JP2503382B2 - ヒスチジルプロリンアミド誘導体の製法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は生理活性ペプチドの合成
中間体として有用な、ヒスチジルプロリンアミド誘導体
の製法に関する。

【０００２】

【従来の技術】アミノ基の保護されたヒスチジルプロリ
ンアミドは、各種の生理活性ペプチド、例えば、サイロ
トロピン分泌因子又は甲状腺刺激因子として知られてい
るＬ−ピログルタミル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−プロリン
アミド等の合成中間体として有用な化合物である。ま
た、当該中間体の製法としては、従来、ヒスチジンのカ
ルボキシル基をエステル化し、そのアミノ基をベンジル
オキシカルボニル基で保護した後、ヒドラジンと反応さ
せてベンジルオキシカルボニル・ヒスチジルヒドラジド
を製し、ついでこれをアジド化し、プロリンアミドと縮
合反応させる方法が知られている（特開昭５２−１１６
４６５号）。

【０００３】しかしながら、この従来法によれば、ヒス
チジンから当該中間体を得るまでに計５工程を要し、収
率も２０〜２５％程度にすぎないという技術的難点があ
り、さらには、爆発の危険性があるアジド化工程を含む
ため、必ずしも工業的に有利な製法とは言えなかった。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記従来法
の難点を克服し、より少ない工程で、高収率に、しかも
危険なアジド化工程を経ることなく、アミノ基の保護さ
れたヒスチジルプロリンアミドを製造し得る、工業的有
利な製法を提供するものである。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明によれば、一般式

【０００６】Ｚ −Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−ＮＨ₂ （Ｉ）

【０００７】（式中、Ｚはベンジルオキシカルボニル基
を表す）で表されるアミノ基の保護されたヒスチジルプ
ロリンアミド（以下、目的化合物（Ｉ）と称する）は、
アミノ基とイミダゾール環上のイミノ基が共にベンジル
オキシカルボニル基で保護されたヒスチジン（以下、原
料化合物と称する）又はそのカルボキシル基における反
応性誘導体とプロリンアミドとを縮合させて一般式

【０００８】Ｚ −Ｈｉｓ（Ｚ）−Ｐｒｏ−ＮＨ₂ （ＩＩ）

【０００９】（式中、Ｚは前記と同一意味を有する）で
示されるヒスチジン誘導体を製した後、イミダゾール環
上のベンジルオキシカルボニル基を選択的に除去して製
造することができる。

【００１０】原料化合物とプロリンアミドとの縮合反応
は、縮合剤の存在下で実施することができる。縮合剤と
しては、ペプチド合成に用いられる慣用のものをいずれ
も用いることができ、例えばジシクロヘキシルカルボジ
イミド（ＤＣＣ）をあげることができる。反応は、適当
な溶媒（クロロホルム、塩化メチレン等）中、室温にて
実施するのが好ましい。

【００１１】また、原料化合物のカルボキシル基におけ
る反応性誘導体とプロリンアミドとの縮合反応は脱酸剤
の存在下又は非存在下に実施することができる。

【００１２】一方、原料化合物のカルボキシル基におけ
る反応性誘導体としては、ペプチド合成に慣用に用いら
れるものをいずれも用いることができ、例えば混合酸無
水物（イソブチルオキシカルボン酸との無水物、トリメ
チル酢酸との無水物、等）をあげることができる。脱酸
剤としては、トリ低級アルキルアミン、Ｎ，Ｎ−ジ低級
アルキルアミン、ピリジンの如き有機塩基や、水酸化ア
ルカリ金属、炭酸アルカリ金属、炭酸水素アルカリ金属
の如き無機塩基を好適に用いることができる。反応は、
適当な溶媒（テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミ
ド、クロロホルム、塩化メチレン、等）中冷却下、とり
わけ−２０〜−１５℃で実施するのが好ましい。

【００１３】かくして得たヒスチジン誘導体（ＩＩ）の
イミダゾール環上のベンジルオキシカルボニル基の選択
的除去は、ヒスチジン誘導体（ＩＩ）を適当な溶液中、
アンモニア、アルカリ金属アルコキシド、水酸化アルカ
リ金属又は有機アミン（ベンジルアミン等）で冷却下な
いし加温下処理して、好適に実施することができる。

【００１４】なお、本発明の原料化合物である、アミノ
基とイミダゾール環上のイミノ基が共にベンジルオキシ
カルボニル基で保護されたヒスチジンは、ベンジルオキ
シカルボニルハライドとヒスチジンとを、炭酸アルカリ
金属、水酸化アルカリ金属など脱酸剤の存在下に反応さ
せて製造でき、その際反応溶媒として、水とテトラヒド
ロフランとの混合溶媒を用いれば、とりわけ好収率で得
ることができる。

【００１５】また、当該原料化合物は、所望により、さ
らにアルコール和物（例えばメタノール和物、エタノー
ル和物）又は塩（例えばジシクロヘキシルアミン塩）と
して用いても良く、これらの付加物又は塩は結晶として
単離できるため、以後の反応操作が容易になり、また分
解を抑えることができる。

【００１６】

【実施例】実施例１ （１）水酸化ナトリウム４０．８ｇを水１５００ｍｌに
溶かし、１５℃に冷却する。これに、ヒスチジン塩酸塩
・１水和物１２５．８ｇを加えて溶かす。次いでこの液
に炭酸カリウム２４８．８ｇを加えて溶かした後、テト
ラヒドロフラン３００ｍｌを加え、１０℃に冷却する。
この液にクロロ炭酸ベンジル２２５．２ｇを１０〜２０
℃で滴下後、同温にて１．５時間かくはんする。反応終
了後、３５％塩酸３００ｍｌを２０℃以下で滴下し、酢
酸エチルで抽出する。抽出液を乾燥後、酢酸エチルを留
去し、残さをエタノール中で結晶化して、アミノ基とイ
ミダゾール環が共にベンジルオキシカルボニル基で保護
されたヒスチジン（Ｚ−Ｈｉｓ（Ｚ）−ＯＨ）・エタノ
ール和物２０７．０ｇを得る。 収率７４％ 〔α〕_Ｄ：＋２１．８°（ｃ＝１，ジオキサン，２０
℃） Ｍ．Ｐ．：１０５−１０７℃ 水分値（カールフィッシャー法）：０．３９％

【００１７】（２）本品１８３．１ｇ及びプロリンアミ
ド４４．５ｇをクロロホルム１２１０ｍｌに溶解する。
次いでこの液を−１０〜−５℃まで冷却し、ＤＣＣ８
８．５ｇを加える。同温にて０．５時間反応後、２５〜
３０℃にて終夜反応する。反応後、５０％酢酸２４ｍｌ
を加え、１０℃に冷却し、析出晶をろ別し、クロロホル
ムで洗浄する。洗浄液とろ液とをあわせ、洗浄、乾燥
後、減圧濃縮して油状物（ヒスチジンのアミノ基とイミ
ダゾール環が共にベンジルオキシカルボニル基で保護さ
れたヒスチジルプロリンアミド、Ｚ−Ｈｉｓ（Ｚ）−Ｐ
ｒｏ−ＮＨ_２）を得る。この油状物をメタノールに溶か
し、２４％アンモニア水３０．４ｇを１０〜１５℃で滴
下し、同温にて０．５時間、２０〜２５℃にて２．５時
間かくはんする。反応後、反応液を減圧濃縮し、２．５
％塩酸９００ｍｌを加え、析出物をろ去する。ろ液を、
クロロホルム洗浄、活性炭処理後、メタノール及び２４
％アンモニア水を加え、アルカリ性条件下で終夜晶析し
て、アミノ基がベンジルオキシカルボニル基で保護され
たヒスチジルプロリンアミド（Ｚ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｎ
Ｈ_２）１０９．７ｇを得る。 収率７３％ 〔α〕_Ｄ：−４１．２°（ｃ＝１，メタノール，２０
℃） Ｍ．Ｐ．：１０３−１０８℃ 水分値（カールフイッシャー法）：５．１％

【００１８】実施例２ （１）実施例１の結晶化溶媒としてメタノールを使用
し、アミノ基とイミダゾール環が共にベンジルオキシカ
ルボニル基で保護されたヒスチジン（Ｚ−Ｈｉｓ（Ｚ）
−ＯＨ）・メタノール和物を得る。 収率８５％ 〔α〕_Ｄ：＋３７．８゜（ｃ＝３，酢酸エチル，２０
℃） Ｍ．Ｐ．：９８−９９℃ 水分値（カールフィッシャー法）：０．３９％

【００１９】（２）本品を実施例１−（２）と同様に処
理して、アミノ基がベンジルオキシカルボニル基で保護
されたヒスチジルプロリンアミド（Ｚ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ
−ＮＨ_２）を得る。本品の物性値は実施例１−（２）の
目的物のそれと一致した。

【００２０】実施例３ （１）水酸化ナトリウム４８．０ｇを水１５００ｍｌに
溶かし、１５℃に冷却する。これに、ヒスチジン塩酸塩
・１水和物１２５．８ｇを加えて溶かす。次いでこの液
に炭酸カリウム２４８．８ｇを加えて溶かした後、テト
ラヒドロフラン３００ｍｌを加え、１０℃に冷却する。
この液にクロロ炭酸ベンジル２２５．２ｇを１０〜２０
℃で滴下後、同温にて１．５時間かくはんする。反応終
了後、３５％塩酸３００ｍｌを２０℃以下で滴下し、酢
酸エチルで抽出する。抽出液を乾燥後、ジシクロヘキシ
ルアミン１０８．８ｇを加え、接種する。終夜晶析し
て、アミノ基とイミダゾール環が共にベンジルオキシカ
ルボニル基で保護されたヒスチジン（Ｚ−Ｈｉｓ（Ｚ）
−ＯＨ）・ジシクロヘキシルアミン塩１０８．０ｇを得
る。 収率７３％ 〔α〕_Ｄ：＋２６．５°（ｃ＝１，クロロホルム，２０
℃） Ｍ．Ｐ．：１４２−１４４℃

【００２１】（２）本品を希硫酸で処理し、酢酸エチル
で抽出する。抽出液を洗浄、乾燥後、酢酸エチルを留去
する。残さを実施例１−（２）と同様に処理して、アミ
ノ基がベンジルオキシカルボニル基で保護されたヒスチ
ジルプロリンアミド（Ｚ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−ＮＨ_２）を
得る。本品の物性値は実施例１−（２）の目的物のそれ
と一致した。

【００２２】

【発明の効果】本発明方法によれば、目的化合物である
アミノ基の保護されたヒスチジルプロリンアミド（Ｉ）
を、原料化合物からわずか２工程で、かつ７０％を超え
る高収率で得ることができる。また原料化合物もヒスチ
ジンから１工程で７０％をこえる高収率で得ることがで
きるので、従来法と比較して、ヒスチジンから目的化合
物（Ｉ）までの工程を２工程短縮でき、しかも従来法の
２倍にあたる５０％をこえる高収率でヒスチジンから目
的化合物（Ｉ）を製造できるという工業的に有利な利点
が得られる。

【００２３】さらに、本発明の原料化合物は、遊離のカ
ルボキシル基を有するため、例えば縮合剤を用いる方法
や混合酸無水物法によりプロリンアミドとの縮合反応を
実施でき、従来法のように爆発の危険性があるアジド化
工程を経る必要がないという利点も得られる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 岡野 晃司 大阪府豊中市西緑丘３丁目11番５−313 号 (72)発明者 藤井 利幸 兵庫県三田市狭間が丘３−23−２

Claims (3)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 アミノ基とイミダゾール環上のイミノ基
   が共にベンジルオキシカルボニル基で保護されたヒスチ
   ジン又はそのカルボキシル基における反応性誘導体とプ
   ロリンアミドとを縮合させて、一般式Ｚ −Ｈｉｓ（Ｚ）−Ｐｒｏ−ＮＨ₂ （式中、Ｚはベンジルオキシカルボニル基を表す） で示されるヒスチジン誘導体を製した後、ヒスチジンの
   イミダゾール環上のベンジルオキシカルボニル基を選択
   的に除去することを特徴とする、一般式Ｚ −Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−ＮＨ₂ （式中、Ｚは前記と同一意味を有する） で示されるアミノ基が保護されたヒスチジルプロリンア
   ミドの製法。
2. 【請求項２】 アミノ基とイミダゾール環上のイミノ基
   が共にベンジルオキシカルボニル基で保護されたヒスチ
   ジンのアルコール和物又は塩を用いることを特徴とする
   請求項１記載の方法。
3. 【請求項３】 ヒスチジン及びプロリンとしてＬ体を用
   いることを特徴とする請求項１又は２記載の方法。