JP2000292422A

JP2000292422A - 走査型サイトメータ

Info

Publication number: JP2000292422A
Application number: JP11096286A
Authority: JP
Inventors: Hitoshi Ueda; 均上田
Original assignee: Olympus Optical Co Ltd
Current assignee: Olympus Corp
Priority date: 1999-04-02
Filing date: 1999-04-02
Publication date: 2000-10-20

Abstract

(57)【要約】【課題】本発明は、統計グラフ上で注目する細胞データ
に対応する細胞を再測定する作業を自動化でき、かつ統
計グラフ上で注目する細胞データに対応する細胞の顕微
鏡画像を自動的に記録できて観察者の観察効率を向上す
る。【解決手段】光ビームを細胞集団から成る標本１０の測
定範囲に二次元走査してその光学像を取り込み、この光
学像から標本１０の細胞個々の特徴を示す細胞データを
統計処理してその解析結果を提示する場合、統計処理さ
れたデータから注目する細胞データ群を注目データ選択
手段４０により選択し、この選択された細胞データ群の
細胞データを注目データ検索手段４４によって注目細胞
データとして抽出するとともにこの細胞データが位置す
る測定範囲内の区画を注目区画として抽出し、この抽出
された注目細胞データを注目データ取得手段３０により
取得する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、蛍光色素で生化学
的に標識された細胞集団の標本にレーザスポットを照射
・走査し、個々の細胞の発する蛍光や散乱光を測定し、
その結果を細胞集団の免疫特性、遺伝的特性及び細胞増
殖性を表わす統計的なデータとして解析して提示する走
査型サイトメータに関する。

【０００２】

【従来の技術】走査型サイトメータは、スライドガラス
上の任意範囲の細胞集団をレーザスポットで走査し、こ
の細胞集団の個々の細胞が発する蛍光や散乱光を検出し
て種々の走査データを得、この走査データから個々の当
該細胞の特徴を示す細胞データを抽出し、座標データと
共に格納し、必要に応じて種々の統計処理（統計グラフ
の表示を含む）を行なうことで細胞集団の解析を行なう
ものである。

【０００３】又、この走査型サイトメータは、モニタ画
面上に表示される顕微鏡画像上の細胞を形態的に選択さ
せ、この選択した細胞群をレーザスポットで走査し、個
々の細胞の細胞データを収集することができるセレクト
スキャン機能を有している。

【０００４】又、この走査型サイトメータは、モニタ画
面上に表示される統計処理後の統計グラフから細胞デー
タの選択を行い、この細胞データに対応する細胞像を顕
微鏡視野内に再現することができ、これにより細胞の形
態を観察できる環境を提供するリコール機能を有してい
る。

【０００５】又、この走査型サイトメータは、顕微鏡画
像上に表示された細胞像を記録することができるスナッ
プショット機能を有している。

【０００６】従って、観察者は、以上のような走査型サ
イトメータを用い、形態的に注目する細胞をセレクトス
キャン機能により測定したり、細胞集団の統計グラフ上
で注目するデータを示す細胞をリコール機能により順番
に顕微鏡画像上に再現し、その形態を観察し、さらにス
ナップショット機能によりその細胞像を記録するなどの
作業を行うものとなる。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】以上のような走査型サ
イトメータの機能のうちセレクトスキャン機能は、顕微
鏡画像上で選択した複数の細胞を測定できるので、顕微
鏡画像上で形態的に注目した細胞だけを測定する場合に
有効である。

【０００８】しかし、一旦測定してから、標本を異なる
蛍光色素で再染色し、統計的処理によって特徴的な傾向
を示した細胞集団だけを再度測定することはできない。
このように標本を異なる色素で再染色して再測定するこ
とは、同時に測定できない細胞の異なる特徴量を取得す
るためであり、細胞診や研究分野において有効な情報を
提供するものとなる。

【０００９】敢えて、かかる再測定のような作業を行な
うならば、特徴的なデータを持つ細胞をリコール機能に
より呼び出し、呼び出した細胞を顕微鏡画像上で選択を
繰り返し、セレクトスキャン機能によって選択した細胞
データを収集するものとなる。

【００１０】又、サイトメータの統計処理で得られた統
計グラフ上で注目する細胞データに対応する細胞の顕微
鏡画像を取得したい場合がある。このように細胞の顕微
鏡画像を取得するのは、統計グラフ上で特徴的な傾向の
細胞データとそのデータに対応する細胞の形態的な傾向
を比較するためであり、数値化された細胞の特徴量と細
胞の形態との関連を明確にするために重要である。この
場合も、リコール機能により細胞を顕微鏡画像上に再現
し、呼び出した細胞のスナップショット画像を取得する
作業を繰り返す必要がある。

【００１１】しかしながら、これらの作業はグラフ上で
注目する細胞の数が十数個程度であれば、作業量的には
問題とならないが、測定したい細胞数が数百から、数千
になると作業量が膨大であり、観察者に多大な負担をか
けることになる。

【００１２】そこで本発明は、測定した細胞集団の統計
的なデータから選択的に細胞を測定する作業及び、細胞
の顕微鏡画像及び走査画像を取得することが自動化でき
る走査型サイトメータを提供する事を目的とする。

【００１３】

【課題を解決するための手段】請求項１によれば、光ビ
ームを細胞集団から成る標本の測定範囲に二次元走査し
てこの測定範囲の光学像を取り込み、この光学像から標
本の細胞個々の特徴を示す細胞データを抽出し、この細
胞データを統計処理により解析してその結果を提示する
走査型サイトメータにおいて、統計処理されたデータか
ら注目する細胞データ群を選択する注目データ選択手段
と、この注目データ選択手段により選択された細胞デー
タ群の細胞データを注目細胞データとして抽出するとと
もにこの細胞データが位置する測定範囲内の区画を注目
区画として抽出する注目データ検索手段と、この注目デ
ータ検索手段により抽出された注目細胞データを取得す
る注目データ取得手段と、を備えた走査型サイトメータ
である。

【００１４】請求項２によれば、請求項１記載の走査型
サイトメータにおいて、注目データ取得手段は、注目デ
ータ検索手段により抽出された注目区画に対して光ビー
ムを二次元走査してその光学像を取り込み、この光学像
から標本の細胞個々の注目細胞データを抽出する機能を
有する。

【００１５】請求項３によれば、請求項１記載の走査型
サイトメータにおいて、注目データ検索手段により抽出
された注目細胞データを取り出し、これら注目細胞デー
タの座標に従って順次標本の光学像を取り込み、所望の
細胞像を取得する選択的細胞像取得手段を備えた。

【００１６】

【発明の実施の形態】(1)以下、本発明の第１の実施の
形態について図面を参照して説明する。

【００１７】図１は、走査型サイトメータの構成図であ
る。

【００１８】この走査型サイトメータは、レーザ走査型
測定装置１及びこれと接続された制御装置２から構成さ
れている。

【００１９】このうちレーザ走査型測定装置１について
説明すると、レーザ光源３から出射されたレーザビーム
は、スポット投影レンズ４で適宜集光された後、ダイク
ロイックミラー５で反射され、さらに図面に直行する回
転軸を中心に回動するガルバノミラー６で反射され、瞳
投影レンズ７で対物像面に結像され、その後、光路切換
ミラー８に入射される。これにより、レーザビームは、
回動するガルバノミラー６の存在によって光路切換ミラ
ー８の位置において紙面上に上下方向に走査される。

【００２０】又、レーザビームは、光路切換ミラー８で
反射された後、対物レンズ９に入射し、標本１０上に結
像される。この場合、標本１０上に結像されるレーザス
ポットは、ガルバノミラー６の回動によりレーザビーム
を紙面に対して左右方向に走査すると同時に、走査ステ
ージ１１を紙面と直交する方向に移動することにより、
標本１０面において、レーザスポットは二次元走査され
る。

【００２１】この標本１０は、上記の如く細胞集団より
なるもので、これら細胞は、予め生化学的に蛍光色素で
標識されており、レーザスポットにより励起され蛍光を
放射する。

【００２２】標本１０からの蛍光は、前述した光路を逆
に進み、対物レンズ９、光路切換ミラー８、瞳投影レン
ズ７、ガルバノミラー６経てダイクロイックミラー５を
上方へ透過され、さらにバリアフィルタ１２を透過さ
れ、集光レンズ１３により光電子倍増管（ＰＭＴ１）１
４の受光面に集光される。

【００２３】一方、標本１０上の細胞によって散乱され
た散乱光は、標本１０を下方へ透過した光と共にコンデ
ンサレンズ１５で集光され、ビームスプリッタ１６で反
射された後にリングスリット１７に入射される。このリ
ングスリット１７は、標本１０からの透過光を遮光し、
散乱光のみを通過させて、フォトダイオード（ＰＤ）１
８の受光面に入射させる。

【００２４】つまり、レーザスポットで二次元走査され
た標本１０からの蛍光及び散乱光は、光電子倍増管１４
及びフォトダイオード１８により検出されることにな
る。

【００２５】なお、同図において標本１０に付される蛍
光色素は、一種類の蛍光色素を用いる場合を述べたが、
ダイクロイックミラー５，バリアフィルタ１２，光電子
倍増管（ＰＭＴ２，ＰＭＴ３）１４を追加することによ
って、複数の蛍光色素からの波長の異なる蛍光を同時に
検出するようにもできる。

【００２６】さらに、透過照明光源１９や落射照明光源
２０を用いることで、通常の顕微鏡として用いることも
できる。この場合、光路切換ミラー８がレーザビームの
光路に対して挿脱可能に設けられ、この光路切換ミラー
８を光路から取り除くことにより、標本１０の観察像を
顕微鏡観察光学系２１に導くようになる。この結果、観
察者は、標本１０の透過像や蛍光像を肉眼で顕微鏡観察
したりテレビカメラや写真撮影装置で顕微鏡撮影するこ
とができる。

【００２７】なお、顕微鏡観察光学系２１には、例えば
ＣＣＤカメラ等の検出器が設けられ、この検出器により
得られる顕微鏡画像は、制御装置２に送られてモニタ２
２ａ上に表示されるようになっている。

【００２８】一方、制御装置２は、レーザ走査型測定装
置１を動作制御し、標本１０にレーザスポットを照射・
走査し、個々の細胞の発する蛍光や散乱光を測定し、そ
の結果を取り込んで、標本１０の細胞集団の免疫特性、
遺伝的特性及び細胞増殖性を表わす統計的なデータとし
て解析して提示する機能を有するもので、測定制御部２
３、細胞データ取得部２４、細胞データ検索部２５及び
細胞データ解析部２６の各機能を有している。

【００２９】この制御装置２は、具体的にＣＰＵ、該Ｃ
ＰＵのバスに接続されたＲＡＭ，入出力装置、及びハー
ドディスク等の外部記憶装置、画像入力部とから構成さ
れる。このうち外部記憶装置には、前記ＣＰＵを、測定
制御部２３、細胞データ取得部２４、細胞データ検索部
２５及び細胞データ解析部２６として、それぞれ作動さ
せる為のプログラムが格納されている。これらのプログ
ラムは、例えばマイクロソフト社のＷｉｎｄｏｗｓを基
本ソフトウェアとして作動し、全ての指令は、マウス等
のポインティングディバイスやキーボード等の入力装置
２２ｂを介して与えられるようになっている。また、細
胞データや統計グラフ、前述した顕微鏡画像などの出力
は、前記モニタ２２ａ上にカラーグラフィックスにより
表示されるようになっている。

【００３０】前記測定制御部２３は、レーザ走査型測定
装置１の光学系（レーザ光源３等）、走査ステージ１１
及びガルバノミラー６を制御することで細胞データの測
定に必要な動作を行なわせる機能を有し、又、前記細胞
データ解析部２６は、得られた細胞データを統計処理す
ることにより、細胞集団の免疫特性や遺伝的特性及び細
胞増殖性を表わす統計グラフ例えばヒストグラム等を作
成し、前記モニタ２２ａ上に表示する機能を有してい
る。

【００３１】次に、細胞データ取得部２４は、レーザ走
査型測定装置１による測定結果に基づいて各細胞データ
（座標データを含む）を取得する細胞データ取得手段２
７、前記測定装置１による測定範囲を複数の区画に分割
する区画分割手段２８、前記細胞データ取得手段２７に
より得られた細胞データを前記区画分割手段２８で分割
した区画に関連付けて格納する細胞データ格納手段２９
及び統計グラフ上に注目した細胞データを測定する注目
データ取得手段３０の各機能を有している。

【００３２】このうち細胞データ取得手段２７は、前記
測定制御部２３を通じてガルバノミラー６を回動させる
と共に走査ステージ１１を作動させ、この走査ステージ
１１上に保持された標本１０に対してレーザスポットを
二次元走査し、各細胞の発する蛍光及び散乱光の信号を
取得し、この測定結果に基づいて個々の細胞の蛍光積算
値（蛍光値の総和）、最大蛍光値、面積、重心、走査ス
テージ１１上の座標（座標位置）、測定開始からの経過
時間、一番近い細胞までの距離、外周、細胞内のスポッ
ト数を求める機能を有している。なお、各細胞の座標位
置は、最大蛍光値が得られるピクセル位置により決定さ
れる。

【００３３】ここで、図２はレーザ走査型測定装置１に
よる測定範囲３１を示し、極太線によって表わしてい
る。この測定範囲３１の大きさは、測定開始前に観察者
によって指定される。又、同図に中太線で示したのは、
ストリップ３２と呼ばれる範囲である。このストリップ
３２とは、１回の測定により細胞データを取得すること
のできる最大の範囲であり、ガルバノミラー６の走査範
囲とＲＡＭ等のメモリ容量とから定められる。従って、
走査ステージ１１とガルバノミラー６とを作動させるこ
とで、このストリップ３２毎に図の実線で示すようにジ
グザグに走査が行われ、測定が実行される。

【００３４】区画分割手段２８は、この測定範囲３１を
図２に点線で示すような複数の区画３３に分割する機能
を有している。ここでは、１つのストリップ３２が８つ
の区画３３に分割されている。そして、各区画３３の情
報は区画情報インデックス（０，１，２，３…）と共に
図３に示す区画管理テーブル３４内に格納されるものと
なっている。

【００３５】図３では、この区画管理テーブル３４及び
細胞データ・データベース３５の内容を示す概略構成図
である。このうち区画管理テーブル３４には、区画情報
０，１，２，３…Ｎ（０，１，２，３…Ｎは区画インデ
ックス）が格納されており、各区画情報は、区画座標３
６と、この区画に含まれる最初の細胞データインデック
ス３７と、最後の細胞データインデックス３８とからな
る。前記区画座標３６は、図４に示すように区画の左上
の座標（Ｘ０，Ｙ０）と右下の座標（Ｘ１，Ｙ１）とか
らなる。なお、図４は、この区画座標とのこの区画内に
含まれる細胞像の座標及び細胞インデックスの関係をわ
かりやすく示した概念図である。

【００３６】次に、前記細胞データ格納手段２９は、細
胞データ取得手段２７により取得された細胞データの座
標に基づいて当該細胞データがどの区画３３に属するか
を判断しながら、この細胞データ・データベース３５に
格納していく機能を有している。すなわち、この細胞デ
ータ・データベース３５には、図３に示すように各区画
０，１，２，３…Ｎに属する各細胞データ３９群が、こ
の順で格納されるようになっている。

【００３７】次に、細胞データ検索部２５は、モニタ２
２ａに表示されたグラフィックウィンドウを通じて注目
する細胞データ群を選択するための注目データ選択手段
４０を有している。

【００３８】図５はかかるモニタ２２ａ上に表示された
グラフィック画像を簡略化して示したもので、統計グラ
フの一つである細胞データプロットウィンドウ４１であ
り、横軸に細胞の蛍光値の総和（Ｖａｌｕｅ）、縦軸に
細胞の面積（Ａｒｅａ）をとったものである。４２で示
すのは、個々の細胞データのプロットであり、４３で示
すのは観察者が注目した細胞データ群を囲んだ注目領域
である。この注目領域４３はマウスポインタ４８によっ
て各頂点をクリックすることによって指定できるように
なっている。

【００３９】次に、注目データ検索手段４４は、注目デ
ータ選択手段４０により選択された注目領域４３の細胞
データ群の細胞データを注目細胞データとして抽出する
とともにこの細胞データが位置する測定範囲３１内の区
画３３を注目区画として抽出する機能を有している。す
なわち、この注目データ検索手段４４は、図６に示す注
目データ検索フローチャートに従って動作し、モニタ２
２ａ上に統計グラフが表示されている状態で、注目デー
タ選択手段４０を用いて注目する細胞データを選択する
ことで実行され、測定対象となる注目区画管理テーブル
４５と注目細胞データ・データベース４６を作成する機
能を有している。

【００４０】なお、これら注目区画管理テーブル４５お
よび注目細胞データ・データベース４６の構造は、夫々
図３に示す区画管理テーブル３４、細胞データ・データ
ベース３５と同じであるのでその説明は省略する。

【００４１】次に、上記注目データ取得手段３０は、注
目データ検索手段４４により抽出された注目細胞データ
を取得するもので、図７に示すデータ取得フローチャー
トに従い、注目データ検索手段４４により抽出された注
目区画３３に対してレーザビームを二次元走査してその
光学像を取り込み、この光学像から標本１０の細胞個々
の注目細胞データを抽出する機能を有するものである。

【００４２】次に上記の如く構成された走査型サイトメ
ータの作用について説明する。

【００４３】レーザ走査型測定装置１は、蛍光色素で生
化学的に標識された細胞集団（標本１０）を走査ステー
ジ１１上に保持する。そしてレーザ光源３から発せられ
たレーザビームをガルバノミラー６で反射させること
で、標本１０に含まれる個々の細胞に対し、レーザスポ
ットを図２に示す測定範囲３１内で走査する。そして、
この標本１０からの蛍光を光電子倍増管１４で検出する
と共に散乱光をフォトダイオード１８で検出する。

【００４４】これらの光電子倍増管１４及びフォトダイ
オード１８からの測光結果は、走査ステージ１１及びガ
ルバノミラー６から得られる走査位置信号と共に制御装
置２に受け渡される。

【００４５】又、顕微鏡観察光学系２１の検出器により
得られる顕微鏡画像は、制御装置２に送られ、モニタ２
２ａ上に表示される。

【００４６】この制御装置２の測定制御部２３は、レー
ザ走査型測定装置１の光学系（レーザ光源３等）、走査
ステージ１１及びガルバノミラー６を制御することで、
細胞データの測定に必要な動作を行なわせる。また、細
胞データ解析部２６は、得られた細胞データを統計処理
することにより、細胞集団の免疫特性や遺伝的特性及び
細胞増殖性を表わすヒストグラム等の統計グラフを作成
し、モニタ２２ａ上に表示する。

【００４７】従って、観察者は、モニタ２２ａを通して
統計グラフを観察した後、注目する細胞データ群を選択
し、選択した細胞データに対応する実際の細胞を走査
し、細胞データ、及び顕微鏡画像を取得することができ
る。

【００４８】このとき、細胞データ取得手段２７は、測
定制御部２３を通じてガルバノミラー６を回動させると
共に走査ステージ１１を作動させる。このことにより、
走査ステージ１１上に保持された標本１０に対してレー
ザスポットが二次元走査され各細胞の発する蛍光及び散
乱光の信号を取得する。

【００４９】そして、細胞データ取得手段２７は、これ
らに取得した信号に基づいて個々の細胞の蛍光積算値
（蛍光値の総和）、最大蛍光値、面積、重心、走査ステ
ージ１１上の座標（座標位置）、測定開始からの経過時
間、一番近い細胞までの距離、外周、細胞内のスポット
数を求める。これらのデータは、細胞データ格納手段２
９により順次インデックスを付されながら細胞データ・
データベース３５内に格納される。

【００５０】又、区画分割手段２８は、図２に示す測定
範囲３１を点線で示すような複数の区画３３に分割す
る。ここでは、１つのストリップ３２が８つの区画３３
に分割されている。そして、各区画３３の情報は区画情
報インデックス（０，１，２，３…）と共に図３に示す
区画管理テーブル３４内に格納される。

【００５１】次に、細胞データ格納手段２９は、細胞デ
ータ取得手段２７により取得された細胞データの座標に
基づいて当該細胞データがどの区画３３に属するかを判
断しながら、この細胞データを細胞データ・データベー
ス３５に格納していく。この細胞データ・データベース
３５には、図３に示すように各区画０，１，２，３…Ｎ
に属する各細胞データ３９群が、この順序で格納され
る。

【００５２】次に、注目データ選択手段４０は、図５に
示すようにモニタ２２に表示されたグラフィックウィン
ドウを通じて注目する細胞データ群を選択する。すなわ
ち、観察者が注目した細胞データ群を囲んだ注目領域４
３に対し、マウスポインタ４８によって各頂点をクリッ
クすることによって指示し、細胞データ群を選択する。

【００５３】次に、注目データ検索手段４４の作用につ
いて図６に示す注目データ検索フローチャートに従って
説明する。

【００５４】すなわち、注目データ検索手段４４は、モ
ニタ２２ａ上に統計グラフが表示されている状態で、注
目データ選択手段４０を用いて注目する細胞データを選
択することで実行され、測定対象となる注目区画管理テ
ーブル４５と注目細胞データ・データベース４６を作成
する。

【００５５】しかるに、観察者が注目データ選択手段４
０により、注目した細胞データ群を選択した後で、図５
に示す注目領域４３に位置する細胞データとその細胞デ
ータが位置する区画を夫々注目細胞データと注目区画と
して抽出する。

【００５６】すなわち、注目データ検索手段４４は、先
ず、初期化ステップＳ１で区画カウンタＫを０に設定
し、次のステップＳ２で区画カウンタＫが総区画数Ｎｒ
未満であるかを判断する。Ｎｒ未満である場合は、ステ
ップＳ３に移行し、細胞データの検索を行う。

【００５７】この細胞データの検索は、ステップＳ３〜
Ｓ１０に従って細胞データ・データベース３５内の当該
区画Ｋに対応する部分の細胞データを検索する。すなわ
ち、先ず、ステップＳ３で、細胞インデックスＬを検索
対象区画Ｋの先頭の細胞インデックスに設定する。次い
でステップＳ４で、その細胞インデックスＬが当該区画
Ｋの最後の細胞インデックス以下であるかを判断し、こ
の細胞インデックス以下の場合はステップＳ５で細胞イ
ンデックスＬで参照される細胞データが図５に示す注目
領域４３に含まれるかどうかを判断する。この注目領域
４３内に含まれる場合は、ステップＳ６で、細胞データ
Ｌを注目細胞データとしてＲＡＭに記録する。

【００５８】次にステップＳ７に移行し、細胞インデッ
クスＬをＬ＝Ｌ＋１にカウントアップして、次の細胞デ
ータについて再度ステップＳ４以下の処理を行なう。

【００５９】以上の工程ステップＳ４からステップＳ７
を区画Ｋ内の細胞データ全てについて繰り返したなら
ば、注目データ検索手段４４は、ステップＳ４からステ
ップＳ８に移行し、もし、ステップＳ３からステップＳ
７の間で、注目領域４３に含まれる細胞データがあった
場合は、ステップＳ９に移行し、区画Ｋを測定対象の注
目区画情報テーブルに追加するとともに、抽出した最初
と最後の注目細胞データのインデックスをステップＳ１
０にて注目区画Ｋに保存する。

【００６０】次に、注目データ検索手段４４は、ステッ
プＳ１１に移行し、区画カウンタＫをＫ＝Ｋ＋１にカウ
ントアップして、次の区画について再度ステップＳ２以
下の処理を行う。

【００６１】以上の工程ステップＳ２からステップＳ１
１を全ての区画について繰り返すと、注目データ検索手
段４４は、測定対象となる注目区画の注目区画情報テー
ブル及び注目細胞データの注目細胞データ・データベー
ス４６を作成する。例えば、図２において黒丸で示す細
胞４７は、抽出された注目細胞データに対応するとする
と、黒墨部分が測定対象の注目区画となる。

【００６２】次に、注目データ取得手段３０は、注目デ
ータ検索手段４４によって抽出された細胞４７の細胞デ
ータに従い、その注目区画３３の座標に基づいて測定制
御部２３を通してガルバノミラー６を回動させるととも
に走査ステージ１１を作動させて、標本１０に対してレ
ーザスポットを二次元走査し、各細胞の発する蛍光及び
散乱光の信号を取得する。そして、注目データ取得手段
３０は、上記同様に個々の細胞の蛍光積算値、最大蛍光
値、面積などの細胞データを取得する。

【００６３】このとき、注目データ取得手段３０は、注
目外の細胞データも抽出するので、注目細胞との距離が
最も近く、かつ閾値Ｒ以内である細胞データのみ抽出す
る。

【００６４】すなわち、注目データ取得手段３０は、図
７に示すデータ取得フローチャートに従って行われるス
テップＳ２０で、注目区画カウンタＫを０に設定し、次
のステップＳ２１で注目区画カウンタＫが総注目区画数
Ｎｒ未満であるかを判断し、Ｎｒ未満である場合は、ス
テップＳ２２に移動し、注目区画Ｋの走査データを取得
する。

【００６５】次に、注目データ取得手段３０は、ステッ
プＳ２３で収集した走査画像から注目細胞データを取得
する。次のステップＳ２４では、注目細胞のインデック
スＬを注目区画Ｋの先頭の細胞インデックスに設定す
る。

【００６６】次に、注目データ取得手段３０は、ステッ
プＳ２５で、その注目細胞インデックスＬが当該注目区
画Ｋの最後の細胞インデックス以下であるかを判断し、
以下である場合はステップＳ２６で注目細胞インデック
スＬで参照される注目細胞データにもっとも近い細胞デ
ータを、上記ステップＳ２２で抽出した細胞データから
検索する。

【００６７】次に、注目データ取得手段３０は、ステッ
プＳ２７にて、上記ステップＳ２２で検索した細胞と注
目細胞インデックスＬで参照される注目細胞データの細
胞との距離が閾値Ｒｔよりも小さい場合は、その細胞デ
ータを注目細胞データＬに保存する。

【００６８】次に、注目データ取得手段３０は、ステッ
プＳ２９にて細胞インデックスＬをＬ＝Ｌ＋１にカウン
トアップして、次の注目細胞データについて再度ステッ
プＳ２５以下の処理を行なう。

【００６９】以上の工程ステップＳ２５からステップＳ
２９を注目区画Ｋ内の細胞データについて繰り返すと、
注目データ取得手段３０は、ステップＳ２５からステッ
プＳ３０に移行し、注目区画カウンタＫをＫ＝Ｋ＋１に
カウントアップして、次の注目区画について再度ステッ
プＳ２１以下の処理を行う。

【００７０】以上の工程ステップを行えば、統計グラフ
上で選択した細胞データに対して測定し、新しく注目区
画管理テーブル４５と注目細胞データ・データベース４
６を作成することができる。

【００７１】このように上記第１の実施の形態において
は、統計処理されたデータから注目する細胞データ群を
選択する注目データ選択手段４０と、この注目データ選
択手段４０により選択された細胞データ群の細胞データ
を注目細胞データとして抽出するとともにこの細胞デー
タが位置する測定範囲内の区画を注目区画として抽出す
る注目データ検索手段４４と、この注目データ検索手段
４４により抽出された注目細胞データを取得する注目デ
ータ取得手段３０とを備えたので、標本１０の細胞個々
の特徴を示す細胞データを統計処理して得られる統計グ
ラフ上で注目する細胞データに対応する細胞を再度測定
する作業を自動化でき、又統計グラフ上で注目する細胞
データに対応する細胞の顕微鏡画像を自動的に記録する
ことができ、これにより観察者の観察効率を向上でき
る。

【００７２】(2)次に本発明の第２の実施の形態につい
て説明する。なお、図１と同一部分には同一符号を付し
てその詳しい説明は省略する。

【００７３】図８は走査型サイトメータの構成図であっ
て、上記第１の実施の形態に対して、選択的細胞像取得
手段５０を備えたものである。

【００７４】この選択的細胞像取得手段５０は、注目デ
ータ検索手段４４により抽出された注目細胞データを取
り出し、これら注目細胞データの座標に従って順次標本
１０の光学像を取り込み、所望の細胞像を取得する機能
を有するものである。

【００７５】このような構成であれば、サイトメータ
は、上記第１の実施の形態と同様な動作を行なうととも
に、選択的細胞像取得手段５０は、注目データ検索手段
４４によって抽出した細胞データ・データベース３５内
の細胞データを順番に取り出し、その座標を顕微鏡画像
上に順次再現する。そして、予め観察者が指定しておい
た大きさの細胞像を取得し注目細胞データに加える。

【００７６】図９は細胞像が再現される顕微鏡画像を表
示するウィンドウを説明したものである。ウィンドウ５
１の内部には、顕微鏡画像が表示され、再現される細胞
５２は、観察者が指定しておいた範囲５３の内部に入
る。細胞像は、範囲５３内部の画像を切り出して記録さ
れる。すなわち注目細胞データ０，１，２，３…の各々
に対して顕微鏡画像が追加される。ここで細胞データに
追加した顕微鏡画像は注目細胞データを参照するときに
モニタ２２ａ上のウィンドウに表示することができる。

【００７７】このように上記第２の実施の形態によれ
ば、注目データ検索手段４４により抽出された注目細胞
データを取り出し、これらの注目細胞データの座標に従
って順次標本１０の光学像を取り込んで所望の細胞像を
取得する選択的細胞像取得手段５０を備えたので、上記
第１の実施の形態の効果に加えて、統計グラフ上で注目
するデータに対応する注目細胞を測定及び、その細胞像
を取得する作業を自動化することができる。

【００７８】なお、本発明は上記第１及び第２の実施の
形態に限定されるものではなく種々変形可能である。

【００７９】

【発明の効果】以上詳記したように本発明によれば、統
計グラフ上で注目する細胞データに対応する細胞を再測
定する作業を自動化でき、かつ統計グラフ上で注目する
細胞データに対応する細胞の顕微鏡画像を自動的に記録
できて観察者の観察効率を向上できる走査型サイトメー
タを提供できる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明に係わる走査型サイトメータの第１の実
施の形態を示す構成図。

【図２】レーザ走査型測定装置の測定範囲の区画への分
割を説明するための模式図。

【図３】区画管理テーブル及び細胞データ・データベー
スの構成を示す模式図。

【図４】レーザ走査型測定装置の測定範囲の区画及び区
画に含まれる細胞像の関係を示す概略図。

【図５】モニタ上に表示される総計グラフを示す図。

【図６】注目データの検索手順を示す注目データ検索フ
ローチャート。

【図７】注目データに対応する実際の細胞を測定する手
順を示すデータ取得フローチャート。

【図８】本発明に係わる走査型サイトメータの第２の実
施の形態を示す構成図。

【図９】顕微鏡画像として再現された細胞が表示された
ウィンドウを示す図。

【符号の説明】

１…レーザ走査型測定装置、２…制御装置、１０…標本、１１…走査ステージ、３…レーザ光源、６…ガルバノミラー、１４…光電子倍増管、１８…フォトダイオード、８…光路切換ミラー、２１…顕微鏡観察光学系、１９…透過照明光源、２０…落射照明光源、２２ａ…モニタ、２３…測定制御部、２４…細胞データ取得部、２５…細胞データ検索部、２６…細胞データ解析部、２７…細胞データ取得手段、２８…区画分割手段、２９…細胞データ格納手段、３０…注目データ取得手段、４０…注目データ選択手段、４４…注目データ検索手段、３４…区画管理テーブル、３５…細胞データ・デーベース、４５…注目区画管理テーブル、４６…注目細胞データ・データベース、５０…選択的細胞像取得手段。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ｇ０２Ｂ 21/36 Ｇ０２Ｂ 21/36 Ｆターム(参考） 2G043 AA04 BA16 DA02 EA01 EA10 EA14 HA01 HA02 KA09 LA01 LA02 LA07 NA02 NA06 2G045 AA24 BA13 BB24 CB01 FA11 FA14 FA16 FA19 FB07 FB12 GC15 JA04 2G059 BB14 CC16 EE07 GG01 GG03 JJ07 JJ11 KK01 KK02 KK10 MM02 PP04 2H052 AA00 AA07 AA09 AB25 AC04 AC05 AC15 AC34 AD19 AF06 AF13 AF14 AF22 AF23 AF25 4B063 QA05 QQ05 QQ08 QQ09 QR66 QR90 QS39 QX02

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】光ビームを細胞集団から成る標本の測定
範囲に二次元走査してこの測定範囲の光学像を取り込
み、この光学像から前記標本の細胞個々の特徴を示す細
胞データを抽出し、この細胞データを統計処理により解
析してその結果を提示する走査型サイトメータにおい
て、前記統計処理されたデータから注目する細胞データ群を
選択する注目データ選択手段と、この注目データ選択手段により選択された前記細胞デー
タ群の細胞データを注目細胞データとして抽出するとと
もにこの細胞データが位置する前記測定範囲内の区画を
注目区画として抽出する注目データ検索手段と、この注目データ検索手段により抽出された前記注目細胞
データを取得する注目データ取得手段と、を具備したこ
とを特徴とする走査型サイトメータ。
【請求項２】前記注目データ取得手段は、前記注目デ
ータ検索手段により抽出された前記注目区画に対して前
記光ビームを二次元走査してその光学像を取り込み、こ
の光学像から前記標本の細胞個々の前記注目細胞データ
を抽出する機能を有することを特徴とする請求項１記載
の走査型サイトメータ。
【請求項３】前記注目データ検索手段により抽出され
た前記注目細胞データを取り出し、これら注目細胞デー
タの座標に従って順次前記標本の光学像を取り込み、所
望の前記細胞像を取得する選択的細胞像取得手段を備え
たことを特徴とする請求項１記載の走査型サイトメー
タ。