JPS6042336A - 免疫グロブリンの製造方法 - Google Patents
免疫グロブリンの製造方法Info
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- JPS6042336A JPS6042336A JP14968883A JP14968883A JPS6042336A JP S6042336 A JPS6042336 A JP S6042336A JP 14968883 A JP14968883 A JP 14968883A JP 14968883 A JP14968883 A JP 14968883A JP S6042336 A JPS6042336 A JP S6042336A
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
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- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は静脈内投与可能な高純度免疫グロブリンを効率
よく製造する方法に関する。
よく製造する方法に関する。
従来、主にコーンの低温エタノール分画法によって製造
された免疫グロブリン製剤は、その中に含まれる免疫グ
ロブリンの凝集体が示すとされる高い抗補体活性のため
、静脈内への投与は禁じられ、筋注が行なわれていた。
された免疫グロブリン製剤は、その中に含まれる免疫グ
ロブリンの凝集体が示すとされる高い抗補体活性のため
、静脈内への投与は禁じられ、筋注が行なわれていた。
静脈内投与可能な免疫グロブリンを得る方法が多数考案
・報告され、一部は既に実用化されている。
・報告され、一部は既に実用化されている。
その中にはペプシンやプラスミン等の酵素で処理するこ
とによって、免疫グロブリンのＦｃフラグメントを除去
あるいは修飾することによって抗補体活性を低下させる
方法や、免疫グロブリン分子内のジスルフィド結合を化
学修飾（スルフオ化、還元アルキル化等）することによ
って、抗補体活性を低下させる方法等が報告されている
。
とによって、免疫グロブリンのＦｃフラグメントを除去
あるいは修飾することによって抗補体活性を低下させる
方法や、免疫グロブリン分子内のジスルフィド結合を化
学修飾（スルフオ化、還元アルキル化等）することによ
って、抗補体活性を低下させる方法等が報告されている
。
また免疫グロブリンの凝集体を除く方法として水溶性暇
合体、特にポリエチレングリコールを用いる方法につい
てもいくつか報告されている。例えば、 マイヤー・ルーイス・コーパルＩｒｉ （％ 開明５３
−７２８１６号）、血漿蛋白分画■等をアルブミンと２
％ポリエチレングリコール（以下ＰＥＧと略）を含む低
イオン強度の水で抽出し、ＰＥＧ濃度を４．０Ｖ’ｔ’
％にあげ、不純物を除き、さらにエタノール４−１２％
で再度不純物を除き、ｐ）ｌ ７−８、ＰＥＧ １’Ｏ
−１２Ｗ／Ｖ％、あるいはエタノール２０〜３０〜ｖ／
／Ｖ％で沈澱する抗補体活性の低いガンマグロブリンを
得ている。
合体、特にポリエチレングリコールを用いる方法につい
てもいくつか報告されている。例えば、 マイヤー・ルーイス・コーパルＩｒｉ （％ 開明５３
−７２８１６号）、血漿蛋白分画■等をアルブミンと２
％ポリエチレングリコール（以下ＰＥＧと略）を含む低
イオン強度の水で抽出し、ＰＥＧ濃度を４．０Ｖ’ｔ’
％にあげ、不純物を除き、さらにエタノール４−１２％
で再度不純物を除き、ｐ）ｌ ７−８、ＰＥＧ １’Ｏ
−１２Ｗ／Ｖ％、あるいはエタノール２０〜３０〜ｖ／
／Ｖ％で沈澱する抗補体活性の低いガンマグロブリンを
得ている。
ハルデマール・シュナイダーラ（％公明５５−１２００
１号）はｐＨ３，５〜８．０（特にｐｆ４６．５〜６．
９）のヒドロキシエチルスターチ１〜３０チ溶液にガン
マグロブリン溶液とＰＥＧＩＯ係溶液を加え、生じるガ
ンマグロブリン凝集体の沈澱を除いた後ｚｏ％ＰＥＧｉ
ｅ液と混合して静注用ガンマグロブリンを得ている。
１号）はｐＨ３，５〜８．０（特にｐｆ４６．５〜６．
９）のヒドロキシエチルスターチ１〜３０チ溶液にガン
マグロブリン溶液とＰＥＧＩＯ係溶液を加え、生じるガ
ンマグロブリン凝集体の沈澱を除いた後ｚｏ％ＰＥＧｉ
ｅ液と混合して静注用ガンマグロブリンを得ている。
シュナイダーらはまたＰＥＧ ４０００による種々の血
漿蛋白質のＪ、漬製を報告しているが（ＶｏｘＳａｎｇ
、ａｌ：１４１，１９７６及びＦ’ｏｌｉａ ）ｌａｅ
ｍ ａｔｏｌｏｇｉｃａ１０３：９３８．１９７６）、
その中でＰＥＧで精製した免疫グロブリンあるいはコー
ンの画分■溶液にヒドロキシエチルスターチ６−ｘｏｓ
、ベントナイト０．５−２．５ ％加え凝集免疫グロブ
リンを除去し、ｐｉ（７，０、ＰＥＧ ２５襲で静注可
能な免疫グロブリンを得ている。
漿蛋白質のＪ、漬製を報告しているが（ＶｏｘＳａｎｇ
、ａｌ：１４１，１９７６及びＦ’ｏｌｉａ ）ｌａｅ
ｍ ａｔｏｌｏｇｉｃａ１０３：９３８．１９７６）、
その中でＰＥＧで精製した免疫グロブリンあるいはコー
ンの画分■溶液にヒドロキシエチルスターチ６−ｘｏｓ
、ベントナイト０．５−２．５ ％加え凝集免疫グロブ
リンを除去し、ｐｉ（７，０、ＰＥＧ ２５襲で静注可
能な免疫グロブリンを得ている。
マルタ・アクプルらは（特開昭５５−４７６２８号）免
疫グログリン溶液にＰＥＧを６Ｏ−９０ｆ／Ａ加え、沈
澱を除去後、ＰＥＧ ７０−１００９／ｌとして静圧可
能なガンマグロブリンを沈澱として得ている。
疫グログリン溶液にＰＥＧを６Ｏ−９０ｆ／Ａ加え、沈
澱を除去後、ＰＥＧ ７０−１００９／ｌとして静圧可
能なガンマグロブリンを沈澱として得ている。
アルフンソド・ボルンンらは（特公昭５５−３８９３２
月）、分子量６０００のポリアルキレングリコール４〜
４．８係、ｐＨ４５の条件で凝集体を除去し、免疫グロ
ブリンの純化を行なっている。
月）、分子量６０００のポリアルキレングリコール４〜
４．８係、ｐＨ４５の条件で凝集体を除去し、免疫グロ
ブリンの純化を行なっている。
加え、凝集体を除去した上清にＰＥ０６〜８係となるよ
う加え、免疫グロブリンを＋ｆｌ製している。
う加え、免疫グロブリンを＋ｆｌ製している。
ポセ・ベンサドン・ランド（％開明５７−２０６６２５
号）は、ポリエチレンポリプロピレンクリコール系のポ
リマ−１ル３ の画分１１の溶液に加え、活性炭を助剤として不溶性物
質を戸別し、抗補体活性を有しない免疫グロプリ／Ｇを
製造している。
号）は、ポリエチレンポリプロピレンクリコール系のポ
リマ−１ル３ の画分１１の溶液に加え、活性炭を助剤として不溶性物
質を戸別し、抗補体活性を有しない免疫グロプリ／Ｇを
製造している。
本発明者らも、例えばコーンの両分Ｈのような粗免疫グ
ロブリンを原料として、ＰＥＧ４０００（日本薬局方で
マクロゴール４０００に相当するもの）を用いて免疫グ
ロブリン凝集体を分離除去する方法について詳細に条件
を検討した結果、次の知見を得た。
ロブリンを原料として、ＰＥＧ４０００（日本薬局方で
マクロゴール４０００に相当するもの）を用いて免疫グ
ロブリン凝集体を分離除去する方法について詳細に条件
を検討した結果、次の知見を得た。
粗免疫グロブリンからＰＥＧ ４ ０ ０ ０を用いて
凝集体を除去する場合、その溶媒の組成及びｐＨが大き
な影響を及はすが、その分画工程中にアミン酢酸を共存
させることにより、免疫グロブリン凝集体が選択的に有
利に沈澱し効率よく静注可能な純化免疫グロブリンが得
られること。
凝集体を除去する場合、その溶媒の組成及びｐＨが大き
な影響を及はすが、その分画工程中にアミン酢酸を共存
させることにより、免疫グロブリン凝集体が選択的に有
利に沈澱し効率よく静注可能な純化免疫グロブリンが得
られること。
次いで陰イオン交換体で吸着処理することによって、さ
らに抗補体活性が低下すること。そのようにして得られ
た純化免疫グロブリンから混入するＰＥＧを除去するに
は、・低温エタノール沈澱によって免疫グロブリンを沈
澱させるか、あるいは陽イオン交換体に吸着せしめた後
よく洗滌し、吸着された純化免疫グロブリンを塩濃度を
高めて溶出することによシ、静注可能な抗補体活性の極
めて低い高純度免疫グロブリンを効率よく製造できるこ
とを知り、この発明を考案した。
らに抗補体活性が低下すること。そのようにして得られ
た純化免疫グロブリンから混入するＰＥＧを除去するに
は、・低温エタノール沈澱によって免疫グロブリンを沈
澱させるか、あるいは陽イオン交換体に吸着せしめた後
よく洗滌し、吸着された純化免疫グロブリンを塩濃度を
高めて溶出することによシ、静注可能な抗補体活性の極
めて低い高純度免疫グロブリンを効率よく製造できるこ
とを知り、この発明を考案した。
以下に本発明の詳細な説明する。
粗免疫グロブリン（例えばコーンの画分■）のペースト
あるいは凍結乾燥粉末をアミン酢酸加食塩水溶液にタン
パク濃度３．０〜５．０ ｗＶ％、ｐＨ６，０〜７．０
となるように溶解し、ＰＥＧ４０００を６゜０〜７．０
Ｗ／Ｖ ％となるように加え、生じる免疫グロブリン
凝集体の沈澱を遠心分離によって除去する。
あるいは凍結乾燥粉末をアミン酢酸加食塩水溶液にタン
パク濃度３．０〜５．０ ｗＶ％、ｐＨ６，０〜７．０
となるように溶解し、ＰＥＧ４０００を６゜０〜７．０
Ｗ／Ｖ ％となるように加え、生じる免疫グロブリン
凝集体の沈澱を遠心分離によって除去する。
この際のアミン酢酸の濃度は０．５〜２． ＯＷｌＶ係
、塩化ナトリウムの濃度は０．５〜１．５ Ｗ／Ｖ％で
あることが望ま、しい。特にアミン酢酸は０．５φ以下
では沈澱の分別生成の効果が不充分であり２．０％以上
にした場合も同様である。
、塩化ナトリウムの濃度は０．５〜１．５ Ｗ／Ｖ％で
あることが望ま、しい。特にアミン酢酸は０．５φ以下
では沈澱の分別生成の効果が不充分であり２．０％以上
にした場合も同様である。
次いで上清をｐＨ７，０〜８．０とした後、ＰＥＧ４０
００を１０．０〜１５．０％となるように追加し生じた
沈澱（免疫グロブリン単数体が主成分）を遠心分離によ
って集める。
００を１０．０〜１５．０％となるように追加し生じた
沈澱（免疫グロブリン単数体が主成分）を遠心分離によ
って集める。
この沈澱を凍結乾燥の安定剤（例えば、グルコース２．
５〜ｐ％）を含む０．９’％塩化ナトリウム溶液で溶解
（ｐＨ６，８〜７．２）ｔ、、濾過除菌、凍結乾燥して
製剤を得ることが出来る。
５〜ｐ％）を含む０．９’％塩化ナトリウム溶液で溶解
（ｐＨ６，８〜７．２）ｔ、、濾過除菌、凍結乾燥して
製剤を得ることが出来る。
このようにして得られる免疫グロブリン製剤は抗補体活
性が低く静注可能であるが、さらに精製するためには、
この沈澱を０．０３〜０．０７Ｍの塩化ナトリウム溶液
又は０．ＯＩＭリン酸ナトナトリウム緩衝液加塩化ナト
リウム溶液、０３〜０．０６Ｍ）等にタンパク濃度５．
０〜１０．０Ｗ／Ｖ％、ｐＨ７，０〜７．５となるよう
溶解し、同じ溶液で平衡化した陰イオン交換体（例えば
ＤＥＡＥセファデックスＡラス０．ＤＥＡＥセファロー
ズＣＬ−６Ｂ、ＱＡＥセファデックスラス５０（いずれ
もスウェーデン国ファルマシア社製）。
性が低く静注可能であるが、さらに精製するためには、
この沈澱を０．０３〜０．０７Ｍの塩化ナトリウム溶液
又は０．ＯＩＭリン酸ナトナトリウム緩衝液加塩化ナト
リウム溶液、０３〜０．０６Ｍ）等にタンパク濃度５．
０〜１０．０Ｗ／Ｖ％、ｐＨ７，０〜７．５となるよう
溶解し、同じ溶液で平衡化した陰イオン交換体（例えば
ＤＥＡＥセファデックスＡラス０．ＤＥＡＥセファロー
ズＣＬ−６Ｂ、ＱＡＥセファデックスラス５０（いずれ
もスウェーデン国ファルマシア社製）。
ＤＥＡセルロファインＡ）ｌ（生化学工業■社製）。
スフエロジルＤＥＡ （仏画ローヌフーラン１１）等）
のカラムを通過させることによって抗補体活性をさらに
低下させることもできる。
のカラムを通過させることによって抗補体活性をさらに
低下させることもできる。
日本国内においては、抗補体活性は５０ ｍｙ／ｒｒｔ
の免疫グロブリン溶液と１００ ＣＨ５０／ｍｌ の補
体溶液を等量混合して３７℃１時間保温し、消費される
補体が２０ ＣＨ５０以下であればよいとされている。
の免疫グロブリン溶液と１００ ＣＨ５０／ｍｌ の補
体溶液を等量混合して３７℃１時間保温し、消費される
補体が２０ ＣＨ５０以下であればよいとされている。
即ち０．４ＣＨ５０／タンパクｍｙ以下（生物学的製剤
基準）である。
基準）である。
そのため静注用免疫グロブリン製剤としては０、４ Ｃ
Ｈ５０／ｍｙ以下の抗補体活性がめられるが１．その値
は低い方がよいと考えられる。
Ｈ５０／ｍｙ以下の抗補体活性がめられるが１．その値
は低い方がよいと考えられる。
製剤中のＰＥＧ含量を減らすには、上述の如くにして得
られる免疫グロブリン溶液（ＰＥＧ沈澱を溶解した溶液
あるいはその溶液の陰イオンカラム通過ｏ、）にコーン
の方法に従って、低温でエタノールを２５％となるよう
に加え、その沈澱を遠心分離によって集めることによっ
て可能である。
られる免疫グロブリン溶液（ＰＥＧ沈澱を溶解した溶液
あるいはその溶液の陰イオンカラム通過ｏ、）にコーン
の方法に従って、低温でエタノールを２５％となるよう
に加え、その沈澱を遠心分離によって集めることによっ
て可能である。
あるいは０．０３〜０．０７Ｍの塩化ナトリウムあるい
はリン酸緩衝加塩化ナトリウム溶液に溶解した免疫グロ
ブリンをｐＨ５，０〜６．０で陽イオン交換体く例えば
ＣＭ−セファデックスＣ−５０゜ＣＭ−セファローズＣ
Ｌ−６Ｂ、ＳＰセファデックスＣ−５０（いずれもスウ
ェーデン国ファルマシア社製）、ＣＭセルロファイ／Ａ
Ｈ（生化学工業■社製）、スフエロジルＣ（仏画ローヌ
プーラン社製）等）のカラムに吸着させた後、カラムを
洗ってＰ Ｅ Ｇを除き、次いで０．１５Ｍ塩化ナトリ
ウム液（ＰＨ７，０〜７，５）で免疫グロブリンを溶出
することによっても可能である。
はリン酸緩衝加塩化ナトリウム溶液に溶解した免疫グロ
ブリンをｐＨ５，０〜６．０で陽イオン交換体く例えば
ＣＭ−セファデックスＣ−５０゜ＣＭ−セファローズＣ
Ｌ−６Ｂ、ＳＰセファデックスＣ−５０（いずれもスウ
ェーデン国ファルマシア社製）、ＣＭセルロファイ／Ａ
Ｈ（生化学工業■社製）、スフエロジルＣ（仏画ローヌ
プーラン社製）等）のカラムに吸着させた後、カラムを
洗ってＰ Ｅ Ｇを除き、次いで０．１５Ｍ塩化ナトリ
ウム液（ＰＨ７，０〜７，５）で免疫グロブリンを溶出
することによっても可能である。
本発明の実施例を以下に示す。
実施例１
コーンの低温エタノール分画法によって得られた画分■
（免疫グロブリン）ペースト３ｏ。
（免疫グロブリン）ペースト３ｏ。
２を０．９％塩化ナトリウム、０．５％アミノ酢酸水溶
液に溶解し、０．５Ｎ塩酸でｐＨ６，０とした後１００
０ ｍｌとする。（蛋白濃度３．８％、抗補体活性千単
位／ｍ２） この溶液をゆるやかに攪拌しながら４ｏφＰＥＧ溶液１
７７ｔｎｌを滴下した。（ＰＥＧ ６．０ ％ ）生じ
た沈澱を遠心分離によって除去した上清に０．５Ｎ水酸
化ナトリウム溶液を加えてｐＨ７，５とし、４９％ＰＥ
Ｇ溶液２６０ ｍｌを加え（ＰＥＧ１２％）、遠心分離
により沈澱を得た。この沈澱には免疫グロブリン凝集体
は含捷れず、０．９チ塩化ナトリウム、２．５チブドウ
糖溶液で溶解した時の抗補体活性は０．３単位／ ｍｙ
であった。
液に溶解し、０．５Ｎ塩酸でｐＨ６，０とした後１００
０ ｍｌとする。（蛋白濃度３．８％、抗補体活性千単
位／ｍ２） この溶液をゆるやかに攪拌しながら４ｏφＰＥＧ溶液１
７７ｔｎｌを滴下した。（ＰＥＧ ６．０ ％ ）生じ
た沈澱を遠心分離によって除去した上清に０．５Ｎ水酸
化ナトリウム溶液を加えてｐＨ７，５とし、４９％ＰＥ
Ｇ溶液２６０ ｍｌを加え（ＰＥＧ１２％）、遠心分離
により沈澱を得た。この沈澱には免疫グロブリン凝集体
は含捷れず、０．９チ塩化ナトリウム、２．５チブドウ
糖溶液で溶解した時の抗補体活性は０．３単位／ ｍｙ
であった。
この溶液を除菌濾過・凍結乾燥し、静脈内投与ｏＪ能な
製剤を得だ。
製剤を得だ。
実施例２
コーン法によって得られた免疫グロブリン粉末１００２
を０．９チ塩化ナトリウム、１．０チアミノ酢酸溶液に
溶解し、０．５Ｎ塩酸でｐＨ６，５とした後、１０１０
０Ｏ！とした。（タンパク濃度３．９係、抗補体活性８
単位／■） この溶液をゆるやかに攪拌しながら、４０係ＰＥＧ溶液
１９４ｆｎ１．を滴下しくＰＥＧ６．５％）、生じる沈
澱を遠心分離によって除去して得た上清に０．５ Ｎ水
酸化ナトリウムを加えて、ｐＨ７，５とした後、４０％
ＰＥＧ溶液２５０−を加え（１）Ｅ０１３％）、遠心分
離によって沈澱を得た。
を０．９チ塩化ナトリウム、１．０チアミノ酢酸溶液に
溶解し、０．５Ｎ塩酸でｐＨ６，５とした後、１０１０
０Ｏ！とした。（タンパク濃度３．９係、抗補体活性８
単位／■） この溶液をゆるやかに攪拌しながら、４０係ＰＥＧ溶液
１９４ｆｎ１．を滴下しくＰＥＧ６．５％）、生じる沈
澱を遠心分離によって除去して得た上清に０．５ Ｎ水
酸化ナトリウムを加えて、ｐＨ７，５とした後、４０％
ＰＥＧ溶液２５０−を加え（１）Ｅ０１３％）、遠心分
離によって沈澱を得た。
この沈澱を０．５％塩化ナトリウム、０．５％グリシン
溶液２００ ｙ＋ｌに溶解しくｐＨ７，２、抗補体活性
０゜３単位／ｍｙ）、同じ溶液で平衡化したＤＥＡＥセ
ファデックスＡラス０カラム（径５ｃｒｎ、長さ１５
ｃｍ ）を通過させた。この通過液を、タンパク濃度５
係、ブドウ糖２．５ ％ 、塩化ナトリウム０．９％に
調整しく抗補体活性０．２単位／ｍｇ）濾過除菌・凍結
乾燥して静注用製剤を得た。
溶液２００ ｙ＋ｌに溶解しくｐＨ７，２、抗補体活性
０゜３単位／ｍｙ）、同じ溶液で平衡化したＤＥＡＥセ
ファデックスＡラス０カラム（径５ｃｒｎ、長さ１５
ｃｍ ）を通過させた。この通過液を、タンパク濃度５
係、ブドウ糖２．５ ％ 、塩化ナトリウム０．９％に
調整しく抗補体活性０．２単位／ｍｇ）濾過除菌・凍結
乾燥して静注用製剤を得た。
実施例３
実施例２と同様の操作によって得られた免疫グロブリン
溶液を０．９多塩化ナトリウム溶液で６００ ｍｌにし
た後、冷却し、コーンの常法に従って５３．３％エタノ
ール５３０−を滴下しくエタノール２５％）、生じた沈
澱を遠心分離によって集め、グルコース２．５敷塩化ナ
トリウム０．９チ、タンパク濃度５．０係となるように
溶解した。
溶液を０．９多塩化ナトリウム溶液で６００ ｍｌにし
た後、冷却し、コーンの常法に従って５３．３％エタノ
ール５３０−を滴下しくエタノール２５％）、生じた沈
澱を遠心分離によって集め、グルコース２．５敷塩化ナ
トリウム０．９チ、タンパク濃度５．０係となるように
溶解した。
この溶液の抗補体活性は９単位／ ｍｅであった。
次いでこの溶液を済過除菌・凍結乾燥して静注用製剤を
得た。
得た。
また実施例１の操作によって得られた免疫グロブリン溶
液を用いて、前記と同様の操作を行なったところ、得ら
れた溶液の抗補体活性は１４単位／ ｍｌであった。
液を用いて、前記と同様の操作を行なったところ、得ら
れた溶液の抗補体活性は１４単位／ ｍｌであった。
実施例４
実施例２と同様の操作によって得られた免疫グロブリン
溶液を、塩化ナトリウム０．２５％、グリシン０．２５
％となるように希釈し、ｐＨ５，５とした。
溶液を、塩化ナトリウム０．２５％、グリシン０．２５
％となるように希釈し、ｐＨ５，５とした。
同じ組成の溶液で平衡化したＣＭセファローズＣＬ−５
Ｂカラム（径５． ＯＣＩｎ、長さ１５ ｃｍ ）を通
過させ免疫グロブリンを吸着させた。カラムを平衡化し
た溶液でよく洗滌した後、０．９係塩化すトリウム、２
．５％グルコース溶液（Ｔ）Ｈ７，０）で吸着した免疫
グロブリンを溶出させる。
Ｂカラム（径５． ＯＣＩｎ、長さ１５ ｃｍ ）を通
過させ免疫グロブリンを吸着させた。カラムを平衡化し
た溶液でよく洗滌した後、０．９係塩化すトリウム、２
．５％グルコース溶液（Ｔ）Ｈ７，０）で吸着した免疫
グロブリンを溶出させる。
この溶液のタンパク濃度を５係としだ時抗補体活性は８
単位であった。溶液を濾過除菌後、凍結乾燥して静注用
製剤を得た。
単位であった。溶液を濾過除菌後、凍結乾燥して静注用
製剤を得た。
また実施例１の操作によって得られた免疫グロブリン溶
液を用いて、前記と同様の操作を行なったところ、肖ら
れた溶液の抗補体活性は１３単位／ｍｌであった。
液を用いて、前記と同様の操作を行なったところ、肖ら
れた溶液の抗補体活性は１３単位／ｍｌであった。
！Ｉ）バ１″庁１（信若杉和夫 殿
１ ・ｌ ｌ’ｌ の 表 ンｊ；
ｊ・ｆ′ｌとの関イ、ｆ 出 １ワ１′１ 人４、代岬
人 イｉ： ＋すｊ 火工；・、都Ｆ代１１１区丸の内２Ｊ
Ｔ１６番２υ丸の内式−１７を洲Ｌ： ル３３０１ ′
１１□ 袖 正 書 不ｊ頭明ｙ’！ｔｌ召中−ト記、卦項全面正いたします
。
人 イｉ： ＋すｊ 火工；・、都Ｆ代１１１区丸の内２Ｊ
Ｔ１６番２υ丸の内式−１７を洲Ｌ： ル３３０１ ′
１１□ 袖 正 書 不ｊ頭明ｙ’！ｔｌ召中−ト記、卦項全面正いたします
。
記
１、第５頁１２行目に
「加え、凝集体を」とめる全
「 木村篤介らは（０開昭５５−２０３１７号）コーク
の画分■溶液にＩ’ＥＧ４０００３〜４％加え、凝集体
金」と訂１Ｅする。
の画分■溶液にＩ’ＥＧ４０００３〜４％加え、凝集体
金」と訂１Ｅする。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 粗製免疫グロブリンをアミノ酢酸０．５〜２．０Ｗ
／Ｖ％の存在下、ｐＨ６，０〜７．０、タンパク濃度３
．０〜５．０ Ｗ／Ｖ ％となるよう溶解し、この溶液
にポリエチレングリコール４０００を６．０〜７、ＯＷ
／Ｖ ％となるように加え、生じる免疫グロブリン凝集
体及び他の夾雑蛋白質の沈澱を除去し、上描をｐＨ７，
０〜８．０とした後ポリエチレングリコール４０００を
１０．０〜１５．０Ｗ／Ｖ％となるように加え、抗補体
活性の低い高純度免疫グロブリンを沈澱として採取する
：ことを特徴とする免疫グロブリンの製造方法。 ２、特許請求の範囲第１項で得られた高純度免疫グロブ
リンの沈澱を溶解し、陰イオン交換体カラムを通過させ
ることにより、更に抗補体活性が低下した高純度免疫グ
ロブリンの製造方法。 ３ 特許請求の範囲第１項又は第２項で得られた高純度
免疫グロブリンの溶液に低温でエタノールを加え生じた
沈澱を採取することによって、含有するポリエチレング
リコール濃度を減少せしめた高純度免疫グロブリンの製
造方法。 ４ ％許請求の範囲第１項又は第２項で得られた高純度
免疫グロブリンの溶液をｐＨ５，Ｑ〜６．０とし、陽イ
オン交換体に吸着させ、交換体を洗浄してポリエチレン
グリコールを除去した後、吸着された高純度免疫グロブ
リンを塩濃度の高い溶出液で溶出させることを特徴とす
る高純度免疫グロブリンの製造方法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14968883A JPS6042336A (ja) | 1983-08-18 | 1983-08-18 | 免疫グロブリンの製造方法 |
| DE19843430320 DE3430320A1 (de) | 1983-08-18 | 1984-08-17 | Verfahren zur herstellung von immunglobulin-praeparaten mit verminderter komplementaktivitaet |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14968883A JPS6042336A (ja) | 1983-08-18 | 1983-08-18 | 免疫グロブリンの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6042336A true JPS6042336A (ja) | 1985-03-06 |
| JPH0582367B2 JPH0582367B2 (ja) | 1993-11-18 |
Family
ID=15480636
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14968883A Granted JPS6042336A (ja) | 1983-08-18 | 1983-08-18 | 免疫グロブリンの製造方法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6042336A (ja) |
| DE (1) | DE3430320A1 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0278635A (ja) * | 1988-07-27 | 1990-03-19 | Biotest Ag | ＩｇＭを含有する静脈内投与のポリクローナル免疫グロブリン調製物の調製方法 |
| JP2003528803A (ja) * | 1999-05-20 | 2003-09-30 | アルファ・セラピューティック・コーポレーション | 静注用免疫グロブリンの２回ウイルス不活化方法 |
| WO2003088999A1 (fr) * | 2002-04-22 | 2003-10-30 | Mitsubishi Pharma Corporation | Procede de production d'une preparation d'immunoglobuline |
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-
1983
- 1983-08-18 JP JP14968883A patent/JPS6042336A/ja active Granted
-
1984
- 1984-08-17 DE DE19843430320 patent/DE3430320A1/de not_active Withdrawn
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0278635A (ja) * | 1988-07-27 | 1990-03-19 | Biotest Ag | ＩｇＭを含有する静脈内投与のポリクローナル免疫グロブリン調製物の調製方法 |
| JP2003528803A (ja) * | 1999-05-20 | 2003-09-30 | アルファ・セラピューティック・コーポレーション | 静注用免疫グロブリンの２回ウイルス不活化方法 |
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0582367B2 (ja) | 1993-11-18 |
| DE3430320A1 (de) | 1985-03-28 |
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