JPH0341030A - 抗ウイルス剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、薬剤、とくに筑後天性免疫不全症候群（エイ
ズ）ウィルス剤、抗インフルエンザウィルス剤、抗ヘル
ペスウィルス剤、抗サイトメガロウィルス剤等、抗ウイ
ルス物質に関するものである。

（従来の技術とその問題点） ウィルスは人体や！！ＩＪｗｉ物に対して数多くの病気
を惹起する原因となることが知られている。

ウィルスの活動を抑制する物質については、その探索が
多数の研究者によって継続されているものの、未だ有効
な抑制物質が開発されるに至っていない。

これらウィルスを原因とする病気のなかには後天性免疫
不全症候群（エイズ）のように深刻なものがあり、有効
な抗ウイルス物質の発見が切実に求められていた。

後天性免疫不全症候群！、ｔ　、　Ａ　Ｉ　Ｄ　Ｓ　（
Ａｃｑｕｉ−ｒｅｄ　Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃ
ｙ　Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）と称され、周知のように麻薬等
の薬物乱用者や男性同性愛者などの間で流行する一方、
血液製剤からの感染によっても深刻な問題が発生してい
る。この病気は人体の免疫機能を著しく低下させ、種々
の日和見感染をひきおこし、感染症により死亡する率が
きわめて高い。エイズ発症のメカニズムにライては、Ｈ
ＩＶウィルス（Ｈｕｍａｎ　Ｉｍｍｕｎ。

ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ）が標的細胞である
ＣＤ−４抗原陽性のヘルパーＴ細胞に次々と感染し、該
ウィルスの増殖と細胞破壊を繰り返すことによって免疫
不全をひき・おこすものと考えられている。

エイズ発症のメカニズムについては未ｔ！不明の点が多
く残されているが、この分野におけろ最近の分子生物学
的研究の発展にはめざましいものがあり、ＨＩ　Ｖの特
徴も徐々に明らかになりつつある。これらの研究によれ
ば、ＨＩＶはウィルスの遺伝子８Ｉ造が他のレトロウィ
ルスと比較して極めて複雑であり、感染性、増殖性等の
機能面でも多様性があり、また非常に変異しやすいとい
う特徴を有するウィルスであることが判明してきている
。

これらの知見にもとづいて、ＨＩＶの感染防止、増殖阻
害の方策が提案されている。ＨＩＶの阻害物質としては
、逆転写酵素阻害剤である核酸誘導体アジトチミヂン（
ＡＺＴ）が現在唯一の治療薬として使用されている。エ
イズ治療剤は、病気の性質上長期間の投与が必要とされ
るが、ＡＺＴには骨髄障害などの副作用があることが報
告されている。このため、ＡＺＴにかわる薬剤の開発は
急務の課題とされているのである。

しかし、現在の段階では有効な薬剤は未だ開発されてい
ない。

つぎに、インフルエンザウィルスについても同様に未解
決の問題がある。

すなわち、インフルエンザウィルスが最初に発見されて
から既に５０年が経過するが、インフルエンザは毎年の
ように流行をくりかえしており、年間の患者発生数は他
の感染性と比較にならない程多い。それにもかかわらず
有効な治療薬が開発できない理由の１つは、インフルエ
ンザウィルスの抗原性が非常に変わりやすいところにも
あると推定される。つまり、人間社会で流行するインフ
ルエンザウィルスの血球凝集素（ＨＡ）とノイラミニダ
ーゼ（ＮＡ）の抗原性は、たえず変化している。これま
で大流行となったものにＨＯＮ　Ｉ、ＨＩＮ　Ｉ、Ｈ２
Ｎ２．Ｈ３Ｎ２があり、このほかにＢ型インフルエンザ
ウィルスが存在する。このためワクチン製造に使用する
ウィルス株も上記にあわせてたえず変えていかなければ
、大きな効果を期待することばできない。このため、ワ
クチンも一応実用化はされているものの効果の点で充分
ではない。

抗インフルエンザウィルス剤としては、アダマンタナミ
ン（＾ｄａｍａｎｔａｎａｌＩ＋１ｎｅ）が唯一の治療
薬として米国で許可されているが、これは８３Ｎ２型ウ
イルスに対してのみ有効であって、他の型のウィルスに
は全く効果がない。アダマンタナミンの作用機序はウィ
ルス増殖過程の、脱￥ｊ１．（Ｕｎｃｏａｔｉｎｇ）に
作用するものと云われている。しかし、臨床的にはプラ
セポに対してアダマンタナミノ投与群は有為期間が若干
減少する程度の効果しかなく、現在では殆ど使用されて
いない程である。

このような現状から、有効な抗ウイルススペクトルの広
い抗インフルエンザウィルス剤の開発が望まれていると
ころである。

つぎに、単純ヘルペスウィルス（ｌＩｅｒｐｏｅｓ　５
ｉｎｐｌｅに、　ｖｉｒｕｓ、　Ｈ５Ｖ）を含むヘルペ
スウィルス群ウィルスに関しても、潜伏感染ウィルスの
再活性化による回帰感染を起こすことがら、ワクチン開
発には多くの未解決問題点が残されており、より優れた
抗ウィルス剤の開発が望まれている。

従来、Ｈ３Ｖによる感染は乳幼児を除いては９０％以上
が不顕性感染に終ると考えられていた。しかし、近年初
感染時期の高含化に伴って成人初感染者による性行為感
染や、水平または垂直感染による新生児ヘルペス感染が
増加してきた。また、医療技術が発達したことの反面と
して免疫不全状態で観察されている患者が増えて型温な
Ｈ３Ｖ感染症の発症の危険に晒されることが多くなった
。さらに、最近では子宮頚癌とＨ３Ｖの関係が解明され
つつある。このような現状から、Ｈ３Ｖ＠染の予防と治
療法確立の必要性が認識され、社会的関心も高まってき
ている。

Ｈ３Ｖ治療薬としては、アシクロビル（人ｃｉｃｏｌｖ
ｉｒ、人ｃＶ）が比較的高い選択毒性を示し、ＨＳＶ感
染症の全身療法を可能とし、治療効果なあげつつある。

しかし、ＡＣｖにも問題点がある。すなわち、ＡＣＶは
顕著な抗Ｈ３Ｖ活性が認められる反面、比較的速やかに
剛性ウィルスが出現する。

ＡＣＶの作用メカニズムは、次のようなものと考えられ
る。ヘルペスウィルスが感染することによって細胞に誘
導されろチミジンキナーゼ（Ｖｉｒｕｓ−ｉｎｄｕｃｅ
ｄ　ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ　Ｋｉｎａｓｅ、ＴＫ（Ｖ））
によりＡＣＶはリン酸化されてアシクロ−〇ＭＰ（人ｃ
ｙｅｌｏ−ＧＭＰ）になり、さらに細胞のチミジンキナ
ーゼ（Ｃｅｌｌｕｌａｒ　ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ　Ｋｉｎ
ａｓｅ、ＴＫ（Ｃ）１によりアシク０−ＧＴＰ（人ｅｙ
ｃｌｏ−ＧＴＰ）に転換され、このアシクロ−ＧＴＰが
ウィルスＤＮＡ合成酵素の活性を顕著に抑制し、かつ合
成されつつあるＤＮＡ鎖の末端に取り込まれて終末点と
なり、ＤＮＡ合成を停止するのである。

ＡＣＶＩｆＴＫ　（Ｃ）　よりもＴＫ（ｖ）に対して２
００倍以上の親和性を有する。このことから、ＡＣＶは
非感染細胞におけるよりも、Ｈ３■感染細胞において、
速やかに、かつ通かに多くリン酸化される。このことが
、ＡＣＶの高い選択毒性または特異的抗ヘルペス作用を
もたらすが、同時にこの乙とが耐性ウィルスを生じさせ
る原因となるものと考えられる。

また、ＴＫあるいはＤＮＡポリメラーセに異常のあるウ
ィルスもＡＣＶに抵抗を示すこととなる。臨床分離ウィ
ルス株のなかにはＴＫの欠如したＨ　Ｓ　Ｖが存在する
との報告があり、このようなウィルス株にはＡＣＶＩよ
作用しない。

ＡＣＶは比較的に副作用が少ないが、耐性ウィルスを出
現させる問題やＴＫ（−）ウィルスに対しては有効でな
いという問題点が残っている。

ワクチンの早期開発が困難な現状では、ＡＣＶとは作用
機序、作用部位の異なる新しいタイプの抗ヘルペスウィ
ルス剤の出現が望まれているのである。

つぎに、ヒトサイトメガロウィルス（ＨｕｍａｎＣｙｔ
ｏｍｅｇａｌｏ　ｖｉｒｕｓ、ＨｃＭＶ）は、易感染宿
主に対して重篤な症候を生じさせることがあり、とくに
骨髄またζよ腎臓移植後に生ずる日和見感染や、胎内感
染による新生児の知能障害、買置、神経疾患、肺炎、出
血傾向などは臨床上大きな問題である。健康人のＨＣＭ
Ｖ感染の多くは不顕性感染として経過しており、生涯に
わたって体内器官に潜伏感染をしていると考えられてい
る。

サイトメガロウィルスは種特異性が強く、ヒトサイトメ
ガロウィルスはヒトに対してのみ、また、マウスサイト
メガロウィルス（ＭｏｕｓｅＣｙｔｏ＋ｍｅｇａｌｏｖ
ｉｒｕｓ［ＣＭＵ）　Ｉよマウスに対してのみ感染が成
立する。このため、ＨＣＭＶには適当な動物実験系がな
く、ＭＣＭＶがモデル感染系として広く使用されている
。現在のところ、有効な抗ウィルス剤としてはアシクロ
ビルの誘導体であるガンシクロピル（ＤＨＰＧ）が臨床
治験の段階にある程度である。ＤＨＰＧに対する耐性ウ
ィルスの発現および副作用等について未だ不明であるが
、ＤＨＰＧも核酸構成塩基関連代金物であることから、
耐性発現の可能性や骨髄抑制等の副作用の虞れも考えら
れろ。

したがって、ＤＨＰＧ以外の抗サイトメガロウィルス剤
の開発が臓器移殖が活発化する時代を迎えて一層強く求
められている。

（発明が解決しようとする課題） 本発明は、前記の核酸構成塩基関連化合物やアマンタヂ
ン等の既知抗ウィルス剤とは異なる新規の抗ウィルス剤
、とくに強い抗ウイルス作用１．広い抗ウイルススペク
トルと副作用の少ない抗ウィルス剤を提供することを目
的とするものである。

（問題を解決するための手段） 発明者らは、新規な抗ウィルス剤を開発するために鋭意
研究を推進した。

その結果）マメ科（ＬｅｇｕｍｉｎｏｓａｅＪ　１ｍ物
の板金乾燥した山豆根の抽出物が、広い抗ウイルススペ
クトルを有する強力な抗ウィルス剤であることを見出し
、本発明を完成するに至った。

山豆根は典型的には５ｏｐｈｏｒａ　５ｕｂｐｒｏｓｔ
ｒａｔａ　Ｃｈｕｎ　ｅｔ　Ｔ、　Ｃｈｅｕの根を乾燥
したもので５ｏｐｈｏｒａｅ　５ｕｂｐｒｏｓｔｒａｔ
ａｅ　Ｒａｄｉｘと称されているが、種名末確認の５ｏ
ｐｈｏｒａ属植物の根であって、「広豆根」と俗称され
ているものも、本発明における山豆根に含まれろ。

山豆根は、数種の例えばｍａｔｒｉｎｅ、　ｏｘｙｍａ
ｔｒｉｎｅａｎａｇｙｒｉｎｅ、　ｍｅｔｈｙｌｃｙｔ
ｉｓｉｎｅ等ののアルカロイド、例えば５ｏｐｈｏｒａ
ｄｉｎ、　５ｏｐｈｏｒａｎｏｎｅ、　５ｏｐｈｏｒａ
ｎｏｃｈｒｏ−１Ｉｌｅｎｅ等の数種のフラボノイド、
ｔｒａｎｓ−ｅａｆｆｅｉｅａｃｉｄ　ｄｏｃｏｓｙｌ
ｅｓｔｅｒを主とする新フェノール性物質等を含有する
。

本発明の抗ウィルス剤は、山豆根から熱水で抽出するこ
とができるが、これをさらに精製してもよく、また、他
の方法によって抽出してもよい。

本発明の抗ウィルス剤は、後天性免疫不全ウィルス、イ
ンフルエンザウィルス、ヘルペスウィルス、サイトメガ
ロウィルス等のウィルスが細胞内で再生する過程に作用
してウィルスの増殖を抑制する。また、本発明の抗ウィ
ルス剤は後天性免疫不全ウィルスのＣｅ１ｌ　Ｆｕｓｉ
ｏｎ　（ウィルスによって引き起こされる細胞融合）を
抑制することが期待される。

また、本発明の抗ウィルス剤は、ウィルス感染を受けた
生体の防御機構を活性化し、ヘルペスウィルスその他の
ウィルスに対して有効な抗ウィルス作用を発現するもの
と考えられる。

本発明の抗ウィルス剤は後述する実験例に示されるよう
に副作用が極めて少ない。

本発明の抗ウィルス剤は、単独で使用することもできろ
し、また、公知の抗ウイルス物質や生体活性物質と併用
することもできろ。

本発明のウィルス剤の投与形態に特別の限定はない。

例えば、経口的、皮下的、静脈的または腹腔的経路で投
与する場合には、蒸留水または生理的食塩水により無菌
液体で投与することができる。経口投与の場合には、懸
ｆＡ液、カプセル、粉末、タブレット等の形態をとるこ
とができる。

このほか、軟膏剤、外用点眼剤等の剤型でも投与するこ
とができる。

本ウィルス剤の投与量は大人では、例えば１００−３０
００ｍｇ　、小児では３０−１０００呵が適当であり、
液体で投与する場合には１００＠程度に稀釈すればよい
。しかし、投与量は症状や被投与者の状態により、適宜
適切な量を選択することができろ。

また、本発明の抗ウィルス剤はヒト以外の生物にも投与
することができ、例えばカイコに投与すれば、その生体
防ｖｌＪ機構を活性化させ、カイコウィルスによる感染
致死からカイコを防御できろことが実験的にも確認され
た。

（作用効果） 本発明の抗ウィルス剤は、筑後天性免疫不全症候群ウィ
ルス作用、抗インフルエンザウイルス作用、抗ヘルペス
ウイルス作用、抗サイトメガロウィルス作用を有し、広
い抗ウィルススペク）・ルを有する抗ウィルス剤である
。また副作用も少ないという利点を有する。

（実施例） 実施例 山豆根（Ｓｏｐｈｏｒａｅ　５ｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａ
ｅ　Ｒａｄｅｘ）の粗末８０ｇ　　に精製水８００ｍｊ
を加え、還流冷却器を付して、直火で５時間にわたり弱
く沸騰させた。冷却後濾紙を用いて濾過した。さらに、
残渣を精製水１００ｍＮで水洗し、濾液と洗液とを合し
、更に精製水を加えて抽出液を１０００ｍｌとした。

上記抽出液１＋ａｌには、山豆根抽出物１４．９呵が含
有することが確認された。抽出物中には、アルカロイド
であるｍａｔｒｉｎｅ、　ｏｘｙｍａｔｒｉｎｅや、さ
らにフラボノイド、フェノール性物質が含有することが
確認された。

（実験例） 本発明の抗ウィルス剤について、抗ウィルス作用および
副作用（細胞毒性）を実験した。

実験例１ 後天性免疫不全ウィルスに対する効果 実験方法 Ｍｏ１ｔ−４ａｌｏｎｅ　＃−８細胞を２×１０５／ｍ
Ｉ含む液を０．５ｍｊとり、これに培養液ＲＰＭＩ−１
６４０　（１０にの牛胎児血清を含む）で希釈された本
則を０゜２５１１１ｉ加、ｔｉ後、ＨＩＶ−１（ＨＴＬ
Ｖ−１１１Ｂ）（７）　’ｙ　イｋ　スをｍｏｉ−０，
００２（細胞数に対して感染させるウィルス粒子数の割
合）となるよう０．２５ｍｊのウィルス液を加えて総容
量１ｍＪとし、４日間３７℃で培養した。

生存細胞数は、トリパンブルーによるＤｙｅｅｘｃｌｕ
ｓｉｏｎ法で測定し、ウィルス抗原はＨＩＶ抗体陽性ヒ
ト血清を一次抗体とした間接蛍光抗体法で染色し、ＨＩ
Ｖ抗原陽性率を調べた。

実験結果を第１表に示す。

実験結果によれば、Ｍｏ１ｔ−４ｃｌｏｎｅ　升８細胞
はＨＩＶ感染により８５．３％の死細胞が観察された（
生細胞１４．７％）（対照群）。

しかし、１０，０００倍希釈濃度の本則の存在下では死
細胞は４５．７％に止まり、５４゜３％が生細胞であっ
て、生存率が飛躍的に増大した。生細胞について、ウィ
ルス抗原陽性率を調べたところ、対照群では７５．８％
であったのに対し、本則の存在下で（、ｆ生細胞の３２
．５％に抗原陽性が認められるに止まり、飛躍的な抗原
陽性阻止率が認められた。

他方、副作用（細胞毒性）の点については、本則の１０
０倍希釈（１４９μｇ／ｍｌ’）および１．０００倍希
釈（１４，９μｇ／ｌｌ１１）ではＭｏ１ｔ−４ｃｌｏ
ｎｅ４ｆ　８細胞に細胞毒性（Ｃｙｔｏｔｏｘｉｅ）が
みられたが、１０，０００倍希釈（１，４９μｇ／ｍｊ
）では細胞毒性が見られなかった。

実験例２ インフルエンザウィルスに対する効果 インフルエンザウィルスに対する本則の効果を１ｎｖｉ
ｔｒｏで実験した。

実験方法 対象ウィルス；　Ｂ／Ｌｅｅ 使用細胞、ＭＤＣＫ細胞（株化された犬の腎臓細胞） ３Ｘ１０’／ｍｌのＭＤＣＫ細胞浮遊液を培養液（１０
％ＦＢＳ−ＭＥＭ　（Ｅ））を用いて作成し、９６　ｗ
ｅｌｌ　ｍ１ｃｒｏｐｌａｔｅに００１ｍ１づつ分注し
た。３７℃の炭酸ガス培養器において３日間静置培養し
、単層細胞が形成された後培養液を捨て、リン酸緩衝液
で１回細胞面を洗浄した。

インフルエンザウィルス液を、所定濃度の本則を含む培
養液（１０％ＢＰＡ−ｖｆｂ−ＭＥＭ　（Ｅ））で希釈
し、その０．１ｍｊを各Ｗｅｌｌに加えた。

１ｉ１３度１ウィルス希釈につき４Ｗｅｌｌｓを用いた
。

これら＋ｍ１ｃｒｏｐｌａｔｅは３４℃の炭酸ガス培養
器内で培養し、２日目と５日目に顕微鏡下で細胞変性（
細胞病変）の程度を調べた。

抗ウィルス活性は、ウィルス感染によって発現する細胞
変性（細胞病変）　ＣＰ　Ｅ　（Ｃｙｔｏｐａｔｈ−ｏ
ｇｅｎｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ）をどの程度抑制できロカ、
ニヨって表現した。

その結果を第２表に示すが、ＣＰＥスコアーは次の５段
階で示した。

＋＋＋（３，０）’培養細胞の７５％以上でＣＰＥ＋＋
（２，０）’同約５０％ ＋　　（１，０）：同約２５％ ±　（０，５）：微細なＣＰＥが１〜２個（０）；ＣＰ
Ｅなし ｍ１ｃｒｏｐｌａｔｅの４穴におけるＣＰＥス：］アの
平均値を求め、そして、Ｒｅｅｄ−Ｍｕｎｃｈの方法に
従い、５０％の細胞に感染するウィルスの感染量（ＴＣ
Ｉ　Ｄ　５０　）　　（５０Ｘｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔ
ｕｒｅ　１ｎｆｅｃｔｉｖｅｄｏｓｅ）を求め、ウィル
スの最高希釈倍数の負対数（−１ｏｇ）で表し、薬物非
処理対照との差を△ＴＣＩＤ５０とし、　ΔＴＣＩＤ５
ｏ≧１゜０を示した場合を有効と判断した。

実験結果を第２表に示す。対照群のＴＣＩＤ５０は４．
５であるのに対し、本則の１００倍希釈（１４９μｇ／
ｍｊ）濃度でのＴＣＩＤ５０は３．５であった。

シタカッチ、ΔＴｃＩＤ５０１ｊ１．Ｏとなり、インフ
ルエンザウィルスＢ／Ｌｅｅによる細胞病変が有意に抑
制されろことが確認された。

これに対し、既存の抗ウィルス剤であるへｍａｎｔａｄ
ｉｎｅはＢ／Ｌｅｅには効果を示さなかった。

実験例３ 単純庖疹ウィルスに対するｉｎ　ｖｉｔｒｏ実験単純庖
疹ウィルス（Ｈｅｒｐｅｓ　ｓｉｍｐｌｅｘ　ｖｉｒｕ
ｓ）に対する本則の効果をｉｎ　ｖｉｔｒｏで実験した
。

対象ウィルスＨｅｒｐｅｓ　ｓｉｍｐｌｅｒ　ｖｉｒｕ
ｓ　ｔｙｐｅ　１（Ｈａｙａｓｈ　ｉ　ｄａ株） 同　　　　　　　　ｔｙｐｅ　　２ （１６９株） 使用細胞　Ｖｅｒｏ細胞（アフリカミドリザル腎臓由来
細胞） 細胞培養には１０％牛脂児血清を含むＥａｇｌｅ′ｓＭ
ＥＭ培養１夜を、培養細胞の維持には２％牛脂児血清を
含むＥａｇ　ｌ　ｅ　’　ｓＭＥＭ培養液を用いた。

本則の抗ウイルス効果は、ウィルス感染による細胞病変
（ＣＰＥ）に対する発現抑制効果を顕微鏡観察により測
定した。すなわち、ｍ１ｃｒ。

ｐｌａｔｅ上でＶｅｒｏ細胞の単層細胞に各Ｗｅｌｌ当
り予め所定濃度に希釈された水剤溶液０．１＋ｎ４’を
分注し、ついで各段階に希釈されたウィルス液の０゜１
ｍｌを分注し、３７℃炭酸ガス培養器にて６日間培養し
た。

抗ウィルス活性の判定は、インフ、レエンザウイルスに
対する効果判定と同一の方法で行った。

その結果、ｔｙｐｅｌのウィルスに対しては３日目に１
　、４９　μｇ／ｒｎｌでΔＴＣＩＤ５０が０．８．１
４　、９　ｐｇ／ｒｍｌで０．７．１４９μｇ／ｍＪで
０．３の効果を示し、またｔｙｐｅ２に対しても３日目
に１．４９μｇ　／　ｍ　ｌの濃度において△ＴＣＩＤ
５０が０．９．１４．９μｇ／ｌｌ１１で０．５の効果
を示した。しかし、既存の抗ウイルス剤アシクロビルを
越える結果は得られなかった。

実験４ 単純庖疹ウィルスに対するｉｎ　ｖｉｖｏ実験単純庖疹
ウィルス（Ｈｅｒｐｅｓ　ｓｉｍｐｌｅｘ　ｖｉｒｕｓ
ｔｙｐｅｌ、Ｈａｙａｓｈｉｄａ株）感染マウスに対し
て本則の効果を確認するためｉｎ　ｖｉｗｏで実験を行
つｔこ。

実験方法 対象ウィルス：　Ｈｅｒｐｅｓ　ｓｉｍｐｌｅｘ　ｖｉ
ｒｕｓ　ｔｙｐｅｌ。

（）Ｈａｙａｓｈｉｄａ株） 使用マウｘＨＢａ　ｌ　ｂ／ｃ、５週齢、雌性末剤投与
Ｈ：　　２００　ｍｇ／　ｋｇ／　ｄａｙｌ　　０　０
　ｍｇ／ｋｇ／　ｄａｙ ５０ｎＩｇ　／　ｋｇ　／　ｄａｙ ２００ＩＴ１ｇ／ｋｇのサイクロフォスフアミド（Ｃｙ
）をマウス腹腔内に投与じ、その２４時間後ウィルスの
３　、５　Ｘ　１０６ｐｉｕ／ｍｏｕｓｅ　（マウス当
り接種するウィルス量）を耳殻皮肉に接種した。この日
をｄａｙＯとした。

本則を、ウィルス接種後３時間目と、以後ｄａｙｌまで
１日１回の割合で合計８回本剤を投与し、マウスの生存
日数を調べｔこ。

実験結果 実験の結果を第３表に示す、これによれば、対照群は平
均７．８０日でマウス全匹が死亡したが、本則２００　
ｍｇ　／　ｋｇ　／　ｄａｙ投与群では１０゜４０日以
上、１００　ｍｇ／　ｋｇ／　ｄａｙ投与群ては９゜６
０日の平均生存日数が得られ、いずれも有意な平均生存
日数の延長が確認された。とくに１００■／ｋｇ群で１
よ１４４日目も１０匹中３匹のマウスの生存が認められ
た。

実験例５ マウスサイトメガロウィルスに対する１ｎｖｉｔｒｏ実
験 マウスサイトメガロウィルス（Ｍｏｕｓｅ　ｃｙｔｏ−
ａ＋＋４ａｌｏｖｉｒｕｓｌに対する本則の効果をｉｒ
ｌ　ｖｉｔｒｏで実験した。

実験方法 対象ウィルス；　Ｍｏｕｓｅ　ｅｙｔｏｍｅｇａｌｏｖ
ｉｒｕｓ（Ｓｎｉｔｈ） 使用細胞　Ｍｏｕｓｅ　ｅｍｂｒｙｏ　ｃｅｌｌｓの２
代目培養細胞 培養肢、活性の測定方法、効果判定はいずれも実験例３
と同様のものを用いた。

実験結果 実験結果を第４表に示す。感染後３日目、６日目、９日
目にＣＰＥ＠観察し、９日目の結果をもって抗ウイルス
効果を判定した。これによると、既存の抗ウィルス薬ア
シクロビルは強い抗ウイルス効果を示したが、本則も１
４．９μｇ／　ｍ　ｅと１４９μｇ／ｌｌ１１の濃度に
おいて、ＣＰＥの発現を有意に抑制することが確認され
た。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 山豆根抽出物を有効成分とする抗ウィルス剤。