JP4666733B2

JP4666733B2 - ウイルス感染抑制剤

Info

Publication number: JP4666733B2
Application number: JP2000252052A
Authority: JP
Inventors: 達夫鈴木; 稔森田; 和琴武川; 辰彦菅
Original assignee: Combi Corp
Current assignee: Combi Corp
Priority date: 2000-08-23
Filing date: 2000-08-23
Publication date: 2011-04-06
Anticipated expiration: 2020-08-23
Also published as: JP2002068988A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、食品由来のウイルス感染抑制剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
ウイルスは、病原体としてわれわれの生活に深い関わりをもっており、ヒトに感染するウイルスとして、アデノウイルス、ヘルペスウイルス、ＥＢウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、インフルエンザウイルス、ポリオウイルス、日本脳炎ウイルス、エイズウイルスなどの様々なウイルスが知られている。
【０００３】
例えばインフルエンザは、数年〜数十年の周期で大流行し、感染すると高熱、頭痛、咽頭痛、全身倦怠などの臨床症状を示す。特に小児では脳症・脳炎、高齢者では細菌の二次感染による肺炎などを引き起こし、死亡する場合もある。
【０００４】
従来のインフルエンザの予防法としては、ワクチンの接種が知られている。また、近年、インフルエンザの予防・治療薬として様々な薬剤が開発されている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
しかし、上記薬剤は対処療法的なものが多く、また、長期に渡って服用した場合には、副作用や変異株の出現などの問題があり、未だ有効な予防・治療法は確立されていない。
【０００６】
したがって、本発明の目的は、安全性の高いウイルス感染抑制剤を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記目的を達成するために鋭意研究した結果、燕窩を水で抽出して得られる抽出物が、ウイルス感染抑制効果を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明のウイルス感染抑制剤は、粉砕した燕窩に水又は熱水を加えて静置又は攪拌し、さらに６０〜１３０℃で加熱処理した後にプロテアーゼで処理して得られる燕窩酵素処理物であって、平均分子量が２，０００〜７万であるものを有効成分として含有することを特徴とする。
【００１２】
本発明のウイルス感染抑制剤は、食品である燕窩から得られる燕窩酵素処理物を有効成分として含有するので安全性が高く、それを摂取することにより、ウイルスの感染の予防効果が期待される。
【００１３】
【発明の実施の形態】
燕窩は、アナツバメが自らの唾液を糸状にして作る巣であり、中国では古くから高級な食材として食されているほか、肺疾患、健胃、去痰、皮膚の若返り、滋養強壮などの医療効果のある食品としても用いられている。また、その成分としては、タンパク質と糖質を多く含み、また、脂質はほとんど含まれていない。
【００１４】
一般に市販されている燕窩には、毛や糞等の汚れを取り除いて洗浄しただけのものから、燕窩のクズを集めて漂白と洗浄を繰り返して成形したものまで、様々な種類があるが、本発明で用いる燕窩は、前処理において、過度の洗浄や漂白などが行われていない燕窩を用いることが好ましい。
【００１５】
燕窩水抽出物は、例えば以下のようにして得ることができる。粒径２ｍｍ以下、好ましくは１５０μｍ以下の大きさに粉砕した燕窩に、その質量の１０〜１，０００倍の水を加えて、１〜１００℃、０．５〜４８時間静置又は撹拌して抽出を行なった後、濾過して濾液を得る。この濾液はそのまま、又は適宜濃縮して濃縮液とすることができる。また、これらを凍結乾燥又は噴霧乾燥して粉末化してもよい。
【００１６】
本発明のウイルス感染抑制剤においてはその有効成分として、燕窩の抽出物の酵素処理物（以下、燕窩酵素処理物という。）を用いる。その燕窩酵素処理物としては、例えば、上記燕窩水抽出物の場合と同様の大きさに粉砕した燕窩に、その質量の１０〜１，０００倍の水又は熱水を加える。そして上記燕窩水抽出物の場合と同様にして静置又は攪拌して抽出した抽出液（濾過前の溶液）を、６０〜１３０℃、５〜３０分間加熱処理した後に酵素処理して得られたものを用いることができる。
【００１７】
上記酵素としては、プロテアーゼを用いることができ、例えば一般に食品用の酵素として市販されているものを１種又は２種以上組合せて用いることができる。
【００１８】
また、酵素処理は、溶液のｐＨを酵素の至適ｐＨに調整して酵素を適量加え、酵素の至適温度で０．５〜２４時間反応させた後、加熱処理するなどして酵素を失活させればよい。この反応液を濾過して得られる濾液は、そのまま、又は適宜濃縮して濃縮液とし、本発明のウイルス感染抑制剤とすることができる。また、これらを凍結乾燥又は噴霧乾燥して粉末化してもよい。
【００１９】
本発明においては、上記燕窩酵素処理物の平均分子量として、２，０００〜７万であるものを用いる。
【００２０】
本発明のウイルス感染抑制剤は、上記のようにして得られた燕窩酵素処理物に、賦形剤や甘味料等を添加して錠剤やカプセル剤等にしてもよい。
【００２２】
【実施例】
以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明する。
参考例１
市販の無漂白の燕窩を粉砕機で粉砕し、１００メッシュパス（粒径１５０μｍ以下）の燕窩粉末１００ｇを得た。
【００２３】
この燕窩粉末２０ｇに水１，０００ｍｌを加えて５℃で一夜抽出を行ない、濾過して濾液を回収した。この濾液を凍結乾燥して燕窩水抽出物２ｇを得た。
【００２４】
実施例２
参考例１で得た燕窩粉末２０ｇに水１，０００ｍｌを加えて５℃で一夜抽出を行なった後、１２１℃、１５分間加熱処理した。この処理液を冷却した後、ｐＨを調整し、プロテアーゼ含有酵素（商品名「パンクレアチンＦ」、天野製薬（株）製）を固形分（燕窩）の２質量％添加して、４５℃で３時間反応させた。
【００２５】
この反応液をｐＨ７．０に調整し、９０℃で５分間加熱して酵素を失活させた後、濾過して濾液を回収した。この濾液を濃縮後、凍結乾燥して、燕窩酵素処理物１９ｇを得た。この燕窩酵素処理物の成分を分析した結果、下記表１に示す通りであった。
【００２６】
【表１】

【００２７】
比較例
参考例１で得た燕窩粉末２０ｇに水１，０００ｍｌを加えて５℃で一夜抽出を行なった後、１２１℃、１５分間加熱処理した。この処理液を濾過して濾液を回収した。この濾液を凍結乾燥して燕窩水抽出物の加熱処理物（以下、燕窩加熱処理物という。）４ｇを得た。
【００２８】
試験例１
下記の材料を用いてウイルス感染抑制効果の試験を行った。なお、各試験の前に、燕窩酵素処理物の細胞毒性試験を行った結果、作用時間が１時間の場合、燕窩酵素処理物濃度が５質量％以下では細胞毒性は観察されなかった。また、作用時間が４日間の場合、０．５質量％以下では細胞毒性は観察されなかった。
【００２９】
・ウイルス：インフルエンザウイルスＡ型（Ａ／ＰＲ８／３４）（入手先：（社）北里研究所）
・細胞：ＭＤＣＫ細胞（サル腎臓細胞）（入手先：大日本製薬（株））
・細胞増殖培地：１０（ｖ／ｖ）％牛胎児血清含有イーグルＭＥＭ培地（ＧＩＢＣＯ製）
・ウイルス維持培地：１質量％アルブミン含有Ｅ−ＭＥＭ培地（ＧＩＢＣＯ製）
・被験物質：実施例２で得られた燕窩酵素処理物１．５ｇを、Ｅ−ＭＥＭ培地１５ｍｌに溶解したものを１０質量％燕窩液とし、これを希釈して用いた。
【００３０】
・評価方法：細胞変性効果法（ＣＰＥ：Cytopathic effect）
ウイルスを１０倍段階希釈して、マイクロプレートに培養した単層の細胞に接種し、ウイルス感染の有無（ウイルスが感染した細胞は、丸くなって収縮し、マイクロプレートの底面から離れて培養液中に浮き上がってくる）を観察して、ウイルス感染価（ＴＣＩＤ₅₀：５０％感染終末点）を測定した。
【００３１】
▲１▼吸着・進入
各濃度に調製した燕窩液で１０倍段階希釈したウイルス液（燕窩酵素処理物換算で０〜５質量％含有）を、予めマイクロプレートに培養してあった細胞に加えて１時間感染させた。ウイルス液を除去してウイルス維持培地０．１ｍｌを加え、３７℃、５（ｖ／ｖ）％ＣＯ₂条件下の孵卵器で培養し、４日間細胞変性（ＣＰＥ）を観察し、ウイルス感染価を測定した。その結果を図1に示す。
【００３２】
図１から、燕窩酵素処理物は、感染の初期段階（インフルエンザウイルスの細胞への吸着・進入）において、濃度依存的にインフルエンザウイルス感染抑制効果を示すことが分かる。そして、０．８質量％以上の濃度で強い（９９．９％以上）インフルエンザウイルス感染抑制率を有することが分かる。
【００３３】
▲２▼増殖・放出
イーグルＭＥＭ培地で１０倍段階希釈したウイルス液を、予めマイクロプレートに培養してあった細胞に加えて１時間感染させた。ウイルス液を除去してウイルス維持培地として、各濃度の燕窩液を含むウイルス維持培地（酵素処理物換算で０〜０．５質量％含有）０．１ｍｌを加え、上記と同様の条件下で培養し、４日間細胞変性（ＣＰＥ）を観察し、ウイルス感染価を測定した。その結果を図２に示す。
【００３４】
図２から、燕窩酵素処理物は、感染の中〜最終段階（インフルエンザウイルスの増殖・放出）においても、濃度依存的にインフルエンザ感染抑制効果を示すことが分かる。そして、０．１質量％以上の濃度で強い（９９．９％以上）ウイルス感染抑制率を有することが分かる。
【００３５】
▲３▼吸着・進入・増殖・放出
各濃度に調製した燕窩液を含む細胞増殖培地（燕窩酵素処理物換算で０．０１又は０．１質量％含有）で細胞を３日間培養し、イーグルＭＥＭ培地で１０倍段階希釈したウイルス液を１時間感染させた（吸着・進入）。ウイルス液を除去した後、各濃度に調製した燕窩液を含むウイルス増殖培地（燕窩酵素処理物換算で０．０１〜０．１質量％）０．１ｍｌを加え、上記と同様の条件下で培養し（増殖・放出）、４日間細胞変性効果を観察し、ウイルス感染価を測定した。その結果を図３に示す。なお、図３において、−○−は細胞増殖培地（吸着・進入）での燕窩酵素処理物の濃度が０．１質量％、−□−は同様に燕窩酵素処理物の濃度が０．０１質量％の場合である。
【００３６】
図３から、ウイルス感染の全過程に燕窩酵素処理物を作用させることにより、より強いインフルエンザ感染抑制効果を示すことが分かる。
【００３７】
試験例２
参考例１、実施例２及び比較例で得た燕窩水抽出物、燕窩酵素処理物及び燕窩加熱処理物を用いて、試験例１の「増殖・放出」の試験方法と同様にして、増殖・放出時における４日間細胞変性（ＣＰＥ）を観察し、ウイルス感染価を測定した。その結果を表２及び図４に示す。なお、図４において、−●−は燕窩水抽出物、−▲−は燕窩酵素処理物、−■−は燕窩加熱処理物を表す。
【００３８】
【表２】

【００３９】
表２及び図４から、燕窩水抽出物は強いインフルエンザ感染抑制効果を有することが分かる。一方、燕窩加熱処理物はほとんどインフルエンザ感染抑制効果を示さないが、これを酵素処理した燕窩酵素処理物は強いインフルエンザ感染抑制効果を示すことが分かる。
【００４０】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明によれば、燕窩由来の成分を有効成分として含有するウイルス感染抑制剤を提供できる。
【００４１】
本発明のウイルス感染抑制剤は食品由来であるので安全性が高く、それを摂取することにより、ウイルスの感染の予防効果が期待される。
【図面の簡単な説明】
【図１】吸着・進入段階で燕窩酵素処理物を添加した場合におけるウイルス感染抑制効果を示す図表である。
【図２】増殖・放出段階で燕窩酵素処理物を添加した場合におけるウイルス感染抑制効果を示す図表である。
【図３】吸着・進入・増殖・放出のそれぞれの段階で燕窩酵素処理物を添加した場合におけるウイルス感染抑制効果を示す図表である。
【図４】増殖・放出段階で燕窩水抽出物、燕窩酵素処理物又は燕窩加熱処理物を添加した場合におけるウイルス感染抑制効果を示す図表である。

Claims

粉砕した燕窩に水又は熱水を加えて静置又は攪拌し、さらに６０〜１３０℃で加熱処理した後にプロテアーゼで処理して得られる燕窩酵素処理物であって、平均分子量が２，０００〜７万であるものを有効成分として含有することを特徴とするウイルス感染抑制剤。