JP7397874B2 - 多鎖キメラポリペプチドおよびその使用 - Google Patents

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Description

関連出願の相互参照
本出願は、各々参照により全体が本明細書に組み込まれる、２０１８年８月３０日に出願された米国特許出願第６２／７２４，９６９号、２０１９年３月１２日に出願された米国特許出願第６２／８１７，２３０号、２０１８年８月３０日に出願された米国特許出願第６２／７２５，０４３号、２０１８年８月３０日に出願された米国特許出願第６２／７２５，０１０号、２０１８年１０月２２日に出願された米国特許出願第６２／７４９，００７号、２０１８年１０月１７日に出願された米国特許出願第６２／７４６，８３２号、２０１８年１０月２３日に出願された米国特許出願第６２／７４９，５０６号、２０１９年３月１２日に出願された米国特許出願第６２／８１７，２４１号、２０１９年３月１１日に出願された米国特許出願第６２／８１６，６８３号、および２０１９年７月３１日に出願された米国特許出願第６２／８８１，０８８号に対する優先権を主張する。
技術分野
本開示は、バイオテクノロジーの分野、より具体的には、抗原結合分子に関する。
約４６ｋＤａの分子量を有する２６３アミノ酸内在性膜糖タンパク質であり、かつ外因性血液凝固経路のトリガータンパク質である組織因子（ＴＦ）は、インビボでの凝固の主要な開始因子である。通常、循環血液と接触していない組織因子は、循環凝固セリンプロテアーゼ因子への曝露時に凝固カスケードを開始する。血管損傷は、組織因子を発現する内皮下細胞を露出させ、既存の血漿因子ＶＩＩａ（ＦＶＩＩａ）とのカルシウム依存性高親和性複合体の形成をもたらす。セリンプロテアーゼＦＶＩＩａの組織因子への結合は、ＦＸからＦＸａおよびＦＩＸからＦＩＸａへの迅速な切断を促進する。その後、結果として生じたＦＸａおよび活性膜表面のタンパク質分解活性は、少量のプロトロンビンを非効率的にトロンビンに変換する。ＦＸａによって生成されたトロンビンは、血小板活性化を開始し、微量のプロ補因子である第Ｖ因子（ＦＶ）および第ＶＩＩＩ因子（ＦＶＩＩＩ）を活性化して、活性補因子である第Ｖａ因子（ＦＶａ）および第ＶＩＩＩａ因子（ＦＶＩＩＩａ）になる。ＦＩＸａは、血小板表面でＦＶＩＩＩａと複合体を形成して、内因性テナーゼ複合体を形成し、これにより、ＦＸａが急速に生成される。ＦＸａは、ＦＶａと複合体を形成して、活性化された血小板表面にプロトロンビナーゼ複合体を形成し、これにより、プロトロンビンがトロンビンに迅速に切断される。
組織因子－ＦＶＩＩａ複合体に加えて、最近の研究では、組織因子－ＦＶＩＩａ－ＦＸａ複合体がＦＶＩＩＩを活性化することができ、これにより、開始段階で追加のレベルのＦＶＩＩＩａが提供されることが示された。外因性経路が限られた量のトロンビンの活性化により凝固を開始する際に最も重要である一方で、内因性経路は、初期シグナルの劇的な増幅により凝固を維持する。
細胞表面に発現する組織因子の多くは「暗号化」されており、凝固に完全に関与するには「暗号解読」されなければならない。細胞表面組織因子の「暗号解読」のメカニズムは、現時点では依然として不明であるが、アニオン性リン脂質の曝露がこのプロセスで主要な役割を果たしている。健常な細胞は、ホスファチジルセリン（ＰＳ）等のアニオン性リン脂質を原形質膜の内側の小葉に能動的に隔離する。細胞損傷、活性化、または細胞質Ｃａ２＋レベルの増加後、この二層非対称性が失われ、外側の小葉にＰＳ曝露が増加し、これにより、細胞表面組織因子－ＦＶＩＩａ複合体の比活性が増加する。ＰＳ曝露が組織因子－ＦＶＩＩａ複合体によるＦＩＸおよびＦＸの活性化の見かけのＫｍを低下させることで知られているが、追加のメカニズムには、組織因子または組織因子－ＦＶＩＩａの立体配座再配置およびその後の基質結合部位の曝露が含まれ得る。
本発明は、可溶性組織因子が抗原結合ドメインを含むキメラポリペプチドの足場として使用され得るという発見に基づく。この発見に基づいて、（ａ）（ｉ）第１の標的結合ドメインと、（ｉｉ）可溶性組織因子ドメインと、（ｉｉｉ）一対の親和性ドメインの第１のドメインとを含む、第１のキメラポリペプチド、および（ｂ）（ｉ）一対の親和性ドメインの第２のドメインと、（ｉｉ）第２の標的結合ドメインとを含む、第２のキメラポリペプチドを含み、第１のキメラポリペプチドと第２のキメラポリペプチドが、一対の親和性ドメインの第１のドメインと第２のドメインとの結合を介して会合している、多鎖キメラポリペプチドが、本明細書に提供される。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを含む組成物、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする核酸、および本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする核酸のうちのいずれかを含む細胞も本明細書に提供される。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかの使用を含む、免疫細胞を刺激する方法および治療を必要とする対象を治療する方法も本明細書に提供される。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを産生する方法も本明細書に提供される。
したがって、
（ａ）（ｉ）第１の標的結合ドメインと、
（ｉｉ）可溶性組織因子ドメインと、
（ｉｉｉ）一対の親和性ドメインの第１のドメインと
を含む、第１のキメラポリペプチド、および
（ｂ）（ｉ）一対の親和性ドメインの第２のドメインと、
（ｉｉ）第２の標的結合ドメインと
を含む、第２のキメラポリペプチド
を含み、第１のキメラポリペプチドと第２のキメラポリペプチドが、一対の親和性ドメインの第１のドメインと第２のドメインとの結合を介して会合している、多鎖キメラポリペプチドが、本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じ抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、異なる抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、抗原結合ドメインである。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々、抗原結合ドメインである。いくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体を含む。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、ＣＤ１６ａ、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ３３、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－１、ＶＥＧＦ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＰＤＬ－１、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、ＣＴＬＡ４、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＣＤ２６ａ、ＣＤ３６、ＵＬＢＰ２、ＣＤ３０、ＣＤ２００、ＩＧＦ－１Ｒ、ＭＵＣ４ＡＣ、ＭＵＣ５ＡＣ、Ｔｒｏｐ－２、ＣＭＥＴ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、Ｂ７Ｈ３、ＥＰＣＡＭ、ＢＣＭＡ、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡＣＡＭ５、ＵＬ１６結合タンパク質、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＬＬ４、ＴＹＲＯ３、ＡＸＬ、ＭＥＲ、ＣＤ１２２、ＣＤ１５５、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）リガンド、ＴＧＦ－βＲＩＩＩリガンド、ＤＮＡＭ－１リガンド、ＮＫｐ４６リガンド、ＮＫｐ４４リガンド、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＫｐ３０リガンド、ｓｃＭＨＣＩリガンド、ｓｃＭＨＣＩＩリガンド、ｓｃＴＣＲリガンド、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－２１受容体、ＰＤＧＦ－ＤＤ受容体、幹細胞因子（ＳＣＦ）受容体、幹細胞様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）受容体、ＭＩＣＡ受容体、ＭＩＣＢ受容体、ＵＬＰ１６結合タンパク質受容体、ＣＤ１５５受容体、ＣＤ１２２受容体、およびＣＤ２８受容体からなる群から選択される標的に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、可溶性インターロイキン、可溶性サイトカインタンパク質、またはリガンドタンパク質である。いくつかの実施形態では、可溶性インターロイキン、可溶性サイトカイン、またはリガンドタンパク質は、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＳＣＦ、およびＦＬＴ３Ｌからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、可溶性インターロイキン、サイトカイン受容体、または可溶性細胞表面受容体である。いくつかの実施形態では、可溶性受容体は、可溶性ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）、可溶性ＴＧＦ－βＲＩＩＩ、可溶性ＮＫＧ２Ｄ、可溶性ＮＫｐ３０、可溶性ＮＫｐ４４、可溶性ＮＫｐ４６、可溶性ＤＮＡＭ－１、ｓｃＭＨＣＩ、ｓｃＭＨＣＩＩ、ｓｃＴＣＲ、可溶性ＣＤ１５５、または可溶性ＣＤ２８である。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（複数可）をさらに含み、１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの少なくとも１つは、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間に位置付けられている。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、可溶性組織因子ドメインと１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの少なくとも１つとの間にリンカー配列、および／または１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの少なくとも１つと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つは、第１のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第１のドメインに直接隣接している。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインに直接隣接している。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと第１の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つは、第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に配置されており、１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間に位置付けられている。いくつかの実施形態では、Ｎ末端に配置された１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つの追加の標的結合ドメインは、第１のキメラポリペプチド内の標的結合ドメインまたは第１の一対の親和性ドメインの第１のドメインに直接隣接している。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと第１の標的結合ドメインまたは一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、Ｃ末端に配置された１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つの追加の標的結合ドメインは、第１のキメラポリペプチド内の標的結合ドメインまたは第１の一対の親和性ドメインの第１のドメインに直接隣接している。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと第１の標的結合ドメインまたは一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間に位置付けられた１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つは、可溶性組織因子ドメインおよび／または一対の親和性ドメインの第１のドメインに直接隣接している。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、（ｉ）可溶性組織因子ドメインと、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間に位置付けられた１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つとの間、および／または（ｉｉ）一対の親和性ドメインの第１のドメインと、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間に位置付けられた１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインに直接隣接している。いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと一対の親和性ドメインの第２のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つは、第２のキメラポリペプチド内の第２の標的結合ドメインに直接隣接している。いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上は、同じ抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上は、同じエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上は、同じアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインは各々、同じ抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインは各々、同じエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインは各々、同じアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインは、異なる抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の標的結合ドメインのうちの１つ以上は、抗原結合ドメインである。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインは各々、抗原結合ドメインである。いくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の標的結合ドメインのうちの１つ以上は、ＣＤ１６ａ、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ３３、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－１、ＶＥＧＦ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＰＤＬ－１、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、ＣＴＬＡ４、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＣＤ２６ａ、ＣＤ３６、ＵＬＢＰ２、ＣＤ３
０、ＣＤ２００、ＩＧＦ－１Ｒ、ＭＵＣ４ＡＣ、ＭＵＣ５ＡＣ、Ｔｒｏｐ－２、ＣＭＥＴ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、Ｂ７Ｈ３、ＥＰＣＡＭ、ＢＣＭＡ、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡＣＡＭ５、ＵＬ１６結合タンパク質、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＬＬ４、ＴＹＲＯ３、ＡＸＬ、ＭＥＲ、ＣＤ１２２、ＣＤ１５５、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）リガンド、ＴＧＦ－βＲＩＩＩリガンド、ＤＮＡＭ－１リガンド、ＮＫｐ４６リガンド、ＮＫｐ４４リガンド、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＫｐ３０リガンド、ｓｃＭＨＣＩリガンド、ｓｃＭＨＣＩＩリガンド、ｓｃＴＣＲリガンド、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－２１受容体、ＰＤＧＦ－ＤＤ受容体、幹細胞因子（ＳＣＦ）受容体、幹細胞様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）受容体、ＭＩＣＡ受容体、ＭＩＣＢ受容体、ＵＬＰ１６結合タンパク質受容体、ＣＤ１５５受容体、ＣＤ１２２受容体、およびＣＤ３受容体、およびＣＤ２８受容体からなる群から選択される標的に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの１つ以上は、可溶性インターロイキン、可溶性サイトカインタンパク質、またはリガンドタンパク質である。いくつかの実施形態では、可溶性インターロイキン、可溶性サイトカイン、またはリガンドタンパク質は、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＳＣＦ、およびＦＬＴ３Ｌからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの１つ以上は、可溶性インターロイキンまたはサイトカイン受容体である。いくつかの実施形態では、可溶性受容体は、可溶性ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）、可溶性ＴＧＦ－βＲＩＩＩ、可溶性ＮＫＧ２Ｄ、可溶性ＮＫｐ３０、可溶性ＮＫｐ４４、可溶性ＮＫｐ４６、可溶性ＤＮＡＭ－１、ｓｃＭＨＣＩ、ｓｃＭＨＣＩＩ、ｓｃＴＣＲ、可溶性ＣＤ１５５、可溶性ＣＤ１２２、可溶性ＣＤ３、または可溶性ＣＤ２８である。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む。いくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、可溶性ヒト組織因子ドメインである。いくつかの実施形態では、可溶性ヒト組織因子ドメインは、配列番号１と少なくとも８０％同一の配列を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ヒト組織因子ドメインは、配列番号１と少なくとも９０％同一の配列を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ヒト組織因子ドメインは、配列番号１と少なくとも９５％同一の配列を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ヒト組織因子ドメインは、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちの１つ以上を含まない。いくつかの実施形態では、可溶性ヒト組織因子ドメインは、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちのいずれも含まない。いくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、第ＶＩＩａ因子に結合することができない。いくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、不活性第Ｘ因子を第Ｘａ因子に変換しない。いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドは、哺乳動物における血液凝固を刺激しない。本明細書に提供される一本鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ヒト可溶性組織因子ドメインは、血液凝固を開始しない。本明細書に提供される一本鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、可溶性野生型ヒト組織因子を含むか、またはそれからなる。
いくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、ヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）由来のｓｕｓｈｉドメインと可溶性ＩＬ－１５である。いくつかの実施形態では、可溶性ＩＬ１５は、Ｄ８ＮまたはＤ８Ａアミノ酸置換を有する。いくつかの実施形態では、ヒトＩＬ１５Ｒαは、成熟全長ＩＬ１５Ｒαである。いくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、バルナーゼとバルンスター、ＰＫＡとＡＫＡＰ、変異ＲＮａｓｅ Ｉ断片に基づくアダプター／ドッキングタグモジュール、ならびに、タンパク質シンタキシン、シナプトタグミン、シナプトブレビン、およびＳＮＡＰ２５の相互作用に基づくＳＮＡＲＥモジュールからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドおよび／または第２のキメラポリペプチドは、そのＮ末端にシグナル配列をさらに含む。
いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドは、組成物を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、医薬組成物である。いくつかの実施形態では、組成物は、多鎖キメラポリペプチドの少なくとも１つの用量を含む。いくつかの実施形態では、キットは、組成物の少なくとも１つの用量を含む。
いくつかの実施形態では、免疫細胞を刺激する方法であって、免疫細胞を、上述の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは組成物の有効量と接触させることを含む、方法が本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫細胞をインビトロで接触させることを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫細胞を対象から得ることを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、接触させるステップの前に、免疫細胞を対象から得ることを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫細胞をインビボで接触させることを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から免疫細胞を選択することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するように免疫細胞を遺伝子修飾することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、接触させるステップの後に、免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断することを含む。いくつかの実施形態では、加齢関連疾患または状態は、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、がんを有すると特定または診断することを含む。いくつかの実施形態では、がんは、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、感染性疾患を有すると診断または特定することを含む。いくつかの実施形態では、感染性疾患は、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である。
免疫細胞の増殖を誘導するまたは増加させる方法であって、免疫細胞を、上述の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは組成物の有効量と接触させることを含む、方法も本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫細胞をインビトロで接触させることを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫細胞を対象から得ることを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、接触させるステップの前に、免疫細胞を対象から得ることを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫細胞をインビボで接触させることを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から免疫細胞を選択することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するように免疫細胞を修飾することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、接触させるステップの後に、免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断することを含む。いくつかの実施形態では、加齢関連疾患または状態は、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、がんを有すると特定または診断することを含む。いくつかの実施形態では、がんは、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、感染性疾患を有すると診断または特定することを含む。いくつかの実施形態では、感染性疾患は、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である。
免疫細胞のメモリーまたはメモリー様免疫細胞への分化を誘導する方法であって、免疫細胞を、上述の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは組成物の有効量と接触させることを含む、方法も本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫細胞をインビトロで接触させることを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫細胞を対象から得ることを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、接触させるステップの前に、免疫細胞を対象から得ることをさらに含む。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫細胞をインビボで接触させることを含む。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている。いくつかの実施形態では、この方法は、接触させるステップの後に、免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断することを含む。いくつかの実施形態では、加齢関連疾患または状態は、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、がんを有すると特定または診断することを含む。いくつかの実施形態では、がんは、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、感染性疾患を有すると診断または特定することを含む。いくつかの実施形態では、感染性疾患は、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である。
がん細胞、感染細胞、または老化細胞の死滅を必要とする対象におけるがん細胞、感染細胞、または老化細胞を死滅させる方法であって、対象に、上述の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは組成物の治療有効量を投与することを含む、方法も本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、がんを有すると特定または診断することを含む。いくつかの実施形態では、がんは、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、老化に関連する病気または状態を有すると特定または診断することを含む。いくつかの実施形態では、加齢関連疾患または状態は、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、この方法は、対象に、上述の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは組成物の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、がんを有すると特定または診断することを含む。いくつかの実施形態では、がんは、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、老化に関連する病気または状態を有すると特定または診断することを含む。いくつかの実施形態では、加齢関連疾患または状態は、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、この方法は、対象を、感染性疾患を有すると診断または特定することを含む。いくつかの実施形態では、感染性疾患は、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である。
上述の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする核酸も本明細書に提供される。いくつかの実施形態は、上述の核酸のうちのいずれかを含むベクターを含む。いくつかの実施形態では、ベクターは、発現ベクターである。いくつかの実施形態は、上述の核酸のうちのいずれかを含む細胞を含む。
多鎖キメラポリペプチドを産生する方法であって、多鎖キメラポリペプチドの産生をもたらすのに十分な条件下で、細胞を培養培地中で培養すること、ならびに多鎖キメラポリペプチドを細胞および／または培養培地から回収することを含む方法も、本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、この方法は、上述の方法によって多鎖キメラポリペプチドを産生することを含む。
いくつかの実施形態では、変異体可溶性ヒト組織因子ドメインは、配列番号３と少なくとも８０％同一の配列を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ヒト組織因子ドメインは、配列番号３と少なくとも９０％同一の配列を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ヒト組織因子ドメインは、配列番号３と少なくとも９５％同一の配列を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と１００％同一の配列を含む、請求項１４０に記載の多鎖キメラポリペプチド。いくつかの実施形態では、可溶性ヒト組織因子ドメインは、配列番号４と少なくとも８０％同一の配列を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ヒト組織因子ドメインは、配列番号４と少なくとも９０％同一の配列を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ヒト組織因子ドメインは、配列番号４と少なくとも９５％同一の配列を含む。いくつかの実施形態では、可溶性ヒト組織因子ドメインは、配列番号４と１００％同一の配列を含む。
本明細書で使用される場合、「キメラ」という用語は、元来２つの異なる源（例えば、同じ種または異なる種由来の、例えば、２つの異なる天然に存在するタンパク質）に由来するアミノ酸配列（例えば、ドメイン）を含むポリペプチドを指す。例えば、キメラポリペプチドは、少なくとも２つの異なる天然に存在するヒトタンパク質由来のドメインを含み得る。いくつかの例では、キメラポリペプチドは、合成配列であるドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）および天然に存在するタンパク質（例えば、天然に存在するヒトタンパク質）に由来するドメインを含み得る。いくつかの実施形態では、キメラポリペプチドは、合成配列である少なくとも２つの異なるドメイン（例えば、２つの異なるｓｃＦｖ）を含み得る。
「抗原結合ドメイン」とは、１つ以上の異なる抗原（複数可）に特異的に結合することができる１つ以上のタンパク質ドメイン（複数可）（例えば、単一のポリペプチド由来のアミノ酸から形成されるか、または２つ以上のポリペプチド（例えば、同じまたは異なるポリペプチド）由来のアミノ酸から形成される）である。いくつかの例では、抗原結合ドメインは、天然に存在する抗体と同様の特異性および親和性で抗原またはエピトープに結合することができる。いくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、抗体またはその断片であり得る。いくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、代替足場を含み得る。抗原結合ドメインの非限定的な例が本明細書に記載されている。抗原結合ドメインの追加の例が当該技術分野で既知である。
「可溶性組織因子ドメイン」とは、膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインを欠く野生型哺乳動物組織因子タンパク質（例えば、野生型ヒト組織因子タンパク質）のセグメントと少なくとも７０％の同一性（例えば、少なくとも７５％の同一性、少なくとも８０％の同一性、少なくとも８５％の同一性、少なくとも９０％の同一性、少なくとも９５％の同一性、少なくとも９９％の同一性、または１００％同一性）を有するポリペプチドを指す。可溶性組織因子ドメインの非限定的な例が本明細書に記載されている。
「可溶性インターロイキンタンパク質」という用語は、成熟分泌インターロイキンタンパク質またはその生物学的に活性な断片を指すために本明細書で使用される。いくつかの例では、可溶性インターロイキンタンパク質は、野生型成熟分泌哺乳動物インターロイキンタンパク質（例えば、野生型ヒトインターロイキンタンパク質）と少なくとも７０％同一、少なくとも７５％同一、少なくとも８０％同一、少なくとも８５％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９５％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一であり、かつその生物学的活性を保持する配列を含み得る。可溶性インターロイキンタンパク質の非限定的な例が本明細書に記載されている。
「可溶性サイトカインタンパク質」という用語は、成熟分泌サイトカインタンパク質またはその生物学的に活性な断片を指すために本明細書で使用される。いくつかの例では、可溶性サイトカインタンパク質は、野生型成熟分泌哺乳動物インターロイキンタンパク質（例えば、野生型ヒトインターロイキンタンパク質）と少なくとも７０％同一、少なくとも７５％同一、少なくとも８０％同一、少なくとも８５％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９５％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一であり、かつその生物学的活性を保持する配列を含み得る。可溶性サイトカインタンパク質の非限定的な例が本明細書に記載されている。
「可溶性インターロイキン受容体」という用語は、本明細書で最も広い意味で使用され、（例えば、生理学的条件下で、例えば、室温のリン酸緩衝生理食塩水中で）その天然リガンドのうちの１つ以上に結合することができる膜貫通ドメイン（および任意に細胞内ドメイン）を欠くポリペプチドを指す。例えば、可溶性インターロイキン受容体は、野生型インターロイキン受容体の細胞外ドメインと少なくとも７０％同一（例えば、少なくとも７５％同一、少なくとも８０％同一、少なくとも８５％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９５％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）であり、かつその天然リガンドのうちの１つ以上に特異的に結合する能力を保持するが、その膜貫通ドメインを欠く（任意にさらに細胞内ドメインを欠く）配列を含み得る。可溶性インターロイキン受容体の非限定的な例が本明細書に記載されている。
「可溶性サイトカイン受容体」という用語は、本明細書で最も広い意味で使用され、（例えば、生理学的条件下で、例えば、室温のリン酸緩衝生理食塩水中で）その天然リガンドのうちの１つ以上に結合することができる膜貫通ドメイン（および任意に細胞内ドメイン）を欠くポリペプチドを指す。例えば、可溶性サイトカイン受容体は、野生型サイトカイン受容体の細胞外ドメインと少なくとも７０％同一（例えば、少なくとも７５％同一、少なくとも８０％同一、少なくとも８５％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９５％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）であり、かつその天然リガンドのうちの１つ以上に特異的に結合する能力を保持するが、その膜貫通ドメインを欠く（任意にさらに細胞内ドメインを欠く）配列を含み得る。可溶性サイトカイン受容体の非限定的な例が本明細書に記載されている。
「抗体」という用語は、本明細書でその最も広い意味で使用され、抗原またはエピトープに特異的に結合する１つ以上の抗原結合ドメインを含むある特定のタイプの免疫グロブリン分子を含む。抗体には、具体的には、例えば、インタクトな抗体（例えば、インタクトな免疫グロブリン）、抗体断片、および多重特異性抗体が含まれる。抗原結合ドメインの一例は、ＶＨ－ＶＬ二量体によって形成された抗原結合ドメインである。抗体の追加の例が本明細書に記載されている。抗体の追加の例は当該技術分野で既知である。
「親和性」とは、抗原結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原またはエピトープ）との間の非共有相互作用の合計の強さを指す。別途指示されない限り、本明細書で使用される場合、「親和性」とは、抗原結合ドメインのメンバーと抗原またはエピトープとの間の１：１相互作用を反映する内因性結合親和性を指す。分子ＸのそのパートナーＹに対する親和性は、解離平衡定数（ＫＤ）で表され得る。解離平衡定数に寄与する動力学的成分は、以下でより詳細に記載される。親和性は、本明細書に記載の方法を含む、当該技術分野で既知の一般的な方法によって測定され得る。親和性は、例えば、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標））または生体層干渉法（例えば、ＦＯＲＴＥＢＩＯ（登録商標））を使用して決定され得る。抗原結合ドメインおよびその対応する抗原またはエピトープに対する親和性を決定するための追加の方法は、当該技術分野で既知である。
本明細書で使用される「多鎖ポリペプチド」とは、２つ以上（例えば、３、４、５、６、７、８、９、または１０）のタンパク質鎖（例えば、少なくとも第１のキメラポリペプチドおよび第２のポリペプチド）を含むポリペプチドを指し、２つ以上のタンパク質鎖が非共有結合を介して結合して、四次構造を形成する。
「一対の親和性ドメイン」という用語は、１×１０－７Ｍ未満（例えば、１×１０－８Ｍ未満、１×１０－９Ｍ未満、１×１０－１０Ｍ未満、または１×１０－１１Ｍ未満）のＫＤで互いに特異的に結合する２つの異なるタンパク質ドメイン（複数可）である。いくつかの例では、一対の親和性ドメインは、一対の天然に存在するタンパク質であり得る。いくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、一対の合成タンパク質であり得る。一対の親和性ドメインの非限定的な例が本明細書に記載されている。
「エピトープ」という用語は、抗原結合ドメインに特異的に結合する抗原の一部を意味する。エピトープは、例えば、表面接触可能アミノ酸残基および／または糖側鎖からなり得、特定の三次元構造特性、ならびに特定の電荷特性を有し得る。立体配座エピトープおよび非立体配座エピトープは、変性溶媒の存在下で前者への結合が失われる可能性があるが、後者への結合が失われる可能性がないという点で区別される。エピトープは、結合に直接関与するアミノ酸残基、および結合に直接関与しない他のアミノ酸残基を含み得る。抗原結合ドメインが結合するエピトープを特定するための方法は、当該技術分野で既知である。
「免疫エフェクター細胞」とは、哺乳動物における病原性細胞（例えば、がん細胞）の細胞増殖抑制または細胞死を直接または間接的に認識および／または引き起こすことができる哺乳動物の免疫系の細胞を指す。免疫エフェクター細胞の非限定的な例には、マクロファージ、Ｔリンパ球（例えば、細胞傷害性Ｔリンパ球およびＴヘルパー細胞）、ナチュラルキラー細胞、好中球、単球、および好酸球が挙げられる。免疫エフェクター細胞の追加の例は当該技術分野で既知である。
「治療」という用語は、障害の少なくとも１つの症状を改善することを意味する。いくつかの例では、治療される障害はがんであり、がんの少なくとも１つの症状を改善することは、異常な増殖、遺伝子発現、シグナル伝達、翻訳、および／または因子の分泌を減少させることを含む。一般に、治療方法は、かかる治療を必要とするか、またはかかる治療を必要とすると決定された対象に、障害の少なくとも１つの症状を軽減する組成物の治療有効量を投与することを含む。
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する当業者によって一般に理解される意味と同じ意味を有する。方法および材料は、本発明で使用するために本明細書に記載されており、当該技術分野で既知の他の好適な方法および材料も使用され得る。材料、方法、および実施例は、例証にすぎず、限定するようには意図されていない。本明細書に記載の全ての刊行物、特許出願、特許、配列、データベースエントリ、および他の参考文献は、参照によりそれらの全体が組み込まれる。矛盾が生じた場合、定義を含む本明細書が優先されるものとする。
[本発明1001]
（ａ）（ｉ）第1の標的結合ドメインと、
（ｉｉ）可溶性組織因子ドメインと、
（ｉｉｉ）一対の親和性ドメインの第1のドメインと
を含む、第1のキメラポリペプチド、および
（ｂ）（ｉ）一対の親和性ドメインの第2のドメインと、
（ｉｉ）第2の標的結合ドメインと
を含む、第2のキメラポリペプチド
を含み、前記第1のキメラポリペプチドおよび前記第2のキメラポリペプチドが、前記一対の親和性ドメインの前記第1のドメインと前記第2のドメインとの結合を介して会合している、多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1002]
前記第1の標的結合ドメインおよび前記可溶性組織因子ドメインが、前記第1のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、本発明1001の多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1003]
前記第1のキメラポリペプチドが、前記第1のキメラポリペプチド内の前記第1の標的結合ドメインと前記可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、本発明1001の多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1004]
前記可溶性組織因子ドメインおよび前記一対の親和性ドメインの前記第1のドメインが、前記第1のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、本発明1001～1003のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1005]
前記第1のキメラポリペプチドが、前記第1のキメラポリペプチド内の前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第1のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、本発明1001～1003のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1006]
前記一対の親和性ドメインの前記第2のドメインおよび前記第2の標的結合ドメインが、前記第2のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、本発明1001～1005のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1007]
前記第2のキメラポリペプチドが、前記第2のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第2のドメインと前記第2の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、本発明1001～1005のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1008]
前記第1の標的結合ドメインおよび前記第2の標的結合ドメインが、同じ抗原に特異的に結合する、本発明1001～1007のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1009]
前記第1の標的結合ドメインおよび前記第2の標的結合ドメインが、異なる抗原に特異的に結合する、本発明1001～1007のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1010]
前記第1の標的結合ドメインおよび前記第2の標的結合ドメインの一方または両方が、抗原結合ドメインである、本発明1001～1009のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1011]
前記第1の標的結合ドメインおよび前記第2の標的結合ドメインの一方または両方が、ＣＤ16ａ、ＣＤ28、ＣＤ3、ＣＤ33、ＣＤ20、ＣＤ19、ＣＤ22、ＣＤ123、ＩＬ－1Ｒ、ＩＬ－1、ＶＥＧＦ、ＩＬ－6Ｒ、ＩＬ－4、ＩＬ－10、ＰＤＬ－1、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ－1、ＴＩＭ3、ＣＴＬＡ4、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＩＬ－6、ＩＬ－8、ＴＮＦα、ＣＤ26ａ、ＣＤ36、ＵＬＢＰ2、ＣＤ30、ＣＤ200、ＩＧＦ－1Ｒ、ＭＵＣ4ＡＣ、ＭＵＣ5ＡＣ、Ｔｒｏｐ－2、ＣＭＥＴ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ1、ＨＥＲ2、ＨＥＲ3、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、Ｂ7Ｈ3、ＥＰＣＡＭ、ＢＣＭＡ、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡＣＡＭ5、ＵＬ16結合タンパク質、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＬＬ4、ＴＹＲＯ3、ＡＸＬ、ＭＥＲ、ＣＤ122、ＣＤ155、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）リガンド、ＴＧＦ－βＲＩＩＩリガンド、ＤＮＡＭ－1リガンド、ＮＫｐ46リガンド、ＮＫｐ44リガンド、ＮＫＧ2Ｄリガンド、ＮＫｐ30リガンド、ｓｃＭＨＣＩリガンド、ｓｃＭＨＣＩＩリガンド、ｓｃＴＣＲリガンド、ＩＬ－1受容体、ＩＬ－2受容体、ＩＬ－3受容体、ＩＬ－7受容体、ＩＬ－8受容体、ＩＬ－10受容体、ＩＬ－12受容体、ＩＬ－15受容体、ＩＬ－17受容体、ＩＬ－18受容体、ＩＬ－21受容体、ＰＤＧＦ－ＤＤ受容体、幹細胞因子（ＳＣＦ）受容体、幹細胞様チロシンキナーゼ3リガンド（ＦＬＴ3Ｌ）受容体、ＭＩＣＡ受容体、ＭＩＣＢ受容体、ＵＬＰ16結合タンパク質受容体、ＣＤ155受容体、ＣＤ122受容体、およびＣＤ28受容体からなる群から選択される標的に特異的に結合する、本発明1001～1010のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1012]
前記第1の標的結合ドメインおよび前記第2の標的結合ドメインの一方または両方が、可溶性インターロイキンまたはサイトカインタンパク質である、本発明1001～1010のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1013]
前記可溶性インターロイキン、サイトカイン、またはリガンドタンパク質が、ＩＬ－1、ＩＬ－2、ＩＬ－3、ＩＬ－7、ＩＬ－8、ＩＬ－10、ＩＬ－12、ＩＬ－15、ＩＬ－17、ＩＬ－18、ＩＬ－21、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＳＣＦ、およびＦＬＴ3Ｌからなる群から選択される、本発明1012の多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1014]
前記第1の標的結合ドメインおよび前記第2の標的結合ドメインの一方または両方が、可溶性インターロイキンまたはサイトカイン受容体である、本発明1001～1010のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1015]
前記可溶性受容体が、可溶性ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）、可溶性ＴＧＦ－βＲＩＩＩ、可溶性ＮＫＧ2Ｄ、可溶性ＮＫｐ30、可溶性ＮＫｐ44、可溶性ＮＫｐ46、可溶性ＤＮＡＭ－1、ｓｃＭＨＣＩ、ｓｃＭＨＣＩＩ、ｓｃＴＣＲ、可溶性ＣＤ155、または可溶性ＣＤ28である、本発明1014の多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1016]
前記第1のキメラポリペプチドが、1つ以上の追加の標的結合ドメイン（複数可）をさらに含む、本発明1001～1015のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1017]
前記第2のキメラポリペプチドが、1つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む、本発明1001～1016のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1018]
前記可溶性組織因子ドメインが、可溶性ヒト組織因子ドメインである、本発明1001～1017のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1019]
前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号1と少なくとも80％同一である配列を含む、本発明1018の多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1020]
前記一対の親和性ドメインが、ヒトＩＬ－15受容体アルファ鎖（ＩＬ15Ｒα）由来のｓｕｓｈｉドメイン、および可溶性ＩＬ－15である、本発明1001～1019のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1021]
前記一対の親和性ドメインが、バルナーゼおよびバルンスター、ＰＫＡおよびＡＫＡＰ、変異ＲＮａｓｅ Ｉ断片に基づくアダプター／ドッキングタグモジュール、ならびに、タンパク質シンタキシン、シナプトタグミン、シナプトブレビン、およびＳＮＡＰ25の相互作用に基づくＳＮＡＲＥモジュールからなる群から選択される、本発明1001～1019のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1022]
前記第1のキメラポリペプチドおよび／または前記第2のキメラポリペプチドが、そのＮ末端にシグナル配列をさらに含む、本発明1001～1021のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1023]
本発明1001～1022の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを含む、組成物。
[本発明1024]
医薬組成物である、本発明1023の組成物。
[本発明1025]
本発明1023または1024の組成物の少なくとも1つの用量を含む、キット。
[本発明1026]
免疫細胞を刺激する方法であって、
免疫細胞を、本発明1001～1022の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは本発明1023もしくは1024の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
[本発明1027]
免疫細胞の増殖を誘導するまたは増加させる方法であって、
免疫細胞を、本発明1001～1022の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは本発明1023もしくは1024の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
[本発明1028]
免疫細胞のメモリーまたはメモリー様免疫細胞への分化を誘導する方法であって、
免疫細胞を、本発明1001～1022の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは本発明1023もしくは1024の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
[本発明1029]
前記免疫細胞をインビトロで接触させる、本発明1026～1028のいずれかの方法。
[本発明1030]
前記免疫細胞をインビボで接触させる、本発明1026～1028のいずれかの方法。
[本発明1031]
前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、Ｔｈ17細胞、Ｔｈ22細胞、Ｔｈ9細胞、Ｔｈ2細胞、Ｔｈ1細胞、Ｔｈ3細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ8＋ Ｔ細胞、ＣＤ4＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、本発明1026～1030のいずれかの方法。
[本発明1032]
前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、本発明1026～1031のいずれかの方法。
[本発明1033]
がん細胞、感染細胞、または老化細胞の死滅を必要とする対象におけるがん細胞、感染細胞、または老化細胞を死滅させる方法であって、前記対象に、本発明1001～1022の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは本発明1023もしくは1024の組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
[本発明1034]
治療を必要とする対象を治療する方法であって、前記対象に、本発明1001～1022の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは本発明1023もしくは1024の組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
[本発明1035]
前記対象が、がん、加齢関連疾患もしくは状態、または感染性疾患を有すると特定または診断されている、本発明1033または1034の方法。
[本発明1036]
前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、本発明1035の方法。
[本発明1037]
前記加齢関連疾患もしくは状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、2型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、本発明1035の方法。
[本発明1038]
前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、本発明1035の方法。
[本発明1039]
本発明1001～1022のいずれかの多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする、核酸。
[本発明1040]
本発明1039の核酸を含む、ベクター。
[本発明1041]
本発明1039の核酸または本発明1040のベクターを含む、細胞。
[本発明1042]
多鎖キメラポリペプチドを産生する方法であって、
前記多鎖キメラポリペプチドの産生をもたらすのに十分な条件下で、本発明1041の細胞を培養培地中で培養すること、ならびに
前記多鎖キメラポリペプチドを前記細胞および／または前記培養培地から回収すること
を含む、方法。
[本発明1043]
本発明1042の方法によって産生された、多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1044]
前記ヒト可溶性組織因子ドメインが、血液凝固を開始しない、本発明1018の多鎖キメラポリペプチド。
[本発明1045]
前記可溶性組織因子ドメインが、野生型可溶性ヒト組織因子由来の配列を含むか、またはそれからなる、本発明1001～1022のいずれかの多鎖キメラポリペプチド。
本発明の他の特徴および利点は、以下の発明を実施するための形態および図、ならびに特許請求の範囲から明らかになるであろう。
多鎖キメラポリペプチド：（ｉ）第１の標的結合ドメイン（Ａ）、可溶性組織因子ドメイン、一対の親和性ドメインの第１のドメイン（可溶性インターロイキンＩＬ－１５）、および追加の標的結合ドメイン（Ｂ）を含む、第１のキメラポリペプチド、ならびに（ｉｉ）一対の親和性ドメインの第２のドメイン（ＩＬ－１５受容体アルファｓｕｓｈｉドメイン）、第２の標的結合ドメイン（Ｃ）、および追加の抗原結合ドメイン（Ｄ）を含む、第２のキメラポリペプチドの、例示的な図を示す。上の模式図は、一対の親和性ドメインを介した第１のキメラポリペプチドと第２のキメラポリペプチドとの会合を示す。下の概略図は、第１および第２のキメラポリペプチド内のドメインの順序を示す。 多鎖キメラポリペプチド：（ｉ）第１の標的結合ドメイン（Ａ）、可溶性組織因子ドメインのＦＶＩＩａへの結合を除去するために５つのアミノ酸置換を含む可溶性組織因子ドメイン、一対の親和性ドメインの第１のドメイン（Ｄ８ＮまたはＤ８Ａアミノ酸置換を含む可溶性インターロイキンＩＬ－１５）、および追加の標的結合ドメイン（Ｂ）を含む、第１のキメラポリペプチド、ならびに（ｉｉ）一対の親和性ドメインの第２のドメイン（ＩＬ－１５受容体アルファｓｕｓｈｉドメイン）、第２の標的結合ドメイン（Ｃ）、および追加の抗原結合ドメイン（Ｄ）を含む、第２のキメラポリペプチドの、例示的な図を示す。上の模式図は、一対の親和性ドメインを介した第１のキメラポリペプチドと第２のキメラポリペプチドとの会合を示す。下の概略図は、第１および第２のキメラポリペプチド内のドメインの順序を示す。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかの他の実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、可溶性野生型ヒト組織因子ドメイン（野生型ヒト組織因子内の連続配列を含むか、またはそれからなる）を含み得るか、またはそれからなり得る。 例示的なＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物の概略図を示す。 例示的なＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の概略図を示す。 例示的なＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物とＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物との間の相互作用の概略図を示す。 ＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ複合体（１８ｔ１５－１２ｓ）をもたらす、例示的なＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質とＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質との間の相互作用の概略図を示す。 抗ＴＦ抗体親和性カラムからの１８ｔ１５－１２ｓ精製溶出のクロマトグラフを示す。 分析的サイズ排除カラム上での溶出後の抗ＴＦ抗体／ＳＥＣ精製１８ｔ１５－１２ｓタンパク質の例示的なクロマトグラフィープロファイルを示し、タンパク質凝集体からの単量体多タンパク質１８ｔ１５－１２ｓ複合体の分離を示す。 ジスルフィド結合の還元後の１８ｔ１５－１２ｓ複合体の４～１２％ＳＤＳ－ＰＡＧＥの例を示す。レーン１：ＳｅｅＢｌｕｅ Ｐｌｕｓ２マーカー、レーン２：抗組織因子抗体親和性カラム精製１８ｔ１５－１２ｓ（０．５μｇ）、レーン３：抗組織因子抗体親和性カラム精製１８ｔ１５－１２ｓ（１μｇ）。 脱グリコシル化および非脱グリコシル化１８ｔ１５－１２ｓのＳＤＳ ＰＡＧＥ分析を示す。レーン１：抗組織因子抗体親和性カラム精製１８ｔ１５－１２ｓ（０．５μｇ）（非脱グリコシル化）、レーン２：抗ＴＦ抗体精製１８ｔ１５－１２ｓ（１μｇ）（非脱グリコシル化）、レーン３：１８ｔ１５－１２ｓ（１μｇ）（脱グリコシル化）、レーン４：Ｍａｒｋ１２非染色マーカー。 抗ヒト組織因子捕捉抗体およびビオチン化抗ヒトＩＬ－１２検出抗体（ＢＡＦ ２１９）を含む１８ｔ１５－１２ｓ複合体のサンドイッチＥＬＩＳＡを示す。 抗ヒト組織因子捕捉抗体およびビオチン化抗ヒトＩＬ－１５検出抗体（ＢＡＭ ２４７）を含む１８ｔ１５－１２ｓ複合体のサンドイッチＥＬＩＳＡを示す。 抗ヒト組織因子捕捉抗体およびビオチン化抗ヒトＩＬ－１８検出抗体（Ｄ０４５－６）を含む１８ｔ１５－１２ｓ複合体のサンドイッチＥＬＩＳＡを示す。 抗ヒト組織因子（Ｉ４３）捕捉抗体および抗ヒト組織因子検出抗体を含む１８ｔ１５－１２ｓ複合体のサンドイッチＥＬＩＳＡを示す。 １８ｔ１５－１２ｓ複合体（白四角）および組換えＩＬ－１５（黒四角）によって媒介されたＩＬ－１５依存性３２Ｄβ細胞の増殖を示す。 １８ｔ１５－１２ｓ複合体（白四角）内のＩＬ－１８の生物学的活性を示し、組換えＩＬ－１８（黒四角）および組換えＩＬ－１２（黒丸）が、それぞれ、陽性対照および陰性対照として機能する。 １８ｔ１５－１２ｓ複合体（白四角）内のＩＬ－１２の生物学的活性を示し、組換えＩＬ－１２（黒丸）および組換えＩＬ－１８（黒四角）が、それぞれ、陽性対照および陰性対照として機能する。 １８ｔ１５－１２ｓ複合体によって誘導されたＮＫ細胞のＣＤ２５の細胞表面発現を示す。 １８ｔ１５－１２ｓ複合体によって誘導されたＮＫ細胞の細胞表面ＣＤ６９発現を示す。 １８ｔ１５－１２ｓ複合体によって誘導されたＮＫ細胞の細胞内インターフェロンガンマ発現のフローサイトメトリーグラフを示す。 Ｋ５６２細胞に対する１８ｔ１５－１２ｓ誘導性ヒトＮＫ細胞の細胞傷害性を示す。 例示的なＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／αＣＤ１６ ＤＮＡ構築物の概略図を示す。 例示的なＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の概略図を示す。 例示的なＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／αＣＤ１６ｓｃＦｖ ＤＮＡ構築物とＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物との間の相互作用の概略図を示す。 例示的な１８ｔ１５－１２ｓ／αＣＤ１６タンパク質複合体の概略図を示す。 抗ヒト組織因子捕捉抗体およびビオチン化抗ヒトＩＬ－１２またはＩＬ－１８検出抗体を含む１８ｔ１５－１２ｓ１６複合体のサンドイッチＥＬＩＳＡを示す。 例示的なＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物の概略図を示す。 例示的なＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物の概略図を示す。 例示的なＩＬ－ＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物とＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物との間の相互作用の概略図を示す。 ＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５／ＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ複合体（２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ）をもたらす、例示的なＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質とＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質との間の相互作用の概略図を示す。 抗ＴＦ抗体親和性カラムからの２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ精製溶出のクロマトグラフを示す。 主なタンパク質ピークおよび高分子量ピークを示す例示的な２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓサイズ排除クロマトグラフを示す。 ジスルフィド結合の還元後の２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体の４～１２％ＳＤＳ－ＰＡＧＥの例を示す。レーン１：Ｍａｒｋ１２非染色マーカー（左側の数字はｋＤａ単位での分子量を示す）、レーン２：２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ（０．５μｇ）、レーン３：２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ（１μｇ）、レーン４：２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ（脱グリコシル化）（１μｇ）、ＭＷは、予想サイズ５３ｋＤａおよび３９．０８ｋＤａであった。 抗ヒト組織因子捕捉抗体およびビオチン化抗ヒトＩＬ－２１検出抗体（１３－７２１８－８１、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）を含む２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体のサンドイッチＥＬＩＳＡを示す。 抗ヒト組織因子捕捉抗体およびビオチン化抗ヒトＩＬ－１５検出抗体（ＢＡＭ ２４７、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を含む２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体のサンドイッチＥＬＩＳＡを示す。 抗ヒト組織因子捕捉抗体およびビオチン化抗ヒトＴＧＦβＲＩＩ検出抗体（ＢＡＦ２４１、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を含む２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体のサンドイッチＥＬＩＳＡを示す。 抗ヒト組織因子（Ｉ４３）捕捉抗体および抗ヒト組織因子検出抗体を含む２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体のサンドイッチＥＬＩＳＡを示す。 ＩＬ－１５（黒四角）と比較した２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体（白四角）によって媒介された３２Ｄβ細胞のＩＬ－１５依存性増殖を示す。 ２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体（白四角）内のＴＧＦβＲＩＩドメインの生物学的活性を示す。ＴＧＦβＲＩＩ／Ｆｃ（黒四角）は、陽性対照として機能した。 ２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体によって誘導されたＮＫ細胞の細胞表面ＣＤ２５発現のフローサイトメトリーグラフを示す。 ２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体によって誘導されたＮＫ細胞の細胞表面ＣＤ６９発現のフローサイトメトリーグラフを示す。 ２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体によって誘導されたＮＫ細胞の細胞内インターフェロンガンマ発現のフローサイトメトリーグラフを示す。 Ｋ５６２細胞に対する２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ誘導性ヒトＮＫ細胞の細胞傷害性を示す。 例示的なＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物の概略図を示す。 例示的なＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の概略図を示す。 例示的なＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物とＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物との間の相互作用の概略図を示す。 ＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ複合体（２１ｔ１５－７ｓ）をもたらす、例示的なＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質とＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質との間の相互作用の概略図を示す。 ２１ｔ１５－７ｓ＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体での刺激による初代ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖を示す。 ＣＤ２５ ＭＦＩおよびＣＤ６９ ＭＦＩをＮＫ細胞活性化のマーカーとして使用した、増殖した初代ＮＫ細胞の活性化を示す。 Ｋ５６２ヒト腫瘍細胞に対する増殖したＮＫ細胞の細胞傷害活性を示し、２１ｔ１５－７ｓ＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体で刺激したＮＫ細胞が、２１ｔ１５－７ｓ＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体で刺激していないＮＫ細胞よりも高いＫ５６２細胞の特異的溶解を示す。 例示的なＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物の概略図を示す。 例示的なＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の概略図を示す。 例示的なＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物とＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物との間の相互作用の概略図を示す。 ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳＵ複合体（７ｔ１５－２１ｓ）をもたらす、例示的なＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質とＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質との間の相互作用の概略図を示す。 ２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体での刺激による初代ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の活性化および増殖を図形形態で示す。 抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体、７ｔ１５－２１ｓ、および等量の抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体と７ｔ１５－２１ｓとを含む複合体のサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）プロファイルを示す。 ２体の異なるドナーの血液から単離したヒトＮＫ細胞（２×１０６細胞／ｍＬ）のピコモル／分単位での酸素消費速度（ＯＣＲ）を示す。 ２体の異なるドナーの血液から単離したヒトＮＫ細胞（２×１０６細胞／ｍＬ）のｍｐＨ／分単位での細胞外酸性化速度（ＥＣＡＲ）を示す。 ７ｔ１５－１６ｓ２１構築物の概略図を示す。 ７ｔ１５－１６ｓ２１構築物の追加の概略図を示す。 図６０Ａおよび６０Ｂは、対照タンパク質と比較した、ヒトＣＤ１６ｂを発現するＣＨＯ細胞への７ｔ１５－１６ｓ２１の結合を示す。 ７ｔ１５－１６ｓ２１の検出にＩＬ－１５に対する抗体を使用したＥＬＩＳＡ実験の結果である。 ７ｔ１５－１６ｓ２１の検出にＩＬ－２１に対する抗体を使用したＥＬＩＳＡ実験の結果である。 ７ｔ１５－１６ｓ２１の検出にＩＬ－７に対する抗体を使用したＥＬＩＳＡ実験の結果である。 ７ｔ１５－１６ｓ２１または組換えＩＬ－１５を用いた３２Ｄβ細胞増殖アッセイの結果を示す。 抗ＴＦ抗体樹脂への結合およびその上での溶出後の７ｔ１５－１６ｓ２１タンパク質含有細胞培養上清のクロマトグラフィープロファイルを示す。 ７ｔ１５－１６ｓ２１の分析的ＳＥＣプロファイルを示す。 ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１構築物の概略図を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１構築物の追加の概略図を示す。 図６７Ａおよび６７Ｂは、ＴＧＦＲｔ１５－１６Ｓ２１および７ｔ１５－２１ｓのヒトＣＤ１６ｂを発現するＣＨＯ細胞との結合親和性を示す。図６７Ａは、ＴＧＦＲｔ１５－１６Ｓ２１のヒトＣＤ１６ｂを発現するＣＨＯ細胞との結合親和性を示す。図６７Ｂは、７ｔ１５－２１ｓのヒトＣＤ１６ｂを発現するＣＨＯ細胞との結合親和性を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１およびＴＧＦＲ－ＦｃによるＴＧＦβ１阻害の結果を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１または組換えＩＬ－１５を用いた３２Ｄβ細胞増殖アッセイの結果を示す。 ＥＬＩＳＡを使用してＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１中のＩＬ－１５を対応する抗体で検出した結果を示す。 ＥＬＩＳＡを使用してＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１中のＩＬ－２１を対応する抗体で検出した結果を示す。 ＥＬＩＳＡを使用してＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１中のＴＧＦβＲＩＩを対応する抗体で検出した結果を示す。 抗ＴＦ抗体樹脂への結合およびその上での溶出後のＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１タンパク質含有細胞培養上清のクロマトグラフィープロファイルを示す。 ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１の還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析の結果を示す。 ７ｔ１５－７ｓ構築物の概略図を示す。 ７ｔ１５－７ｓ構築物の追加の概略図を示す。 抗ＴＦ抗体樹脂への結合およびその上での溶出後の７ｔ１５－７ｓタンパク質含有細胞培養上清のクロマトグラフィープロファイルを示す。 ＥＬＩＳＡを使用した７ｔ１５－７ｓ中のＴＦ、ＩＬ－１５、およびＩＬ－７の検出を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ構築物の概略図を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ構築物の追加の概略図を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓおよびＴＧＦＲ－ＦｃによるＴＧＦβ１阻害の結果を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓまたは組換えＩＬ－１５を用いた３２Ｄβ細胞増殖アッセイの結果を示す。 図８１Ａおよび８１Ｂは、ＥＬＩＳＡを使用してＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＩＬ－１５およびＴＧＦβＲＩＩを対応する抗体で検出した結果を示す。 抗ＴＦ抗体樹脂への結合およびその上での溶出後のＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓタンパク質含有細胞培養上清のクロマトグラフィープロファイルを示す線グラフである。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの分析的ＳＥＣプロファイルを示す。 還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥによって分析された脱グリコシル化前および脱グリコシル化後のＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓを示す。 図８５Ａおよび８５Ｂは、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ処理マウスおよび対照処理マウスにおける脾臓重量および免疫細胞型のパーセンテージを示す。図８５Ａは、ＰＢＳ対照と比較したＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスにおける脾臓重量を示す。図８５Ｂは、ＰＢＳ対照と比較したＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスにおけるＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、およびＮＫ細胞のパーセンテージを示す。 図８５Ａの説明を参照されたい。 図８６Ａおよび８６Ｂは、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスにおける９２時間にわたる脾臓重量および免疫刺激を示す。図８６Ａは、処理後１６、２４、４８、７２、および９２時間時点でのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスの脾臓重量を示す。図８６Ｂは、処理後１６、２４、４８、７２、および９２時間時点でのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスにおける免疫細胞のパーセンテージを示す。 図８６Ａの説明を参照されたい。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスにおけるＫｉ６７発現を経時的に示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスにおけるグランザイムＢ発現を経時的に示す。 Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおけるＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓによる脾細胞の細胞傷害性の増強を示す。 膵臓癌マウスモデルにおける、ＰＢＳ処理、化学療法のみ、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓのみ、または化学療法とＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓとの組み合わせに応答した腫瘍サイズの変化を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスから単離されたＮＫ細胞の細胞傷害性を示す。 ７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）構築物の概略図を示す。 ７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）構築物の追加の概略図を示す。 抗ＴＦ抗体樹脂への結合およびその上での溶出後の７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）タンパク質含有細胞培養上清のクロマトグラフィープロファイルを示す線グラフである。 ７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）の分析的ＳＥＣプロファイルを示す。 ７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）のＣＤ１３７Ｌ（４．１ＢＢＬ）への結合を示す。 図９６Ａ～９６Ｃは、ＥＬＩＳＡを用いた７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）中のＩＬ１５、ＩＬ２１、およびＩＬ７の検出を示す。図９６Ａは、ＥＬＩＳＡを用いた７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）中のＩＬ１５の検出を示す。図９６Ｂは、ＥＬＩＳＡを用いた７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）中のＩＬ２１の検出を示す。図９６Ｃは、ＥＬＩＳＡを用いた７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）中のＩＬ７の検出を示す。 図９６Ａの説明を参照されたい。 図９６Ａの説明を参照されたい。 ＣＴＬＬ－２細胞増殖アッセイの結果を示す。 ＩＬ２１Ｒ含有Ｂ９細胞増殖の促進における７ｔ１５－１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）の活性を示す。 ７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ構築物の概略図を示す。 ７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ構築物の追加の概略図を示す。 ７ｔ１５－ＴＧＦＲｓおよびＴＧＦＲ－ＦｃによるＴＧＦβ１阻害の結果を示す。 図１０２Ａ～１０２Ｃは、ＥＬＩＳＡを用いた７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＩＬ－１５、ＴＧＦβＲＩＩ、およびＩＬ－７の検出を示す。 図１０２Ａの説明を参照されたい。 図１０２Ａの説明を参照されたい。 ７ｔ１５－ＴＧＦＲｓまたは組換えＩＬ－１５を用いた３２Ｄβ細胞増殖アッセイの結果を示す。 抗ＴＦ抗体親和性カラムへの結合およびその上での溶出後の７ｔ１５－ＴＧＦＲｓタンパク質含有細胞培養上清のクロマトグラフィープロファイルを示す線グラフである。 還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥを使用して分析された脱グリコシル化前および脱グリコシル化後の７ｔ１５－ＴＧＦＲｓを示す。 ７ｔ１５－ＴＧＦＲｓタンパク質中のＩＬ－７、ＩＬ－１５、およびＴＧＦβＲＩＩのＥＬＩＳＡ検出を示す。 図１０７Ａおよび１０７Ｂは、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ処理マウスおよび対照処理マウスにおける脾臓重量および免疫細胞型のパーセンテージを示す。図１０７Ａは、ＰＢＳ対照と比較した、様々な投薬量の７ｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスの脾臓重量を示す。図１０７Ｂは、ＰＢＳ対照と比較した、様々な投薬量の７ｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスにおけるＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、およびＮＫ細胞のパーセンテージを示す。 Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおける７ｔ１５－ＴＧＦＲｓによるＣＤ４＋ Ｔ細胞のＣＤ４４発現のアップレギュレーションを示す。 Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおける７ｔ１５－ＴＧＦＲｓによるＣＤ８＋ Ｔ細胞のＣＤ４４発現のアップレギュレーションを示す。 Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおける７ｔ１５－ＴＧＦＲｓによるＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞のＫｉ６７発現のアップレギュレーションを示す。 Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおける７ｔ１５－ＴＧＦＲｓによるＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞のグランザイムＢ発現のアップレギュレーションを示す。 Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおける７ｔ１５－ＴＧＦＲｓによる脾細胞の細胞傷害性の増強を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ構築物の概略図を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ構築物の追加の概略図を示す。 抗ＴＦ抗体親和性カラムへの結合およびその上での溶出後のＴＧＦＲｔ１５－２１ｓ１３７Ｌタンパク質含有細胞培養上清のクロマトグラフィープロファイルを示す線グラフである。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１構築物の概略図を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１構築物の追加の概略図を示す。 抗ＴＦ抗体親和性カラムへの結合およびその上での溶出後のＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１タンパク質含有細胞培養上清のクロマトグラフィープロファイルを示す線グラフである。 還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥによって分析された脱グリコシル化前および脱グリコシル化後のＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１を示す。 図１１８Ａおよび１１８Ｂは、ＥＬＩＳＡを使用したＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１成分の検出を示す。 図１１９Ａおよび１１９Ｂは、対照処理マウスおよびＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１処理マウスの脾臓に存在するＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞のパーセンテージおよび増殖を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１で処理したマウスにおける脾細胞のグランザイムＢ発現のアップレギュレーションを示す。 Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおけるＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１による脾細胞の細胞傷害性の増強を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ１６構築物の概略図を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ１６構築物の追加の概略図を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ１３７Ｌ構築物の概略図を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ１３７Ｌ構築物の追加の概略図を示す。 １８ｔ１５－１２ｓ、１８ｔ１５－１２ｓ１６、および７ｔ１５－２１ｓでの刺激後のリンパ球集団の表面表現型の変化を示す。 １８ｔ１５－１２ｓでの刺激後のＮＫ細胞におけるホスホ－ＳＴＡＴ４レベルおよびホスホ－ＳＴＡＴ５レベルの増加を示す。 図１２８Ａ～１２８Ｃは、西洋食餌を与え、かつＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したＡｐｏＥ－／－マウスにおけるＴｒｅｇ細胞、ＮＫ細胞、およびＣＤ８＋ Ｔ細胞のインビボ刺激を示す。 図１２８Ａの説明を参照されたい。 図１２８Ａの説明を参照されたい。 図１２９Ａ～および１２９Ｃは、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓでの処理後のＣ５７ＢＬ／６マウスにおける免疫刺激を示す。 図１２９Ａの説明を参照されたい。 図１２９Ａの説明を参照されたい。 図１３０Ａおよび１３０Ｂは、西洋食餌を与え、かつＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したＡｐｏＥ－／－マウスにおけるＮＫ細胞およびＣＤ８＋ Ｔ細胞の増殖のインビボ誘導を示す。 図１３１Ａおよび１３１Ｂは、ＮＫ細胞をＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理した後のＮＫ細胞の細胞傷害性の増強を示す。 図１３２Ａおよび１３２Ｂは、ＮＫ細胞をＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理した後のＮＫ細胞のＡＤＣＣ活性の増強を示す。 図１３３Ａ～１３３Ｈは、黒色腫マウスモデルにおける化学療法と組み合わせたＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ＋抗ＴＲＰ１抗体（ＴＡ９９）の抗腫瘍活性を示す。 図１３３Ａの説明を参照されたい。 図１３３Ａの説明を参照されたい。 図１３３Ａの説明を参照されたい。 図１３３Ａの説明を参照されたい。 図１３３Ａの説明を参照されたい。 図１３３Ａの説明を参照されたい。 図１３３Ａの説明を参照されたい。 図１３４Ａ～１３４Ｃは、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓによるＡｐｏＥ－／－マウスにおける西洋食餌誘発性高血糖症の改善を示す。 １８ｔ１５－１２ｓで刺激してｒｈＩＬ１５中で培養した後のＮＫ細胞のサイトカイン誘導性メモリー様ＮＫ細胞（ＣＩＭＬ－ＮＫ細胞）への分化を要約した細胞表面染色を示す。 ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓでの処理時のＣＤ４４ｈｉメモリーＴ細胞のアップレギュレーションを示すアップレギュレーションを示す。 一本鎖または多鎖キメラポリペプチドでの処理後の第Ｘ因子（ＦＸ）活性化のグラフを示す。 プロトロンビン時間（ＰＴ）試験における様々な濃度のＩｎｎｏｖｉｎを有する緩衝液の凝固時間を示す。 ＰＴアッセイにおける多鎖キメラポリペプチドの凝固時間を示す。 ３２ＤＢ細胞と混合した場合のＰＴアッセイにおける多鎖キメラポリペプチドの凝固時間を示す。 ヒトＰＢＭＣと混合した場合のＰＴアッセイにおける多鎖キメラポリペプチドの凝固時間を示す。 ７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）および７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）のＣＤ１３７（４．１ＢＢ）への結合を示す。 図１４３Ａ～１４３Ｄは、ＥＬＩＳＡを使用した７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）中のＩＬ７、ＩＬ２１、ＩＬ１５、および４．１ＢＢＬのそれぞれの抗体による検出を示す。 図１４３Ａの説明を参照されたい。 図１４３Ａの説明を参照されたい。 図１４３Ａの説明を参照されたい。 ＩＬ２Ｒαβγ含有ＣＴＬＬ２細胞増殖アッセイによって評価された７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）および７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）のＩＬ－１５活性を示す。
詳細な説明
（ａ）（ｉ）第１の標的結合ドメインと、（ｉｉ）可溶性組織因子ドメインと、（ｉｉｉ）一対の親和性ドメインの第１のドメインとを含む、第１のキメラポリペプチド、および（ｂ）（ｉ）一対の親和性ドメインの第２のドメインと、（ｉｉ）第２の標的結合ドメインとを含む、第２のキメラポリペプチドを含み、第１のキメラポリペプチドと第２のキメラポリペプチドが、一対の親和性ドメインの第１のドメインと第２のドメインとの結合を介して会合している、多鎖キメラポリペプチドが、本明細書に提供される。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを含む組成物、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする核酸、および本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする核酸のうちのいずれかを含む細胞も本明細書に提供される。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかの使用を含む、免疫細胞を刺激する方法および治療を必要とする対象を治療する方法も本明細書に提供される。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを産生する方法も本明細書に提供される。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドおよび／または第２のキメラポリペプチドの全長は各々独立して、約５０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約５０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約５０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約５０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約５０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約５０アミノ酸～約９００アミノ酸、約５０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約５０アミノ酸～約８００アミノ酸、約５０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約５０アミノ酸～約７００アミノ酸、約５０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約５０アミノ酸～約６００アミノ酸、約５０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約５０アミノ酸～約５００アミノ酸、約５０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約５０アミノ酸～約４６０アミノ酸、約５０アミノ酸～約４４０アミノ酸、約５０アミノ酸～約４２０アミノ酸、約５０アミノ酸～約４００アミノ酸、約５０アミノ酸～約３８０アミノ酸、約５０アミノ酸～約３６０アミノ酸、約５０アミノ酸～約３４０アミノ酸、約５０アミノ酸～約３２０アミノ酸、約５０アミノ酸～約３００アミノ酸、約５０アミノ酸～約２８０アミノ酸、約５０アミノ酸～約２６０アミノ酸、約５０アミノ酸～約２４０アミノ酸、約５０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約５０アミノ酸～約２００アミノ酸、約５０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約５０アミノ酸～約１００アミノ酸、約１００アミノ酸～約３０００アミノ酸、約１００アミノ酸～約２５００アミノ酸、約１００アミノ酸～約２０００アミノ酸、約１００アミノ酸～約１５００アミノ酸、約１００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約１００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約１００アミノ酸～約９００アミノ酸、約１００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約１００アミノ酸～約８００アミノ酸、約１００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約１００アミノ酸～約７００アミノ酸、約１００アミノ酸～約６５０アミノ酸、約１００アミノ酸～約６００アミノ酸、約１００アミノ酸～約５５０アミノ酸、約１００アミノ酸～約５００アミノ酸、約１００アミノ酸～約４８０アミノ酸、約１００アミノ酸～約４６０アミノ酸、約１００アミノ酸～約４４０アミノ酸、約１００アミノ酸～約４２０アミノ酸、約１００アミノ酸～約４００アミノ酸、約１００アミノ酸～約３８０アミノ酸、約１００アミノ酸～約３６０アミノ酸、約１００アミノ酸～約３４０アミノ酸、約１００アミノ酸～約３２０アミノ酸、約１００アミノ酸～約３００アミノ酸、約１００アミノ酸～約２８０アミノ酸、約１００アミノ酸～約２６０アミノ酸、約１００アミノ酸～約２４０アミノ酸、約１００アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１００アミノ酸～約２００アミノ酸、約１００アミノ酸～約１５０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約９００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約８００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約７００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約６００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約５００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約４６０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約４４０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約４２０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約４００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約３８０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約３６０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約３４０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約３２０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約３００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約２８０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約２６０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約２４０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約２００アミノ酸、約２００アミノ酸～約３０００アミノ酸、約２００アミノ酸～約２５００アミノ酸、約２００アミノ酸～約２０００アミノ酸、約２００アミノ酸～約１５００アミノ酸、約２００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約２００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約２００アミノ酸～約９００アミノ酸、約２００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約２００アミノ酸～約８００アミノ酸、約２００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約２００アミノ酸～約７００アミノ酸、約２００アミノ酸～約６５０アミノ酸、約２００アミノ酸～約６００アミノ酸、約２００アミノ酸～約５５０アミノ酸、約２００アミノ酸～約５００アミノ酸、約２００アミノ酸～約４８０アミノ酸、約２００アミノ酸～約４６０アミノ酸、約２００アミノ酸～約４４０アミノ酸、約２００アミノ酸～約４２０アミノ酸、約２００アミノ酸～約４００アミノ酸、約２００アミノ酸～約３８０アミノ酸、約２００アミノ酸～約３６０アミノ酸、約２００アミノ酸～約３４０アミノ酸、約２００アミノ酸～約３２０アミノ酸、約２００アミノ酸～約３００アミノ酸、約２００アミノ酸～約２８０アミノ酸、約２００アミノ酸～約２６０アミノ酸、約２００アミノ酸～約２４０アミノ酸、約２００アミノ酸～約２２０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約９００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約８００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約７００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約６００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約５００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約４６０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約４４０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約４２０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約４００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約３８０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約３６０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約３４０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約３２０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約３００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約２８０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約２６０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約２４０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約９００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約８００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約７００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約６００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約５００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約４６０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約４４０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約４２０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約４００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約３８０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約３６０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約３４０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約３２０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約３００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約２８０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約２６０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約９００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約８００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約７００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約６００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約５００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約４６０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約４４０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約４２０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約４００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約３８０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約３６０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約３４０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約３２０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約３００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約２８０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約９００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約８００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約７００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約６００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約５００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約４６０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約４４０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約４２０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約４００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約３８０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約３６０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約３４０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約３２０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約３００アミノ酸、約３００アミノ酸～約３０００アミノ酸、約３００アミノ酸～約２５００アミノ酸、約３００アミノ酸～約２０００アミノ酸、約３００アミノ酸～約１５００アミノ酸、約３００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約３００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約３００アミノ酸～約９００アミノ酸、約３００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約３００アミノ酸～約８００アミノ酸、約３００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約３００アミノ酸～約７００アミノ酸、約３００アミノ酸～約６５０アミノ酸、約３００アミノ酸～約６００アミノ酸、約３００アミノ酸～約５５０アミノ酸、約３００アミノ酸～約５００アミノ酸、約３００アミノ酸～約４８０アミノ酸、約３００アミノ酸～約４６０アミノ酸、約３００アミノ酸～約４４０アミノ酸、約３００アミノ酸～約４２０アミノ酸、約３００アミノ酸～約４００アミノ酸、約３００アミノ酸～約３８０アミノ酸、約３００アミノ酸～約３６０アミノ酸、約３００アミノ酸～約３４０アミノ酸、約３００アミノ酸～約３２０アミノ酸、約３２０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約３２０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約３２０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約３２０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約３２０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約３２０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約３２０アミノ酸～約９００アミノ酸、約３２０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約３２０アミノ酸～約８００アミノ酸、約３２０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約３２０アミノ酸～約７００アミノ酸、約３２０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約３２０アミノ酸～約６００アミノ酸、約３２０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約３２０アミノ酸～約５００アミノ酸、約３２０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約３２０アミノ酸～約４６０アミノ酸、約３２０アミノ酸～約４４０アミノ酸、約３２０アミノ酸～約４２０アミノ酸、約３２０アミノ酸～約４００アミノ酸、約３２０アミノ酸～約３８０アミノ酸、約３２０アミノ酸～約３６０アミノ酸、約３２０アミノ酸～約３４０アミノ酸、約３４０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約３４０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約３４０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約３４０アミノ酸～約１５００アミ
ノ酸、約３４０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約３４０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約３４０アミノ酸～約９００アミノ酸、約３４０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約３４０アミノ酸～約８００アミノ酸、約３４０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約３４０アミノ酸～約７００アミノ酸、約３４０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約３４０アミノ酸～約６００アミノ酸、約３４０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約３４０アミノ酸～約５００アミノ酸、約３４０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約３４０アミノ酸～約４６０アミノ酸、約３４０アミノ酸～約４４０アミノ酸、約３４０アミノ酸～約４２０アミノ酸、約３４０アミノ酸～約４００アミノ酸、約３４０アミノ酸～約３８０アミノ酸、約３４０アミノ酸～約３６０アミノ酸、約３６０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約３６０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約３６０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約３６０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約３６０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約３６０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約３６０アミノ酸～約９００アミノ酸、約３６０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約３６０アミノ酸～約８００アミノ酸、約３６０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約３６０アミノ酸～約７００アミノ酸、約３６０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約３６０アミノ酸～約６００アミノ酸、約３６０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約３６０アミノ酸～約５００アミノ酸、約３６０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約３６０アミノ酸～約４６０アミノ酸、約３６０アミノ酸～約４４０アミノ酸、約３６０アミノ酸～約４２０アミノ酸、約３６０アミノ酸～約４００アミノ酸、約３６０アミノ酸～約３８０アミノ酸、約３８０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約３８０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約３８０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約３８０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約３８０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約３８０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約３８０アミノ酸～約９００アミノ酸、約３８０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約３８０アミノ酸～約８００アミノ酸、約３８０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約３８０アミノ酸～約７００アミノ酸、約３８０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約３８０アミノ酸～約６００アミノ酸、約３８０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約３８０アミノ酸～約５００アミノ酸、約３８０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約３８０アミノ酸～約４６０アミノ酸、約３８０アミノ酸～約４４０アミノ酸、約３８０アミノ酸～約４２０アミノ酸、約３８０アミノ酸～約４００アミノ酸、約４００アミノ酸～約３０００アミノ酸、約４００アミノ酸～約２５００アミノ酸、約４００アミノ酸～約２０００アミノ酸、約４００アミノ酸～約１５００アミノ酸、約４００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約４００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約４００アミノ酸～約９００アミノ酸、約４００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約４００アミノ酸～約８００アミノ酸、約４００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約４００アミノ酸～約７００アミノ酸、約４００アミノ酸～約６５０アミノ酸、約４００アミノ酸～約６００アミノ酸、約４００アミノ酸～約５５０アミノ酸、約４００アミノ酸～約５００アミノ酸、約４００アミノ酸～約４８０アミノ酸、約４００アミノ酸～約４６０アミノ酸、約４００アミノ酸～約４４０アミノ酸、約４００アミノ酸～約４２０アミノ酸、約４２０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約４２０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約４２０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約４２０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約４２０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約４２０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約４２０アミノ酸～約９００アミノ酸、約４２０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約４２０アミノ酸～約８００アミノ酸、約４２０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約４２０アミノ酸～約７００アミノ酸、約４２０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約４２０アミノ酸～約６００アミノ酸、約４２０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約４２０アミノ酸～約５００アミノ酸、約４２０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約４２０アミノ酸～約４６０アミノ酸、約４２０アミノ酸～約４４０アミノ酸、約４４０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約４４０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約４４０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約４４０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約４４０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約４４０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約４４０アミノ酸～約９００アミノ酸、約４４０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約４４０アミノ酸～約８００アミノ酸、約４４０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約４４０アミノ酸～約７００アミノ酸、約４４０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約４４０アミノ酸～約６００アミノ酸、約４４０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約４４０アミノ酸～約５００アミノ酸、約４４０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約４４０アミノ酸～約４６０アミノ酸、約４６０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約４６０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約４６０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約４６０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約４６０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約４６０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約４６０アミノ酸～約９００アミノ酸、約４６０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約４６０アミノ酸～約８００アミノ酸、約４６０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約４６０アミノ酸～約７００アミノ酸、約４６０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約４６０アミノ酸～約６００アミノ酸、約４６０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約４６０アミノ酸～約５００アミノ酸、約４６０アミノ酸～約４８０アミノ酸、約４８０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約４８０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約４８０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約４８０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約４８０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約４８０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約４８０アミノ酸～約９００アミノ酸、約４８０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約４８０アミノ酸～約８００アミノ酸、約４８０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約４８０アミノ酸～約７００アミノ酸、約４８０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約４８０アミノ酸～約６００アミノ酸、約４８０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約４８０アミノ酸～約５００アミノ酸、約５００アミノ酸～約３０００アミノ酸、約５００アミノ酸～約２５００アミノ酸、約５００アミノ酸～約２０００アミノ酸、約５００アミノ酸～約１５００アミノ酸、約５００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約５００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約５００アミノ酸～約９００アミノ酸、約５００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約５００アミノ酸～約８００アミノ酸、約５００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約５００アミノ酸～約７００アミノ酸、約５００アミノ酸～約６５０アミノ酸、約５００アミノ酸～約６００アミノ酸、約５００アミノ酸～約５５０アミノ酸、約５５０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約５５０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約５５０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約５５０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約５５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約５５０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約５５０アミノ酸～約９００アミノ酸、約５５０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約５５０アミノ酸～約８００アミノ酸、約５５０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約５５０アミノ酸～約７００アミノ酸、約５５０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約５５０アミノ酸～約６００アミノ酸、約６００アミノ酸～約３０００アミノ酸、約６００アミノ酸～約２５００アミノ酸、約６００アミノ酸～約２０００アミノ酸、約６００アミノ酸～約１５００アミノ酸、約６００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約６００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約６００アミノ酸～約９００アミノ酸、約６００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約６００アミノ酸～約８００アミノ酸、約６００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約６００アミノ酸～約７００アミノ酸、約６００アミノ酸～約６５０アミノ酸、約６５０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約６５０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約６５０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約６５０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約６５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約６５０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約６５０アミノ酸～約９００アミノ酸、約６５０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約６５０アミノ酸～約８００アミノ酸、約６５０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約６５０アミノ酸～約７００アミノ酸、約７００アミノ酸～約３０００アミノ酸、約７００アミノ酸～約２５００アミノ酸、約７００アミノ酸～約２０００アミノ酸、約７００アミノ酸～約１５００アミノ酸、約７００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約７００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約７００アミノ酸～約９００アミノ酸、約７００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約７００アミノ酸～約８００アミノ酸、約７００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約７５０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約７５０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約７５０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約７５０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約７５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約７５０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約７５０アミノ酸～約９００アミノ酸、約７５０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約７５０アミノ酸～約８００アミノ酸、約８００アミノ酸～約３０００アミノ酸、約８００アミノ酸～約２５００アミノ酸、約８００アミノ酸～約２０００アミノ酸、約８００アミノ酸～約１５００アミノ酸、約８００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約８００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約８００アミノ酸～約９００アミノ酸、約８００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約８５０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約８５０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約８５０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約８５０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約８５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約８５０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約８５０アミノ酸～約９００アミノ酸、約９００アミノ酸～約３０００アミノ酸、約９００アミノ酸～約２５００アミノ酸、約９００アミノ酸～約２０００アミノ酸、約９００アミノ酸～約１５００アミノ酸、約９００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約９００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約９５０アミノ酸～約３０００アミノ酸、約９５０アミノ酸～約２５００アミノ酸、約９５０アミノ酸～約２０００アミノ酸、約９５０アミノ酸～約１５００アミノ酸、約９５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約１０００アミノ酸～約３０００アミノ酸、約１０００アミノ酸～約２５００アミノ酸、約１０００アミノ酸～約２０００アミノ酸、約１０００アミノ酸～約１５００アミノ酸、約１５００アミノ酸～約３０００アミノ酸、約１５００アミノ酸～約２５００アミノ酸、約１５００アミノ酸～約２０００アミノ酸、約２０００アミノ酸～約３０００アミノ酸、約２０００アミノ酸～約２５００アミノ酸、または約２５００アミノ酸～約３０００アミノ酸であり得る。本明細書に提供される例示的な多鎖キメラポリペプチドの図形は、図１および図２に示されている。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載の第１の標的結合ドメインのうちのいずれか）と可溶性組織因子ドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれか）は、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメイン（本明細書に記載の例示的な第１の標的結合ドメインのうちのいずれか）と可溶性組織因子ドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれか）との間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含む。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれか）と一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの例示的な第１のドメインのうちのいずれか）は、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメイン（本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれか）と一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの例示的な第１のドメインのうちのいずれか）との間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含む。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの例示的な第２のドメインのうちのいずれか）と第２の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な第２の標的結合ドメインのうちのいずれか）は、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの例示的な第２のドメインのうちのいずれか）と第２の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な第２の標的結合ドメインのうちのいずれか）との間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含む。
これらのキメラポリペプチド、核酸、ベクター、細胞、および方法の非限定的な態様は、以下に記載されており、限定されることなく任意の組み合わせで使用され得る。これらのキメラポリペプチド、核酸、ベクター、細胞、および方法の追加の態様は、当該技術分野で既知である。
組織因子
ヒト組織因子は、以下の３つのドメイン：（１）２１９アミノ酸Ｎ末端細胞外ドメイン（残基１～２１９）、（２）２２アミノ酸膜貫通ドメイン（残基２２０～２４２）、および（３）２１アミノ酸細胞質Ｃ末端尾部（残基２４２～２６３）（（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ識別子番号：Ｐ１３７２６）を含む２６３アミノ酸膜貫通タンパク質である。細胞質尾部は、Ｓｅｒ２５３およびＳｅｒ２５８に２つのリン酸化部位を含み、Ｃｙｓ２４５に１つのＳ－パルミトイル化部位を含む。細胞質ドメインの欠失または変異が組織因子凝固活性に影響を及ぼすことは見出されなかった。組織因子は、Ｃｙｓ２４５のタンパク質の細胞内ドメイン内に１つのＳ－パルミトイル化部位を有する。Ｃｙｓ２４５は、細胞内ドメインのアミノ酸末端に位置し、膜表面の近くにある。組織因子膜貫通ドメインは、単一膜貫通α－ヘリックスで構成されている。
２つのフィブロネクチンＩＩＩ型ドメインで構成されている組織因子の細胞外ドメインは、６アミノ酸リンカーを介して膜貫通ドメインに連結されている。このリンカーは、組織因子細胞外ドメインをその膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインから分離するために立体配座可動性を提供する。各組織因子フィブロネクチンＩＩＩ型モジュールは、２つの重複βシートで構成されており、上部のシートドメインには３つの逆平行βストランドが含まれており、下部のシートには４つのβストランドが含まれている。βストランドは、ストランドβＡとβＢ、βＣとβＤ、およびβＥとβＦの間のβループによって連結されており、これらの全ての立体配座が２つのモジュール内で保存されている。βストランドを連結する３つの短いα－ヘリックスセグメントが存在する。組織因子の特有の特徴は、フィブロネクチンスーパーファミリーの共通要素ではないストランドβ１０とストランドβ１１との間の１７アミノ酸β－ヘアピンである。Ｎ末端ドメインには、β６Ｆとβ７Ｇとの間に１２アミノ酸ループも含まれており、これは、Ｃ末端ドメインには存在せず、組織因子に特有のものである。かかるフィブロネクチンＩＩＩ型ドメイン構造は、免疫グロブリン様タンパク質ファミリー折り畳みの特徴であり、多種多様な細胞外タンパク質間で保存されている。
チモーゲンＦＶＩＩは、それが組織に結合して活性組織因子－ＦＶＩＩａ複合体を形成すると、タンパク質限定分解によってＦＶＩＩａに迅速に変換される。およそ０．１ｎＭ（血漿ＦＶＩＩの１％）の濃度で酵素として循環するＦＶＩＩａも、組織因子に直接結合することができる。組織因子－ＦＶＩＩａ複合体上の組織因子とＦＶＩＩａの間のアロステリック相互作用は、ＦＶＩＩａの酵素活性を大幅に増加させ、小さい発色性ペプチジル基質の加水分解速度をおよそ２０～１００倍増加させ、天然高分子基質ＦＩＸおよびＦＸの活性化速度をほぼ１００万倍増加させる。組織因子への結合時のＦＶＩＩａの活性部位のアロステリック活性化と協調して、リン脂質二重層上での組織因子－ＦＶＩＩａ複合体の形成（すなわち、膜表面上のホスファチジル－Ｌ－セリンの曝露時）は、Ｃａ２＋依存的様式でＦＩＸまたはＦＸの活性化速度をさらに１，０００倍増加させる。遊離ＦＶＩＩａと比較した組織因子－ＦＶＩＩａ－リン脂質複合体によるＦＸ活性化のおよそ１００万倍の全体的な増加は、凝固カスケードの臨界調節点である。
ＦＶＩＩは、約５０ｋＤａの一本鎖ポリペプチドであり、４０６アミノ酸残基からなり、Ｎ末端γ－カルボキシグルタミン酸リッチ（ＧＬＡ）ドメイン、２つの上皮成長因子様ドメイン（ＥＧＦ１およびＥＦＧ２）、およびＣ末端セリンプロテアーゼドメインを有する。ＦＶＩＩは、ＥＧＦ２とプロテアーゼドメインとの間の短いリンカー領域におけるＩｌｅ－１５４－Ａｒｇ１５２結合の特異的タンパク質分解切断によってＦＶＩＩａに活性化される。この切断により、軽鎖および重鎖がＣｙｓ１３５およびＣｙｓ２６２の単一ジスルフィド結合によって一緒に保持されるようになる。ＦＶＩＩａは、そのＮ末端ＧＬＡドメインを介してＣａ２＋依存的様式でリン脂質膜に結合する。ＧＬＡドメインのすぐＣ末端側に、芳香族スタックおよび２つのＥＧＦドメインが存在する。芳香族スタックは、ＧＬＡドメインを、単一のＣａ２＋イオンに結合するＥＧＦ１ドメインに連結する。このＣａ２＋結合部位の占有により、ＦＶＩＩａアミド分解活性および組織因子会合が増加する。触媒トライアドは、Ｈｉｓ１９３、Ａｓｐ２４２、およびＳｅｒ３４４からなり、ＦＶＩＩａプロテアーゼドメイン内での単一のＣａ２＋イオンの結合は、その触媒活性に不可欠である。ＦＶＩＩのＦＶＩＩａへのタンパク質分解活性は、Ｉｌｅ１５３で新たに形成されたアミノ末端を解放して、折り返し、活性化ポケットに挿入されて、Ａｓｐ３４３のカルボン酸塩と塩橋を形成して、オキシアニオンホールを生成する。この塩橋の形成は、ＦＶＩＩａ活性に不可欠である。しかしながら、オキシアニオンホールの形成は、タンパク質分解活性化時に遊離ＦＶＩＩａでは生じない。結果として、ＦＶＩＩａは、血漿プロテアーゼ阻害剤によってほとんど認識されないチモーゲン様状態で循環し、それがおよそ９０分の半減期で循環することを可能にする。
膜表面上でのＦＶＩＩａ活性部位の組織因子媒介性位置付けは、同族基質に対するＦＶＩＩａに重要である。遊離ＦＶＩＩａは、その活性部位が膜表面の約８０Å上に位置付けられた膜に結合すると、安定した拡張構造をとる。ＦＶＩＩａが組織因子に結合すると、ＦＶａ活性部位は、膜に約６Å近づいて再位置付けられる。この調節は、ＦＶＩＩａ触媒トライアドの標的基質切断部位との適切な整列を助け得る。ＧＬＡドメインレスＦＶＩＩａを使用して、活性部位が依然として膜上から同様の距離で位置付けられたことが示されており、組織因子がＦＶＩＩａ－膜相互作用の不在下でさえもＦＶＩＩａ活性部位位置付けを完全に支援することができることを示す。追加のデータは、組織因子細胞外ドメインが何らかの方法で膜表面に繋留されている限り、組織因子が完全なＦＶＩＩａタンパク質分解活性を支援することを示した。しかしながら、ＦＶＩＩａの活性部位を膜表面から８０Å超えて上昇させることにより、組織因子－ＦＶＩＩａ複合体がＦＸを活性化する能力が大幅に低下したが、組織因子－ＦＶＩＩａアミド分解活性は低下しなかった。
アラニンスキャニング変異誘発は、ＦＶＩＩａとの相互作用のための組織因子細胞外ドメインにおける特定のアミノ酸側鎖の役割を評価するために使用されている（Ｇｉｂｂｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３３（４７）：１４００３－１４０１０，１９９４、Ｓｃｈｕｌｌｅｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２６９（３０）：１９３９９－１９４０３，１９９４）。アラニン置換は、アラニン置換がＦＶＩＩａ結合に対して５～１０倍低い親和性を引き起こす限定された数の残基位置を特定した。これらの残基側鎖の大半が、高分子リガンド相互作用と調和して、結晶構造における溶媒に十分に曝露されることが見出された。ＦＶＩＩａリガンド結合部位は、２つのモジュール間の境界の広範な領域にわたって位置する。Ｃ－モジュールにおいて、突出したＢ－Ｃループ上に位置する残基Ａｒｇ１３５およびＰｈｅ１４０は、ＦＶＩＩａとの独立した接触を提供する。Ｌｅｕ１３３は、指様の構造の基部に位置し、２つのモジュール間の隙間にパッキングされている。これにより、Ｌｙｓ２０、Ｔｈｒ６０、Ａｓｐ５８、およびＩｌｅ２２からなる重要な結合残基の主要なクラスターに連続性が提供される。Ｔｈｒ６０は、部分的にのみ溶媒に曝露されており、リガンドと有意に接触するのではなく、局所的な構造的役割を果たし得る。結合部位は、Ｇｌｕ２４およびＧｌｎ１１０、ならびに潜在的により遠位の残基Ｖａｌ２０７を含むモジュール間角度の凹面側に伸びている。結合領域は、Ａｓｐ５８から、Ｌｙｓ４８、Ｌｙｓ４６、Ｇｌｎ３７、Ａｓｐ４４、およびＴｒｐ４５によって形成された凸面領域に伸びている。Ｔｒｐ４５およびＡｓｐ４４は、ＦＶＩＩａと独立して相互作用せず、Ｔｒｐ４５位での変異効果が、隣接するＡｓｐ４４およびＧｌｎ３７側鎖の局所的パッキングのためのこの側鎖の構造的重要性を反映し得ることを示す。相互作用領域は、Ｎ－モジュール内に疎水性クラスターの一部を形成する２つの表面露出芳香族残基Ｐｈｅ７６およびＴｙｒ７８をさらに含む。
組織因子－ＦＶＩＩａの既知の生理学的基質は、ＦＶＩＩ、ＦＩＸ、およびＦＸ、ならびにある特定のプロテイナーゼ活性化受容体である。変異分析により、変異すると、小さいペプチジル基質に対する完全なＦＶＩＩａアミド分解活性を支援するが、高分子基質（すなわち、ＦＶＩＩ、ＦＩＸ、およびＦＸ）の活性化を支援する能力を欠くいくつかの残基が特定されている（Ｒｕｆ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２６７（３１）：２２２０６－２２２１０，１９９２、Ｒｕｆ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２６７（９）：６３７５－６３８１，１９９２、Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２７１（３６）：２１７５２－２１７５７，１９９６、Ｋｉｒｃｈｈｏｆｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３９（２５）：７３８０－７３８７，２０００）。残基１５９～１６５の組織因子ループ領域、およびこの可動性ループ内のまたはそれに隣接する残基が、組織因子－ＦＶＩＩａ複合体のタンパク質分解活性に不可欠であることが示されている。これは、ＦＶＩＩａ活性部位からかなり離れた組織因子の提案された基質結合エキソサイト領域を定義する。グリシン残基をわずかによりかさばったアラニン残基で置換することにより、組織因子－ＦＶＩＩａのタンパク質分解活性が著しく損なわれる。これは、グリシンによってもたらされる可動性が組織因子高分子基質認識のための残基１５９～１６５のループに不可欠であることを示唆する。
残基Ｌｙｓ１６５およびＬｙｓ１６６が基質認識および結合に重要であることも実証されている。これらの残基のいずれかをアラニンに変異させることにより、組織因子補因子機能が大幅に低下する。Ｌｙｓ１６５とＬｙｓ１６６は互いに外方に向いており、Ｌｙｓ１６５は、大半の組織因子－ＦＶＩＩａ構造内でＦＶＩＩａの方を指し、Ｌｙｓ１６６は、結晶構造内の基質結合エキソサイト領域を指している。ＦＶＩＩａのＬｙｓ１６５とＦＶＩＩａのＧｌａ３５との間の推定塩橋形成は、組織因子のＦＶＩＩａのＧＬＡドメインとの相互作用が基質認識を調節するという概念を支持するであろう。これらの結果は、組織因子外部ドメインのＣ末端部分が、ＦＩＸおよびＦＸのＧＬＡドメイン、隣接する可能性のあるＥＧＦ１ドメインと直接相互作用し、ＦＶＩＩａ ＧＬＡドメインの存在がこれらの相互作用を直接または間接的のいずれかで調節し得ることを示唆する。
可溶性組織因子ドメイン
本明細書に記載のポリペプチド、組成物、または方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、シグナル配列、膜貫通ドメイン、および細胞内ドメインを欠く野生型組織因子ポリペプチドであり得る。いくつかの例では、可溶性組織因子ドメインは、組織因子変異体であり得、野生型組織因子ポリペプチドが、シグナル配列、膜貫通ドメイン、および細胞内ドメインを欠き、選択されたアミノ酸でさらに修飾されている。いくつかの例では、可溶性組織因子ドメインは、可溶性ヒト組織因子ドメインであり得る。いくつかの例では、可溶性組織因子ドメインは、可溶性マウス組織因子ドメインであり得る。いくつかの例では、可溶性組織因子ドメインは、可溶性ラット組織因子ドメインであり得る。可溶性ヒト組織因子ドメイン、可溶性マウス組織因子ドメイン、可溶性ラット組織因子ドメイン、および変異体可溶性組織因子ドメインの非限定的な例が以下に示される。
例示的な可溶性ヒト組織因子ドメイン（配列番号１）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
可溶性ヒト組織因子ドメイン（配列番号２）をコードする例示的な核酸
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
例示的な変異体可溶性ヒト組織因子ドメイン（配列番号３）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＡＴＡＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＡＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＡＲＮＮＴＡＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
例示的な変異体可溶性ヒト組織因子ドメイン（配列番号４）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＡＴＡＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＡＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＡＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＡＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＡＲＮＮＴＡＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
例示的な可溶性マウス組織因子ドメイン（配列番号５）
ａｇｉｐｅｋａｆｎｌｔｗｉｓｔｄｆｋｔｉｌｅｗｑｐｋｐｔｎｙｔｙｔｖｑｉｓｄｒｓｒｎｗｋｎｋｃｆｓｔｔｄｔｅｃｄｌｔｄｅｉｖｋｄｖｔｗａｙｅａｋｖｌｓｖｐｒｒｎｓｖｈｇｄｇｄｑｌｖｉｈｇｅｅｐｐｆｔｎａｐ ｋｆｌｐｙｒｄｔｎｌｇｑｐｖｉｑｑｆｅｑｄｇｒｋｌｎｖｖｖｋｄｓｌｔｌｖｒｋｎｇｔｆｌｔｌｒｑｖｆｇｋｄｌｇｙｉｉｔｙｒｋｇｓｓｔｇｋｋｔｎｉｔｎｔｎｅｆｓｉｄｖｅｅｇｖｓｙｃｆｆｖｑａｍｉｆｓｒｋｔｎｑｎｓｐｇｓｓｔｖｃｔｅｑｗｋｓｆｌｇｅ
例示的な可溶性ラット組織因子ドメイン（配列番号６）
Ａｇｔｐｐｇｋａｆｎｌｔｗｉｓｔｄｆｋｔｉｌｅｗｑｐｋｐｔｎｙｔｙｔｖｑｉｓｄｒｓｒｎｗｋｙｋｃｔｇｔｔｄｔｅｃｄｌｔｄｅｉｖｋｄｖｎｗｔｙｅａｒｖｌｓｖｐｗｒｎｓｔｈｇｋｅｔｌｆｇｔｈｇｅｅｐｐｆｔｎａｒｋｆｌｐｙｒｄｔｋｉｇｑｐｖｉｑｋｙｅｑｇｇｔｋｌｋｖｔｖｋｄｓｆｔｌｖｒｋｎｇｔｆｌｔｌｒｑｖｆｇｎｄｌｇｙｉｌｔｙｒｋｄｓｓｔｇｒｋｔｎｔｔｈｔｎｅｆｌｉｄｖｅｋｇｖｓｙｃｆｆａｑａｖｉｆｓｒｋｔｎｈｋｓｐｅｓｉｔｋｃｔｅｑｗｋｓｖｌｇｅ
いくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、配列番号１、３、４、５、または６と少なくとも７０％同一、少なくとも７２％同一、少なくとも７４％同一、少なくとも７６％同一、少なくとも７８％同一、少なくとも８０％同一、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一の配列を含み得る。いくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、１～２０個のアミノ酸（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０個のアミノ酸）がそのＮ末端から除去された、および／または１～２０個のアミノ酸（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０個のアミノ酸）がそのＣ末端から除去された、配列番号１、３、４、５、または６の配列を含み得る。
当該技術分野で理解され得るように、当業者であれば、異なる哺乳動物種間で保存されているアミノ酸の変異がタンパク質の活性および／または構造的安定性を低下させる可能性が高い一方で、異なる哺乳類種間で保存されていないアミノ酸の変異がタンパク質の活性および／または構造的安定性を低下させる可能性が低いことを理解するであろう。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの例では、可溶性組織因子ドメインは、第ＶＩＩａ因子に結合することができない。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの例では、可溶性組織因子ドメインは、不活性第Ｘ因子を第Ｘａ因子に変換しない。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドは、哺乳動物における血液凝固を刺激しない。
いくつかの例では、可溶性組織因子ドメインは、可溶性ヒト組織因子ドメインであり得る。いくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、可溶性マウス組織因子ドメインであり得る。いくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、可溶性ラット組織因子ドメインであり得る。
いくつかの例では、可溶性組織因子ドメインは、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちの１つ以上（例えば、２、３、４、５、６、または７つ）を含まない。いくつかの実施形態では、変異体可溶性組織因子は、配列番号３または配列番号４のアミノ酸配列を有する。
いくつかの例では、可溶性組織因子ドメインは、配列番号２と少なくとも７０％同一、少なくとも７２％同一、少なくとも７４％同一、少なくとも７６％同一、少なくとも７８％同一、少なくとも８０％同一、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一の配列を含む核酸によってコードされ得る。
いくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、全長約２０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約２０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約２０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約２０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約２０アミノ酸～約２００アミノ酸、約２０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１３０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１２５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１２０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１１５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１１０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１０５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１００アミノ酸、約２０アミノ酸～約９５アミノ酸、約２０アミノ酸～約９０アミノ酸、約２０アミノ酸～約８５アミノ酸、約２０アミノ酸～約８０アミノ酸、約２０アミノ酸～約７５アミノ酸、約２０アミノ酸～約７０アミノ酸、約２０アミノ酸～約６０アミノ酸、約２０アミノ酸～約５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約４０アミノ酸、約２０アミノ酸～約３０アミノ酸、約３０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約３０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約３０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約３０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約３０アミノ酸～約２００アミノ酸、約３０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約３０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約３０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約３０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約３０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約３０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約３０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約３０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約３０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約３０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約３０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約３０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約３０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約３０アミノ酸～約１３０アミノ酸、約３０アミノ酸～約１２５アミノ酸、約３０アミノ酸～約１２０アミノ酸、約３０アミノ酸～約１１５アミノ酸、約３０アミノ酸～約１１０アミノ酸、約３０アミノ酸～約１０５アミノ酸、約３０アミノ酸～約１００アミノ酸、約３０アミノ酸～約９５アミノ酸、約３０アミノ酸～約９０アミノ酸、約３０アミノ酸～約８５アミノ酸、約３０アミノ酸～約８０アミノ酸、約３０アミノ酸～約７５アミノ酸、約３０アミノ酸～約７０アミノ酸、約３０アミノ酸～約６０アミノ酸、約３０アミノ酸～約５０アミノ酸、約３０アミノ酸～約４０アミノ酸、約４０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約４０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約４０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約４０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約４０アミノ酸～約２００アミノ酸、約４０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約４０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約４０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約４０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約４０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約４０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約４０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約４０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約４０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約４０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約４０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約４０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約４０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約４０アミノ酸～約１３０アミノ酸、約４０アミノ酸～約１２５アミノ酸、約４０アミノ酸～約１２０アミノ酸、約４０アミノ酸～約１１５アミノ酸、約４０アミノ酸～約１１０アミノ酸、約４０アミノ酸～約１０５アミノ酸、約４０アミノ酸～約１００アミノ酸、約４０アミノ酸～約９５アミノ酸、約４０アミノ酸～約９０アミノ酸、約４０アミノ酸～約８５アミノ酸、約４０アミノ酸～約８０アミノ酸、約４０アミノ酸～約７５アミノ酸、約４０アミノ酸～約７０アミノ酸、約４０アミノ酸～約６０アミノ酸、約４０アミノ酸～約５０アミノ酸、約５０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約５０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約５０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約５０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約５０アミノ酸～約２００アミノ酸、約５０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約５０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約５０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約５０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約５０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約５０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約５０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約５０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約５０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約５０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約５０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約５０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約５０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約５０アミノ酸～約１３０アミノ酸、約５０アミノ酸～約１２５アミノ酸、約５０アミノ酸～約１２０アミノ酸、約５０アミノ酸～約１１５アミノ酸、約５０アミノ酸～約１１０アミノ酸、約５０アミノ酸～約１０５アミノ酸、約５０アミノ酸～約１００アミノ酸、約５０アミノ酸～約９５アミノ酸、約５０アミノ酸～約９０アミノ酸、約５０アミノ酸～約８５アミノ酸、約５０アミノ酸～約８０アミノ酸、約５０アミノ酸～約７５アミノ酸、約５０アミノ酸～約７０アミノ酸、約５０アミノ酸～約６０アミノ酸、約６０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約６０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約６０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約６０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約６０アミノ酸～約２００アミノ酸、約６０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約６０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約６０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約６０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約６０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約６０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約６０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約６０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約６０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約６０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約６０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約６０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約６０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約６０アミノ酸～約１３０アミノ酸、約６０アミノ酸～約１２５アミノ酸、約６０アミノ酸～約１２０アミノ酸、約６０アミノ酸～約１１５アミノ酸、約６０アミノ酸～約１１０アミノ酸、約６０アミノ酸～約１０５アミノ酸、約６０アミノ酸～約１００アミノ酸、約６０アミノ酸～約９５アミノ酸、約６０アミノ酸～約９０アミノ酸、約６０アミノ酸～約８５アミノ酸、約６０アミノ酸～約８０アミノ酸、約６０アミノ酸～約７５アミノ酸、約６０アミノ酸～約７０アミノ酸、約７０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約７０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約７０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約７０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約７０アミノ酸～約２００アミノ酸、約７０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約７０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約７０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約７０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約７０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約７０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約７０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約７０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約７０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約７０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約７０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約７０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約７０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約７０アミノ酸～約１３０アミノ酸、約７０アミノ酸～約１２５アミノ酸、約７０アミノ酸～約１２０アミノ酸、約７０アミノ酸～約１１５アミノ酸、約７０アミノ酸～約１１０アミノ酸、約７０アミノ酸～約１０５アミノ酸、約７０アミノ酸～約１００アミノ酸、約７０アミノ酸～約９５アミノ酸、約７０アミノ酸～約９０アミノ酸、約７０アミノ酸～約８５アミノ酸、約７０アミノ酸～約８０アミノ酸、約８０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約８０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約８０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約８０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約８０アミノ酸～約２００アミノ酸、約８０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約８０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約８０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約８０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約８０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約８０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約８０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約８０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約８０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約８０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約８０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約８０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約８０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約８０アミノ酸～約１３０アミノ酸、約８０アミノ酸～約１２５アミノ酸、約８０アミノ酸～約１２０アミノ酸、約８０アミノ酸～約１１５アミノ酸、約８０アミノ酸～約１１０アミノ酸、約８０アミノ酸～約１０５アミノ酸、約８０アミノ酸～約１００アミノ酸、約８０アミノ酸～約９５アミノ酸、約８０アミノ酸～約９０アミノ酸、約９０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約９０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約９０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約９０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約９０アミノ酸～約２００アミノ酸、約９０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約９０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約９０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約９０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約９０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約９０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約９０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約９０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約９０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約９０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約９０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約９０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約９０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約９０アミノ酸～約１３０アミノ酸、約９０アミノ酸～約１２５アミノ酸、約９０アミノ酸～約１２０アミノ酸、約９０アミノ酸～約１１５アミノ酸、約９０アミノ酸～約１１０アミノ酸、約９０アミノ酸～約１０５アミノ酸、約９０アミノ酸～約１００アミノ酸、約１００アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１００アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１００アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１００アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１００アミノ酸～約２００アミノ酸、約１００アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１００アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１００アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１００アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１００アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１００アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１００アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１００アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１００アミノ酸～約１５５アミノ酸、約１００アミノ酸～約１５０アミノ酸、約１００アミノ酸～約１４５アミノ酸、約１００アミノ酸～約１４０アミノ酸、約１００アミノ酸～約１３５アミノ酸、約１００アミノ酸～約１３０アミノ酸、約１００アミノ酸～約１２５アミノ酸、約１００アミノ酸～約１２０アミノ酸、約１００アミノ酸～約１１５アミノ酸、約１００アミノ酸～約１１０アミノ酸、約１１０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１１０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１１０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１１０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１１０アミノ酸～約２００アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１３０アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１２５アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１２０アミノ酸、約１１０アミノ酸～約１１５アミノ酸、約１１５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１１５アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１１５アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１１５アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１１５アミノ酸～約２００アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１１
５アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１５５アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１５０アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１４５アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１４０アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１３５アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１３０アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１２５アミノ酸、約１１５アミノ酸～約１２０アミノ酸、約１２０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１２０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１２０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１２０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１２０アミノ酸～約２００アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１３０アミノ酸、約１２０アミノ酸～約１２５アミノ酸、約１２５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１２５アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１２５アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１２５アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１２５アミノ酸～約２００アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１５５アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１５０アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１４５アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１４０アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１３５アミノ酸、約１２５アミノ酸～約１３０アミノ酸、約１３０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１３０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１３０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１３０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１３０アミノ酸～約２００アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約１３０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約１３５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１３５アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１３５アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１３５アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１３５アミノ酸～約２００アミノ酸、約１３５アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１３５アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１３５アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１３５アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１３５アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１３５アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１３５アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１３５アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１３５アミノ酸～約１５５アミノ酸、約１３５アミノ酸～約１５０アミノ酸、約１３５アミノ酸～約１４５アミノ酸、約１３５アミノ酸～約１４０アミノ酸、約１４０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１４０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１４０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１４０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１４０アミノ酸～約２００アミノ酸、約１４０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１４０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１４０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１４０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１４０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１４０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１４０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１４０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１４０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約１４０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約１４０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約１４５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１４５アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１４５アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１４５アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１４５アミノ酸～約２００アミノ酸、約１４５アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１４５アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１４５アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１４５アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１４５アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１４５アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１４５アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１４５アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１４５アミノ酸～約１５５アミノ酸、約１４５アミノ酸～約１５０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１５０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１５０アミノ酸～約２００アミノ酸、約１５０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１５０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１５０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１５０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１５０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１５０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約１５５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１５５アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１５５アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１５５アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１５５アミノ酸～約２００アミノ酸、約１５５アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１５５アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１５５アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１５５アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１５５アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１５５アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１５５アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１５５アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１６０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１６０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１６０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１６０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１６０アミノ酸～約２００アミノ酸、約１６０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１６０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１６０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１６０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１６０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１６０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１６０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１６５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１６５アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１６５アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１６５アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１６５アミノ酸～約２００アミノ酸、約１６５アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１６５アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１６５アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１６５アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１６５アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１６５アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１７０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１７０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１７０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１７０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１７０アミノ酸～約２００アミノ酸、約１７０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１７０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１７０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１７０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１７０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１７５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１７５アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１７５アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１７５アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１７５アミノ酸～約２００アミノ酸、約１７５アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１７５アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１７５アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１７５アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１８０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１８０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１８０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１８０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１８０アミノ酸～約２００アミノ酸、約１８０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１８０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１８０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１８５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１８５アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１８５アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１８５アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１８５アミノ酸～約２００アミノ酸、約１８５アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１８５アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１９０アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１９０アミノ酸～約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１９５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約２１５アミノ酸、約１９５アミノ酸～約２１０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約２０５アミノ酸、約１９５アミノ酸～約２００アミノ酸、約２００アミノ酸～約２２０アミノ酸、約２００アミノ酸～約２１５アミノ酸、約２００アミノ酸～約２１０アミノ酸、約２００アミノ酸～約２０５アミノ酸、約２０５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約２０５アミノ酸～約２１５アミノ酸、約２０５アミノ酸～約２１０アミノ酸、約２１０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約２１０アミノ酸～約２１５アミノ酸、または約２１５アミノ酸～約２２０アミノ酸を有し得る。
リンカー配列
いくつかの実施形態では、リンカー配列は、可動性リンカー配列であり得る。使用され得るリンカー配列の非限定的な例は、Ｋｌｅｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｄｅｓｉｇｎ ＆ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ２７（１０）：３２５－３３０，２０１４、Ｐｒｉｙａｎｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ．２２（２）：１５３－１６７，２０１３に記載されている。いくつかの例では、リンカー配列は、合成リンカー配列である。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のリンカー配列（複数可）（例えば、同じまたは異なるリンカー配列、例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）を含み得る。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のリンカー配列（複数可）（例えば、同じまたは異なるリンカー配列、例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）を含み得る。
いくつかの実施形態では、リンカー配列は、全長１アミノ酸～約１００アミノ酸、１アミノ酸～約９０アミノ酸、１アミノ酸～約８０アミノ酸、１アミノ酸～約７０アミノ酸、１アミノ酸～約６０アミノ酸、１アミノ酸～約５０アミノ酸、１アミノ酸～約４５アミノ酸、１アミノ酸～約４０アミノ酸、１アミノ酸～約３５アミノ酸、１アミノ酸～約３０アミノ酸、１アミノ酸～約２５アミノ酸、１アミノ酸～約２４アミノ酸、１アミノ酸～約２２アミノ酸、１アミノ酸～約２０アミノ酸、１アミノ酸～約１８アミノ酸、１アミノ酸～約１６アミノ酸、１アミノ酸～約１４アミノ酸、１アミノ酸～約１２アミノ酸、１アミノ酸～約１０アミノ酸、１アミノ酸～約８アミノ酸、１アミノ酸～約６アミノ酸、１アミノ酸～約４アミノ酸、約２アミノ酸～約１００アミノ酸、約２アミノ酸～約９０アミノ酸、約２アミノ酸～約８０アミノ酸、約２アミノ酸～約７０アミノ酸、約２アミノ酸～約６０アミノ酸、約２アミノ酸～約５０アミノ酸、約２アミノ酸～約４５アミノ酸、約２アミノ酸～約４０アミノ酸、約２アミノ酸～約３５アミノ酸、約２アミノ酸～約３０アミノ酸、約２アミノ酸～約２５アミノ酸、約２アミノ酸～約２４アミノ酸、約２アミノ酸～約２２アミノ酸、約２アミノ酸～約２０アミノ酸、約２アミノ酸～約１８アミノ酸、約２アミノ酸～約１６アミノ酸、約２アミノ酸～約１４アミノ酸、約２アミノ酸～約１２アミノ酸、約２アミノ酸～約１０アミノ酸、約２アミノ酸～約８アミノ酸、約２アミノ酸～約６アミノ酸、約２アミノ酸～約４アミノ酸、約４アミノ酸～約１００アミノ酸、約４アミノ酸～約９０アミノ酸、約４アミノ酸～約８０アミノ酸、約４アミノ酸～約７０アミノ酸、約４アミノ酸～約６０アミノ酸、約４アミノ酸～約５０アミノ酸、約４アミノ酸～約４５アミノ酸、約４アミノ酸～約４０アミノ酸、約４アミノ酸～約３５アミノ酸、約４アミノ酸～約３０アミノ酸、約４アミノ酸～約２５アミノ酸、約４アミノ酸～約２４アミノ酸、約４アミノ酸～約２２アミノ酸、約４アミノ酸～約２０アミノ酸、約４アミノ酸～約１８アミノ酸、約４アミノ酸～約１６アミノ酸、約４アミノ酸～約１４アミノ酸、約４アミノ酸～約１２アミノ酸、約４アミノ酸～約１０アミノ酸、約４アミノ酸～約８アミノ酸、約４アミノ酸～約６アミノ酸、約６アミノ酸～約１００アミノ酸、約６アミノ酸～約９０アミノ酸、約６アミノ酸～約８０アミノ酸、約６アミノ酸～約７０アミノ酸、約６アミノ酸～約６０アミノ酸、約６アミノ酸～約５０アミノ酸、約６アミノ酸～約４５アミノ酸、約６アミノ酸～約４０アミノ酸、約６アミノ酸～約３５アミノ酸、約６アミノ酸～約３０アミノ酸、約６アミノ酸～約２５アミノ酸、約６アミノ酸～約２４アミノ酸、約６アミノ酸～約２２アミノ酸、約６アミノ酸～約２０アミノ酸、約６アミノ酸～約１８アミノ酸、約６アミノ酸～約１６アミノ酸、約６アミノ酸～約１４アミノ酸、約６アミノ酸～約１２アミノ酸、約６アミノ酸～約１０アミノ酸、約６アミノ酸～約８アミノ酸、約８アミノ酸～約１００アミノ酸、約８アミノ酸～約９０アミノ酸、約８アミノ酸～約８０アミノ酸、約８アミノ酸～約７０アミノ酸、約８アミノ酸～約６０アミノ酸、約８アミノ酸～約５０アミノ酸、約８アミノ酸～約４５アミノ酸、約８アミノ酸～約４０アミノ酸、約８アミノ酸～約３５アミノ酸、約８アミノ酸～約３０アミノ酸、約８アミノ酸～約２５アミノ酸、約８アミノ酸～約２４アミノ酸、約８アミノ酸～約２２アミノ酸、約８アミノ酸～約２０アミノ酸、約８アミノ酸～約１８アミノ酸、約８アミノ酸～約１６アミノ酸、約８アミノ酸～約１４アミノ酸、約８アミノ酸～約１２アミノ酸、約８アミノ酸～約１０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１００アミノ酸、約１０アミノ酸～約９０アミノ酸、約１０アミノ酸～約８０アミノ酸、約１０アミノ酸～約７０アミノ酸、約１０アミノ酸～約６０アミノ酸、約１０アミノ酸～約５０アミノ酸、約１０アミノ酸～約４５アミノ酸、約１０アミノ酸～約４０アミノ酸、約１０アミノ酸～約３５アミノ酸、約１０アミノ酸～約３０アミノ酸、約１０アミノ酸～約２５アミノ酸、約１０アミノ酸～約２４アミノ酸、約１０アミノ酸～約２２アミノ酸、約１０アミノ酸～約２０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１８アミノ酸、約１０アミノ酸～約１６アミノ酸、約１０アミノ酸～約１４アミノ酸、約１０アミノ酸～約１２アミノ酸、約１２アミノ酸～約１００アミノ酸、約１２アミノ酸～約９０アミノ酸、約１２アミノ酸～約８０アミノ酸、約１２アミノ酸～約７０アミノ酸、約１２アミノ酸～約６０アミノ酸、約１２アミノ酸～約５０アミノ酸、約１２アミノ酸～約４５アミノ酸、約１２アミノ酸～約４０アミノ酸、約１２アミノ酸～約３５アミノ酸、約１２アミノ酸～約３０アミノ酸、約１２アミノ酸～約２５アミノ酸、約１２アミノ酸～約２４アミノ酸、約１２アミノ酸～約２２アミノ酸、約１２アミノ酸～約２０アミノ酸、約１２アミノ酸～約１８アミノ酸、約１２アミノ酸～約１６アミノ酸、約１２アミノ酸～約１４アミノ酸、約１４アミノ酸～約１００アミノ酸、約１４アミノ酸～約９０アミノ酸、約１４アミノ酸～約８０アミノ酸、約１４アミノ酸～約７０アミノ酸、約１４アミノ酸～約６０アミノ酸、約１４アミノ酸～約５０アミノ酸、約１４アミノ酸～約４５アミノ酸、約１４アミノ酸～約４０アミノ酸、約１４アミノ酸～約３５アミノ酸、約１４アミノ酸～約３０アミノ酸、約１４アミノ酸～約２５アミノ酸、約１４アミノ酸～約２４アミノ酸、約１４アミノ酸～約２２アミノ酸、約１４アミノ酸～約２０アミノ酸、約１４アミノ酸～約１８アミノ酸、約１４アミノ酸～約１６アミノ酸、約１６アミノ酸～約１００アミノ酸、約１６アミノ酸～約９０アミノ酸、約１６アミノ酸～約８０アミノ酸、約１６アミノ酸～約７０アミノ酸、約１６アミノ酸～約６０アミノ酸、約１６アミノ酸～約５０アミノ酸、約１６アミノ酸～約４５アミノ酸、約１６アミノ酸～約４０アミノ酸、約１６アミノ酸～約３５アミノ酸、約１６アミノ酸～約３０アミノ酸、約１６アミノ酸～約２５アミノ酸、約１６アミノ酸～約２４アミノ酸、約１６アミノ酸～約２２アミノ酸、約１６アミノ酸～約２０アミノ酸、約１６アミノ酸～約１８アミノ酸、約１８アミノ酸～約１００アミノ酸、約１８アミノ酸～約９０アミノ酸、約１８アミノ酸～約８０アミノ酸、約１８アミノ酸～約７０アミノ酸、約１８アミノ酸～約６０アミノ酸、約１８アミノ酸～約５０アミノ酸、約１８アミノ酸～約４５アミノ酸、約１８アミノ酸～約４０アミノ酸、約１８アミノ酸～約３５アミノ酸、約１８アミノ酸～約３０アミノ酸、約１８アミノ酸～約２５アミノ酸、約１８アミノ酸～約２４アミノ酸、約１８アミノ酸～約２２アミノ酸、約１８アミノ酸～約２０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１００アミノ酸、約２０アミノ酸～約９０アミノ酸、約２０アミノ酸～約８０アミノ酸、約２０アミノ酸～約７０アミノ酸、約２０アミノ酸～約６０アミノ酸、約２０アミノ酸～約５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約４５アミノ酸、約２０アミノ酸～約４０アミノ酸、約２０アミノ酸～約３５アミノ酸、約２０アミノ酸～約３０アミノ酸、約２０アミノ酸～約２５アミノ酸、約２０アミノ酸～約２４アミノ酸、約２０アミノ酸～約２２アミノ酸、約２２アミノ酸～約１００アミノ酸、約２２アミノ酸～約９０アミノ酸、約２２アミノ酸～約８０アミノ酸、約２２アミノ酸～約７０アミノ酸、約２２アミノ酸～約６０アミノ酸、約２２アミノ酸～約５０アミノ酸、約２２アミノ酸～約４５アミノ酸、約２２アミノ酸～約４０アミノ酸、約２２アミノ酸～約３５アミノ酸、約２２アミノ酸～約３０アミノ酸、約２２アミノ酸～約２５アミノ酸、約２２アミノ酸～約２４アミノ酸、約２５アミノ酸～約１００アミノ酸、約２５アミノ酸～約９０アミノ酸、約２５アミノ酸～約８０アミノ酸、約２５アミノ酸～約７０アミノ酸、約２５アミノ酸～約６０アミノ酸、約２５アミノ酸～約５０アミノ酸、約２５アミノ酸～約４５アミノ酸、約２５アミノ酸～約４０アミノ酸、約２５アミノ酸～約３５アミノ酸、約２５アミノ酸～約３０アミノ酸、約３０アミノ酸～約１００アミノ酸、約３０アミノ酸～約９０アミノ酸、約３０アミノ酸～約８０アミノ酸、約３０アミノ酸～約７０アミノ酸、約３０アミノ酸～約６０アミノ酸、約３０アミノ酸～約５０アミノ酸、約３０アミノ酸～約４５アミノ酸、約３０アミノ酸～約４０アミノ酸、約３０アミノ酸～約３５アミノ酸、約３５アミノ酸～約１００アミノ酸、約３５アミノ酸～約９０アミノ酸、約３５アミノ酸～約８０アミノ酸、約３５アミノ酸～約７０アミノ酸、約３５アミノ酸～約６０アミノ酸、約３５アミノ酸～約５０アミノ酸、約３５アミノ酸～約４５アミノ酸、約３５アミノ酸～約４０アミノ酸、約４０アミノ酸～約１００アミノ酸、約４０アミノ酸～約９０アミノ酸、約４０アミノ酸～約８０アミノ酸、約４０アミノ酸～約７０アミノ酸、約４０アミノ酸～約６０アミノ酸、約４０アミノ酸～約５０アミノ酸、約４０アミノ酸～約４５アミノ酸、約４５アミノ酸～約１００アミノ酸、約４５アミノ酸～約９０アミノ酸、約４５アミノ酸～約８０アミノ酸、約４５アミノ酸～約７０アミノ酸、約４５アミノ酸～約６０アミノ酸、約４５アミノ酸～約５０アミノ酸、約５０アミノ酸～約１００アミノ酸、約５０アミノ酸～約９０アミノ酸、約５０アミノ酸～約８０アミノ酸、約５０アミノ酸～約７０アミノ酸、約５０アミノ酸～約６０アミノ酸、約６０アミノ酸～約１００アミノ酸、約６０アミノ酸～約９０アミノ酸、約６０アミノ酸～約８０アミノ酸、約６０アミノ酸～約７０アミノ酸、約７０アミノ酸～約１００アミノ酸、約７０アミノ酸～約９０アミノ酸、約７０アミノ酸～約８０アミノ酸、約８０アミノ酸～約１００アミノ酸、約８０アミノ酸～約９０アミノ酸、または約９０アミノ酸～約１００アミノ酸を有し得る。
いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン（ＧｌｙまたはＧ）残基に富む。いくつかの実施形態では、リンカーは、セリン（ＳｅｒまたはＳ）残基に富む。いくつかの実施形態では、リンカーは、グリシン残基およびセリン残基に富む。いくつかの実施形態では、リンカーは、１つ以上のグリシン－セリン残基対（ＧＳ）、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上のＧＳ対を有する。いくつかの実施形態では、リンカーは、１つ以上のＧｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ（ＧＧＧＳ）配列、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上のＧＧＧＳ配列を有する。いくつかの実施形態では、リンカーは、１つ以上のＧｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ（ＧＧＧＧＳ）配列、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上のＧＧＧＧＳ配列を有する。いくつかの実施形態では、リンカーは、１つ以上のＧｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ（ＧＧＳＧ）配列、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上のＧＧＳＧ配列を有する。
いくつかの実施形態では、リンカー配列は、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７）を含み得るか、またはそれからなり得る。いくつかの実施形態では、リンカー配列は、ＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴ（配列番号８）を含むか、またはそれらからなる核酸によってコードされ得る。いくつかの実施形態では、リンカー配列は、ＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号９）を含み得るか、またはそれからなり得る。
標的結合ドメイン
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および／または追加の１つ以上の標的結合ドメインは、抗原結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な抗原結合ドメインのうちのいずれか）、可溶性インターロイキンまたはサイトカインタンパク質（例えば、本明細書に記載の例示的な可溶性インターロイキンタンパク質または可溶性サイトカインタンパク質のうちのいずれか）、および可溶性インターロイキンまたはサイトカイン受容体（例えば、本明細書に記載の例示的な可溶性インターロイキン受容体または可溶性サイトカイン受容体のうちのいずれか）であり得る。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な第１の標的結合ドメインのうちのいずれか）、第２の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な第２の標的結合ドメインのうちのいずれか）、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの１つ以上は各々独立して、ＣＤ１６ａ、ＣＤ２８、ＣＤ３（例えば、ＣＤ３α、ＣＤ３β、ＣＤ３δ、ＣＤ３Μ、およびＣＤ３Κのうちの１つ以上）、ＣＤ３３、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－１、ＶＥＧＦ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＰＤＬ－１、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、ＣＴＬＡ４、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＣＤ２６ａ、ＣＤ３６、ＵＬＢＰ２、ＣＤ３０、ＣＤ２００、ＩＧＦ－１Ｒ、ＭＵＣ４ＡＣ、ＭＵＣ５ＡＣ、Ｔｒｏｐ－２、ＣＭＥＴ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、Ｂ７Ｈ３、ＥＰＣＡＭ、ＢＣＭＡ、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡＣＡＭ５、ＵＬ１６結合タンパク質（例えば、ＵＬＢＰ１、ＵＬＢＰ２、ＵＬＢＰ３、ＵＬＢＰ４、ＵＬＢＰ５、およびＵＬＢＰ６）、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＬＬ４、ＴＹＲＯ３、ＡＸＬ、ＭＥＲ、ＣＤ１２２、ＣＤ１５５、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）リガンド、ＴＧＦ－βＲＩＩＩリガンド、ＤＮＡＭ－１リガンド、ＮＫｐ４６リガンド、ＮＫｐ４４リガンド、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＫＰ３０リガンド、ｓｃＭＨＣＩリガンド、ｓｃＭＨＣＩＩリガンド、ｓｃＴＣＲリガンド、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－２１受容体、ＰＤＧＦ－ＤＤ受容体、幹細胞因子（ＳＣＦ）受容体、幹細胞様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）受容体、ＭＩＣＡ受容体、ＭＩＣＢ受容体、ＵＬＰ１６結合タンパク質受容体、ＣＤ１５５受容体、ＣＤ１２２受容体、およびＣＤ２８受容体の群から選択される標的に特異的に結合し、それからなる群から選択される標的に特異的に結合することができる。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および／または１つ以上の追加の標的結合ドメインは各々独立して、アミノ酸総数約５アミノ酸～約１０００アミノ酸、約５アミノ酸～約９５０アミノ酸、約５アミノ酸～約９００アミノ酸、約５アミノ酸～約８５０アミノ酸、約５アミノ酸～約８００アミノ酸、約５アミノ酸～約７５０アミノ酸、約５アミノ酸～約７００アミノ酸、約５アミノ酸～約６５０アミノ酸、約５アミノ酸～約６００アミノ酸、約５アミノ酸～約５５０アミノ酸、約５アミノ酸～約５００アミノ酸、約５アミノ酸～約４５０アミノ酸、約５アミノ酸～約４００アミノ酸、約５アミノ酸～約３５０アミノ酸、約５アミノ酸～約３００アミノ酸、約５アミノ酸～約２８０アミノ酸、約５アミノ酸～約２６０アミノ酸、約５アミノ酸～約２４０アミノ酸、約５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約５アミノ酸～約２００アミノ酸、約５アミノ酸～約１９５アミノ酸、約５アミノ酸～約１９０アミノ酸、約５アミノ酸～約１８５アミノ酸、約５アミノ酸～約１８０アミノ酸、約５アミノ酸～約１７５アミノ酸、約５アミノ酸～約１７０アミノ酸、約５アミノ酸～約１６５アミノ酸、約５アミノ酸～約１６０アミノ酸、約５アミノ酸～約１５５アミノ酸、約５アミノ酸～約１５０アミノ酸、約５アミノ酸～約１４５アミノ酸、約５アミノ酸～約１４０アミノ酸、約５アミノ酸～約１３５アミノ酸、約５アミノ酸～約１３０アミノ酸、約５アミノ酸～約１２５アミノ酸、約５アミノ酸～約１２０アミノ酸、約５アミノ酸～約１１５アミノ酸、約５アミノ酸～約１１０アミノ酸、約５アミノ酸～約１０５アミノ酸、約５アミノ酸～約１００アミノ酸、約５アミノ酸～約９５アミノ酸、約５アミノ酸～約９０アミノ酸、約５アミノ酸～約８５アミノ酸、約５アミノ酸～約８０アミノ酸、約５アミノ酸～約７５アミノ酸、約５アミノ酸～約７０アミノ酸、約５アミノ酸～約６５アミノ酸、約５アミノ酸～約６０アミノ酸、約５アミノ酸～約５５アミノ酸、約５アミノ酸～約５０アミノ酸、約５アミノ酸～約４５アミノ酸、約５アミノ酸～約４０アミノ酸、約５アミノ酸～約３５アミノ酸、約５アミノ酸～約３０アミノ酸、約５アミノ酸～約２５アミノ酸、約５アミノ酸～約２０アミノ酸、約５アミノ酸～約１５アミノ酸、約５アミノ酸～約１０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約１０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約１０アミノ酸～約９００アミノ酸、約１０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約１０アミノ酸～約８００アミノ酸、約１０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約１０アミノ酸～約７００アミノ酸、約１０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約１０アミノ酸～約６００アミノ酸、約１０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約１０アミノ酸～約５００アミノ酸、約１０アミノ酸～約４５０アミノ酸、約１０アミノ酸～約４００アミノ酸、約１０アミノ酸～約３５０アミノ酸、約１０アミノ酸～約３００アミノ酸、約１０アミノ酸～約２８０アミノ酸、約１０アミノ酸～約２６０アミノ酸、約１０アミノ酸～約２４０アミノ酸、約１０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１０アミノ酸～約２００アミノ酸、約１０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約１０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約１０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約１０アミノ酸～約１３０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１２５アミノ酸、約１０アミノ酸～約１２０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１１５アミノ酸、約１０アミノ酸～約１１０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１０５アミノ酸、約１０アミノ酸～約１００アミノ酸、約１０アミノ酸～約９５アミノ酸、約１０アミノ酸～約９０アミノ酸、約１０アミノ酸～約８５アミノ酸、約１０アミノ酸～約８０アミノ酸、約１０アミノ酸～約７５アミノ酸、約１０アミノ酸～約７０アミノ酸、約１０アミノ酸～約６５アミノ酸、約１０アミノ酸～約６０アミノ酸、約１０アミノ酸～約５５アミノ酸、約１０アミノ酸～約５０アミノ酸、約１０アミノ酸～約４５アミノ酸、約１０アミノ酸～約４０アミノ酸、約１０アミノ酸～約３５アミノ酸、約１０アミノ酸～約３０アミノ酸、約１０アミノ酸～約２５アミノ酸、約１０アミノ酸～約２０アミノ酸、約１０アミノ酸～約１５アミノ酸、約１５アミノ酸～約１０００アミノ酸、約１５アミノ酸～約９５０アミノ酸、約１５アミノ酸～約９００アミノ酸、約１５アミノ酸～約８５０アミノ酸、約１５アミノ酸～約８００アミノ酸、約１５アミノ酸～約７５０アミノ酸、約１５アミノ酸～約７００アミノ酸、約１５アミノ酸～約６５０アミノ酸、約１５アミノ酸～約６００アミノ酸、約１５アミノ酸～約５５０アミノ酸、約１５アミノ酸～約５００アミノ酸、約１５アミノ酸～約４５０アミノ酸、約１５アミノ酸～約４００アミノ酸、約１５アミノ酸～約３５０アミノ酸、約１５アミノ酸～約３００アミノ酸、約１５アミノ酸～約２８０アミノ酸、約１５アミノ酸～約２６０アミノ酸、約１５アミノ酸～約２４０アミノ酸、約１５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１５アミノ酸～約２００アミノ酸、約１５アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１５アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１５アミノ酸～約１８５アミノ酸、約１５アミノ酸～約１８０アミノ酸、約１５アミノ酸～約１７５アミノ酸、約１５アミノ酸～約１７０アミノ酸、約１５アミノ酸～約１６５アミノ酸、約１５アミノ酸～約１６０アミノ酸、約１５アミノ酸～約１５５アミノ酸、約１５アミノ酸～約１５０アミノ酸、約１５アミノ酸～約１４５アミノ酸、約１５アミノ酸～約１４０アミノ酸、約１５アミノ酸～約１３５アミノ酸、約１５アミノ酸～約１３０アミノ酸、約１５アミノ酸～約１２５アミノ酸、約１５アミノ酸～約１２０アミノ酸、約１５アミノ酸～約１１５アミノ酸、約１５アミノ酸～約１１０アミノ酸、約１５アミノ酸～約１０５アミノ酸、約１５アミノ酸～約１００アミノ酸、約１５アミノ酸～約９５アミノ酸、約１５アミノ酸～約９０アミノ酸、約１５アミノ酸～約８５アミノ酸、約１５アミノ酸～約８０アミノ酸、約１５アミノ酸～約７５アミノ酸、約１５アミノ酸～約７０アミノ酸、約１５アミノ酸～約６５アミノ酸、約１５アミノ酸～約６０アミノ酸、約１５アミノ酸～約５５アミノ酸、約１５アミノ酸～約５０アミノ酸、約１５アミノ酸～約４５アミノ酸、約１５アミノ酸～約４０アミノ酸、約１５アミノ酸～約３５アミノ酸、約１５アミノ酸～約３０アミノ酸、約１５アミノ酸～約２５アミノ酸、約１５アミノ酸～約２０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約２０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約９００アミノ酸、約２０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約８００アミノ酸、約２０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約７００アミノ酸、約２０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約６００アミノ酸、約２０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約５００アミノ酸、約２０アミノ酸～約４５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約４００アミノ酸、約２０アミノ酸～約３５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約３００アミノ酸、約２０アミノ酸～約２８０アミノ酸、約２０アミノ酸～約２６０アミノ酸、約２０アミノ酸～約２４０アミノ酸、約２０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約２０アミノ酸～約２００アミノ酸、約２０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１８５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１８０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１７５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１７０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１６５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１６０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１５５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１４５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１４０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１３５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１３０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１２５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１２０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１１５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１１０アミノ酸、約２０アミノ酸～約１０５アミノ酸、約２０アミノ酸～約１００アミノ酸、約２０アミノ酸～約９５アミノ酸、約２０アミノ酸～約９０アミノ酸、約２０アミノ酸～約８５アミノ酸、約２０アミノ酸～約８０アミノ酸、約２０アミノ酸～約７５アミノ酸、約２０アミノ酸～約７０アミノ酸、約２０アミノ酸～約６５アミノ酸、約２０アミノ酸～約６０アミノ酸、約２０アミノ酸～約５５アミノ酸、約２０アミノ酸～約５０アミノ酸、約２０アミノ酸～約４５アミノ酸、約２０アミノ酸～約４０アミノ酸、約２０アミノ酸～約３５アミノ酸、約２０アミノ酸～約３０アミノ酸、約２０アミノ酸～約２５アミノ酸、約２５アミノ酸～約１０００アミノ酸、約２５アミノ酸～約９５０アミノ酸、約２５アミノ酸～約９００アミノ酸、約２５アミノ酸～約８５０アミノ酸、約２５アミノ酸～約８００アミノ酸、約２５アミノ酸～約７５０アミノ酸、約２５アミノ酸～約７００アミノ酸、約２５アミノ酸～約６５０アミノ酸、約２５アミノ酸～約６００アミノ酸、約２５アミノ酸～約５５０アミノ酸、約２５アミノ酸～約５００アミノ酸、約２５アミノ酸～約４５０アミノ酸、約２５アミノ酸～約４００アミノ酸、約２５アミノ酸～約３５０アミノ酸、約２５アミノ酸～約３００アミノ酸、約２５アミノ酸～約２８０アミノ酸、約２５アミノ酸～約２６０アミノ酸、約２５アミノ酸～約２４０アミノ酸、約２５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約２５アミノ酸～約２００アミノ酸、約２５アミノ酸～約１９５アミノ酸、約２５アミノ酸～約１９０アミノ酸、約２５アミノ酸～約１８５アミノ酸、約２５アミノ酸～約１８０アミノ酸、約２５アミノ酸～約１７５アミノ酸、約２５アミノ酸～約１７０アミノ酸、約２５アミノ酸～約１６５アミノ酸、約２５アミノ酸～約１６０アミノ酸、約２５アミノ酸～約１５５アミノ酸、約２５アミノ酸～約１５０アミノ酸、約２５アミノ酸～約１４５アミノ酸、約２５アミノ酸～約１４０アミノ酸、約２５アミノ酸～約１３５アミノ酸、約２５アミノ酸～約１３０アミノ酸、約２５アミノ酸～約１２５アミノ酸、約２５アミノ酸～約１２０アミノ酸、約２５アミノ酸～約１１５アミノ酸、約２５アミノ酸～約１１０アミノ酸、約２５アミノ酸～約１０５アミノ酸、約２５アミノ酸～約１００アミノ酸、約２５アミノ酸～約９５アミノ酸、約２５アミノ酸～約９０アミノ酸、約２５アミノ酸～約８５アミノ酸、約２５アミノ酸～約８０アミノ酸、約２５アミノ酸～約７５アミノ酸、約２５アミノ酸～約７０アミノ酸、約２５アミノ酸～約６５アミノ酸、約２５アミノ酸～約６０アミノ酸、約２５アミノ酸～約５５アミノ酸、約２５アミノ酸～約５０アミノ酸、約２５アミノ酸～約４５アミノ酸、約２５アミノ酸～約４０アミノ酸、約２５アミノ酸～約３５アミノ酸、約２５アミノ酸～約３０アミノ酸、約３０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約３０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約３０アミノ酸～約９００アミノ酸、約３０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約３０アミノ酸～約８００アミノ酸、約３０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約３０アミノ酸～約７００アミノ酸、約３０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約３０アミノ酸～約６００アミノ酸、約３０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約３０アミノ酸～約５００アミノ酸、約３０アミノ酸～約４５０アミノ酸、約３０アミノ酸～約４００アミノ酸、約３０アミノ酸～約３５０アミノ酸、約３０アミノ酸～約３００アミノ酸、約３０アミノ酸～約２８０アミノ酸、約３０アミノ酸～約２６０アミノ酸、約３０アミノ酸～約２４０アミノ酸、約３０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約３０アミノ酸～約２００アミノ酸、約３０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約３０アミノ酸～約１９０アミノ酸、約３０アミノ酸～約１８５アミノ酸、
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アミノ酸～約１９０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約１９０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約９００アミノ酸、約１９０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約８００アミノ酸、約１９０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約７００アミノ酸、約１９０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約６００アミノ酸、約１９０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約５００アミノ酸、約１９０アミノ酸～約４５０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約４００アミノ酸、約１９０アミノ酸～約３５０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約３００アミノ酸、約１９０アミノ酸～約２８０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約２６０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約２４０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１９０アミノ酸～約２００アミノ酸、約１９０アミノ酸～約１９５アミノ酸、約１９５アミノ酸～約１０００アミノ酸、約１９５アミノ酸～約９５０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約９００アミノ酸、約１９５アミノ酸～約８５０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約８００アミノ酸、約１９５アミノ酸～約７５０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約７００アミノ酸、約１９５アミノ酸～約６５０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約６００アミノ酸、約１９５アミノ酸～約５５０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約５００アミノ酸、約１９５アミノ酸～約４５０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約４００アミノ酸、約１９５アミノ酸～約３５０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約３００アミノ酸、約１９５アミノ酸～約２８０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約２６０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約２４０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約２２０アミノ酸、約１９５アミノ酸～約２００アミノ酸、約２００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約２００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約２００アミノ酸～約９００アミノ酸、約２００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約２００アミノ酸～約８００アミノ酸、約２００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約２００アミノ酸～約７００アミノ酸、約２００アミノ酸～約６５０アミノ酸、約２００アミノ酸～約６００アミノ酸、約２００アミノ酸～約５５０アミノ酸、約２００アミノ酸～約５００アミノ酸、約２００アミノ酸～約４５０アミノ酸、約２００アミノ酸～約４００アミノ酸、約２００アミノ酸～約３５０アミノ酸、約２００アミノ酸～約３００アミノ酸、約２００アミノ酸～約２８０アミノ酸、約２００アミノ酸～約２６０アミノ酸、約２００アミノ酸～約２４０アミノ酸、約２００アミノ酸～約２２０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約９００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約８００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約７００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約６００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約５００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約４５０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約４００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約３５０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約３００アミノ酸、約２２０アミノ酸～約２８０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約２６０アミノ酸、約２２０アミノ酸～約２４０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約９００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約８００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約７００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約６００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約５００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約４５０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約４００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約３５０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約３００アミノ酸、約２４０アミノ酸～約２８０アミノ酸、約２４０アミノ酸～約２６０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約９００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約８００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約７００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約６００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約５００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約４５０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約４００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約３５０アミノ酸、約２６０アミノ酸～約３００アミノ酸、約２６０アミノ酸～約２８０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約９００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約８００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約７００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約６００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約５００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約４５０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約４００アミノ酸、約２８０アミノ酸～約３５０アミノ酸、約２８０アミノ酸～約３００アミノ酸、約３００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約３００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約３００アミノ酸～約９００アミノ酸、約３００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約３００アミノ酸～約８００アミノ酸、約３００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約３００アミノ酸～約７００アミノ酸、約３００アミノ酸～約６５０アミノ酸、約３００アミノ酸～約６００アミノ酸、約３００アミノ酸～約５５０アミノ酸、約３００アミノ酸～約５００アミノ酸、約３００アミノ酸～約４５０アミノ酸、約３００アミノ酸～約４００アミノ酸、約３００アミノ酸～約３５０アミノ酸、約３５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約３５０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約３５０アミノ酸～約９００アミノ酸、約３５０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約３５０アミノ酸～約８００アミノ酸、約３５０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約３５０アミノ酸～約７００アミノ酸、約３５０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約３５０アミノ酸～約６００アミノ酸、約３５０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約３５０アミノ酸～約５００アミノ酸、約３５０アミノ酸～約４５０アミノ酸、約３５０アミノ酸～約４００アミノ酸、約４００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約４００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約４００アミノ酸～約９００アミノ酸、約４００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約４００アミノ酸～約８００アミノ酸、約４００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約４００アミノ酸～約７００アミノ酸、約４００アミノ酸～約６５０アミノ酸、約４００アミノ酸～約６００アミノ酸、約４００アミノ酸～約５５０アミノ酸、約４００アミノ酸～約５００アミノ酸、約４００アミノ酸～約４５０アミノ酸、約４５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約４５０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約４５０アミノ酸～約９００アミノ酸、約４５０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約４５０アミノ酸～約８００アミノ酸、約４５０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約４５０アミノ酸～約７００アミノ酸、約４５０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約４５０アミノ酸～約６００アミノ酸、約４５０アミノ酸～約５５０アミノ酸、約４５０アミノ酸～約５００アミノ酸、約５００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約５００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約５００アミノ酸～約９００アミノ酸、約５００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約５００アミノ酸～約８００アミノ酸、約５００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約５００アミノ酸～約７００アミノ酸、約５００アミノ酸～約６５０アミノ酸、約５００アミノ酸～約６００アミノ酸、約５００アミノ酸～約５５０アミノ酸、約５５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約５５０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約５５０アミノ酸～約９００アミノ酸、約５５０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約５５０アミノ酸～約８００アミノ酸、約５５０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約５５０アミノ酸～約７００アミノ酸、約５５０アミノ酸～約６５０アミノ酸、約５５０アミノ酸～約６００アミノ酸、約６００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約６００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約６００アミノ酸～約９００アミノ酸、約６００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約６００アミノ酸～約８００アミノ酸、約６００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約６００アミノ酸～約７００アミノ酸、約６００アミノ酸～約６５０アミノ酸、約６５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約６５０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約６５０アミノ酸～約９００アミノ酸、約６５０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約６５０アミノ酸～約８００アミノ酸、約６５０アミノ酸～約７５０アミノ酸、約６５０アミノ酸～約７００アミノ酸、約７００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約７００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約７００アミノ酸～約９００アミノ酸、約７００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約７００アミノ酸～約８００アミノ酸、約７００アミノ酸～約７５０アミノ酸、約７５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約７５０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約７５０アミノ酸～約９００アミノ酸、約７５０アミノ酸～約８５０アミノ酸、約７５０アミノ酸～約８００アミノ酸、約８００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約８００アミノ酸～約９５０アミノ酸、約８００アミノ酸～約９００アミノ酸、約８００アミノ酸～約８５０アミノ酸、約８５０アミノ酸～約１０００アミノ酸、約８５０アミノ酸～約９５０アミノ酸、約８５０アミノ酸～約９００アミノ酸、約９００アミノ酸～約１０００アミノ酸、約９００アミノ酸～約９５０アミノ酸、または約９５０アミノ酸～約１０００アミノ酸を有し得る。
本明細書に記載の標的結合ドメインのうちのいずれも、１×１０－７Ｍ未満、１×１０－８Ｍ未満、１×１０－９Ｍ未満、１×１０－１０Ｍ未満、１×１０－１１Ｍ未満、１×１０－１２Ｍ未満、または１×１０－１３Ｍ未満の解離平衡定数（ＫＤ）でその標的に結合することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される抗原結合タンパク質構築物は、１×１０－３Ｍ～約１×１０－５Ｍ、約１×１０－４Ｍ～約１×１０－６Ｍ、約１×１０－５Ｍ～約１×１０－７Ｍ、約１×１０－６Ｍ～約１×１０－８Ｍ、約１×１０－７Ｍ～約１×１０－９Ｍ、約１×１０－８Ｍ～約１×１０－１０Ｍ、または約１×１０－９Ｍ～約１×１０－１１Ｍ（その上限および下限も含む）のＫＤで特定の抗原に結合することができる。
本明細書に記載の標的結合ドメインのうちのいずれも、約１ｐＭ～約３０ｎＭ（例えば、約１ｐＭ～約２５ｎＭ、約１ｐＭ～約２０ｎＭ、約１ｐＭ～約１５ｎＭ、約１ｐＭ～約１０ｎＭ、約１ｐＭ～約５ｎＭ、約１ｐＭ～約２ｎＭ、約１ｐＭ～約１ｎＭ、約１ｐＭ～約９５０ｐＭ、約１ｐＭ～約９００ｐＭ、約１ｐＭ～約８５０ｐＭ、約１ｐＭ～約８００ｐＭ、約１ｐＭ～約７５０ｐＭ、約１ｐＭ～約７００ｐＭ、約１ｐＭ～約６５０ｐＭ、約１ｐＭ～約６００ｐＭ、約１ｐＭ～約５５０ｐＭ、約１ｐＭ～約５００ｐＭ、約１ｐＭ～約４５０ｐＭ、約１ｐＭ～約４００ｐＭ、約１ｐＭ～約３５０ｐＭ、約１ｐＭ～約３００ｐＭ、約１ｐＭ～約２５０ｐＭ、約１ｐＭ～約２００ｐＭ、約１ｐＭ～約１５０ｐＭ、約１ｐＭ～約１００ｐＭ、約１ｐＭ～約９０ｐＭ、約１ｐＭ～約８０ｐＭ、約１ｐＭ～約７０ｐＭ、約１ｐＭ～約６０ｐＭ、約１ｐＭ～約５０ｐＭ、約１ｐＭ～約４０ｐＭ、約１ｐＭ～約３０ｐＭ、約１ｐＭ～約２０ｐＭ、約１ｐＭ～約１０ｐＭ、約１ｐＭ～約５ｐＭ、約１ｐＭ～約４ｐＭ、約１ｐＭ～約３ｐＭ、約１ｐＭ～約２ｐＭ、約２ｐＭ～約３０ｎＭ、約２ｐＭ～約２５ｎＭ、約２ｐＭ～約２０ｎＭ、約２ｐＭ～約１５ｎＭ、約２ｐＭ～約１０ｎＭ、約２ｐＭ～約５ｎＭ、約２ｐＭ～約２ｎＭ、約２ｐＭ～約１ｎＭ、約２ｐＭ～約９５０ｐＭ、約２ｐＭ～約９００ｐＭ、約２ｐＭ～約８５０ｐＭ、約２ｐＭ～約８００ｐＭ、約２ｐＭ～約７５０ｐＭ、約２ｐＭ～約７００ｐＭ、約２ｐＭ～約６５０ｐＭ、約２ｐＭ～約６００ｐＭ、約２ｐＭ～約５５０ｐＭ、約２ｐＭ～約５００ｐＭ、約２ｐＭ～約４５０ｐＭ、約２ｐＭ～約４００ｐＭ、約２ｐＭ～約３５０ｐＭ、約２ｐＭ～約３００ｐＭ、約２ｐＭ～約２５０ｐＭ、約２ｐＭ～約２００ｐＭ、約２ｐＭ～約１５０ｐＭ、約２ｐＭ～約１００ｐＭ、約２ｐＭ～約９０ｐＭ、約２ｐＭ～約８０ｐＭ、約２ｐＭ～約７０ｐＭ、約２ｐＭ～約６０ｐＭ、約２ｐＭ～約５０ｐＭ、約２ｐＭ～約４０ｐＭ、約２ｐＭ～約３０ｐＭ、約２ｐＭ～約２０ｐＭ、約２ｐＭ～約１０ｐＭ、約２ｐＭ～約５ｐＭ、約２ｐＭ～約４ｐＭ、約２ｐＭ～約３ｐＭ、約５ｐＭ～約３０ｎＭ、約５ｐＭ～約２５ｎＭ、約５ｐＭ～約２０ｎＭ、約５ｐＭ～約１５ｎＭ、約５ｐＭ～約１０ｎＭ、約５ｐＭ～約５ｎＭ、約５ｐＭ～約２ｎＭ、約５ｐＭ～約１ｎＭ、約５ｐＭ～約９５０ｐＭ、約５ｐＭ～約９００ｐＭ、約５ｐＭ～約８５０ｐＭ、約５ｐＭ～約８００ｐＭ、約５ｐＭ～約７５０ｐＭ、約５ｐＭ～約７００ｐＭ、約５ｐＭ～約６５０ｐＭ、約５ｐＭ～約６００ｐＭ、約５ｐＭ～約５５０ｐＭ、約５ｐＭ～約５００ｐＭ、約５ｐＭ～約４５０ｐＭ、約５ｐＭ～約４００ｐＭ、約５ｐＭ～約３５０ｐＭ、約５ｐＭ～約３００ｐＭ、約５ｐＭ～約２５０ｐＭ、約５ｐＭ～約２００ｐＭ、約５ｐＭ～約１５０ｐＭ、約５ｐＭ～約１００ｐＭ、約５ｐＭ～約９０ｐＭ、約５ｐＭ～約８０ｐＭ、約５ｐＭ～約７０ｐＭ、約５ｐＭ～約６０ｐＭ、約５ｐＭ～約５０ｐＭ、約５ｐＭ～約４０ｐＭ、約５ｐＭ～約３０ｐＭ、約５ｐＭ～約２０ｐＭ、約５ｐＭ～約１０ｐＭ、約１０ｐＭ～約３０ｎＭ、約１０ｐＭ～約２５ｎＭ、約１０ｐＭ～約２０ｎＭ、約１０ｐＭ～約１５ｎＭ、約１０ｐＭ～約１０ｎＭ、約１０ｐＭ～約５ｎＭ、約１０ｐＭ～約２ｎＭ、約１０ｐＭ～約１ｎＭ、約１０ｐＭ～約９５０ｐＭ、約１０ｐＭ～約９００ｐＭ、約１０ｐＭ～約８５０ｐＭ、約１０ｐＭ～約８００ｐＭ、約１０ｐＭ～約７５０ｐＭ、約１０ｐＭ～約７００ｐＭ、約１０ｐＭ～約６５０ｐＭ、約１０ｐＭ～約６００ｐＭ、約１０ｐＭ～約５５０ｐＭ、約１０ｐＭ～約５００ｐＭ、約１０ｐＭ～約４５０ｐＭ、約１０ｐＭ～約４００ｐＭ、約１０ｐＭ～約３５０ｐＭ、約１０ｐＭ～約３００ｐＭ、約１０ｐＭ～約２５０ｐＭ、約１０ｐＭ～約２００ｐＭ、約１０ｐＭ～約１５０ｐＭ、約１０ｐＭ～約１００ｐＭ、約１０ｐＭ～約９０ｐＭ、約１０ｐＭ～約８０ｐＭ、約１０ｐＭ～約７０ｐＭ、約１０ｐＭ～約６０ｐＭ、約１０ｐＭ～約５０ｐＭ、約１０ｐＭ～約４０ｐＭ、約１０ｐＭ～約３０ｐＭ、約１０ｐＭ～約２０ｐＭ、約１５ｐＭ～約３０ｎＭ、約１５ｐＭ～約２５ｎＭ、約１５ｐＭ～約２０ｎＭ、約１５ｐＭ～約１５ｎＭ、約１５ｐＭ～約１０ｎＭ、約１５ｐＭ～約５ｎＭ、約１５ｐＭ～約２ｎＭ、約１５ｐＭ～約１ｎＭ、約１５ｐＭ～約９５０ｐＭ、約１５ｐＭ～約９００ｐＭ、約１５ｐＭ～約８５０ｐＭ、約１５ｐＭ～約８００ｐＭ、約１５ｐＭ～約７５０ｐＭ、約１５ｐＭ～約７００ｐＭ、約１５ｐＭ～約６５０ｐＭ、約１５ｐＭ～約６００ｐＭ、約１５ｐＭ～約５５０ｐＭ、約１５ｐＭ～約５００ｐＭ、約１５ｐＭ～約４５０ｐＭ、約１５ｐＭ～約４００ｐＭ、約１５ｐＭ～約３５０ｐＭ、約１５ｐＭ～約３００ｐＭ、約１５ｐＭ～約２５０ｐＭ、約１５ｐＭ～約２００ｐＭ、約１５ｐＭ～約１５０ｐＭ、約１５ｐＭ～約１００ｐＭ、約１５ｐＭ～約９０ｐＭ、約１５ｐＭ～約８０ｐＭ、約１５ｐＭ～約７０ｐＭ、約１５ｐＭ～約６０ｐＭ、約１５ｐＭ～約５０ｐＭ、約１５ｐＭ～約４０ｐＭ、約１５ｐＭ～約３０ｐＭ、約１５ｐＭ～約２０ｐＭ、約２０ｐＭ～約３０ｎＭ、約２０ｐＭ～約２５ｎＭ、約２０ｐＭ～約２０ｎＭ、約２０ｐＭ～約１５ｎＭ、約２０ｐＭ～約１０ｎＭ、約２０ｐＭ～約５ｎＭ、約２０ｐＭ～約２ｎＭ、約２０ｐＭ～約１ｎＭ、約２０ｐＭ～約９５０ｐＭ、約２０ｐＭ～約９００ｐＭ、約２０ｐＭ～約８５０ｐＭ、約２０ｐＭ～約８００ｐＭ、約２０ｐＭ～約７５０ｐＭ、約２０ｐＭ～約７００ｐＭ、約２０ｐＭ～約６５０ｐＭ、約２０ｐＭ～約６００ｐＭ、約２０ｐＭ～約５５０ｐＭ、約２０ｐＭ～約５００ｐＭ、約２０ｐＭ～約４５０ｐＭ、約２０ｐＭ～約４００ｐＭ、約２０ｐＭ～約３５０ｐＭ、約２０ｐＭ～約３００ｐＭ、約２０ｐＭ～約２５０ｐＭ、約２０ｐＭ～約２０ｐＭ、約２００ｐＭ～約１５０ｐＭ、約２０ｐＭ～約１００ｐＭ、約２０ｐＭ～約９０ｐＭ、約２０ｐＭ～約８０ｐＭ、約２０ｐＭ～約７０ｐＭ、約２０ｐＭ～約６０ｐＭ、約２０ｐＭ～約５０ｐＭ、約２０ｐＭ～約４０ｐＭ、約２０ｐＭ～約３０ｐＭ、約３０ｐＭ～約３０ｎＭ、約３０ｐＭ～約２５ｎＭ、約３０ｐＭ～約３０ｎＭ、約３０ｐＭ～約１５ｎＭ、約３０ｐＭ～約１０ｎＭ、約３０ｐＭ～約５ｎＭ、約３０ｐＭ～約２ｎＭ、約３０ｐＭ～約１ｎＭ、約３０ｐＭ～約９５０ｐＭ、約３０ｐＭ～約９００ｐＭ、約３０ｐＭ～約８５０ｐＭ、約３０ｐＭ～約８００ｐＭ、約３０ｐＭ～約７５０ｐＭ、約３０ｐＭ～約７００ｐＭ、約３０ｐＭ～約６５０ｐＭ、約３０ｐＭ～約６００ｐＭ、約３０ｐＭ～約５５０ｐＭ、約３０ｐＭ～約５００ｐＭ、約３０ｐＭ～約４５０ｐＭ、約３０ｐＭ～約４００ｐＭ、約３０ｐＭ～約３５０ｐＭ、約３０ｐＭ～約３００ｐＭ、約３０ｐＭ～約２５０ｐＭ、約３０ｐＭ～約２００ｐＭ、約３０ｐＭ～約１５０ｐＭ、約３０ｐＭ～約１００ｐＭ、約３０ｐＭ～約９０ｐＭ、約３０ｐＭ～約８０ｐＭ、約３０ｐＭ～約７０ｐＭ、約３０ｐＭ～約６０ｐＭ、約３０ｐＭ～約５０ｐＭ、約３０ｐＭ～約４０ｐＭ、約４０ｐＭ～約３０ｎＭ、約４０ｐＭ～約２５ｎＭ、約４０ｐＭ～約３０ｎＭ、約４０ｐＭ～約１５ｎＭ、約４０ｐＭ～約１０ｎＭ、約４０ｐＭ～約５ｎＭ、約４０ｐＭ～約２ｎＭ、約４０ｐＭ～約１ｎＭ、約４０ｐＭ～約９５０ｐＭ、約４０ｐＭ～約９００ｐＭ、約４０ｐＭ～約８５０ｐＭ、約４０ｐＭ～約８００ｐＭ、約４０ｐＭ～約７５０ｐＭ、約４０ｐＭ～約７００ｐＭ、約４０ｐＭ～約６５０ｐＭ、約４０ｐＭ～約６００ｐＭ、約４０ｐＭ～約５５０ｐＭ、約４０ｐＭ～約５００ｐＭ、約４０ｐＭ～約４５０ｐＭ、約４０ｐＭ～約４００ｐＭ、約４０ｐＭ～約３５０ｐＭ、約４０ｐＭ～約３００ｐＭ、約４０ｐＭ～約２５０ｐＭ、約４０ｐＭ～約２００ｐＭ、約４０ｐＭ～約１５０ｐＭ、約４０ｐＭ～約１００ｐＭ、約４０ｐＭ～約９０ｐＭ、約４０ｐＭ～約８０ｐＭ、約４０ｐＭ～約７０ｐＭ、約４０ｐＭ～約６０ｐＭ、約４０ｐＭ～約５０ｐＭ、約５０ｐＭ～約３０ｎＭ、約５０ｐＭ～約２５ｎＭ、約５０ｐＭ～約３０ｎＭ、約５０ｐＭ～約１５ｎＭ、約５０ｐＭ～約１０ｎＭ、約５０ｐＭ～約５ｎＭ、約５０ｐＭ～約２ｎＭ、約５０ｐＭ～約１ｎＭ、約５０ｐＭ～約９５０ｐＭ、約５０ｐＭ～約９００ｐＭ、約５０ｐＭ～約８５０ｐＭ、約５０ｐＭ～約８００ｐＭ、約５０ｐＭ～約７５０ｐＭ、約５０ｐＭ～約７００ｐＭ、約５０ｐＭ～約６５０ｐＭ、約５０ｐＭ～約６００ｐＭ、約５０ｐＭ～約５５０ｐＭ、約５０ｐＭ～約５００ｐＭ、約５０ｐＭ～約４５０ｐＭ、約５０ｐＭ～約４００ｐＭ、約５０ｐＭ～約３５０ｐＭ、約５０ｐＭ～約３００ｐＭ、約５０ｐＭ～約２５０ｐＭ、約５０ｐＭ～約２００ｐＭ、約５０ｐＭ～約１５０ｐＭ、約５０ｐＭ～約１００ｐＭ、約５０ｐＭ～約９０ｐＭ、約５０ｐＭ～約８０ｐＭ、約５０ｐＭ～約７０ｐＭ、約５０ｐＭ～約６０ｐＭ、約６０ｐＭ～約３０ｎＭ、約６０ｐＭ～約２５ｎＭ、約６０ｐＭ～約３０ｎＭ、約６０ｐＭ～約１５ｎＭ、約６０ｐＭ～約１０ｎＭ、約６０ｐＭ～約５ｎＭ、約６０ｐＭ～約２ｎＭ、約６０ｐＭ～約１ｎＭ、約６０ｐＭ～約９５０ｐＭ、約６０ｐＭ～約９００ｐＭ、約６０ｐＭ～約８５０ｐＭ、約６０ｐＭ～約８００ｐＭ、約６０ｐＭ～約７５０ｐＭ、約６０ｐＭ～約７００ｐＭ、約６０ｐＭ～約６５０ｐＭ、約６０ｐＭ～約６００ｐＭ、約６０ｐＭ～約５５０ｐＭ、約６０ｐＭ～約５００ｐＭ、約６０ｐＭ～約４５０ｐＭ、約６０ｐＭ～約４００ｐＭ、約６０ｐＭ～約３５０ｐＭ、約６０ｐＭ～約３００ｐＭ、約６０ｐＭ～約２５０ｐＭ、約６０ｐＭ～約２００ｐＭ、約６０ｐＭ～約１５０ｐＭ、約６０ｐＭ～約１００ｐＭ、約６０ｐＭ～約９０ｐＭ、約６０ｐＭ～約８０ｐＭ、約６０ｐＭ～約７０ｐＭ、約７０ｐＭ～約３０ｎＭ、約７０ｐＭ～約２５ｎＭ、約７０ｐＭ～約３０ｎＭ、約７０ｐＭ～約１５ｎＭ、約７０ｐＭ～約１０ｎＭ、約７０ｐＭ～約５ｎＭ、約７０ｐＭ～約２ｎＭ、約７０ｐＭ～約１ｎＭ、約７０ｐＭ～約９５０ｐＭ、約７０ｐＭ～約９００ｐＭ、約７０ｐＭ～約８５０ｐＭ、約７０ｐＭ～約８００ｐＭ、約７０ｐＭ～約７５０ｐＭ、約７０ｐＭ～約７００ｐＭ、約７０ｐＭ～約６５０ｐＭ、約７０ｐＭ～約６００ｐＭ、約７０ｐＭ～約５５０ｐＭ、約７０ｐＭ～約５００ｐＭ、約７０ｐＭ～約４５０ｐＭ、約７０ｐＭ～約４００ｐＭ、約７０ｐＭ～約３５０ｐＭ、約７０ｐＭ～約３００ｐＭ、約７０ｐＭ～約２５０ｐＭ、約７０ｐＭ～約２００ｐＭ、約７０ｐＭ～約１５０ｐＭ、約７０ｐＭ～約１００ｐＭ、約７０ｐＭ～約９０ｐＭ、約７０ｐＭ～約８０ｐＭ、約８０ｐＭ～約３０ｎＭ、約８０ｐＭ～約２５ｎＭ、約８０ｐＭ～約３０ｎＭ、約８０ｐＭ～約１５ｎＭ、約８０ｐＭ～約１０ｎＭ、約８０ｐＭ～約５ｎＭ、約８０ｐＭ～約２ｎＭ、約８０ｐＭ～約１ｎＭ、約８０ｐＭ～約９５０ｐＭ、約８０ｐＭ～約９００ｐＭ、約８０ｐＭ～約８５０ｐＭ、約８０ｐＭ～約８００ｐＭ、約８０ｐＭ～約７５０ｐＭ、約８０ｐＭ～約７００ｐＭ、約８０ｐＭ～約６５０ｐＭ、約８０ｐＭ～約６００ｐＭ、約８０ｐＭ～約５５０ｐＭ、約８０ｐＭ～約５００ｐＭ、約８０ｐＭ～約４５０ｐＭ、約８０ｐＭ～約４００ｐＭ、約８０ｐＭ～約３５０ｐＭ、約８０ｐＭ～約３００ｐＭ、約８０ｐＭ～約２５０ｐＭ、約８０ｐＭ～約２００ｐＭ、約８０ｐＭ～約１５０ｐＭ、約８０ｐＭ～約１００ｐＭ、約８０ｐＭ～約９０ｐＭ、約９０ｐＭ～約３０ｎＭ、約９０ｐＭ～約２５ｎＭ、約９０ｐＭ～約３０ｎＭ、約９０ｐＭ～約１５ｎＭ、約９０ｐＭ～約１０ｎＭ、約９０ｐＭ～約５ｎＭ、約９０ｐＭ～約２ｎＭ、約９０ｐＭ～約１ｎＭ、約９０ｐＭ～約９５０ｐＭ、約９０ｐＭ～約９００ｐＭ、約９０ｐＭ～約８５０ｐＭ、約９０ｐＭ～約８００ｐＭ、約９０ｐＭ～約７５０ｐＭ、約９０ｐＭ～約７００ｐＭ、約９０ｐＭ～約６５０ｐＭ、約９０ｐＭ～約６００ｐＭ、約９０ｐＭ～約５５０ｐＭ、約９０ｐＭ～約５００ｐＭ、約９０ｐＭ～約４５０ｐＭ、約９０ｐＭ～約４００ｐＭ、約９０ｐＭ～約３５０ｐＭ、約９０ｐＭ～約３００ｐＭ、約９０ｐＭ～約２５０ｐＭ、約９０ｐＭ～約２００ｐＭ、約９０ｐＭ～約１５０ｐＭ、約９０ｐＭ～約１００ｐＭ、約１００ｐＭ～約３０ｎＭ、約１００ｐＭ～約２５
ｎＭ、約１００ｐＭ～約３０ｎＭ、約１００ｐＭ～約１５ｎＭ、約１００ｐＭ～約１０ｎＭ、約１００ｐＭ～約５ｎＭ、約１００ｐＭ～約２ｎＭ、約１００ｐＭ～約１ｎＭ、約１００ｐＭ～約９５０ｐＭ、約１００ｐＭ～約９００ｐＭ、約１００ｐＭ～約８５０ｐＭ、約１００ｐＭ～約８００ｐＭ、約１００ｐＭ～約７５０ｐＭ、約１００ｐＭ～約７００ｐＭ、約１００ｐＭ～約６５０ｐＭ、約１００ｐＭ～約６００ｐＭ、約１００ｐＭ～約５５０ｐＭ、約１００ｐＭ～約５００ｐＭ、約１００ｐＭ～約４５０ｐＭ、約１００ｐＭ～約４００ｐＭ、約１００ｐＭ～約３５０ｐＭ、約１００ｐＭ～約３００ｐＭ、約１００ｐＭ～約２５０ｐＭ、約１００ｐＭ～約２００ｐＭ、約１００ｐＭ～約１５０ｐＭ、約１５０ｐＭ～約３０ｎＭ、約１５０ｐＭ～約２５ｎＭ、約１５０ｐＭ～約３０ｎＭ、約１５０ｐＭ～約１５ｎＭ、約１５０ｐＭ～約１０ｎＭ、約１５０ｐＭ～約５ｎＭ、約１５０ｐＭ～約２ｎＭ、約１５０ｐＭ～約１ｎＭ、約１５０ｐＭ～約９５０ｐＭ、約１５０ｐＭ～約９００ｐＭ、約１５０ｐＭ～約８５０ｐＭ、約１５０ｐＭ～約８００ｐＭ、約１５０ｐＭ～約７５０ｐＭ、約１５０ｐＭ～約７００ｐＭ、約１５０ｐＭ～約６５０ｐＭ、約１５０ｐＭ～約６００ｐＭ、約１５０ｐＭ～約５５０ｐＭ、約１５０ｐＭ～約５００ｐＭ、約１５０ｐＭ～約４５０ｐＭ、約１５０ｐＭ～約４００ｐＭ、約１５０ｐＭ～約３５０ｐＭ、約１５０ｐＭ～約３００ｐＭ、約１５０ｐＭ～約２５０ｐＭ、約１５０ｐＭ～約２００ｐＭ、約２００ｐＭ～約３０ｎＭ、約２００ｐＭ～約２５ｎＭ、約２００ｐＭ～約３０ｎＭ、約２００ｐＭ～約１５ｎＭ、約２００ｐＭ～約１０ｎＭ、約２００ｐＭ～約５ｎＭ、約２００ｐＭ～約２ｎＭ、約２００ｐＭ～約１ｎＭ、約２００ｐＭ～約９５０ｐＭ、約２００ｐＭ～約９００ｐＭ、約２００ｐＭ～約８５０ｐＭ、約２００ｐＭ～約８００ｐＭ、約２００ｐＭ～約７５０ｐＭ、約２００ｐＭ～約７００ｐＭ、約２００ｐＭ～約６５０ｐＭ、約２００ｐＭ～約６００ｐＭ、約２００ｐＭ～約５５０ｐＭ、約２００ｐＭ～約５００ｐＭ、約２００ｐＭ～約４５０ｐＭ、約２００ｐＭ～約４００ｐＭ、約２００ｐＭ～約３５０ｐＭ、約２００ｐＭ～約３００ｐＭ、約２００ｐＭ～約２５０ｐＭ、約３００ｐＭ～約３０ｎＭ、約３００ｐＭ～約２５ｎＭ、約３００ｐＭ～約３０ｎＭ、約３００ｐＭ～約１５ｎＭ、約３００ｐＭ～約１０ｎＭ、約３００ｐＭ～約５ｎＭ、約３００ｐＭ～約２ｎＭ、約３００ｐＭ～約１ｎＭ、約３００ｐＭ～約９５０ｐＭ、約３００ｐＭ～約９００ｐＭ、約３００ｐＭ～約８５０ｐＭ、約３００ｐＭ～約８００ｐＭ、約３００ｐＭ～約７５０ｐＭ、約３００ｐＭ～約７００ｐＭ、約３００ｐＭ～約６５０ｐＭ、約３００ｐＭ～約６００ｐＭ、約３００ｐＭ～約５５０ｐＭ、約３００ｐＭ～約５００ｐＭ、約３００ｐＭ～約４５０ｐＭ、約３００ｐＭ～約４００ｐＭ、約３００ｐＭ～約３５０ｐＭ、約４００ｐＭ～約３０ｎＭ、約４００ｐＭ～約２５ｎＭ、約４００ｐＭ～約３０ｎＭ、約４００ｐＭ～約１５ｎＭ、約４００ｐＭ～約１０ｎＭ、約４００ｐＭ～約５ｎＭ、約４００ｐＭ～約２ｎＭ、約４００ｐＭ～約１ｎＭ、約４００ｐＭ～約９５０ｐＭ、約４００ｐＭ～約９００ｐＭ、約４００ｐＭ～約８５０ｐＭ、約４００ｐＭ～約８００ｐＭ、約４００ｐＭ～約７５０ｐＭ、約４００ｐＭ～約７００ｐＭ、約４００ｐＭ～約６５０ｐＭ、約４００ｐＭ～約６００ｐＭ、約４００ｐＭ～約５５０ｐＭ、約４００ｐＭ～約５００ｐＭ、約５００ｐＭ～約３０ｎＭ、約５００ｐＭ～約２５ｎＭ、約５００ｐＭ～約３０ｎＭ、約５００ｐＭ～約１５ｎＭ、約５００ｐＭ～約１０ｎＭ、約５００ｐＭ～約５ｎＭ、約５００ｐＭ～約２ｎＭ、約５００ｐＭ～約１ｎＭ、約５００ｐＭ～約９５０ｐＭ、約５００ｐＭ～約９００ｐＭ、約５００ｐＭ～約８５０ｐＭ、約５００ｐＭ～約８００ｐＭ、約５００ｐＭ～約７５０ｐＭ、約５００ｐＭ～約７００ｐＭ、約５００ｐＭ～約６５０ｐＭ、約５００ｐＭ～約６００ｐＭ、約５００ｐＭ～約５５０ｐＭ、約６００ｐＭ～約３０ｎＭ、約６００ｐＭ～約２５ｎＭ、約６００ｐＭ～約３０ｎＭ、約６００ｐＭ～約１５ｎＭ、約６００ｐＭ～約１０ｎＭ、約６００ｐＭ～約５ｎＭ、約６００ｐＭ～約２ｎＭ、約６００ｐＭ～約１ｎＭ、約６００ｐＭ～約９５０ｐＭ、約６００ｐＭ～約９００ｐＭ、約６００ｐＭ～約８５０ｐＭ、約６００ｐＭ～約８００ｐＭ、約６００ｐＭ～約７５０ｐＭ、約６００ｐＭ～約７００ｐＭ、約６００ｐＭ～約６５０ｐＭ、約７００ｐＭ～約３０ｎＭ、約７００ｐＭ～約２５ｎＭ、約７００ｐＭ～約３０ｎＭ、約７００ｐＭ～約１５ｎＭ、約７００ｐＭ～約１０ｎＭ、約７００ｐＭ～約５ｎＭ、約７００ｐＭ～約２ｎＭ、約７００ｐＭ～約１ｎＭ、約７００ｐＭ～約９５０ｐＭ、約７００ｐＭ～約９００ｐＭ、約７００ｐＭ～約８５０ｐＭ、約７００ｐＭ～約８００ｐＭ、約７００ｐＭ～約７５０ｐＭ、約８００ｐＭ～約３０ｎＭ、約８００ｐＭ～約２５ｎＭ、約８００ｐＭ～約３０ｎＭ、約８００ｐＭ～約１５ｎＭ、約８００ｐＭ～約１０ｎＭ、約８００ｐＭ～約５ｎＭ、約８００ｐＭ～約２ｎＭ、約８００ｐＭ～約１ｎＭ、約８００ｐＭ～約９５０ｐＭ、約８００ｐＭ～約９００ｐＭ、約８００ｐＭ～約８５０ｐＭ、約９００ｐＭ～約３０ｎＭ、約９００ｐＭ～約２５ｎＭ、約９００ｐＭ～約３０ｎＭ、約９００ｐＭ～約１５ｎＭ、約９００ｐＭ～約１０ｎＭ、約９００ｐＭ～約５ｎＭ、約９００ｐＭ～約２ｎＭ、約９００ｐＭ～約１ｎＭ、約９００ｐＭ～約９５０ｐＭ、約１ｎＭ～約３０ｎＭ、約１ｎＭ～約２５ｎＭ、約１ｎＭ～約２０ｎＭ、約１ｎＭ～約１５ｎＭ、約１ｎＭ～約１０ｎＭ、約１ｎＭ～約５ｎＭ、約２ｎＭ～約３０ｎＭ、約２ｎＭ～約２５ｎＭ、約２ｎＭ～約２０ｎＭ、約２ｎＭ～約１５ｎＭ、約２ｎＭ～約１０ｎＭ、約２ｎＭ～約５ｎＭ、約４ｎＭ～約３０ｎＭ、約４ｎＭ～約２５ｎＭ、約４ｎＭ～約２０ｎＭ、約４ｎＭ～約１５ｎＭ、約４ｎＭ～約１０ｎＭ、約４ｎＭ～約５ｎＭ、約５ｎＭ～約３０ｎＭ、約５ｎＭ～約２５ｎＭ、約５ｎＭ～約２０ｎＭ、約５ｎＭ～約１５ｎＭ、約５ｎＭ～約１０ｎＭ、約１０ｎＭ～約３０ｎＭ、約１０ｎＭ～約２５ｎＭ、約１０ｎＭ～約２０ｎＭ、約１０ｎＭ～約１５ｎＭ、約１５ｎＭ～約３０ｎＭ、約１５ｎＭ～約２５ｎＭ、約１５ｎＭ～約２０ｎＭ、約２０ｎＭ～約３０ｎＭ、および約２０ｎＭ～約２５ｎＭ）のＫＤでその標的に結合することができる。
本明細書に記載の標的結合ドメインのうちのいずれも、約１ｎＭ～約１０ｎＭ（例えば、約１ｎＭ～約９ｎＭ、約１ｎＭ～約８ｎＭ、約１ｎＭ～約７ｎＭ、約１ｎＭ～約６ｎＭ、約１ｎＭ～約５ｎＭ、約１ｎＭ～約４ｎＭ、約１ｎＭ～約３ｎＭ、約１ｎＭ～約２ｎＭ、約２ｎＭ～約１０ｎＭ、約２ｎＭ～約９ｎＭ、約２ｎＭ～約８ｎＭ、約２ｎＭ～約７ｎＭ、約２ｎＭ～約６ｎＭ、約２ｎＭ～約５ｎＭ、約２ｎＭ～約４ｎＭ、約２ｎＭ～約３ｎＭ、約３ｎＭ～約１０ｎＭ、約３ｎＭ～約９ｎＭ、約３ｎＭ～約８ｎＭ、約３ｎＭ～約７ｎＭ、約３ｎＭ～約６ｎＭ、約３ｎＭ～約５ｎＭ、約３ｎＭ～約４ｎＭ、約４ｎＭ～約１０ｎＭ、約４ｎＭ～約９ｎＭ、約４ｎＭ～約８ｎＭ、約４ｎＭ～約７ｎＭ、約４ｎＭ～約６ｎＭ、約４ｎＭ～約５ｎＭ、約５ｎＭ～約１０ｎＭ、約５ｎＭ～約９ｎＭ、約５ｎＭ～約８ｎＭ、約５ｎＭ～約７ｎＭ、約５ｎＭ～約６ｎＭ、約６ｎＭ～約１０ｎＭ、約６ｎＭ～約９ｎＭ、約６ｎＭ～約８ｎＭ、約６ｎＭ～約７ｎＭ、約７ｎＭ～約１０ｎＭ、約７ｎＭ～約９ｎＭ、約７ｎＭ～約８ｎＭ、約８ｎＭ～約１０ｎＭ、約８ｎＭ～約９ｎＭ、および約９ｎＭ～約１０ｎＭ）のＫＤでその標的に結合することができる。
当該技術分野で既知の様々な異なる方法を使用して、本明細書に記載の抗原結合タンパク質構築物のうちのいずれのＫＤ値も決定することができる（例えば、電気泳動移動度シフトアッセイ、フィルター結合アッセイ、表面プラズモン共鳴、および生体分子結合反応速度アッセイ等）。
抗原結合ドメイン
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じ抗原に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じエピトープに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じアミノ酸配列を含む。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、異なる抗原に特異的に結合する。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、抗原結合ドメインである。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々、抗原結合ドメインである。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体（例えば、ＶＨＨまたはＶＮＡＲドメイン）を含むか、またはそれである。
いくつかの例では、抗原結合ドメイン（例えば、本明細書に記載の抗原結合ドメインのうちのいずれか）は、ＣＤ１６ａ（例えば、米国特許第９，０３５，０２６号に記載のものを参照のこと）、ＣＤ２８（例えば、米国特許第７，７２３，４８２号に記載のものを参照のこと）、ＣＤ３（例えば、米国特許第９，２２６，９６２号に記載のものを参照のこと）、ＣＤ３３（例えば、米国特許第８，７５９，４９４号に記載のものを参照のこと）、ＣＤ２０（例えば、ＷＯ２０１４／０２６０５４に記載のものを参照のこと）、ＣＤ１９（例えば、米国特許第９，７０１，７５８号に記載のものを参照のこと）、ＣＤ２２（例えば、ＷＯ２００３／１０４４２５に記載のものを参照のこと）、ＣＤ１２３（例えば、ＷＯ２０１４／１３０６３５に記載のものを参照のこと）、ＩＬ－１Ｒ（例えば、米国特許第８，７４１，６０４号に記載のものを参照のこと）、ＩＬ－１（例えば、ＷＯ２０１４／０９５８０８に記載のものを参照のこと）、ＶＥＧＦ（例えば、米国特許第９，０９０，６８４号に記載のものを参照のこと）、ＩＬ－６Ｒ（例えば、米国特許第７，４８２，４３６号に記載のものを参照のこと）、ＩＬ－４（例えば、米国特許出願公開第２０１２／０１７１１９７号に記載のものを参照のこと）、ＩＬ－１０（例えば、米国特許出願公開第２０１６／０３４０４１３号に記載のものを参照のこと）、ＰＤＬ－１（例えば、Ｄｒｅｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒｅｓｓ．Ｐｕｒｉｆ．９４：６０－６６，２０１４に記載のものを参照のこと）、ＴＩＧＩＴ（例えば、米国特許出願公開第２０１７／０１９８０４２号に記載のものを参照のこと）、ＰＤ－１（例えば、米国特許第７，４８８，８０２号に記載のものを参照のこと）、ＴＩＭ３（例えば、米国特許第８，５５２，１５６号に記載のものを参照のこと）、ＣＴＬＡ４（例えば、ＷＯ２０１２／１２０１２５に記載のものを参照のこと）、ＭＩＣＡ（例えば、ＷＯ２０１６／１５４５８５に記載のものを参照のこと）、ＭＩＣＢ（例えば、米国特許第８，７５３，６４０号に記載のものを参照のこと）、ＩＬ－６（例えば、Ｇｅｊｉｍａ ｅｔ ａｌ．，Ｈｕｍａｎ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ １１（４）：１２１－１２９，２００２に記載のものを参照のこと）、ＩＬ－８（例えば、米国特許第６，１１７，９８０号に記載のものを参照のこと）、ＴＮＦα（例えば、Ｇｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．６２（３）：３７７－３８５，２０１５に記載のものを参照のこと）、ＣＤ２６ａ（例えば、ＷＯ２０１７／１８９５２６に記載のものを参照のこと）、ＣＤ３６（例えば、米国特許出願公開第２０１５／０２５９４２９号に記載のものを参照のこと）、ＵＬＢＰ２（例えば、米国特許第９，２７３，１３６号に記載のものを参照のこと）、ＣＤ３０（例えば、Ｈｏｍａｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４８（５）：４９７－５０１，１９９８に記載のものを参照のこと）、ＣＤ２００（例えば、米国特許第９，０８５，６２３号に記載のものを参照のこと）、ＩＧＦ－１Ｒ（例えば、米国特許出願公開第２０１７／００５１０６３号に記載のものを参照のこと）、ＭＵＣ４ＡＣ（例えば、ＷＯ２０１２／１７０４７０に記載のものを参照のこと）、ＭＵＣ５ＡＣ（例えば、米国特許第９，２３８，０８４号に記載のものを参照のこと）、Ｔｒｏｐ－２（例えば、ＷＯ２０１３／０６８９４６に記載のものを参照のこと）、ＣＭＥＴ（例えば、Ｅｄｗａｒｄｒａｊａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．１０６（３）：３６７－３７５，２０１０に記載のものを参照のこと）、ＥＧＦＲ（例えば、Ａｋｂａｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒ．Ｐｕｒｉｆ．１２７：８－１５，２０１６に記載のものを参照のこと）、ＨＥＲ１（例えば、米国特許出願公開第２０１３／０２７４４４６号に記載のものを参照のこと）、ＨＥＲ２（例えば、Ｃａｏ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｌｅｔｔ．３７（７）：１３４７－１３５４，２０１５に記載のものを参照のこと）、ＨＥＲ３（例えば、米国特許第９，５０５，８４３号に記載のものを参照のこと）、ＰＳＭＡ（例えば、Ｐａｒｋｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒ．Ｐｕｒｉｆ．８９（２）：１３６－１４５，２０１３に記載のものを参照のこと）、ＣＥＡ（例えば、ＷＯ１９９５／０１５３４１に記載のものを参照のこと）、Ｂ７Ｈ３（例えば、米国特許第９，３７１，３９５号に記載のものを参照のこと）、ＥＰＣＡＭ（例えば、ＷＯ２０１４／１５９５３１に記載のものを参照のこと）、ＢＣＭＡ（例えば、Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．２６（６）：１４４７－１４５６，２０１８に記載のものを参照のこと）、Ｐ－ｃａｄｈｅｒｉｎ（例えば、米国特許第７，４５２，５３７号に記載のものを参照のこと）、ＣＥＡＣＡＭ５（例えば、米国特許第９，６１７，３４５号に記載のものを参照のこと）、ＵＬ１６結合タンパク質（例えば、ＷＯ２０１７／０８３６１２に記載のものを参照のこと）、ＨＬＡ－ＤＲ（例えば、Ｐｉｓｔｉｌｌｏ ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｐ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔ．１４（２）：１２３－１３０，１９９７を参照のこと）、ＤＬＬ４（例えば、ＷＯ２０１４／００７５１３に記載のものを参照のこと）、ＴＹＲＯ３（例えば、ＷＯ２０１６／１６６３４８に記載のものを参照のこと）、ＡＸＬ（例えば、ＷＯ２０１２／１７５６９２に記載のものを参照のこと）、ＭＥＲ（例えば、ＷＯ２０１６／１０６２２１に記載のものを参照のこと）、ＣＤ１２２（例えば、米国特許出願公開第２０１６／０３６７６６４号に記載のものを参照のこと）、ＣＤ１５５（例えば、ＷＯ２０１７／１４９５３８に記載のものを参照のこと）、またはＰＤＧＦ－ＤＤ（例えば、米国特許第９，４４１，０３４号に記載のものを参照のこと）のうちのいずれか１つに特異的に結合することができる。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかに存在する抗原結合ドメインは各々独立して、ＶＨＨドメイン、ＶＮＡＲドメイン、およびｓｃＦｖからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗原結合ドメインのうちのいずれかは、ＢｉＴｅ、（ｓｃＦｖ）２、ナノボディ、ナノボディ－ＨＳＡ、ＤＡＲＴ、ＴａｎｄＡｂ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ－ＣＨ３、ｓｃＦｖ－ＣＨ－ＣＬ－ｓｃＦｖ、ＨＳＡｂｏｄｙ、ｓｃＤｉａｂｏｄｙ－ＨＡＳ、またはタンデム－ｓｃＦｖである。多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかで使用され得る抗原結合ドメインの追加の例は、当該技術分野で既知である。
ＶＨＨドメインは、ラクダ科動物に見られ得る単一単量体可変抗体ドメインである。ＶＮＡＲドメインは、軟骨魚に見られ得る単一単量体可変抗体ドメインです。ＶＨＨドメインおよびＶＮＡＲドメインの非限定的な態様は、例えば、Ｃｒｏｍｉｅ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１５：２５４３－２５５７，２０１６、Ｄｅ Ｇｅｎｓｔ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：１８７－１９８，２００６、Ｄｅ Ｍｅｙｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．３２：２６３－２７０，２０１４、Ｋｉｊａｎｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ １０：１６１－１７４，２０１５、Ｋｏｖａｌｅｖａ ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｔ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．１４：１５２７－１５３９，２０１４、Ｋｒａｈ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｏｘｉｃｏｌ．３８：２１－２８，２０１６、Ｍｕｊｉｃ－Ｄｅｌｉｃ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．３５：２４７－２５５，２０１４、Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ，Ｊ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．７４：２７７－３０２，２００１、Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．２６：２３０－２３５，２００１、Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．８２：７７５－７９７，２０１３、Ｒａｈｂａｒｉｚａｄｅｈ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｎｖｅｓｔ．４０：２９９－３３８，２０１１、Ｖａｎ Ａｕｄｅｎｈｏｖｅ ｅｔ ａｌ．，ＥＢｉｏＭｅｄｉｃｉｎｅ ８：４０－４８，２０１６、Ｖａｎ Ｂｏｃｋｓｔａｅｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ １０：１２１２－１２２４，２００９、Ｖｉｎｃｋｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．９１１：１５－２６，２０１２、およびＷｅｓｏｌｏｗｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８：１５７－１７４，２００９に記載されている。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチド内の抗原結合ドメインは各々、いずれもＶＨＨドメインであるか、または少なくとも１つの抗原結合ドメインがＶＨＨドメインである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチド内の抗原結合ドメインは各々、いずれもＶＮＡＲドメインであるか、または少なくとも１つの抗原結合ドメインがＶＮＡＲドメインである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドの抗原結合ドメインは各々、いずれもｓｃＦｖドメインであるか、または少なくとも１つの抗原結合ドメインがｓｃＦｖドメインである。
いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドに存在する２つ以上のポリペプチドは、集合して（例えば、非共有結合的に集合して）、本明細書に記載の抗原結合ドメインのうちのいずれか、例えば、抗体の抗原結合断片（例えば、本明細書に記載の抗体の抗原結合断片のうちのいずれか）、ＶＨＨ－ｓｃＡｂ、ＶＨＨ－Ｆａｂ、二重ｓｃＦａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、ダイアボディ、ｃｒｏｓｓＭａｂ、ＤＡＦ（ツーインワン）、ＤＡＦ（フォーインワン）、ＤｕｔａＭａｂ、ＤＴ－ＩｇＧ、ノブ・イン・ホール共通軽鎖、ノブ・イン・ホール集合体、電荷対、Ｆａｂアーム交換、ＳＥＥＤｂｏｄｙ、ＬＵＺ－Ｙ、Ｆｃａｂ、κλ－ボディ、直交Ｆａｂ、ＤＶＤ－ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｈ）－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－（Ｈ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－（Ｌ）ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ，Ｈ）－Ｆｖ、ＩｇＧ（Ｈ）－Ｖ、Ｖ（Ｈ）－ＩｇＧ、ＩｇＧ（Ｌ）－Ｖ、Ｖ（Ｌ）－ＩｇＧ、ＫＩＨ ＩｇＧ－ｓｃＦａｂ、２ｓｃＦｖ－ＩｇＧ、ＩｇＧ－２ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ４－Ｉｇ、Ｚｙｂｏｄｙ、ＤＶＩ－ＩｇＧ、ダイアボディ－ＣＨ３、トリプルボディ、ミノ抗体、ミニボディ、ＴｒｉＢｉミニボディ、ｓｃＦｖ－ＣＨ３ ＫＩＨ、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２－ｓｃＦｖ２、ｓｃＦｖ－ＫＩＨ、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ－Ｆｃ、四価ＨＣＡｂ、ｓｃダイアボディ－Ｆｃ、ダイアボディ－Ｆｃ、タンデムｓｃＦｖ－Ｆｃ、イントラボディ、ドック・アンド・ロック、ｌｍｍＴＡＣ、ＩｇＧ－ＩｇＧコンジュゲート、Ｃｏｖ－Ｘ－Ｂｏｄｙ、およびｓｃＦｖ１－ＰＥＧ－ｓｃＦｖ２を形成することができる。これらの要素の説明については、例えば、全体が本明細書に組み込まれるＳｐｉｅｓｓ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６７：９５－１０６，２０１５を参照されたい。抗体の抗原結合断片の非限定的な例には、Ｆｖ断片、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、およびＦａｂ’断片が挙げられる。抗体の抗原結合断片の追加の例は、ＩｇＧの抗原結合断片（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の抗原結合断片）（例えば、ヒトまたはヒト化ＩｇＧ、例えば、ヒトまたはヒト化ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４の抗原結合断片）、ＩｇＡの抗原結合断片（例えば、ＩｇＡ１またはＩｇＡ２の抗原結合断片）（例えば、ヒトまたはヒト化ＩｇＡ、例えば、ヒトまたはヒト化ＩｇＡ１またはＩｇＡ２の抗原結合断片）、ＩｇＤの抗原結合断片（例えば、ヒトまたはヒト化ＩｇＤの抗原結合断片）、ＩｇＥの抗原結合断片（例えば、ヒトまたはヒト化ＩｇＥの抗原結合断片）、またはＩｇＭの抗原結合断片（例えば、ヒトまたはヒト化ＩｇＭの抗原結合断片）である。
「Ｆｖ」断片は、１つの重鎖可変ドメインおよび１つの軽鎖可変ドメインを有する非共有結合二量体を含む。
「Ｆａｂ」断片は、Ｆｖ断片の重鎖および軽鎖可変ドメインに加えて、軽鎖の定常ドメインおよび重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）を含む。
「Ｆ（ａｂ’）２」断片には、ヒンジ領域の近くでジスルフィド結合によって結合された２つのＦａｂ断片が含まれる。
「二重可変ドメイン免疫グロブリン」または「ＤＶＤ－Ｉｇ」とは、例えば、各々参照により全体が組み込まれる、ＤｉＧｉａｍｍａｒｉｎｏ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．８９９：１４５－１５６，２０１２、Ｊａｋｏｂ ｅｔ ａｌ．，ＭＡＢｓ ５：３５８－３６３，２０１３、および米国特許第７，６１２，１８１号、同第８，２５８，２６８号、同第８，５８６，７１４号、同第８，７１６，４５０号、同第８，７２２，８５５号、同第８，７３５，５４６号、および同第８，８２２，６４５号に記載の多価および多重特異性結合タンパク質を指す。
ＤＡＲＴは、例えば、Ｇａｒｂｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ １３：７９９－８０１，２０１４に記載されている。
本明細書に記載の抗原結合ドメインのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、タンパク質、炭水化物、脂質、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される抗原に結合することができる。
抗原結合ドメインの追加の例および態様は、当該技術分野で既知である。
可溶性インターロイキンまたはサイトカインタンパク質
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、可溶性インターロイキンタンパク質または可溶性サイトカインタンパク質であり得る。いくつかの実施形態では、可溶性インターロイキンまたは可溶性サイトカインタンパク質は、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＳＣＦ、およびＦＬＴ３Ｌの群から選択される。可溶性ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＳＣＦ、およびＦＬＴ３Ｌの非限定的な例が以下に提供される。
ヒト可溶性ＩＬ－２（配列番号９）
ａｐｔｓｓｓｔｋｋｔ ｑｌｑｌｅｈｌｌｌｄ ｌｑｍｉｌｎｇｉｎｎ ｙｋｎｐｋｌｔｒｍｌ ｔｆｋｆｙｍｐｋｋａ ｔｅｌｋｈｌｑｃｌｅ ｅｅｌｋｐｌｅｅｖｌ ｎｌａｑｓｋｎｆｈｌ ｒｐｒｄｌｉｓｎｉｎ ｖｉｖｌｅｌｋｇｓｅ
ｔｔｆｍｃｅｙａｄｅ ｔａｔｉｖｅｆｌｎｒ ｗｉｔｆｃｑｓｉｉｓ ｔｌｔ
ヒト可溶性ＩＬ－３（配列番号１０）
ａｐｍｔｑｔｔｐｌｋｔ ｓｗｖｎｃｓｎｍｉｄ ｅｉｉｔｈｌｋｑｐｐ ｌｐｌｌｄｆｎｎｌｎ ｇｅｄｑｄｉｌｍｅｎ ｎｌｒｒｐｎｌｅａｆ ｎｒａｖｋｓｌｑｎａ ｓａｉｅｓｉｌｋｎｌ ｌｐｃｌｐｌａｔａａ ｐｔｒｈｐｉｈｉｋｄ
ｇｄｗｎｅｆｒｒｋｌ ｔｆｙｌｋｔｌｅｎａ ｑａｑｑｔｔｌｓｌａ ｉｆ
ヒト可溶性ＩＬ－７（配列番号１１）
ｄｃｄｉｅｇｋｄｇｋｑｙｅｓｖ ｌｍｖｓｉｄｑｌｌｄ ｓｍｋｅｉｇｓｎｃｌ ｎｎｅｆｎｆｆｋｒｈ ｉｃｄａｎｋｅｇｍｆ ｌｆｒａａｒｋｌｒｑ ｆｌｋｍｎｓｔｇｄｆ ｄｌｈｌｌｋｖｓｅｇ ｔｔｉｌｌｎｃｔｇｑ ｖｋｇｒｋｐａａｌｇ ｅａｑｐｔｋｓｌｅｅ ｎｋｓｌｋｅｑｋｋｌ ｎｄｌｃｆｌｋｒｌｌ ｑｅｉｋｔｃｗｎｋｉ ｌｍｇｔｋｅｈ
ヒト可溶性ＩＬ－８（配列番号１２）
ｅｇａｖｌｐｒｓａｋ ｅｌｒｃｑｃｉｋｔｙ ｓｋｐｆｈｐｋｆｉｋ ｅｌｒｖｉｅｓｇｐｈ ｃａｎｔｅｉｉｖｋｌ ｓｄｇｒｅｌｃｌｄｐ ｋｅｎｗｖｑｒｖｖｅ ｋｆｌｋｒａｅｎｓ
ヒト可溶性ＩＬ－１０（配列番号１３）
ｓｐｇｑｇｔｑｓｅｎｓｃ ｔｈｆｐｇｎｌｐｎｍ ｌｒｄｌｒｄａｆｓｒ ｖｋｔｆｆｑｍｋｄｑ ｌｄｎｌｌｌｋｅｓｌ ｌｅｄｆｋｇｙｌｇｃ ｑａｌｓｅｍｉｑｆｙ ｌｅｅｖｍｐｑａｅｎ ｑｄｐｄｉｋａｈｖｎ ｓｌｇｅｎｌｋｔｌｒ
ｌｒｌｒｒｃｈｒｆｌ ｐｃｅｎｋｓｋａｖｅ ｑｖｋｎａｆｎｋｌｑ ｅｋｇｉｙｋａｍｓｅ ｆｄｉｆｉｎｙｉｅａ ｙｍｔｍｋｉｒｎ
ヒト可溶性ＩＬ－１５（配列番号１４）
Ｎｗｖｎｖｉｓｄｌｋｋｉ ｅｄｌｉｑｓｍｈｉｄ ａｔｌｙｔｅｓｄｖｈ ｐｓｃｋｖｔａｍｋｃ ｆｌｌｅｌｑｖｉｓｌ ｅｓｇｄａｓｉｈｄｔ ｖｅｎｌｉｉｌａｎｎ ｓｌｓｓｎｇｎｖｔｅ ｓｇｃｋｅｃｅｅｌｅ ｅｋｎｉｋｅｆｌｑｓ ｆｖｈｉｖｑｍｆｉｎ ｔｓ
ヒト可溶性ＩＬ－１７（配列番号１５）
ｇｉｔｉｐｒｎ ｐｇｃｐｎｓｅｄｋｎ ｆｐｒｔｖｍｖｎｌｎ ｉｈｎｒｎｔｎｔｎｐ ｋｒｓｓｄｙｙｎｒｓ ｔｓｐｗｎｌｈｒｎｅ ｄｐｅｒｙｐｓｖｉｗ ｅａｋｃｒｈｌｇｃｉ ｎａｄｇｎｖｄｙｈｍ ｎｓｖｐｉｑｑｅｉｌ
ｖｌｒｒｅｐｐｈｃｐ ｎｓｆｒｌｅｋｉｌｖ ｓｖｇｃｔｃｖｔｐｉ ｖｈｈｖａ
ヒト可溶性ＩＬ－１８（配列番号１６）
ｙｆｇｋｌｅｓｋｌｓｖｉｒｎ ｌｎｄｑｖｌｆｉｄｑ ｇｎｒｐｌｆｅｄｍｔ ｄｓｄｃｒｄｎａｐｒ ｔｉｆｉｉｓｍｙｋｄ ｓｑｐｒｇｍａｖｔｉ ｓｖｋｃｅｋｉｓｔｌ ｓｃｅｎｋｉｉｓｆｋ ｅｍｎｐｐｄｎｉｋｄ ｔｋｓｄｉｉｆｆｑｒ ｓｖｐｇｈｄｎｋｍｑ ｆｅｓｓｓｙｅｇｙｆ ｌａｃｅｋｅｒｄｌｆ ｋｌｉｌｋｋｅｄｅｌ ｇｄｒｓｉｍｆｔｖｑ ｎｅｄ
ヒト可溶性ＰＤＧＦ－ＤＤ（配列番号１７）
ｒｄｔｓａｔｐｑｓａｓｉ ｋａｌｒｎａｎｌｒｒ ｄｅｓｎｈｌｔｄｌｙ ｒｒｄｅｔｉｑｖｋｇ ｎｇｙｖｑｓｐｒｆｐ ｎｓｙｐｒｎｌｌｌｔ ｗｒｌｈｓｑｅｎｔｒ ｉｑｌｖｆｄｎｑｆｇ ｌｅｅａｅｎｄｉｃｒ ｙｄｆｖｅｖｅｄｉｓ
ｅｔｓｔｉｉｒｇｒｗ ｃｇｈｋｅｖｐｐｒｉ ｋｓｒｔｎｑｉｋｉｔ ｆｋｓｄｄｙｆｖａｋ ｐｇｆｋｉｙｙｓｌｌ ｅｄｆｑｐａａａｓｅ ｔｎｗｅｓｖｔｓｓｉ ｓｇｖｓｙｎｓｐｓｖ ｔｄｐｔｌｉａｄａｌ ｄｋｋｉａｅｆｄｔｖ ｅｄｌｌｋｙｆｎｐｅ ｓｗｑｅｄｌｅｎｍｙ ｌｄｔｐｒｙｒｇｒｓ ｙｈｄｒｋｓｋｖｄｌ ｄｒｌｎｄｄａｋｒｙ ｓｃｔｐｒｎｙｓｖｎ ｉｒｅｅｌｋｌａｎｖ ｖｆｆｐｒｃｌｌｖｑ ｒｃｇｇｎｃｇｃｇｔ ｖｎｗｒｓｃｔｃｎｓ ｇｋｔｖｋｋｙｈｅｖ ｌｑｆｅｐｇｈｉｋｒ ｒｇｒａｋｔｍａｌｖ ｄｉｑｌｄｈｈｅｒｃ ｄｃｉｃｓｓｒｐｐｒ
ヒト可溶性ＳＣＦ（配列番号１８）
ｅｇｉｃｒｎｒｖｔｎｎｖｋｄｖ ｔｋｌｖａｎｌｐｋｄ ｙｍｉｔｌｋｙｖｐｇ ｍｄｖｌｐｓｈｃｗｉ ｓｅｍｖｖｑｌｓｄｓ ｌｔｄｌｌｄｋｆｓｎ ｉｓｅｇｌｓｎｙｓｉ ｉｄｋｌｖｎｉｖｄｄ ｌｖｅｃｖｋｅｎｓｓ ｋｄｌｋｋｓｆｋｓｐ ｅｐｒｌｆｔｐｅｅｆ ｆｒｉｆｎｒｓｉｄａ ｆｋｄｆｖｖａｓｅｔ ｓｄｃｖｖｓｓｔｌｓ ｐｅｋｄｓｒｖｓｖｔ
ｋｐｆｍｌｐｐｖａａ ｓｓｌｒｎｄｓｓｓｓ ｎｒｋａｋｎｐｐｇｄ ｓｓｌｈｗａａｍａｌ ｐａｌｆｓｌｉｉｇｆ ａｆｇａｌｙｗｋｋｒ ｑｐｓｌｔｒａｖｅｎ ｉｑｉｎｅｅｄｎｅｉ ｓｍｌｑｅｋｅｒｅｆ ｑｅｖ
ヒト可溶性ＦＬＴ３Ｌ（配列番号１９）
ｔｑｄｃｓｆｑｈｓｐｉｓｓｄ ｆａｖｋｉｒｅｌｓｄ ｙｌｌｑｄｙｐｖｔｖ ａｓｎｌｑｄｅｅｌｃ ｇｇｌｗｒｌｖｌａｑ ｒｗｍｅｒｌｋｔｖａ ｇｓｋｍｑｇｌｌｅｒ ｖｎｔｅｉｈｆｖｔｋ ｃａｆｑｐｐｐｓｃｌ ｒｆｖｑｔｎｉｓｒｌ ｌｑｅｔｓｅｑｌｖａ ｌｋｐｗｉｔｒｑｎｆ ｓｒｃｌｅｌｑｃｑｐ ｄｓｓｔｌｐｐｐｗｓ ｐｒｐｌｅａｔａｐｔ
ａｐｑｐｐｌｌｌｌｌ ｌｌｐｖｇｌｌｌｌａ ａａｗｃｌｈｗｑｒｔ ｒｒｒｔｐｒｐｇｅｑ ｖｐｐｖｐｓｐｑｄｌ ｌｌｖｅｈ
可溶性ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＵＬＢＰ１、ＵＬＢＰ２、ＵＬＢＰ３、ＵＬＢＰ４、ＵＬＢＰ５、およびＵＬＢＰ６の非限定的な例が以下に提供される。
ヒト可溶性ＭＩＣＡ（配列番号２０）
ｅｐｈｓｌｒｙ ｎｌｔｖｌｓｗｄｇｓ ｖｑｓｇｆｌｔｅｖｈ ｌｄｇｑｐｆｌｒｃｄ ｒｑｋｃｒａｋｐｑｇ ｑｗａｅｄｖｌｇｎｋ ｔｗｄｒｅｔｒｄｌｔ ｇｎｇｋｄｌｒｍｔｌ ａｈｉｋｄｑｋｅｇｌ ｈｓｌｑｅｉｒｖｃｅ
ｉｈｅｄｎｓｔｒｓｓ ｑｈｆｙｙｄｇｅｌｆ ｌｓｑｎｌｅｔｋｅｗ ｔｍｐｑｓｓｒａｑｔ ｌａｍｎｖｒｎｆｌｋ ｅｄａｍｋｔｋｔｈｙ ｈａｍｈａｄｃｌｑｅ ｌｒｒｙｌｋｓｇｖｖ ｌｒｒｔｖｐｐｍｖｎ ｖｔｒｓｅａｓｅｇｎ ｉｔｖｔｃｒａｓｇｆ ｙｐｗｎｉｔｌｓｗｒ ｑｄｇｖｓｌｓｈｄｔ ｑｑｗｇｄｖｌｐｄｇ ｎｇｔｙｑｔｗｖａｔ ｒｉｃｑｇｅｅｑｒｆ ｔｃｙｍｅｈｓｇｎｈ ｓｔｈｐｖｐｓｇｋｖ ｌｖｌｑｓｈｗｑｔｆ ｈｖｓａｖａａａａｉ ｆｖｉｉｉｆｙｖｒｃ ｃｋｋｋｔｓａａｅｇ ｐｅｌｖｓｌｑｖｌｄ ｑｈｐｖｇｔｓｄｈｒ ｄａｔｑｌｇｆｑｐｌ ｍｓｄｌｇｓｔｇｓｔ ｅｇａ
ヒト可溶性ＭＩＣＢ（配列番号２１）
ａｅｐｈｓｌｒｙ ｎｌｍｖｌｓｑｄｅｓ ｖｑｓｇｆｌａｅｇｈ ｌｄｇｑｐｆｌｒｙｄ ｒｑｋｒｒａｋｐｑｇ ｑｗａｅｄｖｌｇａｋ ｔｗｄｔｅｔｅｄｌｔ ｅｎｇｑｄｌｒｒｔｌ ｔｈｉｋｄｑｋｇｇｌ ｈｓｌｑｅｉｒｖｃｅ
ｉｈｅｄｓｓｔｒｇｓ ｒｈｆｙｙｄｇｅｌｆ ｌｓｑｎｌｅｔｑｅｓ ｔｖｐｑｓｓｒａｑｔ ｌａｍｎｖｔｎｆｗｋ ｅｄａｍｋｔｋｔｈｙ ｒａｍｑａｄｃｌｑｋ ｌｑｒｙｌｋｓｇｖａ ｉｒｒｔｖｐｐｍｖｎ ｖｔｃｓｅｖｓｅｇｎ ｉｔｖｔｃｒａｓｓｆ ｙｐｒｎｉｔｌｔｗｒ ｑｄｇｖｓｌｓｈｎｔ ｑｑｗｇｄｖｌｐｄｇ ｎｇｔｙｑｔｗｖａｔ ｒｉｒｑｇｅｅｑｒｆ ｔｃｙｍｅｈｓｇｎｈ ｇｔｈｐｖｐｓｇｋｖ ｌｖｌｑｓｑｒｔｄｆ ｐｙｖｓａａｍｐｃｆ ｖｉｉｉｉｌｃｖｐｃ ｃｋｋｋｔｓａａｅｇ ｐｅｌｖｓｌｑｖｌｄ ｑｈｐｖｇｔｇｄｈｒ
ｄａａｑｌｇｆｑｐｌ ｍｓａｔｇｓｔｇｓｔ ｅｇａ
ヒト可溶性ＵＬＢＰ１（配列番号２２）
ｗｖｄｔｈｃｌｃｙｄｆｉｉｔ ｐｋｓｒｐｅｐｑｗｃ ｅｖｑｇｌｖｄｅｒｐ ｆｌｈｙｄｃｖｎｈｋ ａｋａｆａｓｌｇｋｋ ｖｎｖｔｋｔｗｅｅｑ ｔｅｔｌｒｄｖｖｄｆ ｌｋｇｑｌｌｄｉｑｖ ｅｎｌｉｐｉｅｐｌｔ ｌｑａｒｍｓｃｅｈｅ ａｈｇｈｇｒｇｓｗｑ ｆｌｆｎｇｑｋｆｌｌ ｆｄｓｎｎｒｋｗｔａ ｌｈｐｇａｋｋｍｔｅ ｋｗｅｋｎｒｄｖｔｍ
ｆｆｑｋｉｓｌｇｄｃ ｋｍｗｌｅｅｆｌｍｙ ｗｅｑｍｌｄｐｔｋｐ ｐｓｌａｐｇ
ヒト可溶性ＵＬＢＰ２（配列番号２３）
ｇｒａｄｐｈｓｌｃｙｄｉｔｖｉ ｐｋｆｒｐｇｐｒｗｃ ａｖｑｇｑｖｄｅｋｔ ｆｌｈｙｄｃｇｎｋｔ ｖｔｐｖｓｐｌｇｋｋ ｌｎｖｔｔａｗｋａｑ ｎｐｖｌｒｅｖｖｄｉ ｌｔｅｑｌｒｄｉｑｌ ｅｎｙｔｐｋｅｐｌｔ ｌｑａｒｍｓｃｅｑｋ ａｅｇｈｓｓｇｓｗｑ ｆｓｆｄｇｑｉｆｌｌ ｆｄｓｅｋｒｍｗｔｔ ｖｈｐｇａｒｋｍｋｅ ｋｗｅｎｄｋｖｖａｍ ｓｆｈｙｆｓｍｇｄｃ ｉｇｗｌｅｄｆｌｍｇ ｍｄｓｔｌｅｐｓａｇ ａｐｌａｍｓ
ヒト可溶性ＵＬＢＰ３（配列番号２４）
ｄａｈｓｌｗｙｎｆｔｉ ｉｈｌｐｒｈｇｑｑｗ ｃｅｖｑｓｑｖｄｑｋ ｎｆｌｓｙｄｃｇｓｄ ｋｖｌｓｍｇｈｌｅｅ ｑｌｙａｔｄａｗｇｋ ｑｌｅｍｌｒｅｖｇｑ ｒｌｒｌｅｌａｄｔｅ ｌｅｄｆｔｐｓｇｐｌ ｔｌｑｖｒｍｓｃｅｃ ｅａｄｇｙｉｒｇｓｗ ｑｆｓｆｄｇｒｋｆｌ ｌｆｄｓｎｎｒｋｗｔ ｖｖｈａｇａｒｒｍｋ ｅｋｗｅｋｄｓｇｌｔ
ｔｆｆｋｍｖｓｍｒｄ ｃｋｓｗｌｒｄｆｌｍ ｈｒｋｋｒｌｅｐｔａ ｐｐｔｍａｐｇ
ヒト可溶性ＵＬＢＰ４（配列番号２５）
ｈｓｌｃｆｎｆｔｉｋ ｓｌｓｒｐｇｑｐｗｃ ｅａｑｖｆｌｎｋｎｌ ｆｌｑｙｎｓｄｎｎｍ ｖｋｐｌｇｌｌｇｋｋ ｖｙａｔｓｔｗｇｅｌ ｔｑｔｌｇｅｖｇｒｄ ｌｒｍｌｌｃｄｉｋｐ ｑｉｋｔｓｄｐｓｔｌ ｑｖｅｍｆｃｑｒｅａ ｅｒｃｔｇａｓｗｑｆ ａｔｎｇｅｋｓｌｌｆ ｄａｍｎｍｔｗｔｖｉ ｎｈｅａｓｋｉｋｅｔ ｗｋｋｄｒｇｌｅｋｙ ｆｒｋｌｓｋｇｄｃｄ ｈｗｌｒｅｆｌｇｈｗ ｅａｍｐｅｐｔｖｓｐ ｖｎａｓｄｉｈｗｓｓ ｓｓｌｐｄｒｗｉｉｌ ｇａｆｉｌｌｖｌｍｇ ｉｖｌｉｃｖｗｗｑｎ ｇｅｗｑａｇｌｗｐｌ ｒｔｓ
ヒト可溶性ＵＬＢＰ５（配列番号２６）
ｇｌａｄｐ ｈｓｌｃｙｄｉｔｖｉ ｐｋｆｒｐｇｐｒｗｃ ａｖｑｇｑｖｄｅｋｔ ｆｌｈｙｄｃｇｓｋｔ ｖｔｐｖｓｐｌｇｋｋ ｌｎｖｔｔａｗｋａｑ ｎｐｖｌｒｅｖｖｄｉ ｌｔｅｑｌｌｄｉｑｌ ｅｎｙｉｐｋｅｐｌｔ ｌｑａｒｍｓｃｅｑｋ ａｅｇｈｇｓｇｓｗｑ ｌｓｆｄｇｑｉｆｌｌ ｆｄｓｅｎｒｍｗｔｔ ｖｈｐｇａｒｋｍｋｅ ｋｗｅｎｄｋｄｍｔｍ ｓｆｈｙｉｓｍｇｄｃ ｔｇｗｌｅｄｆｌｍｇ ｍｄｓｔｌｅｐｓａｇ ａｐｐｔｍｓｓｇ
ヒト可溶性ＵＬＢＰ６（配列番号２７）
ｒｒｄｄｐ ｈｓｌｃｙｄｉｔｖｉ ｐｋｆｒｐｇｐｒｗｃ ａｖｑｇｑｖｄｅｋｔ ｆｌｈｙｄｃｇｎｋｔ ｖｔｐｖｓｐｌｇｋｋ ｌｎｖｔｍａｗｋａｑ ｎｐｖｌｒｅｖｖｄｉ ｌｔｅｑｌｌｄｉｑｌ ｅｎｙｔｐｋｅｐｌｔ ｌｑａｒｍｓｃｅｑｋ ａｅｇｈｓｓｇｓｗｑ ｆｓｉｄｇｑｔｆｌｌ ｆｄｓｅｋｒｍｗｔｔ ｖｈｐｇａｒｋｍｋｅ ｋｗｅｎｄｋｄｖａｍ ｓｆｈｙｉｓｍｇｄｃ ｉｇｗｌｅｄｆｌｍｇ ｍｄｓｔｌｅｐｓａｇ ａｐｌａｍｓｓｇ
可溶性インターロイキンタンパク質および可溶性サイトカインタンパク質の追加の例は、当該技術分野で既知である。
可溶性受容体
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、可溶性インターロイキン受容体、可溶性サイトカイン受容体、またはリガンド受容体である。いくつかの実施形態では、可溶性受容体は、可溶性ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－β ＲＩＩ）である（例えば、Ｙｕｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．１９４（９）：１１４０－１１５１，２０１６に記載のものを参照のこと）、可溶性ＴＧＦ－βＲＩＩＩ（例えば、Ｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｃｅｎｔａ ５７：３２０，２０１７に記載のものを参照のこと）、可溶性ＮＫＧ２Ｄ（例えば、Ｃｏｓｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １４（２）：１２３－１３３，２００１、Ｃｏｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．９，Ａｒｔｉｃｌｅ １１５０，Ｍａｙ ２９，２０１８、ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１８．０１１５０を参照のこと）、可溶性ＮＫｐ３０（例えば、Ｃｏｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．９，Ａｒｔｉｃｌｅ １１５０，Ｍａｙ ２９，２０１８、ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１８．０１１５０を参照のこと）、可溶性ＮＫｐ４４（例えば、Ｃｏｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．９，Ａｒｔｉｃｌｅ １１５０，Ｍａｙ ２９，２０１８、ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１８．０１１５０に記載のものを参照のこと）、可溶性ＮＫｐ４６（例えば、Ｍａｎｄｅｌｂｏｉｍ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ４０９：１０５５－１０６０，２００１、Ｃｏｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．９，Ａｒｔｉｃｌｅ １１５０，Ｍａｙ ２９，２０１８、ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１８．０１１５０を参照のこと）、可溶性ＤＮＡＭ－１（例えば、Ｃｏｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，Ｖｏｌ．９，Ａｒｔｉｃｌｅ １１５０，Ｍａｙ ２９，２０１８、ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｉｍｍｕ．２０１８．０１１５０に記載のものを参照のこと）、ｓｃＭＨＣＩ（例えば、Ｗａｓｈｂｕｒｎ ｅｔ ａｌ．，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ６（３）：ｅ１８４３９，２０１１に記載のものを参照のこと）、ｓｃＭＨＣＩＩ（例えば、Ｂｉｓｈｗａｊｉｔ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７０（１）：２５－３３，１９９６に記載のものを参照のこと）、ｓｃＴＣＲ（例えば、Ｗｅｂｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３５６（６３７２）：７９３－７９６，１９９２に記載のものを参照のこと）、可溶性ＣＤ１５５（例えば、Ｔａｈａｒａ－Ｈａｎａｏｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６（４）：５３３－５３８，２００４に記載のものを参照のこと）、または可溶性ＣＤ２８（例えば、Ｈｅｂｂａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３６：３８８－３９２，２００４を参照のこと）。
可溶性インターロイキン受容体および可溶性サイトカイン受容体の追加の例は、当該技術分野で既知である。
追加の抗原結合ドメイン
多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、１つ以上（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０）の追加の標的結合ドメイン（複数可）（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）をさらに含み、１つ以上の追加の抗原結合ドメインのうちの少なくとも１つが、可溶性組織因子ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれか）と一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの例示的な第１のドメインのうちのいずれか）との間に位置付けられている。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、可溶性組織因子ドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれか）と１つ以上の追加の標的結合ドメイン（複数可）（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）、および／または１つ以上の追加の標的結合ドメイン（複数可）（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つと一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの本明細書に記載の例示的な第１のドメインのうちのいずれか）との間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含み得る。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に１つ以上（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０）の追加の標的結合ドメインをさらに含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つは、第１のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの本明細書に記載の例示的な第１のドメインのうちのいずれか）に直接隣接している。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つと一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの本明細書に記載の例示的な第１のドメインのうちのいずれか）との間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）に直接隣接している。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つと第１の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）との間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含む。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つは、第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に配置されており、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれか）と一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの例示的な第１のドメインのうちのいずれか）との間に位置付けられている。いくつかの実施形態では、Ｎ末端に配置された１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つの追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）は、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）または一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの本明細書に記載の例示的な第１のドメインのうちのいずれか）に直接隣接している。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の少なくとも１つの追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）と第１の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）または一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの本明細書に記載の例示的な第１のドメインのうちのいずれか）との間に配置されたリンカー配列（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知のリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含む。いくつかの実施形態では、Ｃ末端に配置された１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つの追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）は、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）または一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの例示的な第１のドメインのうちのいずれか）に直接隣接している。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の少なくとも１つの追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）と第１の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）または一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの本明細書に記載の例示的な第１のドメインのうちのいずれか）との間に配置されたリンカー配列（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含む。いくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれか）と一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の第１のドメインのうちのいずれかまたは本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれか）との間に位置付けられた１つ以上の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つは、可溶性組織因子ドメインおよび／または一対の親和性ドメインの第１のドメインに直接隣接している。いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、（ｉ）可溶性組織因子ドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子のうちのいずれか）と、可溶性組織因子ドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子のうちのいずれか）と一対の親和性ドメインの第１のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの例示的な第１のドメインのうちのいずれか）との間に位置付けられた１つ以上の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つとの間、および／または（ｉｉ）一対の親和性ドメインの第１のドメインと、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間に位置付けられた１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つとの間に配置されたリンカー配列（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含む。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に１つ以上（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０）の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）をさらに含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの例示的な第２のドメインのうちのいずれか）に直接隣接している。いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の１つ以上の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つと一対の親和性ドメインの第２のドメイン（例えば、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかの本明細書に記載の例示的な第２のドメインのうちのいずれか）との間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つは、第２のキメラポリペプチド内の第２の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の標的結合ドメインのうちのいずれか）に直接隣接している。いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の１つ以上の追加の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）のうちの少なくとも１つと第２の標的結合ドメイン（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な標的結合ドメインのうちのいずれか）との間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含む。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上（例えば、３つ以上、４つ以上、５つ以上、６つ以上、７つ以上、８つ以上、９つ以上、１０以上、またはそれ以上）は、同じ抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上（例えば、３つ以上、４つ以上、５つ以上、６つ以上、７つ以上、８つ以上、９つ以上、１０以上、またはそれ以上）は、同じエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上（例えば、３つ以上、４つ以上、５つ以上、６つ以上、７つ以上、８つ以上、９つ以上、１０以上、またはそれ以上）は、同じアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインは各々、同じ抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインは各々、同じエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインは各々、同じアミノ酸配列を含む。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインは、異なる抗原に特異的に結合する。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の標的結合ドメインのうちの１つ以上（例えば、２つ以上、３つ以上、４つ以上、５つ以上、６つ以上、７つ以上、８つ以上、９つ以上、１０以上、またはそれ以上）は、抗原結合ドメインである。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインは各々、抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体）である。
一対の親和性ドメイン
いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドは、１）一対の親和性ドメインの第１のドメインを含む第１のキメラポリペプチドと、２）一対の親和性ドメインの第２のドメインを含む第２のキメラポリペプチドとを含み、これにより、第１のキメラポリペプチドおよび第２のキメラポリペプチドが、一対の親和性ドメインの第１のドメインおよび第２のドメインの結合を介して会合するようになる。いくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、ヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）由来のｓｕｓｈｉドメインと可溶性ＩＬ－１５である。ｓｕｓｈｉドメイン、別名、ショートコンセンサスリピートまたは１型糖タンパク質モチーフは、タンパク質－タンパク質相互作用の一般的なモチーフである。ｓｕｓｈｉドメインは、補体成分Ｃ１ｒ、Ｃ１ｓ、Ｈ因子、Ｃ２ｍ、ならびに非免疫学的分子第ＸＩＩＩ因子およびβ２－糖タンパク質を含むいくつかのタンパク質結合分子上で特定されている。典型的なｓｕｓｈｉドメインは、およそ６０個のアミノ酸残基を有し、４つのシステインを含む（Ｒａｎｇａｎａｔｈａｎ，Ｐａｃ．Ｓｙｍｐ Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔ．２０００：１５５－６７）。第１のシステインは第３のシステインとジスルフィド結合を形成することができ、第２のシステインは第４のシステインとジスルフィド架橋を形成することができる。一対の親和性ドメインの一方のメンバーが可溶性ＩＬ－１５であるいくつかの実施形態では、可溶性ＩＬ１５は、Ｄ８ＮまたはＤ８Ａアミノ酸置換を有する。一対の親和性ドメインの一方のメンバーがヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）であるいくつかの実施形態では、ヒトＩＬ１５Ｒαは、成熟全長ＩＬ１５Ｒαである。いくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、バルナーゼとバルンスターである。いくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、ＰＫＡとＡＫＡＰである。いくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、変異ＲＮａｓｅ Ｉ断片に基づくアダプター／ドッキングタグモジュール（Ｒｏｓｓｉ，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．１０３：６８４１－６８４６，２００６、Ｓｈａｒｋｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６８：５２８２－５２９０，２００８、Ｒｏｓｓｉ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｃｉ．３３：４７４－４８１，２０１２）、またはタンパク質シンタキシン、シナプトタグミン、シナプトブレビン、およびＳＮＡＰ２５の相互作用に基づくＳＮＡＲＥモジュール（Ｄｅｙｅｖ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４８６－１４９２，２００３）である。
いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチドは、一対の親和性ドメインの第１のドメインを含み、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチドは、一対の親和性ドメインの第２のドメインを含み、一対の親和性ドメインの第１のドメインと一対の親和性ドメインの第２のドメインは、１×１０－７Ｍ未満、１×１０－８Ｍ未満、１×１０－９Ｍ未満、１×１０－１０Ｍ未満、１×１０－１１Ｍ未満、１×１０－１２Ｍ未満、または１×１０－１３Ｍ未満の解離平衡定数（ＫＤ）で互いに結合する。いくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第１のドメインと一対の親和性ドメインの第２のドメインは、約１×１０－４Ｍ～約１×１０－６Ｍ、約１×１０－５Ｍ～約１×１０－７Ｍ、約１×１０－６Ｍ～約１×１０－８Ｍ、約１×１０－７Ｍ～約１×１０－９Ｍ、約１×１０－８Ｍ～約１×１０－１０Ｍ、約１×１０－９Ｍ～約１×１０－１１Ｍ、約１×１０－１０Ｍ～約１×１０－１２Ｍ、約１×１０－１１Ｍ～約１×１０－１３Ｍ、約１×１０－４Ｍ～約１×１０－５Ｍ、約１×１０－５Ｍ～約１×１０－６Ｍ、約１×１０－６Ｍ～約１×１０－７Ｍ、約１×１０－７Ｍ～約１×１０－８Ｍ、約１×１０－８Ｍ～約１×１０－９Ｍ、約１×１０－９Ｍ～約１×１０－１０Ｍ、約１×１０－１０Ｍ～約１×１０－１１Ｍ、約１×１０－１１Ｍ～約１×１０－１２Ｍ、または約１×１０－１２Ｍ～約１×１０－１３Ｍ（その上限および下限も含む）のＫＤで互いに結合する。当該技術分野で既知の様々な異なる方法のうちのいずれかを使用して、一対の親和性ドメインの第１のドメインおよび一対の親和性ドメインの第２のドメインの結合のＫＤ値を決定することができる（例えば、電気泳動移動度シフトアッセイ、フィルター結合アッセイ、表面プラズモン共鳴、および生体分子結合反応速度アッセイ等）。
いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチドは、一対の親和性ドメインの第１のドメインを含み、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチドは、一対の親和性ドメインの第２のドメインを含み、一対の親和性ドメインの第１のドメイン、一対の親和性ドメインの第２のドメイン、またはそれらの両方が、約１０～１００アミノ酸長である。例えば、一対の親和性ドメインの第１のドメイン、一対の親和性ドメインの第２のドメイン、またはそれらの両方が、約１０～１００アミノ酸長、約１５～１００アミノ酸長、約２０～１００アミノ酸長、約２５～１００アミノ酸長、約３０～１００アミノ酸長、約３５～１００アミノ酸長、約４０～１００アミノ酸長、約４５～１００アミノ酸長、約５０～１００アミノ酸長、約５５～１００アミノ酸長、約６０～１００アミノ酸長、約６５～１００アミノ酸長、約７０～１００アミノ酸長、約７５～１００アミノ酸長、約８０～１００アミノ酸長、約８５～１００アミノ酸長、約９０～１００アミノ酸長、約９５～１００アミノ酸長、約１０～９５アミノ酸長、約１０～９０アミノ酸長、約１０～８５アミノ酸長、約１０～８０アミノ酸長、約１０～７５アミノ酸長、約１０～７０アミノ酸長、約１０～６５アミノ酸長、約１０～６０アミノ酸長、約１０～５５アミノ酸長、約１０～５０アミノ酸長、約１０～４５アミノ酸長、約１０～４０アミノ酸長、約１０～３５アミノ酸長、約１０～３０アミノ酸長、約１０～２５アミノ酸長、約１０～２０アミノ酸長、約１０～１５アミノ酸長、約２０～３０アミノ酸長、約３０～４０アミノ酸長、約４０～５０アミノ酸長、約５０～６０アミノ酸長、約６０～７０アミノ酸長、約７０～８０アミノ酸長、約８０～９０アミノ酸長、約９０～１００アミノ酸長、約２０～９０アミノ酸長、約３０～８０アミノ酸長、約４０～７０アミノ酸長、約５０～６０アミノ酸長、またはそれらの間の任意の範囲であり得る。いくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第１のドメイン、一対の親和性ドメインの第２のドメイン、またはそれらの両方が、約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、または１００アミノ酸長である。
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される一対の親和性ドメインの第１および／または第２のドメインのうちのいずれかは、一対の親和性ドメインの第１および／または第２のドメインの機能が損なわれないままである限り、そのＮ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加のアミノ酸（例えば、１、２、３、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上のアミノ酸）を含み得る。例えば、ヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）由来のｓｕｓｈｉドメインは、可溶性ＩＬ－１５に結合する能力を依然として保持しながら、Ｎ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加のアミノ酸を含むことができる。加えてまたはあるいは、可溶性ＩＬ－１５は、ヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）由来のｓｕｓｈｉドメインに結合する能力を依然として保持しながら、Ｎ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加のアミノ酸を含むことができる。
ＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）由来のｓｕｓｈｉドメインの非限定的な例は、ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号２８）に少なくとも７０％同一、少なくとも７５％同一、少なくとも８０％同一、少なくとも８５％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９５％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一の配列を含み得る。いくつかの実施形態では、ＩＬ１５Ｒαアルファ鎖由来のｓｕｓｈｉドメインは、ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ（配列番号２９）を含む核酸によってコードされ得る。
いくつかの実施形態では、可溶性ＩＬ－１５は、ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１４）と少なくとも７０％同一、少なくとも７５％同一、少なくとも８０％同一、少なくとも８５％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９５％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一の配列を含み得る。いくつかの実施形態では、可溶性ＩＬ－１５は、ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号３０）の配列を含む核酸によってコードされ得る。
シグナル配列
いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドは、そのＮ末端にシグナル配列を含む第１のキメラポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドは、そのＮ末端にシグナル配列を含む第２のキメラポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチドおよび多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチドの両方がシグナル配列を含む。当業者に理解されるように、シグナル配列は、タンパク質を分泌経路に指向するいくつかの内因的に産生されたタンパク質のＮ末端に存在するアミノ酸配列である（例えば、タンパク質は、ある特定の細胞内オルガネラに存在するか、細胞膜に存在するか、または細胞から分泌されるように指示される）。シグナル配列は不均一であり、それらの一次アミノ酸配列が大きく異なる。しかしながら、シグナル配列は、典型的には、１６～３０アミノ酸長であり、親水性の通常は正に帯電したＮ末端領域、中央の疎水性ドメイン、およびシグナルペプチダーゼの切断部位を含むＣ末端領域を含む。
いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方が、アミノ酸配列ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ（配列番号３１）を有するシグナル配列を含む。いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方が、核酸配列ＡＴＧＡＡＡＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＴＡＴＴＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＴＡＧＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ（配列番号３２）、ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＣＡＣＡＴＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＡＧＣ（配列番号３３）、またはＡＴＧＡＡＡＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＴＡＴＴＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＴＡＧＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ（配列番号３４）によってコードされるシグナル配列を含む。
いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方が、アミノ酸配列ＭＫＣＬＬＹＬＡＦＬＦＬＧＶＮＣ（配列番号３５）を有するシグナル配列を含む。いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方が、アミノ酸配列ＭＧＱＩＶＴＭＦＥＡＬＰＨＩＩＤＥＶＩＮＩＶＩＩＶＬＩＩＩＴＳＩＫＡＶＹＮＦＡＴＣＧＩＬＡＬＶＳＦＬＦＬＡＧＲＳＣＧ（配列番号３６）を有するシグナル配列を含む。いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方が、アミノ酸配列ＭＰＮＨＱＳＧＳＰＴＧＳＳＤＬＬＬＳＧＫＫＱＲＰＨＬＡＬＲＲＫＲＲＲＥＭＲＫＩＮＲＫＶＲＲＭＮＬＡＰＩＫＥＫＴＡＷＱＨＬＱＡＬＩＳＥＡＥＥＶＬＫＴＳＱＴＰＱＮＳＬＴＬＦＬＡＬＬＳＶＬＧＰＰＶＴＧ（配列番号３７）を有するシグナル配列を含む。いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方が、アミノ酸配列ＭＤＳＫＧＳＳＱＫＧＳＲＬＬＬＬＬＶＶＳＮＬＬＬＣＱＧＶＶＳ（配列番号３８）を有するシグナル配列を含む。当業者であれば、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチドおよび／または第２のキメラポリペプチドにおける使用に適切な他のシグナル配列を認識しているであろう。
いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方が、約１０～１００アミノ酸長のシグナル配列を含む。例えば、シグナル配列は、約１０～１００アミノ酸長、約１５～１００アミノ酸長、約２０～１００アミノ酸長、約２５～１００アミノ酸長、約３０～１００アミノ酸長、約３５～１００アミノ酸長、約４０～１００アミノ酸長、約４５～１００アミノ酸長、約５０～１００アミノ酸長、約５５～１００アミノ酸長、約６０～１００アミノ酸長、約６５～１００アミノ酸長、約７０～１００アミノ酸長、約７５～１００アミノ酸長、約８０～１００アミノ酸長、約８５～１００アミノ酸長、約９０～１００アミノ酸長、約９５～１００アミノ酸長、約１０～９５アミノ酸長、約１０～９０アミノ酸長、約１０～８５アミノ酸長、約１０～８０アミノ酸長、約１０～７５アミノ酸長、約１０～７０アミノ酸長、約１０～６５アミノ酸長、約１０～６０アミノ酸長、約１０～５５アミノ酸長、約１０～５０アミノ酸長、約１０～４５アミノ酸長、約１０～４０アミノ酸長、約１０～３５アミノ酸長、約１０～３０アミノ酸長、約１０～２５アミノ酸長、約１０～２０アミノ酸長、約１０～１５アミノ酸長、約２０～３０アミノ酸長、約３０～４０アミノ酸長、約４０～５０アミノ酸長、約５０～６０アミノ酸長、約６０～７０アミノ酸長、約７０～８０アミノ酸長、約８０～９０アミノ酸長、約９０～１００アミノ酸長、約２０～９０アミノ酸長、約３０～８０アミノ酸長、約４０～７０アミノ酸長、約５０～６０アミノ酸長、またはそれらの間の任意の範囲であり得る。いくつかの実施形態では、シグナル配列は、約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、または１００アミノ酸長である。
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるシグナル配列のうちのいずれかは、シグナル配列の機能が損なわれないままである限り、そのＮ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加のアミノ酸（例えば、１、２、３、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上のアミノ酸）を含み得る。例えば、アミノ酸配列ＭＫＣＬＬＹＬＡＦＬＦＬＧＶＮＣ（配列番号３５）を有するシグナル配列は、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方を分泌経路に指向する能力を依然として保持しながら、Ｎ末端またはＣ末端に１つ以上の追加のアミノ酸を含むことができる。
いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方が、多鎖キメラポリペプチドを細胞外空間に指向するシグナル配列を含む。かかる実施形態は、単離および／または精製が比較的容易な多鎖キメラポリペプチドを生成するのに有用である。
ペプチドタグ
いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドは、（例えば、第１のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に）ペプチドタグを含む第１のキメラポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドは、（例えば、第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に）ペプチドタグを含む第２のキメラポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチドおよび多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチドの両方がペプチドタグを含む。いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方が、２つ以上のペプチドタグを含む。
多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方に含まれ得る例示的なペプチドタグには、ＡｖｉＴａｇ（ＧＬＮＤＩＦＥＡＱＫＩＥＷＨＥ、配列番号３９）、カルモジュリンタグ（ＫＲＲＷＫＫＮＦＩＡＶＳＡＡＮＲＦＫＫＩＳＳＳＧＡＬ、配列番号４０）、ポリグルタミン酸タグ（ＥＥＥＥＥＥ、配列番号４１）、Ｅタグ（ＧＡＰＶＰＹＰＤＰＬＥＰＲ、配列番号４２）、ＦＬＡＧタグ（ＤＹＫＤＤＤＤＫ、配列番号４３）、ＨＡタグ、血球凝集素由来のペプチド（ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ、配列番号４４）、ｈｉｓタグ（ＨＨＨＨＨ（配列番号４５）、ＨＨＨＨＨＨ（配列番号４６）、ＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号４７）、ＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号４８）、ＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号４９）、またはＨＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号５０））、ｍｙｃタグ（ＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ、配列番号５１）、ＮＥタグ（ＴＫＥＮＰＲＳＮＱＥＥＳＹＤＤＮＥＳ、配列番号５２）、Ｓタグ（ＫＥＴＡＡＡＫＦＥＲＱＨＭＤＳ、配列番号５３）、ＳＢＰタグ（ＭＤＥＫＴＴＧＷＲＧＧＨＶＶＥＧＬＡＧＥＬＥＱＬＲＡＲＬＥＨＨＰＱＧＱＲＥＰ、配列番号５４）、Ｓｏｆｔａｇ １（ＳＬＡＥＬＬＮＡＧＬＧＧＳ、配列番号５５）、Ｓｏｆｔａｇ ３（ＴＱＤＰＳＲＶＧ、配列番号５６）、Ｓｐｏｔタグ（ＰＤＲＶＲＡＶＳＨＷＳＳ、配列番号５７）、Ｓｔｒｅｐタグ（ＷＳＨＰＱＦＥＫ、配列番号５８）、ＴＣタグ（ＣＣＰＧＣＣ、配列番号５９）、Ｔｙタグ（ＥＶＨＴＮＱＤＰＬＤ、配列番号６０）、Ｖ５タグ（ＧＫＰＩＰＮＰＬＬＧＬＤＳＴ、配列番号６１）、ＶＳＶタグ（ＹＴＤＩＥＭＮＲＬＧＫ、配列番号６２）、およびＸｐｒｅｓｓタグ（ＤＬＹＤＤＤＤＫ、配列番号６３）が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、組織因子タンパク質は、ペプチドタグである。
多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方に含まれ得るペプチドタグは、多鎖キメラポリペプチドに関連する様々な用途のうちのいずれかに使用され得る。例えば、ペプチドタグは、多鎖キメラポリペプチドの精製に使用され得る。１つの非限定的な例として、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド（例えば、組換え発現された第１のキメラポリペプチド）、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド（例えば、組換え発現された第２のキメラポリペプチド）、またはそれらの両方が、ｍｙｃタグを含み得、ｍｙｃタグ付き第１キメラポリペプチド、ｍｙｃタグ付き第２キメラポリペプチド、またはそれらの両方を含む多鎖キメラポリペプチドは、ｍｙｃタグ（複数可）を認識する抗体を使用して精製され得る。ｍｙｃタグを認識する抗体の１つの非限定的な例は、非営利Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｓｔｕｄｉｅｓ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ Ｂａｎｋから入手可能な９Ｅ１０である。別の非限定的な例として、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド（例えば、組換え発現された第１のキメラポリペプチド）、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド（例えば、組換え発現された第２のキメラポリペプチド）、またはそれらの両方が、ヒスチジンタグを含み得、ヒスチジンタグ付き第１キメラポリペプチド、ヒスチジンタグ付き第２キメラポリペプチド、またはそれらの両方を含む多鎖キメラポリペプチドは、ニッケルまたはコバルトキレートを使用して精製され得る。当業者であれば、多鎖キメラポリペプチドの精製における使用に好適なそれらのタグに結合する他のタグおよび薬剤を認識しているであろう。いくつかの実施形態では、ペプチドタグは、精製後に、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチドおよび／または第２のキメラポリペプチドから除去される。いくつかの実施形態では、ペプチドタグは、精製後に、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチドおよび／または第２のキメラポリペプチドから除去されない。
多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方に含まれ得るペプチドタグは、例えば、多鎖キメラポリペプチドの免疫沈降、多鎖キメラポリペプチドの画像化（例えば、ウエスタンブロッティング、ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリー、および／または免疫細胞化学による）、および／または多鎖キメラポリペプチドの可溶化に使用され得る。
いくつかの実施形態では、多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方が、約１０～１００アミノ酸長のペプチドタグを含む。例えば、ペプチドタグは、約１０～１００アミノ酸長、約１５～１００アミノ酸長、約２０～１００アミノ酸長、約２５～１００アミノ酸長、約３０～１００アミノ酸長、約３５～１００アミノ酸長、約４０～１００アミノ酸長、約４５～１００アミノ酸長、約５０～１００アミノ酸長、約５５～１００アミノ酸長、約６０～１００アミノ酸長、約６５～１００アミノ酸長、約７０～１００アミノ酸長、約７５～１００アミノ酸長、約８０～１００アミノ酸長、約８５～１００アミノ酸長、約９０～１００アミノ酸長、約９５～１００アミノ酸長、約１０～９５アミノ酸長、約１０～９０アミノ酸長、約１０～８５アミノ酸長、約１０～８０アミノ酸長、約１０～７５アミノ酸長、約１０～７０アミノ酸長、約１０～６５アミノ酸長、約１０～６０アミノ酸長、約１０～５５アミノ酸長、約１０～５０アミノ酸長、約１０～４５アミノ酸長、約１０～４０アミノ酸長、約１０～３５アミノ酸長、約１０～３０アミノ酸長、約１０～２５アミノ酸長、約１０～２０アミノ酸長、約１０～１５アミノ酸長、約２０～３０アミノ酸長、約３０～４０アミノ酸長、約４０～５０アミノ酸長、約５０～６０アミノ酸長、約６０～７０アミノ酸長、約７０～８０アミノ酸長、約８０～９０アミノ酸長、約９０～１００アミノ酸長、約２０～９０アミノ酸長、約３０～８０アミノ酸長、約４０～７０アミノ酸長、約５０～６０アミノ酸長、またはそれらの間の任意の範囲であり得る。いくつかの実施形態では、ペプチドタグは、約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、または１００アミノ酸長である。
多鎖キメラポリペプチドの第１のキメラポリペプチド、多鎖キメラポリペプチドの第２のキメラポリペプチド、またはそれらの両方に含まれるペプチドタグは、任意の好適な長さのものであり得る。例えば、ペプチドタグは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、またはそれ以上のアミノ酸長であり得る。多鎖キメラポリペプチドが２つ以上のペプチドタグを含む実施形態では、２つ以上のペプチドタグは、同じ長さまたは異なる長さのものであり得る。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるペプチドタグのうちのいずれかは、ペプチドタグの機能が損なわれないままである限り、Ｎ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加のアミノ酸（例えば、１、２、３、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上のアミノ酸）を含み得る。例えば、アミノ酸配列ＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ（配列番号６４）を有するｍｙｃタグは、抗体（例えば、９Ｅ１０）によって結合される能力を依然として保持しながら、（例えば、ペプチドタグのＮ末端および／またはＣ末端）に１つ以上の追加のアミノ酸を含み得る。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＡ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＩＬ－１８受容体またはＩＬ－１２受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、アゴニスト抗原結合ドメインである。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々、アゴニスト抗原結合ドメインである。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、可溶性ＩＬ－１５または可溶性ＩＬ－１８である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、可溶性ＩＬ－１５または可溶性ＩＬ－１８である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの両方が、ＩＬ－１８受容体またはＩＬ－１２受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じエピトープに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じアミノ酸配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＩＬ－１２受容体に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－１８受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＩＬ－１８受容体に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－１２受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－１８（例えば、可溶性ヒトＩＬ－１８）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１８は、
ＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤ（配列番号１６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１８は、
ＴＡＣＴＴＣＧＧＣＡＡＡＣＴＧＧＡＡＴＣＣＡＡＧＣＴＧＡＧＣＧＴＧＡＴＣＣＧＧＡＡＴＴＴＡＡＡＣＧＡＣＣＡＡＧＴＴＣＴＧＴＴＴＡＴＣＧＡＴＣＡＡＧＧＴＡＡＣＣＧＧＣＣＴＣＴＧＴＴＣＧＡＧＧＡＣＡＴＧＡＣＣＧＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＴＧＣＣＣＣＣＣＧＧＡＣＣＡＴＣＴＴＣＡＴＴＡＴＣＴＣＣＡＴＧＴＡＣＡＡＧＧＡＣＡＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＧＣＴＧＴＧＡＣＡＡＴＴＡＧＣＧＴＧＡＡＧＴＧＴＧＡＧＡＡＡＡＴＣＡＧＣＡＣＴＴＴＡＴＣＴＴＧＴＧＡＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＡＴＣＴＣＣＴＴＴＡＡＧＧＡＡＡＴＧＡＡＣＣＣＣＣＣＣＧＡＴＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＣＴＴＣＣＡＧＣＧＧＴＣＣＧＴＧＣＣＣＧＧＴＣＡＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＡＴＧＣＡＧＴＴＣＧＡＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＧＧＣＴＡＣＴＴＴＴＴＡＧＣＴＴＧＴＧＡＡＡＡＧＧＡＧＡＧＧＧＡＴＴＴＡＴＴＣＡＡＧＣＴＧＡＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＴＣＧＴＴＣＣＡＴＣＡＴＧＴＴＣＡＣＣＧＴＣＣＡＡＡＡＣＧＡＧＧＡＴ（配列番号６５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－１２（例えば、可溶性ヒトＩＬ－１２）を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１５は、可溶性ヒトＩＬ－１２β（ｐ４０）配列および可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）配列を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＩＬ－１５ヒトＩＬ－１５は、可溶性ＩＬ－１２β（ｐ４０）配列と可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）配列との間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、リンカー配列は、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１２β（ｐ４０）配列は、
ＩＷＥＬＫＫＤＶＹＶＶＥＬＤＷＹＰＤＡＰＧＥＭＶＶＬＴＣＤＴＰＥＥＤＧＩＴＷＴＬＤＱＳＳＥＶＬＧＳＧＫＴＬＴＩＱＶＫＥＦＧＤＡＧＱＹＴＣＨＫＧＧＥＶＬＳＨＳＬＬＬＬＨＫＫＥＤＧＩＷＳＴＤＩＬＫＤＱＫＥＰＫＮＫＴＦＬＲＣＥＡＫＮＹＳＧＲＦＴＣＷＷＬＴＴＩＳＴＤＬＴＦＳＶＫＳＳＲＧＳＳＤＰＱＧＶＴＣＧＡＡＴＬＳＡＥＲＶＲＧＤＮＫＥＹＥＹＳＶＥＣＱＥＤＳＡＣＰＡＡＥＥＳＬＰＩＥＶＭＶＤＡＶＨＫＬＫＹＥＮＹＴＳＳＦＦＩＲＤＩＩＫＰＤＰＰＫＮＬＱＬＫＰＬＫＮＳＲＱＶＥＶＳＷＥＹＰＤＴＷＳＴＰＨＳＹＦＳＬＴＦＣＶＱＶＱＧＫＳＫＲＥＫＫＤＲＶＦＴＤＫＴＳＡＴＶＩＣＲＫＮＡＳＩＳＶＲＡＱＤＲＹＹＳＳＳＷＳＥＷＡＳＶＰＣＳ（配列番号６６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１２β（ｐ４０）は、
ＡＴＴＴＧＧＧＡＡＣＴＧＡＡＧＡＡＧＧＡＣＧＴＣＴＡＣＧＴＧＧＴＣＧＡＡＣＴＧＧＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＧＡＴＧＣＴＣＣＣＧＧＣＧＡＡＡＴＧＧＴＧＧＴＧＣＴＣＡＣＴＴＧＴＧＡＣＡＣＣＣＣＣＧＡＡＧＡＡＧＡＣＧＧＣＡＴＣＡＣＴＴＧＧＡＣＣＣＴＣＧＡＴＣＡＧＡＧＣＡＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＴＣＣＧＧＡＡＡＧＡＣＣＣＴＣＡＣＡＡＴＣＣＡＡＧＴＴＡＡＧＧＡＧＴＴＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＧＧＣＣＡＡＴＡＣＡＣＡＴＧＣＣＡＣＡＡＧＧＧＡＧＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＣＡＧＣＣＡＴＴＣＣＴＴＡＴＴＡＴＴＡＴＴＡＣＡＣＡＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＣＧＧＡＡＴＣＴＧＧＴＣＣＡＣＣＧＡＣＡＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＴＣＡＧＡＡＧＧＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＴＡＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＡＡＧＧＴＧＴＧＡＧＧＣＣＡＡＡＡＡＣＴＡＣＡＧＣＧＧＴＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＴＴＧＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＡＣＣＡＴＴＴＣＣＡＣＣＧＡＴＴＴＡＡＣＣＴＴＣＴＣＣＧＴＧＡＡＡＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＡＡＧＣＴＣＣＧＡＣＣＣＴＣＡＡＧＧＴＧＴＧＡＣＡＴＧＴＧＧＡＧＣＣＧＣＴＡＣＣＣＴＣＡＧＣＧＣＴＧＡＧＡＧＧＧＴＴＣＧＴＧＧＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＧＡＡＴＡＣＧＡＧＴＡＣＡＧＣＧＴＧＧＡＧＴＧＣＣＡＡＧＡＡＧＡＴＡＧＣＧＣＴＴＧＴＣＣＣＧＣＴＧＣＣＧＡＡＧＡＡＴＣＴＴＴＡＣＣＣＡＴＴＧＡＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＧＡＣＧＣＣＧＴＧＣＡＣＡＡＡＣＴＣＡＡＧＴＡＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＡＣＣＴＣＣＴＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＣＣＧＧＧＡＣＡＴＣＡＴＴＡＡＧＣＣＣＧＡＴＣＣＴＣＣＴＡＡＧＡＡＴＴＴＡＣＡＧＣＴＧＡＡＧＣＣＴＣＴＣＡＡＡＡＡＴＡＧＣＣＧＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＴＣＴＣＴＴＧＧＧＡＡＴＡＴＣＣＣＧＡＣＡＣＴＴＧＧＡＧＣＡＣＡＣＣＣＣＡＣＡＧＣＴＡＣＴＴＣＴＣＴＴＴＡＡＣＣＴＴＴＴＧＴＧＴＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＴＡＡＡＡＧＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＡＧＡＡＡＧＡＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＣＣＧＡＣＡＡＡＡＣＣＡＧＣＧＣＣＡＣＣＧＴＣＡＴＣＴＧＴＣＧＧＡＡＧＡＡＣＧＣＣＴＣＣＡＴＣＡＧＣＧＴＧＡＧＧＧＣＴＣＡＡＧＡＴＣＧＴＴＡＴＴＡＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＧＧＴＣＣＧＡＧＴＧＧＧＣＣＡＧＣＧＴＧＣＣＴＴＧＴＴＣＣ（配列番号６７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）は、
ＲＮＬＰＶＡＴＰＤＰＧＭＦＰＣＬＨＨＳＱＮＬＬＲＡＶＳＮＭＬＱＫＡＲＱＴＬＥＦＹＰＣＴＳＥＥＩＤＨＥＤＩＴＫＤＫＴＳＴＶＥＡＣＬＰＬＥＬＴＫＮＥＳＣＬＮＳＲＥＴＳＦＩＴＮＧＳＣＬＡＳＲＫＴＳＦＭＭＡＬＣＬＳＳＩＹＥＤＬＫＭＹＱＶＥＦＫＴＭＮＡＫＬＬＭＤＰＫＲＱＩＦＬＤＱＮＭＬＡＶＩＤＥＬＭＱＡＬＮＦＮＳＥＴＶＰＱＫＳＳＬＥＥＰＤＦＹＫＴＫＩＫＬＣＩＬＬＨＡＦＲＩＲＡＶＴＩＤＲＶＭＳＹＬＮＡＳ（配列番号６８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）は、
ＣＧＴＡＡＣＣＴＣＣＣＣＧＴＧＧＣＴＡＣＣＣＣＣＧＡＴＣＣＣＧＧＡＡＴＧＴＴＣＣＣＴＴＧＴＴＴＡＣＡＣＣＡＣＡＧＣＣＡＧＡＡＴＴＴＡＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＴＧＡＧＣＡＡＣＡＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＣＴＡＧＧＣＡＧＡＣＴＴＴＡＧＡＡＴＴＴＴＡＣＣＣＴＴＧＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＧＡＧＡＴＣＧＡＣＣＡＴＧＡＡＧＡＴＡＴＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣＡＴＣＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＧＣＴＴＧＴＴＴＡＣＣＴＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＣＡＡＡＧＡＡＣＧＡＧＴＣＴＴＧＴＣＴＣＡＡＣＴＣＴＣＧＴＧＡＡＡＣＣＡＧＣＴＴＣＡＴＣＡＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＴＧＴＴＴＡＧＣＴＴＣＣＣＧＧＡＡＧＡＣＣＴＣＣＴＴＴＡＴＧＡＴＧＧＣＴＴＴＡＴＧＣＣＴＣＡＧＣＴＣＣＡＴＣＴＡＣＧＡＧＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＴＧＴＡＣＣＡＡＧＴＧＧＡＧＴＴＣＡＡＧＡＣＣＡＴＧＡＡＣＧＣＣＡＡＧＣＴＧＣＴＣＡＴＧＧＡＣＣＣＴＡＡＡＣＧＧＣＡＧＡＴＣＴＴＴＴＴＡＧＡＣＣＡＧＡＡＣＡＴＧＣＴＧＧＣＴＧＴＧＡＴＴＧＡＴＧＡＧＣＴＧＡＴＧＣＡＡＧＣＴＴＴＡＡＡＣＴＴＣＡＡＣＴＣＣＧＡＧＡＣＣＧＴＣＣＣＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＣＣＣＴＣＧＡＧＧＡＧＣＣＣＧＡＴＴＴＴＴＡＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＡＴＣＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＴＴＴＴＡＣＴＣＣＡＣＧＣＣＴＴＴＡＧＧＡＴＣＣＧＧＧＣＣＧＴＧＡＣＣＡＴＴＧＡＣＣＧＧＧＴＣＡＴＧＡＧＣＴＡＴＴＴＡＡＡＣＧＣＣＡＧＣ（配列番号６９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号７０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＴＡＣＴＴＣＧＧＣＡＡＡＣＴＧＧＡＡＴＣＣＡＡＧＣＴＧＡＧＣＧＴＧＡＴＣＣＧＧＡＡＴＴＴＡＡＡＣＧＡＣＣＡＡＧＴＴＣＴＧＴＴＴＡＴＣＧＡＴＣＡＡＧＧＴＡＡＣＣＧＧＣＣＴＣＴＧＴＴＣＧＡＧＧＡＣＡＴＧＡＣＣＧＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＴＧＣＣＣＣＣＣＧＧＡＣＣＡＴＣＴＴＣＡＴＴＡＴＣＴＣＣＡＴＧＴＡＣＡＡＧＧＡＣＡＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＧＣＴＧＴＧＡＣＡＡＴＴＡＧＣＧＴＧＡＡＧＴＧＴＧＡＧＡＡＡＡＴＣＡＧＣＡＣＴＴＴＡＴＣＴＴＧＴＧＡＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＡＴＣＴＣＣＴＴＴＡＡＧＧＡＡＡＴＧＡＡＣＣＣＣＣＣＣＧＡＴＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＣＴＴＣＣＡＧＣＧＧＴＣＣＧＴＧＣＣＣＧＧＴＣＡＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＡＴＧＣＡＧＴＴＣＧＡＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＧＧＣＴＡＣＴＴＴＴＴＡＧＣＴＴＧＴＧＡＡＡＡＧＧＡＧＡＧＧＧＡＴＴＴＡＴＴＣＡＡＧＣＴＧＡＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＴＣＧＴＴＣＣＡＴＣＡＴＧＴＴＣＡＣＣＧＴＣＣＡＡＡＡＣＧＡＧＧＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号７１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号７２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＣＡＣＡＴＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＡＧＣＴＡＣＴＴＣＧＧＣＡＡＡＣＴＧＧＡＡＴＣＣＡＡＧＣＴＧＡＧＣＧＴＧＡＴＣＣＧＧＡＡＴＴＴＡＡＡＣＧＡＣＣＡＡＧＴＴＣＴＧＴＴＴＡＴＣＧＡＴＣＡＡＧＧＴＡＡＣＣＧＧＣＣＴＣＴＧＴＴＣＧＡＧＧＡＣＡＴＧＡＣＣＧＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＴＧＣＣＣＣＣＣＧＧＡＣＣＡＴＣＴＴＣＡＴＴＡＴＣＴＣＣＡＴＧＴＡＣＡＡＧＧＡＣＡＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＧＣＴＧＴＧＡＣＡＡＴＴＡＧＣＧＴＧＡＡＧＴＧＴＧＡＧＡＡＡＡＴＣＡＧＣＡＣＴＴＴＡＴＣＴＴＧＴＧＡＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＡＴＣＴＣＣＴＴＴＡＡＧＧＡＡＡＴＧＡＡＣＣＣＣＣＣＣＧＡＴＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＣＴＴＣＣＡＧＣＧＧＴＣＣＧＴＧＣＣＣＧＧＴＣＡＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＡＴＧＣＡＧＴＴＣＧＡＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＧＧＣＴＡＣＴＴＴＴＴＡＧＣＴＴＧＴＧＡＡＡＡＧＧＡＧＡＧＧＧＡＴＴＴＡＴＴＣＡＡＧＣＴＧＡＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＴＣＧＴＴＣＣＡＴＣＡＴＧＴＴＣＡＣＣＧＴＣＣＡＡＡＡＣＧＡＧＧＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号７３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＩＷＥＬＫＫＤＶＹＶＶＥＬＤＷＹＰＤＡＰＧＥＭＶＶＬＴＣＤＴＰＥＥＤＧＩＴＷＴＬＤＱＳＳＥＶＬＧＳＧＫＴＬＴＩＱＶＫＥＦＧＤＡＧＱＹＴＣＨＫＧＧＥＶＬＳＨＳＬＬＬＬＨＫＫＥＤＧＩＷＳＴＤＩＬＫＤＱＫＥＰＫＮＫＴＦＬＲＣＥＡＫＮＹＳＧＲＦＴＣＷＷＬＴＴＩＳＴＤＬＴＦＳＶＫＳＳＲＧＳＳＤＰＱＧＶＴＣＧＡＡＴＬＳＡＥＲＶＲＧＤＮＫＥＹＥＹＳＶＥＣＱＥＤＳＡＣＰＡＡＥＥＳＬＰＩＥＶＭＶＤＡＶＨＫＬＫＹＥＮＹＴＳＳＦＦＩＲＤＩＩＫＰＤＰＰＫＮＬＱＬＫＰＬＫＮＳＲＱＶＥＶＳＷＥＹＰＤＴＷＳＴＰＨＳＹＦＳＬＴＦＣＶＱＶＱＧＫＳＫＲＥＫＫＤＲＶＦＴＤＫＴＳＡＴＶＩＣＲＫＮＡＳＩＳＶＲＡＱＤＲＹＹＳＳＳＷＳＥＷＡＳＶＰＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＮＬＰＶＡＴＰＤＰＧＭＦＰＣＬＨＨＳＱＮＬＬＲＡＶＳＮＭＬＱＫＡＲＱＴＬＥＦＹＰＣＴＳＥＥＩＤＨＥＤＩＴＫＤＫＴＳＴＶＥＡＣＬＰＬＥＬＴＫＮＥＳＣＬＮＳＲＥＴＳＦＩＴＮＧＳＣＬＡＳＲＫＴＳＦＭＭＡＬＣＬＳＳＩＹＥＤＬＫＭＹＱＶＥＦＫＴＭＮＡＫＬＬＭＤＰＫＲＱＩＦＬＤＱＮＭＬＡＶＩＤＥＬＭＱＡＬＮＦＮＳＥＴＶＰＱＫＳＳＬＥＥＰＤＦＹＫＴＫＩＫＬＣＩＬＬＨＡＦＲＩＲＡＶＴＩＤＲＶＭＳＹＬＮＡＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号７４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＴＴＧＧＧＡＡＣＴＧＡＡＧＡＡＧＧＡＣＧＴＣＴＡＣＧＴＧＧＴＣＧＡＡＣＴＧＧＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＧＡＴＧＣＴＣＣＣＧＧＣＧＡＡＡＴＧＧＴＧＧＴＧＣＴＣＡＣＴＴＧＴＧＡＣＡＣＣＣＣＣＧＡＡＧＡＡＧＡＣＧＧＣＡＴＣＡＣＴＴＧＧＡＣＣＣＴＣＧＡＴＣＡＧＡＧＣＡＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＴＣＣＧＧＡＡＡＧＡＣＣＣＴＣＡＣＡＡＴＣＣＡＡＧＴＴＡＡＧＧＡＧＴＴＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＧＧＣＣＡＡＴＡＣＡＣＡＴＧＣＣＡＣＡＡＧＧＧＡＧＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＣＡＧＣＣＡＴＴＣＣＴＴＡＴＴＡＴＴＡＴＴＡＣＡＣＡＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＣＧＧＡＡＴＣＴＧＧＴＣＣＡＣＣＧＡＣＡＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＴＣＡＧＡＡＧＧＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＴＡＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＡＡＧＧＴＧＴＧＡＧＧＣＣＡＡＡＡＡＣＴＡＣＡＧＣＧＧＴＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＴＴＧＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＡＣＣＡＴＴＴＣＣＡＣＣＧＡＴＴＴＡＡＣＣＴＴＣＴＣＣＧＴＧＡＡＡＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＡＡＧＣＴＣＣＧＡＣＣＣＴＣＡＡＧＧＴＧＴＧＡＣＡＴＧＴＧＧＡＧＣＣＧＣＴＡＣＣＣＴＣＡＧＣＧＣＴＧＡＧＡＧＧＧＴＴＣＧＴＧＧＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＧＡＡＴＡＣＧＡＧＴＡＣＡＧＣＧＴＧＧＡＧＴＧＣＣＡＡＧＡＡＧＡＴＡＧＣＧＣＴＴＧＴＣＣＣＧＣＴＧＣＣＧＡＡＧＡＡＴＣＴＴＴＡＣＣＣＡＴＴＧＡＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＧＡＣＧＣＣＧＴＧＣＡＣＡＡＡＣＴＣＡＡＧＴＡＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＡＣＣＴＣＣＴＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＣＣＧＧＧＡＣＡＴＣＡＴＴＡＡＧＣＣＣＧＡＴＣＣＴＣＣＴＡＡＧＡＡＴＴＴＡＣＡＧＣＴＧＡＡＧＣＣＴＣＴＣＡＡＡＡＡＴＡＧＣＣＧＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＴＣＴＣＴＴＧＧＧＡＡＴＡＴＣＣＣＧＡＣＡＣＴＴＧＧＡＧＣＡＣＡＣＣＣＣＡＣＡＧＣＴＡＣＴＴＣＴＣＴＴＴＡＡＣＣＴＴＴＴＧＴＧＴＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＴＡＡＡＡＧＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＡＧＡＡＡＧＡＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＣＣＧＡＣＡＡＡＡＣＣＡＧＣＧＣＣＡＣＣＧＴＣＡＴＣＴＧＴＣＧＧＡＡＧＡＡＣＧＣＣＴＣＣＡＴＣＡＧＣＧＴＧＡＧＧＧＣＴＣＡＡＧＡＴＣＧＴＴＡＴＴＡＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＧＧＴＣＣＧＡＧＴＧＧＧＣＣＡＧＣＧＴＧＣＣＴＴＧＴＴＣＣＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＣＧＴＡＡＣＣＴＣＣＣＣＧＴＧＧＣＴＡＣＣＣＣＣＧＡＴＣＣＣＧＧＡＡＴＧＴＴＣＣＣＴＴＧＴＴＴＡＣＡＣＣＡＣＡＧＣＣＡＧＡＡＴＴＴＡＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＴＧＡＧＣＡＡＣＡＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＣＴＡＧＧＣＡＧＡＣＴＴＴＡＧＡＡＴＴＴＴＡＣＣＣＴＴＧＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＧＡＧＡＴＣＧＡＣＣＡＴＧＡＡＧＡＴＡＴＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣＡＴＣＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＧＣＴＴＧＴＴＴＡＣＣＴＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＣＡＡＡＧＡＡＣＧＡＧＴＣＴＴＧＴＣＴＣＡＡＣＴＣＴＣＧＴＧＡＡＡＣＣＡＧＣＴＴＣＡＴＣＡＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＴＧＴＴＴＡＧＣＴＴＣＣＣＧＧＡＡＧＡＣＣＴＣＣＴＴＴＡＴＧＡＴＧＧＣＴＴＴＡＴＧＣＣＴＣＡＧＣＴＣＣＡＴＣＴＡＣＧＡＧＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＴＧＴＡＣＣＡＡＧＴＧＧＡＧＴＴＣＡＡＧＡＣＣＡＴＧＡＡＣＧＣＣＡＡＧＣＴＧＣＴＣＡＴＧＧＡＣＣＣＴＡＡＡＣＧＧＣＡＧＡＴＣＴＴＴＴＴＡＧＡＣＣＡＧＡＡＣＡＴＧＣＴＧＧＣＴＧＴＧＡＴＴＧＡＴＧＡＧＣＴＧＡＴＧＣＡＡＧＣＴＴＴＡＡＡＣＴＴＣＡＡＣＴＣＣＧＡＧＡＣＣＧＴＣＣＣＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＣＣＣＴＣＧＡＧＧＡＧＣＣＣＧＡＴＴＴＴＴＡＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＡＴＣＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＴＴＴＴＡＣＴＣＣＡＣＧＣＣＴＴＴＡＧＧＡＴＣＣＧＧＧＣＣＧＴＧＡＣＣＡＴＴＧＡＣＣＧＧＧＴＣＡＴＧＡＧＣＴＡＴＴＴＡＡＡＣＧＣＣＡＧＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ（配列番号７５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＷＥＬＫＫＤＶＹＶＶＥＬＤＷＹＰＤＡＰＧＥＭＶＶＬＴＣＤＴＰＥＥＤＧＩＴＷＴＬＤＱＳＳＥＶＬＧＳＧＫＴＬＴＩＱＶＫＥＦＧＤＡＧＱＹＴＣＨＫＧＧＥＶＬＳＨＳＬＬＬＬＨＫＫＥＤＧＩＷＳＴＤＩＬＫＤＱＫＥＰＫＮＫＴＦＬＲＣＥＡＫＮＹＳＧＲＦＴＣＷＷＬＴＴＩＳＴＤＬＴＦＳＶＫＳＳＲＧＳＳＤＰＱＧＶＴＣＧＡＡＴＬＳＡＥＲＶＲＧＤＮＫＥＹＥＹＳＶＥＣＱＥＤＳＡＣＰＡＡＥＥＳＬＰＩＥＶＭＶＤＡＶＨＫＬＫＹＥＮＹＴＳＳＦＦＩＲＤＩＩＫＰＤＰＰＫＮＬＱＬＫＰＬＫＮＳＲＱＶＥＶＳＷＥＹＰＤＴＷＳＴＰＨＳＹＦＳＬＴＦＣＶＱＶＱＧＫＳＫＲＥＫＫＤＲＶＦＴＤＫＴＳＡＴＶＩＣＲＫＮＡＳＩＳＶＲＡＱＤＲＹＹＳＳＳＷＳＥＷＡＳＶＰＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＮＬＰＶＡＴＰＤＰＧＭＦＰＣＬＨＨＳＱＮＬＬＲＡＶＳＮＭＬＱＫＡＲＱＴＬＥＦＹＰＣＴＳＥＥＩＤＨＥＤＩＴＫＤＫＴＳＴＶＥＡＣＬＰＬＥＬＴＫＮＥＳＣＬＮＳＲＥＴＳＦＩＴＮＧＳＣＬＡＳＲＫＴＳＦＭＭＡＬＣＬＳＳＩＹＥＤＬＫＭＹＱＶＥＦＫＴＭＮＡＫＬＬＭＤＰＫＲＱＩＦＬＤＱＮＭＬＡＶＩＤＥＬＭＱＡＬＮＦＮＳＥＴＶＰＱＫＳＳＬＥＥＰＤＦＹＫＴＫＩＫＬＣＩＬＬＨＡＦＲＩＲＡＶＴＩＤＲＶＭＳＹＬＮＡＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号７６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＡＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＴＡＴＴＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＴＡＧＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＴＴＧＧＧＡＡＣＴＧＡＡＧＡＡＧＧＡＣＧＴＣＴＡＣＧＴＧＧＴＣＧＡＡＣＴＧＧＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＧＡＴＧＣＴＣＣＣＧＧＣＧＡＡＡＴＧＧＴＧＧＴＧＣＴＣＡＣＴＴＧＴＧＡＣＡＣＣＣＣＣＧＡＡＧＡＡＧＡＣＧＧＣＡＴＣＡＣＴＴＧＧＡＣＣＣＴＣＧＡＴＣＡＧＡＧＣＡＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＴＣＣＧＧＡＡＡＧＡＣＣＣＴＣＡＣＡＡＴＣＣＡＡＧＴＴＡＡＧＧＡＧＴＴＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＧＧＣＣＡＡＴＡＣＡＣＡＴＧＣＣＡＣＡＡＧＧＧＡＧＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＣＡＧＣＣＡＴＴＣＣＴＴＡＴＴＡＴＴＡＴＴＡＣＡＣＡＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＣＧＧＡＡＴＣＴＧＧＴＣＣＡＣＣＧＡＣＡＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＴＣＡＧＡＡＧＧＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＴＡＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＡＡＧＧＴＧＴＧＡＧＧＣＣＡＡＡＡＡＣＴＡＣＡＧＣＧＧＴＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＴＴＧＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＡＣＣＡＴＴＴＣＣＡＣＣＧＡＴＴＴＡＡＣＣＴＴＣＴＣＣＧＴＧＡＡＡＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＡＡＧＣＴＣＣＧＡＣＣＣＴＣＡＡＧＧＴＧＴＧＡＣＡＴＧＴＧＧＡＧＣＣＧＣＴＡＣＣＣＴＣＡＧＣＧＣＴＧＡＧＡＧＧＧＴＴＣＧＴＧＧＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＧＡＡＴＡＣＧＡＧＴＡＣＡＧＣＧＴＧＧＡＧＴＧＣＣＡＡＧＡＡＧＡＴＡＧＣＧＣＴＴＧＴＣＣＣＧＣＴＧＣＣＧＡＡＧＡＡＴＣＴＴＴＡＣＣＣＡＴＴＧＡＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＧＡＣＧＣＣＧＴＧＣＡＣＡＡＡＣＴＣＡＡＧＴＡＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＡＣＣＴＣＣＴＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＣＣＧＧＧＡＣＡＴＣＡＴＴＡＡＧＣＣＣＧＡＴＣＣＴＣＣＴＡＡＧＡＡＴＴＴＡＣＡＧＣＴＧＡＡＧＣＣＴＣＴＣＡＡＡＡＡＴＡＧＣＣＧＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＴＣＴＣＴＴＧＧＧＡＡＴＡＴＣＣＣＧＡＣＡＣＴＴＧＧＡＧＣＡＣＡＣＣＣＣＡＣＡＧＣＴＡＣＴＴＣＴＣＴＴＴＡＡＣＣＴＴＴＴＧＴＧＴＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＴＡＡＡＡＧＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＡＧＡＡＡＧＡＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＣＣＧＡＣＡＡＡＡＣＣＡＧＣＧＣＣＡＣＣＧＴＣＡＴＣＴＧＴＣＧＧＡＡＧＡＡＣＧＣＣＴＣＣＡＴＣＡＧＣＧＴＧＡＧＧＧＣＴＣＡＡＧＡＴＣＧＴＴＡＴＴＡＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＧＧＴＣＣＧＡＧＴＧＧＧＣＣＡＧＣＧＴＧＣＣＴＴＧＴＴＣＣＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＣＧＴＡＡＣＣＴＣＣＣＣＧＴＧＧＣＴＡＣＣＣＣＣＧＡＴＣＣＣＧＧＡＡＴＧＴＴＣＣＣＴＴＧＴＴＴＡＣＡＣＣＡＣＡＧＣＣＡＧＡＡＴＴＴＡＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＴＧＡＧＣＡＡＣＡＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＣＴＡＧＧＣＡＧＡＣＴＴＴＡＧＡＡＴＴＴＴＡＣＣＣＴＴＧＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＧＡＧＡＴＣＧＡＣＣＡＴＧＡＡＧＡＴＡＴＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣＡＴＣＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＧＣＴＴＧＴＴＴＡＣＣＴＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＣＡＡＡＧＡＡＣＧＡＧＴＣＴＴＧＴＣＴＣＡＡＣＴＣＴＣＧＴＧＡＡＡＣＣＡＧＣＴＴＣＡＴＣＡＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＴＧＴＴＴＡＧＣＴＴＣＣＣＧＧＡＡＧＡＣＣＴＣＣＴＴＴＡＴＧＡＴＧＧＣＴＴＴＡＴＧＣＣＴＣＡＧＣＴＣＣＡＴＣＴＡＣＧＡＧＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＴＧＴＡＣＣＡＡＧＴＧＧＡＧＴＴＣＡＡＧＡＣＣＡＴＧＡＡＣＧＣＣＡＡＧＣＴＧＣＴＣＡＴＧＧＡＣＣＣＴＡＡＡＣＧＧＣＡＧＡＴＣＴＴＴＴＴＡＧＡＣＣＡＧＡＡＣＡＴＧＣＴＧＧＣＴＧＴＧＡＴＴＧＡＴＧＡＧＣＴＧＡＴＧＣＡＡＧＣＴＴＴＡＡＡＣＴＴＣＡＡＣＴＣＣＧＡＧＡＣＣＧＴＣＣＣＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＣＣＣＴＣＧＡＧＧＡＧＣＣＣＧＡＴＴＴＴＴＡＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＡＴＣＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＴＴＴＴＡＣＴＣＣＡＣＧＣＣＴＴＴＡＧＧＡＴＣＣＧＧＧＣＣＧＴＧＡＣＣＡＴＴＧＡＣＣＧＧＧＴＣＡＴＧＡＧＣＴＡＴＴＴＡＡＡＣＧＣＣＡＧＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ（配列番号７７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＢ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＩＬ－２１受容体またはＴＧＦ－βに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、可溶性ＩＬ－２１（例えば、可溶性ヒトＩＬ－２１ポリペプチド）または可溶性ＴＧＦ－β受容体（例えば、可溶性ＴＧＦＲβＲＩＩ受容体）である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、可溶性ＩＬ－２１または可溶性ＴＧＦ－β受容体（例えば、可溶性ＴＧＦＲβＲＩＩ受容体）である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの両方が、ＩＬ－２１受容体またはＴＧＦ－βに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じエピトープに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じアミノ酸配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＩＬ－２１受容体に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＴＧＦ－βに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＴＧＦ－βに特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－２１（例えば、可溶性ヒトＩＬ－２１）を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号７８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号７９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、可溶性ＴＧＦ－β受容体（例えば、可溶性ＴＧＦＲβＲＩＩ受容体（例えば、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体））を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列および第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列と第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列との間に配置されたリンカーを含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、リンカーは、配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＣＧＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴ（配列番号８２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＡＣＡＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＣＧＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＡＣＡＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ヒトＴＧＦβＲＩＩ受容体は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号８６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＡＴＡＣＣＧＴＧＧＣＣＧＣＴＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＡＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＧＡＣＡＡＴＴＣＴＧＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＧＣＣＣＧＴＣＡＡＴＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＴＣＣＡＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＡＧＡＣＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＡＧＴＧＣＴＴＣＴＡＣＡＣＡＡＣＡＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＴＧＡＴＴＴＡＡＣＣＧＡＣＧＡＡＡＴＣＧＴＣＡＡＧＧＡＣＧＴＣＡＡＧＣＡＡＡＣＣＴＡＴＣＴＧＧＣＴＣＧＧＧＴＣＴＴＴＴＣＣＴＡＣＣＣＣＧＣＴＧＧＣＡＡＴＧＴＣＧＡＧＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＣＴＣＴＡＣＧＡＧＡＡＴＴＣＣＣＣＣＧＡＡＴＴＣＡＣＣＣＣＴＴＡＴＴＴＡＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＣＣＡＧＣＣＴＡＣＣＡＴＣＣＡＧＡＧＣＴＴＣＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＣＣＧＴＣＧＡＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＴＡＡＣＡＣＡＴＴＴＴＴＡＴＣＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＣＣＴＣＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＧＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＡＡＡＧＡＣＣＧＣＴＡＡＧＡＣＣＡＡＣＡＣＣＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＴＧＡＣＧＴＧＧＡＣＡＡＡＧＧＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＴＧＣＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＣＧＴＧＡＴＣＣＣＴＴＣＴＣＧＴＡＣＣＧＴＣＡＡＣＣＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＡＧＡＴＴＣＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号８７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号８８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＡＴＡＣＣＧＴＧＧＣＣＧＣＴＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＡＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＧＡＣＡＡＴＴＣＴＧＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＧＣＣＣＧＴＣＡＡＴＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＴＣＣＡＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＡＧＡＣＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＡＧＴＧＣＴＴＣＴＡＣＡＣＡＡＣＡＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＴＧＡＴＴＴＡＡＣＣＧＡＣＧＡＡＡＴＣＧＴＣＡＡＧＧＡＣＧＴＣＡＡＧＣＡＡＡＣＣＴＡＴＣＴＧＧＣＴＣＧＧＧＴＣＴＴＴＴＣＣＴＡＣＣＣＣＧＣＴＧＧＣＡＡＴＧＴＣＧＡＧＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＣＴＣＴＡＣＧＡＧＡＡＴＴＣＣＣＣＣＧＡＡＴＴＣＡＣＣＣＣＴＴＡＴＴＴＡＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＣＣＡＧＣＣＴＡＣＣＡＴＣＣＡＧＡＧＣＴＴＣＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＣＣＧＴＣＧＡＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＴＡＡＣＡＣＡＴＴＴＴＴＡＴＣＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＣＣＴＣＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＧＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＡＡＡＧＡＣＣＧＣＴＡＡＧＡＣＣＡＡＣＡＣＣＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＴＧＡＣＧＴＧＧＡＣＡＡＡＧＧＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＴＧＣＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＣＧＴＧＡＴＣＣＣＴＴＣＴＣＧＴＡＣＣＧＴＣＡＡＣＣＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＡＧＡＴＴＣＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号８９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号９０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＣＧＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＡＣＡＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＴＣＡＣＧＴＧＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＡＴＧＴＣＣＧＴＧＧＡＡＣＡＣＧＣＡＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＣＡＡＧＡＧＣＴＡＣＡＧＣＴＴＧＴＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＧＣＧＧＴＡＣＡＴＴＴＧＴＡＡＣＴＣＴＧＧＴＴＴＣＡＡＧＣＧＴＡＡＡＧＣＣＧＧＣＡＣＧＴＣＣＡＧＣＣＴＧＡＣＧＧＡＧＴＧＣＧＴＧＴＴＧＡＡＣＡＡＧＧＣＣＡＣＧＡＡＴＧＴＣＧＣＣＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＣＣＣＣＡＧＴＣＴＣＡＡＡＴＧＴＡＴＴＡＧＡ（配列番号９１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号９２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＣＧＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＡＣＡＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＴＣＡＣＧＴＧＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＡＴＧＴＣＣＧＴＧＧＡＡＣＡＣＧＣＡＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＣＡＡＧＡＧＣＴＡＣＡＧＣＴＴＧＴＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＧＣＧＧＴＡＣＡＴＴＴＧＴＡＡＣＴＣＴＧＧＴＴＴＣＡＡＧＣＧＴＡＡＡＧＣＣＧＧＣＡＣＧＴＣＣＡＧＣＣＴＧＡＣＧＧＡＧＴＧＣＧＴＧＴＴＧＡＡＣＡＡＧＧＣＣＡＣＧＡＡＴＧＴＣＧＣＣＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＣＣＣＣＡＧＴＣＴＣＡＡＡＴＧＴＡＴＴＡＧＡ（配列番号９３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＣ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＩＬ－７受容体またはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、可溶性ＩＬ－２１（例えば、可溶性ヒトＩＬ－２１ポリペプチド）または可溶性ＩＬ－７（例えば、可溶性ヒトＩＬ－７ポリペプチド）である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、可溶性ＩＬ－２１または可溶性ＩＬ－７である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの両方が、ＩＬ－２１受容体またはＩＬ－７受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じエピトープに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じアミノ酸配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＩＬ－２１受容体に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－７受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＩＬ－７受容体に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－２１（例えば、可溶性ヒトＩＬ－２１）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号７８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＣＡＡＧＧＴＣＡＡＧＡＴＣＧＣＣＡＣＡＴＧＡＴＴＡＧＡＡＴＧＣＧＴＣＡＡＣＴＴＡＴＡＧＡＴＡＴＴＧＴＴＧＡＴＣＡＧＣＴＧＡＡＡＡＡＴＴＡＴＧＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＧＴＣＣＣＴＧＡＡＴＴＴＣＴＧＣＣＡＧＣＴＣＣＡＧＡＡＧＡＴＧＴＡＧＡＧＡＣＡＡＡＣＴＧＴＧＡＧＴＧＧＴＣＡＧＣＴＴＴＴＴＣＣＴＧＴＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＡＣＴＡＡＡＧＴＣＡＧＣＡＡＡＴＡＣＡＧＧＡＡＡＣＡＡＴＧＡＡＡＧＧＡＴＡＡＴＣＡＡＴＧＴＡＴＣＡＡＴＴＡＡＡＡＡＧＣＴＧＡＡＧＡＧＧＡＡＡＣＣＡＣＣＴＴＣＣＡＣＡＡＡＴＧＣＡＧＧＧＡＧＡＡＧＡＣＡＧＡＡＡＣＡＣＡＧＡＣＴＡＡＣＡＴＧＣＣＣＴＴＣＡＴＧＴＧＡＴＴＣＴＴＡＴＧＡＧＡＡＡＡＡＡＣＣＡＣＣＣＡＡＡＧＡＡＴＴＣＣＴＡＧＡＡＡＧＡＴＴＣＡＡＡＴＣＡＣＴＴＣＴＣＣＡＡＡＡＧＡＴＧＡＴＴＣＡＴＣＡＧＣＡＴＣＴＧＴＣＣＴＣＴＡＧＡＡＣＡＣＡＣＧＧＡＡＧＴＧＡＡＧＡＴＴＣＣ（配列番号９４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号７９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７配列は、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ（配列番号１１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７は、
ＧＡＴＴＧＴＧＡＴＡＴＴＧＡＡＧＧＴＡＡＡＧＡＴＧＧＣＡＡＡＣＡＡＴＡＴＧＡＧＡＧＴＧＴＴＣＴＡＡＴＧＧＴＣＡＧＣＡＴＣＧＡＴＣＡＡＴＴＡＴＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＡＧＡＡＡＴＴＧＧＴＡＧＣＡＡＴＴＧＣＣＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＡＴＴＴＡＡＣＴＴＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＣＡＴＡＴＣＴＧＴＧＡＴＧＣＴＡＡＴＡＡＧＧＡＡＧＧＴＡＴＧＴＴＴＴＴＡＴＴＣＣＧＴＧＣＴＧＣＴＣＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＣＡＡＴＴＴＣＴＴＡＡＡＡＴＧＡＡＴＡＧＣＡＣＴＧＧＴＧＡＴＴＴＴＧＡＴＣＴＣＣＡＣＴＴＡＴＴＡＡＡＡＧＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＡＡＣＡＡＴＡＣＴＧＴＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＴＧＧＣＣＡＧＧＴＴＡＡＡＧＧＡＡＧＡＡＡＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＣＣＡＡＣＣＡＡＣＡＡＡＧＡＧＴＴＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＴＡＡＡＴＣＴＴＴＡＡＡＧＧＡＡＣＡＧＡＡＡＡＡＡＣＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＴＧＴＴＴＣＣＴＡＡＡＧＡＧＡＣＴＡＴＴＡＣＡＡＧＡＧＡＴＡＡＡＡＡＣＴＴＧＴＴＧＧＡＡＴＡＡＡＡＴＴＴＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＴＡＡＡＧＡＡＣＡＣ（配列番号９５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号９６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＣＡＡＧＧＴＣＡＡＧＡＴＣＧＣＣＡＣＡＴＧＡＴＴＡＧＡＡＴＧＣＧＴＣＡＡＣＴＴＡＴＡＧＡＴＡＴＴＧＴＴＧＡＴＣＡＧＣＴＧＡＡＡＡＡＴＴＡＴＧＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＧＴＣＣＣＴＧＡＡＴＴＴＣＴＧＣＣＡＧＣＴＣＣＡＧＡＡＧＡＴＧＴＡＧＡＧＡＣＡＡＡＣＴＧＴＧＡＧＴＧＧＴＣＡＧＣＴＴＴＴＴＣＣＴＧＴＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＡＣＴＡＡＡＧＴＣＡＧＣＡＡＡＴＡＣＡＧＧＡＡＡＣＡＡＴＧＡＡＡＧＧＡＴＡＡＴＣＡＡＴＧＴＡＴＣＡＡＴＴＡＡＡＡＡＧＣＴＧＡＡＧＡＧＧＡＡＡＣＣＡＣＣＴＴＣＣＡＣＡＡＡＴＧＣＡＧＧＧＡＧＡＡＧＡＣＡＧＡＡＡＣＡＣＡＧＡＣＴＡＡＣＡＴＧＣＣＣＴＴＣＡＴＧＴＧＡＴＴＣＴＴＡＴＧＡＧＡＡＡＡＡＡＣＣＡＣＣＣＡＡＡＧＡＡＴＴＣＣＴＡＧＡＡＡＧＡＴＴＣＡＡＡＴＣＡＣＴＴＣＴＣＣＡＡＡＡＧＡＴＧＡＴＴＣＡＴＣＡＧＣＡＴＣＴＧＴＣＣＴＣＴＡＧＡＡＣＡＣＡＣＧＧＡＡＧＴＧＡＡＧＡＴＴＣＣＴＣＡＧＧＣＡＣＴＡＣＡＡＡＴＡＣＴＧＴＧＧＣＡＧＣＡＴＡＴＡＡＴＴＴＡＡＣＴＴＧＧＡＡＡＴＣＡＡＣＴＡＡＴＴＴＣＡＡＧＡＣＡＡＴＴＴＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＣＡＡＴＣＡＡＧＴＣＴＡＣＡＣＴＧＴＴＣＡＡＡＴＡＡＧＣＡＣＴＡＡＧＴＣＡＧＧＡＧＡＴＴＧＧＡＡＡＡＧＣＡＡＡＴＧＣＴＴＴＴＡＣＡＣＡＡＣＡＧＡＣＡＣＡＧＡＧＴＧＴＧＡＣＣＴＣＡＣＣＧＡＣＧＡＧＡＴＴＧＴＧＡＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＧＣＡＧＡＣＧＴＡＣＴＴＧＧＣＡＣＧＧＧＴＣＴＴＣＴＣＣＴＡＣＣＣＧＧＣＡＧＧＧＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＣＧＧＴＴＣＴＧＣＴＧＧＧＧＡＧＣＣＴＣＴＧＴＡＴＧＡＧＡＡＣＴＣＣＣＣＡＧＡＧＴＴＣＡＣＡＣＣＴＴＡＣＣＴＧＧＡＧＡＣＡＡＡＣＣＴＣＧＧＡＣＡＧＣＣＡＡＣＡＡＴＴＣＡＧＡＧＴＴＴＴＧＡＡＣＡＧＧＴＧＧＧＡＡＣＡＡＡＡＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＣＧＴＡＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＣＡＧＡＡＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＴＴＴＣＣＴＡＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＴＴＴＴＧＧＣＡＡＧＧＡＣＴＴＡＡＴＴＴＡＴＡＣＡＣＴＴＴＡＴＴＡＴＴＧＧＡＡＡＴＣＴＴＣＡＡＧＴＴＣＡＧＧＡＡＡＧＡＡＡＡＣＡＧＣＣＡＡＡＡＣＡＡＡＣＡＣＴＡＡＴＧＡＧＴＴＴＴＴＧＡＴＴＧＡＴＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＡＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＴＧＴＴＣＡＡＧＣＡＧＴＧＡＴＴＣＣＣＴＣＣＣＧＡＡＣＡＧＴＴＡＡＣＣＧＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＧＡＣＡＧＣＣＣＧＧＴＡＧＡＧＴＧＴＡＴＧＧＧＣＣＡＧＧＡＧＡＡＡＧＧＧＧＡＡＴＴＣＡＧＡＧＡＡＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号９７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＧＶＫＶＬＦＡＬＩＣＩＡＶＡＥＡＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号９８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＧＧＡＧＴＧＡＡＡＧＴＴＣＴＴＴＴＴＧＣＣＣＴＴＡＴＴＴＧＴＡＴＴＧＣＴＧＴＧＧＣＣＧＡＧＧＣＣＣＡＡＧＧＴＣＡＡＧＡＴＣＧＣＣＡＣＡＴＧＡＴＴＡＧＡＡＴＧＣＧＴＣＡＡＣＴＴＡＴＡＧＡＴＡＴＴＧＴＴＧＡＴＣＡＧＣＴＧＡＡＡＡＡＴＴＡＴＧＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＧＴＣＣＣＴＧＡＡＴＴＴＣＴＧＣＣＡＧＣＴＣＣＡＧＡＡＧＡＴＧＴＡＧＡＧＡＣＡＡＡＣＴＧＴＧＡＧＴＧＧＴＣＡＧＣＴＴＴＴＴＣＣＴＧＴＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＡＣＴＡＡＡＧＴＣＡＧＣＡＡＡＴＡＣＡＧＧＡＡＡＣＡＡＴＧＡＡＡＧＧＡＴＡＡＴＣＡＡＴＧＴＡＴＣＡＡＴＴＡＡＡＡＡＧＣＴＧＡＡＧＡＧＧＡＡＡＣＣＡＣＣＴＴＣＣＡＣＡＡＡＴＧＣＡＧＧＧＡＧＡＡＧＡＣＡＧＡＡＡＣＡＣＡＧＡＣＴＡＡＣＡＴＧＣＣＣＴＴＣＡＴＧＴＧＡＴＴＣＴＴＡＴＧＡＧＡＡＡＡＡＡＣＣＡＣＣＣＡＡＡＧＡＡＴＴＣＣＴＡＧＡＡＡＧＡＴＴＣＡＡＡＴＣＡＣＴＴＣＴＣＣＡＡＡＡＧＡＴＧＡＴＴＣＡＴＣＡＧＣＡＴＣＴＧＴＣＣＴＣＴＡＧＡＡＣＡＣＡＣＧＧＡＡＧＴＧＡＡＧＡＴＴＣＣＴＣＡＧＧＣＡＣＴＡＣＡＡＡＴＡＣＴＧＴＧＧＣＡＧＣＡＴＡＴＡＡＴＴＴＡＡＣＴＴＧＧＡＡＡＴＣＡＡＣＴＡＡＴＴＴＣＡＡＧＡＣＡＡＴＴＴＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＣＡＡＴＣＡＡＧＴＣＴＡＣＡＣＴＧＴＴＣＡＡＡＴＡＡＧＣＡＣＴＡＡＧＴＣＡＧＧＡＧＡＴＴＧＧＡＡＡＡＧＣＡＡＡＴＧＣＴＴＴＴＡＣＡＣＡＡＣＡＧＡＣＡＣＡＧＡＧＴＧＴＧＡＣＣＴＣＡＣＣＧＡＣＧＡＧＡＴＴＧＴＧＡＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＧＣＡＧＡＣＧＴＡＣＴＴＧＧＣＡＣＧＧＧＴＣＴＴＣＴＣＣＴＡＣＣＣＧＧＣＡＧＧＧＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＣＧＧＴＴＣＴＧＣＴＧＧＧＧＡＧＣＣＴＣＴＧＴＡＴＧＡＧＡＡＣＴＣＣＣＣＡＧＡＧＴＴＣＡＣＡＣＣＴＴＡＣＣＴＧＧＡＧＡＣＡＡＡＣＣＴＣＧＧＡＣＡＧＣＣＡＡＣＡＡＴＴＣＡＧＡＧＴＴＴＴＧＡＡＣＡＧＧＴＧＧＧＡＡＣＡＡＡＡＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＣＧＴＡＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＣＡＧＡＡＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＴＴＴＣＣＴＡＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＴＴＴＴＧＧＣＡＡＧＧＡＣＴＴＡＡＴＴＴＡＴＡＣＡＣＴＴＴＡＴＴＡＴＴＧＧＡＡＡＴＣＴＴＣＡＡＧＴＴＣＡＧＧＡＡＡＧＡＡＡＡＣＡＧＣＣＡＡＡＡＣＡＡＡＣＡＣＴＡＡＴＧＡＧＴＴＴＴＴＧＡＴＴＧＡＴＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＡＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＴＧＴＴＣＡＡＧＣＡＧＴＧＡＴＴＣＣＣＴＣＣＣＧＡＡＣＡＧＴＴＡＡＣＣＧＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＧＡＣＡＧＣＣＣＧＧＴＡＧＡＧＴＧＴＡＴＧＧＧＣＣＡＧＧＡＧＡＡＡＧＧＧＧＡＡＴＴＣＡＧＡＧＡＡＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号９９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号１００）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＧＡＴＴＧＴＧＡＴＡＴＴＧＡＡＧＧＴＡＡＡＧＡＴＧＧＣＡＡＡＣＡＡＴＡＴＧＡＧＡＧＴＧＴＴＣＴＡＡＴＧＧＴＣＡＧＣＡＴＣＧＡＴＣＡＡＴＴＡＴＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＡＧＡＡＡＴＴＧＧＴＡＧＣＡＡＴＴＧＣＣＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＡＴＴＴＡＡＣＴＴＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＣＡＴＡＴＣＴＧＴＧＡＴＧＣＴＡＡＴＡＡＧＧＡＡＧＧＴＡＴＧＴＴＴＴＴＡＴＴＣＣＧＴＧＣＴＧＣＴＣＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＣＡＡＴＴＴＣＴＴＡＡＡＡＴＧＡＡＴＡＧＣＡＣＴＧＧＴＧＡＴＴＴＴＧＡＴＣＴＣＣＡＣＴＴＡＴＴＡＡＡＡＧＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＡＡＣＡＡＴＡＣＴＧＴＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＴＧＧＣＣＡＧＧＴＴＡＡＡＧＧＡＡＧＡＡＡＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＣＣＡＡＣＣＡＡＣＡＡＡＧＡＧＴＴＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＴＡＡＡＴＣＴＴＴＡＡＡＧＧＡＡＣＡＧＡＡＡＡＡＡＣＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＴＧＴＴＴＣＣＴＡＡＡＧＡＧＡＣＴＡＴＴＡＣＡＡＧＡＧＡＴＡＡＡＡＡＣＴＴＧＴＴＧＧＡＡＴＡＡＡＡＴＴＴＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＴＡＡＡＧＡＡＣＡＣＡＴＣＡＣＧＴＧＣＣＣＴＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＣＣＧＴＧＧＡＡＣＡＣＧＣＡＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＣＡＡＧＡＧＣＴＡＣＡＧＣＴＴＧＴＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＧＣＧＧＴＡＣＡＴＴＴＧＴＡＡＣＴＣＴＧＧＴＴＴＣＡＡＧＣＧＴＡＡＡＧＣＣＧＧＣＡＣＧＴＣＣＡＧＣＣＴＧＡＣＧＧＡＧＴＧＣＧＴＧＴＴＧＡＡＣＡＡＧＧＣＣＡＣＧＡＡＴＧＴＣＧＣＣＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＣＣＣＣＡＧＴＣＴＣＡＡＡＴＧＣＡＴＴＡＧＡ（配列番号１０１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＧＶＫＶＬＦＡＬＩＣＩＡＶＡＥＡＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号１０２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＧＧＡＧＴＧＡＡＡＧＴＴＣＴＴＴＴＴＧＣＣＣＴＴＡＴＴＴＧＴＡＴＴＧＣＴＧＴＧＧＣＣＧＡＧＧＣＣＧＡＴＴＧＴＧＡＴＡＴＴＧＡＡＧＧＴＡＡＡＧＡＴＧＧＣＡＡＡＣＡＡＴＡＴＧＡＧＡＧＴＧＴＴＣＴＡＡＴＧＧＴＣＡＧＣＡＴＣＧＡＴＣＡＡＴＴＡＴＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＡＧＡＡＡＴＴＧＧＴＡＧＣＡＡＴＴＧＣＣＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＡＴＴＴＡＡＣＴＴＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＣＡＴＡＴＣＴＧＴＧＡＴＧＣＴＡＡＴＡＡＧＧＡＡＧＧＴＡＴＧＴＴＴＴＴＡＴＴＣＣＧＴＧＣＴＧＣＴＣＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＣＡＡＴＴＴＣＴＴＡＡＡＡＴＧＡＡＴＡＧＣＡＣＴＧＧＴＧＡＴＴＴＴＧＡＴＣＴＣＣＡＣＴＴＡＴＴＡＡＡＡＧＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＡＡＣＡＡＴＡＣＴＧＴＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＴＧＧＣＣＡＧＧＴＴＡＡＡＧＧＡＡＧＡＡＡＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＣＣＡＡＣＣＡＡＣＡＡＡＧＡＧＴＴＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＴＡＡＡＴＣＴＴＴＡＡＡＧＧＡＡＣＡＧＡＡＡＡＡＡＣＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＴＧＴＴＴＣＣＴＡＡＡＧＡＧＡＣＴＡＴＴＡＣＡＡＧＡＧＡＴＡＡＡＡＡＣＴＴＧＴＴＧＧＡＡＴＡＡＡＡＴＴＴＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＴＡＡＡＧＡＡＣＡＣＡＴＣＡＣＧＴＧＣＣＣＴＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＣＣＧＴＧＧＡＡＣＡＣＧＣＡＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＣＡＡＧＡＧＣＴＡＣＡＧＣＴＴＧＴＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＧＣＧＧＴＡＣＡＴＴＴＧＴＡＡＣＴＣＴＧＧＴＴＴＣＡＡＧＣＧＴＡＡＡＧＣＣＧＧＣＡＣＧＴＣＣＡＧＣＣＴＧＡＣＧＧＡＧＴＧＣＧＴＧＴＴＧＡＡＣＡＡＧＧＣＣＡＣＧＡＡＴＧＴＣＧＣＣＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＣＣＣＣＡＧＴＣＴＣＡＡＡＴＧＣＡＴＴＡＧＡ（配列番号１０３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＤ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＩＬ－７受容体またはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、可溶性ＩＬ－２１（例えば、可溶性ヒトＩＬ－２１ポリペプチド）または可溶性ＩＬ－７（例えば、可溶性ヒトＩＬ－７ポリペプチド）である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、可溶性ＩＬ－２１または可溶性ＩＬ－７である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの両方が、ＩＬ－２１受容体またはＩＬ－７受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じエピトープに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じアミノ酸配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＩＬ－２１受容体に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－７受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＩＬ－７受容体に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号７８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＣＡＡＧＧＴＣＡＡＧＡＴＣＧＣＣＡＣＡＴＧＡＴＴＡＧＡＡＴＧＣＧＴＣＡＡＣＴＴＡＴＡＧＡＴＡＴＴＧＴＴＧＡＴＣＡＧＣＴＧＡＡＡＡＡＴＴＡＴＧＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＧＴＣＣＣＴＧＡＡＴＴＴＣＴＧＣＣＡＧＣＴＣＣＡＧＡＡＧＡＴＧＴＡＧＡＧＡＣＡＡＡＣＴＧＴＧＡＧＴＧＧＴＣＡＧＣＴＴＴＴＴＣＣＴＧＴＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＡＣＴＡＡＡＧＴＣＡＧＣＡＡＡＴＡＣＡＧＧＡＡＡＣＡＡＴＧＡＡＡＧＧＡＴＡＡＴＣＡＡＴＧＴＡＴＣＡＡＴＴＡＡＡＡＡＧＣＴＧＡＡＧＡＧＧＡＡＡＣＣＡＣＣＴＴＣＣＡＣＡＡＡＴＧＣＡＧＧＧＡＧＡＡＧＡＣＡＧＡＡＡＣＡＣＡＧＡＣＴＡＡＣＡＴＧＣＣＣＴＴＣＡＴＧＴＧＡＴＴＣＴＴＡＴＧＡＧＡＡＡＡＡＡＣＣＡＣＣＣＡＡＡＧＡＡＴＴＣＣＴＡＧＡＡＡＧＡＴＴＣＡＡＡＴＣＡＣＴＴＣＴＣＣＡＡＡＡＧＡＴＧＡＴＴＣＡＴＣＡＧＣＡＴＣＴＧＴＣＣＴＣＴＡＧＡＡＣＡＣＡＣＧＧＡＡＧＴＧＡＡＧＡＴＴＣＣ（配列番号９４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号７９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７配列は、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ（配列番号１１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７は、
ＧＡＴＴＧＴＧＡＴＡＴＴＧＡＡＧＧＴＡＡＡＧＡＴＧＧＣＡＡＡＣＡＡＴＡＴＧＡＧＡＧＴＧＴＴＣＴＡＡＴＧＧＴＣＡＧＣＡＴＣＧＡＴＣＡＡＴＴＡＴＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＡＧＡＡＡＴＴＧＧＴＡＧＣＡＡＴＴＧＣＣＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＡＴＴＴＡＡＣＴＴＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＣＡＴＡＴＣＴＧＴＧＡＴＧＣＴＡＡＴＡＡＧＧＡＡＧＧＴＡＴＧＴＴＴＴＴＡＴＴＣＣＧＴＧＣＴＧＣＴＣＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＣＡＡＴＴＴＣＴＴＡＡＡＡＴＧＡＡＴＡＧＣＡＣＴＧＧＴＧＡＴＴＴＴＧＡＴＣＴＣＣＡＣＴＴＡＴＴＡＡＡＡＧＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＡＡＣＡＡＴＡＣＴＧＴＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＴＧＧＣＣＡＧＧＴＴＡＡＡＧＧＡＡＧＡＡＡＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＣＣＡＡＣＣＡＡＣＡＡＡＧＡＧＴＴＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＴＡＡＡＴＣＴＴＴＡＡＡＧＧＡＡＣＡＧＡＡＡＡＡＡＣＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＴＧＴＴＴＣＣＴＡＡＡＧＡＧＡＣＴＡＴＴＡＣＡＡＧＡＧＡＴＡＡＡＡＡＣＴＴＧＴＴＧＧＡＡＴＡＡＡＡＴＴＴＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＴＡＡＡＧＡＡＣＡＣ（配列番号９５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１０４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１０５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１０６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１０７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号１０８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ（配列番号１０９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号１１０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ（配列番号１１１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＥ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＩＬ－１８（例えば、可溶性ヒトＩＬ－１８）受容体、ＩＬ－１２（例えば、可溶性ヒトＩＬ－１２）受容体、またはＣＤ１６（例えば、抗ＣＤ１６ ｓｃＦｖ）に特異的に結合する。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、ＣＤ１６またはＩＬ－１２受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと一対の親和性ドメインの第２のドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の第２の標的結合ドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および追加の抗原結合ドメインのうちの１つ以上は、アゴニスト抗原結合ドメインである。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および追加の抗原結合ドメインは各々、アゴニスト抗原結合ドメインである。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの一方または両方は、可溶性ＩＬ－１５または可溶性ＩＬ－１８である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、可溶性ＩＬ－１５または可溶性ＩＬ－１８である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインの両方が、ＩＬ－１８受容体またはＩＬ－１２受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じエピトープに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じアミノ酸配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＩＬ－１２受容体に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－１８受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＩＬ－１８受容体に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－１２受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＣＤ１６に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－１８受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＩＬ－１８受容体に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＣＤ１６に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上は、同じ抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上は、同じエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上は、同じアミノ酸配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－１８（例えば、可溶性ヒトＩＬ－１８）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１８は、
ＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤ（配列番号１６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１８は、
ＴＡＣＴＴＣＧＧＣＡＡＡＣＴＧＧＡＡＴＣＣＡＡＧＣＴＧＡＧＣＧＴＧＡＴＣＣＧＧＡＡＴＴＴＡＡＡＣＧＡＣＣＡＡＧＴＴＣＴＧＴＴＴＡＴＣＧＡＴＣＡＡＧＧＴＡＡＣＣＧＧＣＣＴＣＴＧＴＴＣＧＡＧＧＡＣＡＴＧＡＣＣＧＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＴＧＣＣＣＣＣＣＧＧＡＣＣＡＴＣＴＴＣＡＴＴＡＴＣＴＣＣＡＴＧＴＡＣＡＡＧＧＡＣＡＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＧＣＴＧＴＧＡＣＡＡＴＴＡＧＣＧＴＧＡＡＧＴＧＴＧＡＧＡＡＡＡＴＣＡＧＣＡＣＴＴＴＡＴＣＴＴＧＴＧＡＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＡＴＣＴＣＣＴＴＴＡＡＧＧＡＡＡＴＧＡＡＣＣＣＣＣＣＣＧＡＴＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＣＴＴＣＣＡＧＣＧＧＴＣＣＧＴＧＣＣＣＧＧＴＣＡＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＡＴＧＣＡＧＴＴＣＧＡＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＧＧＣＴＡＣＴＴＴＴＴＡＧＣＴＴＧＴＧＡＡＡＡＧＧＡＧＡＧＧＧＡＴＴＴＡＴＴＣＡＡＧＣＴＧＡＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＴＣＧＴＴＣＣＡＴＣＡＴＧＴＴＣＡＣＣＧＴＣＣＡＡＡＡＣＧＡＧＧＡＴ（配列番号６５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－１２（例えば、可溶性ヒトＩＬ－１２）を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１５は、可溶性ヒトＩＬ－１２β（ｐ４０）配列および可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）配列を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＩＬ－１５（例えば、可溶性ヒトＩＬ－１５）は、可溶性ＩＬ－１２β（ｐ４０）配列と可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）配列との間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカー配列のうちのいずれか）をさらに含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、リンカー配列は、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１２β（ｐ４０）配列は、
ＩＷＥＬＫＫＤＶＹＶＶＥＬＤＷＹＰＤＡＰＧＥＭＶＶＬＴＣＤＴＰＥＥＤＧＩＴＷＴＬＤＱＳＳＥＶＬＧＳＧＫＴＬＴＩＱＶＫＥＦＧＤＡＧＱＹＴＣＨＫＧＧＥＶＬＳＨＳＬＬＬＬＨＫＫＥＤＧＩＷＳＴＤＩＬＫＤＱＫＥＰＫＮＫＴＦＬＲＣＥＡＫＮＹＳＧＲＦＴＣＷＷＬＴＴＩＳＴＤＬＴＦＳＶＫＳＳＲＧＳＳＤＰＱＧＶＴＣＧＡＡＴＬＳＡＥＲＶＲＧＤＮＫＥＹＥＹＳＶＥＣＱＥＤＳＡＣＰＡＡＥＥＳＬＰＩＥＶＭＶＤＡＶＨＫＬＫＹＥＮＹＴＳＳＦＦＩＲＤＩＩＫＰＤＰＰＫＮＬＱＬＫＰＬＫＮＳＲＱＶＥＶＳＷＥＹＰＤＴＷＳＴＰＨＳＹＦＳＬＴＦＣＶＱＶＱＧＫＳＫＲＥＫＫＤＲＶＦＴＤＫＴＳＡＴＶＩＣＲＫＮＡＳＩＳＶＲＡＱＤＲＹＹＳＳＳＷＳＥＷＡＳＶＰＣＳ（配列番号６６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１２β（ｐ４０）は、
ＡＴＴＴＧＧＧＡＡＣＴＧＡＡＧＡＡＧＧＡＣＧＴＣＴＡＣＧＴＧＧＴＣＧＡＡＣＴＧＧＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＧＡＴＧＣＴＣＣＣＧＧＣＧＡＡＡＴＧＧＴＧＧＴＧＣＴＣＡＣＴＴＧＴＧＡＣＡＣＣＣＣＣＧＡＡＧＡＡＧＡＣＧＧＣＡＴＣＡＣＴＴＧＧＡＣＣＣＴＣＧＡＴＣＡＧＡＧＣＡＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＴＣＣＧＧＡＡＡＧＡＣＣＣＴＣＡＣＡＡＴＣＣＡＡＧＴＴＡＡＧＧＡＧＴＴＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＧＧＣＣＡＡＴＡＣＡＣＡＴＧＣＣＡＣＡＡＧＧＧＡＧＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＣＡＧＣＣＡＴＴＣＣＴＴＡＴＴＡＴＴＡＴＴＡＣＡＣＡＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＣＧＧＡＡＴＣＴＧＧＴＣＣＡＣＣＧＡＣＡＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＴＣＡＧＡＡＧＧＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＴＡＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＡＡＧＧＴＧＴＧＡＧＧＣＣＡＡＡＡＡＣＴＡＣＡＧＣＧＧＴＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＴＴＧＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＡＣＣＡＴＴＴＣＣＡＣＣＧＡＴＴＴＡＡＣＣＴＴＣＴＣＣＧＴＧＡＡＡＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＡＡＧＣＴＣＣＧＡＣＣＣＴＣＡＡＧＧＴＧＴＧＡＣＡＴＧＴＧＧＡＧＣＣＧＣＴＡＣＣＣＴＣＡＧＣＧＣＴＧＡＧＡＧＧＧＴＴＣＧＴＧＧＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＧＡＡＴＡＣＧＡＧＴＡＣＡＧＣＧＴＧＧＡＧＴＧＣＣＡＡＧＡＡＧＡＴＡＧＣＧＣＴＴＧＴＣＣＣＧＣＴＧＣＣＧＡＡＧＡＡＴＣＴＴＴＡＣＣＣＡＴＴＧＡＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＧＡＣＧＣＣＧＴＧＣＡＣＡＡＡＣＴＣＡＡＧＴＡＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＡＣＣＴＣＣＴＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＣＣＧＧＧＡＣＡＴＣＡＴＴＡＡＧＣＣＣＧＡＴＣＣＴＣＣＴＡＡＧＡＡＴＴＴＡＣＡＧＣＴＧＡＡＧＣＣＴＣＴＣＡＡＡＡＡＴＡＧＣＣＧＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＴＣＴＣＴＴＧＧＧＡＡＴＡＴＣＣＣＧＡＣＡＣＴＴＧＧＡＧＣＡＣＡＣＣＣＣＡＣＡＧＣＴＡＣＴＴＣＴＣＴＴＴＡＡＣＣＴＴＴＴＧＴＧＴＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＴＡＡＡＡＧＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＡＧＡＡＡＧＡＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＣＣＧＡＣＡＡＡＡＣＣＡＧＣＧＣＣＡＣＣＧＴＣＡＴＣＴＧＴＣＧＧＡＡＧＡＡＣＧＣＣＴＣＣＡＴＣＡＧＣＧＴＧＡＧＧＧＣＴＣＡＡＧＡＴＣＧＴＴＡＴＴＡＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＧＧＴＣＣＧＡＧＴＧＧＧＣＣＡＧＣＧＴＧＣＣＴＴＧＴＴＣＣ（配列番号６７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）は、
ＲＮＬＰＶＡＴＰＤＰＧＭＦＰＣＬＨＨＳＱＮＬＬＲＡＶＳＮＭＬＱＫＡＲＱＴＬＥＦＹＰＣＴＳＥＥＩＤＨＥＤＩＴＫＤＫＴＳＴＶＥＡＣＬＰＬＥＬＴＫＮＥＳＣＬＮＳＲＥＴＳＦＩＴＮＧＳＣＬＡＳＲＫＴＳＦＭＭＡＬＣＬＳＳＩＹＥＤＬＫＭＹＱＶＥＦＫＴＭＮＡＫＬＬＭＤＰＫＲＱＩＦＬＤＱＮＭＬＡＶＩＤＥＬＭＱＡＬＮＦＮＳＥＴＶＰＱＫＳＳＬＥＥＰＤＦＹＫＴＫＩＫＬＣＩＬＬＨＡＦＲＩＲＡＶＴＩＤＲＶＭＳＹＬＮＡＳ（配列番号６８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）は、
ＣＧＴＡＡＣＣＴＣＣＣＣＧＴＧＧＣＴＡＣＣＣＣＣＧＡＴＣＣＣＧＧＡＡＴＧＴＴＣＣＣＴＴＧＴＴＴＡＣＡＣＣＡＣＡＧＣＣＡＧＡＡＴＴＴＡＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＴＧＡＧＣＡＡＣＡＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＣＴＡＧＧＣＡＧＡＣＴＴＴＡＧＡＡＴＴＴＴＡＣＣＣＴＴＧＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＧＡＧＡＴＣＧＡＣＣＡＴＧＡＡＧＡＴＡＴＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣＡＴＣＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＧＣＴＴＧＴＴＴＡＣＣＴＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＣＡＡＡＧＡＡＣＧＡＧＴＣＴＴＧＴＣＴＣＡＡＣＴＣＴＣＧＴＧＡＡＡＣＣＡＧＣＴＴＣＡＴＣＡＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＴＧＴＴＴＡＧＣＴＴＣＣＣＧＧＡＡＧＡＣＣＴＣＣＴＴＴＡＴＧＡＴＧＧＣＴＴＴＡＴＧＣＣＴＣＡＧＣＴＣＣＡＴＣＴＡＣＧＡＧＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＴＧＴＡＣＣＡＡＧＴＧＧＡＧＴＴＣＡＡＧＡＣＣＡＴＧＡＡＣＧＣＣＡＡＧＣＴＧＣＴＣＡＴＧＧＡＣＣＣＴＡＡＡＣＧＧＣＡＧＡＴＣＴＴＴＴＴＡＧＡＣＣＡＧＡＡＣＡＴＧＣＴＧＧＣＴＧＴＧＡＴＴＧＡＴＧＡＧＣＴＧＡＴＧＣＡＡＧＣＴＴＴＡＡＡＣＴＴＣＡＡＣＴＣＣＧＡＧＡＣＣＧＴＣＣＣＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＣＣＣＴＣＧＡＧＧＡＧＣＣＣＧＡＴＴＴＴＴＡＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＡＴＣＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＴＴＴＴＡＣＴＣＣＡＣＧＣＣＴＴＴＡＧＧＡＴＣＣＧＧＧＣＣＧＴＧＡＣＣＡＴＴＧＡＣＣＧＧＧＴＣＡＴＧＡＧＣＴＡＴＴＴＡＡＡＣＧＣＣＡＧＣ（配列番号６９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖ（例えば、抗ＣＤ１６ ｓｃＦｖ）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨ（配列番号１１２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴ（配列番号１１３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の軽鎖可変ドメイン配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲ（配列番号１１４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む重鎖可変ドメインを含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧ（配列番号１１５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の重鎖可変ドメイン配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１１６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＴＡＣＴＴＣＧＧＣＡＡＡＣＴＧＧＡＡＴＣＣＡＡＧＣＴＧＡＧＣＧＴＧＡＴＣＣＧＧＡＡＴＴＴＡＡＡＣＧＡＣＣＡＡＧＴＴＣＴＧＴＴＴＡＴＣＧＡＴＣＡＡＧＧＴＡＡＣＣＧＧＣＣＴＣＴＧＴＴＣＧＡＧＧＡＣＡＴＧＡＣＣＧＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＴＧＣＣＣＣＣＣＧＧＡＣＣＡＴＣＴＴＣＡＴＴＡＴＣＴＣＣＡＴＧＴＡＣＡＡＧＧＡＣＡＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＧＣＴＧＴＧＡＣＡＡＴＴＡＧＣＧＴＧＡＡＧＴＧＴＧＡＧＡＡＡＡＴＣＡＧＣＡＣＴＴＴＡＴＣＴＴＧＴＧＡＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＡＴＣＴＣＣＴＴＴＡＡＧＧＡＡＡＴＧＡＡＣＣＣＣＣＣＣＧＡＴＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＣＴＴＣＣＡＧＣＧＧＴＣＣＧＴＧＣＣＣＧＧＴＣＡＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＡＴＧＣＡＧＴＴＣＧＡＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＧＧＣＴＡＣＴＴＴＴＴＡＧＣＴＴＧＴＧＡＡＡＡＧＧＡＧＡＧＧＧＡＴＴＴＡＴＴＣＡＡＧＣＴＧＡＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＴＣＧＴＴＣＣＡＴＣＡＴＧＴＴＣＡＣＣＧＴＣＣＡＡＡＡＣＧＡＧＧＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１１７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１１８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＣＡＣＡＴＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＡＧＣＴＡＣＴＴＣＧＧＣＡＡＡＣＴＧＧＡＡＴＣＣＡＡＧＣＴＧＡＧＣＧＴＧＡＴＣＣＧＧＡＡＴＴＴＡＡＡＣＧＡＣＣＡＡＧＴＴＣＴＧＴＴＴＡＴＣＧＡＴＣＡＡＧＧＴＡＡＣＣＧＧＣＣＴＣＴＧＴＴＣＧＡＧＧＡＣＡＴＧＡＣＣＧＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＴＧＣＣＣＣＣＣＧＧＡＣＣＡＴＣＴＴＣＡＴＴＡＴＣＴＣＣＡＴＧＴＡＣＡＡＧＧＡＣＡＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＧＣＴＧＴＧＡＣＡＡＴＴＡＧＣＧＴＧＡＡＧＴＧＴＧＡＧＡＡＡＡＴＣＡＧＣＡＣＴＴＴＡＴＣＴＴＧＴＧＡＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＡＴＣＴＣＣＴＴＴＡＡＧＧＡＡＡＴＧＡＡＣＣＣＣＣＣＣＧＡＴＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＣＴＴＣＣＡＧＣＧＧＴＣＣＧＴＧＣＣＣＧＧＴＣＡＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＡＴＧＣＡＧＴＴＣＧＡＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＧＧＣＴＡＣＴＴＴＴＴＡＧＣＴＴＧＴＧＡＡＡＡＧＧＡＧＡＧＧＧＡＴＴＴＡＴＴＣＡＡＧＣＴＧＡＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＴＣＧＴＴＣＣＡＴＣＡＴＧＴＴＣＡＣＣＧＴＣＣＡＡＡＡＣＧＡＧＧＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１１９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＩＷＥＬＫＫＤＶＹＶＶＥＬＤＷＹＰＤＡＰＧＥＭＶＶＬＴＣＤＴＰＥＥＤＧＩＴＷＴＬＤＱＳＳＥＶＬＧＳＧＫＴＬＴＩＱＶＫＥＦＧＤＡＧＱＹＴＣＨＫＧＧＥＶＬＳＨＳＬＬＬＬＨＫＫＥＤＧＩＷＳＴＤＩＬＫＤＱＫＥＰＫＮＫＴＦＬＲＣＥＡＫＮＹＳＧＲＦＴＣＷＷＬＴＴＩＳＴＤＬＴＦＳＶＫＳＳＲＧＳＳＤＰＱＧＶＴＣＧＡＡＴＬＳＡＥＲＶＲＧＤＮＫＥＹＥＹＳＶＥＣＱＥＤＳＡＣＰＡＡＥＥＳＬＰＩＥＶＭＶＤＡＶＨＫＬＫＹＥＮＹＴＳＳＦＦＩＲＤＩＩＫＰＤＰＰＫＮＬＱＬＫＰＬＫＮＳＲＱＶＥＶＳＷＥＹＰＤＴＷＳＴＰＨＳＹＦＳＬＴＦＣＶＱＶＱＧＫＳＫＲＥＫＫＤＲＶＦＴＤＫＴＳＡＴＶＩＣＲＫＮＡＳＩＳＶＲＡＱＤＲＹＹＳＳＳＷＳＥＷＡＳＶＰＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＮＬＰＶＡＴＰＤＰＧＭＦＰＣＬＨＨＳＱＮＬＬＲＡＶＳＮＭＬＱＫＡＲＱＴＬＥＦＹＰＣＴＳＥＥＩＤＨＥＤＩＴＫＤＫＴＳＴＶＥＡＣＬＰＬＥＬＴＫＮＥＳＣＬＮＳＲＥＴＳＦＩＴＮＧＳＣＬＡＳＲＫＴＳＦＭＭＡＬＣＬＳＳＩＹＥＤＬＫＭＹＱＶＥＦＫＴＭＮＡＫＬＬＭＤＰＫＲＱＩＦＬＤＱＮＭＬＡＶＩＤＥＬＭＱＡＬＮＦＮＳＥＴＶＰＱＫＳＳＬＥＥＰＤＦＹＫＴＫＩＫＬＣＩＬＬＨＡＦＲＩＲＡＶＴＩＤＲＶＭＳＹＬＮＡＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲ（配列番号１２０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＴＴＧＧＧＡＡＣＴＧＡＡＧＡＡＧＧＡＣＧＴＣＴＡＣＧＴＧＧＴＣＧＡＡＣＴＧＧＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＧＡＴＧＣＴＣＣＣＧＧＣＧＡＡＡＴＧＧＴＧＧＴＧＣＴＣＡＣＴＴＧＴＧＡＣＡＣＣＣＣＣＧＡＡＧＡＡＧＡＣＧＧＣＡＴＣＡＣＴＴＧＧＡＣＣＣＴＣＧＡＴＣＡＧＡＧＣＡＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＴＣＣＧＧＡＡＡＧＡＣＣＣＴＣＡＣＡＡＴＣＣＡＡＧＴＴＡＡＧＧＡＧＴＴＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＧＧＣＣＡＡＴＡＣＡＣＡＴＧＣＣＡＣＡＡＧＧＧＡＧＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＣＡＧＣＣＡＴＴＣＣＴＴＡＴＴＡＴＴＡＴＴＡＣＡＣＡＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＣＧＧＡＡＴＣＴＧＧＴＣＣＡＣＣＧＡＣＡＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＴＣＡＧＡＡＧＧＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＴＡＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＡＡＧＧＴＧＴＧＡＧＧＣＣＡＡＡＡＡＣＴＡＣＡＧＣＧＧＴＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＴＴＧＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＡＣＣＡＴＴＴＣＣＡＣＣＧＡＴＴＴＡＡＣＣＴＴＣＴＣＣＧＴＧＡＡＡＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＡＡＧＣＴＣＣＧＡＣＣＣＴＣＡＡＧＧＴＧＴＧＡＣＡＴＧＴＧＧＡＧＣＣＧＣＴＡＣＣＣＴＣＡＧＣＧＣＴＧＡＧＡＧＧＧＴＴＣＧＴＧＧＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＧＡＡＴＡＣＧＡＧＴＡＣＡＧＣＧＴＧＧＡＧＴＧＣＣＡＡＧＡＡＧＡＴＡＧＣＧＣＴＴＧＴＣＣＣＧＣＴＧＣＣＧＡＡＧＡＡＴＣＴＴＴＡＣＣＣＡＴＴＧＡＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＧＡＣＧＣＣＧＴＧＣＡＣＡＡＡＣＴＣＡＡＧＴＡＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＡＣＣＴＣＣＴＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＣＣＧＧＧＡＣＡＴＣＡＴＴＡＡＧＣＣＣＧＡＴＣＣＴＣＣＴＡＡＧＡＡＴＴＴＡＣＡＧＣＴＧＡＡＧＣＣＴＣＴＣＡＡＡＡＡＴＡＧＣＣＧＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＴＣＴＣＴＴＧＧＧＡＡＴＡＴＣＣＣＧＡＣＡＣＴＴＧＧＡＧＣＡＣＡＣＣＣＣＡＣＡＧＣＴＡＣＴＴＣＴＣＴＴＴＡＡＣＣＴＴＴＴＧＴＧＴＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＴＡＡＡＡＧＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＡＧＡＡＡＧＡＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＣＣＧＡＣＡＡＡＡＣＣＡＧＣＧＣＣＡＣＣＧＴＣＡＴＣＴＧＴＣＧＧＡＡＧＡＡＣＧＣＣＴＣＣＡＴＣＡＧＣＧＴＧＡＧＧＧＣＴＣＡＡＧＡＴＣＧＴＴＡＴＴＡＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＧＧＴＣＣＧＡＧＴＧＧＧＣＣＡＧＣＧＴＧＣＣＴＴＧＴＴＣＣＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＣＧＴＡＡＣＣＴＣＣＣＣＧＴＧＧＣＴＡＣＣＣＣＣＧＡＴＣＣＣＧＧＡＡＴＧＴＴＣＣＣＴＴＧＴＴＴＡＣＡＣＣＡＣＡＧＣＣＡＧＡＡＴＴＴＡＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＴＧＡＧＣＡＡＣＡＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＣＴＡＧＧＣＡＧＡＣＴＴＴＡＧＡＡＴＴＴＴＡＣＣＣＴＴＧＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＧＡＧＡＴＣＧＡＣＣＡＴＧＡＡＧＡＴＡＴＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣＡＴＣＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＧＣＴＴＧＴＴＴＡＣＣＴＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＣＡＡＡＧＡＡＣＧＡＧＴＣＴＴＧＴＣＴＣＡＡＣＴＣＴＣＧＴＧＡＡＡＣＣＡＧＣＴＴＣＡＴＣＡＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＴＧＴＴＴＡＧＣＴＴＣＣＣＧＧＡＡＧＡＣＣＴＣＣＴＴＴＡＴＧＡＴＧＧＣＴＴＴＡＴＧＣＣＴＣＡＧＣＴＣＣＡＴＣＴＡＣＧＡＧＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＴＧＴＡＣＣＡＡＧＴＧＧＡＧＴＴＣＡＡＧＡＣＣＡＴＧＡＡＣＧＣＣＡＡＧＣＴＧＣＴＣＡＴＧＧＡＣＣＣＴＡＡＡＣＧＧＣＡＧＡＴＣＴＴＴＴＴＡＧＡＣＣＡＧＡＡＣＡＴＧＣＴＧＧＣＴＧＴＧＡＴＴＧＡＴＧＡＧＣＴＧＡＴＧＣＡＡＧＣＴＴＴＡＡＡＣＴＴＣＡＡＣＴＣＣＧＡＧＡＣＣＧＴＣＣＣＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＣＣＣＴＣＧＡＧＧＡＧＣＣＣＧＡＴＴＴＴＴＡＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＡＴＣＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＴＴＴＴＡＣＴＣＣＡＣＧＣＣＴＴＴＡＧＧＡＴＣＣＧＧＧＣＣＧＴＧＡＣＣＡＴＴＧＡＣＣＧＧＧＴＣＡＴＧＡＧＣＴＡＴＴＴＡＡＡＣＧＣＣＡＧＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＡＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧ（配列番号１２１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＷＥＬＫＫＤＶＹＶＶＥＬＤＷＹＰＤＡＰＧＥＭＶＶＬＴＣＤＴＰＥＥＤＧＩＴＷＴＬＤＱＳＳＥＶＬＧＳＧＫＴＬＴＩＱＶＫＥＦＧＤＡＧＱＹＴＣＨＫＧＧＥＶＬＳＨＳＬＬＬＬＨＫＫＥＤＧＩＷＳＴＤＩＬＫＤＱＫＥＰＫＮＫＴＦＬＲＣＥＡＫＮＹＳＧＲＦＴＣＷＷＬＴＴＩＳＴＤＬＴＦＳＶＫＳＳＲＧＳＳＤＰＱＧＶＴＣＧＡＡＴＬＳＡＥＲＶＲＧＤＮＫＥＹＥＹＳＶＥＣＱＥＤＳＡＣＰＡＡＥＥＳＬＰＩＥＶＭＶＤＡＶＨＫＬＫＹＥＮＹＴＳＳＦＦＩＲＤＩＩＫＰＤＰＰＫＮＬＱＬＫＰＬＫＮＳＲＱＶＥＶＳＷＥＹＰＤＴＷＳＴＰＨＳＹＦＳＬＴＦＣＶＱＶＱＧＫＳＫＲＥＫＫＤＲＶＦＴＤＫＴＳＡＴＶＩＣＲＫＮＡＳＩＳＶＲＡＱＤＲＹＹＳＳＳＷＳＥＷＡＳＶＰＣＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＮＬＰＶＡＴＰＤＰＧＭＦＰＣＬＨＨＳＱＮＬＬＲＡＶＳＮＭＬＱＫＡＲＱＴＬＥＦＹＰＣＴＳＥＥＩＤＨＥＤＩＴＫＤＫＴＳＴＶＥＡＣＬＰＬＥＬＴＫＮＥＳＣＬＮＳＲＥＴＳＦＩＴＮＧＳＣＬＡＳＲＫＴＳＦＭＭＡＬＣＬＳＳＩＹＥＤＬＫＭＹＱＶＥＦＫＴＭＮＡＫＬＬＭＤＰＫＲＱＩＦＬＤＱＮＭＬＡＶＩＤＥＬＭＱＡＬＮＦＮＳＥＴＶＰＱＫＳＳＬＥＥＰＤＦＹＫＴＫＩＫＬＣＩＬＬＨＡＦＲＩＲＡＶＴＩＤＲＶＭＳＹＬＮＡＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲ（配列番号１２２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＡＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＴＡＴＴＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＴＡＧＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＴＴＧＧＧＡＡＣＴＧＡＡＧＡＡＧＧＡＣＧＴＣＴＡＣＧＴＧＧＴＣＧＡＡＣＴＧＧＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＧＡＴＧＣＴＣＣＣＧＧＣＧＡＡＡＴＧＧＴＧＧＴＧＣＴＣＡＣＴＴＧＴＧＡＣＡＣＣＣＣＣＧＡＡＧＡＡＧＡＣＧＧＣＡＴＣＡＣＴＴＧＧＡＣＣＣＴＣＧＡＴＣＡＧＡＧＣＡＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＴＣＣＧＧＡＡＡＧＡＣＣＣＴＣＡＣＡＡＴＣＣＡＡＧＴＴＡＡＧＧＡＧＴＴＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＧＧＣＣＡＡＴＡＣＡＣＡＴＧＣＣＡＣＡＡＧＧＧＡＧＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＣＡＧＣＣＡＴＴＣＣＴＴＡＴＴＡＴＴＡＴＴＡＣＡＣＡＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＣＧＧＡＡＴＣＴＧＧＴＣＣＡＣＣＧＡＣＡＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＴＣＡＧＡＡＧＧＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＴＡＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＡＡＧＧＴＧＴＧＡＧＧＣＣＡＡＡＡＡＣＴＡＣＡＧＣＧＧＴＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＴＴＧＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＡＣＣＡＴＴＴＣＣＡＣＣＧＡＴＴＴＡＡＣＣＴＴＣＴＣＣＧＴＧＡＡＡＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＡＡＧＣＴＣＣＧＡＣＣＣＴＣＡＡＧＧＴＧＴＧＡＣＡＴＧＴＧＧＡＧＣＣＧＣＴＡＣＣＣＴＣＡＧＣＧＣＴＧＡＧＡＧＧＧＴＴＣＧＴＧＧＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＧＡＡＴＡＣＧＡＧＴＡＣＡＧＣＧＴＧＧＡＧＴＧＣＣＡＡＧＡＡＧＡＴＡＧＣＧＣＴＴＧＴＣＣＣＧＣＴＧＣＣＧＡＡＧＡＡＴＣＴＴＴＡＣＣＣＡＴＴＧＡＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＧＡＣＧＣＣＧＴＧＣＡＣＡＡＡＣＴＣＡＡＧＴＡＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＡＣＣＴＣＣＴＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＣＣＧＧＧＡＣＡＴＣＡＴＴＡＡＧＣＣＣＧＡＴＣＣＴＣＣＴＡＡＧＡＡＴＴＴＡＣＡＧＣＴＧＡＡＧＣＣＴＣＴＣＡＡＡＡＡＴＡＧＣＣＧＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＴＣＴＣＴＴＧＧＧＡＡＴＡＴＣＣＣＧＡＣＡＣＴＴＧＧＡＧＣＡＣＡＣＣＣＣＡＣＡＧＣＴＡＣＴＴＣＴＣＴＴＴＡＡＣＣＴＴＴＴＧＴＧＴＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＴＡＡＡＡＧＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＡＧＡＡＡＧＡＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＣＣＧＡＣＡＡＡＡＣＣＡＧＣＧＣＣＡＣＣＧＴＣＡＴＣＴＧＴＣＧＧＡＡＧＡＡＣＧＣＣＴＣＣＡＴＣＡＧＣＧＴＧＡＧＧＧＣＴＣＡＡＧＡＴＣＧＴＴＡＴＴＡＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＧＧＴＣＣＧＡＧＴＧＧＧＣＣＡＧＣＧＴＧＣＣＴＴＧＴＴＣＣＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＣＧＴＡＡＣＣＴＣＣＣＣＧＴＧＧＣＴＡＣＣＣＣＣＧＡＴＣＣＣＧＧＡＡＴＧＴＴＣＣＣＴＴＧＴＴＴＡＣＡＣＣＡＣＡＧＣＣＡＧＡＡＴＴＴＡＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＴＧＡＧＣＡＡＣＡＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＣＴＡＧＧＣＡＧＡＣＴＴＴＡＧＡＡＴＴＴＴＡＣＣＣＴＴＧＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＧＡＧＡＴＣＧＡＣＣＡＴＧＡＡＧＡＴＡＴＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣＡＴＣＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＧＣＴＴＧＴＴＴＡＣＣＴＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＣＡＡＡＧＡＡＣＧＡＧＴＣＴＴＧＴＣＴＣＡＡＣＴＣＴＣＧＴＧＡＡＡＣＣＡＧＣＴＴＣＡＴＣＡＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＴＧＴＴＴＡＧＣＴＴＣＣＣＧＧＡＡＧＡＣＣＴＣＣＴＴＴＡＴＧＡＴＧＧＣＴＴＴＡＴＧＣＣＴＣＡＧＣＴＣＣＡＴＣＴＡＣＧＡＧＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＴＧＴＡＣＣＡＡＧＴＧＧＡＧＴＴＣＡＡＧＡＣＣＡＴＧＡＡＣＧＣＣＡＡＧＣＴＧＣＴＣＡＴＧＧＡＣＣＣＴＡＡＡＣＧＧＣＡＧＡＴＣＴＴＴＴＴＡＧＡＣＣＡＧＡＡＣＡＴＧＣＴＧＧＣＴＧＴＧＡＴＴＧＡＴＧＡＧＣＴＧＡＴＧＣＡＡＧＣＴＴＴＡＡＡＣＴＴＣＡＡＣＴＣＣＧＡＧＡＣＣＧＴＣＣＣＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＣＣＣＴＣＧＡＧＧＡＧＣＣＣＧＡＴＴＴＴＴＡＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＡＴＣＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＴＴＴＴＡＣＴＣＣＡＣＧＣＣＴＴＴＡＧＧＡＴＣＣＧＧＧＣＣＧＴＧＡＣＣＡＴＴＧＡＣＣＧＧＧＴＣＡＴＧＡＧＣＴＡＴＴＴＡＡＡＣＧＣＣＡＧＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＡＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧ（配列番号１２３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＦ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＩＬ－７（例えば、可溶性ヒトＩＬ－７）受容体、ＣＤ１６（例えば、抗ＣＤ１６ ｓｃＦｖ）、またはＩＬ－２１（例えば、可溶性ヒトＩＬ－２１）受容体に特異的に結合する。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、ＣＤ１６またはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと一対の親和性ドメインの第２のドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の第２の標的結合ドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および追加の抗原結合ドメインのうちの１つ以上は、アゴニスト抗原結合ドメインである。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および追加の抗原結合ドメインは各々、アゴニスト抗原結合ドメインである。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体を含む。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは受容体ＩＬ－７に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＣＤ１６またはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－７タンパク質を含む。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、可溶性ＩＬ－７タンパク質は、可溶性ヒトＩＬ－７である。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２の抗原結合ドメインは、ＣＤ１６に特異的に結合する標的結合ドメインを含む。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖを含む。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－２１を含む。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、可溶性ＩＬ－２１は、可溶性ヒトＩＬ－２１である。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－２１を含む。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、可溶性ＩＬ－２１は、可溶性ヒトＩＬ－２１である。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、ＣＤ１６に特異的に結合する追加の標的結合ドメインをさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上は、同じ抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上は、同じエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上は、同じアミノ酸配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－７（例えば、可溶性ヒトＩＬ－７）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７は、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ（配列番号１１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７は、
ＧＡＴＴＧＴＧＡＴＡＴＴＧＡＡＧＧＴＡＡＡＧＡＴＧＧＣＡＡＡＣＡＡＴＡＴＧＡＧＡＧＴＧＴＴＣＴＡＡＴＧＧＴＣＡＧＣＡＴＣＧＡＴＣＡＡＴＴＡＴＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＡＧＡＡＡＴＴＧＧＴＡＧＣＡＡＴＴＧＣＣＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＡＴＴＴＡＡＣＴＴＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＣＡＴＡＴＣＴＧＴＧＡＴＧＣＴＡＡＴＡＡＧＧＡＡＧＧＴＡＴＧＴＴＴＴＴＡＴＴＣＣＧＴＧＣＴＧＣＴＣＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＣＡＡＴＴＴＣＴＴＡＡＡＡＴＧＡＡＴＡＧＣＡＣＴＧＧＴＧＡＴＴＴＴＧＡＴＣＴＣＣＡＣＴＴＡＴＴＡＡＡＡＧＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＡＡＣＡＡＴＡＣＴＧＴＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＴＧＧＣＣＡＧＧＴＴＡＡＡＧＧＡＡＧＡＡＡＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＣＣＡＡＣＣＡＡＣＡＡＡＧＡＧＴＴＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＴＡＡＡＴＣＴＴＴＡＡＡＧＧＡＡＣＡＧＡＡＡＡＡＡＣＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＴＧＴＴＴＣＣＴＡＡＡＧＡＧＡＣＴＡＴＴＡＣＡＡＧＡＧＡＴＡＡＡＡＡＣＴＴＧＴＴＧＧＡＡＴＡＡＡＡＴＴＴＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＴＡＡＡＧＡＡＣＡＣ（配列番号９５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７は、
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴ（配列番号１２４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１配列は、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号７８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＣＡＡＧＧＴＣＡＡＧＡＴＣＧＣＣＡＣＡＴＧＡＴＴＡＧＡＡＴＧＣＧＴＣＡＡＣＴＴＡＴＡＧＡＴＡＴＴＧＴＴＧＡＴＣＡＧＣＴＧＡＡＡＡＡＴＴＡＴＧＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＧＴＣＣＣＴＧＡＡＴＴＴＣＴＧＣＣＡＧＣＴＣＣＡＧＡＡＧＡＴＧＴＡＧＡＧＡＣＡＡＡＣＴＧＴＧＡＧＴＧＧＴＣＡＧＣＴＴＴＴＴＣＣＴＧＴＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＡＣＴＡＡＡＧＴＣＡＧＣＡＡＡＴＡＣＡＧＧＡＡＡＣＡＡＴＧＡＡＡＧＧＡＴＡＡＴＣＡＡＴＧＴＡＴＣＡＡＴＴＡＡＡＡＡＧＣＴＧＡＡＧＡＧＧＡＡＡＣＣＡＣＣＴＴＣＣＡＣＡＡＡＴＧＣＡＧＧＧＡＧＡＡＧＡＣＡＧＡＡＡＣＡＣＡＧＡＣＴＡＡＣＡＴＧＣＣＣＴＴＣＡＴＧＴＧＡＴＴＣＴＴＡＴＧＡＧＡＡＡＡＡＡＣＣＡＣＣＣＡＡＡＧＡＡＴＴＣＣＴＡＧＡＡＡＧＡＴＴＣＡＡＡＴＣＡＣＴＴＣＴＣＣＡＡＡＡＧＡＴＧＡＴＴＣＡＴＣＡＧＣＡＴＣＴＧＴＣＣＴＣＴＡＧＡＡＣＡＣＡＣＧＧＡＡＧＴＧＡＡＧＡＴＴＣＣ（配列番号９４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号７９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖ（例えば、抗ＣＤ１６ ｓｃＦｖ）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨ（配列番号１１２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴ（配列番号１１３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の軽鎖可変ドメイン配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲ（配列番号１１４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む重鎖可変ドメインを含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧ（配列番号１１５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の重鎖可変ドメイン配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１２５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１２６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１２７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１２８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号１２９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＡＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号１３０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号１３１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＡＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号１３２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＧ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＴＧＦβ（例えば、ヒトＴＧＦβＲＩＩ受容体）、ＣＤ１６（例えば、抗ＣＤ１６ ｓｃＦｖ）、またはＩＬ－２１（例えば、可溶性ヒトＩＬ－２１）受容体に特異的に結合する。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、ＣＤ１６またはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと一対の親和性ドメインの第２のドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の第２の標的結合ドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および追加の抗原結合ドメインのうちの１つ以上は、アゴニスト抗原結合ドメインである。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および追加の抗原結合ドメインは各々、アゴニスト抗原結合ドメインである。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体を含む。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＴＧＦ－β、ＣＤ１６、またはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＴＧＦ－βに特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＣＤ１６またはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、可溶性ＴＧＦ－β受容体である。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、ＣＤ１６に特異的に結合する。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２の抗原結合ドメインは、ＣＤ１６に特異的に結合する抗原結合ドメインを含む。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２の抗原結合ドメインは、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖを含む。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－２１を含む。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、可溶性ヒトＩＬ－２１を含む。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－２１を含む。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、可溶性ＩＬ－２１は、可溶性ヒトＩＬ－２１である。本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、ＣＤ１６に特異的に結合する追加の標的結合ドメインをさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上は、同じ抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上は、同じエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上は、同じアミノ酸配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、ＴＧＦβＲＩＩ受容体（例えば、可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ受容体）を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列および第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列と第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列との間に配置されたリンカーを含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、リンカーは、配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴ（配列番号８２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ受容体は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１配列は、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号７８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＣＡＡＧＧＴＣＡＡＧＡＴＣＧＣＣＡＣＡＴＧＡＴＴＡＧＡＡＴＧＣＧＴＣＡＡＣＴＴＡＴＡＧＡＴＡＴＴＧＴＴＧＡＴＣＡＧＣＴＧＡＡＡＡＡＴＴＡＴＧＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＧＴＣＣＣＴＧＡＡＴＴＴＣＴＧＣＣＡＧＣＴＣＣＡＧＡＡＧＡＴＧＴＡＧＡＧＡＣＡＡＡＣＴＧＴＧＡＧＴＧＧＴＣＡＧＣＴＴＴＴＴＣＣＴＧＴＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＡＣＴＡＡＡＧＴＣＡＧＣＡＡＡＴＡＣＡＧＧＡＡＡＣＡＡＴＧＡＡＡＧＧＡＴＡＡＴＣＡＡＴＧＴＡＴＣＡＡＴＴＡＡＡＡＡＧＣＴＧＡＡＧＡＧＧＡＡＡＣＣＡＣＣＴＴＣＣＡＣＡＡＡＴＧＣＡＧＧＧＡＧＡＡＧＡＣＡＧＡＡＡＣＡＣＡＧＡＣＴＡＡＣＡＴＧＣＣＣＴＴＣＡＴＧＴＧＡＴＴＣＴＴＡＴＧＡＧＡＡＡＡＡＡＣＣＡＣＣＣＡＡＡＧＡＡＴＴＣＣＴＡＧＡＡＡＧＡＴＴＣＡＡＡＴＣＡＣＴＴＣＴＣＣＡＡＡＡＧＡＴＧＡＴＴＣＡＴＣＡＧＣＡＴＣＴＧＴＣＣＴＣＴＡＧＡＡＣＡＣＡＣＧＧＡＡＧＴＧＡＡＧＡＴＴＣＣ（配列番号９４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号７９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨ（配列番号１１２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴ（配列番号１１３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の軽鎖可変ドメイン配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲ（配列番号１１４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む重鎖可変ドメインを含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧ（配列番号１１５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の重鎖可変ドメイン配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１３３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１３４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１３５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１３６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号１３７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＡＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号１３８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号１３９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＡＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号１４０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＨ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＩＬ－７受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＩＬ－７受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じエピトープに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じアミノ酸配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－７（例えば、可溶性ヒトＩＬ－７）を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７は、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ（配列番号１１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７は、
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴ（配列番号９５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１４１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１４２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１４３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１４４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号１４５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＧＡＴＴＧＴＧＡＴＡＴＴＧＡＡＧＧＴＡＡＡＧＡＴＧＧＣＡＡＡＣＡＡＴＡＴＧＡＧＡＧＴＧＴＴＣＴＡＡＴＧＧＴＣＡＧＣＡＴＣＧＡＴＣＡＡＴＴＡＴＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＡＧＡＡＡＴＴＧＧＴＡＧＣＡＡＴＴＧＣＣＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＡＴＴＴＡＡＣＴＴＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＣＡＴＡＴＣＴＧＴＧＡＴＧＣＴＡＡＴＡＡＧＧＡＡＧＧＴＡＴＧＴＴＴＴＴＡＴＴＣＣＧＴＧＣＴＧＣＴＣＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＣＡＡＴＴＴＣＴＴＡＡＡＡＴＧＡＡＴＡＧＣＡＣＴＧＧＴＧＡＴＴＴＴＧＡＴＣＴＣＣＡＣＴＴＡＴＴＡＡＡＡＧＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＡＡＣＡＡＴＡＣＴＧＴＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＴＧＧＣＣＡＧＧＴＴＡＡＡＧＧＡＡＧＡＡＡＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＣＣＡＡＣＣＡＡＣＡＡＡＧＡＧＴＴＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＴＡＡＡＴＣＴＴＴＡＡＡＧＧＡＡＣＡＧＡＡＡＡＡＡＣＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＴＧＴＴＴＣＣＴＡＡＡＧＡＧＡＣＴＡＴＴＡＣＡＡＧＡＧＡＴＡＡＡＡＡＣＴＴＧＴＴＧＧＡＡＴＡＡＡＡＴＴＴＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＴＡＡＡＧＡＡＣＡＣＡＴＣＡＣＧＴＧＣＣＣＴＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＣＣＧＴＧＧＡＡＣＡＣＧＣＡＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＣＡＡＧＡＧＣＴＡＣＡＧＣＴＴＧＴＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＧＣＧＧＴＡＣＡＴＴＴＧＴＡＡＣＴＣＴＧＧＴＴＴＣＡＡＧＣＧＴＡＡＡＧＣＣＧＧＣＡＣＧＴＣＣＡＧＣＣＴＧＡＣＧＧＡＧＴＧＣＧＴＧＴＴＧＡＡＣＡＡＧＧＣＣＡＣＧＡＡＴＧＴＣＧＣＣＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＣＣＣＣＡＧＴＣＴＣＡＡＡＴＧＣＡＴＴＡＧＡ（配列番号１４６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号１４７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ（配列番号１４８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＩ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＴＧＦ－βに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＴＧＦ－βに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じエピトープに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、同じアミノ酸配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは、可溶性ＴＧＦ－β受容体（例えば、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体、例えば、可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ）である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列および第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列と第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列との間に配置されたリンカーを含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、リンカーは、配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、ｃ（配列番号８１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴ（配列番号８２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１４９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１５０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１５１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１５２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号１５３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ（配列番号１５４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号１５５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ（配列番号１５６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＪ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－２１受容体、またはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、ＩＬ－２１（例えば、可溶性ＩＬ－２１、例えば、可溶性ヒトＩＬ－２１）受容体またはＣＤ１３７Ｌ（例えば、可溶性ＣＤ１３７Ｌ、例えば、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌ）受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと一対の親和性ドメインの第２のドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の第２の標的結合ドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、追加の標的結合ドメインを含み得る。いくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインおよび
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および追加の標的結合ドメインのうちの１つ以上は、アゴニスト抗原結合ドメインである。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および追加の標的結合ドメインは各々、アゴニスト抗原結合ドメインである。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＩＬ－７受容体に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－２１受容体またはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、ＩＬ－２１受容体またはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－７（例えば、可溶性ヒトＩＬ－７）である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７は、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ（配列番号１１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７は、
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴ（配列番号１２４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインまたは追加の標的結合ドメインは、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインまたは追加の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－２１（例えば、可溶性ヒトＩＬ－２１）である。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号７８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号７９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、ＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、ＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する追加の標的結合ドメインをさらに含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインおよび／または追加の標的結合ドメインは、可溶性ＣＤ１３７Ｌ（例えば、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌ）である。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌは、
ＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ（配列番号１５７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌは、
ＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ（配列番号１５８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌは、
ＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩ（配列番号１５９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌは、
ＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣ（配列番号１６０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１６１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１６２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１６３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１６４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ（配列番号１６５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ（配列番号１６６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ（配列番号１６７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ（配列番号１６８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩ（配列番号１６９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣ（配列番号１７０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩ（配列番号１７１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣ（配列番号１７２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＫ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＩＬ－７受容体またはＴＧＦ－βに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＩＬ－７受容体に特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＴＧＦ－βに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＴＧＦ－βに特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－７受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－７タンパク質（例えば、可溶性ヒトＩＬ－７タンパク質）を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７タンパク質は、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ（配列番号１１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－７は、
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴ（配列番号１２４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、ＴＧＦ－βに特異的に結合する標的結合ドメインを含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、可溶性ＴＧＦ－β受容体（例えば、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体、例えば、可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ受容体）である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列および第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列と第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列との間に配置されたリンカーを含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、リンカーは、配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴ（配列番号８２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１７３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１７４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１７５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１７６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号１７７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ（配列番号１７８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ（配列番号１７９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ（配列番号１８０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＬ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＴＧＦ－β、ＩＬ－２１受容体、またはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、ＩＬ－２１（例えば、可溶性ＩＬ－２１、例えば、可溶性ヒトＩＬ－２１）受容体またはＣＤ１３７Ｌ（例えば、可溶性ＣＤ１３７Ｌ、例えば、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌ）受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと一対の親和性ドメインの第２のドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の第２の標的結合ドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および追加の標的結合ドメインのうちの１つ以上は、アゴニスト抗原結合ドメインである。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメイン、第２の標的結合ドメイン、および追加の標的結合ドメインは各々、アゴニスト抗原結合ドメインである。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＴＧＦ－βに特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＩＬ－２１受容体またはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、可溶性ＴＧＦ－β受容体（例えば、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体、例えば、可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ受容体）である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列および第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列と第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列との間に配置されたリンカーを含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、リンカーは、配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴ（配列番号８２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインまたは追加の標的結合ドメインは、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインまたは追加の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－２１（例えば、可溶性ヒトＩＬ－２１）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号７８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＩＬ－２１は、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号７９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインまたは追加の標的結合ドメインは、ＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインおよび／または追加の標的結合ドメインは、可溶性ＣＤ１３７Ｌ（例えば、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌ）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＣＤ１３７Ｌは、
ＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ（配列番号１５７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＣＤ１３７Ｌは、
ＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ（配列番号１５８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌは、
ＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩ（配列番号１５９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌは、
ＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣ（配列番号１６０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１８１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１８２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１８３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１８４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ（配列番号１８５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ（配列番号１８６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ（配列番号１８７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ（配列番号１８８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩ（配列番号１８９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣ（配列番号１９０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩ（配列番号１９１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣ（配列番号１９２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＭ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＴＧＦ－βまたはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、ＩＬ－２１（例えば、可溶性ＩＬ－２１、例えば、可溶性ヒトＩＬ－２１）受容体またはＴＧＦ－β受容体（例えば、可溶性ＴＧＦ－β受容体、例えば、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体）に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと一対の親和性ドメインの第２のドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の第２の標的結合ドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＴＧＦ－βに特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＴＧＦ－βまたはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、可溶性ＴＧＦ－β受容体（例えば、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体、例えば、可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ受容体）である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列および第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列と第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列との間に配置されたリンカーを含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、リンカーは、配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴ（配列番号８２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、可溶性ＩＬ－２１（例えば、ヒト可溶性ＩＬ－２１）を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＩＬ－２１は、
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号７８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＩＬ－２１は、
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号７９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１９３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１９４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号１９５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号１９６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号１９７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号１９８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ（配列番号１９９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ（配列番号２００）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＮ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＴＧＦ－βまたはＣＤ１６に特異的に結合する。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、ＣＤ１６（例えば、抗ＣＤ１６ ｓｃＦｖ）またはＴＧＦ－β（例えば、可溶性ＴＧＦ－β受容体、例えば、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体）に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと一対の親和性ドメインの第２のドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の第２の標的結合ドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＴＧＦ－βに特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＴＧＦ－βまたはＣＤ１６に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインは、可溶性ＴＧＦ－β受容体（例えば、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体、例えば、可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ受容体）である。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列および第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列と第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列との間に配置されたリンカーを含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、リンカーは、配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴ（配列番号８２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、ＣＤ１６に特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、抗ＣＤ１６ ｓｃＦｖを含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨ（配列番号１１２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴ（配列番号１１３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の軽鎖可変ドメイン配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲ（配列番号１１４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む重鎖可変ドメインを含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖは、
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧ（配列番号１１５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の重鎖可変ドメイン配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号２０１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号２０２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号２０３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号２０４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲ（配列番号２０５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＡＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧ（配列番号２０６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲ（配列番号２０７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＡＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧ（配列番号２０８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
例示的な多鎖キメラポリペプチド－タイプＯ
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインおよび第２の標的結合ドメインは各々独立して、ＴＧＦ－βまたはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、追加の標的結合ドメインをさらに含む。本明細書に記載のこれらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインは、ＴＧＦ－β受容体（例えば、可溶性ＴＧＦ－β受容体、例えば、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体）またはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の第１の標的結合ドメインと可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインは、第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、第１のキメラポリペプチド内の可溶性組織因子ドメインと一対の親和性ドメインの第１のドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと一対の親和性ドメインの第２のドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の一対の親和性ドメインの第２のドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、追加の標的結合ドメインと第２の標的結合ドメインは、第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、第２のキメラポリペプチド内の第２の標的結合ドメインと追加の標的結合ドメインとの間にリンカー配列（例えば、本明細書に記載の例示的なリンカーのうちのいずれか）をさらに含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性組織因子ドメインは、本明細書に記載の例示的な可溶性組織因子ドメインのうちのいずれかであり得る。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、一対の親和性ドメインは、本明細書に記載の例示的な一対の親和性ドメインのうちのいずれかであり得る。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインはＴＧＦ－βに特異的に結合し、第２の標的結合ドメインはＣＤ１３７Ｌに特異的に結合する。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の標的結合ドメインまたは追加の標的結合ドメインは、可溶性ＴＧＦ－β受容体（例えば、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体、例えば、可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ受容体）である。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列および第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩは、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列と第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ配列との間に配置されたリンカーを含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの例では、リンカーは、配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７）を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第１の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴ（配列番号８２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の可溶性ヒトＴＧＦＲβＲＩＩ受容体配列は、
ＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ（配列番号８５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ＴＧＦ－β受容体は、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ（配列番号８４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、第２の標的結合ドメインは、可溶性ＣＤ１３７Ｌタンパク質（例えば、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌタンパク質）を含む。これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌは、
ＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ（配列番号１５７）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌは、
ＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ（配列番号１５８）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一）の配列によってコードされる。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌは、
ＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩ（配列番号１５９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一）の配列を含む。
これらの多鎖キメラポリペプチドのいくつかの実施形態では、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌは、
ＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣ（配列番号１６０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号２０９）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号２１０）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ（配列番号２１１）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第１のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ（配列番号２１２）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ（配列番号２１３）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ（配列番号２１４）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ（配列番号２１５）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列を含み得る。
いくつかの実施形態では、第２のキメラポリペプチドは、
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ（配列番号２１６）と少なくとも８０％同一（例えば、少なくとも８２％同一、少なくとも８４％同一、少なくとも８６％同一、少なくとも８８％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９２％同一、少なくとも９４％同一、少なくとも９６％同一、少なくとも９８％同一、少なくとも９９％同一、または１００％同一）の配列によってコードされる。
組成物／キット
本明細書に記載のいずれかの多鎖キメラポリペプチドのうちの少なくとも１つ、細胞のうちのいずれか、または核酸のうちのいずれかを含む組成物（例えば、医薬組成物）も本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、組成物は、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかの少なくとも１つを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、免疫細胞のうちのいずれか（例えば、本明細書に記載の免疫細胞のうちのいずれか、例えば、本明細書に記載の方法のうちのいずれかを使用して産生された免疫細胞のうちのいずれか）を含む。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、異なる投与経路（例えば、静脈内、皮下）用に製剤化される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、医薬的に許容される担体（例えば、リン酸緩衝生理食塩水）を含み得る。
医薬組成物の単回または複数回投与は、例えば、対象によって必要とされ、かつ許容される投薬量および頻度に応じて、それを必要とする対象に与えられ得る。製剤は、状態、疾患、または症状を効果的に治療、予防、または改善するのに十分な量の活性薬剤を提供すべきである。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチド、組成物、核酸、または細胞（例えば、免疫細胞）のうちのいずれかを含むキットも本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、キットは、本明細書に記載の方法のうちのいずれかを行うための指示を含み得る。いくつかの実施形態では、キットは、本明細書に記載の医薬組成物のうちのいずれかの少なくとも１用量を含み得る。
核酸／ベクター
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする核酸も本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、第１の核酸は、第１のキメラポリペプチドをコードすることができ、第２の核酸は、第２のキメラポリペプチドをコードすることができる。いくつかの実施形態では、単一核酸は、第１のキメラポリペプチドおよび第２のキメラポリペプチドの両方をコードすることができる。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする核酸のうちのいずれかを含むベクターも本明細書に提供される。いくつかの実施形態では、第１のベクターは、第１のキメラポリペプチドをコードする核酸を含み得、第２のベクターは、第２のキメラポリペプチドをコードする核酸を含み得る。いくつかの実施形態では、単一ベクターは、第１のキメラポリペプチドをコードする第１の核酸および第２のキメラポリペプチドをコードする第２の核酸を含み得る。
本明細書に記載のベクターのうちのいずれかが発現ベクターであり得る。例えば、発現ベクターは、第１のキメラポリペプチドおよび第２のキメラポリペプチドをコードする配列に作動可能に連結されたプロモーター配列を含み得る。
ベクターの非限定的な例には、プラスミド、トランスポゾン、コスミド、およびウイルスベクター（例えば、任意のアデノウイルスベクター（例えば、ｐＳＶまたはｐＣＭＶベクター）、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター、レンチウイルスベクター、およびレトロウイルスベクター）、ならびに任意のＧａｔｅｗａｙ（登録商標）ベクターが挙げられる。ベクターは、例えば、発現のための十分なシス作用エレメントを含み得、発現のための他の要素は、宿主哺乳動物細胞によって、またはインビトロ発現系において供給され得る。当業者であれば、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかの作製に好適なベクターおよび哺乳動物細胞を選択することができるであろう。
細胞
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする（例えば、第１のキメラポリペプチドおよび第２のキメラポリペプチドの両方をコードする）本明細書に記載の核酸のうちのいずれかを含む細胞（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な細胞のうちのいずれか）も本明細書に提供される。本明細書に記載の第１のキメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする本明細書に記載の核酸のうちのいずれかを含む細胞（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な細胞のうちのいずれか）も本明細書に提供される。本明細書に記載の第２のキメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする本明細書に記載の核酸のうちのいずれかを含む細胞（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な細胞のうちのいずれか）も提供される。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする（例えば、第１のキメラポリペプチドおよび第２のキメラポリペプチドの両方をコードする）本明細書に記載のベクターのうちのいずれかを含む細胞（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な細胞のうちのいずれか）も本明細書に提供される。本明細書に記載の第１のキメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする本明細書に記載のベクターのうちのいずれかを含む細胞（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な細胞のうちのいずれか）も本明細書に提供される。本明細書に記載の第２のキメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする本明細書に記載のベクターのうちのいずれかを含む細胞（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な細胞のうちのいずれか）も本明細書に提供される。
本明細書に記載の方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、細胞は、真核細胞であり得る。本明細書で使用される場合、「真核細胞」という用語は、別個の膜結合核を有する細胞を指す。かかる細胞には、例えば、哺乳動物（例えば、齧歯類、非ヒト霊長類、またはヒト）細胞、昆虫細胞、真菌細胞、または植物細胞が含まれ得る。いくつかの実施形態では、真核細胞は、サッカロミセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）等の酵母細胞である。いくつかの実施形態では、真核細胞は、哺乳動物細胞、鳥類細胞、植物細胞、または昆虫細胞等の高等真核生物である。哺乳動物細胞の非限定的な例には、チャイニーズハムスター卵巣細胞およびヒト胎児腎臓細胞（例えば、ＨＥＫ２９３細胞）が含まれる。
核酸および発現ベクターを細胞（例えば、真核細胞）に導入する方法は、当該技術分野で既知である。核酸を細胞に導入するために使用され得る方法の非限定的な例には、リポフェクション、トランスフェクション、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション、リン酸カルシウムトランスフェクション、デンドリマーベースのトランスフェクション、カチオン性ポリマートランスフェクション、細胞圧搾、ソノポレーション、光学トランスフェクション、インパレフェクション、流体力学的送達、マグネトフェクション、ウイルス形質導入（例えば、アデノウイルスおよびレンチウイルス形質導入）、およびナノ粒子トランスフェクションが挙げられる。
多鎖キメラポリペプチドを産生する方法
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを産生する方法であって、多鎖キメラポリペプチドの産生をもたらすのに十分な条件下で本明細書に記載の細胞のうちのいずれかを培養培地中で培養すること、ならびに多鎖キメラポリペプチドを細胞および／または培養培地から回収することを含む方法も、本明細書に提供される。
本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを産生する方法であって、第１のキメラポリペプチドの産生をもたらすのに十分な条件下で本明細書に記載の細胞のうちのいずれかを第１の培養培地中で培養すること、第１のキメラポリペプチドを細胞および／または第１の培養培地から回収すること、第２のキメラポリペプチドの産生をもたらすのに十分な条件下で本明細書に記載の細胞のうちのいずれかを第２の培養培地中で培養すること、第２のキメラポリペプチドを細胞および／または第２の培養培地から回収すること、ならびに、回収された第１のキメラポリペプチドと回収された第２のキメラポリペプチドを組み合わせて（例えば、混合して）、多鎖キメラポリペプチド（例えば、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれか）を形成することを含む方法も、本明細書に提供される。
細胞（例えば、真核生物細胞）からの多鎖キメラポリペプチド、第１のキメラポリペプチド、または第２のキメラポリペプチドの回収は、当該技術分野で周知の技法（例えば、硫酸アンモニウム沈殿、ポリエチレングリコール沈殿、イオン交換クロマトグラフィー（アニオンまたはカチオン）、疎水性相互作用に基づくクロマトグラフィー、金属親和性クロマトグラフィー、リガンド親和性クロマトグラフィー、およびサイズ排除クロマトグラフィー）を使用して行われ得る。
細胞を培養する方法は、当該技術分野で周知である。細胞は、増殖、分化、および成長を好む条件下で、インビトロで維持され得る。簡潔には、細胞は、細胞（例えば、任意の細胞）を、細胞の生存および成長を支持するために必要な成長因子および栄養補助剤を含む細胞培養培地と接触させることによって培養され得る。
本明細書に記載の方法のうちのいずれかによって産生された多鎖キメラポリペプチド（例えば、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれか）、第１のキメラポリペプチド（例えば、第１のキメラポリペプチドのうちのいずれか）、または第２のキメラポリペプチド（例えば、本明細書に記載の第２のキメラポリペプチドのうちのいずれか）も本明細書に提供される。
免疫細胞を刺激する方法
免疫細胞（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な免疫細胞のうちのいずれか）を刺激する方法であって、免疫細胞を、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは本明細書に記載の組成物（例えば、医薬組成物）のうちのいずれかの有効量と接触させることを含む、方法も本明細書に提供される。いくつかの例では、免疫細胞は、インビトロで（例えば、免疫細胞の刺激をもたらすのに十分な条件下で、好適な液体培地中で）接触する。
いくつかの例では、免疫細胞は、対象（例えば、哺乳動物、例えば、ヒト）から以前に得られた。これらの方法のいくつかの実施形態は、接触させるステップの前に、免疫細胞を対象から得ることをさらに含む。
いくつかの例では、免疫細胞をインビボで接触させる。かかる実施形態では、多鎖キメラポリペプチドは、対象（例えば、哺乳動物、例えば、ヒト）に、対象における免疫細胞の刺激をもたらすのに十分な量で投与される。
本明細書に記載の方法のうちのいずれかのいくつかの例では、免疫細胞は、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、またはナチュラルキラー細胞、またはそれらの組み合わせであり得る。
いくつかの例では、免疫細胞は、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている。いくつかの例では、免疫細胞（例えば、本明細書に記載の免疫細胞のうちのいずれか）は、共刺激分子（例えば、ＣＤ２８）を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている。
これらの方法のいくつかの実施形態は、接触させるステップの後に、免疫細胞（例えば、本明細書に記載の免疫細胞のうちのいずれか）に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含み得る。これらの方法のいくつかの実施形態は、接触させるステップの後に、免疫細胞（例えば、本明細書に記載の免疫細胞のうちのいずれか）に、共刺激分子（例えば、ＣＤ２８）をコードする核酸を導入することをさらに含み得る。
これらの方法のいくつかの実施形態は、免疫細胞の治療有効量を、それを必要とする対象（例えば、本明細書に記載の例示的な対象のうちのいずれか）に投与することをさらに含み得る。
いくつかの例では、対象は、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断された対象であり得る。加齢関連疾患または障害の非限定的な例には、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害が挙げられる。
いくつかの例では、対象は、がんを有すると特定または診断された対象であり得る。がんの非限定的な例には、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌が挙げられる。
いくつかの例では、対象は、感染性疾患を有すると診断または特定された対象であり得る。感染性疾患の非限定的な例には、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、またはインフルエンザウイルスによる感染が挙げられる。
免疫細胞の活性化は、当該技術分野で既知の方法を使用して決定され得る。例えば、免疫細胞の活性化は、免疫細胞の活性化時に分泌されるサイトカインおよびケモカインまたはアップレギュレートされる細胞傷害性顆粒および調節分子のレベルを検出することによって決定され得る。免疫細胞の活性化時に分泌またはアップレギュレートされるサイトカイン、ケモカイン、細胞傷害性顆粒、および調節分子の非限定的な例には、ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２２、ＩＬ－３３、ロイコトリエンＢ４、ＣＣＬ５、ＴＮＦα、グランザイム、パーフォリン、ＴＧＦβ、ＳＴＡＴ３、ＳＴＡＴ４、ＳＴＡＴ５、ＲＯＲΚＴ、ＦＯＸＰ３、ＳＴＡＴ６、およびＧＡＴＡ３が挙げられる。これらのサイトカイン、ケモカイン、細胞傷害性顆粒、または調節分子の検出は、イムノアッセイ（例えば、酵素結合免疫吸着アッセイ）および定量的ＰＣＲを使用して行われ得る。例えば、免疫細胞の活性化は、本明細書に記載のサイトカインまたはケモカインまたは細胞傷害性顆粒または調節分子のうちのいずれかのうちの１つ以上（例えば、ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２２、ＩＬ－３３、ロイコトリエンＢ４、ＣＣＬ５、ＴＮＦα、グランザイム、パーフォリン、ＴＧＦβ、ＳＴＡＴ３、ＳＴＡＴ４、ＳＴＡＴ５、ＲＯＲΚＴ、ＦＯＸＰ３、およびＧＡＴＡ３のうちのいずれかのうちの１つ以上）の約１％～約８００％（例えば、約１％～約７５０％、約１％～約７００％、約１％～約６５０％、約１％～約６００％、約１％～約５５０％、約１％～約５００％、約１％～約４５０％、約１％～約４００％、約１％～約３５０％、約１％～約３００％、約１％～約２８０％、約１％～約２６０％、約１％～約２４０％、約１％～約２２０％、約１％～約２００％、約１％～約１８０％、約１％～約１６０％、約１％～約１４０％、約１％～約１２０％、約１％～約１００％、約１％～約９０％、約１％～約８０％、約１％～約７０％、約１％～約６０％、約１％～約５０％、約１％～約４５％、約１％～約４０％、約１％～約３５％、約１％～約３０％、約１％～約２５％、約１％～約２０％、約１％～約１５％、約１％～約１０％、約１％～約５％、約５％～約８００％、約５％～約７５０％、約５％～約７００％、約５％～約６５０％、約５％～約６００％、約５％～約５５０％、約５％～約５００％、約５％～約４５０％、約５％～約４００％、約５％～約３５０％、約５％～約３００％、約５％～約２８０％、約５％～約２６０％、約５％～約２４０％、約５％～約２２０％、約５％～約２００％、約５％～約１８０％、約５％～約１６０％、約５％～約１４０％、約５％～約１２０％、約５％～約１００％、約５％～約９０％、約５％～約８０％、約５％～約７０％、約５％～約６０％、約５％～約５０％、約５％～約４５％、約５％～約４０％、約５％～約３５％、約５％～約３０％、約５％～約２５％、約５％～約２０％、約５％～約１５％、約５％～約１０％、約１０％～約８００％、約１０％～約７５０％、約１０％～約７００％、約１０％～約６５０％、約１０％～約６００％、約１０％～約５５０％、約１０％～約５００％、約１０％～約４５０％、約１０％～約４００％、約１０％～約３５０％、約１０％～約３００％、約１０％～約２８０％、約１０％～約２６０％、約１０％～約２４０％、約１０％～約２２０％、約１０％～約２００％、約１０％～約１８０％、約１０％～約１６０％、約１０％～約１４０％、約１０％～約１２０％、約１０％～約１００％、約１０％～約９０％、約１０％～約８０％、約１０％～約７０％、約１０％～約６０％、約１０％～約５０％、約１０％～約４５％、約１０％～約４０％、約１０％～約３５％、約１０％～約３０％、約１０％～約２５％、約１０％～約２０％、約１０％～約１５％、約１５％～約８００％、約１５％～約７５０％、約１５％～約７００％、約１５％～約６５０％、約１５％～約６００％、約１５％～約５５０％、約１５％～約５００％、約１５％～約４５０％、約１５％～約４００％、約１５％～約３５０％、約１５％～約３００％、約１５％～約２８０％、約１５％～約２６０％、約１５％～約２４０％、約１５％～約２２０％、約１５％～約２００％、約１５％～約１８０％、約１５％～約１６０％、約１５％～約１４０％、約１５％～約１２０％、約１５％～約１００％、約１５％～約９０％、約１５％～約８０％、約１５％～約７０％、約１５％～約６０％、約１５％～約５０％、約１５％～約４５％、約１５％～約４０％、約１５％～約３５％、約１５％～約３０％、約１５％～約２５％、約１５％～約２０％、約２０％～約８００％、約２０％～約７５０％、約２０％～約７００％、約２０％～約６５０％、約２０％～約６００％、約２０％～約５５０％、約２０％～約５００％、約２０％～約４５０％、約２０％～約４００％、約２０％～約３５０％、約２０％～約３００％、約２０％～約２８０％、約２０％～約２６０％、約２０％～約２４０％、約２０％～約２２０％、約２０％～約２００％、約２０％～約１８０％、約２０％～約１６０％、約２０％～約１４０％、約２０％～約１２０％、約２０％～約１００％、約２０％～約９０％、約２０％～約８０％、約２０％～約７０％、約２０％～約６０％、約２０％～約５０％、約２０％～約４５％、約２０％～約４０％、約２０％～約３５％、約２０％～約３０％、約２０％～約２５％、約２５％～約８００％、約２５％～約７５０％、約２５％～約７００％、約２５％～約６５０％、約２５％～約６００％、約２５％～約５５０％、約２５％～約５００％、約２５％～約４５０％、約２５％～約４００％、約２５％～約３５０％、約２５％～約３００％、約２５％～約２８０％、約２５％～約２６０％、約２５％～約２４０％、約２５％～約２２０％、約２５％～約２００％、約２５％～約１８０％、約２５％～約１６０％、約２５％～約１４０％、約２５％～約１２０％、約２５％～約１００％、約２５％～約９０％、約２５％～約８０％、約２５％～約７０％、約２５％～約６０％、約２５％～約５０％、約２５％～約４５％、約２５％～約４０％、約２５％～約３５％、約３５％～約８００％、約３５％～約７５０％、約３５％～約７００％、約３５％～約６５０％、約３５％～約６００％、約３５％～約５５０％、約３５％～約５００％、約３５％～約４５０％、約３５％～約４００％、約３５％～約３５０％、約３５％～約３００％、約３５％～約２８０％、約３５％～約２６０％、約３５％～約２４０％、約３５％～約２２０％、約３５％～約２００％、約３５％～約１８０％、約３５％～約１６０％、約３５％～約１４０％、約３５％～約１２０％、約３５％～約１００％、約３５％～約９０％、約３５％～約８０％、約３５％～約７０％、約３５％～約６０％、約３５％～約５０％、約３５％～約４５％、約３５％～約４０％、約４０％～約８００％、約４０％～約７５０％、約４０％～約７００％、約４０％～約６５０％、約４０％～約６００％、約４０％～約５５０％、約４０％～約５００％、約４０％～約４５０％、約４０％～約４００％、約４０％～約３５０％、約４０％～約３００％、約４０％～約２８０％、約４０％～約２６０％、約４０％～約２４０％、約４０％～約２２０％、約４０％～約２００％、約４０％～約１８０％、約４０％～約１６０％、約４０％～約１４０％、約４０％～約１２０％、約４０％～約１００％、約４０％～約９０％、約４０％～約８０％、約４０％～約７０％、約４０％～約６０％、約４０％～約５０％、約４０％～約４５％、約４５％～約８００％、約４５％～約７５０％、約４５％～約７００％、約４５％～約６５０％、約４５％～約６００％、約４５％～約５５０％、約４５％～約５００％、約４５％～約４５０％、約４５％～約４００％、約４５％～約３５０％、約４５％～約３００％、約４５％～約２８０％、約４５％～約２６０％、約４５％～約２４０％、約４５％～約２２０％、約４５％～約２００％、約４５％～約１８０％、約４５％～約１６０％、約４５％～約１４０％、約４５％～約１２０％、約４５％～約１００％、約４５％～約９０％、約４５％～約８０％、約４５％～約７０％、約４５％～約６０％、約４５％～約５０％、約５０％～約８００％、約５０％～約７５０％、約５０％～約７００％、約５０％～約６５０％、約５０％～約６００％、約５０％～約５５０％、約５０％～約５００％、約５０％～約４５０％、約５０％～約４００％、約５０％～約３５０％、約５０％～約３００％、約５０％～約２８０％、約５０％～約２６０％、約５０％～約２４０％、約５０％～約２２０％、約５０％～約２００％、約５０％～約１８０％、約５０％～約１６０％、約５０％～約１４０％、約５０％～約１２０％、約５０％～約１００％、約５０％～約９０％、約５０％～約８０％、約５０％～約７０％、約５０％～約６０％、約６０％～約８００％、約６０％～約７５０％、約６０％～約７００％、約６０％～約６５０％、約６０％～約６００％、約６０％～約５５０％、約６０％～約５００％、約６０％～約４５０％、約６０％～約４００％、約６０％～約３５０％、約６０％～約３００％、約６０％～約２８０％、約６０％～約２６０％、約６０％～約２４０％、約６０％～約２２０％、約６０％～約２００％、約６０％～約１８０％、約６０％～約１６０％、約６０％～約１４０％、約６０％～約１２０％、約６０％～約１００％、約６０％～約９０％、約６０％～約８０％、約６０％～約７０％、約７０％～約８００％、約７０％～約７５０％、約７０％～約７００％、約７０％～約６５０％、約７０％～約６００％、約７０％～約５５０％、約７０％～約５００％、約７０％～約４５０％、約７０％～約４００％、約７０％～約３５０％、約７０％～約３００％、約７０％～約２８０％、約７０％～約２６０％、約７０％～約２４０％、約７０％～約２２０％、約７０％～約２００％、約７０％～約１８０％、約７０％～約１６０％、約７０％～約１４０％、約７０％～約１２０％、約７０％～約１００％、約７０％～約９０％、約７０％～約８０％、約８０％～約８００％、約８０％～約７５０％、約８０％～約７００％、約８０％～約６５０％、約８０％～約６００％、約８０％～約５５０％、約８０％～約５００％、約８０％～約４５０％、約８０％～約４００％、約８０％～約３５０％、約８０％～約３００％、約８０％～約２８０％、約８０％～約２６０％、約８０％～約２４０％、約８０％～約２２０％、約８０％～約２００％、約８０％～約１８０％、約８０％～約１６０％、約８０％～約１４０％、約８０％～約１２０％、約８０％～約１００％、約８０％～約９０％、約９０％～約８００％、約９０％～約７５０％、約９０％～約７００％、約９０％～約６５０％、約９０％～約６００％、約９０％～約５５０％、約９０％～約５００％、約９０％～約４５０％、約９０％～約４００％、約９０％～約３５０％、約９０％～約３００％、約９０％～約２８０％、約９０％～約２６０％、約９０％～約２４０％、約９０％～約２２０％、約９０％～約２００％、約９０％～約１８０％、約９０％～約１６０％、約９０％～約１４０％、約９０％～約１２０％、約９０％～約１００％、約１００％～約８００％、約１００％～約７５０％、約１００％～約７００％、約１００％～約６５０％、約１００％～約６００％、約１００％～約５５０％、約１００％～約５００％、約１００％～約４５０％、約１００％～約４００％、約１００％～約３５０％、約１００％～約３００％、約１００％～約２８０％、約１００％～約２６０％、約１００％～約２４０％、約１００％～約２２０％、約１００％～約２００％、約１００％～約１８０％、約１００％～約１６０％、約１００％～約１４０％、約１００％～約１２０％、約１２０％～約８００％、約１２０％～約７５０％、約１２０％～約７００％、約１２０
％～約６５０％、約１２０％～約６００％、約１２０％～約５５０％、約１２０％～約５００％、約１２０％～約４５０％、約１２０％～約４００％、約１２０％～約３５０％、約１２０％～約３００％、約１２０％～約２８０％、約１２０％～約２６０％、約１２０％～約２４０％、約１２０％～約２２０％、約１２０％～約２００％、約１２０％～約１８０％、約１２０％～約１６０％、約１２０％～約１４０％、約１４０％～約８００％、約１４０％～約７５０％、約１４０％～約７００％、約１４０％～約６５０％、約１４０％～約６００％、約１４０％～約５５０％、約１４０％～約５００％、約１４０％～約４５０％、約１４０％～約４００％、約１４０％～約３５０％、約１４０％～約３００％、約１４０％～約２８０％、約１４０％～約２６０％、約１４０％～約２４０％、約１４０％～約２２０％、約１４０％～約２００％、約１４０％～約１８０％、約１４０％～約１６０％、約１６０％～約８００％、約１６０％～約７５０％、約１６０％～約７００％、約１６０％～約６５０％、約１６０％～約６００％、約１６０％～約５５０％、約１６０％～約５００％、約１６０％～約４５０％、約１６０％～約４００％、約１６０％～約３５０％、約１６０％～約３００％、約１６０％～約２８０％、約１６０％～約２６０％、約１６０％～約２４０％、約１６０％～約２２０％、約１６０％～約２００％、約１６０％～約１８０％、約１８０％～約８００％、約１８０％～約７５０％、約１８０％～約７００％、約１８０％～約６５０％、約１８０％～約６００％、約１８０％～約５５０％、約１８０％～約５００％、約１８０％～約４５０％、約１８０％～約４００％、約１８０％～約３５０％、約１８０％～約３００％、約１８０％～約２８０％、約１８０％～約２６０％、約１８０％～約２４０％、約１８０％～約２２０％、約１８０％～約２００％、約２００％～約８００％、約２００％～約７５０％、約２００％～約７００％、約２００％～約６５０％、約２００％～約６００％、約２００％～約５５０％、約２００％～約５００％、約２００％～約４５０％、約２００％～約４００％、約２００％～約３５０％、約２００％～約３００％、約２００％～約２８０％、約２００％～約２６０％、約２００％～約２４０％、約２００％～約２２０％、約２２０％～約８００％、約２２０％～約７５０％、約２２０％～約７００％、約２２０％～約６５０％、約２２０％～約６００％、約２２０％～約５５０％、約２２０％～約５００％、約２２０％～約４５０％、約２２０％～約４００％、約２２０％～約３５０％、約２２０％～約３００％、約２２０％～約２８０％、約２２０％～約２６０％、約２２０％～約２４０％、約２４０％～約８００％、約２４０％～約７５０％、約２４０％～約７００％、約２４０％～約６５０％、約２４０％～約６００％、約２４０％～約５５０％、約２４０％～約５００％、約２４０％～約４５０％、約２４０％～約４００％、約２４０％～約３５０％、約２４０％～約３００％、約２４０％～約２８０％、約２４０％～約２６０％、約２６０％～約８００％、約２６０％～約７５０％、約２６０％～約７００％、約２６０％～約６５０％、約２６０％～約６００％、約２６０％～約５５０％、約２６０％～約５００％、約２６０％～約４５０％、約２６０％～約４００％、約２６０％～約３５０％、約２６０％～約３００％、約２６０％～約２８０％、約２８０％～約８００％、約２８０％～約７５０％、約２８０％～約７００％、約２８０％～約６５０％、約２８０％～約６００％、約２８０％～約５５０％、約２８０％～約５００％、約２８０％～約４５０％、約２８０％～約４００％、約２８０％～約３５０％、約２８０％～約３００％、約３００％～約８００％、約３００％～約７５０％、約３００％～約７００％、約３００％～約６５０％、約３００％～約６００％、約３００％～約５５０％、約３００％～約５００％、約３００％～約４５０％、約３００％～約４００％、約３００％～約３５０％、約３５０％～約８００％、約３５０％～約７５０％、約３５０％～約７００％、約３５０％～約６５０％、約３５０％～約６００％、約３５０％～約５５０％、約３５０％～約５００％、約３５０％～約４５０％、約３５０％～約４００％、約４００％～約８００％、約４００％～約７５０％、約４００％～約７００％、約４００％～約６５０％、約４００％～約６００％、約４００％～約５５０％、約４００％～約５００％、約４００％～約４５０％、約４５０％～約８００％、約４５０％～約７５０％、約４５０％～約７００％、約４５０％～約６５０％、約４５０％～約６００％、約４５０％～約５５０％、約４５０％～約５００％、約５００％～約８００％、約５００％～約７５０％、約５００％～約７００％、約５００％～約６５０％、約５００％～約６００％、約５００％～約５５０％、約５５０％～約８００％、約５５０％～約７５０％、約５５０％～約７００％、約５５０％～約６５０％、約５５０％～約６００％、約６００％～約８００％、約６００％～約７５０％、約６００％～約７００％、約６００％～約６５０％、約６５０％～約８００％、約６５０％～約７５０％、約６５０％～約７００％、約７００％～約８００％、約７００％～約７５０％、または約７５０％～約８００％）の増加をもたらし得る（例えば、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれとも接触していない対照における１つ以上のサイトカイン、ケモカイン、細胞傷害性顆粒、および調節分子のレベルと比較して）。
免疫細胞の増殖を誘導するまたは増加させる方法
免疫細胞（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な免疫細胞のうちのいずれか）の増殖を誘導するまたは増加させる方法であって、免疫細胞を、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは本明細書に記載の組成物（例えば、医薬組成物）のうちのいずれかの有効量と接触させることを含む、方法も本明細書に提供される。いくつかの例では、免疫細胞は、インビトロで（例えば、免疫細胞の刺激をもたらすのに十分な条件下で、好適な液体培地中で）接触する。
いくつかの例では、免疫細胞は、対象（例えば、哺乳動物、例えば、ヒト）から以前に得られた。これらの方法のいくつかの実施形態は、接触させるステップの前に、免疫細胞を対象から得ることをさらに含む。
いくつかの例では、免疫細胞をインビボで接触させる。かかる実施形態では、多鎖キメラポリペプチドは、対象（例えば、哺乳動物、例えば、ヒト）に、対象における免疫細胞の刺激をもたらすのに十分な量で投与される。
本明細書に記載の方法のうちのいずれかのいくつかの例では、免疫細胞は、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、またはナチュラルキラー細胞、またはそれらの組み合わせであり得る。
いくつかの例では、免疫細胞は、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている。いくつかの例では、免疫細胞（例えば、本明細書に記載の免疫細胞のうちのいずれか）は、共刺激分子（例えば、ＣＤ２８）を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている。
これらの方法のいくつかの実施形態は、接触させるステップの後に、免疫細胞（例えば、本明細書に記載の免疫細胞のうちのいずれか）に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含み得る。これらの方法のいくつかの実施形態は、接触させるステップの後に、免疫細胞（例えば、本明細書に記載の免疫細胞のうちのいずれか）に、共刺激分子（例えば、ＣＤ２８）をコードする核酸を導入することをさらに含み得る。
これらの方法のいくつかの実施形態は、免疫細胞の治療有効量を、それを必要とする対象（例えば、本明細書に記載の例示的な対象のうちのいずれか）に投与することをさらに含み得る。
いくつかの例では、対象は、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断された対象であり得る。加齢関連疾患または障害の非限定的な例には、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害が挙げられる。
いくつかの例では、対象は、がんを有すると特定または診断された対象であり得る。がんの非限定的な例には、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌が挙げられる。
いくつかの例では、対象は、感染性疾患を有すると診断または特定された対象であり得る。感染性疾患の非限定的な例には、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、またはインフルエンザウイルスによる感染が挙げられる。
免疫細胞の増殖の検出は、当該技術分野で既知の方法、例えば、サイトメトリー（例えば、蛍光支援フローサイトメトリー）、顕微鏡法、および免疫蛍光顕微鏡法を使用して、例えば、多鎖キメラポリペプチドと接触していない試料中の免疫細胞の濃度の増加率を、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかと接触した同様の試料中の免疫細胞の濃度の増加率と比較することによって行われ得る。
他の例では、免疫細胞の増殖は、増殖性免疫細胞によって分泌またはアップレギュレートされる１つ以上のサイトカインまたはケモカインまたは細胞傷害性顆粒または調節分子（例えば、ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２２、ＩＬ－３３、ロイコトリエンＢ４、ＣＣＬ５、ＴＮＦα、グランザイム、パーフォリン、ＴＧＦβ、ＳＴＡＴ３、ＳＴＡＴ４、ＳＴＡＴ５、ＲＯＲΚＴ、ＦＯＸＰ３、およびＧＡＴＡ３のうちの１つ以上）のレベルの増加（例えば、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれとも接触していない対照における１つ以上のサイトカイン、ケモカイン、細胞傷害性顆粒、および調節分子のレベルと比較して）を検出することによって間接的に検出され得る。
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法は、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれとも接触していない同様の対照試料中の免疫細胞の濃度の増加率と比較して、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかと接触した試料中の免疫細胞の濃度の増加率の増加（例えば、約１％～約８００％の増加、または本明細書に記載のこの範囲の部分範囲のうちのいずれか）をもたらし得る。
免疫細胞の分化を誘導する方法
免疫細胞（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な免疫細胞のうちのいずれか）のメモリーまたはメモリー様免疫細胞への分化を誘導する方法であって、免疫細胞を、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは本明細書に記載の組成物（例えば、医薬組成物）のうちのいずれかの有効量と接触させることを含む、方法も本明細書に提供される。いくつかの例では、免疫細胞は、インビトロで（例えば、免疫細胞の刺激をもたらすのに十分な条件下で、好適な液体培地中で）接触する。
いくつかの例では、免疫細胞は、対象（例えば、哺乳動物、例えば、ヒト）から以前に得られた。これらの方法のいくつかの実施形態は、接触させるステップの前に、免疫細胞を対象から得ることをさらに含む。
いくつかの例では、免疫細胞をインビボで接触させる。かかる実施形態では、多鎖キメラポリペプチドは、対象（例えば、哺乳動物、例えば、ヒト）に、対象における免疫細胞の刺激をもたらすのに十分な量で投与される。
本明細書に記載の方法のいずれかのいくつかの例では、免疫細胞は、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、またはナチュラルキラー細胞、またはそれらの組み合わせであり得る。
いくつかの例では、免疫細胞は、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている。いくつかの例では、免疫細胞（例えば、本明細書に記載の免疫細胞のうちのいずれか）は、共刺激分子（例えば、ＣＤ２８）を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている。
いくつかの例では、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは本明細書に記載の組成物（例えば、医薬組成物）のうちのいずれかの有効量が抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体と組み合わせられて、メモリーまたはメモリー様免疫細胞が作製される。
これらの方法のいくつかの実施形態は、接触させるステップの後に、免疫細胞（例えば、本明細書に記載の免疫細胞のうちのいずれか）に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含み得る。これらの方法のいくつかの実施形態は、接触させるステップの後に、免疫細胞（例えば、本明細書に記載の免疫細胞のうちのいずれか）に、共刺激分子（例えば、ＣＤ２８）をコードする核酸を導入することをさらに含み得る。
これらの方法のいくつかの実施形態は、免疫細胞の治療有効量を、それを必要とする対象（例えば、本明細書に記載の例示的な対象のうちのいずれか）に投与することをさらに含み得る。
いくつかの例では、対象は、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断された対象であり得る。加齢関連疾患または障害の非限定的な例には、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害が挙げられる。
いくつかの例では、対象は、がんを有すると特定または診断された対象であり得る。がんの非限定的な例には、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌が挙げられる。
いくつかの例では、対象は、感染性疾患を有すると診断または特定された対象であり得る。感染性疾患の非限定的な例には、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、またはインフルエンザウイルスによる感染が挙げられる。
いくつかの例では、免疫細胞は、ＮＫ細胞であり、メモリーＮＫ細胞の検出は、例えば、ＩＬ－１２、ＩＬ－１８、ＩＬ－３３、ＣＤ２５、ＣＤ６９、ＣＤ６２Ｌ、ＳＴＡＴ４、Ｚｂｔｂ３２、ＤＮＡＭ－１、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＢＩＭ、Ｎｏｘａ、ＳＯＣＳ１、ＢＮＩＰ３、ＢＮＩＰ３Ｌ、ＩＦＮ－γ、ＣＸＣＬ１６、ＣＸＣＲ６、ＮＫＧ２Ｄ、ＴＲＡＩＬ、ＣＤ４９、Ｌｙ４９Ｄ、ＣＤ４９ｂ、およびＬｙ７９Ｈのうちの１つ以上のレベルの検出を含み得る。メモリーＮＫ細胞およびそれを検出する方法の説明は、Ｏ’Ｓｕｌｌｉｖａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ４３：６３４－６４５，２０１５に記載されている。
いくつかの例では、免疫細胞は、Ｔ細胞であり、メモリーＴ細胞の検出は、例えば、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＣＲ７、Ｌ－セレクチン（ＣＤ６２Ｌ）、ＣＤ４４、ＣＤ４５ＲＡ、インテグリンαｅβ７、ＣＤ４３、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＩＬ－７Ｒα、ＣＤ９５、ＩＬ－２Ｒβ、ＣＸＣＲ３、およびＬＦＡ－１のうちの１つ以上の発現レベルの検出を含み得る。いくつかの例では、免疫細胞は、Ｂ細胞であり、メモリーＢ細胞の検出は、例えば、ＣＤ２７の発現レベルの検出を含み得る。メモリーまたはメモリー様免疫細胞の他のタイプおよびマーカーは、当該技術分野で既知である。
治療法
治療を必要とする対象（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な対象のうちのいずれか）を治療する方法であって、対象に、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは本明細書に記載の組成物（例えば、医薬組成物）のうちのいずれかの治療有効量を投与することを含む、方法も本明細書に提供される。
これらの方法のいくつかの実施形態では、対象は、がんを有すると特定または診断されている。がんの非限定的な例には、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌が挙げられる。いくつかの実施形態では、これらの方法は、対象におけるがんの１つ以上の症状の数、重症度、または頻度の減少をもたらし得る（例えば、治療前の対象におけるがんの１つ以上の症状の数、重症度、または頻度と比較して）。いくつかの実施形態では、これらの方法は、対象における１つ以上の固形腫瘍の体積の減少（例えば、約１％減少～約９９％減少、約１％減少～約９５％減少、約１％減少～約９０％減少、約１％減少～約８５％減少、約１％減少～約８０％減少、約１％減少～約７５％減少、約１％減少～約７０％減少、約１％減少～約６５％減少、約１％減少～約６０％減少、約１％減少～約５５％減少、約１％減少～約５０％減少、約１％減少～約４５％減少、約１％減少～約４０％減少、約１％減少～約３５％減少、約１％減少～約３０％減少、約１％減少～約２５％減少、約１％減少～約２０％減少、約１％減少～約１５％減少、約１％減少～約１０％減少、約１％減少～約５％減少、約５％減少～約９９％減少、約５％減少～約９５％減少、約５％減少～約９０％減少、約５％減少～約８５％減少、約５％減少～約８０％減少、約５％減少～約７５％減少、約５％減少～約７０％減少、約５％減少～約６５％減少、約５％減少～約６０％減少、約５％減少～約５５％減少、約５％減少～約５０％減少、約５％減少～約４５％減少、約５％減少～約４０％減少、約５％減少～約３５％減少、約５％減少～約３０％減少、約５％減少～約２５％減少、約５％減少～約２０％減少、約５％減少～約１５％減少、約５％減少～約１０％減少、約１０％減少～約９９％減少、約１０％減少～約９５％減少、約１０％減少～約９０％減少、約１０％減少～約８５％減少、約１０％減少～約８０％減少、約１０％減少～約７５％減少、約１０％減少～約７０％減少、約１０％減少～約６５％減少、約１０％減少～約６０％減少、約１０％減少～約５５％減少、約１０％減少～約５０％減少、約１０％減少～約４５％減少、約１０％減少～約４０％減少、約１０％減少～約３５％減少、約１０％減少～約３０％減少、約１０％減少～約２５％減少、約１０％減少～約２０％減少、約１０％減少～約１５％減少、約１５％減少～約９９％減少、約１５％減少～約９５％減少、約１５％減少～約９０％減少、約１５％減少～約８５％減少、約１５％減少～約８０％減少、約１５％減少～約７５％減少、約１５％減少～約７０％減少、約１５％減少～約６５％減少、約１５％減少～約６０％減少、約１５％減少～約５５％減少、約１５％減少～約５０％減少、約１５％減少～約４５％減少、約１５％減少～約４０％減少、約１５％減少～約３５％減少、約１５％減少～約３０％減少、約１５％減少～約２５％減少、約１５％減少～約２０％減少、約２０％減少～約９９％減少、約２０％減少～約９５％減少、約２０％減少～約９０％減少、約２０％減少～約８５％減少、約２０％減少～約８０％減少、約２０％減少～約７５％減少、約２０％減少～約７０％減少、約２０％減少～約６５％減少、約２０％減少～約６０％減少、約２０％減少～約５５％減少、約２０％減少～約５０％減少、約２０％減少～約４５％減少、約２０％減少～約４０％減少、約２０％減少～約３５％減少、約２０％減少～約３０％減少、約２０％減少～約２５％減少、約２５％減少～約９９％減少、約２５％減少～約９５％減少、約２５％減少～約９０％減少、約２５％減少～約８５％減少、約２５％減少～約８０％減少、約２５％減少～約７５％減少、約２５％減少～約７０％減少、約２５％減少～約６５％減少、約２５％減少～約６０％減少、約２５％減少～約５５％減少、約２５％減少～約５０％減少、約２５％減少～約４５％減少、約２５％減少～約４０％減少、約２５％減少～約３５％減少、約２５％減少～約３０％減少、約３０％減少～約９９％減少、約３０％減少～約９５％減少、約３０％減少～約９０％減少、約３０％減少～約８５％減少、約３０％減少～約８０％減少、約３０％減少～約７５％減少、約３０％減少～約７０％減少、約３０％減少～約６５％減少、約３０％減少～約６０％減少、約３０％減少～約５５％減少、約３０％減少～約５０％減少、約３０％減少～約４５％減少、約３０％減少～約４０％減少、約３０％減少～約３５％減少、約３５％減少～約９９％減少、約３５％減少～約９５％減少、約３５％減少～約９０％減少、約３５％減少～約８５％減少、約３５％減少～約８０％減少、約３５％減少～約７５％減少、約３５％減少～約７０％減少、約３５％減少～約６５％減少、約３５％減少～約６０％減少、約３５％減少～約５５％減少、約３５％減少～約５０％減少、約３５％減少～約４５％減少、約３５％減少～約４０％減少、約４０％減少～約９９％減少、約４０％減少～約９５％減少、約４０％減少～約９０％減少、約４０％減少～約８５％減少、約４０％減少～約８０％減少、約４０％減少～約７５％減少、約４０％減少～約７０％減少、約４０％減少～約６５％減少、約４０％減少～約６０％減少、約４０％減少～約５５％減少、約４０％減少～約５０％減少、約４０％減少～約４５％減少、約４５％減少～約９９％減少、約４５％減少～約９５％減少、約４５％減少～約９０％減少、約４５％減少～約８５％減少、約４５％減少～約８０％減少、約４５％減少～約７５％減少、約４５％減少～約７０％減少、約４５％減少～約６５％減少、約４５％減少～約６０％減少、約４５％減少～約５５％減少、約４５％減少～約５０％減少、約５０％減少～約９９％減少、約５０％減少～約９５％減少、約５０％減少～約９０％減少、約５０％減少～約８５％減少、約５０％減少～約８０％減少、約５０％減少～約７５％減少、約５０％減少～約７０％減少、約５０％減少～約６５％減少、約５０％減少～約６０％減少、約５０％減少～約５５％減少、約５５％減少～約９９％減少、約５５％減少～約９５％減少、約５５％減少～約９０％減少、約５５％減少～約８５％減少、約５５％減少～約８０％減少、約５５％減少～約７５％減少、約５５％減少～約７０％減少、約５５％減少～約６５％減少、約５５％減少～約６０％減少、約６０％減少～約９９％減少、約６０％減少～約９５％減少、約６０％減少～約９０％減少、約６０％減少～約８５％減少、約６０％減少～約８０％減少、約６０％減少～約７５％減少、約６０％減少～約７０％減少、約６０％減少～約６５％減少、約６５％減少～約９９％減少、約６５％減少～約９５％減少、約６５％減少～約９０％減少、約６５％減少～約８５％減少、約６５％減少～約８０％減少、約６５％減少～約７５％減少、約６５％減少～約７０％減少、約７０％減少～約９９％減少、約７０％減少～約９５％減少、約７０％減少～約９０％減少、約７０％減少～約８５％減少、約７０％減少～約８０％減少、約７０％減少～約７５％減少、約７５％減少～約９９％減少、約７５％減少～約９５％減少、約７５％減少～約９０％減少、約７５％減少～約８５％減少、約７５％減少～約８０％減少、約８０％減少～約９９％減少、約８０％減少～約９５％減少、約８０％減少～約９０％減少、約８０％減少～約８５％減少、約８５％減少～約９９％減少、約８５％減少～約９５％減少、約８５％減少～約９０％減少、約９０％減少～約９９％減少、約９０％減少～約９５％減少、または約９５％減少～約９９％減少）をもたらし得る（例えば、治療前または治療開始時の１つ以上の固形腫瘍の体積と比較して）。いくつかの実施形態では、これらの方法は、対象における転移を発症するリスクまたは１つ以上の追加の転移を発症するリスクを減少させることができる（例えば、約１％減少～約９９％減少、または本明細書に記載のこの範囲の部分範囲のうちのいずれか）（例えば、治療前の対象または異なる治療が施された同様の対象もしくは対象集団における転移を発症するリスクまたは１つ以上の追加の転移を発症するリスクと比較して）。
これらの方法のいくつかの例では、対象は、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている。加齢関連疾患および状態の非限定的な例には、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害が挙げられる。いくつかの例では、これらの方法は、対象における加齢関連疾患または状態の１つ以上の症状の数、重症度、または頻度の減少をもたらし得る（例えば、治療前の対象における加齢関連疾患または状態の１つ以上の症状の数、重症度、または頻度と比較して）。いくつかの例では、これらの方法は、例えば、治療前の対象における老化細胞の数と比較して、対象における老化細胞の数の減少をもたらし得る（例えば、約１％減少～約９９％減少、約１％減少～約９５％減少、約１％減少～約９０％減少、約１％減少～約８５％減少、約１％減少～約８０％減少、約１％減少～約７５％減少、約１％～約７０％減少、約１％減少～約６５％減少、約１％減少～約６０％減少、約１％減少～約５５％減少、約１％減少～約５０％減少、約１％減少～約４５％減少、約１％減少～約４０％減少、約１％減少～約３５％減少、約１％減少～約３０％減少、約１％減少～約２５％減少、約１％減少～約２０％減少、約１％減少～約１５％減少、約１％減少～約１０％減少、約１％減少～約５％減少、約５％減少～約９９％減少、約５％減少～約９５％減少、約５％減少～約９０％減少、約５％減少～約８５％減少、約５％減少～約８０％減少、約５％減少～約７５％減少、約５％～約７０％減少、約５％減少～約６５％減少、約５％減少～約６０％減少、約５％減少～約５５％減少、約５％減少～約５０％減少、約５％減少～約４５％減少、約５％減少～約４０％減少、約５％減少～約３５％減少、約５％減少～約３０％減少、約５％減少～約２５％減少、約５％減少～約２０％減少、約５％減少～約１５％減少、約５％減少～約１０％減少、約１０％減少～約９９％減少、約１０％減少～約９５％減少、約１０％減少～約９０％減少、約１０％減少～約８５％減少、約１０％減少～約８０％減少、約１０％減少～約７５％減少、約１０％～約７０％減少、約１０％減少～約６５％減少、約１０％減少～約６０％減少、約１０％減少～約５５％減少、約１０％減少～約５０％減少、約１０％減少～約４５％減少、約１０％減少～約４０％減少、約１０％減少～約３５％減少、約１０％減少～約３０％減少、約１０％減少～約２５％減少、約１０％減少～約２０％減少、約１０％減少～約１５％減少、約１５％減少～約９９％減少、約１５％減少～約９５％減少、約１５％減少～約９０％減少、約１５％減少～約８５％減少、約１５％減少～約８０％減少、約１５％減少～約７５％減少、約１５％～約７０％減少、約１５％減少～約６５％減少、約１５％減少～約６０％減少、約１５％減少～約５５％減少、約１５％減少～約５０％減少、約１５％減少～約４５％減少、約１５％減少～約４０％減少、約１５％減少～約３５％減少、約１５％減少～約３０％減少、約１５％減少～約２５％減少、約１５％減少～約２０％減少、約２０％減少～約９９％減少、約２０％減少～約９５％減少、約２０％減少～約９０％減少、約２０％減少～約８５％減少、約２０％減少～約８０％減少、約２０％減少～約７５％減少、約２０％～約７０％減少、約２０％減少～約６５％減少、約２０％減少～約６０％減少、約２０％減少～約５５％減少、約２０％減少～約５０％減少、約２０％減少～約４５％減少、約２０％減少～約４０％減少、約２０％減少～約３５％減少、約２０％減少～約３０％減少、約２０％減少～約２５％減少、約２５％減少～約９９％減少、約２５％減少～約９５％減少、約２５％減少～約９０％減少、約２５％減少～約８５％減少、約２５％減少～約８０％減少、約２５％減少～約７５％減少、約２５％～約７０％減少、約２５％減少～約６５％減少、約２５％減少～約６０％減少、約２５％減少～約５５％減少、約２５％減少～約５０％減少、約２５％減少～約４５％減少、約２５％減少～約４０％減少、約２５％減少～約３５％減少、約２５％減少～約３０％減少、約３０％減少～約９９％減少、約３０％減少～約９５％減少、約３０％減少～約９０％減少、約３０％減少～約８５％減少、約３０％減少～約８０％減少、約３０％減少～約７５％減少、約３０％～約７０％減少、約３０％減少～約６５％減少、約３０％減少～約６０％減少、約３０％減少～約５５％減少、約３０％減少～約５０％減少、約３０％減少～約４５％減少、約３０％減少～約４０％減少、約３０％減少～約３５％減少、約３５％減少～約９９％減少、約３５％減少～約９５％減少、約３５％減少～約９０％減少、約３５％減少～約８５％減少、約３５％減少～約８０％減少、約３５％減少～約７５％減少、約３５％～約７０％減少、約３５％減少～約６５％減少、約３５％減少～約６０％減少、約３５％減少～約５５％減少、約３５％減少～約５０％減少、約３５％減少～約４５％減少、約３５％減少～約４０％減少、約４０％減少～約９９％減少、約４０％減少～約９５％減少、約４０％減少～約９０％減少、約４０％減少～約８５％減少、約４０％減少～約８０％減少、約４０％減少～約７５％減少、約４０％～約７０％減少、約４０％減少～約６５％減少、約４０％減少～約６０％減少、約４０％減少～約５５％減少、約４０％減少～約５０％減少、約４０％減少～約４５％減少、約４５％減少～約９９％減少、約４５％減少～約９５％減少、約４５％減少～約９０％減少、約４５％減少～約８５％減少、約４５％減少～約８０％減少、約４５％減少～約７５％減少、約４５％～約７０％減少、約４５％減少～約６５％減少、約４５％減少～約６０％減少、約４５％減少～約５５％減少、約４５％減少～約５０％減少、約５０％減少～約９９％減少、約５０％減少～約９５％減少、約５０％減少～約９０％減少、約５０％減少～約８５％減少、約５０％減少～約８０％減少、約５０％減少～約７５％減少、約５０％～約７０％減少、約５０％減少～約６５％減少、約５０％減少～約６０％減少、約５０％減少～約５５％減少、約５５％減少～約９９％減少、約５５％減少～約９５％減少、約５５％減少～約９０％減少、約５５％減少～約８５％減少、約５５％減少～約８０％減少、約５５％減少～約７５％減少、約５５％～約７０％減少、約５５％減少～約６５％減少、約５５％減少～約６０％減少、約６０％減少～約９９％減少、約６０％減少～約９５％減少、約６０％減少～約９０％減少、約６０％減少～約８５％減少、約６０％減少～約８０％減少、約６０％減少～約７５％減少、約６０％～約７０％減少、約６０％減少～約６５％減少、約６５％減少～約９９％減少、約６５％減少～約９５％減少、約６５％減少～約９０％減少、約６５％減少～約８５％減少、約６５％減少～約８０％減少、約６５％減少～約７５％減少、約６５％～約７０％減少、約７０％減少～約９９％減少、約７０％減少～約９５％減少、約７０％減少～約９０％減少、約７０％減少～約８５％減少、約７０％減少～約８０％減少、約７０％減少～約７５％減少、約７５％減少～約９９％減少、約７５％減少～約９５％減少、約７５％減少～約９０％減少、約７５％減少～約８５％減少、約７５％減少～約８０％減少、約８０％減少～約９９％減少、約８０％減少～約９５％減少、約８０％減少～約９０％減少、約８０％減少～約８５％減少、約８５％減少～約９９％減少、約８５％減少～約９５％減少、約８５％減少～約９０％減少、約９０％減少～約９９％減少、約９０％減少～約９５％減少、または約９５％減少～約９９％減少）（例えば、対象における加齢関連疾患または障害に関与しているおよび／または関係付けられている１つ以上の特定の組織中の老化細胞の数の減少）。
これらの方法のいくつかの例では、対象は、感染性疾患を有すると診断または特定されている。感染性疾患の非限定的な例には、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、およびインフルエンザウイルスによる感染が挙げられる。いくつかの実施形態では、これらの方法は、対象における感染力価（例えば、ウイルス力価）の減少をもたらし得る（例えば、治療前の対象における感染力価と比較して）。いくつかの実施形態では、これらの方法は、対象における感染性疾患（例えば、ウイルス感染）の１つ以上の症状の数、重症度、または頻度の減少をもたらし得る（例えば、治療前の対象における感染性疾患の１つ以上の症状の数、重症度、または頻度と比較して）。
「対象」という用語は、任意の哺乳動物を指す。いくつかの実施形態では、対象または「治療を必要とする対象」は、イヌ科動物（例えば、イヌ）、ネコ科動物（例えば、ネコ）、ウマ科動物（例えば、ウマ）、ヒツジ、ウシ、ブタ、ヤギ、霊長類、例えば、サル（ｓｉｍｉａｎ）（例えば、サル（ｍｏｎｋｅｙ）（例えば、マーモセット、ヒヒ）、もしくは類人猿（例えば、ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、またはテナガザル）、もしくはヒト、または齧歯類（例えば、マウス、テンジクネズミ、ハムスター、またはラット）であり得る。いくつかの実施形態では、対象または「治療を必要とする対象」は、非ヒト哺乳動物であり得、特にヒトにおける治療効果を実証するためにモデルとして従来使用されている哺乳動物（例えば、マウス、ラパイン、ブタ、イヌ、または霊長類動物）が用いられ得る。
がん細胞、感染細胞、または老化細胞を死滅させる方法
がん細胞（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なタイプのがんのうちのいずれか）、感染細胞（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的なウイルスのうちのいずれかによる感染）、または老化細胞（例えば、老化がん細胞、老化線維芽細胞、または老化内皮細胞）の死滅を必要とする対象（例えば、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の例示的な対象のうちのいずれか）におけるそれらを死滅させる方法であって、対象に、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは本明細書に記載の組成物（例えば、医薬組成物）のうちのいずれかの治療有効量を投与することを含む、方法も本明細書に提供される。
これらの方法のいくつかの実施形態では、対象は、がんを有すると特定または診断されている。がんの非限定的な例には、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌が挙げられる。
これらの方法のいくつかの例では、対象は、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている。加齢関連疾患および状態の非限定的な例には、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害が挙げられる。
これらの方法のいくつかの例では、対象は、感染性疾患を有すると診断または特定されている。感染性疾患の非限定的な例には、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、およびインフルエンザウイルスによる感染が挙げられる。
老化細胞
老化は、表現型の変化、アポトーシスへの耐性、および損傷を感知するシグナル伝達経路の活性化を伴う不可逆的な成長停止の一形態である。細胞老化は、増殖する能力を失った培養ヒト線維芽細胞で最初に説明され、約５０回の集団倍加（ヘイフリック限界と称される）後に永久停止に達した。老化は、酸化的ストレスおよび遺伝毒性ストレス、ＤＮＡ損傷、テロメア摩滅、発がん性活性化、ミトコンドリア機能障害、または化学療法剤を含む、広範囲の内因性および外因性傷害によって誘導され得るストレス応答とみなされる。
老化細胞は、代謝的に活性を維持し、それらの分泌表現型を介して組織の止血、疾患、加齢に影響を及ぼし得る。老化は、生理学的プロセスとみなされており、創傷治癒、組織の恒常性、再生、および線維症の調節を促進する上で重要である。例えば、老化細胞の一過性の誘導は、治癒中に観察され、創傷の消散に寄与する。恐らく、老化の最も重要な役割の１つは、腫瘍抑制におけるその役割である。しかしながら、老化細胞の蓄積は、加齢および加齢関連疾患および状態も促進する。老化の表現型は、慢性炎症反応も引き起こし、その結果、慢性炎症状態を増強して、腫瘍の成長を促進する可能性がある。老化と加齢との間の関連性は、当初、老化細胞が加齢組織に蓄積するという観察に基づいていた。トランスジェニックモデルの使用により、多くの加齢関連病状において老化細胞を体系的に検出することが可能になった。老化細胞を選択的に排除するための戦略は、老化細胞が実際に加齢および関連病状において因果的役割を果たすことができることを実証している。
老化細胞は、形態、クロマチン構成、遺伝子発現、および代謝の変化を含む重要な特有の特性を示す。細胞老化に関連するいくつかの生化学的および機能的特性、例えば、（ｉ）サイクリン依存性キナーゼの阻害剤であるｐ１６およびｐ２１の発現の増加、（ｉｉ）リソソーム活性のマーカーである老化関連β－ガラクトシダーゼの存在、（ｉｉｉ）老化関連ヘテロクロマチン病巣の出現およびラミンＢ１レベルのダウンレギュレーション、（ｉｖ）抗アポトーシスＢＣＬファミリータンパク質の発現の増加によって引き起こされるアポトーシスに対する耐性、および（ｖ）ＣＤ２６（ＤＰＰ４）、ＣＤ３６（スカベンジャー受容体）、フォークヘッドボックス４（ＦＯＸＯ４）、および分泌キャリア膜タンパク質４（ＳＣＡＭＰ４）のアップレギュレーションが存在する。老化細胞は、炎症特性、いわゆる老化関連分泌表現型（ＳＡＳＰ）も発現する。ＳＡＳＰを介して、老化細胞は、細胞自律的様式で作動して老化を強化し（オートクリン効果）、微小環境と通信して修飾する（パラクリン効果）、広範囲の炎症性サイトカイン（ＩＬ－６、ＩＬ－８）、成長因子（ＴＧＦ－β）、ケモカイン（ＣＣＬ－２）、およびマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－９）を産生する。ＳＡＳＰ因子は、老化細胞の免疫介在性クリアランスである老化監視をトリガすることによって腫瘍抑制に寄与することができる。しかしながら、慢性炎症も腫瘍形成の既知の要因であり、累積証拠は、慢性ＳＡＳＰががんおよび加齢関連疾患を後押しする可能性もあることを示す。
老化細胞の分泌プロファイルは、状況依存的である。例えば、ヒト線維芽細胞における様々なミトコンドリア機能障害によって誘導されるミトコンドリア機能障害関連老化（ＭｉＤＡＳ）は、ＩＬ－１依存性炎症性因子が不足したＳＡＳＰの出現をもたらした。ＮＡＤ＋／ＮＡＤＨ比の減少は、ｐ５３の活性化によりＭｉＤＡＳを誘導したＡＭＰＫシグナル伝達を活性化した。結果として、ｐ５３は炎症促進性ＳＡＳＰの重要な誘導因子であるＮＦ－κＢシグナル伝達を阻害した。対照的に、ヒト細胞における持続的なＤＮＡ損傷によって引き起こされた細胞老化は、炎症性ＳＡＳＰを誘導し、これは、運動失調－毛細血管拡張症変異（ＡＴＭ）キナーゼの活性化に依存したが、ｐ５３の活性化には依存しなかった。具体的には、ＩＬ－６およびＩＬ－８の発現レベルおよび分泌レベルが増加した。異所性発現ｐ１６ＩＮＫ４ａおよびｐ２１ＣＩＰ１によって引き起こされる細胞老化が、炎症性ＳＡＳＰなしでヒト線維芽細胞における老化表現型を誘導することも実証されており、成長停止自体はＳＡＳＰを刺激しなかったことを示している。
老化の最も明確な特徴の１つは、安定した成長停止である。これは、２つの重要な経路であるｐ１６／Ｒｂおよびｐ５３／ｐ２１によって達成され、これらはいずれも腫瘍抑制の中心である。ＤＮＡ損傷は、（１）クロマチンにおけるγＨ２Ａｘ（ヒストンコーディング遺伝子）および５３ＢＰ１（ＤＮＡ損傷応答に関与）の高沈着（これは最終的にｐ５３活性化をもたらすキナーゼカスケードの活性化につながる）、および（２）ｐ１６ＩＮＫ４ａおよびＡＲＦ（いずれもＣＤＫＮ２Ａによってコードされる）ならびにＰ１５ＩＮＫ４ｂ（ＣＤＫＮ２Ｂによってコードされる）の活性化（ｐ５３はサイクリン依存性キナーゼ阻害剤（ｐ２１）の転写を誘導し、ｐ１６ＩＮＫ４ａおよびｐ１５ＩＮＫ４ｂの両方とともに、細胞周期進行のために遺伝子を遮断する（ＣＤＫ４およびＣＤＫ６））をもたらす。これは、最終的に網膜芽細胞腫タンパク質（Ｒｂ）の低リン酸化およびＧ１期での細胞周期停止につながる。
老化細胞を選択的に死滅させることにより、正常な加齢との関連でマウスの健康スパンが大幅に改善され、加齢関連疾患またはがん療法の結果が改善されることが示されている（Ｏｖａｄｙａ，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．１２８（４）：１２４７－１２５４，２０１８）。自然界では、老化細胞は、通常、自然免疫細胞によって除去される。老化の誘導は、損傷／変化した細胞の潜在的な増殖および形質転換を阻止するのみならず、主にナチュラルキラー（ＮＫ）細胞（ＩＬ－１５およびＣＣＬ２等）およびマクロファージ（ＣＦＳ－１およびＣＣＬ２等）の化学誘引物質として機能するＳＡＳＰ因子の産生により組織修復も支持する。これらの自然免疫細胞は、ストレスを受けた細胞を排除するための免疫監視メカニズムを媒介する。老化細胞は、通常、ストレス誘導性リガンドのファミリーに属するＮＫ細胞活性化受容体ＮＫＧ２ＤおよびＤＮＡＭ－１リガンドをアップレギュレートし、これは、感染性疾患および悪性腫瘍に対する最前線の免疫防御の重要な要素である。受容体が活性化されると、ＮＫ細胞は、それらの細胞溶解機構を介して老化細胞の死を特異的に誘導することができる。老化細胞の免疫監視におけるＮＫ細胞の役割は、肝線維症（Ｓａｇｉｖ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ３２（１５）：１９７１－１９７７，２０１３）、肝細胞癌（Ｉａｎｎｅｌｌｏ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２１０（１０）：２０５７－２０６９，２０１３）、多発性骨髄腫（Ｓｏｒｉａｎｉ，Ｂｌｏｏｄ １１３（１５）：３５０３－３５１１，２００９）、およびメバロン酸経路の機能傷害によってストレスを受けた神経膠腫細胞（Ｃｉａｇｌｉａ，Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ １４２（１）：１７６－１９０，２０１８）において指摘されている。子宮内膜細胞は、急性細胞老化を受け、脱落膜細胞に分化しない。分化した脱落膜細胞は、ＩＬ－１５を分泌し、それにより、子宮ＮＫ細胞を動員して、未分化老化細胞を標的として排除し、子宮内膜の再構築および若返りを助ける（Ｂｒｉｇｈｔｏｎ，Ｅｌｉｆｅ ６：ｅ３１２７４，２０１７）。同様のメカニズムを用いて、肝線維症の間に、ｐ５３を発現する老化肝衛星細胞は、老化細胞除去活性を呈する常在性Ｋｕｐｆｅｒマクロファージおよび新たに浸潤したマクロファージの極性を炎症促進性Ｍ１表現型に向かって歪めた。Ｆ４／８０＋マクロファージが、分娩後の子宮機能を維持するためにマウス子宮老化細胞のクリアランスに重要な役割を果たすことが示されている。
老化細胞は、主に、ＮＫＧ２Ｄ（ＮＫ細胞で発現）、ケモカイン、および他のＳＡＳＰ因子に対するリガンドをアップレギュレートすることによってＮＫ細胞を動員する。肝線維症のインビボモデルは、活性化されたＮＫ細胞による老化細胞の効果的なクリアランスを示している（Ｋｒｉｚｈａｎｏｖｓｋｙ，Ｃｅｌｌ １３４（４）：６５７－６６７，２００８）。研究では、肝線維症（Ｋｒｉｚｈａｎｏｖｓｋｙ，Ｃｅｌｌ １３４（４）：６５７－６６７，２００８）、変形性関節症（Ｘｕ，Ｊ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ Ａ Ｂｉｏｌ Ｓｃｉ Ｍｅｄ Ｓｃｉ ７２（６）：７８０－７８５，２０１７）、およびパーキンソン病（Ｃｈｉｎｔａ，Ｃｅｌｌ Ｒｅｐ ２２（４）：９３０－９４０，２０１８）を含む老化を研究するための様々なモデルが説明されている。老化細胞を研究するための動物モデルは、Ｋｒｉｚｈａｎｏｖｓｋｙ，Ｃｅｌｌ １３４（４）：６５７－６６７，２００８、Ｂａｋｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ ４７９（７３７２）：２３２－２３６，２０１１、Ｆａｒｒ，Ｎａｔ Ｍｅｄ ２３（９）：１０７２－１０７９，２０１７、Ｂｏｕｒｇｅｏｉｓ，ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ ５９２（１２）：２０８３－２０９７，２０１８、Ｘｕ，Ｎａｔ Ｍｅｄ ２４（８）：１２４６－１２５６，２０１８）で説明されている。
追加の治療薬
本明細書に記載の方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態は、１つ以上の追加の治療薬の治療有効量を対象（例えば、本明細書に記載の対象のうちのいずれか）に投与することをさらに含み得る。１つ以上の追加の治療薬は、多鎖キメラポリペプチド（例えば、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれか）または免疫細胞と実質的に同時に対象に投与され得る（例えば、単一製剤としてまたは２つ以上の製剤として対象に投与され得る）。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の治療薬は、多鎖キメラポリペプチド（例えば、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれか）または免疫細胞を投与する前に、対象に投与され得る。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の治療薬は、多鎖キメラポリペプチド（例えば、本明細書に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれか）または免疫細胞を対象に投与した後に、対象に投与され得る。
追加の治療薬の非限定的な例には、抗がん剤、活性化受容体アゴニスト、免疫チェックポイント阻害剤、ＨＬＡ特異的阻害受容体を遮断するための薬剤、グリコーゲンシンターゼキナーゼ（ＧＳＫ）３阻害剤、および抗体が挙げられる。
抗がん剤の非限定的な例には、代謝拮抗薬（例えば、５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）、６－メルカプトプリン（６－ＭＰ）、カペシタビン、シタラビン、フロクスウリジン、フルダラビン、ゲムシタビン、ヒドロキシカルバミド、メトトレキサート、６－チオグアニン、クラドリビン、ネララビン、ペントスタチン、またはペメトレキセド）、植物アルカロイド（例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、カンプトセシン、９－メトキシカンプトセシン、コロナリジン、タキソール、ナウクレアオラル（ｎａｕｃｌｅａｏｒａｌ）、ジプレニル化インドールアルカロイド、モンタミン、シシュキニイン、プロトベルベリン、ベルベリン、サンギナリン、ケレリトリン、ケリドニン、リリオデニン、クリボリン、β－カルボリン、アントフィン、チロホリン、クリプトレピン、ネオクリプトレピン、コリノリン、サンパンギン、カルバゾール、クリナミン、モンタニン、エリプチシン、パクリタキセル、ドセタキセル、エトポシド、テニポシド、イリノテカン、トポテカン、またはアクリドンアルカロイド）、プロテアソーム阻害剤（例えば、ラクタシスチン、ジスルフィラム、エピガロカテキン－３－ガレート、マリゾミブ（サリノスポラミドＡ）、オプロゾミブ（ＯＮＸ－０９１２）、デランゾミブ（ＣＥＰ－１８７７０）、エポキソミシン、ＭＧ１３２、ベータ－ヒドロキシベータ－メチルブチラート、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、またはイキサゾミブ）、抗腫瘍抗生物質（例えば、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、ミトキサントロン、イダルビシン、アクチノマイシン、プリカマイシン、マイトマイシン、またはブレオマイシン）、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（例えば、ボリノスタット、パノビノスタット、ギビノスタット、アベキシノスタット、デプシペプチド、エンチノスタット、フェニルブチラート、バルプロ酸、トリコスタチンＡ、ダシノスタット、モセチノスタット、プラシノスタット、ニコチンアミド、カンビノール、テノビン１、テノビン６、シルチノール、リコリノスタット、テフィノスタット、ケベトリン、キシノスタット、レスミノスタット、タセジナリン、チダミド、またはセリシスタット）、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、アキシチニブ、ダサチニブ、エンコラフィニブ、エルロチニブ、イマチニブ、ニロチニブ、パゾパニブ、およびスニチニブ）、および化学療法剤（例えば、オールトランスレチノイン酸、アザシチジン、アザチオプリン、ドキシフルリジン、エポチロン、ヒドロキシウレア、イマチニブ、テニポシド、チオグアニン、バルルビシン、ベムラフェニブ、およびレナリドミド）が挙げられる。化学療法剤の追加の例には、アルキル化剤、例えば、メクロレタミン、シクロホスファミド、クロラムブシル、メルファラン、イホスファミド、チオテパ、ヘキサメチルメラミン、ブスルファン、アルトレタミン、プロカルバジン、ダカルバジン、テモゾロミド、カルムスチン、ルムスチン、ストレプトゾシン、カルボプラチン、シスプラチン、およびオキサリプラチンが挙げられる。
活性化受容体アゴニストの非限定的な例には、抗ＣＤ１６抗体（例えば、抗ＣＤ１６／ＣＤ３０二重特異性モノクローナル抗体（ＢｉＭＡｂ））およびＦｃベースの融合タンパク質を含む、ＮＫ細胞の細胞傷害性を活性化および増強する活性化受容体のための任意のアゴニストが挙げられる。チェックポイント阻害剤の非限定的な例には、抗ＰＤ－１抗体（例えば、ＭＥＤＩ０６８０）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（例えば、ＢＣＤ－１３５、ＢＧＢ－Ａ３３３、ＣＢＴ－５０２、ＣＫ－３０１、ＣＳ１００１、ＦＡＺ０５３、ＫＮ０３５、ＭＤＸ－１１０５、ＭＳＢ２３１１、ＳＨＲ－１３１６、抗ＰＤ－Ｌ１／ＣＴＬＡ－４二重特異性抗体ＫＮ０４６、抗ＰＤ－Ｌ１／ＴＧＦβＲＩＩ融合タンパク質Ｍ７８２４、抗ＰＤ－Ｌ１／ＴＩＭ－３二重特異性抗体ＬＹ３４１５２４４、アテゾリズマブ、またはアベルマブ）、抗ＴＩＭ３抗体（例えば、ＴＳＲ－０２２、Ｓｙｍ０２３、またはＭＢＧ４５３）、および抗ＣＴＬＡ－４抗体（例えば、ＡＧＥＮ１８８４、ＭＫ－１３０８、または抗ＣＴＬＡ－４／ＯＸ４０二重特異性抗体ＡＴＯＲ－１０１５）が挙げられる。ＨＬＡ特異的阻害受容体を遮断するための薬剤の非限定的な例には、モナリズマブ（例えば、抗ＨＬＡ－Ｅ ＮＫＧ２Ａ阻害受容体モノクローナル抗体）が挙げられる。ＧＳＫ３阻害剤の非限定的な例には、チデグルシブまたはＣＨＩＲ９９０２１が挙げられる。追加の治療薬として使用され得る抗体の非限定的な例には、抗ＣＤ２６抗体（例えば、ＹＳ１１０）、抗ＣＤ３６抗体、およびＮＫ細胞上のＦｃ受容体（例えば、ＣＤ１６）に結合して活性化することができる任意の他の抗体または抗体構築物が挙げられる。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、インスリンまたはメトホルミンであり得る。
本発明は、以下の実施例にさらに記載されており、これらは、特許請求の範囲に記載の本発明の範囲を限定しない。
実施例１．例示的な多鎖キメラポリペプチドの構築およびその特性の評価
２つの多鎖キメラポリペプチドを生成し、それらの特性を評価した。２つの多鎖キメラポリペプチドは各々、第１の標的結合ドメインに共有結合した可溶性組織因子ドメインと、一対の親和性ドメインの第１のドメインとを含む第１のキメラポリペプチドを含む。２つの多鎖キメラポリペプチドの各々内の第２のキメラポリペプチドは、一対の親和性ドメインの第２のドメインと、第２の標的結合ドメインとを含む。
多鎖キメラポリペプチドの構築の根底にある論理の説明
組織因子（ＴＦ）は、２３６個のアミノ酸残基を含む安定した膜貫通タンパク質である。組織因子の切断された組換え２１９アミノ酸細胞外ドメインは可溶性であり、細菌細胞または哺乳動物細胞で、高レベルで発現されることが知られている。特定の理論に拘束されることを望むことなく、本出願人は、２１９－ａａ組織因子が特有の多鎖キメラポリペプチドを作製するためのコネクターリンカーとして使用され得ると推測した。
可溶性組織因子ドメインを含む第１のキメラポリペプチドを、発酵ブロス中で増殖したＣＨＯ細胞によって高レベルで産生した。これらの第１のキメラポリペプチドを、固体マトリックス上に結合した抗組織因子モノクローナル抗体（ｍＡｂ）によって精製した。注目すべきことに、組織因子には、ＦＶＩＩａおよびＦＸの結合部位が含まれている。ＦＸに対する組織因子－ＦＶＩＩａ複合体の触媒活性は、組織因子がリン脂質二重層に固定されていない場合、およそ１００万倍低くなる。したがって、特定の理論に拘束されることを望むことなく、本出願人は、第１のキメラポリペプチドの構築時に膜貫通なしで組織因子の２１９－ａａ細胞外ドメインを使用することにより、第１のキメラポリペプチドにおける組織因子の凝固促進活性を排除することができると推測した。２１９－ａａ組織因子の凝固促進活性をさらに低下させるまたは排除するために、特にＦＶＩＩａ結合部位の結合エネルギーに寄与することで知られている７つのアミノ酸残基で、組織因子の選択的変異を行うことができる。
記載のキメラポリペプチドの結合相互作用の特徴付け
第１のキメラポリペプチドと第２のキメラポリペプチドが互いに結合して多鎖キメラポリペプチドを形成するかを決定するために、インビトロ結合アッセイを行った。可溶性組織因子ドメインを含む第１のキメラポリペプチドが認識され、抗ＴＦ ｍＡｂによって結合されるかを決定するために、インビトロ結合アッセイを行った。注目すべきことに、データは、変異した組織因子タンパク質が依然として認識され、組織因子上のＦＸ結合部位に結合することで知られている抗ＴＦ ｍＡｂによって選択的に結合されることを示した。ｓｃＦｖまたはサイトカインに共有結合した可溶性組織因子ドメインを含む第１のキメラポリペプチド（図１および図２を参照のこと）が機能的ｓｃＦｖまたはサイトカインを有するかを決定するために、インビトロ結合アッセイを行った。前述のアッセイからのデータは、予想された生物学的活性を有する精製された第１のキメラポリペプチドと一致した（例えば、ｓｃＦｖが予想された標的抗原に選択的に結合するか、またはサイトカインが予想された受容体または結合タンパク質に選択的に結合する）。
加えて、互いに結合した第１のキメラポリペプチドおよび第２のキメラポリペプチドを含む２つの多鎖キメラポリペプチドを使用して行った実験は、予想された標的結合活性を実証している（例えば、多鎖キメラポリペプチドは、第１の標的結合ドメインによって特異的に認識される標的および第２の標的結合ドメインによって特異的に認識される標的に特異的に結合する）。
前述の結果に基づいて、本出願人は、可溶性組織因子コネクターリンカーが、可溶性組織因子ドメインに対して、かつ互いに対して、三次元空間内でのいずれかのｓｃＦｖ、インターロイキン、サイトカイン、インターロイキン受容体、またはサイトカイン受容体をコードするポリペプチドの適切な表示を提供または可能にし、これにより、各々が予想された生物学的特性および活性を保持したと結論付けた。
第１のキメラポリペプチドおよび第２のキメラポリペプチドの両方を共発現させた場合、ヘテロ二量体複合体を高レベルで発酵ブロス中に分泌した。複合体を捕捉し、親和性クロマトグラフィーを使用して固体マトリックスにコンジュゲートされた抗ＴＦ ｍＡｂによって容易に精製した。これらの多鎖キメラポリペプチドの第１および第２の標的結合ドメインは、インビトロ結合アッセイによってアッセイされるように、それらの予想された生物学的活性を保持していた。したがって、多鎖キメラポリペプチドの集合は、生物学的活性のためのドメインの適切な空間的表示および折り畳みを提供する。重要なことに、多鎖キメラポリペプチドの空間的配置は、組織因子上のＦＸ結合部位を妨害せず、これにより、親和性精製に抗ＴＦ ｍＡｂを使用することができる。
記載のキメラポリペプチドの安定性の特徴付け
精製された多鎖キメラポリペプチドは両方ともに安定している。これらの多鎖キメラポリペプチドは、ヒト血清中３７℃で７２時間インキュベートした場合、構造的に損なわれておらず、完全に生物学的に活性である。
記載のキメラポリペプチドが凝集する傾向の特徴付け
開発した精製された多鎖キメラポリペプチドは両方ともに、ＰＢＳ中４℃で保存した場合、凝集体を形成しない。
記載のキメラポリペプチドの粘度の特徴付け
多鎖キメラポリペプチドをＰＢＳ中５０ｍｇ／ｍＬの高濃度で製剤化した場合、粘度の問題はない。
多鎖キメラポリペプチドプラットフォームの追加の用途
これらの研究からのデータは、本明細書に記載のプラットフォーム技術を利用して、接着分子、受容体、サイトカイン、リガンド、およびケモカインを含むが、これらに限定されない、本明細書に記載の形式のうちのいずれかで、抗体に由来する標的結合ドメインに融合することができる分子を作製することができることを示す。適切な標的結合ドメインを用いて、結果として生じた多鎖キメラポリペプチドは、様々な免疫エフェクター細胞のコンジュゲーションを促進し、がん細胞、ウイルス感染細胞、または老化細胞を含む標的細胞の破壊を媒介し得る。多鎖キメラポリペプチド内の他のドメインは、免疫系を刺激、活性化、および誘引して、標的細胞に対するエフェクター細胞の細胞傷害性を増強する。
実施例２：ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物の作製
非限定的な例では、ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物を作製した（図３）。ヒトＩＬ－１２サブユニット配列、ヒトＩＬ－１５ＲαＳｕ配列、ヒトＩＬ－１５配列、ヒト組織因子２１９配列、およびヒトＩＬ－１８配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。ＧＳ（３）リンカーを用いてＩＬ－１２サブユニットベータ（ｐ４０）をＩＬ－１２サブユニットアルファ（ｐ３５）に結合してＩＬ－１２の一本鎖バージョンを生成し、その後、ＩＬ－１２配列をＩＬ－１５ＲαＳｕ配列に直接結合することによってＤＮＡ構築物を作製した。最終ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物配列をＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。
ＩＬ１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号７７）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＡＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＴＡＴＴＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＴＡＧＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－１２サブユニットベータ（ｐ４０））
ＡＴＴＴＧＧＧＡＡＣＴＧＡＡＧＡＡＧＧＡＣＧＴＣＴＡＣＧＴＧＧＴＣＧＡＡＣＴＧＧＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＧＡＴＧＣＴＣＣＣＧＧＣＧＡＡＡＴＧＧＴＧＧＴＧＣＴＣＡＣＴＴＧＴＧＡＣＡＣＣＣＣＣＧＡＡＧＡＡＧＡＣＧＧＣＡＴＣＡＣＴＴＧＧＡＣＣＣＴＣＧＡＴＣＡＧＡＧＣＡＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＴＣＣＧＧＡＡＡＧＡＣＣＣＴＣＡＣＡＡＴＣＣＡＡＧＴＴＡＡＧＧＡＧＴＴＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＧＧＣＣＡＡＴＡＣＡＣＡＴＧＣＣＡＣＡＡＧＧＧＡＧＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＣＡＧＣＣＡＴＴＣＣＴＴＡＴＴＡＴＴＡＴＴＡＣＡＣＡＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＣＧＧＡＡＴＣＴＧＧＴＣＣＡＣＣＧＡＣＡＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＴＣＡＧＡＡＧＧＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＴＡＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＡＡＧＧＴＧＴＧＡＧＧＣＣＡＡＡＡＡＣＴＡＣＡＧＣＧＧＴＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＴＴＧＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＡＣＣＡＴＴＴＣＣＡＣＣＧＡＴＴＴＡＡＣＣＴＴＣＴＣＣＧＴＧＡＡＡＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＡＡＧＣＴＣＣＧＡＣＣＣＴＣＡＡＧＧＴＧＴＧＡＣＡＴＧＴＧＧＡＧＣＣＧＣＴＡＣＣＣＴＣＡＧＣＧＣＴＧＡＧＡＧＧＧＴＴＣＧＴＧＧＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＧＡＡＴＡＣＧＡＧＴＡＣＡＧＣＧＴＧＧＡＧＴＧＣＣＡＡＧＡＡＧＡＴＡＧＣＧＣＴＴＧＴＣＣＣＧＣＴＧＣＣＧＡＡＧＡＡＴＣＴＴＴＡＣＣＣＡＴＴＧＡＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＧＡＣＧＣＣＧＴＧＣＡＣＡＡＡＣＴＣＡＡＧＴＡＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＡＣＣＴＣＣＴＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＣＣＧＧＧＡＣＡＴＣＡＴＴＡＡＧＣＣＣＧＡＴＣＣＴＣＣＴＡＡＧＡＡＴＴＴＡＣＡＧＣＴＧＡＡＧＣＣＴＣＴＣＡＡＡＡＡＴＡＧＣＣＧＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＴＣＴＣＴＴＧＧＧＡＡＴＡＴＣＣＣＧＡＣＡＣＴＴＧＧＡＧＣＡＣＡＣＣＣＣＡＣＡＧＣＴＡＣＴＴＣＴＣＴＴＴＡＡＣＣＴＴＴＴＧＴＧＴＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＴＡＡＡＡＧＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＡＧＡＡＡＧＡＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＣＣＧＡＣＡＡＡＡＣＣＡＧＣＧＣＣＡＣＣＧＴＣＡＴＣＴＧＴＣＧＧＡＡＧＡＡＣＧＣＣＴＣＣＡＴＣＡＧＣＧＴＧＡＧＧＧＣＴＣＡＡＧＡＴＣＧＴＴＡＴＴＡＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＧＧＴＣＣＧＡＧＴＧＧＧＣＣＡＧＣＧＴＧＣＣＴＴＧＴＴＣＣ
（リンカー）
ＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴ
（ヒトＩＬ－１２サブユニットアルファ（ｐ３５））
ＣＧＴＡＡＣＣＴＣＣＣＣＧＴＧＧＣＴＡＣＣＣＣＣＧＡＴＣＣＣＧＧＡＡＴＧＴＴＣＣＣＴＴＧＴＴＴＡＣＡＣＣＡＣＡＧＣＣＡＧＡＡＴＴＴＡＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＴＧＡＧＣＡＡＣＡＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＣＴＡＧＧＣＡＧＡＣＴＴＴＡＧＡＡＴＴＴＴＡＣＣＣＴＴＧＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＧＡＧＡＴＣＧＡＣＣＡＴＧＡＡＧＡＴＡＴＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣＡＴＣＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＧＣＴＴＧＴＴＴＡＣＣＴＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＣＡＡＡＧＡＡＣＧＡＧＴＣＴＴＧＴＣＴＣＡＡＣＴＣＴＣＧＴＧＡＡＡＣＣＡＧＣＴＴＣＡＴＣＡＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＴＧＴＴＴＡＧＣＴＴＣＣＣＧＧＡＡＧＡＣＣＴＣＣＴＴＴＡＴＧＡＴＧＧＣＴＴＴＡＴＧＣＣＴＣＡＧＣＴＣＣＡＴＣＴＡＣＧＡＧＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＴＧＴＡＣＣＡＡＧＴＧＧＡＧＴＴＣＡＡＧＡＣＣＡＴＧＡＡＣＧＣＣＡＡＧＣＴＧＣＴＣＡＴＧＧＡＣＣＣＴＡＡＡＣＧＧＣＡＧＡＴＣＴＴＴＴＴＡＧＡＣＣＡＧＡＡＣＡＴＧＣＴＧＧＣＴＧＴＧＡＴＴＧＡＴＧＡＧＣＴＧＡＴＧＣＡＡＧＣＴＴＴＡＡＡＣＴＴＣＡＡＣＴＣＣＧＡＧＡＣＣＧＴＣＣＣＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＣＣＣＴＣＧＡＧＧＡＧＣＣＣＧＡＴＴＴＴＴＡＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＡＴＣＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＴＴＴＴＡＣＴＣＣＡＣＧＣＣＴＴＴＡＧＧＡＴＣＣＧＧＧＣＣＧＴＧＡＣＣＡＴＴＧＡＣＣＧＧＧＴＣＡＴＧＡＧＣＴＡＴＴＴＡＡＡＣＧＣＣＡＧＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
実施例３：ＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の作製
非限定的な例では、ＩＬ－１８配列を組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に結合し、ＩＬ－１８／ＴＦ構築物をＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによってＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を作製した（図４）。Ｇｅｎｅｗｉｚによって合成したＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物の核酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号７３）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＣＡＣＡＴＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＡＧＣ
（ヒトＩＬ－１８）
ＴＡＣＴＴＣＧＧＣＡＡＡＣＴＧＧＡＡＴＣＣＡＡＧＣＴＧＡＧＣＧＴＧＡＴＣＣＧＧＡＡＴＴＴＡＡＡＣＧＡＣＣＡＡＧＴＴＣＴＧＴＴＴＡＴＣＧＡＴＣＡＡＧＧＴＡＡＣＣＧＧＣＣＴＣＴＧＴＴＣＧＡＧＧＡＣＡＴＧＡＣＣＧＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＴＧＣＣＣＣＣＣＧＧＡＣＣＡＴＣＴＴＣＡＴＴＡＴＣＴＣＣＡＴＧＴＡＣＡＡＧＧＡＣＡＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＧＣＴＧＴＧＡＣＡＡＴＴＡＧＣＧＴＧＡＡＧＴＧＴＧＡＧＡＡＡＡＴＣＡＧＣＡＣＴＴＴＡＴＣＴＴＧＴＧＡＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＡＴＣＴＣＣＴＴＴＡＡＧＧＡＡＡＴＧＡＡＣＣＣＣＣＣＣＧＡＴＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＣＴＴＣＣＡＧＣＧＧＴＣＣＧＴＧＣＣＣＧＧＴＣＡＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＡＴＧＣＡＧＴＴＣＧＡＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＧＧＣＴＡＣＴＴＴＴＴＡＧＣＴＴＧＴＧＡＡＡＡＧＧＡＧＡＧＧＧＡＴＴＴＡＴＴＣＡＡＧＣＴＧＡＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＴＣＧＴＴＣＣＡＴＣＡＴＧＴＴＣＡＣＣＧＴＣＣＡＡＡＡＣＧＡＧＧＡＴ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
実施例４：ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質およびＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質の分泌
ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物およびＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物をｐＭＳＧＶ－１修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（参照により本明細書に組み込まれる、Ｈｕｇｈｅｓ，Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ １６：４５７－７２，２００５に記載のもの）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕタンパク質複合体（１８ｔ１５－１２ｓと称する、図５および図６）の形成および分泌が可能になった。１８ｔ１５－１２ｓタンパク質を、抗ＴＦ抗体親和性クロマトグラフィーおよびサイズ排除クロマトグラフィーを使用してＣＨＯ－Ｋ１細胞培養上清から精製し、ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質およびＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質からなる可溶性（非凝集）タンパク質複合体を得た。
ＩＬ１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質のアミノ酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号７６）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－１２サブユニットベータ（ｐ４０））
ＩＷＥＬＫＫＤＶＹＶＶＥＬＤＷＹＰＤＡＰＧＥＭＶＶＬＴＣＤＴＰＥＥＤＧＩＴＷＴＬＤＱＳＳＥＶＬＧＳＧＫＴＬＴＩＱＶＫＥＦＧＤＡＧＱＹＴＣＨＫＧＧＥＶＬＳＨＳＬＬＬＬＨＫＫＥＤＧＩＷＳＴＤＩＬＫＤＱＫＥＰＫＮＫＴＦＬＲＣＥＡＫＮＹＳＧＲＦＴＣＷＷＬＴＴＩＳＴＤＬＴＦＳＶＫＳＳＲＧＳＳＤＰＱＧＶＴＣＧＡＡＴＬＳＡＥＲＶＲＧＤＮＫＥＹＥＹＳＶＥＣＱＥＤＳＡＣＰＡＡＥＥＳＬＰＩＥＶＭＶＤＡＶＨＫＬＫＹＥＮＹＴＳＳＦＦＩＲＤＩＩＫＰＤＰＰＫＮＬＱＬＫＰＬＫＮＳＲＱＶＥＶＳＷＥＹＰＤＴＷＳＴＰＨＳＹＦＳＬＴＦＣＶＱＶＱＧＫＳＫＲＥＫＫＤＲＶＦＴＤＫＴＳＡＴＶＩＣＲＫＮＡＳＩＳＶＲＡＱＤＲＹＹＳＳＳＷＳＥＷＡＳＶＰＣＳ
（リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
（ヒトＩＬ－１２サブユニットアルファ（ｐ３５））
ＲＮＬＰＶＡＴＰＤＰＧＭＦＰＣＬＨＨＳＱＮＬＬＲＡＶＳＮＭＬＱＫＡＲＱＴＬＥＦＹＰＣＴＳＥＥＩＤＨＥＤＩＴＫＤＫＴＳＴＶＥＡＣＬＰＬＥＬＴＫＮＥＳＣＬＮＳＲＥＴＳＦＩＴＮＧＳＣＬＡＳＲＫＴＳＦＭＭＡＬＣＬＳＳＩＹＥＤＬＫＭＹＱＶＥＦＫＴＭＮＡＫＬＬＭＤＰＫＲＱＩＦＬＤＱＮＭＬＡＶＩＤＥＬＭＱＡＬＮＦＮＳＥＴＶＰＱＫＳＳＬＥＥＰＤＦＹＫＴＫＩＫＬＣＩＬＬＨＡＦＲＩＲＡＶＴＩＤＲＶＭＳＹＬＮＡＳ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
ＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質のアミノ酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号７２）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－１８）
ＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
ある場合には、リーダー（シグナル配列）ペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
実施例５：免疫親和性クロマトグラフィーによる１８ｔ１５－１２ｓの精製
抗ＴＦ抗体親和性カラムをＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ（商標）ＡＫＴＡ Ａｖａｎｔタンパク質精製システムに接続した。流速は、２ｍＬ／分の溶出ステップを除く全てのステップで４ｍＬ／分であった。
１８ｔ１５－１２ｓの細胞培養収集物を１Ｍトリス塩基でｐＨ７．４に調整し、５カラム体積のＰＢＳで平衡化した抗ＴＦ抗体親和性カラムにロードした。試料をロードした後、カラムを５カラム体積のＰＢＳで洗浄し、その後、６カラム体積の０．１Ｍ酢酸（ｐＨ２．９）で溶出した。２８０ｎｍでの吸光度を収集し、その後、１Ｍトリス塩基の添加により、試料をｐＨ７．５～８．０に中和した。その後、中和した試料を、分子量カットオフ３０ＫＤａでＡｍｉｃｏｎ（登録商標）遠心フィルターを使用してＰＢＳに緩衝液交換した。図７は、１８ｔ１５－１２ｓ複合体が抗ＴＦ抗体親和性カラムに結合することを示しており、ここで、ＴＦは、１８ｔ１５－１２ｓ結合パートナーである。緩衝液交換したタンパク質試料を、さらなる生化学的分析および生物学的活性試験のために２～８℃で保管する。
各溶出後、抗ＴＦ抗体親和性カラムを６カラム体積の０．１Ｍグリシン（ｐＨ２．５）を使用してストリッピングした。その後、カラムを、１０カラム体積のＰＢＳ、０．０５％アジ化ナトリウムを使用して中和し、２～８℃で保管した。
実施例６：１８ｔ１５－１２ｓのサイズ排除クロマトグラフィー
ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｓｕｐｅｒｄｅｘ（登録商標）２００ Ｉｎｃｒｅａｓｅ １０／３００ ＧＬゲル濾過カラムを、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＡＫＴＡ（商標）Ａｖａｎｔタンパク質精製システムに接続した。カラムを２カラム体積のＰＢＳで平衡化した。流速は０．８ｍＬ／分であった。キャピラリーループを使用して、１ｍｇ／ｍＬの１８ｔ１５－１２ｓ複合体２００μＬをカラムに注入した。注入を１．２５カラム体積のＰＢＳで追跡した。ＳＥＣクロマトグラフを図８に示す。恐らく１８ｔ１５－１２ｓ二量体または凝集体のグリコシル化程度が異なるため、マイナーな高分子量ピークとともに主要な１８ｔ１５－１２ｓタンパク質ピークが存在する。
実施例７：１８ｔ１５－１２ｓのＳＤＳ－ＰＡＧＥ
純度およびタンパク質分子量を決定するために、精製した１８ｔ１５－１２ｓタンパク質試料を、４～１２％ＮｕＰａｇｅビス－トリスタンパク質ゲルＳＤＳ－ＰＡＧＥを使用して分析した。ゲルをＩｎｓｔａｎｔＢｌｕｅ（商標）で約３０分間染色し、その後、精製水中で一晩脱色した。図９は、抗ＴＦ抗体親和性精製１８ｔ１５－１２ｓのＳＤＳゲルの例を示しており、予想された分子量（６６ｋＤａおよび５６ｋＤａ）にバンドがある。
実施例８：ＣＨＯ－Ｋ１細胞における１８ｔ１５－１２ｓのグリコシル化
ＣＨＯ－Ｋ１細胞における１８ｔ１５－１２ｓのグリコシル化を、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ Ｍｉｘ ＩＩキット（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ）を製造業者の指示に従って使用して確認した。図１０は、脱グリコシル化および非脱グリコシル化１８ｔ１５－１２ｓのＳＤＳ ＰＡＧＥの例を示す。図１０のレーン４に見られるように、脱グリコシル化により１８ｔ１５－１２ｓの分子量が減少する。
実施例９：１８ｔ１５－１２ｓ複合体の組換えタンパク質定量
１８ｔ１５－１２ｓ複合体を、標準のサンドイッチＥＬＩＳＡ法を使用して検出および定量化した（図１１～１４）。抗ヒト組織因子抗体が捕捉抗体として機能し、ビオチン化抗ヒトＩＬ－１２、ＩＬ－１５、またはＩＬ－１８抗体（ＢＡＦ ２１９、ＢＡＭ ２４７、Ｄ０４５－６、全てＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）が検出抗体として機能した。精製した１８ｔ１５－１２ｓタンパク質複合体の組織因子も、抗ヒト組織因子捕捉抗体（Ｉ４３）および抗ヒト組織因子抗体検出抗体を使用して検出した。Ｉ４３／抗ＴＦ抗体ＥＬＩＳＡを、同様の濃度の精製組織因子と比較した。
実施例１０：１８ｔ１５－１２ｓ複合体の免疫刺激能力
１８ｔ１５－１２ｓ複合体のＩＬ－１５免疫刺激活性を評価するために、増加濃度の１８ｔ１５－１２ｓを２００μＬのＩＭＤＭ：１０％ＦＢＳ培地中の３２Ｄβ細胞（１０４細胞／ウェル）に添加した。３２Ｄβ細胞を３７℃で３日間インキュベートした。４日目に、ＷＳＴ－１増殖試薬（１０μＬ／ウェル）を添加し、４時間後、吸光度を４５０ｎｍで測定して、ＷＳＴ－１の可溶性ホルマザン色素への切断に基づいて細胞増殖を測定した。ヒト組換えＩＬ－１５の生物活性を陽性対照として評価した。図１５に示されるように、１８ｔ１５－１２ｓは、３２Ｄβ細胞のＩＬ－１５依存性細胞増殖を示した。１８ｔ１５－１２ｓ複合体は、恐らくＩＬ－１８および組織因子のＩＬ－１５ドメインへの結合のため、ヒト組換えＩＬ－１５と比較して低下した活性を示した。
１８ｔ１５－１２ｓ複合体におけるＩＬ－１２およびＩＬ－１８の個々の活性を評価するために、１８ｔ１５－１２ｓを、２００μＬのＩＭＤＭ：１０％熱不活性化ＦＢＳ培地中のＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＩＬ－１２およびＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＩＬ－１８レポーター細胞に添加した（５×１０４細胞／ウェル、ｈｋｂ－ｉｌ１２およびｈｋｂ－ｈｍｉｌ１８、ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）。細胞を３７℃で一晩インキュベートした。２０μＬの誘導されたＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＩＬ－１２およびＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＩＬ－１８レポーター細胞上清を１８０μＬのＱＵＡＮＴＩ－Ｂｌｕｅ（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）に添加し、３７℃で１～３時間インキュベートした。ＩＬ－１２またはＩＬ－１８活性を、吸光度を６２０ｎｍで測定することによって評価した。ヒト組換えＩＬ－１２またはＩＬ－１８を陽性または陰性対照として評価した。図１６および図１７に示されるように、１８ｔ１５－１２ｓ複合体のサイトカインドメインは各々、特定の生物学的活性を保持する。１８ｔ１５－１２ｓの活性は、恐らくＩＬ－１５および組織因子のＩＬ－１８ドメインへの結合、およびＩＬ－１２のＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメインへの結合のため、ヒト組換えＩＬ－１８またはＩＬ－１２の活性と比較して低下した。
実施例１１：１８ｔ１５－１２ｓ複合体によるサイトカイン誘導性メモリー様ＮＫ細胞の誘導
サイトカイン誘導性メモリー様ＮＫ細胞を、精製ＮＫ細胞を飽和量のＩＬ－１２（１０ｎｇ／ｍＬ）、ＩＬ－１５（５０ｎｇ／ｍＬ）、およびＩＬ－１８（５０ｎｇ／ｍＬ）で一晩刺激した後にエクスビボで誘導することができる。これらのメモリー様特性は、ＩＬ－２受容体α（ＩＬ－２Ｒα、ＣＤ２５）、ＣＤ６９（および他の活性化マーカー）の発現、およびＩＦＮ－γ産生の増加により測定されている。サイトカイン誘導性メモリー様ＮＫ細胞の生成を促進する１８ｔ１５－１２ｓ複合体の能力を評価するために、精製ヒトＮＫ細胞（９５％超のＣＤ５６＋）を、０．０１ｎＭ～１００００ｎＭの１８ｔ１５－１２ｓ複合体または個々のサイトカインの組み合わせ（組換えＩＬ－１２（１０ｎｇ／ｍＬ）、ＩＬ－１８（５０ｎｇ／ｍＬ）、およびＩＬ－１５（５０ｎｇ／ｍＬ））で１４～１８時間刺激した。細胞表面ＣＤ２５およびＣＤ６９発現および細胞内ＩＦＮ－γレベルを、抗体染色およびフローサイトメトリーによって評価した。
新鮮なヒト白血球を血液バンクから入手し、ＣＤ５６＋ＮＫ細胞を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ／ヒトＮＫ細胞試薬（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して単離した。ＮＫ細胞の純度は７０％超であり、ＣＤ５６－ＢＶ４２１、ＣＤ１６－ＢＶ５１０、ＣＤ２５－ＰＥ、ＣＤ６９－ＡＰＣＦｉｒｅ７５０特異的抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で染色することにより確認した。細胞をカウントし、０．２ｍＬの完全培地（ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ）、２ｍＭのＬ－グルタミン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ペニシリン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ストレプトマイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、および１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を補充）中の９６ウェル平底プレートに０．２×１０６／ｍＬで再懸濁した。細胞を、サイトカインｈＩＬ－１２（１０ｎｇ／ｍＬ）（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、ｈＩＬ－１８（５０ｎｇ／ｍＬ）（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、およびｈＩＬ－１５（５０ｎｇ／ｍＬ）（ＮＣＩ）の混合物、または０．０１ｎＭ～１００００ｎＭの１８ｔ１５－１２ｓのいずれかで、３７℃、５％ＣＯ２で１４～１８時間刺激した。その後、細胞を収集し、ＣＤ５６－ＢＶ４２１、ＣＤ１６－ＢＶ５１０、ＣＤ２５－ＰＥ、ＣＤ６９－ＡＰＣＦｉｒｅ７５０特異的抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で３０分間表面染色した。染色後、細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液（１Ｘ ＰＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、０．５％ＢＳＡ（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）および０．００１％アジ化ナトリウム（Ｓｉｇｍａ）を含む）中で洗浄した（１５００ＲＰＭ、室温で５分間）。２回洗浄した後、細胞を、ＦＡＣＳＣｅｌｅｓｔａ（商標）フローサイトメーターを使用して分析した（プロットされたデータ－平均蛍光強度、図１８Ａおよび図１８Ｂ）。
新鮮なヒト白血球を血液バンクから入手し、ＣＤ５６＋ＮＫ細胞を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ／ヒトＮＫ細胞試薬（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して単離した。ＮＫ細胞の純度は７０％超であり、ＣＤ５６－ＢＶ４２１、ＣＤ１６－ＢＶ５１０、ＣＤ２５－ＰＥ、ＣＤ６９－ＡＰＣＦｉｒｅ７５０特異的抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で染色することにより確認した。細胞をカウントし、０．２ｍＬの完全培地（ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ）、２ｍＭのＬ－グルタミン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ペニシリン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ストレプトマイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、および１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を補充）中の９６ウェル平底プレートに０．２×１０６／ｍＬで再懸濁した。細胞を、ｈＩＬ－１２（１０ｎｇ／ｍＬ）（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、ｈＩＬ－１８（５０ｎｇ／ｍＬ）（Ｒ＆Ｄ）、およびｈＩＬ－１５（５０ｎｇ／ｍＬ）（ＮＣＩ）のサイトカイン混合物、または０．０１ｎＭ～１００００ｎＭの１８ｔ１５－１２ｓ複合体のいずれかで、３７℃、５％ＣＯ２で１４～１８時間刺激した。その後、細胞を、１０μｇ／ｍＬのブレフェルジンＡ（Ｓｉｇｍａ）および１Ｘモネンシン（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で４時間処理し、収集した後、ＣＤ５６－ＢＶ４２１、ＣＤ１６－ＢＶ５１０、ＣＤ２５－ＰＥ、ＣＤ６９－ＡＰＣＦｉｒｅ７５０特異的抗体で３０分間染色した。染色後、細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液（１Ｘ ＰＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、０．５％ＢＳＡ（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）および０．００１％アジ化ナトリウム（Ｓｉｇｍａ）を含む）中で洗浄し（１５００ＲＰＭ、室温で５分間）、室温で１０分間固定した。固定後、細胞を１ｘ透過処理緩衝液（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）中で洗浄し（１５００ＲＰＭ、室温で５分間）、ＩＦＮ－γ－ＰＥ Ａｂ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）で、室温で３０分間染色した。細胞を１ｘ透過処理緩衝液で再度洗浄し、その後、ＦＡＣＳ緩衝液で洗浄した。細胞ペレットを３００μＬのＦＡＣＳ緩衝液中に再懸濁し、ＢＤ ＦＡＣＳＣｅｌｅｓｔａ（商標）フローサイトメーターを使用して分析した（ＩＦＮ－γ陽性細胞のプロット％、図１９）。
実施例１２：ヒト腫瘍細胞に対するＮＫ細胞のインビトロ細胞傷害性
ヒト骨髄性白血病細胞Ｋ５６２（ＣｅｌｌＴｒａｃｅ ｖｉｏｌｅｔで標識）を、増加濃度の１８ｔ１５－１２ｓ複合体または対照としてのサイトカイン混合物の存在下で、精製ヒトＮＫ細胞とインキュベートした。２０時間後、培養物を収集し、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）で染色し、フローサイトメトリーで評価した。図２０に示されるように、１８ｔ１５－１２ｓ複合体は、サイトカイン混合物と同様のまたはそれよりも高いレベルで、Ｋ５６２に対するヒトＮＫ細胞傷害性を誘導し、１８ｔ１５－１２ｓ複合体およびサイトカイン混合物の両方が培地対照よりも高い細胞傷害性を誘導した。
実施例１３：ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／αＣＤ１６ｓｃＦｖ ＤＮＡ構築物およびＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の作製
非限定的な例では、ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／αＣＤ１６ｓｃＦｖ ＤＮＡ構築物およびＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物を作製した（図２１および図２２）。ヒトＩＬ－１２サブユニット配列、ヒトＩＬ－１５ＲαＳｕ配列、ヒトＩＬ－１５配列、ヒト組織因子２１９配列、およびヒトＩＬ－１８配列をＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。ＧＳ（３）リンカーを用いてＩＬ－１２サブユニットベータ（ｐ４０）をＩＬ－１２サブユニットアルファ（ｐ３５）に結合してＩＬ－１２の一本鎖バージョンを生成し、ＩＬ－１２配列をＩＬ－１５ＲαＳｕ配列に、かつＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物をαＣＤ１６ｓｃＦｖのＮ末端コーディング領域に直接結合することによってＤＮＡ構築物を作製した。
ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／αＣＤ１６ｓｃＦｖ構築物の核酸配列は、以下の通りである（配列番号１２３）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＡＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＴＡＴＴＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＴＡＧＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－１２サブユニットベータ（ｐ４０））
ＡＴＴＴＧＧＧＡＡＣＴＧＡＡＧＡＡＧＧＡＣＧＴＣＴＡＣＧＴＧＧＴＣＧＡＡＣＴＧＧＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＧＡＴＧＣＴＣＣＣＧＧＣＧＡＡＡＴＧＧＴＧＧＴＧＣＴＣＡＣＴＴＧＴＧＡＣＡＣＣＣＣＣＧＡＡＧＡＡＧＡＣＧＧＣＡＴＣＡＣＴＴＧＧＡＣＣＣＴＣＧＡＴＣＡＧＡＧＣＡＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＴＣＣＧＧＡＡＡＧＡＣＣＣＴＣＡＣＡＡＴＣＣＡＡＧＴＴＡＡＧＧＡＧＴＴＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＧＧＣＣＡＡＴＡＣＡＣＡＴＧＣＣＡＣＡＡＧＧＧＡＧＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＣＡＧＣＣＡＴＴＣＣＴＴＡＴＴＡＴＴＡＴＴＡＣＡＣＡＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＣＧＧＡＡＴＣＴＧＧＴＣＣＡＣＣＧＡＣＡＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＴＣＡＧＡＡＧＧＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＴＡＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＡＡＧＧＴＧＴＧＡＧＧＣＣＡＡＡＡＡＣＴＡＣＡＧＣＧＧＴＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＴＴＧＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＡＣＣＡＴＴＴＣＣＡＣＣＧＡＴＴＴＡＡＣＣＴＴＣＴＣＣＧＴＧＡＡＡＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＡＡＧＣＴＣＣＧＡＣＣＣＴＣＡＡＧＧＴＧＴＧＡＣＡＴＧＴＧＧＡＧＣＣＧＣＴＡＣＣＣＴＣＡＧＣＧＣＴＧＡＧＡＧＧＧＴＴＣＧＴＧＧＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＧＡＡＴＡＣＧＡＧＴＡＣＡＧＣＧＴＧＧＡＧＴＧＣＣＡＡＧＡＡＧＡＴＡＧＣＧＣＴＴＧＴＣＣＣＧＣＴＧＣＣＧＡＡＧＡＡＴＣＴＴＴＡＣＣＣＡＴＴＧＡＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＧＡＣＧＣＣＧＴＧＣＡＣＡＡＡＣＴＣＡＡＧＴＡＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＡＣＣＴＣＣＴＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＣＣＧＧＧＡＣＡＴＣＡＴＴＡＡＧＣＣＣＧＡＴＣＣＴＣＣＴＡＡＧＡＡＴＴＴＡＣＡＧＣＴＧＡＡＧＣＣＴＣＴＣＡＡＡＡＡＴＡＧＣＣＧＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＴＣＴＣＴＴＧＧＧＡＡＴＡＴＣＣＣＧＡＣＡＣＴＴＧＧＡＧＣＡＣＡＣＣＣＣＡＣＡＧＣＴＡＣＴＴＣＴＣＴＴＴＡＡＣＣＴＴＴＴＧＴＧＴＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＴＡＡＡＡＧＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＡＧＡＡＡＧＡＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＣＣＧＡＣＡＡＡＡＣＣＡＧＣＧＣＣＡＣＣＧＴＣＡＴＣＴＧＴＣＧＧＡＡＧＡＡＣＧＣＣＴＣＣＡＴＣＡＧＣＧＴＧＡＧＧＧＣＴＣＡＡＧＡＴＣＧＴＴＡＴＴＡＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＧＧＴＣＣＧＡＧＴＧＧＧＣＣＡＧＣＧＴＧＣＣＴＴＧＴＴＣＣ
（リンカー）
ＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴ
（ヒトＩＬ－１２サブユニットアルファ（ｐ３５））
ＣＧＴＡＡＣＣＴＣＣＣＣＧＴＧＧＣＴＡＣＣＣＣＣＧＡＴＣＣＣＧＧＡＡＴＧＴＴＣＣＣＴＴＧＴＴＴＡＣＡＣＣＡＣＡＧＣＣＡＧＡＡＴＴＴＡＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＴＧＡＧＣＡＡＣＡＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＣＴＡＧＧＣＡＧＡＣＴＴＴＡＧＡＡＴＴＴＴＡＣＣＣＴＴＧＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＧＡＧＡＴＣＧＡＣＣＡＴＧＡＡＧＡＴＡＴＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣＡＴＣＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＧＣＴＴＧＴＴＴＡＣＣＴＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＣＡＡＡＧＡＡＣＧＡＧＴＣＴＴＧＴＣＴＣＡＡＣＴＣＴＣＧＴＧＡＡＡＣＣＡＧＣＴＴＣＡＴＣＡＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＴＧＴＴＴＡＧＣＴＴＣＣＣＧＧＡＡＧＡＣＣＴＣＣＴＴＴＡＴＧＡＴＧＧＣＴＴＴＡＴＧＣＣＴＣＡＧＣＴＣＣＡＴＣＴＡＣＧＡＧＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＴＧＴＡＣＣＡＡＧＴＧＧＡＧＴＴＣＡＡＧＡＣＣＡＴＧＡＡＣＧＣＣＡＡＧＣＴＧＣＴＣＡＴＧＧＡＣＣＣＴＡＡＡＣＧＧＣＡＧＡＴＣＴＴＴＴＴＡＧＡＣＣＡＧＡＡＣＡＴＧＣＴＧＧＣＴＧＴＧＡＴＴＧＡＴＧＡＧＣＴＧＡＴＧＣＡＡＧＣＴＴＴＡＡＡＣＴＴＣＡＡＣＴＣＣＧＡＧＡＣＣＧＴＣＣＣＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＣＣＣＴＣＧＡＧＧＡＧＣＣＣＧＡＴＴＴＴＴＡＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＡＴＣＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＴＴＴＴＡＣＴＣＣＡＣＧＣＣＴＴＴＡＧＧＡＴＣＣＧＧＧＣＣＧＴＧＡＣＣＡＴＴＧＡＣＣＧＧＧＴＣＡＴＧＡＧＣＴＡＴＴＴＡＡＡＣＧＣＣＡＧＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
（抗ヒトＣＤ１６軽鎖可変ドメイン）
ＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴ
（リンカー）
ＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＡＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣ
（抗ヒトＣＤ１６重鎖可変ドメイン）
ＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧ
ＩＬ－１８配列を組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に結合し、ＩＬ－１８／ＴＦ構築物をＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによっても構築物を作製した（図２２）。ＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物の核酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号７３）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＣＡＣＡＴＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＡＧＣ
（ヒトＩＬ－１８）
ＴＡＣＴＴＣＧＧＣＡＡＡＣＴＧＧＡＡＴＣＣＡＡＧＣＴＧＡＧＣＧＴＧＡＴＣＣＧＧＡＡＴＴＴＡＡＡＣＧＡＣＣＡＡＧＴＴＣＴＧＴＴＴＡＴＣＧＡＴＣＡＡＧＧＴＡＡＣＣＧＧＣＣＴＣＴＧＴＴＣＧＡＧＧＡＣＡＴＧＡＣＣＧＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＴＧＣＣＣＣＣＣＧＧＡＣＣＡＴＣＴＴＣＡＴＴＡＴＣＴＣＣＡＴＧＴＡＣＡＡＧＧＡＣＡＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＧＣＴＧＴＧＡＣＡＡＴＴＡＧＣＧＴＧＡＡＧＴＧＴＧＡＧＡＡＡＡＴＣＡＧＣＡＣＴＴＴＡＴＣＴＴＧＴＧＡＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＡＴＣＴＣＣＴＴＴＡＡＧＧＡＡＡＴＧＡＡＣＣＣＣＣＣＣＧＡＴＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＣＴＴＣＣＡＧＣＧＧＴＣＣＧＴＧＣＣＣＧＧＴＣＡＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＡＴＧＣＡＧＴＴＣＧＡＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＧＧＣＴＡＣＴＴＴＴＴＡＧＣＴＴＧＴＧＡＡＡＡＧＧＡＧＡＧＧＧＡＴＴＴＡＴＴＣＡＡＧＣＴＧＡＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＴＣＧＴＴＣＣＡＴＣＡＴＧＴＴＣＡＣＣＧＴＣＣＡＡＡＡＣＧＡＧＧＡＴ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
実施例１４：ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／αＣＤ１６ｓｃＦｖ融合タンパク質およびＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質の分泌
ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／αＣＤ１６ｓｃＦｖ構築物およびＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物をｐＭＳＧＶ－１修飾レトロウイルス発現ベクター（参照により本明細書に組み込まれる、Ｈｕｇｈｅｓ，Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ １６：４５７－７２，２００５）にクローニングし、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／αＣＤ１６ｓｃＦｖタンパク質複合体（１８ｔ１５－１２ｓ／αＣＤ１６と称する、図２３および図２４）の分泌がもたらされた。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／αＣＤ１６ｓｃＦｖタンパク質複合体（１８ｔ１５－１２ｓ／αＣＤ１６と称する、図２３および図２４）の分泌がもたらされ、これを抗ＴＦ抗体親和性および他のクロマトグラフィー法により精製することができる。ある場合には、シグナルペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、成熟形態を生成する。
ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／αＣＤ１６ｓｃＦｖ融合タンパク質のアミノ酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号１２２）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－１２サブユニットベータ（ｐ４０））
ＩＷＥＬＫＫＤＶＹＶＶＥＬＤＷＹＰＤＡＰＧＥＭＶＶＬＴＣＤＴＰＥＥＤＧＩＴＷＴＬＤＱＳＳＥＶＬＧＳＧＫＴＬＴＩＱＶＫＥＦＧＤＡＧＱＹＴＣＨＫＧＧＥＶＬＳＨＳＬＬＬＬＨＫＫＥＤＧＩＷＳＴＤＩＬＫＤＱＫＥＰＫＮＫＴＦＬＲＣＥＡＫＮＹＳＧＲＦＴＣＷＷＬＴＴＩＳＴＤＬＴＦＳＶＫＳＳＲＧＳＳＤＰＱＧＶＴＣＧＡＡＴＬＳＡＥＲＶＲＧＤＮＫＥＹＥＹＳＶＥＣＱＥＤＳＡＣＰＡＡＥＥＳＬＰＩＥＶＭＶＤＡＶＨＫＬＫＹＥＮＹＴＳＳＦＦＩＲＤＩＩＫＰＤＰＰＫＮＬＱＬＫＰＬＫＮＳＲＱＶＥＶＳＷＥＹＰＤＴＷＳＴＰＨＳＹＦＳＬＴＦＣＶＱＶＱＧＫＳＫＲＥＫＫＤＲＶＦＴＤＫＴＳＡＴＶＩＣＲＫＮＡＳＩＳＶＲＡＱＤＲＹＹＳＳＳＷＳＥＷＡＳＶＰＣＳ
（リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
（ヒトＩＬ－１２サブユニットアルファ（ｐ３５））
ＲＮＬＰＶＡＴＰＤＰＧＭＦＰＣＬＨＨＳＱＮＬＬＲＡＶＳＮＭＬＱＫＡＲＱＴＬＥＦＹＰＣＴＳＥＥＩＤＨＥＤＩＴＫＤＫＴＳＴＶＥＡＣＬＰＬＥＬＴＫＮＥＳＣＬＮＳＲＥＴＳＦＩＴＮＧＳＣＬＡＳＲＫＴＳＦＭＭＡＬＣＬＳＳＩＹＥＤＬＫＭＹＱＶＥＦＫＴＭＮＡＫＬＬＭＤＰＫＲＱＩＦＬＤＱＮＭＬＡＶＩＤＥＬＭＱＡＬＮＦＮＳＥＴＶＰＱＫＳＳＬＥＥＰＤＦＹＫＴＫＩＫＬＣＩＬＬＨＡＦＲＩＲＡＶＴＩＤＲＶＭＳＹＬＮＡＳ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
（抗ヒトＣＤ１６軽鎖可変ドメイン）
ＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨ
（リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
（抗ヒトＣＤ１６重鎖可変ドメイン）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲ
ＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号７２）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－１８）
ＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
実施例１５：ＩＬ－１８／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物およびＩＬ－１２／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の作製
非限定的な例では、ＩＬ－１８／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物およびＩＬ－１２／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物を作製した。ヒトＩＬ－１８サブユニット配列、ヒトＩＬ－１５ＲαＳｕ配列、ヒトＩＬ－１２配列、ヒト組織因子２１９配列、およびヒトＩＬ－１５配列をＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。ＩＬ－１８をＩＬ－１５ＲαＳｕに直接結合することによってＤＮＡ構築物を作製した。ＩＬ－１２配列をヒト組織因子２１９形態のＮ末端コーディング領域に結合し、さらにＩＬ－１２／ＴＦ構築物をＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによって追加の構築物も作製した。上述のように、ＩＬ－１２の一本鎖バージョン（ｐ４０－リンカー－ｐ３５）を使用した。
ＩＬ－１８／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号２１７）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＣＡＣＡＴＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＡＧＣ
（ヒトＩＬ－１８）
ＴＡＣＴＴＣＧＧＣＡＡＡＣＴＧＧＡＡＴＣＣＡＡＧＣＴＧＡＧＣＧＴＧＡＴＣＣＧＧＡＡＴＴＴＡＡＡＣＧＡＣＣＡＡＧＴＴＣＴＧＴＴＴＡＴＣＧＡＴＣＡＡＧＧＴＡＡＣＣＧＧＣＣＴＣＴＧＴＴＣＧＡＧＧＡＣＡＴＧＡＣＣＧＡＣＴＣＣＧＡＴＴＧＣＣＧＧＧＡＣＡＡＴＧＣＣＣＣＣＣＧＧＡＣＣＡＴＣＴＴＣＡＴＴＡＴＣＴＣＣＡＴＧＴＡＣＡＡＧＧＡＣＡＧＣＣＡＧＣＣＣＣＧＧＧＧＣＡＴＧＧＣＴＧＴＧＡＣＡＡＴＴＡＧＣＧＴＧＡＡＧＴＧＴＧＡＧＡＡＡＡＴＣＡＧＣＡＣＴＴＴＡＴＣＴＴＧＴＧＡＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＡＴＣＴＣＣＴＴＴＡＡＧＧＡＡＡＴＧＡＡＣＣＣＣＣＣＣＧＡＴＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＣＴＴＣＣＡＧＣＧＧＴＣＣＧＴＧＣＣＣＧＧＴＣＡＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＡＴＧＣＡＧＴＴＣＧＡＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＧＧＣＴＡＣＴＴＴＴＴＡＧＣＴＴＧＴＧＡＡＡＡＧＧＡＧＡＧＧＧＡＴＴＴＡＴＴＣＡＡＧＣＴＧＡＴＣＣＴＣＡＡＧＡＡＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＴＧＧＧＣＧＡＴＣＧＴＴＣＣＡＴＣＡＴＧＴＴＣＡＣＣＧＴＣＣＡＡＡＡＣＧＡＧＧＡＴ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
ＩＬ－１２／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物の核酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号２１８）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＡＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＴＡＴＴＴＣＴＴＴＡＣＴＧＴＴＣＣＴＣＴＴＴＡＧＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－１２サブユニットベータ（ｐ４０））
ＡＴＴＴＧＧＧＡＡＣＴＧＡＡＧＡＡＧＧＡＣＧＴＣＴＡＣＧＴＧＧＴＣＧＡＡＣＴＧＧＡＣＴＧＧＴＡＴＣＣＣＧＡＴＧＣＴＣＣＣＧＧＣＧＡＡＡＴＧＧＴＧＧＴＧＣＴＣＡＣＴＴＧＴＧＡＣＡＣＣＣＣＣＧＡＡＧＡＡＧＡＣＧＧＣＡＴＣＡＣＴＴＧＧＡＣＣＣＴＣＧＡＴＣＡＧＡＧＣＡＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＴＣＣＧＧＡＡＡＧＡＣＣＣＴＣＡＣＡＡＴＣＣＡＡＧＴＴＡＡＧＧＡＧＴＴＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＧＧＣＣＡＡＴＡＣＡＣＡＴＧＣＣＡＣＡＡＧＧＧＡＧＧＣＧＡＧＧＴＧＣＴＣＡＧＣＣＡＴＴＣＣＴＴＡＴＴＡＴＴＡＴＴＡＣＡＣＡＡＧＡＡＧＧＡＡＧＡＣＧＧＡＡＴＣＴＧＧＴＣＣＡＣＣＧＡＣＡＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＴＣＡＧＡＡＧＧＡＧＣＣＣＡＡＧＡＡＴＡＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＡＡＧＧＴＧＴＧＡＧＧＣＣＡＡＡＡＡＣＴＡＣＡＧＣＧＧＴＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＴＴＧＧＴＧＧＣＴＧＡＣＣＡＣＣＡＴＴＴＣＣＡＣＣＧＡＴＴＴＡＡＣＣＴＴＣＴＣＣＧＴＧＡＡＡＡＧＣＡＧＣＣＧＧＧＧＡＡＧＣＴＣＣＧＡＣＣＣＴＣＡＡＧＧＴＧＴＧＡＣＡＴＧＴＧＧＡＧＣＣＧＣＴＡＣＣＣＴＣＡＧＣＧＣＴＧＡＧＡＧＧＧＴＴＣＧＴＧＧＣＧＡＴＡＡＣＡＡＧＧＡＡＴＡＣＧＡＧＴＡＣＡＧＣＧＴＧＧＡＧＴＧＣＣＡＡＧＡＡＧＡＴＡＧＣＧＣＴＴＧＴＣＣＣＧＣＴＧＣＣＧＡＡＧＡＡＴＣＴＴＴＡＣＣＣＡＴＴＧＡＧＧＴＧＡＴＧＧＴＧＧＡＣＧＣＣＧＴＧＣＡＣＡＡＡＣＴＣＡＡＧＴＡＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＡＣＣＴＣＣＴＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＣＣＧＧＧＡＣＡＴＣＡＴＴＡＡＧＣＣＣＧＡＴＣＣＴＣＣＴＡＡＧＡＡＴＴＴＡＣＡＧＣＴＧＡＡＧＣＣＴＣＴＣＡＡＡＡＡＴＡＧＣＣＧＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＴＣＴＣＴＴＧＧＧＡＡＴＡＴＣＣＣＧＡＣＡＣＴＴＧＧＡＧＣＡＣＡＣＣＣＣＡＣＡＧＣＴＡＣＴＴＣＴＣＴＴＴＡＡＣＣＴＴＴＴＧＴＧＴＧＣＡＡＧＴＴＣＡＡＧＧＴＡＡＡＡＧＣＡＡＧＣＧＧＧＡＧＡＡＧＡＡＡＧＡＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＣＣＧＡＣＡＡＡＡＣＣＡＧＣＧＣＣＡＣＣＧＴＣＡＴＣＴＧＴＣＧＧＡＡＧＡＡＣＧＣＣＴＣＣＡＴＣＡＧＣＧＴＧＡＧＧＧＣＴＣＡＡＧＡＴＣＧＴＴＡＴＴＡＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＧＧＴＣＣＧＡＧＴＧＧＧＣＣＡＧＣＧＴＧＣＣＴＴＧＴＴＣＣ
（リンカー）
ＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴ
（ヒトＩＬ－１２サブユニットアルファ（ｐ３５））
ＣＧＴＡＡＣＣＴＣＣＣＣＧＴＧＧＣＴＡＣＣＣＣＣＧＡＴＣＣＣＧＧＡＡＴＧＴＴＣＣＣＴＴＧＴＴＴＡＣＡＣＣＡＣＡＧＣＣＡＧＡＡＴＴＴＡＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＴＧＡＧＣＡＡＣＡＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＡＧＣＴＡＧＧＣＡＧＡＣＴＴＴＡＧＡＡＴＴＴＴＡＣＣＣＴＴＧＣＡＣＣＡＧＣＧＡＧＧＡＧＡＴＣＧＡＣＣＡＴＧＡＡＧＡＴＡＴＣＡＣＣＡＡＧＧＡＣＡＡＧＡＣＡＴＣＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＧＣＴＴＧＴＴＴＡＣＣＴＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＣＡＡＡＧＡＡＣＧＡＧＴＣＴＴＧＴＣＴＣＡＡＣＴＣＴＣＧＴＧＡＡＡＣＣＡＧＣＴＴＣＡＴＣＡＣＡＡＡＴＧＧＣＴＣＴＴＧＴＴＴＡＧＣＴＴＣＣＣＧＧＡＡＧＡＣＣＴＣＣＴＴＴＡＴＧＡＴＧＧＣＴＴＴＡＴＧＣＣＴＣＡＧＣＴＣＣＡＴＣＴＡＣＧＡＧＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＴＧＴＡＣＣＡＡＧＴＧＧＡＧＴＴＣＡＡＧＡＣＣＡＴＧＡＡＣＧＣＣＡＡＧＣＴＧＣＴＣＡＴＧＧＡＣＣＣＴＡＡＡＣＧＧＣＡＧＡＴＣＴＴＴＴＴＡＧＡＣＣＡＧＡＡＣＡＴＧＣＴＧＧＣＴＧＴＧＡＴＴＧＡＴＧＡＧＣＴＧＡＴＧＣＡＡＧＣＴＴＴＡＡＡＣＴＴＣＡＡＣＴＣＣＧＡＧＡＣＣＧＴＣＣＣＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＣＣＣＴＣＧＡＧＧＡＧＣＣＣＧＡＴＴＴＴＴＡＣＡＡＧＡＣＡＡＡＧＡＴＣＡＡＡＣＴＧＴＧＣＡＴＴＴＴＡＣＴＣＣＡＣＧＣＣＴＴＴＡＧＧＡＴＣＣＧＧＧＣＣＧＴＧＡＣＣＡＴＴＧＡＣＣＧＧＧＴＣＡＴＧＡＧＣＴＡＴＴＴＡＡＡＣＧＣＣＡＧＣ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
実施例１６：ＩＬ－１８／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質およびＩＬ－１２／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質の分泌
ＩＬ－１８／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物およびＩＬ－１２／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物をｐＭＳＧＶ－１修飾レトロウイルス発現ベクター（参照により本明細書に組み込まれる、Ｈｕｇｈｅｓ，Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ １６：４５７－７２，２００５）にクローニングし、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＩＬ－１２／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－１８／ＩＬ－１５ＲαＳｕタンパク質複合体（１２ｔ１５／ｓ１８と称する）の分泌がもたらされ、これを抗ＴＦ抗体親和性および他のクロマトグラフィー法により精製することができる。
ＩＬ－１８／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質のアミノ酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号２１９）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－１８）
ＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
ＩＬ－１２／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号２２０）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－１２サブユニットベータ（ｐ４０））
ＩＷＥＬＫＫＤＶＹＶＶＥＬＤＷＹＰＤＡＰＧＥＭＶＶＬＴＣＤＴＰＥＥＤＧＩＴＷＴＬＤＱＳＳＥＶＬＧＳＧＫＴＬＴＩＱＶＫＥＦＧＤＡＧＱＹＴＣＨＫＧＧＥＶＬＳＨＳＬＬＬＬＨＫＫＥＤＧＩＷＳＴＤＩＬＫＤＱＫＥＰＫＮＫＴＦＬＲＣＥＡＫＮＹＳＧＲＦＴＣＷＷＬＴＴＩＳＴＤＬＴＦＳＶＫＳＳＲＧＳＳＤＰＱＧＶＴＣＧＡＡＴＬＳＡＥＲＶＲＧＤＮＫＥＹＥＹＳＶＥＣＱＥＤＳＡＣＰＡＡＥＥＳＬＰＩＥＶＭＶＤＡＶＨＫＬＫＹＥＮＹＴＳＳＦＦＩＲＤＩＩＫＰＤＰＰＫＮＬＱＬＫＰＬＫＮＳＲＱＶＥＶＳＷＥＹＰＤＴＷＳＴＰＨＳＹＦＳＬＴＦＣＶＱＶＱＧＫＳＫＲＥＫＫＤＲＶＦＴＤＫＴＳＡＴＶＩＣＲＫＮＡＳＩＳＶＲＡＱＤＲＹＹＳＳＳＷＳＥＷＡＳＶＰＣＳ
（リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
（ヒトＩＬ－１２サブユニットアルファ（ｐ３５））
ＲＮＬＰＶＡＴＰＤＰＧＭＦＰＣＬＨＨＳＱＮＬＬＲＡＶＳＮＭＬＱＫＡＲＱＴＬＥＦＹＰＣＴＳＥＥＩＤＨＥＤＩＴＫＤＫＴＳＴＶＥＡＣＬＰＬＥＬＴＫＮＥＳＣＬＮＳＲＥＴＳＦＩＴＮＧＳＣＬＡＳＲＫＴＳＦＭＭＡＬＣＬＳＳＩＹＥＤＬＫＭＹＱＶＥＦＫＴＭＮＡＫＬＬＭＤＰＫＲＱＩＦＬＤＱＮＭＬＡＶＩＤＥＬＭＱＡＬＮＦＮＳＥＴＶＰＱＫＳＳＬＥＥＰＤＦＹＫＴＫＩＫＬＣＩＬＬＨＡＦＲＩＲＡＶＴＩＤＲＶＭＳＹＬＮＡＳ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
ある場合には、リーダーペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
実施例１７：１８ｔ１５－１２ｓ１６複合体の組換えタンパク質定量
１８ｔ１５－１２ｓ１６複合体（ＩＬ－１２／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／αＣＤ１６ｓｃＦｖ；ＩＬ－１８／ＴＦ／ＩＬ－１５を含む）を、標準のサンドイッチＥＬＩＳＡ法を使用して検出および定量化した（図２５）。抗ヒト組織因子抗体／ＩＬ－２または抗ＴＦ抗体／ＩＬ－１８が捕捉抗体として機能し、ビオチン化抗ヒトＩＬ－１２またはＩＬ－１８抗体（ＢＡＦ ２１９、Ｄ０４５－６、いずれもＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）が検出抗体として機能した。組織因子を、抗ヒト組織因子抗体（Ｉ４３）および抗ヒト組織因子抗体検出抗体を使用して検出した。
実施例１８：ＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物およびＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の作製
非限定的な例では、ＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物を作製した（図２６）。ヒトＴＧＦβＲＩＩ二量体配列およびヒトＩＬ－２１配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。リンカーを用いてＴＧＦβＲＩＩを別のＴＧＦβＲＩＩに結合してＴＧＦβＲＩＩの一本鎖バージョンを生成し、その後、ＴＧＦβＲＩＩ一本鎖二量体配列をＩＬ－１５ＲαＳｕのＮ末端コーディング領域に直接結合することによってＤＮＡ構築物を作製した。
ＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物の核酸配列（シグナル配列を含む）は、以下の通りである（配列番号９３）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（（ヒトＴＧＦβＲＩＩ－第１の断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＣＧＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴ
（リンカー）
ＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴ
（ヒトＴＧＦβＲＩＩ－第２の断片）
ＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＡＣＡＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＣＡＣＧＴＧＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＡＴＧＴＣＣＧＴＧＧＡＡＣＡＣＧＣＡＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＣＡＡＧＡＧＣＴＡＣＡＧＣＴＴＧＴＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＧＣＧＧＴＡＣＡＴＴＴＧＴＡＡＣＴＣＴＧＧＴＴＴＣＡＡＧＣＧＴＡＡＡＧＣＣＧＧＣＡＣＧＴＣＣＡＧＣＣＴＧＡＣＧＧＡＧＴＧＣＧＴＧＴＴＧＡＡＣＡＡＧＧＣＣＡＣＧＡＡＴＧＴＣＧＣＣＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＣＣＣＣＡＧＴＣＴＣＡＡＡＴＧＴＡＴＴＡＧＡ
加えて、ＩＬ－２１配列を組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に結合し、さらにＩＬ－２１／ＴＦ構築物をＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによってＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を作製した（図２７）。ＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物の核酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号８９）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－２１）
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ
（ヒト組織因子２１９）
ＴＣＣＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＡＴＡＣＣＧＴＧＧＣＣＧＣＴＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＡＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＧＡＣＡＡＴＴＣＴＧＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＧＣＣＣＧＴＣＡＡＴＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＴＣＣＡＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＡＧＡＣＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＡＧＴＧＣＴＴＣＴＡＣＡＣＡＡＣＡＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＴＧＡＴＴＴＡＡＣＣＧＡＣＧＡＡＡＴＣＧＴＣＡＡＧＧＡＣＧＴＣＡＡＧＣＡＡＡＣＣＴＡＴＣＴＧＧＣＴＣＧＧＧＴＣＴＴＴＴＣＣＴＡＣＣＣＣＧＣＴＧＧＣＡＡＴＧＴＣＧＡＧＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＣＴＣＴＡＣＧＡＧＡＡＴＴＣＣＣＣＣＧＡＡＴＴＣＡＣＣＣＣＴＴＡＴＴＴＡＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＣＣＡＧＣＣＴＡＣＣＡＴＣＣＡＧＡＧＣＴＴＣＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＣＣＧＴＣＧＡＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＴＡＡＣＡＣＡＴＴＴＴＴＡＴＣＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＣＣＴＣＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＧＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＡＡＡＧＡＣＣＧＣＴＡＡＧＡＣＣＡＡＣＡＣＣＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＴＧＡＣＧＴＧＧＡＣＡＡＡＧＧＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＴＧＣＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＣＧＴＧＡＴＣＣＣＴＴＣＴＣＧＴＡＣＣＧＴＣＡＡＣＣＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＡＧＡＴＴＣＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
実施例１９：ＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質およびＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質の分泌
ＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物およびＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物をｐＭＳＧＶ－１修飾レトロウイルス発現ベクター（参照により本明細書に組み込まれる、Ｈｕｇｈｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ １６：４５７－７２，２００５に記載のもの）にクローニングし、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕタンパク質複合体（２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓと称する、図２８および図２９）の分泌がもたらされた。２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体を、抗ＴＦ抗体親和性クロマトグラフィーおよび他のクロマトグラフィー法を使用して、ＣＨＯ－Ｋ１細胞培養上清から精製した。
ＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物のアミノ酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号９２）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＴＧＦβＲＩＩ－第１の断片）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
（ヒトＴＧＦβＲＩＩ－第２の断片）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
成熟ＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質のアミノ酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号８８）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－２１）
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
ある場合には、リーダーペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
実施例２０：免疫親和性クロマトグラフィーによる２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓの精製
抗ＴＦ抗体親和性カラムをＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＡＫＴＡ（商標）Ａｖａｎｔタンパク質精製システムに接続した。流速は、２ｍＬ／分の溶出ステップを除く全てのステップで４ｍＬ／分であった。
２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓの細胞培養収集物を１Ｍトリス塩基でｐＨ７．４に調整し、５カラム体積のＰＢＳで平衡化した抗ＴＦ抗体親和性カラムにロードした。試料をロードした後、カラムを５カラム体積のＰＢＳで洗浄し、その後、６カラム体積の０．１Ｍ酢酸（ｐＨ２．９）で溶出した。２８０ｎｍでの吸光度を収集し、その後、１Ｍトリス塩基の添加により、試料をｐＨ７．５～８．０に中和した。その後、中和した試料を、分子量カットオフ３０ＫＤａでＡｍｉｃｏｎ（登録商標）遠心フィルターを使用してＰＢＳに緩衝液交換した。図３０は、２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体が抗ＴＦ抗体親和性カラムに結合することを示しており、ここで、ＴＦは、２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ結合パートナーである。緩衝液交換したタンパク質試料を、さらなる生化学的分析および生物学的活性試験のために２～８℃で保管する。
各溶出後、抗ＴＦ抗体親和性カラムを６カラム体積の０．１Ｍグリシン（ｐＨ２．５）を使用してストリッピングした。その後、カラムを、１０カラム体積のＰＢＳ、０．０５％アジ化ナトリウムを使用して中和し、２～８℃で保管した。
実施例２１：２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓのサイズ排除クロマトグラフィー
ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｓｕｐｅｒｄｅｘ（登録商標）２００ Ｉｎｃｒｅａｓｅ １０／３００ ＧＬゲル濾過カラムを、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＡＫＴＡ（商標）Ａｖａｎｔタンパク質精製システムに接続した。カラムを２カラム体積のＰＢＳで平衡化した。流速は０．８ｍＬ／分であった。キャピラリーループを使用して、１ｍｇ／ｍＬの２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体２００μＬをカラムに注入した。その後、注入を１．２５カラム体積のＰＢＳで追跡した。ＳＥＣクロマトグラフを図３１に示した。２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓの単量体形態と二量体形態を表す可能性が高い２つのタンパク質ピークが存在した。
実施例２２：２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓのＳＤＳ－ＰＡＧＥ
純度およびタンパク質分子量を決定するために、精製した２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合タンパク質試料を、還元条件下で４～１２％ＮｕＰａｇｅビス－トリスタンパク質ゲルＳＤＳ－ＰＡＧＥを使用して分析した。ゲルをＩｎｓｔａｎｔＢｌｕｅ（商標）で約３０分間染色し、その後、精製水中で一晩脱色した。図３２は、抗ＴＦ抗体親和性精製２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓのＳＤＳゲルの例を示しており、３９．０８ｋＤａおよび５３ｋＤａにバンドがある。
ＣＨＯ細胞における２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓのグリコシル化は、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ Ｍｉｘ ＩＩキット（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ）および製造業者の指示を使用して確認した。図３２のレーン４に見られるように、脱グリコシル化により２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓの分子量が減少する。
実施例２３：２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体の組換えタンパク質定量
２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体を、標準のサンドイッチＥＬＩＳＡ法を使用して検出および定量化した（図３３～３７）。抗ヒト組織因子抗体が捕捉抗体として機能し、ビオチン化抗ヒトＩＬ－２１、ＩＬ－１５、またはＴＧＦβＲＩＩが検出抗体として機能した。組織因子も、抗ヒト組織因子捕捉抗体（Ｉ４３）および抗ヒト組織因子抗体検出抗体を使用して検出した。Ｉ４３／抗ＴＦ抗体ＥＬＩＳＡを、同様の濃度の精製組織因子と比較した。
実施例２４：２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体の免疫刺激能力
２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体のＩＬ－１５免疫刺激活性を評価するために、増加濃度の２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓを２００μＬのＩＭＤＭ：１０％ＦＢＳ培地中の３２Ｄβ細胞（１０４細胞／ウェル）に添加し、細胞を３７℃で３日間インキュベートした。４日目に、ＷＳＴ－１増殖試薬（１０μＬ／ウェル）を添加し、４時間後、吸光度を４５０ｎｍで測定して、ＷＳＴ－１の可溶性ホルマザン色素への切断に基づいて細胞増殖を測定した。ヒト組換えＩＬ－１５の生物活性を陽性対照として評価した。図３７に示されるように、２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓは、ＩＬ－１５依存性３２Ｄβ細胞増殖を示した。２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体は、恐らくＩＬ－２１および組織因子のＩＬ－１５ドメインへの結合のため、ヒト組換えＩＬ－１５と比較して低下した。
加えて、ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβレポーター細胞（ｈｋｂ－ｔｇｆｂ、ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）を使用して、ＴＧＦβ１活性を遮断する２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓの能力を測定した（図３８）。増加濃度の２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓを０．１ｎＭのＴＧＦβ１と混合し、２００μＬのＩＭＤＭ：１０％熱不活性化ＦＢＳ培地中のＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβレポーター細胞（２．５×１０４細胞／ウェル）に添加した。細胞を３７℃で一晩インキュベートした。翌日、２０μＬの誘導されたＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβレポーター細胞上清を１８０μＬのＱＵＡＮＴＩ－Ｂｌｕｅ（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）に添加し、３７℃で１～３時間インキュベートした。２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ活性を、吸光度を６２０ｎｍで測定することによって評価した。ヒト組換えＴＧＦβＲＩＩ／Ｆｃ活性を陽性対照として評価した。
これらの結果は、２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体のＴＧＦβＲＩＩドメインがＴＧＦβ１を捕捉する能力を保持することを示す。ＴＧＦβ１活性を遮断する２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓの能力は、恐らくＴＧＦβＲＩＩのＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメインへの結合のため、ヒト組換えＴＧＦβＲＩＩ／Ｆｃの能力と比較して低下した。
実施例２５：２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体によるサイトカイン誘導性メモリー様ＮＫ細胞の誘導
サイトカイン誘導性メモリー様ＮＫ細胞を、精製ＮＫ細胞を飽和量のサイトカインで一晩刺激した後にエクスビボで誘導することができる。これらのメモリー様特性を、ＩＬ－２受容体α（ＩＬ－２Ｒα、ＣＤ２５）、ＣＤ６９（および他の活性化マーカー）の発現、およびＩＦＮ－γ産生の増加により測定することができる。サイトカイン誘導性メモリー様ＮＫ細胞の生成を促進する２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体の能力を評価するために、精製ヒトＮＫ細胞（９５％超のＣＤ５６＋）を１ｎＭ～１００ｎＭの２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体で１４～１８時間刺激した。細胞表面ＣＤ２５およびＣＤ６９発現および細胞内ＩＦＮ－γレベルを、抗体染色およびフローサイトメトリーによって評価した。
新鮮なヒト白血球を血液バンクから入手し、ＣＤ５６＋ＮＫ細胞を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ／ヒトＮＫ細胞試薬（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して単離した。ＮＫ細胞の純度は７０％超であり、ＣＤ５６－ＢＶ４２１、ＣＤ１６－ＢＶ５１０、ＣＤ２５－ＰＥ、ＣＤ６９－ＡＰＣＦｉｒｅ７５０特異的抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で染色することにより確認した。細胞をカウントし、０．２ｍＬの完全培地（ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ）、２ｍＭのＬ－グルタミン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ペニシリン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ストレプトマイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、および１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を補充）中の９６ウェル平底プレートに０．２×１０６／ｍＬで再懸濁した。細胞を、ｈＩＬ－２１（５０ｎｇ／ｍＬ）（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）およびｈＩＬ－１５（５０ｎｇ／ｍＬ）（ＮＣＩ）の混合サイトカイン、または１ｎＭ、１０ｎＭ、もしくは１００ｎＭの２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体のいずれかで、３７℃で一晩、５％ＣＯ２で１４～１８時間刺激した。その後細胞を収集し、ＣＤ５６－ＢＶ４２１、ＣＤ１６－ＢＶ５１０、ＣＤ２５－ＰＥ、ＣＤ６９－ＡＰＣＦｉｒｅ７５０特異的抗体で３０分間表面染色した。染色後、細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液（１Ｘ ＰＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、０．５％ＢＳＡ（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）および０．００１％アジ化ナトリウム（Ｓｉｇｍａ）を含む）中で洗浄した（１５００ＲＰＭ、室温で５分間）。２回洗浄した後、細胞を、ＢＤ ＦＡＣＳＣｅｌｅｓｔａ（商標）フローサイトメーターを使用して分析した。（プロットされたデータ－平均蛍光強度、図３９および図４０）。
新鮮なヒト白血球を血液バンクから入手し、ＣＤ５６＋ＮＫ細胞を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ／ヒトＮＫ細胞試薬（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して単離した。ＮＫ細胞の純度は７０％超であり、ＣＤ５６－ＢＶ４２１、ＣＤ１６－ＢＶ５１０、ＣＤ２５－ＰＥ、ＣＤ６９－ＡＰＣＦｉｒｅ７５０特異的抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で染色することにより確認した。細胞をカウントし、０．２ｍＬの完全培地（ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ）、２ｍＭのＬ－グルタミン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ペニシリン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ストレプトマイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、および１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を補充）中の９６ウェル平底プレートに０．２×１０６／ｍＬで再懸濁した。細胞を、ｈＩＬ－２１（５０ｎｇ／ｍＬ）（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）およびｈＩＬ－１５（５０ｎｇ／ｍＬ）（ＮＣＩ）の混合サイトカイン、または１ｎＭ、１０ｎＭ、もしくは１００ｎＭの２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体のいずれかで、３７℃で一晩、５％ＣＯ２で１４～１８時間刺激した。その後、細胞を、１０μｇ／ｍＬのブレフェルジンＡ（Ｓｉｇｍａ）および１Ｘモネンシン（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で４時間処理した。細胞を収集し、ＣＤ５６－ＢＶ４２１、ＣＤ１６－ＢＶ５１０、ＣＤ２５－ＰＥ、ＣＤ６９－ＡＰＣＦｉｒｅ７５０特異的抗体で３０分間表面染色した。染色後、細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液（１Ｘ ＰＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、０．５％ＢＳＡ（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）および０．００１％アジ化ナトリウム（Ｓｉｇｍａ）を含む）中で洗浄し（１５００ＲＰＭ、室温で５分間）、室温で１０分間固定した。固定後、細胞を１ｘ透過処理緩衝液（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で洗浄し（１５００ＲＰＭ、室温で５分間）、細胞内ＩＦＮ－γ－ＰＥ Ａｂ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）で、室温で３０分間染色した。細胞を１ｘ透過処理緩衝液で再度洗浄し、その後、ＦＡＣＳ緩衝液で洗浄した。細胞ペレットを３００μＬのＦＡＣＳ緩衝液中に再懸濁し、ＢＤ ＦＡＣＳＣｅｌｅｓｔａ（商標）フローサイトメーターを使用して分析した。（プロットされたＩＦＮ－γ陽性細胞％、図４１）。
実施例２６：ヒト腫瘍細胞に対するＮＫ細胞のインビトロ細胞傷害性
ヒト骨髄性白血病細胞Ｋ５６２（ＣｅｌｌＴｒａｃｅ ｖｉｏｌｅｔで標識）を、増加濃度の２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体の存在下で、精製ヒトＮＫ細胞（ＳｔｅｍＣｅｌｌヒトＮＫ細胞精製キット（Ｅ：Ｔ比；２：１）を使用）とインキュベートした。２０時間後、培養物を収集し、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）で染色し、フローサイトメトリーで評価した。図４２に示されるように、２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体は、対照と比較して、Ｋ５６２に対するヒトＮＫ細胞傷害性を誘導した。
実施例２７：ＩＬ－２１／ＴＦ変異体／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の作製、およびＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕとの結果として生じた融合タンパク質複合体
非限定的な例では、ＩＬ－２１を組織因子２１９変異体のＮ末端コーディング領域に直接結合し、さらにＩＬ－２１／ＴＦ変異体をＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによってＩＬ－２１／ＴＦ変異体／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物を作製した。
ＩＬ－２１／ＴＦ変異体／ＩＬ－１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号２２１、影付きのヌクレオチドが変異体であり、変異体コドンには下線が引かれている）。
（シグナル配列）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－２１）
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ
（ヒト組織因子２１９変異体）
Figure 0007397874000001
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
ＩＬ－２１／ＴＦ変異体／ＩＬ－１５構築物のアミノ酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号２２２、置換残基には影付けされている）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－２１）
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ
（ヒト組織因子２１９）
Figure 0007397874000002
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
ある場合には、リーダーペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
いくつかの実施形態では、ＩＬ－２１／ＴＦ変異体／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物を、ＴＧＦβＲＩＩ ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物と組み合わせて、上述のようにレトロウイルスベクターを使用して細胞にトランスフェクトし、ＩＬ－２１／ＴＦ変異体／ＩＬ－１５融合タンパク質およびＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質として発現させることができる。ＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質のＩＬ－１５ＲαＳｕドメインがＩＬ－２１／ＴＦ変異体／ＩＬ－１５融合タンパク質のＩＬ－１５ドメインに結合して、ＩＬ－２１／ＴＦ変異体／ＩＬ－１５：ＴＧＦβＲＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ複合体を作製する。
実施例２８：ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物およびＴＧＦβＲＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の作製、ならびに結果として生じた融合タンパク質複合体
非限定的な例では、ＩＬ－２１をＩＬ－１５ＲαＳｕサブユニット配列に直接結合することによってＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物を作製した。ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物の核酸配列（シグナル配列を含む）は、以下の通りである（配列番号１１１）。
（シグナル配列）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－２１）
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物のアミノ酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号１１０）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－２１）
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
ある場合には、リーダーペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
いくつかの実施形態では、ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物を、ＴＧＦβＲＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物と組み合わせて、上述のようにレトロウイルスベクターにトランスフェクトし、ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質およびＴＧＦβＲＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質として発現させることができる。ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質のＩＬ－１５ＲαＳｕドメインがＴＧＦβＲＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質のＩＬ－１５ドメインに結合して、ＴＧＦβＲＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ複合体を作製する。
ＴＧＦβＲＩＩ配列をヒト組織因子２１９形態のＮ末端コーディング領域に結合し、その後、ＴＧＦβＲＩＩ／ＴＦ構築物をＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによってＴＧＦβＲＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物を作製した。上述のように、ＴＧＦβＲＩＩの一本鎖バージョン（ＴＧＦβＲＩＩ－リンカー－ＴＧＦβＲＩＩ）を使用した。ＴＧＦβＲＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物の核酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号１３６）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＴＧＦβＲＩＩ－第１の断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＣＧＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴ
（リンカー）
ＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴ
（ヒトＴＧＦβＲＩＩ－第２の断片）
ＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＡＣＡＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒト組織因子２１９）
ＴＣＣＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＡＴＡＣＣＧＴＧＧＣＣＧＣＴＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＡＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＧＡＣＡＡＴＴＣＴＧＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＧＣＣＣＧＴＣＡＡＴＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＴＣＣＡＣＣＡＡＡＴＣＣＧＧＡＧＡＣＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＡＧＴＧＣＴＴＣＴＡＣＡＣＡＡＣＡＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＴＧＡＴＴＴＡＡＣＣＧＡＣＧＡＡＡＴＣＧＴＣＡＡＧＧＡＣＧＴＣＡＡＧＣＡＡＡＣＣＴＡＴＣＴＧＧＣＴＣＧＧＧＴＣＴＴＴＴＣＣＴＡＣＣＣＣＧＣＴＧＧＣＡＡＴＧＴＣＧＡＧＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＣＴＣＴＡＣＧＡＧＡＡＴＴＣＣＣＣＣＧＡＡＴＴＣＡＣＣＣＣＴＴＡＴＴＴＡＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＣＣＡＧＣＣＴＡＣＣＡＴＣＣＡＧＡＧＣＴＴＣＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＣＣＧＴＣＧＡＧＧＡＴＧＡＡＡＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＴＡＡＣＡＣＡＴＴＴＴＴＡＴＣＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＣＣＴＣＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＣＴＡＴＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＧＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＡＡＡＧＡＣＣＧＣＴＡＡＧＡＣＣＡＡＣＡＣＣＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＴＧＡＣＧＴＧＧＡＣＡＡＡＧＧＣＧＡＧＡＡＣＴＡＣＴＧＣＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＣＧＴＧＡＴＣＣＣＴＴＣＴＣＧＴＡＣＣＧＴＣＡＡＣＣＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＡＧＡＴＴＣＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
ＴＧＦβＲＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質のアミノ酸配列（シグナルペプチドを含む）は、以下の通りである（配列番号１３５）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＴＧＦβＲＩＩ－第１の断片）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
（ヒトＴＧＦβＲＩＩ－第２の断片）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
実施例２９：ＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物の作製
非限定的な例では、ＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物を作製した（図４３を参照のこと）。ヒトＩＬ－７配列、ヒトＩＬ－１５ＲαＳｕ配列、ヒトＩＬ－１５配列、およびヒト組織因子２１９配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。ＩＬ－７配列をＩＬ－１５ＲαＳｕ配列に結合することによってＤＮＡ構築物を作製した。最終ＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物配列をＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。
ＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物の第２のキメラポリペプチドをコードする核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号１０３）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＧＧＡＧＴＧＡＡＡＧＴＴＣＴＴＴＴＴＧＣＣＣＴＴＡＴＴＴＧＴＡＴＴＧＣＴＧＴＧＧＣＣＧＡＧＧＣＣ
（ヒトＩＬ－７）
ＧＡＴＴＧＴＧＡＴＡＴＴＧＡＡＧＧＴＡＡＡＧＡＴＧＧＣＡＡＡＣＡＡＴＡＴＧＡＧＡＧＴＧＴＴＣＴＡＡＴＧＧＴＣＡＧＣＡＴＣＧＡＴＣＡＡＴＴＡＴＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＡＧＡＡＡＴＴＧＧＴＡＧＣＡＡＴＴＧＣＣＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＡＴＴＴＡＡＣＴＴＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＣＡＴＡＴＣＴＧＴＧＡＴＧＣＴＡＡＴＡＡＧＧＡＡＧＧＴＡＴＧＴＴＴＴＴＡＴＴＣＣＧＴＧＣＴＧＣＴＣＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＣＡＡＴＴＴＣＴＴＡＡＡＡＴＧＡＡＴＡＧＣＡＣＴＧＧＴＧＡＴＴＴＴＧＡＴＣＴＣＣＡＣＴＴＡＴＴＡＡＡＡＧＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＡＡＣＡＡＴＡＣＴＧＴＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＴＧＧＣＣＡＧＧＴＴＡＡＡＧＧＡＡＧＡＡＡＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＣＣＡＡＣＣＡＡＣＡＡＡＧＡＧＴＴＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＴＡＡＡＴＣＴＴＴＡＡＡＧＧＡＡＣＡＧＡＡＡＡＡＡＣＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＴＧＴＴＴＣＣＴＡＡＡＧＡＧＡＣＴＡＴＴＡＣＡＡＧＡＧＡＴＡＡＡＡＡＣＴＴＧＴＴＧＧＡＡＴＡＡＡＡＴＴＴＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＴＡＡＡＧＡＡＣＡＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＣＡＣＧＴＧＣＣＣＴＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＣＣＧＴＧＧＡＡＣＡＣＧＣＡＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＣＡＡＧＡＧＣＴＡＣＡＧＣＴＴＧＴＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＧＣＧＧＴＡＣＡＴＴＴＧＴＡＡＣＴＣＴＧＧＴＴＴＣＡＡＧＣＧＴＡＡＡＧＣＣＧＧＣＡＣＧＴＣＣＡＧＣＣＴＧＡＣＧＧＡＧＴＧＣＧＴＧＴＴＧＡＡＣＡＡＧＧＣＣＡＣＧＡＡＴＧＴＣＧＣＣＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＣＣＣＣＡＧＴＣＴＣＡＡＡＴＧＣＡＴＴＡＧＡ
ＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物の第２のキメラポリペプチド（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号１０２）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－７）
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
実施例３０：ＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の作製
非限定的な例では、ＩＬ－２１配列を組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に結合し、さらにＩＬ－２１／ＴＦ構築物をＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合連結することによってＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を作製した（図４４）。
Ｇｅｎｅｗｉｚによって合成したＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物の第１のキメラポリペプチドをコードする核酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号８９）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＧＧＡＧＴＧＡＡＡＧＴＴＣＴＴＴＴＴＧＣＣＣＴＴＡＴＴＴＧＴＡＴＴＧＣＴＧＴＧＧＣＣＧＡＧＧＣＣ
（ヒトＩＬ－２１断片）
ＣＡＡＧＧＴＣＡＡＧＡＴＣＧＣＣＡＣＡＴＧＡＴＴＡＧＡＡＴＧＣＧＴＣＡＡＣＴＴＡＴＡＧＡＴＡＴＴＧＴＴＧＡＴＣＡＧＣＴＧＡＡＡＡＡＴＴＡＴＧＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＧＴＣＣＣＴＧＡＡＴＴＴＣＴＧＣＣＡＧＣＴＣＣＡＧＡＡＧＡＴＧＴＡＧＡＧＡＣＡＡＡＣＴＧＴＧＡＧＴＧＧＴＣＡＧＣＴＴＴＴＴＣＣＴＧＴＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＡＣＴＡＡＡＧＴＣＡＧＣＡＡＡＴＡＣＡＧＧＡＡＡＣＡＡＴＧＡＡＡＧＧＡＴＡＡＴＣＡＡＴＧＴＡＴＣＡＡＴＴＡＡＡＡＡＧＣＴＧＡＡＧＡＧＧＡＡＡＣＣＡＣＣＴＴＣＣＡＣＡＡＡＴＧＣＡＧＧＧＡＧＡＡＧＡＣＡＧＡＡＡＣＡＣＡＧＡＣＴＡＡＣＡＴＧＣＣＣＴＴＣＡＴＧＴＧＡＴＴＣＴＴＡＴＧＡＧＡＡＡＡＡＡＣＣＡＣＣＣＡＡＡＧＡＡＴＴＣＣＴＡＧＡＡＡＧＡＴＴＣＡＡＡＴＣＡＣＴＴＣＴＣＣＡＡＡＡＧＡＴＧＡＴＴＣＡＴＣＡＧＣＡＴＣＴＧＴＣＣＴＣＴＡＧＡＡＣＡＣＡＣＧＧＡＡＧＴＧＡＡＧＡＴＴＣＣ
（ヒト組織因子２１９）
ＴＣＡＧＧＣＡＣＴＡＣＡＡＡＴＡＣＴＧＴＧＧＣＡＧＣＡＴＡＴＡＡＴＴＴＡＡＣＴＴＧＧＡＡＡＴＣＡＡＣＴＡＡＴＴＴＣＡＡＧＡＣＡＡＴＴＴＴＧＧＡＧＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＣＡＡＴＣＡＡＧＴＣＴＡＣＡＣＴＧＴＴＣＡＡＡＴＡＡＧＣＡＣＴＡＡＧＴＣＡＧＧＡＧＡＴＴＧＧＡＡＡＡＧＣＡＡＡＴＧＣＴＴＴＴＡＣＡＣＡＡＣＡＧＡＣＡＣＡＧＡＧＴＧＴＧＡＣＣＴＣＡＣＣＧＡＣＧＡＧＡＴＴＧＴＧＡＡＧＧＡＴＧＴＧＡＡＧＣＡＧＡＣＧＴＡＣＴＴＧＧＣＡＣＧＧＧＴＣＴＴＣＴＣＣＴＡＣＣＣＧＧＣＡＧＧＧＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＣＧＧＴＴＣＴＧＣＴＧＧＧＧＡＧＣＣＴＣＴＧＴＡＴＧＡＧＡＡＣＴＣＣＣＣＡＧＡＧＴＴＣＡＣＡＣＣＴＴＡＣＣＴＧＧＡＧＡＣＡＡＡＣＣＴＣＧＧＡＣＡＧＣＣＡＡＣＡＡＴＴＣＡＧＡＧＴＴＴＴＧＡＡＣＡＧＧＴＧＧＧＡＡＣＡＡＡＡＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＣＧＴＡＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＣＡＧＡＡＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＴＴＴＣＣＴＡＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＴＴＴＴＧＧＣＡＡＧＧＡＣＴＴＡＡＴＴＴＡＴＡＣＡＣＴＴＴＡＴＴＡＴＴＧＧＡＡＡＴＣＴＴＣＡＡＧＴＴＣＡＧＧＡＡＡＧＡＡＡＡＣＡＧＣＣＡＡＡＡＣＡＡＡＣＡＣＴＡＡＴＧＡＧＴＴＴＴＴＧＡＴＴＧＡＴＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＡＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＴＧＴＴＣＡＡＧＣＡＧＴＧＡＴＴＣＣＣＴＣＣＣＧＡＡＣＡＧＴＴＡＡＣＣＧＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＧＡＣＡＧＣＣＣＧＧＴＡＧＡＧＴＧＴＡＴＧＧＧＣＣＡＧＧＡＧＡＡＡＧＧＧＧＡＡＴＴＣＡＧＡＧＡＡ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
リーダー配列を含むＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物の第１のキメラポリペプチドは、配列番号８８である：
（シグナルペプチド）
ＭＧＶＫＶＬＦＡＬＩＣＩＡＶＡＥＡ（配列番号２２３）
（ヒトＩＬ－２１）
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
実施例３１：ＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質およびＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質の分泌
ＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物およびＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物をｐＭＳＧＶ－１修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（参照により本明細書に組み込まれる、Ｈｕｇｈｅｓ，Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ １６：４５７－７２，２００５に記載のもの）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕタンパク質複合体（２１ｔ１５－７ｓと称する、図４５および図４６）の形成および分泌が可能になった。２１ｔ１５－７ｓタンパク質を、抗ＴＦ抗体親和性クロマトグラフィーおよびサイズ排除クロマトグラフィーを使用してＣＨＯ－Ｋ１細胞培養上清から精製し、ＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質およびＩＬ－２１／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質からなる可溶性（非凝集）タンパク質複合体を得た。
ある場合には、リーダー（シグナル配列）ペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
実施例３２：免疫親和性クロマトグラフィーによる２１ｔ１５－７ｓの精製
抗ＴＦ抗体親和性カラムをＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ（商標）ＡＫＴＡ Ａｖａｎｔタンパク質精製システムに接続した。流速は、２ｍＬ／分の溶出ステップを除く全てのステップで４ｍＬ／分であった。
２１ｔ１５－７ｓの細胞培養収集物を１Ｍトリス塩基でｐＨ７．４に調整し、５カラム体積のＰＢＳで平衡化した抗ＴＦ抗体親和性カラムにロードした。試料をロードした後、カラムを５カラム体積のＰＢＳで洗浄し、その後、６カラム体積の０．１Ｍ酢酸（ｐＨ２．９）で溶出した。２８０ｎｍでの吸光度を収集し、その後、１Ｍトリス塩基の添加により、試料をｐＨ７．５～８．０に中和した。その後、中和した試料を、分子量カットオフ３０ＫＤａでＡｍｉｃｏｎ（登録商標）遠心フィルターを使用してＰＢＳに緩衝液交換した。緩衝液交換したタンパク質試料を、さらなる生化学的分析および生物学的活性試験のために２～８℃で保管した。
各溶出後、抗ＴＦ抗体親和性カラムを６カラム体積の０．１Ｍグリシン（ｐＨ２．５）を使用してストリッピングした。その後、カラムを、１０カラム体積のＰＢＳ、０．０５％アジ化ナトリウムを使用して中和し、２～８℃で保管した。
実施例３３：サイズ排除クロマトグラフィー
ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｓｕｐｅｒｄｅｘ（登録商標）２００ Ｉｎｃｒｅａｓｅ １０／３００ ＧＬゲル濾過カラムを、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＡＫＴＡ（商標）Ａｖａｎｔタンパク質精製システムに接続した。カラムを２カラム体積のＰＢＳで平衡化した。流速は０．７ｍＬ／分であった。キャピラリーループを使用して、１ｍｇ／ｍＬの７ｔ１５－２１ｓ複合体２００μＬをカラムに注入した。注入を１．２５カラム体積のＰＢＳで追跡した。
実施例３４：２１ｔ１５－７ｓおよび２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓのＳＤＳ－ＰＡＧＥ
純度およびタンパク質分子量を決定するために、精製した２１ｔ１５－７ｓタンパク質または２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓタンパク質試料を、４～１２％ＮｕＰａｇｅビス－トリスタンパク質ゲルＳＤＳ－ＰＡＧＥを使用して分析した。ゲルをＩｎｓｔａｎｔＢｌｕｅ（商標）で約３０分間染色し、その後、精製水中で一晩脱色する。
実施例３５：ＣＨＯ－Ｋ１細胞における２１ｔ１５－７ｓおよび２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓのグリコシル化
ＣＨＯ－Ｋ１細胞における２１ｔ１５－７ｓまたはＣＨＯ－Ｋ１細胞における２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓのグリコシル化を、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ Ｍｉｘ ＩＩキット（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ）を製造業者の指示に従って使用して確認した。
実施例３６：２１ｔ１５－７ｓ複合体および２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体の組換えタンパク質定量
２１ｔ１５－７ｓ複合体または２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体を、標準のサンドイッチＥＬＩＳＡ法を使用して検出および定量化した。抗ヒト組織因子抗体（ＩｇＧ１）は捕捉抗体として機能し、ビオチン化抗ヒトＩＬ－２１、ＩＬ－１５、もしくはＩＬ－７抗体（２１ｔ１５－７ｓ）、またはビオチン化抗ヒトＩＬ－２１、ＩＬ－１５、もしくはＴＧＦ－βＲＩＩ抗体（２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ）が検出抗体として機能した。精製した２１ｔ１５－７ｓタンパク質複合体または２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓタンパク質複合体の組織因子を、抗ヒト組織因子捕捉抗体および抗ヒト組織因子抗体（ＩｇＧ１）検出抗体を使用して検出した。抗ＴＦ抗体ＥＬＩＳＡを、同様の濃度の精製組織因子と比較する。
実施例３７：２１ｔ１５－７ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体または２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体による初代ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖能力
初代ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を増殖する２１ｔ１５－７ｓ複合体の能力を評価するために、２１ｔ１５－７ｓ複合体および２１ｔ１５－７ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体を、新鮮なヒト白血球の試料から得たＮＫ細胞に添加した。細胞を、２５ｎＭの抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体または抗ＴＦ ＩｇＧ４抗体を有するまたは有しない５０ｎＭの２１ｔ１５－７ｓ複合体で、３７℃および５％ＣＯ２で刺激した。細胞を、４８～７２時間毎にカウントすることにより０．５×１０６／ｍＬ～２．０×１０６／ｍＬ未満の濃度で維持し、培地に新鮮な刺激剤を補充した。２１ｔ１５－７ｓ複合体または抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体もしくは抗ＴＦ ＩｇＧ４抗体もしくは抗ＴＦ ＩｇＧ４＋２１ｔ１５－７ｓ複合体で刺激した細胞を５日目まで維持した。図４７は、２１ｔ１５－７ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体とのインキュベーション時の初代ＮＫ細胞の増殖を示す。図５４もこれらの結果の概略図を示す。
実施例３８：２１ｔ１５－７ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体または２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体による増殖したＮＫ細胞の活性化
初代ＮＫ細胞を、精製ＮＫ細胞を２１ｔ１５－７ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体で一晩刺激した後にエクスビボで誘導することができる。新鮮なヒト白血球を血液バンクから入手し、ＣＤ５６＋ＮＫ細胞を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ／ヒトＮＫ細胞試薬（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して単離した。ＮＫ細胞の純度は８０％超であり、ＣＤ５６－ＢＶ４２１およびＣＤ１６－ＢＶ５１０特異的抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で染色することにより確認した。細胞をカウントし、１ｍＬの完全培地（ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ）、４ｍＭのＬ－グルタミン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ペニシリン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ストレプトマイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、非必須アミノ酸（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ピルビン酸ナトリウム（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、および１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を補充）中の２４ウェル平底プレートに１×１０６／ｍＬで再懸濁した。細胞を、２５ｎＭの抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体を有するまたは有しない５０ｎＭの２１ｔ１５－７ｓで、３７℃および５％ＣＯ２で刺激した。細胞を４８～７２時間毎にカウントし、１４日目まで０．５×１０６／ｍＬ～２．０×１０６／ｍＬの濃度で維持した。培地に新鮮な刺激剤を定期的に補充した。細胞を収集し、３日目に、ＣＤ５６－ＢＶ４２１、ＣＤ１６－ＢＶ５１０、ＣＤ２５－ＰＥ、ＣＤ６９－ＡＰＣＦｉｒｅ７５０特異的抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）で表面染色し、Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ－Ｃｅｌｅｓｔｅ－ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅによって分析した。図４８は、活性化マーカーＣＤ２５ ＭＦＩおよびＣＤ６９ ＭＦＩを示す。活性化マーカーＣＤ２５ ＭＦＩは、２１ｔ１５－７ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体刺激で増加したが、２１ｔ１５－７ｓ複合体刺激では増加しなかった。活性化マーカーＣＤ６９ ＭＦＩは、２１ｔ１５－７ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体および２１ｔ１５－７ｓ複合体単独の両方で増加した。
実施例３９：ヒト腫瘍細胞に対するＮＫ細胞の細胞傷害性
新鮮なヒト血液バフィーコートを血液バンクから入手した。ＮＫ細胞を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ／ヒトＮＫ細胞試薬（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用した陰性選択により単離した。ＮＫ細胞を、１００ｎＭの２１ｔ１５－７ｓおよび５０ｎＭの抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体を有する完全ＲＰＭＩ－１６４０培地中で、３７℃および５％ＣＯ２で１１日目まで培養した。活性化したＮＫ細胞をＣｅｌｌｔｒａｃｅ ｖｉｏｌｅｔ標識Ｋ５６２細胞と２：１のＥ：Ｔ比で混合し、３７℃で４時間インキュベートした。混合物を収集し、死んだＫ５６２細胞のパーセンテージをヨウ化プロピジウム染色およびフローサイトメトリーによって決定した。図４９は、増殖したＮＫ細胞とインキュベートした際のＫ５６２細胞の特異的溶解の増加を示す。
実施例４０：ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物の作製
非限定的な例では、ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物を作製した。ヒトＩＬ－２１配列およびヒトＩＬ－１５ＲαＳｕ配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。ＩＬ－２１配列をＩＬ－１５ＲαＳｕ配列に結合することによってＤＮＡ構築物を作製した。最終ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物配列をＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。図５０を参照されたい。
実施例４１：ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の作製
非限定的な例では、ＩＬ－７配列を組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に結合し、さらにＩＬ－７／ＴＦ構築物をＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによってＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を作製した。図５１を参照されたい。
実施例４２：ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαｓｕｓｈｉＤＮＡ構築物の作製
非限定的な例では、ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕの第２のキメラポリペプチドを生成した。ヒトＩＬ－２１配列およびヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉ配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。ＩＬ－２１配列をＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉ配列に結合することによってＤＮＡ構築物を作製した。最終ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物配列をＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。
Ｇｅｎｅｗｉｚによって合成したＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕドメインの第２のキメラポリペプチドをコードする核酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号１１１）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－２１）
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
ＩＬ－２１／ＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメインの第２のキメラポリペプチド（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号１１０）。
（シグナル配列）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－２１）
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
実施例４３：ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物の作製
非限定的な例では、ＩＬ－７配列を組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に結合し、さらにＩＬ－７／ＴＦ構築物をＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによってＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５の例示的な第１のキメラポリペプチドを作製した。Ｇｅｎｅｗｉｚによって合成したＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５の第１のキメラポリペプチドをコードする核酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号１０７）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－７断片）
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５の第１のキメラポリペプチド（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号１０６）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－７）
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
実施例４４：ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質およびＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質の分泌
ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ ＤＮＡ構築物およびＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５ ＤＮＡ構築物をｐＭＳＧＶ－１修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（参照により本明細書に組み込まれる、Ｈｕｇｈｅｓ，Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ １６：４５７－７２，２００５に記載のもの）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕタンパク質複合体（７ｔ１５－２１ｓと称する）の形成および分泌が可能になった。７ｔ１５－２１ｓタンパク質を、抗ＴＦ抗体（ＩｇＧ１）親和性クロマトグラフィーおよびサイズ排除クロマトグラフィーを使用してＣＨＯ－Ｋ１細胞培養上清から精製し、ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質およびＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質からなる可溶性（非凝集）タンパク質複合体を得た。図５２および図５３を参照されたい。
実施例４５：ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質およびＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質の分析的サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）分析
抗組織因子モノクローナル抗体および７ｔ１５－２１ｓが抗体－融合－分子複合体を形成することができるかを決定するために、分析的サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を行った。Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ２００ Ｉｎｃｒｅａｓｅ １０／３００ ＧＬゲル濾過カラム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ製）をＡＫＴＡ Ａｖａｎｔシステム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ製）に接続した。カラムを２カラム体積のＰＢＳで平衡化した。流速は０．７ｍＬ／分であった。抗ＴＦ ｍＡｂ（１ｍｇ／ｍＬ）、７ｔ１５－２１ｓ（１ｍｇ／ｍＬ）、および１：１の比率で組み合わせた混合物（各タンパク質の最終濃度０．５ｍｇ／ｍＬ）の試料をＰＢＳ中に置いた。各試料を、キャピラリーループを使用してＳｕｐｅｒｄｅｘ ２００カラムに注入し、ＳＥＣによって分析した。各試料のＳＥＣクロマトグラフを図５５に示した。ＳＥＣの結果は、７ｔ１５－２１ｓに２つのタンパク質ピークが存在し、恐らく７ｔ１５－２１ｓの二量体（１９９．２ｋＤａの見かけの分子量）およびより高次のオリゴマーを表し、抗ＴＦ ｍＡｂには１つのピーク（見かけの分子量２０６．８ｋＤａ）が存在する。しかしながら、予想通り、抗ＴＦ ｍＡｂおよび７ｔ１５－２１ｓを含有する混合試料では、高分子量（５７６．９ｋＤａの見かけの分子量）の新たなタンパク質ピークが形成され、抗ＴＦ ｍＡｂおよび７ｔ１５－２１ｓが融合タンパク質複合体における抗ＴＦ ｍＡｂのＴＦへの結合により抗体－抗原複合体を形成することを示す。
実施例４６：７ｔ１５－２１ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体による初代ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の増殖能力
初代ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を増殖する７ｔ１５－２１ｓ複合体の能力を評価するために、７ｔ１５－２１ｓ複合体および７ｔ１５－２１ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体を、新鮮なヒト白血球の試料から得たＮＫ細胞に添加する。細胞を、２５ｎＭの抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体または抗ＴＦ ＩｇＧ４抗体を有するまたは有しない５０ｎＭの７ｔ１５－２１ｓ複合体で、３７℃および５％ＣＯ２で刺激する。細胞を、４８～７２時間毎にカウントすることにより０．５×１０６／ｍＬ～２．０×１０６／ｍＬ未満の濃度で維持し、培地に新鮮な刺激剤を補充する。７ｔ１５－２１ｓ複合体または抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体もしくは抗ＴＦ ＩｇＧ４抗体もしくは抗ＴＦ ＩｇＧ４＋７ｔ１５－２１ｓ複合体で刺激した細胞を５日目まで維持する。２１ｔ１５－７ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体とのインキュベーション時の初代ＮＫ細胞の増殖が観察される。
実施例４７：７ｔ１５－２１ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体による増殖したＮＫ細胞の活性化
初代ＮＫ細胞を、精製ＮＫ細胞を７ｔ１５－２１ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体で一晩刺激した後にエクスビボで誘導することができる。新鮮なヒト白血球を血液バンクから入手し、ＣＤ５６＋ＮＫ細胞を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ／ヒトＮＫ細胞試薬（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して単離する。ＮＫ細胞の純度は８０％超であり、ＣＤ５６－ＢＶ４２１およびＣＤ１６－ＢＶ５１０特異的抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で染色することにより確認する。細胞をカウントし、１ｍＬの完全培地（ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ）、４ｍＭのＬ－グルタミン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ペニシリン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ストレプトマイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、非必須アミノ酸（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ピルビン酸ナトリウム（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、および１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を補充）中の２４ウェル平底プレートに１×１０６／ｍＬで再懸濁する。細胞を、２５ｎＭの抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体を有するまたは有しない５０ｎＭの７ｔ１５－２１ｓで、３７℃および５％ＣＯ２で刺激する。細胞を４８～７２時間毎にカウントし、１４日目まで０．５×１０６／ｍＬ～２．０×１０６／ｍＬの濃度で維持する。培地に新鮮な刺激剤を定期的に補充する。細胞を収集し、３日目に、ＣＤ５６－ＢＶ４２１、ＣＤ１６－ＢＶ５１０、ＣＤ２５－ＰＥ、ＣＤ６９－ＡＰＣＦｉｒｅ７５０特異的抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）で表面染色し、Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ－Ｃｅｌｅｓｔｅ－ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅによって分析する。活性化マーカーＣＤ２５ ＭＦＩは、７ｔ１５－２１ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体刺激で増加するが、７ｔ１５－２１ｓ複合体刺激では増加しないことが観察される。活性化マーカーＣＤ６９ ＭＦＩは、７ｔ１５－２１ｓ複合体＋抗ＴＦ ＩｇＧ１抗体および７ｔ１５－２１ｓ複合体単独の両方で増加することが観察される。
実施例４８：１８ｔ１５－１２ｓを使用したＮＫ細胞のグルコース代謝の増加
一連の実験を行い、ヒト血液から精製したＮＫ細胞の酸素消費速度および細胞外酸性化速度（ＥＣＡＲ）に対する１８ｔ１５－１２ｓ構築物（図６）の影響を決定した。
これらの実験では、２名の異なるヒトドナー由来の血液バンクから新鮮なヒト白血球を入手し、ＮＫ細胞を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ／ヒトＮＫ細胞試薬（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用した陰性選択により単離した。ＮＫ細胞の純度は８０％超であり、ＣＤ５６－ＢＶ４２１およびＣＤ１６－ＢＶ５１０特異的抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で染色することにより確認した。細胞をカウントし、１ｍＬの完全培地（ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ）、４ｍＭのＬ－グルタミン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ペニシリン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ストレプトマイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、非必須アミノ酸（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ピルビン酸ナトリウム（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、および１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を補充）中の２４ウェル平底プレートに２×１０６／ｍＬで再懸濁した。細胞を、（１）培地のみ、（２）１００ｎＭの１８ｔ１５－１２ｓ、または（３）単一サイトカインである組換えヒトＩＬ－１２（０．２５μｇ）、組換えヒトＩＬ－１５（１．２５μｇ）、および組換えヒトＩＬ－１８（１．２５μｇ）の混合物のいずれかで、３７℃および５％ＣＯ２で一晩刺激した。翌日、細胞を収集し、増殖したＮＫ細胞の細胞外フラックスアッセイを、ＸＦｐ分析器（Ｓｅａｈｏｒｓｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を使用して行った。収集した細胞を洗浄し、ＯＣＲ（酸素消費速度）およびＥＣＡＲ（細胞外酸性化速度）の細胞外フラックス分析のために少なくとも二連で、２．０×１０５細胞／ウェルでプレーティングした。解糖ストレス試験を、２ｍＭのグルタミンを含有するＳｅａｈｏｒｓｅ培地中で行った。以下のものをアッセイ中に使用した：１０ｍＭのグルコース、１００ｎＭのオリゴマイシン、および１００ｍＭの２－デオキシ－Ｄ－グリコーゼ（２ＤＧ）。
データは、１８ｔ１５－１２ｓが、組換えヒトＩＬ－１２、組換えヒトＩＬ－１５、および組換えヒトＩＬ－１８の組み合わせで活性化された同じ細胞と比較して、酸素消費速度（図５６）および細胞外酸性化速度（ＥＣＡＲ）を著しく増加させることを示す（図５７）。
実施例４９：７ｔ１５－１６ｓ２１融合タンパク質の生成および特徴付け
抗ＣＤ１６ｓｃＦｖ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ－２１融合タンパク質およびＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質からなる融合タンパク質複合体を生成した。ヒトＩＬ－７配列およびヒトＩＬ－２１配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。具体的には、ＩＬ－７配列を組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによって構築物を作製した。
組織因子２１９のＮ末端に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端に結合したＩＬ－７を含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－７）
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－７）
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
抗ＣＤ１６ｓｃＦｖ配列をＧｅｎｅｗｉｚによって合成したＩＬ－１５ＲαＳｕ鎖のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－２１のＮ末端コーディング領域に結合することによっても構築物を作製した。ＩＬ－１５ＲαＳｕ鎖のＮ末端に、続いて、ＩＬ－２１のＮ末端コーディング領域に結合した抗ＣＤ１６ｓｃＦｖを含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
抗ＣＤ１６ＳｓｃＦｖ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ－２１構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（（抗ヒトＣＤ１６ｓｃＦｖ）
ＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＡＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
（ヒトＩＬ－２１）
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ
抗ＣＤ１６ｓｃＦｖ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ－２１構築物のアミノ酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（抗ヒトＣＤ１６ｓｃＦｖ）
ＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
（ヒトＩＬ－２１）
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ
ある場合には、リーダーペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
抗ＣＤ１６ｓｃＦｖ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ－２１構築物およびＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を前述の修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（Ｈｕｇｈｅｓ ＭＳ，Ｙｕ ＹＹ，Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ，Ｌｉ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ａ ＴＣＲ ｇｅｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ａ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ａ ｍａｒｋｅｄ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｏｎｖｅｙｓ ｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ２００５；１６：４５７－７２）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５：ａｎｔｉ－ＣＤ１６ｓｃＦｖ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ－２１タンパク質複合体（７ｔ１５－１６ｓ２１と称する、図５８および図５９）の形成および分泌が可能になり、これを抗ＴＦ ＩｇＧ１ベースの親和性および他のクロマトグラフィー法によって精製することができる。
ヒトＣＤ１６ｂを発現するＣＨＯ細胞への７ｔ１５－１６ｓ２１の結合
ＣＨＯ細胞をｐＭＣプラスミド中のヒトＣＤ１６ｂでトランスフェクトし、１０μｇ／ｍＬのブラストサイジンで１０日間選択した。ＣＤ１６ｂを安定的に発現するＣＨＯ細胞を、１．２μｇ／ｍＬの抗ヒトＣＤ１６ ｓｃＦｖを含む７ｔ１５－１６ｓ２１または陰性対照として抗ヒトＣＤ１６ ｓｃＦｖを含まない１８ｔ１５－１２ｓで染色し、その後、ビオチン化抗ヒト組織因子抗体およびＰＥ結合ストレプトアビジンで染色した。図６０Ａに示されるように、抗ヒトＣＤ１６ｓｃＦｖを含む７ｔ１５－１６ｓ２１のみが細胞を染色した。図６０Ｂに示されるように、１８ｔ１５－１２ｓは、ヒトＣＤ１６ｂを発現するＣＨＯ細胞を染色しなかった。
ＥＬＩＳＡを使用した７ｔ１５－１６ｓ２１におけるＩＬ－１５、ＩＬ－２１、およびＩＬ－７の検出
９６ウェルプレートをＲ５（コーティング緩衝液）中１００μＬ（８μｇ／ｍＬ）の抗ＴＦ ＩｇＧ１でコーティングし、室温（ＲＴ）で２時間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、ＰＢＳ中１００μＬの１％ＢＳＡでブロックした。連続希釈の７ｔ１５－１６ｓ２１（１：３比）をウェルに添加し、室温で６０分間インキュベートした。３回洗浄した後、５０ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ１５抗体（ＢＡＭ２４７、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、５００ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ－２１抗体（１３－７２１８－８１、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、または５００ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ－７抗体（５０６６０２、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）をウェルと室温で６０分間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、０．２５μｇ／ｍＬのＨＲＰ－ＳＡ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）と１００μＬ／ウェルで、室温で３０分間インキュベートし、その後、４回洗浄し、１００μＬのＡＢＴＳと室温で２分間インキュベートした。吸光度を４０５ｎｍで読み取った。図６１Ａ～６１Ｃに示されるように、７ｔ１５－１６ｓ２１中のＩＬ－１５ドメイン、ＩＬ－２１ドメイン、およびＩＬ－７ドメインを個々の抗体によって検出した。
７ｔ１５－１６ｓ２１におけるＩＬ－１５は、ＩＬ－２Ｒβおよび共通γ鎖含有３２Ｄβ細胞の増殖を促進する
７ｔ１５－１６ｓ２１におけるＩＬ－１５の活性を分析するために、７ｔ１５－１６ｓ２１のＩＬ－１５活性を、ＩＬ２Ｒβおよび共通γ鎖を発現する３２Ｄβ細胞を使用して組換えＩＬ－１５と比較し、細胞増殖の促進に対するそれらの効果を評価した。ＩＬ－１５依存性３２Ｄβ細胞をＩＭＤＭ－１０％ＦＢＳで５回洗浄し、２×１０４細胞／ウェルでウェル中に播種した。連続希釈した７ｔ１５－１６ｓ２１またはＩＬ－１５を細胞に添加した（図６２）。細胞をＣＯ２インキュベーター内で、３７℃で３日間インキュベートした。３日目に１０μＬのＷＳＴ１を各ウェルに添加し、ＣＯ２インキュベーター内で、３７℃でさらに３時間インキュベートすることにより、細胞増殖を検出した。生成されたホルマザン色素の量を分析することにより、吸光度を４５０ｎｍで測定した。図６２に示されるように、７ｔ１５－１６ｓ２１およびＩＬ－１５は３２Ｄβ細胞増殖を促進し、７ｔ１５－１６ｓ２１およびＩＬ－１５のＥＣ５０は、それぞれ、１７２．２ＰＭおよび１６．６３ＰＭであった。
抗ＴＦ抗体親和性カラムからの７ｔ１５－１６ｓ２１の精製溶出クロマトグラフ
細胞培養物から収集した７ｔ１５－１６ｓ２１を、５カラム体積のＰＢＳで平衡化した抗ＴＦ抗体親和性カラムにロードした。次いで、カラムを５カラム体積のＰＢＳで洗浄し、その後、６カラム体積の０．１Ｍ酢酸（ｐＨ２．９）で溶出した。Ａ２８０溶出ピークを収集し、１Ｍトリス塩基でｐＨ７．５～８．０に中和した。中和した試料を、分子量カットオフ３０ＫＤａでＡｍｉｃｏｎ遠心フィルターを使用してＰＢＳに緩衝液交換した。図６３は、抗ＴＦ抗体樹脂への結合およびその上での溶出後の７ｔ１５－１６ｓ２１タンパク質含有細胞培養上清のクロマトグラフィープロファイルを示す線グラフである。図６３に示されるように、抗ＴＦ抗体親和性カラムは、ＴＦを含む７ｔ１５－１６ｓ２１に結合した。緩衝液交換したタンパク質試料を、さらなる生化学的分析および生物学的活性試験のために２～８℃で保管した。各溶出後、抗ＴＦ抗体親和性カラムを６カラム体積の０．１Ｍグリシン（ｐＨ２．５）を使用してストリッピングした。その後、カラムを、保管のために５カラム体積のＰＢＳおよび７カラム体積の２０％エタノールを使用して中和した。抗ＴＦ抗体親和性カラムを、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＡＫＴＡ Ａｖａｎｔシステムに接続した。流速は、２ｍＬ／分の溶出ステップを除く全てのステップで４ｍＬ／分であった。
７ｔ１５－１６ｓ２１の分析的サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）分析
７ｔ１５－１６ｓ２１のサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）分析を行うために、ＡＫＴＡ Ａｖａｎｔシステム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に接続したＳｕｐｅｒｄｅｘ ２００ Ｉｎｃｒｅａｓｅ １０／３００ ＧＬゲル濾過カラム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用した。カラムを２カラム体積のＰＢＳで平衡化した。流速は０．７ｍＬ／分であった。ＰＢＳ中７ｔ１５－１６ｓ２１を含む試料を、キャピラリーループを使用してＳｕｐｅｒｄｅｘ ２００カラムに注入し、ＳＥＣによって分析した。図６４に示されるように、ＳＥＣ結果は、７ｔ１５－１６ｓ２１の２つのタンパク質ピークを示した。
実施例５０：ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１融合タンパク質の生成および特徴付け
抗ヒトＣＤ１６ｓｃＦｖ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ２１およびＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質を含む融合タンパク質複合体を生成した（図６５および図６６）。ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ（Ｉｌｅ２４－Ａｓｐ１５９）、組織因子２１９、およびＩＬ－１５配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。具体的には、Ｇ４Ｓ（３）リンカーを用いて２つのＴＧＦβ受容体ＩＩ配列を結合してＴＧＦβ受容体ＩＩの一本鎖バージョンを生成し、その後、組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に直接結合することによって構築物を作製した。
組織因子２１９のＮ末端に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端に結合した２つのＴＧＦβ受容体ＩＩを含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
２つのＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（２つのヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
ＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
抗ヒトＣＤ１６ｓｃＦｖをＧｅｎｅｗｉｚによって合成したＩＬ－１５ＲαＳｕ鎖のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－２１のＮ末端コーディング領域に直接結合することによっても構築物を作製した。ＩＬ－１５ＲαＳｕのＮ末端に、続いて、ＩＬ－２１のＮ末端コーディング領域に結合した抗ヒトＣＤ１６ｓｃＦｖを含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
抗ＣＤ１６ｓｃＦｖ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ－２１構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（抗ヒトＣＤ１６ｓｃＦｖ）
ＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＡＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
（ヒトＩＬ－２１）
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ
抗ＣＤ１６ｓｃＦｖ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ－２１構築物のアミノ酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（抗ヒトＣＤ１６ｓｃＦｖ）
ＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
（ヒトＩＬ－２１）
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ
ある場合には、リーダーペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
抗ＣＤ１６ｓｃＦｖ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ－２１構築物およびＴＧＦＲ／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を前述の修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（Ｈｕｇｈｅｓ ＭＳ，Ｙｕ ＹＹ，Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ，Ｌｉ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ａ ＴＣＲ ｇｅｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ａ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ａ ｍａｒｋｅｄ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｏｎｖｅｙｓ ｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ２００５；１６：４５７－７２）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＴＧＦＲ／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＣＤ１６ｓｃＦｖ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ－２１タンパク質複合体（ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１と称する）の形成および分泌が可能になり、これを抗ＴＦ ＩｇＧ１ベースの親和性および他のクロマトグラフィー法によって精製することができる。
ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１とヒトＣＤ１６ｂを発現するＣＨＯ細胞との間の相互作用
ＣＨＯ細胞をｐＭＣプラスミド中のヒトＣＤ１６ｂでトランスフェクトし、１０μｇ／ｍＬのブラストサイジンで１０日間選択した。ＣＤ１６ｂを安定的に発現する細胞を、１．２μｇ／ｍＬの抗ヒトＣＤ１６ ｓｃＦｖを含むＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１または陰性対照として抗ヒトＣＤ１６ ｓｃＦｖを含まない７ｔ１５－２１ｓで染色し、ビオチン化抗ヒト組織因子抗体およびＰＥ結合ストレプトアビジンで染色した。図６７Ａおよび図６７Ｂに示されるように、抗ヒトＣＤ１６ｓｃＦｖを含むＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１が陽性結合を示した一方で、７ｔ１５－２１ｓは結合を示さなかった。
ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞におけるＴＧＦβ１活性に対するＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１の効果
ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１中のＴＧＦβＲＩＩの活性を評価するために、ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞におけるＴＧＦβ１活性に対するＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１の効果を分析した。ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を予熱したＰＢＳで２回洗浄し、試験培地（ＤＭＥＭ、１０％熱不活性化ＦＣＳ、１×グルタミン、１×抗－抗、および２×グルタミン）中に５×１０５細胞／ｍＬで再懸濁した。平底９６ウェルプレート中、５０μＬの細胞を各ウェルに添加し（２．５×１０４細胞／ウェル）、その後、５０μＬの０．１ｎＭ ＴＧＦβ１（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ）を添加した。その後、１：３連続希釈で調製したＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１またはＴＧＦＲ－Ｆｃ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）をプレートに添加して、総量を２００μＬにした。３７℃で２４時間インキュベートした後、４０μＬの誘導されたＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞上清を平底９６ウェルプレート中の１６０μＬの予熱したＱＵＡＮＴＩ－Ｂｌｕｅ（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）に添加し、３７℃で１～３時間インキュベートした。その後、ＯＤ値を、プレートリーダー（Ｍｕｌｔｉｓｃａｎ Ｓｋｙ）を使用して６２０～６５５ｎＭで決定した。各タンパク質試料のＩＣ５０を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ７．０４を用いて計算した。ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１およびＴＧＦＲ－ＦｃのＩＣ５０は、それぞれ、９１２７ＰＭおよび４６０．６ｐＭであった。これらの結果は、ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１中のＴＧＦβＲＩＩドメインがＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞におけるＴＧＦβ－１活性を遮断することができたことを示した。
ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１におけるＩＬ－１５は、ＩＬ－２Ｒβおよび共通γ鎖含有３２Ｄβ細胞の増殖を促進する
ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１におけるＩＬ－１５の活性を分析するために、ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１のＩＬ－１５活性を、ＩＬ２Ｒβおよび共通γ鎖を発現する３２Ｄβ細胞を使用して組換えＩＬ－１５と比較し、細胞増殖の促進に対するそれらの効果を評価した。ＩＬ－１５依存性３２Ｄβ細胞をＩＭＤＭ－１０％ＦＢＳで５回洗浄し、２×１０４細胞／ウェルでウェル中に播種した。連続希釈したＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１またはＩＬ－１５を細胞に添加した（図６８）。細胞をＣＯ２インキュベーター内で、３７℃で３日間インキュベートした。３日目に１０μＬのＷＳＴ１を各ウェルに添加し、ＣＯ２インキュベーター内で、３７℃でさらに３時間インキュベートすることにより、細胞増殖を検出した。生成されたホルマザン色素の量を分析することにより、吸光度を４５０ｎｍで測定した。図６８に示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１およびＩＬ－１５は３２Ｄβ細胞増殖を促進し、ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１およびＩＬ－１５のＥＣ５０は、それぞれ、５１２９８ＰＭおよび１０．６３ＰＭであった。
ＥＬＩＳＡを使用したＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１におけるＩＬ－１５、ＩＬ－２１、およびＴＧＦβＲＩＩの検出
９６ウェルプレートをＲ５（コーティング緩衝液）中１００μＬ（８μｇ／ｍＬ）の抗ＴＦ ＩｇＧ１でコーティングし、室温（ＲＴ）で２時間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、ＰＢＳ中１００μＬの１％ＢＳＡでブロックした。１：３比で連続希釈したＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１を添加し、室温で６０分間インキュベートした。３回洗浄した後、５０ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ－１５抗体（ＢＡＭ２４７、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、５００ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ－２１抗体（１３－７２１８－８１、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、または２００ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＴＧＦβＲＩＩ抗体（ＢＡＦ２４１、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）をウェル毎に適用し、室温で６０分間インキュベートした。３回洗浄した後、０．２５μｇ／ｍＬのＨＲＰ－ＳＡ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈと１００μＬ／ウェルで、室温で３０分間インキュベートし、その後、４回洗浄し、１００μＬのＡＢＴＳと室温で２分間インキュベートした。吸光度を４０５ｎｍで読み取った。データを図６９に示す。図７０Ａ～７０Ｃに示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１中のＩＬ－１５ドメイン、ＩＬ－２１ドメイン、およびＴＧＦβＲＩＩドメインをそれぞれの抗体によって検出した。
抗ＴＦ抗体親和性カラムを使用したＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１の精製溶出クロマトグラフ
細胞培養物から収集したＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１を、５カラム体積のＰＢＳで平衡化した抗ＴＦ抗体親和性カラムにロードした。試料をロードした後、カラムを５カラム体積のＰＢＳで洗浄し、その後、６カラム体積の０．１Ｍ酢酸（ｐＨ２．９）で溶出した。Ａ２８０溶出ピークを収集し、１Ｍトリス塩基でｐＨ７．５～８．０に中和した。その後、中和した試料を、分子量カットオフ３０ＫＤａでＡｍｉｃｏｎ遠心フィルターを使用してＰＢＳに緩衝液交換した。図７１に示されるように、抗ＴＦ抗体親和性カラムは、融合パートナーとして組織因子を含むＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１に結合した。緩衝液交換したタンパク質試料を、さらなる生化学的分析および生物学的活性試験のために２～８℃で保管した。各溶出後、抗ＴＦ抗体親和性カラムを６カラム体積の０．１Ｍグリシン（ｐＨ２．５）を使用してストリッピングした。その後、カラムを、保管のために５カラム体積のＰＢＳおよび７カラム体積の２０％エタノールを使用して中和した。抗ＴＦ抗体親和性カラムを、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＡＫＴＡ Ａｖａｎｔシステムに接続した。流速は、２ｍＬ／分の溶出ステップを除く全てのステップで４ｍＬ／分であった。
ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１の還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ
ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１タンパク質の純度および分子量を決定するために、抗ＴＦ抗体親和性カラムで精製したタンパク質試料を、還元条件下でドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル（４～１２％ＮｕＰａｇｅビス－トリスゲル）電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）によって分析した。電気泳動後、ゲルをＩｎｓｔａｎｔＢｌｕｅで約３０分間染色し、その後、精製水中で一晩脱色した。
ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１タンパク質がＣＨＯ細胞において翻訳後にグリコシル化を受けることを検証するために、脱グリコシル化実験を、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ製のＰｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ Ｍｉｘ ＩＩキットを製造業者の指示に従って使用して実施した。図７２は、非脱グリコシル化状態（赤色の縁内のレーン１）および脱グリコシル化状態（黄色の縁内のレーン２）での試料の還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析の結果を示す。結果は、ＴＧＦＲｔ１５－１６ｓ２１タンパク質がＣＨＯ細胞で発現されるとグリコシル化されることを示した。脱グリコシル化後、精製した試料は、還元ＳＤＳゲル中で予想された分子量（６９ｋＤａおよび４８ｋＤａ）を示した。レーンＭには、１０μＬのＳｅｅＢｌｕｅ Ｐｌｕｓ２ Ｐｒｅｓｔａｉｎｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄをロードした。
実施例５１：７ｔ１５－７ｓ融合タンパク質の生成および特徴付け
ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質およびＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質を含む融合タンパク質複合体を生成した（図７３および図７４）。ヒトＩＬ－７、組織因子２１９、およびＩＬ－１５配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。具体的には、ＩＬ－７配列を組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによって構築物を作製した。
組織因子２１９のＮ末端に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端に結合したＩＬ－７を含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
７ｔ１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ７）
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
７ｔ１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ７）
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
ＩＬ－７配列をＧｅｎｅｗｉｚによって合成したＩＬ－１５ＲαＳｕ鎖のＮ末端コーディング領域に連結することによっても構築物を作製した。ＩＬ－１５ＲαＳｕ鎖のＮ末端に結合したＩＬ－７を含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
７ｓ構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＧＧＡＧＴＧＡＡＡＧＴＴＣＴＴＴＴＴＧＣＣＣＴＴＡＴＴＴＧＴＡＴＴＧＣＴＧＴＧＧＣＣＧＡＧＧＣＣ
（ヒトＩＬ７）
ＧＡＴＴＧＴＧＡＴＡＴＴＧＡＡＧＧＴＡＡＡＧＡＴＧＧＣＡＡＡＣＡＡＴＡＴＧＡＧＡＧＴＧＴＴＣＴＡＡＴＧＧＴＣＡＧＣＡＴＣＧＡＴＣＡＡＴＴＡＴＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＡＧＡＡＡＴＴＧＧＴＡＧＣＡＡＴＴＧＣＣＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＡＴＴＴＡＡＣＴＴＴＴＴＴＡＡＡＡＧＡＣＡＴＡＴＣＴＧＴＧＡＴＧＣＴＡＡＴＡＡＧＧＡＡＧＧＴＡＴＧＴＴＴＴＴＡＴＴＣＣＧＴＧＣＴＧＣＴＣＧＣＡＡＧＴＴＧＡＧＧＣＡＡＴＴＴＣＴＴＡＡＡＡＴＧＡＡＴＡＧＣＡＣＴＧＧＴＧＡＴＴＴＴＧＡＴＣＴＣＣＡＣＴＴＡＴＴＡＡＡＡＧＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＡＣＡＡＣＡＡＴＡＣＴＧＴＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＴＧＧＣＣＡＧＧＴＴＡＡＡＧＧＡＡＧＡＡＡＡＣＣＡＧＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＣＣＡＡＣＣＡＡＣＡＡＡＧＡＧＴＴＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＴＡＡＡＴＣＴＴＴＡＡＡＧＧＡＡＣＡＧＡＡＡＡＡＡＣＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＴＧＴＴＴＣＣＴＡＡＡＧＡＧＡＣＴＡＴＴＡＣＡＡＧＡＧＡＴＡＡＡＡＡＣＴＴＧＴＴＧＧＡＡＴＡＡＡＡＴＴＴＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＴＡＡＡＧＡＡＣＡＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＣＡＣＧＴＧＣＣＣＴＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＣＣＧＴＧＧＡＡＣＡＣＧＣＡＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＣＡＡＧＡＧＣＴＡＣＡＧＣＴＴＧＴＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＧＣＧＧＴＡＣＡＴＴＴＧＴＡＡＣＴＣＴＧＧＴＴＴＣＡＡＧＣＧＴＡＡＡＧＣＣＧＧＣＡＣＧＴＣＣＡＧＣＣＴＧＡＣＧＧＡＧＴＧＣＧＴＧＴＴＧＡＡＣＡＡＧＧＣＣＡＣＧＡＡＴＧＴＣＧＣＣＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＣＣＣＣＡＧＴＣＴＣＡＡＡＴＧＣＡＴＴＡＧＡ
７ｓ融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＧＶＫＶＬＦＡＬＩＣＩＡＶＡＥＡ
（ヒトＩＬ７）
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物およびＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物を前述の修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（Ｈｕｇｈｅｓ ＭＳ，Ｙｕ ＹＹ，Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ，Ｌｉ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ａ ＴＣＲ ｇｅｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ａ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ａ ｍａｒｋｅｄ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｏｎｖｅｙｓ ｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ２００５；１６：４５７－７２）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、７ｔ１５－７ｓと称する可溶性ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－７／ＩＬ－１５ＲαＳｕタンパク質複合体の形成および分泌が可能になり、これを抗ＴＦ ＩｇＧ１親和性および他のクロマトグラフィー法によって精製することができる。
抗ＴＦ抗体親和性カラムを使用した７ｔ１５－７ｓの精製溶出クロマトグラフ
細胞培養物から収集した７ｔ１５－７ｓを、５カラム体積のＰＢＳで平衡化した抗ＴＦ抗体親和性カラムにロードした。試料をロードした後、カラムを５カラム体積のＰＢＳで洗浄し、その後、６カラム体積の０．１Ｍ酢酸（ｐＨ２．９）で溶出した。Ａ２８０溶出ピークを収集し、１Ｍトリス塩基でｐＨ７．５～８．０に中和した。その後、中和した試料を、分子量カットオフ３０ＫＤａでＡｍｉｃｏｎ遠心フィルターを使用してＰＢＳに緩衝液交換した。図７５に示されるように、抗ＴＦ抗体親和性カラムは、融合パートナーとして組織因子（ＴＦ）を含む７ｔ１５－７ｓに結合した。緩衝液交換したタンパク質試料を、さらなる生化学的分析および生物学的活性試験のために２～８℃で保管した。各溶出後、抗ＴＦ抗体親和性カラムを６カラム体積の０．１Ｍグリシン（ｐＨ２．５）を使用してストリッピングした。その後、カラムを、保管のために５カラム体積のＰＢＳおよび７カラム体積の２０％エタノールを使用して中和した。抗ＴＦ抗体親和性カラムを、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＡＫＴＡ Ａｖａｎｔシステムに接続した。流速は、２ｍＬ／分の溶出ステップを除く全てのステップで４ｍＬ／分であった。
Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおける７ｔ１５－７ｓの免疫刺激
７ｔ１５－７ｓは、ヒトＩＬ－７、ヒト組織因子２１９断片、およびヒトＩＬ－１５の可溶性融合物（７ｔ１５）である第１のポリペプチドと、ヒトＩＬ－７およびヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖のｓｕｓｈｉドメインの可溶性融合物（７ｓ）である第２のポリペプチドとを含む多鎖ポリペプチド（本明細書に記載のタイプＡ多鎖ポリペプチド）である。
ＣＨＯ細胞を、ＩＬ７－ＴＦ－ＩＬ１５（７ｔ１５）およびＩＬ７－ＩＬ１５Ｒａｓｕｓｈｉドメイン（７ｓ）ベクターで共トランスフェクトした。７ｔ１５－７ｓ複合体を、トランスフェクトしたＣＨＯ細胞培養上清から精製した。図７６に示されるように、複合体中のＩＬ－７、ＩＬ－１５、および組織因子（ＴＦ）成分をＥＬＩＳＡによって実証した。ヒト化抗ＴＦモノクローナル抗体（抗ＴＦ ＩｇＧ１）を捕捉抗体として使用して、７ｔ１５－７ｓ中のＴＦを決定し、ビオチン化抗ヒトＩＬ－１５抗体（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ）およびビオチン化抗ヒトＩＬ－７抗体（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を検出抗体として使用して、それぞれ、７ｔ１５－７ｓ中のＩＬ－１５およびＩＬ－７を検出し、その後、ペルオキシダーゼ結合ストレプトアビジン（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂ）およびＡＢＴＳ基質（Ｓｕｒｍｏｄｉｃｓ ＩＶＤ，Ｉｎｃ．）を使用した。
実施例５２：ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ融合タンパク質の生成および特徴付け
ＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質およびＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質からなる融合タンパク質複合体を生成した（図７７および図７８）。ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ（Ｉｌｅ２４－Ａｓｐ１５９）、組織因子２１９、およびＩＬ－１５配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。具体的には、Ｇ４Ｓ（３）リンカーを用いて２つのＴＧＦβ受容体ＩＩ配列を結合してＴＧＦβ受容体ＩＩの一本鎖バージョンを生成し、その後、組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に直接連結することによって構築物を作製した。
組織因子２１９のＮ末端に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端に結合した２つのＴＧＦβ受容体ＩＩを含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
２つのＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（２つのヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
ＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
２つのＴＧＦβ受容体ＩＩをＧｅｎｅｗｉｚによって合成したＩＬ－１５ＲαＳｕ鎖に直接結合することによっても構築物を作製した。ＩＬ－１５ＲαＳｕのＮ末端に結合したＴＧＦβ受容体ＩＩを含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
ＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（２つのヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
２つのＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物のアミノ酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（２つのヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ細胞外ドメイン）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
ある場合には、リーダーペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
ＴＧＦβＲ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ構築物およびＴＧＦβＲ／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を前述の修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（Ｈｕｇｈｅｓ ＭＳ，Ｙｕ ＹＹ，Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ，Ｌｉ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ａ ＴＣＲ ｇｅｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ａ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ａ ｍａｒｋｅｄ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｏｎｖｅｙｓ ｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ２００５；１６：４５７－７２）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＴＧＦβＲ／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＴＧＦβＲ／ＩＬ－１５ＲαＳｕタンパク質複合体（ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓと称する）の形成および分泌が可能になり、これを抗ＴＦ ＩｇＧ１親和性および他のクロマトグラフィー法によって精製することができる。
ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞におけるＴＧＦβ１活性に対するＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの効果
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＴＧＦβＲＩＩの活性を評価するために、ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞におけるＴＧＦβ１活性に対するＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの効果を分析した。ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を予熱したＰＢＳで２回洗浄し、試験培地（ＤＭＥＭ、１０％熱不活性化ＦＣＳ、１×グルタミン、１×抗－抗、および２×グルタミン）中に５×１０５細胞／ｍＬで再懸濁した。平底９６ウェルプレート中、５０μＬの細胞を各ウェルに添加し（２．５×１０４細胞／ウェル）、その後、５０μＬの０．１ｎＭ ＴＧＦβ１（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ）を添加した。その後、１：３連続希釈で調製したＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓまたはＴＧＦＲ－Ｆｃ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）をプレートに添加して、総量を２００μＬにした。３７℃で２４時間インキュベートした後、４０μＬの誘導されたＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞上清を平底９６ウェルプレート中の１６０μＬの予熱したＱＵＡＮＴＩ－Ｂｌｕｅ（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）に添加し、３７℃で１～３時間インキュベートした。その後、ＯＤ値を、プレートリーダー（Ｍｕｌｔｉｓｃａｎ Ｓｋｙ）を使用して６２０～６５５ｎＭで決定した。各タンパク質試料のＩＣ５０を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ７．０４を用いて計算した。ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓおよびＴＧＦＲ－ＦｃのＩＣ５０は、それぞれ、２１６．９ＰＭおよび４６０．６ｐＭであった。これらの結果は、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＴＧＦβＲＩＩドメインがＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞におけるＴＧＦβ１活性を遮断することができたことを示した。
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＩＬ－１５は、ＩＬ－２Ｒβおよび共通γ鎖含有３２Ｄβ細胞の増殖を促進する
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＩＬ－１５の活性を評価するために、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓのＩＬ－１５活性を、ＩＬ２Ｒβおよび共通γ鎖を発現する３２Ｄβ細胞を使用して組換えＩＬ－１５と比較し、細胞増殖の促進に対するそれらの効果を評価した。ＩＬ－１５依存性３２Ｄβ細胞をＩＭＤＭ－１０％ＦＢＳで５回洗浄し、２×１０４細胞／ウェルでウェル中に播種した。連続希釈したＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓまたはＩＬ－１５を細胞に添加した（図７９）。細胞をＣＯ２インキュベーター内で、３７℃で３日間インキュベートした。３日目に１０μＬのＷＳＴ１を各ウェルに添加し、ＣＯ２インキュベーター内で、３７℃でさらに３時間インキュベートすることにより、細胞増殖を検出した。生成されたホルマザン色素の量を分析することにより、吸光度を４５０ｎｍで測定した。図７９に示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓおよびＩＬ－１５は３２Ｄβ細胞増殖を促進し、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓおよびＩＬ－１５のＥＣ５０は、それぞれ、１９０１ＰＭおよび１０．６３ＰＭであった。
ＥＬＩＳＡを使用した対応する抗体を用いたＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＩＬ－１５ドメインおよびＴＧＦβＲＩＩドメインの検出
９６ウェルプレートをＲ５（コーティング緩衝液）中１００μＬ（８μｇ／ｍＬ）の抗ＴＦ ＩｇＧ１でコーティングし、室温（ＲＴ）で２時間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、ＰＢＳ中１００μＬの１％ＢＳＡでブロックした。ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓを１：３連続希釈で添加し、室温で６０分間インキュベートした。３回洗浄した後、５０ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ－１５抗体（ＢＡＭ２４７、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）または２００ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＴＧＦβＲＩＩ抗体（ＢＡＦ２４１、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）をウェルに添加し、室温で６０分間インキュベートした。次いで、プレートを３回洗浄し、０．２５μｇ／ｍＬのＨＲＰ－ＳＡ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）を１００μＬ／ウェルで添加し、室温で３０分間インキュベートし、その後、４回洗浄し、１００μＬのＡＢＴＳと室温で２分間インキュベートした。吸光度を４０５ｎｍで読み取った。図８１Ａおよび８１Ｂに示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＩＬ－１５ドメインおよびＴＧＦβＲＩＩドメインを個々の抗体によって検出した。
抗ＴＦ抗体親和性カラムからのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの精製溶出クロマトグラフ
細胞培養物から収集したＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓを、５カラム体積のＰＢＳで平衡化した抗ＴＦ抗体親和性カラムにロードした。試料をロードした後、カラムを５カラム体積のＰＢＳで洗浄し、その後、６カラム体積の０．１Ｍ酢酸（ｐＨ２．９）で溶出した。Ａ２８０溶出ピークを収集し、１Ｍトリス塩基でｐＨ７．５～８．０に中和した。その後、中和した試料を、分子量カットオフ３０ＫＤａでＡｍｉｃｏｎ遠心フィルターを使用してＰＢＳに緩衝液交換した。図８２に示されるように、抗ＴＦ抗体親和性カラムは、融合パートナーとしてＴＦを含むＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓに結合した。緩衝液交換したタンパク質試料を、さらなる生化学的分析および生物学的活性試験のために２～８℃で保管した。各溶出後、抗ＴＦ抗体親和性カラムを６カラム体積の０．１Ｍグリシン（ｐＨ２．５）を使用してストリッピングした。その後、カラムを、保管のために５カラム体積のＰＢＳおよび７カラム体積の２０％エタノールを使用して中和した。抗ＴＦ抗体親和性カラムを、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＡＫＴＡ Ａｖａｎｔシステムに接続した。流速は、２ｍＬ／分の溶出ステップを除く全てのステップで４ｍＬ／分であった。
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの分析的サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）分析
Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ２００ Ｉｎｃｒｅａｓｅ １０／３００ ＧＬゲル濾過カラム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ製）をＡＫＴＡ Ａｖａｎｔシステム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ製）に接続した。カラムを２カラム体積のＰＢＳで平衡化した。流速は０．７ｍＬ／分であった。ＰＢＳ中ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓを含む試料を、キャピラリーループを使用してＳｕｐｅｒｄｅｘ ２００カラムに注入し、ＳＥＣによって分析した。試料のＳＥＣクロマトグラフを図８３に示す。ＳＥＣの結果は、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの４つのタンパク質ピークを示した。
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓタンパク質の純度および分子量を決定するために、抗ＴＦ抗体親和性カラムで精製したタンパク質試料を、還元条件下でドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル（４～１２％ＮｕＰａｇｅビス－トリスゲル）電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）法によって分析した。電気泳動後、ゲルをＩｎｓｔａｎｔＢｌｕｅで約３０分間染色し、その後、精製水中で一晩脱色した。
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓタンパク質がＣＨＯ細胞において翻訳後にグリコシル化を受けることを検証するために、脱グリコシル化実験を、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ製のＰｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ Ｍｉｘ ＩＩキットおよび製造業者の指示を使用して実施した。図８４は、非脱グリコシル化状態（赤色の縁内のレーン１）および脱グリコシル化状態（黄色の縁内のレーン２）での試料の還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析を示す。結果は、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓタンパク質がＣＨＯ細胞で発現されるとグリコシル化されることを示した。脱グリコシル化後、精製した試料は、還元ＳＤＳゲル中で予想された分子量（６９ｋＤａおよび３９ｋＤａ）を示した。レーンＭには、１０ｕＬのＳｅｅＢｌｕｅ Ｐｌｕｓ２ Ｐｒｅｓｔａｉｎｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄをロードした。
Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおけるＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの免疫刺激活性
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓは、２つのＴＧＦβＲＩＩドメイン、ヒト組織因子２１９断片、およびヒトＩＬ－１５の可溶性融合物である第１のポリペプチドと、２つのＴＧＦβＲＩＩドメインおよびヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖のｓｕｓｈｉドメインの可溶性融合物である第２のポリペプチドとを含む多鎖ポリペプチド（本明細書に記載のタイプＡ多鎖ポリペプチド）である。
野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスを、対照溶液、または０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、もしくは１０ｍｇ／ｋｇの投薬量のＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓのいずれかで皮下処理した。処理の４日後、脾臓の重量および脾臓に存在する様々な免疫細胞型のパーセンテージを評価した。図８５Ａに示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスにおける脾臓の重量は、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの投薬量の増加とともに増加した。さらに、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、および１０ｍｇ／ｋｇのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスにおける脾臓の重量は、それぞれ、対照溶液で処理したマウスと比較して高かった。加えて、対照処理マウスおよびＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ処理マウスの脾臓に存在するＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＮＫ細胞、およびＣＤ１９＋ Ｂ細胞のパーセンテージを評価した。図８５Ｂに示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスの脾臓では、ＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞の両方のパーセンテージが、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの投薬量の増加とともに増加した。具体的には、ＣＤ８＋ Ｔ細胞のパーセンテージは、対照処理マウスと比較して、０．３ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、および１０ｍｇ／ｋｇのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスで高く、ＮＫ細胞のパーセンテージは、対照処理マウスと比較して、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、および１０ｍｇ／ｋｇのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスで高かった。これらの結果は、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓが、脾臓中の免疫細胞、特にＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞を刺激することができることを示す。
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ分子の薬物動態を、野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスで評価した。マウスを、３ｍｇ／ｋｇの投薬量のＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで皮下処理した。マウスの血液を様々な時点で尾静脈から排出し、血清を調製した。マウス血清中のＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ濃度を、ＥＬＩＳＡを用いて測定した（捕捉：抗ヒト組織因子抗体、検出：ビオチン化抗ヒトＴＧＦβ受容体抗体、その後、ペルオキシダーゼ結合ストレプトアビジンおよびＡＢＴＳ基質）。結果は、Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおけるＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの半減期が１２．６６時間であることを示した。
マウスにおけるＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの免疫刺激活性を経時的に評価するために、マウス脾細胞を調製した。図８６Ａに示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスの脾臓重量は、処理後４８時間時点で増加し、経時的に増加し続けた。加えて、対照処理マウスおよびＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ処理マウスの脾臓に存在するＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＮＫ細胞、およびＣＤ１９＋ Ｂ細胞のパーセンテージを評価した。図８６Ｂに示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスの脾臓では、ＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞の両方のパーセンテージが処理後４８時間時点で増加し、単回投与処理後に経時的に高くなった。これらの結果は、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓが、脾臓中の免疫細胞、特にＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞を刺激することができることをさらに示す。
さらに、脾細胞のＫｉ６７発現に基づく免疫細胞の動的増殖およびグランザイムＢ発現に基づく細胞傷害性の潜在性を、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの単回投与（３ｍｇ／ｋｇ）後にマウスから単離した脾細胞で評価した。図８７Ａおよび図８７Ｂに示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスの脾臓では、ＮＫ細胞によるＫｉ６７およびグランザイムＢの発現は処理後２４時間時点で増加し、ＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞の発現はいずれも単回投与処理後４８時間およびその後の時点で増加した。これらの結果は、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓがＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞の数を増加させるのみならず、これらの細胞の細胞傷害性も増強することを示す。ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの単回投与処理により、ＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞が少なくとも４日間増殖した。
腫瘍細胞に対するＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ処理マウス由来の脾細胞の細胞傷害性も評価した。マウスモロニーＭｏｌｏｎｅｙ白血病細胞（Ｙａｃ－１）をＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔで標識し、腫瘍標的細胞として使用した。脾細胞を、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ（３ｍｇ／ｋｇ）で処理したマウス脾臓から処理後の様々な時点で調製し、エフェクター細胞として使用した。標的細胞をエフェクター細胞とＥ：Ｔ比１０：１で混合し、３７℃で２０時間インキュベートした。フローサイトメトリーを使用したヨウ化プロピジウム陽性のバイオレット標識Ｙａｃ－１細胞の分析により、標的細胞の生存率を評価した。Ｙａｃ－１腫瘍阻害のパーセンテージを、式（１－［実験試料中の生存Ｙａｃ－１細胞数］／［脾細胞を含まない試料中の生存Ｙａｃ－１細胞数］）×１００を使用して計算した。図８８に示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウス由来の脾細胞は、対照マウス脾細胞よりもＹａｃ－１細胞に対して強い細胞傷害性を有した。
化学療法および／またはＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓに応答した腫瘍サイズ分析
膵臓癌細胞（ＳＷ１９９０、ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ－２１７２）をＣ５７ＢＬ／６ ｓｃｉｄマウス（Ｔｈｅ Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、００１９１３、２×１０６細胞／マウス、１００μＬのＨＢＳＳ中）に皮下（ｓ．ｃ．）注射して、膵臓癌マウスモデルを確立した。腫瘍細胞注射の２週間後、アブラキサン（Ｃｅｌｇｅｎｅ、６８８１７－１３４、５ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）とゲムシタビン（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｇ６４２３、４０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）との組み合わせを用いた化学療法をこれらのマウスに腹腔内で開始し、続いて、２日後にＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ（３ｍｇ／ｋｇ、皮下注射）を用いた免疫療法を行った。上記の手順を１つの処理サイクルとみなし、さらに３サイクル（１サイクル／週）繰り返した。対照群を、ＰＢＳ、化学療法（ゲムシタビンおよびアブラキサン）、またはＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓのみを受けたＳＷ１９９０注射マウスとして設定した。処理サイクルに加えて、各動物の腫瘍サイズを、ＳＷ１９９０細胞を注射した２か月後に実験を終了するまで１日おきに測定および記録した。腫瘍体積の測定を群毎に分析し、結果は、化学療法とＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓとの組み合わせを受けた動物がＰＢＳ群と比較して有意に小さい腫瘍を有した一方で、化学療法もＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ療法も単独では組み合わせほどには十分に機能しないことを示した（図８９）。
インビトロ老化Ｂ１６Ｆ１０黒色腫モデル
次に、活性化マウスＮＫ細胞による老化Ｂ１６Ｆ１０黒色腫細胞のインビトロ死滅を評価した。Ｂ１６Ｆ１０老化細胞（Ｂ１６Ｆ１０－ＳＮＣ）細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｅ ｖｉｏｌｅｔで標識し、異なるＥ：Ｔ比のインビトロ２ｔ２活性化マウスＮＫ細胞（ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓを１０ｍｇ／ｋｇで４日間注射したＣ５７ＢＬ／６マウスの脾臓から単離したもの）と１６時間インキュベートした。細胞をトリプシン処理し、洗浄し、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）溶液を含有する完全培地中に再懸濁した。細胞傷害性をフローサイトメトリーによって評価した（図９０）。
実施例５３：７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）融合タンパク質の作製および特徴付け
ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＣＤ１３７Ｌ融合タンパク質およびＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質からなる融合タンパク質複合体を生成した（図９１および図９２）。具体的には、ＩＬ－７配列を組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによって構築物を作製した。組織因子２１９のＮ末端に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端に結合したＩＬ－７を含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
７ｔ１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ７）
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
７ｔ１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ７）
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
２１ｓ１３７Ｌの核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。２１ｓ１３７Ｌ構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－２１）
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
（（Ｇ４Ｓ）３リンカー）
ＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴ
（ヒトＣＤ１３７Ｌ）
ＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ
２１ｓ１３７Ｌ融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－２１）
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
（（Ｇ４Ｓ）３リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
（ヒトＣＤ１３７Ｌ）
ＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ
ある場合には、リーダーペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＣＤ１３７Ｌ構築物およびＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を前述の修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（Ｈｕｇｈｅｓ ＭＳ，Ｙｕ ＹＹ，Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ，Ｌｉ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ａ ＴＣＲ ｇｅｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ａ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ａ ｍａｒｋｅｄ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｏｎｖｅｙｓ ｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ２００５；１６：４５７－７２）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＣＤ１３７Ｌタンパク質複合体（７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌと称する）の形成および分泌が可能になり、これを抗ＴＦ ＩｇＧ１親和性および他のクロマトグラフィー法によって精製することができる。
抗ＴＦ抗体親和性カラムを使用した７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌの精製溶出クロマトグラフ
細胞培養物から収集した７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌを、５カラム体積のＰＢＳで平衡化した抗ＴＦ抗体親和性カラムにロードした。試料をロードした後、カラムを５カラム体積のＰＢＳで洗浄し、その後、６カラム体積の０．１Ｍ酢酸（ｐＨ２．９）で溶出した。Ａ２８０溶出ピークを収集し、１Ｍトリス塩基でｐＨ７．５～８．０に中和した。その後、中和した試料を、分子量カットオフ３０ＫＤａでＡｍｉｃｏｎ遠心フィルターを使用してＰＢＳに緩衝液交換した。図９３に示されるように、抗ＴＦ抗体親和性カラムは、融合パートナーとしてＴＦを含む７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌに結合した。緩衝液交換したタンパク質試料を、さらなる生化学的分析および生物学的活性試験のために２～８℃で保管した。各溶出後、抗ＴＦ抗体親和性カラムを６カラム体積の０．１Ｍグリシン（ｐＨ２．５）を使用してストリッピングした。その後、カラムを、保管のために５カラム体積のＰＢＳおよび７カラム体積の２０％エタノールを使用して中和した。抗ＴＦ抗体親和性カラムを、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＡＫＴＡ Ａｖａｎｔシステムに接続した。流速は、２ｍＬ／分の溶出ステップを除く全てのステップで４ｍＬ／分であった。図９４は、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌの分析的ＳＥＣプロファイルを示す。
実施例５４：７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）融合タンパク質の生成および特徴付け
ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＣＤ１３７Ｌ融合タンパク質およびＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質からなる融合タンパク質複合体を生成した。具体的には、ＩＬ－７配列を組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによって構築物を作製した。組織因子２１９のＮ末端に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端に結合したＩＬ－７を含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
７ｔ１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ７）
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
７ｔ１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ７）
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）構築物（シグナルペプチド配列を含む）の核酸配列は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－２１）
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
（（Ｇ４Ｓ）３リンカー）
ＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴ
（ヒトＣＤ１３７リガンドショートバージョン）
ＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣ
２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）構築物のアミノ酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－２１）
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
（（Ｇ４Ｓ）３リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
（ヒトＣＤ１３７リガンドショートバージョン）
ＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩ
ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＣＤ１３７Ｌ（ショートバージョン）構築物およびＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を前述の修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（Ｈｕｇｈｅｓ ＭＳ，Ｙｕ ＹＹ，Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ，Ｌｉ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ａ ＴＣＲ ｇｅｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ａ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ａ ｍａｒｋｅｄ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｏｎｖｅｙｓ ｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ２００５；１６：４５７－７２）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＣＤ１３７Ｌタンパク質複合体（７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）と称する）の形成および分泌が可能になり、これを抗ＴＦ ＩｇＧ１親和性および他のクロマトグラフィー法によって精製することができる。
７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）のＣＤ１３７（４．１ＢＢ）への結合
１日目に、９６ウェルプレートを、Ｒ５（コーティング緩衝液）中１００μＬ（２．５μｇ／ｍＬ）のＧＡＨ ＩｇＧ Ｆｃ（Ｇ－１０２－Ｃ、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）またはＲ５のみでコーティングし、４℃で一晩インキュベートした。２日目に、プレートを３回洗浄し、ＰＢＳ中３００μＬの１％ＢＳＡで、３７℃で２時間ブロックした。１０ｎｇ／ｍＬの４．１ＢＢ／Ｆｃ（８３８－４Ｂ、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を１００μＬ／ウェルで添加し、室温で２時間インキュベートした。３回洗浄した後、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌまたは７ｔ１５－２１ｓを１／３比で連続希釈し（１０ｎＭから開始）、４℃で一晩インキュベートした。３日目に、３回洗浄した後、３００ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ｈＴＦ抗体（ＢＡＦ２３３９、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を１００μＬ／ウェルで添加し、室温で２時間インキュベートした。次いで、プレートを３回洗浄し、０．２５μｇ／ｍＬのＨＲＰ－ＳＡ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｅＲｅｓｅａｒｃｈ）と１００μＬ／ウェルで３０分間インキュベートし、その後、３回洗浄し、１００μＬのＡＢＴＳと室温で２分間インキュベートした。吸光度を４０５ｎｍで読み取った。図９５に示されるように、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）は、７ｔ１５－２１ｓと比較して４．１ＢＢ／Ｆｃ（青色線）との有意な相互作用を示した。
ＥＬＩＳＡを用いた７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）中のＩＬ－１５、ＩＬ－２１、およびＩＬ－７の検出
９６ウェルプレートをＲ５（コーティング緩衝液）中１００μＬ（８μｇ／ｍＬ）の抗ＴＦ ＩｇＧ１でコーティングし、室温で２時間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、ＰＢＳ中１００μＬの１％ＢＳＡでブロックした。１：３比で連続希釈した７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）を添加し、室温で６０分間インキュベートした。３回洗浄した後、５０ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ１５抗体（ＢＡＭ２４７、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、５００ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ２１抗体（１３－７２１８－８１、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、または５００ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ７抗体（５０６６０２、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）をウェルに添加し、室温で６０分間インキュベートした。３回洗浄し、０．２５μｇ／ｍＬのＨＲＰ－ＳＡ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）と１００μＬ／ウェルで、室温で３０分間インキュベートした後、４回洗浄し、１００μＬのＡＢＴＳと室温で２分間インキュベートした。吸光度を４０５ｎｍで読み取った。図９６Ａ～９６Ｃに示されるように、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）中のＩＬ－１５ドメイン、ＩＬ－２１ドメイン、およびＩＬ－７ドメインをそれぞれの抗体によって検出した。
７ｔ１５－１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）におけるＩＬ－１５は、ＩＬ２Ｒαβγ含有ＣＴＬＬ２細胞の増殖を促進する
７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）のＩＬ－１５活性を評価するために、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）を、ＩＬ２Ｒαβγを発現するＣＴＬＬ２細胞の増殖の促進について組換えＩＬ１５と比較した。ＩＬ－１５依存性ＣＴＬＬ２細胞をＩＭＤＭ－１０％ＦＢＳで５回洗浄し、２×１０４細胞／ウェルでウェルに播種した。連続希釈した７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）またはＩＬ－１５を細胞に添加した（図９７）。細胞をＣＯ２インキュベーター内で、３７℃で３日間インキュベートした。３日目に１０μＬのＷＳＴ１を各ウェルに添加し、ＣＯ２インキュベーター内で、３７℃でさらに３時間インキュベートすることにより、細胞増殖を検出した。吸光度を４５０ｎｍで測定することにより、生成されたホルマザン色素の量を分析した。図９７に示されるように、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）およびＩＬ－１５は、ＣＴＬＬ２細胞の増殖を促進した。７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）およびＩＬ－１５のＥＣ５０は、それぞれ、５５．９１ｐＭおよび６．２２ｐＭであった。
７ｔ１５－１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）におけるＩＬ－２１は、ＩＬ２１Ｒ含有Ｂ９細胞の増殖を促進する
７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）のＩＬ－２１活性を評価するために、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）を、ＩＬ－２１Ｒを発現するＢ９細胞の増殖の促進について組換えＩＬ－２１と比較した。ＩＬ－２１Ｒ含有Ｂ９細胞をＲＰＭＩ－１０％ＦＢＳで５回洗浄し、１×１０４細胞／ウェルでウェルに播種した。連続希釈した７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）またはＩＬ－２１を細胞に添加した（図９８）。細胞をＣＯ２インキュベーター内で、３７℃で５日間インキュベートした。５日目に１０μＬのＷＳＴ１を各ウェルに添加し、ＣＯ２インキュベーター内で、３７℃でさらに４時間インキュベートすることにより、細胞増殖を検出した。吸光度を４５０ｎｍで測定することにより、生成されたホルマザン色素の量を分析した。図９８に示されるように、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）およびＩＬ－２１は、Ｂ９細胞の増殖を促進した。７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）およびＩＬ－２１のＥＣ５０は、それぞれ、１０４．１ｎＭおよび７２．５５ｎＭであった。
実施例５５：７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ融合タンパク質の生成および特徴付け
ＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ融合タンパク質およびＩＬ－７／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質からなる融合タンパク質複合体を生成した（図９９および図１００）。ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ（Ｉｌｅ２４－Ａｓｐ１５９）、組織因子２１９、ＩＬ－１５、およびＩＬ－７配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。具体的には、ＩＬ－７配列を組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に結合することによって構築物を作製した。組織因子２１９のＮ末端に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端に結合したＩＬ－７を含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
７ｔ１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ７）
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
７ｔ１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ７）
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
２つのＴＧＦβ受容体ＩＩをＧｅｎｅｗｉｚによって合成したＩＬ－１５ＲαＳｕ鎖に直接結合することによっても構築物を作製した。ＩＬ－１５ＲαＳｕのＮ末端に結合したＴＧＦβ受容体ＩＩを含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
ＴＧＦＲｓ構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
ＴＧＦＲｓ融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞におけるＴＧＦβ１活性に対する７ｔ１５－ＴＧＦＲｓの効果
７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＴＧＦβＲの活性を評価するために、ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞におけるＴＧＦβ１活性に対する７ｔ１５－ＴＧＦＲｓの効果を分析した。ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を予熱したＰＢＳで２回洗浄し、試験培地（ＤＭＥＭ、１０％熱不活性化ＦＣＳ、１×グルタミン、１×抗－抗、および２×グルタミン）中に５×１０５細胞／ｍＬで再懸濁した。平底９６ウェルプレート中、５０μＬの細胞を各ウェルに添加し（２．５×１０４細胞／ウェル）、その後、５０μＬの０．１ｎＭ ＴＧＦβ１（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ）を添加した。その後、１：３連続希釈で調製した７ｔ１５－ＴＧＦＲｓまたはＴＧＦＲ－Ｆｃ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）をプレートに添加して、総量を２００μＬにした。３７℃で２４時間インキュベートした後、４０μＬの誘導されたＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞上清を平底９６ウェルプレート中の１６０μＬの予熱したＱＵＡＮＴＩ－Ｂｌｕｅ（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）に添加し、３７℃で１～３時間インキュベートした。その後、ＯＤ値を、プレートリーダー（Ｍｕｌｔｉｓｃａｎ Ｓｋｙ）を使用して６２０～６５５ｎＭで決定した。各タンパク質試料のＩＣ５０を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ７．０４を用いて計算した。７ｔ１５－ＴＧＦＲｓおよびＴＧＦＲ－ＦｃのＩＣ５０は、それぞれ、１１４２ＰＭおよび５５８．６ｐＭであった。これらの結果は、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＴＧＦβＲがＨＥＫ－Ｂｌｕｅ ＴＧＦβ細胞におけるＴＧＦβ１活性を遮断することができたことを示した。
ＥＬＩＳＡを用いた７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＩＬ－１５、ＴＧＦβＲＩＩ、およびＩＬ－７の検出
９６ウェルプレートをＲ５（コーティング緩衝液）中１００μＬ（８μｇ／ｍＬ）の抗ＴＦ ＩｇＧ１でコーティングし、室温（ＲＴ）で２時間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、ＰＢＳ中１００μＬの１％ＢＳＡでブロックした。連続希釈の７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ（１：３比）を添加し、室温で６０分間インキュベートした。３回洗浄した後、５０ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ－１５抗体（ＢＡＭ２４７、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、２００ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＴＧＦｂＲＩＩ抗体（ＢＡＦ２４１、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、または５００ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ－７抗体（５０６６０２、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を添加し、室温で６０分間インキュベートした。３回洗浄した後、０．２５μｇ／ｍＬのＨＲＰ－ＳＡ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）と１００μＬ／ウェルで、室温で３０分間インキュベートし、その後、４回洗浄し、１００μＬのＡＢＴＳと室温で２分間インキュベートした。吸光度を４０５ｎｍで読み取った。データを図１０１に示す。図１０２Ａ～１０２Ｃに示されるように、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＩＬ－１５、ＴＧＦＲ、およびＩＬ－７をそれぞれの抗体によって検出した。
７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＩＬ－１５は、ＩＬ－２Ｒβおよび共通γ鎖含有３２Ｄβ細胞の増殖を促進する
７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＩＬ－１５の活性を評価するために、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓを、ＩＬ２Ｒβおよび共通γ鎖を発現する３２Ｄβ細胞を使用して組換えＩＬ－１５と比較し、細胞増殖の促進に対するそれらの効果を評価した。ＩＬ－１５依存性３２Ｄβ細胞をＩＭＤＭ－１０％ＦＢＳで５回洗浄し、２×１０４細胞／ウェルでウェル中に播種した。連続希釈した７ｔ１５－ＴＧＦＲｓまたはＩＬ－１５を細胞に添加した（図１０３）。細胞をＣＯ２インキュベーター内で、３７℃で３日間インキュベートした。３日目に１０μＬのＷＳＴ１を各ウェルに添加し、ＣＯ２インキュベーター内で、３７℃でさらに３時間インキュベートすることにより、細胞増殖を検出した。吸光度を４５０ｎｍで測定することにより、生成されたホルマザン色素の量を分析した。図１０３に示されるように、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓおよびＩＬ－１５は３２Ｄβ細胞増殖を促進し、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓおよびＩＬ－１５のＥＣ５０は、それぞれ、１２６ｎＭおよび１６．６３ｐＭであった。
抗ＴＦ抗体親和性カラムを使用した７ｔ１５－ＴＧＦＲｓの精製溶出クロマトグラフ
細胞培養物から収集した７ｔ１５－ＴＧＦＲｓを、５カラム体積のＰＢＳで平衡化した抗ＴＦ抗体親和性カラムにロードした。試料をロードした後、カラムを５カラム体積のＰＢＳで洗浄し、その後、６カラム体積の０．１Ｍ酢酸（ｐＨ２．９）で溶出した。Ａ２８０溶出ピークを収集し、１Ｍトリス塩基でｐＨ７．５～８．０に中和した。その後、中和した試料を、分子量カットオフ３０ＫＤａでＡｍｉｃｏｎ遠心フィルターを使用してＰＢＳに緩衝液交換した。図１０４に示されるように、抗ＴＦ抗体親和性カラムは、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓの融合パートナーとしてＴＦを含む７ｔ１５－ＴＧＦＲｓに結合することができる。緩衝液交換したタンパク質試料を、さらなる生化学的分析および生物学的活性試験のために２～８℃で保管した。各溶出後、抗ＴＦ抗体親和性カラムを６カラム体積の０．１Ｍグリシン（ｐＨ２．５）を使用してストリッピングした。その後、カラムを、保管のために５カラム体積のＰＢＳおよび７カラム体積の２０％エタノールを使用して中和した。抗ＴＦ抗体親和性カラムを、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＡＫＴＡ Ａｖａｎｔシステムに接続した。流速は、２ｍＬ／分の溶出ステップを除く全てのステップで４ｍＬ／分であった。
７ｔ１５－ＴＧＦＲｓの還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析
タンパク質の純度および分子量を決定するために、抗ＴＦ抗体親和性カラムで精製した７ｔ１５－ＴＧＦＲｓタンパク質試料を、還元条件下でドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル（４～１２％ＮｕＰａｇｅビス－トリスゲル）電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）法によって分析した。電気泳動後、ゲルをＩｎｓｔａｎｔＢｌｕｅで約３０分間染色し、その後、精製水中で一晩脱色した。
７ｔ１５－ＴＧＦＲｓタンパク質がＣＨＯ細胞において翻訳後にグリコシル化を受けることを検証するために、脱グリコシル化実験を、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ製のＰｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ Ｍｉｘ ＩＩキットおよび製造業者の指示を使用して実施した。図１０５は、非脱グリコシル化状態（赤色の縁内のレーン１）および脱グリコシル化状態（黄色の縁内のレーン２）での試料の還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析を示す。これらの結果は、タンパク質がＣＨＯ細胞で発現されるとグリコシル化されることを示した。脱グリコシル化後、精製した試料は、還元ＳＤＳゲル中で予想された分子量（５５ｋＤａおよび３９ｋＤａ）を示した。レーンＭには、１０ｕＬのＳｅｅＢｌｕｅ Ｐｌｕｓ２ Ｐｒｅｓｔａｉｎｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄをロードした。
７ｔ１５－ＴＧＦＲｓの特徴付け
７ｔ１５－ＴＧＦＲｓは、ヒトＩＬ－７、ヒト組織因子２１９断片、およびヒトＩＬ－１５の可溶性融合物（７ｔ１５）である第１のポリペプチドと、一本鎖の２つのＴＧＦβＲＩＩドメインおよびヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖のｓｕｓｈｉドメインの可溶性融合物（ＴＧＦＲｓ）である第２のポリペプチドとを含む多鎖ポリペプチド（本明細書に記載のタイプＡ多鎖ポリペプチド）である。
ＣＨＯ細胞を、７ｔ１５およびＴＧＦＲｓベクターで共トランスフェクトした。７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ複合体を、トランスフェクトしたＣＨＯ細胞培養上清から精製した。図１０６に示されるように、複合体中のＩＬ－７、ＩＬ－１５、ＴＧＦβ受容体、および組織因子（ＴＦ）成分をＥＬＩＳＡによって実証した。ヒト化抗ＴＦモノクローナル抗体（抗ＴＦ ＩｇＧ１）を捕捉抗体として使用して、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＴＦを決定し、ヒトＩＬ－１５抗体（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ）、ヒトＩＬ－７（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、抗ＴＧＦβ受容体（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）に対するビオチン化抗体を検出抗体として使用して、それぞれ、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓ中のＩＬ－７、ＩＬ－１５、およびＴＧＦβ受容体を決定した。その後、ペルオキシダーゼ結合ストレプトアビジン（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂ）およびＡＢＴＳ基質（Ｓｕｒｍｏｄｉｃｓ ＩＶＤ，Ｉｎｃ．）を使用して、結合したビオチン化抗体を検出した。結果をＥＬＩＳＡによって分析した（図１０６）。
Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおける７ｔ１５－ＴＧＦＲｓのインビボ特徴付け
インビボでの７ｔ１５－ＴＧＦＲｓの免疫刺激活性を決定するために、Ｃ５７ＢＬ／６マウスを、対照溶液（ＰＢＳ）または０．３、１、３、および１０ｍｇ／ｋｇの７ｔ１５－ＴＧＦＲｓで皮下処理した。処理したマウスを安楽死させた。マウスの脾臓を収集し、処理後４日目に秤量した。単一脾細胞懸濁液を調製し、蛍光色素結合抗ＣＤ４、抗ＣＤ８、および抗ＮＫ１．１抗体で染色し、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、およびＮＫ細胞のパーセンテージをフローサイトメトリーによって分析した。結果は、脾臓重量に基づいて、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓが特に１～１０ｍｇ／ｋｇで脾臓細胞を増殖させるのに効果的であることを示した（図１０７Ａ）。ＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞のパーセンテージは、試験した全ての用量で対照処理マウスと比較して高かった（図１０７Ｂ）。
ＣＤ４＋ Ｔ細胞およびＣＤ８＋ Ｔ細胞のＣＤ４４発現
ＩＬ－１５がＴ細胞でのＣＤ４４発現およびメモリーＴ細胞の成長を誘導することが知られている。７ｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスにおけるＣＤ４＋ Ｔ細胞およびＣＤ８＋ Ｔ細胞のＣＤ４４発現を評価した。Ｃ５７ＢＬ／６マウスを７ｔ１５－ＴＧＦＲｓで皮下処理した。脾細胞を、免疫細胞サブセット用の蛍光色素結合抗ＣＤ４、抗ＣＤ８、および抗ＣＤ４４モノクローナル抗体で染色した。総ＣＤ４＋ Ｔ細胞のＣＤ４＋ＣＤ４４高 Ｔ細胞および総ＣＤ８＋ Ｔ細胞のＣＤ８＋ＣＤ４４高 Ｔ細胞のパーセンテージをフローサイトメトリーによって分析した。図１０８Ａおよび図１０８Ｂに示されるように、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓは、ＣＤ４＋ Ｔ細胞およびＣＤ８＋ Ｔ細胞を有意に活性化して、メモリーＴ細胞に分化した。
さらに、脾細胞のＫｉ６７発現に基づく免疫細胞の動的増殖およびマウスの単回投与処理後に７ｔ１５－ＴＧＦＲｓによって誘導された脾細胞のグランザイムＢ発現に基づく細胞傷害性の潜在性も評価した。Ｃ５７ＢＬ／６マウスを３ｍｇ／ｋｇの７ｔ１５－ＴＧＦＲｓで皮下処理した。処理したマウスを安楽死させ、脾細胞を調製した。調製した脾細胞を、免疫細胞サブセット用の蛍光色素結合抗ＣＤ４、抗ＣＤ８、および抗ＮＫ１．１（ＮＫ）抗体で染色し、その後、細胞増殖用の抗Ｋｉ６７抗体および細胞傷害性マーカー用の抗グランザイムＢ抗体で細胞内染色した。対応する免疫細胞サブセットのＫｉ６７およびグランザイムＢの平均蛍光強度（ＭＦＩ）をフローサイトメトリーによって分析した。図１０９Ａおよび図１０９Ｂに示されるように、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスの脾臓では、ＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞によるＫｉ６７およびグランザイムＢの発現がＰＢＳ対照処理と比較して増加した。これらの結果は、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓがＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞の数を増加させるのみならず、これらの細胞の潜在的な細胞傷害性も増強することを示す。
加えて、腫瘍細胞に対するマウス脾細胞の細胞傷害性も評価した。マウスＹａｃ－１細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔで標識し、腫瘍標的細胞として使用した。脾細胞を７ｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスから調製し、エフェクター細胞として使用した。標的細胞を、１００ｎＭの７ｔ１５－ＴＧＦＲｓを有するまたは有しないＲＰＭＩ－１０培地中でエフェクター細胞とＥ：Ｔ比１０：１で混合し、３７℃で２０時間インキュベートした。標的Ｙａｃ－１細胞阻害を、フローサイトメトリーを使用した生存ｖｉｏｌｅｔ標識Ｙａｃ－１細胞の分析によって評価した。Ｙａｃ－１阻害のパーセンテージを、式（１－実験試料中の生存Ｙａｃ－１細胞数／脾細胞を含まない試料中の生存Ｙａｃ－１細胞数）×１００を使用して計算した。図１１０に示されるように、７ｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウス脾細胞は、対照マウス脾細胞よりもＹａｃ－１細胞に対して強い細胞傷害性を示し、細胞傷害性アッセイ中に７ｔ１５－ＴＧＦＲｓを添加することにより、Ｙａｃ－１標的細胞に対する脾細胞の細胞傷害性がさらに増強された。
実施例５６：ＴＧＦＲｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ融合タンパク質の生成および特徴付け
ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＣＤ１３７Ｌ融合タンパク質およびＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質を含む融合タンパク質複合体を生成した（図１１１および図１１２）。ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ（Ｉｌｅ２４－Ａｓｐ１５９）、組織因子２１９、およびＩＬ－１５配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。具体的には、Ｇ４Ｓ（３）リンカーを用いて２つのＴＧＦβ受容体ＩＩ配列を結合してＴＧＦβ受容体ＩＩの一本鎖バージョンを生成し、その後、組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に直接連結することによって構築物を作製した。
ＴＧＦＲｔ１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
ＴＧＦＲｔ１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
２１ｓ１３７Ｌの核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。２１ｓ１３７Ｌ構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－２１）
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
（（Ｇ４Ｓ）３リンカー）
ＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴ
（ヒトＣＤ１３７Ｌ）
ＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ
２１ｓ１３７Ｌ融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－２１）
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
（（Ｇ４Ｓ）３リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
（ヒトＣＤ１３７Ｌ）
ＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ
ある場合には、リーダーペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＣＤ１３７Ｌ構築物およびＴＧＦＲ／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を前述の修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（Ｈｕｇｈｅｓ ＭＳ，Ｙｕ ＹＹ，Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ，Ｌｉ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ａ ＴＣＲ ｇｅｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ａ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ａ ｍａｒｋｅｄ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｏｎｖｅｙｓ ｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ２００５；１６：４５７－７２）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＴＧＦＲ／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＩＬ－２１／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＣＤ１３７Ｌタンパク質複合体（ＴＧＦＲｔ１５－２１ｓ１３７Ｌと称する）の形成および分泌が可能になり、これを抗ＴＦ ＩｇＧ１親和性および他のクロマトグラフィー法によって精製することができる。
抗ＴＦ抗体親和性カラムを使用したＴＧＦＲｔ１５－２１ｓ１３７Ｌの精製溶出クロマトグラフ
細胞培養物から収集したＴＧＦＲｔ１５－２１ｓ１３７Ｌを、５カラム体積のＰＢＳで平衡化した抗ＴＦ抗体親和性カラムにロードした。試料をロードした後、カラムを５カラム体積のＰＢＳで洗浄し、その後、６カラム体積の０．１Ｍ酢酸（ｐＨ２．９）で溶出した。Ａ２８０溶出ピークを収集し、１Ｍトリス塩基でｐＨ７．５～８．０に中和した。その後、中和した試料を、分子量カットオフ３０ＫＤａでＡｍｉｃｏｎ遠心フィルターを使用してＰＢＳに緩衝液交換した。図１１３に示されるように、抗ＴＦ抗体親和性カラムは、ＴＧＦＲｔ１５－２１ｓ１３７Ｌの融合パートナーとしてＴＦを含むＴＧＦＲｔ１５－２１ｓ１３７Ｌに結合した。緩衝液交換したタンパク質試料を、さらなる生化学的分析および生物学的活性試験のために２～８℃で保管した。各溶出後、抗ＴＦ抗体親和性カラムを６カラム体積の０．１Ｍグリシン（ｐＨ２．５）を使用してストリッピングした。その後、カラムを、保管のために５カラム体積のＰＢＳおよび７カラム体積の２０％エタノールを使用して中和した。抗ＴＦ抗体親和性カラムを、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＡＫＴＡ Ａｖａｎｔシステムに接続した。流速は、２ｍＬ／分の溶出ステップを除く全てのステップで４ｍＬ／分であった。
実施例５７：ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１融合タンパク質の生成および特徴付け
ＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ－２１融合タンパク質およびＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質からなる融合タンパク質複合体を生成した（図１１４および図１１５）。ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ（Ｉｌｅ２４－Ａｓｐ１５９）、組織因子２１９、ＩＬ－２１、およびＩＬ－１５配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。具体的には、Ｇ４Ｓ（３）リンカーを用いて２つのＴＧＦβ受容体ＩＩ配列を結合してＴＧＦβ受容体ＩＩの一本鎖バージョンを生成し、その後、組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に直接連結することによって構築物を作製した。
組織因子２１９のＮ末端に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端に結合した２つのＴＧＦβ受容体ＩＩを含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
ＴＧＦＲｔ１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
ＴＧＦＲｔ１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
２つのＴＧＦβ受容体ＩＩをＧｅｎｅｗｉｚによって合成したＩＬ－１５ＲαＳｕ鎖に、続いて、ＩＬ－２１のＮ末端コーディング領域に直接結合することによっても構築物を作製した。ＩＬ－１５ＲαＳｕのＮ末端に、続いて、ＩＬ－２１のＮ末端に結合したＴＧＦβ受容体ＩＩを含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
ＴＧＦＲｓ２１構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
（ヒトＩＬ－２１）
ＣＡＡＧＧＴＣＡＡＧＡＴＣＧＣＣＡＣＡＴＧＡＴＴＡＧＡＡＴＧＣＧＴＣＡＡＣＴＴＡＴＡＧＡＴＡＴＴＧＴＴＧＡＴＣＡＧＣＴＧＡＡＡＡＡＴＴＡＴＧＴＧＡＡＴＧＡＣＴＴＧＧＴＣＣＣＴＧＡＡＴＴＴＣＴＧＣＣＡＧＣＴＣＣＡＧＡＡＧＡＴＧＴＡＧＡＧＡＣＡＡＡＣＴＧＴＧＡＧＴＧＧＴＣＡＧＣＴＴＴＴＴＣＣＴＧＴＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＡＣＴＡＡＡＧＴＣＡＧＣＡＡＡＴＡＣＡＧＧＡＡＡＣＡＡＴＧＡＡＡＧＧＡＴＡＡＴＣＡＡＴＧＴＡＴＣＡＡＴＴＡＡＡＡＡＧＣＴＧＡＡＧＡＧＧＡＡＡＣＣＡＣＣＴＴＣＣＡＣＡＡＡＴＧＣＡＧＧＧＡＧＡＡＧＡＣＡＧＡＡＡＣＡＣＡＧＡＣＴＡＡＣＡＴＧＣＣＣＴＴＣＡＴＧＴＧＡＴＴＣＴＴＡＴＧＡＧＡＡＡＡＡＡＣＣＡＣＣＣＡＡＡＧＡＡＴＴＣＣＴＡＧＡＡＡＧＡＴＴＣＡＡＡＴＣＡＣＴＴＣＴＣＣＡＡＡＡＧＡＴＧＡＴＴＣＡＴＣＡＧＣＡＴＣＴＧＴＣＣＴＣＴＡＧＡＡＣＡＣＡＣＧＧＡＡＧＴＧＡＡＧＡＴＴＣＣ
ＴＧＦＲｓ２１融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
（ヒトＩＬ－２１）
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ
ある場合には、リーダーペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
ＴＧＦＲ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ－２１構築物およびＴＧＦＲ／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を前述の修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（Ｈｕｇｈｅｓ ＭＳ，Ｙｕ ＹＹ，Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ，Ｌｉ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ａ ＴＣＲ ｇｅｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ａ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ａ ｍａｒｋｅｄ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｏｎｖｅｙｓ ｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ２００５；１６：４５７－７２）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＴＧＦＲ／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＴＧＦＲ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＩＬ－２１タンパク質複合体（ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１と称する）の形成および分泌が可能になり、これを抗ＴＦ抗体ＩｇＧ１親和性および他のクロマトグラフィー法によって精製することができる。
抗ＴＦ抗体親和性カラムを使用したＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１の精製溶出クロマトグラフ
細胞培養物から収集したＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１を、５カラム体積のＰＢＳで平衡化した抗ＴＦ抗体親和性カラムにロードした。試料をロードした後、カラムを５カラム体積のＰＢＳで洗浄し、その後、６カラム体積の０．１Ｍ酢酸（ｐＨ２．９）で溶出した。Ａ２８０溶出ピークを収集し、１Ｍトリス塩基でｐＨ７．５～８．０に中和した。その後、中和した試料を、分子量カットオフ３０ＫＤａでＡｍｉｃｏｎ遠心フィルターを使用してＰＢＳに緩衝液交換した。図１１６に示されるように、抗ＴＦ抗体親和性カラムは、融合パートナーとしてＴＦを含むＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１に結合した。緩衝液交換したタンパク質試料を、さらなる生化学的分析および生物学的活性試験のために２～８℃で保管した。各溶出後、抗ＴＦ抗体親和性カラムを６カラム体積の０．１Ｍグリシン（ｐＨ２．５）を使用してストリッピングした。その後、カラムを、保管のために５カラム体積のＰＢＳおよび７カラム体積の２０％エタノールを使用して中和した。抗ＴＦ抗体親和性カラムを、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＡＫＴＡ Ａｖａｎｔシステムに接続した。流速は、２ｍＬ／分の溶出ステップを除く全てのステップで４ｍＬ／分であった。
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１の還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析
タンパク質の純度および分子量を決定するために、抗ＴＦ抗体親和性カラムで精製したＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１タンパク質試料を、還元条件下でドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル（４～１２％ＮｕＰａｇｅビス－トリスゲル）電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）法によって分析した。電気泳動後、ゲルをＩｎｓｔａｎｔＢｌｕｅで約３０分間染色し、その後、精製水中で一晩脱色した。
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１タンパク質がＣＨＯ細胞において翻訳後にグリコシル化を受けることを検証するために、脱グリコシル化実験を、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ製のＰｒｏｔｅｉｎ Ｄｅｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ Ｍｉｘ ＩＩキットおよび製造業者の指示を使用して実施した。図１１７は、非脱グリコシル化状態（赤色の縁内のレーン１）および脱グリコシル化状態（黄色の縁内のレーン２）での試料の還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析を示す。タンパク質がＣＨＯ細胞で発現されるとグリコシル化されることは明らかである。脱グリコシル化後、精製した試料は、還元ＳＤＳゲル中で予想された分子量（６９ｋＤａおよび５５ｋＤａ）を示した。レーンＭには、１０ｕＬのＳｅｅＢｌｕｅ Ｐｌｕｓ２ Ｐｒｅｓｔａｉｎｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄをロードした。
Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおけるＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１の免疫刺激
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１は、一本鎖の２つのＴＧＦβＲＩＩドメイン、ヒト組織因子２１９断片、およびヒトＩＬ－１５の可溶性融合物（ＴＧＦＲｔ１５）である第１のポリペプチドと、一本鎖の２つのＴＧＦβＲＩＩドメイン、ヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖のｓｕｓｈｉドメイン、およびヒトＩＬ－２１の可溶性融合物（ＴＧＦＲｓ２１）である第２のポリペプチドとを含む多鎖ポリペプチド（本明細書に記載のタイプＡ多鎖ポリペプチド）である。
ＣＨＯ細胞を、ＴＧＦＲｔ１５およびＴＧＦＲｓ２１ベクターで共トランスフェクトした。ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１複合体を、トランスフェクトしたＣＨＯ細胞培養上清から精製した。図１１８Ａ～Ｂに示されるように、複合体中のＴＧＦβ受容体、ＩＬ－１５、ＩＬ－２１、および組織因子（ＴＦ）成分をＥＬＩＳＡによって実証した。ヒト化抗ＴＦモノクローナル抗体（抗ＴＦ ＩｇＧ１）を捕捉抗体として使用して、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１、ビオチン化抗ヒトＩＬ－１５抗体（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ）、ビオチン化抗ヒトＴＧＦβ受容体抗体（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ）中のＴＦを決定し、ビオチン化抗ヒトＩＬ－２１抗体（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を検出抗体として使用して、それぞれ、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１中のＩＬ－１５、ＴＧＦβ受容体、およびＩＬ－２１を決定した。検出のために、ペルオキシダーゼ結合ストレプトアビジン（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂ）およびＡＢＴＳを使用した。
野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスを、対照溶液（ＰＢＳ）または３ｍｇ／ｋｇのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１のいずれかで皮下処理した。処理の４日後、脾臓の重量および脾臓に存在する様々な免疫細胞型のパーセンテージを評価した。図１１９Ａに示されるように、対照処理マウスおよびＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１処理マウスの脾臓に存在するＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、およびＮＫ細胞のパーセンテージを評価した。ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１処理後のＫｉ６７発現に基づく免疫細胞の動的増殖も評価した。脾細胞を蛍光色素結合抗ＣＤ４、抗ＣＤ８、および抗ＮＫ１．１（ＮＫ）抗体で染色し、抗Ｋｉ６７抗体で細胞内染色した。ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、およびＮＫ細胞のパーセンテージ、ならびに対応する免疫細胞サブセットのＫｉ６７の平均蛍光強度（ＭＦＩ）をフローサイトメトリーによって分析した（図１１９Ａおよび図１１９Ｂ）。さらに、マウスの単回投与処理後にＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１によって誘導された脾細胞のグランザイムＢ発現に基づく細胞傷害性の潜在性も評価した。図１２０に示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１で処理したマウスの脾臓では、ＮＫ細胞によるグランザイムＢの発現が処理後に増加した。ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１で処理したマウスの脾細胞を、蛍光色素結合抗ＣＤ４、抗ＣＤ８、および抗ＮＫ１．１（ＮＫ）抗体で染色し、抗グランザイムＢ抗体で細胞内染色した。対応する免疫細胞サブセットのグランザイムＢの平均蛍光強度（ＭＦＩ）をフローサイトメトリーによって分析した（図１２０）。
図１１９Ａに示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１で処理したマウスの脾臓では、ＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞の両方のパーセンテージが、単回ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１処理後４日目に増加した。これらの結果は、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１が免疫細胞を誘導して、マウス脾臓、特にＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞を増殖させることができることを示す。
加えて、腫瘍細胞に対するマウス脾細胞の細胞傷害性も評価した。マウスＹａｃ－１細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔで標識し、腫瘍標的細胞として使用した。脾細胞をＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１で処理したマウスから調製し、エフェクター細胞として使用した。標的細胞を、１００ｎＭのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１を有するまたは有しないＲＰＭＩ－１０培地中でエフェクター細胞とＥ：Ｔ比１０：１で混合し、３７℃で２４時間インキュベートした。標的Ｙａｃ－１細胞阻害を、フローサイトメトリーを使用した生存ｖｉｏｌｅｔ標識Ｙａｃ－１細胞の分析によって評価した。Ｙａｃ－１阻害のパーセンテージを、式（１－［実験試料中の生存Ｙａｃ－１細胞数］／［脾細胞を含まない試料中の生存Ｙａｃ－１細胞数］）×１００を使用して計算した。図１２１に示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１で処理したマウス脾細胞は、細胞傷害性アッセイ中にＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ２１の存在下で対照マウス細胞よりもＹａｃ－１細胞に対して強い細胞傷害性を示した（図１２１）。
実施例５８：ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ１６融合タンパク質の生成
ＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／抗ＣＤ１６ｓｃＦｖ融合タンパク質およびＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質からなる融合タンパク質複合体を生成した（図１２２および図１２３）。ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ（Ｉｌｅ２４－Ａｓｐ１５９）、組織因子２１９、およびＩＬ－１５配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。具体的には、Ｇ４Ｓ（３）リンカーを用いて２つのＴＧＦβ受容体ＩＩ配列を結合してＴＧＦβ受容体ＩＩの一本鎖バージョンを生成し、その後、組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に直接連結することによって構築物を作製した。
組織因子２１９のＮ末端に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端に結合した２つのＴＧＦβ受容体ＩＩを含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
ＴＧＦＲｔ１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒト組織因子２１９）
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（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
ＴＧＦＲｔ１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
２つのＴＧＦβ受容体ＩＩをＧｅｎｅｗｉｚによって合成したＩＬ－１５ＲαＳｕ鎖に、続いて、抗ＣＤ１６ｓｃＦｖ配列に直接結合することによっても構築物を作製した。ＩＬ－１５ＲαＳｕのＮ末端に、続いて、抗ＣＤ１６ｓｃＦｖ配列に結合したＴＧＦβ受容体ＩＩを含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
ＴＧＦＲｓ１６構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
（抗ヒトＣＤ１６ｓｃＦｖ）
ＴＣＣＧＡＧＣＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＣＴＧＴＧＴＣＣＧＴＧＧＣＴＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＣＣＧＴＧＡＧＧＡＴＣＡＣＣＴＧＣＣＡＧＧＧＣＧＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＴＣＣＴＡＣＴＡＣＧＣＣＴＣＣＴＧＧＴＡＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＣＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＴＣＴＡＣＧＧＣＡＡＧＡＡＣＡＡＣＡＧＧＣＣＣＴＣＣＧＧＣＡＴＣＣＣＴＧＡＣＡＧＧＴＴＣＴＣＣＧＧＡＴＣＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＣＣＴＧＡＣＣＡＴＣＡＣＡＧＧＣＧＣＴＣＡＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＣＴＧＡＣＴＡＣＴＡＣＴＧＣＡＡＣＴＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＴＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＴＧＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＴＧＧＣＧＧＣＧＧＣＧＧＣＴＣＣＧＧＡＧＧＣＧＧＣＧＧＣＡＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＧＴＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＧＧＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＴＧＣＴＧＣＣＴＣＣＧＧＣＴＴＣＡＣＣＴＴＣＧＡＣＧＡＣＴＡＣＧＧＣＡＴＧＴＣＣＴＧＧＧＴＧＡＧＧＣＡＧＧＣＴＣＣＴＧＧＡＡＡＧＧＧＣＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧＴＧＴＣＣＧＧＣＡＴＣＡＡＣＴＧＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＴＣＣＡＣＣＧＧＣＴＡＣＧＣＣＧＡＴＴＣＣＧＴＧＡＡＧＧＧＣＡＧＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＧＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＡＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴＧＣＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＣＴＧＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＡＣＣＧＣＣＧＴＧＴＡＣＴＡＣＴＧＣＧＣＣＡＧＧＧＧＣＡＧＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＡＣＡＧＧＧＣＡＣＣＣＴＧＧＴＧＡＣＣＧＴＧＴＣＣＡＧＧ
ＴＧＦＲｓ１６融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
（抗ヒトＣＤ１６ｓｃＦｖ）
ＳＥＬＴＱＤＰＡＶＳＶＡＬＧＱＴＶＲＩＴＣＱＧＤＳＬＲＳＹＹＡＳＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＩＹＧＫＮＮＲＰＳＧＩＰＤＲＦＳＧＳＳＳＧＮＴＡＳＬＴＩＴＧＡＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＮＳＲＤＳＳＧＮＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＧＨＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＲＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＮＷＮＧＧＳＴＧＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＳＬＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＲ
ある場合には、リーダーペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
ＴＧＦＲ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／抗ＣＤ１６ｓｃＦｖ構築物およびＴＧＦＲ／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を前述の修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（Ｈｕｇｈｅｓ ＭＳ，Ｙｕ ＹＹ，Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ，Ｌｉ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ａ ＴＣＲ ｇｅｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ａ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ａ ｍａｒｋｅｄ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｏｎｖｅｙｓ ｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ２００５；１６：４５７－７２）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＴＧＦＲ／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＴＧＦＲ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ａｎｔｉ－ＣＤ１６ｓｃＦｖタンパク質複合体（ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ１６と称する）の形成および分泌が可能になり、これを抗ＴＦ ＩｇＧ１親和性および他のクロマトグラフィー法によって精製することができる。
実施例５９：ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ１３７Ｌ融合タンパク質の生成
ＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＣＤ１３７Ｌ融合タンパク質およびＴＧＦβ受容体ＩＩ／ＴＦ／ＩＬ－１５融合タンパク質からなる融合タンパク質複合体を生成した（図１２４および図１２５）。ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ（Ｉｌｅ２４－Ａｓｐ１５９）、組織因子２１９、ＣＤ１３７Ｌ、およびＩＬ－１５配列をＵｎｉＰｒｏｔウェブサイトから入手し、これらの配列のＤＮＡをＧｅｎｅｗｉｚによって合成した。具体的には、Ｇ４Ｓ（３）リンカーを用いて２つのＴＧＦβ受容体ＩＩ配列を結合してＴＧＦβ受容体ＩＩの一本鎖バージョンを生成し、その後、組織因子２１９のＮ末端コーディング領域に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端コーディング領域に直接連結することによって構築物を作製した。
組織因子２１９のＮ末端に、続いて、ＩＬ－１５のＮ末端に結合した２つのＴＧＦβ受容体ＩＩを含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
ＴＧＦＲｔ１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
ＴＧＦＲｔ１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
２つのＴＧＦβ受容体ＩＩをＧｅｎｅｗｉｚによって合成したＩＬ－１５ＲαＳｕ鎖に、続いて、（Ｇ４Ｓ）３リンカーおよびＣＤ１３７Ｌ配列に直接結合することによっても構築物を作製した。ＩＬ－１５ＲαＳｕのＮ末端に、続いて、（Ｇ４Ｓ）３リンカーおよびＣＤ１３７Ｌ配列に結合したＴＧＦβ受容体ＩＩを含む構築物の核酸配列およびタンパク質配列を以下に示す。
ＴＧＦＲｓ１３７Ｌ構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ断片）
ＡＴＣＣＣＣＣＣＣＣＡＴＧＴＧＣＡＡＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＣＡＡＣＧＡＴＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＣＡＡＣＡＡＣＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＧＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＣＴＧＣＡＡＧＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＣＡＧＧＴＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＣＡＴＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＡＡＧＣＣＣＣＡＡＧＡＡＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＣＧＴＧＴＧＧＣＧＧＡＡＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＣＧＴＧＴＧＴＣＡＣＧＡＣＣＣＣＡＡＧＣＴＣＣＣＴＴＡＴＣＡＣＧＡＣＴＴＣＡＴＴＣＴＧＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＣＣＴＣＣＣＣＣＡＡＡＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＧＧＡＧＡＧＡＣＣＴＴＣＴＴＴＡＴＧＴＧＴＴＣＣＴＧＴＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＧＴＧＴＡＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＣＡＴＣＴＴＣＡＧＣＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＡＣＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＴＧＡＴＧＧＡＧＧＴＧＧＣＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧＧＧＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＣＣＡＣＧＴＧＣＡＧＡＡＧＡＧＣＧＴＧＡＡＴＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＧＴＧＡＣＣＧＡＴＡＡＣＡＡＴＧＧＣＧＣＣＧＴＧＡＡＡＴＴＴＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＣＡＡＡＴＴＣＴＧＣＧＡＴＧＴＧＡＧＧＴＴＴＴＣＣＡＣＣＴＧＣＧＡＣＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＡＴＧＡＧＣＡＡＣＴＧＣＴＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＴＣＴＧＴＧＡＧＡＡＧＣＣＴＣＡＧＧＡＧＧＴＧＴＧＣＧＴＧＧＣＴＧＴＣＴＧＧＣＧＧＡＡＧＡＡＴＧＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＡＡＣＣＧＴＣＴＧＣＣＡＣＧＡＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＣＣＣＴＡＣＣＡＣＧＡＴＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＡＡＧＡＣＧＣＣＧＣＣＡＧＣＣＣＴＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＡＡＡＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＧＡＧＡＣＣＴＴＴＴＴＣＡＴＧＴＧＣＴＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＧＡＡＴＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＡＴＣＴＴＴＡＧＣＧＡＧＧＡＡＴＡＣＡＡＴＡＣＣＡＧＣＡＡＣＣＣＣＧＡＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
（（Ｇ４Ｓ）３リンカー）
ＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴ
（ヒトＣＤ１３７Ｌ）
ＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ
ＴＧＦＲｓ１３７Ｌ融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＴＧＦβ受容体ＩＩ）
ＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＩＰＰＨＶＱＫＳＶＮＮＤＭＩＶＴＤＮＮＧＡＶＫＦＰＱＬＣＫＦＣＤＶＲＦＳＴＣＤＮＱＫＳＣＭＳＮＣＳＩＴＳＩＣＥＫＰＱＥＶＣＶＡＶＷＲＫＮＤＥＮＩＴＬＥＴＶＣＨＤＰＫＬＰＹＨＤＦＩＬＥＤＡＡＳＰＫＣＩＭＫＥＫＫＫＰＧＥＴＦＦＭＣＳＣＳＳＤＥＣＮＤＮＩＩＦＳＥＥＹＮＴＳＮＰＤ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳＬＫＣＩＲ
（（Ｇ４Ｓ）３リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
（ヒトＣＤ１３７Ｌ）
ＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ
ある場合には、リーダーペプチドをインタクトなポリペプチドから切断して、可溶性であり得るか、または分泌され得る成熟形態を生成する。
ＴＧＦＲ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＣＤ１３７Ｌ構築物およびＴＧＦＲ／ＴＦ／ＩＬ－１５構築物を前述の修飾レトロウイルス発現ベクターにクローニングし（Ｈｕｇｈｅｓ ＭＳ，Ｙｕ ＹＹ，Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ，Ｚｈｅｎｇ Ｚ，Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ，Ｌｉ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ａ ＴＣＲ ｇｅｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ａ ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ ａ ｍａｒｋｅｄ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｏｎｖｅｙｓ ｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ２００５；１６：４５７－７２）、発現ベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞にトランスフェクトした。ＣＨＯ－Ｋ１細胞でのこれらの２つの構築物の共発現により、可溶性ＴＧＦＲ／ＴＦ／ＩＬ－１５：ＴＧＦＲ／ＩＬ－１５ＲαＳｕ／ＣＤ１３７Ｌタンパク質複合体（ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ１３７Ｌと称する）の形成および分泌が可能になり、これを抗ＴＦ ＩｇＧ１親和性および他のクロマトグラフィー法によって精製することができる。
実施例６０：多鎖キメラポリペプチド構築物によるインビトロでのＮＫ細胞の刺激
１８ｔ１５－１２ｓ、１８ｔ１５－１２ｓ１６、および７ｔ１５－２１ｓで刺激した後のリンパ球集団の表面表現型の変化を評価するために一連の実験を行った。これらの実験では、新鮮なヒト白血球を血液バンクから入手した。末梢血リンパ球を、Ｆｉｃｏｌｌ－ＰＡＱＵＥ Ｐｌｕｓ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）密度勾配培地で単離した。細胞をカウントし、０．２ｍＬの完全培地（ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ）、２ｍＭのＬ－グルタミン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ペニシリン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ストレプトマイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、および１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を補充）中の９６ウェル平底プレートに０．２×１０６／ｍＬで再懸濁した。細胞を、１８ｔ１５－１２ｓ（１００ｎＭ）、１８ｔ１５－１２ｓ１６（１００ｎＭ）、単一サイトカインｒｈＩＬ１５（５０ｎｇ／ｍＬ）（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）とｒｈＩＬ１８（５０ｎｇ／ｍＬ）（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）とｒｈＩＬ－１２（１０ｎｇ／ｍＬ）（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ）との混合物、７ｔ１５－２１ｓ（１００ｎＭ）＋抗ＴＦ抗体（５０ｎＭ）、７ｔ１５－２１ｓ（１００ｎＭ）、または抗ＴＦ抗体（５０ｎＭ）で、３７℃および５％ＣＯ２で１６時間刺激した。翌日、細胞を収集し、ＣＤ４またはＣＤ８、ＣＤ６２Ｌ、およびＣＤ６９に特異的な抗体で３０分間表面染色した。表面染色後、細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液（１Ｘ ＰＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、０．５％ＢＳＡ（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）および０．００１％アジ化ナトリウム（Ｓｉｇｍａ）を含む）中で洗浄した（１５００ＲＰＭ、室温で５分間）。２回洗浄した後、細胞をフローサイトメトリー（Ｃｅｌｅｓｔａ－ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）によって分析した。図１２６は、精製リンパ球集団（ＣＤ４およびＣＤ８ Ｔ細胞）を１８ｔ１５－１２ｓ、１８ｔ１５－１２ｓ１６、または７ｔ１５－２１ｓ＋抗ＴＦ抗体と一晩インキュベートすることにより、ＣＤ６９を発現するＣＤ８およびＣＤ４ Ｔ細胞のパーセンテージが増加したことを示す。さらに、７ｔ１５－２１ｓ＋抗ＴＦ抗体とインキュベートすることにより、ＣＤ６２Ｌを発現するＣＤ８およびＣＤ４ Ｔ細胞のパーセンテージが増加した（図１２６）。
１８ｔ１５－１２ｓで刺激した後のＮＫ細胞におけるホスホ－ＳＴＡＴ４およびホスホ－ＳＴＡＴ５レベルの増加を決定するために一連の実験を行った。これらの実験では、新鮮なヒト白血球を血液バンクから入手し、ＣＤ５６＋ ＮＫ細胞をＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ／ヒトＮＫ細胞試薬（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で単離した。ＮＫ細胞の純度は７０％超であり、ＣＤ５６－ＢＶ４２１、ＣＤ１６－ＢＶ５１０、ＣＤ２５－ＰＥ、およびＣＤ６９－ＡＰＣＦｉｒｅ７５０特異的抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で染色することによって確認した。細胞をカウントし、０．１ｍＬの完全培地（ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ）、２ｍＭのＬ－グルタミン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ペニシリン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ストレプトマイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、および１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を補充）中の９６ウェル平底プレートに０．０５×１０６／ｍＬで再懸濁した。細胞を、ｈＩＬ－１２（１０ｎｇ／ｍＬ）（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）もしくはｈＩＬ－１５（５０ｎｇ／ｍＬ）（ＮＣＩ）（単一サイトカイン）、または１８ｔ１５－１２ｓ（１００ｎＭ）で、３７℃および５％ＣＯ２で９０分間刺激した。刺激していないＮＫ細胞（ＵＳ）を対照として使用した。細胞を収集し、パラホルムアルデヒド（Ｓｉｇｍａ）で固定して、最終濃度１．６％にした。プレートを暗所で、室温で１０分間インキュベートした。ＦＡＣＳ緩衝液（０．５％ＢＳＡ（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）および０．００１％アジ化ナトリウム（Ｓｉｇｍａ）を含む１Ｘ ＰＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ））（１００μＬ）を添加し、細胞を９６ウェル「Ｖ」ボトムプレートに移した。細胞を１５００ＲＰＭで、室温で５分間洗浄した。細胞ペレットを１００μＬの冷却メタノールと上下に穏やかにピペッティングしながら混合し、細胞を４℃で３０分間インキュベートした。細胞を１００ｍＬのＦＡＣＳ緩衝液と混合し、１５００ＲＰＭで、室温で５分間洗浄した。細胞ペレットを、４ｍＬのｐＳＴＡＴ４（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）およびｐＳＴＡＴ５抗体（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を含む５０ｍＬのＦＡＣＳ緩衝液と混合し、その後、暗所で、室温で３０分間インキュベートした。細胞を１００ｍＬのＦＡＣＳ緩衝液と混合し、１５００ＲＰＭで、室温で５分間洗浄した。細胞ペレットを５０ｍＬのＦＡＣＳ緩衝液と混合し、細胞をフローサイトメトリー（Ｃｅｌｅｓｔａ－ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）によって分析した。図１２７は、ＮＫ細胞を１８ｔ１５－１２ｓとインキュベートすることにより、ｐＳＴＡＴ４およびｐＳＴＡＴ５の増加が誘導されたことを示す（プロットされたデータ、正規化された倍率変化）。
実施例６１：ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓによるインビボでのＮＫ細胞の刺激
西洋食餌を与えたＡｐｏＥ－／－マウスにおける免疫刺激に対するＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ構築物の効果を決定するために一連の実験を行った。これらの実験では、６週齢の雌Ｂ６．１２９Ｐ２－ＡｐｏＥｔｍ１Ｕｎｃ／Ｊマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）に、２１％脂肪、０．１５％コレステロール、３４．１％スクロース、１９．５％カゼイン、および１５％デンプンを含む西洋食餌（ＴＤ８８１３７、Ｅｎｖｉｇｏ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を与えた。西洋食餌の８週間後、マウスにＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓを３ｍｇ／ｋｇで皮下注射した。処理の３日後、マウスを１６時間絶食させ、その後、血液試料を後眼窩静脈叢穿刺によって収集した。血液を１０μＬの０．５Ｍ ＥＤＴＡと混合し、リンパ球サブセット分析のために血液を２０μＬ採取した。赤血球を、ＡＣＫ（０．１５Ｍ ＮＨ４Ｃｌ、１．０ｍＭ ＫＨＣＯ３、０．１ｍＭ Ｎａ２ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）で溶解し、リンパ球を、ＦＡＣＳ染色緩衝液（ＰＢＳ中１％ＢＳＡ）中、抗マウスＣＤ８ａおよび抗マウスＮＫ１．１抗体で、４℃で３０分間染色した。細胞を１回洗浄し、ＦＡＣＳ Ｃｅｌｅｓｔａを用いて分析した。Ｔｒｅｇ染色の場合、ＡＣＫで処理した血液リンパ球を、ＦＡＣＳ染色緩衝液中、抗マウスＣＤ４および抗マウスＣＤ２５抗体で、４℃で３０分間染色した。細胞を１回洗浄し、固定／透過処理希釈標準溶液中に再懸濁し、室温で６０分間インキュベートした。細胞を１回洗浄し、透過処理緩衝液中に再懸濁した。試料を３００～４００×ｇで、室温で５分間遠心分離し、上清を廃棄した。細胞ペレットを残留体積中に再懸濁し、体積を１×透過処理緩衝液で約１００μＬに調整した。抗Ｆｏｘｐ３抗体を細胞に添加し、細胞を室温で３０分間インキュベートした。透過処理緩衝液（２００μＬ）を細胞に添加し、細胞を３００～－４００×ｇで、室温で５分間遠心分離した。細胞をフローサイトメトリー染色緩衝液中に再懸濁し、フローサイトメーター上で分析した。図１２８Ａ～１２８Ｃは、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓでの処理により、西洋食餌を与えたＡｐｏＥ－／－マウスにおけるＮＫ細胞およびＣＤ８＋ Ｔ細胞のパーセンテージが増加したことを示す。
実施例６２：インビボでの免疫細胞の増殖の誘導
Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおける免疫刺激に対するＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ構築物の効果を決定するために一連の実験を行った。これらの実験では、Ｃ５７ＢＬ／６マウスを、対照溶液（ＰＢＳ）、または０．１、０．３、１、３、および１０ｍｇ／ｋｇのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで皮下処理した。処理したマウスを処理の４日後に安楽死させた。脾臓重量を測定し、脾臓細胞懸濁液を調製した。脾細胞懸濁液を、結合抗ＣＤ４、抗ＣＤ８、および抗ＮＫ１．１（ＮＫ）抗体で染色した。細胞を増殖マーカーＫｉ６７についてさらに染色した。図１２９Ａは、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスにおける脾臓の重量がＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの投薬量の増加とともに増加したことを示す。加えて、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、および１０ｍｇ／ｋｇのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理したマウスにおける脾臓の重量は、対照溶液のみで処理したマウスと比較して高かった。ＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞の両方のパーセンテージが、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの投薬量の増加とともに増加した（図１２９Ｂ）。最後に、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓは、試験したＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの全ての用量で、ＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞の両方での細胞増殖マーカーＫｉ６７の発現を有意にアップレギュレートした（図１２９Ｃ）。これらの結果は、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓでの処理が、Ｃ５７ＢＬ／６におけるＣＤ８＋ Ｔ細胞およびＮＫ細胞の両方の増殖を誘導したことを示す。
西洋食餌を与えたＡｐｏＥ－／－マウスにおける免疫刺激に対するＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ構築物の効果を決定するために一連の実験を行った。これらの実験では、６週齢の雌Ｂ６．１２９Ｐ２－ＡｐｏＥｔｍ１Ｕｎｃ／Ｊマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）に、２１％脂肪、０．１５％コレステロール、３４．１％スクロース、１９．５％カゼイン、および１５％デンプンを含む西洋食餌（ＴＤ８８１３７、Ｅｎｖｉｇｏ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を与えた。西洋食餌の８週間後、マウスにＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓを３ｍｇ／ｋｇで皮下注射した。処理の３日後、マウスを１６時間絶食させ、その後、血液試料を後眼窩静脈叢穿刺によって収集した。血液を１０μＬの０．５Ｍ ＥＤＴＡと混合し、リンパ球サブセット分析のために血液を２０μＬ採取した。赤血球を、ＡＣＫ（０．１５Ｍ ＮＨ４Ｃｌ、１．０ｍＭ ＫＨＣＯ３、０．１ｍＭ Ｎａ２ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）で溶解し、リンパ球を、ＦＡＣＳ染色緩衝液（ＰＢＳ中１％ＢＳＡ）中、抗マウスＣＤ８ａおよび抗マウスＮＫ１．１抗体で、４℃で３０分間染色した。細胞を１回洗浄し、Ｆｉｘａｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒ（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄカタログ番号４２０８０１）中に室温で２０分間再懸濁した。細胞を３５０×ｇで５分間遠心分離し、固定した細胞をＩｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ Ｓｔａｉｎｉｎｇ Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｗａｓｈ Ｂｕｆｆｅｒ（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄカタログ番号４２１００２）中に再懸濁し、その後、３５０×ｇで５分間遠心分離した。その後、細胞を抗Ｋｉ６７抗体で、室温で２０分間染色した。細胞をＩｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ Ｓｔａｉｎｉｎｇ Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｗａｓｈ Ｂｕｆｆｅｒで２回洗浄し、３５０×ｇで５分間遠心分離した。その後、細胞をＦＡＣＳ染色緩衝液中に再懸濁した。リンパ球サブセットを、ＢＤ ＦＡＣＳ Ｃｅｌｅｓｔａを用いて分析した。図１３０Ａおよび図１３０Ｂに記載されるように、ＡｐｏＥ－／－マウスをＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理することにより、ＮＫ細胞およびＣＤ８＋ Ｔ細胞の増殖（Ｋｉ６７陽性染色）が誘導された。
実施例６３：多鎖構築物での処理後のＮＫ媒介性細胞傷害性
ＮＫ細胞をＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理することによりＮＫ細胞の細胞傷害性が増強されるかを決定するために一連の実験を行った。これらの実験では、ヒトＤａｕｄｉ Ｂリンパ腫細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ（ＣＴＶ）で標識し、腫瘍標的細胞として使用した。マウスＮＫエフェクター細胞を、３ｍｇ／ｋｇでのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ皮下処理の４日後のＣ５７ＢＬ／６雌マウス脾臓の磁気細胞選別法（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用したＮＫ１．１陽性選択で単離した。ヒトＮＫエフェクター細胞を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ／ヒトＮＫ細胞試薬（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて、ヒト血液バフィーコート由来の末梢血単核細胞から単離した。標的細胞（ヒトＤａｕｄｉ Ｂリンパ腫細胞）を、５０ｎＭのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの存在下またはＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの不在下（対照）でエフェクター細胞（マウスＮＫエフェクター細胞またはヒトＮＫエフェクター細胞のいずれか）と混合し、マウスＮＫ細胞の場合は４４時間、ヒトＮＫ細胞の場合は２０時間、３７℃でインキュベートした。フローサイトメトリーを使用したヨウ化プロピジウム陽性のＣＴＶ標識細胞の分析により、標的細胞（Ｄａｕｄｉ）の生存率を評価した。Ｄａｕｄｉ阻害のパーセンテージを、式（１－実験試料中の生存腫瘍細胞数／ＮＫ細胞を含まない試料中の生存腫瘍細胞数）×１００を使用して計算した。図１３１は、マウス（図１３１Ａ）およびヒト（図１３１Ｂ）ＮＫ細胞が、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ活性化の不在下よりも、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓによるＮＫ細胞活性化後にＤａｕｄｉ Ｂ細胞に対する有意に強い細胞傷害性を有したことを示す。
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで処理した後のマウスおよびヒトＮＫ細胞の抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を決定するために一連の実験を行った。これらの実験では、ヒトＤａｕｄｉ Ｂリンパ腫細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｅ Ｖｉｏｌｅｔ（ＣＴＶ）で標識し、腫瘍標的細胞として使用した。マウスＮＫエフェクター細胞を、３ｍｇ／ｋｇでのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ皮下処理の４日後のＣ５７ＢＬ／６雌マウス脾臓の磁気細胞選別法（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用したＮＫ１．１陽性選択で単離した。ヒトＮＫエフェクター細胞を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ／ヒトＮＫ細胞試薬（Ｓｔｅｍｃｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて、ヒト血液バフィーコート由来の末梢血単核細胞から単離した。標的細胞（Ｄａｕｄｉ Ｂ細胞）を、抗ＣＤ２０抗体（１０ｎＭリツキシマブ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）の存在下および５０ｎＭのＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの存在下、またはＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓの不在下（対照）で、エフェクター細胞（マウスＮＫエフェクター細胞またはヒトＮＫエフェクター細胞のいずれか）と混合し、マウスＮＫ細胞の場合は４４時間、ヒトＮＫ細胞の場合は２０時間、３７℃でインキュベートした。Ｄａｕｄｉ Ｂ細胞は、抗ＣＤ２０抗体のＣＤ２０標的を発現する。フローサイトメトリーを使用したヨウ化プロピジウム陽性のＣＴＶ標識標的細胞の分析により、インキュベーション後の標的細胞の生存率を評価した。Ｄａｕｄｉ阻害のパーセンテージを、式（１－実験試料中の生存腫瘍細胞数／ＮＫ細胞を含まない試料中の生存腫瘍細胞数）×１００を使用して計算した。図１３２は、マウスＮＫ細胞（図１３２Ａ）およびヒトＮＫ細胞（図１３２Ｂ）が、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ活性化の不在下よりも、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓによるＮＫ細胞の活性化後にＤａｕｄｉ Ｂ細胞に対する強いＡＤＣＣ活性を有したことを示す。
実施例６４：がんの治療
黒色腫マウスモデルにおける化学療法と組み合わせたＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ＋抗ＴＲＰ１抗体（ＴＡ９９）の抗腫瘍活性を評価するために一連の実験を行った。これらの実験では、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに０．５×１０６個のＢ１６Ｆ１０黒色腫細胞を皮下注射した。マウスを、１日目、４日目、および７日目に化学療法ドセタキセル（１０ｍｇ／ｋｇ）（ＤＴＸ）の３回投与で処理、その後、９日目に組み合わせ免疫療法ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ（３ｍｇ／ｋｇ）＋抗ＴＲＰ１抗体ＴＡ９９（２００μｇ）の単回投与で処理した。図１３３Ａは、処理レジメンの概略図を示す。腫瘍成長をキャリパー測定によって監視し、腫瘍体積を式（Ｌ×Ｗ２）／２を使用して計算し、式中、Ｌは最大腫瘍直径であり、Ｗは垂直腫瘍直径である。図１３３Ｂは、ＤＴＸ＋ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ＋ＴＡ９９での処理が、生理食塩水対照群およびＤＴＸ処理群と比較して腫瘍成長を有意に抑制したことを示す（Ｎ＝１０、＊＊＊＊ｐ＜０．００１、複数のｔ検定分析）。
Ｂ１６Ｆ１０腫瘍モデルにおける免疫細胞サブセットを評価するために、末梢血分析を行った。これらの実験では、Ｃ５７ＢＬ／６マウスにＢ１６Ｆ１０細胞を注射し、ＤＴＸ、ＤＴＸ＋ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ＋ＴＡ９９、または生理食塩水で処理した。ＤＴＸ＋ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ＋ＴＡ９９群の免疫療法後２、５、および８日目、およびＤＴＸ群および生理食塩水群の腫瘍注射後１１日目に、Ｂ１６Ｆ１０腫瘍を有するマウスの顎下静脈から採血した。ＲＢＣをＡＣＫ溶解緩衝液中に溶解させ、リンパ球を洗浄し、抗ＮＫ１．１、抗ＣＤ８、および抗ＣＤ４抗体で染色した。細胞をフローサイトメトリー（Ｃｅｌｅｓｔａ－ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）によって分析した。図１３３Ｃ～１３３Ｅは、ＤＴＸ＋ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ＋ＴＡ９９処理が、生理食塩水処理群およびＤＴＸ処理群と比較して、腫瘍内のＮＫ細胞およびＣＤ８＋ Ｔ細胞のパーセンテージの増加を誘導したことを示す。
１７日目に、全ＲＮＡを、Ｔｒｉｚｏｌを使用して、生理食塩水、ＤＴＸ、またはＤＴＸ＋ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ＋ＴＡ９９で処理したマウスの腫瘍から抽出した。全ＲＮＡ（１μｇ）を、ＱｕａｎｔｉＴｅｃｔ Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用したｃＤＮＡ合成に使用した。リアルタイムＰＣＲを、老化細胞マーカー（Ｆ）ｐ２１（Ｇ）ＤＰＰ４および（Ｈ）ＩＬ６用のＦＡＭ標識事前設計プライマーを使用して、ＣＦＸ９６ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）で実行した。ハウスキーピング遺伝子１８ＳリボソームＲＮＡを、発現レベルの変動を正規化するための内部対照として使用した。１８Ｓ ｒＲＮＡに対する各標的ｍＲＮＡの発現を、Ｃｔに基づいて２－Δ（ΔＣｔ）として計算し、式中、ΔＣｔ＝Ｃｔ標的－Ｃｔ１８Ｓである。データを、生理食塩水対照と比較した倍率変化として表す。図１３３Ｆ～１３３Ｈは、ＤＴＸ処理が老化腫瘍細胞の増加を誘導し、その後、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ＋ＴＡ９９免疫療法での処理後に減少したことを示す。
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓによるＡｐｏＥ－／－マウスの西洋食餌誘発性高血糖の改善を調査するために一連の実験を行った。これらの実験では、６週齢の雌Ｂ６．１２９Ｐ２－ＡｐｏＥｔｍ１Ｕｎｃ／Ｊマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）に、２１％脂肪、０．１５％コレステロール、３４．１％スクロース、１９．５％カゼイン、および１５％デンプンを含む西洋食餌（ＴＤ８８１３７、Ｅｎｖｉｇｏ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を与えた。西洋食餌の８週間後、マウスにＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓを３ｍｇ／ｋｇで皮下注射した。処理の３日後、マウスを１６時間絶食させ、その後、血液試料を後眼窩静脈叢穿刺によって収集した。血糖値を、一滴の新鮮な血液を使用して血糖値計（ＯｎｅＴｏｕｃｈ ＵｌｔｒａＭｉｎｉ）およびＧｅｎＵｌｔｉｍａｔｅｄ試験条片で検出した。図１３４Ａに示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ処理は、西洋食餌によって誘発された高血糖を軽減した。血漿インスリンレベルおよびレジスチンレベルを、Ｅｖｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製のＭｏｕｓｅ Ｒａｔ Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ Ａｒｒａｙを用いて分析した。ＨＯＭＡ－ＩＲを、以下の式：恒常性モデル評価－インスリン抵抗性＝グルコース（ｍｇ／ｄＬ）×インスリン（ｍＵ／ｍＬ）／４０５を使用して計算した。図１３４Ｂに示されるように、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ処理は、未処理群と比較してインスリン抵抗性を低下させた。ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ（ｐ＜０．０５）は、図１４２Ｃに示されるように、未処理群と比較してレジスチンレベルを有意に低下させ、これは、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓによって誘導されたインスリン抵抗性の低下に関連している可能性がある（図１３４Ｂ）。
実施例６５：ＮＫ細胞のサイトカイン誘導性メモリー様ＮＫ細胞への分化の誘導
１８ｔ１５－１２ｓで刺激した後のＮＫ細胞のサイトカイン誘導性メモリー様ＮＫ細胞（ＣＩＭＫ－ＮＫ細胞）への分化を評価するために一連の実験を行った。これらの実験では、新鮮なヒト白血球を血液バンクから入手し、ＣＤ５６＋ ＮＫ細胞をＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ／ヒトＮＫ細胞試薬（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で単離した。ＮＫ細胞の純度は９０％超であり、ＣＤ５６－ＢＶ４２１、ＣＤ１６－ＢＶ５１０、ＣＤ２５－ＰＥ、およびＣＤ６９－ＡＰＣＦｉｒｅ７５０抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で染色することによって確認した。細胞をカウントし、２ｍＬの完全培地（ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ）、２ｍＭのＬ－グルタミン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ペニシリン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ストレプトマイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、および１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を補充）中の２４ウェル平底プレートに２×１０６／ｍＬで再懸濁した。細胞を、刺激しない（「スパイクなし」）か、または１８ｔ１５－１２ｓ（１００ｎＭ）、もしくはｒｈＩＬ１５（５０ｎｇ／ｍＬ）（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）、ｒｈＩＬ１８（５０ｎｇ／ｍＬ）（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）、およびｒｈＩＬ－１２（１０ｎｇ／ｍＬ）（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ）を含む単一サイトカイン混合物（「単一サイトカイン」）で、３７℃および５％ＣＯ２で１６時間刺激した。翌日、細胞を収集し、温かい完全培地で２回、１０００ＲＰＭで、室温で１０分間洗浄した。細胞を、ｒｈＩＬ１５（１ｎｇ／ｍＬ）を含む２ｍＬの完全培地中の２４ウェル平底プレートに２×１０６／ｍＬで再懸濁した。２日毎に、培地の半分を、ｒｈＩＬ１５を含む新鮮な完全培地と交換した。
７日目のＮＫ細胞のメモリー表現型の変化を評価するために、細胞を、細胞表面ＣＤ５６、ＣＤ１６、ＣＤ２７、ＣＤ６２Ｌ、ＮＫｐ３０、およびＮＫｐ４４（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）に対する抗体で染色した。表面染色後、細胞を、ＦＡＣＳ緩衝液（１Ｘ ＰＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、０．５％ＢＳＡ（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）および０．００１％アジ化ナトリウム（Ｓｉｇｍａ）を含む）中で洗浄した（１５００ＲＰＭ、室温で５分間）。２回洗浄した後、細胞をフローサイトメトリー（Ｃｅｌｅｓｔａ－ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）によって分析した。図１３５は、ＮＫ細胞を１８ｔ１５－１２ｓとインキュベートすることにより、ＣＤ２７、ＣＤ６２Ｌ、およびＮＫｐ４４を発現するＣＤ１６＋ＣＤ５６＋ ＮＫ細胞のパーセンテージが増加し、ＣＤ１６＋ＣＤ５６＋ ＮＫ細胞中のＮＫｐ３０のレベル（ＭＦＩ）が増加したことを示す。
実施例６６：ＣＤ４４メモリーＴ細胞のアップレギュレーション
ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓでの処理時のＣＤ４４メモリーＴ細胞のアップレギュレーションを評価するために一連の実験を行った。これらの実験では、Ｃ５７ＢＬ／６マウスをＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓで皮下処理した。処理したマウスを安楽死させ、単一脾細胞懸濁液を処理の４日後に調製した（ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓ）。調製した脾細胞を蛍光色素結合抗ＣＤ４、抗ＣＤ８、および抗ＣＤ４４抗体で染色し、ＣＤ４＋ Ｔ細胞またはＣＤ８＋ Ｔ細胞中のＣＤ４４高 Ｔ細胞のパーセンテージをフローサイトメトリーによって分析した。結果は、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓがＣＤ４＋およびＣＤ８＋ Ｔ細胞でのメモリーマーカーＣＤ４４の発現をアップレギュレートしたことを示す（図１３６）。これらの所見は、ＴＧＦＲｔ１５－ＴＧＦＲｓがマウスＴ細胞のメモリーＴ細胞への分化を誘導することができたことを示す。
実施例６７：一本鎖または多鎖キメラポリペプチドでの処理後の組織因子凝固アッセイ
一本鎖または多鎖キメラポリペプチドでの処理後の血液凝固を評価するために一連の実験を行った。血液凝固カスケード経路を開始するために、組織因子（ＴＦ）を第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）に結合して、ＴＦ／ＦＶＩＩａ複合体を形成する。その後、ＴＦ／ＦＶＩＩａ複合体を第Ｘ因子（ＦＸ）に結合し、ＦＸをＦＸａに変換する。
第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）活性アッセイ
血液凝固を測定するための１つのアッセイは、第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）活性の測定を含む。このタイプのアッセイは、組織因子およびカルシウムの存在を必要とする。ＴＦ／ＦＶＩＩａ複合体活性を、小さい基質または天然タンパク質基質、例えば、第Ｘ因子（ＦＸ）を用いて測定することができる。ＦＸを基質として使用する場合、リン脂質もＴＦ／ＦＶＩＩａ活性に必要とされる。このアッセイでは、ＦＶＩＩａ活性を、ＦＶＩＩａ特異的発色性基質Ｓ－２２８８（Ｄｉａｐｈａｒｍａ，Ｗｅｓｔ Ｃｈｅｓｔｅｒ，ＯＨ）を用いて決定する。Ｓ－２２８８基質の色の変化を分光光度法で測定することができ、これは、ＦＶＩＩａ（ＴＦ／ＦＶＩＩａ複合体等）のタンパク質分解活性に比例する。
これらの実験では、以下の群：組織因子ドメインの２１９アミノ酸細胞外ドメイン（ＴＦ２１９）、野生型組織因子ドメインを有する多鎖キメラポリペプチド、および変異体組織因子ドメインを有する多鎖キメラポリペプチドのＦＶＩＩａ活性を比較した。変異体組織因子分子を含むキメラポリペプチドを、アミノ酸部位：Ｌｙｓ２０、Ｉｌｅ２２、Ａｓｐ５８、Ａｒｇ１３５、およびＰｈｅ１４０でのＴＦドメインへの変異により構築した。
ＦＶＩＩａの活性を評価するために、ＦＶＩＩａ、およびＴＦ２１９またはＴＦ２１９含有多鎖キメラポリペプチドを、９６ウェルＥＬＩＳＡプレートの全てのウェル中に全体積７０μＬ中等モル濃度（１０ｎＭ）で混合した。３７℃で１０分間インキュベートした後、１０μＬの８ｍＭ Ｓ－２２８８基質を添加して、反応を開始した。その後、３７℃で２０分間インキュベートし続けた。最後に、色の変化を、吸光度を４０５ｎｍで読み取ることによって監視した。様々なＴＦ／ＶＩＩａ複合体のＯＤ値を表１および表２に示す。表１は、ＴＦ２１９、２１ｔ１５－２１ｓ野生型（ＷＴ）、および２１ｔ１５－２１ｓ変異体（Ｍｕｔ）の比較を示す。表２は、ＴＦ２１９、２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ野生型（ＷＴ）、および２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ変異体（Ｍｕｔ）の比較を示す。これらのデータは、発色性Ｓ－２２８８を基質として使用した場合、ＴＦ２１９含有多鎖キメラポリペプチド（例えば、２１ｔ１５－２１ｓ－ＷＴ、２１ｔ１５－２１ｓ－Ｍｕｔ、２１ｔ１５－ＴＧＦＲＳ－ＷＴ、および２１ｔ１５－ＴＧＦＲＳ－Ｍｕｔ）がＴＦ２１９よりも低いＦＶＩＩａ活性を有することを示す。注目すべきことに、ＴＦ２１９変異を含む多鎖キメラポリペプチドは、野生型ＴＦ２１９を含む多鎖キメラポリペプチドと比較した場合、はるかに低いＦＶＩＩａ活性を示した。
（表１）ＦＶＩＩａ活性
Figure 0007397874000003
ＷＴ：野生型ＴＦ２１９、Ｍｕｔ：ＴＦ２１９含有変異。
（表２）ＦＶＩＩａ活性
Figure 0007397874000004
ＷＴ：野生型ＴＦ２１９、Ｍｕｔ：ＴＦ２１９含有変異。
第Ｘ因子（ＦＸ）活性化アッセイ
血液凝固を測定するための追加のアッセイは、第Ｘ因子（ＦＸ）の活性化の測定を含む。簡潔には、ＴＦ／ＶＩＩａは、カルシウムおよびリン脂質の存在下で、血液凝固第Ｘ因子（ＦＸ）を第Ｘａ因子（ＦＸａ）に活性化する。ＴＦの膜貫通ドメインを含むＴＦ２４３は、ＦＸをＦＸａに活性化する際に膜貫通ドメインを含まないＴＦ２１９よりもはるかに高い活性を有する。ＦＸのＴＦ／ＶＩＩａ依存性活性化を、ＦＸａ特異的発色性基質Ｓ－２７６５（Ｄｉａｐｈａｒｍａ，Ｗｅｓｔ Ｃｈｅｓｔｅｒ，ＯＨ）を使用してＦＸａ活性を測定することによって決定する。Ｓ－２７６５の色の変化を分光光度法で監視することができ、これは、ＦＸａのタンパク質分解活性に比例する。
これらの実験では、多鎖キメラポリペプチド（１８ｔ１５－１２ｓ、マウス（ｍ）２１ｔ１５、２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ、および２１ｔ１５－７ｓ）によるＦＸ活性化を、陽性対照（Ｉｎｎｏｖｉｎ）またはＴＦ２１９と比較した。ＴＦ２１９（またはＴＦ２１９含有多鎖キメラポリペプチド）／ＦＶＩＩａ複合体を、９６ウェルＥＬＩＳＡプレートの丸底ウェル中に５０μＬの体積中等モル濃度（各０．１ｎＭ）で混合し、その後、１０μＬの１８０ｎＭ ＦＸを添加した。３７℃で１５分間インキュベートしている間にＦＸをＦＸａに変換し、その後、８μＬの０．５Ｍ ＥＤＴＡ（カルシウムをキレート化し、ひいてはＴＦ／ＶＩＩａによるＦＸ活性化を終了させる）を各ウェルに添加して、ＦＸ活性化を停止した。次に、１０μＬの３．２ｍＭ Ｓ－２７６５基質を反応混合物に添加した。直ちにプレート吸光度を４０５ｎｍで測定し、０時点での吸光度として記録した。その後、プレートを３７℃で１０～２０分間インキュベートした。色の変化を、インキュベートした後に吸光度を４０５ｎｍで読み取ることによって監視した。発色性基質Ｓ－２７６５を使用してＦＸａ活性によって測定されたＦＸ活性化の結果を図１３７に示す。この実験では、脂質化組換えヒトＴＦ２４３を含む市販のプロトロンビン試薬であるＩｎｎｏｖｉｎを、ＦＸ活性化の陽性対照として使用した。Ｉｎｎｏｖｉｎを精製水で再構成して、約１０ｎＭのＴＦ２４３にした。次に、等体積の０．２ｎＭのＦＶＩＩａを０．２ｎＭのＩｎｎｏｖｉｎと混合することにより、０．１ｎＭのＴＦ／ＶＩＩａ複合体を作製した。Ｉｎｎｏｖｉｎが非常に強力なＦＸ活性化活性を示した一方で、ＴＦ２１９およびＴＦ２１９含有多鎖キメラポリペプチドは非常に低いＦＸ活性化活性を有し、ＴＦ２１９がインビボで天然基質ＦＸを活性化するためにＴＦ／ＦＶＩＩａ複合体では活性でないことを確認した。
プロトロンビン時間試験
血液凝固を測定するための第３のアッセイは、血液凝固活性を測定するプロトロンビン時間（ＰＴ）試験である。ここでは、ＰＴ試験を、市販の正常ヒト血漿（Ｃｉ－Ｔｒｏｌ Ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｌｅｖｅｌ Ｉ）を使用して行った。標準ＰＴ試験のために、凝固反応を、カルシウムの存在下で、脂質化組換えヒトＴＦ２４３であるＩｎｎｏｖｉｎの添加によって開始した。凝固時間を、ＳＴａｒｔ ＰＴアナライザー（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ Ｓｔａｇｏ，Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，Ｎ．Ｊ．）によって監視および報告した。ＰＴアッセイを、ＰＴアッセイ緩衝液（５０ｍＭトリス－ＨＣｌ、ｐＨ７．５、１４．６ｍＭ ＣａＣｌ２、０．１％ＢＳＡ）中に希釈した０．２ｍＬの様々なＩｎｎｏｖｉｎ希釈物を３７℃で予熱した０．１ｍＬの正常ヒト血漿を含むキュベットに注入することによって開始した。ＰＴアッセイでは、ＰＴ時間（凝固時間）が短いほどＴＦ依存性凝固活性が高いことを示し、ＰＴ（凝固時間）が長いほどＴＦ依存性凝固活性が低いことを意味する。
図１３８に見られるように、異なる量のＩｎｎｏｖｉｎ（例えば、１０ｎＭの脂質化組換えヒトＴＦ２４３と同等の精製水で再構成したＩｎｎｏｖｉｎを１００％のＩｎｎｏｖｉｎとみなす）のＰＴアッセイへの添加は、用量反応関係を示し、ＴＦ２４３濃度が低いほどＰＴ時間が長くなった（凝固活性が低くなった）。例えば、０．００１％のＩｎｎｏｖｉｎのＰＴ時間は１１０秒を超え、これは緩衝液のみの場合とほぼ同じであった。
別の実験では、ＰＴ試験を、ＴＦ２１９、ならびに１８ｔ１５－１２ｓ、７ｔ１５－２１ｓ、２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ－ＷＴ、および２１ｔ１５－ＴＧＦＲｓ－Ｍｕｔを含む多鎖キメラポリペプチドに対して行った。図１３９は、ＴＦ２１９およびＴＦ２１９含有多鎖キメラポリペプチド（１００ｎＭの濃度）が長時間のＰＴ時間を有し、非常に低い凝固活性または凝固活性なしを示す。
多鎖キメラポリペプチドのサイトカイン成分に対する受容体を有する他の細胞（３２ＤβまたはヒトＰＢＭＣ）の存在下で多鎖キメラポリペプチドをインキュベートすることがＰＴアッセイにおける凝固時間に影響を及ぼすかを評価するための研究も実施した。ＩＬ－１５受容体を発現する細胞（３２Ｄβ細胞）またはＩＬ－１５受容体およびＩＬ－２１受容体を発現する細胞（ＰＢＭＣ）が、ＩＬ－１５含有多鎖キメラポリペプチドを細胞ＦＶＩＩａ受容体として模倣天然ＴＦに結合するかを試験するために、ＴＦ２１９含有多鎖キメラポリペプチド（各分子１００ｎＭの濃度）をＰＴアッセイ緩衝液中に希釈し、３２Ｄβ細胞（２×１０５細胞／ｍＬ）またはＰＢＭＣ（１×１０５細胞／ｍＬ）と室温で２０～３０分間プレインキュベートした。その後、ＰＴアッセイを上述のように実施した。図１４０および図１４１は、１００ｎＭの最終濃度で３２Ｄβ細胞（図１４０）またはＰＢＭＣ（図１４１）と混合したＴＦ２１９およびＴＦ２１９含有多鎖キメラポリペプチドが、０．００１～０．０１％のＩｎｎｏｖｉｎと同様の長時間のＰＴ時間を有したことを示す（０．１ｐＭ～１．０ｐＭのＴＦ２４３と同等）。相対的ＴＦ２４３活性のパーセンテージで表すと、ＴＦ２１９含有多鎖キメラポリペプチドは、Ｉｎｎｏｖｉｎと比較して１００，０００～１，０００，０００倍低いＴＦ依存性凝固活性を有した。これは、分子が３２ＤβまたはＰＢＭＣ等のインタクトな細胞膜表面に結合している間でさえも、ＴＦ２１９含有多鎖キメラポリペプチドが非常に低いＴＦ依存性凝固活性を有したまたはＴＦ依存性凝固活性を有しなかったことを示した。
実施例６８：７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）の特徴付け
７ｔ１５構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号１０７）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ７）
ＧＡＴＴＧＣＧＡＣＡＴＣＧＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＣＧＧＣＡＡＧＣＡＧＴＡＣＧＡＧＡＧＣＧＴＧＣＴＧＡＴＧＧＴＧＴＣＣＡＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＧＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＡＴＣＧＧＣＴＣＣＡＡＣＴＧＣＣＴＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＴＴＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＡＧＣＧＧＣＡＣＡＴＣＴＧＣＧＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＧＧＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＧＣＣＡＧＧＡＡＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＴＧＡＡＣＴＣＣＡＣＣＧＧＣＧＡＣＴＴＣＧＡＣＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＣＣＧＡＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＴＧＣＴＧＡＡＣＴＧＣＡＣＣＧＧＡＣＡＧＧＴＧＡＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧＧＣＣＣＡＡＣＣＣＡＣＣＡＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＴＧＣＴＴＣＣＴＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＴＣＡＡＧＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＣＡＡＧＡＴＣＣＴＧＡＴＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＧＡＧＣＡＴ
（ヒト組織因子２１９）
ＡＧＣＧＧＣＡＣＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＣＧＣＴＧＣＣＴＡＴＡＡＣＣＴＣＡＣＴＴＧＧＡＡＧＡＧＣＡＣＣＡＡＣＴＴＣＡＡＡＡＣＣＡＴＣＣＴＣＧＡＡＴＧＧＧＡＡＣＣＣＡＡＡＣＣＣＧＴＴＡＡＣＣＡＡＧＴＴＴＡＣＡＣＣＧＴＧＣＡＧＡＴＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＣＣＧＧＣＧＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＡＡＡＴＧＴＴＴＣＴＡＴＡＣＣＡＣＣＧＡＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＡＴＣＴＣＡＣＣＧＡＴＧＡＧＡＴＣＧＴＧＡＡＡＧＡＴＧＴＧＡＡＡＣＡＧＡＣＣＴＡＣＣＴＣＧＣＣＣＧＧＧＴＧＴＴＴＡＧＣＴＡＣＣＣＣＧＣＣＧＧＣＡＡＴＧＴＧＧＡＧＡＧＣＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＣＴＧＧＣＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＡＣＧＡＧＡＡＣＡＧＣＣＣＣＧＡＡＴＴＴＡＣＣＣＣＴＴＡＣＣＴＣＧＡＧＡＣＣＡＡＴＴＴＡＧＧＡＣＡＧＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＡＡＡＧＣＴＴＴＧＡＧＣＡＡＧＴＴＧＧＣＡＣＡＡＡＧＧＴＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＡＣＧＡＧＣＧＧＡＣＴＴＴＡＧＴＧＣＧＧＣＧＧＡＡＣＡＡＣＡＣＣＴＴＴＣＴＣＡＧＣＣＴＣＣＧＧＧＡＴＧＴＧＴＴＣＧＧＣＡＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＣＴＡＣＡＣＡＣＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＧＡＡＧＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＣＣＧＧＣＡＡＧＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＣＡＡＡＣＧＡＧＴＴＴＴＴＡＡＴＣＧＡＣＧＴＧＧＡＴＡＡＡＧＧＣＧＡＡＡＡＣＴＡＣＴＧＴＴＴＣＡＧＣＧＴＧＣＡＡＧＣＴＧＴＧＡＴＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＡＣＣＧＴＧＡＡＴＡＧＧＡＡＡＡＧＣＡＣＣＧＡＴＡＧＣＣＣＣＧＴＴＧＡＧＴＧＣＡＴＧＧＧＣＣＡＡＧＡＡＡＡＧＧＧＣＧＡＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧ
（ヒトＩＬ－１５）
ＡＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＣＧＴＣＡＴＣＡＧＣＧＡＴＴＴＡＡＡＧＡＡＧＡＴＣＧＡＡＧＡＴＴＴＡＡＴＴＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＴＣＧＡＣＧＣＣＡＣＴＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＡＡＴＣＣＧＡＣＧＴＧＣＡＣＣＣＣＴＣＴＴＧＴＡＡＧＧＴＧＡＣＣＧＣＣＡＴＧＡＡＡＴＧＴＴＴＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＣＴＧＣＡＡＧＴＴＡＴＣＴＣＴＴＴＡＧＡＧＡＧＣＧＧＡＧＡＣＧＣＴＡＧＣＡＴＣＣＡＣＧＡＣＡＣＣＧＴＧＧＡＧＡＡＴＴＴＡＡＴＣＡＴＴＴＴＡＧＣＣＡＡＴＡＡＣＴＣＴＴＴＡＴＣＣＡＧＣＡＡＣＧＧＣＡＡＣＧＴＧＡＣＡＧＡＧＴＣＣＧＧＣＴＧＣＡＡＧＧＡＧＴＧＣＧＡＡＧＡＧＣＴＧＧＡＧＧＡＧＡＡＧＡＡＣＡＴＣＡＡＧＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＡＡＴＣＣＴＴＴＧＴＧＣＡＣＡＴＴＧＴＣＣＡＧＡＴＧＴＴＣＡＴＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣ
７ｔ１５融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号１０６）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ７）
ＤＣＤＩＥＧＫＤＧＫＱＹＥＳＶＬＭＶＳＩＤＱＬＬＤＳＭＫＥＩＧＳＮＣＬＮＮＥＦＮＦＦＫＲＨＩＣＤＡＮＫＥＧＭＦＬＦＲＡＡＲＫＬＲＱＦＬＫＭＮＳＴＧＤＦＤＬＨＬＬＫＶＳＥＧＴＴＩＬＬＮＣＴＧＱＶＫＧＲＫＰＡＡＬＧＥＡＱＰＴＫＳＬＥＥＮＫＳＬＫＥＱＫＫＬＮＤＬＣＦＬＫＲＬＬＱＥＩＫＴＣＷＮＫＩＬＭＧＴＫＥＨ
（ヒト組織因子２１９）
ＳＧＴＴＮＴＶＡＡＹＮＬＴＷＫＳＴＮＦＫＴＩＬＥＷＥＰＫＰＶＮＱＶＹＴＶＱＩＳＴＫＳＧＤＷＫＳＫＣＦＹＴＴＤＴＥＣＤＬＴＤＥＩＶＫＤＶＫＱＴＹＬＡＲＶＦＳＹＰＡＧＮＶＥＳＴＧＳＡＧＥＰＬＹＥＮＳＰＥＦＴＰＹＬＥＴＮＬＧＱＰＴＩＱＳＦＥＱＶＧＴＫＶＮＶＴＶＥＤＥＲＴＬＶＲＲＮＮＴＦＬＳＬＲＤＶＦＧＫＤＬＩＹＴＬＹＹＷＫＳＳＳＳＧＫＫＴＡＫＴＮＴＮＥＦＬＩＤＶＤＫＧＥＮＹＣＦＳＶＱＡＶＩＰＳＲＴＶＮＲＫＳＴＤＳＰＶＥＣＭＧＱＥＫＧＥＦＲＥ
（ヒトＩＬ－１５）
ＮＷＶＮＶＩＳＤＬＫＫＩＥＤＬＩＱＳＭＨＩＤＡＴＬＹＴＥＳＤＶＨＰＳＣＫＶＴＡＭＫＣＦＬＬＥＬＱＶＩＳＬＥＳＧＤＡＳＩＨ
ＤＴＶＥＮＬＩＩＬＡＮＮＳＬＳＳＮＧＮＶＴＥＳＧＣＫＥＣＥＥＬＥＥＫＮＩＫＥＦＬＱＳＦＶＨＩＶＱＭＦＩＮＴＳ
２１ｓ１３７Ｌ構築物の核酸配列（シグナルペプチド配列を含む）は、以下の通りである（配列番号２２５）。
（シグナルペプチド）
ＡＴＧＡＡＧＴＧＧＧＴＧＡＣＣＴＴＣＡＴＣＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＴＣＣＴＧＴＴＣＴＣＣＡＧＣＧＣＣＴＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－２１）
ＣＡＧＧＧＣＣＡＧＧＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＧＡＴＧＡＧＧＣＡＧＣＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＡＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＣＧＡＣＣＴＧＧＴＧＣＣＣＧＡＧＴＴＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＣＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＧＡＧＴＧＧＴＣＣＧＣＣＴＴＣＴＣＣＴＧＣＴＴＴＣＡＧＡＡＧＧＣＣＣＡＧＣＴＧＡＡＧＴＣＣＧＣＣＡＡＣＡＣＣＧＧＣＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＧＧＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＴＧＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＣＴＣＣＡＣＡＡＡＣＧＣＣＧＧＣＡＧＧＡＧＧＣＡＧＡＡＧＣＡＣＡＧＧＣＴＧＡＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＴＧＴＧＡＣＴＣＣＴＡＣＧＡＧＡＡＧＡＡＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＧＡＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＴＴＣＡＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＧＣＡＧＡＡＧＡＴＧＡＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＣＣＡＣＧＧＣＴＣＣＧＡＧＧＡＣＴＣＣ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＡＴＴＡＣＡＴＧＣＣＣＣＣＣＴＣＣＣＡＴＧＡＧＣＧＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＣＧＡＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＣＴＡＴＡＧＣＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＧＧＧＡＧＡＧＧＴＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＣＡＧＣＧＧＣＴＴＣＡＡＧＡＧＧＡＡＧＧＣＣＧＧＣＡＣＣＡＧＣＡＧＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＴＧＣＧＴＧＣＴＧＡＡＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣＴＣＡＣＴＧＧＡＣＡＡＣＡＣＣＣＴＣＴＴＴＡＡＡＧＴＧＣＡＴＣＣＧＧ
（（Ｇ４Ｓ）３リンカー）
ＧＧＣＧＧＴＧＧＡＧＧＡＴＣＣＧＧＡＧＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＣＧＧＣＧＧＣＧＧＡＧＧＡＴＣＴ
（ヒトＣＤ１３７Ｌ）
ＣＧＣＧＡＧＧＧＴＣＣＣＧＡＧＣＴＴＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＡＴＣＣＣＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＴＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＡＴＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＣＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＡＡＡＴＧＴＴＣＴＧＣＴＧＡＴＣＧＡＴＧＧＧＣＣＣＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＣＡＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＣＧＴＧＴＣＣＣＴＧＡＣＧＧＧＧＧＧＣＣＴＧＡＧＣＴＡＣＡＡＡＧＡＧＧＡＣＡＣＧＡＡＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＡＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＣＴＡＣＴＡＴＧＴＣＴＴＣＴＴＴＣＡＡＣＴＡＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＧＣＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＧＡＧＧＧＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧＣＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＣＡＧＣＣＡＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＧＧＣＣＧＣＣＧＣＣＣＴＧＧＣＴＴＴＧＡＣＣＧＴＧＧＡＣＣＴＧＣＣＡＣＣＣＧＣＣＴＣＣＴＣＣＧＡＧＧＣＴＣＧＧＡＡＣＴＣＧＧＣＣＴＴＣＧＧＴＴＴＣＣＡＧＧＧＣＣＧＣＴＴＧＣＴＧＣＡＣＣＴＧＡＧＴＧＣＣＧＧＣＣＡＧＣＧＣＣＴＧＧＧＣＧＴＣＣＡＴＣＴＴＣＡＣＡＣＴＧＡＧＧＣＣＡＧＧＧＣＡＣＧＣＣＡＴＧＣＣＴＧＧＣＡＧＣＴＴＡＣＣＣＡＧＧＧＣＧＣＣＡＣＡＧＴＣＴＴＧＧＧＡＣＴＣＴＴＣＣＧＧＧＴＧＡＣＣＣＣＣＧＡＡＡＴＣＣＣＡＧＣＣＧＧＡＣＴＣＣＣＴＴＣＡＣＣＧＡＧＧＴＣＧＧＡＡ
２１ｓ１３７Ｌ融合タンパク質のアミノ酸配列（リーダー配列を含む）は、以下の通りである（配列番号２２６）。
（シグナルペプチド）
ＭＫＷＶＴＦＩＳＬＬＦＬＦＳＳＡＹＳ
（ヒトＩＬ－２１）
ＱＧＱＤＲＨＭＩＲＭＲＱＬＩＤＩＶＤＱＬＫＮＹＶＮＤＬＶＰＥＦＬＰＡＰＥＤＶＥＴＮＣＥＷＳＡＦＳＣＦＱＫＡＱＬＫＳＡＮＴＧＮＮＥＲＩＩＮＶＳＩＫＫＬＫＲＫＰＰＳＴＮＡＧＲＲＱＫＨＲＬＴＣＰＳＣＤＳＹＥＫＫＰＰＫＥＦＬＥＲＦＫＳＬＬＱＫＭＩＨＱＨＬＳＳＲＴＨＧＳＥＤＳ
（ヒトＩＬ－１５Ｒαｓｕｓｈｉドメイン）
ＩＴＣＰＰＰＭＳＶＥＨＡＤＩＷＶＫＳＹＳＬＹＳＲＥＲＹＩＣＮＳＧＦＫＲＫＡＧＴＳＳＬＴＥＣＶＬＮＫＡＴＮＶＡＨＷＴＴＰＳ
ＬＫＣＩＲ
（（Ｇ４Ｓ）３リンカー）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
（ヒトＣＤ１３７Ｌ）
ＲＥＧＰＥＬＳＰＤＤＰＡＧＬＬＤＬＲＱＧＭＦＡＱＬＶＡＱＮＶＬＬＩＤＧＰＬＳＷＹＳＤＰＧＬＡＧＶＳＬＴＧＧＬＳＹＫＥＤＴＫＥＬＶＶＡＫＡＧＶＹＹＶＦＦＱＬＥＬＲＲＶＶＡＧＥＧＳＧＳＶＳＬＡＬＨＬＱＰＬＲＳＡＡＧＡＡＡＬＡＬＴＶＤＬＰＰＡＳＳＥＡＲＮＳＡＦＧＦＱＧＲＬＬＨＬＳＡＧＱＲＬＧＶＨＬＨＴＥＡＲＡＲＨＡＷＱＬＴＱＧＡＴＶＬＧＬＦＲＶＴＰＥＩＰＡＧＬＰＳＰＲＳＥ
７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ中のＣＤ１３７Ｌ部分がＣＤ１３７（４．１ＢＢ）に結合するためにインタクトであるかを評価するために以下の実験を実施した。１日目に、９６ウェルプレートをＲ５（コーティング緩衝液）中１００μＬ（２．５μｇ／ｍＬ）のＧＡＨ ＩｇＧ Ｆｃ（Ｇ－１０２－Ｃ、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）で一晩コーティングした。２日目に、プレートを３回洗浄し、ＰＢＳ中３００μＬの１％ＢＳＡで、３７℃で２時間ブロックした。１０ｎｇ／ｍＬの４．１ＢＢ／Ｆｃ（８３８－４Ｂ、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を１００μＬ／ウェルで、室温で２時間添加した。３回洗浄した後、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）もしくは７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）を１０ｎＭから、または組換えヒト４．１ＢＢＬを１８０ｎｇ／ｍＬから、１／３希釈で添加し、その後、４℃で一晩インキュベートした。３日目に、プレートを３回洗浄し、５００ｎｇ／ｍＬのビオチン化ヤギ抗ヒト４．１ＢＢＬ（ＢＡＦ２２９５、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を１００μＬ／ウェルで適用し、その後、室温で２時間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、０．２５μｇ／ｍＬのＨＲＰ－ＳＡ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｅＲｅｓｅａｒｃｈ）と１００μＬ／ウェルで３０分間インキュベートした。その後、プレートを３回洗浄し、１００μＬのＡＢＴＳと室温で２分間インキュベートした。結果を４０５ｎｍで読み取った。図１４２に示されるように、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）および７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）はいずれも、組換えヒト４．１ＢＢリガンド（ｒｈＣＤ１３７Ｌ、薄灰色の星）と比較して、４．１ＢＢ／Ｆｃ（濃色のひし形および灰色の四角）と相互作用することができた。７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）（濃色のひし形）は、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）（灰色の四角）と比較して４．１ＢＢ／Ｆｃとより良好に相互作用した。
７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）中の成分ＩＬ７、ＩＬ２１、ＩＬ１５、および４．１ＢＢＬがＥＬＩＳＡを使用して個々の抗体によって検出されるためにインタクトであるかを評価するために以下の実験を実施した。９６ウェルプレートをＲ５（コーティング緩衝液）中１００μＬ（４μｇ／ｍＬ）の抗ＴＦ（ヒトＩｇＧ１）でコーティングし、室温で２時間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、ＰＢＳ中１００μＬの１％ＢＳＡでブロックした。精製した７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）を１０ｎＭから１／３希釈で添加し、その後、室温で６０分間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、５００ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ７（５０６６０２、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、５００ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ２１（１３－７２１８－８１、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、５０ｎｇ／ｍＬのビオチン化抗ＩＬ１５（ＢＡＭ２４７、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、または５００ｎｇ／ｍＬのビオチン化ヤギ抗ヒト４．１ＢＢＬ（ＢＡＦ２２９５、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を各ウェルに添加し、室温で６０分間インキュベートした。プレートを３回洗浄し、０．２５μｇ／ｍＬのＨＲＰ－ＳＡ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）と１００μＬ／ウェルで、室温で３０分間インキュベートした。プレートを４回洗浄し、１００μＬのＡＢＴＳと室温で２分間インキュベートした。吸光度結果を４０５ｎｍで読み取った。図１４３Ａ～１４３Ｄに示されるように、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）中のＩＬ７、ＩＬ２１、ＩＬ１５、４．１ＢＢＬを含む成分を個々の抗体によって検出した。
７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）および７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）におけるＩＬ１５の活性を評価するために以下の実験を実施した。ＩＬ２Ｒαβγ発現ＣＴＬＬ２細胞の増殖を促進する７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）および７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）の能力を、組換えＩＬ１５の能力と比較した。ＩＬ１５依存性ＣＴＬＬ２細胞をＩＭＤＭ－１０％ＦＢＳで５回洗浄し、ウェルに２×１０４細胞／ウェルで播種した。連続希釈した７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）、またはＩＬ１５を細胞に添加した。細胞をＣＯ２インキュベーター内で、３７℃で３日間インキュベートした。３日目に２０μＬのＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ（Ａ１３２６１、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を各ウェルに添加し、ＣＯ２インキュベーター内で、３７℃でさらに４時間インキュベートすることにより、細胞増殖を検出した。５７０～６１０ｎｍでの生吸光度をマイクロタイタープレートリーダーで読み取った。図１４４に示されるように、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）、およびＩＬ１５は全て、ＣＴＬＬ２細胞増殖を促進した。７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ロングバージョン）、７ｔ１５－２１ｓ１３７Ｌ（ショートバージョン）、およびＩＬ１５のＥＣ５０は、それぞれ、５１．１９ｐＭ、５５．７５ｐＭ、および４．９４７ｐＭである。
他の実施形態
本発明がその発明を実施するための形態と併せて記載されているが、前述の記述は、例証するものであり、添付の特許請求の範囲によって規定される本発明の範囲を限定するようには意図されていないことを理解されたい。他の態様、利点、および修正は、以下の特許請求の範囲内である。
例示的な実施形態
実施形態Ａ１．
（ａ）（ｉ）第１の標的結合ドメインと、
（ｉｉ）可溶性組織因子ドメインと、
（ｉｉｉ）一対の親和性ドメインの第１のドメインと
を含む、第１のキメラポリペプチド、および
（ｂ）（ｉ）一対の親和性ドメインの第２のドメインと、
（ｉｉ）第２の標的結合ドメインと
を含む、第２のキメラポリペプチド
を含み、前記第１のキメラポリペプチドと前記第２のキメラポリペプチドが、前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと前記第２のドメインとの結合を介して会合している、多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ２．前記第１の標的結合ドメインと前記可溶性組織因子ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ａ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ３．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインと前記可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ａ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ４．前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ａ１～Ａ３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ５．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ａ１～Ａ３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ６．前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインが、前記第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ａ１～Ａ５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ７．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ａ１～Ａ５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ８．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが同じ抗原に特異的に結合する、実施形態Ａ１～Ａ７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ９．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが同じエピトープに特異的に結合する、実施形態Ａ８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１０．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが同じアミノ酸配列を含む、実施形態Ａ９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１１．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが異なる抗原に特異的に結合する、実施形態Ａ１～Ａ７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１２．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、抗原結合ドメインである、実施形態Ａ１～Ａ１１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１３．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々、抗原結合ドメインである、実施形態Ａ１２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１４．抗原結合ドメインが、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体を含む、実施形態Ａ１２またはＡ１３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１５．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、ＣＤ１６ａ、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ３３、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－１、ＶＥＧＦ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＰＤＬ－１、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、ＣＴＬＡ４、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＣＤ２６ａ、ＣＤ３６、ＵＬＢＰ２、ＣＤ３０、ＣＤ２００、ＩＧＦ－１Ｒ、ＭＵＣ４ＡＣ、ＭＵＣ５ＡＣ、Ｔｒｏｐ－２、ＣＭＥＴ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、Ｂ７Ｈ３、ＥＰＣＡＭ、ＢＣＭＡ、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡＣＡＭ５、ＵＬ１６結合タンパク質、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＬＬ４、ＴＹＲＯ３、ＡＸＬ、ＭＥＲ、ＣＤ１２２、ＣＤ１５５、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）リガンド、ＴＧＦ－βＲＩＩＩリガンド、ＤＮＡＭ－１リガンド、ＮＫｐ４６リガンド、ＮＫｐ４４リガンド、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＫＰ３０リガンド、ｓｃＭＨＣＩリガンド、ｓｃＭＨＣＩＩリガンド、ｓｃＴＣＲリガンド、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－２１受容体、ＰＤＧＦ－ＤＤ受容体、幹細胞因子（ＳＣＦ）受容体、幹細胞様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）受容体、ＭＩＣＡ受容体、ＭＩＣＢ受容体、ＵＬＰ１６結合タンパク質受容体、ＣＤ１５５受容体、ＣＤ１２２受容体、およびＣＤ２８受容体からなる群から選択される標的に特異的に結合する、実施形態Ａ１～Ａ１４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１６．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、可溶性インターロイキンまたはサイトカインタンパク質である、実施形態Ａ１～Ａ１４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１７．前記可溶性インターロイキン、サイトカイン、またはリガンドタンパク質が、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＳＣＦ、およびＦＬＴ３Ｌからなる群から選択される、実施形態Ａ１６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１８．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、可溶性インターロイキンまたはサイトカイン受容体である、実施形態Ａ１～Ａ１４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１９．前記可溶性受容体が、可溶性ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）、可溶性ＴＧＦ－βＲＩＩＩ、可溶性ＮＫＧ２Ｄ、可溶性ＮＫｐ３０、可溶性ＮＫｐ４４、可溶性ＮＫｐ４６、可溶性ＤＮＡＭ－１、ｓｃＭＨＣＩ、ｓｃＭＨＣＩＩ、ｓｃＴＣＲ、可溶性ＣＤ１５５、または可溶性ＣＤ２８である、実施形態Ａ１８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ２０．前記第１のキメラポリペプチドが、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（複数可）をさらに含み、前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの少なくとも１つが、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられている、実施形態Ａ１～Ａ１９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ２１．前記第１のキメラポリペプチドが、前記可溶性組織因子ドメインと前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの前記少なくとも１つとの間にリンカー配列、および／または前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの前記少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ａ２０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ２２．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ａ１～Ａ１９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ２３．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ａ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ２４．前記第１のキメラポリペプチドが、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ａ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ２５．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインに直接隣接している、実施形態Ａ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ２６．前記第１のキメラポリペプチドが、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つと前記第１の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ａ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ２７．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に配置されており、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられている、実施形態Ａ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ２８．Ｎ末端に配置された前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ａ２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ２９．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ａ２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ３０．Ｃ末端に配置された前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ａ２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ３１．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ａ２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ３２．前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つが、前記可溶性組織因子ドメインおよび／または前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ａ２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ３３．前記第１のキメラポリペプチドが、（ｉ）前記可溶性組織因子ドメインと、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つとの間、および／または（ｉｉ）前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ａ２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ３４．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ａ１～Ａ３３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ３５．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインに直接隣接している、実施形態Ａ３４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ３６．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ａ３４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ３７．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記第２の標的結合ドメインに直接隣接している、実施形態Ａ３４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ３８．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ａ３４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ３９．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じ抗原に特異的に結合する、実施形態Ａ２０～Ａ３８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ４０．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じエピトープに特異的に結合する、実施形態Ａ３９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ４１．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じアミノ酸配列を含む、実施形態Ａ４０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ４２．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが各々、同じ抗原に特異的に結合する、実施形態Ａ３９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ４３．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが各々、同じエピトープに特異的に結合する、実施形態Ａ４２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ４４．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが各々、同じアミノ酸配列を含む、実施形態Ａ４３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ４５．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが異なる抗原に特異的に結合する、実施形態Ａ２０～Ａ３８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ４６．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の標的結合ドメインのうちの１つ以上が、抗原結合ドメインである、実施形態Ａ２０～Ａ４５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ４７．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが各々、抗原結合ドメインである、実施形態Ａ４６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ４８．抗原結合ドメインが、ｓｃＦｖを含む、実施形態Ａ４７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ４９．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の標的結合ドメインのうちの１つ以上が、ＣＤ１６ａ、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ３３、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－１、ＶＥＧＦ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＰＤＬ－１、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、ＣＴＬＡ４、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＣＤ２６ａ、ＣＤ３６、ＵＬＢＰ２、ＣＤ３０、ＣＤ２００、ＩＧＦ－１Ｒ、ＭＵＣ４ＡＣ、ＭＵＣ５ＡＣ、Ｔｒｏｐ－２、ＣＭＥＴ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、Ｂ７Ｈ３、ＥＰＣＡＭ、ＢＣＭＡ、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡＣＡＭ５、ＵＬ１６結合タンパク質、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＬＬ４、ＴＹＲＯ３、ＡＸＬ、ＭＥＲ、ＣＤ１２２、ＣＤ１５５、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）リガンド、ＴＧＦ－βＲＩＩＩリガンド、ＤＮＡＭ－１リガンド、ＮＫｐ４６リガンド、ＮＫｐ４４リガンド、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＫＰ３０リガンド、ｓｃＭＨＣＩリガンド、ｓｃＭＨＣＩＩリガンド、ｓｃＴＣＲリガンド、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－２１受容体、ＰＤＧＦ－ＤＤ受容体、幹細胞因子（ＳＣＦ）受容体、幹細胞様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）受容体、ＭＩＣＡ受容体、ＭＩＣＢ受容体、ＵＬＰ１６結合タンパク質受容体、ＣＤ１５５受容体、ＣＤ１２２受容体、およびＣＤ３受容体、およびＣＤ２８受容体からなる群から選択される標的に特異的に結合する、実施形態Ａ２０～Ａ４８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ５０．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの１つ以上が、可溶性インターロイキンまたはサイトカインタンパク質である、実施形態Ａ２０～Ａ４８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ５１．前記可溶性インターロイキン、サイトカイン、またはリガンドタンパク質が、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＳＣＦ、およびＦＬＴ３Ｌからなる群から選択される、実施形態Ａ５０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ５２．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの１つ以上が、可溶性インターロイキンまたはサイトカイン受容体である、実施形態Ａ２０～Ａ４８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ５３．前記可溶性受容体が、可溶性ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）、可溶性ＴＧＦ－βＲＩＩＩ、可溶性ＮＫＧ２Ｄ、可溶性ＮＫｐ３０、可溶性ＮＫｐ４４、可溶性ＮＫｐ４６、可溶性ＤＮＡＭ－１、ｓｃＭＨＣＩ、ｓｃＭＨＣＩＩ、ｓｃＴＣＲ、可溶性ＣＤ１５５、可溶性ＣＤ１２２、可溶性ＣＤ３、または可溶性ＣＤ２８である、実施形態Ａ５２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ５４．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む、実施形態Ａ１～Ａ５３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ５５．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチドＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む、実施形態Ａ１～Ａ５３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ５６．前記可溶性組織因子ドメインが、可溶性ヒト組織因子ドメインである、実施形態Ａ１～Ａ５５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ５７．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ａ５６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ５８．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ａ５７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ５９．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ａ５８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ６０．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちの１つ以上を含まない、実施形態Ａ５６～Ａ５９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ６１．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちのいずれも含まない、実施形態Ａ６０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ６２．前記可溶性組織因子ドメインが、第ＶＩＩａ因子に結合することができない、実施形態Ａ１～Ａ６１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ６３．前記可溶性組織因子ドメインが、不活性第Ｘ因子を第Ｘａ因子に変換しない、実施形態Ａ１～Ａ６２のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ６４．前記多鎖キメラポリペプチドが、哺乳動物における血液凝固を刺激しない、実施形態Ａ１～Ａ６３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ６５．前記一対の親和性ドメインが、ヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）由来のｓｕｓｈｉドメインと可溶性ＩＬ－１５である、実施形態Ａ１～Ａ６４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ６６．前記可溶性ＩＬ１５が、Ｄ８ＮまたはＤ８Ａアミノ酸置換を有する、実施形態Ａ６５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ６７．前記ヒトＩＬ１５Ｒαが、成熟全長ＩＬ１５Ｒαである、実施形態Ａ６５またはＡ６６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ６８．前記一対の親和性ドメインが、バルナーゼとバルンスター、ＰＫＡとＡＫＡＰ、変異ＲＮａｓｅ Ｉ断片に基づくアダプター／ドッキングタグモジュール、ならびに、タンパク質シンタキシン、シナプトタグミン、シナプトブレビン、およびＳＮＡＰ２５の相互作用に基づくＳＮＡＲＥモジュールからなる群から選択される、実施形態Ａ１～Ａ６４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ６９．前記第１のキメラポリペプチドおよび／または前記第２のキメラポリペプチドが、そのＮ末端にシグナル配列をさらに含む、実施形態Ａ１～Ａ６８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ７０．実施形態Ａ１～Ａ６９に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを含む、組成物。
実施形態Ａ７１．医薬組成物である、実施形態Ａ７０に記載の組成物。
実施形態Ａ７２．実施形態Ａ７０またはＡ７１に記載の組成物の少なくとも１つの用量を含む、キット。
実施形態Ａ７３．免疫細胞を刺激する方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ａ１～Ａ６９に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ａ７０またはＡ７１に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ａ７４．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ａ７３に記載の方法。
実施形態Ａ７５．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ａ７４に記載の方法。
実施形態Ａ７６．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ａ７５に記載の方法。
実施形態Ａ７７．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ａ７３に記載の方法。
実施形態Ａ７８．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ａ７３～Ａ７７のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ａ７９．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ａ７３～Ａ７８のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ａ８０．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ａ７３～Ａ７８のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ａ８１．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ａ７３～Ａ８０のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ａ８２．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ａ８１に記載の方法。
実施形態Ａ８３．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ａ８２に記載の方法。
実施形態Ａ８４．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ａ８１に記載の方法。
実施形態Ａ８５．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ａ８４に記載の方法。
実施形態Ａ８６．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ａ８１に記載の方法。
実施形態Ａ８７．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ａ８６に記載の方法。
実施形態Ａ８８．免疫細胞の増殖を誘導するまたは増加させる方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ａ１～Ａ６９に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ａ７０またはＡ７１に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ａ８９．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ａ８８に記載の方法。
実施形態Ａ９０．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ａ８９に記載の方法。
実施形態Ａ９１．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ａ９０に記載の方法。
実施形態Ａ９２．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ａ８８に記載の方法。
実施形態Ａ９３．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ａ８８～Ａ９２のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ａ９４．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ａ８８～Ａ９３のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ａ９５．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ａ８８～Ａ９３のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ａ９６．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ａ８８～Ａ９５のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ａ９７．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ａ９６に記載の方法。
実施形態Ａ９８．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ａ９７に記載の方法。
実施形態Ａ９９．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ａ９６に記載の方法。
実施形態Ａ１００．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ａ９９に記載の方法。
実施形態Ａ１０１．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ａ９６に記載の方法。
実施形態Ａ１０２．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ａ９６に記載の方法。
実施形態Ａ１０３．免疫細胞のメモリーまたはメモリー様免疫細胞への分化を誘導する方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ａ１～Ａ６９に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ａ７０またはＡ７１に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ａ１０４．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ａ１０３に記載の方法。
実施形態Ａ１０５．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ａ１０４に記載の方法。
実施形態Ａ１０６．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ａ１０５に記載の方法。
実施形態Ａ１０７．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ａ１０３に記載の方法。
実施形態Ａ１０８．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ａ１０３～Ａ１０７のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ａ１０９．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ａ１０３～Ａ１０８のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ａ１１０．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ａ１０３～Ａ１０８のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ａ１１１．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ａ１０３～Ａ１１０のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ａ１１２．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ａ１１１に記載の方法。
実施形態Ａ１１３．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ａ１１２に記載の方法。
実施形態Ａ１１４．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ａ１１１に記載の方法。
実施形態Ａ１１５．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ａ１１４に記載の方法。
実施形態Ａ１１６．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ａ１１１に記載の方法。
実施形態Ａ１１７．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ａ１１６に記載の方法。
実施形態Ａ１１８．がん細胞、感染細胞、または老化細胞の死滅を必要とする対象におけるがん細胞、感染細胞、または老化細胞を死滅させる方法であって、前記対象に、実施形態Ａ１～Ａ６９に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ａ７０またはＡ７１に記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
実施形態Ａ１１９．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ａ１１８に記載の方法。
実施形態Ａ１２０．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ａ１１９に記載の方法。
実施形態Ａ１２１．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ａ１１８に記載の方法。
実施形態Ａ１２２．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ａ１２１に記載の方法。
実施形態Ａ１２３．治療を必要とする対象を治療する方法であって、前記対象に、実施形態Ａ１～Ａ６９に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ａ７０またはＡ７１に記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
実施形態Ａ１２４．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ａ１２３に記載の方法。
実施形態Ａ１２５．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ａ１２４に記載の方法。
実施形態Ａ１２６．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ａ１２３に記載の方法。
実施形態Ａ１２７．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ａ１２６に記載の方法。
実施形態Ａ１２８．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ａ１２３に記載の方法。
実施形態Ａ１２９．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ａ１２８に記載の方法。
実施形態Ａ１３０．実施形態Ａ１～Ａ６９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする、核酸。
実施形態Ａ１３１．実施形態Ａ１３０に記載の核酸を含む、ベクター。
実施形態Ａ１３２．前記ベクターが、発現ベクターである、実施形態Ａ１３１に記載のベクター。
実施形態Ａ１３３．実施形態Ａ１３０に記載の核酸または実施形態Ａ１３１またはＡ１３２に記載のベクターを含む、細胞。
実施形態Ａ１３４．多鎖キメラポリペプチドを産生する方法であって、
前記多鎖キメラポリペプチドの産生をもたらすのに十分な条件下で、実施形態Ａ１３３に記載の細胞を培養培地中で培養すること、ならびに
前記多鎖キメラポリペプチドを前記細胞および／または前記培養培地から回収すること
を含む、方法。
実施形態Ａ１３５．実施形態Ａ１３４に記載の方法によって産生された多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１３６．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ａ５６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１３７．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ａ１３６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１３８．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ａ１３７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１３９．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と１００％同一の配列を含む、実施形態Ａ１３８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１４０．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ａ５６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１４１．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ａ１４０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１４２．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ａ１４１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１４３．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と１００％同一の配列を含む、実施形態Ａ１４２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１４４．前記ヒト可溶性組織因子ドメインが凝固を開始しない、実施形態５６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ａ１４５．前記可溶性組織因子ドメインが、野生型可溶性ヒト組織因子由来の配列を含むか、またはそれからなる、請求項１～５９のいずれか１項に記載の多鎖キメラポリペプチド。
Ｂ．例示的な実施形態
実施形態Ｂ１．
（ａ）（ｉ）第１の標的結合ドメインと、
（ｉｉ）可溶性組織因子ドメインと、
（ｉｉｉ）一対の親和性ドメインの第１のドメインと
を含む、第１のキメラポリペプチド、および
（ｂ）（ｉ）一対の親和性ドメインの第２のドメインと、
（ｉｉ）第２の標的結合ドメインと
を含む、第２のキメラポリペプチド
を含み、
前記第１のキメラポリペプチドと前記第２のキメラポリペプチドが、前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと前記第２のドメインとの結合を介して会合しており、
前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＩＬ－１８受容体またはＩＬ－１２受容体に特異的に結合する、
多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ２．前記第１の標的結合ドメインと前記可溶性組織因子ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｂ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ３．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインと前記可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｂ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ４．前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｂ１～Ｂ３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ５．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｂ１～Ｂ３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ６．前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインが、前記第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｂ１～Ｂ５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ７．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｂ１～Ｂ５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ８．前記可溶性組織因子ドメインが、可溶性ヒト組織因子ドメインである、実施形態Ｂ１～Ｂ７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ９．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１０．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１１．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｂ１０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１２．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちの１つ以上を含まない、実施形態Ｂ８～Ｂ１１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１３．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちのいずれも含まない、実施形態Ｂ１２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１４．前記可溶性組織因子ドメインが、第ＶＩＩａ因子に結合することができない、実施形態Ｂ１～Ｂ１３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１５．前記可溶性組織因子ドメインが、不活性第Ｘ因子を第Ｘａ因子に変換しない、実施形態Ｂ１～Ｂ１４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１６．前記多鎖キメラポリペプチドが、哺乳動物における凝固を刺激しない、実施形態Ｂ１～Ｂ１５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１７．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む、実施形態Ｂ１～Ｂ１６のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１８．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチドＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む、実施形態Ｂ１～Ｂ１７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１９．前記第１のキメラポリペプチドおよび／または前記第２のキメラポリペプチドが、そのＮ末端にシグナル配列をさらに含む、実施形態Ｂ１～１８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ２０．前記シグナル配列が、配列番号３１を含む、実施形態Ｂ１９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ２１．前記シグナル配列が、配列番号３１である、実施形態Ｂ２０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ２２．前記一対の親和性ドメインが、ヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）由来のｓｕｓｈｉドメインと可溶性ＩＬ－１５である、実施形態Ｂ１～Ｂ２１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ２３．前記可溶性ＩＬ－１５が、Ｄ８ＮまたはＤ８Ａアミノ酸置換を有する、実施形態Ｂ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ２４．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４と８０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ２５．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４と９０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ２４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ２６．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４と９５％同一の配列を含む、実施形態Ｂ２５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ２７．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４を含む、実施形態Ｂ２６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ２８．ＩＬ１５Ｒαの前記ｓｕｓｈｉドメインが、ヒトＩＬ１５Ｒα由来のｓｕｓｈｉドメインを含む、実施形態Ｂ２２～Ｂ２７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ２９．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８と８０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ２８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ３０．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８と９０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ２９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ３１．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８と９５％同一の配列を含む、実施形態Ｂ３０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ３２．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８を含む、実施形態Ｂ３１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ３３．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、成熟全長ＩＬ１５Ｒαである、実施形態Ｂ２８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ３４．前記一対の親和性ドメインが、バルナーゼとバルンスター、ＰＫＡとＡＫＡＰ、変異ＲＮａｓｅ Ｉ断片に基づくアダプター／ドッキングタグモジュール、ならびに、タンパク質シンタキシン、シナプトタグミン、シナプトブレビン、およびＳＮＡＰ２５の相互作用に基づくＳＮＡＲＥモジュールからなる群から選択される、実施形態Ｂ１～Ｂ２１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ３５．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、アゴニスト抗原結合ドメインである、実施形態Ｂ１～Ｂ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ３６．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々、アゴニスト抗原結合ドメインである、実施形態Ｂ３５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ３７．抗原結合ドメインが、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体を含む、実施形態Ｂ３５またはＢ３６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ３８．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、可溶性ＩＬ－１５または可溶性ＩＬ－１８である、実施形態Ｂ１～Ｂ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ３９．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、可溶性ＩＬ－１５または可溶性ＩＬ－１８である、実施形態Ｂ３８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ４０．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの両方が、ＩＬ－１８受容体またはＩＬ－１２受容体に特異的に結合する、実施形態Ｂ１～Ｂ３９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ４１．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが同じエピトープに特異的に結合する、実施形態Ｂ４０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ４２．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが同じアミノ酸配列を含む、実施形態Ｂ４１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ４３．前記第１の標的結合ドメインがＩＬ－１２受容体に特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインがＩＬ－１８受容体に特異的に結合する、実施形態Ｂ１～Ｂ３９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ４４．前記第１の標的結合ドメインがＩＬ－１８受容体に特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインがＩＬ－１２受容体に特異的に結合する、実施形態Ｂ１～Ｂ３９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ４５．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－１８を含む、実施形態Ｂ４４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ４６．前記可溶性ＩＬ－１８が、可溶性ヒトＩＬ－１８である、実施形態Ｂ４５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ４７．前記可溶性ヒトＩＬ－１８が、配列番号１６と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ４６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ４８．前記可溶性ヒトＩＬ－１８が、配列番号１６と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ４７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ４９．前記可溶性ヒトＩＬ－１８が、配列番号１６と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｂ４８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ５０．前記可溶性ヒトＩＬ－１８が、配列番号１６の配列を含む、実施形態Ｂ４９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ５１．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－１２を含む、実施形態Ｂ４４～Ｂ５０のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ５２．前記可溶性ＩＬ－１８が、可溶性ヒトＩＬ－１２である、実施形態Ｂ５１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ５３．前記可溶性ヒトＩＬ－１５が、可溶性ヒトＩＬ－１２β（ｐ４０）配列および可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）配列を含む、実施形態Ｂ５２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ５４．前記可溶性ヒトＩＬ－１５が、前記可溶性ＩＬ－１２β（ｐ４０）配列と前記可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）配列との間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｂ５３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ５５．前記リンカー配列が、配列番号７を含む、実施形態Ｂ５４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ５６．前記可溶性ヒトＩＬ－１２β（ｐ４０）配列が、配列番号６６と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ５３～Ｂ５５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ５７．前記可溶性ヒトＩＬ－１２β（ｐ４０）配列が、配列番号６６と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ５６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ５８．前記可溶性ヒトＩＬ－１２β（ｐ４０）配列が、配列番号６６と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｂ５７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ５９．前記可溶性ヒトＩＬ－１２β（ｐ４０）配列が、配列番号６６を含む、実施形態Ｂ５８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ６０．前記可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）配列が、配列番号６８と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ５３～Ｂ５９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ６１．前記可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）配列が、配列番号６８と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ６０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ６２．前記可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）配列が、配列番号６８と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｂ６１に記載のミュール鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ６３．前記可溶性ヒトＩＬ－１２α（ｐ３５）配列が、配列番号６８を含む、実施形態Ｂ６２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ６４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号７０と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ６５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号７０と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ６４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ６６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号７０と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｂ６５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ６７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号７０を含む、実施形態Ｂ６６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ６８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号７２を含む、実施形態Ｂ６７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ６９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号７４と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ１およびＢ６４～Ｂ６８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ７０．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号７４と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ６９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ７１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号７４と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｂ７０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ７２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号７４を含む、実施形態Ｂ７１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ７３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号７４を含む、実施形態Ｂ７２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ７４．前記第１のキメラポリペプチドが、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（複数可）をさらに含み、前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの少なくとも１つが、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられている、実施形態Ｂ１～Ｂ６３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ７５．前記第１のキメラポリペプチドが、前記可溶性組織因子ドメインと前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの前記少なくとも１つとの間にリンカー配列、および／または前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの前記少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｂ７４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ７６．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｂ１～Ｂ６３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ７７．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｂ７６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ７８．前記第１のキメラポリペプチドが、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｂ７６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ７９．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインに直接隣接している、実施形態Ｂ７６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ８０．前記第１のキメラポリペプチドが、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つと前記第１の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｂ７６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ８１．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に配置されており、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられている、実施形態Ｂ７６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ８２．Ｎ末端に配置された前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｂ８１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ８３．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｂ８１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ８４．Ｃ末端に配置された前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｂ８１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ８５．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｂ８１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ８６．前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つが、前記可溶性組織因子ドメインおよび／または前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｂ８１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ８７．前記第１のキメラポリペプチドが、（ｉ）前記可溶性組織因子ドメインと、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つとの間、および／または（ｉｉ）前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｂ８１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ８８．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｂ１～Ｂ６３およびＢ７４～Ｂ８７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ８９．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインに直接隣接している、実施形態Ｂ８８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ９０．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｂ８８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ９１．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記第２の標的結合ドメインに直接隣接している、実施形態Ｂ８８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ９２．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｂ８８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ９３．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じ抗原に特異的に結合する、実施形態Ｂ７４～Ｂ９２のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ９４．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じエピトープに特異的に結合する、実施形態Ｂ９３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ９５．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じアミノ酸配列を含む、実施形態Ｂ９４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ９６．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが異なる抗原に特異的に結合する、実施形態Ｂ７４～Ｂ９２のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ９７．前記１つ以上の追加の抗原結合ドメインが、ＣＤ１６ａ、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ３３、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－１、ＶＥＧＦ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＰＤＬ－１、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、ＣＴＬＡ４、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＣＤ２６ａ、ＣＤ３６、ＵＬＢＰ２、ＣＤ３０、ＣＤ２００、ＩＧＦ－１Ｒ、ＭＵＣ４ＡＣ、ＭＵＣ５ＡＣ、Ｔｒｏｐ－２、ＣＭＥＴ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、Ｂ７Ｈ３、ＥＰＣＡＭ、ＢＣＭＡ、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡＣＡＭ５、ＵＬ１６結合タンパク質、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＬＬ４、ＴＹＲＯ３、ＡＸＬ、ＭＥＲ、ＣＤ１２２、ＣＤ１５５、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）リガンド、ＴＧＦ－βＲＩＩＩリガンド、ＤＮＡＭ－１リガンド、ＮＫｐ４６リガンド、ＮＫｐ４４リガンド、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＫＰ３０リガンド、ｓｃＭＨＣＩリガンド、ｓｃＭＨＣＩＩリガンド、ｓｃＴＣＲリガンド、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－２１受容体、ＰＤＧＦ－ＤＤ受容体、幹細胞因子（ＳＣＦ）受容体、幹細胞様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）受容体、ＭＩＣＡ受容体、ＭＩＣＢ受容体、ＵＬＰ１６結合タンパク質受容体、ＣＤ１５５受容体、およびＣＤ２８受容体からなる群から選択される標的に特異的に結合する、実施形態Ｂ７４～Ｂ９６のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ９８．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが、可溶性インターロイキンまたはサイトカインタンパク質である、実施形態Ｂ７４～Ｂ９６のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ９９．前記可溶性インターロイキン、サイトカイン、またはリガンドタンパク質が、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＳＣＦ、およびＦＬＴ３Ｌからなる群から選択される、実施形態Ｂ９８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１００．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが、可溶性インターロイキンまたはサイトカイン受容体である、実施形態Ｂ７４～Ｂ９６のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１０１．前記可溶性受容体が、可溶性ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）、可溶性ＴＧＦ－βＲＩＩＩ、可溶性ＮＫＧ２Ｄ、可溶性ＮＫｐ３０、可溶性ＮＫｐ４４、可溶性ＮＫｐ４６、可溶性ＤＮＡＭ－１、ｓｃＭＨＣＩ、ｓｃＭＨＣＩＩ、ｓｃＴＣＲ、可溶性ＣＤ１５５、可溶性ＣＤ１２２、または可溶性ＣＤ２８である、実施形態Ｂ１００に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１０２．実施形態Ｂ１～Ｂ１０１に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを含む、組成物。
実施形態Ｂ１０３．医薬組成物である、実施形態Ｂ１０２に記載の組成物。
実施形態Ｂ１０４．実施形態Ｂ１０２またはＢ１０３に記載の組成物の少なくとも１つの用量を含む、キット。
実施形態Ｂ１０５．免疫細胞を刺激する方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ｂ１～Ｂ１０１に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｂ１０２またはＢ１０３に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ｂ１０６．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ｂ１０５に記載の方法。
実施形態Ｂ１０７．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ｂ１０６に記載の方法。
実施形態Ｂ１０８．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ｂ１０７に記載の方法。
実施形態Ｂ１０９．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ｂ１０５に記載の方法。
実施形態Ｂ１１０．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ｂ１０５～Ｂ１０９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｂ１１１．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ｂ１０５～Ｂ１１０のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｂ１１２．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ｂ１０５～Ｂ１１０のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｂ１１３．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ｂ１０５～Ｂ１１２のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｂ１１４．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｂ１１３に記載の方法。
実施形態Ｂ１１５．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｂ１１４に記載の方法。
実施形態Ｂ１１６．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｂ１１３に記載の方法。
実施形態Ｂ１１７．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｂ１１６に記載の方法。
実施形態Ｂ１１８．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｂ１１３に記載の方法。
実施形態Ｂ１１９．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｂ１１８に記載の方法。
実施形態Ｂ１２０．免疫細胞の増殖を誘導するまたは増加させる方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ｂ１～Ｂ１０１に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｂ１０２またはＢ１０３に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ｂ１２１．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ｂ１２０に記載の方法。
実施形態Ｂ１２２．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ｂ１２１に記載の方法。
実施形態Ｂ１２３．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ｂ１２２に記載の方法。
実施形態Ｂ１２４．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ｂ１２０に記載の方法。
実施形態Ｂ１２５．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ｂ１２０～Ｂ１２４のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｂ１２６．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ｂ１２０～Ｂ１２５のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｂ１２７．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ｂ１２０～Ｂ１２５のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｂ１２８．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ｂ１２０～Ｂ１２７のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｂ１２９．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｂ１２８に記載の方法。
実施形態Ｂ１３０．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｂ１２９に記載の方法。
実施形態Ｂ１３１．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｂ１２８に記載の方法。
実施形態Ｂ１３２．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｂ１３１に記載の方法。
実施形態Ｂ１３３．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｂ１２８に記載の方法。
実施形態Ｂ１３４．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｂ１２８に記載の方法。
実施形態Ｂ１３５．免疫細胞のメモリーまたはメモリー様免疫細胞への分化を誘導する方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ｂ１～Ｂ１０１に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｂ１０２またはＢ１０３に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ｂ１３６．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ｂ１３５に記載の方法。
実施形態Ｂ１３７．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ｂ１３６に記載の方法。
実施形態Ｂ１３８．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ｂ１３７に記載の方法。
実施形態Ｂ１３９．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ｂ１３５に記載の方法。
実施形態Ｂ１４０．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ｂ１３５～Ｂ１３９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｂ１４１．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ｂ１３５～Ｂ１４０のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｂ１４２．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ｂ１３５～Ｂ１４０のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｂ１４３．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ｂ１３５～Ｂ１４２のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｂ１４４．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｂ１４３に記載の方法。
実施形態Ｂ１４５．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｂ１４４に記載の方法。
実施形態Ｂ１４６．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｂ１４３に記載の方法。
実施形態Ｂ１４７．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｂ１４６に記載の方法。
実施形態Ｂ１４８．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｂ１４３に記載の方法。
実施形態Ｂ１４９．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｂ１４８に記載の方法。
実施形態Ｂ１５０．がん細胞、感染細胞、または老化細胞の死滅を必要とする対象におけるがん細胞、感染細胞、または老化細胞を死滅させる方法であって、前記対象に、実施形態Ｂ１～Ｂ１０１に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｂ１０２またはＢ１０３に記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
実施形態Ｂ１５１．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｂ１５０に記載の方法。
実施形態Ｂ１５２．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｂ１５１に記載の方法。
実施形態Ｂ１５３．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｂ１５０に記載の方法。
実施形態Ｂ１５４．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｂ１５３に記載の方法。
実施形態Ｂ１５５．治療を必要とする対象を治療する方法であって、前記対象に、実施形態Ｂ１～Ｂ１０１に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｂ１０２またはＢ１０３に記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
実施形態Ｂ１５６．前記対象が、がんまたは感染性疾患を有すると特定または診断されている、実施形態Ｂ１５５に記載の方法。
実施形態Ｂ１５７．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｂ１５６に記載の方法。
実施形態Ｂ１５８．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｂ１５５に記載の方法。
実施形態Ｂ１５９．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｂ１５８に記載の方法。
実施形態Ｂ１６０．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｂ１５５に記載の方法。
実施形態Ｂ１６１．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｂ１６０に記載の方法。
実施形態Ｂ１６２．実施形態Ｂ１～Ｂ１０１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする、核酸。
実施形態Ｂ１６３．実施形態Ｂ１６２に記載の核酸を含む、ベクター。
実施形態Ｂ１６４．前記ベクターが、発現ベクターである、実施形態Ｂ１６３に記載のベクター。
実施形態Ｂ１６５．実施形態Ｂ１６２に記載の核酸または実施形態Ｂ１６３またはＢ１６４に記載のベクターを含む、細胞。
実施形態Ｂ１６６．多鎖キメラポリペプチドを産生する方法であって、
前記多鎖キメラポリペプチドの産生をもたらすのに十分な条件下で、実施形態Ｂ１６５に記載の細胞を培養培地中で培養すること、ならびに
前記多鎖キメラポリペプチドを前記細胞および／または前記培養培地から回収すること
を含む、方法。
実施形態Ｂ１６７．実施形態Ｂ１６６に記載の方法によって産生された多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１６８．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１６９．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ１６８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１７０．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｂ１６９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１７１．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と１００％同一の配列を含む、実施形態Ｂ１７０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１７２．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１７３．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｂ１７２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１７４．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｂ１７３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｂ１７５．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と１００％同一の配列を含む、実施形態Ｂ１７４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
Ｃ．例示的な実施形態
実施形態Ｃ１．
（ａ）（ｉ）第１の標的結合ドメインと、
（ｉｉ）可溶性組織因子ドメインと、
（ｉｉｉ）一対の親和性ドメインの第１のドメインと
を含む、第１のキメラポリペプチド、および
（ｂ）（ｉ）一対の親和性ドメインの第２のドメインと、
（ｉｉ）第２の標的結合ドメインと
を含む、第２のキメラポリペプチド
を含み、
前記第１のキメラポリペプチドと前記第２のキメラポリペプチドが、前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと前記第２のドメインとの結合を介して会合しており、
前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＩＬ－２１受容体または腫瘍増殖因子受容体βＩＩ（ＴＧＦβＲＩＩ）リガンドに特異的に結合する、
多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ２．前記第１の標的結合ドメインと前記可溶性組織因子ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｃ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ３．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインと前記可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｃ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ４．前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｃ１～Ｃ３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ５．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｃ１～Ｃ３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ６．前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインが、前記第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｃ１～Ｃ５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ７．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｃ１～Ｃ５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ８．前記可溶性組織因子ドメインが、可溶性ヒト組織因子ドメインである、実施形態Ｃ１～Ｃ７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ９．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１０．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１１．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｃ１０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１２．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちの１つ以上を含まない、実施形態Ｃ８～Ｃ１１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１３．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちのいずれも含まない、実施形態Ｃ１２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１４．前記可溶性組織因子ドメインが、第ＶＩＩａ因子に結合することができない、実施形態Ｃ１～Ｃ１３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１５．前記可溶性組織因子ドメインが、不活性第Ｘ因子を第Ｘａ因子に変換しない、実施形態Ｃ１～Ｃ１４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１６．前記多鎖キメラポリペプチドが、哺乳動物における血液凝固を刺激しない、実施形態Ｃ１～Ｃ１５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１７．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む、実施形態Ｃ１～Ｃ１６のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１８．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチドＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む、実施形態Ｃ１～Ｃ１７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１９．前記第１のキメラポリペプチドおよび／または前記第２のキメラポリペプチドが、そのＮ末端にシグナル配列をさらに含む、実施形態Ｃ１～Ｃ１８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ２０．前記シグナル配列が、配列番号３１を含む、実施形態Ｃ１９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ２１．前記シグナル配列が、配列番号３１である、実施形態Ｃ２０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ２２．前記一対の親和性ドメインが、ヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα由来のｓｕｓｈｉドメインと可溶性ＩＬ－１５である、実施形態Ｃ１～Ｃ２１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ２３．前記可溶性ＩＬ－１５が、Ｄ８ＮまたはＤ８Ａアミノ酸置換を有する、実施形態Ｃ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ２４．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４と８０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ２５．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４と９０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ２４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ２６．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４と９５％同一の配列を含む、実施形態Ｃ２５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ２７．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４を含む、実施形態Ｃ２６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ２８．ＩＬ１５Ｒαの前記ｓｕｓｈｉドメインが、ヒトＩＬ１５Ｒα由来のｓｕｓｈｉドメインを含む、実施形態Ｃ２２～Ｃ２７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ２９．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８と８０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ２８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ３０．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８と９０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ２９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ３１．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８と９５％同一の配列を含む、実施形態Ｃ３０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ３２．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８を含む、実施形態Ｃ３１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ３３．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、成熟全長ＩＬ１５Ｒαである、実施形態Ｃ２８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ３４．前記一対の親和性ドメインが、バルナーゼとバルンスター、ＰＫＡとＡＫＡＰ、変異ＲＮａｓｅ Ｉ断片に基づくアダプター／ドッキングタグモジュール、ならびに、タンパク質シンタキシン、シナプトタグミン、シナプトブレビン、およびＳＮＡＰ２５の相互作用に基づくＳＮＡＲＥモジュールからなる群から選択される、実施形態Ｃ１～Ｃ２１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ３５．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、抗原結合ドメインである、実施形態Ｃ１～Ｃ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ３６．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが、抗原結合ドメインである、実施形態Ｃ３５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ３７．抗原結合ドメインが、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体を含む、実施形態Ｃ３５またはＣ３６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ３８．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、可溶性ＩＬ－２１または可溶性ＴＧＦβＲＩＩである、実施形態Ｃ１～Ｃ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ３９．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの両方が、ＩＬ－２１受容体またはＴＧＦβＲＩＩリガンドに特異的に結合する、実施形態Ｃ１～Ｃ３８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ４０．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが同じエピトープに特異的に結合する、実施形態Ｃ３９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ４１．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが同じアミノ酸配列を含む、実施形態Ｃ４０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ４２．前記第１の標的結合ドメインがＴＧＦβＲＩＩリガンドに特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインがＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｃ１～Ｃ３８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ４３．前記第１の標的結合ドメインがＩＬ－２１受容体に特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインがＴＧＦβＲＩＩリガンドに特異的に結合する、実施形態Ｃ１～Ｃ３８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ４４．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－２１を含む、実施形態Ｃ４３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ４５．前記可溶性ＩＬ－２１が、可溶性ヒトＩＬ－２１である、実施形態Ｃ４４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ４６．前記可溶性ヒトＩＬ－２１が、配列番号７８と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ４５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ４７．前記可溶性ヒトＩＬ－２１が、配列番号７８と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ４６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ４８．前記可溶性ヒトＩＬ－２１が、配列番号７８と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｃ４７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ４９．前記可溶性ヒトＩＬ－２１が、配列番号７８の配列を含む、実施形態Ｃ４８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ５０．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦβＲＩＩを含む、実施形態Ｃ４３～Ｃ４９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ５１．前記可溶性ＴＧＦβＲＩＩが、可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩである、実施形態Ｃ５０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ５２．前記可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩが、第１の可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ配列および第２の可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ配列を含む、実施形態Ｃ５１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ５３．前記可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩが、前記第１の可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ配列と前記第２の可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ配列との間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｃ５２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ５４．前記リンカー配列が、配列番号７を含む、実施形態Ｃ５３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ５５．前記第１の可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ配列が、配列番号８０と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ５２～Ｃ５４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ５６．前記第１の可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ配列が、配列番号８０と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ５５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ５７．前記第１の可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ配列が、配列番号８０と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｃ５６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ５８．前記第１の可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ配列が、配列番号８０を含む、実施形態Ｃ５７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ５９．前記第２の可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ配列が、配列番号８１と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ５２～Ｃ５８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ６０．前記第２の可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ配列が、配列番号８１と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ５９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ６１．前記第２の可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ配列が、配列番号８１と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｃ６０に記載のミュール鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ６２．前記第２の可溶性ヒトＴＧＦβＲＩＩ配列が、配列番号８１を含む、実施形態Ｃ６１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ６３．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号８６と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ６４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号８６と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ６３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ６５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号８６と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｃ６４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ６６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号８６を含む、実施形態Ｃ６５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ６７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号８８を含む、実施形態Ｃ６６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ６８．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号９０と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ１およびＣ６３～Ｃ６７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ６９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号９０と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ６８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ７０．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号９０と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｃ６９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ７１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号９０を含む、実施形態Ｃ７０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ７２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号９２を含む、実施形態Ｃ７１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ７３．前記第１のキメラポリペプチドが、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（複数可）をさらに含み、前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの少なくとも１つが、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられている、実施形態Ｃ１～Ｃ６２のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ７４．前記第１のキメラポリペプチドが、前記可溶性組織因子ドメインと前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの前記少なくとも１つとの間にリンカー配列、および／または前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの前記少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｃ７３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ７５．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｃ１～Ｃ６２のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ７６．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｃ７５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ７７．前記第１のキメラポリペプチドが、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｃ７５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ７８．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインに直接隣接している、実施形態Ｃ７５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ７９．前記第１のキメラポリペプチドが、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つと前記第１の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｃ７５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ８０．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に配置されており、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられている、実施形態Ｃ７５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ８１．Ｎ末端に配置された前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｃ８０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ８２．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｃ８０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ８３．Ｃ末端に配置された前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｃ８０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ８４．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｃ８０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ８５．前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つが、前記可溶性組織因子ドメインおよび／または前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｃ８０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ８６．前記第１のキメラポリペプチドが、（ｉ）前記可溶性組織因子ドメインと、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つとの間、および／または（ｉｉ）前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｃ８０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ８７．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｃ１～Ｃ６２およびＣ７３～Ｃ８６のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ８８．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインに直接隣接している、実施形態Ｃ８７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ８９．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｃ８７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ９０．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記第２の標的結合ドメインに直接隣接している、実施形態Ｃ８７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ９１．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｃ８７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ９２．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じ抗原に特異的に結合する、実施形態Ｃ７３～Ｃ９１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ９３．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じエピトープに特異的に結合する、実施形態Ｃ９２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ９４．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じアミノ酸配列を含む、実施形態Ｃ９３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ９５．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが異なる抗原に特異的に結合する、実施形態Ｃ７３～Ｃ９１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ９６．前記１つ以上の追加の抗原結合ドメインが、ＣＤ１６ａ、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ３３、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－１、ＶＥＧＦ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＰＤＬ－１、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、ＣＴＬＡ４、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＣＤ２６ａ、ＣＤ３６、ＵＬＢＰ２、ＣＤ３０、ＣＤ２００、ＩＧＦ－１Ｒ、ＭＵＣ４ＡＣ、ＭＵＣ５ＡＣ、Ｔｒｏｐ－２、ＣＭＥＴ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、Ｂ７Ｈ３、ＥＰＣＡＭ、ＢＣＭＡ、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡＣＡＭ５、ＵＬ１６結合タンパク質、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＬＬ４、ＴＹＲＯ３、ＡＸＬ、ＭＥＲ、ＣＤ１２２、ＣＤ１５５、ＰＤＧＦ－Ｄ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－ＲＩＩ）リガンド、ＴＧＦ－βＲＩＩＩリガンド、ＤＮＡＭ－１リガンド、ＮＫｐ４６リガンド、ＮＫｐ４４リガンド、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＫｐ３０リガンド、ｓｃＭＨＣＩリガンド、ｓｃＭＨＣＩＩリガンド、ｓｃＴＣＲリガンド、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－２１受容体、ＰＤＧＦ－ＤＤ受容体、幹細胞因子（ＳＣＦ）受容体、幹細胞様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）受容体、ＭＩＣＡ受容体、ＭＩＣＢ受容体、ＵＬＰ１６結合タンパク質受容体、ＣＤ１５５受容体、およびＣＤ２８受容体からなる群から選択される標的に特異的に結合する、実施形態Ｃ７３～Ｃ９５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ９７．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが、可溶性インターロイキンまたはサイトカインタンパク質である、実施形態Ｃ７３～Ｃ９５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ９８．前記可溶性インターロイキン、サイトカイン、またはリガンドタンパク質が、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＳＣＦ、およびＦＬＴ３Ｌからなる群から選択される、実施形態Ｃ９７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ９９．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが、可溶性インターロイキンまたはサイトカイン受容体である、実施形態Ｃ７３～Ｃ９５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１００．前記可溶性受容体が、可溶性ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）、可溶性ＴＧＦ－βＲＩＩＩ、可溶性ＮＫＧ２Ｄ、可溶性ＮＫｐ３０、可溶性ＮＫｐ４４、可溶性ＮＫｐ４６、可溶性ＤＮＡＭ－１、ｓｃＭＨＣＩ、ｓｃＭＨＣＩＩ、ｓｃＴＣＲ、可溶性ＣＤ１５５、または可溶性ＣＤ２８である、実施形態Ｃ９９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１０１．実施形態Ｃ１～Ｃ１００に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを含む、組成物。
実施形態Ｃ１０２．医薬組成物である、実施形態Ｃ１０１に記載の組成物。
実施形態Ｃ１０３．実施形態Ｃ１０１またはＣ１０２に記載の組成物の少なくとも１つの用量を含む、キット。
実施形態Ｃ１０４．免疫細胞を刺激する方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ｃ１～Ｃ１００に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｃ１０１またはＣ１０２に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ｃ１０５．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ｃ１０４に記載の方法。
実施形態Ｃ１０６．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ｃ１０５に記載の方法。
実施形態Ｃ１０７．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ｃ１０６に記載の方法。
実施形態Ｃ１０８．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ｃ１０４に記載の方法。
実施形態Ｃ１０９．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ｃ１０４～Ｃ１０８のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｃ１１０．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ｃ１０４～Ｃ１０９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｃ１１１．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ｃ１０４～Ｃ１０９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｃ１１２．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ｃ１０４～Ｃ１１１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｃ１１３．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｃ１１２に記載の方法。
実施形態Ｃ１１４．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｃ１１３に記載の方法。
実施形態Ｃ１１５．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｃ１１２に記載の方法。
実施形態Ｃ１１６．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｃ１１５に記載の方法。
実施形態Ｃ１１７．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｃ１１２に記載の方法。
実施形態Ｃ１１８．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｃ１１７に記載の方法。
実施形態Ｃ１１９．免疫細胞の増殖を誘導するまたは増加させる方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ｃ１～Ｃ１００に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｃ１０１またはＣ１０２に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ｃ１２０．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ｃ１１９に記載の方法。
実施形態Ｃ１２１．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ｃ１２０に記載の方法。
実施形態Ｃ１２２．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ｃ１２１に記載の方法。
実施形態Ｃ１２３．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ｃ１１９に記載の方法。
実施形態Ｃ１２４．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ｃ１１９～Ｃ１２３のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｃ１２５．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ｃ１１９～Ｃ１２４のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｃ１２６．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ｃ１１９～Ｃ１２４のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｃ１２７．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ｃ１１９～Ｃ１２６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｃ１２８．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｃ１２７に記載の方法。
実施形態Ｃ１２９．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｃ１２８に記載の方法。
実施形態Ｃ１３０．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｃ１２７に記載の方法。
実施形態Ｃ１３１．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｃ１３０に記載の方法。
実施形態Ｃ１３２．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｃ１２７に記載の方法。
実施形態Ｃ１３３．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｃ１２７に記載の方法。
実施形態Ｃ１３４．免疫細胞のメモリーまたはメモリー様免疫細胞への分化を誘導する方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ｃ１～Ｃ１００に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｃ１０１またはＣ１０２に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ｃ１３５．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ｃ１３４に記載の方法。
実施形態Ｃ１３６．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ｃ１３５に記載の方法。
実施形態Ｃ１３７．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ｃ１３６に記載の方法。
実施形態Ｃ１３８．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ｃ１３４に記載の方法。
実施形態Ｃ１３９．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ｃ１３４～Ｃ１３８のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｃ１４０．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ｃ１３４～Ｃ１３９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｃ１４１．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ｃ１３４～Ｃ１３９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｃ１４２．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ｃ１３４～Ｃ１４１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｃ１４３．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｃ１４２に記載の方法。
実施形態Ｃ１４４．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｃ１４３に記載の方法。
実施形態Ｃ１４５．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｃ１４２に記載の方法。
実施形態Ｃ１４６．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｃ１４５に記載の方法。
実施形態Ｃ１４７．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｃ１４２に記載の方法。
実施形態Ｃ１４８．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｃ１４７に記載の方法。
実施形態Ｃ１４９．がん細胞、感染細胞、または老化細胞の死滅を必要とする対象におけるがん細胞、感染細胞、または老化細胞を死滅させる方法であって、前記対象に、実施形態Ｃ１～Ｃ１００に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｃ１０１またはＣ１０２に記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
実施形態Ｃ１５０．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｃ１４９に記載の方法。
実施形態Ｃ１５１．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｃ１５０に記載の方法。
実施形態Ｃ１５２．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｃ１４９に記載の方法。
実施形態Ｃ１５３．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｃ１５２に記載の方法。
実施形態Ｃ１５４．治療を必要とする対象を治療する方法であって、前記対象に、実施形態Ｃ１～Ｃ１００に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｃ１０１またはＣ１０２に記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
実施形態Ｃ１５５．前記対象が、がんまたは感染性疾患を有すると特定または診断されている、実施形態Ｃ１５４に記載の方法。
実施形態Ｃ１５６．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｃ１５７に記載の方法。
実施形態Ｃ１５７．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｃ１５４に記載の方法。
実施形態Ｃ１５８．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｃ１５７に記載の方法。
実施形態Ｃ１５９．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｃ１５４に記載の方法。
実施形態Ｃ１６０．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｃ１５９に記載の方法。
実施形態Ｃ１６１．実施形態Ｃ１～Ｃ１００のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする、核酸。
実施形態Ｃ１６２．実施形態Ｃ１６１に記載の核酸を含む、ベクター。
実施形態Ｃ１６３．前記ベクターが、発現ベクターである、実施形態Ｃ１６２に記載のベクター。
実施形態Ｃ１６４．実施形態Ｃ１６１に記載の核酸または実施形態Ｃ１６２またはＣ１６３に記載のベクターを含む、細胞。
実施形態Ｃ１６５．多鎖キメラポリペプチドを産生する方法であって、
前記多鎖キメラポリペプチドの産生をもたらすのに十分な条件下で、実施形態Ｃ１６４に記載の細胞を培養培地中で培養すること、ならびに
前記多鎖キメラポリペプチドを前記細胞および／または前記培養培地から回収すること
を含む、方法。
実施形態Ｃ１６６．実施形態Ｃ１６５に記載の方法によって産生された多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１６７．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ１２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１６８．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ１６７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１６９．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｃ１６８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１７０．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と１００％同一の配列を含む、実施形態Ｃ１６９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１７１．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ１２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１７２．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｃ１７１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１７３．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｃ１７２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｃ１７４．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と１００％同一の配列を含む、実施形態Ｃ１７３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
Ｄ．例示的な実施形態
実施形態Ｄ１．
（ｃ）（ｉ）第１の標的結合ドメインと、
（ｉｉ）可溶性組織因子ドメインと、
（ｉｉｉ）一対の親和性ドメインの第１のドメインと
を含む、第１のキメラポリペプチド、および
（ｄ）（ｉ）一対の親和性ドメインの第２のドメインと、
（ｉｉ）第２の標的結合ドメインと
を含む、第２のキメラポリペプチド
を含み、
前記第１のキメラポリペプチドと前記第２のキメラポリペプチドが、前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと前記第２のドメインとの結合を介して会合しており、
前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＩＬ－２１受容体またはＩＬ－７受容体に特異的に結合する、
多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ２．前記第１の標的結合ドメインと前記可溶性組織因子ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｄ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ３．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインと前記可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｄ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ４．前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｄ１～Ｄ３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ５．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｄ１～Ｄ３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ６．前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインが、前記第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｄ１～Ｄ５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ７．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｄ１～Ｄ５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ８．前記可溶性組織因子ドメインが、可溶性ヒト組織因子ドメインである、実施形態Ｄ１～Ｄ７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ９．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１０．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１１．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｄ１０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１２．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１を含む、実施形態Ｄ１１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１３．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１４．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ１３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１５．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｄ１４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１６．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３を含む、実施形態Ｄ１５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１７．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１８．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ１７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１９．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｄ１８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ２０．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４を含む、実施形態Ｄ１９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ２１．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちの１つ以上を含まない、実施形態Ｄ８～Ｄ１１、Ｄ１３～Ｄ１５、およびＤ１７～Ｄ１９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ２２．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちのいずれも含まない、実施形態Ｄ２１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ２３．前記可溶性組織因子ドメインが、第ＶＩＩａ因子に結合することができない、実施形態Ｄ１～Ｄ２２のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ２４．前記可溶性組織因子ドメインが、不活性第Ｘ因子を第Ｘａ因子に変換しない、実施形態Ｄ１～Ｄ２３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ２５．前記多鎖キメラポリペプチドが、哺乳動物における凝固を刺激しない、実施形態Ｄ１～Ｄ２４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ２６．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む、実施形態Ｄ１～Ｄ２５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ２７．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチドＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む、実施形態Ｄ１～Ｄ２６のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ２８．前記第１のキメラポリペプチドおよび／または前記第２のキメラポリペプチドが、そのＮ末端にシグナル配列をさらに含む、実施形態Ｄ１～Ｄ２７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ２９．前記シグナル配列が、配列番号３１を含む、実施形態Ｄ２８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ３０．前記シグナル配列が、配列番号２２３である、実施形態Ｄ２８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ３１．前記一対の親和性ドメインが、ヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）由来のｓｕｓｈｉドメインと可溶性ＩＬ－１５である、実施形態Ｄ１～Ｄ３０のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ３２．前記可溶性ＩＬ－１５が、Ｄ８ＮまたはＤ８Ａアミノ酸置換を有する、実施形態Ｄ３１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ３３．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ３１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ３４．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ３３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ３５．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｄ３４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ３６．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４を含む、実施形態Ｄ３５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ３７．ＩＬ１５Ｒαの前記ｓｕｓｈｉドメインが、ヒトＩＬ１５Ｒα由来のｓｕｓｈｉドメインを含む、実施形態Ｄ３１～Ｄ３６のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ３８．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ３７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ３９．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ３８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ４０．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｄ３９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ４１．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８を含む、実施形態Ｄ４０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ４２．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、成熟全長ＩＬ１５Ｒαである、実施形態Ｄ３７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ４３．前記一対の親和性ドメインが、バルナーゼとバルンスター、ＰＫＡとＡＫＡＰ、変異ＲＮａｓｅ Ｉ断片に基づくアダプター／ドッキングタグモジュール、ならびに、タンパク質シンタキシン、シナプトタグミン、シナプトブレビン、およびＳＮＡＰ２５の相互作用に基づくＳＮＡＲＥモジュールからなる群から選択される、実施形態Ｄ１～Ｄ３０のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ４４．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、アゴニスト抗原結合ドメインである、実施形態Ｄ１～Ｄ４３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ４５．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々、アゴニスト抗原結合ドメインである、実施形態Ｄ４４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ４６．抗原結合ドメインが、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体を含む、実施形態Ｄ４４またはＤ４５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ４７．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、可溶性ＩＬ－２１または可溶性ＩＬ－７である、実施形態Ｄ１～Ｄ４３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ４８．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、可溶性ＩＬ－２１または可溶性ＩＬ－７である、実施形態Ｄ４７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ４９．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの両方が、ＩＬ－２１受容体またはＩＬ－７受容体に特異的に結合する、実施形態Ｄ１～Ｄ４８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ５０．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが同じエピトープに特異的に結合する、実施形態Ｄ４９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ５１．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが同じアミノ酸配列を含む、実施形態Ｄ５０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ５２．前記第１の標的結合ドメインがＩＬ－２１受容体に特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインがＩＬ－７受容体に特異的に結合する、実施形態Ｄ１～Ｄ４８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ５３．前記第１の標的結合ドメインがＩＬ－７受容体に特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインがＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｄ１～Ｄ４８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ５４．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－２１を含む、実施形態Ｄ５３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ５５．前記可溶性ＩＬ－２１が、可溶性ヒトＩＬ－２１である、実施形態Ｄ５４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ５６．前記可溶性ヒトＩＬ－２１が、配列番号７８と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ５５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ５７．前記可溶性ヒトＩＬ－２１が、配列番号７８と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ５６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ５８．前記可溶性ヒトＩＬ－２１が、配列番号７８と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｄ５７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ５９．前記可溶性ヒトＩＬ－２１が、配列番号７８の配列を含む、実施形態Ｄ５８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ６０．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－７を含む、実施形態Ｄ５３～Ｄ５９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ６１．前記可溶性ＩＬ－７が、可溶性ヒトＩＬ－７である、実施形態Ｄ６０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ６２．前記可溶性ヒトＩＬ－７が、配列番号１１と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ６１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ６３．前記可溶性ヒトＩＬ－７が、配列番号１１と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ６２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ６４．前記可溶性ヒトＩＬ－７が、配列番号１１と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｄ６３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ６５．前記可溶性ヒトＩＬ－７が、配列番号１１の配列を含む、実施形態Ｄ６４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ６６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１０４と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ６７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１０４と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ６６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ６８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１０４と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｄ６７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ６９．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１０４を含む、実施形態Ｄ６８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ７０．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１０６を含む、実施形態Ｄ６９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ７１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１０８と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ１およびＤ６６～Ｄ７０のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ７２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１０８と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ７１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ７３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１０８と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｄ７２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ７４．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１０８を含む、実施形態Ｄ７３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ７５．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１１０を含む、実施形態Ｄ７４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ７６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号９６と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ７７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号９６と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ７６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ７８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号９６と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｄ７７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ７９．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号９６を含む、実施形態Ｄ６８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ８０．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号９８を含む、実施形態Ｄ６９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ８１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１００と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ１およびＤ７６～Ｄ８０のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ８２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１００と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｄ８１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ８３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１００と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｄ８２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ８４．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１００を含む、実施形態Ｄ８３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ８５．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１０６を含む、実施形態Ｄ８４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ８６．前記第１のキメラポリペプチドが、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（複数可）をさらに含み、前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの少なくとも１つが、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられている、実施形態Ｄ１～Ｄ６５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ８７．前記第１のキメラポリペプチドが、前記可溶性組織因子ドメインと前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの前記少なくとも１つとの間にリンカー配列、および／または前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの前記少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｄ８６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ８８．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｄ１～Ｄ６５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ８９．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｄ８８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ９０．前記第１のキメラポリペプチドが、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｄ８８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ９１．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインに直接隣接している、実施形態Ｄ８８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ９２．前記第１のキメラポリペプチドが、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つと前記第１の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｄ８８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ９３．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に配置されており、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられている、実施形態Ｄ８８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ９４．Ｎ末端に配置された前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｄ９３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ９５．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｄ９３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ９６．Ｃ末端に配置された前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｄ９３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ９７．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｄ９３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ９８．前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つが、前記可溶性組織因子ドメインおよび／または前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｄ９３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ９９．前記第１のキメラポリペプチドが、（ｉ）前記可溶性組織因子ドメインと、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つとの間、および／または（ｉｉ）前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｄ９３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１００．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｄ１～Ｄ６５およびＤ８６～Ｄ９９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１０１．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインに直接隣接している、実施形態Ｄ１００に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１０２．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｄ１００に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１０３．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記第２の標的結合ドメインに直接隣接している、実施形態Ｄ１００に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１０４．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｄ１００に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１０５．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じ抗原に特異的に結合する、実施形態Ｄ８６～Ｄ１０４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１０６．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じエピトープに特異的に結合する、実施形態Ｄ１０５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１０７．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じアミノ酸配列を含む、実施形態Ｄ１０６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１０８．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが異なる抗原に特異的に結合する、実施形態Ｄ８６～Ｄ１０４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１０９．前記１つ以上の追加の抗原結合ドメインが、ＣＤ１６ａ、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ３３、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－１、ＶＥＧＦ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＰＤＬ－１、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、ＣＴＬＡ４、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＣＤ２６ａ、ＣＤ３６、ＵＬＢＰ２、ＣＤ３０、ＣＤ２００、ＩＧＦ－１Ｒ、ＭＵＣ４ＡＣ、ＭＵＣ５ＡＣ、Ｔｒｏｐ－２、ＣＭＥＴ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、Ｂ７Ｈ３、ＥＰＣＡＭ、ＢＣＭＡ、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡＣＡＭ５、ＵＬ１６結合タンパク質、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＬＬ４、ＴＹＲＯ３、ＡＸＬ、ＭＥＲ、ＣＤ１２２、ＣＤ１５５、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）リガンド、ＴＧＦ－βＲＩＩＩリガンド、ＤＮＡＭ－１リガンド、ＮＫｐ４６リガンド、ＮＫｐ４４リガンド、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＫｐ３０リガンド、ｓｃＭＨＣＩリガンド、ｓｃＭＨＣＩＩリガンド、ｓｃＴＣＲリガンド、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－２１受容体、ＰＤＧＦ－ＤＤ受容体、幹細胞因子（ＳＣＦ）受容体、幹細胞様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）受容体、ＭＩＣＡ受容体、ＭＩＣＢ受容体、ＵＬＰ１６結合タンパク質受容体、ＣＤ１５５受容体、およびＣＤ２８受容体からなる群から選択される標的に特異的に結合する、実施形態Ｄ８６～Ｄ１０８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１１０．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが、可溶性インターロイキンまたはサイトカインタンパク質である、実施形態Ｄ８６～Ｄ１０８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１１１．前記可溶性インターロイキン、サイトカイン、またはリガンドタンパク質が、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＳＣＦ、およびＦＬＴ３Ｌからなる群から選択される、実施形態Ｄ１１０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１１２．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが、可溶性インターロイキンまたはサイトカイン受容体である、実施形態Ｄ８６～Ｄ１０８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１１３．前記可溶性受容体が、可溶性ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）、可溶性ＴＧＦ－βＲＩＩＩ、可溶性ＮＫＧ２Ｄ、可溶性ＮＫｐ３０、可溶性ＮＫｐ４４、可溶性ＮＫｐ４６、可溶性ＤＮＡＭ－１、ｓｃＭＨＣＩ、ｓｃＭＨＣＩＩ、ｓｃＴＣＲ、可溶性ＣＤ１５５、可溶性ＣＤ１２２、または可溶性ＣＤ２８である、実施形態Ｄ１１２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｄ１１４．実施形態Ｄ１～Ｄ１１３に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを含む、組成物。
実施形態Ｄ１１５．医薬組成物である、実施形態Ｄ１１４に記載の組成物。
実施形態Ｄ１１６．実施形態Ｄ１１４またはＤ１１５に記載の組成物の少なくとも１つの用量を含む、キット。
実施形態Ｄ１１７．免疫細胞を刺激する方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ｄ１～Ｄ１１３に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｄ１１４またはＤ１１５に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ｄ１１８．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ｄ１１７に記載の方法。
実施形態Ｄ１１９．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ｄ１１８に記載の方法。
実施形態Ｄ１２０．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ｄ１１９に記載の方法。
実施形態Ｄ１２１．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ｄ１１７に記載の方法。
実施形態Ｄ１２２．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ｄ１１７～Ｄ１２１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１２３．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ｄ１１７～Ｄ１２２のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１２４．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ｄ１１７～Ｄ１２２のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１２５．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ｄ１１７～Ｄ１２４のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１２６．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｄ１２５に記載の方法。
実施形態Ｄ１２７．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｄ１２６に記載の方法。
実施形態Ｄ１２８．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｄ１２５に記載の方法。
実施形態Ｄ１２９．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｄ１２８に記載の方法。
実施形態Ｄ１３０．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｄ１２５に記載の方法。
実施形態Ｄ１３１．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、またはインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｄ１３０に記載の方法。
実施形態Ｄ１３２．免疫細胞の増殖を誘導するまたは増加させる方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ｄ１～Ｄ１１３に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｄ１１４またはＤ１１５に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ｄ１３３．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ｄ１３２に記載の方法。
実施形態Ｄ１３４．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ｄ１３３に記載の方法。
実施形態Ｄ１３５．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ｄ１３４に記載の方法。
実施形態Ｄ１３６．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ｄ１３２に記載の方法。
実施形態Ｄ１３７．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ｄ１３２～Ｄ１３６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１３８．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ｄ１３２～Ｄ１３７のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１３９．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ｄ１３２～Ｄ１３７のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１４０．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ｄ１３２～Ｄ１３９のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１４１．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｄ１４０に記載の方法。
実施形態Ｄ１４２．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｄ１４１に記載の方法。
実施形態Ｄ１４３．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｄ１４０に記載の方法。
実施形態Ｄ１４４．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｄ１４３に記載の方法。
実施形態Ｄ１４５．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｄ１４０に記載の方法。
実施形態Ｄ１４６．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、またはインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｄ１４０に記載の方法。
実施形態Ｄ１４７．免疫細胞のメモリーまたはメモリー様免疫細胞への分化を誘導する方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ｄ１～Ｄ１１３に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｄ１１４またはＤ１１５に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ｄ１４８．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ｄ１４７に記載の方法。
実施形態Ｄ１４９．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ｄ１４８に記載の方法。
実施形態Ｄ１５０．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ｄ１４９に記載の方法。
実施形態Ｄ１５１．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ｄ１４７に記載の方法。
実施形態Ｄ１５２．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ｄ１４７～Ｄ１５１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１５３．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ｄ１４７～Ｄ１５２のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１５４．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ｄ１４７～Ｄ１５２のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１５５：前記免疫細胞が、抗ＴＦ ＩｇＧ抗体と接触して、メモリーまたはメモリー様免疫細胞を作製する、実施形態Ｄ１４７～Ｄ１５３のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１５６．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ｄ１４７～Ｄ１５５のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｄ１５７．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｄ１５６に記載の方法。
実施形態Ｄ１５８．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｄ１５６に記載の方法。
実施形態Ｄ１５９．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｄ１５６に記載の方法。
実施形態Ｄ１６０．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｄ１５９に記載の方法。
実施形態Ｄ１６１．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｄ１５６に記載の方法。
実施形態Ｄ１６２．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、またはインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｄ１６１に記載の方法。
実施形態Ｄ１６３．がん細胞、感染細胞、または老化細胞の死滅を必要とする対象におけるがん細胞、感染細胞、または老化細胞を死滅させる方法であって、前記対象に、実施形態Ｄ１～Ｄ１１３に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｄ１１４またはＤ１１５に記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
実施形態Ｄ１６４．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｄ１６３に記載の方法。
実施形態Ｄ１６５．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｄ１６４に記載の方法。
実施形態Ｄ１６６．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｄ１６３に記載の方法。
実施形態Ｄ１６７．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｄ１６６に記載の方法。
実施形態Ｄ１６８．治療を必要とする対象を治療する方法であって、前記対象に、実施形態Ｄ１～Ｄ１１３に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｄ１１４またはＤ１１５に記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
実施形態Ｄ１６９．前記対象が、がんまたは感染性疾患を有すると特定または診断されている、実施形態Ｄ１６８に記載の方法。
実施形態Ｄ１７０．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｄ１６９に記載の方法。
実施形態Ｄ１７１．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｄ１６８に記載の方法。
実施形態Ｄ１７２．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｄ１７１に記載の方法。
実施形態Ｄ１７３．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｄ１６８に記載の方法。
実施形態Ｄ１７４．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、またはインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｄ１７３に記載の方法。
実施形態Ｄ１７５．実施形態Ｄ１～Ｄ１１３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする、核酸。
実施形態Ｄ１７６．実施形態Ｄ１７４に記載の核酸を含む、ベクター。
実施形態Ｄ１７７．前記ベクターが、発現ベクターである、実施形態Ｄ１７６に記載のベクター。
実施形態Ｄ１７８．実施形態Ｄ１７５に記載の核酸または実施形態Ｄ１７５またはＤ１７６に記載のベクターを含む、細胞。
実施形態Ｄ１７９．多鎖キメラポリペプチドを産生する方法であって、
前記多鎖キメラポリペプチドの産生をもたらすのに十分な条件下で、実施形態Ｄ１７７に記載の細胞を培養培地中で培養すること、ならびに
前記多鎖キメラポリペプチドを前記細胞および／または前記培養培地から回収すること
を含む、方法。
実施形態Ｄ１８０．実施形態Ｄ１７９に記載の方法によって産生された多鎖キメラポリペプチド。
Ｅ．例示的な実施形態
実施形態Ｅ１．
（ｅ）（ｉ）第１の標的結合ドメインと、
（ｉｉ）可溶性組織因子ドメインと、
（ｉｉｉ）一対の親和性ドメインの第１のドメインと
を含む、第１のキメラポリペプチド、および
（ｆ）（ｉ）一対の親和性ドメインの第２のドメインと、
（ｉｉ）第２の標的結合ドメインと
を含む、第２のキメラポリペプチド
を含み、
前記第１のキメラポリペプチドと前記第２のキメラポリペプチドが、前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと前記第２のドメインとの結合を介して会合しており、
前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＩＬ－７受容体、ＣＤ１６、ＩＬ－２１受容体、ＴＧＦ－β、またはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する、
多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２．前記第１の標的結合ドメインと前記可溶性組織因子ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインと前記可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ４．前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｅ１～Ｅ３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ５．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｅ１～Ｅ３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ６．前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインが、前記第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｅ１～Ｅ５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ７．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｅ１～Ｅ５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ８．前記可溶性組織因子ドメインが、可溶性ヒト組織因子ドメインである、実施形態Ｅ１～Ｅ７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ９．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１０．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１１．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１２．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちの１つ以上を含まない、実施形態Ｅ８～Ｅ１１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１３．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちのいずれも含まない、実施形態Ｅ１２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１４．前記可溶性組織因子ドメインが、第ＶＩＩａ因子に結合することができない、実施形態Ｅ１～Ｅ１３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１５．前記可溶性組織因子ドメインが、不活性第Ｘ因子を第Ｘａ因子に変換しない、実施形態Ｅ１～Ｅ１４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１６．前記多鎖キメラポリペプチドが、哺乳動物における凝固を刺激しない、実施形態Ｅ１～Ｅ１５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１７．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む、実施形態Ｅ１～Ｅ１６のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１８．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチドＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む、実施形態Ｅ１～Ｅ１７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１９．前記第１のキメラポリペプチドおよび／または前記第２のキメラポリペプチドが、そのＮ末端にシグナル配列をさらに含む、実施形態Ｅ１～Ｅ１８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２０．前記シグナル配列が、配列番号３１を含む、実施形態Ｅ１９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２１．前記シグナル配列が、配列番号３１である、実施形態Ｅ２０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２２．前記一対の親和性ドメインが、ヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）由来のｓｕｓｈｉドメインと可溶性ＩＬ－１５である、実施形態Ｅ１～Ｅ２１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２３．前記可溶性ＩＬ－１５が、Ｄ８ＮまたはＤ８Ａアミノ酸置換を有する、実施形態Ｅ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２４．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４と８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２５．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４と９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２６．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４と９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２７．前記可溶性ＩＬ－１５が、配列番号１４を含む、実施形態Ｅ２６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２８．ＩＬ１５Ｒαの前記ｓｕｓｈｉドメインが、ヒトＩＬ１５Ｒα由来のｓｕｓｈｉドメインを含む、実施形態Ｅ２２～Ｅ２７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２９．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８と８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３０．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８と９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３１．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８と９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ３０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３２．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、配列番号２８を含む、実施形態Ｅ３１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３３．ヒトＩＬ１５Ｒα由来の前記ｓｕｓｈｉドメインが、成熟全長ＩＬ１５Ｒαである、実施形態Ｅ２８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３４．前記一対の親和性ドメインが、バルナーゼとバルンスター、ＰＫＡとＡＫＡＰ、変異ＲＮａｓｅ Ｉ断片に基づくアダプター／ドッキングタグモジュール、ならびに、タンパク質シンタキシン、シナプトタグミン、シナプトブレビン、およびＳＮＡＰ２５の相互作用に基づくＳＮＡＲＥモジュールからなる群から選択される、実施形態Ｅ１～Ｅ２１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３５．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＩＬ－７受容体、ＣＤ１６、またはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ１～Ｅ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３６．前記第１の標的結合ドメインがＩＬ－７受容体に特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインが、ＣＤ１６またはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ３５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３７．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－７タンパク質を含む、実施形態Ｅ３６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３８．前記可溶性ＩＬ－７タンパク質が、可溶性ヒトＩＬ－７である、実施形態Ｅ３７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３９．前記第２の抗原結合ドメインが、ＣＤ１６に特異的に結合する抗原結合ドメインを含む、実施形態Ｅ３６～Ｅ３８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ４０．前記第２の抗原結合ドメインが、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖを含む、実施形態Ｅ３９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ４１．前記第２の抗原結合ドメインが、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ３６～Ｅ３８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ４２．前記第２の抗原結合ドメインが、可溶性ＩＬ－２１を含む、実施形態Ｅ４１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ４３．前記可溶性ＩＬ－２１が、可溶性ヒトＩＬ－２１である、実施形態Ｅ４２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ４４．前記第２のキメラポリペプチドが、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｅ３６～Ｅ４０のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ４５．前記追加の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－２１を含む、実施形態Ｅ４４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ４６．前記可溶性ＩＬ－２１が、可溶性ヒトＩＬ－１２である、実施形態Ｅ４５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ４７．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＴＧＦ－β、ＣＤ１６、またはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ１～Ｅ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ４８．前記第１の標的結合ドメインがＴＧＦ－βに特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインが、ＣＤ１６またはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ４７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ４９．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦ－β受容体である、実施形態Ｅ４８に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ５０．可溶性ＴＧＦ－β受容体が、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である、実施形態Ｅ４９に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ５１．前記第２の標的結合ドメインが、ＣＤ１６に特異的に結合する、実施形態Ｅ４８～Ｅ５０のいずれか１つに記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ５２．前記第２の抗原結合ドメインが、ＣＤ１６に特異的に結合する抗原結合ドメインを含む、実施形態Ｅ５１に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ５３．前記第２の抗原結合ドメインが、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖを含む、実施形態Ｅ５２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ５４．前記第２の標的結合ドメインが、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ４８～Ｅ５０のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ５５．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－２１を含む、実施形態Ｅ５４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ５６．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ヒトＩＬ－２１を含む、実施形態Ｅ５５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ５７．前記第２のキメラポリペプチドが、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｅ４８～Ｅ５３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ５８．前記追加の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－２１を含む、実施形態Ｅ５７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ５９．前記可溶性ＩＬ－２１が、可溶性ヒトＩＬ－２１である、実施形態Ｅ５８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ６０．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＩＬ－７受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ１～Ｅ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ６１．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－７を含む、実施形態Ｅ６０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ６２．前記可溶性ＩＬ－７が、可溶性ヒトＩＬ－７である、実施形態Ｅ６１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ６３．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＴＧＦ－βに特異的に結合する、実施形態Ｅ１～Ｅ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ６４．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦ－β受容体である、実施形態Ｅ６３に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ６５．前記可溶性ＴＧＦ－β受容体が、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である、実施形態Ｅ６４に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ６６．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－２１受容体、またはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ１～Ｅ３４のいずれか１つに記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ６７．前記第１の標的結合ドメインがＩＬ－７受容体に特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインがＩＬ－２１受容体またはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ６６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ６８．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－７である、実施形態Ｅ６７に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ６９．前記可溶性ＩＬ－７が、可溶性ヒトＩＬ－７である、実施形態Ｅ６８に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ７０．前記第２の標的結合ドメインが、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ６７～Ｅ６９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ７１．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－２１である、実施形態Ｅ７０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ７２．前記可溶性ＩＬ－２１が、可溶性ヒトＩＬ－２１である、実施形態Ｅ７１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ７３．前記第２の抗原結合ドメインが、ＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ６７～Ｅ６９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ７４．前記第２の抗原結合ドメインが、可溶性ＣＤ１３７Ｌである、実施形態Ｅ７３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ７５．前記可溶性ＣＤ１３７Ｌが、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌである、実施形態Ｅ７４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ７６．前記第２のキメラポリペプチドが、ＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｅ６７～Ｅ７２のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ７７．前記追加の標的結合ドメインが、可溶性ＣＤ１３７Ｌを含む、実施形態Ｅ７６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ７８．前記可溶性ＣＤ１３７Ｌが、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌである、実施形態Ｅ７７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ７９．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＩＬ－７受容体またはＴＧＦ－βに特異的に結合する、実施形態Ｅ１～Ｅ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ８０．前記第１の標的結合ドメインがＩＬ－７受容体に特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインがＴＧＦ－βに特異的に結合する、実施形態Ｅ７９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ８１．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－７タンパク質を含む、実施形態Ｅ８０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ８２．前記可溶性ＩＬ－７タンパク質が、可溶性ヒトＩＬ－７である、実施形態Ｅ８１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ８３．前記第２の抗原結合ドメインが、ＴＧＦ－βに特異的に結合する抗原結合ドメインを含む、実施形態Ｅ８０～Ｅ８２のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ８４．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦ－β受容体である、実施形態Ｅ８３に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ８５．前記可溶性ＴＧＦ－β受容体が、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である、実施形態Ｅ８４に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ８６．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＴＧＦ－β、ＩＬ－２１受容体、またはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ１～Ｅ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ８７．前記第１の標的結合ドメインがＴＧＦ－βに特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインがＩＬ－２１受容体またはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ８６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ８８．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦ－β受容体である、実施形態Ｅ８７に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ８９．前記可溶性ＴＧＦ－β受容体が、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である、実施形態Ｅ８８に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ９０．前記第２の標的結合ドメインが、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ８７～Ｅ８９のいずれか１つに記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ９１．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－２１を含む、実施形態Ｅ９０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ９２．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ヒトＩＬ－２１を含む、実施形態Ｅ９１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ９３．前記第２の標的結合ドメインが、ＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ８７～Ｅ８９のいずれか１つに記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ９４．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ＣＤ１３７Ｌを含む、実施形態Ｅ９３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ９５．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌを含む、実施形態Ｅ９４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ９６．前記第２のキメラポリペプチドが、ＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｅ８７～Ｅ９２のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ９７．前記追加の標的結合ドメインが、可溶性ＣＤ１３７Ｌを含む、実施形態Ｅ９６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ９８．前記可溶性ＣＤ１３７Ｌが、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌである、実施形態Ｅ９７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ９９．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＴＧＦ－βまたはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ１～Ｅ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１００．前記第１の標的結合ドメインがＴＧＦ－βに特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインがＴＧＦ－βまたはＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ９９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１０１．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦ－β受容体である、実施形態Ｅ１００に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１０２．前記可溶性ＴＧＦ－β受容体が、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である、実施形態Ｅ１０１に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１０３．前記第２の標的結合ドメインが、ＩＬ－２１受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ１００～Ｅ１０２のいずれか１つに記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１０４．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ＩＬ－２１を含む、実施形態Ｅ１０３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１０５．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ヒトＩＬ－２１を含む、実施形態Ｅ１０４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１０６．前記第２の標的結合ドメインが、ＴＧＦ－βに特異的に結合する、実施形態Ｅ１００～Ｅ１０２のいずれか１つに記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１０７．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦ－β受容体である、実施形態Ｅ１０６に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１０８．前記可溶性ＴＧＦ－β受容体が、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である、実施形態Ｅ１０７に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１０９．前記第２のポリペプチドが、ＴＧＦ－βに特異的に結合する追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｅ１００～Ｅ１０５のいずれか１つに記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１１０．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦ－β受容体である、実施形態Ｅ１０９に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１１１．前記可溶性ＴＧＦ－β受容体が、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である、実施形態Ｅ１１０に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１１２．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＴＧＦ－βまたはＩＬ－１６に特異的に結合する、実施形態Ｅ１～Ｅ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１１３．前記第１の標的結合ドメインがＴＧＦ－βに特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインがＴＧＦ－βまたはＩＬ－１６に特異的に結合する、実施形態Ｅ１１２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１１４．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦ－β受容体である、実施形態Ｅ１１３に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１１５．前記可溶性ＴＧＦ－β受容体が、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である、実施形態Ｅ１１４に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１１６．前記第２の標的結合ドメインが、ＩＬ－１６に特異的に結合する、実施形態Ｅ１１３～Ｅ１１５のいずれか１つに記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１１７．前記第２の抗原結合ドメインが、ＣＤ１６に特異的に結合する抗原結合ドメインを含む、実施形態Ｅ１１６に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１１８．前記第２の抗原結合ドメインが、ＣＤ１６に特異的に結合するｓｃＦｖを含む、実施形態Ｅ１１７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１１９．前記第２の標的結合ドメインが、ＴＧＦ－βに特異的に結合する、実施形態Ｅ１１３～Ｅ１１５のいずれか１つに記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１２０．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦ－β受容体である、実施形態Ｅ１１９に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１２１．前記可溶性ＴＧＦ－β受容体が、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である、実施形態Ｅ１２０に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１２２．前記第２のキメラポリペプチドが、ＴＧＦ－βに特異的に結合する追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｅ１１３～Ｅ１１８のいずれか１つに記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１２３．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦ－β受容体である、実施形態Ｅ１２２に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１２４．前記可溶性ＴＧＦ－β受容体が、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である、実施形態Ｅ１２３に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１２５．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々独立して、ＴＧＦ－βまたはＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ１～Ｅ３４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１２６．前記第１の標的結合ドメインがＴＧＦ－βに特異的に結合し、前記第２の標的結合ドメインがＣＤ１３７Ｌ受容体に特異的に結合する、実施形態Ｅ１２５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１２７．前記第１の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦ－β受容体である、実施形態Ｅ１２６に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１２８．前記可溶性ＴＧＦ－β受容体が、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である、実施形態Ｅ１２７に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１２９．前記第２の標的結合ドメインが、可溶性ＣＤ１３７Ｌタンパク質を含む、実施形態Ｅ１２８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１３０．前記可溶性ＣＤ１３７Ｌタンパク質が、可溶性ヒトＣＤ１３７Ｌである、実施形態Ｅ１２９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１３１．前記第２のキメラポリペプチドが、ＴＧＦ－βに特異的に結合する追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｅ１２６～Ｅ１３０のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１３２．前記追加の標的結合ドメインが、可溶性ＴＧＦ－β受容体である、実施形態Ｅ１３１に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１３３．前記可溶性ＴＧＦ－β受容体が、可溶性ＴＧＦβＲＩＩ受容体である、実施形態Ｅ１３２に記載の多重特異性キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１３４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１０４と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１３５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１０４と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１３４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１３６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１０４と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１３５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１３７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１０４を含む、実施形態Ｅ１３６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１３８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１０６を含む、実施形態Ｅ１３７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１３９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１２９と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１およびＥ１３４～Ｅ１３８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１４０．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１２９と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１３９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１４１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１２９と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１４０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１４２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１２９を含む、実施形態Ｅ１４１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１４３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１３１を含む、実施形態Ｅ１４２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１４４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１３３と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１４５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１３３と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１４４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１４６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１３３と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１４５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１４７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１３３を含む、実施形態Ｅ１４６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１４８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１３５を含む、実施形態Ｅ１４７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１４９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１３７と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１およびＥ１４４～Ｅ１４８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１５０．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１３７と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１４９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１５１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１３７と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１５０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１５２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１３７を含む、実施形態Ｅ１５１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１５３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１３９を含む、実施形態Ｅ１５２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１５４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１４１と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１５５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１４１と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１５４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１５６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１４１と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１５５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１５７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１４１を含む、実施形態Ｅ１５６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１５８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１４３を含む、実施形態Ｅ１５７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１５９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１４５と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１およびＥ１５４～Ｅ１５８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１６０．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１４５と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１５９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１６１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１４５と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１６０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１６２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１４５を含む、実施形態Ｅ１６１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１６３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１４７を含む、実施形態Ｅ１６２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１６４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１４９と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１６５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１４９と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１６４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１６６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１４９と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１６５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１６７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１４９を含む、実施形態Ｅ１６６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１６８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１５１を含む、実施形態Ｅ１６７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１６９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１５３と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１およびＥ１６４～Ｅ１６８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１７０．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１５３と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１６９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１７１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１５３と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１７０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１７２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１５３を含む、実施形態Ｅ１７１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１７３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１５５を含む、実施形態Ｅ１７２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１７４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１６１と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１７５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１６１と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１７４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１７６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１６１と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１７５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１７７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１６１を含む、実施形態Ｅ１７６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１７８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１６３を含む、実施形態Ｅ１７７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１７９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１６５と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１およびＥ１７４～Ｅ１７８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１８０．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１６５と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１７９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１８１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１６５と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１８０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１８２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１６５を含む、実施形態Ｅ１８１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１８３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１６７を含む、実施形態Ｅ１８２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１８４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１７３と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１８５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１７３と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１８４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１８６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１７３と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１８５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１８７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１７３を含む、実施形態Ｅ１８６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１８８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１７５を含む、実施形態Ｅ１８７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１８９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１８９と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１およびＥ１８４～Ｅ１８８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１９０．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１８９と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１８９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１９１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１８９と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１９０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１９２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１８９を含む、実施形態Ｅ１９１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１９３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１９１を含む、実施形態Ｅ１９２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１９４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１７３と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１９５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１７３と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１９４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１９６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１７３と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１９５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１９７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１７３を含む、実施形態Ｅ１９６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１９８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１７５を含む、実施形態Ｅ１９７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ１９９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１７７と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１およびＥ１９４～Ｅ１９８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２００．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１７７と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１９９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２０１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１７７と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２００に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２０２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１７７を含む、実施形態Ｅ２０１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２０３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１７９を含む、実施形態Ｅ２０２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２０４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１８１と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２０５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１８１と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２０４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２０６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１８１と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２０５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２０７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１８１を含む、実施形態Ｅ２０６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２０８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１８３を含む、実施形態Ｅ２０７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２０９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１８５と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１およびＥ２０４～Ｅ２０８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２１０．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１８５と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２０９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２１１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１８５と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２１０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２１２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１８５を含む、実施形態Ｅ２１１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２１３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１８７を含む、実施形態Ｅ２１２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２１４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１９３と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２１５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１９３と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２１４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２１６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１９３と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２１５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２１７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１９３を含む、実施形態Ｅ２１６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２１８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号１９５を含む、実施形態Ｅ２１７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２１９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１９７と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１およびＥ２１４～Ｅ２１８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２２０．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１９７と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２１９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２２１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１９７と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２２０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２２２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１９７を含む、実施形態Ｅ２２１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２２３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号１９９を含む、実施形態Ｅ２２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２２４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号２０１と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２２５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号２０１と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２２４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２２６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号２０１と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２２５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２２７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号２０１を含む、実施形態Ｅ２２６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２２８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号２０３を含む、実施形態Ｅ２２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２２９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号２０５と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１およびＥ２２４～Ｅ２２８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２３０．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号２０５と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２２９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２３１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号２０５と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２３０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２３２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号２０５を含む、実施形態Ｅ２３１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２３３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号２０７を含む、実施形態Ｅ２３２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２３４．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号２０９と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２３５．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号２０９と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２３４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２３６．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号２０９と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２３５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２３７．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号２０９を含む、実施形態Ｅ２３６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２３８．前記第１のキメラポリペプチドが、配列番号２１１を含む、実施形態Ｅ２３７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２３９．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号２１３と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ１およびＥ２３４～Ｅ２３８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２４０．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号２１３と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２３９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２４１．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号２１３と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ２４０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２４２．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号２１３を含む、実施形態Ｅ２４１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２４３．前記第２のキメラポリペプチドが、配列番号２１５を含む、実施形態Ｅ２４２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２４４．前記第１のキメラポリペプチドが、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（複数可）をさらに含み、前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの少なくとも１つが、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられている、実施形態Ｅ１～Ｅ１３３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２４５．前記第１のキメラポリペプチドが、前記可溶性組織因子ドメインと前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの前記少なくとも１つとの間にリンカー配列、および／または前記１つ以上の追加の抗原結合ドメイン（複数可）のうちの前記少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｅ２４４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２４６．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｅ１～Ｅ１３３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２４７．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｅ２４６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２４８．前記第１のキメラポリペプチドが、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｅ２４６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２４９．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインに直接隣接している、実施形態Ｅ２４６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２５０．前記第１のキメラポリペプチドが、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つと前記第１の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｅ２４６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２５１．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に配置されており、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられている、実施形態Ｅ２４６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２５２．Ｎ末端に配置された前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｅ２５１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２５３．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｅ２５１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２５４．Ｃ末端に配置された前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｅ２５１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２５５．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｅ２５１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２５６．前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つが、前記可溶性組織因子ドメインおよび／または前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｅ２５１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２５７．前記第１のキメラポリペプチドが、（ｉ）前記可溶性組織因子ドメインと、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つとの間、および／または（ｉｉ）前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと、前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｅ２５１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２５８．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に前記追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｅ４４～Ｅ４６、Ｅ５７～Ｅ５９、Ｅ７６～Ｅ７８、Ｅ９６～Ｅ９８、Ｅ１０９～Ｅ１１１、Ｅ１２２～Ｅ１２４、およびＥ１３１～Ｅ１３３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２５９．前記追加の標的結合ドメインが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインに直接隣接している、実施形態Ｅ２５８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２６０．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記追加の標的結合ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｅ２５８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２６１．前記追加の標的結合ドメインが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記第２の標的結合ドメインに直接隣接している、実施形態Ｅ２５８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２６２．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記追加の標的結合ドメインと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｅ２５８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ２６３．実施形態Ｅ１～Ｅ２６２に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを含む、組成物。
実施形態Ｅ２６４．医薬組成物である、実施形態Ｅ２６３に記載の組成物。
実施形態Ｅ２６５．実施形態Ｅ２６３またはＥ２６４に記載の組成物の少なくとも１つの用量を含む、キット。
実施形態Ｅ２６６．免疫細胞を刺激する方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ｅ１～Ｅ２６２に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｅ２６３またはＥ２６４に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ｅ２６７．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ｅ２６６に記載の方法。
実施形態Ｅ２６８．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ｅ２６７に記載の方法。
実施形態Ｅ２６９．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ｅ２６８に記載の方法。
実施形態Ｅ２７０．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ｅ２６６に記載の方法。
実施形態Ｅ２７１．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ｅ２６６～Ｅ２７０のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｅ２７２．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ｅ２６６～Ｅ２７１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｅ２７３．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ｅ２６６～Ｅ２７１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｅ２７４．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ｅ２６６～Ｅ２７３のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｅ２７５．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｅ２７４に記載の方法。
実施形態Ｅ２７６．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｅ２７５に記載の方法。
実施形態Ｅ２７７．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｅ２７４に記載の方法。
実施形態Ｅ２７８．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｅ２７７に記載の方法。
実施形態Ｅ２７９．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｅ２７４に記載の方法。
実施形態Ｅ２８０．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｅ２７９に記載の方法。
実施形態Ｅ２８１．免疫細胞の増殖を誘導するまたは増加させる方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ｅ１～Ｅ２６２に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｅ２６３またはＥ２６４に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ｅ２８２．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ｅ２８１に記載の方法。
実施形態Ｅ２８３．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ｅ２８２に記載の方法。
実施形態Ｅ２８４．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ｅ２８３に記載の方法。
実施形態Ｅ２８５．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ｅ２８１に記載の方法。
実施形態Ｅ２８６．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ｅ２８１～Ｅ２８５のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｅ２８７．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ｅ２８１～Ｅ２８６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｅ２８８．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ｅ２８１～Ｅ２８６のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｅ２８９．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ｅ２８１～Ｅ２８８のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｅ２９０．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｅ２８９に記載の方法。
実施形態Ｅ２９１．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｅ２９０に記載の方法。
実施形態Ｅ２９２．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｅ２８９に記載の方法。
実施形態Ｅ２９３．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｅ２９２に記載の方法。
実施形態Ｅ２９４．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｅ２８９に記載の方法。
実施形態Ｅ２９５．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｅ２８９に記載の方法。
実施形態Ｅ２９６．免疫細胞のメモリーまたはメモリー様免疫細胞への分化を誘導する方法であって、
免疫細胞を、実施形態Ｅ１～Ｅ２６２に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｅ２６３またはＥ２６４に記載の組成物の有効量と接触させること
を含む、方法。
実施形態Ｅ２９７．前記免疫細胞をインビトロで接触させる、実施形態Ｅ２９６に記載の方法。
実施形態Ｅ２９８．前記免疫細胞が、対象から以前に得られた、実施形態Ｅ２９７に記載の方法。
実施形態Ｅ２９９．前記方法が、前記接触させるステップの前に、前記免疫細胞を前記対象から得ることをさらに含む、実施形態Ｅ２９８に記載の方法。
実施形態Ｅ３００．前記免疫細胞をインビボで接触させる、実施形態Ｅ２９６に記載の方法。
実施形態Ｅ３０１．前記免疫細胞が、未熟胸腺細胞、末梢血リンパ球、ナイーブＴ細胞、多能性Ｔｈ細胞前駆体、リンパ前駆細胞、Ｔｒｅｇ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ２２細胞、Ｔｈ９細胞、Ｔｈ２細胞、Ｔｈ１細胞、Ｔｈ３細胞、γδ Ｔ細胞、αβ Ｔ細胞、腫瘍浸潤Ｔ細胞、ＣＤ８＋ Ｔ細胞、ＣＤ４＋ Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、マスト細胞、マクロファージ、好中球、樹状細胞、好塩基球、好酸球、およびナチュラルキラー細胞からなる群から選択される、実施形態Ｅ２９６～Ｅ３００のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｅ３０２．前記免疫細胞が、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体を発現するようにあらかじめ遺伝子修飾されている、実施形態Ｅ２９６～Ｅ３０１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｅ３０３．前記方法が、前記接触させるステップの後に、前記免疫細胞に、キメラ抗原受容体または組換えＴ細胞受容体をコードする核酸を導入することをさらに含む、実施形態Ｅ２９６～Ｅ３０１のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｅ３０４．前記方法が、前記免疫細胞を、それを必要とする対象に投与することをさらに含む、実施形態Ｅ２９６～Ｅ３０３のいずれか１つに記載の方法。
実施形態Ｅ３０５．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｅ３０４に記載の方法。
実施形態Ｅ３０６．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｅ３０５に記載の方法。
実施形態Ｅ３０７．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｅ３０４に記載の方法。
実施形態Ｅ３０８．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｅ３０７に記載の方法。
実施形態Ｅ３０９．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｅ３０４に記載の方法。
実施形態Ｅ３１０．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｅ３０９に記載の方法。
実施形態Ｅ３１１．がん細胞、感染細胞、または老化細胞の死滅を必要とする対象におけるがん細胞、感染細胞、または老化細胞を死滅させる方法であって、前記対象に、実施形態Ｅ１～Ｅ２６２に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｅ２６３またはＥ２６４に記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
実施形態Ｅ３１２．前記対象が、がんを有すると特定または診断されている、実施形態Ｅ３１１に記載の方法。
実施形態Ｅ３１３．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｅ３１２に記載の方法。
実施形態Ｅ３１４．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｅ３１１に記載の方法。
実施形態Ｅ３１５．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｅ３１４に記載の方法。
実施形態Ｅ３１６．治療を必要とする対象を治療する方法であって、前記対象に、実施形態Ｅ１～Ｅ２６２に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかまたは実施形態Ｅ２６３またはＥ２６４に記載の組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
実施形態Ｅ３１７．前記対象が、がんまたは感染性疾患を有すると特定または診断されている、実施形態Ｅ３１６に記載の方法。
実施形態Ｅ３１８．前記がんが、固形腫瘍、血液腫瘍、肉腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経芽細胞腫、黒色腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、骨肉腫、Ｂ細胞新生物、多発性骨髄腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、網膜芽細胞腫、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、腎細胞癌、胃食道癌、膵臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、非小細胞肺癌、扁平上皮細胞頭頸部癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、肝臓癌、および肝細胞癌からなる群から選択される、実施形態Ｅ３１７に記載の方法。
実施形態Ｅ３１９．前記対象が、加齢関連疾患または状態を有すると特定または診断されている、実施形態Ｅ３１６に記載の方法。
実施形態Ｅ３２０．前記加齢関連疾患または状態が、アルツハイマー病、動脈瘤、嚢胞性線維症、膵炎における線維症、緑内障、高血圧症、特発性肺線維症、炎症性腸疾患、椎間板変性、黄斑変性、骨関節炎、２型真性糖尿病、脂肪萎縮、リポジストロフィー、アテローム性動脈硬化症、白内障、ＣＯＰＤ、特発性肺線維症、腎移植不全、肝線維症、骨量喪失、心筋梗塞、サルコペニア、創傷治癒、脱毛症、心筋細胞肥大、骨関節炎、パーキンソン病、加齢関連肺組織弾性喪失、黄斑変性、悪液質、糸球体硬化症、肝硬変、ＮＡＦＬＤ、骨粗しょう症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、脊髄小脳失調症、多発性硬化症、および腎機能障害からなる群から選択される、実施形態Ｅ３１９に記載の方法。
実施形態Ｅ３２１．前記対象が、感染性疾患を有すると診断または特定されている、実施形態Ｅ３１６に記載の方法。
実施形態Ｅ３２２．前記感染性疾患が、ヒト免疫不全ウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、ライノウイルス、ロタウイルス、天然痘、単純ヘルペスウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、およびＣ型肝炎ウイルス、パピローマウイルス、ならびにインフルエンザウイルスによる感染である、実施形態Ｅ３２１に記載の方法。
実施形態Ｅ３２３．実施形態Ｅ１～Ｅ２６２のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする、核酸。
実施形態Ｅ３２４．実施形態Ｅ３２３に記載の核酸を含む、ベクター。
実施形態Ｅ３２５．前記ベクターが、発現ベクターである、実施形態Ｅ３２４に記載のベクター。
実施形態Ｅ３２６．実施形態Ｅ３２３に記載の核酸または実施形態Ｅ３２４またはＥ３２５に記載のベクターを含む、細胞。
実施形態Ｅ３２７．多鎖キメラポリペプチドを産生する方法であって、
前記多鎖キメラポリペプチドの産生をもたらすのに十分な条件下で、実施形態Ｅ３２６に記載の細胞を培養培地中で培養すること、ならびに
前記多鎖キメラポリペプチドを前記細胞および／または前記培養培地から回収すること
を含む、方法。
実施形態Ｅ３２８．実施形態Ｅ３２７に記載の方法によって産生された多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３２９．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３３０．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ３２９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３３１．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ３３０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３３２．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号３と１００％同一の配列を含む、実施形態Ｅ３３１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３３３．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３３４．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｅ３３３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３３５．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｅ３３４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｅ３３６．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号４と１００％同一の配列を含む、実施形態Ｅ３３５に記載の多鎖キメラポリペプチド。
Ｆ．例示的な実施形態
実施形態Ｆ１．
（ａ）（ｉ）第１の標的結合ドメインと、
（ｉｉ）リンカードメインと、
（ｉｉｉ）一対の親和性ドメインの第１のドメインと
を含む、第１のキメラポリペプチド、および
（ｂ）（ｉ）一対の親和性ドメインの第２のドメインと、
（ｉｉ）第２の標的結合ドメインと
を含む、第２のキメラポリペプチド
を含み、前記第１のキメラポリペプチドと前記第２のキメラポリペプチドが、前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと前記第２のドメインとの結合を介して会合している、多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ２．前記第１の標的結合ドメインと前記リンカードメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｆ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ３．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインと前記リンカードメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｆ１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ４．前記リンカードメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｆ１～Ｆ３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ５．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記リンカードメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｆ１～Ｆ３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ６．前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインが、前記第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、実施形態Ｆ１～Ｆ５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ７．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｆ１～Ｆ５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ８．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが同じ抗原に特異的に結合する、実施形態Ｆ１～Ｆ７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ９．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが同じエピトープに特異的に結合する、実施形態Ｆ８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ１０．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが同じアミノ酸配列を含む、実施形態Ｆ９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ１１．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが異なる抗原に特異的に結合する、実施形態Ｆ１～Ｆ７のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ１２．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、抗原結合ドメインである、実施形態Ｆ１～Ｆ１１のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ１３．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが各々、抗原結合ドメインである、実施形態Ｆ１２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ１４．前記抗原結合ドメインが、ｓｃＦｖまたは単一ドメイン抗体を含む、実施形態Ｆ１２またはＦ１３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ１５．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、ＣＤ１６ａ、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ３３、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－１、ＶＥＧＦ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＰＤＬ－１、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、ＣＴＬＡ４、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＣＤ２６ａ、ＣＤ３６、ＵＬＢＰ２、ＣＤ３０、ＣＤ２００、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＰＤ－Ｌ２、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、ＩＬＴ３、ＩＬＴ４、ＴＩＧＩＴ、ＭＨＣＩＩ、ＬＡＧ３、ＣＤ２７２、ＶＩＳＴＡ、ＣＤ１３７、ＣＤ４０、ＣＤ４７、ＣＤ７０、ＯＸ４０、ＩＧＦ－１Ｒ、ＭＵＣ４ＡＣ、ＭＵＣ５ＡＣ、Ｔｒｏｐ－２、ＣＭＥＴ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、Ｂ７Ｈ３、ＥＰＣＡＭ、ＢＣＭＡ、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡＣＡＭ５、ＵＬ１６結合タンパク質、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＬＬ４、ＴＹＲＯ３、ＡＸＬ、ＭＥＲ、ＣＤ１２２、ＣＤ１５５、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）リガンド、ＴＧＦ－βＲＩＩＩリガンド、ＤＮＡＭ－１リガンド、ＮＫｐ４６リガンド、ＮＫｐ４４リガンド、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＫｐ３０リガンド、ｓｃＭＨＣＩリガンド、ｓｃＭＨＣＩＩリガンド、ｓｃＴＣＲリガンド、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－２１受容体、ＰＤＧＦ－ＤＤ受容体、幹細胞因子（ＳＣＦ）受容体、幹細胞様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）受容体、ＭＩＣＡ受容体、ＭＩＣＢ受容体、ＵＬＰ１６結合タンパク質受容体、ＣＤ１５５受容体、ＣＤ１２２受容体、およびＣＤ２８受容体からなる群から選択される標的に特異的に結合する、実施形態Ｆ１～Ｆ１４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ１６．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、可溶性インターロイキンまたはサイトカインタンパク質である、実施形態Ｆ１～Ｆ１４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ１７．前記可溶性インターロイキン、サイトカイン、またはリガンドタンパク質が、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＳＣＦ、およびＦＬＴ３Ｌからなる群から選択される、実施形態Ｆ１６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ１８．前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、可溶性インターロイキンまたはサイトカイン受容体である、実施形態Ｆ１～Ｆ１４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ１９．前記可溶性受容体が、可溶性ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）、可溶性ＴＧＦ－βＲＩＩＩ、可溶性ＮＫＧ２Ｄ、可溶性ＮＫｐ３０、可溶性ＮＫｐ４４、可溶性ＮＫｐ４６、可溶性ＤＮＡＭ－１、ｓｃＭＨＣＩ、ｓｃＭＨＣＩＩ、ｓｃＴＣＲ、可溶性ＣＤ１５５、または可溶性ＣＤ２８である、実施形態Ｆ１８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ２０．前記第１のキメラポリペプチドが、１つ以上の追加の標的結合ドメイン（複数可）をさらに含み、前記１つ以上の標的結合ドメイン（複数可）のうちの少なくとも１つが、前記リンカードメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられている、実施形態Ｆ１～Ｆ１９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ２１．前記第１のキメラポリペプチドが、前記リンカードメインと前記１つ以上の標的抗原結合ドメイン（複数可）のうちの前記少なくとも１つとの間にリンカー配列、および／または前記１つ以上の標的抗原結合ドメイン（複数可）のうちの前記少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｆ２０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ２２．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｆ１～Ｆ１９のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ２３．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｆ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ２４．前記第１のキメラポリペプチドが、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｆ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ２５．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインに直接隣接している、実施形態Ｆ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ２６．前記第１のキメラポリペプチドが、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つと前記第１の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｆ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ２７．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に配置されており、前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記リンカードメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられている、実施形態Ｆ２２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ２８．Ｎ末端に配置された前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｆ２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ２９．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｆ２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ３０．Ｃ末端に配置された前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｆ２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ３１．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記少なくとも１つの追加の標的結合ドメインと前記第１の標的結合ドメインまたは前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｆ２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ３２．前記リンカードメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つが、前記リンカードメインおよび／または前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインに直接隣接している、実施形態Ｆ２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ３３．前記第１のキメラポリペプチドが、（ｉ）前記リンカードメインと、前記リンカードメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つとの間、および／または（ｉｉ）前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと、前記リンカードメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間に位置付けられた前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの前記少なくとも１つとの間に配置されたリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｆ２７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ３４．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に１つ以上の追加の標的結合ドメインをさらに含む、実施形態Ｆ１～Ｆ３３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ３５．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインに直接隣接している、実施形態Ｆ３４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ３６．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｆ３４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ３７．前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記第２の標的結合ドメインに直接隣接している、実施形態Ｆ３４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ３８．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの少なくとも１つと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、実施形態Ｆ３４に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ３９．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じ抗原に特異的に結合する、実施形態Ｆ２０～Ｆ３８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ４０．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じエピトープに特異的に結合する、実施形態Ｆ３９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ４１．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの２つ以上が同じアミノ酸配列を含む、実施形態Ｆ４０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ４２．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが各々、同じ抗原に特異的に結合する、実施形態Ｆ３９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ４３．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが各々、同じエピトープに特異的に結合する、実施形態Ｆ４２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ４４．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが各々、同じアミノ酸配列を含む、実施形態Ｆ４３に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ４５．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが異なる抗原に特異的に結合する、実施形態Ｆ２０～Ｆ３８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ４６．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の標的結合ドメインのうちの１つ以上が、抗原結合ドメインである、実施形態Ｆ２０～Ｆ４５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ４７．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインが各々、抗原結合ドメインである、実施形態Ｆ４６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ４８．前記抗原結合ドメインが、ｓｃＦｖを含む、実施形態Ｆ４６またはＦ４７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ４９．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の標的結合ドメインのうちの１つ以上が、ＣＤ１６ａ、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ３３、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－１、ＶＥＧＦ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＰＤＬ－１、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、ＣＴＬＡ４、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＣＤ２６ａ、ＣＤ３６、ＵＬＢＰ２、ＣＤ３０、ＣＤ２００、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＰＤ－Ｌ２、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、ＩＬＴ３、ＩＬＴ４、ＴＩＧＩＴ、ＭＨＣＩＩ、ＬＡＧ３、ＣＤ２７２、ＶＩＳＴＡ、ＣＤ１３７、ＣＤ４０、ＣＤ４７、ＣＤ７０、ＯＸ４０、ＩＧＦ－１Ｒ、ＭＵＣ４ＡＣ、ＭＵＣ５ＡＣ、Ｔｒｏｐ－２、ＣＭＥＴ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、Ｂ７Ｈ３、ＥＰＣＡＭ、ＢＣＭＡ、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡＣＡＭ５、ＵＬ１６結合タンパク質、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＬＬ４、ＴＹＲＯ３、ＡＸＬ、ＭＥＲ、ＣＤ１２２、ＣＤ１５５、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）リガンド、ＴＧＦ－βＲＩＩＩリガンド、ＤＮＡＭ－１リガンド、ＮＫｐ４６リガンド、ＮＫｐ４４リガンド、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＫｐ３０リガンド、ｓｃＭＨＣＩリガンド、ｓｃＭＨＣＩＩリガンド、ｓｃＴＣＲリガンド、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－２１受容体、ＰＤＧＦ－ＤＤ受容体、幹細胞因子（ＳＣＦ）受容体、幹細胞様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）受容体、ＭＩＣＡ受容体、ＭＩＣＢ受容体、ＵＬＰ１６結合タンパク質受容体、ＣＤ１５５受容体、ＣＤ１２２受容体、およびＣＤ３受容体、およびＣＤ２８受容体からなる群から選択される標的に特異的に結合する、実施形態Ｆ２０～Ｆ４８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ５０．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの１つ以上が、可溶性インターロイキンまたはサイトカインタンパク質である、実施形態Ｆ２０～Ｆ４８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ５２．前記第１の標的結合ドメイン、前記第２の標的結合ドメイン、および前記１つ以上の追加の標的結合ドメインのうちの１つ以上が、可溶性インターロイキンまたはサイトカイン受容体である、実施形態Ｆ２０～Ｆ４８のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ５３．前記可溶性受容体が、可溶性ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）、可溶性ＴＧＦ－βＲＩＩＩ、可溶性ＮＫＧ２Ｄ、可溶性ＮＫｐ３０、可溶性ＮＫｐ４４、可溶性ＮＫｐ４６、可溶性ＤＮＡＭ－１、ｓｃＭＨＣＩ、ｓｃＭＨＣＩＩ、ｓｃＴＣＲ、可溶性ＣＤ１５５、可溶性ＣＤ１２２、可溶性ＣＤ３、または可溶性ＣＤ２８である、実施形態Ｆ５２に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ５４．前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチドのＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む、実施形態Ｆ１～Ｆ５３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ５５．前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチドＮ末端またはＣ末端にペプチドタグをさらに含む、実施形態Ｆ１～Ｆ５３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ５６．前記リンカードメインが、可溶性組織因子ドメインである、実施形態Ｆ１～Ｆ５５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ５７．前記可溶性組織因子ドメインが、可溶性ヒト組織因子ドメインである、実施形態Ｆ５６に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ５８．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも８０％同一の配列を含む、実施形態Ｆ５７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ５９．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも９０％同一の配列を含む、実施形態Ｆ５８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ６０．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、配列番号１と少なくとも９５％同一の配列を含む、実施形態Ｆ５９に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ６１．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちの１つ以上を含まない、実施形態Ｆ５７～Ｆ６０のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ６２．前記可溶性ヒト組織因子ドメインが、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２０位に対応するアミノ酸の位置にリジン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸２２位に対応するアミノ酸の位置にイソロイシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸４５位に対応するアミノ酸の位置にトリプトファン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸５８位に対応するアミノ酸の位置にアスパラギン酸、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸９４位に対応するアミノ酸の位置にチロシン、
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１３５位に対応するアミノ酸の位置にアルギニン、および
成熟野生型ヒト組織因子タンパク質のアミノ酸１４０位に対応するアミノ酸の位置にフェニルアラニンのうちのいずれも含まない、実施形態Ｆ６１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ６３．前記可溶性組織因子ドメインが、第ＶＩＩａ因子に結合することができない、実施形態Ｆ５６～Ｆ６２のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ６４．前記可溶性組織因子ドメインが、不活性第Ｘ因子を第Ｘａ因子に変換しない、実施形態Ｆ５６～Ｆ６３のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ６５．前記多鎖キメラポリペプチドが、哺乳動物における血液凝固を刺激しない、実施形態Ｆ５６～Ｆ６４のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ６６．前記リンカードメインが、カッパ鎖およびラムダ鎖からなる群から選択される、実施形態Ｆ１～Ｆ５５のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ６７．前記一対の親和性ドメインが、ヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）由来のｓｕｓｈｉドメインと可溶性ＩＬ－１５である、実施形態Ｆ１～Ｆ６６のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ６８．前記可溶性ＩＬ１５が、Ｄ８ＮまたはＤ８Ａアミノ酸置換を有する、実施形態Ｆ６７に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ６９．前記ヒトＩＬ１５Ｒαが、成熟全長ＩＬ１５Ｒαである、実施形態Ｆ６７またはＦ６８に記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ７０．前記一対の親和性ドメインが、バルナーゼとバルンスター、ＰＫＡとＡＫＡＰ、変異ＲＮａｓｅ Ｉ断片に基づくアダプター／ドッキングタグモジュール、ならびに、タンパク質シンタキシン、シナプトタグミン、シナプトブレビン、およびＳＮＡＰ２５の相互作用に基づくＳＮＡＲＥモジュールからなる群から選択される、実施形態Ｆ１～Ｆ６６のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ７１．前記第１のキメラポリペプチドおよび／または前記第２のキメラポリペプチドが、そのＮ末端にシグナル配列をさらに含む、実施形態Ｆ１～Ｆ７０のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ７２．前記第１のキメラポリペプチドおよび／または前記第２のキメラポリペプチドが、そのＮ末端にシグナル配列を欠く、実施形態Ｆ１～Ｆ７０のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチド。
実施形態Ｆ７３．実施形態Ｆ１～Ｆ７２に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを含む、組成物。
実施形態Ｆ７４．医薬組成物である、実施形態Ｆ７３に記載の組成物。
実施形態Ｆ７５．実施形態Ｆ７３またはＦ７４に記載の組成物の少なくとも１つの用量を含む、キット。
実施形態Ｆ７６．実施形態Ｆ１～Ｆ７２のいずれか１つに記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする、核酸。
実施形態Ｆ７７．実施形態Ｆ７６に記載の核酸を含む、ベクター。
実施形態Ｆ７８．前記ベクターが、発現ベクターである、実施形態Ｆ７７に記載のベクター。
実施形態Ｆ７９．実施形態Ｆ７６に記載の核酸または実施形態Ｆ７７またはＦ７８に記載のベクターを含む、細胞。
実施形態Ｆ８０．多鎖キメラポリペプチドを産生する方法であって、
前記多鎖キメラポリペプチドの産生をもたらすのに十分な条件下で、実施形態Ｆ７９に記載の細胞を培養培地中で培養すること、ならびに
前記多鎖キメラポリペプチドを前記細胞および／または前記培養培地から回収すること
を含む、方法。
実施形態Ｆ８１．実施形態Ｆ８０に記載の方法によって産生された多鎖キメラポリペプチド。

Claims (22)

  1. （ａ）（ｉ）第１の標的結合ドメインと、
    （ｉｉ）可溶性組織因子ドメインと、
    （ｉｉｉ）一対の親和性ドメインの第１のドメインと
    を含む、第１のキメラポリペプチド、および
    （ｂ）（ｉ）一対の親和性ドメインの第２のドメインと、
    （ｉｉ）第２の標的結合ドメインと
    を含む、第２のキメラポリペプチド
    を含み、前記第１のキメラポリペプチドおよび前記第２のキメラポリペプチドが、前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインと前記第２のドメインとの結合を介して会合している、多鎖キメラポリペプチド。
  2. 前記第１の標的結合ドメインおよび前記可溶性組織因子ドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、請求項１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  3. 前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記第１の標的結合ドメインと前記可溶性組織因子ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、請求項１に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  4. 前記可溶性組織因子ドメインおよび前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインが、前記第１のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、請求項１～３のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  5. 前記第１のキメラポリペプチドが、前記第１のキメラポリペプチド内の前記可溶性組織因子ドメインと前記一対の親和性ドメインの前記第１のドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  6. 前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインおよび前記第２の標的結合ドメインが、前記第２のキメラポリペプチド内で互いに直接隣接している、請求項１～５のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  7. 前記第２のキメラポリペプチドが、前記第２のキメラポリペプチド内の前記一対の親和性ドメインの前記第２のドメインと前記第２の標的結合ドメインとの間にリンカー配列をさらに含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  8. 前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、抗原結合ドメインである、請求項１～７のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  9. 前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、ＣＤ１６ａ、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ３３、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－１、ＶＥＧＦ、ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＰＤＬ－１、ＴＩＧＩＴ、ＰＤ－１、ＴＩＭ３、ＣＴＬＡ４、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦα、ＣＤ２６ａ、ＣＤ３６、ＵＬＢＰ２、ＣＤ３０、ＣＤ２００、ＩＧＦ－１Ｒ、ＭＵＣ４ＡＣ、ＭＵＣ５ＡＣ、Ｔｒｏｐ－２、ＣＭＥＴ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＰＳＭＡ、ＣＥＡ、Ｂ７Ｈ３、ＥＰＣＡＭ、ＢＣＭＡ、Ｐ－カドヘリン、ＣＥＡＣＡＭ５、ＵＬ１６結合タンパク質、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＬＬ４、ＴＹＲＯ３、ＡＸＬ、ＭＥＲ、ＣＤ１２２、ＣＤ１５５、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）リガンド、ＴＧＦ－βＲＩＩＩリガンド、ＤＮＡＭ－１リガンド、ＮＫｐ４６リガンド、ＮＫｐ４４リガンド、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＮＫｐ３０リガンド、ｓｃＭＨＣＩリガンド、ｓｃＭＨＣＩＩリガンド、ｓｃＴＣＲリガンド、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－２１受容体、ＰＤＧＦ－ＤＤ受容体、幹細胞因子（ＳＣＦ）受容体、幹細胞様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）受容体、ＭＩＣＡ受容体、ＭＩＣＢ受容体、ＵＬＰ１６結合タンパク質受容体、ＣＤ１５５受容体、ＣＤ１２２受容体、およびＣＤ２８受容体からなる群から選択される標的に特異的に結合する、請求項１～８のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  10. 前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、可溶性インターロイキンタンパク質または可溶性サイトカインタンパク質である、請求項１～７のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  11. 前記可溶性インターロイキンタンパク質または前記可溶性サイトカインタンパク質が、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、およびＩＬ－２１からなる群から選択される、請求項１０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  12. 前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、ＰＤＧＦ－ＤＤ、ＳＣＦ、またはＦＬＴ３Ｌである、請求項１０に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  13. 前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、可溶性インターロイキン受容体または可溶性サイトカイン受容体である、請求項１～７のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  14. 前記第１の標的結合ドメインおよび前記第２の標的結合ドメインの一方または両方が、可溶性ＴＧＦ－β受容体ＩＩ（ＴＧＦ－βＲＩＩ）、可溶性ＴＧＦ－βＲＩＩＩ、可溶性ＮＫＧ２Ｄ、可溶性ＮＫｐ３０、可溶性ＮＫｐ４４、可溶性ＮＫｐ４６、可溶性ＤＮＡＭ－１、ｓｃＭＨＣＩ、ｓｃＭＨＣＩＩ、ｓｃＴＣＲ、可溶性ＣＤ１５５、または可溶性ＣＤ２８である、請求項１～７のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  15. 前記可溶性組織因子ドメインが、可溶性ヒト組織因子ドメインである、請求項１～１４のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  16. 前記一対の親和性ドメインが、ヒトＩＬ－１５受容体アルファ鎖（ＩＬ１５Ｒα）由来のｓｕｓｈｉドメイン、および可溶性ＩＬ－１５である、請求項１～１５のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチド。
  17. 請求項１～１６のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかを含む、組成物。
  18. 請求項１～１６のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかの有効量を含む、免疫細胞を刺激するための、または免疫細胞の増殖を誘導するもしくは増加させるための、医薬組成物。
  19. 請求項１～１６のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかの有効量を含む、免疫細胞のメモリーまたはメモリー様免疫細胞への分化を誘導するための医薬組成物。
  20. 請求項１～１６のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかの治療有効量を含む、がん細胞、感染細胞、または老化細胞の死滅を必要とする対象におけるがん細胞、感染細胞、または老化細胞を死滅させるための医薬組成物。
  21. 請求項１～１６のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかの治療有効量を含む、治療を必要とする対象を治療するための医薬組成物。
  22. 請求項１～１６のいずれか一項に記載の多鎖キメラポリペプチドのうちのいずれかをコードする、核酸。
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Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2019328567A1 (en) 2018-08-30 2021-02-25 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
CA3108951A1 (en) 2018-08-30 2020-03-05 HCW Biologics, Inc. Single-chain chimeric polypeptides and uses thereof
JP7397874B2 (ja) 2018-08-30 2023-12-13 エイチシーダブリュー バイオロジックス インコーポレイテッド 多鎖キメラポリペプチドおよびその使用
SG11202102777PA (en) 2018-09-27 2021-04-29 Xilio Development Inc Masked cytokine polypeptides
EP3987010A1 (en) * 2019-06-21 2022-04-27 HCW Biologics, Inc. Multi-chain chimeric polypeptides and uses thereof
IL295084A (en) * 2020-02-11 2022-09-01 Hcw Biologics Inc Chromatography resin and its uses
CA3184756A1 (en) * 2020-06-01 2021-12-09 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
WO2021247003A1 (en) * 2020-06-01 2021-12-09 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
USD986799S1 (en) * 2020-09-11 2023-05-23 Wind Craft Aviation Inc. Aircraft
CN114042154A (zh) * 2021-12-14 2022-02-15 澳门大学 一种药物组合在制备抗肿瘤的联合治疗药物中的应用
WO2023134716A1 (zh) * 2022-01-14 2023-07-20 盛禾(中国)生物制药有限公司 一种结合b7h3和nkp30的双特异性抗体及其应用
WO2023168363A1 (en) * 2022-03-02 2023-09-07 HCW Biologics, Inc. Method of treating pancreatic cancer
US20240075141A1 (en) 2022-03-18 2024-03-07 WUGEN, Inc. Chimeric receptor constructs for nk cells
WO2023183853A1 (en) 2022-03-22 2023-09-28 WUGEN, Inc. Hybrid promoters, vectors containing same and methods of use

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4361133B2 (ja) 1994-07-11 2009-11-11 ボード オブ リージェンツ， ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム 血管系の特異的凝固のための方法および組成物

Family Cites Families (101)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6749853B1 (en) 1992-03-05 2004-06-15 Board Of Regents, The University Of Texas System Combined methods and compositions for coagulation and tumor treatment
GB9324807D0 (en) 1993-12-03 1994-01-19 Cancer Res Campaign Tech Tumour antibody
US6117980A (en) 1997-02-21 2000-09-12 Genentech, Inc. Humanized anti-IL-8 monoclonal antibodies
US20030109680A1 (en) 2001-11-21 2003-06-12 Sunol Molecular Corporation Antibodies for inhibiting blood coagulation and methods of use thereof
US20060235209A9 (en) 1997-03-10 2006-10-19 Jin-An Jiao Use of anti-tissue factor antibodies for treating thromboses
JP2001206899A (ja) 1999-11-18 2001-07-31 Japan Tobacco Inc ＴＧＦ−βＩＩ型受容体に対するヒトモノクローナル抗体及びその医薬用途
AU2270101A (en) 1999-12-20 2001-07-03 Merck & Co., Inc. Pharmaceutical kit
WO2001083755A2 (en) 2000-04-28 2001-11-08 La Jolla Institute For Allergy And Immunology Human anti-cd40 antibodies and methods of making and using same
ES2649037T3 (es) 2000-12-12 2018-01-09 Medimmune, Llc Moléculas con semividas prolongadas, composiciones y usos de las mismas
PT1345969E (pt) 2000-12-26 2010-11-17 Inst Nat Sante Rech Med Anticorpos anti-cd28
US20040204481A1 (en) 2001-04-12 2004-10-14 Pnina Fishman Activation of natural killer cells by adenosine A3 receptor agonists
EP1476180A4 (en) 2001-08-13 2005-04-20 Univ Southern California INTERLEUKIN-2 MUTANTS WITH REDUCED TOXICITY
TWI338009B (en) 2001-10-29 2011-03-01 Genentech Inc Antibodies for inhibiting blood coagulation and methods of use thereof
AU2003239197A1 (en) 2002-06-07 2003-12-22 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Novel stable anti-cd22 antibodies
US9321832B2 (en) 2002-06-28 2016-04-26 Domantis Limited Ligand
KR20150021911A (ko) * 2002-07-15 2015-03-03 더 보드 오브 리전츠 오브 더 유니버시티 오브 텍사스 시스템 포스파티딜에탄올아민에 결합하는 펩타이드, 및 바이러스 감염 및 암을 치료하는데 있어서 이의 용도
WO2004020633A1 (ja) 2002-08-30 2004-03-11 Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute ヒト抗ヒトインターロイキン−６抗体及び該抗体フラグメント
EP1400534B1 (en) 2002-09-10 2015-10-28 Affimed GmbH Human CD3-specific antibody with immunosuppressive properties
WO2004056875A1 (en) 2002-12-23 2004-07-08 Wyeth Antibodies against pd-1 and uses therefor
CA2516832A1 (en) 2003-02-27 2004-09-10 Theravision Gmbh A molecule which binds cd80 and cd86
AU2004224277A1 (en) 2003-03-21 2004-10-07 Wyeth Treating immunological disorder using agonists of interleukin-21/ interleukin-21 receptor
US7618632B2 (en) 2003-05-23 2009-11-17 Wyeth Method of treating or ameliorating an immune cell associated pathology using GITR ligand antibodies
US9005613B2 (en) 2003-06-16 2015-04-14 Immunomedics, Inc. Anti-mucin antibodies for early detection and treatment of pancreatic cancer
NZ549040A (en) 2004-02-17 2009-07-31 Schering Corp Use for interleukin-33 (IL33) and the IL-33 receptor complex
US8133485B2 (en) 2004-03-30 2012-03-13 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Bi-specific complexes for targeting cells involved in allergic-type reactions, compositions and uses thereof
US7393833B2 (en) * 2005-03-09 2008-07-01 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Chimeric proteins with phosphatidylserine binding domains
CA2605507C (en) 2005-04-19 2016-06-28 Seattle Genetics, Inc. Humanized anti-cd70 binding agents and uses thereof
AU2006238930B2 (en) 2005-04-26 2010-12-23 Pfizer Inc. P-cadherin antibodies
JP2008543278A (ja) 2005-05-11 2008-12-04 フィロゲン エスピーエー フィブロネクチンｅｄ−ｂに対する抗体ｌ１９とインターロイキン１２との融合タンパク質
GB0510790D0 (en) 2005-05-26 2005-06-29 Syngenta Crop Protection Ag Anti-CD16 binding molecules
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
US8092804B2 (en) 2007-12-21 2012-01-10 Medimmune Limited Binding members for interleukin-4 receptor alpha (IL-4Rα)-173
CA2716882A1 (en) 2008-03-27 2009-10-01 Zymogenetics, Inc. Compositions and methods for inhibiting pdgfr-beta and vegf-a
EP3722310A1 (en) 2008-06-25 2020-10-14 Novartis AG Stable and soluble antibodies inhibiting vegf
US8822645B2 (en) 2008-07-08 2014-09-02 Abbvie Inc. Prostaglandin E2 dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
WO2010017103A2 (en) 2008-08-04 2010-02-11 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Servic Fully human anti-human nkg2d monoclonal antibodies
US8298533B2 (en) 2008-11-07 2012-10-30 Medimmune Limited Antibodies to IL-1R1
LT4209510T (lt) 2008-12-09 2024-03-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-pd-l1 antikūnai ir jų panaudojimas t ląstelių funkcijos pagerinimui
WO2011028811A2 (en) 2009-09-01 2011-03-10 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
DE102009045006A1 (de) 2009-09-25 2011-04-14 Technische Universität Dresden Anti-CD33 Antikörper und ihre Anwendung zum Immunotargeting bei der Behandlung von CD33-assoziierten Erkrankungen
CN102666875A (zh) 2009-10-15 2012-09-12 雅培制药有限公司 双重可变结构域免疫球蛋白及其用途
UY32979A (es) 2009-10-28 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
BR112012020101A2 (pt) 2010-02-11 2018-09-25 Alexion Pharma Inc método diagnósticos e terapêuticos usando anticorpos anti-cd200.
EP2560994B1 (en) 2010-04-08 2016-10-12 JN Biosciences LLC Antibodies to cd122
TWI629483B (zh) 2010-06-11 2018-07-11 協和醱酵麒麟有限公司 anti-TIM-3 antibody
CN103298834A (zh) 2010-08-03 2013-09-11 Abbvie公司 双重可变结构域免疫球蛋白及其用途
JP2012034668A (ja) 2010-08-12 2012-02-23 Tohoku Univ ヒト型化抗ｅｇｆｒ抗体リジン置換可変領域断片及びその利用
AU2011305476B2 (en) 2010-09-21 2016-12-01 Altor Bioscience Corporation Multimeric IL-15 soluble fusion molecules and methods of making and using same
AU2011316730B2 (en) 2010-10-11 2015-12-10 Abbvie Bahamas Ltd. Processes for purification of proteins
CN102153653B (zh) 2010-12-30 2012-08-15 厦门大学 肿瘤血管靶向多肽与组织因子的融合蛋白及其制备方法
GB201103955D0 (en) 2011-03-09 2011-04-20 Antitope Ltd Antibodies
KR20140138353A (ko) 2011-04-19 2014-12-03 메리맥 파마슈티컬즈, 인크. 단일특이적 및 이중특이적 항-igf-1r 및 항 erbb3 항체
SI2703486T1 (en) 2011-04-25 2018-05-31 Daiichi Sankyo Company, Limited ANTI-B7-H3 PROTITELO
MX347514B (es) 2011-05-25 2017-04-28 Innate Pharma Sa Anticuerpos anti-receptores tipo inmunoglobulina citoliticos (kir) para el tratamiento de trastornos inflamatorios.
US8753640B2 (en) 2011-05-31 2014-06-17 University Of Washington Through Its Center For Commercialization MIC-binding antibodies and methods of use thereof
WO2012170470A1 (en) 2011-06-06 2012-12-13 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Compositions and methods for detection and treatment of cancer
ES2677367T3 (es) 2011-06-22 2018-08-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anticuerpos anti-Axl y usos de los mismos
EP2537933A1 (en) * 2011-06-24 2012-12-26 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) An IL-15 and IL-15Ralpha sushi domain based immunocytokines
CA2954166A1 (en) 2011-11-11 2013-05-16 Rinat Neuroscience Corp. Antibodies specific for trop-2 and their uses
GB2513793B (en) 2012-01-26 2016-11-02 Nugen Tech Inc Compositions and methods for targeted nucleic acid sequence enrichment and high efficiency library generation
KR101535341B1 (ko) 2012-07-02 2015-07-13 한화케미칼 주식회사 Dll4에 특이적으로 결합하는 신규한 단일클론항체 및 이의 용도
KR20150038012A (ko) 2012-08-08 2015-04-08 로슈 글리카트 아게 인터루킨-10 융합 단백질 및 그의 용도
WO2014026054A2 (en) 2012-08-10 2014-02-13 University Of Southern California CD20 scFv-ELPs METHODS AND THERAPEUTICS
EP2890713A1 (en) 2012-08-28 2015-07-08 Institut Curie Cluster of differentiation 36 (cd36) as a therapeutic target for hiv infection
KR102408660B1 (ko) 2012-11-20 2022-06-15 사노피 항-ceacam5 항체 및 이의 용도
WO2014095808A1 (en) 2012-12-17 2014-06-26 Delenex Therapeutics Ag Antibodies against il-1 beta
EP2948475A2 (en) 2013-01-23 2015-12-02 AbbVie Inc. Methods and compositions for modulating an immune response
WO2014130635A1 (en) 2013-02-20 2014-08-28 Novartis Ag Effective targeting of primary human leukemia using anti-cd123 chimeric antigen receptor engineered t cells
US9790274B2 (en) 2013-03-14 2017-10-17 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Monoclonal antibodies targeting EpCAM for detection of prostate cancer lymph node metastases
US9701758B2 (en) 2013-05-24 2017-07-11 Board Of Regents, The University Of Texas System Anti-CD19 scFv (FMC63) polypeptide
JP2015030666A (ja) 2013-07-31 2015-02-16 学校法人順天堂 抗ヒトｃｄ２６モノクローナル抗体又はその抗原結合性断片
CN103709251B (zh) 2013-12-19 2016-04-13 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 全人源抗cd26抗体及其应用
KR102127408B1 (ko) 2014-01-29 2020-06-29 삼성전자주식회사 항 Her3 scFv 단편 및 이를 포함하는 항 c-Met/항 Her3 이중 특이 항체
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
FR3021970B1 (fr) 2014-06-06 2018-01-26 Universite Sciences Technologies Lille Anticorps dirige contre la galectine 9 et inhibiteur de l'activite suppressive des lymphocytes t regulateurs
TWI790593B (zh) 2014-08-19 2023-01-21 美商默沙東有限責任公司 抗tigit抗體
ES2774380T3 (es) 2014-08-29 2020-07-20 Hoffmann La Roche Politerapia de inmunocitocinas de variante de IL-2 dirigida a tumor y anticuerpos frente a PD-L1 humano
WO2016106221A1 (en) 2014-12-22 2016-06-30 The Rockefeller University Anti-mertk agonistic antibodies and uses thereof
EP3270937A4 (en) 2015-03-26 2018-09-12 The Trustees Of Dartmouth College Anti-mica antigen binding fragments, fusion molecules, cells which express and methods of using
EP3283523A1 (en) 2015-04-17 2018-02-21 Elsalys Biotech Anti-tyro3 antibodies and uses thereof
KR101778439B1 (ko) 2015-04-27 2017-09-14 울산대학교 산학협력단 자연살해세포 활성화제를 유효성분으로 함유하는 면역증강 및 항암활성증진용 조성물
KR20180037239A (ko) 2015-08-06 2018-04-11 에이전시 포 사이언스, 테크놀로지 앤드 리서치 Il2r 베타/공통 감마 체인 항체
RU2742953C2 (ru) 2015-09-11 2021-02-12 И'с АК Ко., Лтд. Композиция для лечения рака, объединяющая анти-cd26 антитело и другое противораковое средство
TWI747841B (zh) 2015-09-25 2021-12-01 美商建南德克公司 抗ｔｉｇｉｔ抗體及使用方法
CN108367071B (zh) 2015-11-13 2022-05-13 达纳-法伯癌症研究所有限公司 用于癌症免疫疗法的nkg2d-ig融合蛋白
MX2018010445A (es) 2016-03-01 2019-10-17 Yissum Res Dev Co Of Hebrew Univ Jerusalem Ltd Anticuerpos especificos del receptor de poliovirus humano (rvp).
WO2017189526A1 (en) 2016-04-25 2017-11-02 Musc Foundation For Research Development Activated cd26-high immune cells and cd26-negative immune cells and uses thereof
JP2019533449A (ja) 2016-10-21 2019-11-21 アルター・バイオサイエンス・コーポレーション 多量体ｉｌ−１５に基づく分子
AU2018205629A1 (en) 2017-01-03 2019-07-11 Bioatla Llc Protein therapeutics for treatment of senescent cells
WO2018158350A1 (en) 2017-02-28 2018-09-07 Affimed Gmbh Combination of an anti-cd16a antibody with a cytokine
CA3216726A1 (en) 2017-03-06 2018-09-13 Altor Bioscience Corporation Il-15-based fusions to il-12 and il-18
CN110475858A (zh) 2017-03-27 2019-11-19 河谷细胞有限公司 aNK和IL-12组合物和方法
AU2018323455B2 (en) 2017-08-28 2022-02-03 Altor Bioscience Llc IL-15-based fusions to IL-7 and IL-21
AU2019328567A1 (en) 2018-08-30 2021-02-25 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
JP7397874B2 (ja) 2018-08-30 2023-12-13 エイチシーダブリュー バイオロジックス インコーポレイテッド 多鎖キメラポリペプチドおよびその使用
CA3108951A1 (en) 2018-08-30 2020-03-05 HCW Biologics, Inc. Single-chain chimeric polypeptides and uses thereof
EP3987010A1 (en) 2019-06-21 2022-04-27 HCW Biologics, Inc. Multi-chain chimeric polypeptides and uses thereof
IL295084A (en) 2020-02-11 2022-09-01 Hcw Biologics Inc Chromatography resin and its uses
JP2023519107A (ja) 2020-02-11 2023-05-10 エイチシーダブリュー バイオロジックス インコーポレイテッド 制御性ｔ細胞を活性化する方法
US20210338724A1 (en) 2020-02-11 2021-11-04 HCW Biologics, Inc. Methods of treating age-related and inflammatory diseases
US20220073578A1 (en) 2020-06-01 2022-03-10 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4361133B2 (ja) 1994-07-11 2009-11-11 ボード オブ リージェンツ， ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム 血管系の特異的凝固のための方法および組成物

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Biochem. J.，2000年，vol.349，p.805-812
Protein Eng. Des. Sel.，2010年，vol.24, no.4，p.373-383

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