JPH11503305A - 遺伝子治療用の抗菌ペプチドをコードする治療用遺伝子を有するベクター - Google Patents
遺伝子治療用の抗菌ペプチドをコードする治療用遺伝子を有するベクターInfo
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Abstract
Description
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1.真核生物細胞DNA中に導入するための組換えベクターであって: a)標的細胞中での感染および発現を指令することができる、レトロウ イルスベクターのDNAまたはレトロウイルスベクターの少なくとも一部に対応 するDNAと; b)少なくとも1つの配列は、哺乳動物の腫瘍、ウイルス、細菌および 真菌感染症から選択される少なくとも1つの疾患を治療するための、少なくとも 1つの天然に存在する治療用抗菌性ペプチドまたはその誘導体をコードする、1 以上のコード配列とを、 機能的に結合して含有してなる組換えベクター。 2.請求項1に記載の組換えベクターであって、前記レトロウイルスベクター が、複製欠損である組換えベクター。 3.請求項1に記載の組換えベクターであって、前記レトロウイルスベクター は、U3−R−U5構造を含む5’LTR領域と、完全にまたは部分的に欠失さ れたU3領域を含む3’LTR領域とを、機能的に結合して含有し、前記欠失さ れたU3領域は、前記1以上のコード配列(少なくとも1つの配列は、哺乳動物 の腫瘍、ウイルス感染症、細菌感染症および真菌感染症から選択される少なくと も1つの疾患を治療するための、天然の抗菌性ペプチドまたはその誘導体をコー ドする)により置換されており、R領域およびU5領域がこれに続いているベク ター。 4.請求項1に記載の組換えウイルスベクターであって、 前記レトロウイルスベクターは、5’LTR領域と;少なくとも1つの配 列は、哺乳動物の腫瘍、ウイルス感染症、細菌感染症および真菌感染症から選択 される少なくとも1つの疾患を治療するための、少なくとも1つの天然に存在す る抗菌性ペプチドまたはその誘導体をコードする、1以上の前記コード配列と; 3’LTR領域を、機能的に結合して含有し、 前記5’LTR領域はU3−R−U5構造を含み、また前記3’LTR領 域は、完全にまたは部分的に欠失されたU3領域を含んでおり、 前記欠失したU3領域は、プロモーター変換を受けるように、ポリリンカ ー配列により置換されており、R領域およびU5領域がこれに続いているベクタ ー。 5.請求項1〜4の何れか1項に記載の組換えベクターであって、天然に存在 する治療用の抗菌性ペプチドまたはその誘導体をコードする前記配列が、メリチ ン、セクロピン、マガイニン、アピダエシンおよびデフェンシンペプチド、また はこのような抗菌性ペプチドの一部、類縁体、相同体、組換え体またはその組合 せのアミノ酸配列をコードする組換えベクター。 6.請求項5に記載の組換えベクターであって、メリチンの構造類縁体が、シ グナルペプチドおよび活性化ドメインを有するかまたは有しない両親媒性らせん を含む組換えベクター。 7.請求項5に記載の組換えベクターであって、メリチンの構造類縁体が、G ly−Ile−Gly−Ala−Val−Leu−Lys−Val−Leu−T hr−Thr−Gly−Leu−Pro−Ala−Leu−Ile−Ser−T rp−Ile−Gly−Gly−Gly−Gly−Gly−Glyである組換え ベクター。 8.請求項5に記載の組換えベクターであって、前記構造類縁体が、メリチン 様のAmfi 1およびGP41のペプチドである組換えベクター。 9.請求項5に記載の組換えベクターであって、前記構造類縁体が、メリチン 様のAmfi 2およびGP41のペプチドである組換えベクター。 10.請求項5に記載の組換えベクターであって、前記メリチン遺伝子配列また はその誘導体が、メリチン、プレメリチン、またはプレプロメリチンをコードす る配列である組換えベクター。 11.請求項5に記載の組換えベクターであって、天然に存在する抗菌性ペプチ ドまたはその誘導体をコードする前記配列が、セクロピン、プレセクロピン、ま たはプレプロセクロピンをコードする配列である組換えベクター。 12.請求項5に記載の組換えベクターであって、天然に存在する抗菌性ペプチ ドまたはその誘導体をコードする前記配列が、マガイニンをコードする配 列またはその誘導体である組換えベクター。 13.請求項4に記載の組換えベクターであって、前記ポリリンカー配列が、少 なくとも1つのユニークな制限部位を有する組換えベクター。 14.請求項4に記載の組換えベクターであって、前記ポリリンカー配列が、少 なくとも1つの異種DNA断片の挿入配列を含有する組換えベクター。 15.請求項14に記載の組換えベクターであって、前記異種DNA断片が、制 御要素およびプロモーターよりなる群の1つまたはそれ以上の要素から選択され る組換えベクター。 16.請求項1〜4の何れか1項に記載の組換えベクターであって、前記コード 配列が、制御要素およびプロモーターから選択される少なくとも1つの非コード 配列をさらに含む組換えベクター。 17.請求項16に記載の組換えベクターであって、前記制御要素またはプロモ ーターが、SV40、サイトメガロウイルス、ラウス肉腫ウイルス、β−アクチ ン、HIV−LTR、MMTLV−LTR、B細胞またはT細胞特異的なプロモ ーターおよび腫瘍特異的なプロモーターの群から選択される組換えベクター。 18.請求項15〜16の何れか1項に記載の組換えベクターであって、前記制 御要素およびプロモーターが、その発現において標的細胞に特異的である組換え ベクター。 19.請求項18に記載の組換えベクターであって、前記標的細胞に特異的な制 御要素およびプロモーターが、HIV、WAP、MMTV、β−ラクトグロブリ ンおよびカゼイン特異的制御要素およびプロモーター;炭酸脱水酵素IIおよびβ −グルコキナーゼ制御要素およびプロモーターを含む、膵臓特異的な制御要素お よびプロモーター;免疫グロブリンおよびMMTVリンパ球特異的制御要素およ びプロモーターを含む、リンパ球特異的な制御要素およびプロモーター;および グルココルチコイドホルモンに対する応答性を与えるかまたは乳腺に対して発現 を指令するMMTVP2のようなMMTV特異的な制御要素およびプロモーター;T 細胞受容体遺伝子、CD 4受容体プロモーターのような、T細胞特異的な制御要素およびプロモーター; および免疫グロブリンプロモーターおよびmb1のような、B細胞特異的な制御 要素およびプロモーターよりなる群の1つまたはそれ以上の要素から選択される 組換えベクター。 20.請求項15〜16の何れか1項に記載の組換えベクターであって、前記制 御要素が、トランス作用性分子により制御可能である組換えベクター。 21.請求項15〜16の何れか1項に記載の組換えベクターであって、前記制 御要素およびプロモーターが、前記レトロウイルスベクターの少なくとも1つの コード配列の発現を制御する組換えベクター。 22.請求項1〜4の何れか1項に記載の組換えベクターであって、前記レトロ ウイルスベクターのLTR領域が、MLV、MMTV、MSV、SIV、HIV 、HTLV、FIV、FeLV、BLVおよびMPMVのLTRよりなる群の少 なくとも1つの要素から選択される組換えベクター。 23.請求項22に記載の組換えベクターであって、前記レトロウイルスベクタ ーが、BAGベクターである組換えベクター。 24.請求項1〜4に記載の組換えベクターであって、前記コード配列が、マー カー遺伝子、治療用遺伝子、抗ウイルス性遺伝子、抗腫瘍性遺伝子、サイトカイ ン遺伝子よりなる群の1つまたはそれ以上の要素からさらに選択される組換えベ クター。 25.請求項24に記載の組換えベクターであって、前記マーカーまたは治療用 遺伝子が、β−ガラクトシダーゼ、ネオマイシン、アルコール脱水素酵素、ピュ ーロマイシン、ヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ(HPRT)、 ヒグロマイシンおよび分泌アルカリ性ホスファターゼのようなタンパク質をコー ドするマーカー遺伝子、または単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ、シトシ ンデアミナーゼ、グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ(gpt)、チト クロームP450のようなタンパク質をコードする治療用遺伝子、およびP.T .O.、SDIのようなタンパク質をコードする細胞周期制御遺伝子、またはp 53のようなタンパク質をコ ードする腫瘍抑制遺伝子、または抗増殖遺伝子、またはIL−2のようなサイト カインよりなる群から選択される組換えベクター。 26.請求項1〜4の何れか1項に記載の組換えベクターであって、レトロウイ ルスの組込みに関与するレトロウイルス配列が、改変されているかまたは少なく とも部分的に欠失している組換えベクター。 27.請求項1〜4の何れか1項に記載の組換えベクターであって、前記レトロ ウイルスベクターが、1以上の細胞内配列に対して相同的なDNA配列をさらに 含んでなる組換えベクター。 28.第1成分として、請求項1〜27の何れか1項に記載のレトロウイルスベ クターと;前記レトロウイルスベクターをパッケージングするために必要なタン パク質をコードする、少なくとも1つのレトロウイルスベクターまたは組換えレ トロウイルス構築物を有するパッケージング細胞株を含んでなる、組換えレトロ ウイルスベクター系。 29.ヒトまたは動物細胞中にインビトロおよびインビボで相同的なおよび/ま たは異種のヌクレオチド配列を導入するための非治療的または治療的方法であっ て、請求項28に記載のレトロウイルスベクター系のパッケージング細胞株を、 請求項1〜27の何れか1項に記載のレトロウイルスベクターでトランスフェク ションすることと、パッケージング細胞株により産生される前記組換えレトロウ イルスで標的細胞集団を感染することとを具備する方法。 30.請求項28に記載のレトロウイルスベクター系において、請求項1〜27 の何れか1項に記載のレトロウイルスベクターを複製することにより産生される レトロウイルスプロウイルスであって、3’LTR中のU3または前記ポリリン カーおよび該ポリリンカーに挿入された任意の配列が、感染標的細胞における逆 転写の過程で複製されて、得られたプロウイルスの3’LTRと同様に5’LT Rにも現れ、また5’LTRのU5が、感染標的細胞における逆転写の過程で複 製されて、得られたプロウイルスの5’LTRと同様に3’LTRにも現れるプ ロウイルス。 31.請求項28に記載のレトロウイルスベクター系のパッケージング細胞株を 、請求項1〜27の何れか1項に記載のレトロウイルスベクターでトランスフェ クションすることと、レトロウイルス粒子を単離することにより産生されるレト ロウイルス粒子。 32.ヒトを含む哺乳動物の、腫瘍、ウイルス感染症、細菌感染症および真菌感 染症から選択される少なくとも1つの疾患の遺伝子治療用の薬学的組成物を製造 するための、請求項1〜27の何れか1項に記載の組換えベクターの使用。 33.ヒトを含む哺乳動物の、腫瘍、ウイルス感染症、細菌感染症および真菌感 染症から選択される少なくとも1つの疾患の遺伝子治療用の薬学的組成物を製造 するための、請求項28に記載の組換えレトロウイルスベクター系の使用。 34.ヒトを含む哺乳動物の、腫瘍、ウイルス感染症、細菌感染症および真菌感 染症から選択される少なくとも1つの疾患の遺伝子治療用の薬学的組成物を製造 するための、請求項31に記載のレトロウイルス粒子の使用。 35.前記相同的な細胞内配列におけるターゲティングされた組込みのための、 請求項31に記載のレトロウイルス粒子の使用。 36.請求項30に記載のレトロウイルス性プロウイルスのmRNA。 37.請求項1〜27の何れか1項に記載のベクターのRNA。 38.請求項31に記載のビリオンに感染した宿主細胞。 39.請求項38に記載の宿主細胞であって、前記抗菌性治療用ペプチドを発現 する宿主細胞。 40.ウイルス感染症の治療用医薬を製造するための、セクロピン、マガイニン またはその誘導体の使用。 41.レトロウイルス感染症の治療用医薬を製造するための、請求項40に記載 の使用。 42.HIV感染症の治療用医薬を製造するための、請求項41に記載の使用。
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