JPS58216693A - 発酵法によるｌ−グルタミン酸又はｌ−グルタミン酸ナトリウムの製造法 - Google Patents
発酵法によるｌ−グルタミン酸又はｌ−グルタミン酸ナトリウムの製造法Info
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- JPS58216693A JPS58216693A JP9892682A JP9892682A JPS58216693A JP S58216693 A JPS58216693 A JP S58216693A JP 9892682 A JP9892682 A JP 9892682A JP 9892682 A JP9892682 A JP 9892682A JP S58216693 A JPS58216693 A JP S58216693A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
、［６明は発酵法ｒこよるＬ−グルタミン酸又はＬ−グ
ルタミン酸ナトリウムの製造法Ｅ関する。
ルタミン酸ナトリウムの製造法Ｅ関する。
Ｌ−グルタミン酸（以下、単ｒこグルタミン酸と略す。
）を直接発酵生産する微生物が発見されたのを契機とし
て発酵法ｔこよるグルタミン酸の製造法が確立され、今
［ｌでは我が国をはじめとして凹界各国で大歌のグルタ
ミン酸が工業的に生産されている。
て発酵法ｔこよるグルタミン酸の製造法が確立され、今
［ｌでは我が国をはじめとして凹界各国で大歌のグルタ
ミン酸が工業的に生産されている。
以来、グルタミン酸発酵の機作の解明がｆｊわれると共
ｔこグルタミン酸生産菌の改良についても多くの研究が
なされ、今日までｔこ以下に示すようなグルタミン酸生
産菌が育種され、いくつかのものは実用に供されている
。
ｔこグルタミン酸生産菌の改良についても多くの研究が
なされ、今日までｔこ以下に示すようなグルタミン酸生
産菌が育種され、いくつかのものは実用に供されている
。
上記グルタミン酸生産菌としては、ブレビバクテリウム
又はコリネバクテリウム属に属し、いわゆるコリネ型グ
ルタミン酸生産菌として知られている微生物から誘導さ
れたグリセロール要求性株（特公昭５１−３３９９７号
公報参照）、オレイノ酸要求株（Ａｇｒｉｃ＋ Ｂｉｏ
ｌ、 Ｃｈｅｍ、、 ３１ ＋１３０７、 １９６７
）、ペニシリン耐性株（Δｇｒｉｃ＋ Ｂｉｏｌ＋
Ｃｈｅｍ、、 ３５ ＋ １２４１ ＋＋９７１
）、モノフルオロ酢酸又はマロン酸耐性株（特公昭５５
−９１９７）、ストレプトマイゾ／、クロランフェニコ
ール又はテトラサイクリンＭ ｔ４Ｅ株（特公昭４ｌ−
４３９８）、フルオロクエン酸、ケトマロン酸、α−７
ミノ吉草酸、又はアミ／レブリン酸耐性株（特開昭５４
−８９０８６）、ベンゾピロ７又はナフトキノン類耐性
株（特開昭５６−１８８９ ）、サルファ剤、グルタミ
ノ酸アナログ又はグルグミ／アナログ、２，６−ピリジ
ンカルボンｖ０４性株（特９１１昭ｂｏ−８９５９０，
５５−２１７６４）、呼吸阻害剤又はＡＤＰリン酸化阻
害剤耐性株（特開昭５６−４８８９０）、Ｎ−バルミト
イルグルタミン酸感受性株、温度感受性株、リゾチーム
感受性株（特開昭５３−３２１９３．６２−６６６８７
．５４−１２２７９４）、ビタミン−Ｐ活性物質耐性株
（特開昭５６−１６４７９２ ）、ピルビン酸脱水素酵
素低下株（特開昭５５−２１７６２）、 インクエン酸
すアーゼ低下株（特開昭５６−９２７９５ ）、酢酸要
求性株（特開昭５６−８２０９６ ）等が知られている
。
又はコリネバクテリウム属に属し、いわゆるコリネ型グ
ルタミン酸生産菌として知られている微生物から誘導さ
れたグリセロール要求性株（特公昭５１−３３９９７号
公報参照）、オレイノ酸要求株（Ａｇｒｉｃ＋ Ｂｉｏ
ｌ、 Ｃｈｅｍ、、 ３１ ＋１３０７、 １９６７
）、ペニシリン耐性株（Δｇｒｉｃ＋ Ｂｉｏｌ＋
Ｃｈｅｍ、、 ３５ ＋ １２４１ ＋＋９７１
）、モノフルオロ酢酸又はマロン酸耐性株（特公昭５５
−９１９７）、ストレプトマイゾ／、クロランフェニコ
ール又はテトラサイクリンＭ ｔ４Ｅ株（特公昭４ｌ−
４３９８）、フルオロクエン酸、ケトマロン酸、α−７
ミノ吉草酸、又はアミ／レブリン酸耐性株（特開昭５４
−８９０８６）、ベンゾピロ７又はナフトキノン類耐性
株（特開昭５６−１８８９ ）、サルファ剤、グルタミ
ノ酸アナログ又はグルグミ／アナログ、２，６−ピリジ
ンカルボンｖ０４性株（特９１１昭ｂｏ−８９５９０，
５５−２１７６４）、呼吸阻害剤又はＡＤＰリン酸化阻
害剤耐性株（特開昭５６−４８８９０）、Ｎ−バルミト
イルグルタミン酸感受性株、温度感受性株、リゾチーム
感受性株（特開昭５３−３２１９３．６２−６６６８７
．５４−１２２７９４）、ビタミン−Ｐ活性物質耐性株
（特開昭５６−１６４７９２ ）、ピルビン酸脱水素酵
素低下株（特開昭５５−２１７６２）、 インクエン酸
すアーゼ低下株（特開昭５６−９２７９５ ）、酢酸要
求性株（特開昭５６−８２０９６ ）等が知られている
。
今日ｔでｔこ、このように多種、多数のグルタミン酸生
産菌が育種されており、更ｔこ新しいグルタミン酸生産
菌を育種することは容易なことではないが、本発明者等
はより優れたグルタミン酸生産菌を育種することを目的
として種々（ｔｌｌ究を重ねた結果、（１）酢酸を炭素
源とする培地では生育が悪いが糖類の添加ｔこより生育
が促進される変異株及び（２）糖類な炭素伽とする培地
で生育が悪く酢酸の添加で生育促進されないがエタノー
ルｔこより生育が促進される変異株が夫々糖類及び酢酸
又は糖類及びエタノールを炭素源として高収率でグルタ
ミン酸、又はグルタミノ酸ナトリウムを蓄積することを
発見し本発明を完成するに至った。
産菌が育種されており、更ｔこ新しいグルタミン酸生産
菌を育種することは容易なことではないが、本発明者等
はより優れたグルタミン酸生産菌を育種することを目的
として種々（ｔｌｌ究を重ねた結果、（１）酢酸を炭素
源とする培地では生育が悪いが糖類の添加ｔこより生育
が促進される変異株及び（２）糖類な炭素伽とする培地
で生育が悪く酢酸の添加で生育促進されないがエタノー
ルｔこより生育が促進される変異株が夫々糖類及び酢酸
又は糖類及びエタノールを炭素源として高収率でグルタ
ミン酸、又はグルタミノ酸ナトリウムを蓄積することを
発見し本発明を完成するに至った。
本発明で使用する微生物はブレビバクテリウム属又はコ
リネバクテリウム属ｔこ属し、（！ノグルタミン酸生産
能を有し、かつ酢酸を炭素源とする培地に於て生育が悪
いが糖類の添加によって生育が促進される変異株、例え
ば、ブレビバクテリウム◆ラクトフエルメノタ人ＡＪＩ
＋８７４ ＦＥＲＭ−Ｐ６６３０、コリネバクテリウ
ム・グルタミクム八Ｊ１１８７５ＦＥＲＭ−Ｐ６５３１
、又は■糖類を炭素源とする培地で生育が怨く酢酸ｔ
こよって’Ｊ＝育が促進されないがエタノールｒこよっ
て生育が促進される変異株、例えばブレビバクテリウム
中ラクトフェルメンタムΔＪ１１Ｂ７６ ＦＥＲＭ−
Ｐ６５３２、コリネバクテリウム・グルタミクムＡＪ１
１８７７ ＦＥＲＭ−Ｐ６６３３ 等の変異株が使用
される。上記糖類ｔこはグルコース、フラクトース、ン
ユークロース等１市常のグルタミノ醗酵の炭素源として
利用されるものが含まれる。
リネバクテリウム属ｔこ属し、（！ノグルタミン酸生産
能を有し、かつ酢酸を炭素源とする培地に於て生育が悪
いが糖類の添加によって生育が促進される変異株、例え
ば、ブレビバクテリウム◆ラクトフエルメノタ人ＡＪＩ
＋８７４ ＦＥＲＭ−Ｐ６６３０、コリネバクテリウ
ム・グルタミクム八Ｊ１１８７５ＦＥＲＭ−Ｐ６５３１
、又は■糖類を炭素源とする培地で生育が怨く酢酸ｔ
こよって’Ｊ＝育が促進されないがエタノールｒこよっ
て生育が促進される変異株、例えばブレビバクテリウム
中ラクトフェルメンタムΔＪ１１Ｂ７６ ＦＥＲＭ−
Ｐ６５３２、コリネバクテリウム・グルタミクムＡＪ１
１８７７ ＦＥＲＭ−Ｐ６６３３ 等の変異株が使用
される。上記糖類ｔこはグルコース、フラクトース、ン
ユークロース等１市常のグルタミノ醗酵の炭素源として
利用されるものが含まれる。
本発明の変異株の誘導方法は、ブレビバクテリウム属又
はコリネバクテリウム属に属し、グルタミン酸生産能を
有する微生物、特ｔこいわゆるコリネをのグルタミン酸
生産菌として知られている微生物、例えば、 ブレビバクテリウム噛ラクトフェルメンタム ＡＴＣＣ
１３８６９ブレビバクテリウム・フラバム
ＡＴＣＣ１４０６７プレビバクテリウム嗜サノ力ロ
リテイカム ＡＴＣＣ１４０６６プレビバクテリウム
・デバリカタム ＡＴＣＣＩ ４０２０フリ
ネバクテリウ春・グルタミクム ＡＴＣＣ１
３０３２コリネバクテリウム・アヒトアン１′フイラム
ＡＴＣＣ１３８７０等を親株とし、これにａ常の変異
誘導操作、例えば紫外線照射、又はＮ−メチル−Ｎｏ−
二）ｆ’−Ｎ−ニトロソグアニジノ、１１Ｉ！硝酸等の
（ヒ学薬剤処理を施し、酢酸培地で生育が悪く、糖類の
添加により生育が促進される変異株又は糖類培地で生育
が悪いがエタノールによって生育が促進される変異株を
レプリカ法で分目（することにこまって行われる。
はコリネバクテリウム属に属し、グルタミン酸生産能を
有する微生物、特ｔこいわゆるコリネをのグルタミン酸
生産菌として知られている微生物、例えば、 ブレビバクテリウム噛ラクトフェルメンタム ＡＴＣＣ
１３８６９ブレビバクテリウム・フラバム
ＡＴＣＣ１４０６７プレビバクテリウム嗜サノ力ロ
リテイカム ＡＴＣＣ１４０６６プレビバクテリウム
・デバリカタム ＡＴＣＣＩ ４０２０フリ
ネバクテリウ春・グルタミクム ＡＴＣＣ１
３０３２コリネバクテリウム・アヒトアン１′フイラム
ＡＴＣＣ１３８７０等を親株とし、これにａ常の変異
誘導操作、例えば紫外線照射、又はＮ−メチル−Ｎｏ−
二）ｆ’−Ｎ−ニトロソグアニジノ、１１Ｉ！硝酸等の
（ヒ学薬剤処理を施し、酢酸培地で生育が悪く、糖類の
添加により生育が促進される変異株又は糖類培地で生育
が悪いがエタノールによって生育が促進される変異株を
レプリカ法で分目（することにこまって行われる。
上記例示の変異株な酢酸培地で培養した時のグルコース
の６休加効果ｆＩ：第１表に、又糖培地ｔこ於るエタノ
ール及び酢酸のＭＳ、加効果を第２表、及び第３表ｔこ
示す。
の６休加効果ｆＩ：第１表に、又糖培地ｔこ於るエタノ
ール及び酢酸のＭＳ、加効果を第２表、及び第３表ｔこ
示す。
第１表 酢酸ｊη地に於るグルコースの添加効果０
１００ １３．１００ ２１
１０ １０４ ３８ １０４ ３
６２０ １１０ ７８ １０
７ ７２５０ １３９ １０
９ １３１ １０７（※酢酸ナトリウムｏ、５
ｔｔ／ｄｔを炭素源として使用する培地） 第２表 糖培地でのエタノール添加効果０
１００ １９ １００ ３６５０
１０４ ５１ １０３ ７４１００
１１０ ８９ ＋０４ １００２００
Ｉｌｌ １００ １０８ １０
５５００ ８ １２８ ７ １１
４第３表 糖培地での酢酸添加効果 ０ １００ １６ １００ ３２５０
１１１ １４ １０８ ３３１００
１２０ １６ １１４ ３１（※グルコー
スｏ、５ｔ／ｄｌ培地） 上記各人ｒこ掲げた各変異株の生育度は次のようにして
測定した。第４表に示す組店の培地を５００ｍ１容の肩
イ」フラスコに２〇−充分注し１２０Ｃで１０分間加熱
減菌した。
１００ １３．１００ ２１
１０ １０４ ３８ １０４ ３
６２０ １１０ ７８ １０
７ ７２５０ １３９ １０
９ １３１ １０７（※酢酸ナトリウムｏ、５
ｔｔ／ｄｔを炭素源として使用する培地） 第２表 糖培地でのエタノール添加効果０
１００ １９ １００ ３６５０
１０４ ５１ １０３ ７４１００
１１０ ８９ ＋０４ １００２００
Ｉｌｌ １００ １０８ １０
５５００ ８ １２８ ７ １１
４第３表 糖培地での酢酸添加効果 ０ １００ １６ １００ ３２５０
１１１ １４ １０８ ３３１００
１２０ １６ １１４ ３１（※グルコー
スｏ、５ｔ／ｄｌ培地） 上記各人ｒこ掲げた各変異株の生育度は次のようにして
測定した。第４表に示す組店の培地を５００ｍ１容の肩
イ」フラスコに２〇−充分注し１２０Ｃで１０分間加熱
減菌した。
第４表培地組成（ｐＨ７，０）
成 分 濃 度 成 分 濃 変
法 素 ０．＋５ 〃 ＣｕＳＯ４
・５ＨｓＯ１，９５’硫酸アンモニウム ０．１６
＃ （ＮＨ４）、ＭＯ，０，４０，１８５／／ＫＩｌ
ｓＰＯ４０，３ｓ ＺｎＳＯ４拳７ＨｔＯ４４ｔ／に、
ＨＩ’０４０．１ ／Ｆ ＭｎＣｌ、＠４Ｈ，ＯＯ，３
６ｔｔＭｇＳＯ４＊７ＨｇＯＯ，０１／／ ＮａｇＢ４
０７＠ＨｇＯＯ，４４ｔｔＣａＣＩ、 −ｚＩ４．ｏ
Ｏ，１ｍ９／ｄｅ ヒオｆン３．Ｏｐｙ／ｄｌザイア
ミン塩酸塩 ｌＯμｆａｄｅ この培地にニュートリエンドブロス寒天培地上に生育（
３１Ｕ１２４時間培養）させた各菌株を接種し、３ Ｌ
、Ｓ ｔ？で２４時間振盪培養した。培養液を純水で１
／２６Ｆこ希釈し、５６２ ｎｍ ｔこ於る吸光度を測
定し生育度を求めた。表中ｔこは相対生育度を示した３
、 本発明の変異株を使用する利点としてはグルタミン酸が
高収率で生産できることの他ｔこグルタミン酸をグルタ
ミン酸ナトリウム塩として蓄積できることが挙げられる
。
法 素 ０．＋５ 〃 ＣｕＳＯ４
・５ＨｓＯ１，９５’硫酸アンモニウム ０．１６
＃ （ＮＨ４）、ＭＯ，０，４０，１８５／／ＫＩｌ
ｓＰＯ４０，３ｓ ＺｎＳＯ４拳７ＨｔＯ４４ｔ／に、
ＨＩ’０４０．１ ／Ｆ ＭｎＣｌ、＠４Ｈ，ＯＯ，３
６ｔｔＭｇＳＯ４＊７ＨｇＯＯ，０１／／ ＮａｇＢ４
０７＠ＨｇＯＯ，４４ｔｔＣａＣＩ、 −ｚＩ４．ｏ
Ｏ，１ｍ９／ｄｅ ヒオｆン３．Ｏｐｙ／ｄｌザイア
ミン塩酸塩 ｌＯμｆａｄｅ この培地にニュートリエンドブロス寒天培地上に生育（
３１Ｕ１２４時間培養）させた各菌株を接種し、３ Ｌ
、Ｓ ｔ？で２４時間振盪培養した。培養液を純水で１
／２６Ｆこ希釈し、５６２ ｎｍ ｔこ於る吸光度を測
定し生育度を求めた。表中ｔこは相対生育度を示した３
、 本発明の変異株を使用する利点としてはグルタミン酸が
高収率で生産できることの他ｔこグルタミン酸をグルタ
ミン酸ナトリウム塩として蓄積できることが挙げられる
。
従来のグルタミン酸発酵法に於ては、グルタミン酸はア
ンモニウム塩の型で培養液中に蓄積されるので、これか
らグルタミン酸ナトリウムを製造するｔこは培養液から
グルタミノ酸を晶析法あるいはイオン交換樹脂法で分離
し、これを苛性ソーダで中和し、脱色・精製後結晶化す
る方法が採用されている。培１ｑ液ｔこグルタミン酸ナ
トリウムが直接蓄積できればアンモニア及び塩酸が節約
でき、又、アンモニウム塩からナトリウム塩への変換す
る工程も省略できるので経済的に有利である。ところが
、従来のグルタミン酸生産菌を用いた場合、全グルタミ
ン酸塩ｒこ対するナトリウム塩の割合が増大するにつれ
てグルタミン酸の収率が低下してしまうため、この方法
は実用化されていない。これｔこＸ、１シて、本発明の
資化性低Ｆ株ではグルタミン酸の収率が低下しないので
、グルタミン酸ナトリウム発酵がｌ！ｆ適に実施できる
。
ンモニウム塩の型で培養液中に蓄積されるので、これか
らグルタミン酸ナトリウムを製造するｔこは培養液から
グルタミノ酸を晶析法あるいはイオン交換樹脂法で分離
し、これを苛性ソーダで中和し、脱色・精製後結晶化す
る方法が採用されている。培１ｑ液ｔこグルタミン酸ナ
トリウムが直接蓄積できればアンモニア及び塩酸が節約
でき、又、アンモニウム塩からナトリウム塩への変換す
る工程も省略できるので経済的に有利である。ところが
、従来のグルタミン酸生産菌を用いた場合、全グルタミ
ン酸塩ｒこ対するナトリウム塩の割合が増大するにつれ
てグルタミン酸の収率が低下してしまうため、この方法
は実用化されていない。これｔこＸ、１シて、本発明の
資化性低Ｆ株ではグルタミン酸の収率が低下しないので
、グルタミン酸ナトリウム発酵がｌ！ｆ適に実施できる
。
グルタミン酸をナトリウム塩として蓄積せしめるために
は培養液のｐＨを制御する際、使用するフルカリとして
竹性ンーダ、炭酸ナトリウム等をトトシて用い、アンモ
ニアはグルタミン酸の生合成ｔこ必要とされる範囲に制
限すれば良い。
は培養液のｐＨを制御する際、使用するフルカリとして
竹性ンーダ、炭酸ナトリウム等をトトシて用い、アンモ
ニアはグルタミン酸の生合成ｔこ必要とされる範囲に制
限すれば良い。
本発明に於て使用する培地は炭素源、窒素源、無機イオ
ン、更にビオチン、サイアミ７等の微量栄養素を含有す
る栄養培地であり、炭素源としては糖類及び酢酸又はエ
タノールが使用される。即ち、（１）の糖類によって生
育が促進される変異株を使用する場合には、糖類及び酢
酸が使用され、懐）のエタノールによって生育が促進さ
れる変異株の場合には、糖類及びエタノールが使用され
る。
ン、更にビオチン、サイアミ７等の微量栄養素を含有す
る栄養培地であり、炭素源としては糖類及び酢酸又はエ
タノールが使用される。即ち、（１）の糖類によって生
育が促進される変異株を使用する場合には、糖類及び酢
酸が使用され、懐）のエタノールによって生育が促進さ
れる変異株の場合には、糖類及びエタノールが使用され
る。
上記糖類としてはグルコース、フラクトース、シューク
ロース、マルトース等の糖出及びこれら糖類な含有する
澱粉氷解物、果汁、糖蜜、廃糖蜜等が使用される。窒素
源としては硫酸アンモニウム、尿素、アンモニア等が使
用さ１シ、無１（（イオンとしては、婢酸、硫酸、カリ
ウム、ナトリウム、マング／、鉄、亜鉛イオン等が使用
される。また使用する培地（主として炭素θ］ｉ）、菌
株の種類？こ応じてビオチン、サイアミン等の機船栄養
素が適宜添加される。尚、ビオチンが過剰ｔこ存在する
培地を使用する場合Ｖこけ、ポリオキシエチレンソルビ
タン、モノパルミテート、ペニシリン等ビオチン作用抑
制物質が′塁状により添加される。
ロース、マルトース等の糖出及びこれら糖類な含有する
澱粉氷解物、果汁、糖蜜、廃糖蜜等が使用される。窒素
源としては硫酸アンモニウム、尿素、アンモニア等が使
用さ１シ、無１（（イオンとしては、婢酸、硫酸、カリ
ウム、ナトリウム、マング／、鉄、亜鉛イオン等が使用
される。また使用する培地（主として炭素θ］ｉ）、菌
株の種類？こ応じてビオチン、サイアミン等の機船栄養
素が適宜添加される。尚、ビオチンが過剰ｔこ存在する
培地を使用する場合Ｖこけ、ポリオキシエチレンソルビ
タン、モノパルミテート、ペニシリン等ビオチン作用抑
制物質が′塁状により添加される。
培養は好気的条件下で行うのが良く、培養期間中、培養
温度を２４〜３７Ｃ１培養ｐＨを６〜９ｔこ制御する。
温度を２４〜３７Ｃ１培養ｐＨを６〜９ｔこ制御する。
ｐＨの調整ｔこは無機あるいは有機の酸、アルカリが使
用される。ｌｊｆ述したように、ナトリウム塩を県積せ
しめる場合には上記アルカリ物質として苛性ソーダ、炭
酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム等を使用し、アンモニ
アあるいは尿素はグルタミン酸の生合成に必要とされる
［ｒこ制限することが必要であり、具体的には培養液中
のＮＨ４／Ｎａ比を１，４以下？こ制御する。
用される。ｌｊｆ述したように、ナトリウム塩を県積せ
しめる場合には上記アルカリ物質として苛性ソーダ、炭
酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム等を使用し、アンモニ
アあるいは尿素はグルタミン酸の生合成に必要とされる
［ｒこ制限することが必要であり、具体的には培養液中
のＮＨ４／Ｎａ比を１，４以下？こ制御する。
’ｇ＜ ５’＃ ？（’１．からグルタミン酸、グルタ
ミン酸ナトリウノ・の採取方法は公知の方法によって行
先ば良１・。
ミン酸ナトリウノ・の採取方法は公知の方法によって行
先ば良１・。
以−卜、実施例ｔこて説明する。
実施例１
第４表に示すグルタミン酸生産用培地を調製し、５００
阿ｌ容フラスコｔこ２０づ充分注し、１１５ｔ；で１０
分間加熱した。
阿ｌ容フラスコｔこ２０づ充分注し、１１５ｔ；で１０
分間加熱した。
第４表 グルタミン酸生産用培地の組成グルコース
１５．０ｆ ５０ ｆ酢酸
アンモニウム １０．０ 〃 −酢
酸ナトリウム Ｉｎ、０＃ −
一、／ ／− 一２．０ 栄 素 ６．ＯＦ ６
．０ＫＨ９ＰＯ４１，０＃ １．０Ｍｇ５Ｏ
，・７Ｈ，０１，ＯＮ １．０ＭｎＳＯ４・
４Ｈ，０１０＃１ｇ ｔｏ、。
１５．０ｆ ５０ ｆ酢酸
アンモニウム １０．０ 〃 −酢
酸ナトリウム Ｉｎ、０＃ −
一、／ ／− 一２．０ 栄 素 ６．ＯＦ ６
．０ＫＨ９ＰＯ４１，０＃ １．０Ｍｇ５Ｏ
，・７Ｈ，０１，ＯＮ １．０ＭｎＳＯ４・
４Ｈ，０１０＃１ｇ ｔｏ、。
ＦｅＳＯ４ＩＩ７ＨｇＯ１０〃 １０．０大豆蛋
白分解液４÷” ０．３６ ｆ
Ｏ，３６ｔビオチン ３．０ １ｔ
ｆ ２．０ μ２サイアミン塩酸塩
２００ ／／ ２００ ／／ｐ Ｈ７，
０７，０ この培地に、ブイヨン寒天スラント上に生育すせた試験
菌を接種し、３１．５ Ｃで４８時間（Ａ培地の場合）
、又は４０時間（Ｂ培地の場合）夫々振盪培養した。
白分解液４÷” ０．３６ ｆ
Ｏ，３６ｔビオチン ３．０ １ｔ
ｆ ２．０ μ２サイアミン塩酸塩
２００ ／／ ２００ ／／ｐ Ｈ７，
０７，０ この培地に、ブイヨン寒天スラント上に生育すせた試験
菌を接種し、３１．５ Ｃで４８時間（Ａ培地の場合）
、又は４０時間（Ｂ培地の場合）夫々振盪培養した。
ＩＸ ５に期間中、尿素水溶液を添加して培養液のｐＨ
を６．５〜８．５に制御１２、かつ、へ培地の場合ｔこ
は、ｊｊ’９養液のグルコ−７、濃度を０．１〜ｏ、５
ｙ／ｌｔｅ。
を６．５〜８．５に制御１２、かつ、へ培地の場合ｔこ
は、ｊｊ’９養液のグルコ−７、濃度を０．１〜ｏ、５
ｙ／ｌｔｅ。
Ｎ’ｒｌｖａ度ヲｏ、ｓ −ｔ、ｏ ｔ ／１ｔｔｔｖ
範囲に、又Ｂ培地の場合ｔこは、エタノール濃度を０．
０５〜ｏ、ｔｔ／ｌｔｔの範囲に制御しつつ培養した。
範囲に、又Ｂ培地の場合ｔこは、エタノール濃度を０．
０５〜ｏ、ｔｔ／ｌｔｔの範囲に制御しつつ培養した。
培養液中のグルタミン酸の格（７７ｍを測定し収率を求
めた。その結果を第５表Ｖこ示す。
めた。その結果を第５表Ｖこ示す。
第５表 グルタミン酸の１に
培 株 培 地 培養時間 収率（４）ＡＴＣ
Ｃ１３８６９Ａ ４８
４３八Ｊ １１８７４ Ａ
５８ＡＴＣＣ＋３０３２ Ａ
４０ＡＪ
１１８７５ Ａ ＃
５１ＡＴＣＣ１３８６９８４０４９ ＡＪ １１８７６ ２ ５８
ＡＴＣＣ！３０３２ Ｂ
４７実施例２ 〆ルコ−ス３ ｆ ／ ｄｉ１酢酸アンモニウム１．Ｏ
ｔ ／ ｒｔｅ 、、酢酸す） ＩＪつＡ １．ＯＰ
／ｄ１．、 ＫＨ，ＰＯ４ｏ、ｌｔ／ａ／、ＭｇＳＯ４
−７Ｈ，ＯＯ，１ｙ／ｌｉｅ。
Ｃ１３８６９Ａ ４８
４３八Ｊ １１８７４ Ａ
５８ＡＴＣＣ＋３０３２ Ａ
４０ＡＪ
１１８７５ Ａ ＃
５１ＡＴＣＣ１３８６９８４０４９ ＡＪ １１８７６ ２ ５８
ＡＴＣＣ！３０３２ Ｂ
４７実施例２ 〆ルコ−ス３ ｆ ／ ｄｉ１酢酸アンモニウム１．Ｏ
ｔ ／ ｒｔｅ 、、酢酸す） ＩＪつＡ １．ＯＰ
／ｄ１．、 ＫＨ，ＰＯ４ｏ、ｌｔ／ａ／、ＭｇＳＯ４
−７Ｈ，ＯＯ，１ｙ／ｌｉｅ。
ＭｎＳＯ４＠ ７Ｈ，０１ＭＷ／ｄ１１ＦｅＳＯ４＠
７）］ｑＯ１■／ｒｔｅｚ大豆蛋白塩酸分解液（全窒素
として）３６ｍｇ／、／／！、ザイ７ミノ、％酸塩２０
０ ｐｆ／Ｌ 、ビオチア ２ ｔｔｙ／ｌを含有する
培地３００ｍ１を１．５を容ジャーファーメンタ−Ｆこ
張込み１２０ｔｌ：で１５分間加熱滅菌した。
７）］ｑＯ１■／ｒｔｅｚ大豆蛋白塩酸分解液（全窒素
として）３６ｍｇ／、／／！、ザイ７ミノ、％酸塩２０
０ ｐｆ／Ｌ 、ビオチア ２ ｔｔｙ／ｌを含有する
培地３００ｍ１を１．５を容ジャーファーメンタ−Ｆこ
張込み１２０ｔｌ：で１５分間加熱滅菌した。
この培地ｔこブレビバクテリウム−ラクトフェルメンタ
ムＡＪＩ ＋８７４のｌｊｉ培Ａ液を１５４接種し３１
．５ ’Ｃｒコテ３１ｔｊ気１’ｅ 斗培貞（攬、件後
１１００Ｏｒｐ。
ムＡＪＩ ＋８７４のｌｊｉ培Ａ液を１５４接種し３１
．５ ’Ｃｒコテ３１ｔｊ気１’ｅ 斗培貞（攬、件後
１１００Ｏｒｐ。
通気敏％ ＶＶＭ ）を行った。
ノＢ食期間中、グルコース溶液（４６Ｐ／ｄｌ）、酢酸
ナトリウムｆｆ４液（２ｏｔ／ｄｉ）及び酢酸アンモニ
ウム溶液（２０？／ｄ１． ）を夫々連続的に供給し、
培養液中の酢酸濃度を０，１〜１．Ｏ９／ｄ／、グルコ
ース鹿度を０．１〜１．５ｆ／ｄｉの範囲に制御し、か
つ培養液のｐＨな７．８ｔこ制御した。
ナトリウムｆｆ４液（２ｏｔ／ｄｉ）及び酢酸アンモニ
ウム溶液（２０？／ｄ１． ）を夫々連続的に供給し、
培養液中の酢酸濃度を０，１〜１．Ｏ９／ｄ／、グルコ
ース鹿度を０．１〜１．５ｆ／ｄｉの範囲に制御し、か
つ培養液のｐＨな７．８ｔこ制御した。
２０時間培養後、酢酸アンモニウムの供給敬を漸次減少
し逆Ｖこ酢酸ナトリウム溶液の供給割合を増大させて培
養を行った。４８時間培養後、培養液中のグルタミン酸
、グルタミン酸ナトリウム塩の占積はを７１１１１定し
た。その結果をり１６表ｔこ示す。
し逆Ｖこ酢酸ナトリウム溶液の供給割合を増大させて培
養を行った。４８時間培養後、培養液中のグルタミン酸
、グルタミン酸ナトリウム塩の占積はを７１１１１定し
た。その結果をり１６表ｔこ示す。
第 ６ 表
ＡＴＣＣ１３８６９４８９７，５
ＡＪ １１８７４ ６３ ９７．９実施例３
ｊｌｉ’ｔｔ［Ａ糖蜜（全糖として） ５ ｆ／ｄｅ１
：ｘ−ｙ−ルアル：ｌ−ル０．２ Ｆ ／ ｄｉ、ＫＨ
，ＰＯ４０，２Ｐ ／ｄｔ。
：ｘ−ｙ−ルアル：ｌ−ル０．２ Ｆ ／ ｄｉ、ＫＨ
，ＰＯ４０，２Ｐ ／ｄｔ。
ＭｇＳＯ４・ＩＨｓＯＯ，１ｆ ／ｄｉ、硫酸７ンーｔ
−、＝ウムｏ、ｏ ５ｔ ／ （／／！、Ｍｎ ＳＯ４
・４ Ｈｇ ＯＩ ８９ ／ ＃、ＦｅＳＯ４・７Ｈ，
ＯＩ ｍｇ’／ｄｉ、大豆加水分解濃縮液を（全窒素と
して） ３６ ｖ＋ｇ ／ｄｙ、及びサイアミン塩酸塩
２００７１１／ｌを含有する培地３００ ｍｌを、１．
５１容ジャーファーメンタ−１こ張込み１２０Ｕで１５
分間滅菌した。
−、＝ウムｏ、ｏ ５ｔ ／ （／／！、Ｍｎ ＳＯ４
・４ Ｈｇ ＯＩ ８９ ／ ＃、ＦｅＳＯ４・７Ｈ，
ＯＩ ｍｇ’／ｄｉ、大豆加水分解濃縮液を（全窒素と
して） ３６ ｖ＋ｇ ／ｄｙ、及びサイアミン塩酸塩
２００７１１／ｌを含有する培地３００ ｍｌを、１．
５１容ジャーファーメンタ−１こ張込み１２０Ｕで１５
分間滅菌した。
この培地？こ、同培地で前培ＩＪｒ ｌ、たブレビバク
テリウム・ラクトフェルメンタムＡＴＣＣ１３８６９、
ＡＪ１１８７６及びＡＪ１１８７７０種培養液を接種し
、ｐＨを７．８ｊ：ｌｉちッツ３１．５ ｃで通気攪拌
培養（１００Ｏｒｐｍ、 ’Ａ ＶＶＭ ）を行った。
テリウム・ラクトフェルメンタムＡＴＣＣ１３８６９、
ＡＪ１１８７６及びＡＪ１１８７７０種培養液を接種し
、ｐＨを７．８ｊ：ｌｉちッツ３１．５ ｃで通気攪拌
培養（１００Ｏｒｐｍ、 ’Ａ ＶＶＭ ）を行った。
培養開始後、培養液の２６倍希釈液の５６２ ｎｍｔこ
おける吸光度が、０．３Ｆこ到達した時ｅこポリオキン
エチレンソルビタノモノバルミティトを添加した。
おける吸光度が、０．３Ｆこ到達した時ｅこポリオキン
エチレンソルビタノモノバルミティトを添加した。
又、培養Ｍ中の残存エチルアルコール濃度が０．０５〜
０．７ Ｐ ／ｒｔｅの範囲にとどまるように、エチル
アルコールを連続的に補給した。更に培養開始後２０時
間後、ｐＨコントロールをＮＨ４ガヌから除々に炭酸ナ
トリウムの址を増加させて培養を行った。以上の結果、
培養４８時間後第７表に示す城のし一グルタミ／酸及び
グルタミン酸ソーダが培養液中ｔこ生成循積した。
０．７ Ｐ ／ｒｔｅの範囲にとどまるように、エチル
アルコールを連続的に補給した。更に培養開始後２０時
間後、ｐＨコントロールをＮＨ４ガヌから除々に炭酸ナ
トリウムの址を増加させて培養を行った。以上の結果、
培養４８時間後第７表に示す城のし一グルタミ／酸及び
グルタミン酸ソーダが培養液中ｔこ生成循積した。
第７表
ＡＴＣＣ１３８６９５２６Ｂ、９
八Ｊ １１８７６ ６１ ９４．６
ＡＴＣＣ１３０３２与。 ６
り、ＯへＪ １１８７７ ５８
８８．８特許出願人 味の素株式会社
ＡＴＣＣ１３０３２与。 ６
り、ＯへＪ １１８７７ ５８
８８．８特許出願人 味の素株式会社
Claims (1)
- ブレビバクテリウム属又はコリネバクテリウム属？こ属
し、Ｌ−グルタミノ酸生産能を有し、かつ、（ｖ酢酸を
炭素源とする培地で生育が悪いが、糖類の添加によって
生育が促進される変異株、又は（２＋糖類を炭素源とす
る培地で生育が悪く酢酸の添加では生育が促進されない
がエタノールの添加で生育が促進される変異株を、糖類
及び酢酸もしくはエタノールを炭素源とする培地で好気
的に培養し、培養液中ｒこ蘂積したし一グルタミン酸又
はＬ−グルタミン酸ナトリウムを採取することを特徴と
する発酵法によるＬ−グルタミン酸又はＬ−グルタミン
酸ナトリウムの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9892682A JPS58216693A (ja) | 1982-06-09 | 1982-06-09 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸又はｌ−グルタミン酸ナトリウムの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9892682A JPS58216693A (ja) | 1982-06-09 | 1982-06-09 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸又はｌ−グルタミン酸ナトリウムの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58216693A true JPS58216693A (ja) | 1983-12-16 |
| JPH0358716B2 JPH0358716B2 (ja) | 1991-09-06 |
Family
ID=14232728
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9892682A Granted JPS58216693A (ja) | 1982-06-09 | 1982-06-09 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸又はｌ−グルタミン酸ナトリウムの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58216693A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63214189A (ja) * | 1987-03-04 | 1988-09-06 | Asahi Chem Ind Co Ltd | Ｌ―グルタミン酸の製造方法 |
| JP2010516274A (ja) * | 2007-01-24 | 2010-05-20 | シージェイ チェイルジェダン コーポレイション | コリネバクテリアを利用してグリセロールを含む炭素源から発酵産物を生産する方法 |
-
1982
- 1982-06-09 JP JP9892682A patent/JPS58216693A/ja active Granted
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63214189A (ja) * | 1987-03-04 | 1988-09-06 | Asahi Chem Ind Co Ltd | Ｌ―グルタミン酸の製造方法 |
| JP2520895B2 (ja) * | 1987-03-04 | 1996-07-31 | 旭化成工業株式会社 | Ｌ―グルタミン酸の製造方法 |
| JP2010516274A (ja) * | 2007-01-24 | 2010-05-20 | シージェイ チェイルジェダン コーポレイション | コリネバクテリアを利用してグリセロールを含む炭素源から発酵産物を生産する方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0358716B2 (ja) | 1991-09-06 |
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