JPH0692433B2 - イセパミシンを調製するための改良法 - Google Patents
イセパミシンを調製するための改良法Info
- Publication number
- JPH0692433B2 JPH0692433B2 JP2509550A JP50955090A JPH0692433B2 JP H0692433 B2 JPH0692433 B2 JP H0692433B2 JP 2509550 A JP2509550 A JP 2509550A JP 50955090 A JP50955090 A JP 50955090A JP H0692433 B2 JPH0692433 B2 JP H0692433B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- isoserine
- gentamicin
- reaction
- formyl
- isepamicin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/22—Cyclohexane rings, substituted by nitrogen atoms
- C07H15/222—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms
- C07H15/226—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms with at least two saccharide radicals directly attached to the cyclohexane rings
- C07H15/234—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms with at least two saccharide radicals directly attached to the cyclohexane rings attached to non-adjacent ring carbon atoms of the cyclohexane rings, e.g. kanamycins, tobramycin, nebramycin, gentamicin A2
- C07H15/236—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms with at least two saccharide radicals directly attached to the cyclohexane rings attached to non-adjacent ring carbon atoms of the cyclohexane rings, e.g. kanamycins, tobramycin, nebramycin, gentamicin A2 a saccharide radical being substituted by an alkylamino radical in position 3 and by two substituents different from hydrogen in position 4, e.g. gentamicin complex, sisomicin, verdamycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/26—Acyclic or carbocyclic radicals, substituted by hetero rings
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 本発明は、ゲンタマイシンＢを、１−Ｎ−［（Ｓ）−３
−アミノ−２−ヒドロキシプロピオニル］ゲンタマイシ
ンＢであるイセパミンに変換するための新規な方法およ
びその方法で有用な新規なホルミル化剤である２−ホル
ミルメルカプトベンゾチアゾールに関する。
−アミノ−２−ヒドロキシプロピオニル］ゲンタマイシ
ンＢであるイセパミンに変換するための新規な方法およ
びその方法で有用な新規なホルミル化剤である２−ホル
ミルメルカプトベンゾチアゾールに関する。
更に詳しくは、本発明は、２−ホルミルメルカプトベン
ゾチアゾールを用い、１−アミノ基を（Ｓ）−イソセリ
ン誘導体でアシル化した後、高収率で所望の生成物を生
じる条件下で保護基を除去することによって、ゲタマイ
シンＢを3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマイシンＢに
変換するための方法に関する。
ゾチアゾールを用い、１−アミノ基を（Ｓ）−イソセリ
ン誘導体でアシル化した後、高収率で所望の生成物を生
じる条件下で保護基を除去することによって、ゲタマイ
シンＢを3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマイシンＢに
変換するための方法に関する。
式 を有するイセパミシンは、既知のアミノグリコシド系抗
生物質である。ゲンタマイシンＢからのこの化合物の製
法は、米国特許第4,230,847号明細書に記載されてい
る。この特許で記載された方法は、ゲンタマイシンＢの
銅−ニッケル（II）塩錯体とＮ−ベンジルオキシカルボ
ニルオキシフタルイミドとを反応させた後、その中間体
化合物とＮ−（Ｓ−３−ベンジルオキシカルボニルアミ
ノ−２−ヒドロキシプロピオニルオキシ）スクシンイミ
ドとを反応させることによって3,6′−ジ−Ｎ−ベンジ
ルオキシカルボニルゲンタマイシンＢを生成することを
含む。得られる物質からベンジルオキシカルボニル保護
基を、炭素上パラジウムによる接触水素添加によって除
去して、中間の出発物質からの収率60％でイセパミシン
を生成した。
生物質である。ゲンタマイシンＢからのこの化合物の製
法は、米国特許第4,230,847号明細書に記載されてい
る。この特許で記載された方法は、ゲンタマイシンＢの
銅−ニッケル（II）塩錯体とＮ−ベンジルオキシカルボ
ニルオキシフタルイミドとを反応させた後、その中間体
化合物とＮ−（Ｓ−３−ベンジルオキシカルボニルアミ
ノ−２−ヒドロキシプロピオニルオキシ）スクシンイミ
ドとを反応させることによって3,6′−ジ−Ｎ−ベンジ
ルオキシカルボニルゲンタマイシンＢを生成することを
含む。得られる物質からベンジルオキシカルボニル保護
基を、炭素上パラジウムによる接触水素添加によって除
去して、中間の出発物質からの収率60％でイセパミシン
を生成した。
ツチヤ（Tsuchiya）ら、Tetrahedron Letters、第51
号、4951〜4954頁（1979）に、酢酸亜鉛キレート化、3,
6′−Ｎ−ビスベンジルオキシカルボニル化、亜鉛の除
去、カルボン酸塩生成、そして最後に３″−アミノ基の
トリフルオロアセチル化を含む、カナマイシンＡの3,
3″−６′−アミノ基を保護するための複雑な多段階方
法が記載されている。このようにして生じた3,3″−
６′−Ｎ−トリブロックカナマイシンＡを、次に、１−
Ｎ−［（Ｓ）−４−ベンジルオキシカルボニルアミノ］
−２−ヒドロキシ酪酸の活性エステルを用いて遊離Ｃ−
１アミノ基でアシル化する。最終的に、得られる生成物
に二つの部分からなる脱保護スキームを施してアミカシ
ンが得られる。同様の順序が、ジベカシンのその１−Ｎ
−［（Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキシブチリル］誘
導体への変換用にも記載されている。他のアミノグリコ
シドの選択的アシル化にこの方法を用いることに関して
は開示されなかった。ツチヤらの操作順序は、保護段階
でトリフルオロアセチル化およびベンジルオキシカルボ
ニル化双方を行い且つ脱保護段階でアミノリシスおよび
水素化分解を必要として厄介である。これらの段階によ
り、その方法は、経常費および装置に要する費用の理由
で商業的に関心を呼ぶものではない。更に、検討中であ
るが、ツチヤらの方法説明での意味に反して、酢酸亜鉛
キレート化は、カナマイシンおよびジベカシン以外のア
ミノグリコシドにおいて選択的な3,6′−ジブロッケー
ド（diblockade）を常に導くわけではない。例えば、予
想外にも、ゲンタマイシンＢの酢酸亜鉛キレート化に続
くホルミルイミダゾールを用いるアシル化によって導か
れるのは、主として1,6′−Ｎ−ジホルミル化であって
3,6′−ジホルミル化ではない。この同じゲンタマイシ
ンＢ酢酸亜鉛キレートを別のホルミル化剤であるホルミ
ル酢酸混合無水物で再度アシル化することにより、所望
の3,6′−Ｎ−ジホルミルゲンタマイシンＢの他に、望
ましくない水準のアセチル化したゲンタマイシンＢの生
成物も生じる。予測が困難であることを強調するため
に、ホルミル−ｐ−ニトロ安息香酸混合無水物は、ゲン
タマイシンＢ酢酸亜鉛キレートのホルミル化において有
用であるには反応性が不十分であることが証明された
が、ホルミル−ｐ−アニス酸混合無水物を用いることに
より、優れた収率で所望の3,6′−ジホルミルゲンタマ
イシンＢが少量のアニソイル不純物を混入して得られ
た。
号、4951〜4954頁（1979）に、酢酸亜鉛キレート化、3,
6′−Ｎ−ビスベンジルオキシカルボニル化、亜鉛の除
去、カルボン酸塩生成、そして最後に３″−アミノ基の
トリフルオロアセチル化を含む、カナマイシンＡの3,
3″−６′−アミノ基を保護するための複雑な多段階方
法が記載されている。このようにして生じた3,3″−
６′−Ｎ−トリブロックカナマイシンＡを、次に、１−
Ｎ−［（Ｓ）−４−ベンジルオキシカルボニルアミノ］
−２−ヒドロキシ酪酸の活性エステルを用いて遊離Ｃ−
１アミノ基でアシル化する。最終的に、得られる生成物
に二つの部分からなる脱保護スキームを施してアミカシ
ンが得られる。同様の順序が、ジベカシンのその１−Ｎ
−［（Ｓ）−４−アミノ−２−ヒドロキシブチリル］誘
導体への変換用にも記載されている。他のアミノグリコ
シドの選択的アシル化にこの方法を用いることに関して
は開示されなかった。ツチヤらの操作順序は、保護段階
でトリフルオロアセチル化およびベンジルオキシカルボ
ニル化双方を行い且つ脱保護段階でアミノリシスおよび
水素化分解を必要として厄介である。これらの段階によ
り、その方法は、経常費および装置に要する費用の理由
で商業的に関心を呼ぶものではない。更に、検討中であ
るが、ツチヤらの方法説明での意味に反して、酢酸亜鉛
キレート化は、カナマイシンおよびジベカシン以外のア
ミノグリコシドにおいて選択的な3,6′−ジブロッケー
ド（diblockade）を常に導くわけではない。例えば、予
想外にも、ゲンタマイシンＢの酢酸亜鉛キレート化に続
くホルミルイミダゾールを用いるアシル化によって導か
れるのは、主として1,6′−Ｎ−ジホルミル化であって
3,6′−ジホルミル化ではない。この同じゲンタマイシ
ンＢ酢酸亜鉛キレートを別のホルミル化剤であるホルミ
ル酢酸混合無水物で再度アシル化することにより、所望
の3,6′−Ｎ−ジホルミルゲンタマイシンＢの他に、望
ましくない水準のアセチル化したゲンタマイシンＢの生
成物も生じる。予測が困難であることを強調するため
に、ホルミル−ｐ−ニトロ安息香酸混合無水物は、ゲン
タマイシンＢ酢酸亜鉛キレートのホルミル化において有
用であるには反応性が不十分であることが証明された
が、ホルミル−ｐ−アニス酸混合無水物を用いることに
より、優れた収率で所望の3,6′−ジホルミルゲンタマ
イシンＢが少量のアニソイル不純物を混入して得られ
た。
金属酢酸塩、例えば酢酸亜鉛等を用いることにより、少
量の望ましくない副生成物、例えばＮ−アセチル誘導体
が生じ、これを除去するは困難であり、しかも望ましい
生成物の収率が低減する。
量の望ましくない副生成物、例えばＮ−アセチル誘導体
が生じ、これを除去するは困難であり、しかも望ましい
生成物の収率が低減する。
アミノグリコシドのホルミル化は、従来、１−Ｎ−アル
キル化カナマイシン抗生物質の製法に関連して、トーマ
ス（Thomas）らによって、Tetrahedron Letters、21
巻、4981〜4984頁（1980）に記載されていた。しかしな
がら、トーマスらは、１−Ｎ−アシル化アミノグリコシ
ドを製造する場合のアミノ保護基としてのホルミル化の
有用性を示していない。アミノグリコシドに関する他の
いずれの文献でもこの点は認められていない。それどこ
ろか、文献には、アミノ基を保護するためにトリフロロ
アセチル基、トリクロロアセチル基およびフタロイル基
などを用いることが記載されており、しかもこのような
基のアミノリシスまたはヒドラジノリシスは、分子上に
存在することができる他のある種のＮ−アシル基に実質
的に影響を及ぼすことなく行うことができるということ
が示されている。要するに、3,6′−Ｎ−ホルミル化−
１−Ｎ−アシル化アミノグリコシドからのホルミル基の
選択的水性塩基加水分解は前例がない。
キル化カナマイシン抗生物質の製法に関連して、トーマ
ス（Thomas）らによって、Tetrahedron Letters、21
巻、4981〜4984頁（1980）に記載されていた。しかしな
がら、トーマスらは、１−Ｎ−アシル化アミノグリコシ
ドを製造する場合のアミノ保護基としてのホルミル化の
有用性を示していない。アミノグリコシドに関する他の
いずれの文献でもこの点は認められていない。それどこ
ろか、文献には、アミノ基を保護するためにトリフロロ
アセチル基、トリクロロアセチル基およびフタロイル基
などを用いることが記載されており、しかもこのような
基のアミノリシスまたはヒドラジノリシスは、分子上に
存在することができる他のある種のＮ−アシル基に実質
的に影響を及ぼすことなく行うことができるということ
が示されている。要するに、3,6′−Ｎ−ホルミル化−
１−Ｎ−アシル化アミノグリコシドからのホルミル基の
選択的水性塩基加水分解は前例がない。
本出願人は、ここで、新規なホルミル化剤である式II を有する２−ホルミルメルカプトベンゾチアゾールが、
ゲンタマイシンＢ亜鉛キレートの3,6′−アミノ基を選
択的にホルミル化することができることを発見した。更
に、本発明の方法は、ピバル酸亜鉛などの別の亜鉛塩を
用いて望ましくない副生成物の生成を避けるならば、高
収率をもたらす。更に、本出願人は、キレートから亜鉛
を除去することによって得られた3,6′−Ｎ−ジホルミ
ルゲンタマイシンＢを、Ｎ−ホルミル（Ｓ）−イソセリ
ン活性エステルを用いて、ツチヤらの方法でのようにＣ
−３″メチルアミノ基を別個に保護することなく、Ｃ−
１アミノ基でのみ選択的にアシル化することができるこ
とを発見した。最終的に、本出願人は、得られる3,6′
−Ｎ−ジホルミル−１−Ｎ−［Ｎ−ホルミル−（Ｓ）−
イソセリノイル］−ゲンタマイシンＢから水性塩基加水
分解によって、所望のイソセリン側鎖を除去することな
く高収率でホルミル基全部を除去することができること
を発見した。
ゲンタマイシンＢ亜鉛キレートの3,6′−アミノ基を選
択的にホルミル化することができることを発見した。更
に、本発明の方法は、ピバル酸亜鉛などの別の亜鉛塩を
用いて望ましくない副生成物の生成を避けるならば、高
収率をもたらす。更に、本出願人は、キレートから亜鉛
を除去することによって得られた3,6′−Ｎ−ジホルミ
ルゲンタマイシンＢを、Ｎ−ホルミル（Ｓ）−イソセリ
ン活性エステルを用いて、ツチヤらの方法でのようにＣ
−３″メチルアミノ基を別個に保護することなく、Ｃ−
１アミノ基でのみ選択的にアシル化することができるこ
とを発見した。最終的に、本出願人は、得られる3,6′
−Ｎ−ジホルミル−１−Ｎ−［Ｎ−ホルミル−（Ｓ）−
イソセリノイル］−ゲンタマイシンＢから水性塩基加水
分解によって、所望のイソセリン側鎖を除去することな
く高収率でホルミル基全部を除去することができること
を発見した。
発明の要約 本発明は、ゲンタマイシンＢを高収率でイセパミシンに
変換するための改良された多段階方法に関する。
変換するための改良された多段階方法に関する。
本発明の方法は、 （ａ）ゲンタマイシンＢをキレート化剤と反応させ、続
いて、ゲンタマイシンＢにおいてホルミル基を選択的に
導入することができる２−ホルミルメルカプトベンゾチ
アゾールと反応させて3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタ
マイシンＢを生成し； （ｂ）3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマイシンＢの１
−アミノ基を、活性化Ｎ−アシル保護（Ｓ）−イソセリ
ン化合物でアシル化し； （ｃ）保護基を全部除去し；そして （ｄ）イセパミシンを単離すること； から成る。
いて、ゲンタマイシンＢにおいてホルミル基を選択的に
導入することができる２−ホルミルメルカプトベンゾチ
アゾールと反応させて3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタ
マイシンＢを生成し； （ｂ）3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマイシンＢの１
−アミノ基を、活性化Ｎ−アシル保護（Ｓ）−イソセリ
ン化合物でアシル化し； （ｃ）保護基を全部除去し；そして （ｄ）イセパミシンを単離すること； から成る。
発明の詳細な説明 中間体化合物である3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマ
イシンＢは、ゲンタマイシンＢの二価の金属塩錯体と２
−ホルミルメルカプトベンゾチアゾールとを反応させて
ホルミル保護基を3,6′−位に導入することによって調
製される。金属塩錯体は、米国特許第4,136,254号明細
書およびトーマスらのTetrahedron Letter、21巻、4981
〜4984頁（1980）で開示された方法を用いて調製され
る。
イシンＢは、ゲンタマイシンＢの二価の金属塩錯体と２
−ホルミルメルカプトベンゾチアゾールとを反応させて
ホルミル保護基を3,6′−位に導入することによって調
製される。金属塩錯体は、米国特許第4,136,254号明細
書およびトーマスらのTetrahedron Letter、21巻、4981
〜4984頁（1980）で開示された方法を用いて調製され
る。
3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマイシンＢ（III）を調
製するための反応スキームを下記に記載する。
製するための反応スキームを下記に記載する。
本発明の方法において錯生成剤として有用な遷移金属塩
には、銅（II）、ニッケル（II）、コバルト（II）、カ
ドミウム（II）および亜鉛（II）のこのような二価の塩
並びにそれらの混合物が挙げられる。二価の金属塩は有
機酸の塩であり、好ましくは、有機酸は、例えばギ酸、
酢酸、プロピオン酸、ピバル酸および安息香酸である。
好ましい二価の金属塩として、亜鉛（II）およびコバル
ト（II）のピバル酸塩が挙げられる。特に用いられるの
はピバル酸亜鉛（II）である。
には、銅（II）、ニッケル（II）、コバルト（II）、カ
ドミウム（II）および亜鉛（II）のこのような二価の塩
並びにそれらの混合物が挙げられる。二価の金属塩は有
機酸の塩であり、好ましくは、有機酸は、例えばギ酸、
酢酸、プロピオン酸、ピバル酸および安息香酸である。
好ましい二価の金属塩として、亜鉛（II）およびコバル
ト（II）のピバル酸塩が挙げられる。特に用いられるの
はピバル酸亜鉛（II）である。
ゲンタマイシンＢの二価の塩錯体の生成は、不活性有機
溶媒中で行われる。好ましい有機溶媒は、例えばジメチ
ルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセ
トアミド、塩化メチレン、トルエン、酢酸エチルおよび
それらの混合物である。
溶媒中で行われる。好ましい有機溶媒は、例えばジメチ
ルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセ
トアミド、塩化メチレン、トルエン、酢酸エチルおよび
それらの混合物である。
ゲンタマイシンＢの二価の塩錯体を調製する場合、亜鉛
（II）などの二価の塩を、ゲンタマイシンＢの１モル当
り約1.5〜4.5モル用いるのが好都合であることが見出さ
れた。試薬の好ましいモル比は、ゲンタマイシンＢの１
モル当り二価の塩約2.7〜3.5モルである。
（II）などの二価の塩を、ゲンタマイシンＢの１モル当
り約1.5〜4.5モル用いるのが好都合であることが見出さ
れた。試薬の好ましいモル比は、ゲンタマイシンＢの１
モル当り二価の塩約2.7〜3.5モルである。
ゲンタマイシンの二価の塩錯体を２−ホルミルメルカプ
トベンゾチアゾールと反応させて、３−アミノ基および
６′−アミノ基の双方でホルミル保護基を導入する。
トベンゾチアゾールと反応させて、３−アミノ基および
６′−アミノ基の双方でホルミル保護基を導入する。
２−ホルミルメルカプトベンゾチアゾールのモル量は、
通常、ゲンタマイシンＢの二価の塩錯体のモル量１に対
して２〜３である。好ましいモル量は１に対して2.5で
ある。
通常、ゲンタマイシンＢの二価の塩錯体のモル量１に対
して２〜３である。好ましいモル量は１に対して2.5で
ある。
ゲンタマイシンＢの二価の塩錯体のホルミル化は、０℃
〜40℃の温度で、好ましくは、20℃〜30℃で行われる。
〜40℃の温度で、好ましくは、20℃〜30℃で行われる。
ゲンタマイシンＢの二価の塩錯体のホルミル化反応は、
有機溶媒中または有機溶媒の混合物中で行うのが好都合
である。この反応で用いることができる有機溶媒とし
て、双性非プロトン性有機溶媒、例えばジメチルスルホ
キシド、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド
等が挙げられる。更に、双性非プロトン性有機溶媒と、
不活性有機溶媒、例えばトルエン、酢酸エチル、1,2−
ジメトキシエタン、テトラヒドロフラン、アセトニトリ
ル、塩化メチレン等との混合物を用いるのが好都合であ
ることが見出された。好ましい溶媒混合物は、塩化メチ
レンかまたは酢酸エチルを含むジメチルスルホキシドで
ある。
有機溶媒中または有機溶媒の混合物中で行うのが好都合
である。この反応で用いることができる有機溶媒とし
て、双性非プロトン性有機溶媒、例えばジメチルスルホ
キシド、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド
等が挙げられる。更に、双性非プロトン性有機溶媒と、
不活性有機溶媒、例えばトルエン、酢酸エチル、1,2−
ジメトキシエタン、テトラヒドロフラン、アセトニトリ
ル、塩化メチレン等との混合物を用いるのが好都合であ
ることが見出された。好ましい溶媒混合物は、塩化メチ
レンかまたは酢酸エチルを含むジメチルスルホキシドで
ある。
従来の方法は全て、沈殿剤の使用または二価の金属塩陽
イオンを除去する操作を必要とするが、２−ホルミルメ
ルカプトベンゾチアゾールおよび亜鉛を用いることによ
り、有機溶媒層中の亜鉛２−メルカプトベンゾチアゾー
ル塩の抽出除去が可能になる。
イオンを除去する操作を必要とするが、２−ホルミルメ
ルカプトベンゾチアゾールおよび亜鉛を用いることによ
り、有機溶媒層中の亜鉛２−メルカプトベンゾチアゾー
ル塩の抽出除去が可能になる。
水性溶液は、3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマイシン
Ｂを約90〜95％の収率で含む。生成物を、通常の方法、
例えばイオン交換クロマトグラフィーによって単離し且
つ精製する。
Ｂを約90〜95％の収率で含む。生成物を、通常の方法、
例えばイオン交換クロマトグラフィーによって単離し且
つ精製する。
3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマイシンＢの１−アミ
ノ基での（Ｓ）−イソセリン側鎖の導入は、下記の反応
スキームにしたがって、ジシクロヘキシルカルボジイミ
ド存在下で活性化試薬を用いてＮ−保護−（Ｓ）−イソ
セリンの活性エステルを現場で生成することによって行
われる。
ノ基での（Ｓ）−イソセリン側鎖の導入は、下記の反応
スキームにしたがって、ジシクロヘキシルカルボジイミ
ド存在下で活性化試薬を用いてＮ−保護−（Ｓ）−イソ
セリンの活性エステルを現場で生成することによって行
われる。
本発明の方法において有用であるＮ−保護−（Ｓ）−イ
ソセリン化合物は、−（Ｓ）−イソセリンのアミノ基
が、ホルミル保護基を除去する条件下で容易に除去する
ことができ且つ分子の他の部分に影響を及ぼすことがな
いアシル基で保護されているものである。穏やかな塩基
性条件下でまたはヒドラジンによって容易に除去するこ
とができるアシル保護基をその方法で用いる。穏やかな
塩基性条件下で容易に除去されるＮ−アシル保護基の例
として、ホルミル、トリクロロアセチルおよびトリフル
オロアセチルが挙げられる。ヒドラジンによって容易に
除去されるＮ−アシル保護基の例として、フタロイルお
よびスクシノイルが挙げられる。イソセリン化合物に好
ましいＮ−アシル保護基はホルミル基である。
ソセリン化合物は、−（Ｓ）−イソセリンのアミノ基
が、ホルミル保護基を除去する条件下で容易に除去する
ことができ且つ分子の他の部分に影響を及ぼすことがな
いアシル基で保護されているものである。穏やかな塩基
性条件下でまたはヒドラジンによって容易に除去するこ
とができるアシル保護基をその方法で用いる。穏やかな
塩基性条件下で容易に除去されるＮ−アシル保護基の例
として、ホルミル、トリクロロアセチルおよびトリフル
オロアセチルが挙げられる。ヒドラジンによって容易に
除去されるＮ−アシル保護基の例として、フタロイルお
よびスクシノイルが挙げられる。イソセリン化合物に好
ましいＮ−アシル保護基はホルミル基である。
本発明の方法において有用であるＮ−保護イソセリン化
合物として、Ｎ−ホルミル−（Ｓ）−イソセリン、Ｎ−
フタロイル−（Ｓ）−イソセリン、Ｎ−トリクロロアセ
チル−（Ｓ）−イソセリンおよびＮ−トリフルオロアセ
チル−（Ｓ）−イソセリンが挙げられる。好ましいＮ−
保護イソセリン化合物はＮ−ホルミル−（Ｓ）−イソセ
リンである。
合物として、Ｎ−ホルミル−（Ｓ）−イソセリン、Ｎ−
フタロイル−（Ｓ）−イソセリン、Ｎ−トリクロロアセ
チル−（Ｓ）−イソセリンおよびＮ−トリフルオロアセ
チル−（Ｓ）−イソセリンが挙げられる。好ましいＮ−
保護イソセリン化合物はＮ−ホルミル−（Ｓ）−イソセ
リンである。
Ｎ−保護−（Ｓ）−イソセリンの活性エステルは、イソ
セリン化合物と、例えばＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾ
ール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、イミダゾール、
Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、Ｎ−ヒドロキシ−５−ノ
ルボルネン−2,3−ジカルボキシイミド等の化合物と
を、ジシクロヘキシルカルボジイミドなどのカップリン
グ剤存在下で反応させることによって調製される。
セリン化合物と、例えばＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾ
ール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、イミダゾール、
Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、Ｎ−ヒドロキシ−５−ノ
ルボルネン−2,3−ジカルボキシイミド等の化合物と
を、ジシクロヘキシルカルボジイミドなどのカップリン
グ剤存在下で反応させることによって調製される。
Ｎ−保護−（Ｓ）−イソセリンと3,6′−ジ−Ｎ−ホル
ミルゲンタマイシンＢとの反応は、溶媒中、０℃〜40℃
の温度、好ましくはおよび室温で行われる。本発明の方
法で用いることができる溶媒の例として、プロトン性有
機溶媒、例えば、メタノール、エタノール、プロパノー
ル等のようなアルコール；水性メタノール、水性エタノ
ール等のような水およびアルコールの混合物；非プロト
ン性溶媒、例えばジメチルホルムアミド、ジオキサンお
よび塩化メチレン；が挙げられる。好ましい溶媒は水性
メタノールである。
ミルゲンタマイシンＢとの反応は、溶媒中、０℃〜40℃
の温度、好ましくはおよび室温で行われる。本発明の方
法で用いることができる溶媒の例として、プロトン性有
機溶媒、例えば、メタノール、エタノール、プロパノー
ル等のようなアルコール；水性メタノール、水性エタノ
ール等のような水およびアルコールの混合物；非プロト
ン性溶媒、例えばジメチルホルムアミド、ジオキサンお
よび塩化メチレン；が挙げられる。好ましい溶媒は水性
メタノールである。
Ｎ−ホルミルイソセリンと3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲ
ンタマイシンＢとを反応させることによって得られる化
合物は、化合物IVのトリホルミルイセパミシンである。
ンタマイシンＢとを反応させることによって得られる化
合物は、化合物IVのトリホルミルイセパミシンである。
化合物IVから下記の反応スキームによる加水分解によっ
て保護基を除去する。
て保護基を除去する。
化合物IVを脱保護する前に、反応混合物から溶媒を除去
する。加水分解による脱保護は通常の方法であるが、イ
ソセリン側鎖を除去することなくホルミル基を特異的に
除去することは、アミノグリコシドの分野では前例がな
い。加水分解反応が室温で一晩中攪拌することによって
行われる場合に、優れた収率（88〜90％）で望ましい生
成物が得られることが見出された。得られる加水分解物
を酸によってpH6まで酸性にし且つ単離することによっ
てイセパミシンが得られる。
する。加水分解による脱保護は通常の方法であるが、イ
ソセリン側鎖を除去することなくホルミル基を特異的に
除去することは、アミノグリコシドの分野では前例がな
い。加水分解反応が室温で一晩中攪拌することによって
行われる場合に、優れた収率（88〜90％）で望ましい生
成物が得られることが見出された。得られる加水分解物
を酸によってpH6まで酸性にし且つ単離することによっ
てイセパミシンが得られる。
下記の実施例は、本発明を実施する好ましい態様を例証
するものであるが、その範囲を制限すると解釈されるべ
きではない。その同等物は本願書を読む当業者に明らか
であり、前記の同等物は本発明の範囲内に包含されると
解釈される。実施例において、HPLCとは高速液体クロマ
トグラフィーを意味し、アンバーライト（Amberlite）I
RC−50はローム・アンド・ハース・カンパニー（Rohm a
nd Haas Company）から入手可能な弱陽イオン交換樹脂
である。
するものであるが、その範囲を制限すると解釈されるべ
きではない。その同等物は本願書を読む当業者に明らか
であり、前記の同等物は本発明の範囲内に包含されると
解釈される。実施例において、HPLCとは高速液体クロマ
トグラフィーを意味し、アンバーライト（Amberlite）I
RC−50はローム・アンド・ハース・カンパニー（Rohm a
nd Haas Company）から入手可能な弱陽イオン交換樹脂
である。
実施例１ ２−ホルミルメルカプトベンゾチアゾールの製法 500mlの乾燥三つ口丸底フラスコに、アセトニトリル80m
l、ギ酸5.0ml（0.133モル）およびギ酸ナトリウム18.1g
（0.266モル）を入れた。得られる懸濁液を０〜５℃ま
で冷却し、塩化アセチル14.6ml（0.2モル）を、反応混
合物の温度を８℃未満に保持しながら徐々に加えた。塩
化アセチルの添加を終了した後、反応混合物を18〜20℃
まで加温した。反応の完了を1H−NMRによって判断し
た。酢酸ギ酸無水物を含む不均一混合物に、アセトニト
リル60mlを加え、続いて２−メルカプトベンゾチアゾー
ル20g（0.103モル）を加え、そして温度を32℃まで加温
し且つその温度で保持し、同時に、反応の進行をHPLCに
よって10分間隔で監視した。反応は、約４％の２−メル
カプトベンゾチアゾール（面積％で）が未反応で残留し
た場合またはその面積％が生成物の分解によって増加し
始める場合に完了したとみなされた。
l、ギ酸5.0ml（0.133モル）およびギ酸ナトリウム18.1g
（0.266モル）を入れた。得られる懸濁液を０〜５℃ま
で冷却し、塩化アセチル14.6ml（0.2モル）を、反応混
合物の温度を８℃未満に保持しながら徐々に加えた。塩
化アセチルの添加を終了した後、反応混合物を18〜20℃
まで加温した。反応の完了を1H−NMRによって判断し
た。酢酸ギ酸無水物を含む不均一混合物に、アセトニト
リル60mlを加え、続いて２−メルカプトベンゾチアゾー
ル20g（0.103モル）を加え、そして温度を32℃まで加温
し且つその温度で保持し、同時に、反応の進行をHPLCに
よって10分間隔で監視した。反応は、約４％の２−メル
カプトベンゾチアゾール（面積％で）が未反応で残留し
た場合またはその面積％が生成物の分解によって増加し
始める場合に完了したとみなされた。
次に、反応混合物を氷水200mlで急冷し且つ２分間攪拌
した。沈殿した生成物を過し、水（４×150ml）で充
分に洗浄し、そして固形物の水分含量が0.08％未満にな
るまで真空下で乾燥させて、２−ホルミルメルカプトベ
ンゾチアゾールが21.4g（HPLCによる純度98％、収率89
％）得られ、m.p.125℃〜130℃（分解）；1 H−NMR（CDCl3）w7.36〜7.44（m,3H）,8.45〜8.52（m,
1H）,9.92（s,1H）であった。
した。沈殿した生成物を過し、水（４×150ml）で充
分に洗浄し、そして固形物の水分含量が0.08％未満にな
るまで真空下で乾燥させて、２−ホルミルメルカプトベ
ンゾチアゾールが21.4g（HPLCによる純度98％、収率89
％）得られ、m.p.125℃〜130℃（分解）；1 H−NMR（CDCl3）w7.36〜7.44（m,3H）,8.45〜8.52（m,
1H）,9.92（s,1H）であった。
実施例２ ピバル酸亜鉛の製法 60〜70℃まで加温された水250mlに、ピバル酸（トリメ
チル酢酸）56.1g（0.55モル）を加えた。次に、カルボ
ン酸亜鉛31.25g（0.25モル）を少量ずつ10〜15分間にわ
たって加えた後、温度を96〜98℃まで上昇させた。反応
混合物を１時間攪拌した後、氷浴を用いて混合物を４℃
まで30分間冷却し、そして懸濁液を過した。過ケー
キを冷水75mlで１回および冷アセトン３×50mlで洗浄し
た。得られる生成物をドラフトオーブン中、60℃で16時
間乾燥させてピバル酸亜鉛58g（87％）を生成した。
チル酢酸）56.1g（0.55モル）を加えた。次に、カルボ
ン酸亜鉛31.25g（0.25モル）を少量ずつ10〜15分間にわ
たって加えた後、温度を96〜98℃まで上昇させた。反応
混合物を１時間攪拌した後、氷浴を用いて混合物を４℃
まで30分間冷却し、そして懸濁液を過した。過ケー
キを冷水75mlで１回および冷アセトン３×50mlで洗浄し
た。得られる生成物をドラフトオーブン中、60℃で16時
間乾燥させてピバル酸亜鉛58g（87％）を生成した。
実施例３ 3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマイシンＢ ジメチルスルホキシド285mlおよび塩化メチレン285ml
に、ピバル酸亜鉛34.0g（127ミリモル）およびゲンタマ
イシンＢ（純度93.1％、36.7ミリモル）19gを加えた。
得られた懸濁液を室温で10〜15分間攪拌して溶液にし
た。この溶液に、２−ホルミルメルカプトベンゾチアゾ
ール16.0g（81.9ミリモル）を加え、５分後に一部分を
取出して、モノホルミル／ジホルミルピークの比率を液
体クロマトグラフィーによって分析した。最後の全添加
量が16.95g（86.8ミリモル）であるように更に少量を２
回添加して最終のピーク比率を0.02にし、それによって
完了したと判断した。
に、ピバル酸亜鉛34.0g（127ミリモル）およびゲンタマ
イシンＢ（純度93.1％、36.7ミリモル）19gを加えた。
得られた懸濁液を室温で10〜15分間攪拌して溶液にし
た。この溶液に、２−ホルミルメルカプトベンゾチアゾ
ール16.0g（81.9ミリモル）を加え、５分後に一部分を
取出して、モノホルミル／ジホルミルピークの比率を液
体クロマトグラフィーによって分析した。最後の全添加
量が16.95g（86.8ミリモル）であるように更に少量を２
回添加して最終のピーク比率を0.02にし、それによって
完了したと判断した。
反応混合物を２リットルの分液漏斗に移し、水800mlを
加えた。層を分離し、水性層を塩化メチレン30ml部分で
再抽出した。次に、水性層をセライトの小型パッドを介
して過して固体の曇りを除去した。
加えた。層を分離し、水性層を塩化メチレン30ml部分で
再抽出した。次に、水性層をセライトの小型パッドを介
して過して固体の曇りを除去した。
液を水で稀釈して最終容量を２リットルにし、そのpH
はこの時点で約６であった。この水溶液を、不完全なア
ンモニウムサイクルに調整されたアンバーライトIRN−5
0樹脂800mlが入っているカラムに充填した。生成物を0.
75N水酸化アンモニウムで溶離し；生成物を含む画分を
集め且つ濃縮して溶液を生じ、これを液体クロマトグラ
フィーによって分析し、そして3,6′−ジ−Ｎ−ホルミ
ルゲンタマイシンＢが17.9g（90.5％）含まれることが
分かった。
はこの時点で約６であった。この水溶液を、不完全なア
ンモニウムサイクルに調整されたアンバーライトIRN−5
0樹脂800mlが入っているカラムに充填した。生成物を0.
75N水酸化アンモニウムで溶離し；生成物を含む画分を
集め且つ濃縮して溶液を生じ、これを液体クロマトグラ
フィーによって分析し、そして3,6′−ジ−Ｎ−ホルミ
ルゲンタマイシンＢが17.9g（90.5％）含まれることが
分かった。
質量スペクトルm/e（％）（FAB/GLY−THIO）539（100,M
+＋１）,511（９）,380（９）,350（４）,191（10）,19
0（５）,160（28）．1 H−NMR（400MHz,D2O;pH＝９）w1.25（s,3H,C−４″−C
H3）,2.57（s,3H,N−CH3）,5.11（d,J＝4.02 Hz,1H,ア
ノマー性）,5.38（d,J＝4.02 Hz,1H,アノマー性）,8.1
5（s,1H,N−CHO）,8.16（s,1H,N−COH）．13 C−NMR（100MHz,D2O;pH＝９）w51.36（Ｃ−１）,47.8
（Ｃ−３）,38.96（Ｃ−６′）,64.5（Ｃ−３″）,37.0
1（Ｎ−CH3）,22.22（Ｃ−４″−CH3）,165.47（Ｎ−CH
O）,164.76（Ｎ−CHO）． 実施例４ N,O−ジホルミル−（Ｓ）−イソセリンの製法 （Ｓ）−イソセリン50g（0.476モル）およびギ酸62.5ml
が入っている１リットルの丸底フラスコに、新たに調製
された酢酸ギ酸無水物溶液＊（５当量）を０〜５℃で30
分間で加えた。反応の完了をH1−NMRによって試験した
後（約２時間）、混合物を真空下40℃で濃縮して最初の
量の半分にした。イソプロパノール250mlを徐々に加
え、同時に冷却して結晶化をおこなった。スラリーを０
℃で１時間攪拌した。生成物であるN,O−ジホルミル−
（Ｓ）−イソセリンを過し且つイソプロパノールで洗
浄した。これによって、N,O−ジホルミル−（Ｓ）−イ
ソセリン64gが得られ、収率84％;m.p.139.5℃〜141.5
℃；▲［ａ］20 D▼：−38°（１％,MeOH）であった。1 H−NMR（D2O）w3.8（dd,1H,J＝14.6,4.4Hz）,3.91（d
d,1H,J＝14.6,5.5Hz）,5.38（dd,1H,J＝5.5,4.4Hz）,8.
15（s,1H）,8.27（s,1H）． ＊酢酸ギ酸無水物は、塩化アセチルを、無水アセトニト
リル中、1.2当量のギ酸ナトリウム（無水物、超微粉
砕）（ギ酸ナトリウム／CH3CNの濃度は50％と同程度に
高いことがある）に０〜５℃で加えることによって調製
された。反応は完了するのに２時間を要する。沈殿を
過し、液を前記の反応でのように用いた。若干の一酸
化炭素が、温度に応じてこの混合物から発生する。適度
の安定性が０℃で１か月間観察された。
+＋１）,511（９）,380（９）,350（４）,191（10）,19
0（５）,160（28）．1 H−NMR（400MHz,D2O;pH＝９）w1.25（s,3H,C−４″−C
H3）,2.57（s,3H,N−CH3）,5.11（d,J＝4.02 Hz,1H,ア
ノマー性）,5.38（d,J＝4.02 Hz,1H,アノマー性）,8.1
5（s,1H,N−CHO）,8.16（s,1H,N−COH）．13 C−NMR（100MHz,D2O;pH＝９）w51.36（Ｃ−１）,47.8
（Ｃ−３）,38.96（Ｃ−６′）,64.5（Ｃ−３″）,37.0
1（Ｎ−CH3）,22.22（Ｃ−４″−CH3）,165.47（Ｎ−CH
O）,164.76（Ｎ−CHO）． 実施例４ N,O−ジホルミル−（Ｓ）−イソセリンの製法 （Ｓ）−イソセリン50g（0.476モル）およびギ酸62.5ml
が入っている１リットルの丸底フラスコに、新たに調製
された酢酸ギ酸無水物溶液＊（５当量）を０〜５℃で30
分間で加えた。反応の完了をH1−NMRによって試験した
後（約２時間）、混合物を真空下40℃で濃縮して最初の
量の半分にした。イソプロパノール250mlを徐々に加
え、同時に冷却して結晶化をおこなった。スラリーを０
℃で１時間攪拌した。生成物であるN,O−ジホルミル−
（Ｓ）−イソセリンを過し且つイソプロパノールで洗
浄した。これによって、N,O−ジホルミル−（Ｓ）−イ
ソセリン64gが得られ、収率84％;m.p.139.5℃〜141.5
℃；▲［ａ］20 D▼：−38°（１％,MeOH）であった。1 H−NMR（D2O）w3.8（dd,1H,J＝14.6,4.4Hz）,3.91（d
d,1H,J＝14.6,5.5Hz）,5.38（dd,1H,J＝5.5,4.4Hz）,8.
15（s,1H）,8.27（s,1H）． ＊酢酸ギ酸無水物は、塩化アセチルを、無水アセトニト
リル中、1.2当量のギ酸ナトリウム（無水物、超微粉
砕）（ギ酸ナトリウム／CH3CNの濃度は50％と同程度に
高いことがある）に０〜５℃で加えることによって調製
された。反応は完了するのに２時間を要する。沈殿を
過し、液を前記の反応でのように用いた。若干の一酸
化炭素が、温度に応じてこの混合物から発生する。適度
の安定性が０℃で１か月間観察された。
実施例５ Ｎ−フタロイル−（Ｓ）−イソセリンの製法 （Ｓ）−イソセリン15.75g（150ミリモル）および無水
フタル酸22.2g（150ミリモル）をトルエン：ジメチルホ
ルムアミド（3:1）600ml中で攪拌した懸濁液に、トリエ
チルアミン2.1ml（15ミリモル）を加えた。懸濁液を加
熱して還流し、生じた水をディーン・スターク冷却器を
用いて除去した。還流で２時間後にはそれ以上水は分離
されなかった。溶媒を蒸発させて最終容量約100mlにし
た。反応混合物を冷却し、氷水で稀釈し、そして2N塩酸
で酸性にして沈殿が得られた。生成物を過し、氷水で
洗浄し、そして真空下で乾燥させてＮ−フタロイル−
（Ｓ）イソセリン30.4g（86％）を生成し;m.p.227〜228
℃；▲［ａ］20 D▼：＋10（１％,DMF）であった。1 H−NMR（DMSO−d6）w3.76（dd,1H,J＝13.46,7.69Hz）,
3.84（dd,1H,J＝13.46,5.77Hz）,4.3（dd,1H,J＝7.69,
5.77Hz）,7.77〜7.89（m,4H）． 実施例６ Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｓ−イソセリンの製法 メタノール中で攪拌されたナトリウムメトキシド溶液11
ml（１当量、24.8％w/w溶液）に、（Ｓ）−イソセリン5
gを加えた。混合物を室温で15分間、均一溶液がえられ
るまで攪拌した。トリフルオロ酢酸エチル7ml（1.25当
量）を加えた。添加後、混合物を30分間攪拌した。反応
の完了を1H−NMRによって監視した。混合物を減圧下で
濃縮して可能な限り容量を低減させた。残留物に酢酸エ
チル50mlを加えた。混合物を０〜５℃まで冷却し、2N−
HClを25ml（１当量）加え、続いて、固体塩化ナトリウ
ム5gを加えた。有機層を分離した。水性層は酢酸エチル
50mlで再抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥させ（乾
燥硫酸マグネシウム5g上）、過し、そして減圧下で濃
縮して20mlにした。それにヘプタン50mlを氷浴中で30分
間攪拌しながら加えた。生成物を過し且つ乾燥させて
Ｎ−トリフルオロアセチル−（Ｓ）−イソセリン8.68g
（93％）を生成し;m.p.142〜143℃； ▲［ａ］20 D▼：＋12.4（１％，H2O）；1 H−NMR（D2O）w3.78（d,2H,J＝5.48 Hz）,4.53（t,1
H,J＝5.48 Hz）であった。
フタル酸22.2g（150ミリモル）をトルエン：ジメチルホ
ルムアミド（3:1）600ml中で攪拌した懸濁液に、トリエ
チルアミン2.1ml（15ミリモル）を加えた。懸濁液を加
熱して還流し、生じた水をディーン・スターク冷却器を
用いて除去した。還流で２時間後にはそれ以上水は分離
されなかった。溶媒を蒸発させて最終容量約100mlにし
た。反応混合物を冷却し、氷水で稀釈し、そして2N塩酸
で酸性にして沈殿が得られた。生成物を過し、氷水で
洗浄し、そして真空下で乾燥させてＮ−フタロイル−
（Ｓ）イソセリン30.4g（86％）を生成し;m.p.227〜228
℃；▲［ａ］20 D▼：＋10（１％,DMF）であった。1 H−NMR（DMSO−d6）w3.76（dd,1H,J＝13.46,7.69Hz）,
3.84（dd,1H,J＝13.46,5.77Hz）,4.3（dd,1H,J＝7.69,
5.77Hz）,7.77〜7.89（m,4H）． 実施例６ Ｎ−トリフルオロアセチル−Ｓ−イソセリンの製法 メタノール中で攪拌されたナトリウムメトキシド溶液11
ml（１当量、24.8％w/w溶液）に、（Ｓ）−イソセリン5
gを加えた。混合物を室温で15分間、均一溶液がえられ
るまで攪拌した。トリフルオロ酢酸エチル7ml（1.25当
量）を加えた。添加後、混合物を30分間攪拌した。反応
の完了を1H−NMRによって監視した。混合物を減圧下で
濃縮して可能な限り容量を低減させた。残留物に酢酸エ
チル50mlを加えた。混合物を０〜５℃まで冷却し、2N−
HClを25ml（１当量）加え、続いて、固体塩化ナトリウ
ム5gを加えた。有機層を分離した。水性層は酢酸エチル
50mlで再抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥させ（乾
燥硫酸マグネシウム5g上）、過し、そして減圧下で濃
縮して20mlにした。それにヘプタン50mlを氷浴中で30分
間攪拌しながら加えた。生成物を過し且つ乾燥させて
Ｎ−トリフルオロアセチル−（Ｓ）−イソセリン8.68g
（93％）を生成し;m.p.142〜143℃； ▲［ａ］20 D▼：＋12.4（１％，H2O）；1 H−NMR（D2O）w3.78（d,2H,J＝5.48 Hz）,4.53（t,1
H,J＝5.48 Hz）であった。
実施例７ イセパミシンの製法 下記の方法でイセパミシンの製法を例証する。
方法Ａ Ｎ−ホルミル−（Ｓ）−イソセリンの原液を、N,O−ジ
ホルミル−（Ｓ）−イソセリン20g（124.2ミリモル）を
メタノール（85ml）およびピリジン（15ml、1.5当量）
の混合物中、室温で14〜16時間攪拌することによって調
製した。反応の完了を1H−NMRによって判断した。
ホルミル−（Ｓ）−イソセリン20g（124.2ミリモル）を
メタノール（85ml）およびピリジン（15ml、1.5当量）
の混合物中、室温で14〜16時間攪拌することによって調
製した。反応の完了を1H−NMRによって判断した。
別のフラスコで、3,6′−ジホルミルゲンタマイシンＢ
の水性濃厚物20g（4.424g活性、8.2ミリモル）および１
−Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物1.26g
（8.26ミリモル）をメタノール40ml中に溶解させた。攪
拌された混合物に対して、前記のＮ−ホルミル−（Ｓ）
−イソセリンのメタノール中溶液（22.2ml、24.4ミリモ
ル、３当量）およびジシクロヘキシルカルボジイミド
（5g、24.3ミリモル、３当量）のメタノール20ml中溶液
を40分間にわたって同時に加えた。添加を終了した後、
混合物を15分間攪拌した。反応の進行をHPLCかまたは薄
層クロマトグラフィーによって監視した。次に、溶媒を
減圧下で除去し、生成物であるトリホルミルイセパミシ
ンを、2N−NaOH90mlと一緒に室温で16時間攪拌すること
によって加水分解した。反応混合物を酸でpH6まで中和
し、過し、そして液を稀釈して正確に容量1000mlに
した。この溶液の外部標準HPLC検定によりイセパミシン
の収率89％（4.17g、7.3ミリモル）が示された。
の水性濃厚物20g（4.424g活性、8.2ミリモル）および１
−Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物1.26g
（8.26ミリモル）をメタノール40ml中に溶解させた。攪
拌された混合物に対して、前記のＮ−ホルミル−（Ｓ）
−イソセリンのメタノール中溶液（22.2ml、24.4ミリモ
ル、３当量）およびジシクロヘキシルカルボジイミド
（5g、24.3ミリモル、３当量）のメタノール20ml中溶液
を40分間にわたって同時に加えた。添加を終了した後、
混合物を15分間攪拌した。反応の進行をHPLCかまたは薄
層クロマトグラフィーによって監視した。次に、溶媒を
減圧下で除去し、生成物であるトリホルミルイセパミシ
ンを、2N−NaOH90mlと一緒に室温で16時間攪拌すること
によって加水分解した。反応混合物を酸でpH6まで中和
し、過し、そして液を稀釈して正確に容量1000mlに
した。この溶液の外部標準HPLC検定によりイセパミシン
の収率89％（4.17g、7.3ミリモル）が示された。
方法Ｂ 3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマイシンＢを1.156g
（純度96.6％、2.07ミリモル）、Ｎ−フタロイルイソセ
リン800mg（1.7当量）およびＮ−ヒドロキシベンズトリ
アゾール一水和物365mg（1.2当量）をメタノール40ml中
に溶解させることによって溶液を調製した。この溶液に
対して、ジシクロヘキシルカルボジイミド700mg（1.7当
量）を加えた。反応を室温で１時間攪拌し、Ｎ−フタロ
イル−（Ｓ）−イソセリン160mgおよびジシクロヘキシ
ルカルボジイミド140mgを加え、そして反応を室温で約
３時間攪拌した。反応の進行を薄層クロマトグラフィー
によって監視した。溶媒を蒸発によって除去し、残留物
をエタノール50mlおよび水5ml中に入れた。得られる混
合物をヒドラジン水和物6.0ml（85％）で処理すること
によって保護基を除去した。反応を窒素下、85〜90℃で
14時間加熱した。反応の外部標準HPLC検定により、イセ
パミシンの収率89％（1.05g、1.85ミリモル）が示され
た。
（純度96.6％、2.07ミリモル）、Ｎ−フタロイルイソセ
リン800mg（1.7当量）およびＮ−ヒドロキシベンズトリ
アゾール一水和物365mg（1.2当量）をメタノール40ml中
に溶解させることによって溶液を調製した。この溶液に
対して、ジシクロヘキシルカルボジイミド700mg（1.7当
量）を加えた。反応を室温で１時間攪拌し、Ｎ−フタロ
イル−（Ｓ）−イソセリン160mgおよびジシクロヘキシ
ルカルボジイミド140mgを加え、そして反応を室温で約
３時間攪拌した。反応の進行を薄層クロマトグラフィー
によって監視した。溶媒を蒸発によって除去し、残留物
をエタノール50mlおよび水5ml中に入れた。得られる混
合物をヒドラジン水和物6.0ml（85％）で処理すること
によって保護基を除去した。反応を窒素下、85〜90℃で
14時間加熱した。反応の外部標準HPLC検定により、イセ
パミシンの収率89％（1.05g、1.85ミリモル）が示され
た。
方法Ｃ 3,6′−ジホルミルゲンタマイシンＢの水性濃厚物48.9g
（8.45g活性、15.7ミリモル）に対して、１−Ｎ−ヒド
ロキシベンゾトリアゾール一水和物2.4g（15.7ミリモ
ル）を加え、続いてメタノール80mlを加えた。攪拌され
た混合物に対して、メタノール40ml中、Ｎ−トリフルオ
ロアセチル−（Ｓ）−イソセリン9.5g（47.3ミリモル、
３当量）およびメタノール40ml中、ジシクロヘキシルカ
ルボジイミド9.7g（47.1ミリモル、３当量）を40分間に
わたって同時に加えた。添加を終了した後、混合物を15
分間攪拌した。反応の進行をHPLCかまたは薄層クロマト
グラフィーによって監視した。次に、溶媒を減圧下で除
去し、生成物を、2N−NaOH170mlと一緒に室温で16時間
攪拌することによって加水分解した。反応混合物を酸で
pH6まで中和し、過し、そして液を稀釈して正確に
容量1000mlにした。溶液の外部標準HPLC検定により、イ
セパミシンの収率88％（7.84g、13.8ミリモル）が示さ
れた。
（8.45g活性、15.7ミリモル）に対して、１−Ｎ−ヒド
ロキシベンゾトリアゾール一水和物2.4g（15.7ミリモ
ル）を加え、続いてメタノール80mlを加えた。攪拌され
た混合物に対して、メタノール40ml中、Ｎ−トリフルオ
ロアセチル−（Ｓ）−イソセリン9.5g（47.3ミリモル、
３当量）およびメタノール40ml中、ジシクロヘキシルカ
ルボジイミド9.7g（47.1ミリモル、３当量）を40分間に
わたって同時に加えた。添加を終了した後、混合物を15
分間攪拌した。反応の進行をHPLCかまたは薄層クロマト
グラフィーによって監視した。次に、溶媒を減圧下で除
去し、生成物を、2N−NaOH170mlと一緒に室温で16時間
攪拌することによって加水分解した。反応混合物を酸で
pH6まで中和し、過し、そして液を稀釈して正確に
容量1000mlにした。溶液の外部標準HPLC検定により、イ
セパミシンの収率88％（7.84g、13.8ミリモル）が示さ
れた。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 チュー，ジョン・ゼ―フン アメリカ合衆国ニュージャージー州07054, パーシッパニー，ファーンデール・ドライ ヴ 12 (72)発明者 コロン，セサー アメリカ合衆国ニュージャージー州07065, ラーウェイ，アプガー・テラス 849 (72)発明者 グリーン，マイケル・ディー アメリカ合衆国ニュージャージー州07513, パターソン，セヴンティーンス・アヴェニ ュー 96
Claims (3)
- 【請求項１】（ａ）ゲンタマイシンＢの二価の塩錯体
と、ゲンタマイシンＢの3,6′−アミノ基においてホル
ミル保護基を選択的に導入することができる２−ホルミ
ルメルカプトベンゾチアゾールとを反応させて3,6′−
ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマイシンＢを生成し； （ｂ）3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマイシンＢの１
−アミノ基をＮ−保護（Ｓ）−イソセリン化合物でアシ
ル化し； （ｃ）保護基を全部除去し； （ｄ）イセパミシンを単離すること； から成る、イセパミシンの調製方法。 - 【請求項２】構造 を有する3,6′−ジ−Ｎ−ホルミルゲンタマイシンＢ化
合物。 - 【請求項３】構造 （式中、ＲはＨ、CCl3またはCF3であり且つＲ′はＨで
ある；またはＲおよびＲ′が一緒にフタロイル残基のイ
ミド環を形成している）を有する化合物。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US36957889A | 1989-06-21 | 1989-06-21 | |
| US369,578 | 1989-06-21 | ||
| PCT/US1990/003328 WO1990015810A2 (en) | 1989-06-21 | 1990-06-19 | Improved process for preparing isepamicin |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6095303A Division JP2500059B2 (ja) | 1989-06-21 | 1994-05-09 | 新規２−ホルミルメルカプトベンゾチアゾ―ル化合物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04502474A JPH04502474A (ja) | 1992-05-07 |
| JPH0692433B2 true JPH0692433B2 (ja) | 1994-11-16 |
Family
ID=23456036
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2509550A Expired - Lifetime JPH0692433B2 (ja) | 1989-06-21 | 1990-06-19 | イセパミシンを調製するための改良法 |
| JP6095303A Expired - Lifetime JP2500059B2 (ja) | 1989-06-21 | 1994-05-09 | 新規２−ホルミルメルカプトベンゾチアゾ―ル化合物 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6095303A Expired - Lifetime JP2500059B2 (ja) | 1989-06-21 | 1994-05-09 | 新規２−ホルミルメルカプトベンゾチアゾ―ル化合物 |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (3) | EP0478707A1 (ja) |
| JP (2) | JPH0692433B2 (ja) |
| KR (1) | KR940003496B1 (ja) |
| AT (2) | ATE104310T1 (ja) |
| AU (1) | AU629960B2 (ja) |
| CA (2) | CA2325082A1 (ja) |
| DE (2) | DE69030590T2 (ja) |
| DK (2) | DK0405820T3 (ja) |
| ES (2) | ES2100380T3 (ja) |
| FI (1) | FI96955C (ja) |
| GR (1) | GR3023942T3 (ja) |
| HK (2) | HK185096A (ja) |
| HU (1) | HU207338B (ja) |
| NO (1) | NO177349C (ja) |
| RU (1) | RU2120444C1 (ja) |
| WO (1) | WO1990015810A2 (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100927626B1 (ko) * | 2002-09-18 | 2009-11-20 | 쯔지앙 하이썬 파머슈티컬 컴퍼니, 리미티드 | 이세파마이신의 제조 방법 |
| CN101928310B (zh) * | 2010-03-26 | 2012-09-05 | 常州方圆制药有限公司 | 3,2’,6’-三-N-乙酰基庆大霉素C1a的制备方法 |
| CN102190690B (zh) * | 2011-04-01 | 2015-01-21 | 福州博立医药科技有限公司 | 一种简便且高收率阿贝卡星合成方法 |
| CN105524129B (zh) * | 2015-12-25 | 2018-06-26 | 无锡济民可信山禾药业股份有限公司 | 一种硫酸依替米星的制备方法 |
| RU2659032C1 (ru) * | 2017-04-26 | 2018-06-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Удмуртский государственный университет" | Способ модификации гентамицина сополимером винилпирролидона с диацеталем акролеина |
| CN108586313B (zh) * | 2018-03-31 | 2019-12-27 | 海正药业南通有限公司 | 一种新型合成n-取代苯酐-(s)-异丝氨酸的方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4136254A (en) * | 1976-06-17 | 1979-01-23 | Schering Corporation | Process of selectively blocking amino functions in aminoglycosides using transition metal salts and intermediates used thereby |
| IE48972B1 (en) * | 1978-11-11 | 1985-06-26 | Microbial Chem Res Found | The production of a selectively protected n-acylated derivative of an aminoglycosidic antibiotic |
| EP0156771A3 (en) * | 1984-03-29 | 1986-03-19 | Biochemie Gesellschaft M.B.H. | Cephalosporins |
-
1990
- 1990-06-19 CA CA002325082A patent/CA2325082A1/en not_active Abandoned
- 1990-06-19 CA CA002062788A patent/CA2062788C/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-06-19 HU HU906641A patent/HU207338B/hu not_active IP Right Cessation
- 1990-06-19 KR KR1019910700196A patent/KR940003496B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1990-06-19 EP EP90917766A patent/EP0478707A1/en active Pending
- 1990-06-19 AT AT90306657T patent/ATE104310T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-06-19 RU SU5010871A patent/RU2120444C1/ru active
- 1990-06-19 DE DE69030590T patent/DE69030590T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-06-19 AU AU59463/90A patent/AU629960B2/en not_active Ceased
- 1990-06-19 ES ES93102033T patent/ES2100380T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-19 EP EP93102033A patent/EP0547031B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-19 DK DK90306657.9T patent/DK0405820T3/da active
- 1990-06-19 EP EP90306657A patent/EP0405820B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-19 ES ES90306657T patent/ES2063274T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-19 AT AT93102033T patent/ATE152094T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-06-19 DK DK93102033.3T patent/DK0547031T3/da active
- 1990-06-19 WO PCT/US1990/003328 patent/WO1990015810A2/en active IP Right Grant
- 1990-06-19 DE DE69008052T patent/DE69008052T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-06-19 JP JP2509550A patent/JPH0692433B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-12-18 FI FI915953A patent/FI96955C/fi active
- 1991-12-20 NO NO915071A patent/NO177349C/no not_active IP Right Cessation
-
1994
- 1994-05-09 JP JP6095303A patent/JP2500059B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-10-03 HK HK185096A patent/HK185096A/xx not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-06-30 GR GR970401590T patent/GR3023942T3/el unknown
- 1997-08-20 HK HK97101672A patent/HK1000153A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7388083B2 (en) | Epimerization of 4′-C bond and modification of 14-CH3-(CO)-fragment in anthracyclin antibiotics | |
| US20060128754A1 (en) | Tubulysins, method for producing the same and tubulysin preparations | |
| PL161779B1 (pl) | Sposób wytwarzania serynopochodnych zwiazku benzo /a/ naftacenowego PL PL PL PL PL | |
| US5945518A (en) | Process for the preparation of anthracycline antibiotics | |
| JP2500059B2 (ja) | 新規２−ホルミルメルカプトベンゾチアゾ―ル化合物 | |
| US5656735A (en) | Process for the preparation of amikacin precursors | |
| US5539121A (en) | 2-formylmercaptobenzothiazole | |
| JP2670032B2 (ja) | １−ｎ−エチルシソマイシンの製造方法 | |
| EP0678501B1 (en) | Process for producing N-chloroacetylglutamine | |
| EP0096392B1 (en) | Novel aminoglycosides, process for production thereof and use thereof | |
| US4774327A (en) | N-glycolylneuraminic acid derivative | |
| EP0665229A1 (en) | Process for the production of nucleic acid base derivatives | |
| IE46122B1 (en) | Antitumour glycosides | |
| KR100527833B1 (ko) | 3-(7-아미디노-2-나프틸)-2-페닐프로피온산 유도체의제조방법 | |
| JP2503382B2 (ja) | ヒスチジルプロリンアミド誘導体の製法 | |
| Miskolczi et al. | TRANSFORMATION OF A 3-BROMOMETHYL-CEPHEM INTO 3-ACETOXYMETHYL-CEPHEM DERIVATIVES | |
| JPH0432064B2 (ja) | ||
| JPH04108768A (ja) | アミノ酸エステルの製造法 | |
| JPS60252453A (ja) | β−クロロアラニンの製造法 | |
| JPS63310856A (ja) | アミド化合物の製造法 | |
| WO1984001574A1 (en) | Process for preparing physiologically active substance fa-5859 and its derivatives | |
| JPH09278787A (ja) | 新規なイスタマイシン誘導体とその製造法 |