JPH0278635A - ＩｇＭを含有する静脈内投与のポリクローナル免疫グロブリン調製物の調製方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （従来の技術並びに発明が解決しようとする課題）免疫
グロブリンは、ヒトにおける感染を防除するうえで重要
な役割を演する。免疫グロブリンは均一な物質でなく、
そして種々の生化学的および生理学的性質をもつ種々の
クラスに割り当てることができる。ウィルス因子に対す
る防御に参加するのは本質的にＩｇＧであるが、ＩｇＭ
抗体は好ましくはバクテリアの感染を防除する。

そのペンタマーの構造のために、ＩｇＭはバクテリアの
凝集にことに適する。それは、また、ＩｇＧより１００
〜４００倍補体を活性化し、モしてモノマーのＩｇＧの
１００倍のバクテリアに対するオブソニン作用を有する
。

ＩｇＭを含有するタンパク質の投与は、バクテリアの感
染に対して殊に有効である。免疫グロブリン調製物は、
広い範囲の病気の処置および予防に臨床的に３０年間有
効に使用されてきている。しかしながら、これらの物質
は際だって厳格なＩｇＭの調製物であり、微量のＩｇＡ
およびＩｇＭを含有することがある。最初の調製物は筋
肉内にのみ適合性であったが、静脈内１ｇＧ調製物は、
また、２０年以上にもわたり入手可能である。

抗補体活性を減少する方法、それゆえ静脈内適合性を保
証する方法における工程は、［５ｃｈｕｌｔｚ、１（、
Ｅ　、および５ｃｈｖｉｃｋ、　Ｇ、、Ｄｔｅｈｓ、ｍ
ｅｄ、Ｗｏｃｈｅｎｓｃｈｒｌｌ’ｔ　８７（１９８２
）、１６４３　；　　ＢａｒａｎｄｕｎＳＳ、ｅｔ　ａ
ｌ、、Ｖｏｘ　Ｓａｎｇ、　２８　　（１９５７）、１
５７　　；　　ＢａｒａｎｄｕｎＳＳ。

ｅｔ　ａｌ、、Ｖｏｘ　Ｓａｎｇ、７　　（１９Ｂ２）
、１８７　；　５ｔｅｐｈａｎ　。

ν１、Ｚ、ＫＩ　［ｎ、ＣｈｅｌＭ、Ｋｌ　ｉｎ、Ｂｊ
ｏｃｈｅｍ、７　（１９６９）、２８２］。

に記載されている。

これらの方法のすべては１９８０年までＩｇＧに限定さ
れ、最初であって現在まで、静脈内に適合性のＩｇＧ　
、ａ製物［ペンタグロビン　（１’ｅｎｔａｇｌｏｂｉ
ｎ）ｆＲｌ　］の例のみが欧州特許（ＣＰ）１３９０１
号に記載された。この免疫グロブリン調製物は、０．０
５〜０．１５％のβ−プロピオラクトンで処理されて静
脈内適合性とされ、１０％のＩｇＭに加えて、８０％の
ＩｇＧおよび１０％のＩｇＡを含有する。

他の免疫グロブリン調製物、例えば、フィンランド国特
許８３８８３１号およびドイツ国特許２４０４２（ｉ５
号に記載されているものは、ＩｇＭが２０〜３０％に濃
縮されているが、静脈内適合性ではない。

パン・デル・ホウフェン（Ｖａｎ　ｄｅｒ　Ｈｏｒｅｎ
）、１ｍｍｕｎｏｃｈｅ＋ｍｌｓｔｒｙ　ｔｏ（１９７
３）、ＬＱ７−１４に記載されているもののような免疫
学的に純粋な１ｇＭ調製物は、高い抗補体活性をもつた
めに、静脈内投与に適さず、したがってバクテリアの感
染を処置するためにこれまで利用されてきていない。

２０％以上のＩｇＭを含有する調製物の投与のこれまで
の唯一の道筋は筋肉内であった。この方法は非常に痛い
ばかりでなく、かつまたより多い量のＩｇＭを投与する
ために使用することができず、ＩｇＨの血液中の濃度は
有意に高くならない。

本発明の目的は、バクテリアの感染の処置および予防に
おいて静脈内投与に適当な、高い純粋の１ｇＭ濃縮物を
利用可能とすることである。

（課題を解決するための手段並びに作用、効果）この目
的は、全体の免疫グロブリン含量に基づいて少なくとも
５０重二％のＩｇＭを含有し、低い抗補体活性を有し、
そして水溶液において安定でありかつウィルスを含有し
ない免疫グロブリン調製物を使用して達成される。この
タイプの調製物は、ヒト、動物、またはバクテリア起源
の血漿または他の源から、イオン交換体で処理し、生理
的塩類溶液の勾配またはｐｌ＋の勾配で交換体を溶離し
、そしてゲルで濾過し、ここでβ−プロピオラクトンで
処理し、ＰＥＧ４０００で沈澱させ、そして必要に応じ
て、クロマトグラフィーの前または後に、加熱すること
によって調製することができる。これらの手順に引き続
いて、それら自体既知の手段、例えば、β−プロピオラ
クトンおよび紫外線による処理、あるいは溶媒および洗
浄剤による処理を実施すること。

ができ、これらは、また、滅菌の機能を満足する。

また、いくつかのＩｇＭ抗体の混合物から調製物を調製
するか、あるいは、ちょうど上に述べた方法により調製
された調製物に１種または２種以上の抗体を添加するこ
とができる。

ＩｇＭの濃縮物は好ましくはダなくとも５０％である。

注射可能な調製物は、１〜２０ｇ／１００ｍｌ、好まし
くは３〜５　ｇ　／１００ｍｌの本発明による調製物を
含有する溶液である。

驚くべきことには、本発明の方法により調製されかつ５
０％より多いＩｇＭを含有する調製物の抗補体活性は非
常に低いので、調製物は静脈内適合性であることが発見
された。この結果は、９０％のＩｇＧおよびＩｇＡでさ
らに安定化される、わずかにほぼ１０％の１ｇＭ溶液に
関する欧州特許１３９０１号中の情報からでさえ、予測
することができなかった。

本発明による抗バクテリア効果は、欧州特許１３９０１
号に記載される１０％ＩｇＭ調製物のそれと、動物試験
において比較した。驚くべきことには、本発明による調
製物の効果は、そのＩｇＭの含量から予／１ｐ１できる
ものよりも高かった。１ｇＭ濃縮物の抗バクテリア効果
はＩｇＧおよびＩｇＡの濃度を減少することによって増
加できるということは、完全に予１１１１されなかった
。換言すると、ＩｇＨの比濃度は、できるだけＩｇＧお
よびＩｇＡがほとんど存在しないとき、とくに有効であ
る。

このタイプの効果は、現在の技術水準において調製され
るＩｇＭでは達成することができない。

なぜなら、筋肉内に投与するためには少なすぎるか、あ
るいはＩｇＧおよびＩｇＡの比率が高すぎるからである
。

本発明による調製物の調製方法を下に説明する。

ＩｇＭを含有する分画、好ましくはコーン（Ｃｏｈｎ）
アルコール分画により得られるコーン分画１！１、ある
いは血液からのＩｇＧのクロマトグラフィーの分離の間
に生ずるＩｇＭ分画を、１〜５％、好ましくは２．５％
のカプリル酸で沈澱させる。

ＩｇＭを含有する残留物をアニオン交換体、例えば、Ｄ
ＥＡＥ％ＱＡＥまたはＱＭＡの群にｐ＋（５，５〜７．
５において適用する。ＩｇＭ分画は結合するようになり
、そして生理的塩類溶液の勾配またはｐＨの勾配で溶離
する。限外濾過による濃縮後、１ｇＭ溶出液を１ｇＭ溶
液の１００ｍｌ当り０．０５〜５ｍｌのβ−プロピオラ
クトンで処理する。この反応は好ましくは２０〜３７℃
およびｐｕｔ、ｏ〜９，０、好ましくは８．０において
１〜１０時間、β−プロピオラクトンが完全に消費され
るまで、実施する。抗補体活性をさらに低下させるため
、１ｇＭ溶液を１〜３％のＰＥＧ　４０００、好ましく
は２．５％ＰＥＧ４０００で０〜１０℃、好ましくは５
℃、ｐＨ４，５〜５において処理し、そして沈澱を遠心
分離する。

初期の抗補体活性が非常に高い場合、１ｇＭ溶液は必要
に応じて、また、４０〜６０℃、好ましくは５７℃に０
６５〜４時間、好ましくは１時間加熱することができる
。

この処理に引き続いて、濃縮物は全体の免疫グロブリン
に基づいて５０％以上の純度のＩｇＭであろう。さらに
精製するため、この溶液を５０００００Ｄ以上の排除限
界をもつゲルクロマトグラフィー材料、例えばセファク
リル（Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ）Ｓ４００ＨＲまたは５３０
０ＨＲまたはセファ０−ズ（Ｓｅｐｈａｒ。

ｓｅ）　ＣＬＵＢのクロマトグラフィーにかけることが
できる。抗補体活性を減少するための手段は、また、事
なる順序で実施することができる。β−プロピオラクト
ンを使用する処理は、例えば、排除クロマトグラフィー
後のアニオン交換クロマトグラフィーおよび加熱の前に
実施することができるか、あるいは加熱はβ−プロピオ
ラクトンによる処理およびＰＥＧ４０００による沈澱の
前に実施することができる。

ＩｇＭ分画を集め、既知の方法で加工し、そして濾過滅
菌する。

（実施例） 本発明による調製方法を、次の実施例を参照して詳述す
る。

実施例１ １　ｋｇのコーンのペーストＩＩ＋を５１の０．１モル
の酢酸塩緩衝液、ｐ１！５、中に溶解し、そして２．５
％のカプリル酸で２５℃において処理した。

沈澱を４時間後遠心し、そして残留物を０．０２５モル
のトロメタミンに対してｐＨ６，５において透析した。

この溶液を次いで同じ緩衝液中にＱＡ−トリスアクリル
（Ｔｒｌｓａｃｒｙｌ）−ＬＳを備えた３１のカラムに
加えた。ＩｇＭを吸着剤により保持し、そして０．３モ
ルの塩化ナトリウムで溶離した。

溶出液を４０ｇ／ｌのタンパク質含量に濃縮し、５７℃
に１時間加熱し、そして０．１５％のβ−プロピオラク
トンで２５℃およびｐｕａ、ｏにおいて一夜処理した。

次いで、この溶液を２．５　ｇ７１００ｍｌのＰＥＧ４
０００でｐＨ４，５において処理し、１時間、４℃にお
いて撹拌し、そして遠心した。次いで、残留物をセファ
クリル（Ｓｅｐｈａｅｒｙｌ）Ｓ４００ＨＲの２０１の
カラムでクロマトグラフィーにかけた。第２分画はＩｇ
Ｍを含有し、これを限外濾過し、そして濾過滅菌した。

ＩｇＭの含量は８５％であり、５％のＩｇＧおよび９％
のＩｇＡを含有した。

実施例２ ５０１のヒト血漿から得られたプールを４℃において融
解し、そして低温沈澱を分離した。ＰＰ５ｇ因子をＤＥ
ＡＥセファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）で除去し、そ
してフィブリノーゲンを９％のエタノールによる沈澱に
よりｐ）１５．３において除去した。

残留する血漿を２２ミリモルのトロメタミン／ＩＩｃＩ
のイオン性環境にＩ）Ｈ７，５において調節した。クロ
マトグラフィーを同一緩衝液で平衡化したＤＥＡＥ−ト
リスアクリル（Ｔｒｌｓａｃｒｙｌ）−ＬＳの１０Ｒの
カラムで実施した。保持されたＩｇＭを０．３モルの炭
酸ナトリウムでｐＨ？、０において溶離した。溶出液を
２５％のエタノールで一３℃およびｐｌ（７，５におい
て沈澱させ、そして沈澱を０．１モルの酢酸塩緩、新液
中にｐＨ１５において５ｏｇ／ｎのタンパク質濃度に溶
解した。この溶液を２．５％のカプリル酸で２５℃およ
びｐＨ５において処理し、そして沈澱を分離した。残留
物を０．１１％のβ−プロピオラクトンで５時間、２５
℃およびｐｌ＋７において処理し、１時間、４℃におい
て２．５　ｇ　／１００ｍｌのＰＥＧ４０００で沈澱さ
せ、そして遠心した。残留物をセファクリル（Ｓｅｐｈ
ａｃｒｙｌ）　８４００の２０ｆｌのカラムで３回クロ
マトグラフィーにかけた。第２分画を限外濾過し、そし
て濾過滅菌した。この分画はＩｇＭを９３％の純度でを
含有し、そして２％のＩｇＧおよび５％のＩｇＡを含有
した。全体の免疫グロブリン含量は１００％であった。

実施例３ １　ｋｇのコーンのペースト１１！を実施例１に記載す
るようにカプリル酸で沈澱させ、そして残留物を０．０
２５モルのトロメタミンに対してｐＨ７，０において透
析した。

ＩｇＭを吸着剤により保持し、１回カラムを０．０５モ
ルの酢酸ナトリウムでＩ）Ｈ４，５において洗浄した後
、溶離した。溶出液をＰＥＧ４０００およびβ−プロピ
オラクトンで実施例１に記載するように処理した。残留
物をセファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）Ｇ２５の２ｆ
ｔのカラムで再度緩衝化し、限界濾過し、そして濾過滅
菌した。

１ｇＭ含量は７３％であり、２０％のＩｇＡおよび７％
のＩｇＧであった。合計の免疫グロブリン含量は１００
％であった。

β−プロピオラクトンの処理は、β−プロピオラクトン
および紫外線を使用するか、あるいは洗浄剤および溶媒
、好ましくはトリーロープチルホスフェートおよびツイ
ーン（Ｔｗｅｅｎ）８０を使用する処理によるか、ある
いは低温殺菌により達成することができる。この処理に
引き続いて、加熱と同様に、また、ゲル濾過を実施する
ことができる。

タンパク質、好ましくはヒトアルブミン、糖、好ましく
はマルトース、またはアミノ酸の混合物を、また、調製
物に添加することができる。

本発明により調製されたＩｇＭ　ｍ縮物を、その出発材
料、ＩｇＧ　、　ＩｇＡおよびＩｇＭを含有する商業的
に人手可能なペンタグロビン（Ｐｅｎｔａｇｌｏｂｌｎ
）（３）と、および同一出発材料から調製したＩｇＧ分
画と比較した。結果は次の通りである。

１、参照調製物の特性づけ 免疫グロブリンＩｇＧ　、　ＩｇＡ　、およびＩｇＭを
抗血清を使用して比濁的に決定した。全体のタンパク質
含量は、ビウレット（Ｂｉｕｒｅｔ）法により決定した
。個々の試験調製物についてのデータを表１に要約する
。

表　　１ 試験調製物のデータ Ｎｏ、　　調製物　　タンパク質　ＩｇＧ　　ＩｇＡ　
　ＩｇＭ（ｇ／ｌ）　　　　　（ｉ＋ｇ／ｌＱＯｍｌ＞
１　　ペンタグロビン　　５１．５　　　　　３７２０
　９２０　　７５０２　　ＩｇＧ分画　　４８．９　　
　３７７０　８９０　　７０３　１ｇＭ濃縮物　８．１
　　　　４０　７０　７５０２、動物試験 本発明による１ｇＭ濃縮物の抗バクテリア効果（調製物
３）を、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）［
５ｔｅｐｈａｎＳＷ、およびＤｌｅｈｔｅｌｍｕｌｌｅ
ｒ　、　Ｉｌ、、静脈内使用のための２つの７８免疫グ
ロブリン調製物の生体外挙動および生体内効能の比較（
Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　　ｏｆ’　　１ｎ　　ｖｉｔｒ
ｏ　　ｂｅｈａｖＩｏｕｒ　　ａｎｄ　　１ｎ　　ｖｌ
ｖｏ　　ｅｒｒｌｃａｃｙ　ｏｆｔｗｏ　７Ｓ　Ｉｍｍ
ｕｎｏｇｌｏｂｕｌｌｎ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓｆ
ｏｒ　１ｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ　ｕｓｅ）　、Ａｒｚｎ
ｅｉｍｌｔｔｅｌ　Ｆｏｒｓｃｈ、／Ｄｒｕｇ　Ｒｅｓ
、３３（Ｉｆ）（１９８３）、ＩＬ　１５３８−４０］
で感染したマウスにおいて、ペンタグロビン（Ｐｅｎｔ
ａｇｌｏｂｌｎ）　”’　　（調製物１）およびＩｇＧ
分画（調製物２）のそれらと比較した。表２は生存率を
示す。

表　　２ マウス予防試験の結果 Ｎα　調製物　　　感染後２１時間生存するマウス１　
　ペンタグロビン　　　　　　　　　４７．６２　　Ｉ
ｇＧ分画　　　　　　　３３，３３　１ｇＭ濃縮物（本
発明’）　　８８．７４　未処理　　　　　　　　９．
５ したがって、本発明による１ｇＭ濃縮物（調製物３）は
、そのタンパク質濃縮物が１７５のみであってさえ、調
製物１および２のそれらより有意に強力であり、予防作
用を有する。

３、抗補体活性（ＡＣＡ）の決定 抗補体活性は、カバット（Ｋａｂａｔ）およびメイヤー
（Ｍａｙｅｒ）の方法［Ｍａｙｅｒ、　Ｍ、Ｍ、、補体
および補体の固定（Ｃｏｍｐｌ、ｅｍｅｎｔ　ａｎｄ　
Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ　ｆ’１ｘａｔｔｏｎ）、Ｋａｂ
ａｔ　ｓ　Ｅ、Ａ、およびＭａｙｅｒ　、Ｍ、Ｍ、編、
実験免疫化学（Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｉｍａ＋ｕ
ｎｏｃｈｅ１ｓｔｒｙ）、第２版、Ｓｐｒｉｎｇｆｌｅ
ｌｄ　、　Ｉｌｌ、、１９６４、Ｔｈｏａ＋ａｓＢｏｏ
ｋ　１３３−２４０］により、静脈内適合性の尺度とし
て、決定した。表３は、本発明による１ｇＭ濃縮物のそ
れと比較して、商業的に入手可能な調製物を使用して得
られた結果を要約する。すべての溶液は５％であった。

表　　３ ４、ウィルス不活性化の試験 本発明によるＩｇＭ　！縮物を、ΦＸ　１７４型バクテ
リオフアージおよびセンダイ（Ｓｅｎｄａｉ）ウィルス
で処理した。滅菌をβ−プロピオラクトン［Ｐｒ１ｎｃ
ｅＳＡ、Ｍ、、ｌ１ｏｒｏｖｔｔｚ、　Ｂ、、Ｄｌｃｈ
ｔｅｌｍｕｌ　Ｉｅｒ　ｓ　Ｈ＝、５ｔｅｐｈａｎ　Ｓ
ν、およびＧａ１ｌｏ　、　Ｒ，Ｃ，、ＨＴＬＶ−Ｉｌ
ｌの不活性化手順の評価についての定量的アッセイニト
リ　（ｎ−ブチル）ホスフェート、ナトリウムコレート
、およびβ−プロピオラクト　ン　（Ｑｕａｎｔｉｔａ
ｔｉｖｅ　　ａｓｓａｙｓ　　ｆｏｒ　　ｅａｖｌｕａ
ｔｉｏｎ　　ｏ　ｆｌｌＴＬＶ　−Ｉｌｌ　１ｎａｃｔ
ｌｖａｔ１ｏｎ　ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ；Ｔｒｉ（ｎ−
ｂｕｔｙｌ）ｐｈｏｓｐｈａｅｔｅ、ｓｏｄｌｕｍ　ｃ
ｌ＋ｏｌａｔｅ、ａｎｄ　　　β−ｐｒｏｐｌｏｌａｃ
ｔｏｎｅ）、Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　４５（
１９８５）、４５９２ｓ　−４５９４ｓ　］　、］β−
プロ準ビオラクトン＋紫外線　Ｐｒｌｎｃｅ％Ａ、Ｍ、
、５ｔｅｐｈａｎ　％　Ｗ、、Ｄｉｃｈｔｅｌｍｕｌｅ
ｒ、Ｈ８、Ｂｒｏｔｍａｎ　、　Ｂ、、およびＩＩｕＩ
Ｉｎａ　ＳＴ、、β−プロピオラクトンおよび紫外線照
射の組み合せた使用による非Ａ／非Ｂ型肝炎ウィルスの
ハチンソン菌株の不活性化（ｌｎａｅｔｌＶａｔｌｏｎ
　ｏｒｔｈｅ　１Ｉｕｔｃｈ１ｎｓｏｎ　５ｔｒａｉｎ
　ｏｆ’　ｎｏｎ−Ａ／ｎｏｎ−Ｂ　ｈｅｐａｔｉｔｉ
ｓ　　ｖｉｒｕｓ　　ｂｙ　　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　　ｕ
ｓｅ　　ｏｒ　　β−ｐｒｏｐｉ。

１ａｃｔｏｎｅ　　ａｎｄ　　ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ
　　Ｉｒｒａｄｉａｔｌｏｎ）、　Ｊ、ｍｅｄ、Ｖｉｒ
ｏｌ、１６（１９８５）、１１９−２５］　、溶媒＋洗
浄剤（前記β−プロピオラクトンの文献を参照）または
低温殺菌（６０℃において１０時間）　　Ｎ１ｅｌＩＩ
ｌｂｕ「ｇｅｒ、　Ｎ、、Ｗｏｒｔｎｓｂａｃｈｅｒ　
ＳＷ、、およびＫｕｍｐｃ　。

Ｇ１、低温殺菌したイソアグリチニン不含因子−ｖ１１
１調製物および調製方法、欧州特許出願第０１７３２４
２号（１９８５）］を使用して実施した。表４は結果を
示す。

表　　４ タンパク質　ウィルス　　滅　菌　　不活性化（ｇ／１
００ｍｌ）　　　　　　　　　　　　　　（ＩＯｇ＋ｏ
”）４　　　ΦＸ　１７４　　　　ＢＰＬ　　　　）７
４　　　ΦＸ　１７４　　　ＢＰＬ＋ＵＶ　　　　７０
．５　　　センダイ　溶媒＋洗浄剤　〉４，５５　　　
ΦＸ　１７４　　　低温殺菌　　〉８．０結果は有効な
滅菌を示し、表４に記載する方法の１つにより滅菌した
１８Ｍ濃縮物によるウィルスの伝達は防止することがで
きる。

５、貯蔵寿命の試験 本発明の１８Ｍ濃縮物を、１．８％の溶液（１，２ｇ／
１００ｍｌのＩｇＭ）の形態で５７℃に４時間加熱した
。

それをバクテリアＥ、ｃｏｌｉｅ　ｓクレブシェラ属（
ＫＩｅｂｓｉｅｌ　ｌａ）、および連鎖法菌属（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）に対する抗体について、ネーテル
（Ｎｅｔｅｒ）の受身赤血球凝集法（ＰＨＡ）　　［Ｎ
ｅｔｅｒ　、　Ｅ、、Ｂａｃｔ、Ｒｅｖ、２０（１９５
Ｂ）　、１８Ｇ　］により試験した。表５は加熱の前ま
たは後の活性を示す。

表　　５ ペンタグロビン　（Ｐｅｎｔａｇｌｏｂｉｎ）　’　”
と比較した１８Ｍ濃縮物の逆抗バクテリアー抗体力価次
の菌に対　１ｇＭ　　ベンタグ　ＩｇＭ　　ベンタグす
る抗体　　　　　ロビン　　　　　ロビンＥ、ｃｏｌｉ
　　　　Ｇ４０　　１８０　　３２０　　１８０Ｋｌｅ
ｂｓｌｅｌｌａ　　１２８０　　８４０　　　Ｇ４０　
　３２０Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ　３２０　　　　　
　１６０Ｓｔｅｐ、ｖｌｒｌｄ、　　３２０　　１［ｉ
ｏ　　　１６０　　　４０本発明による１８Ｍ濃縮物は
、したがって、決定の方法の誤差の限界（±１力価段階
）を仮定してその免疫学的活性に関して熱安定性である
。

それは寿命に関して、商業的に人手可能な１ｇＭ含有調
製物ペンタグロビン（Ｐｅｎｔａｇｌｏｂｉｎ）（Ｒ’
と同様に挙動する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、バクテリアの感染の処置および予防のための静脈内
   投与のポリクローナル免疫グロブリン調製物であって、 イ）免疫グロブリンの瞬間の合計含量に基づいて少なく
   とも５０重量％のＩｇＭを含有し、ロ）低い抗補体活性
   を示し、 ハ）水溶液中で安定であり、 ニ）ウィルスを含有しない、 ことを特徴とする静脈内投与のポリクローナル免疫グロ
   ブリン調製物。 ２、いく種類かのモノクローナルＩｇＭ抗体の混合物か
   ら成ることを特徴とする、上記第１項記載の免疫グロブ
   リン調製物。 ３、また、１種または２種以上の免疫グロブリン抗体を
   含有することを特徴とする、上記第１または２項記載の
   免疫グロブリン調製物。 ４、また、追加のタンパク質、好ましくはヒトアルブミ
   ン、糖、好ましくはマルトース、またはアミノ酸の混合
   物を含有することを特徴とする、上記第１〜３項のいず
   れかに記載の免疫グロブリン調製物。 ５、１〜２０ｇ／１００ｍｌ、好ましくは３〜５ｇ／１
   ００ｍｌのタンパク質濃度をもつ溶液の形態であること
   を特徴とする、上記第１〜４項のいずれかに記載の免疫
   グロブリン調製物。 ６、ヒト、動物、またはバクテリア起源の免疫グロブリ
   ン含有血漿分画から分離することを特徴とする、上記第
   １〜５項のいずれかに記載の免疫グロブリン調製物を調
   製する方法。 ７、免疫グロブリン含有分画をアニオン交換体で処理し
   、これを生理的塩類溶液またはｐＨ勾配で溶離し、溶出
   液をゲル濾過し、アニン交換クロマトグラフィーまたは
   ゲル濾過の前または後に、β−プロピオラクトンおよび
   ＰＥＧ４００で処理し、そして必要に応じて加熱するこ
   とを特徴とする、上記第６項記載の方法。 ８、アニオン交換体は、ＤＥＡＥ−トリスアクリル（Ｔ
   ｒｉｓａｃｒｙｌ）−ＬＳ、ＱＡ−トリスアクリル（Ｔ
   ｒｉｓａｃｒｙｌ）またはＱＭＡ−アクセル（Ａｃｃｅ
   ｌｌ）であることを特徴とする、上記第７項記載の方法
   。 ９、ゲル濾過のためのゲルはセファクリル（Ｓｅｐｈａ
   ｃｒｙｌ）Ｓ４００ＨＲまたはＳ３００ＨＲであること
   を特徴とする、上記第７または８項記載の方法。 １０、調製物を、アニオン交換クロマトグラフィーまた
   はゲル濾過の前または後に、β−プロピオラクトンで、
   あるいはβ−プロピオラクトンおよび紫外線で、および
   ０〜１０℃、好ましくは５℃、およびｐＨ４．５〜５に
   おいて３％のＰＥＧ４００で、処理することを特徴とす
   る、上記第７〜９項のいずれかに記載の方法。 １１、加熱を０．５〜５時間、４０〜６０℃において、
   好ましくは１時間、５７℃において実施することを特徴
   とする、上記第７〜１０項のいずれかに記載の方法。 １２、調製物を、ゲル濾過の前または後に、溶媒および
   洗浄剤、好ましくはトリ−ｎ−ブチルホスフェートおよ
   びツイーン（Ｔｗｅｅｎ）８０で処理することを特徴と
   する、上記第７〜１１項のいずれかに記載の方法。 １３、調製物を、ゲル濾過の前または後に、低温殺菌す
   ることを特徴とする、上記第７〜１１項のいずれかに記
   載の方法。 １４、タンパク質、好ましくはヒトアルブミン、糖、好
   ましくはマルトース、またはアミノ酸の混合物を調製物
   に添加することを特徴とする、上記第７〜１１項のいず
   れかに記載の方法。