JPH07509262A

JPH07509262A - アルデヒド−硬化されたタンパク質性接着剤

Info

Publication number: JPH07509262A
Application number: JP6503471A
Authority: JP
Inventors: コワンコ，ニコラス
Original assignee: クリオライフ，インコーポレイティド
Priority date: 1992-07-06
Filing date: 1993-07-06
Publication date: 1995-10-12
Anticipated expiration: 2019-01-06
Also published as: AU4666193A; MX9304053A; IL106248A; PT650512E; DE69331011D1; CN1085451A; HK1013094A1; ES2161719T3; BR9306683A; FI950024A; EP0650512B1; CA2139590C; NO20034965D0; NO950044D0; EP0650512A1; NO950044L; US5385606A; ATE207520T1; KR100305374B1; NO20034965L

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】アルデヒド−硬化されたタンパク質性接着剤発明の分野本発明は一般的には接着剤組成物及びより特定にはヒト又は動物対象に対しての内科及び外科医療の実施に有用な組織接着剤に関する。

関連文献の記載種りのタイプの組織接着剤は当業界において知られている。それらのうち３種、すなわちシアノアクリレート、ゼラチン−ホルムアルデヒド組成物及びフィブリン基材接着剤が最とも注目を受けて来た。たとえば、フィブリン（血液凝固タンパク質）及びゼラチン−ホルムアルデヒドはそれぞれ、シアノアクリレートと同じように、手術用接着剤用途に使用されて来た。そのような接着剤は、ある程度制限して使用しているが、しかし下記に示されるように欠点を有する。

いくつかのシアノアクリレートが手術用使用のために研究されて来た。たとえば、あるイソブチルシアノアクリレート配合物は家畜治療への使用のために許可されて来た。典型的には、モノマー又はオリゴマー及び／又はモノマーの混合物が結合されるべき部位に適用され、ここでそれは接着剤固体を形成するために急速に重合する。

ノアノアクリレート接着剤の１つの欠点は、それが乾燥フィールドを必要とすることである。もう１つは、生成される固体は非吸収性であることであり、これが内部への適用においてその接着剤の有用性を制限する。また、この重合はまったくの発熱性になる傾向があリ、そして不適切な組織応答が報告されている。たとえば、Ｂｏｎｕｔｔｉ。

Ｐ、　ｅｔ　ａｌ、＋　Ｃ１１ｎｉｃａｌ　０ｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓ　ａｎｄ　Ｒｅ１ａｔｅｄ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、　Ｖｏｌ。

２２９、　ｐａｇｅｓ　２４１−２４８　（１９８８）　；　Ｎｅ１ｓｏｎ、　Ｒ，ｅｔ　ａｔ、、　Ａｒｃｈ、　Ｓｕｒｇ。

Ｖｏｌ、　１００．　ｐａｇｅｓ　２９５−２９８　（１９７０）　；及びＣｅ１ｉｋ、　１１．、　ｅｔ　ａｌ、。

Ｎｏｎ５ｕｔｕｒｅ　ｃｌｏｓｕｒｅ　ｏｒ　ａｒｔｅｒｉａｌ　ｄｅｆｅｃｔ　ｂｙ　ｖｅｉｎ　ｇｒａｆｔ　ｕｓｉｎｇｉｓｏｂｕｔｙｌ−２−ｃｙａｎｏａｃｒｙｌａｔｅｓ　ａｓ　ａ　ｔｉｓｓｕｅ　ａｄｈｅｓｉｕｅ’　、　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＮｅａｒｏｓｕｒｇｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ　Ｖｏｌ、　３５．　Ｎｏ、　２　（Ａｐｒｉｌ−Ｊｕｎｅ　１９９１）　も参照のこと。

ホルムアルデヒドにより架橋されているゼラチンに基づく接着剤がほぼ１９６４年以来、主にヨー口・ンパにおいて実験的に使用されて来た。提案されて来たいくつかの配合物のうち、°“ＧＲＦ’（ゼラチン、レソルソノール、ホルモール）として言及される１種がたぶん最とも知られている。ゼラチンのホット溶液がホルムアルデヒド溶液から主に成る硬化剤と共に現場混合される。その混合物は、＆Ｉｌ織に接着する固体に急速に硬化する。　ＧＲＦ接着剤に対する主な異論は、ホルムアルデヒド、すなわち既知の危険な物質の必須の使用であうた。

また、ゼラチンは熱い温度、たとえば体温以上の温度で適用されるべきであり、そして混合及び適用の技法は、ＧＲＦの好都合な使用のためにまったくの臨界的である。たとえば、Ｆａｂｉａｎｉ、　ｅｔ　ａｌ、、八ｎｎ。

Ｔｈｏｒａｃ、　Ｓｕｒｇ、　１４３−１４５　（１９９０）　；　Ｆａｂｉａｎｉ、　ｅｔ　ａｌ、＋　５ｕｐｐｌｅ＋ｗｅｎｔ　ＩＣ１ｒｃｕｌａｔｉｏｎ　Ｖｏｌ、　８０＋　Ｎｏ、　３　（Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ　１９８９）　：　ＢａｃｈｅＬ、　ｅｔ　ａｌ、＋Ｊ、　Ｔｈｏｒａｃ、　Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ、　Ｓｕｒｇ、　Ｖｏｌ、　８３　（１９８２）及びＢｒａｕｎｗａｌｄ＋ｅｔ　ａｌ、、Ｓａｒｇｅｒｙ　Ｖｏｌ、　５９．　Ｎｏ、　６　（Ｊｕｎｅ　１９６６）も参照のこと。

フィブリン接着剤は、接着剤又はシーラント組成物を生成するために血液凝集形成の天然の工程を利用する。１種の市販の生成物別よ、Ｒｕｇｉｓ、　Ｆｒａｎｃｅから入手できる゛’Ｔｕｓｓｉｃｏ口Ｒ）”である。もう１種は、０ｓｔｅｒｒｅｉｃｈｉｓｃｈｅｓ　Ｉｎ５Ｌｉｔｕｔ　ｆｏｒ　ｌ（ａｅｍｏｄｅｒｉｒａｔｅ、　ＧＭＢＨ（１＋＋ｎｕｎ。

ＧＡ、　Ａ−１２２０，Ｖｉｅｎｎａ＋　Ａｕ５ｔｒｉａの傘下）から入手できる”ＦｉｂｒｉｎＳｅａｌａｎｔ　Ｋｉｔ　１．０”である、フィブリン接着剤の使用においては、２種の成分が典型的には、人工血液凝集体を形成するために組合される。成分の１つは、フィブリノーゲン及び血液凝集因子、たとえば第Ｘ ■因子の溶液であり、そして他はトロンビン及びカルシウムイオンの溶液である。フィブリン接着剤の欠点はそれらのひじょうに近い強さく一般的に５０ｇ／ｃｍ”よりも低い）及び比較的遅い硬化時間を包含する。また、複数のヒトドナーからの血液生成物（フィブリノーゲン及び補助因子）の使用は、患者へのある疾病の伝達の固有の危険性を提供する。フィブリンシーラントを調製するために自己由来の血液を用いるための方法は提案されている。たとえば１９８２年９月に公開された日本特許第５７１４９〜２２９号を参照のこと。

光所立！封本発明はタンパク質成分及び二又は多官能価アルデヒド成分を含んで成る組成物を硬化することによって調製される接着剤を提供する。その硬化された接着剤は好ましくは、組織接着試験において少なくとも約７５ｇ／ｃｍ”の引裂強さを示す結合を提供する。もう１つの態様においては、本発明はそのような組成物の調製のために有用なタンパク質及びアルデヒド成分を含んで成るキットを提供する。

さらにもう１つの態様においては、本発明はタンパク質及びアルデヒド成分を含んで成る組織接着剤組成物自体を提供する。

本発明の接着剤は強度、使用の容易性、組織適合性及び費用のような性質の最適の組合せを提供する０本発明の好ましい接着剤は、たとえば縫合よりも強い高い強度のものである。好ましい組成物は３０秒又はそれ以下で非毒性結合を創造でき、そして湿潤条件下でさえ良く作用する。

本発明のタンパク質成分は好ましくは、ヒト又は動物起源のクンバク質性材料を含んで成る。そのクンバク質性材料とアルデヒドとを架橋した後、その得られた接着剤は天然又は合成起源の広範囲の支持体に強く且つ急速な結合を提供し、そして広範囲の可能な用途を提供する。従って、本発明の組成物は、生存する組織、たとえば筋肉、皮ｓ、結合＆１１ｗａ、神経＆ｌ１ｗｔ、血管及び心ｌ１ｆｉ組織、脂肪組織、軟骨、骨、及び同様のもの、並びに保存され得、又は化学的に処理され得る死体組織に結合できる接着剤を形成するために硬化され得る。

強い結合がまた、天然又は合成材料、たとえば生物適合材料に、それらを他のそのような材料及び組織に結合せしめるために形成され得る。適切な材料の例は、皮及び皮のような材料、金属及びポリマー材料を包含する。

適切な皮のような材料の例は、被覆された及び被覆されていない織布又は不織布（たとえばビニル−被覆された又はウレタン−被覆された布）及び多孔質体（すなわち°°合成皮′°）を包含する。

適切な金属の例は、生物適合性金属、たとえば二・メチル、銀、ステンレス銅及びアルミニウム並びに金属化された支持体、たとえば貴金属により被覆された不活性ポリマー材料を包含する。

適切なポリマー材料の例は、ポリマー、たとえばポリ（塩化ビニル）、ポリエチレン、超高分子量ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレン、ノリコーンゴム、ポリカルボネート、ポリエステル、ポリテトラフルオロエチレン、弗素化されたエチレン−プロピレンコポリマー、ポリオレフィンゴム、ポリウレタン、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ　（アクリロニトリル）、ポリアクリルアミド、ポリアクロレイン、ポリスルホン、再生セルロース及び酢酸セルロース、ポリ　（メチルメタクリレート）、メチルメタクリレート−スチレンコポリマー、ポリ（ヒドロキシエチルメタクリレート）及び同様のものを包含する。

そのような材料は典型的には、永久的な又は使い捨て用医科製品、たとえば体外装置、カテーテル、管、補綴（血管移植用補綴を包含する）及び他の人工的な身体の部分及び器官、膜、手術用テープ、ガーゼ、包帯及びバッチ、縫合糸、分路体（ｓｈｕｎｔ）、セメント、固定用装置、連結器及び他の医療的に有用な成分の製造のために使用される。

有用な適切材料の例は、たとえば織物ダクロン血管補補綴材料（たとえばＶＥＲＩ−５ＯＦＴ、　ＤｕＰｏｎｔ）　；　ＰＴＦＥフオーム血管補綴材料（たとえばＧｏｒｅ　Ｃｏ、から入手できる）；ガム性ゴムの尿カテーテル管；心臓移植のためのシリコーンゴムクラッド電極及びリード線（ＣａｒｄｉａｃＰａｃｅｍａｋｅｒｓ＋　Ｉｎｃ、、　ＳＬ、　Ｐａｕｌ、　ＭＮから入手できる）を包含する。

本発明の組成物は、手術移植物及び装置の結合のために、並びに創傷の閉鎖、外傷の修復、血止及び同様のものにヒト又は家畜医療の実施において使用され得る。接着剤の非医療用途もまた、本発明の範囲内である。

硬化された接着剤及び関連する組成物の他に、本発明はさらに、接着剤組成物の調製法；前記組成物の使用により多くの組織及び／又は生物適合性材料表面を一緒に接着する方法；及び本発明の硬化された接着剤により一緒に接着された組織表面を含んで成る組合せを提供する。

ましい昭　のテ己本発明は血漿タンパク質及び二又は多官能価アルデヒドの混合物を含んで成る接着剤組成物を提供する。もう１つのＵ様においては、本発明は球状タンパク質（好ましくはアルブミン）及び二又は多官能価アルデヒドの混合物を含んで成る接着剤組成物を提供する０本発明の好ましい接着剤組成物は、硬化される場合、７ｉ３３Ｈ１ｌｄｈｅｒｅｎｃｅＴｅｓ　ｔで測定される場合、少なくとも約７５　ｇ　７ｃｍ”及び好ましくは少なくとも約４００　ｇ　７ｃｍ”の引裂強さを存する。

好ましい接着剤組成物は、タンパク質成分が、組成物の重量に基づいて約２７〜約５３重量％の濃度で存在し、そしてアルデヒド成分が組成物の約０．５〜約５重量％の濃度で存在するものである。

もう１つの態様においては、本発明はタンパク質性材料及び二又は多官能価アルデヒドの滅菌混合物を含んで成る接着剤組成物を提供し、ここで前記タンパク質性材料は血漿タンパク質及び球状タンパク質から成る群から選択される。

さらにもう１つのＢ様においては、本発明はその中に配置された血漿又は球状タンパク質を有する第１の容器手段及びその中に配置された二又は多官能価アルデヒドを有する第２の容器手段を含んで成るキットを提供する。好ましい態様においては、キットは約３０〜約５５置％の濃度でその中に配置される血漿タンパク質成分を有する第１の容器手段及び約５〜約１５重量％の濃度でその中に配置されるジ又はポリアルデヒド成分を含む第２の容器手段を含んで成り、ここで前記タンパク質及びアルデヒド成分は１重量部のアルデヒド成分と５〜６１１部のタンパク質成分の混合を可能にするのに十分な量で存在する。

関連するＢ様においては、本発明は組織表面に接着剤組成物を供給するためのアプリケーターを提供し、ここで前記アプリケーターはその中に分配されるタンパク質性材料及び二又は多官能価アルデヒドを有する。好ましくは、アプリケーターは注射器である。

そのアプリケーターは任意に、第１及び第２の別りの区画室を有し、タンパク質性材料が第１の区画室内に分配され、そしてアルデヒドがアプリケーターの第２の区画室内に分配される。

本発明の好ましい接着剤は、結合されるべき表面の存在下で、下記成分：パートＡ：Ｍｉ成物の重量に基づいて約２７〜約５３重量％の濃度で存在するタンパク質を含む；及びパートロ：組成物の重量に基づいて約０．５〜約５重量％の濃度で存在するジ又はポリアルデヒドを含む、を含んで成る組成物を形成することによって調製される。

成分の好ましい濃度はまた、それぞれのキット成分におけるそれらの濃度により、すなわち組成物を形成するためにそれらの成分の組合せの前に示され得る。キット成分により示される場合、キット成分パートＡは好ましくは、キット成分パートＡの重量に基づいて、約３０〜約５５重量％、より好ましくは約３５〜約４７重量％及び最とも好ましくは約４０〜約４３重猾％の濃度でタンパク質を含んで成る。

同様に、キット成分パー１−Ｂは好ましくは、キット成分パートＢの重置に基づいて約５〜約１５重■％及び好ましくは約１０〜約１５重量％の濃度で存在するジ又はポリアルデヒドを含んで成る。キットは好ましくは、１重量部のパートＢと約５〜６０重量部のパートＡ及び好ましくは約２０〜６０重量部のパートＡとを混合するのに十分な濃度及び量でパー）Ａ及びＢを含む。

場合によっては、パートＡ及びＢの両者は、組成物のバランスを補足するために他の必須でない成分を含むことができる。そのような必須でない材料の例は、中性塩、炭水化物、繊維及びその他の生物学的材料、湿潤剤、抗生物質、保存剤、色素、増粘剤及び同様のものである。パートＡ及びＢの混合に基づいて、血漿タンパク質成分におけるタンパク質性材料は硬化された接着剤を形成するためにアルデヒド成分により架橋される。

最終の架橋され硬化された接着剤は典型的には、実質的にアルデヒドを含まない、水不溶性のゴム用又は旋用タンパク質性固形物の形で存在する。適切な接着剤は典型的には、下記例に十分に記載されるように、Ｔｉ５ｓｕｅ　Ａｄｈｅｒｅｎｃｅ　Ｔｅ５ｔで測定される場合、約７５ｇ／ｃｍ”〜約８００　ｇ　７ｃｍ２の引裂強さを伴って、結合されるべき支持体に接着する０本発明の好ましい接着剤は約１００　ｇ／ｃｍ”〜約５００ｇ／ｃＭＺの引裂強さを示し、そして特に好ましくは、約２５０　ｇ／ｃｓ”〜約４００ｇ／ｃｍｚの引裂強さを示すものである。比較すれば、比較Ｔｉ５ｓｕｅ　Ａｄｈｅｒｅｎｃｅ　Ｔｅ５ｔにおいて他の材料により示される典型的な引裂強さは次の通りである：佳−料　・　ｃ＋ｉ”）プロレン縫合系（５−０）　約３００シアノアクリレート接着剤　１３０〜３６０”ＧＲＦ　”接着剤　１３０〜２８０フイブリンシーラント　７〜１６つ／フィブリノーゲン（６，７ｆ（ｆ％）　約　２５結合（すなわち接着剤に硬化する組成物を形成するためにキット成分の混合）は、２種のパートシステム（パートは、本明細書においてはそれぞれパー）Ａ及びパートＢとして言及される）を組合し、そしてその混合物を結合されるべき表面上で反応せしめることによって達成される。結合の形成は急速であり、一般的には、完全になるのに１分以下の時間を要する。得られる接着性は強く、一般的には約４００　ｇ／ｃｍｚ〜約６００ｇ／ｃｍ”の引裂強さを有する結合を提する。用語“引裂強さ”とは、本明細書に記載されるＴｉ５ｓｕｅ　ＡｄｈｅｒｅｎｃｅＴｅｓ　Ｌにより決定されるように、用語“組織付着性”と交換可能的に使用されるであろう。１３００ｇ／Ｃｍ”及びそれ以上の引裂強さが、本発明を用いることによって得られた。引裂強さの上限は測定されておらず、そしてそれらは本発明を制限するものとして解釈されない。

本発明の組成物のパートＡは好ましくは、約３０〜約５５重量％の血漿タンパク質成分を含む水溶液を含んで成る。約３０重量％以下の濃度で、硬化された生成物は均質の塊状物よりもむしろ懸濁液でのカードをより形成し、そして接着性質は不良であろう、約５５重量％以上の濃度で、組成物は、タンパク質及びアルデヒド成分が混合される場合、早過ぎて硬化する傾向がある０本明細書に示されるような濃度は、記載される種々の固体成分の凍結乾燥重量に基づかれている。

好ましい態様において、キット成分パートＡは血漿タンパク質成分約３５〜約５５重盪％及び特に好ましくは、約４０〜約４３重量％を含んで成る。パー）Ａのバランスは典型的は不活性ビークル、たとえば水、希釈緩衝液及び／又は塩溶液であり、場合によっては、接着剤形成反応を実質的に妨害しない必須でない材料を含む、そのような必須でない材料の例は、中性塩、炭水化物、繊維及び他の生物学的材料、湿潤剤、抗生物質、保存剤、色素、増粘剤及び同様のものである。

たとえば、それぞれ例５及び１９並びに９に示されるようなフィブリノーゲン又はポリ（エチレングリコール）のような必須でない材料が包含され得る。

本発明の組成物を調製するために使用されるキット成分パートＢは好ましくは、水又は他の適切な媒体中、ジ又はポリアルデヒドの溶液を含んで成る。５％〜１５％（及び好ましくは１０％〜１５％）溶液としてのグルタルアルデヒドが好ましいが、しかし他のアルデヒド材料もまた適切である。たとえば、アルデヒド成分がジアルデヒドを含む場合、適切なジアルデヒドはグルタルアルデヒドの他に、グリオキサール、スクジンアルデヒド、マレアルデヒド及びフタルアルデヒドから成る群から選択される。従って、水性グリオキサールは、炭水化物及びそれらの誘導体の過ヨン素酸塩、オゾン又は同様のものによる酸化分解により得られるジ及びポリアルデヒドの水性混合物である場合、パートＢのために満足する。

他の水溶性ジ及び／又はポリアルデヒドは、本発明の目的のために有用であるものとして容易に認識されるであろう。

パートＡ及びＢの適切な混合物が結合されるべき表面上で反応せしめられる場合、一般的は１分以下で、及びしばしば３０秒又はそれ以下で、接着剤組成物が形成する。広範囲の支持体がこれまで示されたように、この方法により結合され得る。有意な発熱は観察されず、そして良好な付着性が湿潤表面に得られ、従って本発明のための広範囲の有用性を提供する。

手術用接着剤の場合、本発明の好ましい組成物は従来のフィブリン接着剤及び縫合糸よりも数倍強い結合強度を有する硬化された接着剤を提供する。いくつかの実験的な手術工程が本発明の接着剤組成物を用いて部会長〈実施され得た（ブタモデルにおいて）、たとえば、有孔性の大動脈及び腸が、その損傷部へのパ・ンチ材料の接着により修復され、そして血止が接着剤の適用により再切断された牌臓においてすばやく達成された。

前述のように、本発明の組成物の有用性は、キント成分ノぐ一トＡ及びＢの混合により提供される０本発明の組成物及び得られる接着剤の性質は、パートＡのタンパク質タイプ及び含有率、及びノ々−ト已におけるアルデヒド成分のタイプ及び重量比により決定される。

結合組成物が実施において実際結合される態様（すなわち硬化のすぐ前に）は、制限要因ではなく、そして意図される使用により変化することができる。混合に基づいて、結合組成物を生成する、ノクートＡ及びＢのための好ましい、濃度範囲は、下記及び実施例に論ぜられる。

上記のように、接着剤組成物のパートＡは好ましくは、オバルプミン又は血漿タンパク質成分、たとえばヒト又は動物起源のタンパク質性材料の実質的な水溶液を含んで成る。パートＡとしての使用するための好ましいタンパク質源は、濃縮血清、血清アルブミン及びそれらの組合せから成る群から選択された血漿タンパク質である。

オバルブミンを包含するアルブミンが好ましいタンパク質であり、そしてヒト又は他の動物起源の血清アルブミンが特に好ましい。

タンパク質性材料は精製されたタンパク質として又はタンパク質、たとえば血清アルブミンが主成分である混合物において提供され得る。たとえば、少量の血漿成分フィブリノーゲン（たとえばパートへの約１〜２０重量％及び好ましくは約１〜約ｌＯ重量％）の存在は、本発明の硬化された組成物の接着性質を改良することが見出された。

たとえば、血液血漿又は血清、又は安定化された血漿タンパク質の市販の溶液の脱水により得られる固体混合物は、パートＡを調製するために使用され得る。血漿固体又は血清固体に対する複合材料として一般的に言及されるそれらの混合物は典型的には、それらの主成分として、約５０〜約９０重量％の程度のアルブミンを含む０本明細書で使用される場合、用語“血漿”とは、血球が遠心分離により除去されている完全な血液を言及する。用語“血清”とは、凝集を防ぐために、そのフィブリノーゲン及び／又はフィブリンの除去により、又は試薬、たとえばクエン酸塩又はＥＤＴ＾の添加によりフィブリン凝集形成を阻害することによってさらに処理されている血清を言及する。

接着剤組成物中のパートＢは好ましくは、ジ又はポリアルデヒドの実質的な水溶液を含んで成る。広範囲のそれらの物質が存在し、そしてそれらの有用性は利用性及び水におけるそれらの溶解性により制限される。たとえば水性グリオキサール（エタンジアール）は、水性グルグルアルデヒド（ペンタンジアール）であるので有用である。過ヨウ素酸塩、オゾン又は同様のものによる適切な炭水化物の酸化分解により調製されるジ及びポリアルデヒドの水溶性混合物がまた有用である。グルタルアルデヒドは、パートＢの好ましく１ジアルデヒド成分である。

パー１−Ａ及びＢが下記例に記載されるように一緒にされる場合、その得られる生成物は、混合の短時間内に、一般的には約５０〜約９０秒で強い皮又はゴム材料に対して急速に硬化する。強１．ｓ接着性番よ、接着剤組成物が結合されるべき表面の１つ又は両者に存在し、そしてその表面が結合が硬化する前に一緒にされる場合にもたらす、十分な結合強度が、１分以内で一般的には達成されるが、し力１し当業者は、操作要因、たとえばパートＡ及びＢとして使用される特定の成分、温度、及び同様のものが結合形成の速度に影響を及＆ｆすために使用され得ることを認識するであろう、たとえば、著しく減じられた硬化速度は、炭水化物の酸化分解により誘導されるジ又番よボ１ノアルデヒドがパートＢとして使用される場合に観察される。同様に、パー）Ａが血漿固体に基づく場合、十分な結合強度力（、精製されたウノ血′消アルブミンが使用される場合よりも約２倍早く得られる。

本明細書に記載される場合、効果的な結合は、フィートＡ及びＢを含む好ましい組成物が上記特定された許容できる範囲内、すなわち約２７〜約５３重量％のタンパク質並びに必要量のジアルデヒド及び水を含む場合にもたらされる。しかしながら、組成物力く結合されるべき表面上でパートＡ及びＢを機械的に混合することによって生成する場合、パートＡ及びＢがその混合を促進するために落（する女子ましい濃度範囲が存在する。従って、約３０〜約５０重量％の）ｉ−トへの固形分を有するタンパク質溶液（ノマートＡ）を用し）、そして約５〜約１５重量％のパートＢのジアルデヒド溶液（ノクートＢ）と共にそれらを混合することが好ましい。

本発明の接着剤組成物を生成する場合、パートＡ及びＢが予備混合され、そして注射器、カテーテル又は他の装置により混合した後ずぐに結合されるべき表面に適用される。他方、パートＡ及びＢは、たとえば二重ノズル装置から同時に通用され、そして結合されるべき表面上で混合される０表面へのパートＡ及びＢの連続的適用はまた満足のいくものであり、そしてＢ及びＡ１次にＢの順序が好ましい。

特に好ましいＢ様においては、パートＡ（約４０〜約４３重量％の血漿タンパク質を含む）とパートＢ（約５〜約１５重量％のグルタルアルデヒド又は他のジ又はポリアルデヒドを含む）とを混合することが最とも便利である。しかしながら、ある用途においては、上記濃度のＡ及びＢからそれらとが好ましく、但し、得られる混合物の組成物が上記で特定された限界内に存在する必要がある。わずかに過剰量のＢを使用することがある用途においてはまた便利である。なぜならば、未反応材料が、結合が形成された後に容易に中和され得るからである。約５％の濃度で適用される、タンパク質、ペプチド又はアミノ酸の希釈溶液は、過剰のアルデヒド成分を中和するために適切である。

好ましい態様において、キット成分バートＡは典型的はペースト状材料であり、そしてパー）Ｂは典型的には液体である。１１１合される場合、ハチ蜜のような組成物（外観及び稠度の両者により）が好ましくは得られる。

現在記載される本発明の硬化された接着剤及び関連するキット及び組成物の他に、本発明は、（ａ）タンパク質成分及び二又は多官能価アルデヒド成分を含んで成る組成物を供給し、そして（ｂ）接着剤を形成するために前記組成物を硬化する段階を含んで成る、組織接着剤を調製するための方法をさらに提供する。好ましくは、タンパク質成分は血漿タンパク質であり、そして硬化された組成物はＴｉ５ｓｕｅ　Ａｄｈｅｒｅｎｃｅ　Ｔｅ５ｔにおいて少なくとも約７５ｇ／ｃｅ＋”の引裂強さを示す結合を提供できる。

パートＡは乾燥タンパク質性固体を水に溶解することによって調製され、ここで場合によっては、必須でない材料を含み、又は固体が場合によっては、前記必須でない材料を含む水に溶解され得る。

乾燥タンパク質性固体は希釈タンパク質性溶液、たとえば血漿又は血清、又は市販の血漿増量剤、たとえばＰＩａｓ＋＊ａ−Ｐｌｅｘ　（Ｒ）　（Ｐ］ａｓ＋＊ａ−Ｐｌｅｘ　Ｐｌａｓｍａタンパク質画分（ヒト）ＵＳＰ５％溶液、熱処理されている、Ａｒｍｏｕｒ　Ｐｈａｒ＋ｍａｃｅｕＬｉｃａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｋａｎｋａｋｅｅ、　ｌ１ｌｉｎｏｉｓ　６０９０１）又はＰｌａｓｍａｎａｔｅ　（Ｒ）　（血漿タンパク質両分（ヒト）ＵＳＰ５％溶液、Ｍｉｌｅｓ、　Ｉｎｃ、　Ｃｕｔｔｅｒ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ、　Ｅｌｋｈａｒｔ、　Ｉｎｄｉａｎａ　４６５１５１ＵＳＡ。

Ｍｉｌｅｓ　Ｃａｎａｄａ、　Ｉｎｃ、、　Ｅｔｏｂｉｏｃｏｋｅ、　０ｎＬａｒｉｏ　Ｃａｎａｄａ）の凍結乾燥により調製され得、ここで前記溶液は、約５重量％のタンパク質を含む血漿タンパク質又は他の適切な溶液の安定化され、再構成された？８液である。精製されたタンパク質粉末、たとえばヒト又は動物血清アルデヒド、ホハルブミン又はタンパク質粉末の混合物がまた、パートＡを調製するために作用する。

パートＡの調製の他の経路は、必要とされる固形分への希釈タンパク質性溶液の濃縮である。このアプローチは、特に、患者自身の血液からの又は単一のドナーから得られたスクリーンされた血液からの接着剤の調製のために有用である。多くの技法がタンパク質溶液を濃縮するために利用でき、そしてそれらは当業者に良く知られている。それらの中で、凍結乾燥及び再構成（上記に言及される）、Ｔ発、吸湿性固体との接触、透析、限外濾過及び真空遠心蒸発を列挙することができる。希釈／８液を濃縮する他の方法は、特定の用途において好ましい。

本発明の上記硬化された接着剤及び関連する組成物の他に、本発明はさらに、多くの組織及び／又は組織接触表面を組成物の使用により一緒に付着せしめる方法を提供する。その方法は、（ａ）タンパク質成分及び二又は多官能価アルデヒド成分を含んで成る組成物（接着性結合を提供するために硬化され得る）を１又は複数の組織表面に適用し、（ｂ）その表面を接触せしめ、そして（Ｃ）その表面を付着せしめるために前記組成物を硬化する段階を含んで成る。

好ましくは、タンパク質成分は血漿タンパク質であり、そして硬化された組成物は、Ｔｉ５ｓｕｅ　Ａｄｈｅｒｅｎｃｅ　Ｔｅ５ｔで少なくとも約７５ｇ／ｃｍ ”の引裂強さを示す、その方法の実施においては、組成物中の成分が表面に連続的に適用され、そして組成物を形成するために現場で一緒に混合され得る。他には、成分が組織表面への適用の前、組成物を形成するために一緒に混合され得る。

従って、本発明は、１つの観点においては、生物学的組織及び物質と、タンパク質及び二又は多官能価アルデヒドの混合物を含んで成る接着剤組成物とを、組織と物質との間の結合が形成されるような条件下で接触せしめることを含んで成る、生物学的組織を物質に結合するための方法を提供する。前記物質は生物学的組織又は合成材料であり得る。

本発明の方法においては、タンパク質及びアルデヒドは表面に連続的に適用され、そして組成物を形成するために現場で一緒に混合され得る。他方、タンパク質及びアルデヒドは、組織表面へのその適用の前、組成物を形成するために一緒に混合され得る。

本発明の硬化された接着剤及び関連するキント及び組成物の他に、本発明はさらに、本発明の硬化された接着剤により、１又は複数の生物適合性装置表面を任意に包含する、−緒に付着された１又は複数の組織表面を含んで成る組合せを提供する。その組合せは、タンパク質成分及び二又は多官能価アルデヒド成分を含んで成る組成物から調製された硬化された接着剤により一緒に付着された多くの表面を含んで成る。好ましくは、タンパク質成分は血漿タンパク質を含んで成り、そして組成物はＴｉ５ｓｕｅ　Ａｄｈｅｒｅｎｃｅ　Ｔｅ５ｔで少なくとも約７５ｇ／ｃｍ”の引裂強さを示す結合試験を提供するように硬化され得る。

本発明の好ましい態様が次の例によりさらに示される。

乾燥血漿固体を、新鮮な凍結されたヒト血漿を凍結乾燥することによって得た。

水をその固体に添加し、４５重量％の固体を含む粘性溶液を生成した。この溶液をパートＡとして使用した。パートＢは、１０重量％のグルタルアルデヒドを含むグルタルアルデヒド水溶液であった。２つの肉片の長方形ブロックを結合されるべき表面上にＢにより軽くスプレーした。次に、その表面を約１！１＋ｌｌ〜約２１の厚さにＡにより被覆し、そして再びＢによりスプレーした。Ａ：Ｂの比は７：１の重量比であった。表面をＡの適用の約１０秒以内で連結し、そして硬化が完結するまで、一般的には温度及びＡ及びＢの混合の有効性に依存して１５〜６０秒間、一定位置に維持した。

１Ｊｌ１３”　Ｔｉ５ｓｕｅ　Ａｄｈｅｒｅｎｃｅ　Ｔｅ５ｔ）引裂強さを測定するために、肉の付着された長方形ブロックを、一端でスプリングバランス及び他端で種々の重りをクランプにより取付けた０重量を、結合又は隣接する肉が破壊するまで徐々に高めた。引裂強さを、結合を破壊するのに必要とされるｇ／ｃｍ”で記録した。引裂強さは、特に示さない限り、表面を結合して後、１分で測定された。上記組成物についての典型的な引裂強さは４４５　ｇ／Ｃｌ１ｚであった。肉自体の強さは、そのような試験を用いて測定され得る組織付着性の上限を測定するように作用する。この特定の試験においては、その上限は約１２００ｇ　７ｃｍ”　（”１２００＋　ｇ　７ｃｍ”　”として同定される）である、いづれか特定の試験における上限はたとえば肉のタイプ、切断の方向及び同様のものに依存するが、それらの上限以下で得られた値は種々のサンプル間で比較できる。そのような強い接着剤は柔組織接着に関する使用のためには低い有用性のものであるが、それらはＮ及び結合組織接着のような用途においては特に有用である。

Ａ及びＢの適用の順序が逆にされる場合、又はＡ及びＢが同時に適用される場合、又はＡ及びＢが適用のすぐ前で予備混合される場合、実質的に同し結合強さが観察された。

拠Ｉ例１と同しである。但し、熱処理された５％血漿タンパク質画分（ヒ）　）　ＵＳＰを用いて、乾燥固体を生成し、そしてパー１−Ａにおけるその濃度は４７重量％であった。接着は上記のようにして達成された。引裂強さは５５０〜６２４　ｇ　７ｃｍ”であった。

桝主ウシ血清アルブミンを水に溶解し、４０重量％の固体を含む溶液を生成し、次にこれを、肉ブロックを結合するために例１に記載されるようにしてパートＡとして使用した。引裂強さは５１４〜６２９ｇ／Ｃ鋼２の範囲であった。

阻土４０〜４５重量％のタンパク質を含むヒト血清アルブミン溶液を、透析により２５％溶液に濃縮することによって調製した。それらの溶液を上記のように結合においてパートＡとして使用する場合、引裂強さは６０５〜９２２　ｇ　／ｃｖａ ”の範囲であった。

倒」− パートＡが４５．５Ｗ！ｔ％固形分を有し、そしてウシ血清アルブミン及びウシフィブリノーゲン（ここでアルブミンは９０〜９７％を構成する）の混合物から成る溶液である場合、得られる結合の引裂強さは７８６〜１２８０　ｇ　／　ｃｗｈ”以上であった。

桝旦Ｄａｃｒｏｎ　（ＴＭ）材料から製造された合成血管補綴及びＴｅｆｌｏｎ　（ＴＭ）材料から製造された補綴並びに死体由来のヒト血管移植物材料は、本明細書に包含されるすべての例に記載されるいづれがの組成物を用いて、肉又はお互いに都合良く結合された。たとえば、牛肉と織物Ｄａｃｒｏｎ血管補綴との間の結合について例５の組成物により得られた引裂強さは８９０　ｇ／ｃＩｍ”以上であった。剪断モードで測定される場合、Ｔｅｆｌｏｎ移植物への結合性は６７０　ｇ　７ｃｍ”であった、同様に、ソリコーンゴムにより被覆された移植可能な医療用電極は、パートＡにおいてウソ血清アルブミンを用いて、ｌ０８０ｇ／ｃＩＩ”の引裂強さを示した。

桝１３０〜３２重量％のヒト血清アルブミンを含むバー）Ａを、新鮮な血漿又は安定化された５％血血漿タンパク温溶液ら限外濾過により調製した。５０％水性グルタルアルデヒドが成分Ｂとして使用される場合、得られる結合の引裂強さは２６７〜３３５　ｇ　７ｃｍ”の範囲であった。

倒１パートＡは、上記例７に記載のようにして５％安定化溶液（ＵＳＰ）から調製されたヒト血漿タンパク質３０重量％であった。パートＢは２５重量％の水性グルグルアルデヒドであった。パートＡ及びＢを１０＝１の重盪比で混合し、２７重量％のタンパク質を含む混合物をもたらした。この混合物をすぐに２つの肉ブロックの表面に適用し、そしてブロックを連結した。その得られる結合は７５ｇ／ｃｌｌ”の引裂強さを有した。

撚度肉ブロックが例１に記載されるようにして、但し、Ａとして４７％の水性ウシ血清アルブミン及びＢとして１０％水性グルオキサールを用いて連結される場合、引裂強さは３３３　ｇ／ｃ＋ｇ”であった。

例皿高い割合の皮膚及び脂肪組織を含む橋体を、バー１−Ａとして、１５．０００〜２０，０００の分子量の４％ポリエチレングリコール及び約４１％ウソ血清アルブミンを含む水溶液、及びパートＢとして１０％グルタルアルデヒドを用いて連結した。生成される結合の引裂強さは１３００ｇ／ｃ剛２であった。

倒狙、例１に記載される接着剤組成物を、３５〜４０ボンドのブタに対してのいくつかの手術方法に都合良く使用した０行なわれた方法は、多孔性腹部大動脈及び腸へのパッチの適用及び再切開された肺臓の血止めであった。パッチは、ヒト心血管手術において移植物材料として使用するために処理されたヒト死体肺動脈組織から切断された。

源パートＡは４７％ウシ血清アルブミンであった。パートＢは次の通りにして調製された：メチルグルコシド（０，５ｇ）を水（４，１ｍｌ）に溶解し、そして水浴において炭酸水素ナトリウムの存在下で４５分間、過ヨウ素酸ナトリウムにより酸化した。この反応の生成物は、約ｌＯ重量％濃度で複合ジアルデヒド並びに必須でない塩であることが知られている。この溶液を精製しないでパートＢとして使用した。

その混合物は約１時間で柔軟な結合に硬化し、そして３２０ｇ／ｃｍ”の引裂強さを有した。

設置１例１１と同じであった。但し、水浴において水（４，０ｍｌ）に溶解されたトレハロース（０，５ｇ）、過ヨウ素酸ナトリウム（１，２ｇ）及び炭酸水素ナトリウム（０，５ｇ）を試薬として用い、パートＢを生成した。この生成物は、約１０％溶液における複合ジ、テトラ及びポリマーアルデヒドの混合物並びに必須でない塩を含むことが知られている。１時間後の引裂強さは２４５　ｇ／ｃｍｚであった。

桝旦例１１におけるのと同しであった。但し、スクロース（０，５ｇ）、過ヨウ素酸ナトリウム（１，０ｇ）、炭酸水素ナトリウム（１，０ｇ）及び水（５，０ｍｌ）を用いた。得られる生成物溶液は、約８％で複合ジ、テトラ及びポリアルデヒドの混合物を含むことが知られている。

得られる結合強さは３６４　ｇ／ｃｍ”であった。

徴艮卵白を凍結乾燥することによって得られた及び主にオバルブミンから成る固体混合物を水に溶解し、４４．０〜４４．８％の範囲の固形分を有する溶液を製造した。それらの溶液がパートＢとして１０％水性グルタルアルデヒドを用いての接着研究においてパートＡとして使用される場合、得られる引裂強さは２５５〜３３９　ｇ／ｃｍ”の範囲であった。

桝■ ウシ血清アルブミン（ＢＳ＾）を、示される濃度で水に溶解し、そしてバー）Ａとして使用した。バー）Ｂは１０％水性グルタルアルデヒドであった。次の引裂強さが測定された：負Ｉ］０酎臣７１　１”　ｃｔａ” ４Ｑ　５１４−６２９傘　：均等に広がるためには粘性過ぎた。

罰Ｐｌａｓ＋ｗａ−ＰｌｅＸ（Ｒ）　、すなわちヒトタンパク質画分（ＵＳＰ）の５％溶液を凍結乾燥し、得られた固体を下記に示される濃度に水により構成し、そしてその溶液をパートＡとして使用した。パートＢは１０％水性グルタルアルデヒドであった。次の引裂強さが観察された：５５　８５−３９０　” ＋　＝支持体組織が結合よりもむしろ裂けたことを示す。

傘　：均等に広がるためには粘性過ぎた。

刈例１７の通りであった。但し、新鮮な凍結された血漿を凍結乾燥することによって得られた固体を用い、次の引裂強さが得られた。

６０　非溶解性＋　：支持体組織が結合よりもむしろ裂けたことを示す。

＄　：十分に広がるためには粘性過ぎる。

佃タンパク質の混合物を、パートＡについての本発明の濃度範囲で使用することができる。たとえば、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）及びウシフィブリノーゲン（ＢＦ）は卓越した接着性を生成する０合計固体（混合された）は４５．５重量％であった。

％ＢＳＡ　ｙ、−肛　ｃ−２）９７　３　７０８−１２８０’ ９３．３　６．７　７９７゜８０　２０　７３６−２３７゜＋　：支持体＆［Ｉ織が結合よりもむしろ裂けたことを示す。

傘：ＢＦは十分に溶解できず、その溶液はゴム状である。

たとえば９３部のＢＳＡ及び７部のＢＰを４５〜４６重量％の固体で有するそれらの混合物は、８９０　’　〜１２００”の強度でＤａｃｒｏｎ　（ＴＭ）及びＰＴＦＥに徐々に結合した。

−Ｃ的に、良好な結合が、Ａ又はＢを最初に又は同時に二重ノズルから適用することによって達成される。また、現場混合の方法は良好な結合を提供する。バートＡ及びＢは順に、８次にＡ、次にＢ；又はＡ、次にＢ；又は結合されるべき表面上で混合により同時に；又はカテーテルを通して；又は予備混合に続いてすぐに、注射器又は類億する装置を通して適用され得る。

本発明は多くの異なった形で具体化され得るが、本発明の特定の好ましい態様が本明細書に詳細に記載されている０本発明の開示は、本発明の原理の例示であって、本発明を特定の態様に制限するものではない、これは本発明の好ましい及び他の態様の記載を完結する。

当業者は、本発明の範囲内で変更及び修飾を実施できることを認識できる。

手続補正書平成７年１月１９日

Claims

【特許請求の範囲】

１．血漿タンパク質及び二又は多官能価アルデヒドの混合物を含んで成る接着剤組成物。
２．球状タンパク質及び二又は多官能価アルデヒドの混合物を含んで成る接着剤組成物。
３．前記球状タンパク質がアルブミンである請求の範囲第２項記載の接着剤組成物。
４．前記接着剤が、硬化される場合、組織付着試験での測定において少なくとも約７５ｇ／ｃｍ２の引裂強さを有する請求る範囲第１又は２項記載の接着剤組成物。
５．前記引裂強さが少なくとも約４００ｇ／ｃｍ２である請求の範囲第４項記載の接着剤組成物。
６．前記タンパク質成分が、組成物の重量に基づいて、約２７〜約５３重量％の濃度で存在する請求の範囲第１又は２項記載の接着剤組成物。
７．前記アルデヒド成分が組成物の約０．５〜約５重量％の濃度で存在する請求の範囲第１又は２項記載の接着剤組成物。
８．前記アルデヒド成分が、グリオキサ−ル、スクシンアルデヒド、グルタルアルデヒド、マレアルデヒド及びフタルアルデヒドから成る群から選択されたジアルデヒドである請求の範囲第１又は２項記載の接着剤組成物。
９．タンパク質性材料及び二又は多官能価アルデヒドの滅菌混合物を含んで成る接着剤組成物。
１０．前記クンパク質性材料が血漿タンパク質である請求の範囲第９項記載の接着剤組成物。
１１．前記タンパク質性材料が球状タンパク質である請求の範囲第９項記載の接着剤組成物。
１２．その中に配置された血漿タンパク質を有する第１の容器手段及びその中に配置された二又は多官能価アルデヒドを有する第２の容器手段を含んで成るキット。
１３．その中に配置された球状タンパク質を有する第１の容器手段及びその中に位置された二又は多官能価アルデヒドを有する第２の容器手段を含んで成るキット。
１４．前記球状タンパク質がアルブミンである請求の範囲第１３項記載のキット。
１５．約３０〜５５重量％の濃度でその中に配置された血漿タンパク質成分を有する第１の容器手段及び約５〜約１５重量％の濃度でその中に配置されたジ又はポリアルデヒド成分を有する第２の容器手段を含んで成るキットであって、前記タンパク質及びアルデヒド成分が５〜６０重量部のタンパク質成分と１重量部のアルデヒド成分との混合を可能にするのに十分な量で存在することを特徴とするキット。
１６．その中に配置されたタンパク質性材料及び二又は多官能価アルデヒドを有する、組織表面に接着剤組成物を供給するためのアプリケーター。
１７．前記アプリケーターが注射器である請求の範囲第１６項記載のアプリケーター。
１８．前記アプリケーターが第１及び第２の別々の区画室を含んで成り、前記タンパク質性材料がアプリケーターの第１の区画室内に配置され、そして前記アルデヒドがアプリケーターの第２の区画室内に配置される請求の範囲第１７項記載のアプリケーター。
１９．生物学的組織を物質に結合するための方法であって、組織及び物質と、タンパク質及び二又は多官能価アルデヒドの混合物を含んで成る接着剤組成物とを、前記組織と物質とる間の結合が形成されるような条件下で接触せしめることを含んで成る方法。
２０．前記物質が生物学的組織である請求の範囲第１９項記載の方法。
２１．前記物質が合成材料である請求の範囲第１９項記載の方法。
２２．前記タンパク質が血漿タンパク質であり、そして前記接着剤が、硬化される場合、組織付着試験での測定において少なくとも約７５ｇ／ｃｍ２の引裂強さを有する請求の範囲第１９項記載の方法。
２３．前記タンパク質及びアルデヒドが前記表面に連続的に適用され、そして前記組成物を形成するために現場で一緒に混合される請求の範囲第１９項記載の方法。
２４．前記タンパク質及びアルデヒドが、組織表面へのその適用の前、前記組成物を形成するために一緒に混合される請求の範囲第１９項記載の方法。
２５．タンパク質成分及び二又は多官能価アルデヒド成分を含んで成る組成物から調製された硬化された接着剤により一緒に接着された多くの表面を含んで成る組合せであって、前記組成物が組織付着試験において少なくとも約７５ｇ／ｃｍ２る引裂強さを示す結合試験を提供するように硬化できることを特徴とする組合せ。