JP4780648B2 - 抗アレルゲン組成物 - Google Patents
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Description
N−ヒドロキシメチルグリシンは殺菌剤として公知の化合物であり、工業用洗剤等の液体製品に防腐剤として使用されてきているが、アレルゲンに作用し、アレルゲン性を低下させる機能を有することは知られていなかった。
(式中Mn+は水素、アルカリ金属またはアルカリ土類金属を示し、nはそれらの価数で水素とアルカリ金属の場合はn=1、アルカリ土類金属の場合はn=2である。)、に示す化合物で、Mn+は水素、リチウム、ナトリウム、カリウム、ルビジウム、セシウム、マグネシウム、カルシウム、ストロンチウム、バリウムいずれでも差し支えないが、ナトリウムが好ましい。
抗アレルゲン組成物中のこれらの成分の含有率は、散布剤として使用する場合0.01〜30重量%が好ましく、0.1〜10重量%がより好ましい。繊維または繊維製品への加工剤の場合には0.01〜70重量%が好ましく、0.1〜50重量%がより好ましい。
(抗アレルゲン組成物実施例)
下記、表1に示す組成のものを、充分攪拌することにより、均一な溶液を得た。なお、表1に示した配合比率はすべて重量%である。
標準ハウスダストに含まれるダニアレルゲン Derf2 約2μg/1mL{リン酸緩衝液(pH7.2)}に対し、実施例1または2を0.15mL反応させた。これら試料について Derf2酵素免疫測定法(ELISA)のサンドイッチ法にてダニアレルゲン低減化効果の測定を行った。まず、リン酸緩衝液(pH7.4、0.1重量%NaN3含有)で2μg/mLに希釈したDerf2 モノクローナル抗体15E11を、F16 MAXISORP NUNC−IMMUNO MODULEプレート(NUNC社製)の1ウェルあたり100μLずつ添加し、4℃にて1日以上感作させた。感作後、液を捨て、ブロッキング試薬{1重量%牛血清アルブミン+リン酸緩衝液(pH7.2、0.1重量%NaN3含有)}を1ウェルあたり100μLずつ添加し、37℃、60分間反応させた。反応後、リン酸緩衝液{pH7.2、0.1重量%ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート含有}にてプレートを洗浄した。次に、ダニアレルゲンと上記組成物を反応させて得られた抽出液を1ウェルあたり100μLずつ滴下し、37℃、60分間反応させた。反応後、リン酸緩衝液{pH7.2、0.1重量%ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート含有}にてプレートを洗浄した。ペルオキシダーゼ標識したDerf2モノクローナル抗体を蒸留水で200μg/mLに溶解し、それをリン酸緩衝液{pH7.2、1重量%牛血清アルブミン及び0.1重量%ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート含有}で1000倍希釈した液を、1ウェルあたり100μLずつ添加した。37℃、60分間反応させた後、先ずリン酸緩衝液{pH7.2、0.1重量%ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート含有}で、次いで蒸留水でプレートを洗浄した。0.1mol/Lリン酸緩衝液(pH6.2)13mLにオルト−フェニレンジアミンジヒドロクロライド(26mg Tablet、SIGMA CHEMICAL CO.製)と過酸化水素水13μLを加えたものを1ウェルあたり100μLずつ添加し、37℃、5分間反応させた。その後直ちに、2mol/L H2SO4を50μLずつ入れて反応を停止させ、マイクロプレート用分光光度計(Bio−Rad Laboratories Inc.製)で吸光度(OD490nm)を測定した。結果を表2に示した。
抗アレルゲン組成物によるスギ花粉アレルゲンCryj1の低減化効果の測定
標準スギ花粉アレルゲン Cryj1(株式会社林原生物化学研究所製) 約12.5ng/1mL{リン酸緩衝液(pH7.2)}に対し、実施例1または3を0.5mL反応させた。これら試料について Cryj1酵素免疫測定法(ELISA)のサンドイッチ法にてダニ抗アレルゲン効果の測定を行った。まず、リン酸緩衝液(pH7.4、0.1重量%NaN3含有)で2μg/mLに希釈したCryj1 モノクローナル抗体013を、F16 MAXISORP NUNC−IMMUNO MODULEプレート(NUNC社製)の1ウェルあたり100μLずつ添加し、4℃にて1日以上感作させた。感作後、液を捨て、ブロッキング試薬{1重量%牛血清アルブミン+リン酸緩衝液(pH7.2、0.1重量%NaN3含有)}を1ウェルあたり100μLずつ添加し、30℃、60分間反応させた。反応後、リン酸緩衝液{pH7.2、0.1重量%ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート含有}にてプレートを洗浄した。次に、スギ花粉アレルゲンと上記組成物を反応させて得られた抽出液を1ウェルあたり100μLずつ滴下し、30℃、60分間反応させた。反応後、リン酸緩衝液{pH7.2、0.1重量%ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート含有}にてプレートを洗浄した。ペルオキシダーゼ標識したCryj1モノクローナル抗体053を蒸留水で200μg/mLに溶解し、それをリン酸緩衝液{pH7.2、1重量%牛血清アルブミン及び0.1重量%ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート含有}で1200倍希釈した液を、1ウェルあたり100μLずつ添加した。30℃、60分間反応させた後、先ずリン酸緩衝液{pH7.2、0.1重量%ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート含有}でプレートを洗浄した。0.1mol/Lリン酸緩衝液(pH6.2)13mLにオルト−フェニレンジアミンジヒドロクロライド(26mg Tablet、SIGMA CHEMICAL CO.製)と過酸化水素水13μLを加えたものを1ウェルあたり100μLずつ添加し、37℃、5分間反応させた。その後直ちに、2mol/L H2SO4を50μLずつ入れて反応を停止させ、マイクロプレート用分光光度計(Bio−Rad Laboratories Inc.製)で吸光度(OD490nm)を測定した。結果を表3に示した。
繊維加工品によるダニアレルゲンの低減化効果の測定
綿ブロード布(白色)またはナイロン布(白色)に実施例4または比較例としてタンニン酸の3%水溶液(特開昭61−44821号該当品)を2.0%o.w.fで25℃において20分間浸漬し、しぼり率100%で処理後、105℃で乾燥させた。これらの生地について抗アレルゲン試験を行った。
生地(5cm×5cm)に標準ハウスダスト0.005gを付着させ、1時間後にチャック付きポリ袋に投入し、スキムミルク含有リン酸緩衝液(pH7.2)10mLを用いて抽出した。遠心分離後のこれら試料について Derf2酵素免疫測定法(ELISA)のサンドイッチ法にてダニアレルゲン低減化効果の測定を行った。まず、リン酸緩衝液(pH7.4、0.1重量%NaN3含有)で2μg/mLに希釈したDerf2 モノクローナル抗体15E11を、F16 MAXISORP NUNC−IMMUNO MODULEプレート(NUNC社製)の1ウェルあたり100μLずつ添加し、4℃にて1日以上感作させた。感作後、液を捨て、ブロッキング試薬{1重量%牛血清アルブミン+リン酸緩衝液(pH7.2、0.1重量%NaN3含有)}を1ウェルあたり100μLずつ添加し、37℃、60分間反応させた。反応後、リン酸緩衝液{pH7.2、0.1重量%ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート含有}にてプレートを洗浄した。次に、ダニアレルゲンと上記組成物を反応させて得られた抽出液を1ウェルあたり100μLずつ滴下し、37℃、60分間反応させた。反応後、リン酸緩衝液{pH7.2、0.1重量%ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート含有}にてプレートを洗浄した。ペルオキシダーゼ標識したDerf2モノクローナル抗体を蒸留水で200μg/mLに溶解し、それをリン酸緩衝液{pH7.2、1重量%牛血清アルブミン及び0.1重量%ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート含有}で1000倍希釈した液を、1ウェルあたり100μLずつ添加した。37℃、60分間反応させた後、先ずリン酸緩衝液{pH7.2、0.1重量%ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウレート含有}で、次いで蒸留水でプレートを洗浄した。0.1mol/Lリン酸緩衝液(pH6.2)13mLにオルト−フェニレンジアミンジヒドロクロライド(26mg Tablet、SIGMA CHEMICAL CO.製)と過酸化水素水13μLを加えたものを1ウェルあたり100μLずつ添加し、37℃、5分間反応させた。その後直ちに、2mol/L H2SO4を50μLずつ入れて反応を停止させ、マイクロプレート用分光光度計(Bio−Rad Laboratories Inc.製)で吸光度(OD490nm)を測定した。また外観を観察し
、変色の有無を確認した。結果を表4に示した。
Claims (3)
- 一般式1
(式中Mn+は水素、アルカリ金属またはアルカリ土類金属を示し、nはそれらの価数で水素とアルカリ金属の場合はn=1、アルカリ土類金属の場合はn=2である。)に示すN−(ヒドロキシメチル)グリシンまたはその塩の少なくとも一種類を含有することを特徴とする抗アレルゲン組成物。 - 一般式1
(式中Mn+は水素、アルカリ金属またはアルカリ土類金属を示し、nはそれらの価数で水素とアルカリ金属の場合はn=1、アルカリ土類金属の場合はn=2である。)に示すN−(ヒドロキシメチル)グリシンまたはその塩の少なくとも一種類の配合率が0.01重量%以上70%重量以下であることを特徴とする請求項1記載の抗アレルゲン組成物。 - 請求項1または2に記載の抗アレルゲン組成物を加工した繊維または繊維製品。
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