JP5956752B2 - Vegfを阻害する安定かつ可溶性の抗体 - Google Patents
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Description
この出願は、2008年6月25日に出願されたUS61/133,212、2008年6月25日に出願されたUS61/075,697、2009年2月24日に出願されたUS61/155,041、および、2008年6月25日に出願されたUS61/075,692への優先権を主張する。
新脈管形成は、固形腫瘍、増殖性網膜症または加齢黄斑変性(AMD)などの眼内の新生血管形成症候群、慢性関節リウマチ、および乾癬を含めた様々な障害の病原に関係づけられる(非特許文献1;非特許文献2;および「Pathobiology of ocular disease. A dynamic approach.」Garner A、Klintworth G K編集、第2版、Marcel Dekker、NY、1625〜1710頁(1994)におけるGarner A、Vascular diseases)。固形腫瘍では、新脈管形成および新しい脈管構造の増殖が腫瘍を生存させ、腫瘍切片における微小血管の密度と、乳がんおよび他のがんにおける患者の生存との間に相関が実証されている(非特許文献3;非特許文献4;および非特許文献5)。
本発明は、ウサギモノクローナル抗体からのCDRを含む、可溶性で安定な抗VEGFイムノバインダーを提供する。前記抗体は、VEGF媒介性障害の診断および/または処置のためにデザインされている。本発明の組換え抗体を発現するためのハイブリドーマ、核酸、ベクター、および宿主細胞、これらを単離するための方法、ならびに医薬における前記抗体の使用も開示する。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
(項目1)
可変重鎖(VH)かつ/または可変軽鎖(VL)を含む組換えイムノバインダーであって、該イムノバインダーがヒトVEGFを中和しウサギCDRを含む、イムノバインダー。
(項目2)
キメラのイムノバインダーである、項目1に記載のイムノバインダー。
(項目3)
ヒト化されている、前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目4)
配列番号14、配列番号26、配列番号37、配列番号49、配列番号60、および配列番号71からなる群のコンセンサス配列に少なくとも80%の類似性を有するCDRを少なくとも1つ含む、前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目5)
配列番号2、配列番号3、配列番号15、配列番号27、配列番号38、配列番号50、および配列番号61からなる群の配列に少なくとも80%の類似性を有するCDRを少なくとも1つ含む、前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目6)
前記VHが配列番号2、配列番号15、および配列番号27からなる群のCDRを含み、かつ/または前記VLが配列番号38、配列番号50、および配列番号61からなる群のCDRを含む、項目5に記載のイムノバインダー。
(項目7)
前記VHが配列番号3、配列番号15、および配列番号27からなる群のCDRを含み、かつ/または前記VLが配列番号38、配列番号50、および配列番号61からなる群のCDRを含む、項目5に記載のイムノバインダー。
(項目8)
配列番号4、配列番号16、配列番号28、配列番号39、配列番号51、および配列番号62からなる群の配列に少なくとも80%の類似性を有するCDRを少なくとも1つ含む、項目1から4のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目9)
前記VHが配列番号4、配列番号16、配列番号28からなる群のCDRを含み、かつ/または前記VLが配列番号39、配列番号51、および配列番号62からなる群のCDRを含む、項目8に記載のイムノバインダー。
(項目10)
配列番号5、配列番号17、配列番号29、配列番号40、配列番号52、および配列番号63からなる群の配列に少なくとも80%の類似性を有するCDRを少なくとも1つ含む、項目1から4のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目11)
前記VHが配列番号5、配列番号17、配列番号29からなる群のCDRを含み、かつ/または前記VLが配列番号40、配列番号52、および配列番号63からなる群のCDRを含む、項目10に記載のイムノバインダー。
(項目12)
配列番号6、配列番号18、配列番号30、配列番号41、配列番号53、および配列番号64からなる群の配列に少なくとも80%の類似性を有するCDRを少なくとも1つ含む、項目1から4のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目13)
前記VHが配列番号6、配列番号18、および配列番号30からなる群のCDRを含み、かつ/または前記VLが配列番号41、配列番号53、および配列番号64からなる群のCDRを含む、項目12に記載のイムノバインダー。
(項目14)
配列番号7、配列番号19、配列番号31、配列番号42、配列番号54、および配列番号65からなる群の配列に少なくとも80%の類似性を有するCDRを少なくとも1つ含む、項目1から4のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目15)
前記VHが配列番号7、配列番号19、および配列番号31からなる群のCDRを含み、かつ/または前記VLが配列番号42、配列番号54、および配列番号65からなる群のCDRを含む、項目14に記載のイムノバインダー。
(項目16)
配列番号8、配列番号20、配列番号32、配列番号43、配列番号55、および配列番号66からなる群の配列に少なくとも80%の類似性を有するCDRを少なくとも1つ含む、項目1から4のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目17)
前記VHが配列番号8、配列番号20、および配列番号32からなる群のCDRを含み、かつ/または前記VLが配列番号43、配列番号55、および配列番号66からなる群のCDRを含む、項目16に記載のイムノバインダー。
(項目18)
配列番号9、配列番号21、配列番号33、配列番号44、配列番号56、および配列番号67からなる群の配列に少なくとも80%の類似性を有するCDRを少なくとも1つ含む、項目1から4のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目19)
前記VHが配列番号9、配列番号21、および配列番号33からなる群のCDRを含み、かつ/または前記VLが配列番号44、配列番号56、および配列番号67からなる群のCDRを含む、項目18に記載のイムノバインダー。
(項目20)
配列番号10、配列番号22、配列番号34、配列番号45、配列番号57、および配列番号68からなる群の配列に少なくとも80%の類似性を有するCDRを少なくとも1つ含む、項目1から4のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目21)
前記VHが配列番号10、配列番号22、および配列番号34からなる群のCDRを含み、かつ/または前記VLが配列番号45、配列番号57、および配列番号68からなる群のCDRを含む、項目20に記載のイムノバインダー。
(項目22)
配列番号11、配列番号13、配列番号23、配列番号25、配列番号35、配列番号46、配列番号58、および配列番号69からなる群の配列に少なくとも80%の類似性を有するCDRを少なくとも1つ含む、項目1から4のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目23)
前記VHが、(i)配列番号11、配列番号23、および配列番号35からなる群、(ii)配列番号11、配列番号25、および配列番号35からなる群、(iii)配列番号13、配列番号23、および配列番号35からなる群、または(iv)配列番号13、配列番号25、および配列番号35からなる群のCDRを含む、項目22に記載のイムノバインダー。
(項目24)
前記VLが、配列番号46、配列番号58、および配列番号69からなる群のCDRを含む、項目23に記載のイムノバインダー。
(項目25)
配列番号12、配列番号24、配列番号36、配列番号47、配列番号48、配列番号59、および配列番号70からなる群の配列に少なくとも80%の類似性を有するCDRを少なくとも1つ含む、項目1から4のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目26)
前記VHが、配列番号12、配列番号24、および配列番号36からなる群のCDRを含み、かつ/または前記VLが、(i)配列番号47、配列番号59、および配列番号70からなる群のCDR、もしくは(ii)配列番号48、配列番号59、および配列番号70からなる群のCDRを含む、項目25に記載のイムノバインダー。
(項目27)
配列番号169の配列に少なくとも80%の配列同一性を有する重鎖可変領域可変領域フレームワーク配列を含む、前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目28)
前記重鎖可変領域フレームワークが配列番号170または配列番号171である、項目27に記載のイムノバインダー。
(項目29)
AHoナンバリングシステムによる、前記重鎖可変領域の位置1、83、または87に欠失を有する、前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目30)
AHoナンバリングシステムによる、前記重鎖可変領域における位置2、12、24、25、46、54、55、83、84、87、89、103、105、108、または144の少なくとも1つに置換を有する、前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目31)
前記置換が、
(a)位置2のグルタミン、
(b)位置12のセリン、
(c)位置24のスレオニン、
(d)位置25のバリン、
(e)位置46のロイシン、
(f)位置54のチロシン、
(g)位置55のイソロイシン、
(h)位置83のアラニン、
(i)位置84のアスパラギン、
(j)位置87のアラニンまたはロイシン、
(k)位置89のアラニンまたはロイシン、
(l)位置103のセリンまたはスレオニン、
(m)位置105のフェニルアラニン、
(n)位置108のアルギニン、および
(o)位置144のセリンまたはスレオニン
からなる群より選択される、項目30に記載のイムノバインダー。
(項目32)
配列番号167の配列に少なくとも85%の配列同一性を有する軽鎖可変領域フレームワーク配列を含む、前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目33)
前記軽鎖可変領域フレームワークが配列番号167または配列番号168である、項目30に記載のイムノバインダー。
(項目34)
AHoナンバリングシステムによる、前記軽鎖可変領域の位置1、2、または15の少なくとも1つに置換を有する、前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目35)
前記置換が、
(a)位置1のアスパラギン酸、
(b)位置2のバリン、
(c)位置15のスレオニン
からなる群より選択される、項目34に記載のイムノバインダー。
(項目36)
配列番号107に少なくとも80%類似であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および/または配列番号72に少なくとも80%類似である軽鎖可変領域を含む、項目5から7、または27から35のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目37)
配列番号109に少なくとも80%類似であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および/または配列番号73に少なくとも80%類似である軽鎖可変領域を含む、項目8から9、または27から35のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目38)
配列番号110に少なくとも80%類似であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および/または配列番号74に少なくとも80%類似である軽鎖可変領域を含む、項目10から11、または27から35のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目39)
配列番号111に少なくとも80%類似であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および/または配列番号75に少なくとも80%類似である軽鎖可変領域を含む、項目12から13、または27から35のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目40)
配列番号112に少なくとも80%類似であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および/または配列番号76に少なくとも80%類似である軽鎖可変領域を含む、項目14から15、または27から35のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目41)
配列番号113に少なくとも80%類似であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および/または配列番号77に少なくとも80%類似である軽鎖可変領域を含む、項目16から17、または27から35のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目42)
配列番号178、配列番号179、または配列番号180に少なくとも80%の同一性を有する、項目41に記載のイムノバインダー。
(項目43)
配列番号114に少なくとも80%類似であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および/または配列番号78に少なくとも80%類似である軽鎖可変領域を含む、項目18から19、または27から35のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目44)
配列番号115に少なくとも80%類似であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および/または配列番号79に少なくとも80%類似である軽鎖可変領域を含む、項目20から21、または27から35のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目45)
配列番号177に少なくとも80%の同一性を有する、項目44に記載のイムノバインダー。
(項目46)
配列番号116に少なくとも80%類似であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および/または配列番号80に少なくとも80%類似である軽鎖可変領域を含む、項目22から24、または27から35のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目47)
配列番号117に少なくとも80%類似であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および/または配列番号81に少なくとも80%類似である軽鎖可変領域を含む、項目25から26、または27から35のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目48)
配列番号176に少なくとも80%の同一性を有する、項目47に記載のイムノバインダー。
(項目49)
前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダーと、ヒトVEGFに対する結合を競合するイムノバインダー。
(項目50)
前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダーによって認識されるヒトVEGF上のエピトープに対して、少なくとも10 7 M −1 の親和性で結合するイムノバインダー。
(項目51)
ヒトおよびラット/マウスVEGFに特異的に結合する、前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目52)
抗体、scFv、Fab、またはDabである、前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
(項目53)
前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダー、および薬学的に許容される担体を含む組成物。
(項目54)
前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダーをコードしている、単離された核酸分子。
(項目55)
項目54に記載の核酸分子を含む発現ベクター。
(項目56)
項目55に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
(項目57)
被験体がVEGF媒介性疾患について処置されるように、前述の項目のいずれか一項に記載のイムノバインダーを前記被験体に投与することを含む、被験体におけるヒトVEGF媒介性疾患を処置または予防する方法。
(項目58)
前記イムノバインダーを局所的に投与する、項目57に記載の方法。
(項目59)
前記VEGF媒介性疾患が、加齢黄斑変性、新生血管形成緑内障、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、水晶体後線維増殖症、乳癌、肺癌、胃癌、食道癌、直腸結腸癌、肝臓癌、卵巣癌、昏睡、卵巣男性胚細胞腫、子宮頸癌、子宮内膜癌、子宮内膜増殖症、子宮内膜症、線維肉腫、絨毛癌、頭部および頸部のがん、上咽頭癌、鼻咽腔癌、肝芽腫、カポジ肉腫、メラノーマ、皮膚癌、血管腫、海綿状血管腫、血管芽細胞腫、膵臓癌、網膜芽細胞腫、星細胞腫、膠芽腫、神経鞘腫、乏突起膠腫、髄芽腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫、骨原性肉腫、平滑筋肉腫、尿路癌、甲状腺癌、ウィルムス腫、腎細胞癌、前立腺癌、母斑症に付随する異常血管増殖、浮腫(脳腫瘍に付随するものなど)、メグズ症候群、慢性関節リウマチ、乾癬、ならびにアテローム性動脈硬化症からなる群より選択される、項目57または58に記載の方法。
(項目60)
配列番号60〜166、および配列番号175〜180に記載するアミノ酸配列の任意の1つを含む抗体を生成するハイブリドーマ。
(項目61)
ラット/マウスおよびヒトのVEGF、またはその部分と交差反応性であるイムノバインダーを産生、または同定するのに適する免疫原。
(項目62)
配列番号1を有する、項目61に記載の免疫原。
(項目63)
ラット/マウスおよびヒトのVEGFと交差反応性であるイムノバインダーを作製する方法であって、項目61に記載の免疫原を使用する、方法。
本発明は、ウサギモノクローナル抗体からのCDRを含む、可溶性で安定な抗VEGFイムノバインダーを提供する。前記イムノバインダーは、VEGF媒介性障害の診断および/または処置のためにデザインされている。本発明の組換え抗体を発現するためのハイブリドーマ、核酸、ベクター、および宿主細胞、これらを単離するための方法、ならびに医薬における前記抗体の使用も開示する。
本発明がより容易に理解され得るために、ある種の用語を以下の通りに定義する。さらなる定義を、詳細な説明を通して記載する。
一態様において、本発明は、VEGFに結合し、したがってインビボでVEGFの機能をブロックするのに適するイムノバインダーを提供する。これらイムノバインダーのCDRは、ヒトVEGFおよび/またはそのフラグメント(配列番号1)で免疫化したウサギから得たウサギ抗VEGFモノクローナル抗体に由来する。本発明者らの知る限りでは、モノクローナル抗VEGF抗体をウサギから得、詳しく特徴付けたのはこれが初めてである。驚くべきことに、親和性(Kd)が並はずれて高いことが見出された。
ならびに/または配列番号72、配列番号82、および配列番号93(それぞれVL60、VL60min、VL60max)からなる群より選択される配列に少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、90%、95%、最も好ましくは100%の同一性を有するVLを含むイムノバインダーを提供する。
ならびに/または配列番号73、配列番号83、および配列番号94(それぞれVL435、VL435min、およびVL435max)からなる群より選択される配列に少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、90%、95%、最も好ましくは100%の同一性を有するVLを含むイムノバインダーを提供する。
ならびに/または配列番号74、配列番号84、および配列番号95(それぞれVL453、VL453min、およびVL453max)からなる群より選択される配列に少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、90%、95%、最も好ましくは100%の同一性を有するVLを含むイムノバインダーを提供する。
ならびに/または配列番号75、配列番号85、および配列番号96(それぞれVL375、VL375min、およびVL375max)からなる群より選択される配列に少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、90%、95%、最も好ましくは100%の同一性を有するVLを含むイムノバインダーを提供する。
ならびに/または配列番号76、配列番号86、および配列番号97(それぞれVL610、VL610min、およびVL610max)からなる群より選択される配列に少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、90%、95%、最も好ましくは100%の同一性を有するVLを含むイムノバインダーを提供する。
ならびに/または配列番号77、配列番号87、配列番号92、配列番号98、配列番号103、配列番号104、および配列番号105(VL578およびその改変体)からなる群より選択される配列に少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、90%、95%、最も好ましくは100%の同一性を有するVLを含むイムノバインダーを提供する。
ならびに/または配列番号78、配列番号88、および配列番号99(それぞれVL534、VL534min、およびVL534max)からなる群より選択される配列に少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、90%、95%、最も好ましくは100%の同一性を有するVLを含むイムノバインダーを提供する。
ならびに/または配列番号79、配列番号89、および配列番号100(それぞれVL567、VL567min、およびVL567max)からなる群より選択される配列に少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、90%、95%、最も好ましくは100%の同一性を有するVLを含むイムノバインダーを提供する。
ならびに/または配列番号80、配列番号90、および配列番号101(それぞれVL509、VL509min、およびVL509max)からなる群より選択される配列に少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、90%、95%、最も好ましくは100%の同一性を有するVLを含むイムノバインダーを提供する。
ならびに/または配列番号81、配列番号91、配列番号102、および配列番号106(それぞれVL511、VL511min、VL511max、およびVL511minC41L)からなる群より選択される配列に少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、90%、95%、最も好ましくは100%の同一性を有するVLを含むイムノバインダーを提供する。
別の一態様において、本発明は、配列番号2〜211に記載するアミノ酸配列の任意の1つを含む抗体によって認識されるVEGF上のエピトープに結合する抗体を提供する。このような抗体は、それだけには限定されないがELISAを含む標準のVEGF結合アッセイにおいて、配列番号2〜211に記載するアミノ酸配列の任意の1つまたは複数を含む抗体と交差競合(cross−compete)するその能力に基づいて同定され得る。試験抗体が、配列番号2〜211に記載するアミノ酸配列の任意の1つまたは複数を含む抗体のヒトVEGFに対する結合を阻害する能力は、試験抗体が交差競合することができ、したがって配列番号2〜211に記載するアミノ酸配列の任意の1つまたは複数を含む抗体としてヒトVEGF上の重複するエピトープと相互作用することを実証している。
本発明の抗体を、機能特性の増強に対して、例えば、溶解性および/または安定性の増強に対してさらに最適化してよい。
(a)アミノ酸位置1のQまたはE;
(b)アミノ酸位置6のQまたはE;
(c)アミノ酸位置7の、T、S、またはA、より好ましくはTまたはA、さらにより好ましくはT;
(d)アミノ酸位置10の、A、T、P、V、またはD、より好ましくはT、P、V、またはD、
(e)アミノ酸位置12の、LまたはV、より好ましくはL、
(f)アミノ酸位置13の、V、R、Q、M、またはK、より好ましくはV、R、Q、またはM;
(g)アミノ酸位置14の、R、M、E、Q、またはK、より好ましくはR、M、EまたはQ、さらにより好ましくはRまたはE;
(h)アミノ酸位置19の、LまたはV、より好ましくはL;
(i)アミノ酸位置20の、R、T、K、またはN、より好ましくはR、T、またはN、さらにより好ましくはN;
(j)アミノ酸位置21の、I、F、L、またはV、より好ましくはI、F、またはL、さらにより好ましくはIまたはL;
(k)アミノ酸位置45の、RまたはK、より好ましくはK;
(l)アミノ酸位置47の、T、P、V、AまたはR、より好ましくはT、P、V、またはR、さらにより好ましくはR;
(m)アミノ酸位置50の、K、Q、H、またはE、より好ましくはK、H、またはE、さらにより好ましくはK;
(n)アミノ酸位置55の、MまたはI、より好ましくはI;
(o)アミノ酸位置77の、KまたはR、より好ましくはK;
(p)アミノ酸位置78の、A、V、L、またはI、より好ましくはA、L、またはI、さらにより好ましくはA;
(q)アミノ酸位置82の、E、R、T、またはA、より好ましくはE、T、またはA、さらにより好ましくはE;
(r)アミノ酸位置86の、T、S、I、またはL、より好ましくはT、S、またはL、さらにより好ましくはT;
(s)アミノ酸位置87の、D、S、N、またはG、より好ましくはD、N、またはG、さらにより好ましくはN;
(t)アミノ酸位置89の、A、V、L、またはF、より好ましくはA、V、またはF、さらにより好ましくはV;
(u)アミノ酸位置90の、F、S、H、D、またはY、より好ましくはF、S、H、またはD;
(v)アミノ酸位置92の、D、Q、またはE、より好ましくはDまたはQ、さらにより好ましくはD;
(w)アミノ酸位置95の、G、N、T、またはS、より好ましくはG、N、またはT、さらにより好ましくはG;
(x)アミノ酸位置98の、T、A、P、F、またはS、より好ましくはT、A、P、またはF、さらにより好ましくはF;
(y)アミノ酸位置103の、R、Q、V、I、M、F、またはL、より好ましくはR、Q、I、M、F、またはL、さらにより好ましくはY、さらにより好ましくはL;および
(z)アミノ酸位置107の、N、S、またはA、より好ましくはNまたはS、さらにより好ましくはN。
(aa)アミノ酸位置1の、Q、D、L、E、S、またはI、より好ましくはL、E、S、またはI、さらにより好ましくはLまたはE;
(bb)アミノ酸位置2の、S、A、Y、I、P、またはT、より好ましくはA、Y、I、P、またはT、さらにより好ましくはPまたはT;
(cc)アミノ酸位置3の、Q、V、T、またはI、より好ましくはV、T、またはI、さらにより好ましくはVまたはT;
(dd)アミノ酸位置4の、V、L、I、またはM、より好ましくはVまたはL;
(ee)アミノ酸位置7の、S、E、またはP、より好ましくはSまたはE、さらにより好ましくはS;
(ff)アミノ酸位置10の、TまたはI、より好ましくはI;
(gg)アミノ酸位置11の、AまたはV、より好ましくはA;
(hh)アミノ酸位置12の、SまたはY、より好ましくはY;
(ii)アミノ酸位置14の、T、S、またはA、より好ましくはTまたはS、さらにより好ましくはT;
(jj)アミノ酸位置18の、SまたはR、より好ましくはS;
(kk)アミノ酸位置20の、TまたはR、より好ましくはR;
(ll)アミノ酸位置24の、RまたはQ、より好ましくはQ;
(mm)アミノ酸位置46の、HまたはQ、より好ましくはH;
(nn)アミノ酸位置47の、K、R、またはI、より好ましくはRまたはI、さらにより好ましくはR;
(oo)アミノ酸位置50の、R、Q、K、E、T、またはM、より好ましくはQ、K、E、TまたはM;
(pp)アミノ酸位置53の、K、T、S、N、Q、またはP、より好ましくはT、S、N、Q、またはP;
(qq)アミノ酸位置56の、IまたはM、より好ましくはM;
(rr)アミノ酸位置57の、H、S、F、またはY、より好ましくはH、S、またはF;
(ss)アミノ酸位置74の、I、V、またはT、より好ましくはVまたはT、R、さらにより好ましくはT;
(tt)アミノ酸位置82の、R、Q、またはK、より好ましくはRまたはQ、さらにより好ましくはR;
(uu)アミノ酸位置91の、LまたはF、より好ましくはF;
(vv)アミノ酸位置92の、G、D、T、またはA、より好ましくはG、D、またはT、さらにより好ましくはT;
(xx)アミノ酸位置94の、SまたはN、より好ましくはN;
(yy)アミノ酸位置101の、F、Y、またはS、より好ましくはYまたはS、さらにより好ましくはS;および
(zz)アミノ酸位置103の、D、F、H、E、L、A、T、V、S、G、またはI、より好ましくはH、E、L、A、T、V、S、G、またはI、さらにより好ましくはAまたはV。
別の一態様において、本発明は、配列番号72〜81、および配列番号107〜117に記載するアミノ酸配列の任意の1つまたは複数を含むモノクローナル抗体を発現するハイブリドーマを提供する。ウサギB細胞からハイブリドーマを産生するための方法は当該分野では周知であり、例えば、米国特許出願第2005/0033031号に開示されている。
本発明の抗体または抗体誘導体を、組換え遺伝学の技術分野における日常的な技術を用いて産生してもよい。ポリペプチドの配列を知り、それをコードするcDNAを遺伝子合成によって産生することができる(www.genscript.com)。これらのcDNAを適切なベクタープラスミド中にクローニングすることができる。VLドメインおよび/またはVHドメインをコードするDNAを得た後は、例えば、変異誘発プライマーを用いたPCRにより、部位特異的変異誘発を行って様々な誘導体を得ることができる。最良の「開始」配列を、VLおよび/またはVH配列における所望の変化の数に応じて選択することができる。
別の一態様において、本発明は、本発明の抗VEGF抗体またはそのフラグメントを含む二重特異性分子を特徴としている。本発明の抗体、またはその抗原結合部分を、誘導体化し、または別のペプチドまたはタンパク質などの別の機能性分子(例えば、別の抗体もしくは受容体に対するリガンド)に連結して、少なくとも2つの異なる結合部位または標的分子に結合する二重特異性分子を産生することができる。本発明の抗体を、誘導体化するか、または2つ以上の他の機能性分子に連結して、3つ以上の異なる結合部位および/または標的分子に結合する多重特異的分子を産生することができ、このような多重特異的分子は、本明細書で用いられる「二重特異性分子」という用語によって包含されることも意図される。本発明の二重特異性分子を作り出すには、本発明の抗体を、別の抗体、抗体フラグメント、腫瘍特異的もしくは病原体特異的な抗原、ペプチド、または結合性模倣物(binding mimetic)などの1つまたは複数の他の結合性分子に、二重特異性分子が生じるように、(例えば、化学的カップリング、遺伝子融合、非共有性の会合、またはその他によって)機能的に連結してよい。したがって、本発明は、VEGFに対する特異性を有する少なくとも1つの第1の結合性分子、および1つまたは複数のさらなる標的エピトープに対する特異性を有する第2の結合性分子を含む二重特異性分子を含む。
別の一態様において、本発明は、細胞毒、薬物(例えば、免疫抑制薬)、または放射性毒などの治療用部分に結合体化している、抗VEGF抗体、またはそのフラグメントを特色としている。このような結合体を、本明細書において「イムノコンジュゲート」と呼ぶ。1つまたは複数の細胞毒を含むイムノコンジュゲートを「免疫毒素」と呼ぶ。細胞毒または細胞毒性剤には、細胞にとって有害な(例えば、死滅させる)あらゆる薬剤が含まれる。例としては、タキソール、サイトカラシンB、グラミシジンD、エチジウムブロマイド、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンD、1−デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、およびピューロマイシン、ならびにこれらの類似体または同族体が挙げられる。治療剤としては、例えば、代謝拮抗薬(例えば、メトトレキサート、6−メルカプトプリン、6−チオグアニン、シタラビン、5−フルオロウラシル、ダカルバジン(decarbazine))、アルキル化薬(例えば、メクロレタミン、チオテパ(thioepa)、クロラムブシル、メルファラン、カルムスチン(BSNU)、およびロムスチン(CCNU)、シクロホスファミド(cyclothosphamide)、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンC、およびシス−ジクロロジアミン白金(II)(DDP)、シスプラチン)、アントラサイクリン(例えば、ダウノルビシン(以前のダウノマイシン)およびドキソルビシン)、抗生物質(例えば、ダクチノマイシン(以前のアクチノマイシン)、ブレオマイシン、ミトラマイシン、およびアントラマイシン(AMC))、ならびに抗有糸分裂剤(例えば、ビンクリスチンおよびビンブラスチン)がやはり挙げられる。
治療的適用のために、本発明の抗VEGF抗体は、哺乳動物、好ましくはヒトに、局所的、眼内、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑膜内、鞘内、経口または吸入経路によって、ボーラスとしてかまたはある期間にわたる持続的注入によって、ヒトに静脈内投与できる形態を含む、本明細書で議論される形態などの、薬学的に許容される投薬形態で投与する。抗体はまた、腫瘍内、腫瘍周囲(peritumoral)、病巣内または病変周囲(perilesional)の経路によって適切に投与され、局所性および全身性治療効果をもたらす。腹腔内経路は、例えば卵巣腫瘍の処置において、特に有用であると期待される。
(a)111In、99Tc、14C、131I、125I、3H、32Pまたは35Sなどの放射性同位元素。抗体は、例えばCurrent Protocols in Immunology、1および2巻、Coligenら編、Wiley−Interscience、New York、N.Y.、Pubs.(1991年)に記載の技法を用いて、放射性同位元素により標識でき、放射活性は、シンチレーション計数器を用いて測定することができる。
(i)西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRPO)と、基質としての水素ペルオキシダーゼであり、水素ペルオキシダーゼが、色素前駆体(例えば、オルトフェニレンジアミン(OPD)または3,3’,5,5’−テトラメチルベンジジン塩酸塩(TMB))を酸化、
(ii)アルカリホスファターゼ(AP)と、色素形成基質としてのパラ−ニトロフェニルホスフェート、および
(iii)ベータ−D−ガラクトシダーゼ(ベータ−D−Gal)と色素形成基質(例えば、P−ニトロフェニル−ベータ−D−ガラクトシダーゼ)または蛍光発生基質4−メチルウンベリフェリル−ベータ−D−ガラクトシダーゼ、が挙げられる。
1つの態様では、本発明は、VEGF媒介性疾患の処置のための抗VEGF抗体を含む薬学的処方物を提供する。用語「薬学的処方物」とは、明白に有効である抗体または抗体誘導体の生物活性を可能にするような形態であり、処方物を投与した被験体に毒性のある追加の成分を含まない調製物をいう。「薬学的に許容される」賦形剤(ビヒクル、添加剤)とは、被験体である哺乳動物に合理的に投与し、採用する活性成分の有効用量を実現できるものである。
本発明の別の実施形態では、本発明の水性薬学的処方物を保持する容器を含む、製造品が提供され、その使用に関する説明書が場合によって提供される。適切な容器には、例えば、ボトル、小瓶、点眼薬アプリケーターおよび注射器が挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成することができる。典型的な容器は、3〜20ccの単回使用のガラスまたはプラスチックの小瓶である。あるいは、複数用量処方物用に、容器は3〜100ccのガラス小瓶であってよい。容器は処方物を保持し、容器上のラベルにより、または容器に付随したラベルにより、使用に関する指示を示すことができる。製造品は、商業および使用者の視点から望まれる他の物質をさらに含むことができ、これには、他の緩衝液、希釈液、フィルタ、針、注射器、および使用に関する説明のついた添付文書が挙げられる。
本開示を、さらに限定するものと解釈すべきではない以下の実施例によってさらに説明する。全ての図ならびにこの出願全体にわたって引用される全ての文献、特許および公開された特許出願の内容は、それらの全体が参照により本明細書に明示的に援用される。
一般的に、本発明の実施では、特に示さない限り、化学、分子生物学、組換えDNA技術、免疫学(特に、例えば抗体技術)の従来技法、およびポリペプチド調製の標準技法を採用する。例えば、Sambrook、FritschおよびManiatis、Molecular Cloning: Cold Spring Harbor Laboratory Press(1989年);Antibody Engineering Protocols(Methods in Molecular Biology)、510、Paul, S.、Humana Pr(1996年);Antibody Engineering: A Practical Approach(Practical Approach Series、169)、McCafferty編、Irl Pr(1996年);Antibodies: A Laboratory Manual、Harlowら、C.S.H.L. Press, Pub.(1999年);およびCurrent Protocols in Molecular Biology、Ausubelら編、John Wiley & Sons(1992年)を参照されたい。
減衰全反射フーリエ変換IR(FTIR−ATR)スペクトルを、Tensor BrukerにおけるFT−IR Bio−ATRセルを使用して、様々な単鎖および誘導体分子に関して入手した。分子を、3mg/mlまで濃縮し、PBS(pH6.5)に対して4℃で一晩中透析し、緩衝液のフロースルー(flow through)をブランクとして採取した。変性プロファイルを、5℃ステップ(25から95℃)の広範な温度で分子を熱チャレンジ(challenge)することによって入手した。全てのスペクトルの操作は、OPUSソフトウェアを用いて行った。主な緩衝液および一過性の雰囲気(CO2およびH2O)のバックグラウンドは、タンパク質スペクトルから差し引いた。結果のタンパク質スペクトルを、次いでベースライン補正し、タンパク質アミドIスペクトルを、期待される領域における最大幅の分解可能なピークの幅から決定した。第2の誘導体スペクトルを、平滑関数による3次多項式関数を用いて、アミドIバンドスペクトルに関して入手した。タンパク質構造における変化を、3つの低度測定に関して0%の変性、および3つの高度測定に関して100%変性と仮定する、初期カーブフィット(curve−fit)計算についての直線検定曲線を用いて、アミドIの第2誘導体分析によって、推定した。変性プロファイルを、ボルツマンシグモイドモデル(Boltzmann sigmoidal model)に適用する変量毎の熱アンフォールディング転移(TM)の中間点を概算するのに使用した。
様々なscFv分子の相対的な溶解性を、硫酸アンモニウムの存在下でタンパク質の凝集および沈殿を増強させた後、測定した。硫酸アンモニウムを水溶液中のタンパク質に添加し、塩−タンパク質の最終混合物における飽和を5%増加させた。動的な範囲における沈殿を実験的に決定し、飽和間隔は、最終混合物において2.5%の飽和間隔までこの範囲で減少した。硫酸アンモニウムの添加後、試料を静かに混合し、6000rpmで30分遠心分離した。上清中に残ったタンパク質を、硫酸アンモニウムの飽和のパーセント毎に回収した。溶解曲線を、NanoDropTM1000 Spectrophotometerを使用するUV−VIS測定により、上清中のタンパク質濃度を測定することによって決定した。上清中に残った可溶性タンパク質の測定を正規化し、ボルツマンシグモイドモデルに適用する変量毎の相対的な溶解性の中間点を推定するのに使用した。
scFv分子を、可溶性凝集物および分解産物の存在に関して、40℃で2週間インキュベートした後、調べた。10mg/mlの濃度のタンパク質を、広範なpH(3.5、4.5、5.5、6.5、7.0、7.5および8.5)のPBSに対して4℃で一晩中透析した。標準緩衝液PBS(pH6.5)中の同じ濃度の対照分子を、2週間の間−80℃で保管した。SDS−PAGEによる分解のバンドの決定は、t=0およびt=14d時点で行い、可溶性凝集物をSEC−HPLCにおいて評価した。40℃で2週間後、残った活性の決定を、Biacoreを使用して行った。
(抗VEGF抗体を産生するための免疫化戦略)
この実施例では、新規の抗原性VEGF由来のペプチドを使用し、ヒト、マウスおよびウサギVEGFAを認識できる抗体を産生させた免疫化戦略を記載する。
A.コンフォメーションバインダーを得る可能性を高めるための、全長ヒトVEGFA165を用いるウサギのプレ免疫化(pre−immunization)。aa長16−K FM DV Y ORS Y CHP−28(下線:受容体相互作用、二重下線、ウサギにおける不一致、Cysは結晶構造によるジスルフィド結合に関与する)由来のペプチドでの第2追加免疫。ペプチド配列中に含まれるCysは、KLHとのカップリングに使用できるので、したがって、遊離Cysとして露出しない。最終ペプチドは、KFMDVYQRSY−Cys−KLHと思われる。
B.コンフォメーションバインダーを得る可能性を高めるための、全長VEGFA165を用いるマウスのプレ免疫化。aa長16−K FM DV Y ORS Y CHP−28(Cysは、結晶構造によるジスルフィド結合に関与する)由来のペプチドでの第2追加免疫。ペプチド配列中に含まれるCysは、KLHとのカップリングに使用できるので、したがって、遊離Cysとして露出しない。最終ペプチドは、以下と思われる:KFMDVYQRSY−Cys−KLH。
C.aa長16−K FM DV Y ORS YC HP−28(最終ペプチド:KFMDVYQRSY−Cys−KLH)由来のペプチドを用いるウサギ/マウスのプレ免疫化。コンフォメーションバインダーを得る可能性を高めるための、全長VEGFA165を用いる第2追加免疫。
D.ウサギにおける全長VEGFA165を用いる免疫化。
(CDR融合およびモノクローナルウサギ抗VEGF抗体の機能的ヒト化)
(ウサギCDRの融合)
ヒトではないドナーの抗体と最大の配列相同性を共有するヒト抗体アクセプターのフレームワークを採用する、伝統的なヒト化方法とは異なり、ウサギCDRを、フレームワークFW1.4(配列番号172)に融合させてMin−graftをもたらしたか、または「ウサギ化」フレームワークrFW1.4(配列番号173)もしくはその改変体rFW1.4(v2)(配列番号174)に融合させてMax−graftをもたらした。両フレームワークは、所望の機能特性(溶解性および安定性)、多種多様なウサギCDRを収容する構造適合性、およびウサギの可変ドメインのコンセンサス配列との妥当な相同性に関して、第一に選択した。フレームワークrFW1.4は、FW1.4の誘導体であり、ウサギCDRの実質的に任意のセットに対して、普遍的なアクセプターのフレームワークとして役立てる狙いでさらに操作した。安定かつ可溶性フレームワーク配列FW1.4は、ウサギ抗体と高い相同性を示すが、利用できる最も相同性の高い配列ではない。
ウサギの各可変ドメイン配列に関して、最も近いウサギの生殖系列対応物を同定した。最も近い生殖系列が確立できなかった場合、配列は、サブグループのコンセンサスまたは高いパーセント値の類似性を有するウサギの配列のコンセンサスに対して比較した。稀なフレームワークの残基は、起こり得る体細胞過剰変異の結果であって、したがって抗原の結合に関与すると考えた。結果として、かかる残基は、アセプターフレームワークrFW1.4またはrFW1.4(v2)上に融合させて、Max−graftをもたらすためのものと考えた。特に、抗原の直接的な接触に潜在的に関係するか、またはVLおよびVHの配置に影響する残基を融合させた。さらにCDR構造に影響すると記載された残基を、必要であれば置換した。CDRをFW1.4(Min−graft)上に融合させたとき、フレームワークは置換しなかった。例えば、578minmaxを産出するために、rFW1.4の残基VH94(H94)を、ドナー配列中の対応する残基に変異させた。ウサギ抗体578は、H94にGlyを含み、一方、最も相同性の高い生殖系列およびウサギのコンセンサスの両方は、位置H94にArgを含む。Glyは、他のアミノ酸には見られない並外れた柔軟性(正のphi角度)を有する。これは、主鎖のねじれ角度における役割、および活性に関連するループコンフォメーションの強い影響の可能性を示唆する。本明細書で開示されるようなMax−graftを得るために融合させたフレームワークの位置のさらなる例は、rFW1.4、rFW1.4(v2)および本明細書で提供される目的のscFv配列のフレームワーク領域の配列をアラインメントすることによって同定することができる。当該分野で公知のウェブツールを、例えば前記目的のために使用することができる(例えば、http://www.ebi.ac.uk/Tools/clustalw2/index.htmlで2009年6月23日に利用できるようなClustalW、またはhttp://bioinfo.genotoul.fr/multalinで2009年6月23日に利用できるようなMultiAlin)。rFW1.4およびrFW1.4(v2)が同じ残基を含み、目的のscFvが異なる残基を明らかにする、全てのフレームワークの位置は、Max−graftを得るために融合させたフレームワークの位置である。
Min−graftの可変軽鎖を、Max−graftの可変重鎖と組み合わせて、生物物理学的特性(溶解性および安定性)および活性に関して最適な組合せを同定した。
本明細書で記載および特徴付けされるscFvを、以下のように産生した。ヒト化VL配列(配列番号82〜106)を、配列番号181のリンカーを介して、ヒト化VH配列(配列番号118〜166)に連結させ、以下の配向のscFv:NH2−VL−リンカー−VH−COOHを産出した。多くの場合、様々なscFvをコードするDNA配列を、サービス会社Entelechon GmbH(www.entelechon.com)で新規に合成した。結果のDNA挿入物を、scFvのDNA配列の5’および3’末端にそれぞれ導入したNcoIおよびHindIIIの制限酵素認識部位を介して、細菌発現ベクターpGMP002にクローニングした。VLドメインのDNA配列とVHドメインのDNA配列との間に、BamHI制限酵素認識部位が位置する。いくつかの場合、scFvをコードするDNAを新規に合成せず、scFv発現構築物を、ドメインシャッフルによってクローニングした。したがって、NcoIおよびBamHI制限酵素認識部位を介して、VLドメインを切り出して新しい構築物に導入し、BamHIおよびHindIII制限酵素認識部位を介して、VHドメインを切り出して新しい構築物に導入した。他の場合、点変異を、先端技術のアッセンブルPCR(assembling PCR)方法を用いて、VHおよび/またはVLドメインに導入した。GMP002のクローニングは、WO2008006235の実施例1に記載されている。scFvの産生は、WO2008006235の実施例1に記載のESBA105に関して類似的に行った。
(抗VEGF scFvのBiacore結合分析)
この実施例では、scFvのBiacore結合能を試験し、結合親和性を、BIAcoreTM−T100による、典型的な表面プラズモン共鳴法を用いて測定した。この実施例および後の実施例において、これらのscFv候補による結合を試験したVEGFタンパク質には、精製したEscherichia coli発現の組換えヒトVEGF165(PeproTech EC Ltd.)、組換えヒトVEGF121(PeproTech EC Ltd.)、組換えヒトVEGF110(ESBATech AG)、組換えマウスVEGF164(PeproTech EC Ltd.)、組換えラットVEGF164(Biovision)、組換えウサギVEGF110(ESBATech AG)、および組換えヒトPLGF(PeproTech EC Ltd.)が含まれる。表面プラズモン共鳴実験のために、カルボキシメチル化デキストランのバイオセンサーチップ(CM4、GE Healthcare)を、供給業者の説明書に従って、N−エチル−N’−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミドヒドロクロリドおよびN−ヒドロキシスクシンイミドを用いて活性化した。上記に例示された6つの異なる各VEGF形態を、標準的なアミンカップリング手順を用いて、CM4センサーチップ上の4つの異なるフローセルのうちの1つにカップリングさせた。カップリングおよびブロッキングの後、これらの固定化したVEGF分子により得られた応答の範囲は、hVEGF165に関しては約250〜500応答単位(RU)、hVEGF110、hVEGF121、マウスVEGF164、ラットVEGF164およびウサギVEGF110に関しては約200RU、ならびにPLGFに関しては約400RUであった。タンパク質をブロッキングの前に固定化しなかったことを除き、各チップの第4のフローセルを同様に処理し、フローセルをインラインの参照として使用した。HBS−EP緩衝液(0.01MのHEPES、 pH7.4または5、0.15MのNaCl、3mMのEDTA、0.005%界面活性剤P20)中の抗VEGF scFvの様々な濃度(例えば、90nM、30nM、10nM、3.33nM、1.11nM、0.37nM、0.12nMおよび0.04nM)を、5分間、30μl/分の流速でフローセルに注入した。CM4チップ上のVEGFからの抗VEGF scFvの解離を、25℃で10分間進行させた。インライン参照のセル補正に続いて緩衝液試料を差し引いた後、センサーグラム(sensorgram)を各抗VEGF scFv試料に関して作成した。見かけの解離速度定数(kd)、見かけの会合速度定数(ka)、および見かけの解離平衡定数(KD)を、BIAcoreT100評価ソフトウェアバージョン1.1を用いて、1対1のLangmuir結合モデル(one−to−one Langmuir binding model)を使用して計算した。
(VEGF受容体ブロッキングアッセイ)
本発明で開示される抗VEGF scFv候補またはそれらの誘導体に関して、実施例3におけるVEGFへのそれらの結合親和性に加えて、VEGFインヒビターとしてのそれらの能力も測定した。それらの能力を測定するための方法には、例えば、この実施例で例示されるようなVEGFR競合ELISA、およびHUVECアッセイが挙げられる(図8)。
(VEGF阻害のHUVECアッセイ)
この実施例では、開示された、VEGFインヒビターとしての抗VEGF scFv候補またはそれらの誘導体の能力を測定する別の方法として、HUVECアッセイを例示する。
(無毛モルモットにおけるhVEGF165誘導型血管性透過への抗VEGF scFvの効果)
この実施例では、ヒトVEGF165誘導型血管性透過への抗VEGF scFvの効果を、Milesアッセイを用いてモルモットにおいて評価した。1匹の動物につき30箇所の適用部位を、耐久性マーカーを用いて雄性の無毛モルモットの背側上にマークした。処置日に、全身麻酔の下、1%エバンスブルー色素溶液1mlを、各動物に静脈内投与した。色素注射して1時間後、2.61nMの組換えヒトVEGF165(PeproTech EC Ltd.)および様々な濃度の抗VEGF scFv(0nM、0.085nM、0.256nM、0.767nM、2.3nM、6.9nM、20.7nM、62.1nM;試験アイテムにつきn=7の動物)を含む試験溶液0.1mlを、背側上のマークに3連で注射した(試験アイテムの濃度につき3注射)。PBSの注射を、全動物における負の対照として供給した。追加の対照として、6.9nMのルセンティス(Novartis)を全動物において注射した。
(ラットにおけるhVEGF165誘導型網膜血管性漏出に対する局所的抗VEGF scFv処置の効果)
この実験では、578minmaxの局所的効能を、修正したMilesアッセイを用いて実証する。これらの修正には、例えば、scFvの硝子体内注射および局所適用を用いる前混合試験が含まれる。
前述の記載を考慮して、本発明の多くの修正および代替の実施形態が、当業者に明らかである。したがって、この記載は、単なる例示として解釈すべきであり、本発明を実施するのに最良の様式を当業者に教示するためのものである。構造の詳細は、本発明の精神から逸脱することなく実質的に変えることができ、添付の特許請求の範囲内となる全ての修正の独占的使用権を保有する。本発明は、添付の特許請求の範囲および法律の適用可能な規則によって要求される程度にのみ制限されるものであると意図する。
Claims (19)
- ヒトVEGFを中和し、ウサギCDRを含む、可変重鎖(VH)および可変軽鎖(VL)を含む組換えイムノバインダーであって、
a)該VHが配列番号137のアミノ酸配列を含み、かつ該VLが配列番号99のアミノ酸配列を含むか;
b)該VHが配列番号138のアミノ酸配列を含み、かつ該VLが配列番号100のアミノ酸配列を含むか;
c)該VHが配列番号139または140のアミノ酸配列を含み、かつ該VLが配列番号101のアミノ酸配列を含むか;
d)該VHが配列番号11、配列番号23、および配列番号35からなる群のCDRを含み、かつ該VLが配列番号46、配列番号58、および配列番号69からなる群のCDRを含み、該VHは配列番号169または配列番号170のフレームワーク配列に少なくとも95%の配列同一性を有するVHフレームワーク配列を含み、該VLは配列番号167のフレームワーク配列に少なくとも95%の配列同一性を有するVLフレームワーク配列を含むか;
e)該VHが配列番号10、配列番号22、および配列番号34からなる群のCDRを含み、かつ該VLが配列番号45、配列番号57、および配列番号68からなる群のCDRを含み、該VHは配列番号169または配列番号170のフレームワーク配列に少なくとも95%の配列同一性を有するVHフレームワーク配列を含み、該VLは配列番号167のフレームワーク配列に少なくとも95%の配列同一性を有するVLフレームワーク配列を含むか;または
f)該VHが、配列番号12、配列番号24、および配列番号36からなる群のCDRを含み、かつ該VLが、配列番号48、配列番号59、および配列番号70からなる群のCDRを含み、該VHは配列番号169または配列番号170のフレームワーク配列に少なくとも95%の配列同一性を有するVHフレームワーク配列を含み、該VLは配列番号167のフレームワーク配列を含む、イムノバインダー。 - キメラのイムノバインダーである、請求項1に記載のイムノバインダー。
- ヒト化されている、請求項1または2に記載のイムノバインダー。
- 配列番号176に少なくとも95%の同一性を有する、請求項1〜3のいずれか1項に記載のイムノバインダー。
- 抗体、scFvまたはFabである、請求項1〜4のいずれか一項に記載のイムノバインダー。
- 請求項1〜5のいずれか一項に記載のイムノバインダー、および薬学的に許容される担体を含む組成物。
- 請求項1〜5のいずれか一項に記載のイムノバインダーをコードしている、単離された核酸分子。
- 請求項7に記載の核酸分子を含む発現ベクター。
- 請求項8に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
- ヒトVEGF媒介性疾患の処置または予防のための医薬の製造における、請求項1〜5のいずれか一項に記載のイムノバインダーの使用。
- 請求項1〜5のいずれか一項に記載のイムノバインダーを含む、ヒトVEGF媒介性疾患を処置または予防するための組成物。
- 前記VEGF媒介性疾患が、加齢黄斑変性、新生血管形成緑内障、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、水晶体後線維増殖症、乳癌、肺癌、胃癌、食道癌、直腸結腸癌、肝臓癌、卵巣癌、昏睡、卵巣男性胚細胞腫、子宮頸癌、子宮内膜癌、子宮内膜増殖症、子宮内膜症、線維肉腫、絨毛癌、頭部および頸部のがん、上咽頭癌、鼻咽腔癌、肝芽腫、カポジ肉腫、メラノーマ、皮膚癌、血管腫、海綿状血管腫、血管芽細胞腫、膵臓癌、網膜芽細胞腫、星細胞腫、膠芽腫、神経鞘腫、乏突起膠腫、髄芽腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫、骨原性肉腫、平滑筋肉腫、尿路癌、甲状腺癌、ウィルムス腫、腎細胞癌、前立腺癌、母斑症に付随する異常血管増殖、浮腫、メグズ症候群、慢性関節リウマチ、乾癬、ならびにアテローム性動脈硬化症からなる群より選択される、請求項10に記載の使用。
- 前記VEGF媒介性疾患が、加齢黄斑変性、新生血管形成緑内障、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、水晶体後線維増殖症、乳癌、肺癌、胃癌、食道癌、直腸結腸癌、肝臓癌、卵巣癌、昏睡、卵巣男性胚細胞腫、子宮頸癌、子宮内膜癌、子宮内膜増殖症、子宮内膜症、線維肉腫、絨毛癌、頭部および頸部のがん、上咽頭癌、鼻咽腔癌、肝芽腫、カポジ肉腫、メラノーマ、皮膚癌、血管腫、海綿状血管腫、血管芽細胞腫、膵臓癌、網膜芽細胞腫、星細胞腫、膠芽腫、神経鞘腫、乏突起膠腫、髄芽腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫、骨原性肉腫、平滑筋肉腫、尿路癌、甲状腺癌、ウィルムス腫、腎細胞癌、前立腺癌、母斑症に付随する異常血管増殖、浮腫、メグズ症候群、慢性関節リウマチ、乾癬、ならびにアテローム性動脈硬化症からなる群より選択される、請求項11に記載の組成物。
- 局所投与、眼内投与、経口投与、経鼻投与、直腸投与または非経口投与のために処方される、請求項6に記載の組成物。
- 哺乳動物におけるVEGF媒介性疾患の処置のための組成物であって、該組成物は、薬学的に許容される投薬形態で、請求項1〜5のいずれか一項に記載のイムノバインダー、または請求項7に記載の単離された核酸分子、または請求項8に記載の発現ベクター、または請求項9に記載の宿主細胞、または請求項13に記載の組成物を含み、そして該組成物は、局所的経路、眼内経路、筋肉内経路、腹腔内経路、脳脊髄内経路、皮下経路、関節内経路、滑膜内経路、鞘内経路、経口経路、または吸入経路により投与されることを特徴とする、組成物。
- 前記哺乳動物がヒトである、請求項15に記載の組成物。
- F(ab’)2またはFab’である、請求項1〜4のいずれか一項に記載の組換えイムノバインダー。
- scFvである請求項5に記載の組換えイムノバインダーであって、前記重鎖可変領域と前記軽鎖可変領域とが配列番号181の配列によって連結されている、組換えイムノバインダー。
- 請求項17〜18のいずれか一項に記載の組換えイムノバインダー、および薬学的に許容される担体を含む組成物。
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CN105431204A (zh) | 2013-07-12 | 2016-03-23 | 奥普索特克公司 | 用于治疗或预防眼科病的方法 |
WO2015076425A1 (ja) * | 2013-11-25 | 2015-05-28 | リンク・ジェノミクス株式会社 | 新規モノクローナル抗体 |
EP3492495A1 (en) | 2014-05-12 | 2019-06-05 | Formycon AG | Pre-filled plastic syringe containing a vegf antagonist |
WO2015198243A2 (en) | 2014-06-25 | 2015-12-30 | Novartis Ag | Compositions and methods for long acting proteins |
WO2015198240A2 (en) | 2014-06-25 | 2015-12-30 | Novartis Ag | Compositions and methods for long acting proteins |
US9840553B2 (en) | 2014-06-28 | 2017-12-12 | Kodiak Sciences Inc. | Dual PDGF/VEGF antagonists |
GB201412658D0 (en) | 2014-07-16 | 2014-08-27 | Ucb Biopharma Sprl | Molecules |
KR102390359B1 (ko) | 2014-09-29 | 2022-04-22 | 삼성전자주식회사 | 폴리펩타이드, 이를 포함하는 항 VEGF 항체 및 항 c-Met/항 VEGF 이중 특이 항체 |
TWI705827B (zh) * | 2014-11-07 | 2020-10-01 | 瑞士商諾華公司 | 治療眼部疾病之方法 |
CR20170240A (es) | 2014-11-10 | 2018-04-03 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-interleucina-33 y sus usos |
WO2016120753A1 (en) * | 2015-01-28 | 2016-08-04 | Pfizer Inc. | Stable aqueous anti- vascular endothelial growth factor (vegf) antibody formulation |
WO2016168768A2 (en) | 2015-04-16 | 2016-10-20 | Alder Biopharmaceuticals, Inc. | Anti-pacap antibodies and uses thereof |
US10851399B2 (en) * | 2015-06-25 | 2020-12-01 | Native Microbials, Inc. | Methods, apparatuses, and systems for microorganism strain analysis of complex heterogeneous communities, predicting and identifying functional relationships and interactions thereof, and selecting and synthesizing microbial ensembles based thereon |
GB201601073D0 (en) | 2016-01-20 | 2016-03-02 | Ucb Biopharma Sprl | Antibodies |
GB201601077D0 (en) | 2016-01-20 | 2016-03-02 | Ucb Biopharma Sprl | Antibody molecule |
US20180230540A1 (en) | 2015-08-12 | 2018-08-16 | Novartis Ag | Methods of treating ophthalmic disorders |
HUE054093T2 (hu) | 2015-10-30 | 2021-08-30 | Hoffmann La Roche | Anti-HtrA1 antitestek és azok alkalmazási eljárásai |
JP7037148B2 (ja) * | 2015-11-09 | 2022-03-16 | 国立大学法人京都工芸繊維大学 | ヒト血清由来IgGポリクローナル抗体の分離剤、及び、それを用いたヒト血清由来IgGポリクローナル抗体を分離する方法 |
EP3377100A1 (en) | 2015-11-18 | 2018-09-26 | Formycon AG | Pre-filled pharmaceutical package comprising a liquid formulation of a vegf-antagonist |
US20180326126A1 (en) | 2015-11-18 | 2018-11-15 | Formycon Ag | Pre-filled plastic syringe containing a vegf antagonist |
RU2751510C2 (ru) | 2015-11-18 | 2021-07-14 | Сио2 Медикал Продактс, Инк. | Фармацевтическая упаковка для офтальмологических составов |
GB201521382D0 (en) | 2015-12-03 | 2016-01-20 | Ucb Biopharma Sprl | Antibodies |
GB201521389D0 (en) | 2015-12-03 | 2016-01-20 | Ucb Biopharma Sprl | Method |
RU2744860C2 (ru) | 2015-12-30 | 2021-03-16 | Кодиак Сайенсиз Инк. | Антитела и их конъюгаты |
CN108699141B (zh) | 2016-01-06 | 2022-06-17 | 定制药品研究株式会社 | 高亲和性抗vegf抗体 |
US11008387B2 (en) | 2016-01-06 | 2021-05-18 | Order-Made Medical Research Inc. | Antibody inhibiting binding of VEGF to NRP1 |
USD789171S1 (en) | 2016-01-21 | 2017-06-13 | Nomis Llc | Right angle drive |
EP3407868A1 (en) | 2016-01-26 | 2018-12-05 | Formycon AG | Liquid formulation of a vegf antagonist |
JP2019512210A (ja) * | 2016-02-05 | 2019-05-16 | ザ ボード オブ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティー オブ テキサス システム | Egfl6特異的モノクローナル抗体及びそれらの使用方法 |
WO2017156423A2 (en) * | 2016-03-11 | 2017-09-14 | Integrated Biotherapeutics, Inc. | Broadly protective antibody cocktails for treatment of filovirus hemorrhagic fever |
EP3222673A1 (de) * | 2016-03-23 | 2017-09-27 | LANXESS Deutschland GmbH | Metallazopigmente |
US10202435B2 (en) | 2016-04-15 | 2019-02-12 | Alder Biopharmaceuticals, Inc. | Anti-PACAP antibodies and uses thereof |
DK3479819T3 (da) | 2016-06-30 | 2024-04-15 | Celltrion Inc | Stabilt væskeformigt farmaceutisk præparat |
CN109890982B (zh) | 2016-07-08 | 2023-07-07 | 基因泰克公司 | 通过nrf2及其下游目标基因的表达状态和突变状态诊断和治疗癌症的方法 |
CN110382002A (zh) * | 2017-03-09 | 2019-10-25 | Mab发现股份有限公司 | 特异性结合人il-1r7的抗体 |
JOP20190245A1 (ar) | 2017-04-20 | 2019-10-15 | Novartis Ag | أنظمة توصيل إطلاق مستدام تتضمن روابط بلا أثر لنقطة الربط |
EP3624847A1 (en) | 2017-05-19 | 2020-03-25 | Council of Scientific and Industrial Research | A method for producing refolded recombinant humanized ranibizumab |
WO2018217995A1 (en) | 2017-05-24 | 2018-11-29 | Formycon Ag | Sterilizable pre-filled pharmaceutical packages comprising a liquid formulation of a vegf-antagonist |
EP3630062A2 (en) | 2017-05-24 | 2020-04-08 | SiO2 Medical Products, Inc. | Sterilizable pharmaceutical package for ophthalmic formulations |
WO2018215580A1 (en) | 2017-05-24 | 2018-11-29 | Formycon Ag | Method for sterilizing prefilled plastic syringes containing a vegf antagonist |
CN110799540B (zh) * | 2017-06-25 | 2024-02-13 | 西雅图免疫公司 | 多特异性抗体及其制备和使用方法 |
WO2019020777A1 (en) | 2017-07-26 | 2019-01-31 | Formycon Ag | LIQUID FORMULATION OF A VEGF ANTAGONIST |
FI3717636T3 (fi) | 2017-11-27 | 2023-06-01 | 4D Molecular Therapeutics Inc | Adenoassosioidun viruksen kapsidivariantteja ja käyttö angiogeneesin estämisessä |
CN111479588A (zh) * | 2017-12-29 | 2020-07-31 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于改善抗vegf抗体的vegf受体阻断选择性的方法 |
EP3740509A4 (en) * | 2018-01-17 | 2022-06-22 | Apexigen, Inc. | ANTI-PD-L1 ANTIBODIES AND METHODS OF USE |
JP6938796B2 (ja) | 2018-03-16 | 2021-09-22 | ノバルティス アーゲー | 眼疾患を治療するための方法 |
JP2021517583A (ja) * | 2018-04-06 | 2021-07-26 | イーライ リリー アンド カンパニー | 小児患者における癌の治療のためのラムシルマブ |
JP7397874B2 (ja) | 2018-08-30 | 2023-12-13 | エイチシーダブリュー バイオロジックス インコーポレイテッド | 多鎖キメラポリペプチドおよびその使用 |
US11401324B2 (en) | 2018-08-30 | 2022-08-02 | HCW Biologics, Inc. | Single-chain chimeric polypeptides and uses thereof |
AU2019328575A1 (en) | 2018-08-30 | 2021-02-25 | HCW Biologics, Inc. | Single-chain and multi-chain chimeric polypeptides and uses thereof |
US10894824B2 (en) | 2018-09-24 | 2021-01-19 | Aerpio Pharmaceuticals, Inc. | Multispecific antibodies that target HPTP-β (VE-PTP) and VEGF |
AU2019407063A1 (en) | 2018-12-18 | 2021-05-27 | Novartis Ag | Protein solution formulation containing high concentration of an anti-VEGF antibody |
USD907456S1 (en) | 2019-05-21 | 2021-01-12 | Nomis Llc | Right angle drill attachment |
USD907455S1 (en) | 2019-05-21 | 2021-01-12 | Nomis Llc | Right angle drive attachment |
US11738052B2 (en) | 2019-06-21 | 2023-08-29 | HCW Biologics, Inc. | Multi-chain chimeric polypeptides and uses thereof |
CN114375201A (zh) | 2019-09-13 | 2022-04-19 | 诺华股份有限公司 | 治疗眼部疾病的方法 |
CA3157509A1 (en) | 2019-10-10 | 2021-04-15 | Kodiak Sciences Inc. | Methods of treating an eye disorder |
IL295084A (en) | 2020-02-11 | 2022-09-01 | Hcw Biologics Inc | Chromatography resin and its uses |
IL295077A (en) | 2020-02-11 | 2022-09-01 | Hcw Biologics Inc | Methods for treating age-related and inflammatory diseases |
IL295083A (en) | 2020-02-11 | 2022-09-01 | Hcw Biologics Inc | Methods for activating regulatory t cells |
WO2021174127A1 (en) * | 2020-02-28 | 2021-09-02 | Apexigen, Inc. | Anti-sirpa antibodies and methods of use |
KR20220152316A (ko) * | 2020-03-12 | 2022-11-15 | 이뮨-온크 테라퓨틱스, 인코포레이티드 | 신규한 항-lilrb4 항체 및 유도체 생성물 |
WO2021183849A1 (en) | 2020-03-13 | 2021-09-16 | Genentech, Inc. | Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof |
CN115836087A (zh) | 2020-04-29 | 2023-03-21 | Hcw生物科技公司 | 抗cd26蛋白及其用途 |
JP2023527869A (ja) | 2020-06-01 | 2023-06-30 | エイチシーダブリュー バイオロジックス インコーポレイテッド | 加齢関連障害の治療法 |
WO2021247003A1 (en) | 2020-06-01 | 2021-12-09 | HCW Biologics, Inc. | Methods of treating aging-related disorders |
TW202216761A (zh) | 2020-07-16 | 2022-05-01 | 瑞士商諾華公司 | 抗β細胞素抗體、其片段及多特異性結合分子 |
IL302089A (en) | 2020-10-15 | 2023-06-01 | Hoffmann La Roche | Non-covalent protein-hyaluronan conjugates for long-term ocular delivery |
TW202237181A (zh) | 2020-11-25 | 2022-10-01 | 瑞士商諾華公司 | 治療眼部疾病之方法 |
WO2022201084A1 (en) | 2021-03-26 | 2022-09-29 | Novartis Ag | Methods for treating ocular diseases |
EP4145456A1 (en) | 2021-09-06 | 2023-03-08 | Bayer AG | Prediction of a change related to a macular fluid |
KR20230094450A (ko) | 2021-12-21 | 2023-06-28 | 한림대학교 산학협력단 | 항-cldn18.2를 포함하는 키메릭 항원 수용체를 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 이의 제조 방법 |
WO2023168363A1 (en) | 2022-03-02 | 2023-09-07 | HCW Biologics, Inc. | Method of treating pancreatic cancer |
TW202337496A (zh) | 2022-03-17 | 2023-10-01 | 瑞士商諾華公司 | 治療新生血管性年齡相關性黃斑點退化之方法 |
Family Cites Families (73)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4275149A (en) | 1978-11-24 | 1981-06-23 | Syva Company | Macromolecular environment control in specific receptor assays |
US4376110A (en) | 1980-08-04 | 1983-03-08 | Hybritech, Incorporated | Immunometric assays using monoclonal antibodies |
US4737456A (en) | 1985-05-09 | 1988-04-12 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Reducing interference in ligand-receptor binding assays |
US6548640B1 (en) | 1986-03-27 | 2003-04-15 | Btg International Limited | Altered antibodies |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
US4946778A (en) | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
US5260203A (en) | 1986-09-02 | 1993-11-09 | Enzon, Inc. | Single polypeptide chain binding molecules |
US4881175A (en) | 1986-09-02 | 1989-11-14 | Genex Corporation | Computer based system and method for determining and displaying possible chemical structures for converting double- or multiple-chain polypeptides to single-chain polypeptides |
US5013653A (en) | 1987-03-20 | 1991-05-07 | Creative Biomolecules, Inc. | Product and process for introduction of a hinge region into a fusion protein to facilitate cleavage |
US5258498A (en) | 1987-05-21 | 1993-11-02 | Creative Biomolecules, Inc. | Polypeptide linkers for production of biosynthetic proteins |
ATE120761T1 (de) | 1987-05-21 | 1995-04-15 | Creative Biomolecules Inc | Multifunktionelle proteine mit vorbestimmter zielsetzung. |
US5091513A (en) | 1987-05-21 | 1992-02-25 | Creative Biomolecules, Inc. | Biosynthetic antibody binding sites |
US5132405A (en) | 1987-05-21 | 1992-07-21 | Creative Biomolecules, Inc. | Biosynthetic antibody binding sites |
WO1989006692A1 (en) | 1988-01-12 | 1989-07-27 | Genentech, Inc. | Method of treating tumor cells by inhibiting growth factor receptor function |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US5147638A (en) | 1988-12-30 | 1992-09-15 | Oklahoma Medical Research Foundation | Inhibition of tumor growth by blockade of the protein C system |
GB8928874D0 (en) | 1989-12-21 | 1990-02-28 | Celltech Ltd | Humanised antibodies |
US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
US6582959B2 (en) | 1991-03-29 | 2003-06-24 | Genentech, Inc. | Antibodies to vascular endothelial cell growth factor |
OA10149A (en) | 1991-03-29 | 1996-12-18 | Genentech Inc | Vascular endothelial cell growth factor antagonists |
ES2206447T3 (es) | 1991-06-14 | 2004-05-16 | Genentech, Inc. | Anticuerpo humanizado para heregulina. |
CA2145985C (en) | 1992-10-28 | 2003-09-16 | Napoleone Ferrara | Vascular endothelial cell growth factor antagonists |
IL117645A (en) | 1995-03-30 | 2005-08-31 | Genentech Inc | Vascular endothelial cell growth factor antagonists for use as medicaments in the treatment of age-related macular degeneration |
US5730977A (en) | 1995-08-21 | 1998-03-24 | Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. | Anti-VEGF human monoclonal antibody |
RU2270030C2 (ru) | 1996-02-09 | 2006-02-20 | Абботт Байотекнолоджи эЛтиди. | СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ АКТИВНОСТИ ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО TNFα (ВАРИАНТЫ), ПРИМЕНЕНИЕ ВЫДЕЛЕННОГО АНТИТЕЛА ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕГО АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩЕГО ФРАГМЕНТА В КАЧЕСТВЕ КОМПОНЕНТА ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА (ВАРИАНТЫ) И ВЫДЕЛЕННОЕ ЧЕЛОВЕЧЕСКОЕ АНТИТЕЛО ИЛИ ЕГО АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЙ ФРАГМЕНТ |
JP2000516452A (ja) * | 1996-07-16 | 2000-12-12 | プリュックテュン,アンドレアス | 可溶性が増大した免疫グロブリンスーパーファミリードメインおよびフラグメント |
US6986890B1 (en) | 1996-11-21 | 2006-01-17 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Anti-human VEGF receptor Flt-1 monoclonal antibody |
EP0973804B1 (en) * | 1997-04-07 | 2006-12-27 | Genentech, Inc. | Anti-vegf antibodies |
US20020032315A1 (en) | 1997-08-06 | 2002-03-14 | Manuel Baca | Anti-vegf antibodies |
US20070059302A1 (en) | 1997-04-07 | 2007-03-15 | Genentech, Inc. | Anti-vegf antibodies |
EP3260468A1 (en) * | 1997-04-07 | 2017-12-27 | Genentech, Inc. | Anti-vegf antibodies |
WO2000034337A1 (en) | 1998-12-10 | 2000-06-15 | Tsukuba Research Laboratory, Toagosei Co., Ltd. | Humanized monoclonal antibodies against vascular endothelial cell growth factor |
AU3737500A (en) | 1999-03-12 | 2000-09-28 | Genentech Inc. | Method of preventing the death of retinal neurons and treating ocular diseases |
US6703020B1 (en) | 1999-04-28 | 2004-03-09 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Antibody conjugate methods for selectively inhibiting VEGF |
WO2000064946A2 (en) | 1999-04-28 | 2000-11-02 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Compositions and methods for cancer treatment by selectively inhibiting vegf |
WO2001030393A2 (en) | 1999-10-22 | 2001-05-03 | Ludwig Institute For Cancer Research | Methods for reducing the effects of cancers that express a33 antigen using a33 antigen specific immunoglobulin products |
EP2392596A3 (en) | 1999-12-28 | 2013-11-27 | ESBATech, an Alcon Biomedical Research Unit LLC | Intrabodies with defined framework that is stable in a reducing environment and applications thereof |
GB0013810D0 (en) | 2000-06-06 | 2000-07-26 | Celltech Chiroscience Ltd | Biological products |
US7667004B2 (en) | 2001-04-17 | 2010-02-23 | Abmaxis, Inc. | Humanized antibodies against vascular endothelial growth factor |
DE10201450B4 (de) | 2002-01-16 | 2004-09-02 | Infineon Technologies Ag | Carry-Skip-Addierer für verschlüsselte Daten |
US6576941B1 (en) | 2002-02-20 | 2003-06-10 | Samsung Electronics Co., Ltd. | Ferroelectric capacitors on protruding portions of conductive plugs having a smaller cross-sectional size than base portions thereof |
CN1187373C (zh) * | 2002-03-20 | 2005-02-02 | 上海中信国健药业有限公司 | 人源化抗血管内皮生长因子单克隆抗体及其制法和药物组合物 |
WO2003080672A1 (en) | 2002-03-22 | 2003-10-02 | Aprogen, Inc. | Humanized antibody and process for preparing same |
US8853362B2 (en) | 2002-05-22 | 2014-10-07 | Esbatech, An Alcon Biomedical Research Unit Llc | Immunoglobulin frameworks which demonstrate enhanced stability in the intracellular environment and methods of identifying same |
CA2492524A1 (en) * | 2002-08-15 | 2004-02-26 | Epitomics, Inc. | Humanized rabbit antibodies |
MXPA05012723A (es) | 2003-05-30 | 2006-02-08 | Genentech Inc | Tratamiento con anticuerpos anti-vgf. |
US20050048578A1 (en) * | 2003-06-26 | 2005-03-03 | Epitomics, Inc. | Methods of screening for monoclonal antibodies with desirable activity |
US7758859B2 (en) | 2003-08-01 | 2010-07-20 | Genentech, Inc. | Anti-VEGF antibodies |
US20050106667A1 (en) | 2003-08-01 | 2005-05-19 | Genentech, Inc | Binding polypeptides with restricted diversity sequences |
WO2005044853A2 (en) * | 2003-11-01 | 2005-05-19 | Genentech, Inc. | Anti-vegf antibodies |
CA2533830A1 (en) * | 2003-08-07 | 2005-02-24 | Epitomics, Inc. | Methods for humanizing rabbit monoclonal antibodies |
PL1781321T3 (pl) | 2004-08-02 | 2014-07-31 | Zenyth Operations Pty Ltd | Sposób leczenia raka zawierający antagonistę VEGF-B |
SI1802334T1 (sl) | 2004-10-21 | 2012-12-31 | Genentech, Inc. | Postopek za zdravljenje intraokularnih neovaskularnih bolezni |
US7462697B2 (en) * | 2004-11-08 | 2008-12-09 | Epitomics, Inc. | Methods for antibody engineering |
US7431927B2 (en) * | 2005-03-24 | 2008-10-07 | Epitomics, Inc. | TNFα-neutralizing antibodies |
AU2006281980A1 (en) * | 2005-08-15 | 2007-02-22 | Cephalon Australia Pty Ltd | Engineered antibodies with new world primate framework regions |
AR059066A1 (es) | 2006-01-27 | 2008-03-12 | Amgen Inc | Combinaciones del inhibidor de la angiopoyetina -2 (ang2) y el inhibidor del factor de crecimiento endotelial vascular (vegf) |
WO2007140534A1 (en) * | 2006-06-08 | 2007-12-13 | Csl Limited | Vegf-a cross-reactive anti- vegf-b antibodies as antagonists of vegf-a and vegf-b signalling |
SI2046382T1 (sl) | 2006-07-10 | 2016-12-30 | ESBATech an Alcon Biomedical Research Unit LLC | Protitelesa scFv, ki prehajajo epitelijske in/ali endotelijske plasti |
WO2008063932A2 (en) | 2006-11-10 | 2008-05-29 | Genentech, Inc. | Method for treating age-related macular degeneration |
US7553486B2 (en) | 2006-11-13 | 2009-06-30 | Paul Theodore Finger | Anti-VEGF treatment for radiation-induced vasculopathy |
SG10201503407WA (en) | 2006-12-19 | 2015-06-29 | Genentech Inc | Vegf-specific antagonists for adjuvant and neoadjuvant therapy and the treatment of early stage tumors |
US8280711B2 (en) | 2007-03-12 | 2012-10-02 | ESBATech, an Alcon Biomedical Research Unit, LLC. | Sequence based engineering and optimization of single chain antibodies |
KR20100018040A (ko) | 2007-06-06 | 2010-02-16 | 도만티스 리미티드 | 프로테아제 내성 폴리펩티드를 선택하는 방법 |
KR20100040840A (ko) | 2007-06-06 | 2010-04-21 | 도만티스 리미티드 | 폴리펩티드,항체 가변 도메인 및 길항제 |
WO2009000098A2 (en) | 2007-06-25 | 2008-12-31 | Esbatech Ag | Sequence based engineering and optimization of single chain antibodies |
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AU2008353479B2 (en) * | 2008-03-26 | 2014-02-20 | Epitomics, Inc. | Anti-VEGF antibody |
RU2514658C2 (ru) | 2008-06-25 | 2014-04-27 | ИЭсБиЭйТЕК, ЭН АЛЬКОН БАЙОМЕДИКАЛ РИСЕРЧ ЮНИТ ЭлЭлСи | Оптимизация растворимости иммуносвязывающих средств |
CN110372792A (zh) * | 2008-06-25 | 2019-10-25 | 艾斯巴技术-诺华有限责任公司 | 抑制vegf的稳定和可溶的抗体 |
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KR20170084357A (ko) * | 2009-12-23 | 2017-07-19 | 에스바테크 - 어 노바티스 컴파니 엘엘씨 | 면역원성의 감소 방법 |
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