JPH0843739A - 走査型光学顕微鏡 - Google Patents
走査型光学顕微鏡Info
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- JPH0843739A JPH0843739A JP12515095A JP12515095A JPH0843739A JP H0843739 A JPH0843739 A JP H0843739A JP 12515095 A JP12515095 A JP 12515095A JP 12515095 A JP12515095 A JP 12515095A JP H0843739 A JPH0843739 A JP H0843739A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】測光分離手段として波長依存性のあるフィルタ
類を使用することなく、多重染色時の蛍光クロスオーバ
のないＳ／Ｎのよい蛍光検出の可能な走査型光学顕微鏡
を得る。 【構成】少なくとも単一波長以上のレーザビームを出射
し標本１９に照射するレーザ光源手段（レーザ光源１，
ビームエクスパンダ２，ダイクロイックミラー４，ＸＹ
走査光学系５，瞳投影レンズ６，顕微鏡７）と、標本１
９より発せられる蛍光を測光用光路上に配置されたグレ
ーティング９と単一以上の可変幅スリット（１０，１
１，１２）を経由してこのスリット１０〜１２に該当す
る光検出器１３，１４，１５に導く測光分離手段を具備
したことを特徴とする走査型光学顕微鏡。
類を使用することなく、多重染色時の蛍光クロスオーバ
のないＳ／Ｎのよい蛍光検出の可能な走査型光学顕微鏡
を得る。 【構成】少なくとも単一波長以上のレーザビームを出射
し標本１９に照射するレーザ光源手段（レーザ光源１，
ビームエクスパンダ２，ダイクロイックミラー４，ＸＹ
走査光学系５，瞳投影レンズ６，顕微鏡７）と、標本１
９より発せられる蛍光を測光用光路上に配置されたグレ
ーティング９と単一以上の可変幅スリット（１０，１
１，１２）を経由してこのスリット１０〜１２に該当す
る光検出器１３，１４，１５に導く測光分離手段を具備
したことを特徴とする走査型光学顕微鏡。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は単一以上の蛍光検出光学
系と蛍光観察光学系を具備した走査型光学顕微鏡に関す
る。
系と蛍光観察光学系を具備した走査型光学顕微鏡に関す
る。
【０００２】
＜第１従来例＞従来、蛍光観察が可能な走査型光学顕微
鏡として、米国特許４９９７２４２号明細書に開示され
ており、これは単一波長のレーザ光源を用いて単一、あ
るいは二つの蛍光観察を行うもので、図７はその第１従
来例を説明するための図である。図７に示すように、レ
ーザ発振器２４から射出されたレーザビームは、以下に
述べる光学走査部材２５により走査される。
鏡として、米国特許４９９７２４２号明細書に開示され
ており、これは単一波長のレーザ光源を用いて単一、あ
るいは二つの蛍光観察を行うもので、図７はその第１従
来例を説明するための図である。図７に示すように、レ
ーザ発振器２４から射出されたレーザビームは、以下に
述べる光学走査部材２５により走査される。
【０００３】すなわち、ビームスプリッタ２３により反
射され、第１ガルバノメータスキャナを構成するガルバ
ノメータ４６ａと平面鏡３５ａ、および凹面鏡４２ａ，
４２ｂならびにガルバノメータスキャナを構成するガル
バノメータ４６ｂと平面鏡３５ｂにより２次元走査した
のち顕微鏡を通して標本上に照射される。これによって
標本に発した蛍光は逆の光路をたどり、ビームスプリッ
タ３２を通過したのち、単一蛍光時はフォトマルチプラ
イヤ３０へ、また二つの蛍光時はビームスプリッタ３２
により分光され、各々フォトマルチプライヤ３０、フォ
トマルチプライヤ３４によって検出される。なお、以上
述べた構成以外に、接眼レンズ２７、アイリス用ダイヤ
フラム３１，３３を備えている。
射され、第１ガルバノメータスキャナを構成するガルバ
ノメータ４６ａと平面鏡３５ａ、および凹面鏡４２ａ，
４２ｂならびにガルバノメータスキャナを構成するガル
バノメータ４６ｂと平面鏡３５ｂにより２次元走査した
のち顕微鏡を通して標本上に照射される。これによって
標本に発した蛍光は逆の光路をたどり、ビームスプリッ
タ３２を通過したのち、単一蛍光時はフォトマルチプラ
イヤ３０へ、また二つの蛍光時はビームスプリッタ３２
により分光され、各々フォトマルチプライヤ３０、フォ
トマルチプライヤ３４によって検出される。なお、以上
述べた構成以外に、接眼レンズ２７、アイリス用ダイヤ
フラム３１，３３を備えている。
【０００４】このような構成のものにおいて、図示しな
い標本からの蛍光は、接眼レンズ２７、平面鏡３５ｂ、
凹面鏡４２ａ，４２ｂを反射した後、平行光線となり、
平面鏡３５ａで反射され、アイリス用ダイヤフラム３
１，３３を通過してフォトマルチプライヤ３０，３４で
検出される。
い標本からの蛍光は、接眼レンズ２７、平面鏡３５ｂ、
凹面鏡４２ａ，４２ｂを反射した後、平行光線となり、
平面鏡３５ａで反射され、アイリス用ダイヤフラム３
１，３３を通過してフォトマルチプライヤ３０，３４で
検出される。
【０００５】以上述べた第１従来例の結像光学系は、ダ
イヤフラム３１，３３から凹面鏡４２ａまでの光路を大
きくとることによって、共焦点効果が得られる。対物レ
ンズが焦点位置の時に標本からの蛍光は、凹面鏡４２ａ
からフォトマルチプライヤ３４までの間で平行光線にな
るので、フォトマルチプライヤ３４に導かれる光ビーム
直径は、ダイヤフラム３１，３３の直径で決定される。
イヤフラム３１，３３から凹面鏡４２ａまでの光路を大
きくとることによって、共焦点効果が得られる。対物レ
ンズが焦点位置の時に標本からの蛍光は、凹面鏡４２ａ
からフォトマルチプライヤ３４までの間で平行光線にな
るので、フォトマルチプライヤ３４に導かれる光ビーム
直径は、ダイヤフラム３１，３３の直径で決定される。
【０００６】＜第２従来例＞図８に示すように、レーザ
光源１からのレーザビームは、適宜なるビーム直径に拡
大するための光学系であるビームエキスパンダ２を通
り、ビーム直径を拡大した後、レーザ波長を選択するた
めのレーザラインフィルタ３でレーザ波長を選択してダ
イクロイックミラー４で反射され、ガルバノミラー等の
ＸーＹ走査光学系５でＸＹ偏光され、瞳レンズ６、顕微
鏡７を介してレーザビームは標本１９上に照射され、標
本１９をビーム走査することになる。
光源１からのレーザビームは、適宜なるビーム直径に拡
大するための光学系であるビームエキスパンダ２を通
り、ビーム直径を拡大した後、レーザ波長を選択するた
めのレーザラインフィルタ３でレーザ波長を選択してダ
イクロイックミラー４で反射され、ガルバノミラー等の
ＸーＹ走査光学系５でＸＹ偏光され、瞳レンズ６、顕微
鏡７を介してレーザビームは標本１９上に照射され、標
本１９をビーム走査することになる。
【０００７】これにより励起された標本１９からの蛍光
は、顕微鏡７からのダイクロイックミラー４に至る経路
を戻り、ダイクロイックミラー４を通過した光は、ダイ
クロイックミラー６４で分光され、一方は結像レンズ７
１を通り、共焦点絞り７４を通って光検出器１５で検出
される。
は、顕微鏡７からのダイクロイックミラー４に至る経路
を戻り、ダイクロイックミラー４を通過した光は、ダイ
クロイックミラー６４で分光され、一方は結像レンズ７
１を通り、共焦点絞り７４を通って光検出器１５で検出
される。
【０００８】同様に、他方はダイクロイックミラー６５
で分光され、結像レンズ７２を通り、共焦点絞り７５を
通って光検出器１４で検出され、またダイクロイックミ
ラー６５を通過した蛍光は、ミラー６６で反射され、結
像レンズ７３を通り、共焦点絞り７６を通って光検出器
１３で検出される。
で分光され、結像レンズ７２を通り、共焦点絞り７５を
通って光検出器１４で検出され、またダイクロイックミ
ラー６５を通過した蛍光は、ミラー６６で反射され、結
像レンズ７３を通り、共焦点絞り７６を通って光検出器
１３で検出される。
【０００９】以上述べた第２従来例は、結像レンズ７１
の焦点距離ｆと共焦点絞り７４へ光検出器１５までの距
離ｌを適当に設定することにより、光検出器１５の受光
領域に標本１９からの蛍光を導くことができる。同様
に、結像レンズ７２，７３の焦点距離ｆと共焦点絞り７
５，７６へ光検出器１４，１３までの距離ｌを適当に設
定することにより、光検出器１４，１３の受光領域に標
本１９からの蛍光を導くことができる。
の焦点距離ｆと共焦点絞り７４へ光検出器１５までの距
離ｌを適当に設定することにより、光検出器１５の受光
領域に標本１９からの蛍光を導くことができる。同様
に、結像レンズ７２，７３の焦点距離ｆと共焦点絞り７
５，７６へ光検出器１４，１３までの距離ｌを適当に設
定することにより、光検出器１４，１３の受光領域に標
本１９からの蛍光を導くことができる。
【００１０】＜第３従来例＞図９は図８を以下のように
構成したものである。すなわち、図８のダイクロイック
ミラー６４，６５と光検出器１５，１４の間にそれぞれ
配設されている結像レンズ７１，７２と共焦点絞り７
４，７５ならびにミラー６６と光検出器１３の間に配設
されている結像レンズ７３と共焦点絞り７６を設けず、
ダイクロイックミラー４と６４の間に結像レンズ７７と
共焦点絞り７８を設けたものである。
構成したものである。すなわち、図８のダイクロイック
ミラー６４，６５と光検出器１５，１４の間にそれぞれ
配設されている結像レンズ７１，７２と共焦点絞り７
４，７５ならびにミラー６６と光検出器１３の間に配設
されている結像レンズ７３と共焦点絞り７６を設けず、
ダイクロイックミラー４と６４の間に結像レンズ７７と
共焦点絞り７８を設けたものである。
【００１１】このように第３従来例のように構成にする
と、図８と同様な機能が得られると共に、図８の従来例
に比べて装置が簡単になり、コストダウンとなる。 ＜第４従来例＞また、従来、蛍光検出が可能な走査型光
学顕微鏡として、米国特許５１２７７３０号明細書に開
示されており、これは複数の波長のレーザ光源を用い
て、２つの蛍光を検出するもので、図１０はその第４従
来例を説明するための図である。レーザ光源５０とし
て、４８８ｎｍ，５６８ｎｍ，６４７ｎｍのレーザ光を
同時発振するＫｒ−Ａｒレーザ光源５０を用いている。
と、図８と同様な機能が得られると共に、図８の従来例
に比べて装置が簡単になり、コストダウンとなる。 ＜第４従来例＞また、従来、蛍光検出が可能な走査型光
学顕微鏡として、米国特許５１２７７３０号明細書に開
示されており、これは複数の波長のレーザ光源を用い
て、２つの蛍光を検出するもので、図１０はその第４従
来例を説明するための図である。レーザ光源５０とし
て、４８８ｎｍ，５６８ｎｍ，６４７ｎｍのレーザ光を
同時発振するＫｒ−Ａｒレーザ光源５０を用いている。
【００１２】レーザ光源５０より発振された３つの波長
のレーザ光５１は、励起フィルタ５２のデュアルバンド
パスフィルタ５２ａで４８８ｎｍと５６８ｎｍの２つと
なり、デュアルダイクロイックミラー５４により図の下
方の対物レンズ（図示せず）を介して蛍光標本５５に導
かれる。標本５５から蛍光として発光された２種類の波
長は、前記対物レンズ、デュアルダイクロイックミラー
５４を透過し反射鏡５６で反射され、フィルタブロック
５７に導かれる。そして、フィルタブロック５７に有す
る測光用ダイクロイックミラー５７ａにより、１つ１つ
の波長に分光されフィルタ５７ｂおよび５７ｃをそれぞ
れ介してフォトマルチプライヤ（ＰＭＴ）５８及び５９
により検出される。
のレーザ光５１は、励起フィルタ５２のデュアルバンド
パスフィルタ５２ａで４８８ｎｍと５６８ｎｍの２つと
なり、デュアルダイクロイックミラー５４により図の下
方の対物レンズ（図示せず）を介して蛍光標本５５に導
かれる。標本５５から蛍光として発光された２種類の波
長は、前記対物レンズ、デュアルダイクロイックミラー
５４を透過し反射鏡５６で反射され、フィルタブロック
５７に導かれる。そして、フィルタブロック５７に有す
る測光用ダイクロイックミラー５７ａにより、１つ１つ
の波長に分光されフィルタ５７ｂおよび５７ｃをそれぞ
れ介してフォトマルチプライヤ（ＰＭＴ）５８及び５９
により検出される。
【００１３】このように、図１０に示す走査型光学顕微
鏡によれば、複数の波長を発振するマルチラインレーザ
光源を組み合わせて、２重励起観察を行うことができ
る。 ＜第５従来例＞一方、第５従来例には、３つの蛍光を検
出する走査型光学顕微鏡が開示され、図１１はこれを説
明するための図である。レーザ光源１６０より発振され
た４８８ｎｍと５１４ｎｍのレーザビーム１６１は、エ
クスターナルフィルタ１６２により、どちらか１つの波
長のみが透過される。
鏡によれば、複数の波長を発振するマルチラインレーザ
光源を組み合わせて、２重励起観察を行うことができ
る。 ＜第５従来例＞一方、第５従来例には、３つの蛍光を検
出する走査型光学顕微鏡が開示され、図１１はこれを説
明するための図である。レーザ光源１６０より発振され
た４８８ｎｍと５１４ｎｍのレーザビーム１６１は、エ
クスターナルフィルタ１６２により、どちらか１つの波
長のみが透過される。
【００１４】そして、ビームスプリッタ１６３により、
図示下方に反射されＸＹスキャニングユニット１６４を
通り、光学顕微鏡内の接眼レンズ１６６および対物レン
ズ１６７を通り標本１６５に集光される。この場合、標
本１６５面はスキャニングユニット１６４で、標本１６
５面を２次元に走査される。すると、標本１６５より発
光した蛍光は、対物レンズ１６７、接眼レンズ１６６、
スキャニングユニット１６４を通る。
図示下方に反射されＸＹスキャニングユニット１６４を
通り、光学顕微鏡内の接眼レンズ１６６および対物レン
ズ１６７を通り標本１６５に集光される。この場合、標
本１６５面はスキャニングユニット１６４で、標本１６
５面を２次元に走査される。すると、標本１６５より発
光した蛍光は、対物レンズ１６７、接眼レンズ１６６、
スキャニングユニット１６４を通る。
【００１５】そして、ビームスプリッタ１６３を透過
し、２波長測光の場合はビームスプリッタ１６８により
分光され、この一方はフォトマルチプライヤ１７４に導
かれ、ビームスプリッタ１６８の他方の分光はビームス
プリッタ１６９により分光され、この一方はフィルタ１
７２を介してフォトマルチプライヤ１７３により検出さ
れ、ビームスプリッタ１６９の分光の他方はフィルタ１
７０を介してフォトマルチプライヤ１７１により検出さ
れる。
し、２波長測光の場合はビームスプリッタ１６８により
分光され、この一方はフォトマルチプライヤ１７４に導
かれ、ビームスプリッタ１６８の他方の分光はビームス
プリッタ１６９により分光され、この一方はフィルタ１
７２を介してフォトマルチプライヤ１７３により検出さ
れ、ビームスプリッタ１６９の分光の他方はフィルタ１
７０を介してフォトマルチプライヤ１７１により検出さ
れる。
【００１６】このようにして標本１６５に適宜、照射さ
れたレーザ光１６１からの蛍光はビームスプリッタ１６
３を通過し、ビームスプリッタ１６８及び１６９により
分光され、各々、フォトマルチプライヤ１７１，１７
３，１７４によって検出される。
れたレーザ光１６１からの蛍光はビームスプリッタ１６
３を通過し、ビームスプリッタ１６８及び１６９により
分光され、各々、フォトマルチプライヤ１７１，１７
３，１７４によって検出される。
【００１７】近年、蛍光観察においては、単染色のみな
らず、多重染色が多用されている。もとより蛍光染色は
細胞、組織内の特定対象を可視化（特異性）する為に行
う。故に多重染色時は各々の染色部位が明確な色の差、
即ち蛍光波長の違いとして標識されなければならない。
らず、多重染色が多用されている。もとより蛍光染色は
細胞、組織内の特定対象を可視化（特異性）する為に行
う。故に多重染色時は各々の染色部位が明確な色の差、
即ち蛍光波長の違いとして標識されなければならない。
【００１８】ところで蛍光染色には極めて多種の方法が
あり、多重染色を行うと蛍光波長に部分的な重なり部分
（クロスオーバ部分）が生じることがあり、図１２はそ
れを示している。
あり、多重染色を行うと蛍光波長に部分的な重なり部分
（クロスオーバ部分）が生じることがあり、図１２はそ
れを示している。
【００１９】
【発明が解決しようとする課題】前述した第１従来例で
は、凹面鏡４２ａ，４２ｂからダイアフラム３１，３３
までの光路長を、共焦点効果を得るために、大きく取ら
ねばならないので、装置が大型化する。さらに第１従来
例を小型化するために、図７のミラー１００ａ，１００
ｂ，１００ｃのように反射させねばならないが、これは
光量をロスする原因になる。
は、凹面鏡４２ａ，４２ｂからダイアフラム３１，３３
までの光路長を、共焦点効果を得るために、大きく取ら
ねばならないので、装置が大型化する。さらに第１従来
例を小型化するために、図７のミラー１００ａ，１００
ｂ，１００ｃのように反射させねばならないが、これは
光量をロスする原因になる。
【００２０】図８の第２従来例では、各チャンネルに共
焦点絞り７４〜７６および結像レンズ１５，１４，１３
を必要とするので、装置が複雑になり、コスト高とな
る。図９の第３従来例では、ダイクロイックミラー６
４，６５を配置し、３チャンネル構成となっているの
で、光検出器１４は１５よりも光路長が大きくなり、ま
た光検出器１３は１４よりも光路長が大きくなる。従っ
て、光検出器１３，１４の受光領域に光ビームが完全に
導かれなくなる。
焦点絞り７４〜７６および結像レンズ１５，１４，１３
を必要とするので、装置が複雑になり、コスト高とな
る。図９の第３従来例では、ダイクロイックミラー６
４，６５を配置し、３チャンネル構成となっているの
で、光検出器１４は１５よりも光路長が大きくなり、ま
た光検出器１３は１４よりも光路長が大きくなる。従っ
て、光検出器１３，１４の受光領域に光ビームが完全に
導かれなくなる。
【００２１】図９の第３従来例では、光検出器１５，１
４，１３の受光領域にロスなく標本１９からの蛍光を導
くには、結像レンズ７７の焦点距離ｆを大きくしなけれ
ばならない。しかし、焦点距離ｆを大きくすると、装置
が大型化するという欠点がある。
４，１３の受光領域にロスなく標本１９からの蛍光を導
くには、結像レンズ７７の焦点距離ｆを大きくしなけれ
ばならない。しかし、焦点距離ｆを大きくすると、装置
が大型化するという欠点がある。
【００２２】また図１０の第４従来例または図１１の第
５従来例では、これら多重染色による複数の蛍光波長を
分割する手段として、ビームスプリッタ（ダイクロイッ
クミラー）５４または１６３を使用し、更に検出する蛍
光波長を限定する為に、様々な種類のシャープカットフ
ィルタやバンドパスフィルタ５２ａ，５２ｂ，５２ｃ、
５７ａ，５７ｂ，５７ｃまたは１６８，１６９，１７
０，１７２を使用する必要がある。これらは使用するレ
ーザ波長や蛍光染色に合わせ、その都度準備する必要も
ある。
５従来例では、これら多重染色による複数の蛍光波長を
分割する手段として、ビームスプリッタ（ダイクロイッ
クミラー）５４または１６３を使用し、更に検出する蛍
光波長を限定する為に、様々な種類のシャープカットフ
ィルタやバンドパスフィルタ５２ａ，５２ｂ，５２ｃ、
５７ａ，５７ｂ，５７ｃまたは１６８，１６９，１７
０，１７２を使用する必要がある。これらは使用するレ
ーザ波長や蛍光染色に合わせ、その都度準備する必要も
ある。
【００２３】一般的に、これらの波長依存性のあるフィ
ルタ類５２ａ〜５２ｃ、５７ａ〜５７ｃ、１６８〜１７
０，１７２は非線形性であり、蛍光波長のクロスオーバ
を取り除こうとすると、蛍光量のかなりの部分を検出す
る前に捨て去ることとなる。このことにより、検出のＳ
／Ｎが落ちる。また染色の種類によっては蛍光波長のク
ロスオーバが大きいものも存在する。従って、前述した
第４従来例または第５従来例では該検出そのものが不可
能となる。
ルタ類５２ａ〜５２ｃ、５７ａ〜５７ｃ、１６８〜１７
０，１７２は非線形性であり、蛍光波長のクロスオーバ
を取り除こうとすると、蛍光量のかなりの部分を検出す
る前に捨て去ることとなる。このことにより、検出のＳ
／Ｎが落ちる。また染色の種類によっては蛍光波長のク
ロスオーバが大きいものも存在する。従って、前述した
第４従来例または第５従来例では該検出そのものが不可
能となる。
【００２４】本発明の第１の目的は前記不具合を解消
し、多重染色時の各々の蛍光波長を検出するための波長
依存性のあるフィルタ類を使用することなく、Ｓ／Ｎの
良い検出を行うことができる走査型光学顕微鏡を提供す
ることにある。
し、多重染色時の各々の蛍光波長を検出するための波長
依存性のあるフィルタ類を使用することなく、Ｓ／Ｎの
良い検出を行うことができる走査型光学顕微鏡を提供す
ることにある。
【００２５】本発明の第２の目的は前記不具合を解消
し、標本を反射して得られる蛍光を光検出器にロスなく
導くことができ、しかも小型で安価となる走査型光学顕
微鏡を提供することにある。
し、標本を反射して得られる蛍光を光検出器にロスなく
導くことができ、しかも小型で安価となる走査型光学顕
微鏡を提供することにある。
【００２６】
【課題を解決するための手段】前記目的を達成するた
め、請求項１に対応する発明は、少なくとも単一波長の
レーザビームを走査して標本に照射するレーザ光源手段
と、前記標本からの光を検出する検出光学系と、前記標
本からの光を結像する結像光学系と、この結像光学系の
焦点位置に配置された共焦点絞りと、この共焦点絞りを
通過した蛍光を複数の波長に分ける少なくとも１個のグ
レーティングと、このグレーティングにより分光された
前記標本からの光を検出する光検出器と、この光検出器
に前記グレーティングからの導入される光の幅を可変可
能な少なくとも１個のスリットと、を具備したことを特
徴とする走査型光学顕微鏡である。
め、請求項１に対応する発明は、少なくとも単一波長の
レーザビームを走査して標本に照射するレーザ光源手段
と、前記標本からの光を検出する検出光学系と、前記標
本からの光を結像する結像光学系と、この結像光学系の
焦点位置に配置された共焦点絞りと、この共焦点絞りを
通過した蛍光を複数の波長に分ける少なくとも１個のグ
レーティングと、このグレーティングにより分光された
前記標本からの光を検出する光検出器と、この光検出器
に前記グレーティングからの導入される光の幅を可変可
能な少なくとも１個のスリットと、を具備したことを特
徴とする走査型光学顕微鏡である。
【００２７】前記目的を達成するため、請求項２に対応
する発明は、前記レーザ光源手段として少なくとも二波
長以上のレーザビームを出射し標本に照射することを特
徴とする請求項１記載の走査型光学顕微鏡である。
する発明は、前記レーザ光源手段として少なくとも二波
長以上のレーザビームを出射し標本に照射することを特
徴とする請求項１記載の走査型光学顕微鏡である。
【００２８】前記目的を達成するため、請求項３に対応
する発明は、少なくとも単一波長のレーザビームを走査
して標本に照射するレーザ光源手段と、前記標本からの
光を検出する検出光学系と、前記標本からの光を結像す
る結像光学系と、この結像光学系の焦点位置に配置され
た共焦点絞りと、この共焦点絞りを通過した発散光を平
行光線にするコリメート光学系と、このコリメート光学
系の後方に配置され、所定の分光特性で前記標本からの
蛍光を分光する少なくとも１個のダイクロイックミラー
と、このダイクロイックミラーで分光された標本からの
光を検出する光検出器を具備したことを特徴とする走査
型光学顕微鏡である。
する発明は、少なくとも単一波長のレーザビームを走査
して標本に照射するレーザ光源手段と、前記標本からの
光を検出する検出光学系と、前記標本からの光を結像す
る結像光学系と、この結像光学系の焦点位置に配置され
た共焦点絞りと、この共焦点絞りを通過した発散光を平
行光線にするコリメート光学系と、このコリメート光学
系の後方に配置され、所定の分光特性で前記標本からの
蛍光を分光する少なくとも１個のダイクロイックミラー
と、このダイクロイックミラーで分光された標本からの
光を検出する光検出器を具備したことを特徴とする走査
型光学顕微鏡である。
【００２９】
【作用】請求項１に対応する発明によれば、単一波長の
レーザビームを標本に照射し、標本からくる蛍光が測光
分離手段により分離され、かつ光検出器によって検出さ
れるので、Ｓ／Ｎが良く、蛍光波長の分離ができる。
レーザビームを標本に照射し、標本からくる蛍光が測光
分離手段により分離され、かつ光検出器によって検出さ
れるので、Ｓ／Ｎが良く、蛍光波長の分離ができる。
【００３０】請求項２に対応する発明によれば、二波長
以上のレーザビームを標本に照射し、標本からくる蛍光
が測光分離手段により分離され、光検出器によって検出
されるので、請求項１に対応する発明に比べて更に多様
な蛍光波長の分離ができる。
以上のレーザビームを標本に照射し、標本からくる蛍光
が測光分離手段により分離され、光検出器によって検出
されるので、請求項１に対応する発明に比べて更に多様
な蛍光波長の分離ができる。
【００３１】請求項３に対応する発明によれば、少なく
とも１つのダイクロイックミラーで標本を反射して得ら
れる蛍光を光検出器にロスなく導くことができ、しかも
小型で安価となる。
とも１つのダイクロイックミラーで標本を反射して得ら
れる蛍光を光検出器にロスなく導くことができ、しかも
小型で安価となる。
【００３２】
【実施例】以下、本発明の実施例について図面を参照し
て説明する。 ＜第１実施例＞図１は本発明の走査型光学顕微鏡の第１
実施例の光学系を示す図である。本実施例は、レーザ光
源１は単一波長例えば４８８ｎｍのレーザビームを出射
し、標本１９に照射する。レーザ光源１からのレーザ光
は、後述するレーザ光源手段および測光分離手段に導か
れる。レーザ光源手段はビームエクスパンダ２、ダイク
ロイックミラー４、Ｘ−Ｙ走査光学系５、瞳投影レンズ
６、顕微鏡７を順次介して標本１９に導くように構成さ
れている。
て説明する。 ＜第１実施例＞図１は本発明の走査型光学顕微鏡の第１
実施例の光学系を示す図である。本実施例は、レーザ光
源１は単一波長例えば４８８ｎｍのレーザビームを出射
し、標本１９に照射する。レーザ光源１からのレーザ光
は、後述するレーザ光源手段および測光分離手段に導か
れる。レーザ光源手段はビームエクスパンダ２、ダイク
ロイックミラー４、Ｘ−Ｙ走査光学系５、瞳投影レンズ
６、顕微鏡７を順次介して標本１９に導くように構成さ
れている。
【００３３】また測光分離手段は、標本１９からの蛍光
をダイクロイックミラー４にて分離したのち、共焦点光
学系８、グレーティング９、幅を変更可能なスリット１
０，１１，１２、集光レンズ１６，１７，１８、光検出
器１３，１４，１５からなっている。
をダイクロイックミラー４にて分離したのち、共焦点光
学系８、グレーティング９、幅を変更可能なスリット１
０，１１，１２、集光レンズ１６，１７，１８、光検出
器１３，１４，１５からなっている。
【００３４】このような構成のものにおいて、標本１９
から発した蛍光は、顕微鏡７から共焦点光学系８を通過
したのち、グレーティング９に至る。勿論この時、共焦
点光学系８をバイパスさせることも可能である。グレー
ティング９に至った蛍光はその波長に合わせ、０次〜ｎ
次光に分けられる。これらの各次光には各々スリット１
０，１１，１２、集光レンズ１６，１７，１８、光検出
器１３，１４，１５が対応する。各々、スリット１０，
１１，１２の幅を変化させることで、検出する各々の蛍
光波長範囲が変更可能となる。
から発した蛍光は、顕微鏡７から共焦点光学系８を通過
したのち、グレーティング９に至る。勿論この時、共焦
点光学系８をバイパスさせることも可能である。グレー
ティング９に至った蛍光はその波長に合わせ、０次〜ｎ
次光に分けられる。これらの各次光には各々スリット１
０，１１，１２、集光レンズ１６，１７，１８、光検出
器１３，１４，１５が対応する。各々、スリット１０，
１１，１２の幅を変化させることで、検出する各々の蛍
光波長範囲が変更可能となる。
【００３５】以上述べた第１実施例によれば、測光分離
手段としてダイクロイックミラー、シャープカットフィ
ルタ、パンドパスフィルタ等の波長依存性のあるフィル
タ類を使用することがないので、多重染色時の蛍光クロ
スオーバのないＳ／Ｎのよい検出が可能になる。
手段としてダイクロイックミラー、シャープカットフィ
ルタ、パンドパスフィルタ等の波長依存性のあるフィル
タ類を使用することがないので、多重染色時の蛍光クロ
スオーバのないＳ／Ｎのよい検出が可能になる。
【００３６】＜第２実施例＞図２は、本発明の第２実施
例の光学系を示す図であり、前述の第１実施例のビーム
エクスパンダ２とダイクロイックミラー４の間の光路上
に、新たにダイクロイックミラー２２およびレーザライ
ンフィルタ３を設け、さらにダイクロイックミラー２２
には、単一あるいは複数波長同時発振レーザ光源２０か
らのレーザ光をビームエクスパンダ２に拡大して照射す
る構成ように構成されている。これ以外のダイクロイッ
クミラー４で反射された後、検出器１３，１４，１５に
至るまでの構成は第１実施例と同一である。
例の光学系を示す図であり、前述の第１実施例のビーム
エクスパンダ２とダイクロイックミラー４の間の光路上
に、新たにダイクロイックミラー２２およびレーザライ
ンフィルタ３を設け、さらにダイクロイックミラー２２
には、単一あるいは複数波長同時発振レーザ光源２０か
らのレーザ光をビームエクスパンダ２に拡大して照射す
る構成ように構成されている。これ以外のダイクロイッ
クミラー４で反射された後、検出器１３，１４，１５に
至るまでの構成は第１実施例と同一である。
【００３７】レーザ光源２０としては、４８８ｎｍ、５
６８ｎｍのＡｒーＫｒレーザ光源、３５１ｎｍのＡｒレ
ーザ光源を組合わせたものを用いる。以上述べた第２実
施例も、前述の第１実施例と同様な作用効果が得られ
る。すなわち、レーザ光源１，２０からの二波長以上の
レーザビームを標本１９に照射し、標本１９からくる蛍
光がグレーティング９により分離され、光検出器１３，
１４，１５によって検出されるので、Ｓ／Ｎが良く、第
１実施例に比べて更に多様な蛍光波長の分離ができる。
６８ｎｍのＡｒーＫｒレーザ光源、３５１ｎｍのＡｒレ
ーザ光源を組合わせたものを用いる。以上述べた第２実
施例も、前述の第１実施例と同様な作用効果が得られ
る。すなわち、レーザ光源１，２０からの二波長以上の
レーザビームを標本１９に照射し、標本１９からくる蛍
光がグレーティング９により分離され、光検出器１３，
１４，１５によって検出されるので、Ｓ／Ｎが良く、第
１実施例に比べて更に多様な蛍光波長の分離ができる。
【００３８】＜第３実施例＞図３は、本発明の第３実施
例の光学系を示す図であり、前述の第１実施例のレーザ
光源１を、例えば３５１ｎｍ，４５８ｎｍ，４８８ｎ
ｍ，５１４．５ｎｍのマルチラインＡｒレーザ光源から
なる複数波長同時発振レーザ光源２１に変更し、ビーム
エクスパンダ２とダイクロイックミラー４の間に、レー
ザラインフィルタ３を設けたものであり、これ以外の構
成は前述の第１実施例と同一である。
例の光学系を示す図であり、前述の第１実施例のレーザ
光源１を、例えば３５１ｎｍ，４５８ｎｍ，４８８ｎ
ｍ，５１４．５ｎｍのマルチラインＡｒレーザ光源から
なる複数波長同時発振レーザ光源２１に変更し、ビーム
エクスパンダ２とダイクロイックミラー４の間に、レー
ザラインフィルタ３を設けたものであり、これ以外の構
成は前述の第１実施例と同一である。
【００３９】第３実施例によれば、レーザ光源２１から
の二波長以上のレーザビームを標本１９に照射し、標本
１９からくる蛍光がグレーティング９により分離され、
光検出器１３，１４，１５によって検出されるので、Ｓ
／Ｎが良く、第１実施例に比べて更に多様な蛍光波長の
分離ができる。
の二波長以上のレーザビームを標本１９に照射し、標本
１９からくる蛍光がグレーティング９により分離され、
光検出器１３，１４，１５によって検出されるので、Ｓ
／Ｎが良く、第１実施例に比べて更に多様な蛍光波長の
分離ができる。
【００４０】＜第４実施例＞図４は、本発明の第４実施
例の光学系を示す図であり、図１の実施例と異なる点
は、以下のように構成したものである。すなわち、標本
１９からの反射光を集光する結像レンズ６１と、結像レ
ンズ６１の結像位置に配置された共焦点絞り６２と、こ
の共焦点絞り６２を通過する発散光（拡がり角をもつビ
ーム）を平行光線にするコリメート光学系６３と、この
コリメート光学系６３の後方に配置され、所定の分光特
性で標本１９からの蛍光を分光する２個のダイクロイッ
クミラー６４，６５と、ダイクロイックミラー６５の後
方に配置され、ダイクロイックミラー６５から得られる
分光を反射して光検出器１３に導くミラー６６を設けた
ものである。
例の光学系を示す図であり、図１の実施例と異なる点
は、以下のように構成したものである。すなわち、標本
１９からの反射光を集光する結像レンズ６１と、結像レ
ンズ６１の結像位置に配置された共焦点絞り６２と、こ
の共焦点絞り６２を通過する発散光（拡がり角をもつビ
ーム）を平行光線にするコリメート光学系６３と、この
コリメート光学系６３の後方に配置され、所定の分光特
性で標本１９からの蛍光を分光する２個のダイクロイッ
クミラー６４，６５と、ダイクロイックミラー６５の後
方に配置され、ダイクロイックミラー６５から得られる
分光を反射して光検出器１３に導くミラー６６を設けた
ものである。
【００４１】このような構成のものにおいて、コリメー
ト光学系６３により、共焦点絞り６２を通過した光（拡
散光）は平行光に変換される。従って、共焦点絞り６２
を通過した後の光を所定の波長毎に分光して異なる複数
の波長の光をそれぞれの光検出器１５，１４ならびに１
３によって測光することができる。
ト光学系６３により、共焦点絞り６２を通過した光（拡
散光）は平行光に変換される。従って、共焦点絞り６２
を通過した後の光を所定の波長毎に分光して異なる複数
の波長の光をそれぞれの光検出器１５，１４ならびに１
３によって測光することができる。
【００４２】この場合、共焦点絞り６２からどのような
距離に光検出器１５，１４，１３を配置しても、測定光
束はコリメート光学系６３により平行光に変換されるこ
とから、全光量がロスなく、ダイクロイックミラー６
４，６５、ミラー６６を介して光検出器１５，１４なら
びに１３に入射する。従って、ダイクロイックミラー６
４，６５、光検出器１５，１４ならびに１３は、光学上
の制約を受けることなく、自由に配置できる。
距離に光検出器１５，１４，１３を配置しても、測定光
束はコリメート光学系６３により平行光に変換されるこ
とから、全光量がロスなく、ダイクロイックミラー６
４，６５、ミラー６６を介して光検出器１５，１４なら
びに１３に入射する。従って、ダイクロイックミラー６
４，６５、光検出器１５，１４ならびに１３は、光学上
の制約を受けることなく、自由に配置できる。
【００４３】＜第５実施例＞図５は、本発明の第４実施
例の光学系を示す図であり、図４のコリメート光学系６
３を、以下のようなコリメート光学系６７としたもので
ある。すなわち、コリメート光学系６７は、片面が平面
の凸レンズ、片面が球面上の凸レンズとし、かつこの凸
レンズの平面側の面に図示しない蒸着膜にピンホールを
形成したものである。
例の光学系を示す図であり、図４のコリメート光学系６
３を、以下のようなコリメート光学系６７としたもので
ある。すなわち、コリメート光学系６７は、片面が平面
の凸レンズ、片面が球面上の凸レンズとし、かつこの凸
レンズの平面側の面に図示しない蒸着膜にピンホールを
形成したものである。
【００４４】このように構成することにより、コリメー
ト光学系６７を通過した光ビームは平行光線になり、ダ
イクロイックミラー６４，６５で分光され、光検出器１
５，１４ならびに１３に受光領域から外れることなく導
かれる。
ト光学系６７を通過した光ビームは平行光線になり、ダ
イクロイックミラー６４，６５で分光され、光検出器１
５，１４ならびに１３に受光領域から外れることなく導
かれる。
【００４５】コリメート光学系６７は、共焦点絞りを兼
ねているので、小型でかつ安価にできる。 ＜第６実施例＞図６（ａ）は、本発明の第６実施例の光
学系を示す図であり、図５の実施例のコリメート光学系
６７を、凸レンズ６７ａと凹レンズ６７ｂの組み合わせ
たものとし、測光分離手段はグレーティング９で構成
し、さらに光の幅を変更可能なスリット１０，１１，１
２、集光レンズ１６，１７，１８、光検出器１３，１
４，１５から構成したものである。
ねているので、小型でかつ安価にできる。 ＜第６実施例＞図６（ａ）は、本発明の第６実施例の光
学系を示す図であり、図５の実施例のコリメート光学系
６７を、凸レンズ６７ａと凹レンズ６７ｂの組み合わせ
たものとし、測光分離手段はグレーティング９で構成
し、さらに光の幅を変更可能なスリット１０，１１，１
２、集光レンズ１６，１７，１８、光検出器１３，１
４，１５から構成したものである。
【００４６】このような構成のものにおいて、図示しな
い標本から発した蛍光は、図示しない顕微鏡、瞳投影レ
ンズ、ＸーＹ走査光学系、ダイクロイックミラーを通過
し、結合レンズ６１、共焦点絞り６２、コリメート光学
系６７を通ってグレーティング９に至る。蛍光は、その
波長に合わせ、０次〜ｎ次光に分けられる。これらの各
次元には、各々スリット１０〜１２、集光レンズ１６〜
１８、光検出器１３〜１５が対応する。各々、スリット
１０〜１２の幅を変化させることで、検出する各々の蛍
光波長範囲が変更可能となる。
い標本から発した蛍光は、図示しない顕微鏡、瞳投影レ
ンズ、ＸーＹ走査光学系、ダイクロイックミラーを通過
し、結合レンズ６１、共焦点絞り６２、コリメート光学
系６７を通ってグレーティング９に至る。蛍光は、その
波長に合わせ、０次〜ｎ次光に分けられる。これらの各
次元には、各々スリット１０〜１２、集光レンズ１６〜
１８、光検出器１３〜１５が対応する。各々、スリット
１０〜１２の幅を変化させることで、検出する各々の蛍
光波長範囲が変更可能となる。
【００４７】第６実施例では、コリメート光学系６７
を、凸レンズ６７ａと凹レンズ６７ｂの組み合わせたも
のとすることにより、目的のビーム直径にするのに小型
化ができる。これは、図６（ｂ）に示すように、コリメ
ート光学系６７として凸レンズのみで構成した場合に比
べてである。なお、ビーム直径は、グレーティング９の
格子間隔に対して十分に大きくする必要がある。
を、凸レンズ６７ａと凹レンズ６７ｂの組み合わせたも
のとすることにより、目的のビーム直径にするのに小型
化ができる。これは、図６（ｂ）に示すように、コリメ
ート光学系６７として凸レンズのみで構成した場合に比
べてである。なお、ビーム直径は、グレーティング９の
格子間隔に対して十分に大きくする必要がある。
【００４８】
【発明の効果】本発明によれば、測光分離手段として波
長依存性のあるフィルタ類を使用することなく、多重染
色時の蛍光クロスオーバのないＳ／Ｎのよい蛍光検出の
可能な走査型光学顕微鏡を提供できる。また、本発明に
よれば、標本を反射して得られる蛍光を光検出器にロス
なく導くことができ、しかも小型で安価となる走査型光
学顕微鏡を提供できる。
長依存性のあるフィルタ類を使用することなく、多重染
色時の蛍光クロスオーバのないＳ／Ｎのよい蛍光検出の
可能な走査型光学顕微鏡を提供できる。また、本発明に
よれば、標本を反射して得られる蛍光を光検出器にロス
なく導くことができ、しかも小型で安価となる走査型光
学顕微鏡を提供できる。
【図１】本発明の走査型光学顕微鏡の第１実施例を示す
図。
図。
【図２】本発明の走査型光学顕微鏡の第２実施例を示す
図。
図。
【図３】本発明の走査型光学顕微鏡の第３実施例を示す
図。
図。
【図４】本発明の走査型光学顕微鏡の第４実施例を示す
図。
図。
【図５】本発明の走査型光学顕微鏡の第５実施例を示す
図。
図。
【図６】本発明の走査型光学顕微鏡の第６実施例を示す
図。
図。
【図７】第１従来例を示す図。
【図８】第２従来例を示す図。
【図９】第３従来例を示す図。
【図１０】第４従来例を示す図。
【図１１】第５従来例を示す図。
【図１２】蛍光のクロスオーバを示す図。
１…単一波長発振レーザ光源、２…ビームエクスパン
ダ、４…ダイクロイックミラー、５…ＸＹ走査光学系、
６…瞳上投影レンズ、７…顕微鏡、８…共焦点光学系、
９…グレーティング、１０，１１，１２…可変スリッ
ト、１３，１４，１５…光検出器、１６，１７，１８…
集光レンズ、１９…標本、２１，２９…レーザ光源、６
１…結像レンズ、６２…共焦点絞り、６３，６７…コリ
メータ光学系、６４，６５…ダイクロイックミラー、６
６…ミラー。
ダ、４…ダイクロイックミラー、５…ＸＹ走査光学系、
６…瞳上投影レンズ、７…顕微鏡、８…共焦点光学系、
９…グレーティング、１０，１１，１２…可変スリッ
ト、１３，１４，１５…光検出器、１６，１７，１８…
集光レンズ、１９…標本、２１，２９…レーザ光源、６
１…結像レンズ、６２…共焦点絞り、６３，６７…コリ
メータ光学系、６４，６５…ダイクロイックミラー、６
６…ミラー。
フロントページの続き (72)発明者 佐々木 浩 東京都渋谷区幡ヶ谷２丁目43番２号 オリ ンパス光学工業株式会社内
Claims (3)
- 【請求項１】 少なくとも単一波長のレーザビームを走
査して標本に照射するレーザ光源手段と、 前記標本からの光を検出する検出光学系と、 前記標本からの光を結像する結像光学系と、 この結像光学系の焦点位置に配置された共焦点絞りと、 この共焦点絞りを通過した蛍光を複数の波長に分ける少
なくとも１個のグレーティングと、 このグレーティングにより分光された前記標本からの光
を検出する光検出器と、 この光検出器に前記グレーティングからの導入される光
の幅を可変可能な少なくとも１個のスリットと、 を具備したことを特徴とする走査型光学顕微鏡。 - 【請求項２】 前記レーザ光源手段は少なくとも二波長
以上のレーザビームを出射し標本に照射することを特徴
とする請求項１記載の走査型光学顕微鏡。 - 【請求項３】 少なくとも単一波長のレーザビームを走
査して標本に照射するレーザ光源手段と、 前記標本からの光を検出する検出光学系と、 前記標本からの光を結像する結像光学系と、 この結像光学系の焦点位置に配置された共焦点絞りと、 この共焦点絞りを通過した発散光を平行光線にするコリ
メート光学系と、 このコリメート光学系の後方に配置され、所定の分光特
性で前記標本からの蛍光を分光する少なくとも１個のダ
イクロイックミラーと、 このダイクロイックミラーで分光された標本からの光を
検出する光検出器と、 を具備したことを特徴とする走査型光学顕微鏡。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12515095A JP3568626B2 (ja) | 1994-05-24 | 1995-05-24 | 走査型光学顕微鏡 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6-109678 | 1994-05-24 | ||
| JP10967894 | 1994-05-24 | ||
| JP12515095A JP3568626B2 (ja) | 1994-05-24 | 1995-05-24 | 走査型光学顕微鏡 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0843739A true JPH0843739A (ja) | 1996-02-16 |
| JP3568626B2 JP3568626B2 (ja) | 2004-09-22 |
Family
ID=26449409
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12515095A Expired - Lifetime JP3568626B2 (ja) | 1994-05-24 | 1995-05-24 | 走査型光学顕微鏡 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3568626B2 (ja) |
Cited By (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000031577A1 (en) * | 1998-11-19 | 2000-06-02 | Medical Research Council | Scanning confocal optical microscope system |
| JP2000512744A (ja) * | 1996-05-16 | 2000-09-26 | アフィメトリックス，インコーポレイテッド | 標識材料を検出するシステムおよび方法 |
| US6255646B1 (en) | 1998-09-24 | 2001-07-03 | Olympus Optical Co., Ltd. | Scanning optical microscope |
| US6396053B1 (en) | 1998-11-02 | 2002-05-28 | Olympus Optical Co. | Scanning optical microscope apparatus capable of detecting a plurality of flourescent light beams |
| US6433929B1 (en) | 2000-06-12 | 2002-08-13 | Olympus Optical Co., Ltd. | Scanning optical microscope and method of acquiring image |
| JP2002236257A (ja) * | 2001-02-13 | 2002-08-23 | Dainippon Printing Co Ltd | マルチカラー共焦点顕微鏡 |
| WO2002097408A1 (fr) * | 2001-05-30 | 2002-12-05 | Olympus Corporation | Lecteur de fluorescence |
| JP2004301561A (ja) * | 2003-03-28 | 2004-10-28 | Mitsui Eng & Shipbuild Co Ltd | 分光学的識別定量システム |
| WO2005015284A1 (de) * | 2003-08-12 | 2005-02-17 | Leica Microsystems Cms Gmbh | Vorrichtung zum nachweis von photonen eines lichtstrahls |
| JP2005091615A (ja) * | 2003-09-16 | 2005-04-07 | Olympus Corp | 顕微鏡 |
| JP2006053542A (ja) * | 2004-07-16 | 2006-02-23 | Carl Zeiss Jena Gmbh | ライン走査式の光走査型顕微鏡およびそれの使用 |
| US7167292B2 (en) | 2003-02-03 | 2007-01-23 | Olympus Corporation | Spectroscope and confocal scanning microscope comprising thereof |
| US7220974B2 (en) | 2004-05-17 | 2007-05-22 | Olympus Corporation | Fluorescence detection apparatus and method for excitation light irradiation timing |
| US7327459B2 (en) | 2003-12-30 | 2008-02-05 | Samsung Electronics Co., Ltd. | Fluorescence detector for detecting microfluid |
| JP2008046132A (ja) * | 2006-08-16 | 2008-02-28 | Wafermasters Inc | 分光システム |
| CN100437196C (zh) * | 2003-08-12 | 2008-11-26 | 莱卡微系统Cms有限责任公司 | 用于探测光束的光子的设备 |
| JP2009128719A (ja) * | 2007-11-26 | 2009-06-11 | Olympus Corp | レーザ顕微鏡 |
| JP2010506155A (ja) * | 2006-10-07 | 2010-02-25 | ライカ マイクロシステムズ ツェーエムエス ゲーエムベーハー | 試料の高分解能光学的走査方法及び装置 |
| EP2662720A1 (en) * | 2012-05-11 | 2013-11-13 | Olympus Corporation | Microscope system |
| CN108982448A (zh) * | 2018-07-20 | 2018-12-11 | 郑州迈迪迅医疗科技有限公司 | 一种荧光免疫分析仪及其检测方法 |
-
1995
- 1995-05-24 JP JP12515095A patent/JP3568626B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (31)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000512744A (ja) * | 1996-05-16 | 2000-09-26 | アフィメトリックス，インコーポレイテッド | 標識材料を検出するシステムおよび方法 |
| JP2006258821A (ja) * | 1996-05-16 | 2006-09-28 | Affymetrix Inc | 標識ターゲットを検出するシステムおよび方法 |
| USRE38860E1 (en) * | 1998-09-24 | 2005-11-01 | Olympus Optical Co., Ltd. | Scanning optical microscope |
| US6255646B1 (en) | 1998-09-24 | 2001-07-03 | Olympus Optical Co., Ltd. | Scanning optical microscope |
| US6396053B1 (en) | 1998-11-02 | 2002-05-28 | Olympus Optical Co. | Scanning optical microscope apparatus capable of detecting a plurality of flourescent light beams |
| JP2002530716A (ja) * | 1998-11-19 | 2002-09-17 | メディカル リサーチ カウンシル | 走査共焦点光学顕微鏡システム |
| WO2000031577A1 (en) * | 1998-11-19 | 2000-06-02 | Medical Research Council | Scanning confocal optical microscope system |
| US6555811B1 (en) | 1998-11-19 | 2003-04-29 | Medical Research Counsel | Scanning confocal optical microscope system |
| AU765975B2 (en) * | 1998-11-19 | 2003-10-09 | Medical Research Council | Scanning confocal optical microscope system |
| US6433929B1 (en) | 2000-06-12 | 2002-08-13 | Olympus Optical Co., Ltd. | Scanning optical microscope and method of acquiring image |
| JP2002236257A (ja) * | 2001-02-13 | 2002-08-23 | Dainippon Printing Co Ltd | マルチカラー共焦点顕微鏡 |
| WO2002097408A1 (fr) * | 2001-05-30 | 2002-12-05 | Olympus Corporation | Lecteur de fluorescence |
| US6956229B2 (en) | 2001-05-30 | 2005-10-18 | Olympus Corporation | Fluorescence reader wherein uniform fluorescence measurement is accomplished regardless of the state of the measurement object |
| US7167292B2 (en) | 2003-02-03 | 2007-01-23 | Olympus Corporation | Spectroscope and confocal scanning microscope comprising thereof |
| JP2004301561A (ja) * | 2003-03-28 | 2004-10-28 | Mitsui Eng & Shipbuild Co Ltd | 分光学的識別定量システム |
| WO2005015284A1 (de) * | 2003-08-12 | 2005-02-17 | Leica Microsystems Cms Gmbh | Vorrichtung zum nachweis von photonen eines lichtstrahls |
| CN100437196C (zh) * | 2003-08-12 | 2008-11-26 | 莱卡微系统Cms有限责任公司 | 用于探测光束的光子的设备 |
| US7259366B2 (en) | 2003-08-12 | 2007-08-21 | Leica Microsystems Cms Gmbh | Apparatus for the detection of photons of a light beam having a three-dimensional array of detectors |
| JP2005091615A (ja) * | 2003-09-16 | 2005-04-07 | Olympus Corp | 顕微鏡 |
| JP4546056B2 (ja) * | 2003-09-16 | 2010-09-15 | オリンパス株式会社 | 顕微鏡 |
| US7327459B2 (en) | 2003-12-30 | 2008-02-05 | Samsung Electronics Co., Ltd. | Fluorescence detector for detecting microfluid |
| US7220974B2 (en) | 2004-05-17 | 2007-05-22 | Olympus Corporation | Fluorescence detection apparatus and method for excitation light irradiation timing |
| JP2006053542A (ja) * | 2004-07-16 | 2006-02-23 | Carl Zeiss Jena Gmbh | ライン走査式の光走査型顕微鏡およびそれの使用 |
| JP2008046132A (ja) * | 2006-08-16 | 2008-02-28 | Wafermasters Inc | 分光システム |
| JP2010506155A (ja) * | 2006-10-07 | 2010-02-25 | ライカ マイクロシステムズ ツェーエムエス ゲーエムベーハー | 試料の高分解能光学的走査方法及び装置 |
| JP2014122917A (ja) * | 2006-10-07 | 2014-07-03 | Leica Microsystems Cms Gmbh | 試料の高分解能光学的走査方法及び装置 |
| JP2009128719A (ja) * | 2007-11-26 | 2009-06-11 | Olympus Corp | レーザ顕微鏡 |
| EP2662720A1 (en) * | 2012-05-11 | 2013-11-13 | Olympus Corporation | Microscope system |
| US9606344B2 (en) | 2012-05-11 | 2017-03-28 | Olympus Corporation | Microscope system |
| CN108982448A (zh) * | 2018-07-20 | 2018-12-11 | 郑州迈迪迅医疗科技有限公司 | 一种荧光免疫分析仪及其检测方法 |
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