JP5683437B2 - 分子診断システム及び方法 - Google Patents
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Description
本発明は、抽出、増幅及び検出を一緒に行うことができる一体化された核酸検査カートリッジに関する。本発明は、核酸抽出のみ、又は抽出と増幅を組み合わせて行うための装置及び方法にも関する。さらに、本発明は、増幅と検出を組み合わせて行うための装置及び方法に関する。カートリッジには、光学的及び電気化学的検出法を可能にするなどの検知手段を装備することができ、標的核酸を試料から分離するために蝋又は吸収性フィルター抽出機構も装備し得る。カートリッジは、ポリメラーゼ連鎖反応、ローリングサークル増幅及び鎖置換増幅などの増幅の様々な方法を実施することが可能である。本発明は、選択される増幅方法に応じて、単一の修飾されたプライマー又は修飾されたプライマーの対を含む新規増幅方法及び試薬にも取り組む。さらに、本発明は、核酸検査中のアンプリコンからプライマーのための一体化された電気泳動分離を提供する。
核酸検査の応用は広範である。現在の商業的検査の多くは、クラミジア、淋病、肝炎及びヒト免疫不全性ウイルス(HIV)ウイルス負荷などの感染性疾患、嚢胞性繊維症などの遺伝病、血色素症などの凝固及び血液学因子、並びに乳癌遺伝子などの癌に関する。興味が持たれるその他の領域には、心血管疾患及び薬理ゲノム学と名付けられた薬物耐性スクリーニングが含まれる。現在、検査の大半は、操作が複雑な非携帯性装置を用いて、集中管理方式の研究室で行われている。現在、検査は、一般的には、アッセイを実施するために高度な技術を身に付けた個人を必要とする。その結果、特異的な核酸断片を含有すると疑われる試料の取得と、その有無の測定との間に要する時間は、しばしば、数時間、時には数日にさえ及ぶ。しかしながら、血液検査の他の種類と同様、医師及びその他の者は、より迅速に、ユーザーが使いやすい便利な形式で取得できる結果を必要とすることが多い。従って、核酸検査を迅速且つ便利に実施することができる携帯分析システムに対する必要性が存在する。核酸検査の様々な態様に関する従来技術の論述は、以下の部に記載されている。
特定の遺伝的な特徴の臨床徴候は、遺伝を基礎とする疾患の異なる種類又はクラスに応じて異なり得る。これは、SNP変異検出、遺伝子コピー変異及び遺伝子過剰発現変異などの遺伝的な特徴を測定するための様々なアプローチに結び付いた。例えば、血色素症、嚢胞性繊維症又は発癌遺伝子p53などの幾つかの疾病は、特異的なヌクレオチドにのみ影響を与える1つ又は数個の極めて特異的な突然変異を有する。血色素症を考えると、2つの特異的突然変異が存在する。本疾病の臨床徴候は、様々な組織内への鉄の蓄積であり、これは治療しなければ致死的となり得る。最も多い変異は、遺伝子中のヌクレオチド845におけるGからAへの転位(C282Yとも称される。)である。U.S. National Center for Biologic Informationのインターネットサイトで見ることができるOMIM:Online Mendelian Inheritance in Manデータベースを参照されたい。同じ血色素症遺伝子中に、次に多く見られる突然変異は、エキソン2中のCからGへの塩基転換(H63Dとしても知られる。)である。これらは、一塩基多型(SNP)として知られる。全ての個体は各遺伝子の2コピーを有するので、これらの遺伝子の可能な組み合わせは2つの野生型(ホモ接合野生型)、2つの変異された遺伝子(ホモ接合変異体)又は1つの野生型及び1つの変異遺伝子(ヘテロ接合)である。血色素症の場合には、ホモ接合変異体である個体は病気の状態を呈し、ヘテロ接合の個体は、ホモ接合野生型の個体に比べて、鉄のより高いレベルを蓄積するので、本疾病の幾つかの側面に対して感受性が高い場合があり得る。また、個体がその子孫へ疾病を伝達するかどうかを決定する目的で、個体がヘテロ接合であることを決定できることは有用であり得る。
細胞中に見出される核酸は、デオキシリボ核酸又はリボ核酸であり得、並びにゲノムDNA、染色体外DNA(例えば、プラスミド及びエピソーム)、ミトコンドリアDNA、メッセンジャーRNA及び転移RNAであり得る。核酸は、宿主にとって外来性であってもよく、感染性因子(例えば、細菌、ウイルス、真菌又は単細胞生物及び感染性多細胞生物(寄生生物)として細胞に混入し得る。最近、一塩基多型(SNP)、染色体の再編成及び外来遺伝子の挿入の同定のために、核酸の存在の検出及び分析が重要となっている。これらには、感染性ウイルス(例えば、HIV及びその他のレトロウイルス)、ジャンピング遺伝子(例えば、トランスポゾン)及び組換え的に操作された外来遺伝子含有生物(例えば、Roundup ReadyTM植物)から得られる核酸の同定が含まれる。
ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)は、組織試料の数多くの種類からのゲノムDNAの精製の標準的方法中に持ち込まれる多数のタンパク質及び他の夾雑物によって阻害される。血液からゲノムDNA試料中のPCR阻害剤を除去するために、フェノール、クロロホルム及びエーテルを用いた有機抽出又はカラムクロマトグラフィー又は勾配CsCl超遠心のさらなる工程を行い得ることが知られている。しかしながら、これらの工程は、時間、複雑さ及び費用を増加させる。この複雑さにより、核酸分析に有用な単純な使い捨てカートリッジへの導入が制約される。従って、核酸増幅過程のために使用される核酸試料中に見出される阻害剤を克服するための新しい単純な方法の開発が望まれる。
ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)は、幾つかの中核的特徴を示すDNAポリメラーゼ酵素の能力に基づいており、この能力には、3’−ヒドロキシル基を有するプライマー及びDNAテンプレート配列を使用する能力及びテンプレート鎖を用いてDNAの新たに合成された鎖を伸長する能力が含まれ、全て当業者に周知である。さらに、PCR反応において使用されるDNAポリメラーゼは、二本鎖DNAテンプレートを変性するために使用される高温(例えば90ないし99℃)に耐えることができなければならず、及びDNAプライマーがDNAテンプレートにハイブリダイズするより低い温度(例えば、40ないし60℃)で不活性でなければならない。さらに、ハイブリダイゼーション温度(例えば、60ないし80℃)に近い温度で最適なDNA合成を有すること。
増幅反応において使用するための合成オリゴヌクレオチドの設計に関しては、「Rychlik et al., (1989, Nucleic Acids Research, vol 17(21):8543−8551)」及び「Rychlik (1995, Molecular Biotechnology, vol 3:129−134)」は、DNAのインビトロ増幅用プライマーなどの、プローブ及びプライマーを設計するための選択基準及びコンピュータプログラムについて記載さしている。何れも、プライマーは、二次構造を生成すべきでなく、又は自己ハイブリダイゼーションを示すべきでないことを教示している。
核酸分析中の最後の工程のための慣用の検出方法が本分野において周知であり、放射能、比色分析、蛍光、蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)及び電気化学に基づくサンドイッチ型の捕捉方法が含まれる。例えば、共有米国特許第5,063,081号は、核酸検出用センサーを取り上げている。本センサーは、電極上に選択透過性の層及び固定化された捕捉オリゴヌクレオチドを有するタンパク質性のパターン化された層を有する。オリゴヌクレオチドは、ポリヌクレオチド、DNA、RNA、これらの活性な断片又はサブユニット又は一本鎖であり得る。核酸を固定化するためのカップリング手段は、固定化された核酸プローブが試料中の相補的標的配列に結合する方法とともに記載されている。
本発明の目的は、抽出、増幅及び検出を行うことができる一体化された核酸検査カートリッジを提供することである。
本開示は、増幅反応(例えば、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR))を実施するという主要な目的のために、全血からゲノムDNAを単離するための迅速で、簡易なプロトコールを示す。本方法は、従来技術の迅速DNA抽出プロトコールに認められたPCRの一般的な阻害剤(例えば、ヘモグロビン)の著しい減少を示すという利点を有している。血液試料において、キレート剤、ヘパリン、EDTA及びシトラートなどの添加された抗凝固試薬も、阻害剤として作用し得る。本方法は、これらの阻害剤及び天然に存在する他のキレート剤並びに核酸テンプレートを損傷し得る酵素及びタンパク質を除去する。本技術は、他の核酸材料源(例えば、口腔綿棒標本、尿及び他の組織試料)に対しても適用可能であり、他の増幅方法と一緒に使用することもできることに留意することが重要である。
体液中に見出される核酸を迅速に抽出及び単離するための別のアプローチが提供される。本アプローチは、フィルター材料の使用に基づく。開示されている装置及び方法は、化学的に含浸された固体基材技術を小型ろ過装置に結合させることによって、既存の技術を著しく改善する。小容量の体液から得られるゲノムDNAの増幅可能量を抽出するための時間も都合よく最小化される。本装置は個別の分離装置として使用し得るが、DNA単離、増幅及び場合により検出のための使い捨て可能なカートリッジ装置中に組み込むのに特に適している。
本発明において、電気化学的検出が好ましい場合、核酸増幅工程の主な目的は、標的分子から検出可能な核酸の約0.01pM濃度を生成することであるが、これは、酵素的増幅及び電気化学的検出を用いたサンドイッチアッセイのより低い検出限界の範囲にあることが見出されているからである。断片の所望される1pM濃度は、アボガドロ数(1モル=6×10(23)分子)に基づいており、ここに、1pmolは、6×10(23)×10(−12)又は約10(12)分子に等しい。公知のように、血液1μLがDNA約5×10(3)分子を含有する場合、1mL(合理的に採取可能な試料容量である。)は、5×10(6)分子又は概ね約10(7)分子を含有する。血液1mL中のDNAの量からDNAの0.01pmolへ移行するためには、約10(3)倍の増幅が必要である。これは、幾つかの周知の増幅技術を用いて確実に達成することができる。増幅の程度を決定するために、様々な試料の種類及び試料の容積に対して類似の計算を実行することは、当業者に自明である。
ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)は、PCR反応に対して選択されたプライマー配列に基づいて、標的DNAの領域を特異的に増幅できることが周知である。この材料を処理することに伴う困難は、均一に、ハイブリダイゼーションに基づいて、シグナルの検出を試みることに存する。本質的に、PCR反応は、平滑末端化された2本鎖の産物を生成する。しかしながら、ある種の熱安定性DNAポリメラーゼは、ポリAポリメラーゼ活性を有しており、これは、さらなるAヌクレオチドを追加するために使用することが可能である。これは、クローニングの目的で商業的に使用されてきたが、単一のヌクレオチドの突出は、ハイブリダイゼーションについては非効率である。ハイブリダイゼーションのためにPCR反応を使用することを試みるための別のアプローチとして、制限エンドヌクレアーゼ酵素に対する認識配列がPCRプライマー中に設計されてきた。しかしながら、典型的には短い突出を生成するに過ぎない追加の酵素を必要とするので、これには限界がある。多くの二本鎖種と同様、PCR産物は、均一な反応でのハイブリダイゼーションに適していない。この制約を克服するために、他方のプライマーに対して一方のプライマーの限定量を使用する戦略が考案されている。別の方法は、バクテリオファージRNAポリメラーゼ(例えば、SP6)に対するプロモーター領域を有することである。プライマーの1つを限定することには、増幅の効率が低減するという欠点がある。バクテリオファージRNAポリメラーゼを用いたRNAの生成はさらなる試薬を必要とし、検出用の壊れやすいRNA種を生成する。
非PCR核酸増幅アッセイを実施するために、同じ検出カートリッジを使用する本方法の別の実施形態を使用することができる。ローリングサークル増幅(RCA)の模式図が図10に示されており、鎖置換増幅(SDA)の模式図が図11に示されている。成分要素は、図7(a)に示されているようにPCRに対して記載されているものに対応することに留意されたい。両アッセイは、図25において、2つの異なる方法を用いて示されているように、標的から作製される3’−OH部分を有する短いssDNA断片(308及び310)を必要とする。図25(a)は、現象惹起法(triggering event method)(例えば、SNPアーゼ及びサイクリングプローブ)を示しており、図25(b)はInvaderTM法を示している。
完了したPCR反応から、未使用のPCRプライマーを除去するための幾つかの新規アプローチについて記載する。迅速なPCR反応(すなわち、約15分未満で増幅が完了する。)を取り込むシステムを開発することを求める結果、プライマー濃度を増加させる必要があることが明らかとなった。しかしながら、これは、通例、検出工程において増加したプライマーバックグラウンドを生じさせ、捕捉オリゴヌクレオチド上でのシグナル生成を低減させ得る。精製されたアンプリコン及び増加した非標識標的オリゴヌクレオチド(とりわけ、標識された対照オリゴヌクレオチド)を用いた実験は、これらのバックグラウンドオリゴヌクレオチドがシグナルを除去又は低減できることを示した。1つのアプローチ又は以下に記載されているアプローチの組み合わせを、バックグラウンドシグナルを低減するために使用することができる。
記載されている第一のアプローチは電気泳動分離である。それらの分子量に基づいて核酸を分離できることは周知である。PCRアンプリコンとオリゴヌクレオチドプライマーとのサイズの相違を活用することによって、アンプリコンを迅速に精製することが可能である。好ましい実施形態において、電気泳動モジュールは、使い捨て装置中に取り込まれる。例えば、電気泳動精製モジュールは、図12に示されているように、精製を実施するのに便利な位置に、装置中のチャンネルに沿った地点に置くことができる。本装置は、装置のチャンネル中の電極50及び隣接する空洞52中の第二の電極51から構成される。各電極は、電気的接触パッド53に接続される。装置中のチャンネル54は、より初期の段階(PCR増幅工程)からより後期の段階(例えば、検出工程)へ、それを通じて流体が移動する手段を提供する。
通常、PCR用途の場合、二次構造の量を減少することは、標的の非特異的で、不良なプライミングを減少するのに役立つので、合成オリゴヌクレオチド配列を設計するときには望ましいアプローチである。Hfe1遺伝子に対して相補的であり、5塩基対のアデノシドスペーサー配列を有し、及び遊離の一本鎖領域を有するオリゴヌクレオチドの予想される折り畳み構造が図15に示されている。図15の配列は、
プライマーを除去するために、2つの酵素的アプローチが考案されており、これらは、取り込まれなかったオリゴヌクレオチド上のTdT尾部及び取り込まれなかったオリゴヌクレオチドの分解に関する。PCR反応混合物内には、iSp18プライマーを有する上記の例では一本鎖領域有するアンプリコン及び取り込まれなかった合成オリゴヌクレオチドという2種類の構造が存在する。アンプリコン上のプライマーは、伸長する5’領域のみを有するのに対して、取り込まれなかったプライマーは遊離の5’及び3’一本鎖末端を有する。3’末端におけるこれらの差に特異的な酵素を用いて、これらの分子を識別して除去するための戦略が開発された。
上記PCR反応では、2つの異なる一本鎖領域を生成する2つのプライマーを含有するアンプリコンが生成される。シグナルを生成するために、2つの一本鎖領域間の架橋である新たに増幅された領域の他に、両方の一本鎖領域が必要である。
核酸分析を実施するための一体化された使い捨て装置及び読み取り機器とのその相互作用が、図6に幾何学的に示されている。これは、標的核酸を含有すると疑われる試料を受容するための入口ポート101を有する収容部100を含む。入口ポートは、前記標的核酸を抽出するための試薬を有するチャンバー102に通じる。試薬103は、チャンバーの壁上に被覆することができる。チャンバーは、ビーズ104、例えば、核酸を結合するのに適したコーティングを有する磁気ビーズを含有し得る。好ましくは、チャンバーは、融解して、伝導路106への出口の領域中に連続した蝋層105を形成することができる蝋も含有する。好ましい磁気ビーズが前記標的核酸と会合したら、蝋層を通じて伝導路中にこれらを引き付けるために磁場を付与する。付与されるこの磁場は、試料からの核酸の抽出を促進するために、チャンバー中で振幅させてもよいことに留意されたい。場合により、抽出チャンバーを出る前に、洗浄流体をビーズに付与してもよい。洗浄流体チャンバー122は、入口ポートと抽出チャンバーの間に接続される。さらに、試料及び洗浄流体廃棄チャンバー123は、入口ポートに関して、抽出チャンバーの遠位末端に接続される。作動時には、抽出工程の後、磁気手段によってビーズはチャンバーの壁上に保持され、次いで、洗浄流体は、チャンバー122からチャンバー102を通じて、チャンバー123中に送られる。これにより、望ましくない試料材料が排除され、チャンバー102はビーズ及び主として洗浄流体を含有する状態になる。機器200はチャンバー122に対して整列された作動手段211を含有し、チャンバーから洗浄流体を追放するために、柔軟な隔壁124に対する力を付与する。
使い捨てカートリッジにおける検出の好ましい方法は電気化学であるが、蛍光、発光、比色、温度測定、光ファイバー、光導波路、表面音波、エバネセント波、プラスモン共鳴などのその他の検知方法を使用することが可能である。
機器200とともに、使い捨て装置100を用いたアッセイサイクルの好ましい実施形態は、以下のとおりである。約10μLの血液試料が入口ポート101に添加され、毛管作用により、抽出チャンバー102の中へ引き込まれる。次いで、入口ポート閉鎖要素117を使用して、入口ポートを密封する。カオトロピック剤、ドデシル硫酸リチウム及びジチオスレイトール及びキレート剤(エチレンジアミン四酢酸)を含み、チャンバーの壁上に被覆されている試薬103は、血液試料中に溶解し、細胞の溶解を引き起こし、細胞内から得られた核酸が開放され、磁気ビーズ104上のカルボキシラートコーティング上に吸着される。ビーズを撹拌してチャンバー内での混合を促進し、抽出の速度を加速するために、磁場を使用することができる。抽出プロセスの本工程は、一般的には、約0.3ないし1分未満を要する。磁場が配備される場合には、これは、機器の自動制御下にあり、検査サイクルを制御する内蔵されたアルゴリズムによって決定される。一旦、この工程が完了したら、機器は、抽出チャンバーの側面に磁気粒子を保持する磁場を配備する。洗浄流体チャンバー122からの洗浄流体は、次いで、抽出チャンバー中に空気圧で強制的に送り込まれ、洗浄流体廃棄チャンバー123中に内容物を流す。洗浄流体廃棄チャンバーは排気口146を有すること、及びこの工程の間、機器は入口118を増幅チャンバーに密封させ、従って、廃棄流体は伝導路106に進入せずに、廃棄チャンバー中に誘導されることに留意されたい。本工程は、約30秒を要する。好ましい実施形態における洗浄液は脱イオン水であり、抽出チャンバーを通して通過する洗浄流体の容積は20ないし30μLである。図23に示されているように、増幅チャンバーの1つの壁を形成するシリコンチップは、抽出チャンバーの1つの壁も形成し、従って、抽出過程は制御された温度で行われ得ることにも留意されたい。好ましい実施形態において、血液からの核酸抽出は室温で行われる。
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Claims (6)
- 核酸の抽出、増幅及び検出を実施するための使い捨て装置であり、
標的核酸を含有することが疑われる抽出された試料を、増幅チャンバーに取り付けられた第一の伝導路中に受容するための入口ポートを含む収容部を有する増幅および検出コンポーネントであって、
前記増幅チャンバーはまた増幅試薬保持チャンバーに取り付けられており、前記試薬は増幅された標的中に検出可能な標識を取り込ませることが可能であり、
前記収容部は、試料及び増幅試薬を増幅チャンバー中に移動させることができる手段を有し、前記増幅チャンバーはまた、温度を調節して標的核酸の増幅に適した条件を実施するための、加熱手段及び温度検知手段を有し、
前記増幅チャンバーは、固定化された捕捉オリゴヌクレオチドを含む検知領域、前記検出可能な標識を結合することができる溶解可能なシグナル発生試薬及び電気化学的センサーを含有する第二の伝導路へ取り付けられており、
前記収容部は、増幅された標的を検知領域へと移動させて、増幅された標的の捕捉オリゴヌクレオチドへの及び前記シグナル発生試薬の前記検出可能な標識への結合を可能とするための手段を含有し、
前記第二の伝導路は、検出試薬を第二の伝導路中に送達して、検知領域から未捕捉の増幅された標的及び未結合のシグナル発生試薬を排除することが可能な検出試薬保持チャンバーに取り付けられており、
ここで検出試薬は、標識へ結合されたシグナル発生試薬と反応することができ及びセンサーにおいてシグナルを発生する、増幅および検出コンポーネントと;
標的核酸を含有すると疑われる試料を受容するためのチャンバーを含む核酸抽出コンポーネントであって、前記チャンバーは、前記標的核酸を前記チャンバー中に位置した磁気ビーズ上に抽出するためのキレート剤及びカオトロピック剤を含む試薬を含有し、
前記チャンバーが、前記チャンバー及び伝導路の領域中に連続した蝋層を含有し、
ここで、前記標的核酸を伴う前記磁気ビーズが、付与される磁場を用いて、前記蝋層を通じて前記伝導路中に通過することが可能である、核酸抽出コンポーネントを備え;
前記増幅および検出コンポーネントの前記収容部は、さらに、前記増幅および検出コンポーネントの前記入口ポートが前記核酸抽出コンポーネント上の出口ポートと合体(matting with)して前記磁気ビーズおよび標的核酸を含有することが疑われる抽出された核酸を前記核酸抽出コンポーネントから前記増幅および検出コンポーネントへ移動させることができるように前記核酸抽出コンポーネント上の対応する合体機構と合体するように構成された1つ又はそれ以上の開口部を含む、装置。 - 前記磁気ビーズが前記伝導路中に保持されて、洗浄流体が洗浄流体保持チャンバーから前記ビーズ上を経て廃棄チャンバーへと通過して、前記ビーズの洗浄を実行することができる、請求項1に記載の使い捨て装置。
- 前記入口ポートが核酸抽出装置と合体して、抽出された標的核酸を使い捨て装置中に移動させることが可能であり、前記抽出装置が、試料から開放された核酸を吸収することができ、及び75℃を上回る温度で水溶液に曝露されたときに前記核酸を脱離させて前記移動を許容することができるフィルターを含有する収容部を含む、請求項1に記載の使い捨て装置。
- 核酸の抽出、増幅及び検出を実施するための使い捨て装置であり、
1つ又はそれ以上の開口部を有する収容部と、
標的核酸を含有することが疑われる抽出された試料を、増幅チャンバーに取り付けられた第一の伝導路中に受容するための入口ポートと、
前記増幅チャンバーに取り付けられた増幅試薬保持チャンバーであって、増幅された標的中に検出可能な標識を取り込ませることが可能である増幅試薬を含む、増幅試薬保持チャンバーと、
前記抽出された試料及び前記増幅試薬を前記増幅チャンバー中に移動させることができる手段と、
前記増幅チャンバーの温度を調節して、前記標的核酸の増幅に適した条件を実施するための加熱手段及び温度検知手段と、
前記増幅チャンバーに取り付けられ、かつ、固定化された捕捉オリゴヌクレオチドを含む検知領域を含有する第二の伝導路と、
前記増幅された標的を前記検知領域へと移動させて、前記捕捉オリゴヌクレオチドへの前記増幅された標的の結合を可能とする手段と、
前記第二の伝導路に取り付けられ、かつ、洗浄流体を前記第二の伝導路中に送達して捕捉されていない増幅された標的を前記検知領域から排除し、前記検知領域中に保持された部分の光学的検知を可能とする洗浄流体保持チャンバー
を含む増幅および検出コンポーネント、並びに
標的核酸を含有すると疑われる試料を受容するためのチャンバーと、
前記チャンバー中に位置した磁気ビーズと、
前記チャンバーの領域中の連続した蝋層と、
前記チャンバーに接続された伝導路と、
出口ポートと、
前記増幅および検出コンポーネントの前記収容部における対応する前記1つ又はそれ以上の開口部と合体(matting with)するように構成された合体機構
を含む核酸抽出コンポーネントを備え、
前記核酸抽出コンポーネントの前記チャンバーは、前記標的核酸を前記磁気ビーズ上に抽出するためのキレート剤及びカオトロピック剤を含む試薬を含有し、
前記標的核酸を伴う前記磁気ビーズが、付与される磁場を用いて、前記連続した蝋層を通じて前記伝導路中に通過するように構成され、
前記増幅および検出コンポーネントの前記収容部における1つ又はそれ以上の開口部は、前記増幅および検出コンポーネントの前記入口ポートが前記核酸抽出コンポーネント上の出口ポートと合体して前記磁気ビーズ及び標的核酸を含有することが疑われる抽出された試料を前記核酸抽出コンポーネントから前記増幅および検出コンポーネントに移動させることができるように前記核酸抽出コンポーネント上の対応する前記合体機構と合体するように構成されている、装置。 - 前記磁気ビーズが前記伝導路中に保持されて、洗浄流体が洗浄流体保持チャンバーから前記ビーズ上を経て廃棄チャンバーへと通過して、前記ビーズの洗浄を実行することができる、請求項4に記載の使い捨て装置。
- 前記入口ポートが核酸抽出装置と合体して、抽出された標的核酸を使い捨て装置中に移動させることが可能であり、前記抽出装置が、試料から開放された核酸を吸収することができ、及び75℃を上回る温度で水溶液に曝露されたときに前記核酸を脱離させて前記移動を許容することができるフィルターを含有する収容部を含む、請求項4に記載の使い捨て装置。
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