JPH03206044A

JPH03206044A - 抗レトロウイルス剤

Info

Publication number: JPH03206044A
Application number: JP2001031A
Authority: JP
Inventors: Hirotaka Higuchi; 裕高樋口; Takahiro Ogata; 緒形　孝弘; Hideki Matsumoto; 英樹松本
Original assignee: Tsumura and Co
Current assignee: Tsumura and Co
Priority date: 1990-01-09
Filing date: 1990-01-09
Publication date: 1991-09-09
Also published as: EP0539587A1; WO1992020345A1; EP0539587A4

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［産業上の利用分野］本発明は、レトロウイルスに起因する各種ウイルス性疾
患の治療に有効であり、また水に対する溶解性の高い抗
レトロウイルス剤に関するものである。

［従来の技術および課題］ウイルスに関する研究がなされるにつれ、ウイルス性疾
患の治療法が徐々に確立されつつある。

特に最近問題となっている後天性免疫不全症候群（ＡＩ
ＤＳ）を引き起こす、Ｈ　Ｉ　Ｖ　（Ｈｕｍａｎ　ｌｍ
ｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　Ｖｉｒｕｓ）は、レト
ロウイルスとして知られている。

レトロウイルスはウイルス粒子内に、ＲＮＡ依存ＤＮＡ
合成酵素（以下、逆転写酵素という）を含むウイルスで
あり、以下のようにして増殖している。

■省主細胞に感染後、まずウイルスＲＮＡが逆転写酵素
によりＤ　Ｎ　Ａに転写される。

■このＤＮＡが宿主細胞染色体に組み込まれ、次いで宿
主細胞のＲＮＡ合成酵素によってｍ　Ｒ　Ｎ　Ａが合成
される。

■このｍＲＮＡにより各種のウイルス蛋白が生成される
。

このレトロウイルスに起因するヒトの疾病に画斯的な治
療効果を有する薬剤の開発が望まれていた。

［課題を解決するための手段］本発明者等は、台湾等に自生する植物、キダチコミカン
ソウに含まれる成分について、レトロウイルス増殖阻害
効果に関する研究を行った結果、上記式で表される化合
物に、レトロウィルス増殖阻害効果のあることを見いだ
し、本発明を完成するに至つｆこ。

すなわち本発明は下記式（式中Ｒ，およびＲ，は同時にあるいは異なって水素原
子、ナトリウム、カリウムを示す。）で表される化合物
（以下、式の化合物という。）およびその薬学的に許容
しうる塩を有効成分とする抗レトロウイルス剤である。

式の化合物は、抗レトロウイルス効果を有することは全
《知られていなかったことである。

式の化合物は、台湾等に自生するキダチコミカンソウを
水で抽出したエキスを、通常用いられるカラムクロマト
グラフイーの手法を用いて精製することかできる。カラ
ムクロマトグラフイーの担体としてはセファデツクスＬ
Ｈ−２０，ＴＳＫゲル　１２０Ｔ、セルロース等が挙げ
られ、溶出溶媒としてはメタノール、エタノール、水、
酢酸、アセトニトリル、リン酸水素ナトリウム水溶液、
ベンゼン、ヘキサン等の単独または混合溶媒が挙げられ
る。カラムクロマトグラフイーの回数、順序は適宜組み
合わせることができる。

更に、精製過程で金属塩となった場合には、塩酸等の酸
で処理し、上述のクロマトグラフイーに付せば良い。

以下に式の化合物の製造の具体例を示す。

具体例ｌ乾燥したキダチコミカンソウ４２．７ｇを、水４００−
を用いて６０℃、２時間で３回抽出し、抽出肢か与水を
留去して乾燥エキスｔｏ．Ｈを得ｆ二。

この乾燥エキスをクロロホルムに溶解し、クロロポルム
不／ｇ部をメタノールに溶解し、メタノール不溶部を更
に水に溶解して得られた可溶部を乾燥させて６．４ｇの
残渣を得た。この残渣をセファデツクスＬ｝｛−２０を
用いたカラムクロマトグラフイー（３３φｘ２６０＋ｕ
）に付し、水で溶出させて１８１ｄ〜３６０ｄの溶出部
を乾燥させて２　３　０　Ｍ９の残渣を得、これを更に
セルロースを用いたカラムクロマトグラフイー（２０φ
×３６０ｉｍ）に付し、２％酢酸水溶液で溶出させて８
１７ｄ〜１４０−の溶出部より粗分画ｔ７ｏｘｙを得た
。

この粗分画をＴＳＫゲル　１２０Ｔを用いたカラムクロ
マトグラフイ−（２２φＸ２５０朋）に付し、１０Ｊ！
Ｈのリン酸水素ナトリウム水溶液に対しアセトニトリル
の濃度を順次５〜２０％に増やした混合液で溶出（２０
７／分）させて２８０）ｄ〜３６〇一の溶出分画を更に
セファデツクスＬＨ−２０を用いたカラムクロマトグラ
フイー（２０φ×５００ｍｍ）に付し、水で溶出させて
１９１−〜２５０−の溶出部を乾燥させて２８．４Ｍｇ
の粉末を得た。この粉末の理化学的性質は文献（Ｃｈｅ
ｍ．　Ｐｈａｒｍ．　Ｂｕｌｌ．　３７（１０）２６２
４−２６３０（１９Ｈ））記載のレバンドウシニックア
ンツドＡモノソデイウムサルト（ｒｅｐａｎｄｕｓｉｎ
ｉｃ　ａｃｉｄ　Ａ　ｍｏｎｏｓｏｄｉｕｍ　ｓａｌｔ
）の理化学的性質と一致した。

具体例２具体例！で得たレパンドウシニックアシツドＡモノソデ
イウムサルト２０Ｗ９にＩＮ塩酸１．５７を加え、反応
させた後、セファデツクスＬＨ２０を用いたカスラムク
ロマトグラフイ−（１０φｘｌＱ（１＋ｍ）に付し、メ
タノール溶出部（４−〜７−）を乾燥させて１５ｆｆｇ
の粉末を得た。この粉末の理化学的性質は文献（Ｃｈｅ
ｍ．　Ｐｈａｒｍ．　Ｂｕｌｌ．　３７（１０）２６２
４−２６３０（１９８９））記載のレバンドウシニツク
アンツド．Ａ　（ｒｅｐａｎｄｕｓｉｎｉｃ　ａｃｉｄ
　Ａ）の理化学的性質と一致した。

［発明の効果］次に式の化合物が抗レトロウイルス効果を有することに
ついて実験例を挙げて説明する。

実験例く逆転写酵素活性に及ｉ《す影響〉以下の組成の反応混合肢を調製した。

０逆転写酵素（Ｈｕｍａｎ　ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉ
ｅｎｃｙｖｉｒｕｓ　ｒｅｖｅｒｓｅ　ｔｒａｎｓｃｒ
ｉｐｔａｓｅ）１単位／一〇テンプレート・プライマー複合体としてのボリアデニ
ル酸・オリゴチミジル酸複合体［ポリアデニル酸ｐｏｌｙｒ＾，オリゴチミジル酸ｐｄ
Ｔ＋ｔ−＋ａ（１・１）］ファルマシア製５ｕ９／１／
１１ｏトリス塩酸（ｐＨ　８．０）２５門０塩化力リウム７５州０塩化マグネンウム８ｚＭＯジチオスレイトール２次Ｍ０［３Ｈ］デオキンチミジノ三リン酸（　＋　．　５　５　ＴＢｑ／ｍｄ）０．２浦Ｏデオキノチミノン三リン酸９．８副Ｏ式の化合物０．０５　〜ｌｌｌｉ／ｍｌ０精製水適量＊ｌ単位とは、逆転写酵素が３７℃、１０分間でｄ　Ｎ
　Ｔ　Ｐ　（デオキシ核酸三リン酸）Ｉｎ一を消費する
比活性単位である。

この反応混合液５０成を３７℃、３０分間反応させた。

反応産物ＤＮＡの定量はイオン交換濾紙法を用い、［３
Ｈ］デオキンチミジン三リン酸のＤＮＡへの放射活性の
取り込みをベツクマン・シンチレーソヨンカウンターで
測定して、逆転写酵素活性とし、式の化合物の５０％阻
害濃度（ＩＣ，。）を算出した。その結果、式の化合物
のＩＣｓｏは０．１１４／一であり、逆転写酵素活性阻
害作用に基づく抗レトロウイルス効果を有することが確
認された。

更に式の化合物は、レトロウイルスの増殖において必要
な逆転写酵素活性を阻害することにより、その増殖を抑
制するものであるから、レトロウイルスであればいかな
るウイルスにも適用することができる。

レトロウイルスの具体例としては、白血病ウイルス、肉
腫ウイルス、乳癌ウイルス、ビスナウイルス、マエデイ
ウイルス、ＨＩＶ，ＨＴＬＶ−１等が挙げられる。

また、式の化合物をマウスに経口投与（１０（Ｍ９／ｋ
ｙ）Ｌても死亡例はなく、安全性の高いものであること
が確認された。

次に、式の化合物の投与量および製剤化について説明す
る。

式の化合物はそのまま、あるいは慣用の製剤担体と共に
動物および人に投与することができる。

投与形態としては、特に限定がなく、必要に応じ適宜選
択して使用Ｓれ、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、
散剤等の経口剤、注射剤、坐剤等の非経口剤が挙げられ
る。

経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年
令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で式の
化合物の重量として０、１ｇ〜６ｇを、１日数回に分け
ての服用が適当と思われる。

本発明において錠剤、カプセル剤、顆粒剤等の経口剤は
、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキ
ノメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等を用
いて常法に従って製造される。

この種の製剤には、通宜前記賦形剤の他に、結合剤、崩
壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着
色剤、香料等を使用することができる。それぞれの具体
例は以下に示す如くである。

［結合剤：デンブン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、
ヒトロキノブロビルスターチ、メチルセルロース、カル
ホキノメチルセルロースナトリウム、ヒドロキノプ口ピ
ルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、ポ
リビニルピロリドン、マクロゴール。

［崩壊剤］デンプン、ヒドロキンプロビルスターチ、カルボキシメ
チルセルロースナトリウム、カルポキンメチルセルロー
スカルシウム、カルボキシメチルセルロース、低置換ヒ
ト口キシブ口ビルセルロース。

［界面活性剤］ラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ノヨ糖脂肪酸
エステル、ポリソルベート　８０。

［滑沢剤］タルク、σウ類、水素添加植物油、ンヨ糖脂肪酸エステ
ル、ステアリン酸マグネンウム、ステアリン酸カルシウ
ム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリコー
ル。

［流動性促進剤］軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケ
イ酸アルミニウム、ケイ酸マグネンウム。

また式の化合物は、懸濁液、エマルノヨン剤、シロップ
剤、エリキンル剤としても投与することができ、これら
の各種剤形には、矯味矯臭剤、着色剤を含有してもよい
。

非経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の
年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常戊人で式
の化合物の重量として１日１〜１０（ＩＩ？までの静注
、点滴静注、皮下注射、筋肉注射か適当と思われる。

この非経口剤は常法に従って製造され、希釈剤として一
般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射
用植物浦、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ油、トウモロ
コシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコー
ル等を用いることができる。さ占に必要に応して、殺菌
剤、防腐剤、安定剤を加えてらよい。また、この非経口
剤は安定性の点かあ、バイアル等に充填後冷凍し、通常
の凍結乾燥技術により水分を除去し、使用直前に凍結乾
燥物かア戚剤を再調製することもできる。更に、必要に
応じて適宜、等張化剤、安定剤、防腐剤、無痛化剤等を
加えても良い。

その他の非経口剤としては、外用液剤、軟膏等の塗布剤
、直腸内投与のための坐剤等が挙げられ、常法に従って
製造される。

実施例１ ■結晶セルロース　　　　　８４．５９■ステアリン酸
マグネンウム　０．５９■カルボキシメチルセルロースカルシウム　　　　５９ ■式の化合物　　　　　　　　１０９計　　　　　１００９上記の処方に従って■、■および■の一部を均一に混合
し、圧縮成型した後、粉砕し、■および■の残量を加え
て混合し、打錠機にて圧縮成型して一錠２　０　０　１
１ｇの錠剤を得た。

この錠剤一錠には、式の化合物２０ｍ９が含有されてお
り、成人１日５〜７錠を数回にわけて服用する。

実施例２ ■結晶セルロース　　　　　３４．５９■１０％ヒドロ
キシブ口ピルセルロースエタノール溶岐　５０９ ■カルボキノメチルセルロースカルンウム　　　５２ ■ステアリン酸マグネノウム　０．５９■式の化合物　
　　　　　　　１０９計　　　　　　Ｉ　０　０９」二記の処方に従って■、■および■を均一に混合し、
常法によりねっ和し、押し出し造粒機により造粒し、乾
燥・解砕した後、■および■を混合し、打鍵機にて圧縮
成型して一錠２　０　０　Ｑの錠剤を得Ｉこ。

この錠剤一錠には、式の化合物２０１！９が含有さイ１
ており、成人１日５〜７錠を数回にわけて服用する。

実施例３ ■注射用蒸留水　　　　　　　　適量 ■ブドウ糖　　　　　　　　　２　０　０　Ｒ９■式の
化合物　　　　　　　　１０Ｉ１９全量　　　　　　　
　１５ｄ注射用蒸留水に■および■を溶解させた後、５−のアン
プルに注入し、１　２　１　℃で１５分間加圧滅菌を行
って注射剤を得た。

Claims

【特許請求の範囲】下記式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿１およびＲ＿２は同時にあるいは異なつて水
素原子、ナトリウム、カリウムを示す。）で表される化合物およびその薬学的に許容しうる塩を有
効成分とする抗レトロウイルス剤。