JPH03198703A - 種子コーティング - Google Patents

種子コーティング

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JPH03198703A
JPH03198703A JP2000348A JP34890A JPH03198703A JP H03198703 A JPH03198703 A JP H03198703A JP 2000348 A JP2000348 A JP 2000348A JP 34890 A JP34890 A JP 34890A JP H03198703 A JPH03198703 A JP H03198703A
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    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は種子コーティングに関し、更に詳しくは有益微
生物を担持した農業」１何用な種子の播種（１ｎｏｃｕ
ｌａｔ］ｏｎ）方法に関する。微生物という用語は、細
菌、真菌及びより高等のもしくはより下宿の生物を意味
するように本明細書では広義に用いられる。
ある微生物は、植物の成長性を改善し、植物のＮ及びＰ
状態を改善し、又は植物に影響を！ｊえるある害虫及び
病気をコントロールするためにいくつかの方法で機能す
ることができる。これらの生物としては、リゾビウム（
Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ）　　Ｃブラシリゾビウム（Ｂｒａ
ｄｙｒｈｉｚｏｂｊｕｍ）を含む〕、シュードモナス（
Ｐｓｃｕｄｏｍｏｎａｓ）　、セラチア（Ｓｃｒｒａｔ
ｉａ）、ノ１チルス（Ｂａｃｉ　Ｉ　Ｉｕｓ）、バスツ
ーリア（Ｐａｓｔｃｕｒｔａ）　、アゾトバクタ−（Ａ
ｚｏＬｏｂａｃｔｃｒ）　、エンテロバクタ−（Ｅｎｔ
ｅｒｏｂａｃＬｅｒ）、アゾスピリラム（八ｚｏｓｐｉ
　ｒｉ　Ｉ　Ｉｕｍ）及びシアノバクテリア（Ｃｙａｎ
ｏｂａｃｔｅｒｉａ）　　（藍藻）属の細菌、ブリオフ
ラジウム（ＧｌｉｏｃｌａｄｉｕＩｌｌ）、トリコダー
マ（Ｔｒｉｃｂｏｄｅｒｍａ）　、コニオセリウム（Ｃ
ｏｎｉｏＬｈｅｒｉｕｍ）、バーチシリウム（■ｅｒＬ
ｉｃｉｌｌｉｕｍ）、バエシロミセス（Ｐａｅｃｊ　Ｉ
ｏｍｙｃｅｓ）、メタリジウム（Ｍｅｔａｒｈ＋ｚｉｕ
ｍ）及び菌根属の真菌並びに特定植物の根付近の土壌中
に存在する虫媒性 （ｅｎｔｏｍｏｐｈ　ｉ　Ｉ　ｉ　ｃ）線虫がある。用
いられる微生物は、播種原（１ｎｏｃｕｌａｎｔ）組成
物の使用による種まきで土壌中に通常混入される。播種
原は、通常乾燥、湿潤又はスラリーのいずれかの播種技
術によって種子と完全接触下におかれる。スラリー播種
の場合、播種原は水と混合され、通常粘着剤、例えばア
ラビアゴム又はメチルセルロースが粘着性を改善するた
めに用いられる。
英国特許節２，０８０，６６９号明細書では、リゾビウ
ム播種原生における水溶性ポリビニルピロリドン（ｐｖ
ｐ）の使用について示している。
水溶性ポリビニルピロリドンは、微生物の生存を　４− 促進すると述べられている。我々の先行欧州特許出願節
８７．３０６　３４３．２号明細書では、キャリア媒体
、微生物の有益種及びビニルピロリドンとビニルアセテ
ート、スチレンもしくは置換スチレンとのコポリマーを
含有した植物用播種原組成物について開示している。
播種の農場内実施では種まきに余計な上程を加えてしま
い、したがって農作者に嫌われることか多い。しかも、
種子を微生物でコーティングする現在の方法には欠点が
あり、即ちそれによれば生存微生物の低担持率及び不十
分な保存寿命を生じてしまう。商業的実施の場合には、
環境温度下で少なくとも６ケ月の保存寿命を有するコー
ティングされた種子が望ましい。
農場で用いられる乾燥、湿潤及びスラリー播種法とは異
なり、前播種（ｐｒｅ］ｎｏｃｕｌａＬ］ｏｎ）は種子
コーター（ｃｏａｔｅｒ）で行イ〕れ、それによって種
ｒは微生物含有処方剤（通常、粘土ベース）でコーティ
ングされる。商業的種子コーティングプロセスでは、微
生物生存に悪影響を与えうる温度での乾燥段階を通常要
する。しかも、種子は種まきに先立ってしっかりとコー
ティングされていることから、微生物は継続的乾燥条件
下でふつう数か月間生存し続ける必要がある。上記問題
のために、種子の商業的前播種はほとんど成功していな
かった。
例えば英国特許節２，０８０，６６９号明細書では、下
記工程からなるリゾビウムでの種子プレコーティング方
法について記載している。種子は、カゼインナトリウム
、微細石灰石及びピート（ｐｅａｔ）でコーティングさ
れ、過剰水分を除くため乾燥され、しかる後ポリビニル
ピロリドン水溶液中ピート媒体内のリゾビウム培養物ス
ラリーと混合される。最後に、カオリン／石灰混合物が
いかなる過剰水分も吸収させてしまうためにコーティン
グされた種子と混合される。この方法は１００％のリゾ
ビウム生存率を与えると主張されているが、示された結
果の詳細な検討によればこれが事実ではないことを示し
ている。−例として２１８間の貯蔵後に１００％生存率
が記録されたが、但し結果の再現性は乏しい。他のすべ
ての例では、２８日間の貯蔵後に０．５〜１９％のリゾ
ビウム生存率が記録された。
リゾビウムでの種子の前播種に関するもう１つの問題は
、植物の成長に対して有益な効果を有するように種子当
たり十分な細菌数を得ることである。大豆の場合］０５
細菌／種子が必要であり、ルーザーン（ｌｕｃｅｒｎｅ
）場合１０３細菌／種子が必要であると認識されている
。種子の前播種に関する前記方法では、これらの目標に
達しえなかった。
我々の先行欧州特許出願第８７．３０６　３４３゜２号
明細書で記載されているようにビニルピロリドン及びビ
ニルアセテートのコポリマーのような粘着性ポリマーを
含有した播種原組成物による種子のスラリー化は、それ
が１０５細菌／大豆種子及び１０３細菌／ルーサーン種
子の目標を達成している点で従来技術よりも改善がある
。しかしながら、それは保存寿命に関する改善で余地を
また残しているのである。
驚くべきことに我々は、スラリー化操作時に水性慝濁液
として別に加えられる粘着性ポリマーの懸濁液の存在下
において例えば我々の先行欧州特許出願第８７．３０６
　３４３．２号明細書で記載されたような播種原組成物
で種子をスラリー化し、しかる後環境温度で風乾したと
ころ、種子当たり十分なリゾビウム数を有するコーティ
ングされた種子製品が得られ、しかもその場合に十分な
リゾビウムが５ケ月以上の期間にわたり生存し続けるこ
とを発見した。
本発明によるコーティングされた種子の製造方法では、
キャリア媒体、種子から成長する植物に対して有益な効
果を有する少なくとも１種の微生物及び粘着性ポリマー
を含有した播種原組成物で種子をスラリー化し、その際
にスラリー化が粘着性ポリマーの水性懸濁液の存在下で
行われ、得られた製品を３０℃以下の温度で風乾する。
本発明は、キャリア、種子又はそれから生じる植物に関
して有益である微生物及び微生物と適合しつる粘着性ポ
リマーを含有したコーティング組成物で包囲された少な
くとも１つの種子を含む改善されたコーティング種子製
品を提供する。
　８ 粘着性ポリマーは、ビニルピロリドン及びビニルアセテ
ートのコポリマー、ポリ（メチルビニルエーテル）無水
マレイン酸コポリマー、メチルビニルエーテル及び無水
マレイン酸のコポリマーの遊離酸、ビニルピロリドン／
スチレンコポリマー部分的加水分解ポリビニルアルコー
ル、ビニルアセテート／ブチルアクリレートコポリマー
、ビニルアセテートホモポリマー、ビニルアセテート／
ベオバ（ＶｃｏＶａ）　　１０　／ブチルアクリレート
ターポリマー、アクリル酸コポリマー、スチレン／アク
リル酸エステルコポリマー、ビニルアセテート／エチレ
ンコポリマー並びにポリビニルアセテートから選択され
ることが好ましい。特に好ましいポリマーは、各重量比
で５０　：　５０〜７０　：　３０のビニルピロリドン
及びビニルアセテートのコポリマーである。好ましくは
、懸濁液は１０〜２０重二％のコポリマーを含有してい
る。好都合には、懸濁液中の粘着性ポリマーが播種原組
成物中の場合と同一であってもよい。
キャリアはピートであることが好ましい。一方、ヒル石
、粘土、沈泥、黒鉛、タルク、濾過泥、コイア粉、バガ
ス、堆肥化コーン穂軸又は石炭粉も使用可能である。
微生物は、リゾビウム（ブラシリゾビウムを含む）、シ
ュードモナス、セラチア、バチルス、バスツーリア、ア
ゾトバクタ−、エンテロバクターアゾスピリラム、シア
ノバクテリア、ブリオフラジウム、トリコダーマ、コニ
オセリウム、バーチシリウム、バエシロミセス、メタリ
ジウム、菌根属の真菌及び虫媒性線虫から選択されるこ
とが好ましい。
一部の環境下では、外観を改善するためコーティングさ
れた種子を粉末粘土で散布することが有用であろう。他
の製品から区別するためコーティングされた種子中に色
素を配合することも望ましいであろう。我々は、粉末粘
土及び色素双方がリゾビウムに対する有害作用なしにコ
ーティング種子組成物中に含有されうることを証明した
。適切な粘土の一例は、サリーパウダー（Ｓｕｒｒｅｙ
　Ｐｏｗｄｅｒ）としても知られるモンモリロナイトカ
ルシウムである。色素は、ローダミンＢ　５００　（Ｒ
ｈｏｄａｍｉｎｅＢ５００）　、メチルバイオレッＩ・
（Ｍｅｔｈｙｌ　Ｖｉｏｌｅｔ）、ブルー２３１３　（
Ｂｌｕｅ　２３１３）　、エオシンＹ（Ｅｏｓｉｎｅ　
Ｙ）、サンセットイエロー（ＳｕｎｓｅＬ　Ｍｅ！ｌｏ
ｗ）。
マゼンタ（Ｍａｇｅｎｔａ）　、ブルー２３１．２３、
ピグメントグリーン７　（ＰｉｇｍｅｎｔＧｒｅｅｎ　
７）　、タートラジン（Ｔａｒｔｒａｚｉｎｅ）、マラ
カイトグリーン（ＭａｌａｃｈｉｔｅＧｒｅｅｎ）　、
オーラミンＯ（Ａｕｒａｍｊｎｅ　Ｏ）、オイルイエロ
ー２１７５６　（Ｏｉ　ｌ　Ｙｅｌ　ｌｏｗ　２１７５
Ｇ）、グリーン１、９１．０２　（Ｇｒｅｅｎ　１９１
０２）及びメチレンブルー　Ｂ　（Ｍｅｔｈｙｌｅｎｃ
　Ｂｌｕｅ　２］３）のような色素並びに１００シルバ
ーパール（ＬＯＱ　５ｉｌｖｅｒ　Ｐｅａｒｌ）、１２
０ラスターパール（１２０Ｌｕ５ｔｒｅ　Ｐｅａｒｌ）
、２３５グリーンパール（２３５Ｇｒｅｅｎ　Ｐｅａｒ
ｌ）、３００ゴールドパール（３００Ｇｏｌｄ　Ｐｅａ
ｒｌ）、５００ブロンズバール（５００Ｂｒｏｎｚｅ　
Ｐｅａｒｌ）及び５０４レツドバール（５０４Ｒｅｄ　
Ｐｅａｒｌ）のような二酸化チタンコーティングマイカ
（ラスター）から選択されることが好ましい。
多数の種子が化学的殺真菌剤でコーティングさ１ れている。これらは本発明でも用いることができるが、
その場合にはこれら殺真菌剤に耐性のリゾビウム株を用
いることが必要であり、このため種子を殺真菌剤及びリ
ゾビウムで同時にコーティングすることができる。殺真
菌剤は、メタラキシル、カルバチイン及びチラムから選
択されることが好ましい。
本発明のコーティングされた種子製品は、種子をコーテ
ィング組成物の諸成分と混合し、得られたコーティング
種子の表面を乾燥することにより製造される。乾燥は室
温（即ち、３０℃以下）で行われるべきである。播種原
対種子の割合は種子のタイプに応じて０．５〜２．５重
■％の範囲から選択される。
本明細書で記載された方法により製造されたコーティン
グ種子は、下記の利点を有している：（ａ）コーティン
グされた種子は易流動性である。
（ｂ）コーティングは発芽に悪影響を与えない。
（Ｃ）はとんどのコーティングは袋づめ及び種まきで失
われない。
２ （ｄ）コーティングされた種子は、少なくとも３ケ月の
期間にわたり種子当たり高い生育リゾビウム細胞数を維
持している。
本発明は下記例で説明されるが、その中で例１〜４は比
較例であり、例５以降は本発明の方法について示してい
る。
例１ ピートベース播種原の調製 選択されたカヤツリグサ（ｓｃｄｇｃ）ピート〔フィソ
ンズ（Ｐｉｓｏｎｓ））を水酸化カルシウム及び炭酸カ
ルシウムでｐＨ６，５に調整した。これを６０°Ｃでオ
ーブン乾燥し、ハンマーミルで粉砕して０．４ｍｍふる
いに通した。粉末ピートの一部１５０ｇを３００ゲージ
ポリテンバツグに封入し、γ線（５０ＫＧｙ）で滅閑し
た。パックにブラシリゾビウム・ジャポニカム（Ｂｒａ
ｄｙｒｂｉｚｏｂ＋ｕｍｊａｐｏｎｉｃｕｍ）、リゾビ
ウム・メリロチ（＋？旧ｚｏｂｉｕｍｍｅｌｌｌｏＬｉ
）又はＲ，レグミノサラム（Ｒ，ｌｅｇｕｍｌｎｏｓａ
ｒｕｍ）の次亜種トリフオリイ（ｔｒｉｒｏｆ　ｉｆ）
の純粋培養物１１５ｍ１を注入し、注入孔を再密封し、
内容物を２６℃で７１−１間のインキュベート前に完全
混合した。このような播種片は、平均５Ｘ１０９／ｇの
生存細胞を含有している。
ピート−粘土混合物ベースの播種片（サリーパウダー、
モンモリロナイトカルシウム）は、同一方法で調製する
ことができる。粉末ピート−粘土混合物（２５又は５０
％ｗ／ｗ粘土）の一部１．５０ｇを３００ゲージポリテ
ンバツグに封入し、γ線（５０Ｋｃｙ）で滅菌した。パ
ックにＢ、ジャポニカム、Ｒ，メリロチ又はＲ，レグミ
ノサラム次亜種トリフォリイの純粋培養物１１５ｍ１を
注入し、注入孔を再密封し、内容物を２６°Ｃで７日間
のインキュベート前に完全混合した。このような播種片
は、平均３．６ｘ１０９／ｇの生存細胞を含有している
。
例２ 放射線照射ピートパックを例１で記載されたように調製
し、Ｂ、ジャポニカム、Ｒ，メリロチ又はＲ，レグミノ
サラム次亜種トリフォリイの純粋培養物５７．５ｍｌ＋
ＰＶＰ−ＶＡ−３−６３０のオートクレーブ処理１０％
水性懸濁液５７．５ｍｌ又はｐｖｐ　（分子量４４，０
００）のオートクレブ処理１０％水溶液５７．５ｍｌを
注入した。
ＰＶＰ−ＶＡ−８−６３０は６０：４０ビニルピロリド
ン／ビニルアセテートコポリマー（分子量７００．００
０）であり、マンチェスターのＧＡＦ　（英国）社から
得られる。それは水中で安定なエマルジョンを形成しつ
るスプレードライ粉末である。
コントロール播種片も同様に調製されるが、但し水５７
．５ｍｌをポリマーの水性懸濁液又は溶液に代用した。
すべてのパックを完全に混合し、２６℃で７日間インキ
ュベートシ、室温で貯蔵した。コントロール、ＰＶＰ−
及びＰＶＰ−ＶＡＳ−６３０含有播種原は、使用時６　
Ｘ　１．０９１．７Ｘ１、０　　及び４．２５ｘ１、０
９／ｇのリゾビウムを各々含有していた。
大豆種子を下記のようにＢ、ジャポニカムで播種した： コントロール播種原を用いて、３方法で大豆種５ 子に播種した： １、乾燥−播種片１、ｇを種子３００ｇと混合した。
２、水スラリー−播種片１ｇを水２ｍｌでスラリー化し
、しかる後種子３００ｇと混合した。
３、アラビアゴムスラリー−播種片１ｇをアラビアゴム
の４０％水溶液〔供給者−シグマ（ＳｉｇＩＩｌａ）　
）　２ｍｌでスラリー化し、しかる後種子３００ｇと混
合した。
すべての処理において、播種された種子をふるい分けに
よる非粘着播種片の除去前に室温で３０分間保った。
ＰＶＰ−又はＰＶＰ−ＶＡ−３−６３０含有播種原を用
いて、３方法で大豆種子に播種した：１、乾燥−播種片
１ｇを種子３００ｇと混合した。
２、湿潤一種子３００ｇを播種片］ｇとの混合前に水０
．３ｍｌでわずかに湿潤化させた。
３、スラリー−播種片１ｇを水２ｍｌでスラリー化し、
しかる後種子３００ｇと混合した。
６ 播種された種子をふるい分けによる非粘着播種片の除去
前に室温で３０分間保った。
次いで、すべての種子ロットを空気にさらし、２５℃で
８日間保ち、その間に種子当たりのリゾビウム数を測定
した。結果は第１表−〇示されている。
第１表から、ＰＶＰ−’ＶＡ−３−６３０播種原のみが
望ま播種柱子当たりのリゾビウム数（即ぢ、１０５／種
子以上）を達成しうろことが観察できる。アラビアゴム
及びＰｖＰの双方は、リゾビウム生存数が保護物質非存
在下で観察される場合と比較して伸びている点で、種子
表面上のリゾビウムをある程度保護することか観察され
る。種子表面上のリゾビウム生存数はＰＶＰ−ＶＡ−３
６３０播種原が用いられる場合史に促進されており、こ
のため保護物質としてＰ　Ｖ　Ｉ）及びアラビアゴムよ
りもＰＶＰ−ＶＡ−３−６３０の優秀性を証明している
。最良の結果は種子がＰＶＰ−ＶＡＳ　−６３０播種原
とスラリー混合された場合に得られるが、但しこの場合
であってもリゾビウム生存数は市販コーティング種子製
品として不十分であり、更に改善が要される。
第１表 播種後の　　　　　　　リゾビウム数／種子時間（日）
　　乾燥　水スラリー　アラビアゴムスラリー２．６０
０　　２０．０００ ２４０　　　３．０００ ０　　　２．０００ ０ ０ 乾燥　　湿潤 ＰＶＰ播種播 種　　　　　　１１．０００ ２００ ４０ ０ １４０．０００ １７．０００ １０．０００ ３．０００ ２１０．０００ ４９．０００ ３７．０００ ７．８００ ７３．０００ ３１、．０００ ２．７００ １．０００ Ｏ スラリー ５．０００ １．０００ ３０ ０ ７８０．０００ ＋２０．０００ ８１．０００ ！３，０００ 例３ 例２で記載された試験のバラツキに鑑みて、この例で適
用される試験はバッグ内で貯蔵されるコーティング種子
の保護性能を比較するために行われた。
種子コーティング上のリゾビウム生存数に関するＰＶＰ
−ＶＡ−８−６３０コポリマーの効果を、アラビアゴム
の４０％水溶液によるスラリー播種及び従来（コントロ
ール）の播種圧による乾燥播種と比較した。
γ線照射大豆種子１００ｇｃｆットを無菌ボトル中で振
盪することにより従来の播種圧（例２で記載されたよう
に調製された；リゾビウム９．６×１０９／ｇ）１ｇで
乾燥播種した。その他を播種前に無菌アラビアゴム溶液
１ｍｌと混合した。
ＰＶＰ−ＶＡ−８−６３０含有播種原（例２で記載され
たように調製された；リゾビウム２．２×１０１０／ｇ
）での播種に用いられる種子ロットは無菌水０．１ｍｌ
で前湿潤化させた。種子ロットを放射線照射ポリテンバ
ッグに移し、密封し、実験室温度で６ケ月間保った。間
隔をあけて５０の種子ロットを各処理物から取出し、種
子力たりの生存リゾビウム細胞数を測定した（第２表参
照）。
第２表 リゾビウム数／種子 播種後の　乾燥　アラビアゴム　ＰＶＰ−ＶＡ−９−８
３０時間（月）播種　スラリー播種　含有播種片播種０
　　８５．０００　３，１００．０００　　　３，４０
０，０００３　　　　Ｎ、Ｄ、　　　　９４，０００　
　　　　＋９０．０００６　　　　Ｎ、Ｄ、　　　　Ｎ
、０．　　　　　　７６ＯＮ、　Ｄ、検出されず 第２表で示された結果は、本例においてアラビアゴムで
の種子のスラリー播種及びＰＶＰ−ＶＡＳ−６３０播種
原での湿潤播種が双方とも望まいリゾビウム数／種子（
即ち、１０５／種子以上）に達していることを示してい
る。従来の播種圧での乾燥播種は不満足であった。しか
しながらすべての場合において、リゾビウム数／８子は
コーティングされた種子がバッグ内で貯蔵されたとして
も貯蔵３〜６ケ月以内に１０５以下に落ちた。
例４ ＰＶＰ−ＶＡ−８−６３０は種子表面上のリゾビウムの
生存を明らかに促進し、このためピート播種原生のＰＶ
Ｐ−ＶＡ−８−６３０濃度増加により十分な保存寿命を
得るため十分な程度までリゾビウムの生存を改善しうる
か否かを調べる上で興味があった。
ＰＶＰ−ＶＡ−３−６３００，５，１０及び１５ｇを含
有したピートベース播種片のパックを例２で記載された
ように調製した。１５ｇを超えるＰＶＰ−ＶＡ−Ｓ　−
６３０を含有した１５０ｇピートバックを調製すること
は、これがピート粒子の凝集を招きひいては種子コーテ
ィングを無効にすることから不可能である。
播種圧を用いて、２方法で大豆種子に播種した：１、湿
測一種子３００ｇを播種圧１ｇとの混合前に水０．４ｍ
ｌでわずかに湿潤化させた。
２、スラリー−播種圧１ｇを水２ｍｌでスラリー化し、
しかる後種子３００ｇと混合した。
播種された種子をふるい分けによる非粘着播種原の除去
前に室温で３０分間保った。次いで、種子を空気にさら
し、種子当たりのリゾビウム数測定前に室温で１時間保
った。結果は第３表で示されている。
結果は、ピート播種片のＰＶＰ−ＶＡ−８６３０含有量
を最大可能レベルまで増加させることにより望ましいリ
ゾビウム数／種子（即ち、１０５／種子以上）が達成可
能であるが、但し更に改善が望まれることを示している
。
第３表 播種片（ｇ＞の　　　リゾビウム数　　　リゾビウム数
ＰＶＰ−ＶＡ−８−［ｉ３０含有ｍ／ｇ播種原　　　　
　／種子湿潤播種　スラリー播種 ０ ５ ２．３ｘＬＯ”　　（ｉ、５ｘｌｏ４ １．２Ｘ１０１０３．６刈０５ ２．５Ｘ１０９ｇ、０Ｘ１０４ １．０Ｘ１０” ８．１ＸＬＯ” １．３Ｘ１０５ 例５ 大豆種子の前播種 ＰＶＰ−ＶＡ−Ｓ−６３０含有ピ一トベース播種原（例
２で記載されたように調製される）２ｇを室温でＰＶＰ
−ＶＡ−５−６３０の水性懸濁液３ｍ１（１０，２０又
は３０％ｗ／ｗ　）と混合した。
懸濁液を大豆種子３００　ｇとスラリー化し、スラリー
を風乾した。種子ロットを放射線照射ポリテンバッグに
移し、密封し、室温で５ケ月間保った。
間隔をあけて５０の種子ロットを各処理物から取出し、
種子当たりの生存リゾビウム細胞数を４り定［７た（第
４表参照）。
ピートベース播種原の皿を変更させた効果が調べられた
。播種片２．３．４又は５ｇをＰＶＰ　−ＶＡ−８−６
３０懸澗液３．４．４又は５ｍｌと各々混合した。播種
片３又は４ｇか用いられた場合には、水１ｍｌも混合物
に加えた。播種片５ｇか用いられた場合には、水２ｍｌ
を混合物に加えた。懸濁液を種子とスラリー化し、乾燥
し、バッグに入れ、生存リゾビウム細胞数を上記のよう
に測定し３− た（第４表参照）。
ＰＶＰ−ＶＡ−３−６３０含有ピート−粘土播種片（例
２で記載されたように調製される）をピートベース播種
片の代わりに用い、前播種大豆種子を上記のように調製
した。種子当たりの生存リゾビウム細胞数を測定した（
第５表参照）。
ＰＶＰ−ＶＡ−８−６３０と３種の異なるＢ。
ジャポニカム株ＲＣＲ３４０７（ＣＢ１８０９）、５３
２Ｃ及びＧ４９のうち１種を含有したピートベース播種
片を用いて上記のように大豆種子に前播種し、種子当た
りの生存リゾビウム細胞数を測定した（第４表参照）。
４ 第４表 ａ）２ｇ播種原　１０％ＰＶＰ−ＶＡ−３−［１３０９
，５Ｘ１０５１．２ＸＩＱ５２．０ＸＩ０５１．０ＸＩ
Ｏ”２０９６　　　〃４．ｌＸ１．Ｉ）５０．８ＸｌＯ
”　３．８ＸＩＯ”　１．７ＸｌＯ”３０％　　／／　
　　２，８ＸＩＯ”　５．４Ｘ１０５３．８ＸＩ０５１
．４ＸＩ０５ｂ）３ｇ播種原　１０％〃３．０ＸＩＯ６
４，７ＸＩＯ”　　２．１．Ｘｌ、０”’　　１．３Ｘ
ＩＯ５２０％”　　　１．ｌＸｌ０６５．４ＸＩＯ５４
ＪＸＩＯ”　２．１ＸＩＯ”３０％　　”　　　ｌ０Ｘ
ＩＯ’　７．８刈０”　４．．５刈０”　２．３Ｘ１０
５ｃ）４ｇｆｆｆｉＦＩ原１０％”　　　２．９Ｘ１０
６２．７ＸＩ０６Ｂ、０ｘｌＯ”　　２．２ＸＩＯ”２
０％”　　　２．０ＸＩ０６１．７Ｘ　０６７．１ＸＩ
Ｏ”　４．ｌＸ　Ｏ”３０９ｆｉ　　　”　　　３．２
Ｘ１０６１．５Ｘ１０６Ｇ、８ｘｌＯ５３，４ＸＩ０５
ｄ）５ｇ播種原１０９６　　　　”　　　２．０ＸＩ０
６１．、ＩＸ　０６５．０ＸｌＯ”　　３．４Ｘ］０”
２０％〃２．２ＸＩ０６７．３ＸＩ０５Ｂ、ＩｘｌＯ”
　４．１ＸＩＯ５３０％　　”　　　３．０ＸＩＯ６Ｌ
５Ｘ　Ｏ”　Ｉｉ、０Ｘ１０５４．５Ｘ　Ｏ”株５３２
ｃ　　（ピート播種片） ａ）２ｇ播種ＪＩＮ、　　２０％ＰＶＰ−Ｖ八−８−８
３０へ、５Ｘ１０６２．８Ｘ１０６６．０ＸＩ０５４．
７ＸＩＯ５ｂ）４ｇ播Ｆｔｍ　２ｏ２ｇ　　　ｌａ、ｏ
刈０６１３刈０６８．４ｘｌＯ”　５．Ｏｘ１．０”３
０９６　　　”　　　３．４ＸＩＯ６６，３ＸＩＯ”　
８．４ＸＩＯ”　５．１ＸＩＱ”株Ｇ４９（ピート播種
片） ａ）２ｇ播種原　２０％ＰＶＰ−Ｖ八−Ｓ−［１３へ４
．２Ｘ１０６ｇ、［１Ｘ１０５１．０ＸＩｏ５０．５Ｘ
Ｉ０５ｂ）４ｇ播ｆ’１１．２０％−８，０Ｘ１００５
．８Ｘ１０５３．０ＸＩＯ５１，０ＸＩ０５３０９６　
　　／／　　　Ｇ、８Ｘ１０６８．４Ｘ１０５３．ｌＸ
ｌ０５１．４ＸＩＯ５６ 第５表 生存リゾビウム細胞数７程了 貯蔵期間（月） 株ＲＣＲ３４０７（７５％ピート ａ）２ｇ播種原　１０％ＰＶＰ−ＶＡ−３−６３０２０
％　　　　ｌ／ ３０％　　　　ｌ／ ｂ）４ｇ播種原　ｌＯ％ｐｖｐ−ｖ＾−８−６３０２０
％　　　　〃 ３０％　　　　ｔ／ ２５％粘土播種原） １ １．２Ｘ１０６２．９Ｘ１０６ ２．１ＸＩＯ［ｉ２．０刈０６ ２．８刈０ロ　　２．０Ｘ１０６ ２．１刈０６１．２ＸＩ０６ ４．７Ｘ　Ｏ’　１．０Ｘ１０６ ３．６刈０６１．１ＸＩＱ６ ３．０刈０５ ４．９刈０５ ３、ｅｘｔｏ５ ７．０刈０５ ７．６刈０５ ６．９刈０５ １．２刈０５ ２．７Ｘ１０５ ２．４Ｘ］０５ ３．０ＸＩ０５ ３．４刈０５ ３．７　Ｘ　１０５ 株ＲＣＲ３４０７（５０％ピー１−５０％粘土播種原）
ａ）２ｇ播ＦＩＪＦ７＋、　１０％ＰＶＰ−ＶＡ−８−
６３０　２．４刈０６５．１刈０５１．８刈０５０．４
ＸＩ０５２０％　　〃３．８刈０６５．９ｘ１０５２．
０ｘ１０５０．９ｘ１０５第４及び５表の結果は、１０
５リゾビウム／種了の目標が達成でき、しかもそうして
製造されたコーティング種子が５ケ月以上の保存寿命を
有することを証明している。
これらの結果から、１０又は２０９６ｗ／ｖ　Ｐ　Ｖ　
Ｐ−ＶＡ−３−６３０懸濁液が最適であって、大豆種子
３００ｇ当たり播種片２〜４ｇ（即ち、播種原率０．７
〜１．３％）で貯蔵５ケ月後に十分な生存リゾビウム細
胞数／種子になると結論づけられる。本方法はＢ、ジャ
ポニカム株の範囲まで適用可能である。
例６ ルーサーン種子の前播種 ルーサーン種子１００ｇを例５で記載されたようｉ：Ｐ
ＶＰ−ＶＡ−３−６３０及びＲ，メリロチＲＣＲ２００
１含有ピートベース播種原で前播種した。処理された種
子をバッグに入れ、例５で記載されたように貯蔵した。
間隔をあけて、種子当たりの生存リゾビウム細胞数を測
定した（第６表参照）。
７ 第６表 生存リゾビウム細胞数／種子 貯蔵期間（月） ０　　　１　　　３　　　６ ａ）Ｉｇ播ＦＪｔｌｆｆｌ　ＩＯ％ＰＶＰ−ＶＡ−８−
８３０３，８Ｘ１０’　９．７ＸＩＯ”　３．０ＸｌＯ
”　２．４ＸＩＯ”２０％”　　４．ｏＸ１ｏ’　１．
８ｘｌＯ’　８．０ｘｌＯ”　４．０ｘｌＯ”３０％　
　〃５．２Ｘ１０４１．９刈０４７．４ｘｌＯ”　４．
０刈０３ｂ）１．５ｇｔｌｆＴｕＪｉｔ　１０％〃８．
７Ｘ　Ｏ’　２．４Ｘ１０４１．０ＸＩ０４５．］Ｘｌ
０３２０％　　”　　　ｅ、ＩＸＩｏ４３．１刈０’　
２．ｌＸ１Ｏ’　４．３ＸＩＯ”３０％　　”　　ＩＯ
，Ｏｘ　Ｏ’　３．２刈０４２．０ＸＩＯ’　Ｉｉ、０
ＸＩＯ”ｃ）２ｇｔｉＦＪ１ｊ　１０％　　　”　　　
９．５ＸＩＯ’　２．８Ｘ１０４２．０ＸｌＯ’　５．
８Ｘ　Ｏ”２０％　　”　　　８．２ＸＩＯ’　３．６
刈０’　２．４ｘ１０４Ｂ、２ｘｌＯ”３０％　　〃１
．０刈０５４．０ｘｌＯ’　２．８刈０４７．１刈０３
第６表の結果は、１０３リゾビウム／ルーサーン種子の
目標が達成でき、しかもそうして製造されたコーティン
グ種子が６ケ月以上の保存寿命を有することを証明して
いる。
これらの結果から、１０又は２０％ｗ／ｗＰＶＰＶＡ−
８−６３０懸濁液が最適であって、ルー８ サーン種子１００ｇ当たり播種片１．５〜２ｇ（即ち、
播種原率１．５〜２％）で貯蔵６ケ月後ににおいでｌＸ
１０３生存リゾビウム細胞数／種子の目標を達成しうる
と結論づけられる。
例７ クローバー種子の前播種 白花クローバー種子１００ｇを例５で記載されたように
ＰＶＰ−ＶＡ−８−６３０及びＲ，レグミノサラム次亜
種トリフォリイＴＡＩ含有ピートベース播種原で前播種
した。処理された種子をバッグに入れ、例５で記載され
たように貯蔵した。
間隔をあけて、種子当たりの生存リゾビウム細胞数を測
定した（第７表参照）。
第７表の結果は、１０３リゾビウム／クローバー種子が
達成でき、しかもそうして製造されたコーティング種子
が３ケ月以上の保存寿命を有することを証明している。
第７表 生存リゾビウム細胞数／種子 貯蔵期間（月） ７．９ＸｌＯ’ ８．８刈０４ ６．３刈０４ ３．６刈０４ ａ）Ｉｇ播播種　１０％ＰＶＰ−ＶＡ−８−６３０２．
６Ｘ１０”２０％　　／／　　　３．０ＸｌＯ” ３０％　　〃５．０刈０３ ｂ）２ｇ播種原　２０％　　　／／　　　３．８ＸＩＯ
３４，０Ｘ１０３ Ｂ、８ＸｌＯ” ６．０刈０３ ７．４刈０３ 例８ ＰＶＰ−ＶＡ−Ｓ−６３０含台ピートベースＢ、ジャポ
ニカム播種原（例２のように調製される）２ｇを室温で
２０％ｗ／ｗ　ＰＶＰ　−ＶＡ　−５６３０の水性懸濁
液３ｍｌと混合した。懸濁液を大豆種子３００ｇとスラ
リー化し、スラリーにサリーパウダー９ｋｇを散布した
。風乾後、種子ロットを放射線照射ポリテンバッグに移
し、密封し、室温で貯蔵した。間隔をあけて５０の種子
ロフトを取出し、種子力たりの生存リゾビウム細胞数を
測定した（第８表参照）。
第８表 貯蔵期間（月）　生存リゾビウム細胞数／種子０　　　
　　　　　　４．８ＸＩ０６ ２　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｂ、０Ｘ
１０５４　　　　　　３．４４０５ 例９ ＰＶＰ−ＶＡ−８−６３０含有ピートベースＢ、ジャポ
ニカム播種片（例２のように調製される）２ｇを色素ロ
ーダミンＢ５００又はブルー２３１２３　０．１２ｇ含
有２０％ｗ／ｖＰＶＰＶＡ−５−６３０懸濁液４．２ｍ
ｌと混合した。懸濁液を大豆種子３００ｇとスラリー化
し、スラリーを風乾した。種子ロットを放射線照射ポリ
テンバッグに移し、密封し、室温で貯蔵した。間隔をあ
けて５０の種子ロットを取出し、種子力たりの生存リゾ
ビウム細胞数を測定した（第９表参照）。
３１ 第９表 ０　　　　　　３、ｌｌＸ１０　　　８’、８ＸｌＯ’
２　　　　　　５、ｌＸ１０　　　５．４Ｘ１０５４　
　　　　　２．２ｘ　１０　　　３．１ｘ　１０５例１
０ ＰＶＰ−ＶＡ−８−６３０含自゛ピートベースＢ、ジャ
ポニカム播種片（例２のように調製される）２ｇを二酸
化チタンコーティングマイカ（ラスター）１００シルバ
ーパール０．６ｇ含有２０％ｗ／ｖ　ＰＶＰ−ＶＡ　−
Ｓ　−６３０の水性懸濁液４．２ｍｌと混合した。懸濁
液を大豆種子３００ｇとスラリーを風乾した。種子ロッ
トを放射線照射ポリテンバッグに移し、密封し、室温で
貯蔵した。
間隔をあけて５０の種子ロットを取出し、種子力たりの
生存リゾビウム細胞数を測定した（第１０表参照）。
　３２− 第１０表 貯蔵期間（月）　生存リゾビウム細胞数／種子０　　　
　　　　　　３．９Ｘ１０６ ２　　　　　　　　　４．４Ｘｌ（１５４２，６ＸｌＯ
５ 例１１ ＰＶＰ−ＶＡ−３−６３０含有ピートベースＢ、ジャポ
ニカム播種片（例２のように調製される）２ｇをローダ
ミンＢ５００又はブルー２３１２３のいずれか０．１２
ｇ及び１００シルバーバール６ｇ含有２０％ｖ／ｖ　Ｐ
ＶＰ　−ＶＡ　−５６３０水性懸濁液４．２ｍｌと混合
した。懸濁液を大豆種子３００ｇとスラリー化し、スラ
リーを風乾した。種子ロットを放射線照射ポリテンバッ
グに移し、密封し、室温で貯蔵した。間隔をあけて５０
の種子ロットを取出し、種子力たりの生存リゾビウム細
胞数を測定した（第１１表参照）。
第１１表 ６ ０　　　　　２．８ｘ　１０　　　　Ｌ４ｘ　１０６２
　　　　　２．８Ｘ　１０　　　３．ＯＸ　１０５４　
　　　　２．３ｘ　１０　　　２．ｌＸ　１０５例１２ 殺真菌剤耐性リゾビウム株の選択 殺真菌剤耐性株をレニー（Ｒｅｎｎｌｅ）　（１９８６
年）の方法により産生じた。Ｒ，メリロチＲＣＲ２００
１の純粋培養物をメタラキシル０．２０．４０．６０．
１００又は５００　ｐｐｍが配合されたＴＹ培地〔ベー
リンガー（Ｂｅｒｉｎｇｅｒ）、１９７４年〕に移した
。株は、それらがメクラキシル１１００ｐｐ存在下で増
殖しうる場合耐性であって、それらがメタラキシル５０
０１）Ｉ）ｆｉｌに耐性である場合免疫性であると考え
られる。１４日以内で増殖性を示す自然突然変異体をメ
タラキシル非含有ＴＹ培地で再培養し、しかる後メタラ
キシルを次第に濃度増加させて含有したＴＹ培地で再培
養した。メタラキシルに対して観察される耐性の遺伝的
安定性を確保するため、この操作を１年間にわたり３回
繰返した。
同様の操作を行い、カルバチイン及びチラムの双方に対
して耐性のＢ、ジャポニカムＲＣＲ３４０７変異体を得
た。
例１３ ＰＶＰ−ＶＡ−８−６３０とメタラキシル耐性Ｒ，メリ
ロチ株又はカルバチイン及びチラム耐性Ｂ、ジャポニカ
ム株とを含有したピートベース播種片を例２で記載され
たように調製した。
Ｒ，メリロチ播種原２ｇをアブロンＦＬ（Ａｐｒｏｎ　
ＰＬＴＭ）　　（メクラキシル２８．３５％含有；供給
者ガスタフソン（Ｇｕｓｔａｆ’５ｏｎ）　）　０．　
　］　２Ｅ；ｇ含有２０％ｗ／ｗ　ＰＶＰ−ＶＡ−Ｓ　
−６３０水性懸濁液３ｍｌと混合した。懸濁液をルーサ
ーン種子１００ｇとスラリー化し、スラリーを風乾した
。
Ｂ、ジャポニカム播種片２ｇをアンカー（Ａｎｃｈｏｒ
ＴＭ）　　Ｃカルバチイン６６．７ｇ／ｌ及びチラム６
６．７ｇ、！含有；倶給者ユニロイヤル　３５− （Ｕｎｉｒｏｙａｌ））　１　、　８ｍｌ含有２０％ｗ
／ｗＰＶＰ−ＶＡ−８−６３０水性懸濁液４２ｍ１と混
合した。
懸濁液を大豆種子３００ｇとスラリー化し、スラリーを
風乾した。
種子ロットを放射線照射ポリテンバッグに移し、密封し
、室温で貯蔵した。間隔をあけて５ｏの種子ロットを取
出し、種子当たりの生存リゾビウム細胞数を測定した（
第１２表参照）。
第１２表 ０　　　　　７．５Ｘ　１０’　　　４．８Ｘ　１０５
２　　　　　３．２ｘ１０　　　３．１ｘ１０５４　　
　　　８．１Ｘ１０　　　２．２Ｘ１０５例１４ 例５で記載されたように大豆種子を前播種するため同様
の操作が、ＰＶＰ−ＶＡ−８−６３０＋、：代えて下記
ポリマーのいずれかで用いることかできる：ポリ（メチ
ルビニルエーテル）無水マレイン酸コポリマー、メチル
ビニルエーテル及び無水６− マレイン酸のコポリマーの遊離酸、ビニルピロリドン／
スチレンコポリマー、部分的加水分解ポリビニルアルコ
ール、ビニルアセテート／ブチルアクリレートコポリマ
ー、ビニルアセテートホモポリマー、ビニルアセテート
／ベオバ１０／ブチルアクリレートターポリマー、アク
リル酸コポリマ、スチレン／アクリル酸エステルコポリ
マービニルアセテート／エチレンコポリマー並びにポリ
ビニルアセテート。
例１５ ルーサーン種子を例７で記載された方法によりＲ，メリ
ロチ及び色素ブルー２３１２３でコーティングした。コ
ーテイング後５ケ月目に、種子を野外試験でまき、得ら
れた植物の成長性を未処理種子から得られる植物の場合
と比較した。種まき後１０週１に長さ４０ｃｍの列から
の植物を切断し、植物上部の重量を測定した（第１３表
）。Ｒ，メリロチによるルーサーン種子の前播種で、植
物成長性が向上した。
第１３表 部位１３９ 部位２５９ １未播種種子と比較 例１６ 大豆種子を例９で記載された方法によりＢ、ジャポニカ
ム及び色素ローダミンＢ５００でコーティングした。コ
ーテイング後３ケ月目に、種子を野外でまいた。試験を
行い採取して、根瘤数、重量及び種子収率を測定した（
第１４表）。Ｂ、ジャポニカムによる大豆種子の前播種
で、未播種種子と比較し種子収率、根瘤数及び重量が増
加した。
参考文献 ベーリンガー、Ｊ、Ｅ、（１９７４年）：リゾビウム・
レグミノサラムにおけるＲ因子移動、ジャーナル・オブ
・ゼネラル・ミクロバイオロジー（ｊｏｕｒｎａｌ　ｏ
ｆ　Ｇｅｎｅｒａｌ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ）　、
第８４巻。
第１８８−１９８頁 レニー、Ｒ，Ｊ、　　（１９８６年）：リゾビウム・フ
ァセオリーファセオラス・ブルガリス（Ｒｂｉｚｏｂ］
ｕｍ　　ｐｈａｓｅｏｌｉ−Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ　　ｖ
ｕｌｇａｒｉｓ　　）Ｌ　、　Ｎ　２固定共生下におい
てキャブタン耐性に関する選択、カナデイアン・ジャー
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Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ’　５ｏｉｌＳｃ　ｉ　ｅｎｃｅ
）、第６６巻８第１．４３−１５０頁根瘤数 （植物ＩＯの平均） 未播種　　　０．３ 前播種　　３０．０ 第１４表 根瘤新鮮重量　　　種子収率 （ｇ／１０植物）（プツシエル／エーカ３．５　　　　
　　３６．１ ９．４　　　　　　５１．８ ）

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １、キャリア媒体、種子から成長する植物に対して有益
    な効果を有する少なくとも１種の微生物及び粘着性ポリ
    マーを含有した播種原組成物で種子をスラリー化し、そ
    の際にスラリー化が粘着性ポリマーの水性懸濁液の存在
    下で行われ、得られた製品を３０℃以下の温度で風乾す
    ることを特徴とするコーティングされた種子の製造方法
    。 ２、懸濁液中の粘着性ポリマーがビニルピロリドン及び
    ビニルアセテートのコポリマーである、請求項１に記載
    の方法。 ３、粘着性ポリマーが各重量比で５０：５０〜７０：３
    ０のビニルピロリドン及びビニルアセテートのコポリマ
    ーである、請求項２に記載の方法。 ４、懸濁液が１０〜２０重量％のコポリマーを含有する
    、請求項２又は３に記載の方法。５、播種原対種子の割
    合が種子のタイプに応じて０．５〜２．５重量％の範囲
    から選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の
    方法。 ６、懸濁液中の粘着性ポリマーが播種原組成物中の場合
    と同一である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方
    法。 ７、種子がマメ科植物種子で、微生物がリゾビウム細菌
    である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。 ８、キャリア媒体がピートである、請求項１〜７のいず
    れか一項に記載の方法。 ９、コーティングされた種子が風乾後に粉末粘土で散布
    される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。 １０、少なくとも１種の色素がコーティング中に配合さ
    れている、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。 １１、適合しうる殺真菌剤がコーティング中に配合され
    ている、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。 １２、キャリア媒体、種子又は得られる植物に対して有
    益な効果を有する微生物及び粘着性ポリマー物質を含有
    した播種原組成物でコーティングされかつ少なくとも１
    ０＾５生物／種子の平均担持数及び標準貯蔵条件下にお
    いて少なくとも５ケ月の保存寿命を有するコーティング
    された大豆種子。 １３、キャリア媒体、種子又は得られる植物に対して有
    益な効果を有する微生物及び粘着性ポリマー物質を含有
    した播種原組成物でコーティングされかつ少なくとも１
    ０＾３生物／種子の平均担持数及び標準貯蔵条件下にお
    いて少なくとも６ケ月の保存寿命を有するコーティング
    されたルーサーン種子。 １４、キャリア媒体、種子又は得られる植物に対して有
    益な効果を有する微生物及び粘着性ポリマー物質を含有
    した播種原組成物でコーティングされかつ少なくとも１
    ０＾３生物／種子の平均担持数及び標準貯蔵条件下にお
    いて少なくとも３ケ月の保存寿命を有するコーティング
    されたクローバー種子。
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