JPH05192050A - リゾビウム接種材料の製法 - Google Patents
リゾビウム接種材料の製法Info
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- JPH05192050A JPH05192050A JP3030413A JP3041391A JPH05192050A JP H05192050 A JPH05192050 A JP H05192050A JP 3030413 A JP3030413 A JP 3030413A JP 3041391 A JP3041391 A JP 3041391A JP H05192050 A JPH05192050 A JP H05192050A
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- legume
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- A01G7/00—Botany in general
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
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- C12R2001/41—Rhizobium
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 本発明の目的は、野外条件で土着のリゾビウ
ム株に打ち勝つことのできる高窒素固定性リゾビウム株
を作成する方法を提供することである。 【構成】 マメ科植物の収穫高を高める方法であって、
(a) リゾビウム（Rhizobium)菌株をマメ科植物の種子
のひき割りを含む培地にさらす工程、及び(b) 工程
(a) で得られたリゾビウム株をマメ科植物に接種する工
程を含む方法。
ム株に打ち勝つことのできる高窒素固定性リゾビウム株
を作成する方法を提供することである。 【構成】 マメ科植物の収穫高を高める方法であって、
(a) リゾビウム（Rhizobium)菌株をマメ科植物の種子
のひき割りを含む培地にさらす工程、及び(b) 工程
(a) で得られたリゾビウム株をマメ科植物に接種する工
程を含む方法。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はマメ科植物の細菌学的な
共生に関する。特に、新規で高窒素固定性を有するリゾ
ビウム菌株の競合性の増加に関する。
共生に関する。特に、新規で高窒素固定性を有するリゾ
ビウム菌株の競合性の増加に関する。
【０００２】
【従来の技術】マメ科植物はリゾビウム菌と共生関係を
持っている。細菌はマメ科植物の根の根瘤に生息し、空
気中の窒素を蛋白質のような生物学的必須化合物の合成
に生物学的に有用な窒素に変換あるいは固定する。リゾ
ビウム菌による窒素固定はまた、窒素栄養物が土壌に残
るので、後に植えられる非窒素固定作物にとって有益で
ある。えんどう豆、そら豆、アルファルファは、リゾビ
ウム菌との共生関係が可能な農業的に重要なマメ科植物
の例である。
持っている。細菌はマメ科植物の根の根瘤に生息し、空
気中の窒素を蛋白質のような生物学的必須化合物の合成
に生物学的に有用な窒素に変換あるいは固定する。リゾ
ビウム菌による窒素固定はまた、窒素栄養物が土壌に残
るので、後に植えられる非窒素固定作物にとって有益で
ある。えんどう豆、そら豆、アルファルファは、リゾビ
ウム菌との共生関係が可能な農業的に重要なマメ科植物
の例である。
【０００３】各種のリゾビウム種は、それぞれただ１つ
の特定のマメ科植物種と共生関係を形成することが可能
である。たとえば、リゾビウム ジャポニカム（Rhizob
iumjaponicum)は大豆の根にのみ根瘤を作る。農業にお
いてよく見られる実例は、土壌あるいは種子自体に適当
なリゾビウム培養物を接種することである。この接種は
効率のよい共生を促進し、マメ科植物の高収穫量を導
く。
の特定のマメ科植物種と共生関係を形成することが可能
である。たとえば、リゾビウム ジャポニカム（Rhizob
iumjaponicum)は大豆の根にのみ根瘤を作る。農業にお
いてよく見られる実例は、土壌あるいは種子自体に適当
なリゾビウム培養物を接種することである。この接種は
効率のよい共生を促進し、マメ科植物の高収穫量を導
く。
【０００４】マメ科植物の収穫量を増加させることの重
要性のため、リゾビウム株の窒素固定能力の改善を目的
とした大量の研究が行われている。不幸にも、改善され
たリゾビウム株は、実験室あるいは温室での試験では強
化された窒素固定能を示すが、改善された株はしばしば
より劣った窒素固定能を持つ土着のリゾビウム株によっ
て退けられてしまう。そのような特殊な土壌あるいは環
境下では土着の低窒素固定株がより効率よく発育し、導
入した株を圧倒してしまうので、このように導入した高
窒素固定能をもつ株は、収穫量を野外条件で増加させる
には有効ではない。
要性のため、リゾビウム株の窒素固定能力の改善を目的
とした大量の研究が行われている。不幸にも、改善され
たリゾビウム株は、実験室あるいは温室での試験では強
化された窒素固定能を示すが、改善された株はしばしば
より劣った窒素固定能を持つ土着のリゾビウム株によっ
て退けられてしまう。そのような特殊な土壌あるいは環
境下では土着の低窒素固定株がより効率よく発育し、導
入した株を圧倒してしまうので、このように導入した高
窒素固定能をもつ株は、収穫量を野外条件で増加させる
には有効ではない。
【０００５】導入する高窒素固定能を持つ株をより競争
的にする１つの方法は、宿主であるマメ科植物との共生
関係の形成を促進するように、導入するリゾビウムを培
養することである。マメ科植物の根の滲出物は、リゾビ
ウムとマメ科植物の共生の試験管内における確立をもた
らす化学的刺激物質を含む（カリヤーら、（Currier,W.
W. and G.A. Strobel)“Chemotaxis of Rhizobium sp
p. to plant root exudates," Plant Physiol. 57:82
0-823(1979); "Characterization and biological acti
vity of trefoil(Lotus corniculatus)chemotactin," P
lant Sci. Lett 21:159-166(1981); "Role of Roo
t exudates on in vitro establishment of symbio
sis between Cicer and Rhizobium." In: Symbiotic
Nitrogen Fixation (Ed. B.S. Ghai), USG Publis
hers and Distributors, Ludiana,India, pp 35-42(198
4).）。
的にする１つの方法は、宿主であるマメ科植物との共生
関係の形成を促進するように、導入するリゾビウムを培
養することである。マメ科植物の根の滲出物は、リゾビ
ウムとマメ科植物の共生の試験管内における確立をもた
らす化学的刺激物質を含む（カリヤーら、（Currier,W.
W. and G.A. Strobel)“Chemotaxis of Rhizobium sp
p. to plant root exudates," Plant Physiol. 57:82
0-823(1979); "Characterization and biological acti
vity of trefoil(Lotus corniculatus)chemotactin," P
lant Sci. Lett 21:159-166(1981); "Role of Roo
t exudates on in vitro establishment of symbio
sis between Cicer and Rhizobium." In: Symbiotic
Nitrogen Fixation (Ed. B.S. Ghai), USG Publis
hers and Distributors, Ludiana,India, pp 35-42(198
4).）。
【０００６】マメ科植物の根の滲出液で処理したリゾビ
ウム菌は、植物ホルモン合成と根瘤化の特質を変えてい
る（ガルシア−ロドリケスら（ Garcia-Rodriquez, T.,
etal.), "Effects of legume root exudates on IAA p
roduction of Rhizobium Meliloti,"Pol. J. Soil Sci.
14:45-52(1981);バグワットら（Bhagwat, A.A.and J.
Thomas),"Legume- Rhizobium interactions: host i
nduced alterations in capsular poly-saccharides an
dinfectivity of cowpea rhizobia," Arch. Micobiol.
140:260-264(1984); ダッゾら（Dazzo, F.B., et al.),
“Alteration of the trifolin A-binding capsule of
Rhizobium tifplii 0403 by enzymes released from
clover roots," Appl. Environ. Micobiol. 44:478
-490(1982).)。
ウム菌は、植物ホルモン合成と根瘤化の特質を変えてい
る（ガルシア−ロドリケスら（ Garcia-Rodriquez, T.,
etal.), "Effects of legume root exudates on IAA p
roduction of Rhizobium Meliloti,"Pol. J. Soil Sci.
14:45-52(1981);バグワットら（Bhagwat, A.A.and J.
Thomas),"Legume- Rhizobium interactions: host i
nduced alterations in capsular poly-saccharides an
dinfectivity of cowpea rhizobia," Arch. Micobiol.
140:260-264(1984); ダッゾら（Dazzo, F.B., et al.),
“Alteration of the trifolin A-binding capsule of
Rhizobium tifplii 0403 by enzymes released from
clover roots," Appl. Environ. Micobiol. 44:478
-490(1982).)。
【０００７】マメ科植物の根の滲出液はまた、アルファ
ルファ植物の実験で示されているように、マメ科植物の
根瘤化に必須である nodＣと nodＡ遺伝子のたん白質生
成物の発現を変化させる（エゲルホフら（Egelhoff, T.
T.and S.R.Long),"Rhizobiummeliloti genes: identif
ication of nodDABC gene products, purificationof
nodA protein, and expression of nodA in Rhizobium
melicoti," J. Bacteriol. 164-591-599(1985).)。
ルファ植物の実験で示されているように、マメ科植物の
根瘤化に必須である nodＣと nodＡ遺伝子のたん白質生
成物の発現を変化させる（エゲルホフら（Egelhoff, T.
T.and S.R.Long),"Rhizobiummeliloti genes: identif
ication of nodDABC gene products, purificationof
nodA protein, and expression of nodA in Rhizobium
melicoti," J. Bacteriol. 164-591-599(1985).)。
【０００８】根による滲出物の量はごくわずかなので、
根の滲出物の利用は実用的でないし、商業的な農業への
応用にはたいへん高価である。他の処置方法を見つける
ことが有利であろう。マメ科植物の根に見い出された化
学的刺激物質はまた、マメ科植物の種子にも存在する
（シートンら（Seaton, P.J. and W.W. Currier), " Ch
emotaxis of Rhizobium spp. to alfalfa root and se
ed exudates," Plant Physiol. (Suppl.) 63:113 (197
9).)。
根の滲出物の利用は実用的でないし、商業的な農業への
応用にはたいへん高価である。他の処置方法を見つける
ことが有利であろう。マメ科植物の根に見い出された化
学的刺激物質はまた、マメ科植物の種子にも存在する
（シートンら（Seaton, P.J. and W.W. Currier), " Ch
emotaxis of Rhizobium spp. to alfalfa root and se
ed exudates," Plant Physiol. (Suppl.) 63:113 (197
9).)。
【０００９】最近、アルファルファの種子の洗浄物にリ
ゾビウム メリロッティ(Rhizobiummeliloti)の nod遺
伝子の発現を刺激する因子が含まれていることが発表さ
れた。
ゾビウム メリロッティ(Rhizobiummeliloti)の nod遺
伝子の発現を刺激する因子が含まれていることが発表さ
れた。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、リゾビウム
菌の１株をマメ科植物の種子のひき割りあるいはマメ科
植物の種子のひき割りの抽出物を含む培地で培養するこ
と、マメ科植物の種子に培養した株を接種すること、そ
して接種したマメ科植物の種子を発芽させることによっ
てマメ科植物の収穫量を高める方法である。
菌の１株をマメ科植物の種子のひき割りあるいはマメ科
植物の種子のひき割りの抽出物を含む培地で培養するこ
と、マメ科植物の種子に培養した株を接種すること、そ
して接種したマメ科植物の種子を発芽させることによっ
てマメ科植物の収穫量を高める方法である。
【００１１】本発明の目的は、野外条件で土着のリゾビ
ウム株に打ち勝つことのできる高窒素固定性リゾビウム
株を作成する方法を提供することである。本発明の１つ
の利点は、その方法が便利で経済的であるということで
ある。本発明の他の目的、利点そして特徴は次の詳細な
説明より明らかになるであろう。
ウム株に打ち勝つことのできる高窒素固定性リゾビウム
株を作成する方法を提供することである。本発明の１つ
の利点は、その方法が便利で経済的であるということで
ある。本発明の他の目的、利点そして特徴は次の詳細な
説明より明らかになるであろう。
【００１２】
【課題を解決するための手段】本発明は農地に導入され
るリゾビウム接種材料に向けられたものであり、マメ科
植物の根が根瘤化する際にこの導入された株が土着のリ
ゾビウム株とより有効に競い合うことができるようにす
ることを目的とするものである。導入しようとするリゾ
ビウム株をマメ科植物の種子のひき割り、あるいは種子
のひき割りの抽出物で培養することは、この導入しよう
とする株に土着の株との競争における有効的な機先を与
えることが見出された。ここであげる証拠は、種子のひ
き割りの組成物が接種する株を根瘤着生部位（nodulati
on niches)のためによりよく競い合えるように整えるこ
とと、さらにこのような株がマメ科植物の収穫を増すの
に有効であることを示唆している。
るリゾビウム接種材料に向けられたものであり、マメ科
植物の根が根瘤化する際にこの導入された株が土着のリ
ゾビウム株とより有効に競い合うことができるようにす
ることを目的とするものである。導入しようとするリゾ
ビウム株をマメ科植物の種子のひき割り、あるいは種子
のひき割りの抽出物で培養することは、この導入しよう
とする株に土着の株との競争における有効的な機先を与
えることが見出された。ここであげる証拠は、種子のひ
き割りの組成物が接種する株を根瘤着生部位（nodulati
on niches)のためによりよく競い合えるように整えるこ
とと、さらにこのような株がマメ科植物の収穫を増すの
に有効であることを示唆している。
【００１３】大豆の種子のひき割りは農産物供給店で得
ることのできるすぐに入手できる日用品である。種子の
ひき割りを得るマメ科植物の個々の種類は重要なものと
は思われない。種子のひき割りの抽出物は、水と種子の
ひき割りの混合物、なるべくなら水１部、種子のひき割
り２部の比率で混合した混合物をろ過することによって
得られるろ過液である。種子のひき割りの抽出物はこの
ようにおそらく種子のひき割り自体の水溶性組成物を含
む。種子のひき割りまたは種子の引き割りの抽出物に使
う種子は、培養する個々のリゾビウム株にとって適合す
る宿主の種子である。すなわち、リゾビウム ジャポニ
カムの場合は、大豆の種子のひき割りである。
ることのできるすぐに入手できる日用品である。種子の
ひき割りを得るマメ科植物の個々の種類は重要なものと
は思われない。種子のひき割りの抽出物は、水と種子の
ひき割りの混合物、なるべくなら水１部、種子のひき割
り２部の比率で混合した混合物をろ過することによって
得られるろ過液である。種子のひき割りの抽出物はこの
ようにおそらく種子のひき割り自体の水溶性組成物を含
む。種子のひき割りまたは種子の引き割りの抽出物に使
う種子は、培養する個々のリゾビウム株にとって適合す
る宿主の種子である。すなわち、リゾビウム ジャポニ
カムの場合は、大豆の種子のひき割りである。
【００１４】リゾビウム株はなるべくならバーミキュラ
イトと栄養源の混合物の中で培養する。その栄養源と
は、できれば酵母の抽出物がよく、１リットル中に１０
ｇのマンニトール、１ｇの酵母抽出物、0.２ｇのMgSO4
・7H2O、0.２ｇのNaCl、 0.65ｇのK2PO4 ・3H2O、6.７mg
のFeCl3 ・6H2O、4.２μｌのHCl を含むマンニトール
（YEM)培養液がよい。
イトと栄養源の混合物の中で培養する。その栄養源と
は、できれば酵母の抽出物がよく、１リットル中に１０
ｇのマンニトール、１ｇの酵母抽出物、0.２ｇのMgSO4
・7H2O、0.２ｇのNaCl、 0.65ｇのK2PO4 ・3H2O、6.７mg
のFeCl3 ・6H2O、4.２μｌのHCl を含むマンニトール
（YEM)培養液がよい。
【００１５】剥離したバーミキュライトをWiley 製粉機
で粒子サイズ４５／８０mech (U.S.Standard Sieves)に
まで粉砕し、１ｇの乾燥バーミキュライトにつき1.５ml
のＹＥＭ培養液と共に小さな容器に入れて圧熱滅菌す
る。細菌接種物をバーミキュライト１ｇあたり１０2 か
ら１０7 細菌数の濃度で圧熱滅菌した培地に加える。も
し種子のひき割りをバーミキュライトと栄養物に加える
ならば、なるべくバーミキュライト４部に対して種子の
ひき割り１部の比率がよい。もし種子のひき割りの抽出
物を使うのなら、２倍量のＹＥＭ培養液に１：１の比率
で混ぜることがよい。
で粒子サイズ４５／８０mech (U.S.Standard Sieves)に
まで粉砕し、１ｇの乾燥バーミキュライトにつき1.５ml
のＹＥＭ培養液と共に小さな容器に入れて圧熱滅菌す
る。細菌接種物をバーミキュライト１ｇあたり１０2 か
ら１０7 細菌数の濃度で圧熱滅菌した培地に加える。も
し種子のひき割りをバーミキュライトと栄養物に加える
ならば、なるべくバーミキュライト４部に対して種子の
ひき割り１部の比率がよい。もし種子のひき割りの抽出
物を使うのなら、２倍量のＹＥＭ培養液に１：１の比率
で混ぜることがよい。
【００１６】バーミキュライトと栄養物と接種物の混合
物は、なるべくなら室温で３０日間培養する。適当な発
育後、培養物を種子１ポンドあたりバーミキュライト培
養物６ｇ（湿量）の比率で湿った大豆の種子と混ぜ、種
子が覆われるまで混合する。覆われた種子をバーミキュ
ライトで満たしたポットで発芽させる。種子のひき割
り、または種子のひき割りの滲出物を含んだ培地で培養
したリゾビウム株と、種子のひき割り、または種子のひ
き割りの滲出物なしで培養した株との競合は、アンピシ
リンに対して差異ある感受性をもつ２種のリゾビウム株
を使い、２つの菌株のそれぞれの相対的な根瘤占有率を
決定することで測定できる。培地１mlあたりアンピシリ
ン濃度４０μg では、リゾビウム ジャポニカムＩＡ２
８７５株はアンピシリンに対して感受性があるが、リゾ
ビウム ジャポニカム Ｋ５６７株にはない。
物は、なるべくなら室温で３０日間培養する。適当な発
育後、培養物を種子１ポンドあたりバーミキュライト培
養物６ｇ（湿量）の比率で湿った大豆の種子と混ぜ、種
子が覆われるまで混合する。覆われた種子をバーミキュ
ライトで満たしたポットで発芽させる。種子のひき割
り、または種子のひき割りの滲出物を含んだ培地で培養
したリゾビウム株と、種子のひき割り、または種子のひ
き割りの滲出物なしで培養した株との競合は、アンピシ
リンに対して差異ある感受性をもつ２種のリゾビウム株
を使い、２つの菌株のそれぞれの相対的な根瘤占有率を
決定することで測定できる。培地１mlあたりアンピシリ
ン濃度４０μg では、リゾビウム ジャポニカムＩＡ２
８７５株はアンピシリンに対して感受性があるが、リゾ
ビウム ジャポニカム Ｋ５６７株にはない。
【００１７】
実施例１リゾビウム ジャポニカム Ｋ５６７株を、４部のバー
ミキュライトとＹＥＭ培養液および１部のひいたセンテ
ニアル大豆種子の混合液中で培養した。Ｋ５６７株は広
範囲な生来競合的な株からの突然変異と選別によって開
発された高窒素固定性変異株である。リゾビウム ジャ
ポニカム ＩＡ２８７５は広範囲な生来競合的な株であ
りバーミキュライトとＹＥＭ培養液のみで培養した。セ
ンテニアル大豆種子は２種のバーミキュライト培養液の
混合物で覆われ、バーミキュライトを満たしたポットの
中で発芽させた。
ミキュライトとＹＥＭ培養液および１部のひいたセンテ
ニアル大豆種子の混合液中で培養した。Ｋ５６７株は広
範囲な生来競合的な株からの突然変異と選別によって開
発された高窒素固定性変異株である。リゾビウム ジャ
ポニカム ＩＡ２８７５は広範囲な生来競合的な株であ
りバーミキュライトとＹＥＭ培養液のみで培養した。セ
ンテニアル大豆種子は２種のバーミキュライト培養液の
混合物で覆われ、バーミキュライトを満たしたポットの
中で発芽させた。
【００１８】温室で３週間発育させた後、ＩＡ２８７５
と比較したＫ５６７による大豆の根瘤占有率は、Ｋ５６
７とＩＡ２８７５の差異ある抗生物質耐性によって測定
された。ＩＡ２８７５は抗生物質アンピシリンに対して
感受性があるが、Ｋ５６７は耐性をもつ。このパーセン
テージは、種子のひきわりなしでバーミキュライトとＹ
ＥＭ培養液のみで培養したＫ５６７とＩＡ２８７５の両
株の混合物で覆われた種子グループから成長した植物を
使った対照標本におけるＫ５６７による相対的根瘤占有
率と比較した。対照群と比較して種子のひきわりで処理
した標本でのＫ５６７による根瘤占有率の平均増加率は
１5.６３％であった。種子のひきわりにさらしたＫ５６
７を接種した種子から発育した大豆は対照群と比較して
見た目にも大きく育ちがよかった。
と比較したＫ５６７による大豆の根瘤占有率は、Ｋ５６
７とＩＡ２８７５の差異ある抗生物質耐性によって測定
された。ＩＡ２８７５は抗生物質アンピシリンに対して
感受性があるが、Ｋ５６７は耐性をもつ。このパーセン
テージは、種子のひきわりなしでバーミキュライトとＹ
ＥＭ培養液のみで培養したＫ５６７とＩＡ２８７５の両
株の混合物で覆われた種子グループから成長した植物を
使った対照標本におけるＫ５６７による相対的根瘤占有
率と比較した。対照群と比較して種子のひきわりで処理
した標本でのＫ５６７による根瘤占有率の平均増加率は
１5.６３％であった。種子のひきわりにさらしたＫ５６
７を接種した種子から発育した大豆は対照群と比較して
見た目にも大きく育ちがよかった。
【００１９】実施例２リゾビウム ジャポニカム Ｋ５６７をバーミキュライ
ト、ＹＥＭ培養液とセンテニアル種子のひき割りの水性
抽出物の混合物中で培養した。リゾビウム ジャポニカ
ム ＩＡ２８７５はバーミキュライトとＹＥＭ培養液中
で培養した。センテニアル大豆の種子は、２種のバーミ
キュライト培養液の混合物で覆われバーミキュライトで
満たしたポットの中で発芽させた。
ト、ＹＥＭ培養液とセンテニアル種子のひき割りの水性
抽出物の混合物中で培養した。リゾビウム ジャポニカ
ム ＩＡ２８７５はバーミキュライトとＹＥＭ培養液中
で培養した。センテニアル大豆の種子は、２種のバーミ
キュライト培養液の混合物で覆われバーミキュライトで
満たしたポットの中で発芽させた。
【００２０】温室で３週間発育させた後、植物における
Ｋ５６７による根瘤占有率は、対照群の植物におけるＫ
５６７による根瘤占有率と比較された。対照群の植物の
種子は、水性抽出物にさらしていないＫ５６７とＩＡ２
８７５のバーミキュライト培養液の混合物に覆われてい
る。種子のひき割りの抽出物で処理したＫ５６７による
根瘤占有率の平均的増加率は、対照群と比較して１6.８
０％であった。種子のひき割りの抽出物にさらしたＫ５
６７を接種した種子から発育した大豆の植物は再び対照
群の植物に比べて見た目にも大きかった。
Ｋ５６７による根瘤占有率は、対照群の植物におけるＫ
５６７による根瘤占有率と比較された。対照群の植物の
種子は、水性抽出物にさらしていないＫ５６７とＩＡ２
８７５のバーミキュライト培養液の混合物に覆われてい
る。種子のひき割りの抽出物で処理したＫ５６７による
根瘤占有率の平均的増加率は、対照群と比較して１6.８
０％であった。種子のひき割りの抽出物にさらしたＫ５
６７を接種した種子から発育した大豆の植物は再び対照
群の植物に比べて見た目にも大きかった。
【００２１】実施例３ 実施例３は、別の種類の大豆の種子が処理されること
と、Ｋ５６７ではなくリゾビウム ジャポニカム ＩＡ
２８７５が水性抽出液で処理されることを除けば、実施
例２とまったく同じである。リゾビウム ジャポニカム
ＩＡ２８７５をバーミキュライトとＹＥＭ培養液とウ
ィリアムス８２大豆種子のひき割りの水性抽出物の混合
物中で培養した。リゾビウム ジャポニカム Ｋ５６７
をバーミキュライトとＹＥＭ培養液中で培養した。ウィ
リアムス８２種子は２種の培養物の混合液で覆われた。
と、Ｋ５６７ではなくリゾビウム ジャポニカム ＩＡ
２８７５が水性抽出液で処理されることを除けば、実施
例２とまったく同じである。リゾビウム ジャポニカム
ＩＡ２８７５をバーミキュライトとＹＥＭ培養液とウ
ィリアムス８２大豆種子のひき割りの水性抽出物の混合
物中で培養した。リゾビウム ジャポニカム Ｋ５６７
をバーミキュライトとＹＥＭ培養液中で培養した。ウィ
リアムス８２種子は２種の培養物の混合液で覆われた。
【００２２】温室で３週間発育させた後、ＩＡ２８７５
による根瘤占有率は、ＩＡ２８７５とＫ５６７の差異あ
る抗生物質感受性によって決定された。このパーセンテ
ージは、種子のひき割りの抽出物にさらしていないＫ５
６７とＩＡ２８７５のバーミキュライト培養物の混合物
に覆われた対照群の種子から発育した植物におけるＩＡ
２８７５による根瘤占有率と比較された。対照群と比べ
て、種子のひき割りの抽出物で処理したＩＡ２８７５に
よる根瘤占有率における平均的増加率は１3.８０％であ
った。種子のひき割りの抽出物にさらしたＩＡ２８７５
を接種した種子から発育した大豆の植物は再び、対照群
の植物に比べて見た目にも大きかった。
による根瘤占有率は、ＩＡ２８７５とＫ５６７の差異あ
る抗生物質感受性によって決定された。このパーセンテ
ージは、種子のひき割りの抽出物にさらしていないＫ５
６７とＩＡ２８７５のバーミキュライト培養物の混合物
に覆われた対照群の種子から発育した植物におけるＩＡ
２８７５による根瘤占有率と比較された。対照群と比べ
て、種子のひき割りの抽出物で処理したＩＡ２８７５に
よる根瘤占有率における平均的増加率は１3.８０％であ
った。種子のひき割りの抽出物にさらしたＩＡ２８７５
を接種した種子から発育した大豆の植物は再び、対照群
の植物に比べて見た目にも大きかった。
【００２３】このように上記の実施例は、マメ科植物の
種子のひき割りあるいはマメ科植物の種子のひき割りの
抽出物によるリゾビウム接種材料株の前処理の有効性を
しめしている。データは、使用された２種の株の相対的
な競合性が、種子のひき割り抽出物を発酵培養液へ添加
することによって変化し得ることを示しているので、野
外の接種材料作成の際にこのような添加物を使用する
と、対象となるマメ科植物の収穫量が改良されることに
なろう。種子のひき割りまたは種子のひき割りの抽出物
は、このように簡単に発酵過程に添加することができ、
その時期は発酵過程の開始時でも最終段階でもよいの
で、接種細菌は土壌に接種する際に競合するように調製
されよう。
種子のひき割りあるいはマメ科植物の種子のひき割りの
抽出物によるリゾビウム接種材料株の前処理の有効性を
しめしている。データは、使用された２種の株の相対的
な競合性が、種子のひき割り抽出物を発酵培養液へ添加
することによって変化し得ることを示しているので、野
外の接種材料作成の際にこのような添加物を使用する
と、対象となるマメ科植物の収穫量が改良されることに
なろう。種子のひき割りまたは種子のひき割りの抽出物
は、このように簡単に発酵過程に添加することができ、
その時期は発酵過程の開始時でも最終段階でもよいの
で、接種細菌は土壌に接種する際に競合するように調製
されよう。
【００２４】本発明は上記に述べた特定の実施例や具体
的態様に限定されるものではなく、請求の範囲に含まれ
るすべての態様を包含するものと解されるべきである。
的態様に限定されるものではなく、請求の範囲に含まれ
るすべての態様を包含するものと解されるべきである。
Claims (14)
- 【請求項１】 マメ科植物の収穫高を高める方法であっ
て、 (a) リゾビウム（Rhizobium)菌株をマメ科植物の種子
のひき割りを含む培地にさらす工程、及び (b) 工程(a) で得られたリゾビウム株をマメ科植物に
接種する工程を含む方法。 - 【請求項２】 種子のひき割りを含む培養基がバーミキ
ュライトと栄養源である請求項１記載の方法。 - 【請求項３】 バーミキュライトと種子のひき割りの比
が４：１である請求項２記載の方法。 - 【請求項４】 栄養源がＹＥＭ培養液である請求項２記
載の方法。 - 【請求項５】 マメ科植物の種子を前記のリゾビウム株
のバーミキュライト培養物で覆うことによりマメ科植物
を接種する請求項２記載の方法。 - 【請求項６】 マメ科植物の種子を前記のリゾビウム株
で覆うことによりマメ科植物を接種する請求項１記載の
方法。 - 【請求項７】 マメ科植物が大豆であり、リゾビウムが
リゾビウム ジャポニカム(Rhizobium japonicum) であ
る請求項１記載の方法。 - 【請求項８】 マメ科植物種の収穫量を高める方法であ
って、 (a) リゾビウム菌の１株をマメ科植物の種子のひき割
りの水性抽出物を含む培地で培養する工程、及び (b) 培養から得られたリゾビウム株をマメ科植物種に
接種する工程を含む方法。 - 【請求項９】 マメ科植物の種子のひき割りの水性抽出
物の容量が、栄養源の容量の1/2 である請求項８記載の
方法。 - 【請求項１０】 栄養源がＹＥＭ培養液である請求項８
記載の方法。 - 【請求項１１】 マメ科植物の種子を前記のリゾビウム
株のバーミキュライト培養物で覆うことによりマメ科植
物を接種する請求項８記載の方法。 - 【請求項１２】 マメ科植物が大豆であり、リゾビウム
がリゾビウム ジャポニカムである請求項８記載の方
法。 - 【請求項１３】 リゾビウム菌の培養のための培地であ
って、 担体； 栄養物； 及び該培地で培養するリゾビウムの野外にお
ける根瘤占有を競う能力を高めるために十分な量のマメ
科植物の種子のひき割りの抽出物を含む培地。 - 【請求項１４】 リゾビウム菌の培養のための培地であ
って、 担体； 栄養物； 及び該培地で培養するリゾビウムの野外にお
ける根瘤占有を競う能力を高めるために十分な量のマメ
科植物の種子のひき割りを含む培地。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US48520290A | 1990-02-26 | 1990-02-26 | |
| US485202 | 1990-02-26 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05192050A true JPH05192050A (ja) | 1993-08-03 |
Family
ID=23927292
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3030413A Pending JPH05192050A (ja) | 1990-02-26 | 1991-02-25 | リゾビウム接種材料の製法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0454291A1 (ja) |
| JP (1) | JPH05192050A (ja) |
| BR (1) | BR9100753A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AUPS338302A0 (en) * | 2002-07-04 | 2002-07-25 | Bayclassic Pty Ltd | Rhizobial inoculant |
| WO2014160827A1 (en) | 2013-03-28 | 2014-10-02 | Novozymes Bioag A/S | Compositions and methods for enhancing microbial stability |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1316859C (en) * | 1985-12-06 | 1993-04-27 | Dennis E. Mccabe | Production of microbial field crop inoculants |
-
1991
- 1991-02-25 BR BR919100753A patent/BR9100753A/pt not_active Application Discontinuation
- 1991-02-25 JP JP3030413A patent/JPH05192050A/ja active Pending
- 1991-02-25 EP EP91301468A patent/EP0454291A1/en not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BR9100753A (pt) | 1991-10-29 |
| EP0454291A1 (en) | 1991-10-30 |
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