JPS6120277B2 - - Google Patents
Info
- Publication number
- JPS6120277B2 JPS6120277B2 JP53094944A JP9494478A JPS6120277B2 JP S6120277 B2 JPS6120277 B2 JP S6120277B2 JP 53094944 A JP53094944 A JP 53094944A JP 9494478 A JP9494478 A JP 9494478A JP S6120277 B2 JPS6120277 B2 JP S6120277B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glutamic acid
- brevibacterium
- corynebacterium
- medium
- acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 66
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 claims description 35
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 claims description 12
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 11
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 11
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 11
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 150000008539 L-glutamic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000249 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 11
- 235000010483 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Nutrition 0.000 description 11
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 10
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 6
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 description 5
- 229960000344 thiamine hydrochloride Drugs 0.000 description 5
- 235000019190 thiamine hydrochloride Nutrition 0.000 description 5
- 239000011747 thiamine hydrochloride Substances 0.000 description 5
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- PHKGGXPMPXXISP-DFWYDOINSA-N azanium;(4s)-4-amino-5-hydroxy-5-oxopentanoate Chemical compound [NH4+].[O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CCC([O-])=O PHKGGXPMPXXISP-DFWYDOINSA-N 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 4
- 235000013917 monoammonium glutamate Nutrition 0.000 description 4
- QHSCIWIRXWFIGH-LURJTMIESA-N (2s)-2-amino-2-methylpentanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@](N)(C)CCC(O)=O QHSCIWIRXWFIGH-LURJTMIESA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- YVGZXTQJQNXIAU-VKHMYHEASA-N glutamine hydroxamate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)NO YVGZXTQJQNXIAU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 241001517047 Corynebacterium acetoacidophilum Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000319304 [Brevibacterium] flavum Species 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 2
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 description 2
- XRKMJTJTAWTXKS-VKHMYHEASA-N (2s)-2-(fluoroamino)pentanedioic acid Chemical compound OC(=O)CC[C@H](NF)C(O)=O XRKMJTJTAWTXKS-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- DDOQBQRIEWHWBT-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-4-phosphonobutanoate Chemical compound OC(=O)C(N)CCP(O)(O)=O DDOQBQRIEWHWBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LKZIEAUIOCGXBY-AOIFVJIMSA-N 3-hydroxy-L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C(O)CC(O)=O LKZIEAUIOCGXBY-AOIFVJIMSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 1
- 241001485655 Corynebacterium glutamicum ATCC 13032 Species 0.000 description 1
- 241000807905 Corynebacterium glutamicum ATCC 14067 Species 0.000 description 1
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 1
- ZGEYCCHDTIDZAE-BYPYZUCNSA-N L-glutamic acid 5-methyl ester Chemical compound COC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O ZGEYCCHDTIDZAE-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- YEJSPQZHMWGIGP-YFKPBYRVSA-N L-glutamic acid, dimethyl ester Chemical compound COC(=O)CC[C@H](N)C(=O)OC YEJSPQZHMWGIGP-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 241000144155 Microbacterium ammoniaphilum Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical group 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- HERPVHLYIHBEFW-ZETCQYMHSA-N diethyl (2s)-2-aminopentanedioate Chemical compound CCOC(=O)CC[C@H](N)C(=O)OCC HERPVHLYIHBEFW-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- NTUGPDFKMVHCCJ-VIFPVBQESA-N ditert-butyl (2s)-2-aminopentanedioate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)OC(C)(C)C NTUGPDFKMVHCCJ-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- -1 methionysulfoximine Chemical compound 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- WWJZWCUNLNYYAU-UHFFFAOYSA-N temephos Chemical compound C1=CC(OP(=S)(OC)OC)=CC=C1SC1=CC=C(OP(=S)(OC)OC)C=C1 WWJZWCUNLNYYAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
この発明は、発酵法によるL−グルタミン酸の
製造法に関する。 本発明者等は、従来の発酵法によるL−グルタ
ミン酸の製造法を改良すべく鋭意研究した結果、
ブレビバクテリウム属又はコリネバクテリウム属
のL−グルタミン酸生産菌より誘導したグルタミ
ン酸に耐性、あるいはグルタミン酸アナログに耐
性を有する変異株の中からL−グルタミン酸生産
能の優秀な菌株を分離する事に成功した。 本発明の骨子は、ブレビバクテリウム属または
コリネバクテリウム属のL−グルタミン酸生産菌
より変異誘導したグルタミン酸に耐性あるいはグ
ルタミン酸アナログに耐性を有する菌株を液体培
地中に好気的に培養し、培養液中にL−グルタミ
ン酸を生成蓄積せしめ、これを採取する点にあ
る。 以下、本発明をさらに詳細に説明する。 本発明に使用する、L−グルタミン酸生産菌よ
り変異誘導したグルタミン酸あるいはグルタミン
酸アナログに対し耐性を有する菌株には、具体的
には、 ブレビバクテリウム・ラクトフアーメンタム
(Brevibacterium lactofermentum)AJ11292、
FERM−P4585(グルタミン酸アンモニウム耐
性)、 ブレビバクテリウム・ラクトフアーメンタム
(Brevibacterium lactofermentum)AJ11293、
FERM−P4586(グルタミン酸γ−モノヒドロキ
サメート耐性)、 ブレビバクテリウム・フラバム
(Brevibacterium flavum)AJ11294、FERM−
P4587(グルタミン酸アンモニウム耐性)、 ブレビバクテリウム・フラバム
(Brevibacterium flavum)AJ11295、FERM−
P4588(α−メチルグルタミン酸耐性)、 コリネバクテリウム・アセトアシドフイラム
(Corynebacterium acetoacidophilum)
AJ11296、FERM−P4581(グルタミン酸アンモ
ニウム耐性)、 コリネバクテリウム・アセトアシドフイラム
(Corynebacterium acetoacidophilum)
AJ11297、FERM−P4582(グルタミン酸γ−モ
ノヒドロキサメート耐性)、 コリネバクテリウム・グルタミカム
(Corynebacterium glutamicum)AJ11298、
FERM−P4583(グルタミン酸アンモニウム耐
性)、 コリネバクテリウム・グルタミカム
(Corynebacterium glutamicum)AJ11299、
FERM−P4584(α−メチルグルタミン酸耐性)
等がある。 これらの菌株は、それぞれ、ブレビバクテリウ
ム・ラクトフアーメンタムATCC13869、ブレビ
バクテリウム・フラバムATCC14067、コリネバ
クテリウム・アセトアシドフイラムATCC13870
およびコリネバクテリウム・グルタミクム
ATCC13032等を親株として変位誘導したもので
あり、その他、親株として、ブレビバクテリウ
ム・デイバリカタム(Brevibacterium
devaricatum)NRRLB−2311、ブレビバクテリ
ウム・サツカロリイテイカム(Brevibacterium
saccharoliticum)ATCC14066等のブレビバクテ
リウム属のL−グルタミン酸生産菌が用いられ、
さらに、コリネバクテリウム・アセトグルタミカ
ム(Corynebacterium acetoglutamicum)
ATCC15806、ミクロバクテリウム・アンモニア
フイラム(Microbacterium anmoniaphilum)
ATCC15354等のL−グルタミン酸生産菌も親株
として使用することができる。 上記変異株の変異誘導方法としては、紫外線照
射、X線照射、放射線照射、変異誘起剤処理等の
通常の方法が用いられ、例えば、250μg/mlのN
−ニトロ−N′−メチル−N−ニトロソグアニジ
ンにより30℃で20分間処理する方法等がある。 耐性を付与するグルタミン酸の形態としては、
グルタミン酸のアンモニウム塩、ナトリウム塩、
カリウム塩のいずれでも良く、又グルタミン酸の
アナログとしては、具体的にはα−メチルグルタ
ミン酸、β−ヒドロキシグルタミン酸、メチオニ
スルホキシミン、グルタミン酸−γ−モノ−ヒド
ロキサメート、2−アミノ−4−ホスホノ−酪
酸、L−グルタミン酸−γ−モノエチルエステ
ル、L−グルタミン酸−γ−メチルエステル、L
−グルタミン酸ジメチルエステル、L−グルタミ
ン酸−ジ−t−ブチルエステル、モノフロログル
タミン酸、L−グルタミン酸ジエチルエステルが
ある。 ここで云うL−グルタミン酸アナログとは、前
記本発明の変異株の親株の生育を顕著に抑制する
が、L−グルタミン酸が併存すればその生育抑制
が解除されるような物質である。 ここで云うグルタミン酸耐性菌あるいはグルタ
ミン酸アナログ耐性菌とは親株が生育できない量
のグルタミン酸あるいはグルタミン酸アナログを
含有する寒天培地中で生育し得るような菌株を云
う。 上記例示の菌株のグルタミン酸及びグルタミン
酸アナログ耐性に関する実験結果をそれぞれ第1
表、第2表に示す。
製造法に関する。 本発明者等は、従来の発酵法によるL−グルタ
ミン酸の製造法を改良すべく鋭意研究した結果、
ブレビバクテリウム属又はコリネバクテリウム属
のL−グルタミン酸生産菌より誘導したグルタミ
ン酸に耐性、あるいはグルタミン酸アナログに耐
性を有する変異株の中からL−グルタミン酸生産
能の優秀な菌株を分離する事に成功した。 本発明の骨子は、ブレビバクテリウム属または
コリネバクテリウム属のL−グルタミン酸生産菌
より変異誘導したグルタミン酸に耐性あるいはグ
ルタミン酸アナログに耐性を有する菌株を液体培
地中に好気的に培養し、培養液中にL−グルタミ
ン酸を生成蓄積せしめ、これを採取する点にあ
る。 以下、本発明をさらに詳細に説明する。 本発明に使用する、L−グルタミン酸生産菌よ
り変異誘導したグルタミン酸あるいはグルタミン
酸アナログに対し耐性を有する菌株には、具体的
には、 ブレビバクテリウム・ラクトフアーメンタム
(Brevibacterium lactofermentum)AJ11292、
FERM−P4585(グルタミン酸アンモニウム耐
性)、 ブレビバクテリウム・ラクトフアーメンタム
(Brevibacterium lactofermentum)AJ11293、
FERM−P4586(グルタミン酸γ−モノヒドロキ
サメート耐性)、 ブレビバクテリウム・フラバム
(Brevibacterium flavum)AJ11294、FERM−
P4587(グルタミン酸アンモニウム耐性)、 ブレビバクテリウム・フラバム
(Brevibacterium flavum)AJ11295、FERM−
P4588(α−メチルグルタミン酸耐性)、 コリネバクテリウム・アセトアシドフイラム
(Corynebacterium acetoacidophilum)
AJ11296、FERM−P4581(グルタミン酸アンモ
ニウム耐性)、 コリネバクテリウム・アセトアシドフイラム
(Corynebacterium acetoacidophilum)
AJ11297、FERM−P4582(グルタミン酸γ−モ
ノヒドロキサメート耐性)、 コリネバクテリウム・グルタミカム
(Corynebacterium glutamicum)AJ11298、
FERM−P4583(グルタミン酸アンモニウム耐
性)、 コリネバクテリウム・グルタミカム
(Corynebacterium glutamicum)AJ11299、
FERM−P4584(α−メチルグルタミン酸耐性)
等がある。 これらの菌株は、それぞれ、ブレビバクテリウ
ム・ラクトフアーメンタムATCC13869、ブレビ
バクテリウム・フラバムATCC14067、コリネバ
クテリウム・アセトアシドフイラムATCC13870
およびコリネバクテリウム・グルタミクム
ATCC13032等を親株として変位誘導したもので
あり、その他、親株として、ブレビバクテリウ
ム・デイバリカタム(Brevibacterium
devaricatum)NRRLB−2311、ブレビバクテリ
ウム・サツカロリイテイカム(Brevibacterium
saccharoliticum)ATCC14066等のブレビバクテ
リウム属のL−グルタミン酸生産菌が用いられ、
さらに、コリネバクテリウム・アセトグルタミカ
ム(Corynebacterium acetoglutamicum)
ATCC15806、ミクロバクテリウム・アンモニア
フイラム(Microbacterium anmoniaphilum)
ATCC15354等のL−グルタミン酸生産菌も親株
として使用することができる。 上記変異株の変異誘導方法としては、紫外線照
射、X線照射、放射線照射、変異誘起剤処理等の
通常の方法が用いられ、例えば、250μg/mlのN
−ニトロ−N′−メチル−N−ニトロソグアニジ
ンにより30℃で20分間処理する方法等がある。 耐性を付与するグルタミン酸の形態としては、
グルタミン酸のアンモニウム塩、ナトリウム塩、
カリウム塩のいずれでも良く、又グルタミン酸の
アナログとしては、具体的にはα−メチルグルタ
ミン酸、β−ヒドロキシグルタミン酸、メチオニ
スルホキシミン、グルタミン酸−γ−モノ−ヒド
ロキサメート、2−アミノ−4−ホスホノ−酪
酸、L−グルタミン酸−γ−モノエチルエステ
ル、L−グルタミン酸−γ−メチルエステル、L
−グルタミン酸ジメチルエステル、L−グルタミ
ン酸−ジ−t−ブチルエステル、モノフロログル
タミン酸、L−グルタミン酸ジエチルエステルが
ある。 ここで云うL−グルタミン酸アナログとは、前
記本発明の変異株の親株の生育を顕著に抑制する
が、L−グルタミン酸が併存すればその生育抑制
が解除されるような物質である。 ここで云うグルタミン酸耐性菌あるいはグルタ
ミン酸アナログ耐性菌とは親株が生育できない量
のグルタミン酸あるいはグルタミン酸アナログを
含有する寒天培地中で生育し得るような菌株を云
う。 上記例示の菌株のグルタミン酸及びグルタミン
酸アナログ耐性に関する実験結果をそれぞれ第1
表、第2表に示す。
【表】
【表】
【表】
第1表、第2表の各菌株の生育度は次のように
して測定した。グルコース0.5g/dl、尿素0.15
g/dl、硫安0.15g/dl、KH2PO40.3g/dl、
K2HPO40.1g/dl、MgSO4・7ag0.01g/dl、
CaCl2・2ag0.1mg/dl、サイアミン塩酸塩10μg/
dl、ビチオン3μg/dl、Na2B4O7・10ag0.44mg/
dl、FeCl3・6ag4.85mg/dl、CuSO4・5ag1.95mg/
dl、(NH4)6Mo7O24・4ag0.185mg/dl、ZnSO4・
7ag44mg/dl、MnCl2・4ag0.36mg/dlおよび表に示
す量のグルタミン酸アンモニウム塩又は、グルタ
ミン酸γ−モノヒドロキサメートを含みPH7.0に
調整した培地に天然培地(ペプトン1g/dl、イ
ーストエキス1g/dl、NaCl0.5g/dl、PH7.0)ス
ラントで24時間培養した菌を無菌水で懸濁して接
種し、24時間培養して生育値を濁度で測定した。 実施例 1 甘蔗糖蜜を糖として100mg/ml、KH2PO41mg/
ml、MgSO4・7ag1mg/ml、サイアミン塩酸塩10μ
g/の組成を有する培地を調製し(PH7.0)、そ
の30mlづつを500ml容振盪フラスコに分注し、加
熱殺菌した。この培地に下記の菌株を接種し、往
復振盪機により31.5℃で培養を行つた。 培養中、培養液をPH6.5〜8.0に保つように400
mg/mlの濃度の尿素溶液を少量づつ添加した。 培地の26倍希釈液の562nmの吸光度が0.30に致
達した時にポリオキシエチレンソルビタンモノパ
ルミテート(PESP)を3mg/ml添加した。36時
間で発酵を終了し発酵液中に蓄積したグルタミン
酸の対糖収率を測定した。 その結果を第3表に示す。
して測定した。グルコース0.5g/dl、尿素0.15
g/dl、硫安0.15g/dl、KH2PO40.3g/dl、
K2HPO40.1g/dl、MgSO4・7ag0.01g/dl、
CaCl2・2ag0.1mg/dl、サイアミン塩酸塩10μg/
dl、ビチオン3μg/dl、Na2B4O7・10ag0.44mg/
dl、FeCl3・6ag4.85mg/dl、CuSO4・5ag1.95mg/
dl、(NH4)6Mo7O24・4ag0.185mg/dl、ZnSO4・
7ag44mg/dl、MnCl2・4ag0.36mg/dlおよび表に示
す量のグルタミン酸アンモニウム塩又は、グルタ
ミン酸γ−モノヒドロキサメートを含みPH7.0に
調整した培地に天然培地(ペプトン1g/dl、イ
ーストエキス1g/dl、NaCl0.5g/dl、PH7.0)ス
ラントで24時間培養した菌を無菌水で懸濁して接
種し、24時間培養して生育値を濁度で測定した。 実施例 1 甘蔗糖蜜を糖として100mg/ml、KH2PO41mg/
ml、MgSO4・7ag1mg/ml、サイアミン塩酸塩10μ
g/の組成を有する培地を調製し(PH7.0)、そ
の30mlづつを500ml容振盪フラスコに分注し、加
熱殺菌した。この培地に下記の菌株を接種し、往
復振盪機により31.5℃で培養を行つた。 培養中、培養液をPH6.5〜8.0に保つように400
mg/mlの濃度の尿素溶液を少量づつ添加した。 培地の26倍希釈液の562nmの吸光度が0.30に致
達した時にポリオキシエチレンソルビタンモノパ
ルミテート(PESP)を3mg/ml添加した。36時
間で発酵を終了し発酵液中に蓄積したグルタミン
酸の対糖収率を測定した。 その結果を第3表に示す。
【表】
実施例 2
甜菜糖蜜を糖として50mg/ml、KH2PO41mg/
ml、MgSO4・7ag1mg/ml、FeSO4・7ag10μg/
、MnSO4・4ag8μg/ml、サイアミン塩酸塩
100μg/、消泡剤0.2ml/、PESP(前出)0.4
mg/mlを含む培地を1容のジヤーフアーメンタ
ーに300ml張り込み、加熱殺菌した。 下記の菌を接種し、31.5℃で通気撹拌培養を行
つた。培養中アンモニアガスをフアーメンターに
通じ培養液をPH7.8に調節した。24時間で培養を
終了し、蓄積したL−グルタミン酸を定量した。 その結果ブレビバクテリウム・ラクトフアーメ
ンタムAJ11293、コリネバクテリウム・アセトア
シドフイラムAJ11297はPESP(前出)3mg/ml添
加でそれぞれ対糖収率65%、54%のL−グルタミ
ン酸を蓄積した。同様の方法によりブレビバクテ
リウム・ラクトフアーメンタムATCC13869、コ
リネバクテリウム・アセトアシドフイラム
ATCC13870はPESP(前出)3mg/ml添加でそれ
ぞれ対糖収率60%、50%のL−グルタミン酸を蓄
積した。 実施例 3 グルコース36mg/ml、尿素2mg/ml、KH2PO41
mg/ml、MgSO4・7ag0.4mg/ml、FeSO4・7ag10μ
g/ml、MnSO4・4ag8μg/ml、大豆蛋白酸加水
分解物(「味液」((味の素株式会社製)))5μ/
ml、サイアミン塩酸塩100μg/、ビオチン5μ
g/を含有する培地を調製し、その20mlづつを
500ml容の振盪フラスコに入れ115℃で10分間加熱
滅菌した。この培地に次に示す菌株を接種し往復
振盪機により31.5℃で培養を行つた。培養中、培
養液をPH6.5ないし8.0に保つように450mg/mlの濃
度の尿素溶液を少量づつ添加した。培地の26倍希
釈液の562nmにおける吸光度が0.30に達した時に
PESP(前出)を添加し、30時間で発酵を終了し
発酵液中に蓄積したL−グルタミン酸の対糖収率
を測定した。 その結果、ブレビバクテリウム・ラクトフアー
メンタムAJ11292はPESP(前出)3mg/ml添加で
対糖収率55%のL−グルタミン酸を蓄積した。同
じ方法によりブレビバクテリウム・ラクトフアー
メンタムATCC13869はPESP(前出)3mg/ml添
加で対糖収率52%のL−グルタミン酸を蓄積し
た。 実施例 4 粗糖を糖として100mg/ml、KH2PO41mg/ml、
MgSO4・7ag0.4mg/ml、FeSO4・7ag10μg/ml、
MnSO4・4ag8μg/ml、尿素5mg/ml、大豆蛋白
酸加水分解物(「味液」((味の素株式会社製)))
5μ/mlを含有する培地を調製し、その20mlづ
つを500ml容の振盪フラスコに入れ115℃で10分間
加熱滅菌した。この培地に次に示す菌を接触し往
復振盪機により31.5℃で培養を行つた。培養中、
培養液をPH6.5ないし8.0に保つように400mg/mlの
濃度の尿素水溶液を少量づつ添加した。 培養液の26倍希釈液の562nmにおける吸光度
が0.30に到達時にPESP(前出)を添加し、30時
間で発酵を終了し、発酵液中に蓄積したL−グル
タミン酸の対糖収率を測定した。 その結果、コリネバクテリウム・グルタミクム
AJ11299はPESP(前出)3mg/ml添加で対糖収率
50%のL−グルタミン酸を蓄積した。同じ方法に
よりコリネバクテリウム・アセトアシドフイラム
ATCC13032はPESP(前出)3mg/ml添加で対糖
収率48%のL−グルタミン酸を蓄積した。 実施例 5 酢酸アンモン10mg/ml、酢酸ソーダ10mg/ml、
KH2PO41mg/ml、MgSO4・7ag0.4mg/ml、
FeSO4・7ag10μg/ml、MnSO4・4ag8μg/ml、
大豆蛋白酸加水分解物(「味液」((味の素株式会
社製)))5μ/ml、サイアミン塩酸塩200μg/
、ビオチン1μg/を含有する培地を調製
し、その20mlづつを500ml容の振盪フラスコに入
れて115℃で10分間加熱滅菌した。この培地に次
に示す菌株を接種し、往復振盪機により31.5℃で
培養を行つた。24時間で発酵を終了し発酵液中に
蓄積したL−グルタミン酸の対酢酸収率を測定し
た。その結果を第4表に示す。
ml、MgSO4・7ag1mg/ml、FeSO4・7ag10μg/
、MnSO4・4ag8μg/ml、サイアミン塩酸塩
100μg/、消泡剤0.2ml/、PESP(前出)0.4
mg/mlを含む培地を1容のジヤーフアーメンタ
ーに300ml張り込み、加熱殺菌した。 下記の菌を接種し、31.5℃で通気撹拌培養を行
つた。培養中アンモニアガスをフアーメンターに
通じ培養液をPH7.8に調節した。24時間で培養を
終了し、蓄積したL−グルタミン酸を定量した。 その結果ブレビバクテリウム・ラクトフアーメ
ンタムAJ11293、コリネバクテリウム・アセトア
シドフイラムAJ11297はPESP(前出)3mg/ml添
加でそれぞれ対糖収率65%、54%のL−グルタミ
ン酸を蓄積した。同様の方法によりブレビバクテ
リウム・ラクトフアーメンタムATCC13869、コ
リネバクテリウム・アセトアシドフイラム
ATCC13870はPESP(前出)3mg/ml添加でそれ
ぞれ対糖収率60%、50%のL−グルタミン酸を蓄
積した。 実施例 3 グルコース36mg/ml、尿素2mg/ml、KH2PO41
mg/ml、MgSO4・7ag0.4mg/ml、FeSO4・7ag10μ
g/ml、MnSO4・4ag8μg/ml、大豆蛋白酸加水
分解物(「味液」((味の素株式会社製)))5μ/
ml、サイアミン塩酸塩100μg/、ビオチン5μ
g/を含有する培地を調製し、その20mlづつを
500ml容の振盪フラスコに入れ115℃で10分間加熱
滅菌した。この培地に次に示す菌株を接種し往復
振盪機により31.5℃で培養を行つた。培養中、培
養液をPH6.5ないし8.0に保つように450mg/mlの濃
度の尿素溶液を少量づつ添加した。培地の26倍希
釈液の562nmにおける吸光度が0.30に達した時に
PESP(前出)を添加し、30時間で発酵を終了し
発酵液中に蓄積したL−グルタミン酸の対糖収率
を測定した。 その結果、ブレビバクテリウム・ラクトフアー
メンタムAJ11292はPESP(前出)3mg/ml添加で
対糖収率55%のL−グルタミン酸を蓄積した。同
じ方法によりブレビバクテリウム・ラクトフアー
メンタムATCC13869はPESP(前出)3mg/ml添
加で対糖収率52%のL−グルタミン酸を蓄積し
た。 実施例 4 粗糖を糖として100mg/ml、KH2PO41mg/ml、
MgSO4・7ag0.4mg/ml、FeSO4・7ag10μg/ml、
MnSO4・4ag8μg/ml、尿素5mg/ml、大豆蛋白
酸加水分解物(「味液」((味の素株式会社製)))
5μ/mlを含有する培地を調製し、その20mlづ
つを500ml容の振盪フラスコに入れ115℃で10分間
加熱滅菌した。この培地に次に示す菌を接触し往
復振盪機により31.5℃で培養を行つた。培養中、
培養液をPH6.5ないし8.0に保つように400mg/mlの
濃度の尿素水溶液を少量づつ添加した。 培養液の26倍希釈液の562nmにおける吸光度
が0.30に到達時にPESP(前出)を添加し、30時
間で発酵を終了し、発酵液中に蓄積したL−グル
タミン酸の対糖収率を測定した。 その結果、コリネバクテリウム・グルタミクム
AJ11299はPESP(前出)3mg/ml添加で対糖収率
50%のL−グルタミン酸を蓄積した。同じ方法に
よりコリネバクテリウム・アセトアシドフイラム
ATCC13032はPESP(前出)3mg/ml添加で対糖
収率48%のL−グルタミン酸を蓄積した。 実施例 5 酢酸アンモン10mg/ml、酢酸ソーダ10mg/ml、
KH2PO41mg/ml、MgSO4・7ag0.4mg/ml、
FeSO4・7ag10μg/ml、MnSO4・4ag8μg/ml、
大豆蛋白酸加水分解物(「味液」((味の素株式会
社製)))5μ/ml、サイアミン塩酸塩200μg/
、ビオチン1μg/を含有する培地を調製
し、その20mlづつを500ml容の振盪フラスコに入
れて115℃で10分間加熱滅菌した。この培地に次
に示す菌株を接種し、往復振盪機により31.5℃で
培養を行つた。24時間で発酵を終了し発酵液中に
蓄積したL−グルタミン酸の対酢酸収率を測定し
た。その結果を第4表に示す。
Claims (1)
- 1 ブレビバクテリウム属またはコリネバクテリ
ウム属のL−グルタミン酸生産菌より変異誘導し
た、L−グルタミン酸あるいはL−グルタミン酸
アナログに対し耐性を有する菌株を液体培地中に
好気的に培養して、培養液中にL−グルタミン酸
を生成、蓄積せしめ、これを採取することを特徴
とする、発酵法によるL−グルタミン酸の製造
法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP9494478A JPS5521763A (en) | 1978-08-02 | 1978-08-02 | Preparation of l-grutamic acid by fermentation |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP9494478A JPS5521763A (en) | 1978-08-02 | 1978-08-02 | Preparation of l-grutamic acid by fermentation |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS5521763A JPS5521763A (en) | 1980-02-16 |
JPS6120277B2 true JPS6120277B2 (ja) | 1986-05-21 |
Family
ID=14124046
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP9494478A Granted JPS5521763A (en) | 1978-08-02 | 1978-08-02 | Preparation of l-grutamic acid by fermentation |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS5521763A (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4393135A (en) * | 1979-12-10 | 1983-07-12 | Ajinomoto Company Incorporated | Method for producing L-glutamic acid by fermentation |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5332193A (en) * | 1976-09-06 | 1978-03-27 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of l-glutamic acid by fermentation |
-
1978
- 1978-08-02 JP JP9494478A patent/JPS5521763A/ja active Granted
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5332193A (en) * | 1976-09-06 | 1978-03-27 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of l-glutamic acid by fermentation |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS5521763A (en) | 1980-02-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JPS6236676B2 (ja) | ||
JPS6236673B2 (ja) | ||
JP2817155B2 (ja) | 発酵法によるl‐アルギニンの製造法 | |
JPH0362394B2 (ja) | ||
JPH0362395B2 (ja) | ||
JP2876739B2 (ja) | 発酵法によるl―リジンの製造法 | |
JPS6241000B2 (ja) | ||
JPS6120277B2 (ja) | ||
JPS6155958B2 (ja) | ||
JPH0665314B2 (ja) | 発酵法によるl−バリンの製造法 | |
JP2817172B2 (ja) | 発酵法によるl―リジンの製法 | |
KR910008636B1 (ko) | L-아르기닌의 제조방법 | |
JPH055477B2 (ja) | ||
JP2817228B2 (ja) | L―グルタミン酸の製造法 | |
JPH0644871B2 (ja) | 発酵法によるl−ロイシンの製造法 | |
JPH0638743B2 (ja) | L―リジンを生産する微生物およびこれを用いたl―リジンの製造方法 | |
JPH0561914B2 (ja) | ||
JPH0822235B2 (ja) | 発酵法によるl−グルタミン酸の製造法 | |
JPH0358716B2 (ja) | ||
JPS5910797B2 (ja) | 発酵法によるl−グルタミン酸の製造法 | |
JP2721975B2 (ja) | L−リジンの製造法 | |
JPS6224075B2 (ja) | ||
JPH0527388B2 (ja) | ||
JPS6236679B2 (ja) | ||
JPS6236678B2 (ja) |