JPH0361485A - 固定化リパーゼ酵素剤 - Google Patents
固定化リパーゼ酵素剤Info
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- JPH0361485A JPH0361485A JP1198473A JP19847389A JPH0361485A JP H0361485 A JPH0361485 A JP H0361485A JP 1198473 A JP1198473 A JP 1198473A JP 19847389 A JP19847389 A JP 19847389A JP H0361485 A JPH0361485 A JP H0361485A
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
-
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- C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、油脂の改質に使用する固定化リパーゼ酵素剤
及びその調製法に関する。
及びその調製法に関する。
固定化リパーゼ酵素剤を用いて油脂を改質する方法は公
知である。この固定化リパーゼ酵素剤は、担体にリパー
ゼを吸着保持させたものである。担体としてはセライト
、豚骨、ケイソウ土、カオリナイト、炭酸カルシウムな
どの無機質担体が一般的であるが、陰イオン交換樹脂の
ような合成吸着剤を使用したものも知られている（たと
えば特開昭６１−２０２６８８号、特開昭６０−９８９
８４号参照）。しかしながらこれら従来公知の固定化リ
パーゼ酵素剤では、酵素活性を長時間維持させることが
できないという問題があった。
知である。この固定化リパーゼ酵素剤は、担体にリパー
ゼを吸着保持させたものである。担体としてはセライト
、豚骨、ケイソウ土、カオリナイト、炭酸カルシウムな
どの無機質担体が一般的であるが、陰イオン交換樹脂の
ような合成吸着剤を使用したものも知られている（たと
えば特開昭６１−２０２６８８号、特開昭６０−９８９
８４号参照）。しかしながらこれら従来公知の固定化リ
パーゼ酵素剤では、酵素活性を長時間維持させることが
できないという問題があった。
したがって本発明の目的は、酵素活性を長時間維持させ
ることができる固定化リパーゼ酵素剤及びその調製法を
提供することである。
ることができる固定化リパーゼ酵素剤及びその調製法を
提供することである。
上記目的は、担体として水分保持率が３重量％以上の担
体を使用することにより達成される。すなわち本発明は
、リパーゼを水分保持率が３重量％以上の担体に吸着保
持させたことを特徴とする固定化リパーゼ酵素剤を提供
するものである。本発明はさらに、リパーゼの溶液と水
分保持率が３重量％以上の担体を混合し、リパーゼを担
体に吸着させた後、乾燥することを特徴とする固定化リ
パーゼ酵素剤の調製法を提供するものである。
体を使用することにより達成される。すなわち本発明は
、リパーゼを水分保持率が３重量％以上の担体に吸着保
持させたことを特徴とする固定化リパーゼ酵素剤を提供
するものである。本発明はさらに、リパーゼの溶液と水
分保持率が３重量％以上の担体を混合し、リパーゼを担
体に吸着させた後、乾燥することを特徴とする固定化リ
パーゼ酵素剤の調製法を提供するものである。
本発明において「水分保持率」とは、担体を０、０１〜
１． ＯＴｏｒｒにおいて、７０℃で、６０時間乾燥し
た後の担体の含水率をいう。
１． ＯＴｏｒｒにおいて、７０℃で、６０時間乾燥し
た後の担体の含水率をいう。
酵素剤を構成するリパーゼは、ヒマの種子、ナタネナの
種子などの植物種子、カビ、酵母、細菌などに由来する
ものが挙げられるが、加水分解活性の高い市販の凍結乾
燥品を好適に使用できる。
種子などの植物種子、カビ、酵母、細菌などに由来する
ものが挙げられるが、加水分解活性の高い市販の凍結乾
燥品を好適に使用できる。
担体としては、水分保持率が３重量％以上のものであれ
ばよく、具体的には弱酸性もしくは強酸性陽イオン交換
樹脂が使用されるが、特に好ましいのは弱酸性陽イオン
交換樹脂である。その具体例としては、三菱化ｔ？、■
製陽イオン交換樹脂’ｖＶＫ−１３及びＷＫ−１１（い
ずれもカルボン酸型）が挙げられる。
ばよく、具体的には弱酸性もしくは強酸性陽イオン交換
樹脂が使用されるが、特に好ましいのは弱酸性陽イオン
交換樹脂である。その具体例としては、三菱化ｔ？、■
製陽イオン交換樹脂’ｖＶＫ−１３及びＷＫ−１１（い
ずれもカルボン酸型）が挙げられる。
本発明において、２種以上の担体を組み合せて使用して
もよい。このような場合、担体全体としての水分保持率
が３重量％以上であればよく、使用した複数の担体の水
分保持率がすべて３重量％以上である必要はない。
もよい。このような場合、担体全体としての水分保持率
が３重量％以上であればよく、使用した複数の担体の水
分保持率がすべて３重量％以上である必要はない。
又、酵素活性化剤や活性発現を目的として添加される物
質が水分保持性を有する場合にも担体の水分保持率に寄
与するものと考えられるので複合担体の水分保持率に組
み入れることは何らさしつかえない。
質が水分保持性を有する場合にも担体の水分保持率に寄
与するものと考えられるので複合担体の水分保持率に組
み入れることは何らさしつかえない。
酵素剤の調製は、常法に従って担体１００重量部を２〜
２００容量部の酵素溶液に浸漬し、０、０１〜ｌ ００
Ｔｏｒｒの減圧下で１−２４時間乾燥することにより行
うことができる。担体に吸着保持されるリパーゼの量が
、担体の１重量部当り０、００１〜０．１重量部の範囲
となるようにするのが適当である。また、リパーゼと共
に、レシチンのような酵素活性発現剤を使用してもよい
。レシチンの添加量は、担体の１重量部当り０．００１
〜０、１重量部の範囲が適当である。
２００容量部の酵素溶液に浸漬し、０、０１〜ｌ ００
Ｔｏｒｒの減圧下で１−２４時間乾燥することにより行
うことができる。担体に吸着保持されるリパーゼの量が
、担体の１重量部当り０、００１〜０．１重量部の範囲
となるようにするのが適当である。また、リパーゼと共
に、レシチンのような酵素活性発現剤を使用してもよい
。レシチンの添加量は、担体の１重量部当り０．００１
〜０、１重量部の範囲が適当である。
酵素剤の調製の際、水の他に、酵素と、必要により添加
したレシチンを分散するためにアルコール、アセトン、
グリセロール、油脂、ヘキサン、界面活性剤等、及びこ
れらの適当な組合せを添加して分散を促進してもよい。
したレシチンを分散するためにアルコール、アセトン、
グリセロール、油脂、ヘキサン、界面活性剤等、及びこ
れらの適当な組合せを添加して分散を促進してもよい。
本発明の酵素剤は、ゴマ油、ナタネ油、綿実油、大豆油
、椿油、オリーブ油、ヒマシ油、ヤシ油、パーマ油など
の植物油、イワシ油、ニシン油、サンマ油、サメ油、鯨
油などの海産動物油、牛脂、豚脂などの陸産動物油、あ
るいはこれらの混合油の改質に有効に使用できる。
、椿油、オリーブ油、ヒマシ油、ヤシ油、パーマ油など
の植物油、イワシ油、ニシン油、サンマ油、サメ油、鯨
油などの海産動物油、牛脂、豚脂などの陸産動物油、あ
るいはこれらの混合油の改質に有効に使用できる。
エステル交換反応は窒素ガスなどの不活性ガス雰囲気中
あるいは減圧下で行うこともできる。反応温度は２０〜
８０℃、反応時間は１〜３０時間の範囲が適当である。
あるいは減圧下で行うこともできる。反応温度は２０〜
８０℃、反応時間は１〜３０時間の範囲が適当である。
原料油に対する酵素剤の添加量は、通常原料油１００重
量部に対し酵素剤ｌ〜２０重量部とするのが適当である
。
量部に対し酵素剤ｌ〜２０重量部とするのが適当である
。
エステル交換反応およびエステル合成反応時に水が存在
するとトリグリセライドの収率低下や反応速度が小さく
なる等の問題点を生じるため原料油および反応基質は予
め減圧乾燥機などで脱水し、反応系中の水分含量を２０
０ｐｐｍ以下、とくに１１００ｐｐ以下とするのが好ま
しい。脱水処理のために、モレキュラーシーブ３Ａのよ
うな脱水剤を原料油に加えておくことが推奨される。
するとトリグリセライドの収率低下や反応速度が小さく
なる等の問題点を生じるため原料油および反応基質は予
め減圧乾燥機などで脱水し、反応系中の水分含量を２０
０ｐｐｍ以下、とくに１１００ｐｐ以下とするのが好ま
しい。脱水処理のために、モレキュラーシーブ３Ａのよ
うな脱水剤を原料油に加えておくことが推奨される。
酵素としてリゾバス・デレマー（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｄｅ
ｌｅｍａｒ ）由来のリパーゼの凍結乾燥標品（天野製
薬＠製、加水分解活性３０００ Ｕ／ｍｇ）を使用した
。これを水に溶かし、リパーゼ溶液（１３，３ｍｇ／ｍ
ｊりとし、さらに活性発現剤であるレシチンを４ｍｇ／
ｍｊ！となるように添加した。この溶液４Ｈにセライト
５３５（＠マンビル社製）、陽イオン交換（封脂”ｖＶ
Ｋ−１３（三菱化成■製）、陽イオン交換樹脂’ＶＶＫ
−１１（三菱化成＠製）、陰イオン交換樹脂５Ａ−１０
ＡＳ（三菱化成＠製）、陰イオン交換樹脂ＨＰＡ−２５
（三菱化成＠製）、キレート樹脂ＣＲ−２０（三菱化成
＠製）、吸着樹脂ＨＰ−２ＭＧ （三菱化成■製）、吸
着樹脂ＨＰ−１０（三菱化ａ＠３１り 、あるいは吸着
樹脂ＨＰ−２０（三菱化成＠）！！り４ｇを添加し、４
０℃、５ ＱＴｏｒｒ以下で１６〜１８時間乾燥し、酵
素剤を調製した。
ｌｅｍａｒ ）由来のリパーゼの凍結乾燥標品（天野製
薬＠製、加水分解活性３０００ Ｕ／ｍｇ）を使用した
。これを水に溶かし、リパーゼ溶液（１３，３ｍｇ／ｍ
ｊりとし、さらに活性発現剤であるレシチンを４ｍｇ／
ｍｊ！となるように添加した。この溶液４Ｈにセライト
５３５（＠マンビル社製）、陽イオン交換（封脂”ｖＶ
Ｋ−１３（三菱化成■製）、陽イオン交換樹脂’ＶＶＫ
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ＡＳ（三菱化成＠製）、陰イオン交換樹脂ＨＰＡ−２５
（三菱化成＠製）、キレート樹脂ＣＲ−２０（三菱化成
＠製）、吸着樹脂ＨＰ−２ＭＧ （三菱化成■製）、吸
着樹脂ＨＰ−１０（三菱化ａ＠３１り 、あるいは吸着
樹脂ＨＰ−２０（三菱化成＠）！！り４ｇを添加し、４
０℃、５ ＱＴｏｒｒ以下で１６〜１８時間乾燥し、酵
素剤を調製した。
なたね油：粗パームオレイン＝５０：５０（重量比）を
８０℃、２０Ｔｏｒｒで２０分間減圧脱水を行い水分含
量を２００ｐｐｍ以下とした。これにモレキュラーシー
ブ３Ａ（［ユニオン昭和社製）を油の重量に対して１０
％添加したものを改質を行う油脂とした。
８０℃、２０Ｔｏｒｒで２０分間減圧脱水を行い水分含
量を２００ｐｐｍ以下とした。これにモレキュラーシー
ブ３Ａ（［ユニオン昭和社製）を油の重量に対して１０
％添加したものを改質を行う油脂とした。
前記酵素剤をカラムに３ｇ充填し、油脂が吸水しないよ
うに注意しながら前記混合油脂を３．３ｇ／ｈｒの流量
で通液し、装置全体を６０℃に保温して反応を行ったと
ころ、活性半減期は表１のごとくであった。
うに注意しながら前記混合油脂を３．３ｇ／ｈｒの流量
で通液し、装置全体を６０℃に保温して反応を行ったと
ころ、活性半減期は表１のごとくであった。
表
また、半減期の最も長いＷＫ−１３を用いた場合につい
て、反応１６時間以降のトリグリセライド収率は９９％
以上であった。
て、反応１６時間以降のトリグリセライド収率は９９％
以上であった。
本発明の固定化リパーゼ酵素剤は、酵素活性が長時間維
持されるので、油脂の改質操作を長時間連続的に実施す
ることができる。
持されるので、油脂の改質操作を長時間連続的に実施す
ることができる。
Claims (4)
- （１）水分保持率が３重量％以上の担体にリパーゼを吸
着保持させたことを特徴とする固定化リパーゼ酵素剤。 - （２）担体が陽イオン交換樹脂である請求項（１）記載
の固定化リパーゼ酵素剤。 - （３）リパーゼの溶液と水分保持率が３重量％以上の担
体を混合し、リパーゼを担体に吸着させた後、乾燥する
ことを特徴とする固定化リパーゼ酵素剤の調製法。 - （４）担体が陽イオン交換樹脂である請求項（３）記載
の固定化リパーゼ酵素剤の調製法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1198473A JP2794201B2 (ja) | 1989-07-31 | 1989-07-31 | 固定化リパーゼ酵素剤 |
| US07/554,877 US5166064A (en) | 1989-07-31 | 1990-07-20 | Immobilized of lipase on a cation exchange resin |
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1198473A JP2794201B2 (ja) | 1989-07-31 | 1989-07-31 | 固定化リパーゼ酵素剤 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0361485A true JPH0361485A (ja) | 1991-03-18 |
| JP2794201B2 JP2794201B2 (ja) | 1998-09-03 |
Family
ID=16391694
Family Applications (1)
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| JP1198473A Expired - Fee Related JP2794201B2 (ja) | 1989-07-31 | 1989-07-31 | 固定化リパーゼ酵素剤 |
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| US (1) | US5166064A (ja) |
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1989
- 1989-07-31 JP JP1198473A patent/JP2794201B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1990
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