JP5164904B2 - ハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物の低褐変化酵素処理物およびその調製方法 - Google Patents
ハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物の低褐変化酵素処理物およびその調製方法 Download PDFInfo
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Description
(I-1)ハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物を40〜600Mpaの高圧条件下で酵素処理することを特徴とする、褐変化が抑制されてなるハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物の酵素処理物の調製方法。
(I-2)酵素がタンパク質分解酵素、好ましくはエンドペプチダーゼおよびエキソペプチダーゼからなる群から選択される少なくとも1つのペプチダーゼである(I-1)記載の調製方法。
(II-1)ハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物を40〜600Mpaの高圧条件下で酵素処理することによって得られるハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物の酵素処理物であって、常圧下で酵素処理したものより褐変化が抑制されてなることを特徴とする、上記酵素処理物。
(II-2)酵素がタンパク質分解酵素、好ましくはエンドペプチダーゼおよびエキソペプチダーゼからなる群から選択される少なくとも1つのペプチダーゼである(II-1)記載の酵素処理物。
(III-1)ハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物の酵素処理を40〜600Mpaの高圧条件下で行うことを特徴とする、ハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物の酵素処理物の褐変抑制方法。
(III-2)酵素がタンパク質分解酵素、好ましくはエンドペプチダーゼおよびエキソペプチダーゼからなる群から選択される少なくとも1つのペプチダーゼである(III-1)記載の褐変抑制方法。
本発明のハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物の酵素処理物は、通常実施される常圧条件下での酵素処理において生じる褐変化(褐色物質の生成)が抑制されてなることを特徴とする。
本発明のハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物の酵素処理物の褐変抑制方法は、ハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物に対するタンパク質分解酵素処理を、前述する40〜600MPaの高圧条件下で行うことによって実施することができる。
<実験方法>
(1)褐変抑制効果の評価
下記の方法で調製した実施例1〜5および比較例1〜5の各試料について、酵素処理前と酵素処理後に色調を測定し、酵素処理前と処理後との色調変化(色差)を判定することによって、酵素処理による褐変化とその抑制効果を評価した。
(1-1)測定装置
紫外可視吸光度計:日本分光 V−660
積分球ユニット:日本分光 PSC-718
使用ソフト:日本分光 色彩計算プログラム。
光源:重水素ランプ、ハロゲンランプ
測定波長:800-200 nm
データ間隔:1 nm
なお、試料が懸濁している場合には反射率を、清澄な場合には透過率を測定した。
酵素処理前と酵素処理後の各溶液について、紫外可視吸光光度計(日本分光V-660+積分球ユニットPSC-718)にて紫外・可視スペクトル(180〜800nm)測定し、付属のソフトウェア(色彩計算プログラム)にてL*a*b*表色系に変換する(計算式の出典JIS Z8729−2004参照)。
得られた試料(常圧下での酵素処理物、高圧下での酵素処理物)について、酵素処理前と処理後のタンパク質濃度(mg/ml)を、BCA(登録商標) Protein Assay Kit (PIERCE社製)を用いて測定した。
実施例1、2、3および4
ハチノコ粉末1000mgをビーカーに量りとり、イオン交換水5mlを加えて均一になるまで攪拌してハチノコ粉末の水分散液を調製した。これにトリプシン(Pancreatic Trypsin Novo:novozyme社製)(実施例1)またはパパイン(パパインW-40:アマノエンザイム社製)(実施例2)またはペプチダーゼ(Sternzym BP 5200:SternEnzym社製、アクチナーゼAS:科研製薬)(実施例3、4)100mgを加え、攪拌しながら混合した。これを耐圧性のビニルパックに入れて、シーラー処理して封印し、40〜600Mpa(表1〜4参照)、50℃の条件下で24時間反応させて、酵素処理を行った。酵素処理後、ビニルパック内容物の温度を80℃に上げて酵素を失活させた後、水冷した。
ハチノコ粉末1000mgをビーカーに量りとり、イオン交換水5mlを加えて均一になるまで攪拌してハチノコ粉末の水分散液を調製した。これにトリプシン(Pancreatic Trypsin Novo:novozyme社製)(比較例1)またはパパイン(パパインW-40:アマノエンザイム社製)(比較例2)、またはペプチダーゼ(Sternzym BP 5200:SternEnzym社製、アクチナーゼAS:科研製薬)(比較例3、4)100mgを加え、攪拌しながら混合した。これを15mL容量の遠沈管にいれて、常圧(1bar、0.1MPa)、50℃の条件下で24時間反応させて、酵素処理を行った。酵素処理後、遠沈管内容物の温度を80℃に上げて酵素を失活させた後、水冷した。
生ローヤルゼリー5000mgをビーカーに量りとり、イオン交換水2mlを加えて均一になるまで攪拌してローヤルゼリーの水溶液を調製した。これに2M NaOH水溶液を加えてローヤルゼリーの水溶液pHを、使用する酵素に応じてpH6.8(トリプシン)、pH6.5(パパイン)、pH7.1(Sternzym BP 5200)、またはpH8.8(アクチナーゼAS)にそれぞれ調整した。次に、トリプシン(Pancreatic Trypsin Novo:novozyme社製)(実施例5)、パパイン(パパインW-40:アマノエンザイム社製)(実施例6)またはペプチダーゼ(Sternzym BP 5200:SternEnzym社製、アクチナーゼAS:科研製薬)(実施例7、8)50mgをそれぞれイオン交換水1mlに溶かした溶液を、上記ローヤルゼリーの水溶液に加え、さらにイオン交換水を全量が10mlになるように加えた。これを耐圧性のビニルパックに入れて、シーラー処理して封印し、40〜600Mpa(表5〜8参照)、50℃の条件下で24時間反応させて、酵素処理を行った。酵素処理後、ビニルパック内容物の温度を80℃に上げて酵素を失活させた後、水冷した。
生ローヤルゼリー5000mgをビーカーに量りとり、イオン交換水2mlを加えて均一になるまで攪拌してローヤルゼリーの水溶液を調製した。これに2M NaOH水溶液を加えてローヤルゼリーの水溶液pHを、上記実施例5〜8と同様に、使用する酵素に応じて各種のpHに調整した。次に、トリプシン(Pancreatic Trypsin Novo:novozyme社製)(比較例5)、パパイン(パパインW-40:アマノエンザイム社製)(比較例6)またはペプチダーゼ(Sternzym BP 5200:SternEnzym社製、アクチナーゼAS:科研製薬)(比較例7、8)50mgをイオン交換水1mlに溶かした溶液を、上記ローヤルゼリーの水溶液に加え、さらにイオン交換水を全量が10mlになるように加えた。これを15mL容量の遠沈管にいれて、常圧(1bar、0.1MPa)、50℃の条件下で24時間反応させて、酵素処理を行った。酵素処理後、遠沈管内容物の温度を80℃に上げて酵素を失活させた後、水冷した。
(1)褐変抑制効果の評価
実施例1と比較例1の試料について色調の変化を比較した結果を表1、実施例2と比較例2の試料について色調の変化を比較した結果を表2、実施例3と比較例3の試料について色調の変化を比較した結果を表3、実施例4と比較例4の試料について色調の変化を比較した結果を表4、実施例5と比較例5の試料について色調の変化を比較した結果を表5、実施例6と比較例6の試料について色調の変化を比較した結果を表6、実施例7と比較例7の試料について色調の変化を比較した結果を表7、実施例8と比較例8の試料について色調の変化を比較した結果を表8にそれぞれ示す。また、各表には、各高圧条件下での酵素処理による褐変抑制率(%)をあわせて示す。
酵素処理前(未処理)のタンパク質濃度(mg/ml)と酵素処理後(常圧下、高圧下)のタンパク質濃度(mg/ml)を測定した結果を表9に示す。なお、表中、「\」は測定していないことを意味する。
Claims (1)
- ハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物のタンパク質分解酵素処理を40〜600MPaの高圧条件下で行うことを特徴とする、ハチノコ、ローヤルゼリーまたはそれらの抽出物の酵素処理物の褐変抑制方法。
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