JPH0743383B2 - 診断試薬用担体ラテツクス - Google Patents
診断試薬用担体ラテツクスInfo
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- JPH0743383B2 JPH0743383B2 JP61210547A JP21054786A JPH0743383B2 JP H0743383 B2 JPH0743383 B2 JP H0743383B2 JP 61210547 A JP61210547 A JP 61210547A JP 21054786 A JP21054786 A JP 21054786A JP H0743383 B2 JPH0743383 B2 JP H0743383B2
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- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
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Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、抗原−抗体反応を利用した免疫血清学的診断
ラテツクスに用いることにより、非特異的凝集反応を著
しく低減させることのできる診断試薬用の担体ラテツク
スに関する。
ラテツクスに用いることにより、非特異的凝集反応を著
しく低減させることのできる診断試薬用の担体ラテツク
スに関する。
抗原又は抗体などの血清学的活性物質を担体に感作さ
せ、血清中の抗体又は抗原を、ラテツクスの凝集反応と
して検出する免疫血清学的診断法は、その簡便性と迅速
性の故に、臨床検査の分野において多くの種類の抗原又
は抗体の検出試薬に適用されている。
せ、血清中の抗体又は抗原を、ラテツクスの凝集反応と
して検出する免疫血清学的診断法は、その簡便性と迅速
性の故に、臨床検査の分野において多くの種類の抗原又
は抗体の検出試薬に適用されている。
この種の試薬において、抗原又は抗体を感作させる担体
としては例えばポリスチレン、スチレン−ブタジエン共
重合体ラテツクスなどの樹脂ラテツクスが一般に使用さ
れている。これらの樹脂ラテツクスに要求される性能と
しては、安定なエマルジヨンを形成すること、抗原又は
抗体を感作させる段階でラテツクスが凝集しないこと、
感作させた抗原又は抗体に対応する抗体又は抗原を反応
させ、ラテツクスの凝集を観察する際に陰性血清と接触
しても凝集しないこと、即ち非特異的凝集が起こらない
こと等が必須の条件とされる。
としては例えばポリスチレン、スチレン−ブタジエン共
重合体ラテツクスなどの樹脂ラテツクスが一般に使用さ
れている。これらの樹脂ラテツクスに要求される性能と
しては、安定なエマルジヨンを形成すること、抗原又は
抗体を感作させる段階でラテツクスが凝集しないこと、
感作させた抗原又は抗体に対応する抗体又は抗原を反応
させ、ラテツクスの凝集を観察する際に陰性血清と接触
しても凝集しないこと、即ち非特異的凝集が起こらない
こと等が必須の条件とされる。
近年、免疫血清学的検査の分野において抗原又は抗体な
どの微量物質を定性的だけではなく定量的に測定するこ
とが重要な課題となつている。従来は感作ラテツクスを
ガラス板上で検体と混合し反応させ、その粒子の凝集状
態を肉眼で観察することによつて検査目的物質を定性的
に検出していたが、この凝集状態を肉眼で観察すること
の代りに、光学的測定装置、例えば分光光度計、濁度
計、準弾性光散乱測定装置などを用いて測定することに
よつて定量的に検出しようとする試みが多くなされてい
る。例えば感作ラテツクス中の粒子が凝集する現象を利
用して上澄液の濁度の減少率を測定する方法及び感作ラ
テツクス中の粒子の凝集による吸光度や散乱光の変化を
測定する方法などが知られている（CROATICA CHEMICAAC
TA,42,457（1970）,Immunochemistry,12,349（1975），
特開昭53−24015号公報、同54−109494号公報など）。
どの微量物質を定性的だけではなく定量的に測定するこ
とが重要な課題となつている。従来は感作ラテツクスを
ガラス板上で検体と混合し反応させ、その粒子の凝集状
態を肉眼で観察することによつて検査目的物質を定性的
に検出していたが、この凝集状態を肉眼で観察すること
の代りに、光学的測定装置、例えば分光光度計、濁度
計、準弾性光散乱測定装置などを用いて測定することに
よつて定量的に検出しようとする試みが多くなされてい
る。例えば感作ラテツクス中の粒子が凝集する現象を利
用して上澄液の濁度の減少率を測定する方法及び感作ラ
テツクス中の粒子の凝集による吸光度や散乱光の変化を
測定する方法などが知られている（CROATICA CHEMICAAC
TA,42,457（1970）,Immunochemistry,12,349（1975），
特開昭53−24015号公報、同54−109494号公報など）。
これらの方法は感作ラテツクス中の粒子の免疫血清学的
凝集反応による反応系の吸光度、散乱光強度などの光学
的特性の変化を測定することによつて定量化しようとす
るものであるが、いずれの方法も凝集反応による反応系
の光学的特性の変化が小さいために精度、再現性などに
問題があつた。また、感作ラテツクスの光学的特性の経
時変化がしばしば起こり、実用上支障を生じるという問
題もあつた。
凝集反応による反応系の吸光度、散乱光強度などの光学
的特性の変化を測定することによつて定量化しようとす
るものであるが、いずれの方法も凝集反応による反応系
の光学的特性の変化が小さいために精度、再現性などに
問題があつた。また、感作ラテツクスの光学的特性の経
時変化がしばしば起こり、実用上支障を生じるという問
題もあつた。
ラテツクスに抗原又は抗体を感作する方法には、物理的
な吸着によるものと化学的な結合によるものがある。一
般に用いられる物理的な吸着による方法では、ラテツク
スと抗原又は抗体との間に吸着解離平衡があるために、
測定中又は保存中に感作された抗原又は抗体がラテツク
スから解離するという欠点がある。
な吸着によるものと化学的な結合によるものがある。一
般に用いられる物理的な吸着による方法では、ラテツク
スと抗原又は抗体との間に吸着解離平衡があるために、
測定中又は保存中に感作された抗原又は抗体がラテツク
スから解離するという欠点がある。
本発明者らは、従来から知られている診断試薬用担体ラ
テツクスに前述の解決すべき問題点があることを認識
し、抗原−抗体反応を利用した免疫血清学的ラテツクス
診断試験に用いる非特異的凝集反応の少ない診断試薬用
担体ラテツクスを提供することを目的とし、さらには特
に吸光度や散乱光強度などの光学的測定法に適した担体
ラテツクスを提供することを目的として鋭意検討したと
ころ、芳香族ビニル化合物がグラフト結合した、エチレ
ンとα，β−エチレン性不飽和カルボン酸との共重合体
および／またはその塩からなり、カルボキシル基を表面
に有する粒子の懸濁液からなるラテツクスがかかる目的
を達成することを見出し、本発明に到達した。
テツクスに前述の解決すべき問題点があることを認識
し、抗原−抗体反応を利用した免疫血清学的ラテツクス
診断試験に用いる非特異的凝集反応の少ない診断試薬用
担体ラテツクスを提供することを目的とし、さらには特
に吸光度や散乱光強度などの光学的測定法に適した担体
ラテツクスを提供することを目的として鋭意検討したと
ころ、芳香族ビニル化合物がグラフト結合した、エチレ
ンとα，β−エチレン性不飽和カルボン酸との共重合体
および／またはその塩からなり、カルボキシル基を表面
に有する粒子の懸濁液からなるラテツクスがかかる目的
を達成することを見出し、本発明に到達した。
〔問題点を解決しようとする手段〕および〔作用〕 本発明の要旨とするところは、芳香族ビニル化合物がグ
ラフト結合した、エチレンとα，β−エチレン性不飽和
カルボン酸との共重合体および／またはその塩からな
り、カルボキシル基を表面に有する粒子の懸濁液からな
る診断試薬用担体ラテツクスにある。
ラフト結合した、エチレンとα，β−エチレン性不飽和
カルボン酸との共重合体および／またはその塩からな
り、カルボキシル基を表面に有する粒子の懸濁液からな
る診断試薬用担体ラテツクスにある。
次に、本発明の診断試薬用担体ラテツクスについて更に
詳細に説明する。
詳細に説明する。
本発明の診断試薬用担体ラテツクスは、芳香族ビニル化
合物がグラフト結合した、エチレンとα，β−エチレン
性不飽和カルボン酸との共重合体および／またはその塩
からなり、カルボキシル基を表面に有する粒子の懸濁液
であり、さらに具体的にはエチレンとα，β−エチレン
性不飽和カルボン酸との共重合体および／またはその塩
の懸濁粒子に芳香族ビニル化合物をグラフト結合させる
ことによつて得られる。ここで、エチレンとα，β−エ
チレン性不飽和カルボン酸との共重合体またはその塩は
エチレン65ないし98重量％、好ましくは80ないし98重量
％とα，β−エチレン性不飽和カルボン酸および／また
はその塩２ないし35重量％、好ましくは２ないし20重量
％との共重合体である。α，β−エチレン性不飽和カル
ボン酸またはその塩としては、α，β−エチレン性不飽
和カルボン酸、その塩あるいはそれらの混合成分からな
るものであり、例えばアクリル酸、メタクリル酸、イタ
コン酸、マレイン酸、フマル酸などのα，β−エチレン
性不飽和カルボン酸、これらのナトリウム塩、カリウム
塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、バリウム塩、亜鉛
塩などの金属塩などを例示することができるが、メタク
リル酸またはその塩が好ましい。本発明において、エチ
レンとα，β−エチレン性不飽和カルボン酸との共重合
体および／またはその塩は、エチレンとα，β−エチレ
ン性不飽和カルボン酸との共重合体の中和物または部分
中和物であつてもよい。また、該共重合体のメルトフロ
ーレート（190℃、2.16kgの荷重で測定）は通常50ない
し700g/10min、好ましくは100ないし600g/10minの範囲
である。また、芳香族ビニル化合物がグラフト結合させ
る前のエチレンとα，β−エチレン性不飽和カルボン酸
との共重合体および／またはその塩からなる粒子の懸濁
液中の該共重合体の粒子の平均粒子径は通常0.03ないし
１μｍ、好ましくは0.04ないし0.8μｍの範囲である。
合物がグラフト結合した、エチレンとα，β−エチレン
性不飽和カルボン酸との共重合体および／またはその塩
からなり、カルボキシル基を表面に有する粒子の懸濁液
であり、さらに具体的にはエチレンとα，β−エチレン
性不飽和カルボン酸との共重合体および／またはその塩
の懸濁粒子に芳香族ビニル化合物をグラフト結合させる
ことによつて得られる。ここで、エチレンとα，β−エ
チレン性不飽和カルボン酸との共重合体またはその塩は
エチレン65ないし98重量％、好ましくは80ないし98重量
％とα，β−エチレン性不飽和カルボン酸および／また
はその塩２ないし35重量％、好ましくは２ないし20重量
％との共重合体である。α，β−エチレン性不飽和カル
ボン酸またはその塩としては、α，β−エチレン性不飽
和カルボン酸、その塩あるいはそれらの混合成分からな
るものであり、例えばアクリル酸、メタクリル酸、イタ
コン酸、マレイン酸、フマル酸などのα，β−エチレン
性不飽和カルボン酸、これらのナトリウム塩、カリウム
塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、バリウム塩、亜鉛
塩などの金属塩などを例示することができるが、メタク
リル酸またはその塩が好ましい。本発明において、エチ
レンとα，β−エチレン性不飽和カルボン酸との共重合
体および／またはその塩は、エチレンとα，β−エチレ
ン性不飽和カルボン酸との共重合体の中和物または部分
中和物であつてもよい。また、該共重合体のメルトフロ
ーレート（190℃、2.16kgの荷重で測定）は通常50ない
し700g/10min、好ましくは100ないし600g/10minの範囲
である。また、芳香族ビニル化合物がグラフト結合させ
る前のエチレンとα，β−エチレン性不飽和カルボン酸
との共重合体および／またはその塩からなる粒子の懸濁
液中の該共重合体の粒子の平均粒子径は通常0.03ないし
１μｍ、好ましくは0.04ないし0.8μｍの範囲である。
また、本発明の診断試薬用担体ラテツクスの懸濁液中の
粒子は、エチレンとα，β−エチレン性不飽和カルボン
酸との共重合体および／またはその塩に、さらに、芳香
族ビニル化合物がグラフト結合されたものからなるもの
である。この芳香族ビニル化合物がグラフト結合され
た、エチレンとα，β−エチレン性不飽和カルボン酸と
の共重合体および／またはその塩において、芳香族ビニ
ル化合物のグラフト割合は、エチレンとα，β−エチレ
ン性不飽和カルボン酸との共重合体および／またはその
塩100重量部に対して通常100ないし900重量部、好まし
くは200ないし800重量部の範囲である。芳香族ビニル化
合物としては、例えばスチレン、α−メチルスチレン、
ビニルトルエン、エチルスチレンなどを挙げることがで
きる。
粒子は、エチレンとα，β−エチレン性不飽和カルボン
酸との共重合体および／またはその塩に、さらに、芳香
族ビニル化合物がグラフト結合されたものからなるもの
である。この芳香族ビニル化合物がグラフト結合され
た、エチレンとα，β−エチレン性不飽和カルボン酸と
の共重合体および／またはその塩において、芳香族ビニ
ル化合物のグラフト割合は、エチレンとα，β−エチレ
ン性不飽和カルボン酸との共重合体および／またはその
塩100重量部に対して通常100ないし900重量部、好まし
くは200ないし800重量部の範囲である。芳香族ビニル化
合物としては、例えばスチレン、α−メチルスチレン、
ビニルトルエン、エチルスチレンなどを挙げることがで
きる。
また、本発明の診断試薬用担体ラテツクスの懸濁粒子の
平均粒子径は通常0.05〜１μｍ、好ましくは0.1ないし
0.3μｍであり、その粒子径分布が狭いものが好まし
い。また、該診断試薬用担体ラテツクスの固形分含有率
は通常５ないし45重量％、好ましくは10ないし35重量％
の範囲である。また、該担体ラテツクスは一般にその後
の感作操作あるいは感作ラテツクスの分離に遠心分離操
作を行うことが多いため、該担体ラテツクスの懸濁粒子
の比重は通常１以上、好ましくは1.0ないし1.1の範囲で
ある。
平均粒子径は通常0.05〜１μｍ、好ましくは0.1ないし
0.3μｍであり、その粒子径分布が狭いものが好まし
い。また、該診断試薬用担体ラテツクスの固形分含有率
は通常５ないし45重量％、好ましくは10ないし35重量％
の範囲である。また、該担体ラテツクスは一般にその後
の感作操作あるいは感作ラテツクスの分離に遠心分離操
作を行うことが多いため、該担体ラテツクスの懸濁粒子
の比重は通常１以上、好ましくは1.0ないし1.1の範囲で
ある。
本発明の診断試薬用担体ラテツクスの懸濁粒子は抗原又
は抗体などの免疫血清学的活性物質を化学的に結合し得
るカルボキシル基を表面に有しており、その量は該懸濁
粒子表面のカルボキシル基が通常0.01ないし0.3meq/g
（粒子）、好ましくは0.02ないし0.1meq/g（粒子）の範
囲である。カルボキシル基含有量が少なくなると非特異
的凝集を起こし易くなり、カルボキシル基の含有率が多
くなると、凝集反応性が低下し感度が低下するという傾
向がある。なお、該担体ラテツクスの懸濁液粒子表面に
存在するカルボキシル基の含有量はジヨンヘンによつて
開発された測定方法によつて求めることができる〔Jour
nal of Colloid and Interface Science,49,425（197
4）〕。
は抗体などの免疫血清学的活性物質を化学的に結合し得
るカルボキシル基を表面に有しており、その量は該懸濁
粒子表面のカルボキシル基が通常0.01ないし0.3meq/g
（粒子）、好ましくは0.02ないし0.1meq/g（粒子）の範
囲である。カルボキシル基含有量が少なくなると非特異
的凝集を起こし易くなり、カルボキシル基の含有率が多
くなると、凝集反応性が低下し感度が低下するという傾
向がある。なお、該担体ラテツクスの懸濁液粒子表面に
存在するカルボキシル基の含有量はジヨンヘンによつて
開発された測定方法によつて求めることができる〔Jour
nal of Colloid and Interface Science,49,425（197
4）〕。
次に、本発明の診断試薬用担体ラテツクスの製法につい
て説明する。例えば、エチレンとα，β−エチレン性不
飽和カルボン酸との共重合体および／またはその塩の懸
濁液と該懸濁液中の固形分100重量部に対して100〜900
重量部の範囲の芳香族ビニル化合物を含む50〜100℃の
水中に、過硫酸塩水溶液を加え、１〜６時間で反応させ
て、エチレンとα，β−エチレン性不飽和カルボン酸と
の共重合体および／またはその塩に芳香族ビニル化合物
をグラフト重合させる方法を挙げることができる。過硫
酸塩としては、例えば過硫酸アンモニウム、過硫酸ナト
リウム、過硫酸カリウムを挙げることができ、その使用
量は芳香族ビニル化合物に対して、0.1〜５重量％が好
ましい。重合温度は50〜100℃が好ましく、特に70〜90
℃が好ましい。重合終了後に必要に応じて脱単量体のた
めの減圧蒸留もしくは濃度調整のための希釈又は濃縮を
行うことができる。
て説明する。例えば、エチレンとα，β−エチレン性不
飽和カルボン酸との共重合体および／またはその塩の懸
濁液と該懸濁液中の固形分100重量部に対して100〜900
重量部の範囲の芳香族ビニル化合物を含む50〜100℃の
水中に、過硫酸塩水溶液を加え、１〜６時間で反応させ
て、エチレンとα，β−エチレン性不飽和カルボン酸と
の共重合体および／またはその塩に芳香族ビニル化合物
をグラフト重合させる方法を挙げることができる。過硫
酸塩としては、例えば過硫酸アンモニウム、過硫酸ナト
リウム、過硫酸カリウムを挙げることができ、その使用
量は芳香族ビニル化合物に対して、0.1〜５重量％が好
ましい。重合温度は50〜100℃が好ましく、特に70〜90
℃が好ましい。重合終了後に必要に応じて脱単量体のた
めの減圧蒸留もしくは濃度調整のための希釈又は濃縮を
行うことができる。
本発明の診断試薬用担体ラテツクスに抗原又は抗体など
の免疫血清学的活性物質を化学的に結合（感作）させる
方法としては従来から知られている方法を採用すること
ができる。
の免疫血清学的活性物質を化学的に結合（感作）させる
方法としては従来から知られている方法を採用すること
ができる。
〔実施例〕 以下に実施例により、具体的に説明するが、本発明は、
下記実施例に限定されるものではない。なお、ラテツク
スに抗体を感作させる方法及び感作ラテツクスの凝集感
度の測定は以下の方法により行つた。
下記実施例に限定されるものではない。なお、ラテツク
スに抗体を感作させる方法及び感作ラテツクスの凝集感
度の測定は以下の方法により行つた。
（１） ラテツクス感作法 抗AFPラテツクス試薬の調製 樹脂ラテツクスをリン酸緩衝液に懸濁させ、固形分濃度
５％の懸濁液を0.25ml調製する。この懸濁液に抗AFPウ
サギ血清より調製したIgG分画1mg、水溶性カルボジイミ
ド5mgを加え、pH5にし、氷冷下１時間撹拌し、1gGをラ
テツクス表面に化学結合させる。次に、グリシンを加
え、pH8にし、遠心分離処理（20,000rpm、30分間）後、
上澄液をとり、ヒト血清アルブミン３重量％を含むグリ
シン緩衝液（pH8.2）に再分散させ、固形分濃度0.1％の
感作ラテツクスとする。
５％の懸濁液を0.25ml調製する。この懸濁液に抗AFPウ
サギ血清より調製したIgG分画1mg、水溶性カルボジイミ
ド5mgを加え、pH5にし、氷冷下１時間撹拌し、1gGをラ
テツクス表面に化学結合させる。次に、グリシンを加
え、pH8にし、遠心分離処理（20,000rpm、30分間）後、
上澄液をとり、ヒト血清アルブミン３重量％を含むグリ
シン緩衝液（pH8.2）に再分散させ、固形分濃度0.1％の
感作ラテツクスとする。
（２） 凝集感度の測定法 上記感作ラテツクス50μをウシ血清アルブミン１重量
％を含むグリシン緩衝液（pH8.2）150μで希釈し、所
定の濃度のAFPを含む試料10μを加え撹拌混合したの
ち、室温で30分間反応させる。光散乱測定装置でこの混
合液の散乱強度を測定し、AFP濃度と散乱強度との関係
を得た。
％を含むグリシン緩衝液（pH8.2）150μで希釈し、所
定の濃度のAFPを含む試料10μを加え撹拌混合したの
ち、室温で30分間反応させる。光散乱測定装置でこの混
合液の散乱強度を測定し、AFP濃度と散乱強度との関係
を得た。
実施例 １ エチレンとメタクリル酸との共重合体のナトリウム塩の
デイスパージヨンの製造 メタクリル酸10重量％を含むエチレン−メタクリル酸共
重合体100gをトルエン330g及びイソプロピルアルコール
220gからなる混合物中で75℃に加熱することにより溶解
した。この溶液をホモミキサー中で水酸化ナトリウム0.
78gを含む蒸留水250gに加え、10〜20分間撹拌を行い、
エチレン−メタクリル酸共重合体のナトリウム塩からな
る粒子を含む懸濁液を調製した。この懸濁液から減圧下
トルエン及びイソプロピルアルコールを除去し、固形分
濃度を30％に調整した。第１表に示すように、油層の重
合体濃度及びトルエンとイソプロピルアルコールの重量
比を変えることにより、粒子径の異なるデイスパージヨ
ンを得た。
デイスパージヨンの製造 メタクリル酸10重量％を含むエチレン−メタクリル酸共
重合体100gをトルエン330g及びイソプロピルアルコール
220gからなる混合物中で75℃に加熱することにより溶解
した。この溶液をホモミキサー中で水酸化ナトリウム0.
78gを含む蒸留水250gに加え、10〜20分間撹拌を行い、
エチレン−メタクリル酸共重合体のナトリウム塩からな
る粒子を含む懸濁液を調製した。この懸濁液から減圧下
トルエン及びイソプロピルアルコールを除去し、固形分
濃度を30％に調整した。第１表に示すように、油層の重
合体濃度及びトルエンとイソプロピルアルコールの重量
比を変えることにより、粒子径の異なるデイスパージヨ
ンを得た。
エチレンとメタクリル酸との共重合体のナトリウム塩
と、スチレンとのグラフト重合 第２表に示した組成の前記に調製したエチレンとメタク
リル酸との共重合体のナトリウム塩を含むデイスパージ
ヨン、スチレン、蒸留水からなる混合物を80℃に加熱
し、過硫酸カリウムを含む蒸留水50gを加え、80℃で２
時間撹拌しグラフト重合を行い、エチレンとメタクリル
酸との共重合体のナトリウム塩に、スチレンをグラフト
結合してなる重合体からなる粒子を含む懸濁液（以下、
「重合体粒子ラテツクス」という）を得た。得られた重
合体粒子ラテツクスから減圧蒸留で未反応スチレンを除
去した。得られた重合体粒子の平均粒子径及び表面カル
ボキシル基の量を第２表に示す。
と、スチレンとのグラフト重合 第２表に示した組成の前記に調製したエチレンとメタク
リル酸との共重合体のナトリウム塩を含むデイスパージ
ヨン、スチレン、蒸留水からなる混合物を80℃に加熱
し、過硫酸カリウムを含む蒸留水50gを加え、80℃で２
時間撹拌しグラフト重合を行い、エチレンとメタクリル
酸との共重合体のナトリウム塩に、スチレンをグラフト
結合してなる重合体からなる粒子を含む懸濁液（以下、
「重合体粒子ラテツクス」という）を得た。得られた重
合体粒子ラテツクスから減圧蒸留で未反応スチレンを除
去した。得られた重合体粒子の平均粒子径及び表面カル
ボキシル基の量を第２表に示す。
比較例 １ スチレンとメタクリル酸との共重合体からなる粒子のラ
テツクスの製造 蒸留水150gを撹拌しながら80℃にした。次にスチレン98
g及びメタクリル酸2gからなる混合物及び過硫酸カリウ
ム0.5gを含む蒸留水50gを同時に10時間かけて連続的に
添加した。添加終了後、さらに２時間撹拌しながら重合
反応を行つて、スチレンとメタクリル酸との共重合体か
らなる粒子を含む懸濁液からなるラテツクスを得た。得
られたラテツクスから減圧蒸留によって未反応単量体を
除去して担体ラテツクスを調製した。得られた担体ラテ
ツクス中のスチレンとメタクリル酸との共重合体からな
る粒子の平均粒子径は0.20μｍ、表面のカルボキシル基
の量は0.06meq/gであつた。
テツクスの製造 蒸留水150gを撹拌しながら80℃にした。次にスチレン98
g及びメタクリル酸2gからなる混合物及び過硫酸カリウ
ム0.5gを含む蒸留水50gを同時に10時間かけて連続的に
添加した。添加終了後、さらに２時間撹拌しながら重合
反応を行つて、スチレンとメタクリル酸との共重合体か
らなる粒子を含む懸濁液からなるラテツクスを得た。得
られたラテツクスから減圧蒸留によって未反応単量体を
除去して担体ラテツクスを調製した。得られた担体ラテ
ツクス中のスチレンとメタクリル酸との共重合体からな
る粒子の平均粒子径は0.20μｍ、表面のカルボキシル基
の量は0.06meq/gであつた。
実施例１及び比較例１で得られた担体ラテツクスに所定
の方法に従つて抗AFP抗体を感作させ、感作ラテツクス
を得、所定の方法で凝集感度を測定した。結果を第１図
に示す。
の方法に従つて抗AFP抗体を感作させ、感作ラテツクス
を得、所定の方法で凝集感度を測定した。結果を第１図
に示す。
第１図から実施例１の試料番号１〜５で得たラテツクス
を使用した感作ラテツクスはAFP濃度によつて散乱光強
度が大きく変化していることがわかる。これに対して比
較例１のラテツクスを使用した感作ラテツクスはAFP濃
度による散乱光強度の変化が小さいことがわかる。
を使用した感作ラテツクスはAFP濃度によつて散乱光強
度が大きく変化していることがわかる。これに対して比
較例１のラテツクスを使用した感作ラテツクスはAFP濃
度による散乱光強度の変化が小さいことがわかる。
本発明の診断試薬用担体ラテツクスを用いて調製された
診断試薬用担体ラテツクス、即ち感作ラテツクスは非特
異的凝集が少なくかつ特異的凝集の感度が高く、特に光
学的測定法による診断システムに最適である。
診断試薬用担体ラテツクス、即ち感作ラテツクスは非特
異的凝集が少なくかつ特異的凝集の感度が高く、特に光
学的測定法による診断システムに最適である。
第１図は実施例１の試料番号１〜５及び比較例１で得た
担体ラテツクスに抗AFP抗体を感作させた感作ラテツク
スの凝集反応に対する抗原濃度と散乱光強度との関係を
示す。
担体ラテツクスに抗AFP抗体を感作させた感作ラテツク
スの凝集反応に対する抗原濃度と散乱光強度との関係を
示す。
Claims (1)
- 【請求項１】芳香族ビニル化合物がグラフト結合した、
エチレンとα，β−エチレン性不飽和カルボン酸との共
重合体および／またはその塩からなり、カルボキシル基
を表面に有する粒子の懸濁液からなる診断試薬用担体ラ
テックス。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61210547A JPH0743383B2 (ja) | 1986-09-09 | 1986-09-09 | 診断試薬用担体ラテツクス |
| PCT/JP1987/000667 WO1988002119A1 (en) | 1986-09-09 | 1987-09-09 | Carrier latex for diagnostic reagent |
| EP87905795A EP0286687B1 (en) | 1986-09-09 | 1987-09-09 | Carrier latex for diagnostic reagent |
| US07/183,734 US5132243A (en) | 1986-09-09 | 1987-09-09 | Carrier latex for use as diagnostic reagent |
| DE8787905795T DE3784701D1 (de) | 1986-09-09 | 1987-09-09 | Latextraeger fuer diagnostisches reagenz. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61210547A JPH0743383B2 (ja) | 1986-09-09 | 1986-09-09 | 診断試薬用担体ラテツクス |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6366464A JPS6366464A (ja) | 1988-03-25 |
| JPH0743383B2 true JPH0743383B2 (ja) | 1995-05-15 |
Family
ID=16591141
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61210547A Expired - Lifetime JPH0743383B2 (ja) | 1986-09-09 | 1986-09-09 | 診断試薬用担体ラテツクス |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5132243A (ja) |
| EP (1) | EP0286687B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0743383B2 (ja) |
| DE (1) | DE3784701D1 (ja) |
| WO (1) | WO1988002119A1 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2642174B1 (fr) * | 1989-01-20 | 1994-03-25 | Diagnostica Stago | Particules submicroniques, utilisation dans le domaine des reactions immunologiques du type antigene |
| US5149737A (en) * | 1990-06-18 | 1992-09-22 | Eastman Kodak Company | Carboxy containing monomers and polymers and latices prepared from same |
| FR2762394B1 (fr) * | 1997-04-16 | 1999-05-28 | Bio Merieux | Compose ligand de coordination et utilisation pour fixer un materiel biologique |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2027031A (en) * | 1978-08-02 | 1980-02-13 | Hoffmann La Roche | Diagnostic Reagent Comprising a Proteinaceous Material Bonded to a Latex |
| JPS57137339A (en) * | 1981-02-20 | 1982-08-24 | Asahi Chem Ind Co Ltd | Aqueous dispersion composition and its preparation |
| JPS57139108A (en) * | 1981-02-24 | 1982-08-27 | Japan Synthetic Rubber Co Ltd | Polymer particle and production thereof |
| JPS57168163A (en) * | 1981-04-10 | 1982-10-16 | Japan Synthetic Rubber Co Ltd | Carier for immunoserological inspection reagent |
| JPS61266420A (ja) * | 1985-05-21 | 1986-11-26 | Mitsui Petrochem Ind Ltd | 水性分散組成物 |
-
1986
- 1986-09-09 JP JP61210547A patent/JPH0743383B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1987
- 1987-09-09 US US07/183,734 patent/US5132243A/en not_active Expired - Fee Related
- 1987-09-09 WO PCT/JP1987/000667 patent/WO1988002119A1/ja active IP Right Grant
- 1987-09-09 EP EP87905795A patent/EP0286687B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-09-09 DE DE8787905795T patent/DE3784701D1/de not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1988002119A1 (en) | 1988-03-24 |
| EP0286687B1 (en) | 1993-03-10 |
| DE3784701D1 (de) | 1993-04-15 |
| US5132243A (en) | 1992-07-21 |
| EP0286687A1 (en) | 1988-10-19 |
| EP0286687A4 (en) | 1990-01-08 |
| JPS6366464A (ja) | 1988-03-25 |
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