JP7311921B2 - コレステロール、その誘導体及び類似体を調製するための方法 - Google Patents

Description

相互参照

本願は、２０１９年１２月１９日に中国特許庁へ提出された、国際出願番号ＰＣＴ／ＣＮ２０１９／１２６７４４、発明の名称が「コレステロール、その誘導体及び類似体を調製するための方法」であるＰＣＴ特許出願に基づき優先権を主張し、その全内容は、援用により本明細書に組み込まれる。

本発明は、医薬品化学分野に関し、具体的には、コレステロール、その誘導体及び類似体を調製するための方法に関し、コレステロール誘導体には、７－デヒドロコレステロール、２５－ヒドロキシコレステロール、２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロール、エルゴステロールが含まれるが、これらに限定されない。

ステロイドは、シクロペンタノぺルヒドロフェナントレンの誘導体であり、基本的な構造は、下図に示すＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ環を含む。

コレステロールは、コレステリンとも称され、重要なステロイド化合物であり、動物の体内に広く存在する。それは、細胞膜の形成に関与するだけでなく、生体内で胆汁酸、７－デヒドロコレステロール、及び多くのステロイドホルモンを合成するための原料である。７－デヒドロコレステロールは、紫外線照射によってビタミンＤ３に変換される。

ビタミンＤ３の肝臓内での代謝産物の１つは、ビタミンＤ３よりも数倍の効果である２５－ヒドロキシビタミンＤ３である。７－デヒドロコレステロールの誘導体である２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロールは、２５－ヒドロキシビタミンＤ３の工業的合成に適用できる。
現在、産業的に使用されるコレステロールの主な供給源は、動物材料の抽出法及び植物材料による半合成法がある。動物材料の抽出法（例えば、ＣＮ２０１８１１０６２８９５．６、ＣＮ２０１８１０７２２９９４．６）は、収率が低く、精製が困難であり、原料の供給源が限されており、しかも、安全的なリスク、例えば、狂牛病、豚レンサ球菌症の感染などがある。植物材料による半合成法の適用は、植物原料の供給量及び価格によって制限されている。例えば、ＣＮ１７７２７６０Ａは、ジオスゲニンからコレステロールを合成するための方法を開示している。ＣＮ１０６６３２５６５Ａ及びＣＮ１０５２３７６０３Ａは、スチグマステロールからコレステロールを合成するための方法を開示している。

７－デヒドロコレステロールの主な供給源は、動物の皮下組織からの抽出、及び植物原料による半合成法がある。ＣＮ１０５６６９８１３Ａ、ＣＮ１０２０３０７９４Ｂ、ＣＮ１００４９４１４９Ｃは、コレステロールの脱水素から７－デヒドロコレステロールを合成するための以下の方法において、空気酸化法により、ヒドラゾン試薬を使用する方法を開示している。

Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、 ２００５、 ７０（２１）、 ８５１３－８５２１； Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ、 ２００４、 ４５ （４０）、 ７４７９－７４８２は、コレステロールの脱水素による７－デヒドロコレステロールの以下の合成方法において、ブロモ置換－脱臭化法を使用して７－二重結合を導入する方法を開示している。

２５－ヒドロキシコレステロール及び２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロールの主な供給源は、コレステロール又はコレステロール類似体から調製される。ＥＰ５９４２２９及びＪ． Ｃｈｅｍ． Ｒｅｓｅａｒｃｈ、 １９９９、 ｐ７０８には、コレステロールから２５－ヒドロキシコレステロールを調製するための以下の方法において、トリフルオロアセトンペルオキシド又は三酸化クロム／無水酢酸を２５－ヒドロキシを導入するための酸化剤として使用する方法ことを開示している。

Ｃｈｉｎ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ．、 １９９２、 ｖｏｌ． ３、 ｐ ４０９は、コレステロール抽出過程中の副産物である２４－デヒドロコレステロールから２５－ヒドロキシコレステロールを調製するための以下の方法において、水銀試薬を使用して２４－二重結合に２５－ヒドロキシを導入する方法を開示している。

ＣＮ１０４９１０２３１Ｂは、２５－ヒドロキシコレステロールから２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロールを調製するための以下の方法において、ヒドラゾン試薬を使用する方法を開示している。

ＣＮ１０６８３１９２１Ａは、５，７，２４－トリエンコレステロールによる２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロールを調製するための方法において、Ｄｉｅｌｓ－Ａｌｄｅｒ保護基を使用することを開示している。

一側面では、本発明は、ステップ（Ａ）及びステップ（Ｂ）を含み、且つステップ（Ｂ）にはステップ（Ｂ－１）又は（Ｂ－２）を含む、式ＩＩＩで表される化合物の調製方法を提供する。
ステップ（Ａ）：

ステップ（Ｂ）：
ステップ（Ｂ－１）：

ステップ（Ｂ－２）：

ここで、
は、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩにおいて同時に単結合を示すか、又は
は、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩにおいて同時に二重結合を示すか、又は
は、式Ｉにおいて単結合又は二重結合を示し、式ＩＩ及び式ＩＩＩにおいて二重結合を示し、
Ｒ^a、Ｒ^bは、それぞれ独立して、Ｈ、－ＯＨ、Ｃ_1-3アルキル基から選ばれ、
ＰＧは、ヒドロキシの保護基であり、好ましくは、Ｃ_1-8シリル基、アセチル基、トリフルオロアセチル基、或いは、１つ又は複数のＣ_1-8アルキル基で任意選択的に置換されたベンゾイル基であり、
Ｒは、Ｌ¹－ＬＧ又はＬ¹－Ｒ¹であり、
Ｌ¹は存在しないか、又はＣ_1-8アルキレン基であり、
ＬＧは、脱離基であり、
Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換され、
ＰＧ¹は、ヒドロキシの保護基であり、好ましくは、Ｃ_1-8シリル基又はＣ_1-6アルコキシ基で置換されたメチル基であり、
＊は、キラル中心を示す。

具体的には、本発明は、式ＩＩＩで表される化合物を調製するために２つの方法を使用することができ、第１の方法は、まず、ＡＢ環を構築し、次に側鎖を導入し、第２の方法は、まず、側鎖を構築し、次にＡＢ環を導入することである。
第１の方法は、
ステップ（１）：式ｉｉで表される化合物を式ａで表される化合物に変換することと、

ステップ（２）：式ａで表される化合物を水素化ホウ素ナトリウム、塩化カルシウム及びピリジンの作用下で式ｂで表される化合物に還元することと、

ステップ（３）：式ｂで表される化合物を式ＩＩＩで表される化合物に変換することと、を含み、
ここで、
、Ｒａ、Ｒｂ、ＰＧ、ＲＬ１、ＬＧ、Ｒは、上記と同じ定義を有し、本発明はここで贅言しない。
第２の方法は、
ステップ（１）：式ｉｉで表される化合物は式Ｉで表される化合物に変換されることと、
ステップ（２）：式Ｉで表される化合物は式ＩＩで表される化合物に変換されることと、
ステップ（３）：式ＩＩで表される化合物を水素化ホウ素ナトリウム及び塩化カルシウムの作用下で式ＩＩＩで表される化合物に還元することと、を含む。
ここで、
、Ｒａ、Ｒｂ、ＰＧ、ＲＬ１、ＬＧ、Ｒは、上記と同じ定義を有し、本発明はここで贅言しない。

好ましい側面では、式ＩＩＩで表される化合物の構造は、

である。他の好ましい側面では、式ＩＩＩで表される化合物は、コレステロール、７－デヒドロコレステロール、２５－ヒドロキシコレステロール、２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロール、その誘導体又は類似体から選ばれる。

特に断らない限り、本明細書で使用されるすべての技術的及び科学的用語は、当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。矛盾があると、本明細書で提供されている定義を基準とする。本明細書に商品名が記載されている場合には、それに対応する商品またはその有効成分を指すことを意味する。本明細書で引用されるすべての特許、公開された特許出願及び公開物は、いずれも援引により本明細書に組み込まれる。

一般的な用語及び定義
特に断らない限り、本明細書で使用されるすべての技術的及び科学的用語は、当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。矛盾があると、本明細書で提供されている定義を基準とする。本明細書に商品名が記載されている場合には、それに対応する商品またはその有効成分を指すことを意味する。本明細書で引用されるすべての特許、公開された特許出願及び公開物は、いずれも援引により本明細書に組み込まれる。
「１つ（１種）又は複数（複数種）」という用語又は類似する「少なくとも１つ（１種）」といった表記は、例えば、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０個（種）又はそれ以上（種）を示すことができる。
本明細書で使用されるｍ－ｎという表記とは、ｍからｎまでの範囲、その中の各点値から構成されるサブ範囲及び各点値を意味する。例えば、「Ｃ₁－Ｃ₈」又は「Ｃ₁－₈」という表記は、１～８つの炭素原子の範囲をカバーし、それらの内の任意のサブ範囲及び各点値、例えば、Ｃ₂～Ｃ₅、Ｃ₃～Ｃ₄、Ｃ₁～Ｃ₂、Ｃ₁～Ｃ₃、Ｃ₁～Ｃ₄、Ｃ₁～Ｃ₅、Ｃ₁～Ｃ₆、Ｃ₁～Ｃ₇など、及びＣ₁、Ｃ₂、Ｃ₃、Ｃ₄、Ｃ₅、Ｃ₆、Ｃ₇、Ｃ₈などもカバーすることを理解すべきである。例えば、「Ｃ₃－Ｃ₁₀」又は「Ｃ₃－₁₀」という表記は、同様に、例えば、それらの内の任意のサブ範囲及び点値、例えば、Ｃ₃～Ｃ₉、Ｃ₆～Ｃ₉、Ｃ₆～Ｃ₈、Ｃ₆～Ｃ₇、Ｃ₇～Ｃ₁₀、Ｃ₇～Ｃ₉、Ｃ₇～Ｃ₈、Ｃ₈～Ｃ₉など、及びＣ₃、Ｃ₄、Ｃ₅、Ｃ₆、Ｃ₇、Ｃ₈、Ｃ₉、Ｃ₁₀などをカバーすることを理解すべきである。また、例えば、「３員～１０員」という表記は、それらの内の任意のサブ範囲及び各点値、例えば、３員～５員、３員～６員、３員～７員、３員～８員、４員～５員、４員～６員、４員～７員、４員～８員、５員～７員、５員～８員、６員～７員、６員～８員、９員～１０員など、及び３員、４員、５員、６員、７員、８員、９員、１０員などをカバーすることを理解すべきである。本明細書では他の類似する表記も同様に理解すべきである。

「アルキル基」という用語とは、炭素原子と水素原子とからなる直鎖状又は分岐鎖状の飽和脂肪族炭化水素基を指し、単結合を介して分子の残った部分に連結されている。「アルキル基」は、１～８個の炭素原子を有することができ、即ち、「Ｃ₁－₈アルキル基」、例えば、Ｃ₁－₄アルキル基、Ｃ₁－₃アルキル基、Ｃ₁－₂アルキル基、Ｃ₃アルキル基、Ｃ₄アルキル基、Ｃ₁－₆アルキル基、Ｃ₃－₆アルキル基である。アルキル基の非限定的な例は、メチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、イソプロピル基、イソブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、イソペンチル基、２－メチルブチル基、１－メチルブチル基、１－エチルプロピル基、１，２－ジメチルプロピル基、ネオペンチル基、１，１－ジメチルプロピル基、４－メチル基ペンチル基、３－メチルペンチル基、２－メチルペンチル基、１－メチルペンチル基、２－エチル基ブチル基、１－エチルブチル基、３，３－ジメチルブチル基、２，２－ジメチルブチル基、１，１－ジメチルブチル基、２，３－ジメチルブチル基、１，３－ジメチルブチル基又は１，２－ジメチルブチル基、又はそれらの異性体を含むが、これらに限定されない。
「アルキレン基」という用語は、本明細書で単独又は他の基と組み合わせて使用される場合には、直鎖状又は分岐鎖状の二価の飽和炭化水素基を指す。例えば、「Ｃ_1-6アルキレン基」という用語とは、１～６個の炭素原子を有するアルキレン基を意味し、例えば、Ｃ₁－₅アルキレン基、Ｃ₁－₄アルキレン基、Ｃ₁－₃アルキレン基、Ｃ₁－₂アルキレン基、Ｃ₃アルキレン基、及びＣ₁アルキレン基（即ち、メチレン基）である。アルキレン基の非限定的な例は、メチレン基（－ＣＨ₂－）、１，１－エチレン基（－ＣＨ（ＣＨ₃）－）、１，２－エチレン基（－ＣＨ₂ＣＨ₂－）、１，１－プロピレン基（－ＣＨ（ＣＨ₂ＣＨ₃）－）、１，２－プロピレン基（－ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）－）、１，３－プロピレン基（－ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂－）、１，４－ブチレン基（－ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂－）などを含むが、これらに限定されない。
「アルケニル基」という用語とは、炭素原子と水素原子とからなる直鎖状又は分岐鎖状の少なくとも１つの二重結合を有する不飽和脂肪族炭化水素基を意味する。アルケニル基は、２～８個の炭素原子を有することができ、即ち、「Ｃ₂－₈アルケニル基」、例えば、Ｃ₂－₄アルケニル基、Ｃ₃－₄アルケニル基である。アルケニル基の非限定的な例は、ビニル基、アリル基、（Ｅ）－２－メチルビニル基、（Ｚ）－２－メチルビニル基、（Ｅ）－ブタ－２－エニル基、（Ｚ）－ブタ－２－エニル基、（Ｅ）－ブタ－１－エニル基、（Ｚ）－ブタ－１－エニル基などを含むが、これらに限定されない。

「アルキニル基」という用語とは、炭素原子と水素原子とからなる直鎖状又は分岐鎖状の少なくとも１つの三重結合を有する不飽和脂肪族炭化水素基を意味する。アルキニル基は、２～８個の炭素原子を有することができ、即ち、「Ｃ₂－₈アルキニル基」、例えば、Ｃ₂－₄アルキニル基、Ｃ₃－₄アルキニル基である。アルキニル基の非限定的な例は、エチニル基、プロプ－１－イニル基、プロプ－２－イニル基、ブト－１－イニル基、ブト－２－イニル基、ブト－３－イニル基などを含むが、これらに限定されない。
「アルコキシ基」という用語とは、単結合を介して酸素原子に連結された以上のように定義されたアルキル基を意味する。アルコキシ基は、酸素原子を介して分子の残った部分に連結されている。アルコキシ基は、－Ｏ（アルキル基）として表されることができる。「Ｃ_1-8アルコキシ基」又は「－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）」とは、１～８個の炭素原子を含むアルコキシ基を意味し、そのうち、アルキル部分は、直鎖、分岐鎖又は環状構造であってもよい。アルコキシ基は、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ－ブトキシ基、ｎ－ペンチルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基などを含むが、これらに限定されない。
「シリル基」という用語とは、以上のように定義されるアルキル基において少なくとも１つのＣ原子がＳｉ原子で置換されたものである。シリル基は、ケイ素原子を介して分子の残った部分に連結されている。「Ｃ_1-8シリル基」とは、１～８個の炭素原子を含むシリル基を意味し、そのアルキル部分は、直鎖、分岐鎖又は環状構造であってもよい。シリル基は、トリメチルシリル基（ＴＭＳ）、ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル基（ＴＢＳ、又はＴＢＤＭＳと称され）、ジメチルイソプロピルシリル基（ＩＰＤＭＳ）、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルメチルシリル基など（ＤＴＢＭＳ）を含むが、これらに限定されない。

本発明に係る化合物は、特定の幾何学的または立体異性体の形態で存在することができる。本発明は、すべてのそのような化合物が、シス－トランス異性体、（－）と（＋）のエナンチオマー、Ｒ体とＳ体のエナンチオマー、ジアステレオマー、（Ｄ）－異性体、（Ｌ）－異性体、及びそのラセミ混合物、他の混合物、例えば、エナンチオマーまたはジアステレオマーに富む混合物を含み、これらの混合物は、全て本発明の範囲内に入ると仮定している。そのような物質の精製及び分離は、当技術分野で知られている標準的な技術によって達成することができる。
「炭化水素類」溶媒という用語とは、１～１０個の炭素原子を有する直鎖、分岐鎖又は環状炭化水素の溶媒を意味する。前記炭化水素は、飽和又は不飽和であってもよい。炭化水素類溶媒は、例えば、アルカン類溶媒が挙げられ、ｎ－ペンタン、ｎ－ヘキサン、シクロヘキサン、ｎ－ヘプタン、オクタン又はそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されなく、好ましくは、ヘキサン又はヘプタンである。炭化水素類溶媒の例は、例えば、少なくとも１つの芳香環を含み、直鎖、分岐鎖又は環状炭化水素で任意選択的に置換された芳香族炭化水素溶媒も含む。芳香族炭化水素溶媒は、ベンゼン、トルエン、キシレン又はそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されなく、好ましくは、トルエン、トルエン又はそれらの組み合わせである。
「ハロゲン化アルカン類」溶媒という用語とは、上記のアルカン類溶媒において１つ又は複数（例えば、１～６個、１～５個、１～４個、１～３個、又は１～２個）の水素原子がハロゲンによって置き換えられたものを意味する。当業者は、ハロゲン置換基が複数存在する場合に、ハロゲンは同一であっても異なっていてもよく、且つ同一又は異なるＣ原子に位置してもよいことを理解すべきである。ハロゲン化アルカン類溶媒は、ジクロロメタン、トリクロロメタン、四塩化炭素、１，２－ジクロロエタン、ヘキサクロロエタン、及び１，２，３－トリクロロプロパン又はそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されなく、好ましくは、ジクロロメタン、トリクロロメタン、１，２－ジクロロエタン又はそれらの組み合わせであり、好ましくは、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン及びそれらの組み合わせ、特に、ジクロロメタンである。

「アルコール類」溶媒という用語とは、１～１０個の炭素原子を有するアルコール溶媒を意味する。アルコール類溶媒は、メタノール、エタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール、ｎ－ペンタノール、シクロヘキサノール又はそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されなく、好ましくは、メタノール、エタノール及びそれらの組み合わせである。
「エステル類」溶媒という用語とは、３～１０個の炭素原子を有するエステル溶媒を意味する。エステル類溶媒は、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、酢酸ペンチル又はそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されなく、好ましくは、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル又はそれらの組み合わせ、特に、酢酸エチルである。
「エーテル類」溶媒という用語とは、２～１０個の炭素原子を有するエーテル溶媒を意味する。エーテル類溶媒は、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメチルテトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテル、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル又はそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されなく、好ましくは、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメチルテトラヒドロフラン又はそれらの組み合わせである。
「スルホキシド類」溶媒という用語とは、ジメチルスルホキシドを意味する。
「ケトン類」溶媒という用語とは、３～８個の炭素原子を有するケトンを意味し、その実例としては、アセトン、２－ブタノン、３－メチル－２－ブタノン、４－メチル－２－ペンタノン又はそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されない。

本明細書で使用される「室温」という用語とは、約１０～３０℃を指し、好ましくは、約２０～２５℃である。
本発明の以下の詳述は、当業者が本発明の技術的態様、原理及び実際の用途をより十分に理解でき、さらに、多くの修正を加えて本発明を実施することにより、特定の用途の要件に最適に適合させることができるために、例を挙げて非限定的な実施形態を説明することを意図している。
本発明の調製方法

本発明は、第１の側面で、ステップ（Ａ）及びステップ（Ｂ）を含み、且つステップ（Ｂ）にステップ（Ｂ－１）又は（Ｂ－２）を含む、式ＩＩＩで表される化合物を調製するための方法を提供する。
ステップ（Ａ）：

ステップ（Ｂ）：
ステップ（Ｂ－１）：

ステップ（Ｂ－２）：

ここで、
は、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩにおいて同時に単結合を示し、或いは、
は、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩにおいて同時に二重結合を示すか、或いは、
は、式Ｉにおいて単結合又は二重結合を示し、式ＩＩ及び式ＩＩＩにおいて二重結合を示し、
Ｒ^a、Ｒ^bは、それぞれ独立して、Ｈ、－ＯＨ、Ｃ_1-3アルキル基から選ばれ、
ＰＧは、ヒドロキシの保護基であり、好ましくは、Ｃ_1-8シリル基、アセチル基、トリフルオロアセチル基、又は１つ又は複数のＣ_1-8アルキル基で任意選択的に置換されたベンゾイル基であり、
Ｒは、Ｌ¹－ＬＧ又はＬ¹－Ｒ¹であり、
Ｌ¹は存在しないか、又はＣ_1-8アルキレン基であり、
ＬＧは、脱離基であり、
Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換され、
ＰＧ¹は、ヒドロキシの保護基であり、好ましくは、Ｃ_1-8シリル基又はＣ_1-6アルコキシ基で置換されたメチル基から選ばれ、
＊は、キラル中心を示す。
ここで、ステップ（Ｂ－１）及びステップ（Ｂ－２）は、いずれも還元剤の存在下で式ＩＩＩで表される化合物を調製する過程を示す。ステップ（Ｂ－１）は、目的生成物（式ＩＩＩで表される化合物）のキラル選択的な取得を示す。ステップ（Ｂ－２）は、反応で得られた化合物（式ＩＩＩ’で表される化合物）が必要な光学純度に達しない場合があることを示すため、異性体分離を行って式ＩＩＩで表される化合物を得る。

一実施形態において、ＰＧは、アセチル基及びトリフルオロアセチル基から選ばれる。好ましい実施形態において、ＰＧは、アセチル基である。
一実施形態において、ステップ（Ａ）は、無水酢酸、塩化アセチル、酢酸イソプロペニル及びそれらの組み合わせから選ばれるか、又は無水トリフルオロ酢酸、トリフルオロアセチルクロリド及びそれらの組み合わせから選ばれるアシル化剤の存在下で行う。他の実施形態において、アシル化剤は、無水酢酸、塩化アセチル、酢酸イソプロペニル及びそれらの組み合わせから選ばれる。特定の実施形態において、アシル化剤は、酢酸イソプロペニルである。他の特定の実施形態において、アシル化剤は、無水酢酸、塩化アセチル混合物である。一実施形態において、ステップ（Ａ）は、無機酸又は有機酸である酸の存在下で行う。一実施形態において、酸は、ｐ－ＴｓＯＨ、ＭｓＯＨ、ＨＣｌ、Ｈ₂ＳＯ₄、ＨＣｌＯ₄及びそれらの組み合わせから選ばれる。特定の実施形態において、酸は、ｐ－ＴｓＯＨである。
一実施形態において、ステップ（Ａ）は、０～１１０℃の温度下、好ましくは、室温～１１０℃で行う。一実施形態において、反応は、４０～１１０℃の温度下で行い、例えば、４０℃、４５℃、５０℃、５５℃、６０℃、６５℃、７０℃、７５℃、８０℃、８５℃、９０℃、９５℃、１００℃又はそれらの組み合わせである。

一実施形態において、Ｌ¹は存在しない。他の実施形態において、Ｌ¹は、Ｃ_1-6アルキレン基であり、好ましくは、Ｃ_1-6アルキレン基であり、より好ましくは、Ｃ_1-4アルキレン基である。特定の実施形態において、Ｌ¹は、Ｃ_1-2アルキレン基、特に、メチレン基である。
一実施形態において、ＬＧは、ハロゲン、ハロゲンで任意選択的に置換されたＣ_1-6アルキルスルホン酸エステル脱離基、及びＣ_1-6アルキル基で任意選択的に置換されたベンゼンスルホン酸エステル脱離基から選ばれる。一実施形態において、ＬＧは、ＯＴｆ、ＯＴｓ又はＯＭｓである。一実施形態において、ＬＧは、ＯＴｓである。一実施形態において、ＬＧは、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選ばれる。
一実施形態において、Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｏ－ＰＧ¹から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換されている。

一実施形態において、Ｒ¹は、－ＣＨ＝ＣＲ⁴Ｒ⁵であり、ここで、Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ_1-6アルキル基、Ｃ_1-6アルケニル基、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換されている。
一実施形態において、Ｒ¹は、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる。Ｒ¹は、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-6アルキル基）、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-6アルキル基）₂から選ばれることが好ましい。
特定の実施形態において、ＰＧ¹は、ＴＭＳ、ＴＢＳ又はＭＯＭである。

一実施形態において、＊で表されるキラル中心は、ラセミ炭素原子である。一実施形態において、＊で表されるキラル中心は、Ｓ配置リッチな炭素原子である。他の実施形態において、＊で表されるキラル中心は、Ｒ配置リッチな炭素原子である。
一実施形態において、還元剤は、ヒドロホウ素化試薬、水素化アルミニウムリチウムから選ばれる。他の実施形態において、ヒドロホウ素化試薬は、Ｃａ（ＢＨ₄）₂、ＮａＢＨ₄、ＫＢＨ₄及びそれらの組み合わせから選ばれる。好ましい実施形態において、ヒドロホウ素化試薬は、Ｃａ（ＢＨ₄）₂である。一実施形態において、反応は、有機塩基、無機塩基又はそれらの組み合わせである塩基の存在下で行う。好ましい実施形態において、前記無機塩基は、ＮａＯＨ、ＫＯＨ、ＮａＯＭｅ、ｔ－ＢｕＯＫ及びそれらの組み合わせから選ばれる。他の好ましい実施形態において、前記有機塩基は、ピリジン、トリエチルアミン、ＤＭＡＰ及びそれらの組み合わせから選ばれる。他の特定の実施形態において、前記塩基は、ピリジンである。一実施形態において、反応は、有機溶媒中で行う。一実施形態において、有機溶媒は、アルコール類溶媒、エーテル類溶媒及びそれらの組み合わせから選ばれる。好ましい実施形態において、エーテル類溶媒は、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン及びそれらの組み合わせから選ばれる。他の好ましい実施形態において、アルコール類溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノール及びそれらの組み合わせから選ばれ、好ましくは、メタノール、エタノール又はそれらの組み合わせ、或いは、エタノール、イソプロパノール又はそれらの組み合わせである。特定の実施形態において、有機溶媒は、テトラヒドロフランと、メタノール、エタノール及びイソプロパノールからの少なくとも１つとの混合溶媒である。他の特定の実施形態において、有機溶媒は、テトラヒドロフランと、メタノール、エタノールからの少なくとも１つとの的混合溶媒である。特定の実施形態において、有機溶媒は、テトラヒドロフランとエタノールとイソプロパノールとの混合溶媒である。特定の実施形態において、テトラヒドロフランとエタノールとイソプロパノールとの混合溶媒では、テトラヒドロフランとエタノールとイソプロパノールの割合は１：（０．１－１）：（０．１－１）であり、好ましくは、１：（０．３－０．８）：（０．３－０．８）、特に１：０．５：０．５である。
一実施形態において、ステップ（Ｂ）は、－２０～８０℃、好ましくは、－２０～７０℃の温度下で行う。一実施形態において、反応は、－２０～６０℃の温度下で行う。一実施形態において、反応は、－２０～４０℃、好ましくは、－１０～４０℃、例えば、－１０℃、－５℃、０℃、５℃、１０℃、１５℃、２０℃、２５℃、３０℃、３５℃又は４０℃の温度下で行う。一実施形態において、「」は、式Ｉにおいて単結合又は二重結合を示し、単結合を示す場合には、式Ｉで表される化合物は、式Ｉ－１で表されることができ、しかも、本発明の方法は、ステップ（Ａ）の前に、該単結合を二重結合に変換できるように以下のステップ（ａ）を任意選択的に含んでもよく、変換後に得られた構造が式Ｉ－２で表され、且つ依然として式Ｉの定義の範囲内に入る。

ステップ（ａ）：式Ｉ－１化合物を脱水素反応させ、式Ｉ－２で表される化合物を調製する。

式中、
Ｒは、Ｌ¹－ＬＧ又はＬ¹－Ｒ¹であり、Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換され、
Ｌ¹、ＬＧ、ＰＧ及びＰＧ¹は、上記に定義される通りである。

一実施形態において、ステップ（ａ）は脱水素化試薬の存在下で行う。一実施形態において、脱水素化試薬は、ＤＤＱ及びクロラニルから選ばれる。好ましい実施形態において、脱水素化試薬は、クロラニルから選ばれる。他の実施形態において、脱水素反応は、ＣＮ１０４９１０２３１Ｂ又はＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、 ２００５、 ７０（２１）、 ８５１３－８５２１； Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ、 ２００４、 ４５（４０）、 ７４７９－７４８２に記載の方法により行う。
一実施形態において、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’及び式ＩＩＩで表される化合物のいずれか１つ又は複数がステップ（ｂ）、ステップ（ｃ）、ステップ（ｄ）、ステップ（ｅ）、ステップ（ｆ）、ステップ（ｇ）－ステップ（ｈ）の組み合わせ、ステップ（ｉ）、ステップ（ｊ）のいずれか１つ又は複数を含む反応を任意選択的に行う。上記反応により、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩで表される化合物中のＲは、官能基変換を発生し、変換後に得られた基は依然としてＲの定義の範囲内に入る。以下、式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ’、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''、式ｉｖで表される化合物は、出現するたびに、式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ’、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''、式ｉｖのステロイドＡＢ環構造がそれぞれ独立して式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩのステロイドＡＢ環構造に対応するように、そのうちの
がそれぞれ独立して、単結合又は二重結合を示す。ステップ（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）、（ｉ）及び（ｊ）のいずれか１つのステップでは、各々の
は、生成物で表される構造が反応物で表される構造と同じである。式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ’、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''で表される化合物中のＬ¹－ＬＧ又はＬ¹－Ｒ¹の構造は、前記Ｒの定義の範囲内に入る。出現するたびに、式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ’、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''で表される化合物は、それぞれ独立して、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩの構造の範囲内に入る。
一実施形態において、式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ’、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''、式ｉｖの少なくとも１つの式中では、ステロイドの３－位がカルボニル基であり、ステロイドの３－位のカルボニル酸素原子は化学結合を介してＲ²に連結することがなく、且つＲ²は存在しなく、ＡＢ環の構造は、

である。一実施形態において、式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ’、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''、式ｉｖでは、ＡＢ環の構造は、式Ｉに対応する。

他の実施形態において、式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ’、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''、式ｉｖの少なくとも１つの式中では、ステロイドの３－位はヒドロキシであり、ステロイドの３－位のヒドロキシ酸素原子は、化学結合を介してＲ²に連結され、且つＡＢ環の構造は、

である。一実施形態において、式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ’、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''、式ｉｖでは、ＡＢ環の構造は、式ＩＩに対応する。
一実施形態において、式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ’、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''、式ｉｖの少なくとも１つの式中では、ＡＢ環の構造は、

である。一実施形態において、式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ’、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''、式ｉｖでは、ＡＢ環の構造は、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩに対応する。他の実施形態において、式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ’、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''、式ｉｖの少なくとも１つの式中では、ＡＢ環の構造は、

である。更に他の実施形態において、式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ’、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''、式ｉｖの少なくとも１つの式中では、ＡＢ環の構造は、

である。
ＲがＬ¹－ＯＨである場合には、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩで表される化合物の構造は、下式ｉで示される。ＲがＬ¹－ＬＧである場合には、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩで表される化合物の構造は、下式ｉｉで示される。

ステップ（ｂ）：式ｉで表される化合物をスルホニル化剤又はハロゲン化剤と反応させ、式ｉｉで表される化合物を調製する。

式中、
Ｒ²は、ＰＧであり、ＰＧは、上記に定義される通りである。
（ｉ）ＬＧは、ハロゲンで任意選択的に置換されたＣ_1-6アルキルスルホン酸エステル脱離基又はＣ_1-6アルキル基で任意選択的に置換されたベンゼンスルホン酸エステル脱離基であり、反応は、スルホニル化剤の存在下で行うか、又は
（ｉｉ）ＬＧは、ハロゲンであり、反応は、ハロゲン化剤の存在下で行う。

一実施形態において、ステップ（ｂ）は、ステップ（Ａ）の前に行い、式ｉと式ｉｉとも式Ｉの構造の範囲内に入る。ステップ（ｂ）は、以下の通りである。

一実施形態において、ＬＧは、ＯＴｆ、ＯＭｓ又はＯＴｓである。一実施形態において、スルホニル化剤は、（Ｔｆ）₂Ｏ、ＭｓＣｌ又はＴｓＣｌである。
一実施形態において、ＬＧは、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩである。一実施形態において、ハロゲン化剤は、ＳＯＣｌ₂、ＰＯＣｌ₃、クロロシラン試薬、ハロゲン化リン、ＨＢｒ、ＮＢＳ、（ＰｈＯ）₃Ｐ／ＣＨ₃Ｉ系又はＰｈ₃Ｐ／Ｉ₂／イミダゾール系である。

ＲがＬ¹－ＬＧ’である場合には、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩで表される化合物の構造は、下式ｉｉ’で示される。
ステップ（ｃ）：式ｉｉ’化合物をハロゲン化剤と反応させ、式ｉｉで表される化合物を調製する。

式中、
Ｒ²は、ＰＧであり、ＰＧは、上記に定義される通りであり、
ＬＧ’は、ハロゲンで任意選択的に置換されたＣ_1-6アルキルスルホン酸エステル脱離基又はＣ_1-6アルキル基で任意選択的に置換されたベンゼンスルホン酸エステル脱離基であり、ＬＧは、ハロゲンであり、反応は、ハロゲン化剤の存在下で行う。

一実施形態において、ステップ（ｃ）は、ステップ（Ａ）の前に行い、式ｉｉ’と式ｉｉとも式Ｉの構造の範囲内に入る。ステップ（ｃ）は、以下の通りである。

一実施形態において、ＬＧ’は、ＯＴｆ、ＯＭｓ又はＯＴｓである。一実施形態において、ＬＧは、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩである。一実施形態において、ハロゲン化剤は、ハロゲン化水素、Ｉ₂、ＰＯＣｌ₃、ＰＢｒ₃又は金属ハロゲン化物である。一実施形態において、金属ハロゲン化物は、塩化ナトリウム、塩化リチウム、塩化マグネシウム及びそれらの組み合わせから選ばれるか、又は、臭化ナトリウム、臭化リチウム、臭化マグネシウム及びそれらの組み合わせから選ばれるか、又は、ヨウ化ナトリウムである。
ＲがＬ¹－Ｒ¹である場合には、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩで表される化合物の構造は、下式ｉｉｉで示される。

ステップ（ｄ）：式ｉｉで表される化合物を有機金属試薬と反応させ、式ｉｉｉで表される化合物を調製する。

式中、
Ｒ²は、Ｈ又はＰＧであり、
ＬＧは、ハロゲン、ハロゲンで任意選択的に置換されたＣ_1-6アルキルスルホン酸エステル脱離基及びＣ_1-6アルキル基で任意選択的に置換されたベンゼンスルホン酸エステル脱離基から選ばれ、

は、有機金属試薬であり、ＬＧ１は、ＭｇＸ又はＣｕＬｉであり、ｎは１又は２であり、
Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｏ－ＰＧ¹から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換され、
Ｌ¹、ＰＧ、ＰＧ¹は、上記に定義される通りである。

一実施形態において、ステップ（ｄ）は、ステップ（Ｂ－２）の第１階段と第２階段の間で実施され、式ｉｉと式ｉｉｉとも式ＩＩＩ’の構造の範囲内に入る。ステップ（ｄ）は、以下のステップ（ｄ－１）を含む。

一実施形態において、ステップ（ｄ）は、ステップ（Ｂ）の後に行い、式ｉｉと式ｉｉｉとも式ＩＩＩの構造の範囲内にいる。ステップ（ｄ）は、以下のステップ（ｄ－２）を含む。

一実施形態において、ＬＧは、ＯＴｆ、ＯＭｓ又はＯＴｓである。他の実施形態において、ＬＧは、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩである。
一実施形態において、ＬＧ¹は、ＭｇＸであり、ここで、Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩであり、ｎは１であり、

は、グリニャール試薬に属する。一実施形態において、ステップ（ｄ）は触媒の存在下で行い、触媒はハロゲン化銅、ハロゲン化第一銅、塩化リチウム、リチウム－銅の複塩及びそれらの組み合わせから選ばれる。一実施形態において、触媒は、ＣｕＩ、ＣｕＢｒ、ＬｉＣｌ、ＣｕＣｌ₂、ＣｕＣｌ、Ｌｉ₂ＣｕＣｌ₄、ＬｉＣｕＣｌ₃のうちの１種又は複数種から選ばれる。
一実施形態において、ＬＧ¹は、ＣｕＬｉであり、ｎは２であり、

は、ハイドロカルビル銅リチウム試薬である。

一実施形態において、ステップ（ｄ）は、さらに、３－カルボニル基を保護するステップ及び脱保護のステップを含む。一実施形態において、３－カルボニル基を保護するステップは、３－カルボニル基をケタールとして形成させることにより達成される。一実施形態において、３－カルボニル基を保護する保護基は、１，３－ジオキソランである。
ステップ（ｅ）：式ｉｉで表される化合物をアクリル酸誘導体と還元剤の存在下で反応させ、式ｉｉｉで表される化合物を調製する。

ここで、Ｒ²は、Ｈ又はＰＧであり、ＰＧは、上記に定義される通りである。
ＬＧは、ハロゲン、ハロゲンで任意選択的に置換されたＣ_1-6アルキルスルホン酸エステル脱離基及びＣ_1-6アルキル基で任意選択的に置換されたベンゼンスルホン酸エステル脱離基から選ばれる。好ましくは、ＬＧは、ハロゲンである。
アクリル酸誘導体は、アクリル酸アルキルから選ばれ、ここで、前記アルキル基は、それぞれ独立して、Ｃ_1-8アルキル基から選ばれる。好ましくは、前記アルキル基は、それぞれ独立して、Ｃ_1-6アルキル基から選ばれ、より好ましくは、Ｃ_1-4アルキル基である。
還元剤は、亜鉛、鉄、アルミニウム、マグネシウムから選ばれる。特定の実施形態において、還元剤は、亜鉛である。
Ｒ¹は、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）から選ばれる。好ましくは、Ｒ¹は、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-6アルキル基）から選ばれる。より好ましくは、Ｒ¹は、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-4アルキル基）から選ばれる。

一実施形態において、ステップ（ｅ）は、ステップ（Ｂ－２）の第１階段と第２階段の間で実施され、式ｉｉと式ｉｉｉとも式ＩＩＩ’の構造の範囲内に入る。ステップ（ｅ）は、以下のステップ（ｅ－１）を含む。

一実施形態において、ステップ（ｅ）は、ステップ（Ｂ）の後に行い、式ｉｉと式ｉｉｉとも式ＩＩＩの構造の範囲内に入る。ステップ（ｅ）は、以下のステップ（ｅ－２）を含む。

一実施形態において、アクリル酸誘導体は、アクリル酸Ｃ_1-6アルキルである。他の実施形態において、アクリル酸アルキルは、アクリル酸メチル、アクリル酸エチル、アクリル酸プロピル、アクリル酸ｎ－ブチル、及びアクリル酸イソブチルから選ばれる。好ましい実施形態において、アクリル酸アルキルは、アクリル酸メチル及びアクリル酸エチルから選ばれる。
一実施形態において、ステップ（ｅ）は、触媒の存在下で行う、ＣｕＩ、Ｎｉ（０）／配位子、Ｚｎ／ＮｉＣｌ₂／配位子から選ばれる。一実施形態において、配位子は、ＰＰｈ₃、ビピリジン、フェナントロリン、ピリジン、ＤＭＡＰ及びそれらの組み合わせから選ばれる。特定の実施形態において、触媒は、Ｚｎ／ＮｉＣｌ₂／ピリジンである。
一実施形態において、ステップ（ｅ）は、０～８０℃の温度下で、好ましくは、０～７０℃で行う。一実施形態において、反応は、０～６０℃の温度下で行う。一実施形態において、反応は、１０～６０℃の温度下で行い、例えば、１０℃、１５℃、２０℃、２５℃、３０℃、３５℃、４０℃、４５℃、５０℃、５５℃、６０℃又はそれらの組み合わせである。
一実施形態において、反応は、有機溶媒中で行う。一実施形態において、有機溶媒は、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジエチルエーテル、酢酸ブチル、メチルテトラヒドロフラン、ピリジンから選ばれる。一実施形態において、有機溶媒は、ピリジンである。
一実施形態において、ステップ（ｅ）は、以下のステップｉ）～ステップｉｉｉ）を含む。
ｉ）還元剤、触媒及び溶媒を混合して混合物を得、
ｉｉ）ステップｉ）で得られた混合物をアクリル酸誘導体と混合し、反応させて活性化されたアクリル酸誘導体を得、
ｉｉｉ）ステップｉｉ）で得られた活性化されたアクリル酸誘導体を式ｉｉで表される化合物と混合し、反応させて式ｉｉｉで表される化合物を得る。

一実施形態において、ステップｉｉ）は、３０～８０℃の温度下で、好ましくは、３０～７０℃、より好ましくは、４０～６０℃、例えば、４０℃、４５℃、５０℃、５５℃又は６０℃で行う。
一実施形態において、ステップｉｉ）は、ステップｉ）で得られた混合物にアクリル酸誘導体を徐々に加えて実施される。一実施形態において、ステップｉｉ）では、混合終了後の反応時間は、０．５～４時間、好ましくは、１～２時間である。
一実施形態において、ステップｉｉｉ）は、０～６０℃の温度下で、好ましくは、０～４０℃、より好ましくは、０～３０℃、例えば、０℃、５℃、１０℃、１５℃、２０℃、２５℃、３０℃で行う。一実施形態において、ステップｉｉｉ）では、混合終了後の反応時間は、０．５～８時間、好ましくは、１～６時間、より好ましくは、３～４時間である。

ＲがＬ¹－Ｒ^1'である場合には、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩで表される化合物の構造は、下式ｉｉｉ’で示される。
ステップ（ｆ）：式ｉｉｉ’で表される化合物をアルキル化剤と反応させ、式ｉｉｉで表される化合物を調製する。

式中、Ｒ²は、Ｈ又はＰＧであり、ＰＧは、上記に定義される通りであり
Ｒ^1'は、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基及び－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）から選ばれる１つ又は２つで置換され、
Ｒ¹は、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基、及び

から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、

から選ばれる１つ又は２つで置換され、ここで、Ｒ³は、Ｃ_1-8アルキル基から選ばれ、
アルキル化剤は、Ｒ³ＭｇＸ、又はＲ³Ｌｉであり、ここで、Ｘは、Ｃｌ又はＢｒである。

一実施形態において、Ｒ³は、Ｃ_1-4アルキル基から選ばれる。特定の実施形態において、Ｒ³は、メチル基である。
一実施形態において、ステップ（ｆ）は、ステップ（Ｂ－２）の第１階段と第２階段の間で実施され、式ｉｉｉ’と式ｉｉｉとも式ＩＩＩ’の構造の範囲内に入る。ステップ（ｆ）は、以下のステップ（ｆ－１）を含む。

一実施形態において、ステップ（ｆ）は、ステップ（Ｂ）の後に行い、式ｉｉｉ’と式ｉｉｉとも式ＩＩＩの構造の範囲内に入る。ステップ（ｆ）は、以下のステップ（ｆ－２）を含む。

一実施形態において、ステップ（ｆ）は、さらに、３－ＯＨを保護するステップ及び脱保護のステップを含む。一実施形態において、３－ＯＨを保護する保護基は、Ｃ_1-8シリル基、アセチル基、トリフルオロアセチル基、メトキシ基で任意選択的に置換されたベンジル基又はＣ_1-6アルコキシ基で置換されたメチル基から選ばれる。
ＲがＬ¹－ＣＨＯである場合には、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩで表される化合物の構造は、下式ｉｖで示される。
ステップ（ｇ）：式ｉｉｉで表される化合物を酸化剤と反応させ、式ｉｖで表される化合物を調製する。

式中、Ｒ¹は－ＣＨ₂ＯＨであり、Ｒ²はＰＧであり、
Ｌ¹、ＰＧは、上記に定義される通りである。

一実施形態において、ステップ（ｇ）は、ステップ（Ａ）の前に行い、式ｉｉｉは、式Ｉの構造の範囲内に入る。ステップ（ｇ）は、以下のステップ（ｇ－１）を含む。

一実施形態において、ステップ（ｇ）は、ステップ（Ａ）とステップ（Ｂ）の間で実施され、式ｉｉｉは、式ＩＩの構造の範囲内に入る。ステップ（ｇ）は、以下のステップ（ｇ－２）を含む。

一実施形態において、酸化剤は、ＴＥＭＰＯ／ＮａＢｒ／ＮａＣｌＯ、ＴＥＭＰＯ／ＮａＢｒ／Ｃａ（ＣｌＯ）₂、ＴＥＭＰＯ／ＴＣＣＡ、ＤＭＳＯ／ＳＯ₃－Ｐｙ／Ｅｔ₃Ｎ、ＮａＮＯ₂／ＦｅＣｌ₃／ＴＥＭＰＯ／空気、ＮａＮＯ₂／ＦｅＣｌ₃／ＴＥＭＰＯ／Ｏ₂及びそれらの組み合わせから選ばれる。特定の実施形態において、酸化剤は、ＴＥＭＰＯ／ＮａＢｒ／ＮａＣｌＯである。

一実施形態において、反応は、有機溶媒中で行う。一実施形態において、有機溶媒は、炭化水素類溶媒、ハロゲン化炭化水素類溶媒、エステル類溶媒、ケトン類溶媒及びそれらの組み合わせから選ばれる。好ましい実施形態において、炭化水素類溶媒は、ベンゼン、トルエン及びそれらの組み合わせから選ばれる。更に他の好ましい実施形態において、ハロゲン化炭化水素類溶媒は、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン及びそれらの組み合わせから選ばれ、好ましくは、ジクロロメタンである。好ましい実施形態において、エステル類溶媒は、酢酸エチルである。他の好ましい実施形態において、ケトン類溶媒は、アセトンである。
ステップ（ｈ）：式ｉｖで表される化合物をＷｉｔｔｉｇ試薬と反応させ、式ｉｉｉで表される化合物を調製する。

Ｒ¹は、－ＣＨ＝ＣＲ⁴Ｒ⁵であり、式中、Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ_1-6アルキル基、Ｃ_1-6アルケニル基、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる１つ又は２つで任意選択的に置換され、
Ｒ²は、Ｈ又はＰＧであり、
Ｌ¹、ＰＧ、ＰＧ¹は、上記に定義される通りである。

一実施形態において、ＣＲ⁴Ｒ⁵構造は、

から選ばれる。
一実施形態において、ステップ（ｈ）は、ステップ（Ａ）の前に行い、式ｉｉｉは式Ｉの構造の範囲内に入る。ステップ（ｈ）は、以下のステップ（ｈ－１）を含む。

一実施形態において、ステップ（ｈ）は、ステップ（Ｂ－２）の第１階段と第２階段の間で実施され、式ｉｉｉは、式ＩＩＩ’の構造の範囲内に入る。ステップ（ｈ）は、以下のステップ（ｈ－２）を含む。

一実施形態において、ステップ（ｈ）は、ステップ（Ｂ）の後に行い、式ｉｉｉは式ＩＩＩの構造の範囲内に入る。ステップ（ｈ）は、以下のステップ（ｈ－３）を含む。

一実施形態において、Ｗｉｔｔｉｇ試薬は、ハロゲン化炭化水素及びリン試薬から調製され、ここで、ハロゲン化炭化水素は、Ｘ－ＣＨＲ⁴Ｒ⁵であり、Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩである。
一実施形態において、リン試薬は、トリフェニルホスフィン、亜リン酸トリメチル、亜リン酸トリエチルなどから選ばれる。特定の実施形態において、リン試薬は、トリフェニルホスフィンである。

一実施形態において、ハロゲン化炭化水素及びリン試薬によりＷｉｔｔｉｇ試薬を調製する反応は、塩基の存在下で行い、前記塩基は、有機塩基、無機塩基又はそれらの組み合わせである。一実施形態において、塩基は、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、ナトリウムメトキシド、カリウムメトキシド、水素化ナトリウム、ブチルリチウム、リチウムジイソプロピルアミド及びそれらの組み合わせから選ばれる。特定の実施形態において、塩基は、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシドである。
一実施形態において、ステップ（ｈ）は、－２０～８０℃の温度下、好ましくは、－２０～７０℃で行う。一実施形態において、反応は、－２０～６０℃の温度下で行う。一実施形態において、反応は、－１０～６０℃の温度下で行い、好ましくは、０～５０℃、より好ましくは、１０～４０℃、例えば、１０℃、１５℃、２０℃、２５℃、３０℃、３５℃又は４０℃である。
一実施形態において、反応は有機溶媒中で行う。一実施形態において、有機溶媒は、スルホキシド類溶媒、エーテル類溶媒、炭化水素類溶媒及びそれらの組み合わせから選ばれる。好ましい実施形態において、スルホキシド類溶媒は、ＤＭＳＯである。他の好ましい実施形態において、エーテル類溶媒は、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメチルテトラヒドロフラン及びそれらの組み合わせから選ばれる。更に他の好ましい実施形態において、炭化水素類溶媒は、ベンゼン、トルエン及びそれらの組み合わせから選ばれる。
ＲがＬ¹－Ｒ^1''である場合には、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩで表される化合物の構造は、式ｉｉｉ^''で示される。
ステップ（ｉ）：式ｉｉｉ^''で表される化合物を還元させ、式ｉｉｉで表される化合物を調製する。

Ｒ^1''は、Ｃ_1-8アルケニル基であり、ここで、前記アルケニル基は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）から選ばれる１つ又は２つで任意選択的に置換され、
Ｒ¹は、Ｃ_1-8アルキル基であり、ここで、前記アルキル基は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－ＣＨ₂ＯＨ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）から選ばれる１つ又は２つで任意選択的に置換され、
Ｒ²は、Ｈであり、
Ｌ¹、ＰＧ¹は、上記に定義される通りである。

一実施形態において、ステップ（ｉ）は、ステップ（Ｂ－２）の第１階段と第２階段の間で実施され、式ｉｉｉ^''と式ｉｉｉとも式ＩＩＩ’の構造の範囲内に入る。ステップ（ｉ）は、以下のステップ（ｉ－１）を含む。

一実施形態において、ステップ（ｉ）は、ステップ（Ｂ）の後に行い、式ｉｉｉ^''と式ｉｉｉとも式ＩＩＩの構造の範囲内に入る。ステップ（ｉ）は、以下のステップ（ｉ－２）を含む。

ＲがＬ¹－Ｒ^1'''である場合には、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩで表される化合物の構造は、下式ｉｉｉ^'''で示される。
一実施形態において、ステップ（ｉ）は、接触水素化反応で行う。
ステップ（ｊ）：式ｉｉｉ^'''化合物を脱保護し、式ｉｉｉで表される化合物を調製する。

Ｒ^1'''は、Ｈ、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる１つ又は２つで任意選択的に置換され、
Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換され、
Ｒ²は、Ｈであり、
Ｌ¹、ＰＧ¹は、上記に定義される通りである。

一実施形態において、ステップ（ｊ）は、ステップ（Ｂ－２）の第１階段と第２階段の間で実施され、式ｉｉｉ^'''と式ｉｉｉとも式ＩＩＩ’の構造の範囲内に入る。ステップ（ｊ）は、以下のステップ（ｊ－１）を含む。

一実施形態において、ステップ（ｊ）は、ステップ（Ｂ）の後に行い、式ｉｉｉ^'''と式ｉｉｉとも式ＩＩＩの構造の範囲内に入る。ステップ（ｊ）は、以下のステップ（ｊ－２）を含む。

上記式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''化合物は、式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ’又は式ＩＩＩの構造の範囲内に入り、式ｉｖ中のＡＢ環の構造は、式ｉｉｉと同様であるため、式ｉ、式ｉｉ、式ｉｉｉ、式ｉｉｉ^''、式ｉｉｉ^'''、式ｉｖ中のＡＢ環に複数の構造が存在する場合には、複数の構造はステップ（Ａ）及びステップ（Ｂ）に記載の方法に従って変換することができる。

本発明に係る第１又は第２の側面のステップ（Ａ）、ステップ（Ｂ）、ステップ（ａ）～ステップ（ｊ）の反応を以下の表１にまとめる。

本発明は、第２の側面は、以下のステップを含む式ＩＩＩで表される化合物を調製するための方法を提供する。即ち
ステップ（１）：式ｉｉで表される化合物を式ａで表される化合物に変換し、

ステップ（２）：式ａで表される化合物を水素化ホウ素ナトリウム、塩化カルシウム及びピリジンの作用下で式ｂで表される化合物に還元させ、

ステップ（３）：式ｂで表される化合物を式ＩＩＩで表される化合物に変換する。

ここで、
、Ｒａ、Ｒｂ、ＰＧ、ＲＬ１、ＬＧ、Ｒは上記と同じ定義を有し、本発明はここで贅言しない。

一実施形態において、ＰＧは、アセチル基及びトリフルオロアセチル基から選ばれる。好ましい実施形態において、ＰＧは、アセチル基である。
一実施形態において、ステップ（１）は、アシル化剤の存在下で行い、アシル化剤は、無水酢酸、塩化アセチル、酢酸イソプロペニル及びそれらの組み合わせから選ばれるか、又は無水トリフルオロ酢酸、トリフルオロアセチルクロリド及びそれらの組み合わせから選ばれる。他の実施形態において、アシル化剤は、無水酢酸、塩化アセチル、酢酸イソプロペニル及びそれらの組み合わせから選ばれる。特定の実施形態において、アシル化剤は、酢酸イソプロペニルである。他の特定の実施形態において、アシル化剤は、無水酢酸、塩化アセチル混合物である。一実施形態において、ステップ（１）は、酸の存在下で行い、前記酸は、無機酸又は有機酸である。一実施形態において、酸は、ｐ－ＴｓＯＨ、ＭｓＯＨ、ＨＣｌ、Ｈ２ＳＯ４、ＨＣｌＯ４及びそれらの組み合わせから選ばれる。特定の実施形態において、酸は、ｐ－ＴｓＯＨである。
一実施形態において、ステップ（１）は、０～１１０℃の温度下で、好ましくは、室温～１１０℃で行う。一実施形態において、反応は、４０～１１０℃の温度下で行い、例えば、４０℃、４５℃、５０℃、５５℃、６０℃、６５℃、７０℃、７５℃、８０℃、８５℃、９０℃、９５℃、１００℃又はそれらの組み合わせである。
一実施形態において、Ｌ¹は存在しない。他の実施形態において、Ｌ¹は、Ｃ_1-6アルキレン基、好ましくは、Ｃ_1-6アルキレン基、より好ましくは、Ｃ_1-4アルキレン基である。特定の実施形態において、Ｌ¹は、Ｃ_1-2アルキレン基、特に、メチレン基である。

一実施形態において、ＬＧは、ハロゲン、ハロゲンで任意選択的に置換されたＣ_1-6アルキルスルホン酸エステル脱離基及びＣ_1-6アルキル基で任意選択的に置換されたベンゼンスルホン酸エステル脱離基から選ばれる。一実施形態において、ＬＧは、ＯＴｆ、ＯＴｓ又はＯＭｓである。一実施形態において、ＬＧは、ＯＴｓである。一実施形態において、ＬＧは、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選ばれる。
一実施形態において、Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｏ－ＰＧ¹から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換されている。
一実施形態において、Ｒ¹は、－ＣＨ＝ＣＲ⁴Ｒ⁵であり、式中、Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ_1-6アルキル基、Ｃ_1-6アルケニル基、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換されている。

一実施形態において、Ｒ¹は、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる。好ましくは、Ｒ¹は、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-6アルキル基）、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-6アルキル基）₂から選ばれる。
特定の実施形態において、ＰＧ¹は、ＴＭＳ、ＴＢＳ又はＭＯＭである。
一実施形態において、ステップ（２）では、式ａで表される化合物は、水素化ホウ素ナトリウム、塩化カルシウム及びピリジンの作用下で式ｂで表される化合物に還元される。一実施形態において、反応は有機溶媒中で行う。一実施形態において、有機溶媒は、アルコール類溶媒とテトラヒドロフランとの混合溶媒から選ばれる。他の好ましい実施形態において、アルコール類溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノール及びそれらの組み合わせから選ばれ、好ましくは、メタノール、エタノール又はそれらの組み合わせであるか、或いは、又はエタノール、イソプロパノール又はそれらの組み合わせである。一実施形態において、エタノール又はイソプロパノールとの体積比は１：１である。特定の実施形態において、有機溶媒は、テトラヒドロフランと、メタノール、エタノール及びイソプロパノールの少なくとも１つとの的混合溶媒である。他の特定の実施形態において、有機溶媒は、テトラヒドロフランと、メタノール、エタノールの少なくとも１つとの的混合溶媒である。特定の実施形態において、有機溶媒は、テトラヒドロフランとエタノールとイソプロパノールとの混合溶媒である。一実施形態において、前記アルコールとテトラヒドロフランとの体積比は、１～２：１、特に、１：１である。特定の実施形態において、テトラヒドロフランとエタノールとイソプロパノールの混合溶媒中のテトラヒドロフランとエタノールとイソプロパノールの割合は１：（０．１－１）：（０．１－１）、好ましくは、１：（０．３－０．８）：（０．３－０．８）、特に、１：０．５：０．５である。

一実施形態において、ステップ（２）は、－２０～８０℃の温度下で行い、好ましくは、－２０～７０℃である。一実施形態において、反応は、－２０～６０℃の温度下で行う。一実施形態において、反応は、－２０～４０℃の温度下で行い、好ましくは、－１０～４０℃、例えば、－１０℃、－５℃、０℃、５℃、１０℃、１５℃、２０℃、２５℃、３０℃、３５℃又は４０℃である。
一実施形態において、ステップ（３）は、上記ステップ（ｄ）に従って行い、即ち、式ｂで表される化合物の脱離基を有機金属試薬と反応させ、側鎖を構築して式ＩＩＩで表される化合物を得、その構築過程は上記と類似するため、本発明はここで贅言しない。
一実施形態において、ステップ（３）は、上記ステップ（ｅ）に従って行い、即ち、式ｂで表される化合物の脱離基とアクリル酸誘導体とが還元剤の作用下で反応させ、側鎖を構築して式ＩＩＩで表される化合物を生じ、その構築過程は上記と類似するため、本発明はここで贅言しない。

一実施形態において、さらに、側鎖にエステル基を含む化合物をアルキル化剤と反応させ、側鎖に第３級ヒドロキシ基を含む化合物を調製するステップｆを含み、その過程は上記と類似するため、本発明はここで贅言しない。
一実施形態において、
は、式Ｉにおいて単結合又は二重結合を示し、単結合を示す場合には、式ｉｉで表される化合物は、式ｉｉ－１として表すことができ、しかも、本発明に係る方法は、ステップ（１）の前に、化合物を脱水素反応させ、その単結合を二重結合に変換するステップ（ａ）を任意選択的に含み、変換後に得られた構造は、式ｉｉ－２として表すことができ、且つ、依然として式Ｉの定義内に入る。該過程は前記ステップａと類似するため、本発明はここで贅言しない。
幾つかの実施形態において、さらに、化合物側鎖上の第１級ヒドロキシ基をスルホニル化剤又はハロゲン化剤と反応させ、側鎖に脱離基を含む化合物を調製するステップ（ｂ）を含む。該過程は前記過程と類似するため、本発明はここで贅言しない。

幾つかの実施形態において、さらに、スルホン酸エステル基を含む式ｉｉ’化合物をハロゲン化剤と反応させ、ハロゲン脱離基を含む式ｉｉで表される化合物を調製するステップ（ｃ）を含み、該過程は前記過程と類似するため、本発明はここで贅言しない。
幾つかの実施例では、さらに、側鎖に二重結合を含む式ｉｉｉ^''で表される化合物を還元させ、側鎖を有する式ｉｉｉで表される化合物を調製するステップ（ｉ）を含む。該過程は前記過程と類似するため、本発明はここで贅言しない。
一つの実施例では、さらに、側鎖に保護基を含む式ｉｉｉ^'''化合物を脱保護し、式ｉｉｉで表される化合物の側鎖を構築するステップ（ｊ）を含む。該過程は前記過程と類似するため、本発明はここで贅言しない。

本発明は、第３の側面で、以下のステップを含む、式ＩＩＩで表される化合物を調製するための別の方法を提供する。即ち、
ステップ（１１）：式ｉｉで表される化合物を式Ｉで表される化合物に変換し、

ステップ（１２）：式Ｉで表される化合物を式ＩＩで表される化合物に変換し、
ステップ（１３）：式ＩＩで表される化合物を水素化ホウ素ナトリウム及び塩化カルシウムの作用下で式ＩＩＩで表される化合物に還元する。

ここで、
Ｒ^a、Ｒ^b、ＰＧ、ＲＬ¹、ＬＧ、Ｒは上記と同じ定義を有し、本発明はここで贅言しない。

一実施形態において、ＰＧは、アセチル基及びトリフルオロアセチル基から選ばれる。好ましい実施形態において、ＰＧは、アセチル基である。
一実施形態において、ステップ（１２）は、アシル化剤の存在下で行い、アシル化剤は、無水酢酸、塩化アセチル、酢酸イソプロペニル及びそれらの組み合わせから選ばれるか、又は無水トリフルオロ酢酸、トリフルオロアセチルクロリド及びそれらの組み合わせから選ばれる。他の実施形態において、アシル化剤は、無水酢酸、塩化アセチル、酢酸イソプロペニル及びそれらの組み合わせから選ばれる。特定の実施形態において、アシル化剤は、酢酸イソプロペニルである。他の特定の実施形態において、アシル化剤は、無水酢酸、塩化アセチル混合物である。一実施形態において、ステップ（１２）は、酸の存在下で行い、前記酸は、無機酸又は有機酸である。一実施形態において、酸は、ｐ－ＴｓＯＨ、ＭｓＯＨ、ＨＣｌ、Ｈ₂ＳＯ₄、ＨＣｌＯ₄及びそれらの組み合わせから選ばれる。特定の実施形態において、酸は、ｐ－ＴｓＯＨである。
一実施形態において、ステップ（１２）は、０～１１０℃の温度下で行い、好ましくは、室温～１１０℃である。一実施形態において、反応は、４０～１１０℃の温度下で行い、例えば、４０℃、４５℃、５０℃、５５℃、６０℃、６５℃、７０℃、７５℃、８０℃、８５℃、９０℃、９５℃、１００℃又はそれらの組み合わせである。
一実施形態において、Ｌ¹は存在しない。他の実施形態において、Ｌ¹は、Ｃ_1-6アルキレン基、好ましくは、Ｃ_1-6アルキレン基、より好ましくは、Ｃ_1-4アルキレン基である。特定の実施形態において、Ｌ¹は、Ｃ_1-2アルキレン基、特に、メチレン基である。

一実施形態において、ＬＧは、ハロゲン、ハロゲンで任意選択的に置換されたＣ_1-6アルキルスルホン酸エステル脱離基及びＣ_1-6アルキル基で任意選択的に置換されたベンゼンスルホン酸エステル脱離基から選ばれる。一実施形態において、ＬＧは、ＯＴｆ、ＯＴｓ又はＯＭｓである。一実施形態において、ＬＧは、ＯＴｓである。一実施形態において、ＬＧは、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選ばれる。
一実施形態において、Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｏ－ＰＧ¹から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換されている。
一実施形態において、Ｒ¹は、－ＣＨ＝ＣＲ⁴Ｒ⁵であり、式中、Ｒ⁴及びＲ⁵は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ_1-6アルキル基、Ｃ_1-6アルケニル基、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換されている。

一実施形態において、Ｒ¹は、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる。好ましくは、Ｒ¹は、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-6アルキル基）、－（ＣＨ₂）₂－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-6アルキル基）₂から選ばれる。
特定の実施形態において、ＰＧ¹は、ＴＭＳ、ＴＢＳ又はＭＯＭである。
一実施形態において、ステップ（１３）では、式ＩＩで表される化合物は、水素化ホウ素ナトリウム及び塩化カルシウムの作用下で式ＩＩＩで表される化合物に還元される。一実施形態において、反応は有機溶媒中で行う。一実施形態において、有機溶媒は、アルコール類溶媒とジクロロメタンの混合溶媒から選ばれる。他の好ましい実施形態において、アルコール類溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノール及びそれらの組み合わせから選ばれ、好ましくは、メタノール、エタノール又はそれらの組み合わせであるか、或いは、エタノール、イソプロパノール又はそれらの組み合わせである。一実施形態において、エタノール、イソプロパノールの体積比は１：１である。特定の実施形態において、有機溶媒は、ジクロロメタンと、メタノール、エタノール及びイソプロパノールの少なくとも１つとの的混合溶媒である。他の特定の実施形態において、有機溶媒は、ジクロロメタンと、メタノール、エタノールの少なくとも１つとの的混合溶媒である。特定の実施形態において、有機溶媒は、ジクロロメタンとエタノールとイソプロパノールの混合溶媒である。一実施形態において、前記アルコールとジクロロメタンの体積比は、１～２：１、特に、１：１である。特定の実施形態において、ジクロロメタンとエタノールとイソプロパノールの混合溶媒中のジクロロメタンとエタノールとイソプロパノールの割合は、１：（０．１～１）：（０．１～１）、好ましくは、１：（０．３～０．８）：（０．３～０．８）、特に、１：０．５：０．５である。

一実施形態において、ステップ（１３）は、－２０～８０℃の温度下で行い、好ましくは、－２０～７０℃である。一実施形態において、反応は、－２０～６０℃の温度下で行う。一実施形態において、反応は、－２０～４０℃の温度下で行い、好ましくは、－１０～４０℃、例えば、－１０℃、－５℃、０℃、５℃、１０℃、１５℃、２０℃、２５℃、３０℃、３５℃又は４０℃である。
一実施形態において、ステップ（１１）は、ステップｄに従って行い、脱離基を含む式ｉｉで表される化合物を有機金属試薬の作用下で式Ｉで表される化合物に変換し、側鎖を構築する。該過程は前記過程と類似するため、本発明はここで贅言しない。
幾つかの実施形態において、ステップ（１１）は、ステップｅに従って行い、脱離基を含む式ｉｉで表される化合物をアクリル酸誘導体及び還元剤の作用下で式Ｉで表される化合物に変換させ、側鎖を構築する。該過程は前記過程と類似するため、本発明はここで贅言しない。

一実施形態において、さらに、側鎖にエステル基を含む式ｉｉで表される化合物をアルキル化剤と反応させ、側鎖に第３級ヒドロキシ基を含む式Ｉで表される化合物を調製するステップｆを含む。該過程は前記過程と類似するため、本発明はここで贅言しない。
一実施形態において、
は、式Ｉにおいて単結合又は二重結合を示し、単結合を示す場合には、式ｉｉで表される化合物は、式ｉｉ－１として表すことができ、しかも、本発明に係る方法は、ステップ（１２）の前に、式ｉｉで表される化合物を脱水素反応させ、脱水素化された式ｉｉ－２化合物を調製するステップ（ａ）を任意選択的に含む。該過程は前記過程と類似するため、本発明はここで贅言しない。
幾つかの実施形態において、さらに、側鎖に第１級ヒドロキシ基を含む式ｉで表される化合物をスルホニル化剤又はハロゲン化剤と反応させ、脱離基を含む式ｉｉで表される化合物を調製するステップ（ｂ）を含む。該過程は前記過程と類似するため、本発明はここで贅言しない。

幾つかの実施形態において、さらに、スルホン酸エステル脱離基を含む式ｉｉ’で表される化合物をハロゲン化剤と反応させ、ハロゲン脱離基を含む式ｉｉで表される化合物を調製するステップ（ｃ）を含む。該過程は前記過程と類似するため、本発明はここで贅言しない。
一つの実施例では、さらに、側鎖に第１級ヒドロキシ基を含む式ｉｉｉで表される化合物を酸化剤と反応させ、側鎖にアルデヒド基を含む式ｉｖで表される化合物を調製するステップ（ｇ）を含む。該過程は前記過程と類似するため、本発明はここで贅言しない。
一実施形態において、さらに、側鎖にアルデヒド基を含む化合物をＷｉｔｔｉｇ反応させ、側鎖に二重結合を含む化合物を調製するステップ（ｈ）を含む。該過程は前記過程と類似するため、本発明はここで贅言しない。
本発明は、さらに、式Ｉ－１化合物から式ＩＩＩ－１化合物を調製するための方法を提供する。

調製手順は、上記と同様であり、区別点が置換基及びキラリティーにあるため、本発明はここで贅言しない。
当業者は、必要に応じて、本発明に係る合成方法に適切な調整、例えば、反応ステップの順序の調整、及び、保護／脱保護反応ステップの追加または省略を行うことができることを理解すべきである。さらに、必要及び実際の状況に応じて、本発明に係る合成方法のステップのそれぞれを別々にまたは同時に行うことができ、特に限定されていない。例えば、上記の各側面では、ステップ（ｊ）は他の反応と同時に行うことができる。

当該分野における周知の知識によれば、式Ｉで表される化合物は、植物ステロールを原料として使用する微生物変換により調製することができる。従って、本発明の任意選択的な側面では、植物ステロールから微生物変換及び化学合成を経て式Ｉで表される化合物を調製することができ、前記方法は、以下のステップ（Ａ’）を含む。
ステップ（Ａ’）：式Ｉ’で表される化合物をマイコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属の微生物又はその培養物に接触させ、式Ｉで表される化合物を調製する。

式中、式Ｉ’で表される化合物は、植物ステロールであり、Ｒ’は、

Ｒは、－ＣＨ₂ＯＨである。
有益な効果

本発明は、当技術分野で緊急に必要とされる、コレステロール及びその誘導体を調製するための新たな方法、特に、２５－ヒドロキシコレステロール、２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロールを調製するための方法を提供し、先行技術の技術的問題、例えば、原料の供給源及び側鎖の２５－ヒドロキシルの構築の難しさという問題を解決している。
本発明に係る方法は、原料が容易に入手可能である。ステップ操作は、簡単で、特別な分離手段がなく、反応収率が高く、製造コストが低く、工業的な生産に適する。しかも、貴金属触媒、毒性の高い試薬、例えば、トリフルオロアセトンペルオキシド又は三酸化クロム／無水酢酸系を使用する必要がなく、ヒドラゾン試薬を使用する必要がないため、環境を汚染する窒素含有廃水の導入を回避できる。
本発明に係る方法は、任意選択的に、低コストで容易に入手可能な植物ステロールを原料として微生物変換により中間体を調製することができ、効率が高く、環境への汚染がほとんどまたはまったくなく、本発明は、完全に植物由来の出発原料から出発して、コレステロール及びその誘導体を首尾よく調製するため、動物由来の出発原料による合成プロセスが直面した安全上のリスク、例えば、狂牛病、豚レンサ球菌症感染等を回避するのはより重要であり、高い経済的価値と幅広い応用の見通しを持つ。

以下、実施例により本発明の実施形態を詳しく説明しているが、当業者は、以下の実施例が本発明を説明するためにのみ使用され、本発明の範囲を限定すると見なされないことを理解すべきである。実施例では、具体的な条件を明記していない場合には、通常の条件又はメーカーの推奨する条件に従って行う。使用される試薬又は機器は、メーカーを明記していない場合に、いずれも市販として購入できる従来の製品である。

実施例１： 化合物１によるコレステロールの調製

ステップ（１） 中間体２Ａの調製
反応フラスコに化合物１ ２００ｇ、ＤＭＡＰ １０ｇ、トリエチルアミン ２００ｍＬ及びＤＣＭ １０００ｍＬを室温で加え、窒素ガスで置換し、溶液が透明になるまで撹拌した。昇温して還流した。反応系にｐ－トルエンスルホニルクロリド １５０ｇのＤＣＭ（４００ｍＬ）溶液を滴下し、約３０ｍｉｎかけて滴下が終了し、１～２ｈの還流反応を続けた。原料がなくなるまで反応をＴＬＣによりモニタリングした。反応終了後、反応系を１０℃に冷却し、５０％メタノール水溶液８０ｍＬを滴下して反応をクエンチし、次いで、水６００ｍＬを加え、分液し、有機層を水で洗浄した。減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去し、適量のメタノールを加え、ＤＣＭが完全に除去されるまで濃縮を続けた。メタノール約２００ｍＬが残存し、０～１０℃まで降温し、撹拌下で１ｈ晶析し、吸引ろ過し、メタノールですすぎ、４５～５０℃で乾燥させて２Ａを得た。重量収率は、約１４０％であり、純度は、９８％を超えた。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ₃）δ ７．７５（ｄ，Ｊ＝８．１ Ｈｚ，２Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），５．６９（ｓ，１Ｈ），３．９３（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．９Ｈｚ，１Ｈ），３．７５（ｄｄ，Ｊ＝９．１，６．５Ｈｚ，１Ｈ），２．５２ － ２．１６（ｍ，７Ｈ），２．０６ － １．８８（ｍ，２Ｈ），１．８６ － １．３２（ｍ，８Ｈ），１．１８ － ０．７８（ｍ，１３Ｈ），０．６５（ｓ，３Ｈ）．

ステップ（２）中間体３Ａの調製
反応フラスコに中間体２Ａ ２００ｇ、ｐ－ＴｓＯＨ ２０ｇ、酢酸イソプロペニル ４００ｍＬ、ジクロロメタン ６００Ｌを室温で加え、撹拌しながら徐々に昇温して還流反応させ、約３～４ｈかけて、反応終了後、ＴＬＣにより原料が残存しないことを確認し、３０℃まで降温し、減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去した。メタノール２００ｍＬを加えて濃縮を続け（該操作は３回行う。）、最後に粘稠状に濃縮し、０℃まで降温し、撹拌下で１ｈ晶析し、吸引ろ過し、メタノールですすぎ、４５～５０℃乾燥させて３Ａを得た。重量収率は、約１０４％であり、純度は、９８％を超えた。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ７．７６（ｄ，Ｊ＝７．９ Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝７．９ Ｈｚ，２Ｈ），５．６６（ｓ，１Ｈ），５．３６（ｓ，１Ｈ），４．０６ － ３．８７（ｍ，１Ｈ），３．８５ － ３．６７（ｍ，１Ｈ），２．４１（ｄ，Ｊ＝１６．４ Ｈｚ，４Ｈ），２．１９ － ２．０４（ｍ，５Ｈ），１．９２（ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，１Ｈ），１．８１（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，５．２ Ｈｚ，１Ｈ），１．７４ － １．４７（ｍ，６Ｈ），１．４４ － ０．８９（ｍ，１４Ｈ），０．６５（ｓ，３Ｈ）．

ステップ（３）中間体４Ａの調製
反応フラスコに無水塩化カルシウム ７ｇ、ピリジン ４０ｇ、メタノール ４００ｍＬ、ＴＨＦ ４００ｍＬを室温で加え、撹拌して溶解させ、次いで、－１０～－１５℃まで降温し、水素化ホウ素ナトリウムを４つのバッチに分けて各バッチあたり４ｇ追加し、仕込間隔を１０ｍｉｎとし、反応系の温度を－１０℃未満に保持し、全ての追加が完了したら、中間体３Ａ（１００ｇ）を加え、室温まで自然に昇温して反応させ、約８～１０ｈかけて反応が終了し、撹拌下で反応液を氷水 １０００ｍＬに徐々に注ぎ、固体が析出するまで終了した。２０ｍＬ撹拌し続け、系に氷酢酸２０ｍＬを徐々に滴下し、吸引ろ過し、水で濯いだ。固体をＤＣＭ ３００ｍＬで溶解させ、水層を分離し、有機相を減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去した。メタノールを加えて濃縮を続け（該操作は３回行う。）、最後にメタノール約１００ｍＬが残存し、０℃まで降温して１ｈ晶析し、吸引ろ過し、氷冷メタノールですすぎ、４５～５０℃で乾燥させて４Ａを得た。重量収率は、約７５％であり、ＨＰＬＣ検出純度は、９２％を超えた。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ７．７６（ｔ，Ｊ＝７．６ Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｔ，Ｊ＝７．４ Ｈｚ，２Ｈ），５．３０（ｄ，Ｊ＝３．９ Ｈｚ，１Ｈ），３．９３（ｄｄ，Ｊ＝８．９，２．３ Ｈｚ，１Ｈ），３．８３ － ３．６６（ｍ，１Ｈ），３．５８ － ３．３６（ｍ，１Ｈ），２．５１ － ２．３６（ｍ，３Ｈ），２．３４ － ２．１０（ｍ，２Ｈ），２．０６ － １．８４（ｍ，３Ｈ），１．８０（ｄ，Ｊ＝１０．６ Ｈｚ，２Ｈ），１．５１（ｄｄｄｄ，Ｊ＝２５．８，２１．７，１２．１，８．１ Ｈｚ，８Ｈ），１．２３ － ０．７８（ｍ，１３Ｈ），０．６７ － ０．５５（ｍ，３Ｈ）． ¹³Ｃ ＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ １４４．５２，１４０．７３，１３３．００，１２９．６８，１２７．７８，１２１．３２，７５．５９，７１．５５，５６．２３，５１．６８，４９．８９，４２．３３，４２．１１，３９．３１，３７．１４，３６．３６，３６．０８，３１．７９，３１．７１，３１．４７，２７．３３，２４．１５，２１．５４，２０．９０，１９．２８，１６．７６，１１．７．（２つの炭素のシグナルは，他のシグナルとオーバーラップしている。）

ステップ（４）コレステロール（化合物２）の調製
乾燥された２５０ｍＬ反応フラスコに塩化銅 ２．３３ｇ、塩化リチウム １．４７ｇ、ＴＨＦ ８０ｍＬを室温で加え、窒素ガスで３回置換した。温度を１０～３０℃に制御して溶液が澄清になるまで１～２時間反応させて、四塩化銅酸リチウム溶液１を得た。乾燥された１Ｌ反応フラスコにマグネシウムチップ ９．３７ｇ、ブロモイソペンタン ５８．９ｇ、ＴＨＦ ４００ｍＬを室温で加え、窒素ガスで３回置換した。３７～４２℃まで徐々に昇温し、約３～４時間反応させ、グリニャール試薬反応液２を得た。反応液２を－４０℃に降温させた。四塩化銅酸リチウム溶液を滴下し、約１時間かけて滴下が終了した。次いで、中間体４Ａ（２５ｇ）のＴＨＦ（２５０ｍＬ）溶液を滴下した。滴下終了後、室温まで徐々に昇温して３ｈ反応させ、サンプルを採取してプレートにスポットし、原料が基本的になくなり、温度を０～２０℃に制御し、５％塩酸 ２００ｍＬを加えてクエンチし、１０～３０分間撹拌した。ほとんど留分がなくなるまで減圧下で濃縮した。水 １００ｍＬ及びＤＣＭ ２００ｍＬを加えて、０．５～１時間撹拌して溶解させた。分液した。有機層を、ほとんど留分がなくなるまで４０～４５℃、減圧下で濃縮した。メタノール ２５ｍＬを加えて４０～５０℃で濃縮を続けた。メタノール ２５ｍＬを加え、１０～３０℃まで降温し、０．５～１時間撹拌し、ろ過し、粗生成物を得た。固体をＤＣＭ及びメタノールで再結晶し、得られた固体を５０℃で乾燥して５Ａを得た。重量収率は、５２％であり、純度は、約９９％である。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ５．３５（ｔ，Ｊ＝２．８ Ｈｚ，１Ｈ），３．０２－３．４３（ｍ，１Ｈ），２．３６－２．２７（ｍ，２Ｈ），２．００－１．８２（ｍ，５Ｈ），１．５６－０．８７（ｍ，２８Ｈ），０．８６（ｄ，Ｊ＝１．６ Ｈｚ，６Ｈ），０．６８（ｓ，３Ｈ）．
¹³Ｃ ＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ １４０．７８，１２１．７１，７１．８０，５６．７８，５６．１８，５０．１５，４２．３３，３９．８０，３９．５３，３７．２７，３６．５１，３６．２１，３５．８０，３１．９２，３１．９２，３１．６８，２８．２４，２８．０２，２４．３１，２３．８５，２２．８３，２２．７２，２２．５７，２１．１０，１９．４１，１９．２２，１２．３５．（１つの炭素のシグナルは，他のシグナルとオーバーラップしている。）

実施例２： 化合物１による７－デヒドロコレステロールの調製

ステップ（１）は実施例１を参照する。

ステップ（２）中間体２ａ
室温で、反応フラスコに中間体２Ａ（１００ｇ）、無水メタノール ５００ｍＬ、ＰＴＳ（５ｇ）、オルト酢酸トリメチル（８０ｍＬ）を撹拌しながら加え、３０℃に保持し、約３ｈかけて反応終了後、ＴＬＣによりモニタリングし、原料の反応が終了した後、アセトン ４００ｍＬ、水 ７０ｍＬ、クロラニル ８０ｇを加え、撹拌しながら４０℃程度まで徐々に昇温して反応させ、ＴＬＣによりモニタリングし、約３～４ｈかけて、反応終了後、反応系を水 １０００ｍＬに注いで固体を析出させ、ろ過し、固体をクロロホルム ４００ｍＬで５０℃に加熱して溶解させ、熱いうちにろ過し、ケーキをクロロホルム １００ｍＬで加熱して溶解させ、ろ過し、有機相を合わせた。有機相に飽和亜硫酸ナトリウム水溶液（亜硫酸ナトリウム ５０ｇ含有）を加えて１ｈ撹拌し、静置して分層させ、有機相を減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去し、メタノールを加えて濃縮を続け（該操作は３回行う。）、メタノール約１００ｍＬが残存し、０℃まで降温して１ｈ晶析させ、吸引ろ過し、メタノールですすぎ、４５～５０℃で乾燥させて２ａを得た。重量収率は、約９０％であり、純度は、９３％を超えた。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ７．７４（ｔ，Ｊ＝７．１ Ｈｚ，２Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝７．７ Ｈｚ，２Ｈ），６．０６（ｄ，Ｊ＝６．６ Ｈｚ，２Ｈ），５．６２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），３．９４（ｄｄ，Ｊ＝９．０，２．３ Ｈｚ，１Ｈ），３．８４ － ３．６１（ｍ，１Ｈ），２．６４ － ２．４６（ｍ，１Ｈ），２．４５ － ２．２５（ｍ，４Ｈ），２．１３（ｔ，Ｊ＝１０．１ Ｈｚ，１Ｈ），２．０４ － １．８４（ｍ，２Ｈ），１．８２ － １．３１（ｍ，６Ｈ），１．３１ － １．０２（ｍ，９Ｈ），１．０４ － ０．８９（ｍ，３Ｈ），０．７３ － ０．５８（ｍ，３Ｈ）．

ステップ（３）中間体３ａ
反応フラスコに中間体２ａ（１００ｇ）、無水酢酸 ５００ｍＬ、塩化アセチル ２００ｍＬを室温で加え、遮光下で昇温し、還流し反応させ、約６～８ｈ後、ＴＬＣによりモニタリングし、原料の残存は５％未満である。反応液を７５℃程度、減圧下で濃縮乾固し、室温まで降温し、メタノール ５０ｍＬを滴下して残った無水酢酸をクエンチし、アセトン １００ｍＬを加え、減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去し、アセトン ２００ｍＬを加えて濃縮を続け、アセトン約１００ｍＬが残存し、０℃まで降温して１ｈ晶析させ、ろ過し、氷冷アセトンですすぎ、固体４を５～５０℃で乾燥させて３ａを得、重量収率は、約９０％であり、純度は、９５％を超えた。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ７．７６（ｄ，Ｊ＝７．８ Ｈｚ，２Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝７．９ Ｈｚ，２Ｈ），５．７３（ｓ，１Ｈ），５．５５（ｄ，Ｊ＝５．７ Ｈｚ，１Ｈ），５．４７（ｓ，１Ｈ），３．９５（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．３ Ｈｚ，１Ｈ），３．８５－ ３．６９（ｍ，１Ｈ），２．５４（ｄｄ，Ｊ＝２１．０，８．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．１９ － １．９６（ｍ，６Ｈ），１．８７（ｄｄ，Ｊ＝１２．４，５．３ Ｈｚ，２Ｈ），１．７７ － １．４９（ｍ，６Ｈ），１．４８ － １．１４（ｍ，４Ｈ），１．０３ － ０．９１（ｍ，６Ｈ），０．５６（ｓ，３Ｈ）．

ステップ（４）中間体４ａ
反応フラスコに無水塩化カルシウム ７ｇ、ピリジン ４０ｇ、メタノール ４００ｍＬ、ＴＨＦ ４００ｍＬを室温で加え、撹拌して溶解させ、次いで、－１０～－１５℃まで降温し、水素化ホウ素ナトリウムを４つのバッチに分けて間隔１０ｍｉｎで各バッチあたり４ｇ追加し、すべての追加が完了したら、中間体３ａ（１００ｇ）を加えた後、系を温度－５～－１０℃に保持して反応させ、約８～１０ｈかけて、反応終了後、ＴＬＣによりモニタリングし、原料が残存しなく、反応液を氷水 １０００ｍＬに徐々に注ぎ、加えながら撹拌し、固体が析出するまで、２０ｍＬ撹拌が終了し、系に氷酢酸 ２０ｍＬを徐々に滴下し、吸引ろ過し、水で濯いだ。固体をＤＣＭ ３００ｍＬで溶解させ、水層を分離し、有機相を減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去し、メタノールを加えて濃縮を続け（該操作は３回行う。）、最後に、メタノール約１００ｍＬが残存し、０℃まで降温して１ｈ晶析し、吸引ろ過し、氷冷メタノールですすぎ、４５～５０℃で乾燥させて４ａを得た。重量収率は、約７０％であり、純度は、９５％を超えた。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ７．７７（ｄ，Ｊ＝８．１ Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），５．５４（ｄ，Ｊ＝３．７ Ｈｚ，１Ｈ），５．４４ － ５．２０（ｍ，１Ｈ），３．９５（ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．７ Ｈｚ，１Ｈ），３．８０（ｄｄ，Ｊ＝９．１，６．４ Ｈｚ，１Ｈ），３．６７ － ３．５２（ｍ，１Ｈ），２．５８ － ２．３７（ｍ，４Ｈ），２．２６（ｔ，Ｊ＝１２．８ Ｈｚ，１Ｈ），２．０８ － １．７８（ｍ，６Ｈ），１．７４ － １．１４（ｍ，１１Ｈ），０．９８（ｄｄ，Ｊ＝１１．３，６．１ Ｈｚ，３Ｈ），０．８７（ｄ，Ｊ＝３１．０Ｈｚ，３Ｈ），０．５９（ｄ，Ｊ＝２３．９ Ｈｚ，３Ｈ）． ¹³Ｃ ＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ １４４．５９，１４０．４４，１４０．０５，１３３．０１，１２９．７２，１２７．８４，１１９．３９，１１６．５７，７５．４９，７０．２６，５３．９７，５１．４３，４６．０３，４２．９４，４０．６７，３８．７７，３８．２７，３６．９４，３６．４４，３１．８４，２７．２６，２２．９３，２１．５７，２０．９４，１６．９２，１６．１９，１１．７０．（２つの炭素のシグナルは，他のシグナルとオーバーラップしている。）

ステップ（５）中間体４ｃ
反応フラスコにＤＭＦ ５００ｍＬ、中間体４ａ １００ｇ、臭化リチウム ３９ｇ、炭酸リチウム １０ｇを室温の条件下で加え、均一に撹拌し、窒素ガスで３回置換し、遮光下で保護した。系を８０～８５℃まで徐々に昇温して反応させ、ＴＬＣにより反応をモニタリングし、反応終了した。反応液を１０～３０℃まで降温し、温度を１０～３０℃に制御し、反応液を１０Ｖの水に移し、１～２時間撹拌した。ろ過し、適量の水ですすぎ、約５０℃のオーブンにて遮光下で乾燥させ、重量収率は、約８０％である。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ５．５７（ｄ，Ｊ＝３．８ Ｈｚ，１Ｈ），５．４５ － ５．３０（ｍ，１Ｈ），３．６３（ｄｄ，Ｊ＝１３．３，９．３ Ｈｚ，１Ｈ），３．５１（ｄｄ，Ｊ＝９．７，２．０Ｈｚ，１Ｈ），３．３７（ｄｄ，Ｊ＝９．７，５．９ Ｈｚ，１Ｈ），２．４７（ｄｄ，Ｊ＝１４．１，２．３ Ｈｚ，１Ｈ），２．２８（ｔ，Ｊ＝１２．８ Ｈｚ，１Ｈ），２．１３ － １．８３（ｍ，６Ｈ），１．６８（ｄｄｄ，Ｊ＝２６．３，１６．９，７．６ Ｈｚ，５Ｈ），１．５１ － １．２２（ｍ，６Ｈ），１．１０（ｔ，Ｊ＝８．６ Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，３Ｈ），０．６７（ｄ，Ｊ＝２３．９ Ｈｚ，３Ｈ）．

ステップ（６）７－デヒドロコレステロール（化合物３）
乾燥された２５０ｍＬ反応フラスコに塩化銅 ０．８０ｇ、塩化リチウム ０．５１ｇ、ＴＨＦ ３０ｍＬを室温下で加え、窒素ガスで３回置換した。温度を１０～３０℃に制御して溶液が透明になるまで１～２時間反応させ、四塩化銅酸リチウム溶液１を得た。乾燥された１Ｌ反応フラスコにマグネシウムチップ ４．１６ｇ、ＴＨＦ １００ｍＬを室温下で加え、窒素ガスで３回置換した。ブロモイソペンタン ２６．２ｇを滴下し、３７～４２℃まで徐々に昇温し、約３～４時間反応させ、グリニャール試薬反応液２を得た。反応液２を－４０～－１０℃まで降温した。四塩化銅酸リチウム溶液を滴下し、約１時間かけて滴下が終了した。温度を－２０～－１０℃に制御し、中間体４ｃの固体２０ｇを加えた。加えた後に、室温まで徐々に昇温し、４時間反応させ、サンプルを採取してプレートにスポットし、原料が基本的になくなるように制御し、温度を０～２０℃に制御し、塩化アンモニウム溶液２２５ｍＬを加えてクエンチし、温度を４０～４５℃に制御し、ほとんど留分がなくなるまで減圧下で濃縮した。ＤＣＭ １００ｍＬを加えて抽出した。分液し、再度、１回水洗した。有機層をほとんど留分がなくなるまで４０～４５℃減圧下で濃縮した。メタノール ２５ｍＬを加えて４０～５０℃で濃縮を続けた。メタノール ２５ｍＬを加え、１０℃まで降温して０．５～１時間撹拌し、ろ過し、ケーキをメタノール １０ｍＬで洗浄した。固体を５０℃以下で真空乾燥して化合物３を得た。重量収率は、６５％である。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ５．５７－５．４０（ｍ，２Ｈ），３．６４－３．５８（ｍ，１Ｈ），２．４９－２．２３（ｍ，２Ｈ），２．１２－１．８３（ｍ，７Ｈ），１．７２－０．８３（ｍ，２９Ｈ），０．６２（ｓ，３Ｈ）．

実施例３： 化合物１による２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロールの調製

ステップ（１）～ステップ（４）は、実施例２を参照した。

ステップ（５） 中間体５ａ
乾燥された２５０ｍＬ反応フラスコに塩化銅 ２．４１ｇ、塩化リチウム １．５２ｇ、ＴＨＦ ８０ｍＬを室温で加え、窒素ガスで３回置換した。温度を１０～３０℃に制御して溶液が透明になるまで１～２時間反応させ、四塩化銅酸リチウム溶液１を得た。乾燥された１Ｌ反応フラスコにマグネシウムチップ １２．５ｇ、ＴＨＦ ３５０ｍＬを室温下で加え、窒素ガスで３回置換した。４－ブロモ－２－メチル－２－トリメチルシロキシブタン １３８．５ｇを滴下し、３７～４２℃まで徐々に昇温し、約３～４時間反応させ、グリニャール試薬反応液２を得た。反応液２を－４０℃まで降温した。四塩化銅酸リチウム溶液を滴下、約１時間かけて滴下が終了した。温度を－２０～－１０℃に制御し、中間体４ａの固体２５ｇを加えた。加えた後、室温まで徐々に昇温し、４時間反応させ、サンプルを採取してプレートにスポットし、原料が基本的になくなるように制御し、塩化アンモニウム溶液 ２２５ｍＬを加えてクエンチし、温度を４０～４５℃に制御し、ほとんど留分がなくなるまで減圧下で濃縮し、得られた混合物は、次の反応に直接使用された。
ステップ（６）２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロール（化合物４）
ステップ（５）で得られた混合物にＤＣＭ １２５ｍＬを加えて溶解させ、塩酸を加えてｐＨが３～４になるように調整し、室温で１ｈ撹拌し、有機相を分離し、水で洗浄した（５０ｍＬ(２）。ほとんど留分がなくなるまで４０～４５℃、減圧下で濃縮した。メタノール ２５ｍＬを加えて４０～５０℃で濃縮を続けた。メタノール ２５ｍＬを加え、１０～３０℃まで降温し、０．５～１時間撹拌し、ろ過し、ケーキをメタノール １０ｍＬで洗浄した。固体を５０℃以下で真空乾燥させて５ｂを得た。重量収率は、６５％である。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ５．５７（ｔ，Ｊ＝２．８ Ｈｚ，１Ｈ），５．３９（ｔ，Ｊ＝２．８ Ｈｚ，１Ｈ），３．７２－３．５６（ｍ，１Ｈ），２．４８－２．０８（ｍ，３Ｈ），１．９８－１．８２（ｍ，５Ｈ），１．６７－１．１８（ｍ，２３Ｈ），１．１０－１．０６（ｍ，１Ｈ），０．９５－０．９４（ｍ，６Ｈ），０．６２（ｓ，３Ｈ）．

実施例４： 化合物１による２５－ヒドロキシコレステロールの調製

ステップ（１）は、実施例１を参照した。

ステップ（２）中間体２Ｃ
反応フラスコにＴＨＦ ５００ｍＬ、中間体２Ａ１００ｇ、臭化リチウム ３９ｇ、炭酸リチウム １０ｇを室温下で加え、均一に撹拌し、窒素ガスで３回置換し、遮光下で保護した。系を５５～６０℃まで徐々に昇温して反応させ、ＴＬＣにより反応をモニタリングし、反応が終了した。小さな体積まで濃縮してＴＨＦを回収し、反応液を１０～３０℃まで降温し、温度を１０～３０℃に制御し、反応液を水 １Ｌに移し、１～２時間撹拌した。ろ過し、適量の水ですすぎ、約５０℃のオーブンにて遮光下で乾燥させ、重量収率は、約８０％であり、純度は９６％である。

ステップ（３）中間体３Ｃ
反応フラスコに中間体２Ａ ２００ｇ、ＰＴＳ ２０ｇ、無水酢酸 ６００ｍＬを室温で加え、撹拌下で３０～３５℃まで徐々に昇温して反応させ、約４～６ｈかけて、反応終了後、ＴＬＣによりモニタリングし、原料は残存しなく、２０℃以下まで降温し、氷水 ４Ｌに徐々に注ぎ、注入しながら激しく撹拌し、２ｈ撹拌し続け、吸引ろ過し、中性になるまで大量の水ですすぎ、４５～５０℃で乾燥させて３Ｃを得た。重量収率は、約９８％であり、純度は、９６％を超えた。

ステップ（４）中間体４Ｃ
反応フラスコに無水塩化カルシウム ７ｇ、ピリジン ４０ｇ、メタノール ４００ｍＬ、ＴＨＦ ４００ｍＬを室温下で加え、撹拌して溶解させ、次いで、－１０～－１５℃まで降温し、水素化ホウ素ナトリウムを４つのバッチに分けて間隔１０ｍｉｎで各バッチあたり４ｇ追加し、反応系の温度を－１０℃未満に保持し、すべての追加が完了したら、中間体３Ｃ（１００ｇ）を加えた後、室温まで自然に昇温して反応させ、約８～１０ｈかけて、反応終了後、ＴＬＣによりモニタリングし、原料は残存しなく、反応液を氷水 １０００ｍＬに徐々に注ぎ、加えながら撹拌し、固体が析出するまで終了し、２０ｍＬ撹拌し、系に氷酢酸 ２０ｍＬを徐々に滴下し、吸引ろ過し、水で濯いだ。固体をＤＣＭ ３００ｍＬで溶解させ、水層を分離し、有機相を減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去し、メタノールを加えて濃縮を続け（該操作は３回行う。）、最後にメタノール約１００ｍＬが残存し、０℃まで降温して１ｈ晶析し、吸引ろ過し、メタノールですすぎ、４５～５０℃で乾燥させて４Ａを得た。重量収率は、約８０％であり、純度は、９５％を超えた。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ５．３５（ｄ，Ｊ＝５．２ Ｈｚ，１Ｈ），３．５０（ｄｄ，Ｊ＝９．８，２．６ Ｈｚ，２Ｈ），３．３５（ｄｄ，Ｊ＝９．７，５．９ Ｈｚ，１Ｈ），２．２６（ｄｔ，Ｊ＝２４．０，９．９ Ｈｚ，２Ｈ），２．０４ － １．９２（ｍ，２Ｈ），１．８４（ｄ，Ｊ＝１０．３ Ｈｚ，３Ｈ），１．７３ － １．６０（ｍ，３Ｈ），１．４９（ｔｄ，Ｊ＝１４．６，９．６ Ｈｚ，６Ｈ），１．３１ － １．１８（ｍ，３Ｈ），１．０８（ｔ，Ｊ＝７．８ Ｈｚ，５Ｈ），１．０１（ｓ，３Ｈ），０．９７ － ０．８９（ｍ，１Ｈ），０．７０（ｓ，３Ｈ）．

ステップ（５）中間体５Ｂ
反応フラスコにピリジン １８０ｍＬ、亜鉛粉末 ３０ｇ、塩化ニッケル六水和物 ２１ｇを加えた。窒素ガスで３回置換し、アクリル酸メチル ４５ｇを滴下し、１０ｍｉｎかけて、滴下終了後、６０℃に昇温し、１ｈ激しく撹拌し、溶液は黒くなり、系は基本的に均一相になり、系を１５～２０℃まで降温し、中間体４Ｃの固体３０ｇを加えた後、２０～３０℃程度で３ｈ反応させ、ＴＬＣにより反応終了を検出した後、酢酸エチル １５０ｍＬを加え、２０ｍｉｎ撹拌し、系内に大量の懸濁物が生成した。
珪藻土層でろ過し、ケーキを酢酸エチルですすぎ、１０％塩酸 １８０ｍＬを加えて洗浄し、分層した。有機層は、６Ｖ １０％炭酸ナトリウム水溶液を加えて洗浄し、分液した。有機相を濃縮乾固し，メタノールを加えて再結晶させ中間体５Ｂを得た。重量収率は，約８０％である。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ５．３２（ｄ，Ｊ＝４．１ Ｈｚ，１Ｈ），３．６４（ｓ，３Ｈ），３．４９（ｔｄ，Ｊ＝１０．７，５．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．４１ － ２．０８（ｍ，４Ｈ），２．０１ － １．９１（ｍ，３Ｈ），１．７９（ｔ，Ｊ＝１５．３ Ｈｚ，３Ｈ），１．６８（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，６．９ Ｈｚ，１Ｈ），１．５９ － １．２６（ｍ，９Ｈ），１．２３ － ０．８７（ｍ，１４Ｈ），０．６５（ｓ，３Ｈ）． ¹³Ｃ ＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ １７４．３２，１４０．７４，１２１．５６，７１．６７，５６．６９，５５．７６，５１．３９，５０．０６，４２．２８，４２．２１，３９．７０，３７．２１，３６．４５，３５．４４，３５．３６，３４．４７，３１．８４，３１．８６，３１．５６，２８．１０，２４．２１，２１．４８，２１．０２，１９．３４，１８．５５，１１．７９．

ステップ（６）２５－ヒドロキシコレステロール（化合物５）
反応フラスコに中間体５Ｂ ５０ｇ、ＴＨＦ ５００ｍＬを加え、窒素ガスで３回置換した。０～１０℃まで降温し、２Ｍ 塩化メチルマグネシウムのＴＨＦ溶液 ３００ｍＬを徐々に滴下し、０．５ｈかけて、滴下終了後、室温に昇温して１ｈ反応させた。反応をＴＬＣによりモニタリングし、反応が完了したことを確認した後、０～１０℃まで降温し、塩化アンモニウム水溶液に徐々に滴下して反応をクエンチした。分層し、水層をＤＣＭ １５０ｍＬで抽出した。有機層を合わせ、５０℃以下、減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去し、トルエンを加えてペースト状になるまで濃縮を続けた。１０～３０℃で１ｈ撹拌し、ろ過した。ケーキを反応フラスコに移し、ＤＣＭ及び３メタノールを加えて清澄になるように溶解させ、５０℃以下、減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去し、メタノールを加えて固体が僅かに析出するまで濃縮を続け、１０～３０℃で１ｈ撹拌し、ろ過した。ケーキを少量のメタノールで洗浄し、５０℃で乾燥させて化合物５を得、重量収率は、約７０％である。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ５．２７（ｓ，１Ｈ），４．５９（ｓ，１Ｈ），４．０３（ｓ，１Ｈ），２．１３－２．０３（ｍ，２Ｈ），１．９６－１．９１（ｍ，２Ｈ），１．７８－１．６８（ｍ，３Ｈ），１．６７－０．９５（ｍ，３３Ｈ），０．６６（ｓ，３Ｈ）．

実施例５： 化合物１による２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロールの調製

ステップ（１）～ステップ（４）は、実施例２を参照した。

ステップ（５）中間体４ｄ
反応フラスコにアセトン ５００ｍＬ、中間体４ａ １００ｇ、ヨウ化ナトリウム ７７．５ｇを室温下で加え、均一に撹拌し、窒素ガスで３回置換し、遮光下で保護した。系を５５～６０℃まで徐々に昇温して反応させ、反応終了するまでＴＬＣにより反応をモニタリングした。大部のアセトンを減圧下で濃縮し、反応液を１０～３０℃まで降温し、氷水 １Ｌを加え、１～２時間撹拌した。ろ過し、適量の水ですすぎ、約５０℃のオーブンにて遮光下で乾燥させて中間体４ｄを得、重量収率は、約９０％である。

ステップ（６）中間体５ｃ
反応フラスコにピリジン １６０ｍＬ、亜鉛粉末 ２６．８ｇ、塩化ニッケル六水和物 １８．８ｇを加えた。窒素ガスで３回置換し、アクリル酸メチル ４０．２ｇを１０ｍｉｎかけて滴下し、滴下終了後、６０℃に昇温して１ｈ激しく撹拌し、溶液は黒くなり、反応系は基本的に均一相になり、系内を１５～２０℃まで降温し、中間体４ｄの固体３０ｇを加えた後、２０～３０℃程度で３ｈ反応させ、反応の終了をＴＬＣによりモニタリングした後、酢酸エチル １５０ｍＬを加えて２０ｍｉｎ撹拌し、系内で大量の懸濁物が生成した。珪藻土層でろ過し、ケーキを酢酸エチルですすぎ、有機相を合わせ、減圧下で濃縮乾固した。得られた油状物は、カラムクロマトグラフィーにより分離され（溶離液は、酢酸エチル：石油エーテル１：６）、ペースト状に濃縮し、０℃まで降温し、結晶化し、ろ過し、ケーキを乾燥させて中間体５ｃを得た。重量収率は、約６５％である。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ５．５４（ｄ，Ｊ＝３．９ Ｈｚ，１Ｈ），５．４１ － ５．２７（ｍ，１Ｈ），３．７１ － ３．５１（ｍ，４Ｈ），２．４４（ｄｄ，Ｊ＝１４．０，２．８ Ｈｚ，１Ｈ），２．３３ － ２．１７（ｍ，３Ｈ），２．１３ － １．８０（ｍ，８Ｈ），１．７４ － １．１８（ｍ，１２Ｈ），１．１５ － １．０１（ｍ，１Ｈ），０．９６ － ０．８６（ｍ，６Ｈ），０．５９（ｓ，３Ｈ）． ¹³Ｃ ＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ １７４．３１，１４１．１４，１３９．８１，１１９．５１，１１６．３１，７０．３３，５５．４８，５４．４１，５１．４０，４６．１８，４２．８７，４０．７２，３９．１３，３８．３４，３６．９７，３５．７８，３５．２９，３４．４６，３１．９０，２７．９７，２２．９５，２１．４９，２１．０５，１８．６９，１６．２３，１１．７４．

ステップ（７）２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロール（化合物４）
反応フラスコに中間体５ｃ ５０ｇ、５００ｍＬを加え、窒素ガスで３回置換した。０～１０℃まで降温し、２Ｍ 塩化メチルマグネシウム３００ｍＬを徐々に滴下し、０．５ｈかけて滴下が終了した後、室温に昇温して１ｈ反応させた。反応をＴＬＣによりモニタリングし、反応が完了したことを確認した後、０～１０℃まで降温し、塩化アンモニウム水溶液に徐々に滴下し、反応をクエンチした。分液し、水層をＤＣＭ １５０ｍＬで抽出した。有機相を合わせ、５０℃以下、減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去し、トルエンを加え、固体が析出するまでに濃縮を続けた。１０℃まで降温して１ｈ撹拌、ろ過した。ケーキを反応フラスコに移し、溶液が透明になるまでＤＣＭ １５０ｍＬ及びメタノール１００ｍＬを加えた。５０℃以下、減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去し、メタノールを加えてペースト状になるまでに濃縮を続けた。０～１０℃で１ｈ撹拌し、ろ過した。ケーキを少量のメタノールで洗浄し、５０℃で乾燥させて２５－ヒドロキシデヒドロコレステロールを得、重量収率は、約８０％である。その¹Ｈ ＮＭＲのデータは、実施例３のステップ（６）で測定されたものと基本的に同様である。

実施例６： 化合物１による２５－ヒドロキシコレステロールの調製

ステップ（１）は、実施例１を参照した。

ステップ（２）中間体２’Ｄ
反応フラスコにアセトン ５００ｍＬ、中間体２Ａ １００ｇ、ヨウ化ナトリウム ８０ｇを室温下で加え、均一に撹拌し、窒素ガスで３回置換し、遮光下で保護した。系内を５５～６０℃まで徐々に昇温して２～３ｈ反応させ、反応終了するまでＴＬＣにより反応をモニタリングした。大部のアセトンを減圧下で濃縮し、反応液を１０～３０℃まで降温し、氷水 １Ｌを加え、１～２時間撹拌した。ろ過し、適量の水ですすぎ、約５０℃のオーブンにて遮光下で乾燥させ、重量収率は、約９０％であり、純度は、９７％を超えた。

ステップ（３）中間体３’Ｂ
反応フラスコにピリジン １６０ｍＬ、亜鉛粉末 ２６．８ｇ、塩化ニッケル六水和物 １８．８ｇを加えた。窒素ガスで３回置換し、アクリル酸メチル ４０．２ｇを滴下し、１０ｍｉｎかけて滴下が終了した後、６０℃に昇温して１ｈ激しく撹拌し、溶液は黒くなり、反応系は基本的に均一相になり、系内を１５～２０℃まで降温し、中間体２’Ｄ ３０ｇを加えた後、２５～３０℃程度で３ｈ反応させ、反応の終了をＴＬＣによりモニタリングした後、酢酸エチル １５０ｍＬを加えて２０ｍｉｎ撹拌し、系内で大量の懸濁物が生成した。珪藻土層でろ過し、ケーキを酢酸エチルですすぎ、５％塩酸 ２００Ｌで洗浄し、分液し、さらに、水 ２００ｍＬで洗浄し、分液し、有機層を小さな体積になるまで濃縮し、エタノールを加えてペースト状になるまで濃縮を続け、０～１０℃まで降温して１ｈ晶析させ、ろ過し、ケーキを乾燥させて製品を得、重量収率は、約７０％であり、純度は９４％である。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ５．７１（ｓ，１Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ），２．４９ － ２．１４（ｍ，６Ｈ），２．０１（ｄｄ，Ｊ＝１３．３，３．３ Ｈｚ，２Ｈ），１．９２ － １．３１（ｍ，１０Ｈ），１．３１ － ０．８３（ｍ，１５Ｈ），０．６９（ｓ，３Ｈ）．

ステップ（４）中間体４’Ｂ
反応フラスコに無水酢酸 １００ｍＬ、中間体３’Ｂ ５０ｇを加え、窒素ガスの保護下で、ｐ－トルエンスルホン酸 ５ｇを加え、２５～３０℃に加熱して４～６ｈ反応させ、反応をＴＬＣによりモニタリングし、原料の反応はほぼ完了した。激しく撹拌しながら反応系を水 １０００ｍＬに徐々に滴下し、固体が析出し、２ｈ撹拌した後、ろ過し、中性になるまでケーキを大量の水で洗浄した。４５～５０℃で乾燥させ、重量収率は、１０４％であり、純度は、９５％である。

ステップ（５）中間体５Ｂ
反応フラスコに無水塩化カルシウム １０ｇ、無水エタノール ４００ｍＬを室温下で加え、溶液が透明になるまで撹拌し、ＤＣＭ ２００ｍＬを加え、次いで、一度に中間体４’Ｂ １００ｇを加え、均一に撹拌し、水素化ホウ素ナトリウムを４つのバッチに分けて間隔５ｍｉｎで各バッチあたり４ｇ追加し、すべての追加が完了したら、室温で２～４ｈ反応させ、ＴＬＣによりモニタリングし、原料は残存しなく、系内に氷酢酸 ２０ｍＬを徐々に滴下して反応をクエンチし、有機溶媒を濃縮して除去し、氷水 １０００ｍＬを加えて固体を析出させ、吸引ろ過し、水で濯いだ。固体をＤＣＭ ３００ｍＬで溶解させ、水層を分離し、有機相を減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去し、メタノールを加えて濃縮を続け、最後にメタノール約１００ｍＬが残存し、０～１０℃まで降温して１ｈ晶析し、吸引ろ過し、メタノールですすぎ、４５～５０℃で乾燥させて中間体５Ｂを得た。重量収率は、約７０％であり、純度は、９７％を超えた。その¹Ｈ ＮＭＲのデータは、実施例４のステップ（５）で測定されたものと基本的に同様である。

ステップ（７）２５－ヒドロキシコレステロール（化合物５）
実施例４のステップ（７）に従って化合物５を調製し、¹Ｈ ＮＭＲのデータは、実施例４で測定されたものと基本的に同様である。

実施例７： 化合物１による２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロールの調製

ステップ（１）～ステップ（２）は、実施例２を参照した。

ステップ（３）中間体２’ｄ
反応フラスコにＤＭＦ ５００ｍＬ、中間体２ａ １００ｇ、臭化リチウム ３９ｇを室温下で加え、均一に撹拌し、窒素ガスで３回置換した。系内で８０～８５℃まで徐々に昇温し、３～５ｈ反応させ、ＴＬＣにより反応をモニタリングした。反応終了後、反応液を１０～３０℃まで降温し、温度を１０～３０℃に制御し、反応液を水 １Ｌに移し、１～２時間撹拌した。ろ過し、適量の水ですすぎ、約５０℃のオーブンで乾燥させ、重量収率は、約７８％であり、純度は、９６％である。

ステップ（４）中間体３’ｂ
反応フラスコにピリジン １８０ｍＬ、亜鉛粉末 ３０ｇ、塩化ニッケル六水和物 ２１ｇを加えた。窒素ガスで３回置換し、アクリル酸メチル ４５ｇを滴下し、１０ｍｉｎかけて滴下が終了した後、６０℃に昇温して１ｈ激しく撹拌し、溶液は黒くなり、反応系は基本的に均一相になり、系内を１５～２０℃まで降温し、中間体２’ｄの固体 ３０ｇを加えた後、２０～３０℃程度で３ｈ反応させ、反応の終了をＴＬＣによりモニタリングした後、酢酸エチル １５０ｍＬを加え、２０ｍｉｎ撹拌し、系内に大量の懸濁物が生成した。
珪藻土層でろ過し、ケーキを酢酸エチルですすぎ、濾液に１０％塩酸 １００ｍＬを加えて洗浄し、分液した。有機層に水 ２００ｍＬを加えて洗浄し、分液した。濃縮乾固させ、メタノール約１００ｍＬを加え、０～５℃まで降温して１時間晶析し、ろ過し、ケーキを乾燥させて３’ｂを得た。重量収率は、約７８％であり、純度は、９２％である。

ステップ（５）中間体４’ｂ
反応フラスコに中間体３’ｂ（１００ｇ）、無水酢酸 ３００ｍＬ、塩化アセチル ２００ｍＬを室温下で加え、遮光下で７５℃～８５℃に昇温して反応させ、ＴＬＣによりモニタリングし、残りの原料は５％未満であり（約６～８ｈ）、７５℃程度、減圧下で濃縮乾固させ、室温まで降温し、メタノール ５０ｍＬ滴下し残った無水酢酸をクエンチし、アセトン １００ｍＬを加え、小さな体積になるまで減圧下で濃縮し、アセトン ２００ｍＬを加えて濃縮を続け、アセトン約５０ｍＬが残存し、０℃まで降温して１ｈ晶析し、ろ過し、氷冷アセトンですすぎ、固体を４５～５０℃で乾燥させて４’ｂを得、重量収率は、約９５％であり、純度は、９５％を超えた。

ステップ（６）中間体５ｃ
反応フラスコに無水塩化カルシウム １０ｇ、無水メタノール ４００ｍＬを室温下で加え、溶液が透明になるまで撹拌し、ＤＣＭ ２００ｍＬを加え、次いで、一度に中間体４’ｂ １００ｇを加え、均一に撹拌し、水素化ホウ素ナトリウム １０ｇを加え、室温に保持し続けて２～４ｈ反応させた。ＴＬＣモニタリングにより反応の終了をモニタリングした後、系内に氷酢酸 ２０ｍＬを徐々に滴下して反応をクエンチし、濃縮して有機溶媒を除去し、氷水 １０００ｍＬを加えて固体を析出させ、吸引ろ過し、水で濯いだ。固体をＤＣＭ ３００ｍＬに溶解させ、水層を分離し、有機相を減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去し、メタノールを加えて濃縮を続け、最後に、メタノール約１００ｍＬが残存し、０～１０℃まで降温して１ｈ晶析し、吸引ろ過し、メタノールですすぎ、４５～５０℃で乾燥させて中間体５’Ｂを得た。重量収率は、約７０％であり、純度は、９７％を超えた。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ５．５４（ｄ，Ｊ＝３．９ Ｈｚ，１Ｈ），５．４１ － ５．２７（ｍ，１Ｈ），３．７１ － ３．５１（ｍ，４Ｈ），２．４４（ｄｄ，Ｊ＝１４．０，２．８ Ｈｚ，１Ｈ），２．３３ － ２．１７（ｍ，３Ｈ），２．１３ － １．８０（ｍ，８Ｈ），１．７４ － １．１８（ｍ，１２Ｈ），１．１５ － １．０１（ｍ，１Ｈ），０．９６ － ０．８６（ｍ，６Ｈ），０．５９（ｓ，３Ｈ）． ¹³Ｃ ＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ １７４．３１，１４１．１４，１３９．８１，１１９．５１，１１６．３１，７０．３３，５５．４８，５４．４１，５１．４０，４６．１８，４２．８７，４０．７２，３９．１３，３８．３４，３６．９７，３５．７８，３５．２９，３４．４６，３１．９０，２７．９７，２２．９５，２１．４９，２１．０５，１８．６９，１６．２３，１１．７４．

ステップ（７）２５－ヒドロキシ－７－デヒドロコレステロール（化合物４）
化合物４は、実施例５のステップ（７）に従って調製され、¹Ｈ ＮＭＲのデータが実施例５で測定されたものと基本的に同様である。

実施例８：化合物１によるエルゴステロールの調製

ステップ（１）中間体２Ｏ
３０００ｍＬ三つ口フラスコに化合物１ ２００ｇ、ＴＥＭＰＯ １ｇを加え、ＤＣＭ ７００ｍＬを加え、撹拌して溶解させ、臭化ナトリウム／炭酸水素ナトリウムの水溶液（臭化ナトリウム７．２ｇ、炭酸水素ナトリウム９．８８ｇ、水５０ｍＬを含む。）、５℃以下まで降温し、温度が－５～５℃になるように制御し、８％ 次亜塩素酸ナトリウムの溶液 ５００ｍＬを滴下し、反応が完了したことをＴＬＣによりモニタリングし（酢酸エチル：トルエン＝１：１）、チオ硫酸ナトリウム水溶液（チオ硫酸ナトリウム１７．２ｇ、水１７８ｍＬ）を加えて反応を停止し、３０～３５℃まで昇温して１０ｍｉｎ撹拌し、分液し、水相をＤＣＭ（４００ｍＬ＊２）で抽出し、有機相を合わせ、水で洗浄し、有機層に水 ８０ｍＬを加え、濃縮し続けて溶媒を除去し、水 １２００ｍＬを加え、撹拌して０～５℃まで降温し、１時間晶析させ、ろ過し、５０℃で乾燥させ、中間体２Ｏを得、ＨＰＬＣ検出純度＞９８．５％、収率９７％である。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ９．５３（ｄ，Ｊ＝３．１ Ｈｚ，１Ｈ），５．６９（ｓ，１Ｈ），２．５０ － ２．１５（ｍ，５Ｈ），２．０１ － １．８９（ｍ，２Ｈ），１．８８ － １．７３（ｍ，２Ｈ），１．７２ － １．５７（ｍ，２Ｈ），１．５６ － １．２８（ｍ，５Ｈ），１．２５ － ０．８３（ｍ，１１Ｈ），０．７２（ｓ，３Ｈ）．

ステップ（２）中間体３Ｏ
三口反応フラスコに中間体２Ｏ １００ｇ、オルト酢酸トリメチル １００ｍＬを加え、室温で１０ｍｉｎ撹拌し、窒素ガスの保護下で、ｐ－トルエンスルホン酸 １ｇを加え、４０～４５℃まで徐々に昇温し、保温して４～５ｈ反応した。反応をＴＬＣによりモニタリングし（展開溶媒はＰＥ：ＥＡ＝５：１）。反応終了後、室温（２０～２５℃）まで降温し、トリエチルアミンを加えて系をｐＨ値が８程度になるように調整し、次いで、反応フラスコにアセトン ５００ｍＬ、水 ８０ｇを加え、１０ｍｉｎ撹拌し、クロラニル ８０ｇを加え、次に、３５～４０℃に昇温して４ｈ反応させた。水 ２００ｇを加え、次に、濃塩酸 ８０ｍＬを滴下し、４０℃で２ｈ撹拌して加水分解し、ＴＬＣにより加水分解が完了したことを確認し、反応液を水 １０００ｍＬに注ぎ、常温で２ｈ撹拌し、ろ過し、析出した固体を収集し、中性になるまでケーキを水で洗浄し、次いで、クロロホルム ４００ｍＬを加えて混合し、加熱して固体を溶解させた後、熱いうちにろ過した。濾液に亜硫酸ナトリウム水溶液 ３００ｍＬ（亜硫酸ナトリウム ５０ｇ含有）を加えて１ｈ撹拌し、静置した後に有機相を分離し、減圧下で濃縮してほとんどの溶媒を除去し、メタノールを加えて濃縮を続け（該操作は３回行う。）、メタノール約１００ｍＬが残存し、０℃まで降温して１ｈ晶析し、吸引ろ過し、メタノールですすぎ、４５～５０℃で乾燥させて中間体３Ｏを得た。重量収率は、９３％であり、純度は、９５％を超えた。
¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ９．５４（ｄ，Ｊ＝２．９ Ｈｚ，１Ｈ），６．１７ － ５．９５（ｍ，２Ｈ），５．６３（ｓ，１Ｈ），２．５８ － ２．４７（ｍ，１Ｈ），２．４５ － ２．２９（ｍ，２Ｈ），２．１７（ｔ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ），２．０３ － １．７４（ｍ，４Ｈ），１．６７（ｔｄ，Ｊ＝１３．８，５．０Ｈｚ，１Ｈ），１．５８ － １．１２（ｍ，９Ｈ），１．０８（ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，５Ｈ），０．７４（ｄ，Ｊ＝１８．５Ｈｚ，３Ｈ）． ¹³Ｃ ＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ２０４．４３，１９９．２９，１６３．４４，１４０．７３，１２７．９１，１２３．５７，５２．６８，５０．７０，５０．５４，４９．２５，４３．８３，３９．０９，３７．５２，３５．９３，３３．８１，３３．７９，２６．８９，２３．９６，２０．５０，１６．１９，１３．３３，１２．１７．

ステップ（３）中間体４Ｏ
１０００ｍＬ三つ口フラスコにアセトニトリル ５００ｍＬを加え、次に、ブロモイソペンタン １００ｇ及びトリフェニルホスフィン １００ｇを加えた。窒素ガスで保護し、２４ｈ還流して反応させた。ほどんど完全に反応させたことをＴＬＣにより検出し、濃縮して溶媒を除去し、適量の石油エーテルを加えて１ｈ撹拌した後、ろ過し、反応で残ったトリフェニルホスフィンを除去した。Ｗｉｔｔｉｇ試薬であるケーキを得た。
１０００ｍＬ三つ口フラスコに無水ＴＨＦ １０００ｍＬを加え、調製されたＷｉｔｔｉｇ試薬を加え、窒素ガスの保護下、０℃でｎ－ブチルリチウム ３００ｍＬを滴下し、温度が１０℃以下になるように制御し、次いで、中間体３Ｏ １００ｇを加え、常温まで徐々に昇温して１ｈ反応させた。ＴＬＣにより反応をモニタリングした。反応終了後、滴下５０ｍＬ水反応をクエンチした。ＴＨＦを濃縮して除去し、５００ｍＬ水を加え、水相を石油エーテル（４００ｍＬ＊２）で抽出し、有機相を合わせ、濃縮し、メタノールを加えて、小さな体積になるまで濃縮を続け、撹拌して０～５℃まで降温し、１時間晶析させ、ろ過し、５０℃で乾燥させて中間体４Ｏを収率７０％で得た。

ステップ（４）中間体５Ｏ
遮光下、清潔で乾燥した反応フラスコに無水酢酸 ２８０ｍＬ、塩化アセチル １４０ｍＬ及び中間体４Ｏ ７０ｇを順次に加え、窒素ガスで３回置換した。撹拌下で７５～８５℃まで徐々に昇温し、遮光下で反応させ（激しく還流させ）、ＴＬＣによりモニタリングし（トルエン：アセトン＝４：１）、約６～８ｈかけて反応が終了した後、７０～８０℃、遮光下、小さな体積になるまで減圧下で濃縮し、メタノールを滴下し、温度が１０℃未満になるように保持し、メタノールを滴下した後、１５～２０ｍｉｎ撹拌し、次いで、メタノール ２００ｍＬを加えてペースト状に濃縮し、０～５℃まで降温し、晶析し、ろ過し、４５～５０℃、遮光下で乾燥させ、中間体５Ｏを得、収率は、約９０％であり、純度は、９４％である。

ステップ（５）エルゴステロール（化合物６）
反応フラスコに無水エタノール １８０ｇ、ＤＣＭ １８０ｇ、無水塩化カルシウム ６ｇを加え、撹拌して無水塩化カルシウムを溶解させ、中間体５Ｏ ６０ｇを加え、撹拌した。釜内の温度が２０℃程度になるように制御し、水素化ホウ素ナトリウム ６ｇをバッチで加え、２０ｍｉｎかけて添加を完了した。３０～３５℃で２～３時間反応させた。原料がなくなるまでＴＬＣによりモニタリングし、完全に反応していない場合には、反応が完了するまで時間を延長し、展開溶媒はＰＥ：ＥＡ：ＤＣＭ ５：１：２である。反応終了後、温度を制御し、ストック溶液を徐々に滴下した。３％塩酸 ６０ｍＬである。ＤＣＭ及びエタノールを濃縮し、ＤＣＭ ２００ｍＬを加え、３％塩酸で弱酸性に調整した。有機相を分離し、炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、有機相を減圧下で濃縮し、エタノールを加えてＤＣＭがなくなるまで濃縮を続け、粘稠状に濃縮し続け、０℃で撹拌して１～２時間晶析した。ろ過し、析出した固体を収集し、４５～５０℃、遮光下で乾燥させ、固体４５ｇを得た。収率は、約７５％であり、純度は、９６％である。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ５．５６（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，７．２ Ｈｚ，１Ｈ），５．３７（ｄｄ，Ｊ＝１４．１，１１．３ Ｈｚ，１Ｈ），５．２６ － ５．０４（ｍ，２Ｈ），３．７１ － ３．５０（ｍ，１Ｈ），２．４５（ｄｔ，Ｊ＝３０．１，１５．１ Ｈｚ，１Ｈ），２．２６（ｄｄ，Ｊ＝２５．２，１２．７ Ｈｚ，１Ｈ），２．１１ － １．１８（ｍ，１９Ｈ），１．０２（ｔ，Ｊ＝７．４ Ｈｚ，３Ｈ），０．９６ － ０．８８（ｍ，６Ｈ），０．８２（ｄｄ，Ｊ＝１３．１，６．７ Ｈｚ，６Ｈ），０．６３（ｓ，３Ｈ）．
¹³Ｃ ＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ １４１．３５，１３９．７７，１３５．５６，１３１．９８，１１９．５９，１１６．２８，７０．４７，５５．７４，５４．５６，４６．２６，４２．８３，４０．７９，４０．４１，３９．０９，３８．３８，３７．０４，３３．０９，３１．９９，２８．２８，２３．００，２１．１１，１９．９５，１９．６４，１７．６０，１６．２８，１２．０５

実施例９：ｗｉｔｔｉｇ経路によるコレステロールの合成

ステップ（１）は、実施例８を参照した。

ステップ（２）中間体３Ｐ
１０００ｍＬ三つ口フラスコにトルエン ５００ｍＬを加え、さらにブロモイソペンタン １１０ｇ及び１００ｇトリフェニルホスフィンを加え、窒素ガスの保護下、１００℃で２４ｈ反応させた。ろ過し、ケーキを石油エーテルで濯ぎ洗い、押し出してほとんどの溶媒を除去し、Ｗｉｔｔｉｇ試薬を得た。
１０００ｍＬ三つ口フラスコにＤＭＳＯ ３００ｍＬを加え、調製されたＷｉｔｔｉｇ試薬を加え、窒素ガスの保護下で、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド ４０ｇを加え、温度が１０℃以下になるように制御し、次いで、中間体２Ｏ ８０ｇを加え、室温で１～２ｈ反応させた。サンプルを採取してＴＬＣにかけて、原料が完全に反応したかどうかを観察した。完全に反応していない場合には、反応が終了するまで反応を延長した。水 ５０ｍＬを滴下して反応をクエンチした。氷水 ５００ｍＬに注ぎ、水相を石油エーテル（４００ｍＬ＊２）で抽出し、有機相を合わせて濃縮し、小さな体積になるまでメタノールを加え、撹拌して０～５℃まで降温し、１時間晶析し、ろ過し、５０℃で乾燥させ、収率は７０％である。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ５．６２（ｓ，１Ｈ），５． ２８ － ５．１６（ｍ，２Ｈ），２．５０ － ２．３６（ｍ，３Ｈ），２．２４ － １．７５（ｍ，６Ｈ），１．６１ － １．３０（ｍ，８Ｈ），１．２６ － ０．９７（ｍ，２２Ｈ）．

ステップ（３）中間体４Ｐ
反応フラスコにｔｅｒｔ－ブタノール １５０ｍＬを室温下で加え、窒素ガスで３回置換し、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド ２０ｇを加えて４０℃に加熱し、清澄になるように撹拌し溶解させ、厳格な窒素ガス保護下で中間体３Ｐ固体を加えた後、保温し続けて２ｈ反応させ、反応をＴＬＣによりモニタリングし、原料が基本的になくなると、反応を停止し、室温まで降温した。氷水 ２００ｍＬを用意し、氷酢酸 １０ｇ、アスコルビン酸ナトリウム ５ｇを加え、均一に撹拌し、緩衝液１を調製し、ｔｅｒｔ－ブタノール反応溶液を緩衝液１に素早く注ぎ、固体を析出させ、２０ｍｉｎ撹拌し続け、ろ過した。中間体４Ｐの湿った固体を得た。

ステップ（４）中間体５Ｐ
反応フラスコに上記湿った固体を加え、エタノール ２００ｍＬを加え、均一に撹拌し、２．５ｇ水素化ホウ素ナトリウムを加えて撹拌して２ｈ反応させ、反応終了後、氷酢酸 ２ｍＬを加え、反応をクエンチし、小さな体積になるまでエタノールを濃縮し、水 １００ｍＬを加えて析出させ、ろ過し、中間体５Ｐの粗生成物を得、メタノールで再結晶して中間体５Ｐを得、収率は８０％でる。純度は９６％である。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ ５．３５（ｓ，１Ｈ），５．１７（ｄ，Ｊ＝６．８ Ｈｚ，２Ｈ），３．６３ － ３．３８（ｍ，１Ｈ），２．４８ － ２．０９（ｍ，２Ｈ），１．９３（ｍ，６Ｈ），１．７０ － １．３６（ｍ，１０Ｈ），１．２２ － ０．８２（ｍ，１９Ｈ），０．７０（ｄ，Ｊ＝１１．２ Ｈｚ，３Ｈ）．

ステップ（５）コレステロール（化合物２）
反応フラスコに中間体５Ｐ １０ｇを加え、ＴＨＦ ２５ｍＬ及びメタノール ２５ｍＬを加えて溶解させ、パラジウム炭素（５％）１ｇを加え、窒素ガスで置換し、次に、水素ガスで置換し、水素ガスバルーンを接続し、１５～２０℃に保温して２４ｈ反応させ、ろ過し、ケーキにメタノールを加えて洗浄し、濾液を合わせ、減圧下で濃縮し、メタノールを加えて全てのＴＨＦが除去されるまで濃縮を続け、メタノールで晶析させ、室温で１ｈ撹拌し、ろ過し、乾燥させてコレステロールを得、重量収率は、８５％であり、純度は９９％である。その¹Ｈ ＮＭＲ及び¹³Ｃ ＮＭＲのデータは、実施例１で測定されたものと基本的に同様である。

実施例１０：異なるアシル化剤の使用による反応への影響
下表に示されるアシル化剤をそれぞれ使用し、本発明の第１から第７の側面に記載のステップ（Ａ）の反応を行い、異なるＰＧ基を有するエノールエステル中間体３Ａ－ｍ及び中間体３ａ－ｍを調整し、それらは、本発明の第１から第７の側面に記載の式ＩＩで表される化合物に対応した。中でも、ｍは、番号であり、ＰＧは、ヒドロキシの保護基である。さらに、中間体３Ａ－ｍ、中間体３ａ－ｍを原料として、下表に示される試薬をそれぞれ使用して本発明の第１から第７の側面に記載のステップ（Ｂ）的反応を行い、中間体４Ａ及び中間体４ａを調製し、それらは、本発明の第１から第７の側面に記載の式ＩＩＩで表される化合物に対応した。

１．中間体４Ａ

（１）反応容器に中間体２Ａ（２０ｇ）、クロロホルム ４０ｍＬを加え、次いで、アシル化剤（８ｅｑ．）、触媒としてｐ－ＴｓＯＨ（１ｇ）を加え、還流するまで加熱し、４～８ｈ反応させた。反応終了後に、０～２０℃まで降温し、メタノールを徐々に滴下して反応をクエンチした。水 ４０ｍＬを加え、有機相を分離し、濃縮した後にメタノールを加えて、ペースト状に濃縮を続け、０～５℃まで降温して１ｈ撹拌し、ろ過し、乾燥させて中間体３Ａ－ｍを得た。反応フラスコに中間体３Ａ－ｍ（１ｇ）、ジクロロメタン １０ｍＬ、メタノール １０ｍＬを加えた。系を０～５℃まで降温し、水素化ホウ素ナトリウム ０．２ｇを３つのバッチに分けて（各バッチ間隔２０ｍｉｎ）加えた後、温度を保持して１２ｈ反応させた。氷酢酸 １ｍＬを滴下して反応をクエンチし、濃縮して溶媒を除去し、水 １０ｍＬを加え、撹拌して混合物を得、その後、ろ過し、乾燥させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離して中間体４Ａを得、モル収率を算出した。結果は、表２に示した。

表２から、アシル化剤を使用した場合に、エノールエステル化反応の変換率はいずれも高くなることが分かった。ＰＧがアセチル基、アルキル基で任意選択的に置換されたベンゾイル基であり、特にアセチル基である場合には、最終生成物のより高い収率を達成することができる。アシル化試薬を使用すると、エノールエステル化反応の転化率が高くなることがわかる。

（２）反応フラスコに中間体３Ａ－ｍ（１ｇ）、ジクロロメタン １０ｍＬ、メタノール １０ｍＬを加えた。系を０～５℃まで降温し、必要に応じてＣａＣｌ₂又はＺｎＣｌ₂（０．３ｅｑ．）を加え、水素化ホウ素ナトリウム ０．２ｇを３つのバッチに分けて（各バッチ間隔１０ｍｉｎ）加えた後、すぐに対応する塩基（２ｅｑ．）を加えた。温度を保持し、１２ｈ反応させた。氷酢酸 １ｍＬを滴下して反応をクエンチし、濃縮して溶媒を除去し、水 １０ｍＬを加え、撹拌して混合物を得、次にろ過し、乾燥させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離して中間体４Ａを得、モル収率を算出した。結果は、表３に示した。

表３より、ＮａＢＨ₄／ＣａＣｌ₂を使用して反応を行い、全体としてより良い効果を達することができることが分かった。アルコール（メタノール）含む混合溶媒中の成分としてＴＨＦを使用すると、ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用することよりも効果が高くなった。反応で使用される塩基については、ＤＭＡＰ又はＮａＯＨを加える場合は、塩基を加えていない場合と比較して収率が低下しているが（それぞれ約８．５％及び１５．５％低下している。）、ピリジンを加える場合は、塩基を加えていない場合と比較して収率が約１４．１％向上した。

２．中間体４ａ

ステップ（１） 中間体３ａ－ｍの調製
反応容器に中間体２ａ（２０ｇ）、１，２－ジクロロエタン ４０ｍＬを加えた後、アシル化剤（１０ｅｑ．）、触媒としてｐ－ＴｓＯＨ（２ｇ）を加え、８０℃に加熱し、６～１２ｈ反応させた。反応終了後に、０～２０℃降温し、メタノールを徐々に滴下して反応をクエンチした。水 ６０ｍＬを加え、有機相を分離し、水で洗浄し、濃縮して溶媒を除去し、その後、酢酸エチルを加え、ペースト状に濃縮を続け、０～５℃まで降温して１ｈ撹拌し、ろ過し、乾燥させてエステル化物を得た。次いで、還元反応を行い、結果は、表４に示した。

ａ：加圧反応

表４より、無水酢酸／塩化アセチル混合物、無水トリフルオロ酢酸をアシル化剤として使用する場合に、アシル化反応の収率が高くなることが分かった。

ステップ（２） 中間体４ａの調製
反応フラスコに中間体３ａ－ｍ（１ｇ）、溶媒 １０ｍＬを加え、必要に応じてＣａＣｌ₂又はＺｎＣｌ₂（０．１ｇ）を加えた。系を０～５℃まで降温し、水素化ホウ素ナトリウム ０．２ｇを３つのバッチに分けて（各バッチ間隔１０ｍｉｎ）加え、次いで、すぐに対応する塩基（２ｅｑ．）を加えた後、温度を保持し、１２ｈ反応させた。氷酢酸 １ｍＬを滴下して反応をクエンチし、濃縮して溶媒を除去し、水 １０ｍＬを加え、撹拌して混合物を得、その後、ろ過し、乾燥させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離して中間体４ａを得、モル収率を算出した。結果は、表５に示した。

ａ：（１：１）； ｂ： ＴＨＦ／ＥｔＯＨ／ｉ－ＰｒＯＨ＝（１：０．５：０．５）； ｃ： ＴＨＦ／ＥｔＯＨ／ＭｅＯＨ＝（１：０．５：０．５）

表５より、ＮａＢＨ₄／ＣａＣｌ₂を使用して反応することにより、より良い効果を達成でき、ＮａＢＨ₄の単独使用よりも優れるか、又は同等であることが分かった。アルコール含有混合溶媒に含まれるアルコールの種類は、反応に一定の影響を及ぼし、測定された混合溶媒のうち、テトラヒドロフラン／エタノール／イソプロパノールは最も効果的である。混合されたエタノール／イソプロパノール（例えば、１：１で混合されたエタノール／イソプロパノール）をアルコール含有混合溶媒に含まれるアルコール成分として使用する場合は、エタノール又はイソプロパノールを単独して使用する場合と比較して、収率がそれぞれ１０．８％及び４８．３％向上した。発明者は、混合されたエタノール／イソプロパノールを混合溶媒中のアルコール成分として使用することにより、反応の収率を大幅に向上させることができることを予期せず発見した。

Claims (10)

1. 式ＩＩＩで表される化合物を調製するための方法において、
   ステップ（１）：式ｉｉで表される化合物を式ａで表される化合物に変換し、
   

   

   ステップ（２）：式ａで表される化合物を水素化ホウ素ナトリウム、塩化カルシウム及びピリジンの作用下で式ｂで表される化合物に還元し、
   

   

   ステップ（３）：式ｂで表される化合物を式ＩＩＩで表される化合物に変換すること、を含む方法。
   

   

   Ｒ^a、Ｒ^bは、それぞれ独立して、Ｈ、－ＯＨ、Ｃ_1-3アルキル基から選ばれ、
   ＰＧは、Ｃ _1-8シリル基、アセチル基、トリフルオロアセチル基、又は１つ又は複数のＣ_1-8アルキル基で任意選択的に置換されたベンゾイル基であり、
   Ｒは、Ｌ¹－Ｒ¹であり、
   Ｌ¹は存在しないか、又はＣ_1-8アルキレン基であり、
   ＬＧは、脱離基であり；
   Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換され、
   ＰＧ¹は、Ｃ _1-8シリル基又はＣ_1-6アルコキシ基で置換されたメチル基から選ばれる。）
2. 前記ステップ（２）において、式ａで表される化合物を水素化ホウ素ナトリウム、塩化カルシウム及びピリジンの作用下で、アルコールとテトラヒドロフランとの混合溶媒で式ｂで表される化合物に還元する、ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
3. 前記アルコールがメタノール、エタノール及びイソプロパノールから選ばれる１種又は複数種である、ことを特徴とする請求項２に記載の方法。
4. 前記アルコールとテトラヒドロフランの体積比が１～２：１である、ことを特徴とする請求項２に記載の方法。
5. 前記アルコールがエタノール及びイソプロパノールから選ばれ、前記エタノールとイソプロパノールの体積比が１：１である、ことを特徴とする請求項３又は４に記載の方法。
6. ＰＧがアセチル基、ｐ－ベンゾイル基又はトリフルオロアセチル基から選ばれ、
   ＬＧがハロゲンで置換されたＣ_1-6アルキルスルホン酸エステル脱離基、Ｃ_1-6アルキル基で任意選択的に置換されたベンゼンスルホン酸エステル脱離基又はハロゲンから選ばれる、ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
7. 式ＩＩＩで表される化合物を調製するための方法において、
   ステップ（１１）：式ｉｉで表される化合物を式Ｉで表される化合物に変換し、
   

   

   ステップ（１２）：式Ｉで表される化合物を式ＩＩで表される化合物に変換し、
   

   

   ステップ（１３）：式ＩＩで表される化合物を水素化ホウ素ナトリウム及び塩化カルシウムの作用下で式ＩＩＩで表される化合物に還元すること、を含む方法。
   

   

   Ｒ^a、Ｒ^bは、それぞれ独立して、Ｈ、－ＯＨ、Ｃ_1-3アルキル基から選ばれ、
   ＰＧは、Ｃ _1-8シリル基、アセチル基、トリフルオロアセチル基、又は１つ又は複数のＣ_1-8アルキル基で任意選択的に置換されたベンゾイル基であり、
   Ｒは、Ｌ¹－Ｒ¹であり、
   Ｌ¹は存在しないか、又はＣ_1-8アルキレン基であり、
   ＬＧは、脱離基であり、
   Ｒ¹は、Ｈ、Ｃ_1-8アルキル基、Ｃ_1-8アルケニル基、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれ、ここで、前記アルキル基又はアルケニル基は、－ＯＨ、－Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）、－Ｏ－ＰＧ¹、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｃ_1-8アルキル基）及び－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ_1-8アルキル基）₂から選ばれる１つ、２つ又は３つで任意選択的に置換され、
   ＰＧ¹は、Ｃ _1-8シリル基又はＣ_1-6アルコキシ基で置換されたメチル基から選ばれる。）
8. 式ＩＩで表される化合物を水素化ホウ素ナトリウム及び塩化カルシウムの作用下で、ジクロロメタンとアルコールとの混合溶媒で式ＩＩＩで表される化合物に還元する、ことを特徴とする請求項７に記載の方法。
9. 前記アルコールは、メタノール、エタノール及びイソプロパノールから選ばれる１種又は複数種であり、
   前記アルコールとテトラヒドロフランの体積比が１～２：１である、ことを特徴とする請求項８に記載の方法。
10. ＰＧがアセチル基、ｐ－ベンゾイル基又はトリフルオロアセチル基から選ばれ、
    ＬＧは、ハロゲンで置換されたＣ_1-6アルキルスルホン酸エステル脱離基、Ｃ_1-6アルキル基で任意選択的に置換されたベンゼンスルホン酸エステル脱離基又はハロゲンから選ばれる、ことを特徴とする請求項７に記載の方法。