JPH0349684A - リパーゼ固定化酵素剤の調製方法 - Google Patents
リパーゼ固定化酵素剤の調製方法Info
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- JPH0349684A JPH0349684A JP1185636A JP18563689A JPH0349684A JP H0349684 A JPH0349684 A JP H0349684A JP 1185636 A JP1185636 A JP 1185636A JP 18563689 A JP18563689 A JP 18563689A JP H0349684 A JPH0349684 A JP H0349684A
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は油脂を改質する際に使用するリパーゼ固定化酵
素剤の調製方法に関する。
素剤の調製方法に関する。
（従来の技術とその問題点）
油脂分解酵素であるリパーゼとその活性発現剤であるレ
シチン、シューガーエステル、ボリオール等をセライト
、活性炭、イオン交換樹脂、セルロース、キトサン等の
担体に吸着保持させた酵素剤を使用し、油脂を改質する
方法が知られている。
シチン、シューガーエステル、ボリオール等をセライト
、活性炭、イオン交換樹脂、セルロース、キトサン等の
担体に吸着保持させた酵素剤を使用し、油脂を改質する
方法が知られている。
（特開昭６３−３３００９ 、特開昭６４１０２５８８
） Ｌかし、この方法により調製した酵素剤は実用に当
っては酵素活性の寿命が短かく、工業的にリアクターで
改質油を生産する際の酵素剤の充填頻度が高く、その操
作性に問題があった。
） Ｌかし、この方法により調製した酵素剤は実用に当
っては酵素活性の寿命が短かく、工業的にリアクターで
改質油を生産する際の酵素剤の充填頻度が高く、その操
作性に問題があった。
（発明が解決しようとする課題）
本発明の課題は、上記の問題点に鑑み、リパーゼ固定化
酵素剤の活性を向上させるとともに、活性低下を防止し
、かつ活性を持続する工業化に有利なリパーゼ固定化酵
素剤の調製方法を提供する事にある。
酵素剤の活性を向上させるとともに、活性低下を防止し
、かつ活性を持続する工業化に有利なリパーゼ固定化酵
素剤の調製方法を提供する事にある。
（問題を解決するための手段）
本発明者らは、問題点を解決するため鋭意研究した結果
、リパーゼと活性発現剤とを、時間をかけ充分接触させ
るとリパーゼの活性寿命が長くなる事を発見し本発明を
完威させた。すなわち、本発明はリパーゼの活性発現剤
であるレシチン、シーＩＩ！脂肪酸エステル、ソルビタ
ン脂肪酸エステル、ポリオール、デキストリン等の水懸
濁液にリパーゼを添加し、該活性発現剤とリパーゼを通
常の撹拌であれば０． ５時間から２４時間撹拌接触さ
せた後リパーゼ含有の水懸濁液を担体に吸着保持させる
事を特徴とするリパーゼ固定化酵素剤である。
、リパーゼと活性発現剤とを、時間をかけ充分接触させ
るとリパーゼの活性寿命が長くなる事を発見し本発明を
完威させた。すなわち、本発明はリパーゼの活性発現剤
であるレシチン、シーＩＩ！脂肪酸エステル、ソルビタ
ン脂肪酸エステル、ポリオール、デキストリン等の水懸
濁液にリパーゼを添加し、該活性発現剤とリパーゼを通
常の撹拌であれば０． ５時間から２４時間撹拌接触さ
せた後リパーゼ含有の水懸濁液を担体に吸着保持させる
事を特徴とするリパーゼ固定化酵素剤である。
本発明をさらに詳細に説明すると、リパーゼ固定化酵素
剤の活性発現剤を純水ｌＯＯ重量部に対し０． ２から
２５重量部を添加、０．２５〜０． ５時間の攪拌混合
を行い純水中に充分に溶解又は懸濁させた後、該懸濁液
にリゾソプス属由来の天野製薬■製造のリパーゼＤ及び
リパーゼＦＡＰ，シュードモナス属由来の天野製薬■製
造のリパーゼＰ１０、ペニシリューム属由来の天野製薬
■製造のリパーゼＧ等に代表されるリパーゼの０． ２
から６０重量部を添加した後、０゜Ｃから４０℃、通常
２０゜Ｃの液温下において０．５から２４時間攪拌する
事により、活性発現剤とリパーゼを充分に接触させた後
、該リパーゼ水懸濁液を担体１００重量部に対し、リパ
ーゼ量として１から１０重量部となるよう担体に吸着保
持させる事により、活性が高くかつ、活性半：＄ｉ期の
長いリパーゼ固定化酵素剤の調製を可能とした。
剤の活性発現剤を純水ｌＯＯ重量部に対し０． ２から
２５重量部を添加、０．２５〜０． ５時間の攪拌混合
を行い純水中に充分に溶解又は懸濁させた後、該懸濁液
にリゾソプス属由来の天野製薬■製造のリパーゼＤ及び
リパーゼＦＡＰ，シュードモナス属由来の天野製薬■製
造のリパーゼＰ１０、ペニシリューム属由来の天野製薬
■製造のリパーゼＧ等に代表されるリパーゼの０． ２
から６０重量部を添加した後、０゜Ｃから４０℃、通常
２０゜Ｃの液温下において０．５から２４時間攪拌する
事により、活性発現剤とリパーゼを充分に接触させた後
、該リパーゼ水懸濁液を担体１００重量部に対し、リパ
ーゼ量として１から１０重量部となるよう担体に吸着保
持させる事により、活性が高くかつ、活性半：＄ｉ期の
長いリパーゼ固定化酵素剤の調製を可能とした。
本発明で用いられる活性発現剤としては、大豆レシチン
、粉末大豆レシチン、卵黄レシチン、精製された、フォ
スファチジルコリンフォスファチジルエタノールアくン
、ホスファチヂルイノシトール等のリン脂質、シー３糖
脂肪酸エステル、デキストリン又はポリオール等特開昭
６３ − ３３００９に記載された活性発現剤を用いる
事ができる。
、粉末大豆レシチン、卵黄レシチン、精製された、フォ
スファチジルコリンフォスファチジルエタノールアくン
、ホスファチヂルイノシトール等のリン脂質、シー３糖
脂肪酸エステル、デキストリン又はポリオール等特開昭
６３ − ３３００９に記載された活性発現剤を用いる
事ができる。
水懸濁液中の活性発現剤の量は０．２重量部より少ない
と活性を充分高める事ができず、一方２５重量部より多
いと懸濁液がゲル化してリパーゼとの混合接触が不可能
となる。リパーゼ水懸濁液中のリパーゼと活性発現剤の
量比は１０：１から１：２．５の範囲になるよう調製す
る。リパーゼ量が０．０１重量部以下では固定化酵素剤
を調製した時、活性が充分でない。一方６０重量部を越
えるとリパーゼ懸濁液がゲル状を呈し、担体への吸着保
持が均一とならない。
と活性を充分高める事ができず、一方２５重量部より多
いと懸濁液がゲル化してリパーゼとの混合接触が不可能
となる。リパーゼ水懸濁液中のリパーゼと活性発現剤の
量比は１０：１から１：２．５の範囲になるよう調製す
る。リパーゼ量が０．０１重量部以下では固定化酵素剤
を調製した時、活性が充分でない。一方６０重量部を越
えるとリパーゼ懸濁液がゲル状を呈し、担体への吸着保
持が均一とならない。
リパーゼと活性発現剤との接触時間は通常の撹拌による
０．２５時間以下の撹拌では活性発現剤がリパーゼと充
分接触しないため、又、２４時間を超えると微生物汚染
等により変性するため、得られた固定化酵素剤は活性が
低く寿命も短くなる場合がある。
０．２５時間以下の撹拌では活性発現剤がリパーゼと充
分接触しないため、又、２４時間を超えると微生物汚染
等により変性するため、得られた固定化酵素剤は活性が
低く寿命も短くなる場合がある。
固定化担体としては、吸着型担体であるセライト、活性
炭、セルロース及びその８３ ４体、キトサン及びその
誘導体、イオン交換樹脂等を用いるが、特に吸水性の高
いセライト、イオン交換樹脂が好適である。
炭、セルロース及びその８３ ４体、キトサン及びその
誘導体、イオン交換樹脂等を用いるが、特に吸水性の高
いセライト、イオン交換樹脂が好適である。
通常の撹拌とは、マグネチックスクーラー、ラボスター
ラー等を用い、３００〜５ ０ ０ ＰＰＭでの攪拌状
態をさし、ジェット流攪拌等の高効率撹拌による場合は
、もっと短かい時間の撹拌でもよく、要は、リパーゼと
活性発現剤の接触を充分行なわせる事がポイントである
。
ラー等を用い、３００〜５ ０ ０ ＰＰＭでの攪拌状
態をさし、ジェット流攪拌等の高効率撹拌による場合は
、もっと短かい時間の撹拌でもよく、要は、リパーゼと
活性発現剤の接触を充分行なわせる事がポイントである
。
担体へのリパーゼの担持量は担体１００重量部に対し１
から１０重量部が好ましく、２０重量部を超えるとリパ
ーゼの効率が低下する。リパーゼの担体への担持方法は
リパーゼ水懸濁液中に担体を添加し、減圧乾燥する方法
、又は減圧乾燥せず、そのまま用いる方法がある。この
場合、リパーゼ固定化酵素剤中の水分量は０．３から７
′＆％に調製することが好ましい。
から１０重量部が好ましく、２０重量部を超えるとリパ
ーゼの効率が低下する。リパーゼの担体への担持方法は
リパーゼ水懸濁液中に担体を添加し、減圧乾燥する方法
、又は減圧乾燥せず、そのまま用いる方法がある。この
場合、リパーゼ固定化酵素剤中の水分量は０．３から７
′＆％に調製することが好ましい。
〔実施例−１〜４，比較例ｌ，２〕
純水４０ｇに粉末レシチン１６０■を添加２０゜Ｃでマ
グネットスターラ（５ｍｍφＸ４０＋ｎｍ回転子）で１
時間よく攪拌混合し、レシチンの水懸濁液を得た。この
水懸濁液４ｇにリゾップスデレマー由来の天野製薬■製
造のリパーゼＤ５３ＩＩｌｇを加え、液温２０″Ｃでそ
れぞれ１５分、１時間、４時間、７時間、２４時間及び
４０時間マグネットスターラー（５Ｉ［ｌＩ１φ×４０
Ｍ回転子）攪拌混合を行い、リパーゼとレシチンを良く
接触させたリパーゼ水懸濁液４ ｔｓｉ！に三菱化戒工
業■製造の弱酸性陽イオン交換樹脂、ＷＫ−１３ ４
ｇを添加、ＷＫ１３樹脂にリパーゼ水懸濁液を担持させ
た後、４０゜Ｃ， １０Ｔｏｒｒで１６時間の減圧乾
燥を行い、水分含！７％のリパーゼ固定化酵素剤２．
３ ２ ｇを得た。
グネットスターラ（５ｍｍφＸ４０＋ｎｍ回転子）で１
時間よく攪拌混合し、レシチンの水懸濁液を得た。この
水懸濁液４ｇにリゾップスデレマー由来の天野製薬■製
造のリパーゼＤ５３ＩＩｌｇを加え、液温２０″Ｃでそ
れぞれ１５分、１時間、４時間、７時間、２４時間及び
４０時間マグネットスターラー（５Ｉ［ｌＩ１φ×４０
Ｍ回転子）攪拌混合を行い、リパーゼとレシチンを良く
接触させたリパーゼ水懸濁液４ ｔｓｉ！に三菱化戒工
業■製造の弱酸性陽イオン交換樹脂、ＷＫ−１３ ４
ｇを添加、ＷＫ１３樹脂にリパーゼ水懸濁液を担持させ
た後、４０゜Ｃ， １０Ｔｏｒｒで１６時間の減圧乾
燥を行い、水分含！７％のリパーゼ固定化酵素剤２．
３ ２ ｇを得た。
エステル交換反応の基質は精製ナタネ油：精製パーム油
＝８０：２０（重量比）を８０゜Ｃ，１０Ｔｏｒｒで２
０分間減圧脱水したのち、油ｌ重鼠部に０． １重量部
のモレキュラーシーブス３Ａを添加したものを用いた。
＝８０：２０（重量比）を８０゜Ｃ，１０Ｔｏｒｒで２
０分間減圧脱水したのち、油ｌ重鼠部に０． １重量部
のモレキュラーシーブス３Ａを添加したものを用いた。
エステル交換反応は基質１０ｇに本発明の酵素剤０．
７ ５ ｇを添加し、６０’Ｃで振とう攪拌しながら２
時間行った。
７ ５ ｇを添加し、６０’Ｃで振とう攪拌しながら２
時間行った。
エステル交換比活性は次式より求めた。
Δ指標ＴＧ（ｇ）＝反応前後のトリグリセリドの変化率
が最大のトリグリセライドを指標ＴＧとした時の当該ト
リグリセライドの変化量それぞれの酵素剤のエステル交
換比活性は表１のようであった。
が最大のトリグリセライドを指標ＴＧとした時の当該ト
リグリセライドの変化量それぞれの酵素剤のエステル交
換比活性は表１のようであった。
（表
ｌ）
〔実施例５〜７〕
リパーゼとレシチン水懸濁液の攪拌混合時間を７時間と
してその時の混合温度をｌ３゜Ｃ，２０゜Ｃ，３１．５
℃とした以外は実施例１〜４と同様操作にて酵素剤を調
製した。酵素剤のエステル交換比活性は表−２のようで
あった。
してその時の混合温度をｌ３゜Ｃ，２０゜Ｃ，３１．５
℃とした以外は実施例１〜４と同様操作にて酵素剤を調
製した。酵素剤のエステル交換比活性は表−２のようで
あった。
（表
２）
〔実施例８〜９，比較例３〕
実施例１〜４で調製したリパーゼ固定化酵素剤を用いて
カラムによる連続エステル交換反応を行った。
カラムによる連続エステル交換反応を行った。
基質としては実施例１〜４と同様の方法で調製した精製
ナタネ油：粗パームオレイン＝ｓ Ｏ：５ ｏ（重量比
）水分含量４０ｐｐｍを用いた。
ナタネ油：粗パームオレイン＝ｓ Ｏ：５ ｏ（重量比
）水分含量４０ｐｐｍを用いた。
３ｇのリパーゼ固定化酵素剤をカラム（直径＝１０ｍｍ
）に充填し、流速３． ３ ｇ ／ｈｒで基質を流し、
６０゜Ｃで連続エステル交換反応を行ったところ、エス
テル交換比活性半減期は（表−３）の様であった． （表 ３） 〔実施例一ｌＯ〜１３，比較例４〕 純水５０ｎ＋ｊ！に粉末レシチン５００■を添加し、液
温２０゜Ｃで３０分間よく混合し水懸濁液とした．この
レシチン水懸濁液にリゾップス、ジャバニカス由来の天
野製薬■製造のリパーゼＦＡＰ−１５を、３． ７ ５
ｇを添加した後、液温２０″Ｃで１５分、１時間、４
時間、７時間及び１７時間マグネットスターラー（φ＝
５１ａＩＩＸＨ＝４０ｍａ＋回転子）で攪拌混合を行っ
たリパーゼ水懸濁液を各５ ｍｌをセライト−５３５９
．６ｇにそれぞれ吸着担持後、３０℃， ３Ｔｏｒｒ
， ４時間、減圧乾燥し、リハーセ固定化酵素剤（水
分含量−０． ３％）を調製した。
）に充填し、流速３． ３ ｇ ／ｈｒで基質を流し、
６０゜Ｃで連続エステル交換反応を行ったところ、エス
テル交換比活性半減期は（表−３）の様であった． （表 ３） 〔実施例一ｌＯ〜１３，比較例４〕 純水５０ｎ＋ｊ！に粉末レシチン５００■を添加し、液
温２０゜Ｃで３０分間よく混合し水懸濁液とした．この
レシチン水懸濁液にリゾップス、ジャバニカス由来の天
野製薬■製造のリパーゼＦＡＰ−１５を、３． ７ ５
ｇを添加した後、液温２０″Ｃで１５分、１時間、４
時間、７時間及び１７時間マグネットスターラー（φ＝
５１ａＩＩＸＨ＝４０ｍａ＋回転子）で攪拌混合を行っ
たリパーゼ水懸濁液を各５ ｍｌをセライト−５３５９
．６ｇにそれぞれ吸着担持後、３０℃， ３Ｔｏｒｒ
， ４時間、減圧乾燥し、リハーセ固定化酵素剤（水
分含量−０． ３％）を調製した。
エステル交換反応の基質は精製ナタネ油：精製パーム油
＝８０：２０（ｌｉ量比）を８０℃，３Ｔｏｒｒ，３０
分間減圧脱水したのち、油１００重量部に対し、２０重
量部のモレキュラーシーブス３Ａを添加したものを用い
た。
＝８０：２０（ｌｉ量比）を８０℃，３Ｔｏｒｒ，３０
分間減圧脱水したのち、油１００重量部に対し、２０重
量部のモレキュラーシーブス３Ａを添加したものを用い
た。
エステル交換反応は基質油Ｌｏｇに本発明の酵素剤０．
２ｇを添加し、５０゜Ｃで振とう攪拌しながら、１７時
間行った。
２ｇを添加し、５０゜Ｃで振とう攪拌しながら、１７時
間行った。
それぞれのリパーゼ固定化酵素剤のエステル交換比活性
は（表−４）のようであった。
は（表−４）のようであった。
実施例−１〜４と同じように、レシチン水懸濁液とリパ
ーゼの長時間、混合接触により比活性の上昇が認められ
た。
ーゼの長時間、混合接触により比活性の上昇が認められ
た。
（表 − ４）
〔実施例−１４〜１５，比較例−５〕
純水５０ｇに粉末レシチン１ｇを添加し、液温２０’Ｃ
で０．５時間マグネチックスクーラー（５ＩＩｌｍφＸ
４０ｍｍ回転子）により、よく攪拌混合した。
で０．５時間マグネチックスクーラー（５ＩＩｌｍφＸ
４０ｍｍ回転子）により、よく攪拌混合した。
この水懸濁液にリゾップスデレマー由来の天野製薬■製
造のリパーゼーＤ（加水分解活性． ５３．０００μ／
ｇ）を５ｇ添加した後、液温２０゜Ｃで０．２５時間、
０． ５時間及び５時間のマグネチックスターラ（５Ｉ
ｎＩｌφＸ４０ｍｍ回転子）による攪拌接触を行った、
各々の酵素液５ ｍＩ！．をセライト−５３５、各９．
４ｇに吸着担持させ、３０″Ｃ− ３ Ｔｏｒｒ下で４
時間の減圧乾燥を行い、リパーゼ固定化酵素剤（水分含
！−０．６％）を調製した。
造のリパーゼーＤ（加水分解活性． ５３．０００μ／
ｇ）を５ｇ添加した後、液温２０゜Ｃで０．２５時間、
０． ５時間及び５時間のマグネチックスターラ（５Ｉ
ｎＩｌφＸ４０ｍｍ回転子）による攪拌接触を行った、
各々の酵素液５ ｍＩ！．をセライト−５３５、各９．
４ｇに吸着担持させ、３０″Ｃ− ３ Ｔｏｒｒ下で４
時間の減圧乾燥を行い、リパーゼ固定化酵素剤（水分含
！−０．６％）を調製した。
調製したリパーゼ固定化酵素剤を用いてカラムによる連
続エステル交換反応を行った。
続エステル交換反応を行った。
基質としては実施例８〜９と同様の方法で調製した精製
ナクネ油：粗バームオレイン−５ ０：５ ０（重量比
）水分含量４０ｐｐｎ＋を用いた。
ナクネ油：粗バームオレイン−５ ０：５ ０（重量比
）水分含量４０ｐｐｎ＋を用いた。
２ｇのリパーゼ固定化酵素剤をカラム（直径一１０ｍｎ
＋）に充填し流速２ｇ／ｈｒで基質を流し、６０゜Ｃで
連続エステル交換反応を行ったところ、エステル交換比
活性半減期は （表−５） のようで あった。
＋）に充填し流速２ｇ／ｈｒで基質を流し、６０゜Ｃで
連続エステル交換反応を行ったところ、エステル交換比
活性半減期は （表−５） のようで あった。
（表
５）
Claims (2)
- （１）リパーゼを担体に吸着保持させた酵素剤の調製方
法において、リパーゼの活性発現剤を水１００重量部に
対し０．２から２５重量部添加した水懸濁液にリパーゼ
を０．２から６０重量部添加し、該活性発現剤とリパー
ゼとを充分に撹拌接触させた後、該リパーゼ水懸濁液を
担体１重量部に対し、リパーゼ量として、０．０１から
０．２重量部となるように担体に吸着保持させる事を特
徴とするリパーゼ固定化酵素剤の調製方法。 - （２）活性発現剤がレシチン、ショ糖脂肪酸エステル、
デキストリン又はポリオールである特許請求項（１）記
載のリパーゼ固定化酵素剤の調製方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1185636A JP2778135B2 (ja) | 1989-07-18 | 1989-07-18 | リパーゼ固定化酵素剤の調製方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1185636A JP2778135B2 (ja) | 1989-07-18 | 1989-07-18 | リパーゼ固定化酵素剤の調製方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0349684A true JPH0349684A (ja) | 1991-03-04 |
| JP2778135B2 JP2778135B2 (ja) | 1998-07-23 |
Family
ID=16174239
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1185636A Expired - Lifetime JP2778135B2 (ja) | 1989-07-18 | 1989-07-18 | リパーゼ固定化酵素剤の調製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2778135B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5390052A (en) * | 1992-10-28 | 1995-02-14 | Mitsubishi Denki Kabushiki Kaisha | Method of recording/reproducing table of contents in digital magnetic tape recording/reproducing apparatus |
| JP2002539782A (ja) * | 1999-03-22 | 2002-11-26 | エンザイモテック、リミテッド | 不溶性マトリックス上に固定化された界面活性剤−リパーゼ複合体 |
| US6762302B2 (en) | 2002-05-10 | 2004-07-13 | Gedeon Richter, Ltd. | Process for dehydrogenation of azaandrostane compounds |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9908328D0 (en) * | 1999-04-12 | 1999-06-09 | Mann Stephen P | Enzymes,dilutents and the provision of water for hydrolytic catalysis |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60251884A (ja) * | 1984-05-30 | 1985-12-12 | Kao Corp | 油脂のエステル交換に有用な酵素剤の製造方法 |
| JPS63214184A (ja) * | 1987-03-02 | 1988-09-06 | Kao Corp | 固定化酵素およびその製造方法 |
| JPS642588A (en) * | 1987-02-26 | 1989-01-06 | Japanese Res & Dev Assoc Bio Reactor Syst Food Ind | Production of modified oil and immobilized lipase used therefor |
-
1989
- 1989-07-18 JP JP1185636A patent/JP2778135B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60251884A (ja) * | 1984-05-30 | 1985-12-12 | Kao Corp | 油脂のエステル交換に有用な酵素剤の製造方法 |
| JPS642588A (en) * | 1987-02-26 | 1989-01-06 | Japanese Res & Dev Assoc Bio Reactor Syst Food Ind | Production of modified oil and immobilized lipase used therefor |
| JPS63214184A (ja) * | 1987-03-02 | 1988-09-06 | Kao Corp | 固定化酵素およびその製造方法 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5390052A (en) * | 1992-10-28 | 1995-02-14 | Mitsubishi Denki Kabushiki Kaisha | Method of recording/reproducing table of contents in digital magnetic tape recording/reproducing apparatus |
| JP2002539782A (ja) * | 1999-03-22 | 2002-11-26 | エンザイモテック、リミテッド | 不溶性マトリックス上に固定化された界面活性剤−リパーゼ複合体 |
| US6762302B2 (en) | 2002-05-10 | 2004-07-13 | Gedeon Richter, Ltd. | Process for dehydrogenation of azaandrostane compounds |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2778135B2 (ja) | 1998-07-23 |
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