JPH0789948B2 - ２▲’▼−デオキシシチジンの製造方法 - Google Patents
２▲’▼−デオキシシチジンの製造方法Info
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- JPH0789948B2 JPH0789948B2 JP62214783A JP21478387A JPH0789948B2 JP H0789948 B2 JPH0789948 B2 JP H0789948B2 JP 62214783 A JP62214783 A JP 62214783A JP 21478387 A JP21478387 A JP 21478387A JP H0789948 B2 JPH0789948 B2 JP H0789948B2
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Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） ２′−デオキシシチジンは医療原料、特に最近世界的に
問題になっているエイズ（AIDS）に対する最も効果のあ
る治療薬の１つとして知られている２′,2′−ジデオキ
シシチジンの原料であり大量合成法の確立が望まれてい
る。
問題になっているエイズ（AIDS）に対する最も効果のあ
る治療薬の１つとして知られている２′,2′−ジデオキ
シシチジンの原料であり大量合成法の確立が望まれてい
る。
本発明は微生物を利用したこの２′−デオキシシチジン
の製造方法に関するものである。
の製造方法に関するものである。
（従来の技術） ２′−デオキシシチジンの製造法としては２′−デオキ
シリボースとシトシンからの化学合成法が知られている
が収率が非常に悪い為に２′−デオキシシチジンの工業
的製造方法はDNA（デオキシリボ核酸）の加水分解物よ
りの抽出に限られている。
シリボースとシトシンからの化学合成法が知られている
が収率が非常に悪い為に２′−デオキシシチジンの工業
的製造方法はDNA（デオキシリボ核酸）の加水分解物よ
りの抽出に限られている。
（発明が解決しようとする問題点） しかし、従来の抽出法においては、DNAの加水分解物中
に目的の２′−デオキシシチジン以外に２′−デオキシ
アデノシン、２′−デオキシグアノシン、チミジン、更
には２′−デオキシアデノシンの脱アミノ化された２′
−デオキシイノシンが含まれており抽出工程が繁雑しか
もコスト高の方法である為に、更に効率の良い方法の開
発が望まれているのが現状である。
に目的の２′−デオキシシチジン以外に２′−デオキシ
アデノシン、２′−デオキシグアノシン、チミジン、更
には２′−デオキシアデノシンの脱アミノ化された２′
−デオキシイノシンが含まれており抽出工程が繁雑しか
もコスト高の方法である為に、更に効率の良い方法の開
発が望まれているのが現状である。
（問題点を解決する為の手段） 本発明者はこのような目的を達成するべく鋭意検討の結
果、DNAの加水分解生成物である２′−デオキシシチジ
ン以外の２′−デオキシリボヌクレオシド２′−デオキ
シアデノシン、２′−デオキシグアノシン、チミジンあ
るいは２′−デオキシアデノシンが脱アミノ化された
２′−デオキシイノシン）又は２′−デオキシリボース
−１−リン酸に、化学合成法で安価に供給されるシトシ
ンを微生物の存在下に作用させることにより、これらの
物質が２′−デオキシシチジンに変換されることを見い
だし本発明を完成させるに至った。
果、DNAの加水分解生成物である２′−デオキシシチジ
ン以外の２′−デオキシリボヌクレオシド２′−デオキ
シアデノシン、２′−デオキシグアノシン、チミジンあ
るいは２′−デオキシアデノシンが脱アミノ化された
２′−デオキシイノシン）又は２′−デオキシリボース
−１−リン酸に、化学合成法で安価に供給されるシトシ
ンを微生物の存在下に作用させることにより、これらの
物質が２′−デオキシシチジンに変換されることを見い
だし本発明を完成させるに至った。
尚、２′−デオキシリボース−１−リン酸は市販の試薬
を用いてもよく、またDNAの加水分解生成物の２′−デ
オキシリボヌクレオシドを更に加リン酸分解して得ても
よい。
を用いてもよく、またDNAの加水分解生成物の２′−デ
オキシリボヌクレオシドを更に加リン酸分解して得ても
よい。
本発明を簡単に記すと以下の通りである。
即ち本発明は２′−デオキシリボース−１−リン酸と
シトシンから２′−デオキシシチジンを生成せしめる方
法、２′−デオキシアデノシン、２′−デオキシグア
ノシン、チミジン及び２′−デオキシイノシン等の２′
−デオキシリボヌクレオシドと無機リン酸またはその塩
とシトシンから２′−デオキシシチジンを生成せしめる
方法である。本発明の有利な点は２′−デオキシリボー
ス−１−リン酸から２′−デオキシシチジンが容易に生
産できることである。本発明の更に有利な点は、上記
２′−デオキシリボヌクレオシドを混合して用いても効
率良く反応が進行するのでDNAを加水分解して得られる
２′−デオキシリボヌクレオシド溶液に、本発明に使用
される微生物（単独でも複数の微生物を混合しても良
い）の存在下、シトシンを作用させれば上記加水分解物
中の２′−デオキシシチジン以外の２′−デオキシリボ
ヌクレオシドが２′−デオキシシチジンに変換されるた
め２′−デオキシシチジン含量の極めて高い反応液が得
られることにある。
シトシンから２′−デオキシシチジンを生成せしめる方
法、２′−デオキシアデノシン、２′−デオキシグア
ノシン、チミジン及び２′−デオキシイノシン等の２′
−デオキシリボヌクレオシドと無機リン酸またはその塩
とシトシンから２′−デオキシシチジンを生成せしめる
方法である。本発明の有利な点は２′−デオキシリボー
ス−１−リン酸から２′−デオキシシチジンが容易に生
産できることである。本発明の更に有利な点は、上記
２′−デオキシリボヌクレオシドを混合して用いても効
率良く反応が進行するのでDNAを加水分解して得られる
２′−デオキシリボヌクレオシド溶液に、本発明に使用
される微生物（単独でも複数の微生物を混合しても良
い）の存在下、シトシンを作用させれば上記加水分解物
中の２′−デオキシシチジン以外の２′−デオキシリボ
ヌクレオシドが２′−デオキシシチジンに変換されるた
め２′−デオキシシチジン含量の極めて高い反応液が得
られることにある。
本発明に用いる微生物はアクロモバクター属、アグロバ
クテリウム属、アルカリゲネス属、アースロバクター
属、バチルス属、ブレビバクテリウム属、ハフニア属、
ロドコッカス属、ミクロコッカス属、ミコプラナ属、プ
ロタミノバクター属、シュードモナス属、リゾビウム
属、サルモネラ属、ヘモフィラス属、エルビニア カロ
トボラ又はプロテウス レッテゲリに属する。
クテリウム属、アルカリゲネス属、アースロバクター
属、バチルス属、ブレビバクテリウム属、ハフニア属、
ロドコッカス属、ミクロコッカス属、ミコプラナ属、プ
ロタミノバクター属、シュードモナス属、リゾビウム
属、サルモネラ属、ヘモフィラス属、エルビニア カロ
トボラ又はプロテウス レッテゲリに属する。
具体的に本発明に用いる微生物としては以下のものがあ
る。
る。
アクロモバクター ビスコサス ATCC−12448（Achromo
bacter viscosus） アグロバクテリウム ツメファシエンス ATCC−4720
（Agrobacterium tumefaciens） アルカリゲネス フェカリス ATCC−8750（Alcaligene
s faecalis） アースロバクター オキシダンス ATCC−14358（Arthr
obacter oxydans） バチルス シンプレックス FERM−Ｐ（Bacillus simpl
ex） ブレビバクテリウム プシルム ATCC−19096（Breviba
cterium pusillum） エルビニア カロトボラ FERM P−2766（Erwinia caro
tovora） ロドコッカス ロドクラウス ATCC−19149（Rhodococu
s rhodochraus） ハフニア アルベイ ATCC−9760（Hafnia alvei） ミクロコッカス バリアンス ATCC−399（Micrococcus
varians） ミコプラナ ディモルファ ATCC−4279（Mycoplana di
morpha） プロタミノバクター アルボフラブス ATCC−8458（Pr
otaminobacter alboflavus） プロテウス レッテゲリ FERM BP−941（Proteus rett
egeri） シュードモナス ローゼオブバリア FERM−P 9471（Ps
eudomonas roseobubalia） リゾビウム メリロッティ FERM−P 8197（Rhizobium
meliloti） サルモネラ ショットムエレリ ATCC−8759（Salmonel
la schottmouelleri） ヘモフィラス インフルエンザエ ATCC−9134（Haemop
hilus influenzae） これらの微生物を用いてチミジンを生成せしめる方法
は、微生物の培養中に基質を添加する培養法を用いても
良いし、また培養した菌体あるいはこの処理物を基質に
作用させる酵素法を用いても良い。
bacter viscosus） アグロバクテリウム ツメファシエンス ATCC−4720
（Agrobacterium tumefaciens） アルカリゲネス フェカリス ATCC−8750（Alcaligene
s faecalis） アースロバクター オキシダンス ATCC−14358（Arthr
obacter oxydans） バチルス シンプレックス FERM−Ｐ（Bacillus simpl
ex） ブレビバクテリウム プシルム ATCC−19096（Breviba
cterium pusillum） エルビニア カロトボラ FERM P−2766（Erwinia caro
tovora） ロドコッカス ロドクラウス ATCC−19149（Rhodococu
s rhodochraus） ハフニア アルベイ ATCC−9760（Hafnia alvei） ミクロコッカス バリアンス ATCC−399（Micrococcus
varians） ミコプラナ ディモルファ ATCC−4279（Mycoplana di
morpha） プロタミノバクター アルボフラブス ATCC−8458（Pr
otaminobacter alboflavus） プロテウス レッテゲリ FERM BP−941（Proteus rett
egeri） シュードモナス ローゼオブバリア FERM−P 9471（Ps
eudomonas roseobubalia） リゾビウム メリロッティ FERM−P 8197（Rhizobium
meliloti） サルモネラ ショットムエレリ ATCC−8759（Salmonel
la schottmouelleri） ヘモフィラス インフルエンザエ ATCC−9134（Haemop
hilus influenzae） これらの微生物を用いてチミジンを生成せしめる方法
は、微生物の培養中に基質を添加する培養法を用いても
良いし、また培養した菌体あるいはこの処理物を基質に
作用させる酵素法を用いても良い。
さて培養法を用いる場合には、炭素源、窒素源、Ｐ、
Ｓ、Fe、Mn等の無機イオン更に必要ならばビタミン等の
微量栄養素または蛋白分解物、酵母エキスのような有機
窒素源を含有する通常の培地を基本に用いれば良い。
Ｓ、Fe、Mn等の無機イオン更に必要ならばビタミン等の
微量栄養素または蛋白分解物、酵母エキスのような有機
窒素源を含有する通常の培地を基本に用いれば良い。
具体的に、２′−デオキシリボース−１−リン酸から
２′−オキシシチジンを生産する場合には、上記基本培
地に２′−デオキシリボース−１−リン酸とシトシンを
適宜添加すればよい。
２′−オキシシチジンを生産する場合には、上記基本培
地に２′−デオキシリボース−１−リン酸とシトシンを
適宜添加すればよい。
更に、２′−デオキシシチジン以外の２′−デオキシリ
ボヌクレオシドから２′−デオキシシチジンを直接生産
する場合には、上記基本培地に、２′−デオキシシチジ
ン以外の２′−デオキシリボヌクレオシドとリン酸もし
くはその塩とシトシンを添加して培養すればよい。
ボヌクレオシドから２′−デオキシシチジンを直接生産
する場合には、上記基本培地に、２′−デオキシシチジ
ン以外の２′−デオキシリボヌクレオシドとリン酸もし
くはその塩とシトシンを添加して培養すればよい。
上記基質の添加は培養初期でも培養途中でも構わない。
次に酵素法を用いる場合の酵素源としては、炭素源、窒
素源、Ｐ、Ｓ、Fe、Mn等の無機イオン、更に必要ならば
ビタミン等の微量栄養素または蛋白分解物、酵母エキス
のような有機窒素源を含有する通常の培地で培養した培
養液、及び洗浄菌体が使用できる他に、更に菌体処理物
も使用できる。菌体処理物としては、アセトン乾燥菌
体、菌体の磨砕物、菌体の超音波処理物、海面活性剤あ
るいはトルエン等の処理菌体、リゾチーム等の酵素処理
菌体、菌体より抽出した後、塩析等により分離した菌体
の蛋白区分、本反応の酵素活性を有する蛋白区分の精製
物、更に本菌体および菌体処理物の固定化物等いずれも
が使用できる。培養法を用いる場合でも、酵素法を用い
る場合でも基質として使用する２′−デオキシリボース
−１−リン酸、２′−デオキシアデノシン、２′−デオ
キシグアノシン、チミジンあるいは２′−デオキシイノ
シンの濃度は１−1000mM程度が適当であり、リン酸また
はその塩の濃度は上記基質の0.01−10倍モル程度が適当
である。無機リン酸の塩は反応の進行を大きく阻害しな
いものであればいずれを用いても良く、例えばナトリウ
ム塩、カリウム、塩アンモニウム塩、カルシウム塩、マ
グネシウム塩等の無機塩、さらにはトリメチルアンモニ
ウム塩等の有機塩が用いられる。２′−デオキシアデノ
シン、２′−デオキシグアノシン、チミジンあるいは
２′−デオキシイノシンから２′−デオキシシチジンを
直接生産する場合でも、２′−デオキシリボース−１−
リン酸から２′−デオキシシチジンを生産する場合で
も、シトシンの添加量は上記基質と等モルあるいはそれ
以上が適当で、通常１−10倍モル程度が適当である。ま
た、直接生産させる場合において、基質の２′−デオキ
シアデノシン、２′−デオキシグアノシン、チミジン又
は２′−デオキシイノシンが反応液に残っても良い場合
には、シトシンの添加量はこれらの基質の等モル以下で
もよい。
次に酵素法を用いる場合の酵素源としては、炭素源、窒
素源、Ｐ、Ｓ、Fe、Mn等の無機イオン、更に必要ならば
ビタミン等の微量栄養素または蛋白分解物、酵母エキス
のような有機窒素源を含有する通常の培地で培養した培
養液、及び洗浄菌体が使用できる他に、更に菌体処理物
も使用できる。菌体処理物としては、アセトン乾燥菌
体、菌体の磨砕物、菌体の超音波処理物、海面活性剤あ
るいはトルエン等の処理菌体、リゾチーム等の酵素処理
菌体、菌体より抽出した後、塩析等により分離した菌体
の蛋白区分、本反応の酵素活性を有する蛋白区分の精製
物、更に本菌体および菌体処理物の固定化物等いずれも
が使用できる。培養法を用いる場合でも、酵素法を用い
る場合でも基質として使用する２′−デオキシリボース
−１−リン酸、２′−デオキシアデノシン、２′−デオ
キシグアノシン、チミジンあるいは２′−デオキシイノ
シンの濃度は１−1000mM程度が適当であり、リン酸また
はその塩の濃度は上記基質の0.01−10倍モル程度が適当
である。無機リン酸の塩は反応の進行を大きく阻害しな
いものであればいずれを用いても良く、例えばナトリウ
ム塩、カリウム、塩アンモニウム塩、カルシウム塩、マ
グネシウム塩等の無機塩、さらにはトリメチルアンモニ
ウム塩等の有機塩が用いられる。２′−デオキシアデノ
シン、２′−デオキシグアノシン、チミジンあるいは
２′−デオキシイノシンから２′−デオキシシチジンを
直接生産する場合でも、２′−デオキシリボース−１−
リン酸から２′−デオキシシチジンを生産する場合で
も、シトシンの添加量は上記基質と等モルあるいはそれ
以上が適当で、通常１−10倍モル程度が適当である。ま
た、直接生産させる場合において、基質の２′−デオキ
シアデノシン、２′−デオキシグアノシン、チミジン又
は２′−デオキシイノシンが反応液に残っても良い場合
には、シトシンの添加量はこれらの基質の等モル以下で
もよい。
さて、次に微生物の培養中に上記濃度の基質を添加する
か、又は、これらを含む水溶液に培養した菌体もしくは
その処理物を添加すればよい。目的とする２′−デオキ
シシチジンの生産条件であるが、まずpHを４−10の範囲
に調製した後、20−70℃、望ましくは50−70℃で静置あ
るいは撹拌しながら10分−10日間保持すると反応が進行
し、反応液中に目的とする２′−デオキシシチジンが著
量蓄積される。
か、又は、これらを含む水溶液に培養した菌体もしくは
その処理物を添加すればよい。目的とする２′−デオキ
シシチジンの生産条件であるが、まずpHを４−10の範囲
に調製した後、20−70℃、望ましくは50−70℃で静置あ
るいは撹拌しながら10分−10日間保持すると反応が進行
し、反応液中に目的とする２′−デオキシシチジンが著
量蓄積される。
反応液より２′−デオキシシチジンを採取する方法は、
水等の溶媒に対する溶解度差を利用したり、イオン交換
樹脂や吸着樹脂を用いる方法で行うことができる。また
２′−デオキシシチジンの定量は高速液体クロマトグラ
フィーを用いる方法で行なえばよい。
水等の溶媒に対する溶解度差を利用したり、イオン交換
樹脂や吸着樹脂を用いる方法で行うことができる。また
２′−デオキシシチジンの定量は高速液体クロマトグラ
フィーを用いる方法で行なえばよい。
以下、実施例に従って本発明を更に詳細に説明する。
実施例１ 酵母エキス0.5g/dl、ペプトン1.0g/dl、肉エキス1.0g/d
lおよびNaCl0.5g/dlを含む培地（pH7.0）50mlを500ml容
肩付フラスコに分注し殺菌した。この培地に、ブイヨン
寒天培地にて30℃,16時間前培養した第１表に示す微生
物を１白金耳ずつ接種し、30℃にて16時間振とう培養し
た。得られた培養液より菌体を遠心分離により分離した
後、0.05Mリン酸バッファー（pH7.0）で洗浄し、更に遠
心分離することにより洗浄菌体を調製した。
lおよびNaCl0.5g/dlを含む培地（pH7.0）50mlを500ml容
肩付フラスコに分注し殺菌した。この培地に、ブイヨン
寒天培地にて30℃,16時間前培養した第１表に示す微生
物を１白金耳ずつ接種し、30℃にて16時間振とう培養し
た。得られた培養液より菌体を遠心分離により分離した
後、0.05Mリン酸バッファー（pH7.0）で洗浄し、更に遠
心分離することにより洗浄菌体を調製した。
上記洗浄菌体を20mMの２′−デオキシリボース−１−リ
ン酸と20mMのシトシンを含む0.05Mトリスバッファー（p
H7.2）10mlに5g/dlになる様に添加し、60℃,24時間反応
させた。各反応液中に生成した２′−デオキシシチジン
の濃度を高速液体クロマトグラフィーを用いて測定しそ
の結果を第１表に示した。
ン酸と20mMのシトシンを含む0.05Mトリスバッファー（p
H7.2）10mlに5g/dlになる様に添加し、60℃,24時間反応
させた。各反応液中に生成した２′−デオキシシチジン
の濃度を高速液体クロマトグラフィーを用いて測定しそ
の結果を第１表に示した。
実施例２ 実施例１と同様に培養調製した第２表に示す微生物の洗
浄菌体を20mMの２′−デオキシアデノシンあるいは２′
−デオキシグアノシンあるいは２′−デオキシイノシン
あるいはチミジンと20mMのシトシンを含む100mMのリン
酸バッファー（pH7.0）10mlに5g/dlになる様に添加し、
60℃,24時間反応させた。各反応液中に生成した２′−
デオキシシチジンを実施例１と同様の方法で測定し、そ
の結果を第２表に示した。
浄菌体を20mMの２′−デオキシアデノシンあるいは２′
−デオキシグアノシンあるいは２′−デオキシイノシン
あるいはチミジンと20mMのシトシンを含む100mMのリン
酸バッファー（pH7.0）10mlに5g/dlになる様に添加し、
60℃,24時間反応させた。各反応液中に生成した２′−
デオキシシチジンを実施例１と同様の方法で測定し、そ
の結果を第２表に示した。
実施例３ 実施例１と同様の培地を用いて、実施例１と同様の方法
で、37℃,16時間培養したエシェリヒア コリ FERM−P
9534の培養液に予め殺菌した200mMの２′−デオキシグ
アノシンと200mMのシトシンを含む500mMのリン酸バッフ
ァー（pH7.0）5mlを添加し、更に10時間培養を続けた。
この培養液中に生成した２′−デオキシシチジンを実施
例１の方法と同様に定量した結果、21mg/dlの２′−デ
オキシシチジンが生成していた。
で、37℃,16時間培養したエシェリヒア コリ FERM−P
9534の培養液に予め殺菌した200mMの２′−デオキシグ
アノシンと200mMのシトシンを含む500mMのリン酸バッフ
ァー（pH7.0）5mlを添加し、更に10時間培養を続けた。
この培養液中に生成した２′−デオキシシチジンを実施
例１の方法と同様に定量した結果、21mg/dlの２′−デ
オキシシチジンが生成していた。
実施例４ 300mMのリン酸バッファー（pH7.0）と50mMのシトシンを
含むサケ精子由来のDNAの酵素水解物（チミジン282mg/d
l、２′−デオキシアデノシン97mg/dl、２′−デオキシ
イノシン124mg/dl、２′−デオキシシチジン121mg/dl、
２′−デオキシグアノシン157mg/dlを含む）10mlに実施
例１と同様に培養調製したミコプラナ ディモルファAT
CC−4279を5g/dlになる様に添加し、60℃,8時間反応さ
せた。
含むサケ精子由来のDNAの酵素水解物（チミジン282mg/d
l、２′−デオキシアデノシン97mg/dl、２′−デオキシ
イノシン124mg/dl、２′−デオキシシチジン121mg/dl、
２′−デオキシグアノシン157mg/dlを含む）10mlに実施
例１と同様に培養調製したミコプラナ ディモルファAT
CC−4279を5g/dlになる様に添加し、60℃,8時間反応さ
せた。
この反応液中の２′−デオキシシチジンの量を実施例１
と同様の方法で測定した結果、248mg/dlに増加してい
た。
と同様の方法で測定した結果、248mg/dlに増加してい
た。
比較例１ 実施例１と同様に培養調製した第３表に示す微生物の洗
浄菌体を20mMの２′−デオキシリボース−１−リン酸と
20mMのシトシンを含む0.05Mトリスバッファー（pH7.2）
10mlに5g/dlになる様に添加し、60℃、24時間反応させ
た。各反応液中に生成した２′−デオキシシチジンを実
施例１と同様の方法で測定し、その結果を第３表に示し
た。
浄菌体を20mMの２′−デオキシリボース−１−リン酸と
20mMのシトシンを含む0.05Mトリスバッファー（pH7.2）
10mlに5g/dlになる様に添加し、60℃、24時間反応させ
た。各反応液中に生成した２′−デオキシシチジンを実
施例１と同様の方法で測定し、その結果を第３表に示し
た。
第１表と第３表の比較により、エルビニア カロトボラ
FERM P−2766による２′−デオキシシチジンの生成量
はエルビニア アミロバラ CCM−1017及びエルビニア
ヘルビコラ ATCC−14537と比べて顕著に高く、ま
た、プロテウス レッテゲリ FERM BP−941による２′
−デオキシシチジンの生成量はプロテウス ブルガリス
FERM−P 4795と比べて顕著に高いことは明らかであ
る。
FERM P−2766による２′−デオキシシチジンの生成量
はエルビニア アミロバラ CCM−1017及びエルビニア
ヘルビコラ ATCC−14537と比べて顕著に高く、ま
た、プロテウス レッテゲリ FERM BP−941による２′
−デオキシシチジンの生成量はプロテウス ブルガリス
FERM−P 4795と比べて顕著に高いことは明らかであ
る。
比較例２ 実施例１と同様に培養調製した第４表に示す微生物の洗
浄菌体を20mMの２′−デオキシアデノシンあるいは２′
−デオキシグアノシンあるいは２′−デオキシイノシン
あるいはチミジンと20mMのシトシンを含む100mMのリン
酸バッファー（pH7.0）10mlに5g/dlとなる様に添加し、
60℃、24時間反応させた。各反応液中に生成した２′−
デオキシシチジンを実施例１と同様の方法で測定し、そ
の結果を第４表に示した。
浄菌体を20mMの２′−デオキシアデノシンあるいは２′
−デオキシグアノシンあるいは２′−デオキシイノシン
あるいはチミジンと20mMのシトシンを含む100mMのリン
酸バッファー（pH7.0）10mlに5g/dlとなる様に添加し、
60℃、24時間反応させた。各反応液中に生成した２′−
デオキシシチジンを実施例１と同様の方法で測定し、そ
の結果を第４表に示した。
第２表と第４表の比較により、エルビニア カロトボラ
FERM P−2766による２′−デオキシシチジンの生成量
はエルビニア アミロバラ CCM−1017及びエルビニア
ヘルビコラ ATCC−14537と比べて顕著に高く、ま
た、プロテウス レッテゲリ FERM BP−941による２′
−デオキシシチジンの生成量はプロテウス ブルガリス
FERM−P 4795と比べて顕著に高いことは明らかであ
る。
FERM P−2766による２′−デオキシシチジンの生成量
はエルビニア アミロバラ CCM−1017及びエルビニア
ヘルビコラ ATCC−14537と比べて顕著に高く、ま
た、プロテウス レッテゲリ FERM BP−941による２′
−デオキシシチジンの生成量はプロテウス ブルガリス
FERM−P 4795と比べて顕著に高いことは明らかであ
る。
〔効 果〕 本発明の方法を用いると、２′−デオキシリボース−１
−リン酸、又は２′−デオキシシチジン以外の２′−デ
オキシリボヌクレオシドから効率よく、しかも大量に
２′−デオキシシチジンを生産することができる。
−リン酸、又は２′−デオキシシチジン以外の２′−デ
オキシリボヌクレオシドから効率よく、しかも大量に
２′−デオキシシチジンを生産することができる。
また、このようにして得られた２′−デオキシシチジン
はエイズの治療薬として期待されている２′,3′−ジデ
オキシシチジンの原料として有用である。
はエイズの治療薬として期待されている２′,3′−ジデ
オキシシチジンの原料として有用である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 19/38 Ｃ１２Ｒ 1:05） (Ｃ１２Ｐ 19/38 Ｃ１２Ｒ 1:06） (Ｃ１２Ｐ 19/38 Ｃ１２Ｒ 1:07） (Ｃ１２Ｐ 19/38 Ｃ１２Ｒ 1:13） (Ｃ１２Ｐ 19/38 Ｃ１２Ｒ 1:265） (Ｃ１２Ｐ 19/38 Ｃ１２Ｒ 1:38） (Ｃ１２Ｐ 19/38 Ｃ１２Ｒ 1:41） (Ｃ１２Ｐ 19/38 Ｃ１２Ｒ 1:42） (Ｃ１２Ｐ 19/38 Ｃ１２Ｒ 1:21） (Ｃ１２Ｐ 19/38 Ｃ１２Ｒ 1:18） (Ｃ１２Ｐ 19/38 Ｃ１２Ｒ 1:37）
Claims (3)
- 【請求項１】アクロモバクター属、アグロバクテリウム
属、アルカリゲネス属、アースロバクター属、バチルス
属、ブレビバクテリウム属、フフニア属、ロドコッカス
属、ミクロコッカス属、ミコプラナ属、プロタミノバク
ター属、シュードモナス属、リゾビウム属、サルモネラ
属、ヘモフィラス属、エルビニア、カロトボラ又はプロ
テウス、レッテゲリに属し、２′−デオキシリボース−
１−リン酸又はその塩とシトシンから２′−デオキシシ
チジンを生成する能力を有する微生物を水性媒体中で
２′−デオキシリボース−１−リン酸又はその塩とシト
シンに作用させて、２′−デオキシシチジンを生成さ
せ、これを取得することを特徴とする２′−デオキシシ
チジンの製造方法。 - 【請求項２】アクロモバクター属、アグロバクテリウム
属、アルカリゲネス属、アースロバクター属、バチルス
属、ブレビバクテリウム属、ハフニア属、ロドコッカス
属、ミクロコッカス属、ミコプラナ属、プロタミノバク
ター属、シュードモナス属、リゾビウム属、サルモネラ
属、ヘモフィラス属、エルビニア カロトボラ又はプロ
テウス レッテゲリに属し、２′−デオキシシチジン以
外の２′−デオキシリボヌクレオシド及び無機リン酸も
しくはその塩とシトシンから２′−デオキシシチジンを
生成する能力を有する微生物を水性媒体中で２′−デオ
キシシチジン以外の２′−デオキシリボヌクレオシド及
び無機リン酸もしくはその塩とシトシンに作用させて、
２′−デオキシシチジンを生成させ、これを取得するこ
とを特徴とする２′−デオキシシチジン製造方法。 - 【請求項３】２′−デオキシシチジン以外の２′−デオ
キシリボヌクレオシドが２′−デオキシアデノシン、
２′−デオキシグアノシン、２′−デオキシイノシン又
はチミジンであることを特徴とする特許請求の範囲第
（２）項記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62214783A JPH0789948B2 (ja) | 1987-08-28 | 1987-08-28 | ２▲’▼−デオキシシチジンの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62214783A JPH0789948B2 (ja) | 1987-08-28 | 1987-08-28 | ２▲’▼−デオキシシチジンの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6460396A JPS6460396A (en) | 1989-03-07 |
| JPH0789948B2 true JPH0789948B2 (ja) | 1995-10-04 |
Family
ID=16661464
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62214783A Expired - Lifetime JPH0789948B2 (ja) | 1987-08-28 | 1987-08-28 | ２▲’▼−デオキシシチジンの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0789948B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002125682A (ja) | 2000-10-25 | 2002-05-08 | Ajinomoto Co Inc | ２’−デオキシリボヌクレオシドの製造方法 |
| CA2380804A1 (en) | 2001-05-01 | 2002-11-01 | Mitsui Chemicals, Inc. | Method for producing cytosine nucleosides compounds |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS56102794A (en) * | 1979-05-01 | 1981-08-17 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of pyrimidine ribonucleosides and pyrimidine deoxyribonucleosides |
-
1987
- 1987-08-28 JP JP62214783A patent/JPH0789948B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6460396A (en) | 1989-03-07 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |