JP5734588B2 - 細胞観察装置および観察方法 - Google Patents
細胞観察装置および観察方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5734588B2 JP5734588B2 JP2010160820A JP2010160820A JP5734588B2 JP 5734588 B2 JP5734588 B2 JP 5734588B2 JP 2010160820 A JP2010160820 A JP 2010160820A JP 2010160820 A JP2010160820 A JP 2010160820A JP 5734588 B2 JP5734588 B2 JP 5734588B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell
- illumination light
- unit
- data
- light
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 14
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 126
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 41
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims description 32
- 238000013075 data extraction Methods 0.000 claims description 24
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 18
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 16
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 8
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 claims description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 4
- 239000013307 optical fiber Substances 0.000 description 11
- 238000005562 fading Methods 0.000 description 8
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 7
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 5
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 2
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 239000004973 liquid crystal related substance Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
- G02B21/36—Microscopes arranged for photographic purposes or projection purposes or digital imaging or video purposes including associated control and data processing arrangements
- G02B21/365—Control or image processing arrangements for digital or video microscopes
Landscapes
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Multimedia (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Computer Vision & Pattern Recognition (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Microscoopes, Condenser (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
また、観察対象外だった細胞が、次回の観察時において注目細胞として選ばれた場合、既に退色しているので、正しいデータが得られない可能性がある。
本発明の第1の態様は、細胞群に照明光を照射する照明光学系と、該照明光学系による照明光の照射範囲を調節する照射範囲調節手段と、前記照明光学系により照明された前記細胞群の画像を生成する画像生成部と、該画像生成部により生成された前記細胞群の画像から各細胞の特徴を示す複数種類のデータを抽出する細胞データ抽出部と、該細胞データ抽出部により抽出された各細胞のデータと対応付けて各細胞の領域を抽出する細胞領域抽出部と、該細胞データ抽出部によって抽出された各細胞の複数種類のデータを統計処理してその処理結果をスキャッタグラムとして表示するとともに、該スキャッタグラム上の個々のデータ点を前記細胞領域抽出部によって抽出された細胞の領域と対応付ける演算部と、前記スキャッタグラム上に表示された前記細胞のデータ点の中から、ユーザによる操作に従って少なくとも一部のデータ点を選択する入力部を有し、該入力部の操作に従って前記細胞群の中から注目細胞を選択する注目細胞選択部と、前記照射範囲調節手段を動作させて、前記注目細胞選択部により選択された前記注目細胞に対応する前記細胞の領域のみに照明光を照射する制御部と、を備える細胞観察装置である。
このようにすることで、揺動機構により一対のガルバノミラーを揺動させることにより、照明光学系による照明光の照射範囲を調節することができる。
このようにすることで、駆動機構により複数の微小素子を動作させることにより、照明光の偏向方向を変化させることができる。これにより、照明光学系に一部または全部の照明光を選択して入射させることができ、照明光学系による照明光の照射範囲を調節することができる。
このようにすることで、照明光学系により注目細胞に細胞観察用の照明光を照射して、注目細胞の画像を取得することができる。
このようにすることで、照明光学系により注目細胞に細胞刺激光を照射して注目細胞を刺激し、刺激されて状態の変化した注目細胞を観察することができる。
このようにすることで、照明光学系の倍率によって照明光を照射する領域の大きさを補正し、照射範囲調節手段により適切な照明領域の照明光を照射することができる。これにより、注目細胞以外の細胞に照明光を照射して退色させてしまうことを効果的に防止することができる。
本発明の第1の実施形態に係る顕微鏡1について、図面を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る顕微鏡1は、図1に示すように、照明光を発する光源11と、標本Aを載置するステージ13と、標本Aに対向して配置された対物レンズ(照明光学系)14と、対物レンズ14により集光された標本Aからの光を検出する光学ユニット12と、光学ユニット12により検出された標本Aからの光から画像を生成するPC15と、PC15により生成された画像を表示するモニタ16と、これらを制御するコントローラ(制御部)17とを備えている。
光源11を作動させると、光源11から射出された照明光は、光学ユニット12に導光される。光学ユニット12に導光された照明光は、ダイクロイックミラー22を透過して、スキャナ23により標本A上において2次元的に走査され、対物レンズ14により標本A上に照射される。
まず、画像取得ステップS1により、標本Aの測定範囲に照明光を照射して標本Aの画像を取得する。
次に、細胞データ抽出ステップS2により、画像取得ステップS1において取得された標本Aの画像から各細胞の特徴(面積や強度等)を示すデータを抽出する。
次に、統計処理ステップS4により、細胞データ抽出ステップS2において抽出された各細胞のデータを統計処理してスキャッタグラムを作成する。
次に、注目細胞選択ステップS5により、統計処理ステップS4において統計処理された結果、すなわちスキャッタグラムを用いて、標本Aの中から注目細胞を選択する。
次に、注目細胞表示ステップS7により、注目細胞照射ステップにより照明光が照射された注目細胞の画像を表示する(再観察)。
このようにすることで、対物レンズ14の倍率によって照明光を照射する領域の大きさを自動的に補正し、適切な照明領域の照明光を照射することができる。これにより、注目細胞以外の細胞に照明光を照射して退色させてしまうことを効果的に防止することができる。
以下に、第2の実施形態に係る顕微鏡2について、図面を参照して説明する。以降では、本実施形態に係る顕微鏡2について、第1の実施形態に係る顕微鏡1と共通する点については説明を省略し、異なる点について主に説明する。
以下に、第3の実施形態に係る顕微鏡3について、図面を参照して説明する。以降では、本実施形態に係る顕微鏡3について、前述の各実施形態に係る顕微鏡1,2と共通する点については説明を省略し、異なる点について主に説明する。
光源11と光学ユニット12との間は光ファイバ18により接続されており、光源11から発せられた照明光は、光ファイバ18により光学ユニット12に導光されるようになっている。
光源11と刺激位置調節ユニット65との間は光ファイバ66により接続されており、光源11から発せられた細胞刺激光は、光ファイバ66により刺激位置調節ユニット65に導光されるようになっている。
図18に示すフローチャートにおいてステップS1〜S5までは、図11に示すフローチャートと同様であるため、ここでは説明を省略する。
次に、注目細胞表示ステップS7により、注目細胞照射ステップにより照明光および細胞刺激光が照射された注目細胞の画像を表示する(再観察)。
また、注目細胞以外の細胞への照明光および細胞刺激光の照射を防止することができ、注目細胞以外の細胞の照明光および細胞刺激光による退色等の悪影響を防止することができる。
以下に、本実施形態に係る顕微鏡3の変形例について図19を参照して説明する。
本実施形態に係る顕微鏡3の変形例として、図19に示すように、本実施形態に係る顕微鏡3の刺激位置調節ユニット65において、DMD75に代えて、ガルバノミラーを有するスキャナ(照射範囲調節手段)81を設けることとしてもよい。または、DMDのような反射型微小素子アレイの代わりに、LCD(液晶アレイ)のような透過型微小素子アレイを用いることもできる。
1,2,3,4 顕微鏡
11 光源
12 光学ユニット
13 ステージ
14 対物レンズ(照明光学系)
15 PC
16 モニタ
17 コントローラ(制御部)
21 レンズ
22 ダイクロイックミラー
23 スキャナ(照射範囲調節手段)
24 光検出器
31 画像生成部
32 細胞データ抽出部
33 細胞領域抽出部
34 演算部
35 注目細胞選択部
36 記憶部
41 通信ユニット
42 CCDユニット
43 DMDユニット
55 DMD(照射範囲調節手段)
65 刺激位置調節ユニット
75 DMD(照射範囲調節手段)
81 スキャナ(照射範囲調節手段)
Claims (7)
- 細胞群に照明光を照射する照明光学系と、
該照明光学系による照明光の照射範囲を調節する照射範囲調節手段と、
前記照明光学系により照明された前記細胞群の画像を生成する画像生成部と、
該画像生成部により生成された前記細胞群の画像から各細胞の特徴を示す複数種類のデータを抽出する細胞データ抽出部と、
該細胞データ抽出部により抽出された各細胞のデータと対応付けて各細胞の領域を抽出する細胞領域抽出部と、
該細胞データ抽出部によって抽出された各細胞の複数種類のデータを統計処理してその処理結果をスキャッタグラムとして表示するとともに、該スキャッタグラム上の個々のデータ点を前記細胞領域抽出部によって抽出された細胞の領域と対応付ける演算部と、
前記スキャッタグラム上に表示された前記細胞のデータ点の中から、ユーザによる操作に従って少なくとも一部のデータ点を選択する入力部を有し、該入力部の操作に従って前記細胞群の中から注目細胞を選択する注目細胞選択部と、
前記照射範囲調節手段を動作させて、前記注目細胞選択部により選択された前記注目細胞に対応する前記細胞の領域のみに照明光を照射する制御部と、を備える細胞観察装置。 - 前記照射範囲調節手段が、一対のガルバノミラーと、該一対のガルバノミラーを揺動させる揺動機構とを有するガルバノスキャナである請求項1に記載の細胞観察装置。
- 前記照射範囲調節手段が、前記照明光の方向を偏向する複数の微小素子と、該複数の微小素子を動作させて前記照明光の偏向方向を変化させる駆動機構とを有する微小素子アレイである請求項1に記載の細胞観察装置。
- 前記照明光学系が、前記注目細胞に細胞観察用の照明光を照射する請求項1に記載の細胞観察装置。
- 前記照明光学系が、前記注目細胞を刺激する細胞刺激光を照射する請求項1に記載の細胞観察装置。
- 前記照射範囲調節手段が、前記照明光学系の倍率によって照明光を照射する領域の大きさを補正する請求項1に記載の細胞観察装置。
- 細胞群に照明光を照射して細胞群の画像を取得する画像取得ステップと、
該画像取得ステップにより取得された前記細胞群の画像から各細胞の特徴を示す複数種類のデータを抽出する細胞データ抽出ステップと、
該細胞データ抽出ステップにより抽出された各細胞のデータと対応付けて各細胞の領域を抽出する細胞領域抽出ステップと、
該細胞データ抽出ステップによって抽出された各細胞の複数種類のデータを統計処理してその処理結果をスキャッタグラムとして表示するとともに、該スキャッタグラム上の個々のデータ点を前記細胞領域抽出ステップによって抽出された細胞の領域と対応付ける統計処理ステップと、
該統計処理ステップにより表示された前記スキャッタグラムに基づき、ユーザの指示に従って前記細胞群の中から注目細胞を選択する注目細胞選択ステップと、
該注目細胞選択ステップによって選択された前記注目細胞に対応する前記細胞の領域のみに照明光を照射する注目細胞照射ステップと、
該注目細胞照射ステップにより照明光が照射された前記注目細胞の画像を表示する注目細胞表示ステップとを含む細胞観察方法。
Priority Applications (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2010160820A JP5734588B2 (ja) | 2010-07-15 | 2010-07-15 | 細胞観察装置および観察方法 |
US13/179,679 US8957957B2 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-11 | Cell observation apparatus and observation method |
EP11005655.3A EP2407781B8 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-11 | Cell observation apparatus and observation method |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2010160820A JP5734588B2 (ja) | 2010-07-15 | 2010-07-15 | 細胞観察装置および観察方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2012019748A JP2012019748A (ja) | 2012-02-02 |
JP5734588B2 true JP5734588B2 (ja) | 2015-06-17 |
Family
ID=44644854
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010160820A Active JP5734588B2 (ja) | 2010-07-15 | 2010-07-15 | 細胞観察装置および観察方法 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8957957B2 (ja) |
EP (1) | EP2407781B8 (ja) |
JP (1) | JP5734588B2 (ja) |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10678602B2 (en) * | 2011-02-09 | 2020-06-09 | Cisco Technology, Inc. | Apparatus, systems and methods for dynamic adaptive metrics based application deployment on distributed infrastructures |
JP6150586B2 (ja) * | 2013-03-29 | 2017-06-21 | オリンパス株式会社 | 顕微鏡 |
JP6595156B2 (ja) | 2014-03-04 | 2019-10-23 | 富士フイルム株式会社 | 細胞画像取得装置および方法並びにプログラム |
JP6713477B2 (ja) * | 2015-03-06 | 2020-06-24 | ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニーBecton, Dickinson And Company | 集光システムならびにその製造および使用方法 |
JP2018157830A (ja) * | 2018-06-25 | 2018-10-11 | 富士フイルム株式会社 | 細胞画像取得装置および方法並びにプログラム |
CN112714886B (zh) | 2018-09-28 | 2023-03-21 | 仪景通株式会社 | 显微镜系统、投影单元以及图像投影方法 |
WO2020066043A1 (ja) | 2018-09-28 | 2020-04-02 | オリンパス株式会社 | 顕微鏡システム、投影ユニット、及び、画像投影方法 |
JP7150868B2 (ja) | 2018-09-28 | 2022-10-11 | 株式会社エビデント | 顕微鏡システム、投影ユニット、及び、画像投影方法 |
Family Cites Families (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4786165A (en) * | 1986-07-10 | 1988-11-22 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Flow cytometry and apparatus therefor |
JP2000292422A (ja) * | 1999-04-02 | 2000-10-20 | Olympus Optical Co Ltd | 走査型サイトメータ |
US6459484B1 (en) * | 1999-10-21 | 2002-10-01 | Olympus Optical Co., Ltd. | Scanning optical apparatus |
DE10112798A1 (de) * | 2001-03-16 | 2002-10-02 | Elegene Gmbh | Vorrichtung und Verfahren zur automatischen Erzeugung einer Wärmevermeidungsreaktion von Nematoden oder ähnlichen Lebewesen |
US7272252B2 (en) | 2002-06-12 | 2007-09-18 | Clarient, Inc. | Automated system for combining bright field and fluorescent microscopy |
WO2003105675A2 (en) | 2002-06-18 | 2003-12-24 | Lifespan Biosciences, Inc. | Computerized image capture of structures of interest within a tissue sample |
JP4454998B2 (ja) * | 2003-09-29 | 2010-04-21 | 株式会社ニコン | 細胞観察装置および細胞観察方法 |
JP4756819B2 (ja) * | 2003-10-21 | 2011-08-24 | オリンパス株式会社 | 走査型顕微鏡システム |
EP1849861A4 (en) | 2005-02-18 | 2009-02-18 | Absize Inc | METHOD AND APPARATUS FOR SEPARATING CELLS |
US20080279441A1 (en) * | 2005-03-29 | 2008-11-13 | Yuichiro Matsuo | Cell-Image Analysis Method, Cell-Image Analysis Program, Cell-Image Analysis Apparatus, Screening Method, and Screening Apparatus |
US20070140543A1 (en) * | 2005-12-19 | 2007-06-21 | Cytyc Corporation | Systems and methods for enhanced cytological specimen review |
EP2034349B2 (en) | 2006-06-08 | 2023-07-19 | Nikon Corporation | Observing apparatus and observing method |
EP1998165A1 (en) | 2007-06-01 | 2008-12-03 | The European Community, represented by the European Commission | Method of fluorescence imaging |
WO2009086521A2 (en) | 2007-12-28 | 2009-07-09 | Carl Zeiss Microimaging Ais, Inc. | System, device, and method for laser capture microdissection |
HU0800688D0 (en) | 2008-11-17 | 2009-01-28 | Femtonics Kft | Multiple free line-scan mode of scanning |
JP5154598B2 (ja) | 2010-04-19 | 2013-02-27 | 東芝テック株式会社 | ハンディターミナル及びプログラム |
-
2010
- 2010-07-15 JP JP2010160820A patent/JP5734588B2/ja active Active
-
2011
- 2011-07-11 EP EP11005655.3A patent/EP2407781B8/en active Active
- 2011-07-11 US US13/179,679 patent/US8957957B2/en active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US8957957B2 (en) | 2015-02-17 |
JP2012019748A (ja) | 2012-02-02 |
EP2407781B1 (en) | 2016-09-28 |
US20120013728A1 (en) | 2012-01-19 |
EP2407781B8 (en) | 2016-11-09 |
EP2407781A1 (en) | 2012-01-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5734588B2 (ja) | 細胞観察装置および観察方法 | |
US8704196B2 (en) | Combination microscopy | |
EP2330454B1 (en) | Laser scanning microscope | |
JP2008276191A (ja) | 蛍光顕微鏡装置 | |
US20130070054A1 (en) | Image processing apparatus, fluorescence microscope apparatus, and image processing program | |
EP1777571A2 (en) | Microscope examination apparatus and microscope examination method | |
JP4526988B2 (ja) | 微小高さ測定方法及びそれに用いる微小高さ測定装置並びに変位ユニット | |
JP2011257599A (ja) | 観察装置および観察方法 | |
JP2010286565A (ja) | 蛍光観察装置 | |
CN109073873B (zh) | 图像取得装置以及图像取得方法 | |
US7983466B2 (en) | Microscope apparatus and cell observation method | |
JP2005301065A (ja) | 観察装置 | |
JP5738580B2 (ja) | 顕微鏡装置および観察方法 | |
JP4968337B2 (ja) | 共焦点顕微鏡装置 | |
CN107076882B (zh) | 数字病理学扫描中的光照 | |
JP2010164635A (ja) | 共焦点顕微鏡 | |
JP5669561B2 (ja) | 蛍光観察装置 | |
JP5649994B2 (ja) | 顕微鏡装置 | |
JP6000671B2 (ja) | 光検出システムおよび顕微鏡システム | |
JP6284372B2 (ja) | 走査型レーザ顕微鏡および超解像画像生成方法 | |
JP6355961B2 (ja) | 標本観察装置 | |
US20240053594A1 (en) | Method and Device for Microscopy | |
JP6128862B2 (ja) | 顕微鏡装置および顕微鏡システム | |
JP4954615B2 (ja) | 走査型レーザ顕微鏡装置 | |
EP2458551A2 (en) | Observation apparatus and observation method |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20130621 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140909 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20150331 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20150415 |
|
R151 | Written notification of patent or utility model registration |
Ref document number: 5734588 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R151 |
|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
R371 | Transfer withdrawn |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R371 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
R371 | Transfer withdrawn |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R371 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |