JP5562582B2 - 蛍光観察装置 - Google Patents
蛍光観察装置 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5562582B2 JP5562582B2 JP2009143371A JP2009143371A JP5562582B2 JP 5562582 B2 JP5562582 B2 JP 5562582B2 JP 2009143371 A JP2009143371 A JP 2009143371A JP 2009143371 A JP2009143371 A JP 2009143371A JP 5562582 B2 JP5562582 B2 JP 5562582B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- image acquisition
- cell
- image
- state
- unit
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Landscapes
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Microscoopes, Condenser (AREA)
Description
そして、細胞の反応、形態の変化には速度の大小、および変化の大小が存在する。また、細胞の生理現象は3次元的に進行する場合が多い。
本発明は上述した事情に鑑みてなされたものであって、細胞に与えるダメージを低減しつつ、細胞の変化を逃すことなく、長時間にわたるタイムラプス蛍光観察を行うことができる蛍光観察装置を提供することを目的としている。
本発明は、生細胞に対して励起光を照射する光源と、該光源から発せられた励起光が照射された結果、生細胞から発生する蛍光を撮影して画像を取得する画像取得部と、生細胞の状態を検出する細胞状態検出部と、該細胞状態検出部により検出された生細胞の状態に基づいて、前記光源による励起光の照射周期および前記画像取得部による画像取得周期を切り替える周期切替手段、取得する画像の解像度を切り替える解像度切替手段、または、観察する次元を切り替える次元切替手段とを備える蛍光観察装置を提供する。
これにより、例えば、細胞周期のS期、G2期、M期を検出したい場合に、そこに至るまでの生細胞の状態の変化はゆっくりと進行するので、比較的長い画像取得周期で撮影を行い、S期、G2期、M期が検出された時点で画像取得周期を短く切り替えることで、S期、G2期、M期における細胞の迅速な変化についても逃すことなく撮影することができる。したがって、細胞の形態変化がゆっくりと進行する場合に、光源からの励起光を過度に生細胞に照射しなくて済み、生細胞に与えるダメージを低減することができる。
このようにすることで、生細胞の状態の変化の速度に合わせてフレームレートを切り替えて、不必要な励起光の照射防止と、必要な頻度での蛍光画像の取得とを図ることができる。
このようにすることで、生細胞の状態の変化の速度に合わせて撮像部を切り替えて、不必要な励起光の照射防止と、必要な頻度での蛍光画像の取得とを図ることができる。
前記画像取得部は、前記次元切替手段によって画像取得周期が短くなるように切り替えられたときに、反応を3次元空間で捕らえるために、取得する画像の次元数を増大させることにしてもよい。
本実施形態に係る蛍光観察装置1は、図1に示されるように、励起光を発生する光源2と、該光源2から発せられた励起光が生細胞Aに照射されることにより生細胞Aから発生する蛍光を撮影する画像取得部3と、生細胞Aの状態を検出する細胞状態検出部4と、該細胞状態検出部4により検出された生細胞Aの状態に基づいて、光源2および画像取得部3を制御する制御部5とを備えている。
画像取得部3は、光源2から発せられた励起光を2次元的に走査するスキャナ6と、スキャナ6により走査された励起光を生細胞Aに対して照射し、生細胞Aにおいて発生した蛍光を集光する対物レンズ7と、該対物レンズ7により集光された蛍光を検出する光検出器8と、スキャナ6による走査位置と光検出器8により検出された蛍光の強度とに基づいて生細胞Aの2次元画像を生成する画像生成部9とを備えている。図中、符号10は励起光を通過し、蛍光を反射するダイクロイックミラー、符号11は、画像生成部9において生成された画像を記憶する記憶部である。
細胞状態検出部4は、画像生成部9により生成された画像から、生細胞Aに投与された、細胞周期進行を可視化するための蛍光プローブ(Fucci:Fluorescent, ubiquitination-based cell cycle indicator)の色を監視することにより、細胞周期(G1期、S期、G2期、M期)における分化過程を検出するようになっている。
また、制御部5は、細胞状態検出部4により、細胞周期の内のS期、G2期、M期が検出されたときには、細胞のXY平面画像を取得するたびに、顕微鏡のステージ、もしくは対物レンズを光軸方向に移動し、細胞の断面像を取得する、すなわち、次元数を増大させるように制御するようになっている。
本実施形態に係る蛍光観察装置1を用いて生細胞Aの長期間にわたるタイムラプス観察を行うには、生細胞AにFucci等の蛍光プローブを投与した状態で、光源2から励起光を出射させ、画像取得部3によって生細胞Aの蛍光画像を取得する。
また、本実施形態に係る蛍光観察装置1によれば、生細胞Aの動作がゆっくりとしている細胞周期の内のG1期においては、長い画像取得周期でXY平面画像を取得するので、取得する画像数が少なくて済み、重要性の低い期間におけるデータ量を低減することができる。
また、撮像素子としては、CCD15に代えて、CMOSを採用してもよい。
1 蛍光観察装置
2 光源
3 画像取得部
4 細胞状態検出部
5 制御部(周期切替手段)
8 光検出器(撮像部)
15 CCD(撮像部)
Claims (8)
- 生細胞に対して励起光を照射する光源と、
該光源から発せられた励起光が照射された結果、生細胞から発生する蛍光を撮影して画像を取得する画像取得部と、
生細胞の状態を検出する細胞状態検出部と、
該細胞状態検出部により検出された生細胞の状態に基づいて、該生細胞の状態の変化の速度に応じた周期で画像を取得するように、前記画像取得部による画像取得周期を切り替える周期切替手段とを備える蛍光観察装置。 - 前記細胞状態検出部により検出された生細胞の状態に基づいて前記画像取得部により取得される画像の解像度を切り替える解像度切替手段をさらに備える請求項1に記載の蛍光観察装置。
- 前記細胞状態検出部により検出された生細胞の状態に基づいて前記画像取得部により取得される画像の次元数を切り替える次元数切替手段をさらに備える請求項1に記載の蛍光観察装置。
- 前記周期切替手段が、前記画像取得部によるフレームレートを切り替える請求項1に記載の蛍光観察装置。
- 前記画像取得部が、画像取得周期の異なる複数種の撮像部を備え、
前記周期切替手段が、前記細胞状態検出部より検出された生細胞の状態に基づいて前記画像取得部を構成する撮像部を切り替える請求項1に記載の蛍光観察装置。 - 前記画像取得部は、前記周期切替手段によって画像取得周期が短くなるように切り替えられたときに、取得する画像の解像度を増大させる請求項1に記載の蛍光観察装置。
- 生細胞に対して励起光を照射する光源と、
該光源から発せられた励起光が照射された結果、生細胞から発生する蛍光を撮影して画像を取得する画像取得部と、
生細胞の状態を検出する細胞状態検出部と、
該細胞状態検出部により検出された生細胞の状態に基づいて前記画像取得部による画像取得周期を切り替える周期切替手段とを備え、
前記画像取得部が、画像取得周期の異なる複数種の撮像部を備え、
前記周期切替手段が、前記細胞状態検出部より検出された生細胞の状態に基づいて前記画像取得部を構成する撮像部を切り替える蛍光観察装置。 - 生細胞に対して励起光を照射する光源と、
該光源から発せられた励起光が照射された結果、生細胞から発生する蛍光を撮影して画像を取得する画像取得部と、
生細胞の状態を検出する細胞状態検出部と、
該細胞状態検出部により検出された生細胞の状態に基づいて前記画像取得部による画像取得周期を切り替える周期切替手段とを備え、
前記画像取得部は、前記周期切替手段によって画像取得周期が短くなるように切り替えられたときに、取得する画像の解像度を増大させる蛍光観察装置。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2009143371A JP5562582B2 (ja) | 2009-06-16 | 2009-06-16 | 蛍光観察装置 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2009143371A JP5562582B2 (ja) | 2009-06-16 | 2009-06-16 | 蛍光観察装置 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2011002254A JP2011002254A (ja) | 2011-01-06 |
JP2011002254A5 JP2011002254A5 (ja) | 2013-07-04 |
JP5562582B2 true JP5562582B2 (ja) | 2014-07-30 |
Family
ID=43560331
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009143371A Expired - Fee Related JP5562582B2 (ja) | 2009-06-16 | 2009-06-16 | 蛍光観察装置 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP5562582B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2533092B1 (en) * | 2010-02-03 | 2019-05-08 | Nikon Corporation | Observation device and observation method |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4756819B2 (ja) * | 2003-10-21 | 2011-08-24 | オリンパス株式会社 | 走査型顕微鏡システム |
JP2005230202A (ja) * | 2004-02-19 | 2005-09-02 | Fujinon Corp | 断層映像装置 |
JP2006317406A (ja) * | 2005-05-16 | 2006-11-24 | Olympus Corp | 細胞画像撮像装置、細胞画像撮像方法、細胞画像撮像プログラム、及び細胞観察装置 |
JP2007209219A (ja) * | 2006-02-07 | 2007-08-23 | Olympus Corp | 生体試料観察計測システムおよび生体試料観察計測方法 |
JP4855139B2 (ja) * | 2006-05-18 | 2012-01-18 | オリンパス株式会社 | 顕微鏡装置および細胞観察方法 |
-
2009
- 2009-06-16 JP JP2009143371A patent/JP5562582B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2011002254A (ja) | 2011-01-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9279973B2 (en) | Image processing apparatus, fluorescence microscope apparatus, and image processing program | |
US20150192461A1 (en) | Light microscope and method of controlling the same | |
JP2005284136A (ja) | 観察装置および観察装置の焦点合わせ方法 | |
JP2011008245A (ja) | 生体観察装置 | |
JP2010230495A (ja) | 観察装置 | |
WO2015064116A1 (ja) | 画像取得装置及び画像取得装置の画像取得方法 | |
JP2010054391A (ja) | 光学顕微鏡、及びカラー画像の表示方法 | |
JP2005214924A (ja) | 測定方法及び測定装置 | |
US8994806B2 (en) | Microscope apparatus chronologically storing different types of image information | |
JP2010286565A (ja) | 蛍光観察装置 | |
JP5562582B2 (ja) | 蛍光観察装置 | |
JP2005301065A (ja) | 観察装置 | |
JP7119085B2 (ja) | 衝撃再走査システム | |
JP5738580B2 (ja) | 顕微鏡装置および観察方法 | |
US7983466B2 (en) | Microscope apparatus and cell observation method | |
US20130162801A1 (en) | Microscope | |
JP5669561B2 (ja) | 蛍光観察装置 | |
JP2010164635A (ja) | 共焦点顕微鏡 | |
JP6355961B2 (ja) | 標本観察装置 | |
WO2012144515A1 (ja) | 顕微鏡装置、及び画像処理方法 | |
JP2012118126A (ja) | 観察装置および観察方法 | |
JP4914567B2 (ja) | 走査型共焦点顕微鏡 | |
JP5655434B2 (ja) | 観察装置及び観察方法 | |
JP4963543B2 (ja) | 走査型レーザ顕微鏡及びその制御方法 | |
JP2010160022A (ja) | 生体観察装置 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20120601 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130521 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20130724 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20131119 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140115 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140603 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20140611 |
|
R151 | Written notification of patent or utility model registration |
Ref document number: 5562582 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R151 |
|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees | ||
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
R371 | Transfer withdrawn |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R371 |