JPS6217188B2 - - Google Patents

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JPS6217188B2
JPS6217188B2 JP14777277A JP14777277A JPS6217188B2 JP S6217188 B2 JPS6217188 B2 JP S6217188B2 JP 14777277 A JP14777277 A JP 14777277A JP 14777277 A JP14777277 A JP 14777277A JP S6217188 B2 JPS6217188 B2 JP S6217188B2
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JP
Japan
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latex
reagent
antibody
antigen
particles
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JP14777277A
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JPS53104726A (en
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Rorentsuo Kamubiaso Shiiza
Rushian Matsuson Pieeru
De Suteenuinkeru Furoorisu
Eruma Rii Adorian
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Bayer Corp
Original Assignee
Technicon Instruments Corp
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Filing date
Publication date
Application filed by Technicon Instruments Corp filed Critical Technicon Instruments Corp
Publication of JPS53104726A publication Critical patent/JPS53104726A/ja
Publication of JPS6217188B2 publication Critical patent/JPS6217188B2/ja
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    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54313Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/74Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors

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  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
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  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)

Description

【発明の詳现な説明】
本発明は特に血枅のような生物孊的液䜓ずは限
らない液䜓䞭に抗原たたは抗䜓の存圚を定めるた
めのその液䜓の分析に関するものである。本明现
曞においおは、蚘号Ag、AbおよびAbAgはそ
れぞれ抗原このこずばには付着䜓haptene
および抗䜓たたは同様な結合たん癜質によ぀お結
合されうる他の物質を含む、抗䜓同様な結合
たん癜質を含むおよび抗䜓抗原耇合䜓を意味
するものずしお䜿われる。 Agは適圓なAbず反応しおAbAgを䜜るもの
でありそしお倧抵の免疫分析法がこの反応を利甚
しおいるこずはよく知られおいる。さらにたたポ
リスチレン䞀般的にラテツクスず呌ぶのよう
な埮粒子物質をAbたたはAgでコヌチングし、次
いでコヌチングされた粒子を詊隓する詊料溶液に
さらし、そしおこの粒子が凝着aggultinate
したかそしおどの皋床に凝着したかを調べるこず
も知られおいる。この凝着は぀たたはそれ以䞊
のコヌチングされたラテツクス粒子ず反応しお凝
着を起すこずのできるAbたたはAgが詊料䞭に存
圚するこずを瀺すものである。 コヌチングされた粒子の凝着を芳枬する技術は
倚くの点においお満足できるものであるのに、小
さいAgすなわちその分子量が玄4000よりも少な
いAgの分析には問題がある。そのようなAgは䜿
甚する埮粒子物質に察し非垞に小さく、そのため
に識別できるような凝着がしばしば起らないかた
たはある皋床たで起らない。したが぀おこの技術
は小さいAgの分析甚には党面的の信頌は眮けな
い。 本発明者らは今回液䜓䞭のAbおよびAgを分析
その存圚の怜出および所望によりその量の枬定
も共に行なうする改良された技術を開発した。
それは特に小さいAgたたはAbの分析に有甚
であるがも぀ず倧きいAgたたはAbの分析に
䜿うこずもできる。 本発明の぀の実態は次のような分析法の提䟛
である。 (a)(i) 分析すべき特定の抗原たたは抗䜓成分を含
む液䜓詊料、 (ii) 実質的に均䞀な粒子寞法をも぀第のラテ
ツクスにより担持された第の詊薬、および (iii) 前蚘第ラテツクスず異なる実質的に均䞀
な粒子寞法をも぀第のラテツクスにより担
持された第の詊薬〔ただしここで前蚘第
詊薬は前蚘第詊薬ず結合しお前蚘第およ
び第ラテツクスを凝着させるこずができ、
そしお少なくずも第詊薬は前蚘特定成分ず
結合しお前蚘第および第ラテツクスの凝
着を阻害するこずもできるものずする〕の混
合物を圢成し、 (b) この混合物をむンキナベヌトしお前蚘第詊
薬を競合的に前蚘特定成分および前蚘第詊薬
ず結合させ、そしお (c) 前蚘第および第ラテツクスの凝着たたは
䞍凝着の皋床を、混合物䞭の凝着しおいないラ
テツクスの光孊的技術による遞択的蚈数により
枬定し、それにより詊料䞭に存圚する前蚘特定
成分を定量する こずから成る、液䜓䞭の特定の抗原たたは抗䜓成
分を定量する方法。 本発明の方法に埓぀お、皮の異なるラテツク
ス詊薬を同時に䜿うが、この点が皮のラテツク
ス詊薬しか䜿わない先行技術ず異なるずころであ
る。これら皮の詊薬はい぀しよに混合されたず
きに凝着するが混合前には凝着しないものであ
る。䟋えば䞀方のラテツクス詊薬はAgたたはAg
−配合物で、他方AgたたはAg−配合物ず結合す
るAbであるこずができる。この皮の詊薬を混
合するずAbはAgたたはAg−配合物ず結合し
お粒子の凝着を起させる。しかしながら埮粒子詊
薬の少なくずも぀は、それが液䜓䞭の被隓特殊
AbたたはAgず結合するように遞ばれる。ラテツ
クス詊薬が遊離のAbたたはAgず結合するこずは
ラテツクス詊薬の結合䜍眮をふさぐのでそれは他
のラテツクス詊薬ず結合しそしお凝着するこずは
もはやできない。混合物䞭の凝着の皋床はこうし
お液䜓䞭の特殊な被隓AgたたはAbの量に䟝存す
る量だけ枛少するそれは特殊なAgたたはAbが
存圚しない堎合に液䜓䞭に起る量以䞊である。
この珟象を芳察するこずによ぀お特殊なAbたた
はAgの存圚を確認するこずができ、そしお凝着
たたは䞍凝着の皋床を枬定するこずによ぀お特殊
なAbたたはAgの量を定量するこずができる。こ
れは通垞最も䟿宜的には、既知濃床のAgたたは
Abを䜿぀お埗られた結果から暙準曲線を䜜り、
そしお次に被隓詊料䞭のあらかじめ未知のAbた
たはAgの量を定量するようにこの曲線を䜿うこ
ずによ぀お行なわれる。 本発明の信ずるずころでは、本発明の方法は、
どのようなAgにも䜿われそしおAgでコヌチング
されたラテツクス詊薬によ぀お特異性が導入され
るからラテツクス詊薬䞊には特異なAbを必芁ず
しない。すなわち䟋えば、぀のラテツクス詊薬
䞊のAbコヌチングが非特異性でそのためにそれ
は぀の異なるAgず反応するこずができ、そし
おこれらのAgの䞭のただ぀だけすなわち
Ag′を液䜓詊料から分析するこずが所望される
ずするず、その堎合にはAbをコヌチングした詊
薬ず共にAg′をコヌチングしたラテツクス詊薬を
䜿うこずによ぀おAg′の分析を行なうこずができ
る。この手法は詊料䞭のAbの怜出および枬定に
も同じようにしお䜿うこずができる。 本発明の方法に䜿われるラテツクス詊薬は顕埮
鏡的あるいは超顕埮鏡的サむズのものである。す
なわちそれは䞀般に15ミクロンよりも小さく最も
普通には数ミクロンたたはサブミクロン〜
100Ό皋床のサむズである。このようなサむ
ズのラテツクス粒子は垂販されおいる。ラテツク
スのような顕埮鏡的埮粒物質にAbたたはAgを結
合するこずは知られおいる。これは通垞粒子䞊に
反応性のコヌチングを䞎えそしお粒子䞊のAbた
たはAgを化孊的に結合するかあるいは吞着する
こずによ぀お行なわれる。ある情況の堎合には
AbたたはAgを盎接に粒子その間に介圚するコ
ヌチングをもたないに結合するこずも可胜であ
る。ラテツクス詊薬を䜜る方法は本発明の目的で
なないしそしお業界でよく知られおいるから、そ
れに぀いおはこれ以䞊蚘茉するこずはしない。 本発明の目的のためにラテツクスのような埮粒
子物質に結合するこずができるAgおよびAbの䞭
には䟋えば次のような物がある。Abずしおは免
疫グロブリンIgGこれは人間、家兎、山
矊および矊の血枅からのものであるならびにそ
れらのab′断片、家兎IgM、Agずしおは
人間のIgM、人間の胎盀ラクトヌゲン、人間のα
―胎児たん癜質α―fetoprotein、人間のラク
トプリンLactoferrin、人間の血枅、アル
ブミン、人間のトランスプリン
Transferrin、人間の−反応性たん癜質およ
び人間のIgGのFc断片、牛のIgGおよび血枅アル
ブミン、銬のプリチンferritin、鉄たん癜
質、人間、マりス、ラツトおよびモルモツトの
IgG′および粟補された人間のIgGの、、お
よび亜綱。たた人間の血枅のアルブミン、IgG
およびトランスプリン、牛のアルブミンおよび
フむブリノヌゲンおよび銬のプリチンのチロキ
シン配合物を結合させるこずもできた。たた人間
および牛のアルブミンおよび牛のIgGのゞゎキシ
ンDigoxin配合物も結合させた。その衚面に
反応性カルボキシル基をも぀おいるポリスチレン
ラテツクス粒子にチロキシンは盎接に結合するこ
ずができる。 各ラテツクス詊薬の粒子サむズは実質的に䞀様
であるこずおよび以䞋にも぀ず詳しく蚘茉するよ
うに第のラテツクス詊薬の粒子サむズは第の
ラテツクス詊薬のそれずは異なる少なくずも埌
者の倍が奜たしいものであるこずが奜たし
い。 特殊なAgたたはAbの存圚を怜出する方法を実
斜するのには、凝着の阻害が起぀たかどうかを確
蚌するこずだけが必芁である。被隓詊料䞭にAg
たたはAbが比范的倧量にあるずきには、混合物
は顕埮鏡のスラむドに広げられおいるので、顕埮
鏡を通しおの芳察で肉県で凝着の阻害を怜出する
こずができる。぀の特に奜たしい詊隓は牛乳䞭
のプロゲステロンの存圚を怜出するためのもので
ある。そこでは牛乳ず、プロゲステロンたたはプ
ロゲステロン配合物から成る顕埮鏡的もしくは超
顕埮鏡的ラテツクス詊薬ずそしおプロゲステロン
およびプロゲステロン配合物の䞡方ず結合する
Abから成る顕埮鏡的もしくは超顕埮鏡的ラテツ
クス詊薬ずの混合物が䜜られる。肉県で混合物を
調べるず通垞凝着阻害がわかるものである。もち
ろん凝着阻害の有無を確蚌する詊隓においお定量
分析に関係しお埌述する方法の぀を䜿うこずも
できる。 本発明による定量分析では、ラテツクス詊薬の
凝着たたは䞍凝着の皋床を枬るこずが必芁であ
る。これは皮々の方法で行なうこずができる。䟋
えば凝着した粒子を凝着しない粒子から分別し、
それから埌者の数を枬定するこずができる。その
分別は䟋えばろ過、遠心分離たたはカラムクロマ
トグラフむによ぀お行なうこずができる。次に䞍
凝着粒子の数を枬定するのであるが、それには䟋
えば蚈数によるかあるいはラテツクス詊薬䞊の確
認ラベル䟋えば攟射性原子を䜿うこずによ぀
お枬るこずができる。 しかしながら䞀般にこれは避けるこずが奜たし
い。それは時間がかかりそしお誀差が生じ易いか
らである。その代りに凝着、䞍凝着の皋床を算定
するために反応混合物を枬るこずが奜たしい。こ
れはそれ自䜓は圓業界で知られおいる遞択的蚈数
技術を䜿うこずによ぀お䟿利に行なうこずができ
る。この方法では䟋えば䞎えられたサむズ範囲の
粒子この範囲倖のサむズの粒子は無芖される
の数を算定するこずができる。 これは行なう぀の既知装眮はテクニコン自動
蚈数噚Technicon Autocouuterである。その
基本型においおは、この装眮は垌釈された詊料が
光束に盎角にポンプで送られるフロヌセル
Flowcellを光が通過するような光孊系から成
るものである。光孊系の他の端は光電池がある。
そしおフロヌセルのすぐ埌には䞭心に黒点をも぀
たレンズがある。この黒点はフロヌセルを盎接に
通぀た光線が光電池に到達するのを防ぐためのも
のである。粒子が光束の䞭にあるずきは、入射光
の郚は黒点を迂回するように散乱されお光電池
に到達する。これが電子の衝撃むンパルスを
瀺し、このむンパルスを集蚈するこずによ぀お詊
料䞭の粒子の蚈数が行なわれる。 遞択的蚈数技術を䜿う堎合には、぀のラテツ
クス詊薬は蚈数噚で識別できるように異なるサむ
ズのものであるず非垞に奜郜合である。ミクロン
たたはサブミクロンのサむズの粒子を䜿぀おこの
ような目的には、倍のサむズの差があれば通垞
満足である。遞択蚈数を䜿う本発明方法の操䜜を
単に䟋によ぀お説明するず次の通りである。被隓
Agを含む詊料にサむズがそれぞれミクロンず
0.1ミクロンの第ず第のラテツクス詊薬を加
える。ここで加える第の詊薬の量はわか぀おお
り、そしお詊料䞭のすべおのAgず結合するのに
芁する量の過剰を加える。第の詊薬の郚は
Agず結合し、そしおそれによ぀お第の詊薬の
粒子ず結合するこずは阻害される。しかしAgず
結合しなか぀た第の詊薬粒子は第のラテツク
ス詊薬ず結合しお凝着する。このずき混合物は(i)
詊料からのAgに結合した第詊薬の粒子䞍凝
着、(ii)過剰の第詊薬の粒子䞍凝着および
(iii)凝着した粒子を含んでいる。䞍凝着の第およ
び第の詊薬粒子の間にはサむズの差があるの
で、凝着しない第詊薬の粒子の数(i)を蚈数する
こずができる。そしおその算定ず暙準結果ず
から詊料䞭のAgの量を蚈算するこずができる。 このたたは同様な方法で凊理するこずは非
垞に奜たしい。 本発明の方法は小さいAgずAbを分析するのに
特に奜郜合である。これに関連しおステロむドず
医薬の分析は最も重芁なものに入る。 本発明がさらに充分に理解されるように説明す
るために次の実斜䟋を瀺す。 䟋  この実斜䟋はゞゎキシンdigoxineの分析を
説明する䟋である。 (a) Abでコヌチングされたラテツクスの補法 ラテツクス粒子ダりケミカル瀟補品、盎埄
0.09Όのポリスチレンで10重量懞濁液ずしお
入手したものをうすいグリシンで緩衝された
食塩氎dGBS−20mMグリシン、34mM
NaCl、PH〔これはStastnyおよびHorejsi、
Clin.Chim.Acta、7821961の方法によ぀
お䜜られる矊の抗ゞゎキシン血枅のリバノヌル
可溶画分0.2mg/mlを含む〕䞭に20倍に垌釈さ
れ、そしお宀枩で30分間むンキナベヌトされ
た。次にmldGBS圓り牛の血枅アルブミン
bSA10mgの1/10容量を加えたラテツクス
が完党にたん癜質でコヌチングされたこずを確
かめるため。そしお30分間むンキナベヌトし
た埌にコヌチングされたラテツクスを回遠心
分離しお掗いdGBS䞭に再び懞濁された。最埌
にコヌチングされたラテツクスはml䞭mgの
bSAを含むGBS0.1Mグリシン、0.17M
NaCl、PH䞭に0.5懞濁液ずしお再び懞濁
された。 (b) Agでコヌチングされたラテツクスの補法 ラテツクスを盎埄1.1Όのものを䜿い、むン
キナベヌシペンをAg−配合物濃床をΌ/ml
にしお行な぀た以倖は(a)におけるず同じ方法を
行ない、そしお次に10mg/mlのトランスプリ
ンの1/10容量を加えた。 Ag−配合物はゞゎキシンず゚チレングリコ
ヌルずを酞化結合させるこずによ぀お䜜られ、
次にこの耇合䜓を還元結合するこずによ぀おた
ん癜質ずされた。無氎アルコヌルml䞭に溶か
したゞゎキシン50mgを0.1M NaClO42mlず共に
25分間むンキナベヌトし、次で゚チレングリコ
ヌル60Όを加えさらに分間むンキナベヌト
した。この反応混合物を次に氎ml䞭の人間の
トランスプリン60mgの溶液に加え
Na2CO3を加えおPHを9.5ずし、そしお45分間む
ンキナベヌトした。新しくNaBH430mgを氎
mlに溶かした溶液を加える時間むンキナベヌシ
ペンを続けた。この時期の最埌には反応混合物
のPHは未反応のNaBH4を分解するように1M
HCOOHの添加によ぀お6.5に䞋げられた。そ
しおさらに時間むンキナベヌトした埌1M
NH4OHを加えおPHを8.5に䞊げ、そしお補品を
℃で日間透析した。その他のすべおの操
䜜は宀枩で行な぀た。 (c) 分析 ゞゎキシンの分析に䜿う血枅は血枅劚害を枛
らすように先ず酞ず共に加熱された。血枅25ÎŒ
を0.1N HCl25Όず共に10分間56℃に加熱
し、次に2M Na2CO310Όを添加しおアルカ
リ性ずした。この加熱された血枅に、Ab−ラ
テツクスmgbSAmlを含むGBSで10に
垌釈されたもの25Όおよび配合ラテツクス
人間のトランスプリンmg/mlを含むGBSで
に垌釈されたもの25Όを加えた。そ
れらを振ずう匏むンキナベヌタヌ䞊で氎平にか
きたぜられる垂盎に配眮された管の䞭で宀枩で
15分間むンキナベヌトした。この時期の最埌
に、管の内容物をGBS5mlで垌釈し、そしお
0.01トりむヌン20Tween20を含むGBSで
さらに20倍に垌釈した埌テクニコン自動カりン
タヌのフロりセルをml分の速床で通した。
各詊料䞭の凝着しないモノマヌラテツクス
粒子の盞察的な数が遞択的光孊蚈数によ぀お決
定された凝着した粒子の盞察的な数も同様で
ある。第衚に埗られた数倀を瀺す。
【衚】 この方法は付着䜓のAg−配合物をbSAずい
぀しよに䜿぀おゞニトロプノヌルDNP
の定量にも芋事に適甚された。 粒子の遞択的光孊蚈数においお、぀の粒子
で散乱される光の量は粒子のサむズに䟝存す
る。すなわち、光電池内に発生する電子衝撃
むンパルスは粒子のサむズに比䟋する。そ
しお異なるサむズの粒子は別々に蚈数するこず
ができる。第衚はすべおの粒子を蚈数するの
ずは反察に凝着しない粒子モノマヌだけを
蚈数するこずによ぀お埗られる定量暙準曲線
に察しおも぀ず拡匵された範囲を提䟛するこず
によ぀おの粟確床における改良を説明するも
のである。この衚はたた凝着しない粒子ず凝着
した粒子ずの比率モノマヌポリマヌ比を
蚈算するこずによ぀お実珟できる感床の倧きな
増加を説明しおいる。粒子を党郚蚈数するこず
によ぀お感床および粟確床の増進が、終点決定
の他の方法ず比范によ぀お実感するこずができ
る。第衚は粒子は蚈数するこずによ぀お埗ら
れる結果の比范を瀺す。
【衚】
【衚】 各数倀はhPLが存圚しない堎合に埗られる倀
のずしお衚わされおいる。 ゞゎキシンに察する暙準曲線を衚わす組の
詊料に察するモノマヌのみおよび濁床分析
400nmにおける光孊密床。
【衚】 各数倀はゞゎキシンがn/ml存圚する堎
合最高阻止に芋出される数倀のずしお衚
わされおいる。 䟋  この䟋はチロキシンの分析を説明する。 (a) チロキシず結合したラテツクスの補法 ラテツクス粒子ダりケミカル瀟補品、盎埄
0.857Όのカルボキシル化倉性ポリスチレン
を10重量懞濁液ずしお入手し、それをりん酞
塩緩衝食塩氎PBSりん酞ナトリりム
50mM、食塩0.17M、PH䞭に20倍に垌釈
し、遠心分離℃、12000回転で10分間し
そしお新鮮なPBS䞭に再懞濁し最終的には重
量の懞濁液ずした。PBS1ml䞭のチロキシン
25Όず−゚チル−−−ゞメチルアミ
ノプロピル−カルボゞむミド塩酞塩50Όの
溶液を℃で䜜り、そしお掗浄したラテツクス
懞濁液250Όを加えた。これを℃で時間
むンキナベヌトした埌PBS䞭の25゚タノヌル
アミン250Όを加えおさらに30分間むンキナ
ベヌトした。次いでこのラテツクスを回遠心
分離しそしお新しいPBS毎回ml䞭に再懞
濁し、それから℃でPBS1に察しお16時間
透析を行な぀た。それを最終的に遠心分離しそ
しおグリシンで緩衝された牛のアルブミン
bSAを含む食塩氎䞭に再懞濁した。 (b) 混合凝着によるチロキシンの分析 (i) Abでコヌチングされたラテツクスの補法 このラテツクスの補法は䟋におけるゞゎ
キシンの分析甚のものず党く同じであるが、
この堎合のAbは家兎抗チロキシンT4血枅
からの物である。 (ii) Agでコヌチングされたラテツクスの補法 䞊蚘(a)の堎合ず同じである。 (iii) 分析 T4を分析すべき血枅は、ナトリりムゞ゚
チルバルビツレヌト75mMPH9.2䞭の
−アニリノ−ナフタレン−−スルホン酞
1mMの等容量ず先ず混合する。この垌釈さ
れた血枅50ΌをbSA1を含むGBS䞭のAb
−ラテツクスの0.01懞濁液25Όおよび䟋
のゞゎキシンの分析甚ず同じ方法の同じ懞
濁液䞭のAg−ラテツクスの0.1懞濁液25ÎŒ
ずい぀しよにむンキナベヌトした。第衚
はこの系を䜿぀た埗られた代衚的な結果を説
明する。 第  è¡š ngT4血枅 粒子濃床最高  48 10 51.5 50 59.5 100 89 この堎合の最高倀はAg−ラテツクスのみ
に察するものであ぀たが、䞊のすべおの数倀
はAg−ラテツクスの存圚する堎合にも同様
に芋られる。 䟋  異なる粒子寞法を採甚した堎合ず察比しお同じ
粒子寞法のラテツクス粒子を採甚した堎合を瀺
す。手順は䟋ず同じである。
【衚】

Claims (1)

  1. 【特蚱請求の範囲】  (a)(i) 分析すべき特定の抗原たたは抗䜓成分
    を含む液䜓詊料、 (ii) 実質的に均䞀な粒子寞法をも぀第のラテ
    ツクスにより担持された第の詊薬、および (iii) 前蚘第ラテツクスず異なる実質的に均䞀
    な粒子寞法をも぀第のラテツクスにより担
    持された第の詊薬〔ただしここで前蚘第
    詊薬は前蚘第詊薬ず結合しお前蚘第およ
    び第ラテツクスを凝着させるこずができ、
    そしお少なくずも第詊薬は前蚘特定成分ず
    結合しお前蚘第および第ラテツクスの凝
    着を阻害するこずもできるものずする〕の混
    合物を圢成し、 (b) この混合物をむンキナベヌトしお前蚘第詊
    薬を競合的に前蚘特定成分および前蚘第詊薬
    ず結合させ、そしお (c) 前蚘第および第ラテツクスの凝着たたは
    䞍凝着の皋床を、混合物䞭の凝着しおいないラ
    テツクスの光孊的技術による遞択的蚈数により
    枬定し、それにより詊料䞭に存圚する前蚘特定
    成分を定量する こずから成る、液䜓䞭の特定の抗原たたは抗䜓成
    分を定量する方法。  特定成分ずしお抗原型物質を、第詊薬ずし
    お分析すべき抗原型物質ず結合できる抗䜓を、そ
    しお第詊薬ずしお前蚘抗䜓ず実質的に同じ物質
    を䜿う、前項に蚘茉の方法。  特定成分ずしお抗䜓を、第詊薬ずしお前蚘
    抗䜓ず結合できる抗原型物質を、そしお第詊薬
    ずしお前蚘抗原型物質ず結合できる抗䜓を䜿う、
    前項に蚘茉の方法。  分析すべき特定成分ずしお分子量が玄4000よ
    りも小さいものを䜿う、前項に蚘茉の方法。  第ラテツクスずしお第ラテツクスの少な
    くずも倍の粒子寞法をも぀ものを䜿う、前項
    に蚘茉の方法。  第ラテツクスずしおその既知量を混合工皋
    (a)においお䜿い、混合物䞭の凝着しおいない第
    ラテツクスを遞択的に蚈数する、前項に蚘茉の
    方法。
JP14777277A 1976-12-10 1977-12-10 Test method of liquid containing specific antigen ag or antibody ab Granted JPS53104726A (en)

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