JPH04221321A - 熱処理されたＩｇＭ抗体製剤 - Google Patents
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【発明の背景】分野： この開示は一般的には治療用
抗体すなわち免疫グロブリンに関するものであり、そし
て特に、少なくとも数種のＩｇＭ型抗体を含んでいる治
療用免疫グロブリン製剤に関するものである。
抗体すなわち免疫グロブリンに関するものであり、そし
て特に、少なくとも数種のＩｇＭ型抗体を含んでいる治
療用免疫グロブリン製剤に関するものである。
【０００２】先行技術： 抗体は公知の類別システム
（すなわちＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ）
に従い分類されており、そしてＩｇＧの場合には副類別
（すなわちＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４）に従
い分類されている。
（すなわちＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ）
に従い分類されており、そしてＩｇＧの場合には副類別
（すなわちＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４）に従
い分類されている。
【０００３】市販の免疫グロブリン製剤（免疫血清グロ
ブリンすなわちＩＳＧとして知られている）は一般的に
は主としてＩｇＧ型抗体からなっており、ＩｇＧ副類別
の分布は人間の血漿中で観察されるものと似ている。典
型的には、そのような製剤中のＩｇＭ量は、たとえ存在
しているとしても、比較的少量である。
ブリンすなわちＩＳＧとして知られている）は一般的に
は主としてＩｇＧ型抗体からなっており、ＩｇＧ副類別
の分布は人間の血漿中で観察されるものと似ている。典
型的には、そのような製剤中のＩｇＭ量は、たとえ存在
しているとしても、比較的少量である。
【０００４】ＩｇＭは、人間で観察される免疫グロブリ
ンの約７％を構成している公知の１９Ｓ免疫グロブリン
である。ＩｇＭ抗体は少なくとも５の抗体価を有してい
ると言われており、そしてそれらは免疫応答において生
成する最も初期の抗体である。ＩｇＭ抗体は特にバクテ
リア性感染において非常に有効であるという傾向がある
が、それらは約５日という比較的短い生体内半減期を有
している。さらに、ＩｇＭ抗体は凝集する傾向があり、
そして特に精製形で安定化させるのは比較的困難である
。
ンの約７％を構成している公知の１９Ｓ免疫グロブリン
である。ＩｇＭ抗体は少なくとも５の抗体価を有してい
ると言われており、そしてそれらは免疫応答において生
成する最も初期の抗体である。ＩｇＭ抗体は特にバクテ
リア性感染において非常に有効であるという傾向がある
が、それらは約５日という比較的短い生体内半減期を有
している。さらに、ＩｇＭ抗体は凝集する傾向があり、
そして特に精製形で安定化させるのは比較的困難である
。
【０００５】現在まで、相当量のＩｇＭ抗体を有する唯
一の公知の商業的静脈用（ＩＶ）製品は西ドイツのバイ
オテストＧｍｂＨから販売されているペンタグロビンＴ
Ｍとして知られている製品である。その製品の用途は、
Ｋ．Ｄ．チンプナー（Ｔｙｍｐｎｅｒ）他、「静脈内Ｉ
ｇＭ−適用（Ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ ＩｇＭ−Ａｐｐ
ｌｉｋａｔｉｏｎ）」、Ｍｓｃｈｒ． Ｋｉｎｄｅｒｈ
ｅｉｌｋ．、１２３、４００−４０１（１９７５）およ
びＫ．Ｎ．ハーク（Ｈａｑｕｅ）他、「新生敗血症にお
けるＩｇＭに富んでいる静脈内免疫グロブリン治療（Ｉ
ｇＭ−ＥｎｒｉｃｈｅｄＩｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ Ｉｍ
ｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ Ｎ
ｅｏｎａｔａｌ Ｓｅｐｓｉｓ）」、Ａｍ． Ｊ． Ｄ
ｉｓ． Ｃｈｉｌｄ．、１４２、１２９３−１２９６（
１９８８）による論文中に記載されているようである。 その製品は、全蛋白質基準の重量％で、約７６％のＩｇ
Ｇ、約１２％のＩｇＡおよび約１２％のＩｇＭからなっ
ている。
一の公知の商業的静脈用（ＩＶ）製品は西ドイツのバイ
オテストＧｍｂＨから販売されているペンタグロビンＴ
Ｍとして知られている製品である。その製品の用途は、
Ｋ．Ｄ．チンプナー（Ｔｙｍｐｎｅｒ）他、「静脈内Ｉ
ｇＭ−適用（Ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ ＩｇＭ−Ａｐｐ
ｌｉｋａｔｉｏｎ）」、Ｍｓｃｈｒ． Ｋｉｎｄｅｒｈ
ｅｉｌｋ．、１２３、４００−４０１（１９７５）およ
びＫ．Ｎ．ハーク（Ｈａｑｕｅ）他、「新生敗血症にお
けるＩｇＭに富んでいる静脈内免疫グロブリン治療（Ｉ
ｇＭ−ＥｎｒｉｃｈｅｄＩｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ Ｉｍ
ｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ Ｎ
ｅｏｎａｔａｌ Ｓｅｐｓｉｓ）」、Ａｍ． Ｊ． Ｄ
ｉｓ． Ｃｈｉｌｄ．、１４２、１２９３−１２９６（
１９８８）による論文中に記載されているようである。 その製品は、全蛋白質基準の重量％で、約７６％のＩｇ
Ｇ、約１２％のＩｇＡおよび約１２％のＩｇＭからなっ
ている。
【０００６】ＩＳＧ製品中での比較的大量のＩｇＭの使
用は逆反応をもたらすと思われてきている。例えば、免
疫反応における補体カスケードの活性化ではＩｇＭはＩ
ｇＧより数倍有能である。この理由は、抗原と結合して
いる１個だけのＩｇＭ分子が補体を活性化させるのに対
して、ＩｇＧは２個以上のＩｇＧ分子が互いに緊密に関
連して抗原と結合して補体を活性化させなければならな
いからである。
用は逆反応をもたらすと思われてきている。例えば、免
疫反応における補体カスケードの活性化ではＩｇＭはＩ
ｇＧより数倍有能である。この理由は、抗原と結合して
いる１個だけのＩｇＭ分子が補体を活性化させるのに対
して、ＩｇＧは２個以上のＩｇＧ分子が互いに緊密に関
連して抗原と結合して補体を活性化させなければならな
いからである。
【０００７】ＩｇＭに富んでいる製品を製造する際に使
用される製造方法が減成反応により得られるＩｇＭの量
を限定するかもしれないようである。例えば、ＩｇＭに
富んでいる製品を静脈内に投与可能にさせるためのβ−
プロピオラクトンの使用を記載しているＷ．ステフェン
（Ｓｔｅｐｈｅｎ）の米国特許４，３１８，９０２を参
照のこと。 従って、どの理由にせよ、ＩｇＭが非常に有効であると
認識されていながら、約１２重量％より多い合計蛋白質
量の市販の静脈内用ＩＳＧ製品はまだ出現していないよ
うである。２０重量％ＩｇＭ製品は過去に得られている
が（ガンマ−Ｍ−コンツェントラート、ベリングヴェル
ケＡＧ、マルブルグ、ドイツ）、それは筋肉内（静脈内
ではない）用途用に製造されており且つそれに限定され
ていた。
用される製造方法が減成反応により得られるＩｇＭの量
を限定するかもしれないようである。例えば、ＩｇＭに
富んでいる製品を静脈内に投与可能にさせるためのβ−
プロピオラクトンの使用を記載しているＷ．ステフェン
（Ｓｔｅｐｈｅｎ）の米国特許４，３１８，９０２を参
照のこと。 従って、どの理由にせよ、ＩｇＭが非常に有効であると
認識されていながら、約１２重量％より多い合計蛋白質
量の市販の静脈内用ＩＳＧ製品はまだ出現していないよ
うである。２０重量％ＩｇＭ製品は過去に得られている
が（ガンマ−Ｍ−コンツェントラート、ベリングヴェル
ケＡＧ、マルブルグ、ドイツ）、それは筋肉内（静脈内
ではない）用途用に製造されており且つそれに限定され
ていた。
【０００８】血漿から誘導されたＩｇＭ、より最近では
モノクローンから誘導されたＩｇＭ、に関しては種々の
精製方式が示唆されている。血漿から誘導されたＩｇＭ
の場合には、コーン留分ＩＩＩとして知られているもの
からアルコール分別技術を使用して比較的濃縮されたＩ
ｇＭを得られることが１９４０年代から知られている。 例えば、静脈内（ＩＶ）投与に適している濃縮された（
１２％）ＩｇＭを製造するためのベータ−プロピオラク
トンの使用に関するＷ．ステフェンの上記で引用されて
いる米国特許４，３１８，９０２（およびそこでの引用
文献）も参照のこと。さらに、ミウラ（Ｍｉｕｒａ）他
のＥＰＯ出願０ ０３８ ６６７（ＩｇＭアシル化）も
参照のこと。他のＩｇＭ精製または製造技術は、Ｕ．ス
ッグ（Ｓｕｇｇ）他、Ｖｏｘ Ｓａｎｇ、３６：２５−
２８（１９７９）；Ｍ．ステインバッフ（Ｓｔｅｉｎｂ
ａｃｈ）他、プリパラティブ・バイオケミストリー（Ｐ
ｒｅｐａｒａｔｉｖｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、
３（４）、３６３−３７３（１９７３）およびＡ．ウッ
ヒマン（Ｗｉｃｈｍａｎ）他、バイオシミカ・エ・バイ
オフィジカ・アクタ（Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｂｉｏｐｈｙ
ｓ． Ａｃｔａ）、４９０：３６３−６９（１９７７）
により開示されている。種々の技術的理由により、血漿
から誘導されたＩｇＭは精製が比較的難しくそして現在
までの最高既知純度（分析目的用に使用されている）は
約９０重量％のＩｇＭである。
モノクローンから誘導されたＩｇＭ、に関しては種々の
精製方式が示唆されている。血漿から誘導されたＩｇＭ
の場合には、コーン留分ＩＩＩとして知られているもの
からアルコール分別技術を使用して比較的濃縮されたＩ
ｇＭを得られることが１９４０年代から知られている。 例えば、静脈内（ＩＶ）投与に適している濃縮された（
１２％）ＩｇＭを製造するためのベータ−プロピオラク
トンの使用に関するＷ．ステフェンの上記で引用されて
いる米国特許４，３１８，９０２（およびそこでの引用
文献）も参照のこと。さらに、ミウラ（Ｍｉｕｒａ）他
のＥＰＯ出願０ ０３８ ６６７（ＩｇＭアシル化）も
参照のこと。他のＩｇＭ精製または製造技術は、Ｕ．ス
ッグ（Ｓｕｇｇ）他、Ｖｏｘ Ｓａｎｇ、３６：２５−
２８（１９７９）；Ｍ．ステインバッフ（Ｓｔｅｉｎｂ
ａｃｈ）他、プリパラティブ・バイオケミストリー（Ｐ
ｒｅｐａｒａｔｉｖｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、
３（４）、３６３−３７３（１９７３）およびＡ．ウッ
ヒマン（Ｗｉｃｈｍａｎ）他、バイオシミカ・エ・バイ
オフィジカ・アクタ（Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｂｉｏｐｈｙ
ｓ． Ａｃｔａ）、４９０：３６３−６９（１９７７）
により開示されている。種々の技術的理由により、血漿
から誘導されたＩｇＭは精製が比較的難しくそして現在
までの最高既知純度（分析目的用に使用されている）は
約９０重量％のＩｇＭである。
【０００９】ＩｇＭに富んでいる製剤に関連する上記の
問題点の他に、製剤は使用時に非−特異的補体活性化と
して知られている事象を生成する傾向があることが観察
されている。非−特異的補体活性化とは、抗体−抗原複
合体の不存在下での補体カスケードの開始をさしている
。この現象はしばしば免疫グロブリン凝集物の注入に伴
われる。非−特異的補体活性化は例えば高血圧症の如き
望ましくない副作用を起こすかもしれないため、それは
避けるべきである。一方、特異的補体活性化は望ましく
、しかもそれは免疫グロブリンが例えば血液流中の微生
物の抗原性表面に結合した後にのみ起きる。
問題点の他に、製剤は使用時に非−特異的補体活性化と
して知られている事象を生成する傾向があることが観察
されている。非−特異的補体活性化とは、抗体−抗原複
合体の不存在下での補体カスケードの開始をさしている
。この現象はしばしば免疫グロブリン凝集物の注入に伴
われる。非−特異的補体活性化は例えば高血圧症の如き
望ましくない副作用を起こすかもしれないため、それは
避けるべきである。一方、特異的補体活性化は望ましく
、しかもそれは免疫グロブリンが例えば血液流中の微生
物の抗原性表面に結合した後にのみ起きる。
【００１０】ｐＨ３．８−４．０において２４時間にわ
たりそしてその後にｐＨを７．０に調節して３７℃に加
熱された静脈投与用の人間ガンマ−グロブリンが補体固
定試験により測定された抗補体活性（ＡＣ）の減少をも
たらすことは、Ｓ．バランダン（Ｂａｒａｎｄｕｎ）他
、「人間ガンマ−グロブリンの静脈内投与（Ｉｎｔｒａ
ｖｅｎｏｕｓ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｈｕｍａｎ Ｇａｍｍａ−Ｇｌｏｂｕｌｉｎ）」、Ｖｏ
ｘ Ｓａｎｇ、７、１５７−１７４（１９６２）により
報告されている。しかしながら、比較的長い培養期間に
わたるこの処理は凝集したガンマ−グロブリンの生成に
より高い抗補体活性を生じる。これらの著者は抗原と結
合された時の加熱された免疫グロブリンによる特異的補
体活性の保有は示していない。さらに、これらの著者は
生体内安全性は示していなかった。さらに、Ｍ．ヴッケ
ルハウセル（Ｗｉｃｋｅｒｈａｕｓｅｒ）他、「巨大グ
ロブリンの大規模製造（Ｌａｒｇｅ Ｓｃａｌｅ Ｐｒ
ｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍａｃｒｏｇｌｏｂｕｌｉ
ｎ）」、Ｖｏｘ Ｓａｎｇ、２３、１１９−１２５（１
９７２）は、ＰＥＧ沈澱により製造されたＩｇＭ濃縮物
は標準的補体固定試験により高い抗補体活性（ＡＣ）を
有しており且つこのＡＣ活性はＩｇＭ濃縮物をｐＨ４．
０において３７℃で８時間培養しそしてその後に中性ｐ
Ｈに再調節することにより１０倍も減じられたことを示
している。前の論文（Ｖｏｘ Ｓａｎｇ、７、１５７−
１７４（１９６２））と同様に、これらの著者も加熱さ
れたＩｇＭ濃縮物の特異的補体活性化能力を評価してお
らず、また、彼らは動物モデルにおける安全性も評価し
ていない。
たりそしてその後にｐＨを７．０に調節して３７℃に加
熱された静脈投与用の人間ガンマ−グロブリンが補体固
定試験により測定された抗補体活性（ＡＣ）の減少をも
たらすことは、Ｓ．バランダン（Ｂａｒａｎｄｕｎ）他
、「人間ガンマ−グロブリンの静脈内投与（Ｉｎｔｒａ
ｖｅｎｏｕｓ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｈｕｍａｎ Ｇａｍｍａ−Ｇｌｏｂｕｌｉｎ）」、Ｖｏ
ｘ Ｓａｎｇ、７、１５７−１７４（１９６２）により
報告されている。しかしながら、比較的長い培養期間に
わたるこの処理は凝集したガンマ−グロブリンの生成に
より高い抗補体活性を生じる。これらの著者は抗原と結
合された時の加熱された免疫グロブリンによる特異的補
体活性の保有は示していない。さらに、これらの著者は
生体内安全性は示していなかった。さらに、Ｍ．ヴッケ
ルハウセル（Ｗｉｃｋｅｒｈａｕｓｅｒ）他、「巨大グ
ロブリンの大規模製造（Ｌａｒｇｅ Ｓｃａｌｅ Ｐｒ
ｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍａｃｒｏｇｌｏｂｕｌｉ
ｎ）」、Ｖｏｘ Ｓａｎｇ、２３、１１９−１２５（１
９７２）は、ＰＥＧ沈澱により製造されたＩｇＭ濃縮物
は標準的補体固定試験により高い抗補体活性（ＡＣ）を
有しており且つこのＡＣ活性はＩｇＭ濃縮物をｐＨ４．
０において３７℃で８時間培養しそしてその後に中性ｐ
Ｈに再調節することにより１０倍も減じられたことを示
している。前の論文（Ｖｏｘ Ｓａｎｇ、７、１５７−
１７４（１９６２））と同様に、これらの著者も加熱さ
れたＩｇＭ濃縮物の特異的補体活性化能力を評価してお
らず、また、彼らは動物モデルにおける安全性も評価し
ていない。
【００１１】我々は、ＩｇＭまたはＩｇＭに富んでいる
免疫グロブリン製剤に関する非−特異的補体活性化問題
を比較的簡単でしかも驚異的な方法で（特異的補体活性
化を損なうことなく）最小にできることを、今見いだし
た。
免疫グロブリン製剤に関する非−特異的補体活性化問題
を比較的簡単でしかも驚異的な方法で（特異的補体活性
化を損なうことなく）最小にできることを、今見いだし
た。
【００１２】
【発明の要旨】特異的補体活性化効果剤機能を保有しな
がらＩｇＭ−含有免疫グロブリン製剤において非−特異
的補体活性化を実質的に排除するという我々の方法は、
該製剤をＩｇＭ抗体の通常の生物学的活性または抗原結
合活性に悪影響を与えずに非−特異的補体活性化を排除
するのに充分な条件下で穏やかな加熱段階にかける工程
を含んでいる。これを行うには、加熱段階は少なくとも
約１０分間にわたる約４０℃−６２℃の、好適には約４
５℃−５５℃の、範囲内の温度であるべきでありそして
製剤は好適には約４．０−５．０の酸性ｐＨ範囲を有す
る水溶液状であるべきであるということを、我々は見い
だした。現在までは、好適温度は少なくとも約３０分間
にわたる５０℃付近であるようである。
がらＩｇＭ−含有免疫グロブリン製剤において非−特異
的補体活性化を実質的に排除するという我々の方法は、
該製剤をＩｇＭ抗体の通常の生物学的活性または抗原結
合活性に悪影響を与えずに非−特異的補体活性化を排除
するのに充分な条件下で穏やかな加熱段階にかける工程
を含んでいる。これを行うには、加熱段階は少なくとも
約１０分間にわたる約４０℃−６２℃の、好適には約４
５℃−５５℃の、範囲内の温度であるべきでありそして
製剤は好適には約４．０−５．０の酸性ｐＨ範囲を有す
る水溶液状であるべきであるということを、我々は見い
だした。現在までは、好適温度は少なくとも約３０分間
にわたる５０℃付近であるようである。
【００１３】我々の改良製品は、少なくとも数種の測定
可能なＩｇＭ型抗体を含有している免疫グロブリン製剤
からなっている。好適製品は乾燥重量基準で少なくとも
２０％のＩｇＭ型抗体を含んでおり、抗体の残りは主と
してＩｇＧ型のものである。痕跡量（２０重量％以下）
の他の型が存在しているかもしれない。我々の好適製品
および方法の詳細は以下に記されている。
可能なＩｇＭ型抗体を含有している免疫グロブリン製剤
からなっている。好適製品は乾燥重量基準で少なくとも
２０％のＩｇＭ型抗体を含んでおり、抗体の残りは主と
してＩｇＧ型のものである。痕跡量（２０重量％以下）
の他の型が存在しているかもしれない。我々の好適製品
および方法の詳細は以下に記されている。
【００１４】
【特定態様】我々の研究所における研究は、ペントバル
ビタールで麻酔をかけたシノモルグス猿中のＩｇＭに富
んでいるＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の注入により誘発
される再現性のある逆応答を示した。その製品は乾燥重
量基準で約５０重量％のＩｇＭを含んでおり、残りはＩ
ｇＧであった。混合物は５％水溶液状で静脈内に投与さ
れた。投与速度は１ｍｇ／ｋｇ／分（ＩｇＭ）であり、
５０ｍｇ／ｋｇの総投与量であった。逆応答の主な要素
は動脈血圧の大減少であった。逆作用機構を理解するた
めの試みでは、我々は中性ｐＨ（酸性ｐＨではない）に
おいて製造された熱−凝集ＩｇＧは猿に注入された時に
はＩｇＭに富んでいるＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の注
入後に観察されるものと同様な作用を顕著に誘発したこ
とを示した。中性ｐＨで製造されたＩｇＭに富んでいる
ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物およびＩｇＧの凝集物の両
者とも補体の正統的経路を活性化させることができるた
め、我々は補体活性化はシノモルグス猿中での逆作用の
誘発と関連があると仮定した。正統的補体経路はインフ
ラメーション（Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ）、基本的原
則および臨床的関連補体：化学および経路（Ｂａｓｉｃ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ
Ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ： Ｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐａｔｈｗａｙｓ）、２１−
５３頁中に記載されておりそれの技術はここでは参考用
に記しておく（ラヴェン・プレス、ニューヨーク、ニュ
ーヨーク、１９８８）。
ビタールで麻酔をかけたシノモルグス猿中のＩｇＭに富
んでいるＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の注入により誘発
される再現性のある逆応答を示した。その製品は乾燥重
量基準で約５０重量％のＩｇＭを含んでおり、残りはＩ
ｇＧであった。混合物は５％水溶液状で静脈内に投与さ
れた。投与速度は１ｍｇ／ｋｇ／分（ＩｇＭ）であり、
５０ｍｇ／ｋｇの総投与量であった。逆応答の主な要素
は動脈血圧の大減少であった。逆作用機構を理解するた
めの試みでは、我々は中性ｐＨ（酸性ｐＨではない）に
おいて製造された熱−凝集ＩｇＧは猿に注入された時に
はＩｇＭに富んでいるＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の注
入後に観察されるものと同様な作用を顕著に誘発したこ
とを示した。中性ｐＨで製造されたＩｇＭに富んでいる
ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物およびＩｇＧの凝集物の両
者とも補体の正統的経路を活性化させることができるた
め、我々は補体活性化はシノモルグス猿中での逆作用の
誘発と関連があると仮定した。正統的補体経路はインフ
ラメーション（Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ）、基本的原
則および臨床的関連補体：化学および経路（Ｂａｓｉｃ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ
Ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ： Ｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐａｔｈｗａｙｓ）、２１−
５３頁中に記載されておりそれの技術はここでは参考用
に記しておく（ラヴェン・プレス、ニューヨーク、ニュ
ーヨーク、１９８８）。
【００１５】補体系統は主として微生物感染に対する免
疫防衛における効果剤機構として機能する。補体系統の
活性化製品は食細胞を引き付けそしてオプソニン作用に
よる異質粒子の吸収および破壊を大きく促進させる。補
体の活性化用には２種類の経路すなわち正統的経路およ
び別の通路が存在している。正統的通路の活性化は抗原
−抗体複合体によりまたは細胞状もしくは粒状抗原と結
合された抗体により開始される。別の経路は抗体とは独
立して例えばバクテリア性壁成分、バクテリア性脂肪多
糖類（ＬＰＳ）、酵母（チモサン）の細胞壁成分および
真菌の如き物質により活性化される。別の経路は免疫応
答前の感染に対する保護を与えるが、正統的経路は抗体
が生成した後に重要であると思われている。
疫防衛における効果剤機構として機能する。補体系統の
活性化製品は食細胞を引き付けそしてオプソニン作用に
よる異質粒子の吸収および破壊を大きく促進させる。補
体の活性化用には２種類の経路すなわち正統的経路およ
び別の通路が存在している。正統的通路の活性化は抗原
−抗体複合体によりまたは細胞状もしくは粒状抗原と結
合された抗体により開始される。別の経路は抗体とは独
立して例えばバクテリア性壁成分、バクテリア性脂肪多
糖類（ＬＰＳ）、酵母（チモサン）の細胞壁成分および
真菌の如き物質により活性化される。別の経路は免疫応
答前の感染に対する保護を与えるが、正統的経路は抗体
が生成した後に重要であると思われている。
【００１６】血液補体系統の活性化により、アナフィラ
トキシンと称されている生活性ペプチド断片が発生する
。補体４ａ（Ｃ４ａ）アナフィラトキシンはＣ４の分裂
生成物（分子量８７４０）である。Ｃｌｑは抗原−抗体
複合体または凝集物により活性化されて、Ｃｌ複合体は
Ｃ４をＣ４ａおよびＣ４ｂに分裂させて、Ｃ４ｂが活性
化表面と結合することができて、Ｃ４ａアナフィラトキ
シンが血漿中に放出される。分析学的生化学における最
近の研究により、放射免疫検定による血漿Ｃ４ａの測定
が可能になるという技術が提唱されている。例えば、両
方ともＰ．Ｓ．サトウ（Ｓａｔｏｈ）のものである米国
特許４，７３１，３３６およびヨーロッパ特許９７，４
４０を参照のこと。
トキシンと称されている生活性ペプチド断片が発生する
。補体４ａ（Ｃ４ａ）アナフィラトキシンはＣ４の分裂
生成物（分子量８７４０）である。Ｃｌｑは抗原−抗体
複合体または凝集物により活性化されて、Ｃｌ複合体は
Ｃ４をＣ４ａおよびＣ４ｂに分裂させて、Ｃ４ｂが活性
化表面と結合することができて、Ｃ４ａアナフィラトキ
シンが血漿中に放出される。分析学的生化学における最
近の研究により、放射免疫検定による血漿Ｃ４ａの測定
が可能になるという技術が提唱されている。例えば、両
方ともＰ．Ｓ．サトウ（Ｓａｔｏｈ）のものである米国
特許４，７３１，３３６およびヨーロッパ特許９７，４
４０を参照のこと。
【００１７】血漿中でのＣ４ａ水準の測定により、生体
内の正統的補体カスケードの活性化に関する直接的情報
が得られる。さらに、例えば補体源の如き人間血清を用
いる種々の免疫グロブリン製剤による試験管内でのＣ４
ａ発生の誘発は免疫グロブリン注入後の猿における生体
内補体活性化と相互関連している。
内の正統的補体カスケードの活性化に関する直接的情報
が得られる。さらに、例えば補体源の如き人間血清を用
いる種々の免疫グロブリン製剤による試験管内でのＣ４
ａ発生の誘発は免疫グロブリン注入後の猿における生体
内補体活性化と相互関連している。
【００１８】ここに記載されている研究では、我々は中
性ｐＨにおいて製造されたＩｇＭに富んでいるＩｇＧ免
疫グロブリン濃縮物および／または熱−凝集されたＩｇ
Ｇにより誘発された逆作用（高血圧症）が高水準の血漿
Ｃ４ａと関連しているかどうかを測定した。さらに、免
疫グロブリン製剤により誘発された補体（正統的経路）
の非−特異的活性化も試験管内でのＣ４ａ発生により評
価した。
性ｐＨにおいて製造されたＩｇＭに富んでいるＩｇＧ免
疫グロブリン濃縮物および／または熱−凝集されたＩｇ
Ｇにより誘発された逆作用（高血圧症）が高水準の血漿
Ｃ４ａと関連しているかどうかを測定した。さらに、免
疫グロブリン製剤により誘発された補体（正統的経路）
の非−特異的活性化も試験管内でのＣ４ａ発生により評
価した。
【００１９】これらの評価方式を用いて、我々はさらに
ＩｇＭに富んでいるＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の穏や
かな熱処理が試験管内でのＣ４ａ発生を減少させそして
これに関連して穏やかな熱処理が非−人間霊長動物中へ
の非経口的（静脈内）投与に伴う逆の副作用（高血圧症
）を減少させることも示した。最後に、我々は穏やかな
熱処理工程段階はＩｇＭもしくはＩｇＧまたは特異的抗
原結合位置の抗原的測定には意義あるほどの影響を与え
ず、従って免疫グロブリンの効果剤機能は変わらないこ
とも示した。免疫グロブリンの望ましい特別な補体活性
化性質の保有は、その後のオプソニン作用研究で確認さ
れた。
ＩｇＭに富んでいるＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の穏や
かな熱処理が試験管内でのＣ４ａ発生を減少させそして
これに関連して穏やかな熱処理が非−人間霊長動物中へ
の非経口的（静脈内）投与に伴う逆の副作用（高血圧症
）を減少させることも示した。最後に、我々は穏やかな
熱処理工程段階はＩｇＭもしくはＩｇＧまたは特異的抗
原結合位置の抗原的測定には意義あるほどの影響を与え
ず、従って免疫グロブリンの効果剤機能は変わらないこ
とも示した。免疫グロブリンの望ましい特別な補体活性
化性質の保有は、その後のオプソニン作用研究で確認さ
れた。
【００２０】
【方法】種々の免疫グロブリン製剤により誘発される逆
作用（高血圧症）をシノモルグス猿中で評価した。猿に
ケタミン塩酸塩の筋肉内注射（５ｍｇ／ｋｇ）により麻
酔をかけた。挿管法の後に、ペントバルビタールナトリ
ウムの静脈注射（必要に応じて５−１０ｍｇ／ｋｇ）に
より麻酔状態を保った。それぞれ、平均的動脈血圧およ
び免疫グロブリン製剤の非経口的投与の測定のために、
カテーテルを大腿動脈および静脈の中に挿入した。
作用（高血圧症）をシノモルグス猿中で評価した。猿に
ケタミン塩酸塩の筋肉内注射（５ｍｇ／ｋｇ）により麻
酔をかけた。挿管法の後に、ペントバルビタールナトリ
ウムの静脈注射（必要に応じて５−１０ｍｇ／ｋｇ）に
より麻酔状態を保った。それぞれ、平均的動脈血圧およ
び免疫グロブリン製剤の非経口的投与の測定のために、
カテーテルを大腿動脈および静脈の中に挿入した。
【００２１】ＩｇＭに富んでいるＩｇＧ免疫グロブリン
濃縮物用には、我々は１ｍｇ／ｋｇ／分の注入速度（Ｉ
ｇＭ）を５０ｍｇ／ｋｇの総投与量となるまで用いた。 この速度および投与量は３０分以内に重症の高血圧症を
もたらした（表示されたデータ）。
濃縮物用には、我々は１ｍｇ／ｋｇ／分の注入速度（Ｉ
ｇＭ）を５０ｍｇ／ｋｇの総投与量となるまで用いた。 この速度および投与量は３０分以内に重症の高血圧症を
もたらした（表示されたデータ）。
【００２２】逆作用が生じる場合にはこの時間枠内で起
きることを我々は認識していたため、血圧測定は９０分
間の期間にわたり大腿動脈から行われた。Ｃ４ａアナフ
ィラトキシンの測定は、０、３０、６０および９０分に
おいて採取した全血（クエン酸塩を用いて抗凝固処理さ
れた）からの血漿に対して行われた。試料を−７０℃で
貯蔵した。Ｃ４ａ測定は、アメルシャム・インターナシ
ョナル（アーリントン・ハイツ、イリノイ州）製の器具
を用いる放射免疫検定により行われた。
きることを我々は認識していたため、血圧測定は９０分
間の期間にわたり大腿動脈から行われた。Ｃ４ａアナフ
ィラトキシンの測定は、０、３０、６０および９０分に
おいて採取した全血（クエン酸塩を用いて抗凝固処理さ
れた）からの血漿に対して行われた。試料を−７０℃で
貯蔵した。Ｃ４ａ測定は、アメルシャム・インターナシ
ョナル（アーリントン・ハイツ、イリノイ州）製の器具
を用いる放射免疫検定により行われた。
【００２３】
【定義】ここで使用されている抗体（または免疫グロブ
リン）製剤という表現は、少なくとも約２０重量％のＩ
ｇＭ型抗体を含んでおりそして存在している場合には残
りの抗体は主としてＩｇＧ型抗体および痕跡量の例えば
ＩｇＭなどの如き他の型であるような治療用抗体の堆積
物を意味している。個々の抗体は例えば血漿（例えば上
記のもの）の如き種々の源からまたは細胞媒体系統（例
えば雑種もしくは変換された細胞線からのモノクローン
性抗体）から得られる。下記の実施例では、我々のＩｇ
Ｍに富んでいる抗体製剤は平均して３０−５０重量％の
ＩｇＭ型抗体を含有しており、残りの抗体は主としてＩ
ｇＧ型のものである。
リン）製剤という表現は、少なくとも約２０重量％のＩ
ｇＭ型抗体を含んでおりそして存在している場合には残
りの抗体は主としてＩｇＧ型抗体および痕跡量の例えば
ＩｇＭなどの如き他の型であるような治療用抗体の堆積
物を意味している。個々の抗体は例えば血漿（例えば上
記のもの）の如き種々の源からまたは細胞媒体系統（例
えば雑種もしくは変換された細胞線からのモノクローン
性抗体）から得られる。下記の実施例では、我々のＩｇ
Ｍに富んでいる抗体製剤は平均して３０−５０重量％の
ＩｇＭ型抗体を含有しており、残りの抗体は主としてＩ
ｇＧ型のものである。
【００２４】非−特異的補体活性化は、抗原の不存在下
における免疫グロブリンによる補体カスケードの活性化
を意味している。
における免疫グロブリンによる補体カスケードの活性化
を意味している。
【００２５】最小の非−特異的補体活性化は、抗原の不
存在下での試験管内評価における約１．０μｇ／ｍｌ以
下のＣ４ａの発生を意味している。一方、最小の非−特
異的補体活性化は、対照用としてｐＨ４．２５の液体Ｉ
ＶＩＧを用いて発生するＣ４ａ量の約１００％以内のＣ
４ａ発生量を意味している。
存在下での試験管内評価における約１．０μｇ／ｍｌ以
下のＣ４ａの発生を意味している。一方、最小の非−特
異的補体活性化は、対照用としてｐＨ４．２５の液体Ｉ
ＶＩＧを用いて発生するＣ４ａ量の約１００％以内のＣ
４ａ発生量を意味している。
【００２６】特異的補体活性化は、抗原の存在下での免
疫グロブリン（ＩｇＭまたはＩｇＧ型のもの）による補
体カスケードの活性化を意味している。
疫グロブリン（ＩｇＭまたはＩｇＧ型のもの）による補
体カスケードの活性化を意味している。
【００２７】ＩｇＭに富んでいる抗体製剤に適用される
際に特異的補体活性化が実質的に損失されないというこ
とは、抗体製剤が抗原と結合可能でありそして試験管内
もしくは生体内での補体の正統的経路を活性化可能であ
ることを意味している。
際に特異的補体活性化が実質的に損失されないというこ
とは、抗体製剤が抗原と結合可能でありそして試験管内
もしくは生体内での補体の正統的経路を活性化可能であ
ることを意味している。
【００２８】
【物質】Ｐｄ ＩｇＭ 免疫グロブリン濃縮物製剤１２
．５容量部のｐＨが３．５−４．０の０．０５Ｍ酢酸塩
緩衝液中に懸濁されておりそして室温で２−３時間にわ
たり混合されたコーン留分ＩＩＩペースト（４５ｋｇ）
から、Ｐｄ ＩｇＭ 免疫グロブリン濃縮物を単離した
。該混合物に２．０容量／重量％のｐＨが４．８のカプ
リル酸を加えて、遠心により脂肪蛋白質およびプレカリ
クレイン活性化剤（ＰＫＡ）を除去した。抽出されたカ
プリレート上澄み液は、ダイアフィルタレーションまた
はＰＭ−３０を通す限外濾過後に、ｐＨ４．８における
０．０３−０．０６ｍｍｈｏ／ｃｍという低い伝導率を
与える。 ウィルスの不活性化は、０．３％ＴＮＢＰ／１％ツィー
ン−８０を用いて２４℃において６時間以上にわたり得
られた。カプリルレート上澄み液を例えばトリス（０．
０１０１容量の１Ｍトリス、ｐＨ７．８）またはイミダ
ゾール緩衝液（０．００５容量の１Ｍイミダゾール、ｐ
Ｈ７．８）殺菌水の如き緩衝液を用いて沈澱させ、ｐＨ
を酢酸を用いて４．０−４．８に調節し、そしてさらに
水に対してダイアフィルタレーション／限外濾過し、次
に固体グリセリンを加えてｐＨが４．０−４．８の０．
２５Ｍグリシンの最終的濃度とする。Ｐｄ ＩｇＭ 免
疫グロブリン濃縮物は低いＰＫＡ（対照用の１０％以下
）および高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によ
り測定された５％以下の凝集物を与えた。最終的なＩｇ
Ｍに富んでいる生成物は、合計５％の蛋白質水溶液中の
、乾燥重量基準で５０−６０％のＩｇＭ、３０−４０％
のＩｇＧ、３−５％のＩｇＡからなっていた。
．５容量部のｐＨが３．５−４．０の０．０５Ｍ酢酸塩
緩衝液中に懸濁されておりそして室温で２−３時間にわ
たり混合されたコーン留分ＩＩＩペースト（４５ｋｇ）
から、Ｐｄ ＩｇＭ 免疫グロブリン濃縮物を単離した
。該混合物に２．０容量／重量％のｐＨが４．８のカプ
リル酸を加えて、遠心により脂肪蛋白質およびプレカリ
クレイン活性化剤（ＰＫＡ）を除去した。抽出されたカ
プリレート上澄み液は、ダイアフィルタレーションまた
はＰＭ−３０を通す限外濾過後に、ｐＨ４．８における
０．０３−０．０６ｍｍｈｏ／ｃｍという低い伝導率を
与える。 ウィルスの不活性化は、０．３％ＴＮＢＰ／１％ツィー
ン−８０を用いて２４℃において６時間以上にわたり得
られた。カプリルレート上澄み液を例えばトリス（０．
０１０１容量の１Ｍトリス、ｐＨ７．８）またはイミダ
ゾール緩衝液（０．００５容量の１Ｍイミダゾール、ｐ
Ｈ７．８）殺菌水の如き緩衝液を用いて沈澱させ、ｐＨ
を酢酸を用いて４．０−４．８に調節し、そしてさらに
水に対してダイアフィルタレーション／限外濾過し、次
に固体グリセリンを加えてｐＨが４．０−４．８の０．
２５Ｍグリシンの最終的濃度とする。Ｐｄ ＩｇＭ 免
疫グロブリン濃縮物は低いＰＫＡ（対照用の１０％以下
）および高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によ
り測定された５％以下の凝集物を与えた。最終的なＩｇ
Ｍに富んでいる生成物は、合計５％の蛋白質水溶液中の
、乾燥重量基準で５０−６０％のＩｇＭ、３０−４０％
のＩｇＧ、３−５％のＩｇＡからなっていた。
【００２９】熱−凝集されたＩｇＧ製剤ＩＧＩＶ（ロッ
ト＃２８５５−１１Ｂ）の５％溶液を適当な抗体対照用
として使用した。５％ＩＧＩＶ溶液から、１時間にわた
る６２℃における加熱（ｐＨ７．０）により、熱−凝集
されたＩｇＧ溶液を製造した。２時間にわたる６２℃に
おける加熱（ｐＨ４．２５）により、他の熱−凝集され
たＩｇＧ溶液を製造した。
ト＃２８５５−１１Ｂ）の５％溶液を適当な抗体対照用
として使用した。５％ＩＧＩＶ溶液から、１時間にわた
る６２℃における加熱（ｐＨ７．０）により、熱−凝集
されたＩｇＧ溶液を製造した。２時間にわたる６２℃に
おける加熱（ｐＨ４．２５）により、他の熱−凝集され
たＩｇＧ溶液を製造した。
【００３０】熱処理されたＩｇＭ、ＩｇＧ製剤最適処理
方式を決めるための水またはグリシン（ｐＨ４．０−４
．８）中でのＩｇＭ、ＩｇＧ調合物の熱処理は１０分間
−８時間の期間にわたる３７℃−６２℃の範囲であった
。
方式を決めるための水またはグリシン（ｐＨ４．０−４
．８）中でのＩｇＭ、ＩｇＧ調合物の熱処理は１０分間
−８時間の期間にわたる３７℃−６２℃の範囲であった
。
【００３１】
【検定方法】高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）
による凝集物測定 天然のＩｇＭおよびＩｇＧ製剤または加熱により誘発さ
れたもの中での凝集物生成を、ＴＳＫＧ４０００ＳＷＸ
Ｌゲル（７．８×３００ｍｍ、８μｍの粒子寸法、東洋
ソーダ株式会社、日本）を用いそして０．０５Ｍ酢酸ナ
トリウム、０．２０Ｍ硫酸ナトリウム、ｐＨ５．０で溶
離される高圧液体クロマトグラフィーにより測定した。
による凝集物測定 天然のＩｇＭおよびＩｇＧ製剤または加熱により誘発さ
れたもの中での凝集物生成を、ＴＳＫＧ４０００ＳＷＸ
Ｌゲル（７．８×３００ｍｍ、８μｍの粒子寸法、東洋
ソーダ株式会社、日本）を用いそして０．０５Ｍ酢酸ナ
トリウム、０．２０Ｍ硫酸ナトリウム、ｐＨ５．０で溶
離される高圧液体クロマトグラフィーにより測定した。
【００３２】ＩｇＭ免疫グロブリン濃縮物の生物学的お
よび機能的活性測定１．放射免疫拡散（ＲＩＤ）による
ＩｇＭに富んでいるＩｇＧの抗原性測定ＩｇＭおよびＩ
ｇＧの濃度および抗原性測定は、ヘレン・ラボラトリイ
ス（ビューモント、テキサス州）製のキプレートシステ
ムを用いる放射免疫拡散（ＲＩＤ）により測定された。 この方法は、抗体保有の間接的評価を与えるものである
。
よび機能的活性測定１．放射免疫拡散（ＲＩＤ）による
ＩｇＭに富んでいるＩｇＧの抗原性測定ＩｇＭおよびＩ
ｇＧの濃度および抗原性測定は、ヘレン・ラボラトリイ
ス（ビューモント、テキサス州）製のキプレートシステ
ムを用いる放射免疫拡散（ＲＩＤ）により測定された。 この方法は、抗体保有の間接的評価を与えるものである
。
【００３３】２．Ｐｓ．ＩＴ４ＬＰＳに対するＥＬＩＳ
Ａによる特異的抗原結合位置研究 ＩｇＭ免疫グロブリン濃縮物および穏やかに熱処理され
たＩｇＭ濃縮物の生物学的活性を酵素−結合された免疫
吸収剤検定（ＥＬＩＳＡ）により測定して、Ｐｓ．ＩＴ
４ＬＰＳ（脂肪多糖類）へのＩｇＭ結合を定量化しそし
て特異的抗原結合位置の保有を評価した。ｐＨが９．５
の０．０６Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液中の１０μｇの緑膿
菌（Ｐ． ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）免疫型４ＬＰＳをイ
ミュロン１板（ダイナテク・ラボ）に３７℃において３
時間にわたり被覆させた。板の各ウエルをＰＢＳ−０．
０５％ツィーン緩衝液で２回洗浄した。標準的シュード
モナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）モノクローン性抗体
および未加熱／加熱処理されたＩｇＭ濃縮物をＢＳＡを
含有しているｐＨが７．８の０．０１Ｍトリス緩衝液中
で希釈し、そして室温で一夜培養された板に加えた。各
ウエルをＰＢＳ−ツィーン緩衝液で３回洗浄した。山羊
の抗−人間ＩｇＭアルカリ性ホスファターゼ共役物（ハ
イクローン、ロガン、ユタ州）を室温で４時間培養され
たウエルに加え、そしてウエルをＰＢＳ−ツィーン緩衝
液で５回洗浄した。ｐＨが９．８のジエタノールアミン
基質溶液中のｐ−燐酸ニトロフェニルを各ウエルに室温
において３０分間にわたり加え、そしてＡ４０５ｎｍ／
４５０ｎｍを読み取った。
Ａによる特異的抗原結合位置研究 ＩｇＭ免疫グロブリン濃縮物および穏やかに熱処理され
たＩｇＭ濃縮物の生物学的活性を酵素−結合された免疫
吸収剤検定（ＥＬＩＳＡ）により測定して、Ｐｓ．ＩＴ
４ＬＰＳ（脂肪多糖類）へのＩｇＭ結合を定量化しそし
て特異的抗原結合位置の保有を評価した。ｐＨが９．５
の０．０６Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液中の１０μｇの緑膿
菌（Ｐ． ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）免疫型４ＬＰＳをイ
ミュロン１板（ダイナテク・ラボ）に３７℃において３
時間にわたり被覆させた。板の各ウエルをＰＢＳ−０．
０５％ツィーン緩衝液で２回洗浄した。標準的シュード
モナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）モノクローン性抗体
および未加熱／加熱処理されたＩｇＭ濃縮物をＢＳＡを
含有しているｐＨが７．８の０．０１Ｍトリス緩衝液中
で希釈し、そして室温で一夜培養された板に加えた。各
ウエルをＰＢＳ−ツィーン緩衝液で３回洗浄した。山羊
の抗−人間ＩｇＭアルカリ性ホスファターゼ共役物（ハ
イクローン、ロガン、ユタ州）を室温で４時間培養され
たウエルに加え、そしてウエルをＰＢＳ−ツィーン緩衝
液で５回洗浄した。ｐＨが９．８のジエタノールアミン
基質溶液中のｐ−燐酸ニトロフェニルを各ウエルに室温
において３０分間にわたり加え、そしてＡ４０５ｎｍ／
４５０ｎｍを読み取った。
【００３４】３．食細胞検定による特異的補体活性測定
食細胞検定を使用して、穏やかに熱処理されたＩｇＭ免
疫グロブリン濃縮物のオプソニン活性（特異的補体活性
）を測定した。食細胞検定は、組織培養流体中に懸濁さ
れているバクテリア（大腸菌０５０：ｋ１）および人間
食細胞（ＰＭＮ）を使用した。バクテリア対ＰＭＮ比は
２０対１であり、そして５（容量／容量）％のモルモッ
ト血清（ＧＰＳ）が補体源として作用した。２．５μｌ
のＩｇＭ濃縮物を総検定混合物（５００μｌ）に加え、
そして３７℃において１００分間にわたり培養した。検
定混合物の試験試料を９容量の蒸留水に加えてＰＭＮを
溶解させ、そして生存バクテリアを二重寒天板計数によ
り数えた。
食細胞検定を使用して、穏やかに熱処理されたＩｇＭ免
疫グロブリン濃縮物のオプソニン活性（特異的補体活性
）を測定した。食細胞検定は、組織培養流体中に懸濁さ
れているバクテリア（大腸菌０５０：ｋ１）および人間
食細胞（ＰＭＮ）を使用した。バクテリア対ＰＭＮ比は
２０対１であり、そして５（容量／容量）％のモルモッ
ト血清（ＧＰＳ）が補体源として作用した。２．５μｌ
のＩｇＭ濃縮物を総検定混合物（５００μｌ）に加え、
そして３７℃において１００分間にわたり培養した。検
定混合物の試験試料を９容量の蒸留水に加えてＰＭＮを
溶解させ、そして生存バクテリアを二重寒天板計数によ
り数えた。
【００３５】４．アナフィラトキシン（Ｃ４ａ）発生に
より評価される試験管内および生体内での非−特異的補
体活性化 種々の免疫グロブリン製剤の試験管内での補体の正統的
経路を活性化させる能力を、各製剤（１．４７ｍｇのＩ
ｇＭまたはＩｇＧ／ｍｌの血清）を人間血清と共に３７
℃において２０分間にわたり培養しそして生じたＣ４ａ
水準生成を放射免疫検定（ＲＩＡ）により評価した。Ｒ
ＩＡ器具はアメルシャム（アーリントン・ハイツ、イリ
ノイ州）製のものであった。
より評価される試験管内および生体内での非−特異的補
体活性化 種々の免疫グロブリン製剤の試験管内での補体の正統的
経路を活性化させる能力を、各製剤（１．４７ｍｇのＩ
ｇＭまたはＩｇＧ／ｍｌの血清）を人間血清と共に３７
℃において２０分間にわたり培養しそして生じたＣ４ａ
水準生成を放射免疫検定（ＲＩＡ）により評価した。Ｒ
ＩＡ器具はアメルシャム（アーリントン・ハイツ、イリ
ノイ州）製のものであった。
【００３６】生体内での系統的補体活性化は、猿におけ
る種々の免疫グロブリン製剤の非経口的投与後の血漿Ｃ
４ａ水準を測定することにより、評価された。人間のＣ
４ａ（ＲＩＡ器具）に対して上昇した抗体は部分的にす
なわち約６０％ほど猿のＣ４ａと相互反応した。
る種々の免疫グロブリン製剤の非経口的投与後の血漿Ｃ
４ａ水準を測定することにより、評価された。人間のＣ
４ａ（ＲＩＡ器具）に対して上昇した抗体は部分的にす
なわち約６０％ほど猿のＣ４ａと相互反応した。
【００３７】
【結果】表１は、非−特異的補体活性化が静脈内注入後
の逆の心臓血管事象と関連があるという仮説を試験する
ために設定された初期実験において使用された免疫グロ
ブリン製剤を記している。この仮説を試験するために、
補体源として人間血清を使用する際のＣ４ａ発生を測定
することにより、種々の免疫グロブリン製剤をそれらが
試験管内での補体の正統的経路を活性化させる能力に関
して評価した。心臓血管安全性を評価するために、免疫
グロブリン注入後に９０分間の期間にわたり猿の食細胞
中での平均動脈血圧を測定した。注入後の補体活性化を
確認するために、血漿Ｃ４ａ水準も測定した。
の逆の心臓血管事象と関連があるという仮説を試験する
ために設定された初期実験において使用された免疫グロ
ブリン製剤を記している。この仮説を試験するために、
補体源として人間血清を使用する際のＣ４ａ発生を測定
することにより、種々の免疫グロブリン製剤をそれらが
試験管内での補体の正統的経路を活性化させる能力に関
して評価した。心臓血管安全性を評価するために、免疫
グロブリン注入後に９０分間の期間にわたり猿の食細胞
中での平均動脈血圧を測定した。注入後の補体活性化を
確認するために、血漿Ｃ４ａ水準も測定した。
【００３８】試験管内データ
ｐＨが４．２５の０．２Ｍグリシン中の５％ＩＧＩＶ免
疫グロブリン（対照用）溶液は、人間血清（＜１％、０
．２３μｇ／ｍｌ）と共に培養された時には、試験管内
では認識できるほどのＣ４ａ発生を起こさなかった。ｐ
Ｈが４．２５の同様なグリシン緩衝液中での真性グロブ
リン沈澱により製造された前記の富んでいるｐｄ Ｉｇ
Ｍは試験管内でかなりのＣ４ａ発生（４．５μｇ／ｍｌ
）を生じた。補体の公知の活性化剤である凝集されたＩ
ｇＧを製造するために、我々はｐＨが７．０の５％ＩＧ
ＩＶ蛋白質溶液を６２℃に１時間加熱した。この加熱処
理で、１９％の五量体凝集物を有する溶液が生じ、それ
はＲＩＤにより評価されたそれの抗原性決定因子の７２
％以上を依然として保有していた。この免疫グロブリン
溶液は、人間血清と共に培養された時には、かなりの量
のＣ４ａ（１４．０μｇ／ｍｌ）も生成した。しかしな
がら、同じＩＧＩＶ溶液は試験管内でｐＨ４．２５にお
いて加熱された時には５８％の凝集物（五量体より小さ
い寸法）を生成したがかなりの量のＣ４ａは生成しなか
った（０．５６μｇ／ｍｌ）。このＩＧＧ溶液はＲＩＤ
により測定されたそれの抗原性決定因子の８０％以上を
損失していた。
疫グロブリン（対照用）溶液は、人間血清（＜１％、０
．２３μｇ／ｍｌ）と共に培養された時には、試験管内
では認識できるほどのＣ４ａ発生を起こさなかった。ｐ
Ｈが４．２５の同様なグリシン緩衝液中での真性グロブ
リン沈澱により製造された前記の富んでいるｐｄ Ｉｇ
Ｍは試験管内でかなりのＣ４ａ発生（４．５μｇ／ｍｌ
）を生じた。補体の公知の活性化剤である凝集されたＩ
ｇＧを製造するために、我々はｐＨが７．０の５％ＩＧ
ＩＶ蛋白質溶液を６２℃に１時間加熱した。この加熱処
理で、１９％の五量体凝集物を有する溶液が生じ、それ
はＲＩＤにより評価されたそれの抗原性決定因子の７２
％以上を依然として保有していた。この免疫グロブリン
溶液は、人間血清と共に培養された時には、かなりの量
のＣ４ａ（１４．０μｇ／ｍｌ）も生成した。しかしな
がら、同じＩＧＩＶ溶液は試験管内でｐＨ４．２５にお
いて加熱された時には５８％の凝集物（五量体より小さ
い寸法）を生成したがかなりの量のＣ４ａは生成しなか
った（０．５６μｇ／ｍｌ）。このＩＧＧ溶液はＲＩＤ
により測定されたそれの抗原性決定因子の８０％以上を
損失していた。
【００３９】
【表１】
表１
免疫グロブリン製剤の特性抗体
ロット＃ 緩衝液 加熱 ＲＩＤ
％凝集物 試験管内で
（時
間） ＩｇＭ ＩｇＧ ＜五量体 ＞五量体 発
生したＣ４ａ
６２℃ ｍｇ／ｍｌ
（人間血清）
（μｇ／ｍｌ） ＩＧＩＶ ２８
５５− ０．２Ｍグリシン ０ ０
５７．０ ０ ０
０．２３（５％） １１−Ｂ ｐＨ ４．２５
ｐｄＩｇＭ ３７４７− ０．２Ｍグリシン ０
３６．０ ２６．２ ０
６．０ ４．５ ８２−Ｅ
ｐＨ ４．２５ＩＧＩＶ １８０５３− ０．２Ｍ
グリシン １ ０ ４０．９ １１
．０ １９．０ １４．０（ＨＴ） ７
９−８ ｐＨ ７．０ＩＧＩＶ １８０５３−
０．２Ｍグリシン ２ ０ １０．
２ ５８．０ ０ ０．５６
（ＨＴ） ６６−２ ｐＨ ４．２５ これらの結果は、ｐＨが７．０ではｐｄＩｇＭ、Ｉ
ｇＧ免疫グロブリン濃縮物並びに熱−凝集されたＩＧＩ
Ｖの両者は試験管内でかなりＣ４ａを発生したが、ｐＨ
が４．２５の天然ＩＧＩＶおよび加熱されたＩＧＩＶは
あまりＣ４ａアナフィラトキシンを発生しなかったこと
を示している。
表１
免疫グロブリン製剤の特性抗体
ロット＃ 緩衝液 加熱 ＲＩＤ
％凝集物 試験管内で
（時
間） ＩｇＭ ＩｇＧ ＜五量体 ＞五量体 発
生したＣ４ａ
６２℃ ｍｇ／ｍｌ
（人間血清）
（μｇ／ｍｌ） ＩＧＩＶ ２８
５５− ０．２Ｍグリシン ０ ０
５７．０ ０ ０
０．２３（５％） １１−Ｂ ｐＨ ４．２５
ｐｄＩｇＭ ３７４７− ０．２Ｍグリシン ０
３６．０ ２６．２ ０
６．０ ４．５ ８２−Ｅ
ｐＨ ４．２５ＩＧＩＶ １８０５３− ０．２Ｍ
グリシン １ ０ ４０．９ １１
．０ １９．０ １４．０（ＨＴ） ７
９−８ ｐＨ ７．０ＩＧＩＶ １８０５３−
０．２Ｍグリシン ２ ０ １０．
２ ５８．０ ０ ０．５６
（ＨＴ） ６６−２ ｐＨ ４．２５ これらの結果は、ｐＨが７．０ではｐｄＩｇＭ、Ｉ
ｇＧ免疫グロブリン濃縮物並びに熱−凝集されたＩＧＩ
Ｖの両者は試験管内でかなりＣ４ａを発生したが、ｐＨ
が４．２５の天然ＩＧＩＶおよび加熱されたＩＧＩＶは
あまりＣ４ａアナフィラトキシンを発生しなかったこと
を示している。
【００４０】免疫グロブリン溶液を静脈内に注入した時
のこれらの非特異的補体活性化の試験管内測定値がシノ
モルグス猿中での逆の心臓血管作用と関連しているかど
うかを測定することが重要である。
のこれらの非特異的補体活性化の試験管内測定値がシノ
モルグス猿中での逆の心臓血管作用と関連しているかど
うかを測定することが重要である。
【００４１】
【表２】
【００４２】表２および図１−４は、各免疫グロブリン
製剤を用いた生体内結果を表示している。これらの結果
は、試験管内ではかなりのＣ４ａ水準を生成する免疫グ
ロブリン製剤すなわちｐＨが７．０におけるｐｄＩｇＭ
および熱−凝集されたＩＧＩＶはシノモルグス猿中で重
症の高血圧症および高められた血漿Ｃ４ａ水準を引き起
こす一方で、試験管内でかなりのＣ４ａを生成しない免
疫グロブリン製剤すなわちｐＨが４．２５における天然
ＩＧＩＶおよび熱凝集されたＩＧＩＶはシノモルグス猿
中で高血圧症を引き起こさずしかも血漿Ｃ４ａ水準を大
きく増加させないことを示している。従って、種々の免
疫グロブリン製剤によるＣ４ａ発生の試験管内評価は静
脈注入後の生体内での逆の心臓血管作用と関連があるよ
うである。
製剤を用いた生体内結果を表示している。これらの結果
は、試験管内ではかなりのＣ４ａ水準を生成する免疫グ
ロブリン製剤すなわちｐＨが７．０におけるｐｄＩｇＭ
および熱−凝集されたＩＧＩＶはシノモルグス猿中で重
症の高血圧症および高められた血漿Ｃ４ａ水準を引き起
こす一方で、試験管内でかなりのＣ４ａを生成しない免
疫グロブリン製剤すなわちｐＨが４．２５における天然
ＩＧＩＶおよび熱凝集されたＩＧＩＶはシノモルグス猿
中で高血圧症を引き起こさずしかも血漿Ｃ４ａ水準を大
きく増加させないことを示している。従って、種々の免
疫グロブリン製剤によるＣ４ａ発生の試験管内評価は静
脈注入後の生体内での逆の心臓血管作用と関連があるよ
うである。
【００４３】ｐＨ４．２５において加熱されたＩＧＩＶ
蛋白質溶液は静脈内に投与された時には試験管内でかな
りのＣ４ａ発生を引き起こさず且つ高血圧症を引き起こ
さないため、我々は多分ｐｄＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブ
リン濃縮物のｐＨ４．２５における加熱が溶液中に存在
しているＩｇＧに悪影響を与えずにＩｇＭの非−特異的
補体活性化能力を減少させると理由づけた。すなわち、
酸性ｐＨにおけるＩｇＧの加熱は試験管内で補体を活性
化させそしてシノモルグス猿中に注入された時の悪影響
を有していない溶液を与えない。この仮説を試験するた
めに、我々は最初にｐｄＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブリン
溶液を６２℃に２時間加熱しそしてそれのＣ４ａ発生能
力を試験管内で評価した。この溶液は試験管内でかなり
のＣ４ａを発生せず（０．２７μｇ／ｍｌ）、そしてシ
ノモルグス猿中に注入された時に高血圧症または血漿Ｃ
４ａ中での実質的な増加を引き起こさなかった。表３ａ
、３ｂおよび図１、２。
蛋白質溶液は静脈内に投与された時には試験管内でかな
りのＣ４ａ発生を引き起こさず且つ高血圧症を引き起こ
さないため、我々は多分ｐｄＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブ
リン濃縮物のｐＨ４．２５における加熱が溶液中に存在
しているＩｇＧに悪影響を与えずにＩｇＭの非−特異的
補体活性化能力を減少させると理由づけた。すなわち、
酸性ｐＨにおけるＩｇＧの加熱は試験管内で補体を活性
化させそしてシノモルグス猿中に注入された時の悪影響
を有していない溶液を与えない。この仮説を試験するた
めに、我々は最初にｐｄＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブリン
溶液を６２℃に２時間加熱しそしてそれのＣ４ａ発生能
力を試験管内で評価した。この溶液は試験管内でかなり
のＣ４ａを発生せず（０．２７μｇ／ｍｌ）、そしてシ
ノモルグス猿中に注入された時に高血圧症または血漿Ｃ
４ａ中での実質的な増加を引き起こさなかった。表３ａ
、３ｂおよび図１、２。
【００４４】
【表３】
表３ａ 熱処理された
ｐｄＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の特性抗体
ＲＩＤ
％凝集物 試験管内で発生したＣ４Ａ
ＩｇＭ ＩｇＧ
＞五量体 （人間血清） μｇ／ｍｌ
ｍｇ／ｍｌ
ｐｄＩｇＭ（ｐＨ４．
２５） ６．５８ １２．８１ ４
７．０ ０．２７（ＨＴ ６２℃，２
時間）
表３ａ 熱処理された
ｐｄＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の特性抗体
ＲＩＤ
％凝集物 試験管内で発生したＣ４Ａ
ＩｇＭ ＩｇＧ
＞五量体 （人間血清） μｇ／ｍｌ
ｍｇ／ｍｌ
ｐｄＩｇＭ（ｐＨ４．
２５） ６．５８ １２．８１ ４
７．０ ０．２７（ＨＴ ６２℃，２
時間）
【００４５】
【表４】
表３ｂ猿におけるＭＡＰおよび血漿Ｃ
４ａアナフィラトキシン水準に対する熱処理されたｐｄ
ＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の急性作用（Ｎ＝
３）
時間（分）抗体 速度
投与量 ０
３０ ６０ ９０ ｐｄＩｇ
Ｍ（ｐＨ４．２５） ２ｍｇ／ｋｇ／分 １００
ｍｇ／ｋｇＭＡＰ ９０±３ ９４±４
９８±４ ９７±５
（ｍｍＨｇ）（ＨＴ６２
℃ ２時間） Ｃ４ａ（ｎｇ
／ｍｌ） １５５±１９ ５３０±２５ ３７２±
７５ ２５１±６０これらの結果は、酸性ｐＨ（４．２
５）におけるＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の加
熱（２時間にわたる６２℃）により、試験管内での非−
特異的補体活性化能力を劇的に減少させそしてシノモル
グス猿に注入された時に高血圧症を引き起こさない蛋白
質溶液が生成したことを示している。しかしながら、こ
の特定熱処理（２時間にわたる６２℃）はＩｇＭ抗原性
決定因子の８０％以上の損失および４７％以上の五量体
凝集物生成をもたらした、表３。
表３ｂ猿におけるＭＡＰおよび血漿Ｃ
４ａアナフィラトキシン水準に対する熱処理されたｐｄ
ＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の急性作用（Ｎ＝
３）
時間（分）抗体 速度
投与量 ０
３０ ６０ ９０ ｐｄＩｇ
Ｍ（ｐＨ４．２５） ２ｍｇ／ｋｇ／分 １００
ｍｇ／ｋｇＭＡＰ ９０±３ ９４±４
９８±４ ９７±５
（ｍｍＨｇ）（ＨＴ６２
℃ ２時間） Ｃ４ａ（ｎｇ
／ｍｌ） １５５±１９ ５３０±２５ ３７２±
７５ ２５１±６０これらの結果は、酸性ｐＨ（４．２
５）におけるＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の加
熱（２時間にわたる６２℃）により、試験管内での非−
特異的補体活性化能力を劇的に減少させそしてシノモル
グス猿に注入された時に高血圧症を引き起こさない蛋白
質溶液が生成したことを示している。しかしながら、こ
の特定熱処理（２時間にわたる６２℃）はＩｇＭ抗原性
決定因子の８０％以上の損失および４７％以上の五量体
凝集物生成をもたらした、表３。
【００４６】従って、この熱処理は静脈内投与に関連し
ている逆の心臓血管作用を減少させるが、免疫グロブリ
ンの効果剤機能も減少させるようである。従って、我々
は関連する生物学的効果剤機能すなわち抗原結合、オプ
ソニン作用などを保有しながら最小の非−特異的補体活
性化能力を有するＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物
を生じるであろう最適加熱温度および培養時間をさらに
詳細に規定しようと試みた。
ている逆の心臓血管作用を減少させるが、免疫グロブリ
ンの効果剤機能も減少させるようである。従って、我々
は関連する生物学的効果剤機能すなわち抗原結合、オプ
ソニン作用などを保有しながら最小の非−特異的補体活
性化能力を有するＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物
を生じるであろう最適加熱温度および培養時間をさらに
詳細に規定しようと試みた。
【００４７】この評価中に、多くの条件を試験した。表
４には、試験管内でのＣ４ａアナフィラトキシン発生に
対する温度および培養時間の影響に関するデータがまと
められている。
４には、試験管内でのＣ４ａアナフィラトキシン発生に
対する温度および培養時間の影響に関するデータがまと
められている。
【００４８】
【表５】
【００４９】６２℃に１０分間加熱されたｐｄＩｇＭ、
ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物（５０％ＩｇＭ、ｐＨ４．
２４）は試験管内で実質的でない量のＣ４ａ発生を引き
起こしたが（０．４９μｇ／ｍｌ）、ＩｇＭ抗原性決定
因子の約５０％が損失された。ＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロ
ブリン濃縮物を５５℃に３０分間加熱すると、試験管内
でのＣ４ａ発生が０．３５μｇ／ｍｌに減少し、そして
ＩｇＭ免疫グロブリンはそれの抗原性決定因子の７５％
以上を保有していた。５２℃に１２０分間にわたり加熱
すると、Ｃ４ａ発生が０．６０μｇ／ｍｌに減少しそし
て免疫グロブリンはそれの抗原性決定因子の９８％以上
を保有していた。５０℃に１８０分間にわたり加熱する
と、Ｃ４ａ発生が０．７７μｇ／ｍｌに減少しそして免
疫グロブリンはそれの抗原性決定因子の９２％以上を保
有していた。４５℃−３７℃に加熱された免疫グロブリ
ンはかなりのＣ４ａ発生能力（＞４μｇ／ｍｌ）を保有
しておりそしてＩｇＭ抗原性決定因子の減少は示さなか
った。
ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物（５０％ＩｇＭ、ｐＨ４．
２４）は試験管内で実質的でない量のＣ４ａ発生を引き
起こしたが（０．４９μｇ／ｍｌ）、ＩｇＭ抗原性決定
因子の約５０％が損失された。ＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロ
ブリン濃縮物を５５℃に３０分間加熱すると、試験管内
でのＣ４ａ発生が０．３５μｇ／ｍｌに減少し、そして
ＩｇＭ免疫グロブリンはそれの抗原性決定因子の７５％
以上を保有していた。５２℃に１２０分間にわたり加熱
すると、Ｃ４ａ発生が０．６０μｇ／ｍｌに減少しそし
て免疫グロブリンはそれの抗原性決定因子の９８％以上
を保有していた。５０℃に１８０分間にわたり加熱する
と、Ｃ４ａ発生が０．７７μｇ／ｍｌに減少しそして免
疫グロブリンはそれの抗原性決定因子の９２％以上を保
有していた。４５℃−３７℃に加熱された免疫グロブリ
ンはかなりのＣ４ａ発生能力（＞４μｇ／ｍｌ）を保有
しておりそしてＩｇＭ抗原性決定因子の減少は示さなか
った。
【００５０】次に我々は試験管内でのＣ４ａ発生に対す
るｐＨ、ＩｇＭ濃度および培養時間の影響を試験した、
表５。温度は５０℃に一定に保たれていた。
るｐＨ、ＩｇＭ濃度および培養時間の影響を試験した、
表５。温度は５０℃に一定に保たれていた。
【００５１】
【表６】
表５５０℃におけるＩｇＭ免疫グロ
ブリン濃縮物の試験管内でのＣ４ａ発生＊およびＩｇＭ
抗原性決定因子に対するｐＨ、ＩｇＭ濃度および培養時
間の影響培養 ５０％ ＩｇＭ ｐＨ ４．
４２ ５０％ ＩｇＭ ｐＨ ４．２４
２０％ ＩｇＭ ｐＨ ４．２５時間（分） Ｃ４ａ
ＩｇＭ Ｃ４ａ
ＩｇＭ Ｃ４ａ ＩｇＭ
μｇ／ｍｌ μｇ／ｍｌ μ
ｇ／ｍｌ μｇ／ｍｌ μｇ／ｍｌ μ
ｇ／ｍｌ ０ ７．０６
３７．９０ ５．４５ ３７．９
０ ５．００ １０．０７ １５
２．７６ ３７．９０ １
．２２ ３７．９０ １．２６
１０．０７ ３０ ２．５２
３７．９０ ０．９８ ３５．５６
０．８８ １０．３８ ４５
２．１２ ３７．９０ １．
０３ ３５．５６ ０．９６
１０．３８ ６０ ２．０８
３６．７３ ０．５４ ３３．２７
０．９４ ９．７７ ９０
１．７４ ３７．９０ ０．９
８ ３３．２７１２０ １．２
０ ３５．５６ ０．７９ ２
８．８１ ０．９４ ８．３２１５
０ １．０３ ３６．７３１８０
０．８８ ３７．９０
０．５６ ２６．６５ ０．９０
６．１＊ 対照用（外因性免疫グロブリンで
ない）Ｃ４ａ水準は全ての報告値から引かれている。
表５５０℃におけるＩｇＭ免疫グロ
ブリン濃縮物の試験管内でのＣ４ａ発生＊およびＩｇＭ
抗原性決定因子に対するｐＨ、ＩｇＭ濃度および培養時
間の影響培養 ５０％ ＩｇＭ ｐＨ ４．
４２ ５０％ ＩｇＭ ｐＨ ４．２４
２０％ ＩｇＭ ｐＨ ４．２５時間（分） Ｃ４ａ
ＩｇＭ Ｃ４ａ
ＩｇＭ Ｃ４ａ ＩｇＭ
μｇ／ｍｌ μｇ／ｍｌ μ
ｇ／ｍｌ μｇ／ｍｌ μｇ／ｍｌ μ
ｇ／ｍｌ ０ ７．０６
３７．９０ ５．４５ ３７．９
０ ５．００ １０．０７ １５
２．７６ ３７．９０ １
．２２ ３７．９０ １．２６
１０．０７ ３０ ２．５２
３７．９０ ０．９８ ３５．５６
０．８８ １０．３８ ４５
２．１２ ３７．９０ １．
０３ ３５．５６ ０．９６
１０．３８ ６０ ２．０８
３６．７３ ０．５４ ３３．２７
０．９４ ９．７７ ９０
１．７４ ３７．９０ ０．９
８ ３３．２７１２０ １．２
０ ３５．５６ ０．７９ ２
８．８１ ０．９４ ８．３２１５
０ １．０３ ３６．７３１８０
０．８８ ３７．９０
０．５６ ２６．６５ ０．９０
６．１＊ 対照用（外因性免疫グロブリンで
ない）Ｃ４ａ水準は全ての報告値から引かれている。
【００５２】ｐＨ４．４２において３時間にわたり５０
℃に加熱された５０％のＩｇＭを含有しているｐｄＩｇ
Ｍ免疫グロブリン濃縮物はＣ４ａ発生において７．０６
μｇ／ｍｌから０．８８μｇ／ｍｌへの減少を生じそし
て完全にＩｇＭ抗原性決定因子を保有していた。ｐＨ４
．２４において６０分間にわたり５０℃に加熱された５
０％のＩｇＭを含有しているｐｄＩｇＭ免疫グロブリン
濃縮物は試験管内でのＣ４ａ発生を引き起こして０．５
４μｇ／ｍｌに減少させそして依然としてかなりのＩｇ
Ｍ抗原性決定因子（８８％）を保有していた。ｐＨ４．
２５において３０分間にわたり５０℃に加熱された２０
％のＩｇＭを含有しているＩｇＭ濃縮物は少量のＩｇＭ
抗原性決定因子を損失させながらＣ４ａ発生を引き起こ
して０．８８μｇ／ｍｌに減少させ、そしてさらに１８
０分間培養しても、試験管内ではＣ４ａ発生におけるそ
れ以上の減少は引き起こされなかったがＩｇＭ抗原性決
定因子の損失（４０％）をもたらした。
℃に加熱された５０％のＩｇＭを含有しているｐｄＩｇ
Ｍ免疫グロブリン濃縮物はＣ４ａ発生において７．０６
μｇ／ｍｌから０．８８μｇ／ｍｌへの減少を生じそし
て完全にＩｇＭ抗原性決定因子を保有していた。ｐＨ４
．２４において６０分間にわたり５０℃に加熱された５
０％のＩｇＭを含有しているｐｄＩｇＭ免疫グロブリン
濃縮物は試験管内でのＣ４ａ発生を引き起こして０．５
４μｇ／ｍｌに減少させそして依然としてかなりのＩｇ
Ｍ抗原性決定因子（８８％）を保有していた。ｐＨ４．
２５において３０分間にわたり５０℃に加熱された２０
％のＩｇＭを含有しているＩｇＭ濃縮物は少量のＩｇＭ
抗原性決定因子を損失させながらＣ４ａ発生を引き起こ
して０．８８μｇ／ｍｌに減少させ、そしてさらに１８
０分間培養しても、試験管内ではＣ４ａ発生におけるそ
れ以上の減少は引き起こされなかったがＩｇＭ抗原性決
定因子の損失（４０％）をもたらした。
【００５３】免疫グロブリン効果剤機能に対する加熱の
影響をさらに評価するために、我々は種々の加熱条件下
でのＰｓ．ＩＴ４脂肪多糖類に対するＩｇＭの抗原結合
活性を評価した。これらの結果は表６にまとまられてい
る。
影響をさらに評価するために、我々は種々の加熱条件下
でのＰｓ．ＩＴ４脂肪多糖類に対するＩｇＭの抗原結合
活性を評価した。これらの結果は表６にまとまられてい
る。
【００５４】
【表７】
表６ｐｄＩｇＭ濃縮物の抗原性決定
因子および特異的抗原結合活性に対する温度および培養
時間の影響 試料 加熱 ＲＩ
Ｄ ＥＬＩＳＡ 特異的活
性 ℃ 分
ＩｇＭ α Ｐｓ ＩＴ４ ＬＰＳ
α ＬＰＳ
ｍｇ／ｍｌ ｍｇ／ｍｌ
ｍｇ／ｍｇ ＩｇＭ ３７４７−８２−Ｅ
−− −− ３６．０
０．５４２ ０．０１５（ｐＨ
４．４２） １８１０７−５８−１ ６２ １０
１７．４２ ０．４００
０．０２３１８０５３−６２−６ ６２
１２０ ６．５８ ０．０４０
０．００６１８１０７−６２−３
５５ ３０ ２６．７７
０．５１８ ０．０１９１８１０
７−６２−５ ５５ ５０ ２４
．６１ ０．３６４ ０．
０１５１８１０７−７２−９ ５２ １５０
３５．００ ０．４８３
０．０１４１８１０７−７２−１１
５２ ２１０ ３２．３２ ０．
４５５ ０．０１４１８１０７−６３
−７ ５０ １８０ ３２．３８
０．４２７ ０．０１３１
８１０７−６７−１５ ４５ ４８０
３５．６８ ０．６０４
０．０１７１８１０７−７０−１ ５０
１８０ ３２．９０ ０．４１９
０．０１３ １２０分間にわたり６２℃に加熱されたｐｄＩｇＭ
、ＩｇＧ濃縮物はＩｇＭ抗原性決定因子に悪影響を与え
て、特異的抗原結合活性の９０％以上の損失および特異
的活性（αＬＰＳ／ＩｇＭ）における３倍の減少を生じ
た。比較的低温で処理された試料は全てかなりの特異的
抗原結合活性および特異的活性におけるかなりでない減
少を全て保有していた。
表６ｐｄＩｇＭ濃縮物の抗原性決定
因子および特異的抗原結合活性に対する温度および培養
時間の影響 試料 加熱 ＲＩ
Ｄ ＥＬＩＳＡ 特異的活
性 ℃ 分
ＩｇＭ α Ｐｓ ＩＴ４ ＬＰＳ
α ＬＰＳ
ｍｇ／ｍｌ ｍｇ／ｍｌ
ｍｇ／ｍｇ ＩｇＭ ３７４７−８２−Ｅ
−− −− ３６．０
０．５４２ ０．０１５（ｐＨ
４．４２） １８１０７−５８−１ ６２ １０
１７．４２ ０．４００
０．０２３１８０５３−６２−６ ６２
１２０ ６．５８ ０．０４０
０．００６１８１０７−６２−３
５５ ３０ ２６．７７
０．５１８ ０．０１９１８１０
７−６２−５ ５５ ５０ ２４
．６１ ０．３６４ ０．
０１５１８１０７−７２−９ ５２ １５０
３５．００ ０．４８３
０．０１４１８１０７−７２−１１
５２ ２１０ ３２．３２ ０．
４５５ ０．０１４１８１０７−６３
−７ ５０ １８０ ３２．３８
０．４２７ ０．０１３１
８１０７−６７−１５ ４５ ４８０
３５．６８ ０．６０４
０．０１７１８１０７−７０−１ ５０
１８０ ３２．９０ ０．４１９
０．０１３ １２０分間にわたり６２℃に加熱されたｐｄＩｇＭ
、ＩｇＧ濃縮物はＩｇＭ抗原性決定因子に悪影響を与え
て、特異的抗原結合活性の９０％以上の損失および特異
的活性（αＬＰＳ／ＩｇＭ）における３倍の減少を生じ
た。比較的低温で処理された試料は全てかなりの特異的
抗原結合活性および特異的活性におけるかなりでない減
少を全て保有していた。
【００５５】次に我々は、生物学的効果剤機能の別の重
要な指示であるオプソニン活性に対して加熱がどのよう
な影響を有しているかを試験した。これらの結果は表７
にまとまられている。
要な指示であるオプソニン活性に対して加熱がどのよう
な影響を有しているかを試験した。これらの結果は表７
にまとまられている。
【００５６】
【表８】
表７５０％ＩｇＭ濃縮物のオプソニ
ン活性に対する温度および培養時間の影響培養時間
大腸菌０５０：Ｋ１のＬＯＧ１０ＣＦＵ減少、
℃ （分） ６２
５５ ５０ ４５
４０ ３７ ０
３．１２ ２．８６ ２．８６
２．８６ ２．８６ ２．８６ １
０ ０．２５ ２．８１
２０ ０．１９ １．７９
３．２３ ４０
０．５５ ３．３５ ６０
０．１７ ０．４２ ３．２７
１２０ ０．５
１ ３．０７ １８０
２．７１ ２４０
２．
１９ ３００
２．１８ ４８０
３
．０９ ３．２１ ３．０９ ５％モル
モット ０．１５ ０．４５ ０．４１
０．４１ ０．４１ ０．４１ 血清だけ未加熱のＩｇＭはバクテリア死滅を相当促進さ
せた。１０分間にわたり６２℃に加熱されたＩｇＭ、Ｉ
ｇＧ濃縮物はオプソニン活性を相当損失した。５５℃に
加熱された濃縮物は活性を２０分間で減少させ、そして
４０分間でオプソニン活性をかなり損失した。５０℃に
おける加熱はオプソニン活性を時間につれてわずかに減
少させたが、実質的なオプソニン活性は５時間において
も依然として保有されていた。４５℃−３７℃の間の温
度における加熱は８時間にわたりオプソニン活性を減少
させなかった。
表７５０％ＩｇＭ濃縮物のオプソニ
ン活性に対する温度および培養時間の影響培養時間
大腸菌０５０：Ｋ１のＬＯＧ１０ＣＦＵ減少、
℃ （分） ６２
５５ ５０ ４５
４０ ３７ ０
３．１２ ２．８６ ２．８６
２．８６ ２．８６ ２．８６ １
０ ０．２５ ２．８１
２０ ０．１９ １．７９
３．２３ ４０
０．５５ ３．３５ ６０
０．１７ ０．４２ ３．２７
１２０ ０．５
１ ３．０７ １８０
２．７１ ２４０
２．
１９ ３００
２．１８ ４８０
３
．０９ ３．２１ ３．０９ ５％モル
モット ０．１５ ０．４５ ０．４１
０．４１ ０．４１ ０．４１ 血清だけ未加熱のＩｇＭはバクテリア死滅を相当促進さ
せた。１０分間にわたり６２℃に加熱されたＩｇＭ、Ｉ
ｇＧ濃縮物はオプソニン活性を相当損失した。５５℃に
加熱された濃縮物は活性を２０分間で減少させ、そして
４０分間でオプソニン活性をかなり損失した。５０℃に
おける加熱はオプソニン活性を時間につれてわずかに減
少させたが、実質的なオプソニン活性は５時間において
も依然として保有されていた。４５℃−３７℃の間の温
度における加熱は８時間にわたりオプソニン活性を減少
させなかった。
【００５７】３時間にわたり５０℃に加熱されたＩｇＭ
、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物のオプソニン活性は、大
腸菌０５０：Ｋ１に対する食細胞化学蛍光検定でも評価
された、図５。３時間にわたる５０℃におけるＩｇＭの
加熱はＩｇＭが化学蛍光およびバクテリアの食細胞死滅
を促進させる能力を無傷のまま残した。
、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物のオプソニン活性は、大
腸菌０５０：Ｋ１に対する食細胞化学蛍光検定でも評価
された、図５。３時間にわたる５０℃におけるＩｇＭの
加熱はＩｇＭが化学蛍光およびバクテリアの食細胞死滅
を促進させる能力を無傷のまま残した。
【００５８】３時間にわたり５０℃に加熱されたＩｇＭ
、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物は効果剤機能、すなわち
オプソニン食細胞活性、抗原性結合位置など、を保有し
ており、そして試験管内で減少された非−特異的補体活
性化（Ｃ４ａ発生）を示したため、我々はシノモルグス
猿中での静脈内注入後のこの製剤の心臓血管作用を評価
した。このデータは表８にまとめられている。
、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物は効果剤機能、すなわち
オプソニン食細胞活性、抗原性結合位置など、を保有し
ており、そして試験管内で減少された非−特異的補体活
性化（Ｃ４ａ発生）を示したため、我々はシノモルグス
猿中での静脈内注入後のこの製剤の心臓血管作用を評価
した。このデータは表８にまとめられている。
【００５９】
【表９】
表８猿におけるＭＡＰおよび血漿Ｃ
４ａアナフィラトキシン水準に対する熱処理されたＩｇ
Ｍ、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の急性影響（Ｎ＝３）
時間（分）
０ ３０
６０ ９０ ＭＡＰ（ｍｍ
Ｈｇ） ９２±７ ８５±５
８８±９ ９３±７Ｃ４ａ（ｎｇ／ｍ
ｌ） ８５±１７ ３２６±１０２
５００±５２ ６８５±６１ ３時間にわたり５０℃−５１℃に加熱されたＩｇＭ、Ｉ
ｇＧ 速度 １ｍｇ／ｋｇ／分 投与量 ５０ｍｇ／ｋｇ これらの猿では免疫グロブリン濃縮物の注入後には重症
の高血圧症は観察されず、そして血漿Ｃ４ａ水準は未加
熱のＩｇＭ調合物が注入された動物（表２）と比べては
るかに減じられた。
表８猿におけるＭＡＰおよび血漿Ｃ
４ａアナフィラトキシン水準に対する熱処理されたＩｇ
Ｍ、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮物の急性影響（Ｎ＝３）
時間（分）
０ ３０
６０ ９０ ＭＡＰ（ｍｍ
Ｈｇ） ９２±７ ８５±５
８８±９ ９３±７Ｃ４ａ（ｎｇ／ｍ
ｌ） ８５±１７ ３２６±１０２
５００±５２ ６８５±６１ ３時間にわたり５０℃−５１℃に加熱されたＩｇＭ、Ｉ
ｇＧ 速度 １ｍｇ／ｋｇ／分 投与量 ５０ｍｇ／ｋｇ これらの猿では免疫グロブリン濃縮物の注入後には重症
の高血圧症は観察されず、そして血漿Ｃ４ａ水準は未加
熱のＩｇＭ調合物が注入された動物（表２）と比べては
るかに減じられた。
【００６０】
【議論】ＩｇＭに富んでいるＩｇＧ（ＩｇＭ、ＩｇＧ免
疫グロブリン濃縮物）の非経口的投与がシノモルグス猿
中での重症の系統的高血圧症を含むひどい副作用に関連
している。ＩｇＭ、ＩｇＧ濃縮物注入がこれらの逆作用
を誘発させる際の機構は現在では知られていない。
疫グロブリン濃縮物）の非経口的投与がシノモルグス猿
中での重症の系統的高血圧症を含むひどい副作用に関連
している。ＩｇＭ、ＩｇＧ濃縮物注入がこれらの逆作用
を誘発させる際の機構は現在では知られていない。
【００６１】しかしながら、これらの実験では我々は種
々の免疫グロブリン調合物が系統的高血圧症を誘発する
能力が正統的補体経路を活性化させるそれらの能力と関
連していることを示した。すなわち、試験管内で補体の
正統的経路を活性化させる免疫グロブリン調合物（すな
わち、中性ｐＨにおけるｐｄＩｇＭおよび熱処理された
ＩｇＧ）は猿に静脈内投与された時には系統的高血圧症
を誘発する。試験管内で補体の正統的経路を活性化させ
ない免疫グロブリン調合物（例えば、酸性ｐＨにおける
未処理のｐｄＩｇＭ、天然のＩｇＧおよび熱処理された
ＩｇＧ）は猿に静脈内投与された時には逆の血液動態作
用を誘発しない。
々の免疫グロブリン調合物が系統的高血圧症を誘発する
能力が正統的補体経路を活性化させるそれらの能力と関
連していることを示した。すなわち、試験管内で補体の
正統的経路を活性化させる免疫グロブリン調合物（すな
わち、中性ｐＨにおけるｐｄＩｇＭおよび熱処理された
ＩｇＧ）は猿に静脈内投与された時には系統的高血圧症
を誘発する。試験管内で補体の正統的経路を活性化させ
ない免疫グロブリン調合物（例えば、酸性ｐＨにおける
未処理のｐｄＩｇＭ、天然のＩｇＧおよび熱処理された
ＩｇＧ）は猿に静脈内投与された時には逆の血液動態作
用を誘発しない。
【００６２】従って、種々の免疫グロブリン調合物の補
体活性化（正統的経路）の試験管内評価がこれらの調合
物が猿に逆作用を誘発する能力を推定するための予測価
を有するようである。これが直接原因でありそして関係
に影響するかどうかまたはこれらの現象が一時的に関連
しているかどうかは測定されていない。さらに、比較的
重要のことであるが、我々はｐｄＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グ
ロブリン濃縮物の穏やかな熱処理がそれの試験管内で補
体を非−特異的に活性化させるそれの能力を減少させそ
してこの最終的な工程処理が我々の哺乳動物モデルであ
るシノモルグス猿中での逆の心臓血管作用（高血圧症）
を誘発させるそれの能力を大きく減少させることも示し
た。
体活性化（正統的経路）の試験管内評価がこれらの調合
物が猿に逆作用を誘発する能力を推定するための予測価
を有するようである。これが直接原因でありそして関係
に影響するかどうかまたはこれらの現象が一時的に関連
しているかどうかは測定されていない。さらに、比較的
重要のことであるが、我々はｐｄＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グ
ロブリン濃縮物の穏やかな熱処理がそれの試験管内で補
体を非−特異的に活性化させるそれの能力を減少させそ
してこの最終的な工程処理が我々の哺乳動物モデルであ
るシノモルグス猿中での逆の心臓血管作用（高血圧症）
を誘発させるそれの能力を大きく減少させることも示し
た。
【００６３】抗原性決定因子および特異的抗原結合一は
比較的過酷でない熱処理（３時間にわたる約５０℃の現
在の好適温度におけるもの）で保有されているため、抗
体保有性はこれらの温度においては損傷されないまま非
−特異的補体活性化能力が劇的に減少されるようであり
、従ってこの処理によってはるかに良好な製品が生じる
であろう。
比較的過酷でない熱処理（３時間にわたる約５０℃の現
在の好適温度におけるもの）で保有されているため、抗
体保有性はこれらの温度においては損傷されないまま非
−特異的補体活性化能力が劇的に減少されるようであり
、従ってこの処理によってはるかに良好な製品が生じる
であろう。
【００６４】ＩｇＭに富んでいるＩｇＧ免疫グロブリン
濃縮物を抗原性決定因子または特異的抗原結合位置のか
なりの損失を伴わずに長時間にわたり高温で熱処理でき
ることが今示された。該製剤は劇的に減じられた非−特
異的補体活性を示しながら依然としてオプソニン食細胞
活性は保有している。従って、ＩｇＭに富んでいるＩｇ
Ｇ免疫グロブリン濃縮物生成物中では、適当なｐＨ、適
当な蛋白質濃度および適当な安定剤における適当な期間
にわたる適当な加熱温度により、非−特異的補体活性は
減じられるが、抗原と結合された時の（オプソニン食細
胞活性）抗原性決定因子、特異的抗原結合位置、特異的
補体活性並びにｐｄＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮
物製品の治療保有性は保っている。
濃縮物を抗原性決定因子または特異的抗原結合位置のか
なりの損失を伴わずに長時間にわたり高温で熱処理でき
ることが今示された。該製剤は劇的に減じられた非−特
異的補体活性を示しながら依然としてオプソニン食細胞
活性は保有している。従って、ＩｇＭに富んでいるＩｇ
Ｇ免疫グロブリン濃縮物生成物中では、適当なｐＨ、適
当な蛋白質濃度および適当な安定剤における適当な期間
にわたる適当な加熱温度により、非−特異的補体活性は
減じられるが、抗原と結合された時の（オプソニン食細
胞活性）抗原性決定因子、特異的抗原結合位置、特異的
補体活性並びにｐｄＩｇＭ、ＩｇＧ免疫グロブリン濃縮
物製品の治療保有性は保っている。
【００６５】上記の開示があるが、当技術の専門家によ
り改変がなされると思われる。従って、上記の開示は説
明用のものであるべきでありそして本発明の範囲は特許
請求の範囲によってのみ限定されべきであると考えられ
ている。
り改変がなされると思われる。従って、上記の開示は説
明用のものであるべきでありそして本発明の範囲は特許
請求の範囲によってのみ限定されべきであると考えられ
ている。
【００６６】本発明の主なる特徴および態様は以下のと
おりである。
おりである。
【００６７】１．特異的補体活性化活性を生成可能であ
りながら最小の非−特異的補体活性化を生じるという特
徴を有する、ＩｇＭ型抗体を含有している抗体製剤。
りながら最小の非−特異的補体活性化を生じるという特
徴を有する、ＩｇＭ型抗体を含有している抗体製剤。
【００６８】２．製剤がＩｇＧ型抗体を含んでいる、上
記１の製剤。
記１の製剤。
【００６９】３．ＩｇＭ型抗体が抗体全量の少なくとも
約２０重量％を構成している、上記１の製剤。
約２０重量％を構成している、上記１の製剤。
【００７０】４．最小の非−特異的補体活性化の発生が
試験管内検定における約１．０μｇ／ｍｌ以下のＣ４ａ
の発生により示されている、上記１の製剤。
試験管内検定における約１．０μｇ／ｍｌ以下のＣ４ａ
の発生により示されている、上記１の製剤。
【００７１】５．ＩｇＭおよびＩｇＧ型の生物学的に活
性な抗体を含有している抗体製剤において、（Ａ）試験
管内または生体内で試験した時に最小の非−特異的補体
活性化を生じ、且つ （Ｂ）抗原結合および特異的補体活性化活性を保有して
いるという特徴からなる改良。
性な抗体を含有している抗体製剤において、（Ａ）試験
管内または生体内で試験した時に最小の非−特異的補体
活性化を生じ、且つ （Ｂ）抗原結合および特異的補体活性化活性を保有して
いるという特徴からなる改良。
【００７２】６．製剤が抗体の乾燥重量基準で少なくと
も約２０重量％のＩｇＭ型を含有している、上記５の製
剤。
も約２０重量％のＩｇＭ型を含有している、上記５の製
剤。
【００７３】７．ＩｇＭが混合物の少なくとも約３０重
量％を構成している、上記６の製剤。
量％を構成している、上記６の製剤。
【００７４】８．最小の非−特異的補体活性化が試験管
内検定における約１．０μｇ／ｍｌ以下のＣ４ａの発生
により示されている、上記５の製剤。
内検定における約１．０μｇ／ｍｌ以下のＣ４ａの発生
により示されている、上記５の製剤。
【００７５】９．非−特異的補体活性化の実質的な不存
在が非−人間霊長動物試験における最小の高血圧症（対
照用の動脈圧において１０％以下の減少）により示され
ている、上記５の製剤。
在が非−人間霊長動物試験における最小の高血圧症（対
照用の動脈圧において１０％以下の減少）により示され
ている、上記５の製剤。
【００７６】１０．ＩｇＭの少なくとも５０重量％が生
物学的に活性でありそして試験管内検定において製剤が
約１．０μｇ／ｍｌ以下のＣ４ａを発生させる、上記５
の製剤。
物学的に活性でありそして試験管内検定において製剤が
約１．０μｇ／ｍｌ以下のＣ４ａを発生させる、上記５
の製剤。
【００７７】１１．ＩｇＭ型抗体を含有している抗体製
剤の処理方法において、該製剤をＩｇＭの特異的補体活
性化活性を実質的に減少させずに非−特異的補体活性化
を最小にするために充分な条件下で穏やかな加熱段階に
かける工程を含んでいる方法。
剤の処理方法において、該製剤をＩｇＭの特異的補体活
性化活性を実質的に減少させずに非−特異的補体活性化
を最小にするために充分な条件下で穏やかな加熱段階に
かける工程を含んでいる方法。
【００７８】１２．加熱段階が４０℃−６２℃の範囲の
温度である、上記１１の方法。
温度である、上記１１の方法。
【００７９】１３．加熱段階が４５℃−５５℃の範囲の
温度である、上記１２の方法。
温度である、上記１２の方法。
【００８０】１４．製剤が約４．０−５．０の範囲のｐ
Ｈを有する水溶液状である、上記１３の方法。
Ｈを有する水溶液状である、上記１３の方法。
【００８１】１５．製剤を約５０℃の温度に約１−３時
間にわたり加熱する、上記１４の方法。
間にわたり加熱する、上記１４の方法。
【００８２】１６．ｐＨが約４．２４−４．４２である
、上記１５の方法。
、上記１５の方法。
【００８３】１７．上記１の製剤を哺乳動物に注入する
段階からなる、哺乳動物に抗体を投与する方法。
段階からなる、哺乳動物に抗体を投与する方法。
【００８４】１８．注入が約１ｍｇ／ｋｇ／分の速度の
静脈注入である、上記１７の方法。
静脈注入である、上記１７の方法。
【図１】 図１は、血漿から誘導されたＩｇＭ（ｐｄ
ＩｇＭ）または熱処理された血漿から誘導されたＩｇＭ
（ＨＴｐｄＩｇＭ）が注入されている猿における血漿Ｃ
４ａアナフィラトキシン水準を表示している。
ＩｇＭ）または熱処理された血漿から誘導されたＩｇＭ
（ＨＴｐｄＩｇＭ）が注入されている猿における血漿Ｃ
４ａアナフィラトキシン水準を表示している。
【図２】 図２は、血漿から誘発されたＩｇＭ（ｐｄ
ＩｇＭ）が注入されている猿における平均動脈血圧（Ｍ
ＡＰ）測定値を表示している。
ＩｇＭ）が注入されている猿における平均動脈血圧（Ｍ
ＡＰ）測定値を表示している。
【図３】 図３は、天然の静脈内ガンマグロブリン（
ＩｇＧ）または中性ｐＨで熱処理された静脈内ガンマグ
ロブリン（ＨＴＩｇＧ）が注入されている猿における血
漿Ｃ４ａアナフィラトキシン水準を表示している。
ＩｇＧ）または中性ｐＨで熱処理された静脈内ガンマグ
ロブリン（ＨＴＩｇＧ）が注入されている猿における血
漿Ｃ４ａアナフィラトキシン水準を表示している。
【図４】 図４は、天然の静脈内ガンマグロブリン（
ＩｇＧ）または中性ｐＨで熱処理された静脈内ガンマグ
ロブリン（ＨＴＩｇＧ）が注入されている猿における平
均動脈血圧（ＭＡＰ）測定値を表示している。
ＩｇＧ）または中性ｐＨで熱処理された静脈内ガンマグ
ロブリン（ＨＴＩｇＧ）が注入されている猿における平
均動脈血圧（ＭＡＰ）測定値を表示している。
【図５】 図５は、未加熱のまたは加熱されたＩｇＭ
が大腸菌０．５０：ｋ１バクテリアに対する食細胞化学
蛍光を促進させる能力を表示している。
が大腸菌０．５０：ｋ１バクテリアに対する食細胞化学
蛍光を促進させる能力を表示している。
Claims (4)
- 【請求項１】 特異的補体活性化活性を生成可能であ
りながら最小の非−特異的補体活性化を生じるという特
徴を有する、ＩｇＭ型抗体を含有している抗体製剤。 - 【請求項２】 ＩｇＭおよびＩｇＧ型の生物学的に活
性な抗体を含有している抗体製剤において、（Ａ）試験
管内または生体内で試験した時に最小の非−特異的補体
活性化を生じ、且つ （Ｂ）抗原結合および特異的補体活性化活性を保有して
いるという特徴からなる改良。 - 【請求項３】 ＩｇＭ型抗体を含有している抗体製剤
の処理方法において、該製剤をＩｇＭの特異的補体活性
化活性を実質的に減少させずに非−特異的補体活性化を
最小にするために充分な条件下で穏やかな加熱段階にか
ける工程を含んでいる方法。 - 【請求項４】 請求項１記載の製剤を哺乳動物に注入
する段階からなる、哺乳動物に抗体を投与する方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/504,161 US5256771A (en) | 1990-04-03 | 1990-04-03 | Heat treatment of IgM-containing immunoglobulins to eliminate non-specific complement activation |
| US504161 | 1990-04-03 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04221321A true JPH04221321A (ja) | 1992-08-11 |
| JP3591782B2 JP3591782B2 (ja) | 2004-11-24 |
Family
ID=24005109
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP09267891A Expired - Lifetime JP3591782B2 (ja) | 1990-04-03 | 1991-04-01 | 熱処理されたＩｇＭ抗体製剤 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US5256771A (ja) |
| EP (1) | EP0450412B1 (ja) |
| JP (1) | JP3591782B2 (ja) |
| AT (1) | ATE155042T1 (ja) |
| CA (1) | CA2039387C (ja) |
| DE (1) | DE69126727T2 (ja) |
| DK (1) | DK0450412T3 (ja) |
| ES (1) | ES2104625T3 (ja) |
| GR (1) | GR3024910T3 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013530950A (ja) * | 2010-04-22 | 2013-08-01 | バイオテスト・アクチエンゲゼルシヤフト | 免疫グロブリン組成物を調製するためのプロセス |
| JP2020512820A (ja) * | 2017-04-07 | 2020-04-30 | アイジーエム バイオサイエンシズ インコーポレイテッド | 補体依存性細胞溶解のエフェクター機能の調節のための修飾されたヒトＩｇＭ定常領域 |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6297024B1 (en) | 1998-10-15 | 2001-10-02 | Cell Activation, Inc. | Methods for assessing complement activation |
| US6235494B1 (en) | 1999-02-08 | 2001-05-22 | The Scripps Research Institute | Substrates for assessing mannan-binding protein-associated serine protease activity and methods using the substrates |
| PL1648427T3 (pl) | 2003-05-16 | 2014-05-30 | Mayo Found Medical Education & Res | Leczenie zaburzeń demielinizacyjnych niskimi dawkami przeciwciała IgM |
| GB0425537D0 (en) * | 2004-11-19 | 2004-12-22 | Celltech R&D Ltd | Process for obtaining antibodies |
| FR2959821B1 (fr) | 2010-05-05 | 2012-07-06 | Lab Francais Du Fractionnement | Procede de mesure de l'activation du complement par des igg |
| EP3275897A1 (en) | 2016-07-27 | 2018-01-31 | Biotest AG | Process for preparing immunoglobulin compositions |
| AR122931A1 (es) * | 2020-07-10 | 2022-10-19 | Grifols Worldwide Operations Ltd | Procedimiento para obtener una composición que comprende inmunoglobulina m derivada de plasma humano |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0278635A (ja) * | 1988-07-27 | 1990-03-19 | Biotest Ag | ＩｇＭを含有する静脈内投与のポリクローナル免疫グロブリン調製物の調製方法 |
| JPH03204822A (ja) * | 1989-08-17 | 1991-09-06 | Biotest Pharma Gmbh | 非変性静脈内投与可能なＩｇＭ―及び／又は／ＩｇＡ―含有免疫グロブリン製剤及びその製造方法 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2527064C3 (de) * | 1975-06-18 | 1979-11-15 | Biotest-Serum-Institut Gmbh, 6000 Frankfurt | Verfahren zur Herstellung eines intravenösen Nativ-Human-Immunglobulin-Präparates mit natürlicher Halbwertszeit und gegenüber dem Ausgangsmaterial unveränderten Antikörperaktivität |
| DE2835843A1 (de) * | 1978-08-16 | 1980-02-28 | Blutspendedienst Dt Rote Kreuz | Verfahren zur herstellung einer fuer die intravenoese anwendung geeigneten gammaglobulinloesung |
| DE2901822A1 (de) * | 1979-01-18 | 1980-07-31 | Biotest Serum Institut Gmbh | Verfahren zur herstellung einer fuer die intravenoese applikation geeigneten immunglobulinloesung, die igm in ankonzentrierter form enthaelt |
| JPS56147724A (en) * | 1980-04-18 | 1981-11-16 | Teijin Ltd | Igm derivative and immunoglobulin preparation for intravenous injection containing said compound as effective component |
| JPS57140724A (en) * | 1981-02-25 | 1982-08-31 | Green Cross Corp:The | Heat-treatment of aqueous solution containing cold insoluble globulin |
| ATE19735T1 (de) * | 1982-02-08 | 1986-05-15 | Schweiz Serum & Impfinst | Intravenoes verabreichbares humanes immunglobulin und verfahren zu dessen herstellung. |
| JPH0669961B2 (ja) * | 1984-09-25 | 1994-09-07 | 株式会社ミドリ十字 | 免疫グロブリンの加熱処理方法 |
-
1990
- 1990-04-03 US US07/504,161 patent/US5256771A/en not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-03-21 DK DK91104391.7T patent/DK0450412T3/da active
- 1991-03-21 ES ES91104391T patent/ES2104625T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-21 DE DE69126727T patent/DE69126727T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-21 EP EP91104391A patent/EP0450412B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-21 AT AT91104391T patent/ATE155042T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-03-28 CA CA002039387A patent/CA2039387C/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-04-01 JP JP09267891A patent/JP3591782B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1993
- 1993-07-26 US US08/096,398 patent/US5510465A/en not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-06-06 US US08/468,221 patent/US5612033A/en not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-10-01 GR GR970402557T patent/GR3024910T3/el unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0278635A (ja) * | 1988-07-27 | 1990-03-19 | Biotest Ag | ＩｇＭを含有する静脈内投与のポリクローナル免疫グロブリン調製物の調製方法 |
| JPH03204822A (ja) * | 1989-08-17 | 1991-09-06 | Biotest Pharma Gmbh | 非変性静脈内投与可能なＩｇＭ―及び／又は／ＩｇＡ―含有免疫グロブリン製剤及びその製造方法 |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013530950A (ja) * | 2010-04-22 | 2013-08-01 | バイオテスト・アクチエンゲゼルシヤフト | 免疫グロブリン組成物を調製するためのプロセス |
| JP2013531630A (ja) * | 2010-04-22 | 2013-08-08 | バイオテスト・アクチエンゲゼルシヤフト | 抗体調製物 |
| JP2016196477A (ja) * | 2010-04-22 | 2016-11-24 | バイオテスト・アクチエンゲゼルシヤフト | 免疫グロブリン組成物を調製するためのプロセス |
| JP2016222674A (ja) * | 2010-04-22 | 2016-12-28 | バイオテスト・アクチエンゲゼルシヤフト | 抗体調製物 |
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