JP2005145934A - 抗インフルエンザウイルス活性化物質 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ燥乾粉末のいずれか1以上を水乃至熱水で抽出して得られる抽出物に、マクロファージ存在下において抗インフルエンザウイルス活性化作用があることを見出した。
【選択図】 なし
Description
(1) 生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ燥乾粉末のいずれか1以上を水乃至熱水で抽出して得られる抽出物からなるマクロファージ存在下における抗インフルエンザウイルス活性化物質、
(2) 生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ乾燥粉末のいずれか1以上を水乃至熱水で抽出して得られる抽出液に、アルコールを加え生成する沈殿からなるマクロファージ存在下における抗インフルエンザウイルス活性化物質、
(3) 生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ乾燥粉末のいずれか1以上を水乃至熱水で抽出して得られる抽出液に、沈殿が生じない程度にアルコールを加え、放置後液面若しくは液中に浮遊又は容器の壁面に付着する物質を取り除き、次いで該溶液を乾燥したものからなるマクロファージ存在下における抗インフルエンザウイルス活性化物質、
(4) 生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ乾燥粉末のいずれか1以上を水乃至熱水で抽出して得られる抽出液に、沈殿が生じない程度にアルコールを加え、放置後液面若しくは液中に浮遊又は容器の壁面に付着する物質を取り除き、次いで更にアルコールを加え生成する沈殿からなるマクロファージ存在下における抗インフルエンザウイルス活性化物質、
(5) 活性発現の機序がTNF-α産生誘導を介してなるものであることを特徴とする(1)乃至(4)記載のマクロファージ存在下における抗インフルエンザウイルス活性化物質、
(6)(1)乃至(5)のいずれか記載の抗インフルエンザウイルス活性化物質を配合してなる食品、
(7) (1)乃至(5)のいずれか記載の抗インフルエンザウイルス活性化物質を配合してなる医薬品
に関する。
尚アルコールとしては低級アルコールが使用しうるが、特にエタノールが好ましい。
以下に実施例を示すが、本発明はそれらによって限定されるものではない。
(1) 乾燥マイタケ子実体の粉末2.5kgにイオン交換水30Lを加圧釜に入れ、加圧下115〜120℃で約0.5時間処理し、その後濾過して褐色液(A)約20Lを得た。該褐色液(A)5Lを取り、減圧下濃縮してBrix濃度20%の濃縮液を得、該濃縮液をスプレードライ装置を用いて噴霧乾燥して褐色乾燥粉末(マイタケ抽出物[1])約152gを得た。
(2)上記(1)で得られた褐色液(A)3Lを取り、減圧下、0.5Lまで濃縮し室温で99%エタノールを同容量加え、約10時間放置して褐色沈殿を回収し、それを減圧乾燥して褐色物質(マイタケ抽出物[2])5gを得た。
(3)上記(1)で得られた褐色液(A)を10Lをとり減圧下約1Lまで濃縮し、室温で99%エタノールを同容量加え、10℃以下で約10時間放置すると液面、液中に浮遊及び容器の壁面に付着する茶褐色の物質が生成した。これら物質を除去し、褐色の溶液を得る。該褐色の液約1.9Lを減圧下エタノールを除去し、更に濃縮してBrix濃度35%の濃縮液を得た。該濃縮液をスプレードライ装置を用いて噴霧乾燥して褐色乾燥粉末(マイタケ抽出物[3])約230gを得た。
又Salmonella typhimurium及びEscherichia coli 等細菌を用いた復帰突然変異試験を行った結果、全く変異原性を有しないことが確認された。
抗インフルエンザウイルス活性検討の実験に用いた材料は以下の通りである。
被験物刺激細胞:マウスマクロファージ由来RAW264.7細胞〔10%非働化牛胎仔血清加Dulbecco’s MEMで培養したもの〕(以下RAW細胞と称す)を使用。
インフルエンザウイルス感染細胞:MDCK細胞〔8%非働化牛胎仔血清加MEMで培養したもの〕を用いた。
被験物質: 実施例1で製造したマイタケ抽出物[1]乃至マイタケ抽出物[3]
以下マイタケ抽出物[3]についての結果を例示する。
Conditioned mediumとして、6 センチデイシュにコンフルエントに培養したRAW細胞を1回serum free DMEDにて洗浄後、種々の濃度のマイタケ抽出物[3](以下、マイタケ抽出物と省略。)含有培地で培養後、適宜採取した培養上清をConditioned medium(以下CMと省略)として用いた。
此の培養開始時を感染0時間とし培養12時間後のウイルス量をplaque法で定量した。
図2の左側のグラフで示される様に12時間刺激後のCMを用いた群では、マイタケ抽出物300μg/mlのCM添加のウイルス量は47.7×104PFU/ml、100μg/mlのCM添加のウイルス量は2.5×106PFU/mlであり、無刺激対照CMのウイルス量を100%とした場合、それぞれ12%, 64%とウイルス量は濃度依存的に減少を示した。
マイタケ抽出物300μg/ml及び100μg/ml で12時間刺激後のTNF-αmRNA発現の誘発をRT-PCR法で見たところ、図4に示される様に、マイタケ抽出物は濃度依存性にTNF-αmRNAの発現を誘発していることが明らかになった。
結果を示すと図5の様になる。グラフに示されるように、TNF-αmRNA発現レベルを内部標準として使用したGAPDHにおけるmRNAの発現レベルとの比で見ると、刺激後30分のRAW細胞では、TNF-αmRNA発現は認められなかったが、1時間後より急激に増加し、2時間目でピークに達し、その後徐々にその発現は減少した。
次に、実際にTNF-αmRNAが翻訳され、TNF-αが産生されているかELISA Kitを用いて検討した。
結果を示すと図6のようになる。
この結果は先に示したTNF-αmRNAの発現の経時的変化に一致している。
Claims (7)
- 生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ燥乾粉末のいずれか1以上を水乃至熱水で抽出して得られる抽出物からなるマクロファージ存在下における抗インフルエンザウイルス活性化物質。
- 生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ乾燥粉末のいずれか1以上を水乃至熱水で抽出して得られる抽出液に、アルコールを加え生成する沈殿からなるマクロファージ存在下における抗インフルエンザウイルス活性化物質。
- 生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ乾燥粉末のいずれか1以上を水乃至熱水で抽出して得られる抽出液に、沈殿が生じない程度にアルコールを加え、放置後液面若しくは液中に浮遊又は容器の壁面に付着する物質を取り除き、次いで該溶液を乾燥したものからなるマクロファージ存在下における抗インフルエンザウイルス活性化物質。
- 生マイタケ、乾燥マイタケ及びマイタケ乾燥粉末のいずれか1以上を水乃至熱水で抽出して得られる抽出液に、沈殿が生じない程度にアルコールを加え、放置後液面若しくは液中に浮遊又は容器の壁面に付着する物質を取り除き、次いで更にアルコールを加え生成する沈殿からなるマクロファージ存在下における抗インフルエンザウイルス活性化物質。
- 活性発現の機序がマクロファージ存在下におけるTNF-α産生誘導を介してなるものであることを特徴とする請求項1乃至4記載の抗インフルエンザウイルス活性化物質。
- 請求項1乃至5のいずれか1項記載の抗インフルエンザウイルス活性化物質を配合してなる食品。
- 請求項1乃至5のいずれか1項記載の抗インフルエンザウイルス活性化物質を配合してなる医薬品。
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