CN110923146A - 一种富含多不饱和脂肪酸和必需氨基酸的小球藻及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及海洋微生物的应用技术，具体涉及一种海洋类小球藻及利用其提高水产品抗氧化性能和轮虫生长繁殖力与营养价值的方法。已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:M2016793。保藏日期为2016年12月30日。所述类小球藻在水产养殖中的应用。采用本发明的方法轮虫繁殖速率提高1.5倍，获得的轮虫的多不饱和脂肪酸和必须氨基酸含量最高可提高100%，水产品的抗氧化性能可提升100%。整套工艺操作方便，成本低。以富含生物活性物质的微藻为纯天然生物制品，通过食物链传递保障了水产品的天然性，可提高饲喂水产动物鱼类、虾类、蟹类以及其它水产动物育苗的成活率、生长速率、抗病能力和营养价值，综合提高水产养殖效率。

Description

一种富含多不饱和脂肪酸和必需氨基酸的小球藻及其应用
技术领域
本发明涉及海洋微生物的应用技术，具体涉及一种海洋类小球藻及利用其提高水产品和轮虫的生长繁殖能力、抗氧化性能、营养价值的方法。
背景技术
水产养殖是海洋渔业的重要组成部分，提升现代渔业规模化、标准化、产业化水平，建设“海上粮仓”，促进现代渔业持续健康发展势在必行。
然而，在目前鱼类、虾类、蟹类和其它水产动物养殖中，特别是在育苗阶段上述水产动物的幼体普遍存在孵化生活率较低、生长缓慢、免疫力低下或病害发生甚至死亡等系列问题。重要原因之一在于人工养殖所提供的饵料较为单一、营养缺乏，与自然环境中丰富多样的天然饵料具有很大差异。如何通过模拟自然食物链(网)，提高饵料(特别是开口鲜活饵料)质量是水产养殖的新命题和需要突破的关键技术问题。
轮虫(Rotifer)是大多数水产动物幼体的开口饵料，为担轮动物轮虫纲(Rotifera或Rotaria)的一类微小无脊椎动物的总称。轮虫形体微小，长约0.04-2毫米，一般不超过0.5毫米。轮虫身体长形，分为头部、躯干及尾部。头部有一个由1-2圈纤毛组成的、能转动的轮盘，形如车轮故叫轮虫。
轮虫具有广温耐盐性，能够在淡水和咸水中生活。其富含营养物质，如蛋白质、脂肪、不饱和脂肪酸、微量元素和各类生长因子。因此，轮虫作为一种优质的活体饵料，在水产养殖中应用非常广泛。然而，目前自然环境中捕捞的轮虫的产量无法满足水产养殖的巨大需求量。同时，与自然环境中成长的轮虫相比，人工养殖轮虫过程中，往往采用酵母、豆浆、麦麸等喂养轮虫，导致轮虫体内的天然活性物质，如类胡萝卜素、蛋白、EPA和DHA 多不饱和脂肪酸等，含量急剧减少，无法满足水产品需求，导致水产动物成活率、生长速率和抗病能力下降，制约了水产养殖业的进一步发展。
发明内容
针对水产养殖及其饵料轮虫养殖现状，本发明提供了一种富含多不饱和脂肪酸和必需氨基酸的小球藻，并提供其养殖方法及利用其提高轮虫的生长繁殖能力、营养价值和水产品抗氧化性能的方法。
为实现上述目的，本发明所采用技术方案为：
一种高产多不饱和脂肪酸和必需氨基酸的小球藻。小球藻分类命名为蛋白核小球藻(Chlorella sp.MEM-A25)，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:M2016793。保藏日期为2016年12月30日。
一种高产多不饱和脂肪酸和必需氨基酸的小球藻的养殖。以CCTCC NO:M2016793藻株为出发藻株，采用海水养殖，获得高密度细胞悬液。
一种高产多不饱和脂肪酸和必需氨基酸的小球藻的应用。采用藻细胞喂养轮虫，提高机体生长速率、繁殖能力、强化其作为饵料的营养；采用藻细胞喂养水产品，提高其抗氧化性能。
具体为：
①所述培养基为海水培养基，氮源含量为10-20 g/L。
②将保存在平板的藻株接种于100 ml 海水种子培养基中，在 20-30℃，100 μE·m-2·s-1光照，培养3-6天，获得一级种子；
③将一级种子接入20 L-50 L种子培养基中，接种量5-10％(v/v)，在20-30℃，以 100μE·m-2·s-1光照，培养3-6天，获得二级种子；
④将二级种子液接入500 L-5000 L管道光生物反应器中，接种量2-10％(v/v)，通气量0.2-2 vvm，户外半连续养殖，每周采集一次藻体，获得富含多不饱和脂肪酸和必需氨基酸细胞。
⑤将二级种子液接入60吨跑道池，接种量2-10％(v/v)，搅拌通气，户外半连续养殖，每周采集一次藻体，获得富含多不饱和脂肪酸和必需氨基酸细胞。
⑥采用所述小球藻单独或与海洋红酵母联合喂养轮虫，提高其生长速率、繁殖能力和营养功效。
⑦采用所述小球藻喂养对虾，提高其抗氧化性能。
本发明与已有技术相比具有以下显著特点和积极效果：
(1)从海南岛热带环境筛选得到一株广谱抗逆性小球藻，该藻株能在15℃-42℃条件下快速生长，并大量积累多不饱和脂肪酸和微藻蛋白。
(2)该小球藻细胞喂养的轮虫，其生长速率、繁殖能力以及胞内多不饱和脂肪酸和必需氨基酸含量显著提高。与对照组相比，轮虫繁殖速率提高1.5倍，获得的轮虫多不饱和脂肪酸和必须氨基酸含量最高可提高100%。
(3)该小球藻细胞喂养的对虾，其抗氧化性能显著提高。与对照组相比，轮虫繁殖速率最高可提高100%。
采用所述小球藻喂养对虾，提高了对虾的抗氧化性能。小球藻喂养提高了轮虫生长速率、繁殖能力和营养功效。
附图说明
图1是本发明实施例提供的小球藻藻株在显微镜下的形态。
图2是本发明实施例提供的采用该小球藻投喂前后轮虫生长与繁殖性能对比。
图3是本发明实施例提供的采用该小球藻投放前后养殖池溶氧量对比。
图4是本发明实施例提供的采用该小球藻投喂前后轮虫多不饱和脂肪酸含量对比。
图5是本发明实施例提供的采用该小球藻投喂前后轮虫氨基酸含量对比。
图6是本发明实施例提供的采用该小球藻投喂前后南极白对虾抗氧化性能对比。
具体实施方式
下面结合实施例进一步说明本申请之发明,但实施例不应视作对本发明权利的限定，本领域的相关技术人员进行的通常变化和替换等，也都属于本发明创造所保护的范围。
实施例1：轮虫喂养
采用小球藻CCTCC NO:M2016793投喂轮虫。该小球藻细胞呈球形，无鞭毛，能够运动，直接2-10 μm（图1）。接种等密度的轮虫（30个/mL）于3个养殖池。每天分别添加等量的：（1）海洋红酵母；（2）新鲜小球藻；（3）海洋红酵母和新鲜小球藻（1：1）。投喂6天。
结果表明：（1）饲喂小球藻组的轮虫生长繁殖好于饲喂酵母组（图2）。（2）饲喂小球藻组的轮虫不饱和脂肪酸含量显著提高（图4）.（3）饲喂小球藻组的轮虫总蛋白和必需氨基酸含量显著提高（图5）。
实施例2：南极白对虾喂养
接种等密度的南极白对虾于2个养殖池。向其中1池中每天分别等量新鲜小球藻，另一池作为对照组。投喂2个月。
结果表明：（1）饲喂小球藻组的南极白对虾抗氧化性能显著提高（图6）。（2）投放小球藻组的养殖池溶氧量显著提高（图3）。

Claims (7)

1.一种高产多不饱和脂肪酸和必需氨基酸的小球藻，其特征在于：已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:M2016793。保藏日期为2016年12月30日。
2.一种小球藻的细胞悬液，其特征在于：以CCTCC NO:M2016793藻株为出发藻株，采用海水养殖，获得的高密度细胞悬液。
3.权利要求2所述的高密度细胞悬液的海水养殖的方法，其特征在于包括下列步骤：
①所述培养基为海水培养基，氮源含量为10-20g/L；
②将保存在平板的藻株接种于100 ml 海水种子培养基中，在 20-30℃，100 μE·m-2·s-1光照，培养3-6天，获得一级种子；
③将一级种子接入20 L-50 L种子培养基中，接种量5-10％(v/v)，在20-30℃，以 100μE·m-2·s-1光照，培养3-6天，获得二级种子；
④将二级种子液接入500 L-5000 L管道光生物反应器中，接种量2-10％(v/v)，通气量0.2-2 vvm，户外半连续养殖，每周采集一次藻体，获得富含多不饱和脂肪酸和必需氨基酸细胞；
⑤将二级种子液接入60吨跑道池，接种量2-10％(v/v)，搅拌通气，户外半连续养殖，每周采集一次藻体，获得富含多不饱和脂肪酸和必需氨基酸细胞。
4.权利要求1所述的高产多不饱和脂肪酸和必需氨基酸的小球藻在作为水产养殖饵料方面的应用。
5.权利要求1所述的高产多不饱和脂肪酸和必需氨基酸的小球藻在轮虫养殖中的应用。
6.权利要求1所述高产多不饱和脂肪酸和必需氨基酸的小球藻与海洋红酵母联合喂养轮虫中的应用。
7.权利要求1所述的高产多不饱和脂肪酸和必需氨基酸的小球藻在对虾养殖中的应用。
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