JPS60158202A - 分離剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は分離剤、特にラセミ化合物の光学分割能をもつ
液体クロマトグラフィー用充填剤を提供するものである
。

本発明の分離剤により光学分割が可能な化合物としては
、例えばアミノ酸があげられるが、アミノ酸は通常一方
の対掌体のみを必要とするもので、このような光学分割
用充填剤は光学活性なアミノ酸の製造においてその純度
を知るうえで重要な分析手段として需要が多い。

（従来技術） これまでアミノ酸またはアミノ酸の金属塩をポリマーに
担持させて得られる充填剤としては、Ｖ、　Ａ、　Ｄａ
ｖａｎｋｏｖらの文献（ＤＯｋｌ、Ａｋａｄ、Ｎａｕｋ
　５ＳＳＲ。

９８６　（１９７１））に記載されている架橋クロロメ
チル化ポリスチレンとＬ−プロリンまたはＬ−ヒドロキ
シプ四リンのメチルエステルを反応させた後エステルを
加水分解して得られるポリマーに２価の銅あるいはニッ
ケルイオンを含む溶離液を用いて光学分割を行なうもの
や、Ｏ−ＱｔＬｉｖｏｒｏｎらによるポリアクリルアミ
ドにホルムアルデヒドを介してＬ−プロリンを結合した
もの（文献；Ｊ、ｏｈｒｏｍａｔｏｇｒ、　２０４．１
８５（１９８１）　）が知られている。一方、シリカゲ
ルの様な無機化合物にシラン化合物を介してアミノ酸も
しくはその誘導体を担持させたものとしては１．８ｕｇ
ｄｅｎら（文献：、Ｔ、Ｏｈｒｏｍａｔｏｇｒ、　１９
２　、２２８　（１９８０））、Ｇ、Ｇｉ’ｂｉｔｇら
（文献：　、Ｔ、Ｈｌｇｈ、ＲｅａＯｌｕｔ、　Ｏｈｒ
ｏｍａｔｏｇｒ、　！ＩａＣｈｒｏｍａｔｏｇｒ、　Ｏ
ｏｍｍ、、２　、１４５　＋１９７９１　）　、Ｖ、五
〇Ｄａｖａｎｋｏｖら（文献：　Ａｎｇｅｗ、　Ｏｈｅ
ｍ、工ｎｔ、Ｅｄ、　Ｆｉｎｇｌ　。

２１、９５０　＋１９８２１　）による方法などがあろ
うまた逆相系シリカゲルカラムにアミノ・酸誘導体を保
持させたものとしてはＶ、Ａ、　Ｄａｖａｎｋｏｖら（
文献：　Ｏｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ　１３，６７
７　（１９８０）　）、特開昭５７−１７６９３６　、
特開昭５８−９６０６２などがある。これらのうちクロ
四メチル化ポリスチレン及びポリアクリルアミドゲルに
Ｌ−プロリン等のアミノ酸もしくはその誘導体を担持さ
せる場合、立体障害や反応性の乏しいことから充分な担
持量を得るには長い反応時間を要した。またシリカゲル
にシラン化合物を介して担持させる方法はシラン化合物
の加水分解などによる脱離が問題となる。また、逆相系
カラムに保持させる方法では安定性が問題である。

（発明の目的） 本発明は、極めて反応性に富むグリシジル基を有スるグ
リシジルメタクリレートを他の重合性モノマーと共重合
することによって得られるポリマーのグリシジル基に各
種アミノ酸の金属塩を付加させることによって光学活性
基を担持した優れた光学分割能をもつ充填剤を得ること
を可能にすることを目的とする。

（発明の構成） 本発明において使用されるポリマーはグリシジルメタク
リレートと他の重合性モノマーとの共重合体である。他
の重合性モノマーとしてはスチレン系ビニルモノマート
シてスチレン、パラメチルスチレンなど、アクリル酸エ
ステル系ビニルモノマーとしてメチルメタクリレート、
エチルメタクリレート、ノルマルブチルメタクリレート
、ターシャリ−ブチルメタクリレート、ヒドロキシエチ
ルメタクリレート、２−エチルへキシルメタクリレート
、ステアリルメタクリレートなど、その他のビニルモノ
マーとじてアクリロニトリル、４−ビニルピリジン、２
−ビニルピリジン、アクリルアミド、メタクリルアミド
などが例示される。

これらのビニルモノマーは１種又は２種以上用いること
ができる。

グリシジルメタクリレートとこれら重合性モノマーの共
重合組成はグリシジルメタクリレートとのモル比が０．
００１乃至１０００であり、好ましくけ０．０１乃至１
００であり、さらに好ましくは０．１乃至１０である。

これらの共重合体の重合方法としては、パーオキシド類
やアゾビスイソブチロニトリルなどを開始剤とするラジ
カル重合法、或いはグリニヤール試薬やアルキル金属類
を用いたイオン重合法などがあげられる。

一方、これに反応させるアミノ酸は光学活性なものであ
ることが必要であるが、光学純度は厳密に純粋である必
要はない。一般には天然に得られる一方の光学異性体を
用いることは原料の入手の容易さから好ましいが、これ
に限られるものではない。

本充填剤の特徴部分をなす光学活性基を有する高分子体
は、１つの合成法としてグリシジルメタクリレートを含
む共重合体にアミノ酸の金属塩を適当な溶媒、例えばメ
タノール、塩化メチレン、ジメチルホルムアミドなどの
単独あるいは′混合溶媒の中で反応させて得られるが、
この方法に限られることなく、グリシジルメタクリレー
トにアミノ酸金属塩を反応させた後重合してポリマーに
してもよい。

得られるポリマーは次の一般式（１）もしくは（２）で
表わされる部分構造を有する。

（１）（２） 上式中Ｒ、Ｒ、Ｒは使用するアミノ酸によって規定され
る基で、プロリンもしくはヒドロキシプロリンの場合は
（２）式で表わされる環構造をなし、Ｒはそれぞれ一０
Ｈ２−ＯＨ２−ＯＨ，、−、−０Ｈ２−ｃＨ（ＯＨＩＯ
Ｈ２−である。

その他のアミノ酸の場合は（１）式で表わされ、Ｒ１’
　、ｕ　２は次゛の表−１の如くになる。

表−１ 尚上記一般式中＊は不斉炭素を表わす。

又Ｍは金属であることを表わし、反応においてはＮａ、
に、Ｌｉなどのアルカリ金属または○ａ。

Ｍｇなどのアルカリ土類金属などが例示されるが、光学
分割用充填剤として使用する場合にはＯｕ。

Ｎｉ　、　Ｏｏなどの遷移金属に置換しておくことが必
要である。

得られたポリマーはそのまま粉砕しカラムに充填しても
良いが、通常は担体に物理的吸着あるいは化学的に結合
させて担持させる。シリカゲルやガラスピーズなどの無
機担体またはポリスチレンゲル、ポリアクリルアミドな
どの有機担体に塗布または化学結合することが考えられ
る。この場合はグリシジルメタクリレートを含むポリマ
ーを塗布または化学結合した後、アミノ酸金属塩を反応
させる方が好ましいがこれに限ったことではない。ポリ
マーをそのまま用いるときは、架橋させたものが好まし
い。

（発明の効果） 本発明によって提供される分離剤はアミノ酸を液体クロ
マトグラフィーによって光学分割する場合に用いること
ができる。特に高速液体クロマトグラフィーに用いる場
合に耐圧性に優れた充填剤を得ることができる。

本発明においてもう１つの特徴をなすグリシジルメタク
リレートの共重合体はその組成が光学分割能と密接に関
係しており、適当に組成を調整することによシ著しく光
学分割能を向上させることが可能となった。

以下実施例をもって詳述するが本発明はこれに限定され
るものではない。

合成例１ グリシジルメタクリレート１０．４　ｆとスチレン１８
．２　ｆ　（ＧＭＡ／Ｓｔモル比＝１／２．４）をアゾ
ビスイソブチロニトリルを開始剤として共重合させて得
られたポリマー１．Ｏｆを、塩化メチレン５Ｒ１とＤＭ
Ｆ　１０ゴの混合溶媒に溶解し、これにＬ−プロリンの
ナトリウム塩１．Ｏｆをメタノール５　ｍｌに溶かした
ものを加え室温で２日間反応させる。

溶媒を留去した後再びメタノール７ｔ／を加えて溶かし
、これにジフェニルジメトキシシランで処理した平均粒
径１０μｍ、細孔径１０００Ａのシリカゲル５ｇを加え
た後、メタノールを留去して被覆させる。得られた固形
物を水で洗った後、２ｆの硫酸銅を５０ｄの水に溶かし
た水溶液に加えて銅塩に変えると青色の充填剤が得られ
る。

以下の実施例において分離係数は次式で与えられる。

実施例１ 合成例１で得られた充填剤を内径０．４６ｔｍｅ長さ２
５副のステンレス製円筒カラムに充填し、各種アミノ酸
のラセミ体の光学分割を行なったところ次の結果を得た
。

溶離液に０．２５ミリモルの硫酸銅を用い、５０℃で１
　、０　ｄ１９流した場合の分離係数は表−２の如くで
あった。

表−２ 合成例２ グリシジルメタクリレート１０．４　ｔとメチルメタク
リレート１８．７ｆ（ＧＭＡ／ＭＭＡモル比：　１／２
．６　）をアゾビスイソブチロニトリルを開始剤として
共重合させて得られたポリマー１．Ｏｆをｊ５ａｔｌの
塩化メチレンに溶かし、これにＬ−プロリンのナトリウ
ム塩１．０１を１０１１！／のメタノールに溶かして加
え室温で２日間反応させる。溶媒を留去した後再びメタ
ノール７ｄを加えて溶かし、これにジフェニルジメトキ
シシランで処理した平均粒径１０μｍ、細孔径１ｏｏｏ
Ｘのシリカゲル５ｆを加えた後、メタノールを留去して
被覆させる。得られた固形物を水で洗った後、２ｆの硫
酸銅を５０ＷＬｌの水に溶かした水溶液に加えて銅塩に
変えると青色の充填剤が得られる。

実施例２ 合成例２で得られた充填剤を内径Ｑ、４６ｔｍ、長さ２
５６ｎのステンレス製円筒カラムに充填し、各種アミノ
酸のラセミ体の光学分割を行なったところ次の結果を得
た。

溶離液に０．２５　ミＩＪモルの硫酸銅を用い、５０℃
で１　、　Ｏｔｒｔｌ／分流した場合の分離係数は表−
３の如くであった。

表−３ 合成例３ グリシジルメタクリレ−）　７．１　ｆとｐ−メチルス
チレン１１．８　ｔ　（ＧＭム／ＦＭＳ−ｅル比＝　１
／２．０　）をアゾビスイソブチロニトリルを開始剤と
して共重合させて得られたポリマー１．Ｏｆを１５−の
塩化メチレンに溶かし、これにＬ−プロリンのナトリウ
ム塩１．０？を１０ｇ／のメタノールに溶かして加え、
室温で２日間反応させる。溶媒を留去した後再びメタノ
ール７ｗＬｌを加えて溶かし、これにジフェニルジメト
キシシランで処理した平均粒径１０μｍ、細孔径１０Ｇ
ＯＡのシリカゲル５ｆを加えた後、メタノールを留去し
て被覆させる。得られた固形物を水で洗った後、２１の
硫酸鋼を５０ｄの水に溶かした水溶液に加えて銅塩に変
えると青色の充填剤が得られる。

実施例３ 合成例３で得られた充填剤を内径０．４６ｃｒｔ、長さ
２５倒のステンレス製円筒カラムに充填し、各種アミノ
酸のラセミ体の光学分割を行なったところ次の結果を得
た。

溶離液Ｆｃ０．２５ミリモルの硫酸銅を用い、５０℃で
１　、０　ｍ１７分流した場合の分離係数は表−４の如
くであった。

表　−４ 合成例４ グリシジルメタクリレート１４．２　ｆとアクリロニト
リル５．３９　（ＧＭＡ／ムＮモル比＝１／１）をアゾ
ビスイソブチロニトリルを開始剤として共重合させて得
られたポリマー１．Ｏｆを１５ｍ１の塩化メチレンに溶
かし、これＩＣ′Ｌ−プロリンのナトリウム塩１．Ｏｆ
を１０１１Ｅ／のメタノールに溶かして加え室温で２日
間反応させる。溶媒を留宍した後再びメタノール７１１
ｔｌを加えて溶かし、これにジフェニルジメトキシシラ
ンで処理した平均粒径１０戸、細孔径１ｏｏｏＸのシリ
カゲル５ｔを加えた後メタノールを留去して被覆させる
。

得られた固形物を水で洗った後、２ｆの硫酸銅を５０ｄ
の水に溶かした水溶液に加えて銅塩に変えると青色の充
填剤が得られる。

実施例４ 合成例４で得られた充填剤を内径０．４６ｍ、長さ２５
副のステンレス製円筒カラムに充填し、各種アミノ酸の
ラセミ体の光学分割を行なったところ次の結果を得た。

溶離液に０．２５ミリモルの硫酸鋼を用い、５０℃で１
．０ｍＡ！／分流した場合の分離係数は表−５の如くで
あった。

表　−５ 合成例５ グリシジルメタクリレ−）　１０．Ｏｆとブチルメタク
リレート１０．Ｏｆ　（ＧＭＡ／ＢｕＭＡモル比＝１／
１）をアゾビスイソブチロニトリルを開始剤として共重
合させて得られたポリマー１．Ｏｆを１５ｍ１の塩化メ
チレンに溶かし、これにＬ−プロリンのナトリウム塩１
．Ｏｆを１０ｄのメタノールに溶かして加え室温で２日
間反応させる。溶媒を留去した後再びメタノール７ｄを
加えて溶がし、これにジフェニルジメトキシシランで処
理した平均粒径１０μ脩、細孔径１ｏｏｏＸのシリカゲ
ル５ｔを加えた後メタノールを留去して被覆させる。得
られた固形物を水で洗った後、２ｆの硫酸銅を５０１１
！／の水に溶かした水溶液に加えて銅塩に変えると青色
の充填剤が得られる。

実施例５ 合成例５で得られた充填剤を内径０．４Ｓｍ＋長さ２５
ｃｆｎのステンレス製円筒カラムに充填し、各種アミノ
酸のラセミ体の光学分割を行なったところ次の結果を得
た。

溶離液に０゜２５ミリモルの硫酸銅を用い、５０℃で１
．０ガ分流した場合の分離係数は表−６の如くであった
。

表　−６ 合成例６ グリシジルメタクリレ−’）１４．２ｒとスチレン１０
．４　ｆ　（ＧＭＡ／８　ｔモル比＝１／１）をアゾビ
スインブチロニトリルを開始剤として共重合させて得ら
れたポリマー１．Ｏ５’を１５ｗ１の塩化メチレンに溶
かし、これにＬ−プロリンのナトリウム塩１．０２を１
０ｘ／のメタノールに溶かして加え室温で２日間反応さ
せる。溶媒を留去した後再びメタノール７　ｍｌを加え
て溶かし、これにジフェニルジメトキシシランで処理し
た平均粒径１０μｍ、細孔径１ｏｏｏＲのシリカゲル５
２を加えた後メタノールを留去して被覆させる。得られ
た固形物を水で洗った後、２ｔの硫酸鋼を５０＋ｍの水
に溶かした水溶液に加えて銅塩に変えると青色の充填剤
が得られる。

実施例６ 合成例６で得られた充填剤を内径０．４６ｃｍ、長さ２
５ａｎのステンレス製円筒カラムに充填し、各種アミノ
酸のラセミ体の光学分割を行なったところ次の結果を得
た。

溶離液に０．２５ミリモルの硫酸銅を用い、５０℃で１
　、　ＯｒｎＶ分流した場合の分離係数は表−７の如く
であった。

表−７ 合成例７ グリシジルメタクリレート４．７？とパラメチルメチレ
ン１１．８９（ＧＭＡ／ＦＭ８モル比＝　１／３．０）
をアゾビスイソブチロニトリルを開始剤として共重合さ
せて得られたポリマー１．２５ｆを１５ｗｔ１の塩化メ
チレンに溶かし、これにＬ−プロリンのナトリウム塩０
．８９を１０ＦＩＩ２のメタノールに溶かして加え室温
で２日間反応させる。溶媒を留去した後再びメタノール
７ｄを加えて溶かし、これにジフェニルジメトキシシラ
ンで処理した平均粒径１０μｍ、細孔径１０００Ａのシ
リカゲル５ｆを加えた後メタノールを留去して被覆させ
る。得られた固形物を水で洗った後、２ｔの硫酸銅を５
０ｄの水に溶かした水溶液に加えて銅塩に変えると背色
の充填剤が得られる。

実施例７ 合成例７で得られた充填剤を内径０．４６６ｎ＋長さ２
５ｃＩｔ１のステンレス製円筒カラムに充填し、各種ア
ミノ酸のラセミ体の光学せ割を行なったところ次の結果
を得た。

溶離液に０．２５　ミＩＪモルの硫酸銅を用い、５０℃
で１　、０１ｎｌ／分流した場合の分離係数は表−８の
如くであ１つた。

表−８

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. グリシジルメタクリレートを含む共重合体のグリシジル
   基に光学活性なアミノ酸の金属塩を付加させてなる分離
   剤。