JPH09512279A - 薬剤移送用修飾アミノ酸 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は経口移送システムに関し、特に生物活性ペプチドなどの感受性剤の移送システムとして使用される修飾アミノ酸またはペプチドに関する。修飾アミノ酸またはペプチドは生物学的活性剤と非共有混合物または微球体を形成可能である。これらの混合物または微球体は、生物学的活性剤を動物に経口投与するのに適している。このようなアミノ酸またはペプチドの調製方法も開示する。

Description

【発明の詳細な説明】 薬剤移送用修飾アミノ酸 本発明は、薬剤移送に適した組成物に関し、特に、修飾アミノ酸またはペプ チドが生物学的活性ペプチドなど（これらに限定されるわけではないが）これら のペプチドを含有する生物学的活性剤用キャリアとして使用される組成物に関す る。修飾アミノ酸またはペプチドは、生物学的活性剤とともに非共有混合物また は微球体を形成可能であり、動物に経口投与するのに適している。該組成物の調 製方法及び投与方法も開示する。 発明の背景 薬剤および治療剤（これらに限定されるわけではない）を含有する生物学的 活性剤を動物に移送する従来の手段は、動物の体による化学的および物理的バリ アによって厳しく制限されている。多くの生物学的活性剤の経口移送は、活性剤 の胃腸膜からの不浸透性、強力な章か酵素、および胃腸管の極端で種々のpＨ等 の化学および物理化学バリアの存在がなければ優れている。経口投与に適さない 多くの薬剤の中でも例を挙げると特に、カルシトニンおよびインスリンなどの生 物学的活性ペプチド類である。物理化学バリアによって影響される他の化合物の 例としては、多糖類、ムコ多糖類、たとえばヘパリン、ヘパリノイド類、抗生物 質、および他の有機基体類が挙げられるがこれらに限定されるわけではない。こ れらの薬剤は、早急に酸加水分解、酵素等により胃腸管で破壊される。 破壊されやすい薬剤を経口投与する従来の方法は、腸壁の透過性を人工的に 増加させるために、添加剤（たとえばｎ−ヘキサデシルポリエチレンエーテルお よびポリオキシエチレンオレイルエーテルなどの非イオン性活性剤およびレゾル シノール）との共投与、および、酵素劣化を避けるために酵素阻害剤（たとえば すい臓トリプシン阻害剤、ジイソプロピルフルオロホスファート（ＤＦＦ）およ びトラシロール）に依存するものであった。リポソームもまた、インスリンおよ びヘパリンの薬剤移送システムとして記載されている。たとえば、米国特許第４ ，２３９，７５４号；文献：Ｐatel et al．（１９７６）ＦＥＢＳ Ｌetters ，Ｖol．６ ２，page６０；および文献：Ｈashimoto et al．（１９７９）Ｅndocrinol， Ｊapan，Ｖol．２６，pages３３７参照。薬剤移送システムとして前記方法を広 範囲に使用することは、以下の理由から妨げられている：（１）添加剤または阻 害剤を毒性量使用する；（２）適当な低い分子量のものがない；（３）システム の安定性が乏しく、保存期間が適当でない；（４）製造が困難である；（５）活 性成分を保護するためのシステムがない；および（６）活性剤の吸収を促進する ためのシステムがない。 特に最近は、混合アミノ酸類のプロテイノイド類、または人工ポリマー類の 微球体が、薬剤の移送用に記載されている。たとえば、米国特許第４，９２５， ６７３号は、このような微球体とその製造および使用方法を開示している。米国 特許第４，９２５，６７３号のプロテイノイド微球体は、多くの活性剤をカプセ ル化するのに有用である。 広範囲の生物学的活性剤を移送可能で、容易に調製される簡単で高価ではな いシステムの技術が必要とされている。 発明の要旨 キャリアとして修飾アミノ酸を組み入れた生物学的活性剤を移送するための 組成物が提供される。 該組成物は、 （Ａ）少なくとも１つの生物学的活性剤と、 （Ｂ）（a）少なくとも１つのアシル化アミノ酸； （b）少なくとも１つのアシル化アミノ酸を含有する少なくとも１つ のペプチド；または （c）前記（a）および（b）の組み合わせとを含有する組成物であっ て、 前記アシル化アミノ酸が、 （i）Ｃ₁−Ｃ₇アルキル、Ｃ₂−Ｃ₇アルケニル、Ｃ₁−Ｃ₇アルコキシ、ヒドロ キシ、フェニル、フェノキシ、または−ＣＯ₂Ｒ（式中、Ｒは、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄ア ルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルである）で任意に置換されてもよいＣ₃−Ｃ_{1 0} シクロアルキルアシル化剤；または （ii）Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル置換のＣ₁−Ｃ₆アルキルアセチル化剤によっ てアセチル化される、組成物である。 他の実施態様において、これらの組成物は、経口投与単位形態で使用される 。該組成物または経口投与単位形態は経口で動物に投与可能である。 図面の説明 図１は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシン、シクロヘプタノイル−（ Ｌ）−ロイシンおよび２−メチルシクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンキャリ アとともにカルシトニンを用いた、ラットに対する経口胃腸管テストの結果を示 すグラフである。 図２は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−アルギニン、シクロペンタノイル− （Ｌ）−アルギニンおよびシクロヘキサノイル−（Ｌ）−フェニルグリシンキャ リアとともにカルシトニンを用いた、ラットに対する経口胃腸管テストの結果を 示すグラフである。 図３は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−アルギニン、シクロヘキサノイル− （Ｌ）−ロイシンおよびシクロヘキサノイル−（Ｌ）−チロシンキャリアととも にカルシトニンを用いた、ラットに対する経口胃腸管テストの結果を示すグラフ である。 図４は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシン、シクロヘキサノイル−（ Ｌ）−グリシンおよびシクロプロパノイル−（Ｌ）−ロイシンキャリアとともに カルシトニンを用いた、ラットに対する経口胃腸管テストの結果を示すグラフで ある。 図５は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンキャリアとともにカルシト ニンを用いた、ラットに対する経口胃腸管テストの結果を示すグラフである。 図６および７は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンキャリアとともに ヘパリンを用いた、ラットに対する経口胃腸管テストの結果を示すグラフである 。 図８は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−アルギニンキャリアとともにヘパリ ンを用いた、ラットに対する経口胃腸管テストの結果を示すグラフである。 図９および１０は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンキャリアととも にヘパリンを用いた、ラットに対する十二指腸内注入テストの結果を示すグラフ である。 図１１および１２は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンキャリアとと もに低分子量ヘパリンを用いた、ラットに対する経口胃腸管テストの結果を示す グラフである。 図１３は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンキャリアとともにクロモ グリシン酸二ナトリウムを用いた、ラットに対する経口胃腸管テストの結果を示 すグラフである。 図１４は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−フェニルグリシンおよびシクロヘ キサノイル−（Ｌ）−アルギニンキャリアとともにインターフェロンα２ｂ（rh ＩＦＮ）を用いた、ラットに対する経口胃腸管テストの結果を示すグラフである 。 図１５は、シクロヘキサノイル−フェニレンおよびシクロヘキサノイル−ア ルギニンキャリアとともにインターフェロンα２ｂを用いた、サルに対する経口 投与テストの結果を示すグラフである。 図１６は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−フェニルグリシンキャリアおよび にインターフェロンα２ｂを用いた、ラットに対する十二指腸内注入テストの結 果を示すグラフである。 図１７は、シクロヘキサノイル−（Ｌ）−フェニルグリシンキャリアおよび にインターフェロンα２ｂを用いた、ラットに対する経口胃腸管テストの結果を 示すグラフである。 発明の詳細な説明 修飾アミノ酸および少なくとも１つの修飾アミノ酸を含有するペプチドは、 生物学的活性剤、たとえばペプチド、ムコ多糖、炭水化物、脂質、および殺虫剤 を移送するためにキャリアとして使用可能である。これらのキャリアは特に経口 感受性生物学的活性剤の移送を促進するのに有用である。たとえば、ホルモン、 たとえばカルシトニン、インスリンおよび多糖、たとえばヘパリンは、種々の理 由から経口投与が不適当であると考えられている。たとえばインスリンは、胃腸 管（ＧＩ）の変性条件に感受性がある。また、ヘパリンは、その電荷および親水 性のために、腸から容易には吸収されない。本発明による修飾アミノ酸またはペ プ チドとは対照的に、非修飾のフリーのアミノ酸は、ＧＩ管において不安定な生物 活性剤の劣化に対して適当な保護性を示すものではない。 本発明による組成物は、種々の動物、たとえば鳥類、哺乳類、霊長類、特に ヒトおよび虫に、生物学的活性剤を投与するのに有用である。 本発明におけるいくつかの実施態様では、容易に入手可能で高価ではない原 料を用い、修飾アミノ酸またはペプチドを調製して単離するコスト低減方法が提 供されるものである。該方法は簡単に行われ、商業的製造にスケールアップする ことが可能である。 ここで開示したキャリアを用いて使用するのに適当な生物学的活性剤として は以下のものが挙げられるが、これらに限定されるわけではない。すなわち、ペ プチド、特にスモールペプチドホルモン、これらはそれ自体胃腸管ムコサをゆっ くり通過するか、および／または、胃腸管における酸および酵素により化学開裂 しやすいものであり；多糖、特にムコ多糖、炭水化物の混合物；脂質；またはこ れらの混合物が挙げられる。たとえば、これらに限定されるわけではないが、ヒ ト成長ホルモン；ウシ成長ホルモン；成長ホルモン放出ホルモン；インターフェ ロン；インターロイキン−II；インスリン；ヘパリン、特に低分子量ヘパリン； カルシトニン；エリトロポイエチン；心房ナチュレティックファクタ（ＡＴＲＩ ＡＬ ＮＡＴＵＲＥＴＩＣ ＦＡＣＴＯＲ）；抗原；モノクローナル抗体；ソマ トスタチン；アドレノコルチコトロピン；ゴナドトロピン放出ホルモン；オキシ トシン；バソプレシン；クロモリンナトリウム；バンコマイシン；デスフェリオ キサミン（ＤＦＯ）；またはこれらの組み合わせが挙げられる。 さらに、本発明のキャリアは、殺虫剤などの他の活性剤を移送するのに使用 可能である。 アミノ酸は少なくとも１つのアミン基を有する種々のカルボン酸であり、天 然および合成アミノ酸を含有する。本発明で使用される好ましいアミノ酸は、α アミノ酸であり、最も好ましいアミノ酸は天然α−アミノ酸である。ポリアミノ 酸は、たとえばエステル、無水物、または無水物結合などの結合可能な他の基に よって形成される結合で結合した２以上のアミノ酸またはペプチドのいずれかで ある。特に、非天然型ポリアミノ酸、特に混合アミノ酸の非天然型ヘテロポリア ミノ酸が挙げられる。 ペプチドはペプチド結合により結合した２以上のアミノ酸である。ペプチド は、２つのアミノ酸を有するジペプチドから数百のアミノ酸を有するポリペプチ ドまで、種々の長さのものであってもよい。文献：Ｗalker，Ｃhambers Ｂiolo gical Ｄictionary，Ｃambridge，Ｅngland：Ｃhambers Ｃambridge，１９８ ９，page２１５参照。特に、非天然型ペプチド、特に混合アミノ酸の非天然型ペ プチドが挙げられる。本発明の使用に際して最も有用なペプチドは、ジペプチド 、トリペプチド、テトラペプチド、およびペンタペプチドが挙げられる。好まし いペプチドは、ジペプチド、およびトリペプチドである。ペプチドは、ホモ−ま たはヘテロ−ペプチドであってもよく、たとえば天然アミノ酸、合成アミノ酸、 またはこれらの混合物であってもよい。 本発明において使用するのに適当なアミノ酸は、式： Ｈ−Ｎ（Ｒ¹）−（Ｒ²−ＣＯ）−ＯＨ （式中、Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルであり、 Ｒ²は、Ｃ₁−Ｃ₂₄アルキル、Ｃ₂−Ｃ₂₄アルケニル、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル 、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルケニル、フェニル、ナフチル、（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）フ ェニル、（Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）フェニル、（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）ナフチル、 （Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）ナフチル、フェニル（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、フェニル （Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）、ナフチル（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、またはナフチル（ Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）であり； Ｒ²は、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、Ｃ₂−Ｃ₄アルケニル、Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ、−Ｏ Ｈ、−ＳＨ、−ＣＯ₂Ｒ³、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルケニ ル、３〜１０環原子を有するヘテロ環（ここで、ヘテロ原子は、１以上の、Ｎ、 Ｏ、Ｓ、またはこれらの任意の組み合わせである）、アリール、（Ｃ₁−Ｃ₁₀ア ルキル）アリール（（₁−Ｃ₁₀alk）aryl）、アリール（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）（a r（Ｃ₁−Ｃ₁₀alkyl）、またはこれらの組み合わせによって、任意に置換されて もよく； Ｒ²に、酸素、窒素、またはイオウ、またはこれらの任意の組み合わせが任意 に介在してもよく； Ｒ³は、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルである） で表わされる。 本発明で使用されるアミノ酸またはペプチドの成分としての好ましい天然ア ミノ酸は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、シトルリン 、システイン、シスチン、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、 ロイシン、リジン、メチオニン、オルニチン、フェニルアラニン、プロリン、セ リン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、ヒドロキシプロリン、 γ−カルボキシグルタマート、フェニルグリシン、またはＯ−ホスホセリンであ る。好ましいアミノ酸は、アルギニン、ロイシン、リジン、フェニルアラニン、 チロシン、トリプトファン、バリン、およびフェニルグリシンである。 本発明で使用される好ましい非天然アミノ酸は、β−アラニン、α−アミノ 酪酸、γ−アミノ酪酸、γ−（アミノフェニル）酪酸、α−アミノイソ酪酸、ε −アミノカプロン酸、７−アミノヘプタン酸、β−アスパラギン酸、アミノ安息 香酸、（アミノフェニル）酢酸、アミノフェニル酪酸、γ−グルタミン酸、シス テイン（ＡＣＭ）、ε−リジン、ε−リジン（Ａ−Ｆmoc）、メチオニンスルホ ン、ノルロイシン、ノルバリン、オルニチン、ｄ−オルニチン、ｐ−ニトロ−フ ェニルアラニン、ヒドロキシプロリン、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノ リン−３−カルボン酸およびチオプロリンである。 アミノ酸またはペプチドは、少なくとも１つのフリーアミン基を、少なくと も１つのフリーアミン基と反応するアシル化剤でアシル化することによって修飾 する。本発明を実施するにあたり有用なアミノ酸またはペプチド誘導体を修飾す るのに有用なアシル化剤の適当な例としては、アシル化剤、特に以下の式で表わ される酸塩化物アシル化剤が挙げられるが、これらに限定されるわけではない。 アシル化剤は、式： 式中、Ｒ⁸は、 （i）Ｃ₁−Ｃ₇アルキル、Ｃ₂−Ｃ₇アルケニル、Ｃ₁−Ｃ₇アルコキシ、ヒドロ キシ、フェニル、フェノキシ、または−ＣＯ₂Ｒ⁹（式中、Ｒ⁹は、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄ アルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルである）で任意に置換されてもよいＣ₃− Ｃ₁₀シクロアルキル；または （ii）Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル置換のＣ₁−Ｃ₆アルキルであり； Ｘは脱離基である、 で表わされる。好ましくは、Ｒ⁸は、シクロプロピル、シクロペンチル、シク ロヘキシル、またはシクロヘプチルである。 置換分子が開裂する反応において、置換分子の一部（炭素を含有しない部分 ）は通常脱離基と呼ばれる。文献：Ａdvanced Ｏrganic Ｃhemistry，2d edi tion，Ｊerry Ｍarch，Ｎew Ｙork，ＭcＧraw−Ｈill Ｂook（１９７７）参 照。典型的な脱離基としては、Ｃl、Ｂr、およびＩなどのハロゲンが挙げられる が、これらに限定されるわけではない。 好ましいアシル化剤としては、アシルハライド、たとえばシクロヘキサノイ ルクロリド、シクロペンタノイルクロリドなど；および酸無水物、たとえばシク ロヘキサン酸無水物、シクロペンタン酸無水物、シクロヘプタン酸無水物などが 挙げられるが、これらに限定されるわけではない。最も好ましいアシル化剤は、 シクロヘキサノイルクロリド、シクロペンタノイルクロリド、およびシクロペン タノイルクロリドである。 本発明による好ましいアシル化アミノ酸は、式： （式中、Ｒ⁴は、（i）Ｃ₁−Ｃ₇アルキル、Ｃ₂−Ｃ₇アルケニル、Ｃ₁−Ｃ₇アル コキシ、ヒドロキシ、フェニル、フェノキシ、または−ＣＯ₂Ｒ⁷（式中、Ｒ⁷は Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルである）で任意に置換されて もよいＣ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル、または（ii）Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキ ル置換Ｃ₁−Ｃ₆アルキルであり； Ｒ⁵は、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルであり； Ｒ⁶は、Ｃ₁−Ｃ₂₄アルキル、Ｃ₂−Ｃ₂₄アルケニル、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル 、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルケニル、フェニル、ナフチル、（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）フ ェニル、（Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）フェニル、（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）ナフチル、 （Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）ナフチル、フェニル（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、フェニル （Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）、ナフチル（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、またはナフチル（ Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）であり； Ｒ⁶は、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、Ｃ₂−Ｃ₄アルケニル、Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ、−Ｏ Ｈ、−ＳＨ、−ＣＯ₂Ｒ⁷、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルケニ ル、３〜１０環原子を有するヘテロ環（ここで、ヘテロ原子は、１以上の、Ｎ、 Ｏ、Ｓ、またはこれらの任意の組み合わせである）、アリール、（Ｃ₁−Ｃ₁₀ア ルキル）アリール、アリール（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、またはこれらの組み合わ せによって、任意に置換されてもよく； Ｒ⁶に、酸素、窒素、またはイオウ、またはこれらの任意の組み合わせが任意 に介在してもよく； Ｒ⁷は、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルである） で表わされる。 本発明による修飾アミノ酸は、１種のアミノ酸、２種以上のアミノ酸、アミ ノ酸エステル、またはアミノ酸アミドを、アミノ酸に存在するフリーのアミノ部 位と反応するアミン修飾剤と反応させることによって調製可能である。アミノ酸 およびアミノ酸エステルは、たとえばＡldrich Ｃhemical Ｃo．（Ｍilwaukee ，ＷＩ，ＵＳＡ）；Ｓigma Ｃhemical Ｃo．（Ｓt．Ｌouis，ＭＯ，ＵＳＡ） ；Ｆluka Ｃhemical Ｃorp．（Ｒonkonkoma，ＮＹ，ＵＳＡ）から容易に入手 可能である。 修飾アミノ酸は当業者に公知の方法で容易に調製可能である。たとえば、ア ミノ酸を、金属水酸化物、たとえば水酸化ナトリウムまたはカリウムのアルカリ 水溶液に溶解し、アシル化剤を添加する。反応時間は、約１時間から約４時間で 、好ましくは約２−２．５時間の範囲であってもよい。混合物の温度は一般的に は約５℃から約７０℃までであり、好ましくは約１０℃から約５０℃までの範囲 の 温度に保持される。アミノ酸におけるＮＨ₂基の１当量に対して使用されるアル カリの量は、一般的には約１．２５モルから約３モルまでの間で、好ましくは約 １．５モルから約２．２５モルまでの間である。反応溶液のpＨは、一般的には 約pＨ８から約pＨ１３までの間、好ましくは約pＨ１０から約pＨ１２までの間で ある。アミノ酸の量に対して使用されるアミノ修飾剤の量は、アミノ酸における 全フリーのＮＨ₂のモルに基づくものである。一般的には、アミノ修飾剤はアミ ノ酸における全フリーのＮＨ₂基のモル当量あたり、約０．５から約２．５モル 当量、好ましくは約０．７５から約１．２５モル当量の量で使用される。 修飾アミノ酸形成反応は、pＨが約２から約３までの間に到達するまで、適 当な酸、たとえば濃塩酸を用いて混合物のpＨを調節することによって終了され る。該混合物は、室温に放置すると分離し、透明な上層と白またはオフホワイト の沈殿を形成する。上層を捨て、修飾アミノ酸をろ過またはデカンテーションに よって収集する。粗修飾アミノ酸を水と混合する。不溶物質をろ過によって除去 し、ろ液を真空乾燥する。修飾アミノ酸の収率は、約３０％から約６０％までの 間であり、通常は約４５％である。本発明はまた、多アシル化、たとえばジアシ ル化またはトリアシル化によって修飾されたアミノ酸も含有するものである。 所望ならば、アミノ酸のエステルまたはアミドは、本発明の修飾アミノ酸を 調製するのに使用可能である。ジメチルホルムアミドまたはピリジンなどの適当 な有機溶媒に溶解したアミノ酸エステルまたはアミドは、アミノ修飾剤と、約５ ℃から約７０℃までの間の温度で、好ましくは約２５℃で、約７時間から約２４ 時間までの間の時間反応させる。アミノ酸エステルに対して使用されるアミノ修 飾剤の量は、上記アミノ酸の場合と同様である。 反応溶媒は、減圧下除去され、任意にエステルまたはアミド官能基は適当な アルカリ溶液、たとえば１Ｎ水酸化ナトリウムを用いて、修飾アミノ酸エステル を、約５０℃から約８０℃までの間の温度で、好ましくは約７０℃で、エステル 基を加水分解してフリーのカルボキシル基を有する修飾アミノ酸を形成するのに 十分な時間、加水分解する。加水分解混合物を次いで室温まで冷却し、たとえば ２５％塩酸水溶液で約２から約２．５までの範囲のpＨまで酸性化する。修飾ア ミノ酸は溶液に沈殿し、ろ過またはデカンテーションなどの常法手段で回収され る。 修飾アミノ酸は酸沈殿、再結晶、または固体カラム分離によって精製可能で ある。精製分離は、移動相として酢酸／ブタノール／水などの混合溶媒を用いて 、シリカゲル、アルミナなどの適当な固体カラムサポート上で、移動相としてト リフルオロ酢酸／アセトニトリル混合物を用いて逆相カラムサポート上で、およ び、移動相として水を用いてイオン交換クロマトグラフィで行ってもよい。修飾 アミノ酸はまた、メタノール、ブタノール、またはイソプロパノールなどの低級 アルコールを用いて抽出することによって、無機塩などの不純物を除去可能であ る。 可能であり、部分的にはエタノール、n−ブタノール、および１：１（v／v）ト ルエン／エタノール溶液中で溶解可能であり、天然水中では溶解不可能である。 アルカリ金属塩、たとえばアミノ酸（deritivated amino acids）のナトリウ ム塩は一般的には約pＨ６−８で水に溶解可能である。 修飾ペプチドは１以上のアシル化アミノ酸を含有可能である。直鎖修飾ペプ チドは一般的には１つのみのアシル化アミノ酸を含有するが、他のペプチド体、 たとえば分岐ペプチド（これに限定されるわけではない）は、１より多いアシル 化アミノ酸を含有可能である。ペプチドは、アシル化アミノ酸を用いて重合可能 であり、または重合後にアシル化してもよい。特に、式： 式中、Ａは、Ｔry、Ｌeu、Ａrg、Ｔrp、またはＣitであり、 任意にＡがＴry、Ａrg、Ｔrp、またはＣitである場合、Ａは少なくとも２以 上の官能基でアシル化される、 で表わされる化合物が挙げられる。 好ましい化合物は、ＡがＴry；ＡがＴyrおよびＡが２つの官能基でアシル化 される；ＡがＬeu；ＡがＡrg；ＡがＡrgおよびＡが２つの官能基でアシル化され る；ＡがＴrp；ＡがＴrpおよびＡが２つの官能基でアシル化される；ＡがＣit； および、Ａが ＣitおよびＡが２つの官能基でアシル化される化合物である。 特に、以下の化合物が挙げられる。 式： 式中、ＡはＡrgまたはＬeuであり、およびＢはＡrgまたはＬeuである、 で表わされる化合物。 式： 式中、ＡはＡrgまたはＬeuであり、ＡはＡrgである場合、Ａは任意に２以上の 官能基でアシル化されている、 で表わされる化合物。 式： 式中、ＡがＬeuまたはフェニルグリシンである、 で表わされる化合物。 式： 式中、Ａがフェニルグリシンである、 で表わされる化合物。 式： 式中、Ａがフェニルグリシンである、 で表わされる化合物。 アミノ酸が多官能化されている場合、すなわち１より多くの−ＯＨ、−ＮＨ₂ 、−ＳＨ基を有する場合、任意に１以上の官能基によってアシル化可能であり 、たとえばエステル、アミド、またはチオエステル結合を形成するものである。 ある実施態様において、修飾アミノ酸またはペプチドは、１以上の修飾アミ ノ酸またはペプチドを投与前に活性剤と単に混合することによって、薬剤移送キ ャリアとして使用可能である。他の実施態様においては、修飾アミノ酸は、活性 剤を含有する微球体を形成するのに使用可能である。本発明の修飾アミノ酸また はペプチドは特に、ある種の生物学的活性剤たとえばそれ自体、胃腸粘膜を通過 しないかまたはゆっくりのみ通過するか、および／または胃腸管の酸および酵素 によって化学開裂を受けやすいスモールペプチドホルモンを、経口投与するのに 特に有用である。 修飾アミノ酸またはペプチドは、プロテイノイド微球体などの微球体に変換 すると、該混合物は任意に約２０℃から約５０℃までの間の温度、好ましくは約 ４０℃で、修飾アミノ酸が溶解するまで加熱される。最終溶液は、溶液１mlあた り、約１mgから約２０００mgまでの間、好ましくは約１mgから約５００mgまでの 間の修飾アミノ酸またはペプチドを含有する。最終溶液中の活性剤の濃度は種々 であり、処置に必要な投与量に依存するものである。必要ならば、抽出濃度はた とえば逆相ＨＰＬＣ分析で決定可能である。 修飾アミノ酸またはペプチドが微球体を調製するのに使用される場合には、 他の有用な方法は、以下の様な方法である：修飾アミノ酸またはペプチドを脱イ オン水に約７５mg／mlから約２００mg／mlまでの間の濃度、好ましくは約１０ ０mg／mlの濃度で、約２５℃から約６０℃までの間、好ましくは約４０℃の温度 で溶解される。溶液中に残存する粒子物質は、ろ過などの常法手段によって除去 可能である。 約４０℃の温度に保持された修飾アミノ酸またはペプチド溶液は、１：１（ Ｖ／Ｖ）で約０．０５Ｎから約２Ｎまでの間の濃度、好ましくは約１．７Ｎの濃 度を有する酸水溶液（約４０℃）と混合する。得られた混合物はさらに４０℃で 、光顕微鏡で観察されるような微球体を形成するのに効果的な時間、培養された 。本発明を実施するにあたり、好ましい添加順序は、修飾アミノ酸またはペプチ ド溶液を酸水溶液に添加するものである。 微球体を形成するための好ましい酸は、 （a）修飾アミノ酸またはペプチド溶液に悪影響をあたえない、たとえば化学 分解を増やさない； （b）微球体の形成に支障をきたさない； （c）カルゴ（cargo）の微球体組み入れに支障をきたさない；および （d）カルゴと悪相互作用をおこさないような酸であればどのような酸でもよ い。 本発明で使用される好ましい酸としては、酢酸、クエン酸、塩酸、リン酸、 リンゴ酸、マレイン酸が挙げられる。 本発明を実施するにあたり、微球体安定化添加物が、微球体形成工程前に、 酸水溶液に、または修飾アミノ酸または蛋白質溶液に入れられてもよい。該添加 物が存在すると、溶液中の微球体の安定性および／または分散性を促進する。 安定化添加物は、約０．１から５％（w／v）、好ましくは約０．５％（ｗ／ v）の濃度で使用可能である。微球体安定化添加物としては、アカシアゴム、ゼ ラチン、メチルセルロース、ポリエチレングリコール、およびポリリジンが挙げ られる。好ましい安定化添加物は、アカシアゴム、ゼラチン、およびメチルセル ロースである。 上記条件下では、修飾アミノ酸分子またはペプチドは、中空または固形マト リックスタイプの微球体であり、カルゴが液体または固体カルゴを包接するキャ リアマトリックスまたはカプセルタイプの微球体に分散されるものである。修飾 アミノ酸またはペプチド微球体が前記水溶液に溶解可能な材料、たとえば薬剤の 存在下形成される場合には、該材料は微球体内に包接される。このようにして、 薬学的活性材料、たとえばペプチド、蛋白質、および多糖、ならびに電荷有機分 子、たとえば抗微生物剤など、経ロルートではバイオアベイラビリティが悪いも のを包接可能である。微球体が組み入れ可能な薬剤の量は、溶液中の薬剤濃度お よびキャリアへのカルゴの親和性を含む多くのファクタに依存する。 本発明の修飾アミノ酸またはペプチド微球体は、活性剤の生理学的および生 物学的特性を変えないものである。さらに、包接方法も活性剤の薬理学的特性を 変えないものである。如何なる薬剤もアミノ酸微球体に組み入れることが可能で ある。このシステムは特に、化学剤または物理剤が投与される動物の体内条件に よって、微球体がターゲットゾーン（すなわち微球体の内容物が放出されるべき 場所）に到達する前に破壊されたり効果が少なくなる化学剤または物理剤、およ び胃腸管で吸収されにくい薬剤を移送するのに優位である。ターゲットゾーンは 使用される薬剤に依存して種々かえることが可能である。 微球体の粒子径は胃腸管のターゲットエリアにおける活性剤の放出決定をす ミクロンまでの、好ましくは約０．５ミクロンから約５ミクロンまでの粒子径を 有する。微球体は、たとえば胃および空腸の間などの胃腸管内のターゲットエリ アに効果的に活性剤を放出するのに十分なほど小さい。小さい微球体はまた、適 当なキャリ流体（たとえば等張食塩水）に懸濁して循環システムに直接、筋肉内 または皮下注射することによって非経口投与可能である。選択される投与モード は、無論、投与される活性剤の必要性に応じて種々変えられる。大きいアミノ酸 微球体（５０ミクロンより大きい）は、経口移送システムとしてはあまり効果的 ではない。 修飾アミノ酸またはペプチドを活性剤を含有する水溶液または水と接触させ ることによって形成された微球体の粒子径は、物理的または化学的パラメータ、 たとえば包接溶液のpＨ、浸透圧またはイオン強度、溶液中のイオンの大きさな どを種々操作することによって、および包接方法において使用する酸を選択する ことによって制御可能である。 典型的には、本発明の薬剤組成物は、投与直前に、キャリアの水溶液を活性 剤の水溶液と混合することによって調製される。または、キャリアおよび生物学 的活性剤を製造工程中に混合することも可能である。溶液は任意に、リン酸緩衝 塩、クエン酸、酢酸、ゼラチン、およびアカシアゴムなどの添加物を混合可能で ある。 本発明を実施するにあたり、安定化添加物をキャリア溶液に導入可能である 。ある種の薬剤を用いれば、このような添加物の存在によって、溶液中の薬剤の 安定性および分散性が促進される。 安定化添加物は約０．１から５％（Ｗ／Ｖ）の範囲、好ましくは約０．５％ （Ｗ／Ｖ）の濃度で使用可能である。安定化添加物としては、アカシアゴム、ゼ ラチン、メチルセルロース、ポリエチレングリコール、およびポリリジンなどが 挙げられるが、これらに限定されるわけではない。好ましい安定化添加物は、ア カシアゴム、ゼラチン、およびメチルセルロースである。 組成物中の活性剤の量は、典型的には薬理学的または生物学的有効量である 。しかしながら該量は、投与単位形態がキャリア／生物学的活性剤組成物を含有 可能であり、または薬理学的または生物学的活性剤組成物を分割して含有可能で あるので、組成物がカプセル、錠剤または液体などの投与単位形態で使用される 場合には、薬理学的または生物学的有効量よりも少なくてもよい。 使用されるべき生物活性剤の全量は、当業者により定めることが可能である 。しかしながら驚くべきことに、ある種の生物学的活性剤、たとえばカルシトニ ンとともに、ここに開示するキャリアを用いると、極めで有効な移送が行われる ことが判明した。したがって、同等の血液レベルと治療効果を達成しつつ、以前 に使用した投与単位形態または移送システムよりも少ない量の生物学的活性剤が 主体に投与可能である。 本発明の組成物中のキャリアの量は、移送有効量であり、特別なキャリアま たは生物活性剤を当業者に公知の方法で定めることが可能である。 投与単位形態はまた、種々の付形剤、希釈剤、崩壊剤、潤滑剤、可塑剤、着 色剤、投与ビヒクル、たとえば水、１，２−プロパンジオール、エタノール、オ リーブオイル、任意のこれらの組み合わせを含有可能であるが、これらに限定さ れるわけではない。 本発明の組成物または投与単位形態の投与は好ましくは経口または十二指腸 内注入である。 実施例 本発明を以下に実施例を挙げて例解するが、本発明はこれらの実施例に限定 されるわけではない。 実施例１ Ｎ−シクロヘキサノイル−（Ｌ）−チロシンの調製 （Ｌ）−チロシン（６１．６g、０．３４モル）を１９０mＬの２Ｎ水酸化ナ トリウムに溶解した。シクロヘキサノイルクロリド（４９．３２mＬ、０．３９ モル）を該混合物に滴下した。さらに２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を添加して、 反応混合物を２時間室温で撹拌した。混合物をついで塩酸（塩酸：水＝１：４） 水溶液を用いてpＨ９．５まで酸性化した。沈殿が形成され、真空ろ過で分離し た。該固体を２Ｎの水酸化ナトリウム中に溶解し、凍結乾燥したころ、Ｎ，Ｏ− ジシクロヘキサノイル−（Ｌ）−チロシンが３３．５g得られた。該生成物をシ リカゲルカラムクロマトグラフィで、ブタノール／酢酸／水で溶出して精製した 。精製生成物は白色固体であった。 １．マススペクトル：Ｍ ＋ ２３ m／e ３１４。 ２．¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨz，ＤＭＳＯ−d６）：d＝６．８（d，２Ｈ） ；６．４（d，２Ｈ）；４．４（m，１Ｈ）；２．５（ddd，２Ｈ）；２．０（m， ２Ｈ）；１．６（m，１０Ｈ）：１．２（m，１０Ｈ）。 ３．ＩＲ（ＫＢr）cm^-1：３３５０、２９００、２８５０、１６００、１５ ２０、１４５０、１４００、１３００。 実施例２ Ｎ−シクロヘキサノイル−（Ｌ）−アルギニンの調製 （Ｌ）−アルギニン（１０３．２g、０．６モル）を６００mＬの２Ｎ水酸化 ナトリウムに溶解した。シクロヘキサノイルクロリド（８７mＬ、０．６モル） を 該混合物に滴下した。反応混合物を２時間５０℃に保持した。混合物をついで室 温まで冷却し、塩酸（塩酸：水＝１：４）水溶液を用いてpＨ２．３まで酸性化 した。沈殿が形成され、デカンテーションで分離した。該固体を２Ｎの水酸化ナ トリウム中に溶解し、凍結乾燥したころ、粗Ｎ−シクロヘキサノイル−（Ｌ）− アルギニンが６４．１g得られた。該生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフ ィで、ブタノール／酢酸／水で溶出して精製した。単離生成物はＮ−シクロヘキ サノイル−（Ｌ）−アルギニンおよびＮ（α）−Ｎ（γ）−ジシクロヘキサノイ ル−（Ｌ）−アルギニンであった。 Ｎ−シクロヘキサノイル−（Ｌ）−アルギニン： １．マススペクトル：Ｍ ＋ １ m／e ３９５。 ２．¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨz，ＤＭＳＯ−d６）：ppmδ＝８．７５（br， １Ｈ）；７．６（br，５Ｈ）；４．０（m，１Ｈ）;３．０５（ｍ，２Ｈ）；２． １５（m，１Ｈ）；１．１−１．５（br．m，１４Ｈ）。 Ｎ（α）−Ｎ（γ）−ジシクロヘキサノイル−（Ｌ）−アルギニン： １．マススペクトル：Ｍ ＋ １ m／e ２８５。 ２．¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨz，ＤＭＳＯ−d６）：d＝２．０（m，３Ｈ） ；１．８−１．４（br．m，１７Ｈ）；１．３−１．０（br．m，２０Ｈ）。 実施例３ Ｎ−シクロヘキサノイル−（Ｌ）−シトルリンの調製 Ｌ−シトルリン（３５．２g、０．２モル）を２００mＬの２Ｎ水酸化ナトリ ウムに溶解した。シクロヘキサノイルクロリド（２９mＬ、０．２モル）を該混 合物に滴下した。該反応混合物を約２５℃で１時間保持し、塩酸（塩酸：水＝１ ：４）水溶液を用いてpＨ２．６まで酸性化した。沈殿が形成され、デカンテー ションで分離した。該固体を２Ｎの水酸化ナトリウム中に溶解してpＨ６．５に し、凍結乾燥したころ、Ｎ−シクロヘキサノイル−（Ｌ）−シトルリンが４４． ２g得られた。生成物は白色固体であった。 １．マススペクトル：Ｍ ＋ ２３ m／e ３０８。 ２．¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨz，ＤＭＳＯ−d６）：d＝４．１（dd，１Ｈ） ；２． ９（t，２Ｈ）；２．１（m，２Ｈ）；１．６−１．２（br．m，１４Ｈ）。 ３．ＩＲ（ＫＢr）cm^-1：３４００、３３００、２９５０、２８５０、１７ ００、１６５０、１６００、１４５０、１４００cm^-1。 実施例４ Ｎ−シクロペンタノイルー（Ｌ）−アルギニンの調製 （Ｌ）−アルギニン（３２．８g、０．１９モル）を１８８mＬの２Ｎ水酸化 ナトリウムに溶解した。シクロペンタノイルクロリド（２２．９mＬ、０．１９ モル）を該混合物に滴下した。反応混合物を２時間約２５℃で保持した。混合物 をついで塩酸（塩酸：水＝１：４）水溶液を用いてpＨ１．５まで酸性化した。 沈殿が形成され、デカンテーションで分離した。該固体を２Ｎの水酸化ナトリウ ム中に溶解してpＨ７．５にして、凍結乾燥したころ、Ｎ−シクロペンタノイル −（Ｌ）−アルギニンが６７．４g得られた。該生成物は白色固体であった。マ ススペクトル：Ｍ ＋ １ m／e ２７１。 実施例５ Ｎ−シクロヘキサノイル−（t）−アルギニンの調製 （t）−アルギニン（１４．２g、０．１モル）を１００mＬの２Ｎ水酸化ナ トリウムに溶解した。シクロヘキサノイルクロリド（１３mＬ、０．０９８モル ）を該混合物に滴下した。反応混合物を２時間約２５℃で保持した。混合物をつ いで室温まで冷却し、塩酸（塩酸：水＝１：４）水溶液を用いてpＨ６．６まで 酸性化した。沈殿が形成され、デカンテーションで分離した。該固体を最少量の ２Ｎの水酸化ナトリウム中に溶解した。白色固体である生成物（１１．６g、４ ９％）を、塩酸（塩酸：水＝１：４）水溶液でpＨ約７−９まで酸性化してpＨを 下げることによって単離した。 １．マススペクトル：Ｍ ＋ １ m／e ２４２３。 ２．¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨz，Ｄ₂Ｏ）：ppm δ＝４．９（s，１Ｈ）； ２．２（m，１Ｈ）；１．７−１．４（m，５Ｈ）；１．３−１．０（m，５Ｈ） ；０．８（s，９Ｈ）。 ３．ＩＲ（ＫＢr）cm^-1：３３５０、２９５０、２８５０、１５５０、１５ ００、１４００cm^-1。 実施例１の方法にしたがって、以下のアミノ酸およびペプチドを合成した： シクロヘキサノイル−Ａla、ｍ−（シクロヘキサノイルアミノ）安息香酸、 p−（シクロヘキサノイルアミノ）安息香酸、４−（シクロヘキサノイルアミノ ）酪酸、６−（シクロヘキサノイルアミノ）ヘキサン酸、シクロヘキサノイルア ントラニン酸、シクロヘキサノイル−Ａrg−Ｌeu、シクロヘキサノイル−Ａsp、 イサトイ酸無水物（isatoicanhydride）−Ａsp、シクロヘキサノイル−Ｇlu、シ クロヘキサノイル−Ｇly、シクロヘキサノイル−Ｇly−Ａrg、シクロヘキサノイ ル−lle、シクロヘキサノイル−Ｌeu、シクロペンタノイル−Ｌeu、シクロプロ パノイル−Ｌeu、３−メチシクロヘキサノイル−Ｌeu、２−メチシクロヘキサノ イル−Ｌeu、４−メチシクロヘキサノイル−Ｌeu、シクロヘキサノイル−（Ｄ） −Ｌeu、シクロヘキサノイル−（t）−Ｌeu、シクロヘキサノイル−Ｌeu−Ａrg 、シクロヘキサノイル−Ｌeu−Ｌeu、シクロヘキサノイル−（Ｄ）−Ｌeu−（Ｌ ）−Ｌeu、シクロヘキサノイル−Ｌeu−Ｌys−Ｖal、シクロヘキサノイル−Ｌys 、シクロヘキサノイル−Ｏrn、シクロヘキサノイル−Ｐhe、シクロヘプタノイル −Ｐhg、シクロヘキシルプロパノイル−Ｐhg、シクロヘキサノイル−Ｐhg、シク ロペンタノイル−Ｐhg、シクロプロパノイル−Ｐhg、４−メチシクロヘキサノイ ル−Ｐhg、シクロヘキサノイル−（Ｄ）−Ｐhg、シクロヘキサノイル−Ｔio、シ クロヘキサノイル−Ｔrp、シクロヘキサノイル−Ｔyr−Ｌeu、シクロヘキサノイ ル−Ｖal、シクロペンタノイル−Ｖal、シクロヘキサノイル−Ｖal−Ｖal、シク ロヘプタノイル−Ｌeu、およびシクロヘキシルプロパノイル−Ｌeu。 実施例６ カルシトニン投与溶液の調製 シクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシン、４００mgを、テストチューブ中の ２．９mlの１５％エタノールに添加した。該溶液を撹拌し、ＮaＯＨ（１．０Ｎ ）を添加してpＨを７．２にあげた。水を添加して全体の容量を４．０mＬにした 。 該サンプルは、２００mg／mＬの濃度のキャリアを有し、カルシトニン（１０μg ）を該溶液に添加した。全カルシトニン濃度は２．５μg／mＬであった。 類似の方法にしたがって、キャリアとして４００mgのシクロヘプタノイル− （Ｌ）−ロイシンを有する第２溶液、および、キャリアとして２−メチルシクロ ヘプタノイル−（Ｌ）−ロイシンを有する第３溶液を調製した。各溶液は２．５ μg／mＬの濃度のカルシトニンを有する。 実施例７ ラットにおけるカルシトニン・イン・ビボ実験 各サンプルに対して、断食したラットのグループを麻酔し、経口または十二 指腸内注入によって、実施例６で調製したカルシトニン／キャリアの投与形態の １つを投与した。各サンプルにおけるカルシトニン濃度は２．５μg／mＬであっ た。各ラットに４mＬ／kgの投与量が投与された。血液サンプルを尾の動脈から 連続して採取した。シーラムカルシウムを“Ｄemand^TM Ｃalcium Ｋit”（” Ｓigma Ｃhemical Ｃompany”、Ｓt．Ｌouis，Ｍissouri，ＵＳＡから入手可 能）でテストすることによって定めた。テストの結果を図１に示す。 実施例８ ４００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−アルギニンおよび１０μg／k gのカルシトニン、４００mg／kgのシクロペンタノイル−（Ｌ）−アルギニンお よび１０μg／kgのカルシトニン、４００ｍg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ） −フェニルグリシンおよび１０μg／kgのカルシトニン有する３つのサンプルを 各々調製した。これらのサンプルを、実施例７に記載したように断食したラット に投与した。テストの結果を図２に示す。 実施例９ ２２６mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−アルギニン、２２６mg／kgの シクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシン、２２６mg／kgのシクロヘキサノイル− （Ｌ）−チロシン、および１０μg／kgのカルシトニンの混合物有するサンプ ルを調製した。このサンプルを、実施例７に記載したように断食したラットに投 与した。テストの結果を図３に示す。 実施例１０ ４００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンおよび３μg／kgの カルシトニン、４００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−グリシンおよび３ μg／kgのカルシトニン、４００mg／kgのシクロプロパノイル−（Ｌ）−ロイシ ンおよび３μg／kgのカルシトニンを有するサンプルを各々調製した。これらの サンプルを、実施例７に記載したように断食したラットに投与した。テストの結 果を図４に示す。 実施例１１ ４００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンおよび１０μg／kg のカルシトニン、およびシクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンおよび３μg／k gのカルシトニンを有する２つのサンプルを各々調製した。これらのサンプルを 、実施例７に記載したように断食したラットに投与した。テストの結果を図５に 示す。 実施例１２ 文献：Ｓantiago，Ｎ．in Ｐroc．Ｉnt．Ｓymp．Ｃontrol Ｒel．Ｂioact ．Ｍat．，Ｖol．１９．pages ５１４−５１５（１９９２）に記載の一般方法 にしたがって、ヘパリンサンプルを調製した。テストチューブ中の４．５mＬの 水中に９００mgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンを添加した。ヘパリン （７４．７mg）を１．７Ｎクエン酸と０．５％アラビアゴムの溶液、４．５mＬ に溶解した。これらの溶液を約４０℃まで暖めた。サンプルは１００mg／mＬの 濃度のキャリアを有している。ヘパリン濃度は８．３mg／mＬであった。 同様の方法で、９００mgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンとヘパリ ン（１５０mg）を有する第２のサンプルを調製した。ヘパリン濃度は１６．７mg ／mＬであった。 実施例１３ ラットにおけるヘパリン・イン・ビボ実験 断食したラットのグループを麻酔し、経口注入によって、実施例１１で調製 したヘパリン／キャリアの投与形態の１つを投与した。サンプルにおけるヘパリ ン濃度は各々８．３および１６．７mg／mＬであった。各ラットに約３mＬ／kgの 投与量が投与された。血液サンプルを尾の動脈から連続して採取した。ヘパリン 活性を”Ｈenry，Ｊ．Ｂ．，Ｃlinical Ｄianosis and Ｍanagement by Ｌ aboratory Ｍethod ；Ｐhiladelphia，ＰＡ；ＷＢ Ｓaunders（１９７９）”の 方法にしたがって、活性部分トロンボプラスチン時間（ＡＴＰＰ：activated p artial thromboplastin time）を利用して定めた。テストの結果を図６に示す 。 実施例１４ ６００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンおよび５０mg／kgの ヘパリン、６００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンおよび１００ mg／kgのヘパリンを有する２つのサンプルを各々調製した。これらのサンプルを 、実施例１３に記載したように断食したラットに投与した。テストの結果を図７ に示す。 実施例１５ １００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−アルギニンおよび１００mg／ kgのヘパリン、および、６００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−アルギニ ンおよび１００mg／kgのヘパリンを有する２つのサンプルを各々調製した。これ らのサンプルを、実施例１２に記載したように断食したラットに投与した。テス トの結果を図８に示す。 実施例１６ ３００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンおよび２５mg／kgの ヘパリンを有するサンプルを調製した。このサンプルを、十二指腸内注入によっ てラットに投与した。比較ヘパリンとして、２５mg／kgの投与量を十二指腸内注 入によって投与した。テストの結果を図９に示す。 実施例１７ ３００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンおよび５０mg／kgの ヘパリンを有するサンプルを調製した。このサンプルを、十二指腸内注入によっ てラットに投与した。比較としてヘパリンなしのシクロヘキサノイル−（Ｌ）− ロイシンを十二指腸内注入によって投与した。３０分後、十二指腸内注入によっ て５０mg／kgのヘパリンを投与した。第２の比較として、ヘパリンのみ５０mg／ kgを十二指腸内注入によって投与した。テストの結果を図１０に示す。 実施例１８ 低分子量ヘパリンサンプルの調製 低分子量ヘパリンを含有するサンプルを、実施例１２に記載したように調製 した。 実施例１９ ラットにおける低分子量ヘパリン・イン・ビボ実験 実施例１９に記載したようなシクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンおよび 低分子量ヘパリン（ＬＭＷＨ）を含有するサンプルを調製し、断食したラットの グループに経口注入投与した。血液サンプルを尾の動脈から連続して採取した。 低分子量ヘパリン（ＬＭＷＨ）をプラズマサンプルにおいて決定した。プラズマ レベルは”Ｃhromogenix Ａ．Ｂ．，Ｓweden”から入手可能な”antiＦactor Ｘa assay kit”を用いて測定した。テストの結果を図１１に示す。 実施例２０ ３００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−ロイシンおよび８０００ＩＵ ／kgの低分子量ヘパリンを有するサンプルを調製した。このサンプルを、実施例 ２０に記載したように断食したラットに投与した。テストの結果を図１２に示す 。 ラットにおけるクロモグリコラート調製のイン・ビボ評価 実施例２１ ここに開示した方法にしたがって、本発明のキャリアとクロモグリコール酸 ２ナトリウムとを含有するサンプルを調製した。サンプルは、０．８５Ｎクエン 酸および０．５％アカシアゴム中、４００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ） −ロイシンおよび５０mg／kgのクロモグリコール酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）を 含有した。このサンプルのpＨは７．１であった。第２のサンプルはpＨ４．６で 調製した。これらのサンプルを、ラットに経口注入投与した。比較として、ＤＳ ＣＧを、pＨ７．２で水中で、およびpＨ３．７でクエン酸中で移送した。移送は 、”Ａ．Ｙoshimi in Ｐharmcobio-Ｄyn．，１５，pages６８１−６８６（１ ９９２）”に開示の方法を用いて評価した。テストの結果を図１３に示す。 ラットにおけるインターフェロン調製のイン・ビボ評価 実施例２２ ここに開示した方法にしたがって、pＨ約７−８で”Ｔrizma”塩酸塩緩衝液 （Ｔris−ＨＣI）中に本発明のキャリアおよびインターフェロンα２bを含有す るサンプルを調製した。これらのサンプルを、ラットに経口注入投与した。移送 は、ヒトインターフェロンα用”ＥＬＩＳＡassay”を用いて評価した。 緩衝溶液中の８００mg／kgのククロヘキサノイル−（Ｌ）−フェニルグリシ ンおよび１０００μg／kgのインターフェロンα２b、および、緩衝溶液中の８０ ０mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−アルギニンおよび１０００μg／kgの インターフェロンα２bを含有する２つのサンプルを調製した。サンプルを、経 口注入によって断食したラットに投与した。テストの結果を図１４に示す。 実施例２３ 緩衝溶液中の８００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−フェニルグリシ ンおよび１０００μg／kgのインターフェロンα２b、および、緩衝溶液中のシク ロヘキサノイル−（Ｌ）−アルギニンおよび１０００μg／kgのインターフェロ ンα２bを含有する２つのサンプルを調製した。サンプルを、経口注入によって サルに投与した。テストの結果を図１５に示す。 実施例２４ 緩衝溶液中の４００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−フェニルグリシ ンおよび５００μg／kgのインターフェロンα２bを含有するサンプルを調製した 。サンプルを、経口注入によって第２のラットのグループに投与した。テストの 結果を図１６に示す。 実施例２５ 緩衝溶液中の４００mg／kgのシクロヘキサノイル−（Ｌ）−フェニルグリシ ンと、１０００μg／kgのインターフェロンα２b、５００μg／kgのインターフ ェロンα２b、および２５０μg／kgのインターフェロンα２bを含有する３つの サンプルを調製した。サンプルを、経口注入によって断食したラットのグループ に投与した。テストの結果を図１７に示す。 ここに記載した全ての特許、特許出願、文献及びテスト方法は、本願に参照 して組み入れられるものである。 本発明の種々の変形例は、上記詳細な記載の範囲において当業者には想定さ れるものである。これらの変形例も請求の範囲に属するものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 38/00 9284−4Ｃ Ａ６１Ｋ 39/00 Ｇ 38/11 9284−4Ｃ 39/395 Ｈ 38/22 7433−4Ｃ 47/42 Ｂ 38/23 9547−4Ｈ Ｃ０７Ｃ 233/50 38/27 9356−4Ｈ Ｃ０７Ｋ 5/062 38/28 9356−4Ｈ 5/065 39/00 9356−4Ｈ 5/068 39/395 9051−4Ｃ Ａ６１Ｋ 37/36 47/42 9051−4Ｃ 37/30 Ｃ０７Ｃ 233/50 9051−4Ｃ 37/26 Ｃ０７Ｋ 5/062 9051−4Ｃ 37/02 5/065 9051−4Ｃ 37/24 5/068 9051−4Ｃ 37/34 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)， ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，Ｃ Ｈ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ， ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，Ｍ Ｎ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ， ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．（Ａ）少なくとも１つの生物学的活性剤と、 （Ｂ）（a）少なくとも１つのアシル化アミノ酸； （b）少なくとも１つのアシル化アミノ酸を含有する少なくとも １つのペプチド；または （c）前記（a）および（b）の組み合わせとを含有する組成物で あって、 前記アシル化アミノ酸が、 （i）Ｃ₁−Ｃ₇アルキル、Ｃ₂−Ｃ₇アルケニル、Ｃ₁−Ｃ₇アルコキシ、ヒドロ キシ、フェニル、フェノキシ、または−ＣＯ₂Ｒ（式中、Ｒは、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄ア ルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルである）で任意に置換されてもよいＣ₃−Ｃ_{1 0} シクロアルキルアシル化剤；または （ii）Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル置換のＣ₁−Ｃ₆アルキルアセチル化剤によっ てアセチル化される、組成物。 ２．前記アミノ酸が、式： Ｈ−Ｎ（Ｒ¹）−（Ｒ²−ＣＯ）−ＯＨ （式中、Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルであり、 Ｒ²は、Ｃ₁−Ｃ₂₄アルキル、Ｃ₂−Ｃ₂₄アルケニル、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル 、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルケニル、フェニル、ナフチル、（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）フ ェニル、（Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）フェニル、（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）ナフチル、 （Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）ナフチル、フェニル（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、フェニル （Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）、ナフチル（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、またはナフチル（ Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）であり； Ｒ²は、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、Ｃ₂−Ｃ₄アルケニル、Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ、−Ｏ Ｈ、−ＳＨ、−ＣＯ₂Ｒ³、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルケニ ル、３〜１０環原子を有するヘテロ環（ここで、ヘテロ原子は、１以上の、Ｎ、 Ｏ、Ｓ、またはこれらの任意の組み合わせである）、アリール、（Ｃ₁−Ｃ_{1 0} アルキル）アリール、アリール（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、またはこれらの組み合 わせによって、任意に置換されてもよく； Ｒ²に、酸素、窒素、またはイオウ、またはこれらの任意の組み合わせが任意 に介在してもよく； Ｒ³は、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルである） で表わされる、請求項１に記載の組成物。 ３．前記アシル化アミノ酸が、式： （式中、Ｒ⁴は、（i）Ｃ₁−Ｃ₇アルキル、Ｃ₂−Ｃ₇アルケニル、Ｃ₁−Ｃ₇アル コキシ、ヒドロキシ、フェニル、フェノキシ、または−ＣＯ₂Ｒ⁷（式中、Ｒ⁷は Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルである）で任意に置換されて もよいＣ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル、または（ii）Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル置換Ｃ₁ −Ｃ₆アルキルであり； Ｒ⁵は、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルであり； Ｒ⁶は、Ｃ₁−Ｃ₂₄アルキル、Ｃ₂−Ｃ₂₄アルケニル、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル 、Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルケニル、フェニル、ナフチル、（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）フ ェニル、（Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）フェニル、（Ｃ₂−Ｃ₁₀アルキル）ナフチル、 （Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）ナフチル、フェニル（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、フェニル （Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）、ナフチル（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、またはナフチル（ Ｃ₂−Ｃ₁₀アルケニル）であり； Ｒ⁶は、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、Ｃ₂−Ｃ₄アルケニル、Ｃ₁−Ｃ₄アルコキシ、−Ｏ Ｈ、−ＳＨ、−ＣＯ₂Ｒ⁷、Ｃ₃−Ｃ₇シクロアルキル、Ｃ₃−Ｃ₇シクロアルケニル 、３〜１０環原子を有するヘテロ環（ここで、ヘテロ原子は、１以上の、Ｎ、Ｏ 、Ｓ、またはこれらの任意の組み合わせである）、アリール、（Ｃ₁−Ｃ₁₀ア ルキル）アリール、アリール（Ｃ₁−Ｃ₁₀アルキル）、またはこれらの組み合わ せによって、任意に置換されてもよく； Ｒ⁶に、酸素、窒素、またはイオウ、またはこれらの任意の組み合わせが任意 に介在してもよく； Ｒ⁷は、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄アルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルである） で表わされる、請求項１に記載の組成物。 ４．前記生物学的活性剤が、ペプチド、ムコ多糖、炭水化物、脂質、殺虫剤 、またはこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載の組成 物。 ５．前記生物学的活性剤が、ヒト成長ホルモン、ウシ成長ホルモン、成長ホ ルモン放出ホルモン、インターフェロン、インターロイキン−II、インスリン、 ヘパリン、カルシトニン、エリトロポイエチン、心房ナチュレティックファクタ （ＡＴＲＩＡＬ ＮＡＴＵＲＥＴＩＣ ＦＡＣＴＯＲ）、抗原、モノクローナル 抗体、ソマトスタチン、アドレノコルチコトロピン、ゴナドトロピン放出ホルモ ン、オキシトシン、バソプレシン、クロモリンナトリウム、バンコマイシン、デ スフェリオキサミン（ＤＦＯ）、またはこれらの組み合わせからなる群から選択 される、請求項１に記載の組成物。 ６．前記生物学的活性剤が、インターフェロン、インターロイキン−II、イ ンスリン、ヘパリン、カルシトニン、オキシトシン、バソプレシン、クロモリン ナトリウム、バンコマイシン、ＤＦＯ、またはこれらの組み合わせからなる群か ら選択される、請求項４に記載の組成物。 ７．前記生物学的活性剤が、カルシトニンである、請求項６に記載の組成物 。 ８．前記アミノ酸が、天然アミノ酸である、請求項１に記載の組成物。 ９．前記アミノ酸が、合成アミノ酸である、請求項１に記載の組成物。 １０．前記アミノ酸が、α−アミノ酸である、請求項１に記載の組成物。 １１．前記アミノ酸が、非α−アミノ酸である、請求項１に記載の組成物。 １２．前記アミノ酸が、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギ ン酸、シトルリン、システイン、シスチン、グルタミン、グリシン、ヒスチジン 、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、オルニチン、フェニルアラニ ン、フェニルグリシン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロ シン、バリン、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタマート、Ｏ−ホスホ セリン、β−アラニン、α−アミノ酪酸、γ−アミノ酪酸、α−アミノイソ酪酸 、４−（４−アミノフェニル）酪酸、（アミノフェニル）酢酸、アミノ安息香酸 、４−アミノ馬尿酸、（アミノメチル）安息香酸、ε−アミノカプロン酸、７− アミノヘプタン酸、β−アスパラギン酸、γ−グルタミン酸、システイン（ＡＣ Ｍ）、ε−リジン、ε−リジン（Ａ−Ｆmoc）、メチオニンスルホン、ノルロイ シン、ノルバリン、オルニチン、d−オルニチン、p−ニトロ−フェニルアラニン 、ヒドロキシプロリン、およびチオプロリンからなる群から選択される、請求項 ２に記載の組成物。 １３．前記アミノ酸が、アルギニン、ロイシン、リジン、フェニルアラニン 、チロシン、バリン、フェニルグリシン、４−（４−アミノフェニル）酪酸、４ −（４−アミノフェニル）酢酸、およびアミノ安息香酸からなる群から選択され る、請求項１２に記載の組成物。 １４．前記ペプチドが、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、また はペンタペプチドからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。 １５．前記ペプチドが、少なくとも１つの天然アミノ酸を含有する、請求項 １４に記載の組成物。 １６．前記ペプチドが、少なくとも１つの合成アミノ酸を含有する、請求項 １４に記載の組成物。 １７．前記ペプチドが、少なくとも１つのα−アミノ酸を含有する、請求項 １４に記載の組成物。 １８．前記ペプチドが、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギ ン酸、シトルリン、システイン、シスチン、グルタミン、グリシン、ヒスチジン 、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、オルニチン、フェニルアラニ ン、フェニルグリシン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロ シン、バリン、ヒドロキシプロリン、γ−カルボキシグルタマート、Ｏ−ホスホ セリン、β−アラニン、α−アミノ酪酸、γ−アミノ酪酸、α−アミノイソ酪酸 、ε−アミノカプロン酸、７−アミノヘプタン酸、β−アスパラギン酸、γ−グ ルタミン酸、システイン（ＡＣＭ）、ε−リジン、ε−リジン（Ａ−Ｆmoc）、 メチオニンスルホン、ノルロイシン、ノルバリン、オルニチン、ｄ−オルニチン 、ｐ−ニトロ−フェニルアラニン、ヒドロキシプロリン、およびチオプロリンか らなる群から選択される１以上のアミノ酸を含有する、請求項１４に記載の組成 物。 １９．前記ペプチドが、アルギニン、ロイシン、リジン、フェニルアラニン 、チロシン、バリン、およびフェニルグリシンからなる群から選択される１以上 のアミノ酸から形成される、請求項１８に記載の組成物。 ２０．前記アシル化剤が、式： 式中、Ｒ⁸は、 （i）Ｃ₁−Ｃ₇アルキル、Ｃ₂−Ｃ₇アルケニル、Ｃ₁−Ｃ₇アルコキシ、ヒドロ キシ、フェニル、フェノキシ、または−ＣＯ₂Ｒ⁹（式中、Ｒ⁹は、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄ アルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルである）で任意に置換されてもよいＣ₃− Ｃ₁₀シクロアルキル；または （ii）Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル置換のＣ₁−Ｃ₁₆アルキルであり； Ｘは脱離基である、 で表わされる、請求項１に記載の組成物。 ２１．前記Ｒが、シクロヘキシル、シクロペンチル、シクロプロピル、また はシクロヘプチルである、請求項２０に記載の組成物。 ２２．成分（b）（i）が、２以上のアセチル化アミノ酸の混合物を含有する 、請求項１に記載の組成物。 ２３．微球体を含有する、請求項１に記載の組成物。 ２４．（Ａ）請求項１に記載の組成物；および （Ｂ）（a）付形剤、 （b）希釈剤、 （c）崩壊剤、 （d）潤滑剤、 （e）可塑剤、 （f）着色剤、 （g）投与ビヒクル、または （h）任意のこれらの組み合わせを含有する投与単位形態。 ２５．錠剤、カプセル、または液剤を含有する、請求項２４に記載の投与単 位形態。 ２６．生物学的活性剤を、該活性剤を必要とする動物に投与する方法であっ て、前記動物に請求項１に記載の組成物を経口投与することを含有する方法。 ２７．組成物の調製方法であって、該方法は （Ａ）少なくとも１つの生物学的活性剤と； （Ｂ）（a）少なくとも１つのアシル化アミノ酸； （b）少なくとも１つのアシル化アミノ酸を含有する少なくとも １つのペプチド；または （c）前記（a）および（b）の組み合わせと； （Ｃ）任意に投与ビヒクルとを混合することを含有し、 前記アシル化アミノ酸が、 （i）Ｃ₁−Ｃ₇アルキル、Ｃ₂−Ｃ₇アルケニル、Ｃ₁−Ｃ₇アルコキシ、ヒドロ キシ、フェニル、フェノキシ、または−ＣＯ₂Ｒ（式中、Ｒは、Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₄ア ルキル、またはＣ₂−Ｃ₄アルケニルである）で任意に置換されてもよいＣ₃−Ｃ_{1 0} シクロアルキルアシル化剤；または （ii）Ｃ₃−Ｃ₁₀シクロアルキル置換のＣ₁−Ｃ₆アルキルアセチル化剤によっ てアセチル化される、調製方法。 ２８．安定化添加剤をさらに含有する、請求項２７に記載の方法。 ２９．前記安定化添加剤が、アカシアゴム、ゼラチン、ポリエチレングリコ ールまたはポリリジンからなる群から選択される、請求項２８に記載の方法。 ３０．式： 式中、Ａは、Ｔry、Ｌeu、Ａrg、Ｔrp、またはＣitである、 で表わされる化合物。 ３１．ＡがＬeuではなく、２以上の官能基でアセチル化される、請求項３０ に記載の化合物。 ３２．ＡがＴryである、請求項３０に記載の化合物。 ３３．ＡがＴryである、請求項３１に記載の化合物。 ３４．ＡがＬeuである、請求項３０に記載の化合物。 ３５．ＡがＡrgである、請求項３０に記載の化合物。 ３６．ＡがＡrgである、請求項３１に記載の化合物。 ３７．ＡがＴrpである、請求項３０に記載の化合物。 ３８．ＡがＴrpである、請求項３１に記載の化合物。 ３９．ＡがＣitである、請求項３０に記載の化合物。 ４０．ＡがＣitである、請求項３１に記載の化合物。 ４１．式： 式中、ＡおよびＢは独立にＡrgまたはＬeuである、 で表わされる化合物。 ４２．Ａ、ＢまたはＡおよびＢがＡrgであり、Ａ、ＢまたはＡおよびＢが２ 以上の官能基でアシル化されている、請求項４１に記載の化合物。 ４３．式： 式中、ＡがＡrgまたはＬeuである、 で表わされる化合物。 ４４．ＡがＡrgである場合、Ａが２以上の官能基でアシル化されている、請 求項４３に記載の化合物。 ４５．ＡがＡrgである、請求項４３に記載の化合物。 ４６．ＡがＡrgである、請求項４４に記載の化合物。 ４７．ＡがＬeuである、請求項４３に記載の化合物。 ４８．式： 式中、ＡがＬeuまたはフェニルグリシンである、 で表わされる化合物。 ４９．ＡがＬeuである、請求項４８に記載の化合物。 ５０．Ａがフェニルグリシンである、請求項４８に記載の化合物。 ５１．式： 式中、Ａがフェニルグリシンである、 で表わされる化合物。 ５２．式： 式中、Ａがフェニルグリシンである、 で表わされる化合物。