JPS5910797B2 - 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 - Google Patents
発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法Info
- Publication number
- JPS5910797B2 JPS5910797B2 JP10656576A JP10656576A JPS5910797B2 JP S5910797 B2 JPS5910797 B2 JP S5910797B2 JP 10656576 A JP10656576 A JP 10656576A JP 10656576 A JP10656576 A JP 10656576A JP S5910797 B2 JPS5910797 B2 JP S5910797B2
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- acid
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Description
【発明の詳細な説明】
この発明は、発酵法によるＬ−グルタミン酸の製造法に
関する。
関する。
本発明者等は、従来の発酵法によるＬ−グルタミン酸の
製造法を改良すべく鋭意研究した結果プレビバクテリウ
ム属またはコリネバクテリウム属のＬ−グルタミン酸生
産菌より誘導したＮ−パルミトイル・Ｌ−グルタミン酸
に感受性を有しかつモノフルオロ酢酸耐性を有する変異
株の中からしーグルタミン酸生産能の優秀な菌株を分離
することに成功した。
製造法を改良すべく鋭意研究した結果プレビバクテリウ
ム属またはコリネバクテリウム属のＬ−グルタミン酸生
産菌より誘導したＮ−パルミトイル・Ｌ−グルタミン酸
に感受性を有しかつモノフルオロ酢酸耐性を有する変異
株の中からしーグルタミン酸生産能の優秀な菌株を分離
することに成功した。
そして、この菌株を、過剰のビオチンを含有するような
培地中に培養してＬ−グルタミン酸を生産する場合にも
、非イオン性界面活性剤、その他の過剰のビオチンを抑
制するだめの阻害剤の使用量は、従来の方法に比し、極
めて少量で充分目的を達し、かつその場合のＬ−グルタ
ミン酸の生産量も、従来に比較して優れていることを見
い出した。
培地中に培養してＬ−グルタミン酸を生産する場合にも
、非イオン性界面活性剤、その他の過剰のビオチンを抑
制するだめの阻害剤の使用量は、従来の方法に比し、極
めて少量で充分目的を達し、かつその場合のＬ−グルタ
ミン酸の生産量も、従来に比較して優れていることを見
い出した。
即ち、本発明の骨子は、プレビバクテリウム属またはコ
リネバクテリウム属のし−グルタミン酸生産菌より変異
誘導したＮ−パルミトイル・Ｌ −グルタミン酸に対し
て感受性を有しかつモノフルオロ酢酸に対し耐性を有す
る菌株を液体培地中に好気的に培養し、培養液中にＬ−
グルタミン酸を生成蓄積せしめ、これを採取する点にあ
る。
リネバクテリウム属のし−グルタミン酸生産菌より変異
誘導したＮ−パルミトイル・Ｌ −グルタミン酸に対し
て感受性を有しかつモノフルオロ酢酸に対し耐性を有す
る菌株を液体培地中に好気的に培養し、培養液中にＬ−
グルタミン酸を生成蓄積せしめ、これを採取する点にあ
る。
以下、本発明をさらに詳細に説明する。
本発明に使用する、Ｌ−グルタミン酸生産菌より変異誘
導したＮ−バルミトイル・Ｌ−グルタミン酸に対して感
受性を有しかつモノフルオロ酢酸に対し耐性を有する菌
株には、具体的には、プレビバクテリウム・ラクトフア
ーメンタム （ Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌａｃｔｏｆｅｒ
ｍｅｎｔｕｍ ）ＡＪ １１０ ６ ０ＦＥＲＭ−Ｐ
３ ６ ７ ８、プレビバクテリウム・フラバム（Ｂｒ
ｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｌａｖｕｍ）Ａ Ｊ ｌ
１ ０ ６ １ＦＥＲＭ−Ｐ３６７９、コリネバクテ
リウム・アセトアシドフイラム（ Ｃｏｒｙｎｅｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ ａｃｅｔｏ −ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｍ
）ＡＪ １ １ ０ ６ ２ Ｆ ＥＲＭ−Ｐ３６８
０およびコリネバクテリウム・グルタミクム（Ｃｏｒｙ
ｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ ）
ＡＪ １ １０ ６ ３ＦＥＲＭ−Ｐ３６８１等がある
。
導したＮ−バルミトイル・Ｌ−グルタミン酸に対して感
受性を有しかつモノフルオロ酢酸に対し耐性を有する菌
株には、具体的には、プレビバクテリウム・ラクトフア
ーメンタム （ Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌａｃｔｏｆｅｒ
ｍｅｎｔｕｍ ）ＡＪ １１０ ６ ０ＦＥＲＭ−Ｐ
３ ６ ７ ８、プレビバクテリウム・フラバム（Ｂｒ
ｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｌａｖｕｍ）Ａ Ｊ ｌ
１ ０ ６ １ＦＥＲＭ−Ｐ３６７９、コリネバクテ
リウム・アセトアシドフイラム（ Ｃｏｒｙｎｅｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ ａｃｅｔｏ −ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｍ
）ＡＪ １ １ ０ ６ ２ Ｆ ＥＲＭ−Ｐ３６８
０およびコリネバクテリウム・グルタミクム（Ｃｏｒｙ
ｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ ）
ＡＪ １ １０ ６ ３ＦＥＲＭ−Ｐ３６８１等がある
。
これらの菌株は、それぞれ、プレビバクテリウムラクト
フアーメンタムＡＴＣＣ１３８６９、プレビバクテリウ
ム・フラプムＡＴＣＣ１４０６７、コリネバクテリウム
・アセトアシドフイラムＡＴＣＣ１３８７０およびコリ
ネバクテリウム・グルタミクムＡＴＣＣ１３０３２等を
親株として変異誘導したものであり、その他親株として
、プレビバクテリウム・デイバリカタム （ Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｅｖａｒｉｃａ
ｔｕｍ ） Ｎ Ｒ Ｒ ＬＢ−２３１１、プレビバク
テリウム・サツカロリイテイカム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ ｓａｃｃｈａｒｏｌｉｔｉｃｕｍ ）ＡＴ
ＣＣ１４０６６等のプレビバクテリウム属のＬ−グルタ
ミン酸生産菌が用いられ、さらに、コリネバクテリウム
・アセテイグルタミカム（ Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒ
ｉｅｕｍ ａｃｅｔｉｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ ） ＡＴ
Ｃ Ｃ１５８０６、ミクロバクテリウム・アンモニア
フイラム（Ｍｉｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｍｍｏｎ
ｉａｐｈｉｌｕｍ ）ＡＴＣＣ１５３５４等のＬ−グル
タミン酸生産菌も親株として使用することができる。
フアーメンタムＡＴＣＣ１３８６９、プレビバクテリウ
ム・フラプムＡＴＣＣ１４０６７、コリネバクテリウム
・アセトアシドフイラムＡＴＣＣ１３８７０およびコリ
ネバクテリウム・グルタミクムＡＴＣＣ１３０３２等を
親株として変異誘導したものであり、その他親株として
、プレビバクテリウム・デイバリカタム （ Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｅｖａｒｉｃａ
ｔｕｍ ） Ｎ Ｒ Ｒ ＬＢ−２３１１、プレビバク
テリウム・サツカロリイテイカム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ ｓａｃｃｈａｒｏｌｉｔｉｃｕｍ ）ＡＴ
ＣＣ１４０６６等のプレビバクテリウム属のＬ−グルタ
ミン酸生産菌が用いられ、さらに、コリネバクテリウム
・アセテイグルタミカム（ Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒ
ｉｅｕｍ ａｃｅｔｉｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ ） ＡＴ
Ｃ Ｃ１５８０６、ミクロバクテリウム・アンモニア
フイラム（Ｍｉｃｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｍｍｏｎ
ｉａｐｈｉｌｕｍ ）ＡＴＣＣ１５３５４等のＬ−グル
タミン酸生産菌も親株として使用することができる。
上記変異株の変異誘導方法としては、紫外線照射、Ｘ線
照射、放射線照射、変異誘起剤処理等の通常Ｑ方法が用
いられ、例えば２５０μｆ／ｍｌのＮ−＝｝口−Ｎ−＃
−ルーＮ−ニトロソグアニジンにより３０℃で２０分間
処理する方法等がある，なお、これらのＮ−パルミトイ
ル・Ｌ−グルタミン酸感受性かつモノフルオロ酢酸耐性
菌は、下記のような飽和高級脂肪酸、脂肪酸エステル型
非イオン界面活性剤またはＮ一飽和長鎖アシルアミノ酸
等にも感受性を有するので、例えば下記のような化合物
に感受性があっても、要はＮ−パルミトイル・Ｌ−グル
タミン酸に感受性を有する限り本発明の範囲に属するも
のである。
照射、放射線照射、変異誘起剤処理等の通常Ｑ方法が用
いられ、例えば２５０μｆ／ｍｌのＮ−＝｝口−Ｎ−＃
−ルーＮ−ニトロソグアニジンにより３０℃で２０分間
処理する方法等がある，なお、これらのＮ−パルミトイ
ル・Ｌ−グルタミン酸感受性かつモノフルオロ酢酸耐性
菌は、下記のような飽和高級脂肪酸、脂肪酸エステル型
非イオン界面活性剤またはＮ一飽和長鎖アシルアミノ酸
等にも感受性を有するので、例えば下記のような化合物
に感受性があっても、要はＮ−パルミトイル・Ｌ−グル
タミン酸に感受性を有する限り本発明の範囲に属するも
のである。
ラウリン酸、ミリスチン酸、ステアリン酸、パルミチン
酸等の飽和脂肪酸、またはグリセロール脂肪酸エステル
、ソルビタン脂肪酸エステル、シくユークロース脂肪酸
エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポ
リエチレンクリコール・ポリプロピレングリコール脂肪
酸エステル、ポリオキシエチレン・ソルビタン脂肪酸エ
ステルなどの脂肪酸エステル型非イオン界面活性剤、ま
たは、Ｎ−パルミトイル・グリシン、Ｎ−パルミトイル
・アラニン、Ｎ−パルミトイル・バリン、Ｎ−バルミト
イル・ロイシン、Ｎ−バルミトイル・スレオニン、Ｎ−
パルミトイル・アスパラギン酸、Ｎ，パルミトイル・グ
ルタミン酸、Ｎ−ミリストイル・グルタミン酸、Ｎ−ス
テアロイル・グルタミン酸、Ｎ，Ｎ−シハルミトイル・
オルニチン、Ｎ，Ｎ−シハルミトイル・リジン、Ｎ−パ
ルミトイル・メチオニン等のＮ−アシルアミノ酸等。
酸等の飽和脂肪酸、またはグリセロール脂肪酸エステル
、ソルビタン脂肪酸エステル、シくユークロース脂肪酸
エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポ
リエチレンクリコール・ポリプロピレングリコール脂肪
酸エステル、ポリオキシエチレン・ソルビタン脂肪酸エ
ステルなどの脂肪酸エステル型非イオン界面活性剤、ま
たは、Ｎ−パルミトイル・グリシン、Ｎ−パルミトイル
・アラニン、Ｎ−パルミトイル・バリン、Ｎ−バルミト
イル・ロイシン、Ｎ−バルミトイル・スレオニン、Ｎ−
パルミトイル・アスパラギン酸、Ｎ，パルミトイル・グ
ルタミン酸、Ｎ−ミリストイル・グルタミン酸、Ｎ−ス
テアロイル・グルタミン酸、Ｎ，Ｎ−シハルミトイル・
オルニチン、Ｎ，Ｎ−シハルミトイル・リジン、Ｎ−パ
ルミトイル・メチオニン等のＮ−アシルアミノ酸等。
ここで言うＮ−パルミトイル・Ｌ−グルタミン酸感受性
かつモノフルオロ酢酸耐性菌とは、親株が生育する量の
Ｎ−パルミトイル・Ｌ−グルタミン酸を含有する寒天培
地中で生育し得ない菌株で、かつ親株が生育し得ない量
のモノフルオロ酢酸を含有する液体培地中で生育し得る
ような菌株を言う。
かつモノフルオロ酢酸耐性菌とは、親株が生育する量の
Ｎ−パルミトイル・Ｌ−グルタミン酸を含有する寒天培
地中で生育し得ない菌株で、かつ親株が生育し得ない量
のモノフルオロ酢酸を含有する液体培地中で生育し得る
ような菌株を言う。
上記例示の菌株のＮ−バルミトイル・Ｌ−グルタミン酸
感受性およびモノフルオロ酢酸耐性に関する実験結果を
それぞれ第１表、第２表に示す。
感受性およびモノフルオロ酢酸耐性に関する実験結果を
それぞれ第１表、第２表に示す。
また、同様に上記の菌株を用いた、ラウリン酸ミリスチ
ン酸、パルミチン酸、ステアリン酸に対する感受性に関
する試験結果を第３表に示す。
ン酸、パルミチン酸、ステアリン酸に対する感受性に関
する試験結果を第３表に示す。
第１表の各菌株の生育度は次のようにして測定し
た。
た。
イースト・エキス１係、ポリペブトン１チ、食塩ｏ．５
％，寒天２％（ ｐＨ７．０ ）を含有する培地を１２
０℃で１５分間殺菌し、寒天プレートを調製した。
％，寒天２％（ ｐＨ７．０ ）を含有する培地を１２
０℃で１５分間殺菌し、寒天プレートを調製した。
このプレートに、ブイヨンスラントで２４時間培養した
菌株を無菌水で懸濁して、プレート当り１０５〜１０６
の菌数を散布接種し、その上に一定濃度、容量のＮ−パ
ルミトイル・Ｌ−グルタミン酸を含むペーパーディスク
をおき、１６〜４８時間培養した。
菌株を無菌水で懸濁して、プレート当り１０５〜１０６
の菌数を散布接種し、その上に一定濃度、容量のＮ−パ
ルミトイル・Ｌ−グルタミン酸を含むペーパーディスク
をおき、１６〜４８時間培養した。
形成される生育阻止円の存在の有無により生育度をみた
。
。
上記の表中＋は菌の生育が観察されたもの、一は生育が
観察されなかったものを示す。
観察されなかったものを示す。
第２表の各菌株の生育度は次のようにして測定した。
グ／１／ コー ス０． ５ ｔ／ｄｌ．ｚ尿素０．
１ ５ １ｌ／ｄｉ，硫安０． １ ５ ｆ／ｄｌ，
Ｅ上，Ｐ０，０．３グカｌ， Ｋ２ＨＰＯ４０．１グ／
ｄｌＸＭｇＳＯ＋・７Ｈ２０ ０． ０ １グカｌ１Ｃ
ａＣ １２ ・２Ｈ２０ ０． ｌ ｑｌ／ｄｉ、サイ
アミン塩酸塩１ ０ ｒ／ｄｌｚ ビオチン３ Ｔ
／’ｄＢ−， Ｎａ２Ｂ ４０？ ” １ ０Ｈ２００
． ４ ４７１１ｆ／／ｄｌＸＦｅＣ １３ ・６Ｈ２
０ ４． ８ ５１ｎｇ／ｄｉ，Ｃｕ ＳＯ４ ・５Ｈ
２０ １． ９ ５ ７１９／ｄ７！、（ＮＨ４ ）ａ
ＭＯ７０２４ ” ４Ｈ２０ ０． １ ８ ５ １
１１ｇ／ｄｌ，ＺｎＳＯ，− ７Ｈ２０ ４ ４Ｗｌ？
／ｄｌ， ＭｎＣ１２− ４Ｈ２００．３６■７ｄｌお
よび表に示す量のモノフルオロ酢酸を含みｐＨ７．０に
調製した培地に天然培地（ペプトン１グ／ｄｉ，イース
トエキス１ ？／ｄｉ， ＮａＣｌＯ． ５ ｔ／ｄｌ
， ｐＨ ７． ０ ）スラントで２４時間培養した菌
を無菌水で懸濁して接種し、２４時間培養して生育値を
濁度で測定した。
１ ５ １ｌ／ｄｉ，硫安０． １ ５ ｆ／ｄｌ，
Ｅ上，Ｐ０，０．３グカｌ， Ｋ２ＨＰＯ４０．１グ／
ｄｌＸＭｇＳＯ＋・７Ｈ２０ ０． ０ １グカｌ１Ｃ
ａＣ １２ ・２Ｈ２０ ０． ｌ ｑｌ／ｄｉ、サイ
アミン塩酸塩１ ０ ｒ／ｄｌｚ ビオチン３ Ｔ
／’ｄＢ−， Ｎａ２Ｂ ４０？ ” １ ０Ｈ２００
． ４ ４７１１ｆ／／ｄｌＸＦｅＣ １３ ・６Ｈ２
０ ４． ８ ５１ｎｇ／ｄｉ，Ｃｕ ＳＯ４ ・５Ｈ
２０ １． ９ ５ ７１９／ｄ７！、（ＮＨ４ ）ａ
ＭＯ７０２４ ” ４Ｈ２０ ０． １ ８ ５ １
１１ｇ／ｄｌ，ＺｎＳＯ，− ７Ｈ２０ ４ ４Ｗｌ？
／ｄｌ， ＭｎＣ１２− ４Ｈ２００．３６■７ｄｌお
よび表に示す量のモノフルオロ酢酸を含みｐＨ７．０に
調製した培地に天然培地（ペプトン１グ／ｄｉ，イース
トエキス１ ？／ｄｉ， ＮａＣｌＯ． ５ ｔ／ｄｌ
， ｐＨ ７． ０ ）スラントで２４時間培養した菌
を無菌水で懸濁して接種し、２４時間培養して生育値を
濁度で測定した。
使用した培地は第１表の実験に示したものと同じものを
用いた。
用いた。
この寒天培地に、第３表に示す飽和脂肪酸を第３表に示
す濃度含有させた寒天プレートを調製する。
す濃度含有させた寒天プレートを調製する。
このプレートに、ブイヨンスラントで２４時間培養した
菌を、無菌水で懸濁してプレート当り１０’−１０３個
の菌数を撒き、出現するコロニー数を計算した。
菌を、無菌水で懸濁してプレート当り１０’−１０３個
の菌数を撒き、出現するコロニー数を計算した。
？−パルミトイル・Ｌ−グルタミン酸に感受性を有しか
つモノフルオロ酢酸耐性を有する菌株を用いて、Ｌ−グ
ルタミン酸を生産するには、次のような方法が用いられ
る。
つモノフルオロ酢酸耐性を有する菌株を用いて、Ｌ−グ
ルタミン酸を生産するには、次のような方法が用いられ
る。
培地として、通常ビチオンをＬ−グルタミン酸生産のた
めには過剰に含有する液体培地を用いた場合、より本発
明の効果を発揮することができる。
めには過剰に含有する液体培地を用いた場合、より本発
明の効果を発揮することができる。
炭素源としては例えば、甘蔗、甜菜からの糖汁あるいは
、廃糖蜜、果実汁、澱粉質原料加水分解物等のビオチン
を多量に含有する糖質原料が用いられる。
、廃糖蜜、果実汁、澱粉質原料加水分解物等のビオチン
を多量に含有する糖質原料が用いられる。
窒素源としては、通常Ｌ−グルタミン酸発酵に用いられ
るアンモニウム塩、アンモニア水、尿素の他、ＣＳしい
蛋白分解アミノ酸等が用いられる。
るアンモニウム塩、アンモニア水、尿素の他、ＣＳしい
蛋白分解アミノ酸等が用いられる。
その他、リン酸塩、マグネシウム塩等の無機塩の他、菌
株によってＦｅ＋＋，Ｍｎ＋＋サイアミン、場合により
ビオチン等の微量栄養素が培地に添加される。
株によってＦｅ＋＋，Ｍｎ＋＋サイアミン、場合により
ビオチン等の微量栄養素が培地に添加される。
培地中にビオチンが過剰に含有されている場合にはＣ１
〜Ｃ１８の飽和高級脂肪酸、それらの脂肪酸のグリセロ
ールエステル、ソルビタンエステル、シュークロースエ
ステル、ホリエチレンクリコールエステル、ポリエチレ
ンクリコール・，ホリフロピレンエステル、ポリオキシ
エチレン・ソルビタンエステルなどの脂肪酸エステル型
の非イオ・ン界面活性剤および各種アミノ酸類のＮ−ア
シル、Ｎ，Ｎ−ジアシル化合物等が培地に添加される。
〜Ｃ１８の飽和高級脂肪酸、それらの脂肪酸のグリセロ
ールエステル、ソルビタンエステル、シュークロースエ
ステル、ホリエチレンクリコールエステル、ポリエチレ
ンクリコール・，ホリフロピレンエステル、ポリオキシ
エチレン・ソルビタンエステルなどの脂肪酸エステル型
の非イオ・ン界面活性剤および各種アミノ酸類のＮ−ア
シル、Ｎ，Ｎ−ジアシル化合物等が培地に添加される。
その添加の時期は、上記の始発培地中に、ないしは培養
の間が望ましい。
の間が望ましい。
これらの飽和高級脂肪酸、脂肪酸エステル非イオン性界
面活性剤またはＮ一飽昭長鎖アシルアミノ酸等の添加の
方法および添加時期は、従来公知の方法と変らないが、
唯、その添加量が従来公知の方法と比べて著しく少量で
よいのが特徴である。
面活性剤またはＮ一飽昭長鎖アシルアミノ酸等の添加の
方法および添加時期は、従来公知の方法と変らないが、
唯、その添加量が従来公知の方法と比べて著しく少量で
よいのが特徴である。
例えば通常の甘蔗廃糖蜜を用いた培地（初糖濃度ｉ ５
ｙ／ａｉｚ ビオチン３００μｔ／ｔ）では、０．２？
／ｄｉ以下で十分であり、従来の菌を用いた場合の１／
２ないし２／３の量で、従来よりも優れた結果を得るこ
とができた。
ｙ／ａｉｚ ビオチン３００μｔ／ｔ）では、０．２？
／ｄｉ以下で十分であり、従来の菌を用いた場合の１／
２ないし２／３の量で、従来よりも優れた結果を得るこ
とができた。
実施例 １
甘蔗糖蜜な糖とし−（ １ ０ ０７１Ｑ／ｍｌ， Ｋ
Ｅ｛２ＰＯ４１ １ＩＩｇ／ｍｌ， ＭｇＳＯ４ ・７
ａｑ １ ｍｔｌ／ｍｌ，サイアミン塩酸塩１００μ
ｔ／Ｌの組成を有する培地を調製し（ ｐＨ ７．０
） 、その３０ｍｌづつを５００軛容振盪フラスコに分
注し、加熱殺菌した。
Ｅ｛２ＰＯ４１ １ＩＩｇ／ｍｌ， ＭｇＳＯ４ ・７
ａｑ １ ｍｔｌ／ｍｌ，サイアミン塩酸塩１００μ
ｔ／Ｌの組成を有する培地を調製し（ ｐＨ ７．０
） 、その３０ｍｌづつを５００軛容振盪フラスコに分
注し、加熱殺菌した。
この培地に下記の菌株を接種し、往復振盪機により３１
．５℃で培養を行った。
．５℃で培養を行った。
培養中、培養液をｐＨ６．５〜８．０に保つように４０
０１１１１７／ｍｌの濃度の尿素溶液を少量づつ添加し
た。
０１１１１７／ｍｌの濃度の尿素溶液を少量づつ添加し
た。
培地の２６倍希釈液の５６２ｍμの吸光度が０．３０に
到達した時にポリオキシエチレンソルビタンモノパルミ
テート（ＰＥＳＰ）を添加した。
到達した時にポリオキシエチレンソルビタンモノパルミ
テート（ＰＥＳＰ）を添加した。
３６時間で発酵を終了し発酵液中に蓄積したグルタミン
酸の対糖収率を測定した。
酸の対糖収率を測定した。
その結果プレビバクテリウム・ラクトフアーメンタムＡ
Ｊ１１０６０、プレビバクテリウム・フラバムＡＪ１１
０６１はＰ Ｅ Ｓ Ｐ ｚｙｎｔｉ／ｍｔｔ添加でそ
れぞれ対糖収率５５％、４９％のＬ−クルタミン酸が蓄
積された。
Ｊ１１０６０、プレビバクテリウム・フラバムＡＪ１１
０６１はＰ Ｅ Ｓ Ｐ ｚｙｎｔｉ／ｍｔｔ添加でそ
れぞれ対糖収率５５％、４９％のＬ−クルタミン酸が蓄
積された。
同じ方法でプレビバクテリウム・ラクトフアーメンタム
ＡＴＣＣ１３８６９プレビバクテリウム・フラバムＡＴ
ＣＣ１４０６７はＰＥＳＰ３■／ｍｌ添加でそれぞれ対
糖収率５２係、４６％のＬ−グルタミン酸が蓄積された
。
ＡＴＣＣ１３８６９プレビバクテリウム・フラバムＡＴ
ＣＣ１４０６７はＰＥＳＰ３■／ｍｌ添加でそれぞれ対
糖収率５２係、４６％のＬ−グルタミン酸が蓄積された
。
実施例 ２
甜菜糖蜜を糖として５ ０ ’ＩＩＫｉ／／ｍｌ， Ｋ
Ｈ２ＰＯ４１ ｍｆ／／ｍｅ， Ｍｇｓｏ４＠ ７ ａ
ｑ １ ７１１ｆ／ｍＥ， Ｆｅ ＳＯ４ ・７ａｑ
１ ０ｐｔ／ｍｌＸＭｎＳＯ４ ６ ４ａｑ ８μ？／
ｍｌ，サイアミン塩酸塩１００μグ／１，消泡剤ｏ．ｏ
２１Ｉｌｌ７／ｔ，ＰＥＳＰ２または３１ＩＩｆ！／
７７Ｚ７！を含む培地を１ｔ容のジャーファーメンター
に３００７１Ｌｌ張り込み、加熱殺菌した。
Ｈ２ＰＯ４１ ｍｆ／／ｍｅ， Ｍｇｓｏ４＠ ７ ａ
ｑ １ ７１１ｆ／ｍＥ， Ｆｅ ＳＯ４ ・７ａｑ
１ ０ｐｔ／ｍｌＸＭｎＳＯ４ ６ ４ａｑ ８μ？／
ｍｌ，サイアミン塩酸塩１００μグ／１，消泡剤ｏ．ｏ
２１Ｉｌｌ７／ｔ，ＰＥＳＰ２または３１ＩＩｆ！／
７７Ｚ７！を含む培地を１ｔ容のジャーファーメンター
に３００７１Ｌｌ張り込み、加熱殺菌した。
下記の菌を接種し、３１．５℃で通気攪拌培養を行った
。
。
培養中アンモニアガスを７アーメンターに通じ培養液を
ｐＨ７．８に調節した。
ｐＨ７．８に調節した。
２４時間で培養を終了し、蓄積したＬ−グルタミン酸を
定量した。
定量した。
その結果プレビバクテリウム・ラクトフアーメンタムＡ
Ｊ１１０６０、コリネバクテリウム・アセトアシドフイ
ラムＡＪ１１０６２はＰＥＳＰ２１１１ｇ／ｍｅ添加で
それぞれ対糖収率７１％、５５％のＬ−グルタミン酸を
蓄積した。
Ｊ１１０６０、コリネバクテリウム・アセトアシドフイ
ラムＡＪ１１０６２はＰＥＳＰ２１１１ｇ／ｍｅ添加で
それぞれ対糖収率７１％、５５％のＬ−グルタミン酸を
蓄積した。
同様の方法によりプレビバクテリウム・ラクトフアーメ
ンタムＡＴＣＣ１３８６９、コリネバクテリウム・アセ
トアシドフイラムＡＴＣＣ１３８７０はＰＥＳＰ３■／
ｍｌ添加でそれぞれ対糖収率６０％、５０％のし−グル
タミン酸を蓄積した。
ンタムＡＴＣＣ１３８６９、コリネバクテリウム・アセ
トアシドフイラムＡＴＣＣ１３８７０はＰＥＳＰ３■／
ｍｌ添加でそれぞれ対糖収率６０％、５０％のし−グル
タミン酸を蓄積した。
実施例 ３
グル：ｒ − ，ｚ． ３ ５ ｙｎｇ ／ｍｌ、尿素
２７Ｉｌｇ／ｍｅ，ＫＨ２ＰＯ４ １ １Ｉｌｇ／ｍ／
３， Ｍｇ ８０４ ・７ ａ ｑ Ｏ． ４ ”！
／ｍｊｌ！ＦｅＳＯ４ ・７ａｑ １ ０ μｆｔ／Ｉ
Ｉ１ｌ， ＭｎＳＯ４ ・４ａｑ８μｆ／ｍｅ、大豆蛋
白酸加水分解物（「味液」 ）５μｔ／Ｔ１１１、サイ
アミン塩酸塩１００μ１／１， ビオチン５０μｆ／
ｔを含有する培地を調製しその２０ｍｌづつを５００７
ｆｉ＃容の振盪フラスコに入れ１１５℃で１０分間加熱
滅菌した。
２７Ｉｌｇ／ｍｅ，ＫＨ２ＰＯ４ １ １Ｉｌｇ／ｍ／
３， Ｍｇ ８０４ ・７ ａ ｑ Ｏ． ４ ”！
／ｍｊｌ！ＦｅＳＯ４ ・７ａｑ １ ０ μｆｔ／Ｉ
Ｉ１ｌ， ＭｎＳＯ４ ・４ａｑ８μｆ／ｍｅ、大豆蛋
白酸加水分解物（「味液」 ）５μｔ／Ｔ１１１、サイ
アミン塩酸塩１００μ１／１， ビオチン５０μｆ／
ｔを含有する培地を調製しその２０ｍｌづつを５００７
ｆｉ＃容の振盪フラスコに入れ１１５℃で１０分間加熱
滅菌した。
この培地に次に示す菌株を接種し往復振盪機により３１
．５℃で培養を行った。
．５℃で培養を行った。
培養中、培養液をｐＨ６．５ないし８．０に保つように
４５０１１１１７／ＭＥの濃度の尿素溶液を少量づつ添
加した。
４５０１１１１７／ＭＥの濃度の尿素溶液を少量づつ添
加した。
培地の２６倍希釈液の５６２ｍμにおける吸光度が０．
３０に達した時にＰＥＳＰを添加し、３０時間で発酵を
終了し発酵液中に蓄積したＬ−グルタミン酸の対糖収率
を測定した。
３０に達した時にＰＥＳＰを添加し、３０時間で発酵を
終了し発酵液中に蓄積したＬ−グルタミン酸の対糖収率
を測定した。
その結果、プレビバクテリウム・ラクトフアーメンタム
ＡＪ１１０６０はＰ Ｅ Ｓ Ｐ ２１ｎｇ／ｍｌ添加
で対糖収率５６％のＬ−グルタミン酸を蓄積した。
ＡＪ１１０６０はＰ Ｅ Ｓ Ｐ ２１ｎｇ／ｍｌ添加
で対糖収率５６％のＬ−グルタミン酸を蓄積した。
同じ方法によりプレビバクテリウム・ラクトファーメ／
タＡＡＴＣＣ １ ３ ８ ６ ９ハＰＥＳ Ｐ３ｍｆ
ｊ／ＭＥ添加で対糖収率５２％のし−グルタミン酸を蓄
積した。
タＡＡＴＣＣ １ ３ ８ ６ ９ハＰＥＳ Ｐ３ｍｆ
ｊ／ＭＥ添加で対糖収率５２％のし−グルタミン酸を蓄
積した。
実施例 ４
粗糖を糖としテ１０ ０ ｍｙ／ｍｅ， ＫＨ２ＰＯ４
１ ｍｔｌ，／ｍｌ．Ｍｇｓｏ４− ７ａｑ ０．４’
ｌｌｌ？／ｍｅ， ＦｅＳＯ４・７ａｑ１ ０１１１ｆ
ｌ／ｍｌＸＭｎＳＯ４・４ａｑ ２０ｔｔｆｉ／’１１
１１，，尿素５１１１１７７ｍｅ，大豆蛋白酸加水分解
物（ 「味液」 ）５μｔ／ｍｌを含有する培地を調製
し、その２０ｍｌづつを５００両容の振盪フラスコに入
れ１１５℃で１０分間加熱滅菌した。
１ ｍｔｌ，／ｍｌ．Ｍｇｓｏ４− ７ａｑ ０．４’
ｌｌｌ？／ｍｅ， ＦｅＳＯ４・７ａｑ１ ０１１１ｆ
ｌ／ｍｌＸＭｎＳＯ４・４ａｑ ２０ｔｔｆｉ／’１１
１１，，尿素５１１１１７７ｍｅ，大豆蛋白酸加水分解
物（ 「味液」 ）５μｔ／ｍｌを含有する培地を調製
し、その２０ｍｌづつを５００両容の振盪フラスコに入
れ１１５℃で１０分間加熱滅菌した。
この培地に次に示す菌を接種し往復振盪機により３１．
５℃で培養を行った。
５℃で培養を行った。
培養中、培養液をｐＨ６．５ないし８．０に保つように
４００ｍｆｊ／ｍｅの濃度の尿素水溶液を少量づつ添加
した。
４００ｍｆｊ／ｍｅの濃度の尿素水溶液を少量づつ添加
した。
培養液の２６倍希釈液の５６２ｍμにおける吸光度が０
．３０に到達時にＰＥＳＰを添加し、３０時間で発酵を
終了し、発酵液中に蓄積したＬ−グルタミン酸の対糖収
率を測定した。
．３０に到達時にＰＥＳＰを添加し、３０時間で発酵を
終了し、発酵液中に蓄積したＬ−グルタミン酸の対糖収
率を測定した。
その結果、コリネバクテリウム・グルタミクムＡＴ１１
０６３はＰ Ｅ Ｓ Ｐ ｚｍｇ／ｍｌｌ添加で対糖収
率５１チのＬ−グルタミン酸を蓄積した。
０６３はＰ Ｅ Ｓ Ｐ ｚｍｇ／ｍｌｌ添加で対糖収
率５１チのＬ−グルタミン酸を蓄積した。
同じ方法によりコリネバクテリウム・アセトアシドフイ
ラムＡＴＣＣ１３０３２はＰＥＳＰ３１ＩＩｇ／ｍｌ添
加で対糖収率４８係のＬ−グルタミン酸を蓄積した。
ラムＡＴＣＣ１３０３２はＰＥＳＰ３１ＩＩｇ／ｍｌ添
加で対糖収率４８係のＬ−グルタミン酸を蓄積した。
Claims (1)
- １ プレビバクテリウム属またはコリネバクテリウム属
のし−グルタミン酸生産菌より変異誘導したＮ−バルミ
トイル・グルタミン酸に対し感受性を有し、かつモノフ
ルオロ酢酸に対し耐性を有する菌株を液体培地中に好気
的に培養して培養液中にＬ−グルタミン酸を生成蓄積せ
しめ、これを採取することを特徴とする発酵法によるし
−グルタミン酸の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10656576A JPS5910797B2 (ja) | 1976-09-06 | 1976-09-06 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10656576A JPS5910797B2 (ja) | 1976-09-06 | 1976-09-06 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5332193A JPS5332193A (en) | 1978-03-27 |
| JPS5910797B2 true JPS5910797B2 (ja) | 1984-03-12 |
Family
ID=14436800
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10656576A Expired JPS5910797B2 (ja) | 1976-09-06 | 1976-09-06 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5910797B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6154796U (ja) * | 1984-09-13 | 1986-04-12 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5521763A (en) * | 1978-08-02 | 1980-02-16 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of l-grutamic acid by fermentation |
| JP2799070B2 (ja) * | 1989-11-22 | 1998-09-17 | 株式会社東芝 | 水道水処理装置 |
| US5196326A (en) * | 1990-02-15 | 1993-03-23 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for concurrent fermentation of basic amino acid and acidic amino acid |
-
1976
- 1976-09-06 JP JP10656576A patent/JPS5910797B2/ja not_active Expired
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6154796U (ja) * | 1984-09-13 | 1986-04-12 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5332193A (en) | 1978-03-27 |
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