JP2794201B2 - 固定化リパーゼ酵素剤 - Google Patents
固定化リパーゼ酵素剤Info
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- JP2794201B2 JP2794201B2 JP1198473A JP19847389A JP2794201B2 JP 2794201 B2 JP2794201 B2 JP 2794201B2 JP 1198473 A JP1198473 A JP 1198473A JP 19847389 A JP19847389 A JP 19847389A JP 2794201 B2 JP2794201 B2 JP 2794201B2
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、油脂の改質に使用する固定化リパーゼ酵素
剤及びその調製法に関する。
剤及びその調製法に関する。
固定化リパーゼ酵素剤を用いて油脂を改質する方法は
公知である。この固定化リパーゼ酵素剤は、担体にリパ
ーゼを吸着保持さぜたものである。担体としてはセライ
ト、豚骨、ケイソウ土、カオリナイト、炭酸カルシウム
などの無機質担体が一般的であるが、陰イオン交換樹脂
のような合成吸着剤を使用したものも知られている（た
とえば特開昭61−202688号、特開昭60−98984号参
照）。しかしながらこれら従来公知の固定化リパーゼ酵
素剤では、酵素活性を長時間維持させることができない
という問題があった。
公知である。この固定化リパーゼ酵素剤は、担体にリパ
ーゼを吸着保持さぜたものである。担体としてはセライ
ト、豚骨、ケイソウ土、カオリナイト、炭酸カルシウム
などの無機質担体が一般的であるが、陰イオン交換樹脂
のような合成吸着剤を使用したものも知られている（た
とえば特開昭61−202688号、特開昭60−98984号参
照）。しかしながらこれら従来公知の固定化リパーゼ酵
素剤では、酵素活性を長時間維持させることができない
という問題があった。
したがって本発明の目的は、酵素活性を長時間維持さ
せることができる固定化リパーゼ酵素剤及びその調製法
を提供することである。
せることができる固定化リパーゼ酵素剤及びその調製法
を提供することである。
上記目的は、担体として水分保持率が３重量％以上の
担体を使用することにより達成される。すなわち本発明
は、リパーゼを水分保持率が３重量％以上の担体に吸着
保持させたことを特徴とする固定化リパーゼ酵素剤を提
供するものである。本発明はさらに、リパーゼの溶液と
水分保持率が３重量％以上の担体を混合し、リパーゼを
担体に吸着させた後、乾燥することを特徴とする固定化
リパーゼ酵素剤の調製法を提供するものである。
担体を使用することにより達成される。すなわち本発明
は、リパーゼを水分保持率が３重量％以上の担体に吸着
保持させたことを特徴とする固定化リパーゼ酵素剤を提
供するものである。本発明はさらに、リパーゼの溶液と
水分保持率が３重量％以上の担体を混合し、リパーゼを
担体に吸着させた後、乾燥することを特徴とする固定化
リパーゼ酵素剤の調製法を提供するものである。
本発明において「水分保持率」とは、担体を0.01〜1.
0Torrにおいて、70℃で、60時間乾燥した後の担体の含
水率をいう。
0Torrにおいて、70℃で、60時間乾燥した後の担体の含
水率をいう。
酵素剤を構成するリパーゼは、ヒマの種子、ナタネナ
の種子などの植物種子、カビ、酵母、細菌などに由来す
るものが挙げられるが、加水分解活性の高い市販の凍結
乾燥品を好適に使用できる。
の種子などの植物種子、カビ、酵母、細菌などに由来す
るものが挙げられるが、加水分解活性の高い市販の凍結
乾燥品を好適に使用できる。
担体としては、水分保持率が３重量％以上のものであ
ればよく、具体的には弱酸性もしくは強酸性陽イオン交
換樹脂が使用されるが、特に好ましいのは弱酸性陽イオ
ン交換樹脂である。その具体例としては、三菱化成
（株）製陽イオン交換樹脂WK−13及びWK−11（いずれも
カルボン酸型）が挙げられる。
ればよく、具体的には弱酸性もしくは強酸性陽イオン交
換樹脂が使用されるが、特に好ましいのは弱酸性陽イオ
ン交換樹脂である。その具体例としては、三菱化成
（株）製陽イオン交換樹脂WK−13及びWK−11（いずれも
カルボン酸型）が挙げられる。
本発明において、２種以上の担体を組み合せて使用し
てもよい。このような場合、担体全体としての水分保持
率が３重量％以上であればよく、使用した複数の担体の
水分保持率がすべて３重量％以上である必要はない。
てもよい。このような場合、担体全体としての水分保持
率が３重量％以上であればよく、使用した複数の担体の
水分保持率がすべて３重量％以上である必要はない。
又、酵素活性化剤や活性発現を目的として添加される
物質が水分保特性を有する場合にも担体の水分保持率に
寄与するものと考えられるので複合担体の水分保持率に
組み入れることは何らさしつかえない。
物質が水分保特性を有する場合にも担体の水分保持率に
寄与するものと考えられるので複合担体の水分保持率に
組み入れることは何らさしつかえない。
酵素剤の調製は、常法に従って担体100重量部を２〜2
00容量部の酵素溶液に浸漬し、0.01〜100Torrの減圧下
で１〜24時間乾燥することにより行うことができる。担
体に吸着保持されるリパーゼの量が、担体の１重量部当
り0.001〜0.1重量部の範囲となるようにするのが適当で
ある。また、リパーゼと共に、レシチンのような酵素活
性発現剤を使用してもよい。レシチンの添加量は、担体
の１重量部当り0.001〜0.1重量部の範囲が適当である。
00容量部の酵素溶液に浸漬し、0.01〜100Torrの減圧下
で１〜24時間乾燥することにより行うことができる。担
体に吸着保持されるリパーゼの量が、担体の１重量部当
り0.001〜0.1重量部の範囲となるようにするのが適当で
ある。また、リパーゼと共に、レシチンのような酵素活
性発現剤を使用してもよい。レシチンの添加量は、担体
の１重量部当り0.001〜0.1重量部の範囲が適当である。
酵素剤の調製の際、水の他に、酵素と、必要により添
加したレシチンを分散するためにアルコール、アセト
ン、グリセロール、油脂、ヘキサン、界面活性剤等、及
びこれらの適当な組合せを添加して分散を促進してもよ
い。
加したレシチンを分散するためにアルコール、アセト
ン、グリセロール、油脂、ヘキサン、界面活性剤等、及
びこれらの適当な組合せを添加して分散を促進してもよ
い。
本発明の酵素剤は、ゴマ油、ナタネ油、綿実油、大豆
油、椿油、オリーブ油、ヒマシ油、ヤシ油、パーマ油な
どの植物油、イワシ油、ニシン油、サンマ油、サメ油、
鯨油などの海産動物油、牛脂、豚脂などの陸産動物油、
あるいはこれらの混合油、あるいはこれらの油脂を水素
添加、分別等の加工処理をした油脂、およびその混合油
の改質に有効に使用できる。
油、椿油、オリーブ油、ヒマシ油、ヤシ油、パーマ油な
どの植物油、イワシ油、ニシン油、サンマ油、サメ油、
鯨油などの海産動物油、牛脂、豚脂などの陸産動物油、
あるいはこれらの混合油、あるいはこれらの油脂を水素
添加、分別等の加工処理をした油脂、およびその混合油
の改質に有効に使用できる。
エステル交換反応は窒素ガスなどの不活性ガス雰囲気
中あるいは減圧下で行うこともできる。反応温度は20〜
80℃、反応時間は１〜30時間の範囲が適当である。原料
油に対する酵素剤の添加量は、通常原料油100重量部に
対し酵素剤１〜20重量部とするのが適当である。
中あるいは減圧下で行うこともできる。反応温度は20〜
80℃、反応時間は１〜30時間の範囲が適当である。原料
油に対する酵素剤の添加量は、通常原料油100重量部に
対し酵素剤１〜20重量部とするのが適当である。
エステル交換反応およびエステル合成反応時に水が存
在するとトリグリセライドの収率低下や反応速度が小さ
くなる等の問題点を生じるため原料油および反応基質は
予め減圧乾燥機などで脱水し、反応系中の水分含量を20
0ppm以下、とくに100ppm以下とするのが好ましい。脱水
処理のために、モレキュラーシーブ3Aのような脱水剤を
原料油に加えておくことが推奨される。
在するとトリグリセライドの収率低下や反応速度が小さ
くなる等の問題点を生じるため原料油および反応基質は
予め減圧乾燥機などで脱水し、反応系中の水分含量を20
0ppm以下、とくに100ppm以下とするのが好ましい。脱水
処理のために、モレキュラーシーブ3Aのような脱水剤を
原料油に加えておくことが推奨される。
酵素としてリゾパス・デレマー（Rhizopus delemar）
由来のリパーゼの凍結乾燥標品（天野製薬（株）製、加
水分解活性3000U/mg）を使用した。これを水に溶かし、
リパーゼ溶液（13.3mg/ml）とし、さらに活性発現剤で
あるレシチンを4mg/mlとなるように添加した。この溶液
4mlにセライト535（（株）マンビル社製）、陽イオン交
換樹脂WK−13（三菱化成（株）製）、陽イオン交換樹脂
WK−11（三菱化成（株）製）、陰イオン交換樹脂SA−10
AS（三菱化成（株）製）、陰イオン交換樹脂HPA−25
（三菱化成（株）製）、キレート樹脂CR−20（三菱化成
（株）製）、吸着樹脂HP−2MG（三菱化成（株）製）、
吸着樹脂HP−10（三菱化成（株）製）、あるいは吸着樹
脂HP−20（三菱化成（株）製）4gを添加し、40℃、60To
rr以下で16〜18時間乾燥し、酵素剤を調製した。
由来のリパーゼの凍結乾燥標品（天野製薬（株）製、加
水分解活性3000U/mg）を使用した。これを水に溶かし、
リパーゼ溶液（13.3mg/ml）とし、さらに活性発現剤で
あるレシチンを4mg/mlとなるように添加した。この溶液
4mlにセライト535（（株）マンビル社製）、陽イオン交
換樹脂WK−13（三菱化成（株）製）、陽イオン交換樹脂
WK−11（三菱化成（株）製）、陰イオン交換樹脂SA−10
AS（三菱化成（株）製）、陰イオン交換樹脂HPA−25
（三菱化成（株）製）、キレート樹脂CR−20（三菱化成
（株）製）、吸着樹脂HP−2MG（三菱化成（株）製）、
吸着樹脂HP−10（三菱化成（株）製）、あるいは吸着樹
脂HP−20（三菱化成（株）製）4gを添加し、40℃、60To
rr以下で16〜18時間乾燥し、酵素剤を調製した。
なたね油：粗パームオレイン＝50:50（重量比）を80
℃、20Torrで20分間減圧脱水を行い水分含量を200ppm以
下とした。これにモレキュラーシーブ3A（（株）ユニオ
ン昭和社製）を油の重量に対して10％添加したものを改
質を行う油脂とした。
℃、20Torrで20分間減圧脱水を行い水分含量を200ppm以
下とした。これにモレキュラーシーブ3A（（株）ユニオ
ン昭和社製）を油の重量に対して10％添加したものを改
質を行う油脂とした。
前記酵素剤をカラムに3g充填し、油脂が吸水しないよ
うに注意しながら前記混合油脂を3.3g/hrの流量で通液
し、装置全体を60℃に保温して反応を行ったところ、活
性半減期は表１のごとくであった。
うに注意しながら前記混合油脂を3.3g/hrの流量で通液
し、装置全体を60℃に保温して反応を行ったところ、活
性半減期は表１のごとくであった。
また、半減期の最も長いWK−13を用いた場合につい
て、反応16時間以降のトリグリセライド従率は99％以上
であった。
て、反応16時間以降のトリグリセライド従率は99％以上
であった。
本発明の固定化リパーゼ酵素剤は、酵素活性が長時間
維持されるので、油脂の改質操作を長時間連続的に実施
することができる。
維持されるので、油脂の改質操作を長時間連続的に実施
することができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C12N 11/00 - 11/12
Claims (2)
- 【請求項１】水分保持率が３重量％以上の担体にリパー
ゼを吸着保持させたことを特徴とする固定化リパーゼ酵
素剤。 - 【請求項２】担体が陽イオン交換樹脂である請求項
（１）記載の固定化リパーゼ酵素剤。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1198473A JP2794201B2 (ja) | 1989-07-31 | 1989-07-31 | 固定化リパーゼ酵素剤 |
| US07/554,877 US5166064A (en) | 1989-07-31 | 1990-07-20 | Immobilized of lipase on a cation exchange resin |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1198473A JP2794201B2 (ja) | 1989-07-31 | 1989-07-31 | 固定化リパーゼ酵素剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0361485A JPH0361485A (ja) | 1991-03-18 |
| JP2794201B2 true JP2794201B2 (ja) | 1998-09-03 |
Family
ID=16391694
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1198473A Expired - Fee Related JP2794201B2 (ja) | 1989-07-31 | 1989-07-31 | 固定化リパーゼ酵素剤 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5166064A (ja) |
| JP (1) | JP2794201B2 (ja) |
Families Citing this family (21)
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|---|---|---|---|---|
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| US20030054509A1 (en) * | 2001-04-06 | 2003-03-20 | Archer-Daniels-Midland Company | Method for producing fats or oils |
| WO2002083741A2 (en) * | 2001-04-17 | 2002-10-24 | Genencor International, Inc. | Method to bind enzyme to carrier using cationic copolymers and product produced thereby |
| JP2003070471A (ja) * | 2001-09-03 | 2003-03-11 | Sumitomo Chem Co Ltd | 固定化酵素及びその用途 |
| EP1651058A4 (en) | 2003-07-16 | 2007-07-11 | Archer Daniels Midland Co | PROCESS FOR PRODUCING FATS OR OILS |
| MY142014A (en) | 2004-04-08 | 2010-08-16 | Nisshin Oillio Group Ltd | A lipase powder, methods for producing the same and use thereof |
| DE102004019472A1 (de) * | 2004-04-22 | 2005-11-17 | Bayer Healthcare Ag | Phenylacetamide |
| JP4394598B2 (ja) | 2004-08-24 | 2010-01-06 | 日清オイリオグループ株式会社 | リパーゼ粉末組成物及びそれを用いたエステル化物の製造方法 |
| JP4478540B2 (ja) | 2004-09-16 | 2010-06-09 | 日清オイリオグループ株式会社 | リパーゼ粉末、その製造方法及びその使用 |
| US8685680B2 (en) * | 2005-05-13 | 2014-04-01 | Thomas P. Binder | Method for producing fats or oils |
| ES2390233T3 (es) | 2005-06-09 | 2012-11-07 | The Nisshin Oillio Group, Ltd. | Composición de lipasa en polvo |
| CA2567576A1 (en) * | 2005-11-10 | 2007-05-10 | Archer-Daniels-Midland Company | Methods for producing proplylene glycol monoesters using a lipase |
| JP4917349B2 (ja) | 2006-05-11 | 2012-04-18 | 日清オイリオグループ株式会社 | リパーゼ活性の回復方法 |
| US20080057552A1 (en) * | 2006-08-31 | 2008-03-06 | Inmok Lee | Processes for Producing Fats or Oils and Compositions Comprising the Fats or Oils |
| UA97127C2 (uk) | 2006-12-06 | 2012-01-10 | Бандж Ойлз, Инк. | Спосіб безперервної ферментативної обробки композиції, що містить ліпід, та система для його здійснення |
| TWI438279B (zh) | 2007-03-16 | 2014-05-21 | Nisshin Oillio Group Ltd | 脂肪酶粉末製劑，其製造方法及使用 |
| EP2177608B1 (en) | 2007-07-31 | 2015-10-14 | Fuji Oil Company, Limited | Immobilized lipase and method for producing the same |
| JP5284663B2 (ja) * | 2008-03-19 | 2013-09-11 | 株式会社Ａｄｅｋａ | 油脂のエステル交換反応方法 |
| JP5494913B2 (ja) | 2009-03-27 | 2014-05-21 | 日清オイリオグループ株式会社 | リパーゼ粉末組成物の製造方法 |
| GB2490324B (en) | 2011-04-21 | 2014-06-11 | Desmet Ballestra Engineering S A Nv | Improved enzyme interesterification process |
| CN105037596B (zh) * | 2015-06-19 | 2017-03-01 | 云南农业大学 | 交联固定脂肪酶的超顺磁载体的制备方法 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0035883B1 (en) * | 1980-03-08 | 1984-06-06 | Fuji Oil Company, Limited | Method for enzymatic interesterification of lipid and enzyme used therein |
| JPS6038112B2 (ja) * | 1982-05-29 | 1985-08-30 | キユーピー株式会社 | 卵白リゾチ−ムの溶出方法 |
| DK402583D0 (da) * | 1983-09-05 | 1983-09-05 | Novo Industri As | Fremgangsmade til fremstilling af et immobiliseret lipasepraeparat og anvendelse deraf |
| DK153762C (da) * | 1985-02-27 | 1989-01-09 | Novo Industri As | Fremgangsmaade til fremstilling af et immobiliseret lipasepraeparat |
| JPS6322795A (ja) * | 1986-07-15 | 1988-01-30 | Kawasaki Heavy Ind Ltd | 船舶の解撤方法 |
| JPH01312995A (ja) * | 1988-06-14 | 1989-12-18 | Japanese Res & Dev Assoc Bio Reactor Syst Food Ind | 酵素による油脂の改質方法 |
-
1989
- 1989-07-31 JP JP1198473A patent/JP2794201B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1990
- 1990-07-20 US US07/554,877 patent/US5166064A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US5166064A (en) | 1992-11-24 |
| JPH0361485A (ja) | 1991-03-18 |
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Legal Events
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| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |