JP4852662B2 - 動物プランクトン餌料用セレン含有単細胞微細藻類とそれを使用したセレン含有動物プランクトンの培養方法 - Google Patents
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Description
及びそのセレン含有量が、藻体乾燥物重量当たり6.0〜1500μg/100gである餌料用単細胞微細藻類。
及びその単細胞微細藻類が、淡水産クロレラ及びナンノクロロプシスである餌料用単細胞微細藻類。
及び対象となる動物プランクトンが、魚類種苗生産の初期餌料として不可欠な、ワムシ類(Rotifer)及びミジンコ類である餌料用単細胞微細藻類。
及びセレン含有単細胞微細藻類を動物プランクトンの餌料として使用し、生産された動物プランクトンのセレン含有量が乾燥物重量当たり10〜500μg/100gである動物プランクトンの培養方法。
動物プランクトンの培養方法に制限はない。例えば、ワムシを海水に10個体/mlから500個体/mlの密度で接種し、このワムシ培養液を10℃から35℃に保って通気を行い、セレンを強化した微細藻類を与えて1日から10日程度培養することによって、ワムシを300個体/mlから2000個体/mlの密度まで増殖させることができる。微細藻類は死細胞よりも生きた細胞を用いる方が好ましい。また、微細藻類とパン酵母やその他の餌料を併用して与えることも可能である。微細藻類の給餌方法は、培養開始時に一度に与えることもできるが、毎日ワムシ密度を測定し、ワムシが1日に摂餌できる量の微細藻類を毎日与える方が好ましい。
セレン含有生クロレラを餌料としたセレン含有ワムシの生産
10Lジャーファーメンターを用いて、セレン含有生クロレラの培養を行った。当社保有のクロレラ株(Chlorella vulgaris)スラントから暗培養基礎培地の坂口フラスコに無菌的に植菌して、28℃で前培養を行った。グルコースの資化終了後に10Lジャーファーメンターに植え継ぎ、セレン強化クロレラの無菌培養を行った。培養条件は、培地液量6L、温度36℃、通気3L/分、pH7.0、撹拌速度300rpm/分とした。培地組成は、グルコース80g/L、リン酸カリウム2.0g/L,硫酸マグネシウム2.0g/L、Fe・EDTA4.8mg/L、微量ミネラルA5(×10)1.08ml/L、ビタミンB12 2.4mg/L、尿素6.0g/Lの基礎培地に、亜セレン酸ナトリウムを5.4μg/L、18μg/L、54μg/L、180μg/L、540μg/L、の濃度で各々加えたものを用いて、培養を開始した。増殖中に高度不飽和脂肪酸(ドコサヘキサエン酸60%濃度)1.5g/Lを各々添加し、グルコースの資化終了後に純水で3回水洗を行い、セレン含有量6〜570μg/100g(乾燥物重量当たり)の範囲で生クロレラ藻体を各々200g(乾燥物換算)得た。
図3の結果より、従来法と同様の方法で生産された生クロレラ(セレン濃度:検出限界以下)で培養したワムシ中のセレン含量は、検出限界(<5μg/100g)以下であった。それに対して、セレン含有生クロレラ(セレン濃度 6〜570μg/100g)で培養したワムシ中のセレン含量は、生クロレラ中のセレン濃度の増加に伴って増加し、最大で200μg/100g(乾燥物当り)の生きたワムシを生産できた。
セレン含有生ナンノクロロプシスを餌料としたセレン含有ミジンコの生産
30L容扁平培養槽を用いて、セレン含有ナンノクロロプシスの培養を行った。当社保有のナンノクロロプシス(Nannochloropsis)のスラントから明培養基礎培地入りの100ml容小型扁平フラスコに無菌的に植菌して、80mlの明培養基礎培地、5%(v/v)CO2通気攪拌、照度2000ルクス、水温20℃で2週間前培養を行った。藻体濃度が2g/L(乾燥物当たり)に達した時点で30L扁平培養槽に植え継ぎ、セレン強化培養を行った。培養条件は、培地液量25L、5%CO2通気撹拌3L/分、照度2500ルクス、水温20℃温度とした。培地組成は、硝酸カリウム0.5g/L、リン酸水素ナトリウム0.1g/L、Fe・EDTA4.15mg/L、微量ミネラルA5(×10)0.1ml/Lの基礎培地に、亜セレン酸ナトリウム50μg/Lを希釈海水(塩分1%w/w)に溶解させたものを用いて、培養を開始した。4週間培養を行った後に収穫して、純水で3回水洗を行い、セレン含量480μg/100g(乾燥物当り)の生きたナンノクロロプシス藻体20g(乾燥物換算)を得た。
セレン含有ワムシを使ったヒラメ仔魚の飼育試験
セレン含有生クロレラを餌料として生産したセレン含有ワムシを用いて、ヒラメ(Paralichthys olivacens)仔魚の飼育試験を実施した。飼育の試験条件は各600L容円型ポリカーボネイト水槽に、500Lのろ過海水を投入して、換水率100%/日、水温17〜20℃、通気500ml/分とし、孵化仔魚(体長2.1±0.05mm*1)を1.1×104尾収容した。試験餌料として、セレン含有ワムシ(セレン含量100μg/100g乾燥重量当たり)を用いて飼育を開始し、飼育水中のワムシ密度が6〜12個体/mlとなるように1日2回給餌を行い、合計2水槽(a、b)で17日間飼育試験を行った。その結果、試験期間中のヒラメ仔魚の摂餌は旺盛で、順調な成育がみられた。
従来法による生クロレラで培養したワムシを使ったヒラメ仔魚の飼育試験
従来の生クロレラを餌料として生産したワムシ(セレン濃度<5μg/100g:検出限界以下)を用いて、ヒラメ仔魚の飼育試験を実施した。飼育の環境条件及び給餌条件は、上記と同様とし、合計2水槽(c、d)で17日間飼育試験を行った。その結果、実施例3の場合とほぼ同様の成育がみられたが、飼育期間中の斃死個体数は増加した。
*2:網による30秒間空中露出後の生残率(n=50)
表1の各17日間のヒラメ仔魚飼育試験結果より、従来法で生産したワムシ給餌区に比べてセレン含有ワムシ給餌区は、体長に大きな差はみられなかったものの、生残率及び活力において優れていた。これは、ワムシ給餌期のヒラメ孵化仔魚にとってワムシ餌料のセレン強化が、その生残率や活力において大きく影響を与えることを示す。
Claims (4)
- 動物プランクトンの餌料として用いられる餌料用単細胞微細藻類において、
前記動物プランクトンはワムシであり、前記餌料用単細胞微細藻類は淡水産クロレラであり、該クロレラに当該クロレラ乾燥物100g当たり6μg以上200μg以下のセレンを含有させてあり、生の状態であることを特徴とする餌料用単細胞微細藻類。 - 仔魚の餌料として用いられるワムシに給餌するための餌料用単細胞微細藻類を生産する方法において、
前記餌料用単細胞微細藻類として淡水産クロレラを用い、所定セレン濃度の培養液を調製し、該培養液で前記クロレラを培養することによって、該クロレラに当該クロレラ乾燥物100g当たり6μg以上200μg以下のセレンを含有させ、生の状態を保つことを特徴とする餌料用単細胞微細藻類の生産方法。 - クロレラ乾燥物100g当たりに含有させるセレンの量(μg)に0.43±0.01を乗じて得られる値のセレン濃度(μg/L)の培養液を調製し、該培養液でクロレラを培養する請求項2記載の餌料用単細胞微細藻類の生産方法。
- セレン含有単細胞微細藻類を動物プランクトンの餌料として使用し、生産された動物プランクトンのセレン含有量が乾燥物重量当たり10〜500μg/100gであることを特徴とする動物プランクトンの培養方法。
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