JP4421127B2 - 抗アレルゲン組成物及びアレルゲン不活化方法 - Google Patents

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、環境中のアレルゲンを不活化するための抗アレルゲン組成物及びこれを用いたアレルゲン不活化方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
喘息やアトピー性皮膚炎などのアレルギー性疾患は、長年にわたり、多くの人が悩まされてきたものである。これらのアレルギー性疾患の原因物質（以下アレルゲンと示す）の代表的なものとしては、屋内に棲息するダニやペットの毛、花粉などがよく知られている。現在、アレルギー患者の治療には主に薬物療法が適用されている一方、原因物質であるアレルゲンを患者自身の生活環境から除去することも、患者をアレルゲンへの暴露から直接守るという合理的な手段である。このようなアレルゲン除去による症状改善は、日本の他、ヨーロッパやアメリカにおいても報告がなされている。
【０００３】
アレルゲン除去の方法としては、電気掃除機による吸引、空気清浄機による除去や寝具の高密度カバーの使用などがあげられる。しかしながら、電気掃除機による吸引だけでは除去できるアレルゲン量に限界があり、空気清浄機では空中に舞うアレルゲン除去しかできない。また、寝具の高密度カバーでは、内側からのアレルゲン除去にはなるが、外側からのアレルゲン除去にはならないなど、これらの方法は必ずしも満足できるものではなかった。
【０００４】
アレルゲンを化学的に不活化する方法としては、特公平２−１６７３１にはタンニン酸を用いた方法、特開平６−２７９２７３には茶抽出物、没食子酸等を用いた方法が提案されている。しかしながら、これらの方法では、安定したアレルゲン不活化効果を得ることが困難で、さらに処理を行った対象物に何らかの着色を生じるという問題があった。
【０００５】
また、ハウスダスト中のダニ駆除には一般的に殺ダニ剤が用いられるが、ハウスダスト中のコナヒョウヒダニ Dermatophagoides farinae やヤケヒョウヒダニ Dermatophagoides pteronyssinus等は、死んだ後もアレルゲン性を有し、虫体が分解するに従い、徐々に微粒子のアレルゲンを放出するため、ダニを殺しただけではアレルゲンを不活化したことにはならない。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、このような課題を解決するため、鋭意研究の結果、カルシウム塩及びストロンチウム塩から選択される少なくとも一種類の塩を含有する組成物が、処理を行った対象物の着色を起こすことなくアレルゲン不活化効果を有すること、及びこの組成物を環境中に処理することにより、環境中のアレルゲンを安定的に不活化しうることを見いだし、本発明に至った。すなわち、本発明は、カルシウム塩及びストロンチウム塩から選択される少なくとも一種類の塩を含有する抗アレルゲン組成物、及びこれを散布しアレルゲンを不活化するアレルゲン不活化方法である。
【０００７】
本発明の抗アレルゲン組成物におけるカルシウム塩、ストロンチウム塩は、酢酸塩、プロピオン酸塩、硝酸塩、塩化物塩、臭化物塩、ヨウ化物塩、乳酸塩、炭酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、水酸化物等いずれの塩を用いても差し支えない。例えば、カルシウム塩であれば、酢酸カルシウム、硝酸カルシウム、塩化カルシウム、臭化カルシウム、ヨウ化カルシウム、乳酸カルシウム、クエン酸カルシウム、水酸化カルシウム、リン酸三カルシウム、リン酸一水素カルシウム、リン酸二水素カルシウム、ピロリン酸カルシウム、プロピオン酸カルシウム、ステアロイル乳酸カルシウム、パントテン酸カルシウム、酒石酸カルシウム、コハク酸カルシウム、マロン酸カルシウム、リンゴ酸カルシウム、ニコチン酸カルシウム、グリセロリン酸カルシウム、グルコン酸カルシウム等が挙げられる。これらの中で、塩化物塩、乳酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩が好ましい。これらのカルシウム塩またはストロンチウム塩をそのまま用いることができるが、通常は固体担体または液体担体に保持させた後、使用する。カルシウム塩、ストロンチウム塩の含有量は通常、０．０１〜５０重量％であり、より好ましくは０．１〜１０重量％である。本発明の抗アレルゲン剤組成物の剤型は、環境中のアレルゲンを不活化できる処理が可能であれば、液状、粉体状及びペースト状等、どのような剤型でも差し支えないが、液状とするのが扱いが容易で有効である。このような製剤を行うために、有効成分であるカルシウム塩及びストロンチウム塩から選択される少なくとも一種類の塩を溶解または分散するのに適当な溶剤が単独、もしくは二種類以上の混合溶剤として使用できる。溶剤には特に限定されないが、例えば水、メチルアルコール、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、ベンジルアルコール、酢酸、アセトン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、エチレングリコール、プロピレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、ジプロピレングリコール、ヘキシレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセリン、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテルアセテート、γ−ブチロラクトン、スルホランなどの極性溶剤、ジメチルナフタレン、ドデシルベンゼン、流動パラフィン、イソホロン、灯油、アジピン酸ジブチル、フタル酸ジエチル、ジエチレングリコールモノブチルエーテルアセテート、プロピレンカーボネート、椰子油、菜種油、綿実油、ヒマシ油、大豆油などの非極性溶剤を適宜使用することができる。通常はカルシウム塩またはストロンチウム塩を溶解させるため、水、アルコール類、及び水−アルコール類混合溶媒を例示出来る。
【０００８】
本発明の組成物は酸性とする方がより効果的であり、このためにリン酸または有機酸を添加することが有効である。リン酸としては、オルトリン酸、メタリン酸、ピロリン酸、ポリリン酸等いずれを用いても差し支えないが、オルトリン酸が好ましい。有機酸としては、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、マロン酸、コハク酸、アスコルビン酸、イソアスコルビン酸、酢酸、プロピオン酸、グルコン酸、マレイン酸、フマル酸、アルギン酸等、いずれの酸を用いても差し支えないが、乳酸、アスコルビン酸、イソアスコルビン酸が好ましい。これらのリン酸または有機酸の含有量は通常０．０１から２０重量％であり、より好ましくは０．１〜１０重量％である。
【０００９】
本発明の抗アレルゲン剤組成物の使用形態としては、水性溶液、スプレー、エアゾール、ペースト、粉剤等、都合の良い形にできるが、特に限定されるものではない。本発明の抗アレルゲン組成物をスプレーとして使用する場合には、乾燥後の粉立ちを防ぐために水溶性の樹脂を添加することが好ましい。このような水溶性樹脂は特に限定されないが、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸（塩）ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。
【００１０】
本発明抗アレルゲン組成物には、他のアレルゲン不活化剤を混合して用いることもできる。また、屋内塵性ダニのアレルゲン除去を目的に使用する場合には、殺ダニ剤と混合することにより、その効果をさらに持続させることも可能である。使用する殺ダニ剤は、屋内塵性ダニに対して致死効果や忌避効果のあるものであれば、特に限定はなく、例えば、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾエート、サリチル酸フェニル、シンナムアルデヒド、ヒソップ油、ニンジン種子油等を用いることができ、また天然ピレトリン、フェノトリン、ペルメトリン等のピレスロイド系化合物、フェニトロチオン、マラチオン、フェンチオン、ダイアジノン等の有機リン系化合物、ジコホル、クロルベンジレート、ヘキシチアゾクス、テブフェンピラド、ピリダベン等を用いることができる。
【００１１】
本発明の製剤化に際しては、用いられる有機酸、溶剤、カルボキシル基を有するポリマーの他に、必要に応じて界面活性剤、キレート剤、防錆剤、抗菌剤、バインダー、増粘剤、香料、スケール防止剤、消泡剤、帯電防止剤、柔軟加工剤等を添加することも可能である。
【００１２】
本発明の環境としては、カーペット、畳、床面、床カバー、布団などの寝具類、ソファー、ぬいぐるみ、衣類、カーテンなど直接人と接触するもの、あるいはタンス、押し入れなどの直接人と接触するものを収納している場所の空間、あるいは家屋内の居住空間などが挙げられる。本発明の抗アレルゲン組成物の使用方法として、一般にはアレルゲンで汚染されたカーペット、畳、寝具類、カーテン、ぬいぐるみ等に直接散布してアレルゲンを不活化することが考えられるが、本発明による対象物の着色はない。また、アレルゲンで汚染された寝具類等には、洗濯時の糊付けのように直接処理する方法も効果的である。さらに、本発明組成物を処理した綿布や不織布などを寝具類の上に敷く方法も効果的である。ダニによる汚染度の高いものは、抗アレルゲン組成物を処理する前に、殺ダニ剤を処理したり、丸洗いや電気掃除機による吸引などをするのが望ましい。
【００１３】
本発明の使用により、ハウスダスト中のダニ由来のアレルゲン、イヌやネコなどのペットの毛や上皮、ゴキブリ、羽毛、カビ由来のアレルゲン、及び植物アレルゲンをほぼ完全に不活化することができ、多種のアレルゲンを実質的に減少させることができる。よって本発明は、環境中のアレルゲンがハウスダスト中のダニアレルゲンや植物アレルゲンの場合に特に効果的に作用するものである。ダニには、ツメダニ、コナダニ等の種類があり、それらの内コナヒョウヒダニ Dermatophagoides farinae 、ヤケヒョウヒダニ Dermatophagoides pteronyssinusはダニアレルギーを引き起こす原因として重要視されている。これらのダニは、虫体そのものがダニアレルゲンになるだけでなく、ダニの死骸や糞も非常に強いアレルゲンとなる。
カビは湿度の高い場所に発生しやすく、肺に吸い込まれた場合にはアレルゲンとなる。植物アレルゲンとしては各種植物の花粉が挙げられ、花粉には、スギ、ヒノキ、ブタクサ、オオアワガエリ、ケヤキ、ヨモギ、ハルガヤ等のものがアレルギーの原因となることが知られている。
【００１４】
【実施例】
本発明を製剤例、実施例により更に詳しく説明するが、本発明がこれらによって限定されることはない。
【００１５】
【抗アレルゲン組成物実施例１〜１８】
表１〜３に示す組成のものを、充分攪拌することにより、均一な溶液を得た。なお、表に示した配合比率はすべて重量％である。
【００１６】
【表１】
抗アレルゲン組成物実施例

【００１７】
【表２】
抗アレルゲン組成物実施例

【００１８】
【表３】
抗アレルゲン組成物実施例

【００１９】
【表４】
抗アレルゲン組成物比較例

【００２０】
【試験例１】
ダニアレルゲン Ｄｅｒ ２ に対する本発明の組成物の不活化効果の測定
直径６．６cmの円形に切り取ったポリエステル製のフェルトに、標準ハウスダスト（ダニアレルゲン Ｄｅｒ ２ を約１０００μｇ／ｇ含有）をおよそ０．０３ｇずつのせ、そこへトリガースプレーにて、実施例１〜１８の抗アレルゲン組成物及び比較例１〜６を約２ｇずつ散布した。５時間以上、室温で自然乾燥させた後、フェルトをチャック付きビニル袋に入れ、リン酸緩衝液（ｐＨ７．０、牛血清アルブミン １５重量％含有）１０ｍＬを加えてよく揉み、ダニアレルゲンを抽出した。抽出液を遠心分離器にかけ（１２，０００rpm×６０min）、上澄み液のダニアレルゲン量の判定を行った。ダニアレルゲン量の判定には、屋内塵性ダニ簡易検査キットであるマイティチェッカー（シントーファイン株式会社製）を使用した。マイティチェッカーによるダニアレルゲン量の判定基準は、表５の通りである。さらに、上澄み液を用い、酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ法）のサンドイッチ法にてダニアレルゲン量の測定を行った。まず、Ｄｅｒｆ２ モノクローナル抗体１３Ａ４（１０００ｎｇ／１μＬ）をリン酸緩衝液（ｐＨ７．４、０．１重量％ＮａＮ３含有）で５００倍に希釈し、Ｆ１６ ＭＡＸＩＳＯＲＰ ＮＵＮＣ−ＩＭＭＵＮＯ ＭＯＤＵＬＥプレート（ＮＵＮＣ社製）の１ウェルあたり １００μＬずつ添加し、４℃にて１日以上感作させた。感作後、液を捨て、ブロッキング試薬｛１重量％牛血清アルブミンＦ−Ｖ（ナカライテスク株式会社製）＋リン酸緩衝液（ｐＨ７．２、０．１重量％ ＮａＮ３含有）｝を１ウェルあたり１００μＬずつ添加し、３７℃、６０分間反応させた。反応後、リン酸緩衝液（ｐＨ７．２、ツイーン２０ ０．１重量％含有）にてプレートを洗浄した。ペルオキシダーゼ標識したＤｅｒｆ２モノクローナル抗体を蒸留水に溶解し、それをリン酸緩衝液（ｐＨ７．２、牛血清アルブミン １重量％及びツイーン２０ ０．１重量％含有）で１０倍希釈した液を、１ウェルあたり１００μＬずつ添加した。３７℃、６０分間反応させた後、まずリン酸緩衝液（ｐＨ６．２）１５ｍＬに オルトフェニレンジアミン ジヒドロクロライド（３０ｍｇ Ｔａｂｌｅｔ、ＳＩＧＭＡ ＣＨＥＭＩＣＡＬ ＣＯ．製）と３０％過酸化水素水 １５μＬを加えたものを１ウェルあたり１００μＬずつ添加し、３７℃、５分間反応させた。その後直ちに、２ｍｏｌ／Ｌ 硫酸水溶液を５０μＬずつ入れて反応を停止させ、マイクロプレート用分光光度計（Ｂｉｏ−Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｃ．製）で吸光度（ＯＤ４９０ｎｍ）を測定した。また、実施例及び比較例にて製剤した抗アレルゲン剤を散布しない以外は同様に試験を行ったものをブランクとした。結果を表６に示した。
【００２１】
【表５】
マイティチェッカーによるダニアレルゲン量の判定基準

【００２２】
【表６】
ダニアレルゲンＤｅｒ ２に対する実施例の不活化効果の測定結果

不活化率はブランクに対する低減割合で示す
【００２３】
【試験例２】
スギ花粉 Ｃｒｙ ｊ２ に対する実施例６の不活化効果の測定
スギ花粉抽出物 Ｃｅｄｅｒ Ｐｏｌｌｅｎ Ｅｘｔｒｕｃｔ−Ｃｊ ５μｇ／５０μＬ｛炭酸−重炭酸緩衝液（ｐＨ９．５）｝に対し、実施例６を０，１６，２０，２４μＬずつ反応させ、これらをＬｉｎｂｒｏ／Ｔｉｔｅｒｔｅｋ Ｅ．Ｉ．Ａ． Ｍｉｃｒｏｔｉｔｒａｔｉｏｎプレート（ＩＣＮ ＢＩＯＣＨＥＭＩＣＡＬ ＩＮＣ．製）に感作させた（４℃、一晩）。感作後、プレートをリン酸緩衝液（ｐＨ７．２、ツイーン２０ ０．１重量％含有）にて洗浄した。次に、スギ花粉抗体 Ａｎｔｉ−Ｃｒｙ ｊ−２（Ｌｏｔ．７４７０３２）をリン酸緩衝液（ｐＨ７．２、牛血清アルブミン １重量％およびツイーン２０ ０．１重量％含有）にて２００倍希釈し、１ウェルあたり５０μＬずつ添加し、３７℃、６０分で反応させた。反応終了後、リン酸緩衝液（ｐＨ７．２、ツイーン２００．１重量％含有）にてプレート洗浄した。ペルオキシダーゼ標識抗家兎 ＩｇＧ（γ鎖）マウスモノクローナル抗体ＨＲＰ−Ａｎｔｉ−Ｒａｂｂｉｔ ＩｇＧ（ＳＩＧＭＡ ＣＨＥＭＩＣＡＬＳ ＣＯ．，Ｌｏｔ．０９７Ｈ４８５２）をリン酸緩衝液（ｐＨ７．２、牛血清アルブミン １重量％及びツイーン２０ ０．１重量％含有）で５，０００倍に希釈し、１ウェルあたり５０μＬずつ添加し、３７℃、６０分で反応させた。反応終了後、まずリン酸緩衝液（ｐＨ７．２、ツイーン２０ ０．１重量％含有）で、次いで蒸留水でプレートを洗浄した後、０．１ｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液（ｐＨ６．２）１５ｍＬに、オルト−フェニレンジアミン ジヒドロクロライド（３０ｍｇ Ｔａｂｌｅｔｓ，ＳＩＧＭＡ ＣＨＥＭＩＣＡＬ ＣＯ．）と３０％過酸化水素水１５μＬを加えたものを１ウェルあたり１００μＬずつ添加し、３７℃、１５分間反応させた。その後直ちに、２ｍｏｌ／Ｌ硫酸水溶液を５０μＬずつ入れて反応を停止させ、マイクロプレート用分光光度計で吸光度（ＯＤ４９０ｎｍ）を測定した。結果を表７に示した。
【００２４】
【表７】
スギ花粉 Ｃｒｙ ｊ２に対する実施例７の不活化効果の測定結果

【００２５】
【試験例３】
本発明組成物をカーペットに処理した場合のダニアレルゲン Ｄｅｒ ２ に対する不活化効果の測定
一辺が約５０ｃｍのカーペットを５枚用意し、各カーペットに１分以上掃除機をかけた後、各カーペットに、標準ハウスダスト（ダニアレルゲン Ｄｅｒ ２ を約１０００μｇ／ｇ含有）をおよそ０．０５ｇずつのせ、そこへトリガースプレーにて、実施例６及び１２の抗アレルゲン組成物、比較例５及び６を約４０ｇずつ散布した。５時間以上、室温で自然乾燥させた後、ダストサンプラー（シントーファイン株式会社製）及びマイティフェルト（シントーファイン株式会社製）を装着した掃除機で、カーペットを１分間かけて吸引した。ゴミを採取したフェルトをチャック付きビニル袋に入れ、リン酸緩衝液（ｐＨ７．０、スキムミルク１０％及び牛血清アルブミン １５重量％含有）１０ｍＬを加えてよく揉み、ダニアレルゲンを抽出した。抽出液を遠心分離器にかけ（１２，０００rpm×６０min）、上澄み液のダニアレルゲン量の判定を行った。また、実施例及び比較例を散布しない以外は同様に試験を行ったものをブランクとした。結果を表８に示した。
【００２６】
【表８】
ダニアレルゲンＤｅｒ ２に対する実施例の不活化効果の測定結果

不活化率はブランクに対する低減割合で示す
【００２７】
【試験例４】
綿生地に対する変色試験
一辺が約２０ｃｍの綿生地３枚に実施例６またはタンニン酸３％水溶液を、トリガースプレーを用いて約４ｇ処理し、室温で自然乾燥させた。１枚を洗濯洗剤アタック（花王株式会社製）で洗濯し、もう１枚を５時間日光曝露した。色彩色差計ＣＴ−２１０（ミノルタ株式会社製）を用いて綿生地の色彩測定を行った。Ｌ＊値（明度）は１００に近い値であるほど白いことを示し、ｂ＊値（黄−青度）は０より大きい値であるほど黄色いことを示し、０より小さい値であるほど青いことを示す。結果を表９に示す。
【００２８】
【表９】
変色試験結果

【００２９】
【発明の効果】
本発明のカルシウム塩、ストロンチウム塩から選択される少なくとも一種類を含有する抗アレルゲン組成物を処理することにより、アレルゲンを不活化することが可能となった。

Claims (4)

1. カルシウム塩（炭酸カルシウム、ハイドロキシアパタイト及び次亜塩素酸カルシウムを除く）、及びストロンチウム塩から選択される少なくとも一種類の塩を含有することを特徴とする抗アレルゲン組成物。
2. カルシウム塩（炭酸カルシウム、ハイドロキシアパタイト及び次亜塩素酸カルシウムを除く）、及びストロンチウム塩から選択される少なくとも一種類の塩と、リン酸及び有機酸（タンニン酸及び没食子酸を除く）から選択される少なくとも一種類の酸を含有することを特徴とする請求項１記載の抗アレルゲン組成物。
3. カルシウム塩が塩化カルシウムもしくは乳酸カルシウムであることを特徴とする請求項１または請求項２記載の抗アレルゲン組成物。
4. 請求項１〜３のいずれかに記載の抗アレルゲン組成物を環境中に散布し、アレルゲンを不活化する、アレルゲン不活化方法。