JPH0553505B2 - - Google Patents

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JPH0553505B2
JPH0553505B2 JP2246000A JP24600090A JPH0553505B2 JP H0553505 B2 JPH0553505 B2 JP H0553505B2 JP 2246000 A JP2246000 A JP 2246000A JP 24600090 A JP24600090 A JP 24600090A JP H0553505 B2 JPH0553505 B2 JP H0553505B2
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tissue
collagen
gel
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container
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Deibitsudo Kenpu Hooru
Beru Yuujiin
Teii Keigan Deibitsudo
Meison Barerii
Kabaraaro Jon
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OOGANOJENESHISU Inc
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    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
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    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
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    • C12M25/02—Membranes; Filters
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    • C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
    • C12N2502/09—Coculture with; Conditioned medium produced by epidermal cells, skin cells, oral mucosa cells
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
    • C12N2502/13—Coculture with; Conditioned medium produced by connective tissue cells; generic mesenchyme cells, e.g. so-called "embryonic fibroblasts"
    • C12N2502/1323—Adult fibroblasts
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
    • C12N2533/50—Proteins
    • C12N2533/54—Collagen; Gelatin

Description

【発明の詳細な説明】 発明の分野 本発明は、(i)収縮集結因子（物質）によつて収
縮集結された水和コラーゲン格子と(ii)透過性部材
に接触しているコラーゲンゲルとを包含している
組織等価物を製造及び使用する方法に係わる。更
に本発明は、かかる組織等価物が組み込まれた試
験係にも系わる。
組織等価物を形成するために腺維芽細胞または
血小板のような収縮集結因子によつて収縮集結さ
れた水和コラーゲン格子を含む組織等価物は、米
国特許第4485096号、第4485097号、第4539716号、
第4546500号、第4604346号及び第4837379号、並
びに1988年９月30日出願の同時係属米国特許出願
第07／252249号（及びその対応米国外出願）に記
載されており、上記全ての特許明細書は参照によ
り本明細書の一部を構成するものとする（本明細
書中では以降これらをまとめて「関連特許」と表
記する）。本明細書において使用される組織とは、
一緒になつて１つ以上の所定の機能を果たす任意
の細胞群または細胞層からなる。このような組織
等価物としては、次のものに限定されることはな
いが、上皮組織、結合組織、軟骨、骨、臓器、腺
及び血管の等価物を挙げることができ、これらは
生細胞及び細胞外基質分子、主としてコラーゲン
を含んでおり、必要によつては、典型的には正規
の組織に見られない成分を含むことができる。
一般にこのような生組織等価物は、生組織中に
収縮集結される水和コラーゲン格子を形成するこ
とにより製造される。収縮集結因子の例として
は、腺維芽細胞、平滑筋細胞及び血小板を挙げる
ことができる。皮膚等価物は、生結合組織等価物
基質上にケラチン細胞を平板培養し、増殖するこ
とにより、生結合組織等価物基質から製造するこ
とができる。
上記組織等価物には、長期間生存することがで
きる細胞であつて且つ生産された単位が実質的に
均一であるという保証がある量だけ生産され得る
細胞が集団形成される。このような組織等価物に
おける細胞は正規組織の細胞に、構造的構成、生
合成産出量及び透過性において類似である。これ
らの組織等価物はヒトのものである必要はなく、
所望の任意の動物のものとし得ることを理解され
たい。
本発明の教示による組織等価物は、研究及び開
発や、組織及び臓器の置換並びに試験における利
用を含む広範囲にわたる用途を有する。
ヒト皮膚組織等価物は、十分に分化する正規の
ヒト表皮細胞の成長を可能にする。これは、今ま
での常習的な培養方法では得られなかつた。かか
る皮膚組織等価物は、動物実験における永久置換
皮膚として幅広く使用されている。かかる皮膚組
織等価物の形態的様相は正常であり、構成細胞
は、遺伝標識によつて示されるように移植後にも
存続し、機能的性能も立証されている。例えば
Science、211：1052〜1054（1981）；J.Invest.
Dermatol.81：2s〜10s（1983）を参照されたい。
前述の関連特許に記載の方法によつてin vitro
製造された皮膚組織等価物は天然皮膚と極めて類
似している。かかる等価物は、よく成長した基底
細胞が真皮層に結合している多層表皮からなる。
真皮層は、真皮腺維芽細胞が分布しているコラー
ゲンマトリツクスからなる。３次元コラーゲンマ
トリツクス中の細胞は、in vivoで現れるのと多
くの点で類似の分化状態に達する。例えば、常在
性（resident）腺維芽細胞は合成的に活性であ
り、コラーゲン及び多数の他の分子種を含むin
vitroマトリツクスを豊富にし、またin vivo細胞
に典型的な透過性を示す。例えばCollagen Rel.
Res.4：351〜364（1984）を参照されたい。更に皮
膚組織等価物は、色素をケラチン細胞に与えるメ
ラニン細胞を包含させることにより色素沈着する
ことができ、このプロセスは、紫外線照射により
in vitroで加速されることが示された（J.Invest.
Dermatol.87：642〜647、1986）。
米国特許第4835102号は、天然組織の多くの物
理的及び生物学的特性をin vitroで再生し、しか
も例えば組織細胞生物学、生理学及び病理学の研
究に有効な組織等価物が組み込まれた系を開示し
ている。かかる系は、少なくとも１種の組織等価
物を使用することにより組織と少なくとも１種の
作用因子との相互作用を測定するための装置及び
キツトを包含している。作用因子としては、次の
ものに限定されることはないが、化学物質、化粧
品、医薬品といつた種々の物質、刺激（例えば光
または物理的創傷）及び組織保護剤を挙げること
ができる。
組織等価物は任意の所望の形状に流延する
（cast）ことができる。皮膚移植及び試験系に使
用するための皮膚組織等価物は一般に平坦なシー
トに流延され、血管等価物は一般に中空チユーブ
または中空チユーブ網状に製造される。しかしな
がら、組織等価物の生来の形状または構成は所望
であれば変えることができる。例えば、皮膚等価
物はシート状ではなくて円筒形に流延することが
できる。
組織等価物の製造における収縮集結因子として
腺維芽細胞または平滑筋細胞を使用する場合、典
型的にはコラーゲン格子を何の拘束もなしに全て
の方向に収縮集結させる。調整可能な形状及び／
または寸法を有する組織等価物や生組織を形成す
る上で助けとなる種々の方法は、例えば米国特許
第4485096号に開示されている。例えばコラーゲ
ン格子はステンレススチールフレーム上に流延
し、その縁を固定して把持し、そうして実質的に
厚さ方向にのみ収縮集結させることができる。組
織等価物の構成を調整するのに使用され得る他の
部材としては、VELCRO（登録商標）、型押し
（textured）プラスツチ及び型押しTEFLON（登
録商標）を挙げることができる。これらの拘束手
段は有効であるが、コスト及び単純性の両面にお
ける多くの点で、流延チヤンバと一体的でない拘
束手段を使用することが好ましい。
組織等価物の多くの用途を鑑み、優れた組織等
価物及びかかる組織等価物を製造する方法を追究
した。
発明の要約 本発明は、(i)収縮集結因子によつて収縮集結さ
れた水和コラーゲン格子、及び(ii)コラーゲンゲル
を包含する組織等価物を提供する。更に本発明
は、収縮集結の程度において、また皮膚組織等価
物の場合には表皮の分化の程度において、試料毎
の再現性が高いという特性等の、優れた特性を有
する組織等価物を提供する。
本発明の幾つかの実施態様においては、かかる
組織等価物は、線維性パツド及びゲル（例えばア
ガロース）を含む１つ以上の吸収部材に隣接して
いる。
更に本発明は、かかる優れた組織等価物を製造
及び使用する方法も提供する。本明細書において
教示する方法は、前述の関連特許に開示された方
法よりも製造が容易で且つ製造コストが低い点で
有利である。
組織等価物を形成する本発明の方法の１つは、 (a) コラーゲンと少なくとも１種の収縮集結因子
とを含む混合物を形成し、 (b) ステツプ(a)で得られた混合物を透過性部材に
接触しているコラーゲンゲルに付着させ、前記
混合物及びゲルを組織等価物が形成し得る条件
下に維持する ことからなる。
更に本発明は、組織と少なくとも１種の作用因
子との相互作用を測定するための、かかる組織等
価物が組み込まれた装置を提供する。
本発明の１つの好ましい実施態様においては、
かかる装置は、その中に、組織等価物が上に置か
れているコラーゲンゲルを備えた透過性手段によ
つて規定される（アウトライン、境界が定められ
ている）第１及び第２の領域を包含しており、そ
れによつて前記組織等価物が前記第１の領域を規
定し且つ前記透過性部材が前記第２の領域を規定
する。
本発明の他の好ましい実施態様においては、か
かる装置は、少なくとも１種の組織等価物と該組
織等価物のための少なくとも１つの容器とを備え
ており、前記容器が、 (i) 組織等価物がその上に置かれているコラーゲ
ンゲルを備えた透過性手段を含む内側ウエルで
あつて、それによつて透過性手段が該内側ウエ
ルの底部を規定する内側ウエル、及び (ii) 前記内側ウエルがその中に置かれる外側ウエ
ル を備えている。
発明の詳細 本発明の組織等価物は、製造及び使用の方法が
前述の関連特許に開示された水和コラーゲン格子
を包含するものに類似であるが、更にコラーゲン
層も包含する。
予期せずして、透過性部材と接触しているコラ
ーゲンゲル上に流延させたコラーゲン格子は、厚
さ方向に収縮集結する際に半径方向または横方向
には実質的に収縮集結せず、このことによつて、
半径方向または横方向の収縮集結を調節するため
にコラーゲン格子を例えばステンレススチール上
に固定する必要性が排除されることが判つた。例
えば、前述の関連特許に教示のごとく流延させた
直径24mmのコラーゲン格子は、固定手段なしでは
半径方向には直径５mm以下にまで収縮集結するで
あろう。これに反して、透過性部材に接触してい
るコラーゲンゲル上に流延させた直径24mmのコラ
ーゲン格子は典型的には半径方向には直径約15mm
までしか収縮集結しない。横方向／半径方向収縮
集結を調節するための固定手段の排除は、組織等
価物製造のコスト削減及び容易さの点で長所をも
たらす。かかる固定手段は、所望であれば透過性
部材に接触させたコラーゲンゲルと一緒に使用し
得ることを理解されたい。
本発明の組織等価物を得る１つの方法は、 (a) コラーゲンと少なくとも１種の収縮集結因子
とを含む混合物を形成し、 (b) ステツプ(a)で得られた混合物を透過性部材に
接触しているコラーゲンゲルに付着させ、前記
混合物及びゲルを組織等価物が形成し得る条件
下に維持する ことからなる。
本発明の幾つかの実施態様においては、次のも
のに限定されることはないが、線維性パツド（例
えば綿パツド）やゲル（例えばアガロースゲル）
等の１つ以上の吸収部材を前記コラーゲンゲルと
一緒に使用する。このような吸収部材は、終始水
平な物理的支持体を提供し、しかも組織等価物と
細胞培地の間の均一な接触を促進することが判つ
た。典型的には、吸収部材は水和コラーゲン格子
とは反対側のコラーゲンゲル表面に当接させる。
吸収部材自体がゲル、例えばアガロースである場
合には、このゲルは、組織等価物に養分を与える
ための滋養培地と一緒に設けることができる。
皮膚組織等価物の種々の発生段階において、コ
ラーゲンゲル及び／または吸収部材を用いたり、
用いずに維持した組織等価物について以下の実験
的決定点をモニターした。
１ グルコース利用の程度； ２ 表皮層形成及び角質化の広がり及び質； ３ 培地のPH。
吸収部材を用いて維持した組織等価物から得ら
れた培地に認められたPHは、かかる部材の不在下
に維持した組織等価物より一定してより高く、生
理学的PHにより近かつた。更に、グルコース利用
の程度は、吸収部材を用いて維持した組織等価物
において一般により低いことが認められた。
驚くべきことには、吸収部材を使用することに
より製造した皮膚組織等価物は、かかる部材を使
用せずに製造した対照皮膚等価物と比較し、角質
熟成化が促進されることが判つた。上記吸収部材
が表皮の角質化に及ぼし得るメカニズムは未知で
あるが、かかる部材が拡散の障壁、例えば透過性
の障壁として使用し得、媒質を過したり及び／
または分泌細胞産物を組織等価物に極めて近いと
ころに保持したりすることが推定される。
本発明の生皮膚等価物は、本発明では水和コラ
ーゲン格子をコラーゲンゲル上に流延させること
を除き、前述の関連特許に記載のごとく製造され
る。
本発明の皮膚組織等価物を製造する１つの方法
は、 (a) コラーゲンと少なくとも１種の収縮集結因子
とを含む混合物を形成し、 (b) ステツプ(a)で得られた混合物を透過性部材に
接触しているコラーゲンゲルに付着させ、前記
混合物及びゲルを組織等価物が形成し得る条件
下に維持し、 (c) ステツプ(b)で得られた組織等価物にケラチン
細胞を播種する ことからなる。
従来技術によれば、本発明の組織等価物を流延
させる１つの都合の良い方法は、PH約３〜４を有
する酸性コラーゲン溶液を滋養培地と一緒に素早
く混合し、得られた溶液のPHを必要であればPH約
6.6〜7.8に調整し、腺維芽細胞を加え、得られた
混合物（「流延用混合物（casting mixture）」）
を適当な型またはコラーゲンゲルが入れられた流
延装置内に移し、好ましくは約35〜38℃の温度で
インキユベートすることを含む。同時にPHを調整
し且つ流延用混合物の成分を配合することが最も
都合が良い。しかしながら、流延用混合物が適正
に硬化するための型に移され得るようにステツプ
が完了するという条件で、上記ステツプは任意の
所望の順序で実施することができる。コラーゲン
フイブリルは、溶液を暖め且つPHを上昇させた結
果として流延用混合物から沈澱し、収縮集結因子
によつて収縮集結されコラーゲンゲル上に置かれ
る水和コラーゲンゲルを形成する。
本発明によつて提供される生組織を製造する方
法は一般の組織等価物の製造に適用可能である
が、これらの方法を、皮膚移植のための及び皮膚
等価物が組み込まれた試験系に使用するための皮
膚等価物製造と関連して説明する。
皮膚組織等価物を含む組織等価物を使用するこ
とにより、組織と１種以上の作用因子との相互作
用を測定するための装置、方法及びキツトは米国
特許第4835102号に記載されている。本発明にお
いては、かかる用途に供する組織等価物は有利な
ことに更に透過性部材に接触しているコラーゲン
ゲルを包含する。
図面を参照すると、第１図〜第３図は、本発明
の皮膚組織等価物を使用することにより皮膚と１
種以上の試薬との相互作用を測定するための装置
の１つの実施態様を示す。これらの図では本発明
の組織等価物がその中に置かれている多重容器１
０，２０がベースまたはホルダに備えられてい
る。第１図〜第３図に示した装置には更にカバー
手段２が備わつている。幾つかの実施態様におい
てはカバーは各容器１０，２０に備えられる（図
示なし）。カバーは、シールを容器上に保持する
任意の生態適合性材料から選択される。使用可能
なカバー材料としては、接着剤または熱によつて
装置に封止され得るフオイル及び遮断フイルムを
挙げることができる。ヒートシール可能なポリエ
ステルフイルムは本発明の実用化において特に有
効である。
組織等価物用の容器は外側容器１０及び内側容
器２０を備えている。内側容器２０には、外側容
器１０内に内側容器２０を位置決めし、それによ
つて外側領域１４及び内側領域２２を規定する手
段となるリム５０が備わつている。内側容器２０
には、コラーゲンゲル２５上に置かれた皮膚組織
等価物２６，２８が備えられている。尚、そのコ
ラーゲンゲル２５は透過性部材２４に当接・載置
されている。透過性部材は、内側容器２０の底面
を形成するために内側容器２０に封止式に取り付
けられている。皮膚組織等価物は２つの層２６及
び２８を含んでおり、層２８は表皮層からなり、
層２６は真皮層からなる。幾つかの実施態様のお
いては、封止部材３０は内側容器２０の内壁と皮
膚等価物２６，２８との間を封止し、また組織等
価物２６，２８の外側縁がコラーゲンゲル２５の
内側に位置している場合にはコラーゲンゲル２５
の周囲を覆う。図に示した実施態様においては、
容器２０に外側領域１４に通じる開口２１が備え
られている。
第３図に示した装置には更に吸収部材３２が備
えられている。更に他の実施態様においては、外
側チヤンバ１４はその中にゲルを置くことができ
る（図示なし）。
第４図〜第６図は、本発明の組織等価物を使用
することにより組織と１種以上の作用因子との相
互作用を測定する装置の他の実施態様を示す。前
述の実施態様のものと同様のエレメントは同じ参
照番号で示してある。この実施態様においては外
側ウエル１０は方形であり、底部には、内側容器
２０を載置することができる隆起部（elevated
section）６０を備えている。外側ウエル１０は
装置の底部から上向きに突出しているというより
は、装置の頂部からポケツト状に形成されてい
る。
外側ウエル１０には組織等価物のための滋養培
地が備えられている。このような培地は当業者に
は公知である。好ましい無血清滋養培地は同時係
属米国特許出願第361041号に開示されている。培
地の容積は、培地を透過性部材２４、コラーゲン
ゲル２５及び組織等価物２６，２８を通して内側
容器２０内に押し込むであろう静圧頭が生じない
ように外側容器１４を適当なレベルまで充填する
ように選択せねばならない。
本発明の幾つかの実施態様においては外側容器
１０に吸収部材３２が備えられており、吸収部材
３２は外側容器１０内に透過性部材２４の外側表
面と接触するように置かれている。吸収部材３２
は生組織等価物と適合性であらねばならない。吸
収部材に好ましい材料としては綿、ポリエステル
及びレーヨンを挙げることができる。特に好まし
い材料は吸収綿である。一般に吸収部材は、洗剤
のような添加剤を含有していないことが好まし
い。
本発明の他の実施態様においては、外側ウエル
１０にはアガロースのようなゲル（図示なし）が
備えられ、これが媒質を捕捉する役割を果たす。
アガロースゲルは開口２４のレベルのちようど下
まで加えることができるので、より多くの滋養培
地を組織等価物のために使用することができ、組
織等価物２６，２８への養分供給は迅速に使い果
たされることはない。このようなゲルの使用は、
本発明の装置を保管及び出荷する上で培地の漏出
を最小化し、結果として組織等価物の汚染の可能
性を最小化する点で有益である。
外側容器１０及び内側容器２０は、組織等価物
を含むアツセイの成分に反応せずまたそれらに望
ましくない影響を及ぼさない任意の所望の材料で
製造することができる。例えば、生組織等価物用
の流延用混合物は、収縮集結の際に内側容器の壁
に付着して組織等価物の形成に干渉するようなこ
とがあるべきはない。
内側容器２０を殺菌するのに使用される方法は
組織組成物の接着性に強く影響し得ることが判つ
た。例えば、酸化エチレンではなくて電子ビーム
によつて殺菌する場合には、形成しつつある組織
は内側容器の１つの好ましい材料であるポリスチ
レンに付着する。これに反して、ポリスチレン及
びブタジエンのポリマーアロイであつて内側容器
の特に好ましい材料であるＫ樹脂は、形成しつつ
ある組織等価物を付着させることなく電子ビーム
によつて殺菌することができる（Ｋ樹脂は
Phillips Petroleumの商標である）。幾つかの実
施例においては容器は、組織等価物が容器を通し
て、例えば容器の壁または容器にある窓を通して
見えるように製造することが望ましい。容器１０
に好ましい材料としてはポリスチレン及びPETG
を挙げることができる。
内側容器２０は、所望の大きさ及び形状の組織
等価物を収容する任意の形状及び容積とすること
ができる。容器の寸法もまた所望の組織等価物及
び所望のアツセイ容積の大きさ及び形状に依存す
る。例えば、外径が約25mmで溶液約５mlを含む容
器が本発明を実施する上で有効である。第１図〜
第３図に示した実施態様においては、ベースまた
はホルダー内に多重容器が備えられている。
透過性部材２４は、コラーゲンゲル２５及び組
織等価物２６，２８を支持するのに十分な強度を
有さねばならない。本発明の実施においては多孔
質膜が有効である。このような膜の孔径は、コラ
ーゲンゲル２５に対する付着性を与えるように選
択する。好ましい膜は親水性であり、厚さ約１〜
10mm及び孔径約１〜約10μを有するものである。
透過性部材２４に好ましい材料としてはポリカー
ボネートを挙げることができる。特に好ましい透
過性部材は、好ましくは湿潤剤を含まず、
Nucleporeから市販されており、且つ孔径約３〜
10μを有するポリカーボネート膜である。
封止手段３０は、使用するアツセイ条件及び組
織等価物に対して不活性であり、しかも内側容器
２０と組織等価物との間に優れた封止を提供する
任意の材料で製造することができる。好ましい材
料としてはポリエチレン、TEFLON（登録商標）、
ポリカーボネート及びナイロンを挙げることがで
きる。封止手段は、外側溶液の内容物を表皮２５
に与えた任意の溶液または物質から分離して維持
することが所望の場合、例えば組織等価物を通し
ての物質の拡散または透過を測定する場合に特に
有効である。
本発明の組織等価物及びコラーゲンゲルは両方
とも、ラツト尾腱、仔ウシ皮膚コラーゲン及び仔
ウシ伸筋腱等の皮膚及び腱由来のコラーゲンを使
用して製造することができる。他のコラーゲン源
も適当であろうが、仔ウシ共通（総）指（calf
common digital）伸筋腱由来の特に好ましいコ
ラーゲン組成物及びこのようなコラーゲン組成物
を誘導する方法は、本出願と同日出願（対応米国
特許出願第07／407465号）の明細書に開示されて
おり、この開示内容は参照により本明細書の一部
を構成するものとする。
本発明の１つの方法においてはコラーゲンゲル
２５は、約0.5〜2.0mg／ml、好ましくは約0.9〜
1.1mg／mlのコラーゲンと滋養培地とを含むコラ
ーゲン組成物から製造される。このコラーゲン組
成物を内側容器２０に入れ、コラーゲン組成物が
硬化し、典型的には厚さ約１〜５mm、好ましくは
厚さ約２〜約３mmの適当な寸法のコラーゲンゲル
を形成し得る条件下に維持する。コラーゲンゲル
２５は、細胞が組織等価物からコラーゲンゲル中
に移動するときに一部は細胞を含まないままに維
持されるのに十分なほど厚く、且つ組織等価物
が、外側容器１０に提供された養分源から不本意
に離れないように十分薄いことが望ましい。
次に真皮等価物をコラーゲンゲル上に、前述の
関連特許及び以下に記載の手順を使用して流延さ
せる。即ち、コラーゲン及び腺維芽細胞を含有す
る流延混合物を内側容器２０内のコラーゲンゲル
２５上に加え、組織等価物が形成され得る条件下
に維持する。組織等価物がコラーゲンゲル２５上
に形成されると、それは半径方向に収縮集結す
る。しかしながら、コラーゲンゲル２５は、型押
し金属及びプラスチツクまたはVELOCRO（登録
商標）のような機械的把持手段の必要性なしに組
織等価物の過剰な半径方向収縮集結を防止する。
典型的には組織等価物２６の側部は、第３図及
び第６図に参照番号５２で示したような卓状部を
形成するために、コラーゲンゲル２５の外側周囲
に向かつて傾斜している。そうして、組織等価物
２６に上皮細胞を播種して表皮層２８を形成す
る。表皮細胞を培地中に濃度約0.3×106〜30×
106細胞／mlで播種する。播種する表皮細胞の容
積は卓状部の大きさに依存する。
コラーゲンの濃度、細胞の数及び流延用混合物
の容積を調整して生組織等価物の直径及び厚さを
最適化することができる。流延用混合物は、滋養
培地中に濃度約1.25〜５×104細胞／mlの細胞と
約0.5〜2.0mg／mlのコラーゲンとを含有してい
る。好ましい細胞濃度は約2.5×104細胞／mlであ
る。コラーゲンゲルのための流延用混合物の容積
に対する組織等価物のための流延用混合物の容積
の比は細胞の生存可能性及び分化に影響を及ぼす
ことが判つた。組織等価物用・流延用混合物とコ
ラーゲンゲル用・流延用混合物との有効な容積比
は約３：１〜１：３である。コラーゲン格子中の
細胞濃度が約2.5×104細胞／mlである場合の好ま
しい比は３：１である。
本発明は以下の実施例を参照することにより更
に理解されるであろう。但し、これらの実施例は
単に例示を目的としており、本発明の範囲を制限
するものではない。
以下の実施例に使用した材料は実施例中に記載
の源から取得したか、または記載の文献に従つて
製造した。全実施例を通して無菌手順を使用し
た。組織等価物はインキユベーター内で10％CO2
下に維持し、初めから終わりまで無菌手順を使用
した。
実施例 ：皮膚等価物試験系の製造 Ａ 以下に記載の実験を実施するに当たり第４図
に示したものに類似の装置を使用した。操作を
実施するためにカバーを取り外したが、そうで
ないときは無菌状態を維持するために元に戻し
ておいた。装置に関する詳細を以下に列挙す
る。
外側容器１０：直径38mm 容量35ml、 内側容器２０：直径24mm 容量４ml、 透過性部材２４：Nuclepore製のポリカーボネ
ート膜、孔径3μ、厚さ5μ Ｂ 透過性部材２４上にコラーゲンゲルを以下の
ように形成した。
(1) プレミツクス： 10X MEM 16.2ml Ｌ−グルタミン（200ｍＭ） 1.6ml ゲンタマイシン（50mg／ml） 0.2ml ウシ胎児血清 18.0ml 重炭酸ナトリウム（71.2mg／ml） 5.0ml 上記順序で配合した原料溶液（stock
solutions）を37℃で混合し、50ml試験管中
に４℃で約30分間保管した（通気なし）。
(2) 0.05％ｖ／ｖ酢酸中の（仔ウシ共通（総）
指伸筋腱から酸によつて抽出した）１mg／ml
コラーゲン溶液27.8ｇを50ml試験管中に計り
取り、４℃で30分間保管した。
(3) （10％FBS、４ｍＭ Ｌ−グルタミン、
50μｇ／mlゲンタマイシンを含有する）前記
プレミツクス8.2ml及びDMEM純粋液４mlを
内側容器２０内に加え、更に１mlアリコート
をピペツトで滴下し、フード内でゲル化させ
た。
Ｃ 以下に記載のように、組織等価物をヒト真皮
腺維芽細胞と一緒に流延させ、ヒト表皮（上
皮）細胞を播種した。操作手順及び試薬の一般
的説明は前述の関連特許及び1989年６月５日出
願の同時係属米国特許出願第07／361041号（及
びその対応米国外出願）に見ることができる。
(1) 流延用混合物： 上記ステツプＡ(2)に記載のごとく前記プレ
ミツクス8.2mlを0.05％ｖ／ｖ酢酸中の１
mg／mlコラーゲン溶液27.8ｇに加え、ヒト真
皮腺維芽細胞（2.5×105細胞／ml）４mlを配
合した。容器２０の上記ステツプＢ(2)で形成
されたコラーゲンゲル上に３mlアリコートを
ピペツトで滴下し、ゲル化させた。DMEM
純粋液4.5mlを外側溶液１０に加え、次いで
36℃／10％CO2で典型的には４〜８日間イン
キユベートした。
以下の培地を使用した。成分 mSBM ヒドロコルチゾン 1.1uM インシユリン 5μｇ／ml トランスフエリン 5μｇ／ml トリヨードチロニン 20pM エタノールアミン １×10-4M Ｏ−ホスホリルエタノールアミン １×10-4M アデニン 0.18ｍＭ プロゲステロン ２×10-9M セレン 5.26×10-8M ウシ血清 0.3％ 表皮成長因子 10nｇ／ml カルシウム非含有DMEM 75％ Ham′s Ｆ−12 25％ 使用した他の２つの培地は以下の点を除き
mSBMと同一であつた。
cSBM 主SBM プロゲステロン ０ ０ ウシ血清 2.0％ １％ 表皮成長因子 1nｇ／ml 1nｇ／ml カルシウム非含有 DMEM 50％ 50％ Ham′sF−12 50％ 50％ 場合によつては培地に塩化カルシウムを
1.8ｍＭ加えた。これを、培地＋カルシウム、
例えばmSBM＋カルシウムと表記する。
Ｄ 組織等価物を流延させてから６日後に表皮形
成（epidermalizaion）が開始した。
(1) 表皮形成 上記ステツプＣの培地を内側容器２０及び
外側容器１０から取り出した。ヒト表皮細胞
（3.33×106細胞／ml）の懸濁液50μを、上
記ステツプＣで形成した組織等価物上に置い
た。次いで容器を36℃及び10％CO2で４時間
インキユベートした。mSBM12.0mlを外側
チヤンバに加え、４mlをウエルに加えた。次
いで装置を同じインキユベーターに戻した。
(2) 分化 表皮形成２日後に培地を取り出し、
mSBM＋カルシウムで置き換えた。
(3) エアリフテイング（airlifting） 表皮形成５日後に以下の処理を実施した。
培地を内側及び外側チヤンバから取り出し
た。内側容器２０を取り出し、２容積の
cSBM＋カルシウムをしみ込ませた綿パツド
を外側チヤンバ１０の底部に置き、cSBM＋
カルシウム9.0mlを加えた。次いで内側容器
２０を置き換え、装置を35.5℃及び10％CO2
でインキユベートした。
(4) 維持 ４日ごとに培地を取り出し、新しい主
SBM＋カルシウムで置き換えた。
実施例 ： アガロースが組み込まれた試験系 ２％アガロース水溶液をオートクレーブ処理に
より滅菌し、40℃に冷却し、等容積の２倍濃度の
主SBMと混合した。吸収綿パツドを取り出し、
混合物13mlを外側領域１４内に注入し、36℃（10
％CO2）で硬化させ、出荷前の保管のためにイン
キユベーターに戻した。
本明細書に記載の実施例及び実施態様は例示を
目的としたものであり、当業者には想起されるで
あろう本発明の種々の変形及び変更は、本発明の
要旨及び範囲並びに特許請求の範囲に包含され得
ることを理解されたい。
【図面の簡単な説明】
第１図は本発明の１つの装置のアイソメトリツ
クな一部切欠斜視図、第２図は第１図の装置の分
解図、第３図は第１図の装置の３−３を通る断面
図、第４図は本発明の他の装置の一部切欠斜視
図、第５図は第４図の装置の分解平面図、第６図
は第４図の装置の６−６を通る分解断面図であ
る。 ２……カバー手段、１０……外側容器、２０…
…内側容器、２１……開口、２４……透過性部
材、２５……コラーゲンゲル、２６，２８……組
織等価物、３２……吸収部材。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １ (a) 収縮集結因子によつて収縮集結された水
    和コラーゲン格子、及び (b) 透過性部材と該水和コラーゲン格子の間に置
    かれているコラーゲンゲル を含有している組織等価物。 ２ (a) コラーゲンと少なくとも１種の収縮集結
    因子とを含む混合物を形成し、 (b) ステツプ(a)で得られた混合物を透過性部材に
    接触しているコラーゲンゲルに付着させ、前記
    混合物及びゲルを組織等価物が形成し得る条件
    下に維持する ことからなる組織等価物を製造する方法。 ３ 前記収縮集結因子が腺維芽細胞からなる請求
    項２に記載の方法。 ４ 前記ステツプ(a)の混合物が濃度約1.25〜５×
    104細胞／mlの腺維芽細胞と約0.5〜2.0mg／mlのコ
    ラーゲンとを含有する請求項２に記載の方法。 ５ 前記コラーゲンゲルを、コラーゲンを濃度約
    0.5〜2.0mg／mlで含有するコラーゲン溶液を流延
    することにより製造する請求項２に記載の方法。 ６ 前記ステツプ(a)の混合物及びステツプ(b)の溶
    液を容積比約３：１〜１：３で使用する請求項５
    に記載の方法。 ７ 前記透過性部材に隣接させて吸収部材を置く
    請求項２に記載の方法。 ８ 前記吸収部材が繊維性パツドまたはゲルから
    なる請求項７に記載の方法。 ９ 前記繊維性パツドが綿である請求項８に記載
    の方法。 １０ 前記透過性部材に隣接させてアガロースか
    らなるゲルを置く請求項２に記載の方法。 １１ 少なくとも１種の組織等価物を使用するこ
    とにより組織と少なくとも１種の作用因子との相
    互作用を測定する装置であつて、その中に、該組
    織等価物が上に置かれるコラーゲンゲルを備えた
    透過性手段によつて規定される第１及び第２の領
    域を包含しており、その場合、前記組織等価物が
    第１の領域を規定し且つ前記透過性部材が前記第
    ２の領域を規定している装置。 １２ 少なくとも１種の組織等価物を使用するこ
    とにより組織と少なくとも１種の作用因子との相
    互作用を測定する装置であつて、組織等価物と該
    組織等価物用の少なくとも１つの容器を備えてお
    り、前記容器が、 (i) 組織等価物がその上に置かれるコラーゲンゲ
    ルを備えた透過性手段を含む内側ウエルであつ
    て、それによつて透過性手段が該内側ウエルの
    底部を規定している内側ウエル、及び (ii) 前記内側ウエルがその中に置かれる外側ウエ
    ル を備えている装置。 １３ 更に、前記容器を閉鎖する手段を備えてお
    り、該閉鎖手段が該容器を着脱可能に封止し得る
    請求項１２に記載の装置。 １４ 前記内側ウエルに少なくとも１つの開口が
    備えられており、該開口が外側ウエルと連通して
    いる請求項１２に記載の装置。 １５ 前記内側ウエルがＫ樹脂からなる請求項１
    ２に記載の装置。 １６ 前記透過性手段の下に吸収性部材が置かれ
    ている請求項１２に記載の装置。 １７ 前記吸収性部材が繊維性パツドまたはゲル
    からなる請求項１６に記載の装置。 １８ 前記繊維性パツドが綿である請求項１６に
    記載の装置。 １９ 前記外側容器内にアガロースゲルが置かれ
    ている請求項１２に記載の装置。
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Families Citing this family (95)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5888720A (en) * 1992-10-27 1999-03-30 Yissum Research And Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem In vitro micro-organs
CA2119064A1 (en) * 1993-03-17 1994-09-18 Richard A. Berg Dermal-epidermal in vitro test system
GB9306449D0 (en) * 1993-03-29 1993-05-19 Nat Heart Research Fund Tissue equivalents
DE69534640T2 (de) * 1994-04-29 2006-08-10 Scimed Life Systems, Inc., Maple Grove Stent mit Kollagen
US5665114A (en) * 1994-08-12 1997-09-09 Meadox Medicals, Inc. Tubular expanded polytetrafluoroethylene implantable prostheses
US5891558A (en) * 1994-11-22 1999-04-06 Tissue Engineering, Inc. Biopolymer foams for use in tissue repair and reconstruction
US5965125A (en) 1995-10-25 1999-10-12 Transkaryotic Therapies, Inc. Hybrid matrix implants and explants
US6419920B1 (en) 1995-10-25 2002-07-16 Trans Karyotic Therapies, Inc. Hybrid matrix implants and explants
US5955353A (en) * 1997-05-22 1999-09-21 Excorp Medical, Inc. Hollow fiber bioreactor with an extrafilament flow plug
US20020086423A1 (en) * 1997-09-09 2002-07-04 Toshiaki Takezawa Hydrogel thin film containing extracellular matrix components
WO1999046285A2 (en) 1998-03-11 1999-09-16 University Of Southern California Method of promoting production of living tissue equivalents
US6129757A (en) 1998-05-18 2000-10-10 Scimed Life Systems Implantable members for receiving therapeutically useful compositions
ES2249928T3 (es) * 1998-11-19 2006-04-01 Organogenesis Inc. Constructos de tejido manipulado mediante bioingenieria y metodos para producirlos y utilizarlos.
US7001746B1 (en) 1999-01-29 2006-02-21 Artecel Sciences, Inc. Methods and compositions for the differentiation of human preadipocytes into adipocytes
WO2000047129A2 (en) * 1999-02-11 2000-08-17 The General Hospital Corporation Microfabricated membranes and matrices
US6197061B1 (en) * 1999-03-01 2001-03-06 Koichi Masuda In vitro production of transplantable cartilage tissue cohesive cartilage produced thereby, and method for the surgical repair of cartilage damage
CA2375505A1 (en) 1999-06-21 2000-12-28 The General Hospital Corporation Cell culture systems and methods for organ assist devices
CA2383398C (en) * 1999-08-23 2013-06-11 Organogenesis, Inc. Skin care compositions and treatments
EP1918366A1 (en) 2000-02-26 2008-05-07 Artecel, Inc. Pleuripotent stem cells generated from adipose tissue-derived stromal cells and uses thereof
DE60132429T2 (de) * 2000-02-26 2009-01-08 Artecel, Inc. Pluripotente aus von fettgewebe stammenden stromazellen erzeugte stammzellen und deren verwendung
US7582292B2 (en) 2000-02-26 2009-09-01 Artecel, Inc. Adipose tissue derived stromal cells for the treatment of neurological disorders
JP4751005B2 (ja) 2000-05-31 2011-08-17 フラウンホファー ゲセルシャフト ツール フェールデルンク ダー アンゲヴァンテン フォルシュンク エー．ファオ． 三次元皮膚モデル
EP1290144A2 (de) * 2000-05-31 2003-03-12 Fraunhofer-Gesellschaft Zur Förderung Der Angewandten Forschung E.V. In vitro-gewebetestsystem
US7144729B2 (en) 2000-09-01 2006-12-05 Dfb Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for tissue regeneration
MXPA03002415A (es) * 2000-09-18 2004-07-08 Organogenesis Inc Metodo para tratar a un paciente que utiliza una construccion de tejido conectivo cultivado.
EP1832300A3 (en) * 2000-09-18 2008-02-27 Organogenesis Inc. Method for treating a patient using a cultured connective tissue construct
US7041868B2 (en) 2000-12-29 2006-05-09 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Bioabsorbable wound dressing
NZ549527A (en) * 2001-03-02 2008-04-30 Stratatech Corp Improved skin substitutes and uses thereof
US6974697B2 (en) * 2001-03-02 2005-12-13 Stratech Corporation Skin substitutes with improved barrier function
US20030211793A1 (en) * 2001-03-05 2003-11-13 Eugene Bell Injectable bio-compatible material and methods of use
US7282362B2 (en) 2001-06-14 2007-10-16 Millipore Corporation Tray with protrusions
JP2005506860A (ja) * 2001-09-15 2005-03-10 ラツシユ−プレスビテリアン−セント・リユークズ・メデイカル・センター 層状化軟骨組織およびその工学的処理方法
US20030165473A1 (en) * 2001-11-09 2003-09-04 Rush-Presbyterian-St. Luke's Medical Center Engineered intervertebral disc tissue
AU2003219830A1 (en) * 2002-02-22 2003-09-09 Ebi, L.P. Methods and compositions for treating bone or cartilage defects
US7741116B2 (en) 2002-03-06 2010-06-22 University Of Cincinnati Surgical device for skin therapy or testing
EP1549738B1 (en) * 2002-04-30 2010-04-21 Stratatech Corporation Keratinocytes expressing exogenous angiogenic growth factors
US7229820B2 (en) * 2002-06-13 2007-06-12 Wilson Wolf Manufacturing Corporation Apparatus and method for culturing and preserving tissue constructs
AU2003254298A1 (en) * 2002-08-02 2004-02-23 Stratatech Corporation Species specific dna detection
CA2534349C (en) 2003-08-01 2012-04-10 Stratatech Corporation Human skin equivalents expressing exogenous polypeptides
FR2881434B1 (fr) * 2005-02-02 2007-05-11 Coletica Sa Dispositif de support de culture de cellules
AU2006218610B2 (en) 2005-03-01 2011-01-20 Stratatech Corporation Human skin equivalents expressing exogenous polypeptides
AU2006227752B2 (en) 2005-03-17 2010-10-21 Stratatech Corporation Skin substitutes with improved purity
FR2889808B1 (fr) 2005-08-17 2011-07-22 Oreal Utilisation de l'acide 8-hexadecene-1,16-dicarboxylique comme agent de soin destine a favoriser la cohesion de la couche cornee
EP1998787A4 (en) * 2006-03-03 2010-04-21 Organogenesis Inc RECOVERY AND REPAIR OF ORAL TISSUE
FR2903702B1 (fr) * 2006-07-13 2012-10-19 Oreal Equivalent d'epiderme capable de se pigmenter obtenu a partir de cellules de la matrice, procede de preparation et utilisation
US8932619B2 (en) * 2007-06-27 2015-01-13 Sofradim Production Dural repair material
US20090068250A1 (en) 2007-09-07 2009-03-12 Philippe Gravagna Bioresorbable and biocompatible compounds for surgical use
WO2009043052A1 (en) * 2007-09-27 2009-04-02 Columbia University Methods and systems for forming biocompatible materials
US20090145087A1 (en) 2007-11-14 2009-06-11 Stratatech Corporation Cold storage of organotypically cultured skin equivalents for clinical applications
US9308068B2 (en) 2007-12-03 2016-04-12 Sofradim Production Implant for parastomal hernia
CA2721507C (en) 2008-04-18 2017-10-03 Collplant Ltd. Methods of generating and using procollagen
US9242026B2 (en) 2008-06-27 2016-01-26 Sofradim Production Biosynthetic implant for soft tissue repair
US20110294215A1 (en) * 2008-10-22 2011-12-01 Regenemed, Inc. Culture systems
PT2352472T (pt) 2008-11-04 2017-04-11 Stratatech Corp Equivalentes de pele secos e irradiados prontos a utilizar
US9511093B2 (en) * 2009-03-23 2016-12-06 The Texas A & M University System Compositions of mesenchymal stem cells to regenerate bone
WO2010135655A2 (en) 2009-05-21 2010-11-25 Stratatech Corporation Human skin substitutes expressing il-12
US9321988B2 (en) * 2009-06-18 2016-04-26 Illinois Tool Works Inc. Gas and liquid tissue culture interface
FR2949688B1 (fr) 2009-09-04 2012-08-24 Sofradim Production Tissu avec picots revetu d'une couche microporeuse bioresorbable
SG184385A1 (en) 2010-04-05 2012-11-29 Emd Millipore Corp Polymeric membranes with human skin like permeability properties and uses thereof
FR2967163A1 (fr) 2010-11-05 2012-05-11 Centre Nat Rech Scient Procede in vitro ou ex vivo pour la maintenance en survie et la generation ou reconstruction d'un epiderme
FR2972626B1 (fr) 2011-03-16 2014-04-11 Sofradim Production Prothese comprenant un tricot tridimensionnel et ajoure
FR2976001B1 (fr) 2011-05-30 2014-10-31 Oreal Modele de cuir chevelu reconstruit et procede de screening de molecules actives
FR2977790B1 (fr) 2011-07-13 2013-07-19 Sofradim Production Prothese pour hernie ombilicale
FR2977789B1 (fr) 2011-07-13 2013-07-19 Sofradim Production Prothese pour hernie ombilicale
JP2014528264A (ja) 2011-09-30 2014-10-27 ソフラディム・プロダクション 軽重量メッシュの可逆性硬さ
CA2847615A1 (en) 2011-09-30 2013-04-04 Sofradim Production Multilayer implants for delivery of therapeutic agents
FR2985271B1 (fr) 2011-12-29 2014-01-24 Sofradim Production Tricot a picots
FR2985170B1 (fr) 2011-12-29 2014-01-24 Sofradim Production Prothese pour hernie inguinale
FR2994185B1 (fr) 2012-08-02 2015-07-31 Sofradim Production Procede de preparation d’une couche poreuse a base de chitosane
PL226837B1 (pl) 2012-08-24 2017-09-29 Celther Polska Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością Aktywna warstwa polimerowa utworzona zpochodnych chityny zwłaszcza doopatrunku oraz jejzastosowanie
FR2995788B1 (fr) 2012-09-25 2014-09-26 Sofradim Production Patch hemostatique et procede de preparation
FR2995779B1 (fr) 2012-09-25 2015-09-25 Sofradim Production Prothese comprenant un treillis et un moyen de consolidation
FR2995778B1 (fr) 2012-09-25 2015-06-26 Sofradim Production Prothese de renfort de la paroi abdominale et procede de fabrication
EP2900174B1 (en) 2012-09-28 2017-04-12 Sofradim Production Packaging for a hernia repair device
WO2014160000A1 (en) 2013-03-13 2014-10-02 Stratatech Corporation Cryopreservation of viable human skin substitutes
CA2910328C (en) 2013-05-03 2019-10-22 The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. Skin substitutes and methods for hair follicle neogenesis
FR3006581B1 (fr) 2013-06-07 2016-07-22 Sofradim Production Prothese a base d’un textile pour voie laparoscopique
FR3006578B1 (fr) 2013-06-07 2015-05-29 Sofradim Production Prothese a base d’un textile pour voie laparoscopique
WO2015166455A1 (en) 2014-04-30 2015-11-05 Fondazione Istituto Italiano Di Tecnologia Method for producing a totally endogenous bioengineered tissue and tissue obtained thereby
EP3000489B1 (en) 2014-09-24 2017-04-05 Sofradim Production Method for preparing an anti-adhesion barrier film
EP3000433B1 (en) 2014-09-29 2022-09-21 Sofradim Production Device for introducing a prosthesis for hernia treatment into an incision and flexible textile based prosthesis
EP3000432B1 (en) 2014-09-29 2022-05-04 Sofradim Production Textile-based prosthesis for treatment of inguinal hernia
EP3029189B1 (en) 2014-12-05 2021-08-11 Sofradim Production Prosthetic porous knit, method of making same and hernia prosthesis
EP3059255B1 (en) 2015-02-17 2020-05-13 Sofradim Production Method for preparing a chitosan-based matrix comprising a fiber reinforcement member
EP3085337B1 (en) 2015-04-24 2022-09-14 Sofradim Production Prosthesis for supporting a breast structure
EP3106185B1 (en) 2015-06-19 2018-04-25 Sofradim Production Synthetic prosthesis comprising a knit and a non porous film and method for forming same
EP3195830B1 (en) 2016-01-25 2020-11-18 Sofradim Production Prosthesis for hernia repair
FR3054449B1 (fr) 2016-07-29 2018-08-31 L'oreal Equivalent de peau a compartiments dermiques juxtaposes distincts
EP3312325B1 (en) 2016-10-21 2021-09-22 Sofradim Production Method for forming a mesh having a barbed suture attached thereto and the mesh thus obtained
EP3398554A1 (en) 2017-05-02 2018-11-07 Sofradim Production Prosthesis for inguinal hernia repair
WO2018220137A1 (en) * 2017-05-31 2018-12-06 ETH Zürich Assembly for the production of tissue implants
FR3071512B1 (fr) 2017-09-28 2022-02-25 Oreal Signatures moleculaires de trois sous-populations de fibroblastes dermiques et equivalent de derme comprenant une de ces sous-populations
EP3653171A1 (en) 2018-11-16 2020-05-20 Sofradim Production Implants suitable for soft tissue repair
FR3111904B1 (fr) 2020-06-30 2022-10-21 Oreal Bioencre pour bioimpression d’un modèle de jonction dermo-épidermique invaginée
LU502391B1 (en) 2022-06-28 2024-01-09 Univerza V Mariboru A complex in vitro model of human skin, a process for preparation and use thereof

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6225974A (ja) * 1985-07-25 1987-02-03 Asahi Chem Ind Co Ltd コラ−ゲンよりなるゲル状組成物
JPS63296699A (ja) * 1987-03-31 1988-12-02 オーガノジェネシス　インコーポレーテッド 組織等価物を用いるテスト方法、装置、および器具

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2677646A (en) * 1952-03-22 1954-05-04 Lovell Chemical Company Unit for bacterial analysis
US2761813A (en) * 1953-01-21 1956-09-04 Goetz Alexander Means and method of producing and controlling cultures of microorganisms
GB1594389A (en) * 1977-06-03 1981-07-30 Max Planck Gesellschaft Dressing material for wounds
DE2967509D1 (en) * 1978-12-26 1985-10-10 Massachusetts Inst Technology Skin-equivalent
US4290911A (en) * 1979-02-07 1981-09-22 Fmc Corporation Agarose composition, aqueous gel and method of making same
SE7908454L (sv) * 1979-10-11 1981-04-12 Pharmacia Fine Chemicals Ab Medium for isoelektrisk fokusering
US4539716A (en) * 1981-03-19 1985-09-10 Massachusetts Institute Of Technology Fabrication of living blood vessels and glandular tissues
US4546500A (en) * 1981-05-08 1985-10-15 Massachusetts Institute Of Technology Fabrication of living blood vessels and glandular tissues
US4505266A (en) * 1981-10-26 1985-03-19 Massachusetts Institute Of Technology Method of using a fibrous lattice
US4485096A (en) * 1982-02-26 1984-11-27 Massachusetts Institute Of Technology Tissue-equivalent and method for preparation thereof
US4485097A (en) * 1982-05-26 1984-11-27 Massachusetts Institute Of Technology Bone-equivalent and method for preparation thereof
US4598045A (en) * 1982-08-25 1986-07-01 Hana Biologics, Inc. Triphasic mycoplasmatales detection method
US4734372A (en) * 1983-02-04 1988-03-29 Brown University Research Foundation Cell culturing methods and apparatus
US4578354A (en) * 1983-05-09 1986-03-25 Pfizer Inc. Immobilization of catalytically active microorganisms in agar gel fibers
EP0164583B1 (en) * 1984-05-11 1991-09-25 TERUMO KABUSHIKI KAISHA trading as TERUMO CORPORATION Method for manufacture a container made of synthetic resin
US4604346A (en) * 1984-10-09 1986-08-05 Massachusetts Institute Of Technology Skin-equivalent prepared by the use of punch biopsy
US5026649A (en) * 1986-03-20 1991-06-25 Costar Corporation Apparatus for growing tissue cultures in vitro
US5032508A (en) * 1988-09-08 1991-07-16 Marrow-Tech, Inc. Three-dimensional cell and tissue culture system
US4963489A (en) * 1987-04-14 1990-10-16 Marrow-Tech, Inc. Three-dimensional cell and tissue culture system
US5037656A (en) * 1986-12-04 1991-08-06 Millipore Corporation Porous membrane having hydrophilic and cell growth promotions surface and process
FR2612938B1 (fr) * 1987-03-26 1989-06-23 Cird Procede d'obtention d'un equivalent de peau et equivalent de peau correspondant
FR2612939B1 (fr) * 1987-03-26 1989-06-23 Cird Equivalent de peau
US4837379A (en) * 1988-06-02 1989-06-06 Organogenesis Inc. Fibrin-collagen tissue equivalents and methods for preparation thereof
US4996154A (en) * 1989-05-04 1991-02-26 Millipore Corporation Method for growing cellular tissue
US4912057A (en) * 1989-06-13 1990-03-27 Cancer Diagnostics, Inc. Cell chamber for chemotaxis assay

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6225974A (ja) * 1985-07-25 1987-02-03 Asahi Chem Ind Co Ltd コラ−ゲンよりなるゲル状組成物
JPS63296699A (ja) * 1987-03-31 1988-12-02 オーガノジェネシス　インコーポレーテッド 組織等価物を用いるテスト方法、装置、および器具

Also Published As

Publication number Publication date
DE69017324D1 (de) 1995-04-06
IE903340A1 (en) 1991-04-10
IL95429A (en) 1997-09-30
KR910005893A (ko) 1991-04-27
KR940001379B1 (ko) 1994-02-21
CA2023968A1 (en) 1991-03-16
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IL95429A0 (en) 1991-06-30
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CA2298856C (en) 2004-11-16
AU6215690A (en) 1991-08-01
EP0418035A1 (en) 1991-03-20
US5536656A (en) 1996-07-16
CA2023968C (en) 2000-05-02
ATE119194T1 (de) 1995-03-15
ES2071778T3 (es) 1995-07-01

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