JPS6217188B2 - - Google Patents

Info

Publication number
JPS6217188B2
JPS6217188B2 JP14777277A JP14777277A JPS6217188B2 JP S6217188 B2 JPS6217188 B2 JP S6217188B2 JP 14777277 A JP14777277 A JP 14777277A JP 14777277 A JP14777277 A JP 14777277A JP S6217188 B2 JPS6217188 B2 JP S6217188B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
latex
reagent
antibody
antigen
particles
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired
Application number
JP14777277A
Other languages
English (en)
Other versions
JPS53104726A (en
Inventor
Rorentsuo Kamubiaso Shiiza
Rushian Matsuson Pieeru
De Suteenuinkeru Furoorisu
Eruma Rii Adorian
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bayer Corp
Original Assignee
Technicon Instruments Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Technicon Instruments Corp filed Critical Technicon Instruments Corp
Publication of JPS53104726A publication Critical patent/JPS53104726A/ja
Publication of JPS6217188B2 publication Critical patent/JPS6217188B2/ja
Granted legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54313Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/74Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)

Description

【発明の詳现な説明】
本発明は特に血枅のような生物孊的液䜓ずは限
らない液䜓䞭に抗原たたは抗䜓の存圚を定めるた
めのその液䜓の分析に関するものである。本明现
曞においおは、蚘号Ag、AbおよびAbAgはそ
れぞれ抗原このこずばには付着䜓haptene
および抗䜓たたは同様な結合たん癜質によ぀お結
合されうる他の物質を含む、抗䜓同様な結合
たん癜質を含むおよび抗䜓抗原耇合䜓を意味
するものずしお䜿われる。 Agは適圓なAbず反応しおAbAgを䜜るもの
でありそしお倧抵の免疫分析法がこの反応を利甚
しおいるこずはよく知られおいる。さらにたたポ
リスチレン䞀般的にラテツクスず呌ぶのよう
な埮粒子物質をAbたたはAgでコヌチングし、次
いでコヌチングされた粒子を詊隓する詊料溶液に
さらし、そしおこの粒子が凝着aggultinate
したかそしおどの皋床に凝着したかを調べるこず
も知られおいる。この凝着は぀たたはそれ以䞊
のコヌチングされたラテツクス粒子ず反応しお凝
着を起すこずのできるAbたたはAgが詊料䞭に存
圚するこずを瀺すものである。 コヌチングされた粒子の凝着を芳枬する技術は
倚くの点においお満足できるものであるのに、小
さいAgすなわちその分子量が玄4000よりも少な
いAgの分析には問題がある。そのようなAgは䜿
甚する埮粒子物質に察し非垞に小さく、そのため
に識別できるような凝着がしばしば起らないかた
たはある皋床たで起らない。したが぀おこの技術
は小さいAgの分析甚には党面的の信頌は眮けな
い。 本発明者らは今回液䜓䞭のAbおよびAgを分析
その存圚の怜出および所望によりその量の枬定
も共に行なうする改良された技術を開発した。
それは特に小さいAgたたはAbの分析に有甚
であるがも぀ず倧きいAgたたはAbの分析に
䜿うこずもできる。 本発明の぀の実態は次のような分析法の提䟛
である。 (a)(i) 分析すべき特定の抗原たたは抗䜓成分を含
む液䜓詊料、 (ii) 実質的に均䞀な粒子寞法をも぀第のラテ
ツクスにより担持された第の詊薬、および (iii) 前蚘第ラテツクスず異なる実質的に均䞀
な粒子寞法をも぀第のラテツクスにより担
持された第の詊薬〔ただしここで前蚘第
詊薬は前蚘第詊薬ず結合しお前蚘第およ
び第ラテツクスを凝着させるこずができ、
そしお少なくずも第詊薬は前蚘特定成分ず
結合しお前蚘第および第ラテツクスの凝
着を阻害するこずもできるものずする〕の混
合物を圢成し、 (b) この混合物をむンキナベヌトしお前蚘第詊
薬を競合的に前蚘特定成分および前蚘第詊薬
ず結合させ、そしお (c) 前蚘第および第ラテツクスの凝着たたは
䞍凝着の皋床を、混合物䞭の凝着しおいないラ
テツクスの光孊的技術による遞択的蚈数により
枬定し、それにより詊料䞭に存圚する前蚘特定
成分を定量する こずから成る、液䜓䞭の特定の抗原たたは抗䜓成
分を定量する方法。 本発明の方法に埓぀お、皮の異なるラテツク
ス詊薬を同時に䜿うが、この点が皮のラテツク
ス詊薬しか䜿わない先行技術ず異なるずころであ
る。これら皮の詊薬はい぀しよに混合されたず
きに凝着するが混合前には凝着しないものであ
る。䟋えば䞀方のラテツクス詊薬はAgたたはAg
−配合物で、他方AgたたはAg−配合物ず結合す
るAbであるこずができる。この皮の詊薬を混
合するずAbはAgたたはAg−配合物ず結合し
お粒子の凝着を起させる。しかしながら埮粒子詊
薬の少なくずも぀は、それが液䜓䞭の被隓特殊
AbたたはAgず結合するように遞ばれる。ラテツ
クス詊薬が遊離のAbたたはAgず結合するこずは
ラテツクス詊薬の結合䜍眮をふさぐのでそれは他
のラテツクス詊薬ず結合しそしお凝着するこずは
もはやできない。混合物䞭の凝着の皋床はこうし
お液䜓䞭の特殊な被隓AgたたはAbの量に䟝存す
る量だけ枛少するそれは特殊なAgたたはAbが
存圚しない堎合に液䜓䞭に起る量以䞊である。
この珟象を芳察するこずによ぀お特殊なAbたた
はAgの存圚を確認するこずができ、そしお凝着
たたは䞍凝着の皋床を枬定するこずによ぀お特殊
なAbたたはAgの量を定量するこずができる。こ
れは通垞最も䟿宜的には、既知濃床のAgたたは
Abを䜿぀お埗られた結果から暙準曲線を䜜り、
そしお次に被隓詊料䞭のあらかじめ未知のAbた
たはAgの量を定量するようにこの曲線を䜿うこ
ずによ぀お行なわれる。 本発明の信ずるずころでは、本発明の方法は、
どのようなAgにも䜿われそしおAgでコヌチング
されたラテツクス詊薬によ぀お特異性が導入され
るからラテツクス詊薬䞊には特異なAbを必芁ず
しない。すなわち䟋えば、぀のラテツクス詊薬
䞊のAbコヌチングが非特異性でそのためにそれ
は぀の異なるAgず反応するこずができ、そし
おこれらのAgの䞭のただ぀だけすなわち
Ag′を液䜓詊料から分析するこずが所望される
ずするず、その堎合にはAbをコヌチングした詊
薬ず共にAg′をコヌチングしたラテツクス詊薬を
䜿うこずによ぀おAg′の分析を行なうこずができ
る。この手法は詊料䞭のAbの怜出および枬定に
も同じようにしお䜿うこずができる。 本発明の方法に䜿われるラテツクス詊薬は顕埮
鏡的あるいは超顕埮鏡的サむズのものである。す
なわちそれは䞀般に15ミクロンよりも小さく最も
普通には数ミクロンたたはサブミクロン〜
100Ό皋床のサむズである。このようなサむ
ズのラテツクス粒子は垂販されおいる。ラテツク
スのような顕埮鏡的埮粒物質にAbたたはAgを結
合するこずは知られおいる。これは通垞粒子䞊に
反応性のコヌチングを䞎えそしお粒子䞊のAbた
たはAgを化孊的に結合するかあるいは吞着する
こずによ぀お行なわれる。ある情況の堎合には
AbたたはAgを盎接に粒子その間に介圚するコ
ヌチングをもたないに結合するこずも可胜であ
る。ラテツクス詊薬を䜜る方法は本発明の目的で
なないしそしお業界でよく知られおいるから、そ
れに぀いおはこれ以䞊蚘茉するこずはしない。 本発明の目的のためにラテツクスのような埮粒
子物質に結合するこずができるAgおよびAbの䞭
には䟋えば次のような物がある。Abずしおは免
疫グロブリンIgGこれは人間、家兎、山
矊および矊の血枅からのものであるならびにそ
れらのab′断片、家兎IgM、Agずしおは
人間のIgM、人間の胎盀ラクトヌゲン、人間のα
―胎児たん癜質α―fetoprotein、人間のラク
トプリンLactoferrin、人間の血枅、アル
ブミン、人間のトランスプリン
Transferrin、人間の−反応性たん癜質およ
び人間のIgGのFc断片、牛のIgGおよび血枅アル
ブミン、銬のプリチンferritin、鉄たん癜
質、人間、マりス、ラツトおよびモルモツトの
IgG′および粟補された人間のIgGの、、お
よび亜綱。たた人間の血枅のアルブミン、IgG
およびトランスプリン、牛のアルブミンおよび
フむブリノヌゲンおよび銬のプリチンのチロキ
シン配合物を結合させるこずもできた。たた人間
および牛のアルブミンおよび牛のIgGのゞゎキシ
ンDigoxin配合物も結合させた。その衚面に
反応性カルボキシル基をも぀おいるポリスチレン
ラテツクス粒子にチロキシンは盎接に結合するこ
ずができる。 各ラテツクス詊薬の粒子サむズは実質的に䞀様
であるこずおよび以䞋にも぀ず詳しく蚘茉するよ
うに第のラテツクス詊薬の粒子サむズは第の
ラテツクス詊薬のそれずは異なる少なくずも埌
者の倍が奜たしいものであるこずが奜たし
い。 特殊なAgたたはAbの存圚を怜出する方法を実
斜するのには、凝着の阻害が起぀たかどうかを確
蚌するこずだけが必芁である。被隓詊料䞭にAg
たたはAbが比范的倧量にあるずきには、混合物
は顕埮鏡のスラむドに広げられおいるので、顕埮
鏡を通しおの芳察で肉県で凝着の阻害を怜出する
こずができる。぀の特に奜たしい詊隓は牛乳䞭
のプロゲステロンの存圚を怜出するためのもので
ある。そこでは牛乳ず、プロゲステロンたたはプ
ロゲステロン配合物から成る顕埮鏡的もしくは超
顕埮鏡的ラテツクス詊薬ずそしおプロゲステロン
およびプロゲステロン配合物の䞡方ず結合する
Abから成る顕埮鏡的もしくは超顕埮鏡的ラテツ
クス詊薬ずの混合物が䜜られる。肉県で混合物を
調べるず通垞凝着阻害がわかるものである。もち
ろん凝着阻害の有無を確蚌する詊隓においお定量
分析に関係しお埌述する方法の぀を䜿うこずも
できる。 本発明による定量分析では、ラテツクス詊薬の
凝着たたは䞍凝着の皋床を枬るこずが必芁であ
る。これは皮々の方法で行なうこずができる。䟋
えば凝着した粒子を凝着しない粒子から分別し、
それから埌者の数を枬定するこずができる。その
分別は䟋えばろ過、遠心分離たたはカラムクロマ
トグラフむによ぀お行なうこずができる。次に䞍
凝着粒子の数を枬定するのであるが、それには䟋
えば蚈数によるかあるいはラテツクス詊薬䞊の確
認ラベル䟋えば攟射性原子を䜿うこずによ぀
お枬るこずができる。 しかしながら䞀般にこれは避けるこずが奜たし
い。それは時間がかかりそしお誀差が生じ易いか
らである。その代りに凝着、䞍凝着の皋床を算定
するために反応混合物を枬るこずが奜たしい。こ
れはそれ自䜓は圓業界で知られおいる遞択的蚈数
技術を䜿うこずによ぀お䟿利に行なうこずができ
る。この方法では䟋えば䞎えられたサむズ範囲の
粒子この範囲倖のサむズの粒子は無芖される
の数を算定するこずができる。 これは行なう぀の既知装眮はテクニコン自動
蚈数噚Technicon Autocouuterである。その
基本型においおは、この装眮は垌釈された詊料が
光束に盎角にポンプで送られるフロヌセル
Flowcellを光が通過するような光孊系から成
るものである。光孊系の他の端は光電池がある。
そしおフロヌセルのすぐ埌には䞭心に黒点をも぀
たレンズがある。この黒点はフロヌセルを盎接に
通぀た光線が光電池に到達するのを防ぐためのも
のである。粒子が光束の䞭にあるずきは、入射光
の郚は黒点を迂回するように散乱されお光電池
に到達する。これが電子の衝撃むンパルスを
瀺し、このむンパルスを集蚈するこずによ぀お詊
料䞭の粒子の蚈数が行なわれる。 遞択的蚈数技術を䜿う堎合には、぀のラテツ
クス詊薬は蚈数噚で識別できるように異なるサむ
ズのものであるず非垞に奜郜合である。ミクロン
たたはサブミクロンのサむズの粒子を䜿぀おこの
ような目的には、倍のサむズの差があれば通垞
満足である。遞択蚈数を䜿う本発明方法の操䜜を
単に䟋によ぀お説明するず次の通りである。被隓
Agを含む詊料にサむズがそれぞれミクロンず
0.1ミクロンの第ず第のラテツクス詊薬を加
える。ここで加える第の詊薬の量はわか぀おお
り、そしお詊料䞭のすべおのAgず結合するのに
芁する量の過剰を加える。第の詊薬の郚は
Agず結合し、そしおそれによ぀お第の詊薬の
粒子ず結合するこずは阻害される。しかしAgず
結合しなか぀た第の詊薬粒子は第のラテツク
ス詊薬ず結合しお凝着する。このずき混合物は(i)
詊料からのAgに結合した第詊薬の粒子䞍凝
着、(ii)過剰の第詊薬の粒子䞍凝着および
(iii)凝着した粒子を含んでいる。䞍凝着の第およ
び第の詊薬粒子の間にはサむズの差があるの
で、凝着しない第詊薬の粒子の数(i)を蚈数する
こずができる。そしおその算定ず暙準結果ず
から詊料䞭のAgの量を蚈算するこずができる。 このたたは同様な方法で凊理するこずは非
垞に奜たしい。 本発明の方法は小さいAgずAbを分析するのに
特に奜郜合である。これに関連しおステロむドず
医薬の分析は最も重芁なものに入る。 本発明がさらに充分に理解されるように説明す
るために次の実斜䟋を瀺す。 䟋  この実斜䟋はゞゎキシンdigoxineの分析を
説明する䟋である。 (a) Abでコヌチングされたラテツクスの補法 ラテツクス粒子ダりケミカル瀟補品、盎埄
0.09Όのポリスチレンで10重量懞濁液ずしお
入手したものをうすいグリシンで緩衝された
食塩氎dGBS−20mMグリシン、34mM
NaCl、PH〔これはStastnyおよびHorejsi、
Clin.Chim.Acta、7821961の方法によ぀
お䜜られる矊の抗ゞゎキシン血枅のリバノヌル
可溶画分0.2mg/mlを含む〕䞭に20倍に垌釈さ
れ、そしお宀枩で30分間むンキナベヌトされ
た。次にmldGBS圓り牛の血枅アルブミン
bSA10mgの1/10容量を加えたラテツクス
が完党にたん癜質でコヌチングされたこずを確
かめるため。そしお30分間むンキナベヌトし
た埌にコヌチングされたラテツクスを回遠心
分離しお掗いdGBS䞭に再び懞濁された。最埌
にコヌチングされたラテツクスはml䞭mgの
bSAを含むGBS0.1Mグリシン、0.17M
NaCl、PH䞭に0.5懞濁液ずしお再び懞濁
された。 (b) Agでコヌチングされたラテツクスの補法 ラテツクスを盎埄1.1Όのものを䜿い、むン
キナベヌシペンをAg−配合物濃床をΌ/ml
にしお行な぀た以倖は(a)におけるず同じ方法を
行ない、そしお次に10mg/mlのトランスプリ
ンの1/10容量を加えた。 Ag−配合物はゞゎキシンず゚チレングリコ
ヌルずを酞化結合させるこずによ぀お䜜られ、
次にこの耇合䜓を還元結合するこずによ぀おた
ん癜質ずされた。無氎アルコヌルml䞭に溶か
したゞゎキシン50mgを0.1M NaClO42mlず共に
25分間むンキナベヌトし、次で゚チレングリコ
ヌル60Όを加えさらに分間むンキナベヌト
した。この反応混合物を次に氎ml䞭の人間の
トランスプリン60mgの溶液に加え
Na2CO3を加えおPHを9.5ずし、そしお45分間む
ンキナベヌトした。新しくNaBH430mgを氎
mlに溶かした溶液を加える時間むンキナベヌシ
ペンを続けた。この時期の最埌には反応混合物
のPHは未反応のNaBH4を分解するように1M
HCOOHの添加によ぀お6.5に䞋げられた。そ
しおさらに時間むンキナベヌトした埌1M
NH4OHを加えおPHを8.5に䞊げ、そしお補品を
℃で日間透析した。その他のすべおの操
䜜は宀枩で行な぀た。 (c) 分析 ゞゎキシンの分析に䜿う血枅は血枅劚害を枛
らすように先ず酞ず共に加熱された。血枅25ÎŒ
を0.1N HCl25Όず共に10分間56℃に加熱
し、次に2M Na2CO310Όを添加しおアルカ
リ性ずした。この加熱された血枅に、Ab−ラ
テツクスmgbSAmlを含むGBSで10に
垌釈されたもの25Όおよび配合ラテツクス
人間のトランスプリンmg/mlを含むGBSで
に垌釈されたもの25Όを加えた。そ
れらを振ずう匏むンキナベヌタヌ䞊で氎平にか
きたぜられる垂盎に配眮された管の䞭で宀枩で
15分間むンキナベヌトした。この時期の最埌
に、管の内容物をGBS5mlで垌釈し、そしお
0.01トりむヌン20Tween20を含むGBSで
さらに20倍に垌釈した埌テクニコン自動カりン
タヌのフロりセルをml分の速床で通した。
各詊料䞭の凝着しないモノマヌラテツクス
粒子の盞察的な数が遞択的光孊蚈数によ぀お決
定された凝着した粒子の盞察的な数も同様で
ある。第衚に埗られた数倀を瀺す。
【衚】 この方法は付着䜓のAg−配合物をbSAずい
぀しよに䜿぀おゞニトロプノヌルDNP
の定量にも芋事に適甚された。 粒子の遞択的光孊蚈数においお、぀の粒子
で散乱される光の量は粒子のサむズに䟝存す
る。すなわち、光電池内に発生する電子衝撃
むンパルスは粒子のサむズに比䟋する。そ
しお異なるサむズの粒子は別々に蚈数するこず
ができる。第衚はすべおの粒子を蚈数するの
ずは反察に凝着しない粒子モノマヌだけを
蚈数するこずによ぀お埗られる定量暙準曲線
に察しおも぀ず拡匵された範囲を提䟛するこず
によ぀おの粟確床における改良を説明するも
のである。この衚はたた凝着しない粒子ず凝着
した粒子ずの比率モノマヌポリマヌ比を
蚈算するこずによ぀お実珟できる感床の倧きな
増加を説明しおいる。粒子を党郚蚈数するこず
によ぀お感床および粟確床の増進が、終点決定
の他の方法ず比范によ぀お実感するこずができ
る。第衚は粒子は蚈数するこずによ぀お埗ら
れる結果の比范を瀺す。
【衚】
【衚】 各数倀はhPLが存圚しない堎合に埗られる倀
のずしお衚わされおいる。 ゞゎキシンに察する暙準曲線を衚わす組の
詊料に察するモノマヌのみおよび濁床分析
400nmにおける光孊密床。
【衚】 各数倀はゞゎキシンがn/ml存圚する堎
合最高阻止に芋出される数倀のずしお衚
わされおいる。 䟋  この䟋はチロキシンの分析を説明する。 (a) チロキシず結合したラテツクスの補法 ラテツクス粒子ダりケミカル瀟補品、盎埄
0.857Όのカルボキシル化倉性ポリスチレン
を10重量懞濁液ずしお入手し、それをりん酞
塩緩衝食塩氎PBSりん酞ナトリりム
50mM、食塩0.17M、PH䞭に20倍に垌釈
し、遠心分離℃、12000回転で10分間し
そしお新鮮なPBS䞭に再懞濁し最終的には重
量の懞濁液ずした。PBS1ml䞭のチロキシン
25Όず−゚チル−−−ゞメチルアミ
ノプロピル−カルボゞむミド塩酞塩50Όの
溶液を℃で䜜り、そしお掗浄したラテツクス
懞濁液250Όを加えた。これを℃で時間
むンキナベヌトした埌PBS䞭の25゚タノヌル
アミン250Όを加えおさらに30分間むンキナ
ベヌトした。次いでこのラテツクスを回遠心
分離しそしお新しいPBS毎回ml䞭に再懞
濁し、それから℃でPBS1に察しお16時間
透析を行な぀た。それを最終的に遠心分離しそ
しおグリシンで緩衝された牛のアルブミン
bSAを含む食塩氎䞭に再懞濁した。 (b) 混合凝着によるチロキシンの分析 (i) Abでコヌチングされたラテツクスの補法 このラテツクスの補法は䟋におけるゞゎ
キシンの分析甚のものず党く同じであるが、
この堎合のAbは家兎抗チロキシンT4血枅
からの物である。 (ii) Agでコヌチングされたラテツクスの補法 䞊蚘(a)の堎合ず同じである。 (iii) 分析 T4を分析すべき血枅は、ナトリりムゞ゚
チルバルビツレヌト75mMPH9.2䞭の
−アニリノ−ナフタレン−−スルホン酞
1mMの等容量ず先ず混合する。この垌釈さ
れた血枅50ΌをbSA1を含むGBS䞭のAb
−ラテツクスの0.01懞濁液25Όおよび䟋
のゞゎキシンの分析甚ず同じ方法の同じ懞
濁液䞭のAg−ラテツクスの0.1懞濁液25ÎŒ
ずい぀しよにむンキナベヌトした。第衚
はこの系を䜿぀た埗られた代衚的な結果を説
明する。 第  è¡š ngT4血枅 粒子濃床最高  48 10 51.5 50 59.5 100 89 この堎合の最高倀はAg−ラテツクスのみ
に察するものであ぀たが、䞊のすべおの数倀
はAg−ラテツクスの存圚する堎合にも同様
に芋られる。 䟋  異なる粒子寞法を採甚した堎合ず察比しお同じ
粒子寞法のラテツクス粒子を採甚した堎合を瀺
す。手順は䟋ず同じである。
【衚】

Claims (1)

  1. 【特蚱請求の範囲】  (a)(i) 分析すべき特定の抗原たたは抗䜓成分
    を含む液䜓詊料、 (ii) 実質的に均䞀な粒子寞法をも぀第のラテ
    ツクスにより担持された第の詊薬、および (iii) 前蚘第ラテツクスず異なる実質的に均䞀
    な粒子寞法をも぀第のラテツクスにより担
    持された第の詊薬〔ただしここで前蚘第
    詊薬は前蚘第詊薬ず結合しお前蚘第およ
    び第ラテツクスを凝着させるこずができ、
    そしお少なくずも第詊薬は前蚘特定成分ず
    結合しお前蚘第および第ラテツクスの凝
    着を阻害するこずもできるものずする〕の混
    合物を圢成し、 (b) この混合物をむンキナベヌトしお前蚘第詊
    薬を競合的に前蚘特定成分および前蚘第詊薬
    ず結合させ、そしお (c) 前蚘第および第ラテツクスの凝着たたは
    䞍凝着の皋床を、混合物䞭の凝着しおいないラ
    テツクスの光孊的技術による遞択的蚈数により
    枬定し、それにより詊料䞭に存圚する前蚘特定
    成分を定量する こずから成る、液䜓䞭の特定の抗原たたは抗䜓成
    分を定量する方法。  特定成分ずしお抗原型物質を、第詊薬ずし
    お分析すべき抗原型物質ず結合できる抗䜓を、そ
    しお第詊薬ずしお前蚘抗䜓ず実質的に同じ物質
    を䜿う、前項に蚘茉の方法。  特定成分ずしお抗䜓を、第詊薬ずしお前蚘
    抗䜓ず結合できる抗原型物質を、そしお第詊薬
    ずしお前蚘抗原型物質ず結合できる抗䜓を䜿う、
    前項に蚘茉の方法。  分析すべき特定成分ずしお分子量が玄4000よ
    りも小さいものを䜿う、前項に蚘茉の方法。  第ラテツクスずしお第ラテツクスの少な
    くずも倍の粒子寞法をも぀ものを䜿う、前項
    に蚘茉の方法。  第ラテツクスずしおその既知量を混合工皋
    (a)においお䜿い、混合物䞭の凝着しおいない第
    ラテツクスを遞択的に蚈数する、前項に蚘茉の
    方法。
JP14777277A 1976-12-10 1977-12-10 Test method of liquid containing specific antigen ag or antibody ab Granted JPS53104726A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB5174076A GB1590525A (en) 1976-12-10 1976-12-10 Biological analysis

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS53104726A JPS53104726A (en) 1978-09-12
JPS6217188B2 true JPS6217188B2 (ja) 1987-04-16

Family

ID=10461194

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP14777277A Granted JPS53104726A (en) 1976-12-10 1977-12-10 Test method of liquid containing specific antigen ag or antibody ab

Country Status (5)

Country Link
JP (1) JPS53104726A (ja)
CA (1) CA1089360A (ja)
DE (1) DE2754645C2 (ja)
FR (1) FR2392387A1 (ja)
GB (1) GB1590525A (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH056646Y2 (ja) * 1987-02-24 1993-02-19

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4191739A (en) * 1977-10-17 1980-03-04 General Electric Company Antigen-antibody reaction assay employing particle aggregation and resistive pulse analysis
GB2045431B (en) * 1979-02-26 1983-04-20 Technicon Instr Immunoassay utilising two particulate reagents
DE2918342A1 (de) * 1979-05-07 1980-11-20 Behringwerke Ag Latex-reagenz
JPS5821166A (ja) * 1981-07-30 1983-02-07 Fujitsu Ltd 被枬定物質分離方匏
DE3212658C3 (de) * 1982-04-05 1993-08-19 American Hospital Supply Corp Verfahren zur antigen-bestimmung
GB2123146B (en) * 1982-06-28 1985-09-25 Abbott Lab Dual parameter flow immunoassays
JPH0619349B2 (ja) * 1983-11-22 1994-03-16 東亜医甚電子株匏䌚瀟 䜓液成分分析方法およびその装眮
JPH0619350B2 (ja) * 1984-05-17 1994-03-16 東亜医甚電子株匏䌚瀟 䜓液成分分析方法およびその装眮
JPS61120060A (ja) * 1984-11-16 1986-06-07 Dai Ichi Pure Chem Co Ltd 党自動連続分析装眮
GB8717862D0 (en) * 1987-07-28 1987-09-03 Acade Diagnostic Systems Sa Nv Turbidimetric assay
CN111965277A (zh) * 2020-08-06 2020-11-20 倩接科執通生物科技有限公叞 䞀种抗䜓纯化流出液自劚收集装眮

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3639558A (en) * 1968-02-19 1972-02-01 Louis Csizmas Immunological reagent particles having proteinaceous materials covalently bonded thereto

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH056646Y2 (ja) * 1987-02-24 1993-02-19

Also Published As

Publication number Publication date
FR2392387A1 (fr) 1978-12-22
DE2754645A1 (de) 1978-06-22
DE2754645C2 (de) 1986-11-20
JPS53104726A (en) 1978-09-12
GB1590525A (en) 1981-06-03
FR2392387B1 (ja) 1982-05-14
CA1089360A (en) 1980-11-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4184849A (en) Mixed agglutination
AU614109B2 (en) Test method and reagent kit therefor
US4397960A (en) Immunoassays using F(AB')2 fragments
US4279617A (en) Iummunoassay involving agglutination
JPS5915860A (ja) 抗䜓、抗原たたは抗䜓抗原耇合䜓の分析法
JPS6314783B2 (ja)
JPH03504276A (ja) 分析方法
JPS60259964A (ja) 分析詊料䞭の免疫孊的に掻性な物質の定量法
US4138213A (en) Agglutination immunoassay of immune complex with RF or Clq
JPS6217188B2 (ja)
KR920000057B1 (ko) 특읎적윌로 결합가능한 묌질의 ìž¡ì • 방법 및 시앜
CN109459570A (zh) 䞀种快速检测人䜓血液䞭铅犻子的胶䜓金免疫试纞条制倇方法
CN113125741A (zh) 降钙玠原的检测试剂、试剂盒、系统及检测方法
JPS6327658B2 (ja)
CN101446586A (zh) 免疫分析试剂和分析方法
JPH0459587B2 (ja)
JP3220546B2 (ja) 免疫耇合䜓存圚䞋の抗原たたは抗䜓の枬定方法
JP4556605B2 (ja) 暙的物質の枬定方法および枬定詊薬
EP0260079A1 (en) Method of assay
JPS63191960A (ja) リガンドのアッセむ法
JP3102827B2 (ja) 特異的結合アッセむ詊薬及びそれを䜿甚した枬定方法
JP2003075438A (ja) −の枬定方法
JPH03118472A (ja) むンスリン定量方法及び定量詊薬
JPH02259569A (ja) リりマチ因子枬定方法
JPH0743383B2 (ja) 蚺断詊薬甚担䜓ラテツクス