JPH02131589A - 発酵法によるｌ−スレオニンの製造法 - Google Patents

発酵法によるｌ−スレオニンの製造法

Info

Publication number
JPH02131589A
JPH02131589A JP63284386A JP28438688A JPH02131589A JP H02131589 A JPH02131589 A JP H02131589A JP 63284386 A JP63284386 A JP 63284386A JP 28438688 A JP28438688 A JP 28438688A JP H02131589 A JPH02131589 A JP H02131589A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
threonine
strain
cysteine
cystine
cultured
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP63284386A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2578492B2 (ja
Inventor
Junichi Takano
純一 高野
Rei Furukawa
令 古川
Toshihide Nakanishi
中西　俊秀
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
KH Neochem Co Ltd
Original Assignee
Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd filed Critical Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd
Priority to JP63284386A priority Critical patent/JP2578492B2/ja
Priority to US07/428,947 priority patent/US5087566A/en
Priority to KR1019890015728A priority patent/KR0133853B1/ko
Priority to CA002002464A priority patent/CA2002464C/en
Priority to DE68912885T priority patent/DE68912885T2/de
Priority to EP89120705A priority patent/EP0368284B1/en
Priority to HU895849A priority patent/HU202590B/hu
Publication of JPH02131589A publication Critical patent/JPH02131589A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP2578492B2 publication Critical patent/JP2578492B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/08—Lysine; Diaminopimelic acid; Threonine; Valine
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/848—Escherichia
    • Y10S435/849—Escherichia coli

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、ンステイン、シスチンまたはそれらのアナロ
グに耐性を有し、かつＬ−スレ才ニン生産能を有するエ
ツシエＩＪヒア属に属する微生物を用いるし−スレオニ
ンの１１！１造法に関する。
Ｌ−スレオニンは、アミノ酸製剤などの医薬品として有
用であるだけでなく、飼料添加用としても利用できるア
ミノ酸である。
従来の技術 従来、発酵法によるし−スレオニンの製造法としては、
エッシェリヒア属に属し、ボレリジン感受性を示す微生
物を用いる方法（特公昭５１−６７５２号公報）、エッ
シェリヒア属に属し、ジアミノピメリン酸とメチ才ニン
の要求性を有し、かつスレオニンの生合成系がスレオニ
ンのフィードバック阻害に対して抵抗性を示す微生物を
用いる方法（特公昭５６−１００３７号公報）、セラチ
ア属に属し、スレオニン脱水素酵素が欠損し、かつスレ
才ニン代謝拮抗物質に耐性を示す微生物を用いる方法゜
（特公昭５２−４８１９５号公報）、クリネバクテリウ
ム属に属し、α−アミノーβ−ヒドロキシ吉草酸および
Ｓ−（２−アミノエチルｌ−Ｌ−システインに耐性を示
し、かつメチオニンの要求性を有する微生物を用いる方
法〈特開昭４７−１９０８７号公報）、プレビバクテリ
ウム属に属し、α−アミノーβヒドロキシ吉草酸および
Ｓ−（２−アミノエチル）Ｌ−システインに耐性を示し
、かつロイシンの要求性を有する微生物を用いる方法（
特開昭５０３１０９３号公報》、プレビバクテリウム属
に属し、α−アミノーβ−ヒドロキシ吉草酸およびＳ（
２−アミノエチル）−Ｌ−システインに耐性を示し、か
つＬ−イソロイシンおよびリジンの要求性を有する微生
物を用いる方法（特開昭５８−２２４６８４号公報）、
エッシェリヒア属に属し、リファンピシン、リジン、メ
チオニン、アスパラギン酸およびホモセリンの少なくと
も１種に耐性を示すか、またはＬ−スレオニン分解能の
低下した微生物を用いる方法（特開昭６２−３３６９３
号公報）などが知られている。
発明が解決しようとする課題 Ｌ−スレオニンを、より収率よく安価に製造する方法が
求められている。
課題を解決するための手段 本発明によれば、エッシェリヒア属に属し、システイン
、シスチンまたはそれらのアナログに耐性を有し、かつ
Ｌ−スレオニン生産能を有する微生物を培地に培養し、
培養物中にＬ−スレ才ニンを生成蓄積させ、該培養物よ
りＬ−スレ才ニンを採取することによって１，−スレオ
ニンを好収率で生産できる。
本発明に使用する微生物としては、エッシェリヒア属に
属し、システイン、シスチンまたはそれらのアナログに
耐性を有し、かつＬ−スレオニン生産能を有する微生物
であればいずれも用いることができる。
システイン、シスチンまたはそれらのアナログに対する
耐性変異株は、エッシェリヒア属に属するし−スレオニ
ン生産菌に通常の変異処理を施し、上記の性質を付与す
ることにより取得できる。
システインおよびシスチンのアナログとしては、Ｓ−メ
チルシステイン、Ｓ−エチルシステイン、アリルグリシ
ン、ホモシステイン、シスチンハイド口キサメート、シ
ステイン酸、ホモシステイン酸などが知られており、い
ずれのアナログも使用できる。好適な菌株としてはエッ
ンエリヒア・コＩＪＨ−７２５６、Ｈ−７　２　６　３
、｝ｌ−７　２　９　３およびＨ−７　２　９　４をあ
げることができる。
エッシェリヒア属に属するスレオニン生産菌は、副生の
アミノ酸が少ないという利点がある。
以下に上記耐性変異株の取得方法を具体的に示す。
エッシェリヒア・コリＨ−４　２　５　８　　（ＦＥＲ
ＭＢＰ−９　８　５、ジアミノピメリン酸要求性、メチ
オニン要求性、α−アミノーβ−ヒドロヰシ吉草酸耐性
、リファンビシン耐性》を、Ｎ−メチルＮ−ニトロ一Ｎ
’一二トロソグアニシン（ＮＴＧ）を用いて変異処理（
２００ｕｇ／ｍｌ、３０℃、３０分間）する。該菌株を
シスチンハイドロキサメー｝　（Ｉｇ／ｊ’）を含む最
少培地〔グルコース５ｇ／１、（ＮＨ．）ｉｓｏ．ｌ　
ｇ／１、ＫＨ２Ｐ０．２ｇ／１，ＫｚＨＰＯ４７ｇ／１
，ＭｇＳＯａ・７　ＨｉＯ　　０．　１　ｇ／　１、Ｆ
ｅｚ（ＳＯ＊）＋　２　０ｍｇ／１、ジアミノピメリン
！５０ｍｇ／ｌ，メチオニン５０Ｉｌｇ／Ｉｌ１寒天２
０ｇ／１　　ｐＨ７．２１に塗布する。
３０℃で２〜６日培養し、生青してくる耐性変異株のコ
ロニーを取得する。シスチンハイドロキサメート耐性変
異株５０株を釣菌し、Ｌ−スレオニン生産試験にかけ、
親株よりＬ−スレオニン生産能が向上した菌株を選んだ
。同様の方法でアリルグリシン（０．５ｇ／Ｊ）、シス
チン（５ｇ／ｆ）およびシステイン（５ｇ／ｊ！）に対
する耐性変異株を取得した。これらの菌株は昭和６３年
１１月８日付で工業技術院微生物工業技術研究所にそれ
ぞれＦＥＲＮ　１３Ｐ−２１３７、ＦＥＲＭ　８Ｐ−２
１３８、ＦＥＲ３１　ｆｌＰ−２１３９、ＦＥＲＭＢＰ
−２１４０として寄託されている。
親株および得られた耐性変異株をシステイン、シスチン
またはそれらのアナログを含む最少培地上で２４時間培
養したときの生育度を第１表に示す。
第　　　　１　　　　表 無添加 シスチンハイＦＤキザメート アリルグリシン シスナイン シスチン ０　　　　　　　ｔ十　　　　　＋＋＋＋（１．０５　
　　　＋＋ ０．５　　　　　一　　　　　中＋ ５　　　　　　−　　　　　−　　　　　＋＋十分な生
育　　＋；生育 ；非生育 該微生物の培養に用いられる培地は、炭素源、窒素源、
無機塩類、成育因子などを含有する培地であれば合成培
地、天然培地のいずれでもよい。
炭素源としては、グルコース、フラクトース、糖蜜、澱
粉または粗糖の加水分解物などの炭水化物、酢酸、プロ
ピオン酸、ギ酸、フマール酸、リンゴ酸などの有機酸が
用いられる。
窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、酢酸アンモニウム、燐酸アンモニウムな
どの各種無機塩類や有機酸のアンモニウム塩、アミン類
、その他含窒素化合物、ならびにペプトン、肉エキス、
コーン・スティープ・リカー、カゼイン加水分解物、大
豆粕加水分解物、各種発酵菌体およびその消化物などが
用いられる。
無機物としては、燐酸第一カリウム、燐酸第二カリウム
、燐酸マグ不シウム、硫酸マグネシウム、塩化ナ｝　Ｉ
Ｊウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、硫酸銅、炭酸カル
シウムなどが適当量用いられる。
また、微生物が栄養要求株の場合は生育に要求される化
合物を培養液中に添加しなくてはならないが、他の培地
成分から、要求物質が十分量持ち込まれる場合はあらた
めて添加する必要はない。
培養は振盪培養または深部通気攪拌培養などの好気的条
件下でおこなう。培養は２０〜４０℃、好ましくは２８
〜３８℃の温度で培地のｐＨは５〜９、好ましくは中性
付近で行われる。培地のｐＨ調整は炭酸カルシウム、無
機または有機の酸、アルカリ溶液、アンモニア、ｐＨ緩
衝液などによっておこなわれる。通常２〜７日間培養を
おこなうことにより、培養物中にＬ−スレオニンが生成
蓄積する。培養終了後、培養液から菌体などの沈澱物を
除去し、イオン交換処理法、濃縮法、塩析法などを併用
することにより、培養液からし−スレ才ニンを回収する
ことができる。
以下に実施例を示す。
実施例１ エッシェリヒア・コリＨ−７　２　５　６　　（ＦＥＲ
Ｍ　ＯＰ２１３７）株、エッシェリヒア・コリＨ−７　
２　６　３（ＦＥＲＭ　ＢＰ−２１３８　）株、エッシ
ェリヒア・コリＨ？　２　９　３　　（ＦＥＲＭ　ＢＰ
−２１３９）株、エッシェリヒア・コリＨ　−　７　２
　９　４　　（ＦＥＲＭ　ＯＰ−２１４０）株、および
親株であるエツシェリヒア・コリＨ−４　２　５　８　
（ＦＥＲＭＢＰ−９８５）株をそれぞれ、グルコース２
０ｇ／１、ペプトン１０ｇ／Ｒ、酵母エキスｌＯｇ／Ｉ
！、ＮａＣｊ！　　２．５ｇ／ｆ、ジアミノピメリン酸
０．１ｇ　／　１の組成から成る種培地で３０℃、１６
時間振盪培養した。得られた種培養液を２０ｍｌの下記
発酵培地を含む２５０ｍｌの三角フラスコに植菌し、３
０℃で７２時間振盪培養した。培養液中のしスレオニン
生成量を第２表に示す。
発酵培地の組成は次のとおりである。
グルコースＴＯｇ／Ｒ，（ＮＨ＊）ｚｓＯ＊　　１４ｇ
／Ｒ，ＫＨ２ＰＯ．２ｇ／１、Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ　４　　
・７Ｈ　２０　　１　ｇ　／　Ｒ、ジアミノピメリン酸
０．３ｇ／Ｉ！、ＤＬ−メチオニン０．１ｇ／ｊ！、コ
ーン・スチープ・リカ−２ｇ／１、Ｃ　ａ　ＣＯ３３　
０　ｇ＃！　（ｐ｝Ｉ　７．４）Ｈ−７２５６を用いた
し−スレオニン含有培養液２００ｍｌを遠心分離（３０
００ｒｐｍ．１０分）にかけ、菌体その他の不純物を除
去した。得られた上澄液を強酸性陽イオン交換樹脂ダイ
ヤイオンＳＫＩ　　（Ｈ−型》　（三菱化成社製》のカ
ラムに通し、Ｌ−スレ才ニンを吸着させ、水洗後０．５
規定のアンモニア水で溶出して、Ｌ−スレオニン画分を
集めた。集めた両分を濃縮し、エタノールを加えて冷却
下で保存することにより、純度９８％以上のし−スレオ
ニンの結晶が２．５ｇ得られた。
第　　　　２　　　　表 ｝１−７２５６ Ｈ−７２６３ ｝１−７２９３ Ｈ−７２９４ Ｈ−４２５８ システンハイドロキサメート　耐性 アリルグリシン耐性 システイン耐性 シスチン耐性 ２２．３ ２ｌ，２ ２０．ｌ ｌ９．８ １７．２ 発 明の効果 本発明により、収率よくＬ スレオニンを得る ことができる。

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. エッシェリヒア属に属し、システイン、シスチンまたは
    それらのアナログに耐性を有し、かつＬ−スレオニン生
    産能を有する微生物を培地に培養し、培養物中にＬ−ス
    レオニンを生成蓄積させ、該培養物よりＬ−スレオニン
    を採取することを特徴とする発酵法によるＬ−スレオニ
    ンの製造法。
JP63284386A 1988-11-10 1988-11-10 発酵法によるｌ−スレオニンの製造法 Expired - Lifetime JP2578492B2 (ja)

Priority Applications (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP63284386A JP2578492B2 (ja) 1988-11-10 1988-11-10 発酵法によるｌ−スレオニンの製造法
US07/428,947 US5087566A (en) 1988-11-10 1989-10-30 Process for producing l-threonine
KR1019890015728A KR0133853B1 (ko) 1988-11-10 1989-10-31 L-트레오닌의 제조방법
DE68912885T DE68912885T2 (de) 1988-11-10 1989-11-08 Verfahren zur Herstellung von L-Threonin.
CA002002464A CA2002464C (en) 1988-11-10 1989-11-08 Process for producing l-threonine
EP89120705A EP0368284B1 (en) 1988-11-10 1989-11-08 Process for producing L-threonine
HU895849A HU202590B (en) 1988-11-10 1989-11-09 Process for producing l-treonine

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP63284386A JP2578492B2 (ja) 1988-11-10 1988-11-10 発酵法によるｌ−スレオニンの製造法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH02131589A true JPH02131589A (ja) 1990-05-21
JP2578492B2 JP2578492B2 (ja) 1997-02-05

Family

ID=17677913

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP63284386A Expired - Lifetime JP2578492B2 (ja) 1988-11-10 1988-11-10 発酵法によるｌ−スレオニンの製造法

Country Status (7)

Country Link
US (1) US5087566A (ja)
EP (1) EP0368284B1 (ja)
JP (1) JP2578492B2 (ja)
KR (1) KR0133853B1 (ja)
CA (1) CA2002464C (ja)
DE (1) DE68912885T2 (ja)
HU (1) HU202590B (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2008522611A (ja) * 2004-12-06 2008-07-03 シージェイ コーポレーション 染色体上のｌｙｓＲ遺伝子が不活性化されたＬ−トレオニン生成微生物、これを製造する方法、及び該微生物を利用したＬ−トレオニンの製造方法

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0555475B1 (en) * 1991-08-26 1997-05-14 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for producing 4-hydroxy-l-proline
JP3036930B2 (ja) * 1991-11-11 2000-04-24 協和醗酵工業株式会社 発酵法によるｌ−イソロイシンの製造法
US5939307A (en) * 1996-07-30 1999-08-17 The Archer-Daniels-Midland Company Strains of Escherichia coli, methods of preparing the same and use thereof in fermentation processes for l-threonine production
US6036659A (en) 1998-10-09 2000-03-14 Flexsite Diagnostics, Inc. Collection device for biological samples and methods of use
US7220571B2 (en) 2000-09-28 2007-05-22 Archer-Daniels-Midland Company Escherichia coli strains which over-produce L-threonine and processes for the production of L-threonine by fermentation
US7723097B2 (en) * 2005-03-11 2010-05-25 Archer-Daniels-Midland Company Escherichia coli strains that over-produce L-threonine and processes for their production
CN103497979B (zh) * 2005-06-20 2018-09-11 阿彻-丹尼尔斯-米德兰公司 用于改良生产天冬氨酸衍生的氨基酸及化学品的改变的乙醛酸支路
KR100864673B1 (ko) * 2006-11-27 2008-10-23 씨제이제일제당 (주) 비용매를 이용하여 쓰레오닌 생산 미생물의 발효액으로부터쓰레오닌을 회수하는 방법

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS4825515B1 (ja) * 1968-08-17 1973-07-30
EP0213536B1 (en) * 1985-08-23 1992-03-18 Toray Industries, Inc. Process for producing l-threonine by fermentation
US5017483A (en) * 1986-02-20 1991-05-21 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for producing L-threonine
FR2727342A1 (fr) * 1994-11-28 1996-05-31 Lorraine Laminage Dispositif de guidage et de transfert d'au moins deux flans de tole prealablement accostes bord a bord, notamment dans une installation de soudage

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2008522611A (ja) * 2004-12-06 2008-07-03 シージェイ コーポレーション 染色体上のｌｙｓＲ遺伝子が不活性化されたＬ−トレオニン生成微生物、これを製造する方法、及び該微生物を利用したＬ−トレオニンの製造方法

Also Published As

Publication number Publication date
KR900008047A (ko) 1990-06-02
HU202590B (en) 1991-03-28
HU895849D0 (en) 1990-01-28
US5087566A (en) 1992-02-11
CA2002464C (en) 1995-04-18
DE68912885T2 (de) 1994-06-01
HUT53941A (en) 1990-12-28
DE68912885D1 (de) 1994-03-17
JP2578492B2 (ja) 1997-02-05
EP0368284A3 (en) 1991-07-10
EP0368284B1 (en) 1994-02-02
KR0133853B1 (ko) 1998-04-21
CA2002464A1 (en) 1990-05-10
EP0368284A2 (en) 1990-05-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0530803B1 (en) Process for producing L-threonine
JP3698758B2 (ja) 発酵法によるｌ−ロイシンの製造法
KR960016135B1 (ko) L-이소로이신(l-isoleucine)의 제조법
JP3151073B2 (ja) 発酵法によるアミノ酸の製造法
EP0301572A2 (en) Process for producing l-threonine by fermentation
JPH02131589A (ja) 発酵法によるｌ−スレオニンの製造法
EP0595163B1 (en) Process for producing L-isoleucine
JP2971089B2 (ja) 発酵法によるｌ―スレオニンの製造法
JP2578463B2 (ja) 発酵法によるｌ−リジンの製造法
JP2877414B2 (ja) 発酵法によるｌ―スレオニンの製造法
JPH089982A (ja) 発酵法によるｌ−アミノ酸の製造法
JP2810739B2 (ja) 発酵法によるｌ―スレオニンの製造法
JPS63273487A (ja) Ｌ−スレオニンの製造法
JPS5988094A (ja) 発酵法によるｌ−リジンの製造法
JPS61260891A (ja) 発酵法によるｌ−スレオニンの製造方法
JPH0692A (ja) 発酵法によるｌ−アルギニンの製造法
JPS63209593A (ja) 発酵法によるｌ−スレオニンの製造法
JPH0313873B2 (ja)
JPH0313874B2 (ja)
JPH0673461B2 (ja) 発酵法によるｌ−スレオニンの製造法
GB1578057A (en) Method of producing l-valine by fermentation
JPH0346114B2 (ja)
JPS62171692A (ja) 発酵法によるｌ−スレオニンの製造方法
JPH0346112B2 (ja)

Legal Events

Date Code Title Description
FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081107

Year of fee payment: 12

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091107

Year of fee payment: 13

EXPY Cancellation because of completion of term
FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091107

Year of fee payment: 13