JPH09508413A - 水中油エマルジョン - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、乳化剤として全製剤の0.01〜50重量％好ましくは0.1〜10重量％のガラクトリピド物質を含有する水中油エマルジョンに関するものである。ガラクトリピド物質は、少なくとも50％のジガラクトシルジアシルグリセロールおよび残りの他の極性脂質からなる。このエマルジョンは、医薬組成物、そしてまた栄養、化粧、食料および農薬製品中の１種または２種以上の活性物質に対する担体として適している。

Description

【発明の詳細な説明】 水中油エマルジョン技術分野 本発明は、乳化剤として極性脂質物質を含有する水中油型エマルジョンに関す るものである。これらのエマルジョンは、医薬組成物、そしてまた、栄養材料、 化粧料、食料および農薬製品における活性物質に対する担体として使用するのに 適している。発明の背景 臨床栄養や親油性薬剤の投与のような医薬用途に対する水中油型エマルジョン は、一般に天然脂質を基にしている。油は、典型的には、植物油、例えば大豆油 、サフラワー油または中鎖長トリアシルグリセロール(MCT)油である。乳化剤は 、典型的には、リン脂質、例えば卵黄リン脂質（卵レシチン）または大豆リン脂 質（大豆レシチン）である。これらの乳化剤は、両性イオン性であるホスファチ ジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミンおよびアニオン性であるホス ファチジルイノシトールのようなリン脂質の組の混合物からなる。これらのレシ チン乳化剤は、上述した種類の工業的規模でのエマルジョンの製造においてもっ とも利用されている天然の脂質であるということはよく知られている。また、こ のようなエマルジョンは、乳化剤がリン脂質であることに関係する不利点および 問題をこうむるということもよく知られている。このような不利点および問題は 、例えば広い粒子の大きさの分布およびいわゆるクリーミングを生ずる粒子の融 合である。 大部分の商業的脂肪エマルジョンは、動物源から製造される、大部分の場合に おいて卵黄粉末である卵リン脂質を基にしている。動 物源は、ある場合においては、ウイルス汚染そして特に卵黄粉末の場合において はサルモネラのような細菌汚染に関連する問題を有している。卵リン脂質の他の 重要な特徴は、小量の酸素の存在下においてさえも、酸化に非常に感受性である アラキドン酸エステルおよびドコサヘキサエン酸エステルのようなポリ不飽和脂 肪エステルの含量である。かくして、卵リン脂質の臭および味は、しばしば不快 であり、この臭および味は、脂肪エマルジョンに持ち込まれうる。汚染および酸 化は、しばしば工業的安全性および取扱に関係する問題の原因となる。従来の技術 EP-A2-0 402 090は、ジグリセリド混合物の全体の油脂含量10〜99％を含有す るクリームおよびドレッシングに適した可食水中油エマルジョンを開示している 。安定性を改善するために、エマルジョンは、また油相を基にしてリン脂質0.1 〜10％を含有することができる。 EP−A2-0 391 369は、有効な量の親油性薬剤を含有する水中油エマルジョン型 の安定な医薬組成物を開示している。このエマルジョンは、３〜50％の油性担体 、主にMCT油、0.05〜20％のリン脂質、0.03〜10％の非−イオン性界面活性剤お よび0.05〜50％のイオン性界面活性剤からなる。改善された安定性は、上述した 成分間の相乗作用により起されると述べられている。 グリコシルグリセリドは、植物細胞膜の公知の構成成分である糖脂質の一型で ある。ティラコイド膜の乾燥重量の40％までを示すガラクトースを基にした２種 の型のもの、モノガラクトシルジアシルグリセロールMGDGおよびジガラクトシル ジアシルグリセロールDGDG が、非常に普通である。 植物糖脂質は、グリセロールに結合した主にガラクトースの炭水化物単位を有 している。MGDGにおいては、ガラクトース環の１−位はグリセロールに対するβ −結合を有しておりそしてDGDGにおいては、糖間のα，１→６結合が存在する。 マイナーな構成成分は、末端デオキシグルコース残基の炭素６に結合したヒドロ キシル基ではなくてスルホネートを含有するより正確にはスルホキノボシルジア シルグリセロールSQDGと称される植物硫脂質である。大部分の植物糖脂質は次の 一般式により記載することができる。 上記式において、 R₁およびR₂は、相互に独立して、２〜24個の炭素原子および０〜６個の二重結 合を有する飽和または不飽和の脂肪酸残基、さらにエステル化されたヒドロキシ 酸、すなわちエストライドまたは水素であり；炭水化物はモノサッカライド単位 であり；ｎ＝１〜５であり；そしてR₃はヒドロキシルまたはスルホネート基であ る。 グリコシルグリセリドと水および他の極性溶剤との相互作用の研究において、 本発明者等は、驚くべきことには、穀類からの特定の糖脂質物質は、該脂質物質 を特に医薬組成物に対するそしてまた他の処方、例えば化粧、農薬、栄養および 食料処方に対する担体物質として利用するのに適当且つ容易にする挙動を有して いるということを見出した。 SE 9400368-8は、抽出およびクロマトグラフィー分離によって、 植物、好ましくは穀類から糖脂質物質を製造する工業的に適用できる方法を開示 している。そのようにして製造された糖脂質物質は、医薬製品、化粧品および食 品に対する両親媒性物質として使用することができる。発明の説明 本発明は、乳化剤が、少なくとも50％がジガラクトシルジアシルグリセロール で残りが他の極性脂質からなるガラクトリピド物質であることを特徴とする、全 製剤の0.01〜50重量％、好ましくは0.1〜10重量％の乳化剤および全製剤の0.1〜 70重量％の極性溶剤中で乳化された油性物質からなる水中油エマルジョンに関す るものである。 好ましい製剤においては、ガラクトリピド物質は、約70〜80％のジガラクトシ ルジアシルグリセロールおよび20〜30％の他の極性脂質からなる。 他の好ましい製剤においては、ガラクトリピド物質は、100％までのジガラク トシルジアシルグリセロールからなる。 ジガラクトシルジアシルグリセロールは、一般式 によって記載することができる。 上記式において、R₁およびR₂は、相互に独立して、10〜22個の炭素原子および ０〜４個の二重結合を含有する飽和または不飽和の脂肪酸残基または水素であり ；そしてR₃は、ヒドロキシルまたはスル ホネート基である。 脂肪酸残基R₁およびR₂の好ましい例としては、天然に存在する脂肪アシル基、 例えば飽和酸のパルミチン酸(C₁₅H₃₁CO；16：0)およびステアリン酸(C₁₇H₃₅CO； 18：0)からの残基；モノ不飽和酸のオレイン酸(C₁₇H₃₃CO；18：1)からの残基； およびポリ不飽和酸のリノール酸(C₁₇H₃₁CO；18：2)およびリノレン酸(C₁₇H₂₉CO ；18：3)からの残基をあげることができる。脂肪酸残基は、また、ヒドロキシ基 がさらに脂肪酸によりエステル化されたいわゆるエストライドであるグリセロー ル部分に結合したヒドロキシ酸を含有することもできる。 ガラクトリピド物質の一部である他の極性脂質は、MGDGおよびホスファチジル コリンのような異なる糖脂質およびリン脂質の混合物である。組成は、ガラクト リピドの製造に使用される出発物質および方法に依存する。 DGDGの含量が少なくとも50％である限りは、ガラクトリピド物質の成分の特性 の性質は、本発明において臨界的ではない。しかしながら、多くの適用に対して 最高の利点は、もっとも重要な２重層(bilayer)−形成成分であるDGDGの高い含 量によって実現される。 ガラクトリピド物質は、殆んどすべての種類の植物物質から抽出することがで きる。好ましい植物物質は、穀粒および穀類、例えば小麦、ライ麦、オート麦、 とうもろこし、米、きびおよびごまからの種子および核である。オート麦のひき 割り実ならびに小麦グルテンは、高い脂質濃度を有しておりそしてそれ故に、本 製造方法に使用するのに有利である。ガラクトリピド物質のジガラクトシルジア シルグリセロールは、もし適用できる場合は、合成源のものであっ てもよい。 油性物質は、室温で液体または半固体のコンシステンシーを有する何れの親油 性物質であってもよい。油性物質に対して、特定の制限は課されない。植物油、 動物油、合成油、脂肪酸、天然の合成グリセリドおよび親油性薬剤などを、例と してあげることができる。 好ましい油は、γ−リノレン酸(GLA)を含有する植物油、例えば宵待草油（eve ning primrose oil）およびボラゴ油(borago oil)、およびエイコサペンタエン 酸(EPA)およびドコサヘキサエン酸(DHA)を含有する魚油である。 乳化剤と油性物質との間の比は、好ましくは、重量で１：40〜１：10、特に重 量で１：25〜１：15の範囲内にある。 ガラクトリピドの固有の有利な特徴は、エマルジョン小滴を立体的に安定化し そして血液の流れ中に注入した場合に延長された寿命を与えることのできるそれ ぞれの脂質分子内の極性ヘッドグループ（headgroup）からなるガラクトース単 位である。 ガラクトースまたはグルコースのような何れかの他の単糖単位を基にした合成 ジグリコシルジアシルグリセロール、およびグルコースのようなガラクトース以 外の他の炭水化物単位を基にした何れかの源から単離された天然のグリコシルグ リセリドは、本発明によって使用することができる。 本発明の水中油エマルジョンは、乳化剤としてガラクトリピド物質を使用する ことによって製造されるけれども他の低分子化合物を有効な等張量で含有するこ とができる。水中油エマルジョンは、また香味剤、着色剤、濃化剤、補助界面活 性剤、防腐剤、抗酸化剤などのような組成物の種々な態様における改善のために 当該技術にお いて知られている任意の添加物を含有することができる。 エマルジョンは、普通の方法により製造される。例えば、水中の中鎖トリアシ ルグリセロール油の30（w／w）％エマルジョンは、乳化剤、すなわち、ガラクト リピド物質を油中に分散することによって製造される。グリセロールおよび水は 混合される。油相ならびに水性相を予め加熱しそしてそれから、油相を水性相に 高剪断混合下で加える。それから、それは高圧均質化に付される。 本発明は、また水中油エマルジョンと組み合わされた治療的に活性な物質から なる医薬組成物に関するものである。 治療的に活性な物質は、親油性薬剤、例えば抗癌剤、抗菌剤、特に抗かび剤、 シクロスポリンのような免疫抑制薬剤、皮膚学的薬剤、向精神薬剤、麻酔薬剤お よび親油性であって、そしてガラクトリピドの使用により解決できる処方問題の ある他の薬剤である。 エマルジョンに対する好ましい油性物質は、上述した好ましい油に加えて、ま たMCT油である。また、遊離脂肪酸、モノ−、ジ−およびトリアシルグリセロー ル、リン脂質、コレステロールエステルおよびそれら自体で治療作用を有しそし てガラクトリピドを基にしてエマルジョンの形態において有利に処方することの できる多くの他の型の脂質のような多くの脂質がある。この場合においては、治 療的に活性な物質は、また他の生体活性性を有することのできる油性物質である 。 医薬組成物は、以下の通りであることができる。 −治療的に有効な量の治療的に活性な物質； −全組成物の0.1〜5.0重量％のガラクトリピド乳化剤； −全組成物の１〜50重量％の油性物質； −場合によっては、等張的に有効な量の等張化剤。 等張化剤は、例えばグリセロールであるが、また、等張的に有効な量の何れの 等張化剤であってもよい。 極性溶剤は、水または水性溶液、例えば緩衝液および食塩水、または何れかの 他の普通の溶剤、例えばエタノール、グリセロール、プロピレングリコール、ポ リエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、グリコフラン、メチルピロ リドン、トランスクートルである。しかしながら、水が好ましい溶剤である。 非経口投与用の医薬組成物は、以下の通りであることができる。 −0.2〜３％の2,6−ジイソプロピルフェノール、 −0.3〜５％のガラクトリピド物質、 −５〜30％のトリアシルグリセロール油、 −等張的に有効な量の等張化剤、 −添加して100％にする量の水。 医薬組成物は、ヒトを包含する動物、特に哺乳動物に対する経口的、経腸的、 非経口的、直腸的、経腟的、局所的、経眼的、経鼻的または経耳的投与のために 処方することができる。 ガラクトリピドを基にしたエマルジョンは、卵レシチンまたは大豆レシチンか ら製造したリン脂質エマルジョンに比較して、驚くほど安定な製剤である。リン 脂質エマルジョンを破壊する振盪試験は、ガラクトリピドエマルジョンに対して 影響を及ぼさない。 ガラクトリピドエマルジョンは、またせまいそして一貫した粒子の大きさの分 布を示すもので、このことは普通リン脂質エマルジョンを使用するときに問題で あったのである。すなわち卵レシチンを基にした商業的に入手できる脂肪エマル ジョンは、しばしば余りに も大きい粒を含有する問題を有しそしてこれは、クリーミング現象または表面上 の油小滴の出現のような問題を生ずる。 ガラクトリピドエマルジョンは、また、標準オートクレーブ中におけるオート クレーブ処理による滅菌に対して驚くほど安定である。商業的に入手できる脂肪 エマルジョンは、しばしば、技術的問題を有する特殊な回転オートクレーブ中で 処理することが必要である。標準オートクレーブ処理操作の使用は、本発明によ って与えられる著しい工業的改善である。 ガラクトリピド物質 ガラクトリピド物質は、以下に述べるような種々な穀類から製造されそして実 施例に述べるような本発明の担体製剤および医薬組成物の製造に使用される。本 明細書において、とくにことわらない限り、％は重量％を意味する。溶剤混合物 中の溶剤の割合は、容量部で示される。オート麦からのガラクトリピド物質 撹拌下で抽出タンク中で70℃で95％エタノール1000ｌで３時間抽出した。スラリ ーを、温かい間に遠心分離しそして固体の粒子から分離した。液体のフラクショ ンを60℃で蒸発して、明るい褐色の油約10kgを得た。 この油を、シリカゲル(Matrex Silica Si，粒子の大きさ20〜45mm、孔直径60 Å、Amicon Corp.，USAから)6.25kgを含有する不銹鋼カラムに適用した。カラム 温度は50℃であった。それから、カラムを、すべての非極性脂質を除去するため に、90：10のヘキサン：イソプロパノールの混合物30ｌで洗浄した。 それから、60：40のヘキサン：イソプロパノールの混合物20ｌでカラムからガ ラクトリピド物質を溶離して、ガラクトシルジアシルグリセロールフラクション を得た。このフラクションを蒸発して主な脂質のクラスであるDGDG約700ｇを得 た。それから、ガラクトリピド物質を、水に分散しそして凍結乾燥して、自由に 流動する粉末を得た。ガラクトリピドからのDGDGの濃縮化 約70％のDGDGの含量を有する上述したようにして得られたオート麦からのガラ クトリピド50ｇを、70：30のヘキサン：イソプロパノール250mlに溶解して全量3 00mlを得た。得られた溶液を、シリカゲル(110ｇ)カラム上に負荷しそして低い 極性の成分を、70：30のヘキサン：イソプロパノールの混合物１ｌで溶離した。 濃縮化したDGDGフラクションを、アセトン２ｌで溶離した。アセトンを蒸発しそ して凍結乾燥した。殆んど純粋なDGDG生成物の全収量は、17ｇであった。ガラクトリピドの水素添加 上述したようにしてオート麦から得られたガラクトリピド混合物200ｇを、温 イソプロパノール２ｌに溶解した。炭素上に相持したパラジウム触媒(Pd 15％、 湿度53％、Engelhard Rome s.r.i.,Italy)15ｇを、撹拌機シャフト上に２個の羽 根を具備した圧力反応器（Model No．4552Ｍ；Parr Instrument Co.，USA）の底 部に入れた。それから、溶液を発火の危険性を減少するための窒素シール下の反 応器に移した。反応容器をシールしそしてはじめに、空気を除去するために窒素 で３回加圧しそしてそれから水素ガス（Plus 4.5,AGA Gas AB，Swedenから）で ３回加圧した。それから、水素圧を６ バールに保持し、撹拌機を600rpmにセットしそして混合物を70℃に加熱した。反 応混合物がその温度設定値に到達するのに14分を必要とした。水素添加操作を６ 時間実施し、その後反応生成物を0.45μmのフィルターを通して濾過して炭素粒 子およびパラジウムを除去した。溶剤を回転蒸発器上で蒸発し、残留する固体物 質を脱イオン化水1600mlに分散させそして凍結乾燥した。 濾過および凍結乾燥後の水素添加されたガラクトリピドの収量は、155ｇであ った。水素添加遂行を、ガスクロマトグラフィーにより評価した。飽和脂肪酸の みを、水素添加生成物中において検出することができた。小麦グルテンからのガラクトリピド カー中において70℃で95％エタノール４ｌで３時間抽出した。それから、スラリ ーを400〜500kPaの圧力下で濾過しそして得られたフィルターケーキを、温95％ エタノール１ｌで洗浄した。合体したエタノール溶液を、最高60℃で蒸発させそ して黄色の油約60ｇを得た。 この油を、シリカゲル（Matrex Silica Si，粒子の大きさ20〜45μm、細孔経6 0Å、Amicon Corp.，USAから）45ｇを含有する不銹鋼カラムに適用した。それか ら、このカラムを、中性脂質を除去するために、90：10のヘキサン：イソプロパ ノール混合物700mlで洗浄した。 その後、MGDGおよび若干の他の極性脂質を除去するために、カラムを、70：30 のヘキサン：イソプロパノール混合物1000mlで洗浄した。DGDGの溶離は、純粋な アセトン1000mlで実施した。蒸発後、殆 んど純粋なDGDG生成物約４ｇを得た。ライ麦からのガラクトリピド 用ヘキサンおよびイソプロパノールの混合物中で60分撹拌した。スラリーを、濾 過しそして蒸発させて、極性の脂質0.5ｇを得た。この残留物を、70：30のヘキ サンおよびイソプロパノールの混合物10mlに溶解し、直列に接続した３本のSep- pak Silica＋カラム（Millipore Corp.，USA）上に負荷し、同じ溶剤混合物20ml で洗浄し、そしてアセトン15mlで溶離した。溶離液を蒸発しそして凍結乾燥した 。ガラクトリピドの収量は、47mgであった。 種々なガラクトリピド物質の化学的および物理的特性脂質クラスの分析 脂質クラスの分析は、ジオール−変性したシリカを充填したカラム(LiChrosph ere 100 DIOL、５μm、250mm×４mm(内径)；E．Merck,Germany)を使用して、高 性能液体クロマトグラフィー(HPLC)によって遂行した。カラムは、75℃に保持さ れた水浴中に封入した。分析系は、HPLCポンプCM4000（LDC／Milton Roy，USA） および20μlのインジェクションループを有するインジェクター、モデル7125（R heodyne Inc.，USA）からなる。使用した蒸発光散乱検出器は、それぞれ97℃お よび2.0バールのドリフト管温度および空気入口圧力を有するSedex 55噴霧化室 を具備したSedex 45（S.E.D.E.R.E.,France）である。 移動相の流れは、分析中１ml／分であった。Ａの100％で始まりそしてＢの100 ％で終る（Ａが64：20：６：4.5：4.5：１のヘキサン：イソプロパノール：ｎ− ブタノール：テトラヒドロフラン：イ ソオクタン：水およびＢが75：６：4.5：4.5：10のイソプロパノール：ｎ−ブタ ノール：テトラヒドロフラン：イソオクタン：水。溶剤は、すべて酢酸アンモニ ウム180mg／ｌを含有する）25分にわたる二成分溶剤の線形勾配を使用した。 データ収集および処理は、GynkoSoft Dataシステムバージョン4.22(Softron G mbH，Germany)を使用して行なった。分析のために注入した典型的な量は、100μ gであった。確認は、真正標準との保持時間比較を基にした(Karlshamns LipidTe knik AB，Sweden)。揮発性化合物は、この系において検出しなかった。定量化は 、ピーク面積計算を基にした。 ゼータ電位は、Zetasizer ４装置（Malvern Instruments Ltd.,UK）を使用し て、希水性ガラクトリピド分散液に対して測定した。 この表１ならびに以下の表２において、次の略号を使用する。 o-GL ＝オート麦からのガラクトリピド o-h-GL＝オート麦からの水素添加されたガラクトリピド o-DGDG＝オート麦からの濃縮されたガラクトリピド w-GL ＝小麦からのガラクトリピド w-DGDG＝小麦からの濃縮されたガラクトリピド r-GL ＝小麦からのガラクトリピド脂肪酸分析 脂肪酸プロフィルの分析は、脂質を脂肪酸メチルエステルにエステル交換した 後に、ガスクロマトグラフィーにより行った。これらは、30ｍ×0.25mm(内径)の 毛管カラム(DB-WAX; J & W Scientific,USA)、カラム上のインジェクターおよび フレームイオン化検出器を具備したVarian 3500 Capillary Gas Chromatograph 上の毛管カラムガスクロマトグラフィーによって分離しそして定量した。ヘリウ ムを担体ガスとして使用した。インテグレーションは、GynkoSoftDataシステム バージョン4.22(Softron GmbH，Germany)を使用して遂行した。エステル交換は 、脂質試料１mgを、１：１の炭酸ジメチル：イソオクタンの２mlに加えることに よって行なった。メタノール200mlに溶解したナトリウム2.3ｇを含有する溶液１ mlを加えそして試験管を30秒はげしく振盪しそして室温で１５分放置して反応の 完了を確保した。水３mlを加えそして試験管を振盪しそしてそれから、２×ｇで 遠心分離した。有機層0.5μlを、次の分離条件を使用してクロマトグラフ上に注 入した。オーブンの温度は、130℃(２分)で出発、150℃(30℃／分)および220℃ （3.2℃／分）に増加し、10分保持するようにプログラムされた温度である。イ ンジェクター温度は、130℃でありそして検出器温度は250℃である。初期のガス 流れは、2.7ml／分である。結果は、外部標準法を使用して標準化した重量％で 表示した。標準が利用できないまたは許容的に純粋なマイナーの成分に対しては 補正ファクターは使用しない。 ジガラクトシルジアシルグリセロールのNMR分光分析 一次元のプロトン−脱結合した（proton-decoupled）天然に存在する¹³C NMR スペクトルを、100.614MHzの¹³C周波数においてBrukerAM-400スペクトロメータ ー(Bruker Analytishe Messtechnik GmbH.,Germany)上で記録した。パルス角は3 6°であり、パルス反復時間は、10秒でありそして分解能は1.526Hzである(デー タ点当り)。操作中、３Hz線拡大を適用した。試料（10〜40mg）は、DMSO-d₆（Al drich Chemical Comp.，Inc.，USA）730μlおよびD₂O（Aldrich ChemicalComp. ，Inc.，USA）20μlの混合物でうすめそしてNMR管(内径５mm)に移した。 実施例 以下の実施例においては、とくにことわらない限りは、商業的に入手できる化 学製品は、さらに精製することなしに使用した。脱イオン化した膜−濾過した水 を、すべての製剤において使用した。大豆油および中鎖トリアシルグリセロール (MCT)油、魚油および宵待草種子から得られた高含量のγ−リノレン酸（GLA）を 有する油を、モデル油として使用した。しかしながら、油性物質の型は、本発明 の特殊な利点を得るのに重要ではない。 大豆油、とうもろこし油およびMCT油は、Karlshamns AB，Swedenで製造された もので、クロマトグラフィー的に精製された。異なるGLAの含量を有する宵待草 油、遊離のGLAおよび魚油は、CallanishLtd.，Scotlandで製造されたもので、ク ロマトグラフィー的に精製された魚油以外は、購入したまま使用した。 抗酸化剤パルミチン酸アスコルビルおよびＥ442（アンモニウムホスファチデ ス(ammonium phosphatides)）は、それぞれ、Roche Products Ltd.，UKおよびPa lsgaard AS，Denmarkから得た。 エマルジョンは、実施例において述べたような種々な装置を使用して、高圧均 質化によって製造した。得られたエマルジョンの粒子（小滴）の大きさの分布お よびゼータ電位は、室温で動力的光散乱(Zetasizer 4; Malvern Instruments Lt d.，UK)によって測定した。粒子の大きさの測定は、AZ 104セルおよび多様な分 析を使用して90°の角度で実施した。データは、Ｚ平均として記録した。ゼータ 電位は、次の装置設定：クロスビームモードＦ(κa)＝1.50およびセル電圧134Ｖ を使用して同じセルで測定した。 実施例 １10％脂肪エマルジョン（MCT油）の製造 次の成分を含有する水中油エマルジョン（バッチの大きさ200ｇ）を製造した 。 成 分 ％ 乳化剤 0.5 MCT油 10.0 グリセロール(99％) 2.3 水 添加して100.0にする量 乳化剤、すなわちガラクトリピドを、油中に分散させた。グリセロールおよび 水を混合した。油相および水性相を、それぞれ70℃および85℃に予備加熱した。 18,000rpmで６分の高剪断混合下で、水性相を油相に加えた。それから、このプ レエマルジョンを、80MPaおよび50℃で６サイクル均質化した（Mini-Lab 8.30H; APV RannieAS，Denmark）。形成したエマルジョンは、243nmの平均小滴大きさ を有している。 実施例 ２20％脂肪エマルジョン（MCT油）の製造 次の成分を含有する水中油エマルジョン（バッチの大きさ200ｇ）を製造した 。 成 分 ％ 乳化剤 1.0 MCT油 20.1 グリセロール(99％) 2.3 水 添加して100.0にする量 乳化剤、すなわちガラクトリピドを、油中に分散させた。グリセロールおよび 水を混合した。油相を90℃に予備加熱しそして水性相を50℃に予備加熱した。14 ,000rpmで４分の高剪断混合下で、油相を水性相に加えた。それからこのプレエ マルジョンを、80MPaおよび45℃で５サイクルの均質化をした（Mini-Lab 8.30H; APV RannieAS，Denmark）。形成したエマルジョンは、213nmの平均小滴大きさ を有している。この平均大きさは、オートクレーブ処理(121℃、20分)および振 盪（120ｈ、150サイクル／分）によって有意に変化されない。 実施例 ３30％脂肪エマルジョン（MCT油）の製造 次の成分を使用して水中油エマルジョン（バッチの大きさ200ｇ）を製造した 。 成 分 ％ 乳化剤 1.5 MCT油 30.1 グリセロール(99％) 2.3 水 添加して100.0にする量 乳化剤、すなわちガラクトリピドを、油中に分散させた。グリセロールおよび 水を混合した。油相を67℃に予備加熱しそして水性相を55℃に予備加熱した。13 ,000rpmで６分の高剪断混合下で油相を水性相に加えた。それから、このプレエ マルジョンを、80MPaおよび40℃で６サイクルの均質化をした(Mini-Lab 8.30H; APV RannieAS，Denmark)。これは、200nmの平均小滴大きさを与えた。 得られたエマルジョンの一部を標準のベンチオートクレーブ中で 121℃で20分加熱滅菌した。加熱処理後、209nmの小滴大きさが測定された。これ は、エマルジョン小滴が操作中に有意に影響されないことを示す。 エマルジョンの他の部分を、150サイクル／分で５日間の振盪試験にさらした 。振盪後において、エマルジョン小滴の凝集および次のクリーミングは観察でき なかった。平均小滴の大きさ206nmは、エマルジョンが長時間高振動の振盪に対 して非常に安定であることを示す。また、加熱滅菌されたエマルジョンは、試験 性能の目立った変化なしに、同じ振盪試験にさらされた。 1.2％の卵リン脂質および20％の大豆油をベースにしたエマルジョンは、同じ 振動における振盪試験に耐えられなかった。１〜２時間後に、卵リン脂質エマル ジョンの頂部においてクリーミングを観察することができた。 実施例 ４39％脂肪エマルジョン（MCT油）の製造 次の成分を使用して、水中油エマルジョン（バッチの大きさ200ｇ）を製造し た。 成 分 ％ 乳化剤 2.0 MCT油 39.4 水 添加して100.0にする量 乳化剤、すなわちガラクトリピドを、油中に分散させた。水および油相を70℃ に予備加熱しそして16,000rpmで７分の高剪断混合下で油を水性相に加えた。そ れから、このプレエマルジョンを、82MPaおよび50℃で６サイクルの均質化をし た(Mini-Lab 8.30H; APV Rannie AS，Denmark)。この処方は、206nmの平均小滴大きさを有する僅かにクリ ーミーコンシステンシーおよびせまい粒径分布のエマルジョンを与える。 実施例 ５50％脂肪エマルジョン（MCT油）の製造 次の成分を含有する水中油エマルジョン（バッチの大きさ200ｇ）を製造した 。 成 分 ％ 乳化剤 2.5 MCT油 50.3 グリセロール(99％) 2.3 水 添加して100.0にする量 乳化剤、すなわちガラクトリピドを、油中に分散させた。グリセロールおよび 水を混合した。油相を60℃に予備加熱しそして水性相を75℃に予備加熱した。20 ,000rpmで4.5分の高剪断混合下で、油相を水性相に加えた。それから、このプレ エマルジョンを、80MPaおよび55℃で５サイクルの均質化をした（Mini-Lab 8.30 H; APVRannie AS，Denmark）。形成したエマルジョンは、粘性が全く高く（“ヨ ーグルト−様”）、235nmの平均小滴大きさを有する。 実施例 ６20％脂肪エマルジョン（MCT／大豆油）の製造 次の成分を含有する水中油エマルジョン（バッチの大きさ200ｇ）を製造した 。 成 分 ％ ガラクトリピド物質 1.0 大豆からのホスファチジルコリン 1.0 大豆油 10.0 MCT油 10.0 グリセロール(99％) 2.3 水 添加して100.0にする量 ガラクトリピド物質および大豆ホスファチジルコリンを、油混合物中に分散さ せた。グリセロールおよび水を混合した。油相を65℃に予備加熱しそして水性相 を55℃に予備加熱した。11,000rpmで９分、高剪断混合下で、水性相を油相に加 えた。それから、このプレエマルジョンを、80MPaおよび46℃で５サイクルの均 質化をした（Mini-Lab 8.30H; APV Rannie AS，Denmark）。形成したエマルジョ ンは、262nmの平均小滴大きさを有し、これは、オートクレーブ処理後、有意に 変化しなかった。 実施例 ７20％脂肪エマルジョン（大豆油）の製造 次の成分を使用して、水中油エマルジョン（バッチの大きさ200ｇ）を製造し た。 成 分 ％ 乳化剤 1.5 大豆油 20.0 グリセロール(99％) 2.3 水 添加して100.0にする量 乳化剤、すなわちガラクトリピドを、水の一部に分散しそして水和化した。そ れから、グリセロールおよび残りの水を加えそして混合した。この水性分散液を 、60MPaおよび40℃で２サイクルの高圧 均質化に付した。40℃に予備加熱した大豆油を、13,000rpmで10分の高剪断混合 下で、水性分散液に加えた。それから、このプレエマルジョンを、80MPaおよび4 0℃で６サイクルの均質化をした(Mini-Lab 8.30H; APV Rannie AS，Denmark)。 室温に冷却した後、エマルジョンを、２ＭNaOH溶液を使用してpH7.2に調節した 。 表４は、実施例１〜７に記載したエマルジョンの平均小滴の大きさ（nm）を要 約するものである。 さらに、表４にゼータ電位値（mV）を示した。これは、エマルジョン小滴が、 エマルジョンの良好な貯蔵寿命を意味する有意な陰電荷を有していることを示す 。 実施例 ８20％脂肪エマルジョン（GLA９％を含有する宵待草油）の製造 次の成分を使用して、水中油エマルジョン（バッチの大きさ200ｇ）を製造し た。 成 分 ％ 乳化剤（水素添加した） 1.02 宵待草油 20.46 水 添加して100.0にする量 乳化剤、すなわち水素添加したガラクトリピドを、油中に分散させた。油相お よび水を、それぞれ62℃および73℃に予備加熱しそして14,000rpmで2.5分の高剪 断混合下で、油相を水に加えた。それから、このプレエマルジョンを、80MPaお よび56℃で７サイクルの均質化をした（Mini-Lab 8.30H; APV Rannie AS，Denma rk）。この処方は、240nmの平均小滴大きさを有するエマルジョンを与えた。ゼ ータ電位は、−57mVであった。 実施例 ９20％脂肪エマルジョン（GLA９％を含有する宵待草油）の製造 次の成分を使用して、水中油エマルジョン（バッチの大きさ200ｇ）を製造し た。 成 分 ％ 濃縮した乳化剤 1.01 宵待草油 20.16 水 添加して100.0にする量 乳化剤、すなわち濃縮したガラクトリピドを、油中に分散させた。油相および 水を、それぞれ64℃および63℃に予備加熱しそして、13,500rpmで2.5分の高剪断 混合下で、油相を水に加えた。それからこのプレエマルジョンを、80MPaおよび5 0℃で７サイクルの均質化をした（Mini-Lab 8.30H; APV Rannie AS，Denmark） 。この処方は、260nmの平均小滴大きさおよび−50mVのゼータ電位を有するエマ ル ジョンを与える。 実施例 1040％脂肪エマルジョン（GLA９％を含有する宵待草油）の製造 次の成分を使用して、水中油エマルジョン（バッチの大きさ300ｇ）を製造し た。 成 分 ％ 乳化剤 1.99 宵待草油 39.55 ビタミンＥアセテート 1.08 アンモニウムホスファチドＥ442 0.10 パルミチン酸アスコルビル 0.02 シュクロース 14.08 レモン香味料 2.00 ソルビン酸カリウム 0.10 クエン酸 0.01 水 添加して100.0にする量 乳化剤および抗酸化剤を、油中に分散させた。シュクロース、防腐剤、香味料 および水を混合した。油相および水性相を、それぞれ60℃および68℃に予備加熱 しそして17,000rpmで４分の高剪断混合下で、油相を水性相に加えた。それから 、このプレエマルジョンを、80MPaおよび60℃で５サイクルの均質化をした(Mini -Lab 8.30H; APV Rannie AS，Denmark)。この処方は、230nmの平均小滴大きさお よび−72mVのゼータ電位を有するエマルジョンを与える。pHは、5.8であった。 実施例 11 36％脂肪エマルジョン（GLA９％を含有する宵待草油）の製造 次の成分を使用して、水中油エマルジョン（バッチの大きさ2300ｇ）を製造し た。 成 分 ％ 乳化剤 1.80 宵待草油 35.97 ビタミンＥアセテート 1.09 アンモニウムホスファチドＥ442 0.10 パルミチン酸アスコルビル 0.02 シュクロース 15.00 バナナ香味料 2.00 ソルビン酸カリウム 0.10 水 添加して100.0にする量 乳化剤および抗酸化剤を、油中に分散させた。シュクロース、防腐剤、香味料 および水を混合した。油相および水性相を、それぞれ58℃および63℃に予備加熱 しそして16,000rpmで7.5分の高剪断混合下で、油相を水性相に加えた。それから 、このプレエマルジョンを、全体で二段階にわたって50MPaの圧力および10MPaの 圧力で均質化した（Model LAB，Type 12.51H; APV Rannie AS，Denmark）。流れ は0.82ｌ／分であり、全時間は12分でありそして温度は48℃である。この処方は 、230nmの平均小滴の大きさおよび−72mVのゼータ電位を有するエマルジョンを 与える。 実施例 1240％脂肪エマルジョン(GLA20％を含有する濃縮した宵待草油)の製造 次の成分を使用して、水中油エマルジョン（バッチの大きさ300ｇ）を製造し た。 成 分 ％ 乳化剤 2.49 濃縮した宵待草油(GLA 20％) 39.85 ビタミンＥアセテート 0.39 アンモニウムホスファチドＥ442 0.10 パルミチン酸アスコルビル 0.02 シュクロース 15.04 レモン香味料 2.00 ソルビン酸カリウム 0.10 水 添加して100.0にする量 乳化剤および抗酸化剤を、油中に分散させた。シュクロース、防腐剤、香味料 および水を混合した。両方の相を65〜70℃に予備加熱しそして15,000rpmで3.5分 の高剪断混合下で、油を水性相に加えた。それから、このプレエマルジョンを、 80MPaおよび60℃で５サイクルの均質化をした（Mini-Lab 8.30H; APV Rannie AS ，Denmark）。この処方は、濃縮されたヨーグルト様コンシステンシーを有する エマルジョンを与える。 実施例 1311％脂肪エマルジョン(GLA80％を含有する濃縮され宵待草油)の製造 次の成分を含有する水中油エマルジョン100ｇを製造した。 成 分 ％ 濃縮された乳化剤 1.0 濃縮された宵待草油(GLA80％) 11.0 グリセロール(水中2.3％) 添加して100.0にする量 乳化剤、すなわち濃縮されたガラクトリピド物質を、窒素下で約50℃の油中に 溶解した。グリセロールおよび水を混合した。12,000rpmで30秒の高剪断混合下 で、水性相を油相に加えた。このプレエマルジョンを、35℃に加熱し、そして83 MPaで５分均質化した(EmulsiFlex-C30，Avestin Inc.，Canada)。得られたエマ ルジョンは、224nmの平均小滴の大きさおよび−40mVのゼータ電位を有しそして0 .22μmの孔大きさを有する膜フィルターを通して容易に濾過された。 実施例 1420％脂肪エマルジョン（GLA70％を含有する遊離脂肪酸）の製造 次の成分を含有する水中油エマルジョン50ｇを製造した。 成 分 ％ 濃縮された乳化剤 2.5 遊離酸(GLA70％) 20.0 グリセロール（水中2.3％） 添加して100.0にする量 乳化剤、すなわち濃縮されたガラクトリピド物質を、窒素下で約50℃の遊離脂 肪酸中に溶解した。グリセロールおよび水を混合した。12.000rpmで30秒の高剪 断混合下で、水性相を油相に加えた。このプレエマルジョンを35℃に加熱しそし て86MPaで6.5分均質化した(EmulsiFlex-C30，Avestin Inc.，Canada)。得られた エマルジョンは、211nmの平均小滴の大きさおよび−40mVのゼータ電位を有しそ して0.22μmの孔大きさを有する膜フィルターを通して容易に濾過された。 実施例 1539％脂肪エマルジョン（エイコサペンタエン酸(EPA)に富んだイワシ油）の製造 次の成分を使用して、水中油エマルジョン（バッチの大きさ250ｇ）を製造し た。 成 分 ％ 乳化剤 3.88 イワシ油 38.93 ビタミンＥアセテート 1.08 アンモニウムホスファチドＥ442 1.00 パルミチン酸アスコルビル 0.02 シュクロース 14.98 薄荷香味料 1.00 ソルビン酸カリウム 0.20 水 添加して100.0にする量 乳化剤および抗酸化剤を、油中に分散した。シュクロース、防腐剤、香味料お よび水を混合した。油相および水性相を、それぞれ57℃および51℃に予備加熱し そして16,000rpmで3.5分の高剪断混合下で油相を水性相に加えた。このプレエマ ルジョンを、80MPaおよび55℃で７サイクルの均質化をした(Mini-Lab 8.30H; AP V Rannie AS,Denmark)。この処方は、190nmの平均小滴大きさおよび−72mVのゼ ータ電位を有するエマルジョンを与える。 実施例 1639％脂肪エマルジョン（ドコサヘキサエン酸(DHA)に富んだマグロ魚油）の製造 次の成分を使用して、水中油エマルジョン（バッチの大きさ250ｇ）を製造し た。 成 分 ％ 乳化剤 3.91 マグロ魚油 39.08 ビタミンＥアセテート 1.10 アンモニウムホスファチドＥ442 1.00 パルミチン酸アスコルビル 0.02 シュクロース 14.90 薄荷香味料 1.00 ソルビン酸カリウム 0.20 水 添加して100.0にする量 乳化剤および抗酸化剤を、油中に分散させた。シュクロース、防腐剤、香味料 および水を混合した。油性および水性相を、それぞれ59℃および64℃に予備加熱 しそして16,000rpmで５分の高剪断混合下で、油相を水性相に加えた。予備エマ ルジョンを、80MPaおよび60℃で７サイクルの均質化をした(Mini-Lab 8.30H; AP V Rannie AS,Denmark)。この処方は、190nmの平均小滴大きさおよび−75mVのゼ ータ電位を有するエマルジョンを与える。 実施例 1740％脂肪エマルジョン（とうもろこし油）の製造 次の成分を使用して、水中油エマルジョン（バッチの大きさ200ｇ）を製造す る。 成 分 ％ 乳化剤 2.00 とうもろこし油 40.08 アンモニウムホスファチドＥ442 1.00 パルミチン酸アスコルビル 0.02 シュクロース 14.98 ソルビン酸カリウム 0.10 水 添加して100.0にする量 乳化剤および抗酸化剤を、油中に分散させた。シュクロース、防腐剤および水 を混合した。両方の相を65℃に予備加熱しそして15,000rpmで４分の高剪断混合 下で、油相を水性相に加えた。それから、このプレエマルジョンを、80MPaおよ び55℃で７サイクル均質化した（Mini-Lab 8.30H; APV Rannie AS，Denmark）。 この処方は、せまい大きさの分布および210nmの平均小滴大きさおよび−74mVの ゼータ電位を有するエマルジョンを与える。 実施例 182,6−ジイソプロピルフェノールを含有する11％非経口的脂肪エマルジョン（大 豆油）の製造 次の成分を使用して、薬理学的に活性な化合物を含有する水中油エマルジョン （バッチの大きさ１５０ｇ）を製造した。 成 分 ％ 乳化剤 1.27 大豆油 10.57 2,6−ジイソプロピルフェノール 1.05 グリセロール(99％) 2.24 水 添加して100.0にする量 乳化剤、すなわちガラクトリピドおよび麻酔薬である活性成分を、 大豆油中に溶解させた。グリセロールおよび水を混合した。水性分散液および薬 剤−含有油相を、それぞれ72℃および68℃に予備加熱した。13,000rpmで１.５分 の高剪断混合下で、油相を水性分散液に加えた。このプレエマルジョンを、80MP aおよび48℃で７サイクルの均質化をした（Mini-Lab 8.30H; APV Rannie AS，De nmark）。形成したエマルジョンは、170nmの平均小滴大きさおよび−63mVのゼー タ電位を有する。ミクロン浸透圧計(Type 13; Hermann RoeblingMesstechnik，G ermany)で測定した浸透圧は、257ミリオスモル／kgH₂Oである。 結論 本発明に関する本発明者等の知見は、オートクレーブ処理することができそし て厳しい機械的処理に対して抵抗性であるという重要なそして必要な必要条件を 満足するガラクトリピド物質に基づく著しく安定な水中油エマルジョンを製造す ることができるということである。このエマルジョンは、非経口的および静脈内 使用に適した粒子の大きさの分布を有している。このエマルジョンは、不快な臭 または味を示さないそしてこのエマルジョンは、酸化に対して著しく安定である 。本発明は、リン脂質エマルジョンに比較して具体的な利点を与えるリン脂質エ マルジョンに代わるエマルジョンを与える。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ)，ＡＭ， ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，Ｃ Ｎ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ， ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，Ｍ Ｘ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ， ＶＮ (72)発明者 ヘルスリヨーヴ，ベンクト スウエーデン国エス−114 21 ストツク ホルム．ブルンベルスヴエイエン２

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．乳化剤が少なくとも50％のジガラクトシルジアシルグリセロールおよび残り の他の極性脂質からなるガラクトリピド物質であることを特徴とする、全製剤の 0.01〜50重量％、好ましくは0.1〜10重量％の乳化剤および全製剤の0.1〜70重量 ％の極性溶剤中の乳化された油性物質からなる水中油エマルジョン。 ２．ガラクトリピド物質が約70〜80％のジガラクトシルジアシルグリセロールお よび20〜30％の他の極性脂質からなる請求項１記載のエマルジョン。 ３．ガラクトリピド物質が100％までのジガラクトシルジアシルグリセロールか らなる請求項１または２記載のエマルジョン。 ４．油性物質が遊離酸、その塩またはエステルの形態のγ−リノレン酸からなる 請求項１〜３の何れかの項記載のエマルジョン。 ５．油性物質が宵待草油またはボラゴ油を基にしたものである請求項１〜４の何 れかの項記載のエマルジョン。 ６．医薬、栄養または化粧組成物における活性物質に対する担体としての請求項 １〜５の何れかの項記載のエマルジョンの使用。 ７．治療的に活性な物質と組み合わされた請求項１〜３の何れかの項記載の水中 油エマルジョンからなる医薬組成物。 ８．油性物質が遊離酸、その塩またはエステルの形態のγ−リノレン酸からなる 請求項７記載の医薬組成物。 ９．油性物質が宵待草油またはボラゴ油を基にしたものである請求項７または８ 記載の医薬組成物。 10．油性物質がトリアシルグリセロール油、好ましくは中鎖トリアシルグリセロ ール(MCT)油または生活性物質である請求項７記載 の医薬組成物。 11．治療的に有効な量の治療的に活性な物質； 全組成物の0.1〜5.0重量％のガラクトリピド乳化剤； 全組成物の１〜50重量％の油性物質； 場合によっては、等張化に有効な量の等張化剤；および 極性溶剤 からなる請求項７〜10の何れかの項記載の医薬組成物。 12．全組成物の 0.2〜３重量％の2,6−ジイソプロピルフェノール、 0.3〜５重量％のガラクトリピド物質、 ５〜30重量％のトリアシルグリセロール油、 等張化に有効な量の等張化剤 添加して100％にする量の水 からなる請求項10または11記載の非経口的投与用の医薬組成物。 13．経口的、経腸的、非経口的、直腸的、経腟的、局所的、経眼的、経鼻的また は経耳的投与用の請求項７〜11の何れかの項記載の医薬組成物。