JP6355961B2 - 標本観察装置 - Google Patents
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Description
本発明は、光源から発せられたレーザ光を標本に照射する対物レンズと、該対物レンズによりレーザ光が照射された前記標本からの戻り光を検出して画像データを取得する画像データ取得部と、該画像データ取得部により前記標本における同一範囲からの戻り光を繰り返し検出して該同一範囲の画像データを複数取得させる制御部と、前記画像データ取得部により取得された前記同一範囲の複数の画像データを加算する画像データ処理部と、該画像データ処理部により得られた加算画像データに対して高周波成分を強調する画像演算処理部とを備える標本観察装置を提供する。
本実施形態に係る標本観察装置1は、図1〜図5に示すように、走査型レーザ顕微鏡3と、走査型レーザ顕微鏡3の制御等を行うシステム制御PC(Personal Computer)5とを備えている。
リレーレンズ23は、ダイクロイックミラー21を透過した蛍光を集光して絞り25の開口位置に蛍光のスポットを結像して投影するコンフォーカルレンズ24Aと、コンフォーカルレンズ24Aにより結像投影された蛍光を第1検出ユニット30および第2検出ユニット40へ導く検出光導入レンズ24Bとにより構成されている。
マルチアルカリPMT31は、サイドオン型のPMTであり、蛍光を受光して光電変換するマルチアルカリ光電面(図示略)を備えている。
GaAsP−PMT41は、ヘッドオン型のPMTであり、GaAsP化合物を使用した光電面(図示略)を備えている。このGaAsP−PMT41は、マルチアルカリPMT31よりも感度が高く、画像データにノイズが少ない。
本実施形態に係る標本観察装置1によりマルチアルカリPMT31を用いて標本Sの画像データを取得する場合は、制御本体部51により、第1HV電源33のHVゲイン、第1増幅器35の増幅器ゲインを設定する。そして、制御本体部51により、蛍光の光路に光路切り替えミラー27を挿入し、光源から励起レーザ光を発生させる。
本実施形態に係る標本観察装置1により超解像画像を生成する場合は、画像データに含まれるノイズが少ないGaAsP−PMT41を用いて標本Sの画像データを取得することが望ましい。
すなわち、本実施形態においては、絞り25を、コンフォーカルスポットの径寸法よりも若干小さい開口径に設定することとしたが、第1変形例としては、例えば、絞り25の開口径を、コンフォーカルスポットの径寸法の1/2の大きさに設定することとしてもよい。
13 スキャナ(走査部)
19 対物レンズ
24A コンフォーカルレンズ
25 絞り(コンフォーカル開口部)
31 マルチアルカリPMT(画像データ取得部)
41 GaAsP−PMT(画像データ取得部)
51 制御本体部(画像データ取得部、制御部、画像データ処理部、画像演算処理部)
S 標本
Claims (5)
- 光源から発せられたレーザ光を標本に照射する対物レンズと、
該対物レンズによりレーザ光が照射された前記標本からの戻り光を検出して画像データを取得する画像データ取得部と、
該画像データ取得部により前記標本における同一範囲からの戻り光を繰り返し検出して該同一範囲の画像データを複数取得させる制御部と、
前記画像データ取得部により取得された前記同一範囲の複数の画像データを加算する画像データ処理部と、
該画像データ処理部により得られた加算画像データに対して高周波成分を強調する画像演算処理部とを備える標本観察装置。 - 前記対物レンズの焦点位置と光学的に共役な位置に開口するコンフォーカル開口部と、
前記対物レンズによりレーザ光が照射された前記標本からの戻り光を集光し、前記コンフォーカル開口部の開口位置に前記戻り光のスポットを投影するコンフォーカルレンズとを備え、
前記コンフォーカル開口部の開口が、前記コンフォーカルレンズにより投影された前記戻り光のスポットの径寸法よりも小さい径寸法を有する請求項1に記載の標本観察装置。 - 前記対物レンズにより前記標本に照射するレーザ光を該標本上で主走査方向およびこれに交差する副走査方向に走査させる走査部を備え、
前記制御部が、前記走査部により前記主走査方向における同一の走査ライン上でレーザ光を所定の回数繰り返し走査させた後に前記副走査方向の位置を変えて次の走査ラインに移動する動作を繰り返させ、前記画像データ取得部により前記同一の走査ラインごとに画像データを複数取得させる請求項1または請求項2に記載の標本観察装置。 - ライン状のレーザ光を発生する前記光源を備え、
前記画像データ取得部が、ライン状のレーザ光が照射された前記標本から戻る戻り光を撮影するライン状に形成された撮像素子を備える請求項1または請求項2に記載の標本観察装置。 - 周期的に配列されたスリット状またはピンホール状の開口を有し、前記対物レンズに入射するレーザ光を制限するマスクと、
該マスクを中心軸回りに高速回転させる駆動部とを備え、
前記画像データ取得部が、前記標本から戻る戻り光を撮影する2次元撮像素子を備える請求項1に記載の標本観察装置。
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