JP3210629B2 - 腫瘍壊死因子媒介疾患の治療または予防用薬剤学的組成物 - Google Patents
腫瘍壊死因子媒介疾患の治療または予防用薬剤学的組成物Info
- Publication number
- JP3210629B2 JP3210629B2 JP29598898A JP29598898A JP3210629B2 JP 3210629 B2 JP3210629 B2 JP 3210629B2 JP 29598898 A JP29598898 A JP 29598898A JP 29598898 A JP29598898 A JP 29598898A JP 3210629 B2 JP3210629 B2 JP 3210629B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- inhibitor
- tnf
- hours
- tnf inhibitor
- composition
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
- C07K14/7151—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for tumor necrosis factor [TNF], for lymphotoxin [LT]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/16—Central respiratory analeptics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は一般には疾患を予防
し治療する方法、より特徴的には、腫瘍壊死因子媒介疾
患を予防し治療する方法に関するものである。
し治療する方法、より特徴的には、腫瘍壊死因子媒介疾
患を予防し治療する方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】腫瘍壊死因子（ＴＮＦｓ）は、単球とマ
クロファージを含む多くの細胞型によって産生されるサ
イトカインの一種である。少なくとも２種類のＴＮＦ
ｓ，特にＴＮＦアルファーとＴＮＦベータ（リンホトキ
シン）がこれまでに記述されてきた。これらの既知のＴ
ＮＦｓは、炎症性の応答を含む多くの異なった標的細胞
に重要な生理的影響を及ぼす。この蛋白質は、線維芽細
胞と滑液細胞の両方に潜伏性のコラゲナーゼとプロスタ
グランジンＥ２を分泌させ、また骨細胞に骨髄の再吸収
をするように刺激する。これらの蛋白質は好中球に対す
る内皮細胞の表面接着性を増加する。それらはまた、内
皮細胞に凝血活性を分泌させ血餅を溶かす能力を減少さ
せる。さらに、それらは酵素リボ蛋白質リパーゼの発現
を阻害することによって脂肪細胞を脂質の貯蔵から変化
させる。ＴＮＦｓは肝細胞に“急性相反応物質”として
知られる蛋白質の１種を合成させ、それらは視床下部に
発熱物質として作用する。これらの活性を通して、感染
や傷害のようないろいろな徴候に対する生物体の応答に
重要な役割を演じていることが分かってきた。 Ｐ．
Ｊ．Ｓｅｌｂｙ ｅｔ ａｌによる論文．，Ｌａｎｃｅ
ｔ，Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２７，１９８８，ｐｇ．４８
３；Ｈ．Ｆ．Ｓｔａｒｎｅｓ，Ｊｒ．ｅｔ ａｌ，，
Ｊ．Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．，ｖｏｌ．８２，ｐｇ．
１３２１（１９８８）；Ａ．Ｏｌｉｆｆ ｅｔ ａｌ．
Ｃｅｌｌ，ｖｏｌ．５０，ｐｇ．５５５（１９８７）；
及びＡ．Ｗａａｇｅ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ，Ｆ
ｅｂｒｕａｒｙ １４，１９８７，ｐｇ．３５５．を参
照すること。もしも自然発生的または実験的疾患が、体
液中のまたは体内の疾患または徴候の病巣に近接した組
織内のＴＮＦの濃度の上昇に関係があれば、その疾患は
“ＴＮＦ媒介疾患”であると考えられる。
クロファージを含む多くの細胞型によって産生されるサ
イトカインの一種である。少なくとも２種類のＴＮＦ
ｓ，特にＴＮＦアルファーとＴＮＦベータ（リンホトキ
シン）がこれまでに記述されてきた。これらの既知のＴ
ＮＦｓは、炎症性の応答を含む多くの異なった標的細胞
に重要な生理的影響を及ぼす。この蛋白質は、線維芽細
胞と滑液細胞の両方に潜伏性のコラゲナーゼとプロスタ
グランジンＥ２を分泌させ、また骨細胞に骨髄の再吸収
をするように刺激する。これらの蛋白質は好中球に対す
る内皮細胞の表面接着性を増加する。それらはまた、内
皮細胞に凝血活性を分泌させ血餅を溶かす能力を減少さ
せる。さらに、それらは酵素リボ蛋白質リパーゼの発現
を阻害することによって脂肪細胞を脂質の貯蔵から変化
させる。ＴＮＦｓは肝細胞に“急性相反応物質”として
知られる蛋白質の１種を合成させ、それらは視床下部に
発熱物質として作用する。これらの活性を通して、感染
や傷害のようないろいろな徴候に対する生物体の応答に
重要な役割を演じていることが分かってきた。 Ｐ．
Ｊ．Ｓｅｌｂｙ ｅｔ ａｌによる論文．，Ｌａｎｃｅ
ｔ，Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２７，１９８８，ｐｇ．４８
３；Ｈ．Ｆ．Ｓｔａｒｎｅｓ，Ｊｒ．ｅｔ ａｌ，，
Ｊ．Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．，ｖｏｌ．８２，ｐｇ．
１３２１（１９８８）；Ａ．Ｏｌｉｆｆ ｅｔ ａｌ．
Ｃｅｌｌ，ｖｏｌ．５０，ｐｇ．５５５（１９８７）；
及びＡ．Ｗａａｇｅ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ，Ｆ
ｅｂｒｕａｒｙ １４，１９８７，ｐｇ．３５５．を参
照すること。もしも自然発生的または実験的疾患が、体
液中のまたは体内の疾患または徴候の病巣に近接した組
織内のＴＮＦの濃度の上昇に関係があれば、その疾患は
“ＴＮＦ媒介疾患”であると考えられる。
【０００３】多くの場合、このようなＴＮＦ媒介疾患は
また、次の２つの条件によって認められる：（１）疾患
に関係した病理所見は、ＴＮＦを実験的に動物に投与す
ることによって模造することができる。；また（２）実
験動物モデルに生じた疾患の病状は、ＴＮＦの作用を阻
害する剤による治療で阻止または無くすことができる。
大部分の“ＴＮＦ媒介疾患”は、少なくとも３つの条件
の内の２つに適合し、多くの“ＴＮＦ媒介疾患”は３つ
の条件のすぺてに適合する。これらの基準を満足する疾
患のリストは次の通りであるが、それらに限定はされな
い； １） 成人呼吸困難症候群 ２） 肺線維症 ３） 関節炎 ４） 炎症性腸疾患 ５） 敗血症ショック これらの５つの疾患は、ＴＮＦ−媒介疾患の証拠があ
る。敗血症ショック、関節炎、成人呼吸困難症候群の動
物モデルはよく知られており、ＴＮＦ−媒介疾患を治療
するＴＮＦ阻害剤の能力を立証するためにここに用いて
いる。
また、次の２つの条件によって認められる：（１）疾患
に関係した病理所見は、ＴＮＦを実験的に動物に投与す
ることによって模造することができる。；また（２）実
験動物モデルに生じた疾患の病状は、ＴＮＦの作用を阻
害する剤による治療で阻止または無くすことができる。
大部分の“ＴＮＦ媒介疾患”は、少なくとも３つの条件
の内の２つに適合し、多くの“ＴＮＦ媒介疾患”は３つ
の条件のすぺてに適合する。これらの基準を満足する疾
患のリストは次の通りであるが、それらに限定はされな
い； １） 成人呼吸困難症候群 ２） 肺線維症 ３） 関節炎 ４） 炎症性腸疾患 ５） 敗血症ショック これらの５つの疾患は、ＴＮＦ−媒介疾患の証拠があ
る。敗血症ショック、関節炎、成人呼吸困難症候群の動
物モデルはよく知られており、ＴＮＦ−媒介疾患を治療
するＴＮＦ阻害剤の能力を立証するためにここに用いて
いる。
【０００４】成人呼吸困難症候群（ＡＲＤＳ）は、呼吸
困難、頻呼吸、チアノーゼ、重度血中酸素減少、肺の伸
展性減少、及び肺動脈管の透過性増加の急速な徴候で特
徴づけられる。ＡＲＤＳによる死亡率は５０％以上であ
る。ＡＲＤＳの進行に関係するリスク要因には、外傷、
大量輸血、散在性血管内凝固、酸素毒、毒物の吸入と刺
激物、また敗血症への全身性反応、出血性膵臓炎、火
傷、及び腹部手術の合併症が含まれる。プロスタグラン
ジン、リューコトリエン、補体、及びフリーの酸素ラジ
カルのような各種の媒体が症候群の原因として関わって
きた；しかしながら、特殊な媒体の作用を阻害するよう
に処方された各種の治療はＡＲＤｓの臨床的経過を改善
しなかった。動物実験の結果は、次のようにＴＮＦがＡ
ＲＤＳの媒体であるという仮設を支持している：
困難、頻呼吸、チアノーゼ、重度血中酸素減少、肺の伸
展性減少、及び肺動脈管の透過性増加の急速な徴候で特
徴づけられる。ＡＲＤＳによる死亡率は５０％以上であ
る。ＡＲＤＳの進行に関係するリスク要因には、外傷、
大量輸血、散在性血管内凝固、酸素毒、毒物の吸入と刺
激物、また敗血症への全身性反応、出血性膵臓炎、火
傷、及び腹部手術の合併症が含まれる。プロスタグラン
ジン、リューコトリエン、補体、及びフリーの酸素ラジ
カルのような各種の媒体が症候群の原因として関わって
きた；しかしながら、特殊な媒体の作用を阻害するよう
に処方された各種の治療はＡＲＤｓの臨床的経過を改善
しなかった。動物実験の結果は、次のようにＴＮＦがＡ
ＲＤＳの媒体であるという仮設を支持している：
【０００５】１ ラットへのＴＮＦの注入の症状はＡＲ
ＤＳに似ている。ＴＮＦの注入後、肺の伸展性が減少
し、肺の水分含量と細胞質が増加し、斑点状の出血がひ
どく目立つようになり、好中球血栓の組織学的所見と拡
散肺胞の損傷が見られる。 Ｅ．Ｆｅｒｒａｒｉ−Ｂａ
ｌｉｖｉｅｒａ ｅｔ ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｓｕｒ
ｑ．，ｖｏｌ．１２４，ｐｐ．１４００−１４０５（１
９８９）； Ｋ．Ｊ．Ｔｒａｃｅｙ ｅｔ ａｌ．，
ｓｃｉｅｎｃｅ，ｖｏｌ．２３４，ｐｐ．４７０−４７
４（１９８６）．を参照すること。
ＤＳに似ている。ＴＮＦの注入後、肺の伸展性が減少
し、肺の水分含量と細胞質が増加し、斑点状の出血がひ
どく目立つようになり、好中球血栓の組織学的所見と拡
散肺胞の損傷が見られる。 Ｅ．Ｆｅｒｒａｒｉ−Ｂａ
ｌｉｖｉｅｒａ ｅｔ ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｓｕｒ
ｑ．，ｖｏｌ．１２４，ｐｐ．１４００−１４０５（１
９８９）； Ｋ．Ｊ．Ｔｒａｃｅｙ ｅｔ ａｌ．，
ｓｃｉｅｎｃｅ，ｖｏｌ．２３４，ｐｐ．４７０−４７
４（１９８６）．を参照すること。
【０００６】２．抗−ＴＮＦ 抗血清でラットを前処理
するとＡＲＤＳの動物モデルの誘発が阻害された。ＡＲ
ＤＳは、肝臓虚血とそれに続く肝臓の再還流によって誘
発された。再還流後のＴＮＦの増加した循環濃度は、大
量の固定した肝臓マクロファージから生ずると推定され
た。肺毛細血管漏出は、ＴＮＦ−阻止能のない血清を与
えられたラットの値に比較して処理ラットの値は減少し
た。 Ｌ．Ｍ．Ｃｏｌｌｅｔｔｉ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒ
ａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，ｖｏｌ．４９，ｐｐ．２
６８−２７２（１９９０）を参照すること。
するとＡＲＤＳの動物モデルの誘発が阻害された。ＡＲ
ＤＳは、肝臓虚血とそれに続く肝臓の再還流によって誘
発された。再還流後のＴＮＦの増加した循環濃度は、大
量の固定した肝臓マクロファージから生ずると推定され
た。肺毛細血管漏出は、ＴＮＦ−阻止能のない血清を与
えられたラットの値に比較して処理ラットの値は減少し
た。 Ｌ．Ｍ．Ｃｏｌｌｅｔｔｉ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒ
ａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，ｖｏｌ．４９，ｐｐ．２
６８−２７２（１９９０）を参照すること。
【０００７】３．２つの臨床試験で、ＴＮＦ濃度はＡＲ
ＤＳ患者の気管支肺の分泌で測定した。５人のＡＲＤＳ
患者の最初の試験で、ＴＮＦ濃度は１２．５ｎｇ／ｍＬ
以上であった。対照サンプルには、ＴＮＦは検出されな
かった。２回目の試験で、ＡＲＤＳの４人の患者の内３
人の気管支肺胞の洗浄液に有意なＴＮＦ量が測定された
が、対照における検出限界以下であった。 Ａ．Ｂ．Ｍ
ｉｌｌａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ，ｖｏｌ．
２，ｐｐ．７２−７１４（１９８９）；Ｄ．Ｊ．Ｒｏｂ
ｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ，ｖｏｌ．２，
ｐｐ．１０４３−１０４４（１９８９）を参照のこと。
ＤＳ患者の気管支肺の分泌で測定した。５人のＡＲＤＳ
患者の最初の試験で、ＴＮＦ濃度は１２．５ｎｇ／ｍＬ
以上であった。対照サンプルには、ＴＮＦは検出されな
かった。２回目の試験で、ＡＲＤＳの４人の患者の内３
人の気管支肺胞の洗浄液に有意なＴＮＦ量が測定された
が、対照における検出限界以下であった。 Ａ．Ｂ．Ｍ
ｉｌｌａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ，ｖｏｌ．
２，ｐｐ．７２−７１４（１９８９）；Ｄ．Ｊ．Ｒｏｂ
ｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ，ｖｏｌ．２，
ｐｐ．１０４３−１０４４（１９８９）を参照のこと。
【０００８】肺線維症は、いろいろな肺疾患の末期段階
で発生する。線維症は線維芽細胞の成長と肺胞壁内のコ
ラーゲン蓄積量の増加の結果である。ＴＮＦは、肺線維
症の進行上明らかにキーの役割を果たしている。ＴＮＦ
は、ピコモル濃度では、正常な二倍体線維芽細胞の成長
因子である。 Ｂ．Ｊ．Ｓｕｇａｒｍａｎ ｅｔ ａ
ｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｖｏｌ．２３０，ｐｐ．９４３
−９４５（１９８５）参照。肺損傷を含む動物実験の結
果は、癌の化学療法剤であるプレオマイシンによって誘
導され、その提案を支える証拠を与えた。肺線維症のＴ
ＮＦ−媒介は次の事項によって支持される：
で発生する。線維症は線維芽細胞の成長と肺胞壁内のコ
ラーゲン蓄積量の増加の結果である。ＴＮＦは、肺線維
症の進行上明らかにキーの役割を果たしている。ＴＮＦ
は、ピコモル濃度では、正常な二倍体線維芽細胞の成長
因子である。 Ｂ．Ｊ．Ｓｕｇａｒｍａｎ ｅｔ ａ
ｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｖｏｌ．２３０，ｐｐ．９４３
−９４５（１９８５）参照。肺損傷を含む動物実験の結
果は、癌の化学療法剤であるプレオマイシンによって誘
導され、その提案を支える証拠を与えた。肺線維症のＴ
ＮＦ−媒介は次の事項によって支持される：
【０００９】１．ＴＮＦの静脈内注入は、広汎性の肺胞
損傷、特に肺胞上皮と内皮細胞の壊死及び肺胞膜の著し
い肥厚を引き起こす。ラットに対するＴＮＦの皮下注入
は、線維芽細胞の増殖とコラーゲン蓄積の著しい増加を
もたらす。Ｋ．Ｊ．Ｔｒａｃｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ ｖｏｌ．２３４，ｐｐ．４７０−４７４
（１９８６）；Ｐ．Ｆ．Ｐｉｇｕｅｔ ｅｔ ａｌ．，
Ｉｎｔ．Ａｒｃｈ．Ａｌｌｅｒｇ．Ａｐｏｌ．Ｉｍｍｕ
ｎｏｌ．，ｖｏｌ．８３，ｐ．１８（１９８６）参照す
ること。
損傷、特に肺胞上皮と内皮細胞の壊死及び肺胞膜の著し
い肥厚を引き起こす。ラットに対するＴＮＦの皮下注入
は、線維芽細胞の増殖とコラーゲン蓄積の著しい増加を
もたらす。Ｋ．Ｊ．Ｔｒａｃｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ ｖｏｌ．２３４，ｐｐ．４７０−４７４
（１９８６）；Ｐ．Ｆ．Ｐｉｇｕｅｔ ｅｔ ａｌ．，
Ｉｎｔ．Ａｒｃｈ．Ａｌｌｅｒｇ．Ａｐｏｌ．Ｉｍｍｕ
ｎｏｌ．，ｖｏｌ．８３，ｐ．１８（１９８６）参照す
ること。
【００１０】２．ウサギの抗−ＴＮＦ抗体のマウスへの
投与は、プレオマイシン誘発の肺胞損傷、線維芽細胞の
成長、及びコラーゲン蓄積を防止した。 Ｐｉｅｒｒｅ
Ｆ．Ｐｉｇｕｅｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅ
ｄ．，ｖｏｌ．１７０，ｐｐ．６５５−６６３（１９８
９）を参照すること。
投与は、プレオマイシン誘発の肺胞損傷、線維芽細胞の
成長、及びコラーゲン蓄積を防止した。 Ｐｉｅｒｒｅ
Ｆ．Ｐｉｇｕｅｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅ
ｄ．，ｖｏｌ．１７０，ｐｐ．６５５−６６３（１９８
９）を参照すること。
【００１１】３．ＡＲＤＳの生き残り患者の通常の後遺
症は、肺線維症である。急性のＡＲＤｓの期間、ＴＮＦ
は気管支肺胞液中に有意な量で存在する。
症は、肺線維症である。急性のＡＲＤｓの期間、ＴＮＦ
は気管支肺胞液中に有意な量で存在する。
【００１２】関節炎は、関節の慢性的炎症によって特徴
づけられる種々の徴候を述べるのに用いられる用語であ
る。関節炎という言葉の定義には次のものが含まれる：
リウマチ様関節炎、骨関節症、強直性脊椎炎、紅斑性狼
瘡、淋菌性関節炎、Ｒｅｉｔｅｒ’ｓ疾患関節炎及び痛
風。リウマチ様関節炎におけるＴＮＦの媒介的役割に関
する証拠は以下のように説明されている。
づけられる種々の徴候を述べるのに用いられる用語であ
る。関節炎という言葉の定義には次のものが含まれる：
リウマチ様関節炎、骨関節症、強直性脊椎炎、紅斑性狼
瘡、淋菌性関節炎、Ｒｅｉｔｅｒ’ｓ疾患関節炎及び痛
風。リウマチ様関節炎におけるＴＮＦの媒介的役割に関
する証拠は以下のように説明されている。
【００１３】リウマチ様関節炎は、関節における関節軟
骨の破壊に起因する慢性の自己免疫疾患である。滑液の
内膜は慢性的に炎症を起こし、進行性線維症の成長を受
けている。Ｉｎ ｖｉｔｒｏに、ＴＮＦは、内皮細胞と
白血球の両方を活性化し、白血球の粘着性を高め、再吸
収を刺激し、軟骨中のプロテオグリカンの合成を阻害す
る。 Ｊ．Ｒ．Ｇａ−ｍｂｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．，ｖｏｌ．
８２，ｐｐ．８６６７−８６７３（１９８５）；Ｊ．Ｓ
ａｋｌａｔｖａｌａ，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３２２，
ｐｐ．５４７−５５２（１９８６）を参照すること。こ
れらのｉｎ ｖｉｔｒｏの活性は、ＴＮＦがリウマチ様
関節炎における関節病理の媒体であり得ることを強力に
示唆する。リウマチ様関節炎のＴＮＦ−媒介は、次のこ
とによって支持される：
骨の破壊に起因する慢性の自己免疫疾患である。滑液の
内膜は慢性的に炎症を起こし、進行性線維症の成長を受
けている。Ｉｎ ｖｉｔｒｏに、ＴＮＦは、内皮細胞と
白血球の両方を活性化し、白血球の粘着性を高め、再吸
収を刺激し、軟骨中のプロテオグリカンの合成を阻害す
る。 Ｊ．Ｒ．Ｇａ−ｍｂｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．，ｖｏｌ．
８２，ｐｐ．８６６７−８６７３（１９８５）；Ｊ．Ｓ
ａｋｌａｔｖａｌａ，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３２２，
ｐｐ．５４７−５５２（１９８６）を参照すること。こ
れらのｉｎ ｖｉｔｒｏの活性は、ＴＮＦがリウマチ様
関節炎における関節病理の媒体であり得ることを強力に
示唆する。リウマチ様関節炎のＴＮＦ−媒介は、次のこ
とによって支持される：
【００１４】１．ウサギの関節にＴＮＦを関節内注入す
ると白血球の関節内への浸潤を引き起こすが軟骨からの
プロテオグリカンのロスは生じない。ＴＮＦとインター
ロイキン−１（ＩＬ−１）の最大下の投与量の関節内へ
の注入は、好中球の共同蓄積を引き起こす。Ｂ．Ｈｅｎ
ｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ，Ｅｘｐ．Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．７５，ｐｐ．３０６−３１０
（１９８９）。逆に、ウサギを用いた他の実験シリーズ
では、ＴＮＦαの単独関節内注入は細胞浸潤と軟骨プロ
テオグリカンのロスの両方を引き起こした。物質Ｐ、炎
症神経ペプチドの濃度は滑液中に増加した。 Ａ．Ｓ．
Ｒｕｂｉｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａ
ｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，ｖｏｌ．３３，ｐｐ．１
０２３−１０２８（１９９０）を参照すること。
ると白血球の関節内への浸潤を引き起こすが軟骨からの
プロテオグリカンのロスは生じない。ＴＮＦとインター
ロイキン−１（ＩＬ−１）の最大下の投与量の関節内へ
の注入は、好中球の共同蓄積を引き起こす。Ｂ．Ｈｅｎ
ｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ，Ｅｘｐ．Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．７５，ｐｐ．３０６−３１０
（１９８９）。逆に、ウサギを用いた他の実験シリーズ
では、ＴＮＦαの単独関節内注入は細胞浸潤と軟骨プロ
テオグリカンのロスの両方を引き起こした。物質Ｐ、炎
症神経ペプチドの濃度は滑液中に増加した。 Ａ．Ｓ．
Ｒｕｂｉｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａ
ｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，ｖｏｌ．３３，ｐｐ．１
０２３−１０２８（１９９０）を参照すること。
【００１５】２．滑液細胞ＩＬ−１の産生におけるＴＮ
Ｆ抗体の影響をリウマチ様患者で測定した。リウマチ様
関節の滑膜または滑液から抽出した単核細胞の培養によ
り、外部からの刺激なしに６日間サイトカインを産生す
る。リウマチ様関節炎の患者の場合、培養における滑液
細胞ＩＬ−１の産生は、抗−ＴＮＦ抗体により有意に減
少した。これらの結果は、リウマチ様関節内のＩＬ−１
の誘発にＴＮＦが中枢的役割を果たしていることを示唆
している。Ｆ．Ｍ．Ｂｒｅｎｎａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｌ
ａｎｃｅｔ，ｖｏｌ．２（８６５７），ｐｐ．２４４−
２４７（１９８９）を参照すること。
Ｆ抗体の影響をリウマチ様患者で測定した。リウマチ様
関節の滑膜または滑液から抽出した単核細胞の培養によ
り、外部からの刺激なしに６日間サイトカインを産生す
る。リウマチ様関節炎の患者の場合、培養における滑液
細胞ＩＬ−１の産生は、抗−ＴＮＦ抗体により有意に減
少した。これらの結果は、リウマチ様関節内のＩＬ−１
の誘発にＴＮＦが中枢的役割を果たしていることを示唆
している。Ｆ．Ｍ．Ｂｒｅｎｎａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｌ
ａｎｃｅｔ，ｖｏｌ．２（８６５７），ｐｐ．２４４−
２４７（１９８９）を参照すること。
【００１６】３．ＴＮＦはリウマチにかかった滑液中に
検出できる量で存在する。 Ｆ．Ｓ．Ｄｉ Ｇｉｏｖｉ
ｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ，ｖ
ｏｌ．４７，ｐｐ．７６８−７７６（１９８８）を参照
のこと。
検出できる量で存在する。 Ｆ．Ｓ．Ｄｉ Ｇｉｏｖｉ
ｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ，ｖ
ｏｌ．４７，ｐｐ．７６８−７７６（１９８８）を参照
のこと。
【００１７】特発性の炎症性腸疾患（ＩＢＤ）は、２つ
の症候群；潰瘍性大腸炎とクローン病を含む。クローン
病は、潰瘍性大腸炎が結腸の粘膜または粘膜下組織に限
定して非特異的炎症反応を起こしている末端回腸または
結腸の壁の全面肥厚を含む肉芽種性の炎症反応によって
特徴づけられる。２つの症候群の病状には違いがあり、
また両方の病因にははっきりしない点が残るが、この２
つの疾患は、通常の原因物質に対するいろいろな組織ま
たは免疫性の反応であることは間違いない。ＩＢＤの患
者には、各種類の免疫性の疾患が同定された。１つの仮
定は、だれもが普通さらされる例えばバクテリア産生物
のような抗原に対して患者の免疫システムが異常にまた
は不適当に反応すると言うことである。腸内でのＴＮＦ
の高濃度の合成がＩＢＤにおける炎症性細胞浸潤に関与
しているのかも知れない。ＩＢＤに関するＴＮＦ−媒介
は以下のことから支持される。
の症候群；潰瘍性大腸炎とクローン病を含む。クローン
病は、潰瘍性大腸炎が結腸の粘膜または粘膜下組織に限
定して非特異的炎症反応を起こしている末端回腸または
結腸の壁の全面肥厚を含む肉芽種性の炎症反応によって
特徴づけられる。２つの症候群の病状には違いがあり、
また両方の病因にははっきりしない点が残るが、この２
つの疾患は、通常の原因物質に対するいろいろな組織ま
たは免疫性の反応であることは間違いない。ＩＢＤの患
者には、各種類の免疫性の疾患が同定された。１つの仮
定は、だれもが普通さらされる例えばバクテリア産生物
のような抗原に対して患者の免疫システムが異常にまた
は不適当に反応すると言うことである。腸内でのＴＮＦ
の高濃度の合成がＩＢＤにおける炎症性細胞浸潤に関与
しているのかも知れない。ＩＢＤに関するＴＮＦ−媒介
は以下のことから支持される。
【００１８】１）ラットによる２つの試験で、ＴＮＦの
静脈内ボーラス投与によって胃腸管の壊死が引き起こさ
れた。ＴＮＦの影響は投与量に関係しているように思わ
れる。０．６ｍｇ／ｋｇ以上の投与量では、肉眼及び顕
微鏡で小腸の壊死が見られた。腸は明らかな出血または
壊死の範囲を持ち部分的な虚血症状を示していた。盲腸
は特にＴＮＦに敏感なようであった。非壊死腸管の組織
構造部分もまた多形核白血球の粘膜下組織と粘膜筋板へ
の浸潤による炎症的変化を示した。上皮は腸の病巣分布
域で露出していた。Ｘ．Ｍ．Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ．，
Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，ｖｏｌ．８１，ｐｐ．
４７０−４７４（１９８６）を参照すること。
静脈内ボーラス投与によって胃腸管の壊死が引き起こさ
れた。ＴＮＦの影響は投与量に関係しているように思わ
れる。０．６ｍｇ／ｋｇ以上の投与量では、肉眼及び顕
微鏡で小腸の壊死が見られた。腸は明らかな出血または
壊死の範囲を持ち部分的な虚血症状を示していた。盲腸
は特にＴＮＦに敏感なようであった。非壊死腸管の組織
構造部分もまた多形核白血球の粘膜下組織と粘膜筋板へ
の浸潤による炎症的変化を示した。上皮は腸の病巣分布
域で露出していた。Ｘ．Ｍ．Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ．，
Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，ｖｏｌ．８１，ｐｐ．
４７０−４７４（１９８６）を参照すること。
【００１９】２）Ｔｒａｃｅｙの試験で、ヒトＴＮＦに
対する中和マウスモノクローナル抗体の４ｍｇをＴＮＦ
の注入１時間前にラットに注入すると、ＴＮＦの致死用
量から完全に動物を防護したばかりではなくＴＮＦによ
って引き起こされる典型的な病変の進行もまた阻止し
た。
対する中和マウスモノクローナル抗体の４ｍｇをＴＮＦ
の注入１時間前にラットに注入すると、ＴＮＦの致死用
量から完全に動物を防護したばかりではなくＴＮＦによ
って引き起こされる典型的な病変の進行もまた阻止し
た。
【００２０】３）クローン病の子供の生検からの分離物
は、スポットのエリサ検定法で分析したすべての個体で
ＴＮＦα分泌細胞の頻度の上昇を示した。正常な子供か
らの分離物ではこの増加は見られなかった。潰瘍性大腸
炎では、８人の子供の内の４人がＴＮＦαの産生が増加
した。これらの結果はＴＮＦαがヒトの腸内の炎症の重
要な媒体であることを示唆している。 Ｔ．Ｔ．Ｍａｃ
Ｄｏｎａｌｄ，ｅｔａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ．，（ＥＮＧＬＡＮＤ）ｖｏｌ．８１，ｐｐ．
３０１−３０５（１９９０）を参照すること。
は、スポットのエリサ検定法で分析したすべての個体で
ＴＮＦα分泌細胞の頻度の上昇を示した。正常な子供か
らの分離物ではこの増加は見られなかった。潰瘍性大腸
炎では、８人の子供の内の４人がＴＮＦαの産生が増加
した。これらの結果はＴＮＦαがヒトの腸内の炎症の重
要な媒体であることを示唆している。 Ｔ．Ｔ．Ｍａｃ
Ｄｏｎａｌｄ，ｅｔａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ．，（ＥＮＧＬＡＮＤ）ｖｏｌ．８１，ｐｐ．
３０１−３０５（１９９０）を参照すること。
【００２１】敗血症ショックは大量のバクテリアの浸潤
に関係している。ショックは少なくとも一部はバクテリ
アのエンドトキシン（リポポリサッカライド）の存在に
よりもたらされるグラム陰性菌感染に起因すると普通信
じられている。敗血症ショックは病院環境では比較的普
通の死亡原因になっている。現在、敗血症ショックで苦
しむ患者に対する治療の選択は少なく、利用できる治療
が実際一般に支持される。敗血症ショックは、平均動脈
血圧（ＭＡＰ）の低下、心臓血液搏出量の減少、頻搏、
頻呼吸、乳酸血症及び白血球減少症を含むいろいろな症
状によって特徴づけられる。この病気の特定の原因は十
分には理解されていないけれども、ＴＮＦを含む各種類
のサイトカインが敗血症ショックの媒体として関係して
きている。敗血症ショックの媒介にＴＮＦｓが役割を演
じていることを示唆するいくつかの一連の証拠がある：
に関係している。ショックは少なくとも一部はバクテリ
アのエンドトキシン（リポポリサッカライド）の存在に
よりもたらされるグラム陰性菌感染に起因すると普通信
じられている。敗血症ショックは病院環境では比較的普
通の死亡原因になっている。現在、敗血症ショックで苦
しむ患者に対する治療の選択は少なく、利用できる治療
が実際一般に支持される。敗血症ショックは、平均動脈
血圧（ＭＡＰ）の低下、心臓血液搏出量の減少、頻搏、
頻呼吸、乳酸血症及び白血球減少症を含むいろいろな症
状によって特徴づけられる。この病気の特定の原因は十
分には理解されていないけれども、ＴＮＦを含む各種類
のサイトカインが敗血症ショックの媒体として関係して
きている。敗血症ショックの媒介にＴＮＦｓが役割を演
じていることを示唆するいくつかの一連の証拠がある：
【００２２】１．ＴＮＦの動物への投与は、ショック様
の状態を引き起こすことが示されてきた。 Ｅｖｅｒｈ
ａｅｒｄｔ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈ
ｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，ｖｏｌ．１６３，ｐ
ｇ．３７８（１９８９）を参照すること。リポポリサッ
カライドのマウスへの投与は、動物の敗血症ショックに
似ていることが示された。この処置を受けた動物は循環
ＴＮＦアルファの濃度の増加がみられた。Ｐａｒｉｌｌ
ｏ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．，
ｖｏｌ．９，ｐｐ．２８−３１（１９８８）；及びｃａ
ｒｓｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａ
ｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，ｖｏｌ．７２，ｐｐ．３６
６６−３６７０（１９７５）を参照すること。
の状態を引き起こすことが示されてきた。 Ｅｖｅｒｈ
ａｅｒｄｔ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈ
ｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，ｖｏｌ．１６３，ｐ
ｇ．３７８（１９８９）を参照すること。リポポリサッ
カライドのマウスへの投与は、動物の敗血症ショックに
似ていることが示された。この処置を受けた動物は循環
ＴＮＦアルファの濃度の増加がみられた。Ｐａｒｉｌｌ
ｏ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．，
ｖｏｌ．９，ｐｐ．２８−３１（１９８８）；及びｃａ
ｒｓｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａ
ｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，ｖｏｌ．７２，ｐｐ．３６
６６−３６７０（１９７５）を参照すること。
【００２３】２．ＴＮＦアルファに対する抗体の投与
は、マウスやモンキーにおけるエンドトキシンの高用量
の致死効果を減少させることが示された。 Ｔｒａｃｅ
ｙ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３３０，ｐ
ｐ．６６２−６６４（１９８７）；Ｂｕｅｔｌｅｒ ｅ
ｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｖｏｌ．２２９，ｐｐ．
８６９−８７１（１９８５）を参照のこと。
は、マウスやモンキーにおけるエンドトキシンの高用量
の致死効果を減少させることが示された。 Ｔｒａｃｅ
ｙ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，ｖｏｌ．３３０，ｐ
ｐ．６６２−６６４（１９８７）；Ｂｕｅｔｌｅｒ ｅ
ｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｖｏｌ．２２９，ｐｐ．
８６９−８７１（１９８５）を参照のこと。
【００３４】３．グラム陰性敗血症の子供の血清中のＴ
ＮＦアルファ濃度の分析追加試験が行われた。この試験
では、検査した患者の９１％にＴＮＦアルファの濃度の
上昇が示された。さらに、ＴＮＦアルファ血清濃度は、
生存者よりも死亡患者のほうが有意に高かった。 Ｆｉ
ｒａｒｄｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ
Ｊ．ｏｆ Ｍｅｄ．，ｖｏｌ．３１９，ｐｐ．３９７
−４００（１９８８）。
ＮＦアルファ濃度の分析追加試験が行われた。この試験
では、検査した患者の９１％にＴＮＦアルファの濃度の
上昇が示された。さらに、ＴＮＦアルファ血清濃度は、
生存者よりも死亡患者のほうが有意に高かった。 Ｆｉ
ｒａｒｄｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ
Ｊ．ｏｆ Ｍｅｄ．，ｖｏｌ．３１９，ｐｐ．３９７
−４００（１９８８）。
【００２５】
【発明が解決しようとする課題】発明者らは、ここに、
ＴＮＦｓの活性を妨げる物質が、これまで定義したよう
なＴＮＦ媒介の疾患の治療に有効な化合物に成りうるこ
とを提案するに至った。
ＴＮＦｓの活性を妨げる物質が、これまで定義したよう
なＴＮＦ媒介の疾患の治療に有効な化合物に成りうるこ
とを提案するに至った。
【００２６】本発明の発明者らは、ＴＮＦ媒介疾患を防
ぎまた治療する化合物の種類を明らかにし、ＴＮＦ阻害
剤としてここに引用した。１９９０年７月１９日出願で
現在係属中のＵ．Ｓ．特許出願連続番号５５５，２７４
（対応ＥＰ−Ａ−０４２２３３９）に、特にここに関連
するものが組み込まれ、自然に発生する蛋白質様のＴＮ
Ｆ阻害剤の好ましい種類と、同じ高純度の実質的な量を
製造する方法について記載してある。特に、前述の出願
には、３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤と４０ＫＤａＴＮＦ阻害
剤に関する２つのＴＮＦ阻害剤の部分集合について詳し
く述べられている。全長４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤蛋白質
に加えて、２つの切断された、しかし４０ＫＤａＴＮＦ
阻害剤の生物活性形もまた生産された。全長４０ＫＤａ
ＴＮＦ阻害剤は、ヒトＵ９３７細胞で調整された培地ま
たはヒト尿から分離され、ＳＤＳ−ＰＡＧＥで約４０Ｋ
Ｄａの分子量をもつＴＮＦ阻害剤である。全長４０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤は、自然発生蛋白質のように糖蛋白質で
あるかも知れない；または、バクテリア発現系から組換
え型で発現した蛋白質のような非糖蛋白質であるかも知
れない。５１と５３カルボキシル末端アミノ酸が全長蛋
白質から除かれた切断蛋白質は、それぞれ、４０ＫＤａ
ＴＮＦ阻害剤△５１及び４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３
として引用されている。
ぎまた治療する化合物の種類を明らかにし、ＴＮＦ阻害
剤としてここに引用した。１９９０年７月１９日出願で
現在係属中のＵ．Ｓ．特許出願連続番号５５５，２７４
（対応ＥＰ−Ａ−０４２２３３９）に、特にここに関連
するものが組み込まれ、自然に発生する蛋白質様のＴＮ
Ｆ阻害剤の好ましい種類と、同じ高純度の実質的な量を
製造する方法について記載してある。特に、前述の出願
には、３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤と４０ＫＤａＴＮＦ阻害
剤に関する２つのＴＮＦ阻害剤の部分集合について詳し
く述べられている。全長４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤蛋白質
に加えて、２つの切断された、しかし４０ＫＤａＴＮＦ
阻害剤の生物活性形もまた生産された。全長４０ＫＤａ
ＴＮＦ阻害剤は、ヒトＵ９３７細胞で調整された培地ま
たはヒト尿から分離され、ＳＤＳ−ＰＡＧＥで約４０Ｋ
Ｄａの分子量をもつＴＮＦ阻害剤である。全長４０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤は、自然発生蛋白質のように糖蛋白質で
あるかも知れない；または、バクテリア発現系から組換
え型で発現した蛋白質のような非糖蛋白質であるかも知
れない。５１と５３カルボキシル末端アミノ酸が全長蛋
白質から除かれた切断蛋白質は、それぞれ、４０ＫＤａ
ＴＮＦ阻害剤△５１及び４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３
として引用されている。
【００２７】３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤は、ＴＮＦアルフ
ァに対して阻害活性を表わすことが示された。全長４０
ＫＤａＴＮＦ阻害剤、４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５１及
び４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３を含む４０ＫＤａＴＮ
Ｆ阻害剤は、ＴＮＦアルファとＴＮＦベータの両方に対
し阻害活性を表わすことが示された。
ァに対して阻害活性を表わすことが示された。全長４０
ＫＤａＴＮＦ阻害剤、４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５１及
び４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３を含む４０ＫＤａＴＮ
Ｆ阻害剤は、ＴＮＦアルファとＴＮＦベータの両方に対
し阻害活性を表わすことが示された。
【００２８】１９９１年３月１５日出願で現在係属中の
Ｕ．Ｓ．特許出願連続番号０７／６６９，８６２（対応
国際公報ＷＯ９２／１６２２１）は、特にこの関連のも
のが組み込まれており、多くの修飾されたＴＮＦ阻害剤
の種類が記載されている。選択したアミノ酸残基をシス
テイン残基で置換したＴＮＦ阻害剤のムテインも作られ
ている。このようなムテインは機能性ポリエチレングリ
コール（ＰＥＧ）単位と側鎖選択的に反応してＴＮＦ阻
害剤ＰＥＧ種を創造するかも知れない。特に、３０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤の位置１０５のアスパラギンがシステイ
ンと置換して、Ｃ１０５として引用される３０ＫＤａＴ
ＮＦ阻害剤ムテインが記載されている。もう一つの具体
例として、ムテイン蛋白質が二重機能性ＰＥＧ単位と反
応して、２つのＴＮＦ阻害剤ムテインが単一ＰＥＧ鎖を
通して結合する二価の“ダンベル”を形成することがで
きる。
Ｕ．Ｓ．特許出願連続番号０７／６６９，８６２（対応
国際公報ＷＯ９２／１６２２１）は、特にこの関連のも
のが組み込まれており、多くの修飾されたＴＮＦ阻害剤
の種類が記載されている。選択したアミノ酸残基をシス
テイン残基で置換したＴＮＦ阻害剤のムテインも作られ
ている。このようなムテインは機能性ポリエチレングリ
コール（ＰＥＧ）単位と側鎖選択的に反応してＴＮＦ阻
害剤ＰＥＧ種を創造するかも知れない。特に、３０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤の位置１０５のアスパラギンがシステイ
ンと置換して、Ｃ１０５として引用される３０ＫＤａＴ
ＮＦ阻害剤ムテインが記載されている。もう一つの具体
例として、ムテイン蛋白質が二重機能性ＰＥＧ単位と反
応して、２つのＴＮＦ阻害剤ムテインが単一ＰＥＧ鎖を
通して結合する二価の“ダンベル”を形成することがで
きる。
【００２９】
【課題を解決するための手段】本発明は、必要とされて
いる治療剤を患者に投与することによりＴＮＦ媒介疾患
の予防と治療を行う方法を開示している。特に、発明
は、必要な治療剤を患者に投与することによりＴＮＦ媒
介敗血症ショックを治療する方法を提供している。ま
た、必要な治療剤を患者に投与することによりＴＮＦ媒
介関節炎とＴＮＦ媒介成人呼吸困難症候群を治療する方
法を含んでいる。本発明に従い、ＴＮＦ媒介疾患、特に
ＴＮＦ媒介敗血症ショック、ＴＮＦ媒介関節炎及びＴＮ
Ｆ媒介成人呼吸困難症候群を、ＴＮＦ阻害剤の治療的に
適当な量によって治療し予防する方法を開示している。
いる治療剤を患者に投与することによりＴＮＦ媒介疾患
の予防と治療を行う方法を開示している。特に、発明
は、必要な治療剤を患者に投与することによりＴＮＦ媒
介敗血症ショックを治療する方法を提供している。ま
た、必要な治療剤を患者に投与することによりＴＮＦ媒
介関節炎とＴＮＦ媒介成人呼吸困難症候群を治療する方
法を含んでいる。本発明に従い、ＴＮＦ媒介疾患、特に
ＴＮＦ媒介敗血症ショック、ＴＮＦ媒介関節炎及びＴＮ
Ｆ媒介成人呼吸困難症候群を、ＴＮＦ阻害剤の治療的に
適当な量によって治療し予防する方法を開示している。
【００３０】本発明の好ましいＴＮＦ阻害剤は、自然に
発生する蛋白質と自然に発生する蛋白質の切断型であ
る。自然に発生する蛋白質は、それによって治療される
患者に予期しない副作用が生ずるリスクが比較的低いよ
うに思われるので好ましい。本発明のいくつかの具体例
で、ほんのわずかのアミノ酸残基が自然の蛋白質配列と
異なるムテインの蛋白質ＴＮＦ阻害剤もまた好ましいＴ
ＮＦ阻害剤である。
発生する蛋白質と自然に発生する蛋白質の切断型であ
る。自然に発生する蛋白質は、それによって治療される
患者に予期しない副作用が生ずるリスクが比較的低いよ
うに思われるので好ましい。本発明のいくつかの具体例
で、ほんのわずかのアミノ酸残基が自然の蛋白質配列と
異なるムテインの蛋白質ＴＮＦ阻害剤もまた好ましいＴ
ＮＦ阻害剤である。
【００３１】ＴＮＦ阻害剤の好ましい種類は、ヒトＴＮ
Ｆ結合蛋白質である。好ましいＴＮＦ阻害剤はＴＮＦ受
容体蛋白質の可溶性フラグメントであるように思われ
る。本発明の実用面で好ましいこれらのＴＮＦ阻害剤
は、３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤と４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤
から成る群から選ばれ、そしてまた、当該４０ＫＤａＴ
ＮＦ阻害剤はさらに、全長４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤、４
０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５１及び４０ＫＤａＴＮＦ阻害
剤△５３から成る群から選ばれる。また、例えば、ポリ
エチレングリコール（ＰＥＧ）または別の反復ポリマー
の添加により循環半減期を増加するように、また／ある
いは免疫原性を減少するように改良された蛋白質が好ま
しい。ＴＮＦに対し、受容体拮抗薬のように作用するＴ
ＮＦ阻害剤もまた本発明の範囲内に含まれる。
Ｆ結合蛋白質である。好ましいＴＮＦ阻害剤はＴＮＦ受
容体蛋白質の可溶性フラグメントであるように思われ
る。本発明の実用面で好ましいこれらのＴＮＦ阻害剤
は、３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤と４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤
から成る群から選ばれ、そしてまた、当該４０ＫＤａＴ
ＮＦ阻害剤はさらに、全長４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤、４
０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５１及び４０ＫＤａＴＮＦ阻害
剤△５３から成る群から選ばれる。また、例えば、ポリ
エチレングリコール（ＰＥＧ）または別の反復ポリマー
の添加により循環半減期を増加するように、また／ある
いは免疫原性を減少するように改良された蛋白質が好ま
しい。ＴＮＦに対し、受容体拮抗薬のように作用するＴ
ＮＦ阻害剤もまた本発明の範囲内に含まれる。
【００３２】ＴＮＦ阻害剤の生産は、ヒトの尿からの分
離によるような自然の利用源からの抽出によって達成で
きるけれども、ＴＮＦ阻害剤生産の好ましい方法は組換
えＤＮＡ技術によるものである。組換えＤＮＡ技術は、
高純度でかなり大量に生産することができるので部分的
に好ましい。さらに好ましいＴＮＦ阻害剤として、３０
ＫＤａＴＮＦ阻害剤の選択したアミノ酸をシステインで
置換した３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤のムテインが含まれ
る。このようなムテインは、ＴＮＦ阻害剤として用いら
れ、またポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と反応させ
て１分子当たり１個または２個のＴＮＦ阻害剤を含むＴ
ＮＦ阻害剤ＰＥＧ化合物を作ることもできる。最も好ま
しい具体例では、ＴＮＦ阻害剤が、ムテインの３０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤と二重機能性ＰＥＧ前駆物質間の反応で
形成される二価の種類である。好ましいムテインは、３
０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の残基１０５がシステイン残基に
より置換されるＣ１０５ ３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤であ
る。これまでの一般的な記述もこれからの詳細な記述も
共に単に例示的で説明的なものであり、発明はこれらに
限定されるものではないことが理解されるべきである。
離によるような自然の利用源からの抽出によって達成で
きるけれども、ＴＮＦ阻害剤生産の好ましい方法は組換
えＤＮＡ技術によるものである。組換えＤＮＡ技術は、
高純度でかなり大量に生産することができるので部分的
に好ましい。さらに好ましいＴＮＦ阻害剤として、３０
ＫＤａＴＮＦ阻害剤の選択したアミノ酸をシステインで
置換した３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤のムテインが含まれ
る。このようなムテインは、ＴＮＦ阻害剤として用いら
れ、またポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と反応させ
て１分子当たり１個または２個のＴＮＦ阻害剤を含むＴ
ＮＦ阻害剤ＰＥＧ化合物を作ることもできる。最も好ま
しい具体例では、ＴＮＦ阻害剤が、ムテインの３０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤と二重機能性ＰＥＧ前駆物質間の反応で
形成される二価の種類である。好ましいムテインは、３
０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の残基１０５がシステイン残基に
より置換されるＣ１０５ ３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤であ
る。これまでの一般的な記述もこれからの詳細な記述も
共に単に例示的で説明的なものであり、発明はこれらに
限定されるものではないことが理解されるべきである。
【００３３】
【発明の実施の形態】この後の例示とともに、発明の原
理の説明に役立つ好ましい具体例について詳細に論及し
たい。先に述べたように、本発明は、患者を苦しめてい
るＴＮＦ媒介疾患を防ぎまた治療する方法に関するもの
である。この方法は、ＴＮＦ媒介疾患に苦しむ患者に治
療に有効な量のＴＮＦ阻害剤を投与することからなる。
本発明の第一の目的は、ヒトの疾患を防ぎかつ治療する
方法を提供することにあるが、ここに開示した内容は一
般の生理学的使用のための指針を与えており、そのため
獣医学的使用もまた本発明の範囲内に含まれる。
理の説明に役立つ好ましい具体例について詳細に論及し
たい。先に述べたように、本発明は、患者を苦しめてい
るＴＮＦ媒介疾患を防ぎまた治療する方法に関するもの
である。この方法は、ＴＮＦ媒介疾患に苦しむ患者に治
療に有効な量のＴＮＦ阻害剤を投与することからなる。
本発明の第一の目的は、ヒトの疾患を防ぎかつ治療する
方法を提供することにあるが、ここに開示した内容は一
般の生理学的使用のための指針を与えており、そのため
獣医学的使用もまた本発明の範囲内に含まれる。
【００３４】もしも自然発生的または実験上の疾患が体
内の疾患もしくは徴候の病巣の近辺の体液または組織内
のＴＮＦの濃度の上昇に関係していれば、その疾患また
は医学的徴候はＴＮＦ媒介疾患であると考えるべきであ
る。ＴＮＦ媒介疾患はまた、次の２つの条件によっても
認められるだろう：１）疾患に関係する病理所見は、動
物にＴＮＦを投与することによって実験的に模造するこ
とができる；また、２）疾患の動物実験モデルに発生し
た病状は、ＴＮＦの作用を阻害する剤による治療で阻害
または消失させることができる。多くのＴＮＦ媒介疾患
は、これらの３つの条件の２つを満足させ、その他は３
つの条件のすべてを満足させるだろう。ＴＮＦ媒介疾患
の非限定的リストには、成人呼吸困難症候群、肺線維
症、関節炎、炎症性腸疾患及び敗血症ショックが含まれ
る。
内の疾患もしくは徴候の病巣の近辺の体液または組織内
のＴＮＦの濃度の上昇に関係していれば、その疾患また
は医学的徴候はＴＮＦ媒介疾患であると考えるべきであ
る。ＴＮＦ媒介疾患はまた、次の２つの条件によっても
認められるだろう：１）疾患に関係する病理所見は、動
物にＴＮＦを投与することによって実験的に模造するこ
とができる；また、２）疾患の動物実験モデルに発生し
た病状は、ＴＮＦの作用を阻害する剤による治療で阻害
または消失させることができる。多くのＴＮＦ媒介疾患
は、これらの３つの条件の２つを満足させ、その他は３
つの条件のすべてを満足させるだろう。ＴＮＦ媒介疾患
の非限定的リストには、成人呼吸困難症候群、肺線維
症、関節炎、炎症性腸疾患及び敗血症ショックが含まれ
る。
【００３５】１つの具体例で、本発明の好ましいＴＮＦ
阻害剤は、ＴＮＦ結合蛋白質として役立つ自然に生ずる
蛋白質である。自然に生ずる蛋白質は、治療される患者
に予期しないまた望ましくない生理的副作用の生ずるリ
スクをかなり低くするように見えるので部分的には好ま
しい。
阻害剤は、ＴＮＦ結合蛋白質として役立つ自然に生ずる
蛋白質である。自然に生ずる蛋白質は、治療される患者
に予期しないまた望ましくない生理的副作用の生ずるリ
スクをかなり低くするように見えるので部分的には好ま
しい。
【００３６】明細書とクレームの目的のためには、もし
もそれ、または実質的に等しい蛋白質が健康なヒトに正
常に存在することが見出せるならば、蛋白質は“自然発
生”であると判断される。“自然発生”蛋白質は、特
に、健康なヒトに糖蛋白質の形で存在する蛋白質の、糖
がない形と同じようなカルボキシル末端の先端が一部分
切断された、健康なヒトにその存在が認められている蛋
白質の形で含まれる。“自然発生”蛋白質は、通常それ
らを産生する細胞からの分離によるとともに、組換えＤ
ＮＡ法によって得ることができる。“自然発生”はま
た、Ｅ．Ｃｏｌｉにおける発現の結果としてＮ−末端メ
チオニル基を含む蛋白質を包含する。
もそれ、または実質的に等しい蛋白質が健康なヒトに正
常に存在することが見出せるならば、蛋白質は“自然発
生”であると判断される。“自然発生”蛋白質は、特
に、健康なヒトに糖蛋白質の形で存在する蛋白質の、糖
がない形と同じようなカルボキシル末端の先端が一部分
切断された、健康なヒトにその存在が認められている蛋
白質の形で含まれる。“自然発生”蛋白質は、通常それ
らを産生する細胞からの分離によるとともに、組換えＤ
ＮＡ法によって得ることができる。“自然発生”はま
た、Ｅ．Ｃｏｌｉにおける発現の結果としてＮ−末端メ
チオニル基を含む蛋白質を包含する。
【００３７】明細書とクレームを通じて用いられる“実
質的に同等”は、同じ様な生物活性を持つとともに、非
常に程度の高いアミノ酸残基の相同関係を持つことを意
味するように定義される（一般には、Ｍ．Ｄａｙｈｏｆ
ｆ，Ａｔｌａｓ ｏｆ ｐｒｏｔｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃ
ｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｖｏｌ．５，ｐ．１
２４（１９７２），Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ，
Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，を参照すること。こ
こに特に文献として取り入れてある）
質的に同等”は、同じ様な生物活性を持つとともに、非
常に程度の高いアミノ酸残基の相同関係を持つことを意
味するように定義される（一般には、Ｍ．Ｄａｙｈｏｆ
ｆ，Ａｔｌａｓ ｏｆ ｐｒｏｔｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃ
ｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｖｏｌ．５，ｐ．１
２４（１９７２），Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ，
Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，を参照すること。こ
こに特に文献として取り入れてある）
【００３８】本発明の好ましいＴＮＦ阻害剤の中には、
現在係属中のＵ．Ｓ．特許出願中に記載されているＴＮ
Ｆの結台蛋白質としてｉｎ ｖｉｖｏに存在する自然発
生蛋白質がある。この出願は、Ｂｒｅｗｅｒ ｅｔ ａ
ｌ．，により１９９０年７月に出願されたＵ．Ｓ．特許
出願連続番号０７／５５５，２７４（対応ＥＰ−Ａ−０
４２２３３９）であり、標題は、“腫瘍壊死因子（ＴＮ
Ｆ）阻害剤とそれを得るための方法”である。このＵ．
Ｓ．特許出願は、特に文献としてここに取り入れてあ
る。
現在係属中のＵ．Ｓ．特許出願中に記載されているＴＮ
Ｆの結台蛋白質としてｉｎ ｖｉｖｏに存在する自然発
生蛋白質がある。この出願は、Ｂｒｅｗｅｒ ｅｔ ａ
ｌ．，により１９９０年７月に出願されたＵ．Ｓ．特許
出願連続番号０７／５５５，２７４（対応ＥＰ−Ａ−０
４２２３３９）であり、標題は、“腫瘍壊死因子（ＴＮ
Ｆ）阻害剤とそれを得るための方法”である。このＵ．
Ｓ．特許出願は、特に文献としてここに取り入れてあ
る。
【００３９】好ましいＴＮＦ阻害剤には２種類の異なっ
た形があり、前述のＢｒｅｗｅｒｅｔ ａｌ．，の出願
の中にそれぞれ開示されている。これらの１つは３０Ｋ
ＤａＴＮＦ阻害剤であり、少なくともヒトＵ９３７細胞
によって調整された培地からとヒトの尿から分離同定さ
れた。３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥに
より約３０ＫＤａで、ＤＥＡＥＣＬ６Ｂカラムからトリ
ス緩衝液中８０ｍｍｏｌ塩化ナトリウム、ｐＨ７．５で
溶出する。３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤は、ＴＮＦアルファ
の活性を阻害することが示され、ＴＮＦベータへの効果
は少なかった。自然に生ずる蛋白質は糖鎖形成されてい
る。非糖鎖形成３０ＫＤａＴＮＦもまたＴＮＦ阻害活性
を表わす。
た形があり、前述のＢｒｅｗｅｒｅｔ ａｌ．，の出願
の中にそれぞれ開示されている。これらの１つは３０Ｋ
ＤａＴＮＦ阻害剤であり、少なくともヒトＵ９３７細胞
によって調整された培地からとヒトの尿から分離同定さ
れた。３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥに
より約３０ＫＤａで、ＤＥＡＥＣＬ６Ｂカラムからトリ
ス緩衝液中８０ｍｍｏｌ塩化ナトリウム、ｐＨ７．５で
溶出する。３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤は、ＴＮＦアルファ
の活性を阻害することが示され、ＴＮＦベータへの効果
は少なかった。自然に生ずる蛋白質は糖鎖形成されてい
る。非糖鎖形成３０ＫＤａＴＮＦもまたＴＮＦ阻害活性
を表わす。
【００４０】好ましいＴＮＦ阻害剤の第２の形は４０Ｋ
ＤａＴＮＦ阻害剤であり、これもまた、少なくともヒト
Ｕ９３７細胞により調整された培地とヒトの尿から分離
同定された。４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤は、ＳＤＳ−ＰＡ
ＧＥでおよそ４０ＫＤａであり、トリス緩衝液中１００
ｍｍｏｌの塩化ナトリウム、ｐＨ７．５でＤＥＡＥカラ
ムから溶出する。４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤は、ＴＮＦア
ルファとＴＮＦベータの両方の活性を阻害することが示
された。４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤もまた、糖蛋白質であ
り、再び、非糖鎖形成蛋白質もＴＮＦ阻害活性を表わ
す。
ＤａＴＮＦ阻害剤であり、これもまた、少なくともヒト
Ｕ９３７細胞により調整された培地とヒトの尿から分離
同定された。４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤は、ＳＤＳ−ＰＡ
ＧＥでおよそ４０ＫＤａであり、トリス緩衝液中１００
ｍｍｏｌの塩化ナトリウム、ｐＨ７．５でＤＥＡＥカラ
ムから溶出する。４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤は、ＴＮＦア
ルファとＴＮＦベータの両方の活性を阻害することが示
された。４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤もまた、糖蛋白質であ
り、再び、非糖鎖形成蛋白質もＴＮＦ阻害活性を表わ
す。
【００４１】３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤と４０ＫＤａＴＮ
Ｆ阻害剤の両方をエンコードする遺伝子の核酸配列と両
蛋白質のアミノ酸配列は、Ｂｒｅｗｅｒらの出願中に記
載されている。本発明は、以下に述べるような自然発生
蛋白質のある種の切断型と同じような非糖鎖形成型ＴＮ
Ｆ阻害剤も包含する。さらに別の具体例で、ＴＮＦ阻害
剤は、１個またはそれ以上のポリエチレングリコール
（ＰＥＧ）または他の反復重合部分の付着によって修飾
される。
Ｆ阻害剤の両方をエンコードする遺伝子の核酸配列と両
蛋白質のアミノ酸配列は、Ｂｒｅｗｅｒらの出願中に記
載されている。本発明は、以下に述べるような自然発生
蛋白質のある種の切断型と同じような非糖鎖形成型ＴＮ
Ｆ阻害剤も包含する。さらに別の具体例で、ＴＮＦ阻害
剤は、１個またはそれ以上のポリエチレングリコール
（ＰＥＧ）または他の反復重合部分の付着によって修飾
される。
【００４２】４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の３種類の型が
Ｅ．Ｃｏｌｉ．における発現で組換えによって産生し
た。これらのそれぞれの形は、全長４０ＫＤａＴＮＦ阻
害剤、４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５１及び４０ＫＤａＴ
ＮＦ阻害剤△５３（糖鎖形成型及び非糖鎖形成型におけ
る、ヒトＵ９３７細胞により調整された培地とヒト尿か
ら分離したような糖鎖形成型全長４０ＫＤａＴＮＦ阻害
剤も加えて、ここではすべて４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤と
してまとめられている）で、Ｂｒｅｗｅｒ ｅｔａｌ．
の出願に記載されている。△５１蛋白質は、成熟蛋白質
のカルボキシル末端における５１アミノ酸残基が除かれ
ている自然の蛋白質の切断型の翻訳語である。△５３蛋
白質は、自然蛋白質のカルボキシル末端の５３アミノ酸
残基が除かれている成熟蛋白質の切断訳語である。自然
発生４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤（糖鎖形成された）及び非
糖鎖形成阻害剤（自然、△５１及び△５３）は、実質的
に同じＴＮＦ阻害活性をもっている。
Ｅ．Ｃｏｌｉ．における発現で組換えによって産生し
た。これらのそれぞれの形は、全長４０ＫＤａＴＮＦ阻
害剤、４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５１及び４０ＫＤａＴ
ＮＦ阻害剤△５３（糖鎖形成型及び非糖鎖形成型におけ
る、ヒトＵ９３７細胞により調整された培地とヒト尿か
ら分離したような糖鎖形成型全長４０ＫＤａＴＮＦ阻害
剤も加えて、ここではすべて４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤と
してまとめられている）で、Ｂｒｅｗｅｒ ｅｔａｌ．
の出願に記載されている。△５１蛋白質は、成熟蛋白質
のカルボキシル末端における５１アミノ酸残基が除かれ
ている自然の蛋白質の切断型の翻訳語である。△５３蛋
白質は、自然蛋白質のカルボキシル末端の５３アミノ酸
残基が除かれている成熟蛋白質の切断訳語である。自然
発生４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤（糖鎖形成された）及び非
糖鎖形成阻害剤（自然、△５１及び△５３）は、実質的
に同じＴＮＦ阻害活性をもっている。
【００４３】Ｂｒｅｗｅｒ ｅｔ ａｌ．の阻害剤を製
造する方法もまた、上記の申請書に開示されている。開
示された方法の１つは、例えば、ヒトの尿やヒトＵ９３
７細胞により調整された培地のようないろいろな利用源
から阻害剤を分離することから成っている。開示された
第２の方法は、阻害剤をコードする能力のある遺伝子の
分離、適当なベクターや細胞型への遺伝子のクローニン
グ、及び阻害剤を産生する遺伝子の発現を含んでいる。
一般には組換えＤＮＡ法の例がある後の方法は、本発明
の好ましい方法である。組換えＤＮＡ法は、高純度でか
なり大量に製造できるので幾分好ましい方法である。
造する方法もまた、上記の申請書に開示されている。開
示された方法の１つは、例えば、ヒトの尿やヒトＵ９３
７細胞により調整された培地のようないろいろな利用源
から阻害剤を分離することから成っている。開示された
第２の方法は、阻害剤をコードする能力のある遺伝子の
分離、適当なベクターや細胞型への遺伝子のクローニン
グ、及び阻害剤を産生する遺伝子の発現を含んでいる。
一般には組換えＤＮＡ法の例がある後の方法は、本発明
の好ましい方法である。組換えＤＮＡ法は、高純度でか
なり大量に製造できるので幾分好ましい方法である。
【００４４】本発明の範囲にはまた、ＴＮＦ阻害剤ムテ
インと、１９９１年３月１５日に出願したＵ．Ｓ．特許
出願連続番号０７／６６９，８６２（対応国際公報ＷＯ
９２／１６２２１）に記載され、ここにも特に文献とし
て引用されている修飾されたムテインが含まれている。
好ましいムテインの１つは、１０５の位置がシステイン
の３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤である。好ましいポリエチレ
ングリコール化ＴＮＦ阻害剤は、２つのＣ１０５ ３０
ＫＤａＴＮＦ阻害剤がポリエチレングリコール（ＰＥ
Ｇ）部分で付着した“ダンベル”種である。最も好まし
い具体例では、ＰＥＧ鎖が２０，０００の分子量を持っ
ている。ダンベル化合物の製造は、以下の例５に記載し
てある。
インと、１９９１年３月１５日に出願したＵ．Ｓ．特許
出願連続番号０７／６６９，８６２（対応国際公報ＷＯ
９２／１６２２１）に記載され、ここにも特に文献とし
て引用されている修飾されたムテインが含まれている。
好ましいムテインの１つは、１０５の位置がシステイン
の３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤である。好ましいポリエチレ
ングリコール化ＴＮＦ阻害剤は、２つのＣ１０５ ３０
ＫＤａＴＮＦ阻害剤がポリエチレングリコール（ＰＥ
Ｇ）部分で付着した“ダンベル”種である。最も好まし
い具体例では、ＰＥＧ鎖が２０，０００の分子量を持っ
ている。ダンベル化合物の製造は、以下の例５に記載し
てある。
【００４５】上記のＴＮＦ阻害剤は前述の方法で“実質
的に純粋”な方法で製造されることが好ましい。“実質
的に純粋”により、阻害剤は、修飾されない形で、かな
り高い比活性を持つことを意味する。しかしながら、Ｔ
ＮＦ阻害剤の誘導体は異なった比活性を持ち得ることを
認めるべきである。本発明の好ましい具体例の中で、少
なくとも３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤または４０ＫＤａＴＮ
Ｆ阻害剤からなる治療構成物の有効量がＴＮＦ媒介疾患
に苦しむ患者に投薬されている。
的に純粋”な方法で製造されることが好ましい。“実質
的に純粋”により、阻害剤は、修飾されない形で、かな
り高い比活性を持つことを意味する。しかしながら、Ｔ
ＮＦ阻害剤の誘導体は異なった比活性を持ち得ることを
認めるべきである。本発明の好ましい具体例の中で、少
なくとも３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤または４０ＫＤａＴＮ
Ｆ阻害剤からなる治療構成物の有効量がＴＮＦ媒介疾患
に苦しむ患者に投薬されている。
【００４６】追加のＴＮＦ阻害剤は、ＴＮＦ受容体部位
でＴＮＦと競合する能力のある化合物を含んでいる。こ
のような化合物には、受容体拮抗物質が含まれる。その
他のＴＮＦ阻害剤には、ｉｎ ｖｉｖｏでＴＮＦの合成
や細胞外放出を妨げる化合物や蛋白質が含まれる。この
ような化合物には、ＴＮＦ遺伝子の転写や翻訳あるいは
ＴＮＦのプレ蛋白質に影響を与える剤が含まれる。
でＴＮＦと競合する能力のある化合物を含んでいる。こ
のような化合物には、受容体拮抗物質が含まれる。その
他のＴＮＦ阻害剤には、ｉｎ ｖｉｖｏでＴＮＦの合成
や細胞外放出を妨げる化合物や蛋白質が含まれる。この
ような化合物には、ＴＮＦ遺伝子の転写や翻訳あるいは
ＴＮＦのプレ蛋白質に影響を与える剤が含まれる。
【００４７】好ましい阻害剤の阻害機能は、１つまたは
それ以上の別個の分離した部分によって伝えられること
が可能なので、本発明の方法は、活性成分が、ＴＮＦ阻
害を制御する阻害剤のその部分（またはそれらの部分）
からなる治療構成物を投与することによって実用化でき
ると想像される。
それ以上の別個の分離した部分によって伝えられること
が可能なので、本発明の方法は、活性成分が、ＴＮＦ阻
害を制御する阻害剤のその部分（またはそれらの部分）
からなる治療構成物を投与することによって実用化でき
ると想像される。
【００４８】本発明の治療構成物は、非経口的に注射に
よって投与されることが望ましいが、関節内注射、吸入
ミスト、経口的な活性製剤、経皮性のイオン導入法また
は坐薬のような他の有効な投与剤もまた考えられる。好
ましい担体の１つは生理的食塩水であるが、他の薬剤的
に許容できる担体もまた用いることができる。１つの好
ましい具体例として、担体とＴＮＦ阻害剤が、生理的−
融和性の徐放出製剤を構成することが想定される。この
ような担体の第一溶媒は、水性または非水性のどちらか
であろう。さらに、担体は、ｐＨ、浸透性、粘着性、透
明性、色彩、殺菌性、安定性、溶解速度、または製剤の
匂を修飾または維持する他の、薬剤学的に許容できる賦
形剤を含めてもよい。同様に、担体は、ＴＮＦ阻害剤の
安定性、溶解速度、放出、または吸着を改良しまたは維
持するさらに別の薬剤学的に許容できる賦形剤を含めて
もよい。このような賦形剤は、単一薬量でも多重投薬型
でも、非経口投与の薬量の製剤に普通また習慣的に用い
られる物質である。
よって投与されることが望ましいが、関節内注射、吸入
ミスト、経口的な活性製剤、経皮性のイオン導入法また
は坐薬のような他の有効な投与剤もまた考えられる。好
ましい担体の１つは生理的食塩水であるが、他の薬剤的
に許容できる担体もまた用いることができる。１つの好
ましい具体例として、担体とＴＮＦ阻害剤が、生理的−
融和性の徐放出製剤を構成することが想定される。この
ような担体の第一溶媒は、水性または非水性のどちらか
であろう。さらに、担体は、ｐＨ、浸透性、粘着性、透
明性、色彩、殺菌性、安定性、溶解速度、または製剤の
匂を修飾または維持する他の、薬剤学的に許容できる賦
形剤を含めてもよい。同様に、担体は、ＴＮＦ阻害剤の
安定性、溶解速度、放出、または吸着を改良しまたは維
持するさらに別の薬剤学的に許容できる賦形剤を含めて
もよい。このような賦形剤は、単一薬量でも多重投薬型
でも、非経口投与の薬量の製剤に普通また習慣的に用い
られる物質である。
【００４９】一度、治療構成物が製剤されれば、溶液、
懸濁液、ゲル、乳液、固体、あるいは脱水または凍結乾
燥した粉末として消毒瓶に保管されるだろう。このよう
な製剤は、使用しやすい形かまたは投与前に迅速に再構
成が要求される形で保管されよう。このような製剤の好
ましい保管は、少なくとも４℃以下、望ましくは−７０
℃である。ＴＮＦ阻害剤を含むような製剤は、貯蔵し、
生理的なｐＨまたはその近辺で投与することが望まし
い。高いｐＨ（すなわち８以上）または低いｐＨ（すな
わち５以下）の製剤の投与は現在望ましくないものと信
じられている。
懸濁液、ゲル、乳液、固体、あるいは脱水または凍結乾
燥した粉末として消毒瓶に保管されるだろう。このよう
な製剤は、使用しやすい形かまたは投与前に迅速に再構
成が要求される形で保管されよう。このような製剤の好
ましい保管は、少なくとも４℃以下、望ましくは−７０
℃である。ＴＮＦ阻害剤を含むような製剤は、貯蔵し、
生理的なｐＨまたはその近辺で投与することが望まし
い。高いｐＨ（すなわち８以上）または低いｐＨ（すな
わち５以下）の製剤の投与は現在望ましくないものと信
じられている。
【００５０】全身性送出のためＴＮＦ阻害剤を含む製剤
を投与する方式は、皮下、筋内、静脈内、鼻腔内または
腟内または直腸坐薬経由が好ましい。局所施用のためＴ
ＮＦ阻害剤を含む製剤を投与する好ましい方式は、関節
内、気管内、または点滴注入または呼吸管への吸入の経
由である。さらに、適当な製剤または装置によるＴＮＦ
阻害剤の経口投与かあるいは坐薬または浣腸により、消
化管の適当な部分にＴＮＦ阻害剤を投与することが望ま
しい。
を投与する方式は、皮下、筋内、静脈内、鼻腔内または
腟内または直腸坐薬経由が好ましい。局所施用のためＴ
ＮＦ阻害剤を含む製剤を投与する好ましい方式は、関節
内、気管内、または点滴注入または呼吸管への吸入の経
由である。さらに、適当な製剤または装置によるＴＮＦ
阻害剤の経口投与かあるいは坐薬または浣腸により、消
化管の適当な部分にＴＮＦ阻害剤を投与することが望ま
しい。
【００５１】ある具体例では、患者の血流内で、あらか
じめ選定されたＴＮＦ阻害剤の濃度が作られるように投
与が設計されている。血清の０．０１ｎｇ／ｍｌ以下の
ＴＮＦ阻害剤の循環濃度の維持は有効な構成とは言えな
い一方、１０μｇ／ｍｌを越える循環濃度の長期の維持
は望ましくない副作用を生ずると信じられている。
じめ選定されたＴＮＦ阻害剤の濃度が作られるように投
与が設計されている。血清の０．０１ｎｇ／ｍｌ以下の
ＴＮＦ阻害剤の循環濃度の維持は有効な構成とは言えな
い一方、１０μｇ／ｍｌを越える循環濃度の長期の維持
は望ましくない副作用を生ずると信じられている。
【００５２】ＴＮＦ媒介疾患の治療とさらに特別にＴＮ
Ｆ媒介敗血症ショックの治療のために好ましい投薬量の
範囲は、約０．１−２００ｍｇ／ｋｇ患者体重／２４時
間で、等量を４−１５回／２４時間投与することが好ま
しい。さらに好ましい具体例では、投薬量は約０．１−
１００ｍｇ／ｋｇ患者体重／２４時間で、等量ずつ３時
間ごとに投与する。最も好ましい具体例では、１５０ｍ
ｇ／ｋｇ患者体重／２４時間で、３時間ごとに投与す
る。好ましい具体例では、投与は、１２から６０時間継
続される。最も好ましい具体的投与例では、少なくとも
２４時間継続される。投薬の頻度と適当な投薬量は、使
用される製剤中のＴＮＦ阻害剤の薬物動態学的パラメー
ターに依存するだろう。
Ｆ媒介敗血症ショックの治療のために好ましい投薬量の
範囲は、約０．１−２００ｍｇ／ｋｇ患者体重／２４時
間で、等量を４−１５回／２４時間投与することが好ま
しい。さらに好ましい具体例では、投薬量は約０．１−
１００ｍｇ／ｋｇ患者体重／２４時間で、等量ずつ３時
間ごとに投与する。最も好ましい具体例では、１５０ｍ
ｇ／ｋｇ患者体重／２４時間で、３時間ごとに投与す
る。好ましい具体例では、投与は、１２から６０時間継
続される。最も好ましい具体的投与例では、少なくとも
２４時間継続される。投薬の頻度と適当な投薬量は、使
用される製剤中のＴＮＦ阻害剤の薬物動態学的パラメー
ターに依存するだろう。
【００５３】ＴＮＦ媒介疾患のため、さらに特別にＴＮ
Ｆ媒介敗血症ショックの治療のために好ましい方式とし
て、最初にＴＮＦの静脈内ボーラス注射で投与し、その
後循環ＴＮＦ濃度がもはや上昇しなくなるまでＴＮＦ阻
害剤を連続的に静脈内に注入する。血清ＴＮＦアルファ
濃度は、市販のイムノアッセイ試験キットで確認出来る
だろう。ＴＮＦ媒介敗血症ショックの治療の開始は、敗
血症または敗血症の可能性が診断された後できるだけ早
くどちらかの治療方式で始めるべきである。例えば、敗
血症ショック開始のリスクをもたらす手術、または偶発
症候またはその他の事故に続いて直ちに治療を開始すべ
きである。
Ｆ媒介敗血症ショックの治療のために好ましい方式とし
て、最初にＴＮＦの静脈内ボーラス注射で投与し、その
後循環ＴＮＦ濃度がもはや上昇しなくなるまでＴＮＦ阻
害剤を連続的に静脈内に注入する。血清ＴＮＦアルファ
濃度は、市販のイムノアッセイ試験キットで確認出来る
だろう。ＴＮＦ媒介敗血症ショックの治療の開始は、敗
血症または敗血症の可能性が診断された後できるだけ早
くどちらかの治療方式で始めるべきである。例えば、敗
血症ショック開始のリスクをもたらす手術、または偶発
症候またはその他の事故に続いて直ちに治療を開始すべ
きである。
【００５４】ＴＮＦ媒介疾患の治療のためとさらに特別
にＴＮＦ媒介関節炎の治療のための好ましい方式には、
１）関節炎の再発の防止または治療の必要上、定期的に
与えられるＴＮＦ阻害剤の単一関節内注射；２）ＴＮＦ
阻害剤の定期的皮下注射が含まれる。
にＴＮＦ媒介関節炎の治療のための好ましい方式には、
１）関節炎の再発の防止または治療の必要上、定期的に
与えられるＴＮＦ阻害剤の単一関節内注射；２）ＴＮＦ
阻害剤の定期的皮下注射が含まれる。
【００５５】ＴＮＦ媒介疾患の治療とさらに特別にＴＮ
Ｆ媒介成人呼吸困難症候群の治療のための好ましい方式
には、１）ＴＮＦ阻害剤の単一または複合の気管内投
与；２）ＴＮＦ阻害剤のボーラスまたは継続的な静脈内
注入が含まれる。
Ｆ媒介成人呼吸困難症候群の治療のための好ましい方式
には、１）ＴＮＦ阻害剤の単一または複合の気管内投
与；２）ＴＮＦ阻害剤のボーラスまたは継続的な静脈内
注入が含まれる。
【００５６】ＴＮＦ阻害剤を含むある種の製剤は、経口
的に投与されるべきことがまた考えられる。この方式で
投与されるＴＮＦ阻害剤は、好ましいのはカプセル化さ
れたものである。カプセル化ＴＮＦ阻害剤は、固形調剤
型の調合に習慣的に用いられる担体によりまたは担体な
しで製剤されるだろう。カプセルは、生物学的同等性が
最大になり、浸透前の分解が最小になる胃腸管内のその
時点に、製剤の活性部分が放出されるように設計される
ことが好ましい。ＴＮＦ阻害剤が吸収されやすくなるよ
うに追加の賦形剤が含められてもよい。希釈剤、調味
料、低融点ワックス、錠剤粉砕剤、及びバインダーもま
た使用してもよい。
的に投与されるべきことがまた考えられる。この方式で
投与されるＴＮＦ阻害剤は、好ましいのはカプセル化さ
れたものである。カプセル化ＴＮＦ阻害剤は、固形調剤
型の調合に習慣的に用いられる担体によりまたは担体な
しで製剤されるだろう。カプセルは、生物学的同等性が
最大になり、浸透前の分解が最小になる胃腸管内のその
時点に、製剤の活性部分が放出されるように設計される
ことが好ましい。ＴＮＦ阻害剤が吸収されやすくなるよ
うに追加の賦形剤が含められてもよい。希釈剤、調味
料、低融点ワックス、錠剤粉砕剤、及びバインダーもま
た使用してもよい。
【００５７】投与の方式に関係なく、患者のおよその体
重にしたがって特定の投薬量が計算される。上記のそれ
ぞれの製剤を含め治療に適した投薬量を決めるのに必要
な計算の見直しは、その分野の専門家によって日常的に
行われ、特にここに開示した投薬情報と解析に照らし
て、過度の実験を行うことなく日常的な仕事の範囲内で
達成される。これらの投与量は、適当な投与量−反応デ
ータとともに、決められた投薬量のために設定された分
析法を利用して確認される。
重にしたがって特定の投薬量が計算される。上記のそれ
ぞれの製剤を含め治療に適した投薬量を決めるのに必要
な計算の見直しは、その分野の専門家によって日常的に
行われ、特にここに開示した投薬情報と解析に照らし
て、過度の実験を行うことなく日常的な仕事の範囲内で
達成される。これらの投与量は、適当な投与量−反応デ
ータとともに、決められた投薬量のために設定された分
析法を利用して確認される。
【００５８】ここに言うＴＮＦ阻害剤製剤は、ヒトへの
適用と同様に、獣医用にも使用でき、“患者”の用語
は、限定した解釈をしないように注意すべきである。獣
医用に用いる場合、投与量の範囲は上に特定したのと同
じにすべきである。
適用と同様に、獣医用にも使用でき、“患者”の用語
は、限定した解釈をしないように注意すべきである。獣
医用に用いる場合、投与量の範囲は上に特定したのと同
じにすべきである。
【００５９】特別な問題または環境への本発明の教示の
適用は、ここに含まれる教示内容に照らして、この分野
に普通の技術をもつ人の能力の範囲によることを理解す
べきである。本発明の代表的な使用例は次の例であると
思われる。次の例は、ここに述べたＴＮＦ媒介疾患の１
つに本発明を適用している。ＴＮＦ媒介敗血症ショック
の患者への治療とその他のＴＮＦ媒介疾患の患者への治
療の相違は、たとえあったとしても、この分野の普通の
技術者であれば容易にかつ日常的に明らかに出来るだろ
う。次の例で示すように、ＴＮＦ阻害剤の投与によりＴ
ＮＦ媒介敗血症ショックの影響を緩和する能力は、ＴＮ
Ｆ阻害剤の投与が、ここに定義するようなＴＮＦの媒介
するすべての疾患の治療に等しく有効であろうことを示
している。
適用は、ここに含まれる教示内容に照らして、この分野
に普通の技術をもつ人の能力の範囲によることを理解す
べきである。本発明の代表的な使用例は次の例であると
思われる。次の例は、ここに述べたＴＮＦ媒介疾患の１
つに本発明を適用している。ＴＮＦ媒介敗血症ショック
の患者への治療とその他のＴＮＦ媒介疾患の患者への治
療の相違は、たとえあったとしても、この分野の普通の
技術者であれば容易にかつ日常的に明らかに出来るだろ
う。次の例で示すように、ＴＮＦ阻害剤の投与によりＴ
ＮＦ媒介敗血症ショックの影響を緩和する能力は、ＴＮ
Ｆ阻害剤の投与が、ここに定義するようなＴＮＦの媒介
するすべての疾患の治療に等しく有効であろうことを示
している。
【００６０】
【実施例】例１：サイトカイン誘発敗血症ショックのネ
ズミモデルにおけるヒト組換え４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤
△５３の防御効果の立証 Ａ．マウスにおける全身性ショックの誘発のための計画 敗血症ショックに対するＴＮＦ阻害剤の治療効果を立証
するため、Ｅｖｅｒａｅｒｄｔ，ｅｔ ａｌ．により開
発された敗血症ショックの改良ネズミモデルをこの例に
利用した。Ｅｖｅｒａｅｒｄｔ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｍ．，ｖ
ｏｌ １６３，ｐｇ．３７８（１９８９），を特に参考
のためにここに引用した。このモデルでは、サイトカイ
ンの組み合わせの共同作用で、ヒト組換え腫瘍壊死要因
α（ｈｒＴＮＦα）とヒト組換えインターロイキン−１
β（ｈｒＩＬ−１β）が、深い低体温とその後の死亡で
特徴づけられるマウスの敗血症ショックを発生させる。
ズミモデルにおけるヒト組換え４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤
△５３の防御効果の立証 Ａ．マウスにおける全身性ショックの誘発のための計画 敗血症ショックに対するＴＮＦ阻害剤の治療効果を立証
するため、Ｅｖｅｒａｅｒｄｔ，ｅｔ ａｌ．により開
発された敗血症ショックの改良ネズミモデルをこの例に
利用した。Ｅｖｅｒａｅｒｄｔ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｍ．，ｖ
ｏｌ １６３，ｐｇ．３７８（１９８９），を特に参考
のためにここに引用した。このモデルでは、サイトカイ
ンの組み合わせの共同作用で、ヒト組換え腫瘍壊死要因
α（ｈｒＴＮＦα）とヒト組換えインターロイキン−１
β（ｈｒＩＬ−１β）が、深い低体温とその後の死亡で
特徴づけられるマウスの敗血症ショックを発生させる。
【００６１】致死敗血症ショックは、Ｃ５７Ｂ１／６匹
の雌マウス、８−１２週令、８−１２ｇ体重、で、ｈｒ
ＴＮＦαとｈｒＩＬ−１βの投与によって誘発された。
ヒト組換え腫瘍壊死要因は、一般に、Ｓｈｉｒａｉ ｅ
ｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ（１９８５）ｖｏｌ．３１
３，ｐｐ．８０３−８０６，に記載の方法にしたがって
作られ、特にこの関係でここに引用した；これもまたＢ
ｒｅｗｅｒ，ｅｔ ａｌ．特許出願を参照されたい。ヒ
ト組換えインターロイキン−１βは、一般に、Ｋｒｏｎ
ｈｅｉｍ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
（１９８６）Ｖｏｌ．４，ｐｐ．１０７８−１０８
２，に記載される方法にしたがって作られ、特にこの関
係でここに引用した。サイトカインは、米国薬局方ＸＸ
ＩＩ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ ＸＶＩ
Ｉ，Ｊａｎｕａｒｙｌ，１９９０，ｐｐ．１４９３−１
４９５に記載される方法に従いＬＰＳについて試験し
た。サイトカインは、１００μｌ容量で、マウスの背の
表面に、単一のボーラスとして皮下注射を行った。４０
ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３は、Ｂｒｅｗｅｒ ｅｔａ
ｌ．出願に記載される組換えＤＮＡ法にしたがって作ら
れ、注射当たり３００μｌ以下の容量で、複合腹膜内投
与で与えられた。
の雌マウス、８−１２週令、８−１２ｇ体重、で、ｈｒ
ＴＮＦαとｈｒＩＬ−１βの投与によって誘発された。
ヒト組換え腫瘍壊死要因は、一般に、Ｓｈｉｒａｉ ｅ
ｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ（１９８５）ｖｏｌ．３１
３，ｐｐ．８０３−８０６，に記載の方法にしたがって
作られ、特にこの関係でここに引用した；これもまたＢ
ｒｅｗｅｒ，ｅｔ ａｌ．特許出願を参照されたい。ヒ
ト組換えインターロイキン−１βは、一般に、Ｋｒｏｎ
ｈｅｉｍ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
（１９８６）Ｖｏｌ．４，ｐｐ．１０７８−１０８
２，に記載される方法にしたがって作られ、特にこの関
係でここに引用した。サイトカインは、米国薬局方ＸＸ
ＩＩ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ ＸＶＩ
Ｉ，Ｊａｎｕａｒｙｌ，１９９０，ｐｐ．１４９３−１
４９５に記載される方法に従いＬＰＳについて試験し
た。サイトカインは、１００μｌ容量で、マウスの背の
表面に、単一のボーラスとして皮下注射を行った。４０
ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３は、Ｂｒｅｗｅｒ ｅｔａ
ｌ．出願に記載される組換えＤＮＡ法にしたがって作ら
れ、注射当たり３００μｌ以下の容量で、複合腹膜内投
与で与えられた。
【００６２】１００％の死亡（図１）を引き起こすに必
要なｈｒＴＮＦαに対するｈｒＩＬ−１βの割合を決め
るための予備実験を行った。投与量はμｇ／ｋｇ体重で
表示した。ｈｒＴＮＦα投与量を３００μｇ／ｋｇに固
定し、ｈｒＩＬ−１βの量を増加させながら注射ボーラ
スに添加した。μｇｈｒＩＬ−１β／ｋｇ：％死亡率と
して得られた結果は次のとおりであった；２５０：０，
５００：１０，１５００：５０，２０００：６７，２５
００：１００。２５００μｇ／ｋｇ以上のすべての投与
量では１００％致死を生じた。その後のすべての実験
で、サイトカイニンは、２５００μｇ／ｋｇｈｒＩＬ−
１β及び３００μｇ／ｋｇｈｒＴＮＦαで使用し、背表
面に単一皮下ボーラスで投与した。
要なｈｒＴＮＦαに対するｈｒＩＬ−１βの割合を決め
るための予備実験を行った。投与量はμｇ／ｋｇ体重で
表示した。ｈｒＴＮＦα投与量を３００μｇ／ｋｇに固
定し、ｈｒＩＬ−１βの量を増加させながら注射ボーラ
スに添加した。μｇｈｒＩＬ−１β／ｋｇ：％死亡率と
して得られた結果は次のとおりであった；２５０：０，
５００：１０，１５００：５０，２０００：６７，２５
００：１００。２５００μｇ／ｋｇ以上のすべての投与
量では１００％致死を生じた。その後のすべての実験
で、サイトカイニンは、２５００μｇ／ｋｇｈｒＩＬ−
１β及び３００μｇ／ｋｇｈｒＴＮＦαで使用し、背表
面に単一皮下ボーラスで投与した。
【００６３】ｈｒＴＮＦαとｈｒＩＬ−１βの組み合わ
せ投与は、マウスに深刻な低体温症（図２）と注射後お
よそ１８から３０時間での死亡（図４）をもたらした。
この例で、体温の低下は、誘発ショックの深刻度の測定
指標として用いられた。体温は、Ｆｉｒｓｔ Ｔｅｍｐ
ｉｎｆｒａｒｅｄ ｈａｎｄ ｈｅｌｄ ｓｃａｎｎ
ｅｒ（Ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｙ
ｓｔｅｍ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）の使用で推定し
た。低体温の程度は、直接他の臨床徴候（例えば、震
え、嗜眠、皮膚弾性の欠如、うずくまり姿勢）の重症度
に関係していた。動物の体温は、注射後およそ１５時間
で３９℃の正常値から２８℃まで低下した。対照的に、
どちらかのサイトカインだけの注射は、同程度の低体温
（図２）を生ぜず、致死効果もなかった。ｈｒＩＬ−１
βの２５００μｇ／ｋｇの単一ボーラスの皮下注射は、
１２から１６時間後に最低３４℃に達する一時的な体温
低下を生じた。死亡は観測されなかった。ｈｒＴＮＦα
の３００μｇ／ｋｇ投与では、マウスの体温に測定でき
るような影響を与えず、死亡も見られなかった。
せ投与は、マウスに深刻な低体温症（図２）と注射後お
よそ１８から３０時間での死亡（図４）をもたらした。
この例で、体温の低下は、誘発ショックの深刻度の測定
指標として用いられた。体温は、Ｆｉｒｓｔ Ｔｅｍｐ
ｉｎｆｒａｒｅｄ ｈａｎｄ ｈｅｌｄ ｓｃａｎｎ
ｅｒ（Ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｙ
ｓｔｅｍ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）の使用で推定し
た。低体温の程度は、直接他の臨床徴候（例えば、震
え、嗜眠、皮膚弾性の欠如、うずくまり姿勢）の重症度
に関係していた。動物の体温は、注射後およそ１５時間
で３９℃の正常値から２８℃まで低下した。対照的に、
どちらかのサイトカインだけの注射は、同程度の低体温
（図２）を生ぜず、致死効果もなかった。ｈｒＩＬ−１
βの２５００μｇ／ｋｇの単一ボーラスの皮下注射は、
１２から１６時間後に最低３４℃に達する一時的な体温
低下を生じた。死亡は観測されなかった。ｈｒＴＮＦα
の３００μｇ／ｋｇ投与では、マウスの体温に測定でき
るような影響を与えず、死亡も見られなかった。
【００６４】Ｂ．サイトカイン誘発ショックに対する４
０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３の効果 ４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３を、サイトカイン混合剤
（上記の量のｈｒＩＬ−１βとｈｒＴＮＦα）を注射し
たマウスに投与した。６匹のマウス群を阻害剤蛋白質
（この実験では、４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３）で、
さらに長期間治療する一連の実験を行った。注射当たり
の阻害剤蛋白質の量は一定に保ったが、全体の注射数を
増加させた。したがって、３種の実験で使用した阻害剤
蛋白質の絶対量は治療の継続時間によって変化した。体
温と死亡率をそれぞれの実験で測定した。
０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３の効果 ４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３を、サイトカイン混合剤
（上記の量のｈｒＩＬ−１βとｈｒＴＮＦα）を注射し
たマウスに投与した。６匹のマウス群を阻害剤蛋白質
（この実験では、４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３）で、
さらに長期間治療する一連の実験を行った。注射当たり
の阻害剤蛋白質の量は一定に保ったが、全体の注射数を
増加させた。したがって、３種の実験で使用した阻害剤
蛋白質の絶対量は治療の継続時間によって変化した。体
温と死亡率をそれぞれの実験で測定した。
【００６５】最初の実験では、サイトカインボーラスの
３０分前と３０分後に、阻害剤蛋白質を腹膜内に注射し
た（図３）。阻害剤蛋白質の全量２００ｍｇ／ｋｇの
内、各注射では３００μｌの容量で１００ｍｇ／ｋｇの
含量であった。サイトカインショックのマウスの内、阻
害剤蛋白質を投与された群のマウスは、無処理群に比較
してサイトカイン投与後４から６時間での低体温症が有
意に減少した（図３）。処理群における死亡の開始は、
約１２時間遅くなった（図４）。しかしながら、両群と
も、注射後４８時間で死亡率は１００％になった。
３０分前と３０分後に、阻害剤蛋白質を腹膜内に注射し
た（図３）。阻害剤蛋白質の全量２００ｍｇ／ｋｇの
内、各注射では３００μｌの容量で１００ｍｇ／ｋｇの
含量であった。サイトカインショックのマウスの内、阻
害剤蛋白質を投与された群のマウスは、無処理群に比較
してサイトカイン投与後４から６時間での低体温症が有
意に減少した（図３）。処理群における死亡の開始は、
約１２時間遅くなった（図４）。しかしながら、両群と
も、注射後４８時間で死亡率は１００％になった。
【００６６】第２の実験では、注射後の治療は全部で１
２時間継続した（図５）サイトカイン注射の時間に対す
る注射時間は；−３０分、＋３０分、３時間、６時間、
９時間、及び１２時間であった。この治療では、阻害剤
蛋白質の全投与量は結果的に６００ｍｇ／ｋｇであっ
た。サイトカインの注射後、無処理群には、特徴的な低
体温症が進行し、１５時間目に最低の２６℃になった。
３６時間目に最初の死亡が見られた（図６）。４３時間
目までに死亡率が１００％に達した。対照的に、阻害剤
蛋白質による処理群では、サイトカイン混合剤の注射後
約２４時間は、重度の低体温症が起こらなかった。体温
は、１２時間目に３５．５℃の最低温度に達した。その
時間で、阻害剤蛋白質治療は終了した。体温は次の６時
間にやや上昇し、それから３６時間までに２６℃に急激
に低下した。無処理群に対し、処理群では死亡の開始を
遅らせた。注射後４２時間目に最初の死亡が見られ、４
４時間目までに１００％に達した。
２時間継続した（図５）サイトカイン注射の時間に対す
る注射時間は；−３０分、＋３０分、３時間、６時間、
９時間、及び１２時間であった。この治療では、阻害剤
蛋白質の全投与量は結果的に６００ｍｇ／ｋｇであっ
た。サイトカインの注射後、無処理群には、特徴的な低
体温症が進行し、１５時間目に最低の２６℃になった。
３６時間目に最初の死亡が見られた（図６）。４３時間
目までに死亡率が１００％に達した。対照的に、阻害剤
蛋白質による処理群では、サイトカイン混合剤の注射後
約２４時間は、重度の低体温症が起こらなかった。体温
は、１２時間目に３５．５℃の最低温度に達した。その
時間で、阻害剤蛋白質治療は終了した。体温は次の６時
間にやや上昇し、それから３６時間までに２６℃に急激
に低下した。無処理群に対し、処理群では死亡の開始を
遅らせた。注射後４２時間目に最初の死亡が見られ、４
４時間目までに１００％に達した。
【００６７】第３の実験では、サイトカイン注射後の治
療を１２時間から２４時間に延長した（図７）。サイト
カイン注射後１５，１８，２１，及び２４時間目に追加
の腹膜内注射で投与した。結果的に、全投与量は１００
０ｍｇ／ｋｇであった。ｈｒＩＬ−１βとｈｒＴＮＦα
を投与された無処理群は、第２の実験と同様のコースを
たどった。体温は１２時間で２７℃の最低温度に達し
た。死亡は注射後１８時間目に始まり４２時間で１００
％に達した（図８）。これに対し、阻害剤蛋白質を投与
された群は、重度の低体温症と致死が防がれた。平均体
温は、サイトカイン注射後１０時間目までにわずか３
３．５℃までしか減少せず、その後、阻害剤蛋白質処理
中止の２４時間目までに正常値近くまで上昇した（図
７）。４２時間目（処理中止後１８時間目）までに、体
温は一時的に３４．５℃に下がり、サイトカインの注射
後９０時間目まで普通よりやや下の温度に保たれた。こ
の群の死亡は６匹の内１匹であった。１匹の死亡の説明
はつかなかった。しかしながら、その動物は実験を通し
て異常に見え、多分、腹膜内注射を誤ったためと思われ
る。これらの動物の体重は、サイトカイン誘発ショック
からの完全回復の評価のために記録された（図９）。阻
害剤蛋白質で処理した群では、６２時間目までに元の体
重の７９％まで低下した。しかしながら、サイトカイン
注射後２００時間目までに平均体重は、リン酸緩衝塩水
（ＰＢＳ）を注射した対照群の体重に達した。動物の挙
動と外観は正常に見えた。阻害剤蛋白質による処理を２
４時間延長することによって、我々はサイトカインで誘
発された敗血症ショックのマウスに見られる重症の低体
温症と致死を逆転させることができた。阻害剤投与の期
間と頻度は、敗血症患者に与えられる集中処理と両立さ
せるべきであろう。
療を１２時間から２４時間に延長した（図７）。サイト
カイン注射後１５，１８，２１，及び２４時間目に追加
の腹膜内注射で投与した。結果的に、全投与量は１００
０ｍｇ／ｋｇであった。ｈｒＩＬ−１βとｈｒＴＮＦα
を投与された無処理群は、第２の実験と同様のコースを
たどった。体温は１２時間で２７℃の最低温度に達し
た。死亡は注射後１８時間目に始まり４２時間で１００
％に達した（図８）。これに対し、阻害剤蛋白質を投与
された群は、重度の低体温症と致死が防がれた。平均体
温は、サイトカイン注射後１０時間目までにわずか３
３．５℃までしか減少せず、その後、阻害剤蛋白質処理
中止の２４時間目までに正常値近くまで上昇した（図
７）。４２時間目（処理中止後１８時間目）までに、体
温は一時的に３４．５℃に下がり、サイトカインの注射
後９０時間目まで普通よりやや下の温度に保たれた。こ
の群の死亡は６匹の内１匹であった。１匹の死亡の説明
はつかなかった。しかしながら、その動物は実験を通し
て異常に見え、多分、腹膜内注射を誤ったためと思われ
る。これらの動物の体重は、サイトカイン誘発ショック
からの完全回復の評価のために記録された（図９）。阻
害剤蛋白質で処理した群では、６２時間目までに元の体
重の７９％まで低下した。しかしながら、サイトカイン
注射後２００時間目までに平均体重は、リン酸緩衝塩水
（ＰＢＳ）を注射した対照群の体重に達した。動物の挙
動と外観は正常に見えた。阻害剤蛋白質による処理を２
４時間延長することによって、我々はサイトカインで誘
発された敗血症ショックのマウスに見られる重症の低体
温症と致死を逆転させることができた。阻害剤投与の期
間と頻度は、敗血症患者に与えられる集中処理と両立さ
せるべきであろう。
【００６８】Ｃ．流体処理の無効果を示す対照群と阻害
剤のみの無毒性 上記の最後の３番目の試験で、阻害剤蛋白質（４０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤△５３）は、注射当たり２００から３０
０μｌの容量で投与された。阻害剤蛋白質の流体容量そ
れ自体に処理効果があるかも知れない可能性があった。
その可能性を試験するために、単にサイトカインのみを
受けた１群と、阻害剤蛋白質処理群と容量も頻度も同じ
にしたＰＢＳの腹膜内注射をサイトカインに加えた第２
群を比較した（図５）。低体温症または死亡率に有意な
差は見られなかった。その後の実験で、無処理のサイト
カインショックのマウスにＰＢＳを腹膜内に投与した。
阻害剤蛋白質のみの影響を調べるための別の対照試験も
含まれていた。すべての実験で、処理を受けたサイトカ
インショック群と同じ容量と頻度で、阻害剤蛋白質のみ
をマウス群に注射した。阻害剤蛋白質のみの対照群に、
いかなる死亡も体温の変化も見られなかった（図３，
５，７）。
剤のみの無毒性 上記の最後の３番目の試験で、阻害剤蛋白質（４０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤△５３）は、注射当たり２００から３０
０μｌの容量で投与された。阻害剤蛋白質の流体容量そ
れ自体に処理効果があるかも知れない可能性があった。
その可能性を試験するために、単にサイトカインのみを
受けた１群と、阻害剤蛋白質処理群と容量も頻度も同じ
にしたＰＢＳの腹膜内注射をサイトカインに加えた第２
群を比較した（図５）。低体温症または死亡率に有意な
差は見られなかった。その後の実験で、無処理のサイト
カインショックのマウスにＰＢＳを腹膜内に投与した。
阻害剤蛋白質のみの影響を調べるための別の対照試験も
含まれていた。すべての実験で、処理を受けたサイトカ
インショック群と同じ容量と頻度で、阻害剤蛋白質のみ
をマウス群に注射した。阻害剤蛋白質のみの対照群に、
いかなる死亡も体温の変化も見られなかった（図３，
５，７）。
【００６９】例２：サイトカイン誘発敗血症ショックの
ネズミモデルにおけるヒト組換え３０ＫＤａＴＮＦ阻害
剤の防御効果の立証 Ａ．ネズミ敗血症ショックの誘発のための計画 ３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の処理効果を立証するため、例
１に述べた同じ敗血症ショックのネズミモデルを利用し
た。致死ショックは、Ｃ５７Ｂ１／６匹の雌マウス、８
−１２週令、体重１８−２１ｇに、３００μｇ／ｋｇの
ｈｒＴＮＦαと２，５００μｇ／ｋｇのｈｒＩＬ−１β
の組み合わせを皮下に投与することによって誘発させ
た。これらの投与量で死亡率は１００％であつた。サイ
トカインは、単一の皮下ボーラスとして頸の後ろに与え
た。
ネズミモデルにおけるヒト組換え３０ＫＤａＴＮＦ阻害
剤の防御効果の立証 Ａ．ネズミ敗血症ショックの誘発のための計画 ３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の処理効果を立証するため、例
１に述べた同じ敗血症ショックのネズミモデルを利用し
た。致死ショックは、Ｃ５７Ｂ１／６匹の雌マウス、８
−１２週令、体重１８−２１ｇに、３００μｇ／ｋｇの
ｈｒＴＮＦαと２，５００μｇ／ｋｇのｈｒＩＬ−１β
の組み合わせを皮下に投与することによって誘発させ
た。これらの投与量で死亡率は１００％であつた。サイ
トカインは、単一の皮下ボーラスとして頸の後ろに与え
た。
【００７０】この実験で、体温の減少を誘発ショックの
重症度の指標として用いた。低体温症の程度は、臨床徴
候（例えば、震え、嗜眠、皮膚の弾力性の欠如、うずく
まり姿勢）の重症度と直接的に関連があった。ｈｒＴＮ
ＦαとｈｒＩＬ−１βの組み合わせ投与の後、注射後お
よそ１５時間で体温が正常値の３９℃から２８℃まで低
下した（図２）。温度は、Ｆｉｒｓｔ Ｔｅｍｐ▲Ｒ▼
ｉｎｆｒａｒｅｄｈａｎｄ ｈｅｌｄ Ｓｃａｎｎｅ
ｒ（ＩｎｔｅｌｌｉｇｅｎｔＭｅｄｉｃａｌＳｙｓｔｅ
ｍｓ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）によって推定した。対
照的に、ｈｒＴＮＦαまたはｈｒＩＬ−１βだけの注射
は、同程度の低体温症を引き起こさず、致死効果もなか
った（図２）。この実験に利用したヒト組換え３０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤は、Ｂｒｅｗｅｒ ｅｔ ａｌ．特許出
願に記載されている方法にしたがって作成した。
重症度の指標として用いた。低体温症の程度は、臨床徴
候（例えば、震え、嗜眠、皮膚の弾力性の欠如、うずく
まり姿勢）の重症度と直接的に関連があった。ｈｒＴＮ
ＦαとｈｒＩＬ−１βの組み合わせ投与の後、注射後お
よそ１５時間で体温が正常値の３９℃から２８℃まで低
下した（図２）。温度は、Ｆｉｒｓｔ Ｔｅｍｐ▲Ｒ▼
ｉｎｆｒａｒｅｄｈａｎｄ ｈｅｌｄ Ｓｃａｎｎｅ
ｒ（ＩｎｔｅｌｌｉｇｅｎｔＭｅｄｉｃａｌＳｙｓｔｅ
ｍｓ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）によって推定した。対
照的に、ｈｒＴＮＦαまたはｈｒＩＬ−１βだけの注射
は、同程度の低体温症を引き起こさず、致死効果もなか
った（図２）。この実験に利用したヒト組換え３０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤は、Ｂｒｅｗｅｒ ｅｔ ａｌ．特許出
願に記載されている方法にしたがって作成した。
【００７１】Ｂ．サイトカイン誘発敗血症ショックに対
する３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の効果 阻害剤蛋白質（この例では３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤）
を、８匹のマウスに、ｈｒＴＮＦαとｈｒＩＬ−１βの
皮下投与後１２、２４、または３９時間目のどれかの時
間に、４０ｍｇ／ｋｇ／注射で腹膜内に投与した。１匹
のマウスを含む第１群は、サイトカインの注射前３０
分、注射後３０分、３時間、６時間、９時間、及び１２
時間目に、阻害剤蛋白質を投与した。このマウスは、６
回の注射で全量２４０ｍｇ／ｋｇの阻害剤蛋白質を受け
た。次の群は、３時間間隔の追加注射でさらに１２時間
処理を延長した。この群の３匹のマウスは、２４時間の
間に１０回の注射で、全部で４００ｍｇｋｇの阻害剤蛋
白質を受けた。次の群は、再び３時間間隔の注射を加え
て、処理を１５時間に延長した。この群の４匹のマウス
は、３９時間に１５回の注射で全部で６００ｍｇ／ｋｇ
の投与を受けた。
する３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の効果 阻害剤蛋白質（この例では３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤）
を、８匹のマウスに、ｈｒＴＮＦαとｈｒＩＬ−１βの
皮下投与後１２、２４、または３９時間目のどれかの時
間に、４０ｍｇ／ｋｇ／注射で腹膜内に投与した。１匹
のマウスを含む第１群は、サイトカインの注射前３０
分、注射後３０分、３時間、６時間、９時間、及び１２
時間目に、阻害剤蛋白質を投与した。このマウスは、６
回の注射で全量２４０ｍｇ／ｋｇの阻害剤蛋白質を受け
た。次の群は、３時間間隔の追加注射でさらに１２時間
処理を延長した。この群の３匹のマウスは、２４時間の
間に１０回の注射で、全部で４００ｍｇｋｇの阻害剤蛋
白質を受けた。次の群は、再び３時間間隔の注射を加え
て、処理を１５時間に延長した。この群の４匹のマウス
は、３９時間に１５回の注射で全部で６００ｍｇ／ｋｇ
の投与を受けた。
【００７２】処理と無処理のマウスについて、体温（図
１０）と死亡率（図１１）を追跡した。無処理のマウス
の平均体温は１２時間目に２７℃に低下し、サイトカイ
ンの投与後３６から４２時間の間に死亡するまでその低
温のままであった。対照的に、３種類の処理群のすべて
のマウスの体温は、わずかに減少しただけで、サイトカ
インショックのすべてのマウスが生き残った。サイトカ
インの投与後最初の２４時間の間、３群共体温が１２時
間までに２から４℃低下し、２４時間までに正常に戻っ
た。その後、２４時間または３９時間阻害剤蛋白質の処
理を受けた群は、体温が正常に保たれたが、１２時間だ
けの処理を受けた１匹のマウスは、３９℃で３℃低下
し、その、サイトカイン注射後１００時間目までに正常
値に戻った。
１０）と死亡率（図１１）を追跡した。無処理のマウス
の平均体温は１２時間目に２７℃に低下し、サイトカイ
ンの投与後３６から４２時間の間に死亡するまでその低
温のままであった。対照的に、３種類の処理群のすべて
のマウスの体温は、わずかに減少しただけで、サイトカ
インショックのすべてのマウスが生き残った。サイトカ
インの投与後最初の２４時間の間、３群共体温が１２時
間までに２から４℃低下し、２４時間までに正常に戻っ
た。その後、２４時間または３９時間阻害剤蛋白質の処
理を受けた群は、体温が正常に保たれたが、１２時間だ
けの処理を受けた１匹のマウスは、３９℃で３℃低下
し、その、サイトカイン注射後１００時間目までに正常
値に戻った。
【００７３】体重が、開始時の値に戻るまでに要する時
間もまた、サイトカイン誘発ショック後の回復の指標に
用いた（図１２）。２４時間または３９時間阻害剤蛋白
質で処理されたマウスの体重は、６０時間目までに間始
時の体重の８６％に低下したが、１４０時間目までに正
常値に戻った。１２時間阻害剤で処理した１匹のマウス
の体重は、若干遅く、７５時間目に８１％に低下した
が、ほかの２群と同じく、約１４０時間で最初の体重に
戻った。
間もまた、サイトカイン誘発ショック後の回復の指標に
用いた（図１２）。２４時間または３９時間阻害剤蛋白
質で処理されたマウスの体重は、６０時間目までに間始
時の体重の８６％に低下したが、１４０時間目までに正
常値に戻った。１２時間阻害剤で処理した１匹のマウス
の体重は、若干遅く、７５時間目に８１％に低下した
が、ほかの２群と同じく、約１４０時間で最初の体重に
戻った。
【００７４】３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤は、サイトカイン
の混合剤の注射後、１２，２４，または３９時間の間、
３時間間隔で治療を続ければ、サイトカイン誘発致死敗
血症ショック症候群からマウスを防護するのに有効であ
った。同様の治療処方は、集中治療中の敗血症ショック
患者に対し、容易に目的を達成することができる。
の混合剤の注射後、１２，２４，または３９時間の間、
３時間間隔で治療を続ければ、サイトカイン誘発致死敗
血症ショック症候群からマウスを防護するのに有効であ
った。同様の治療処方は、集中治療中の敗血症ショック
患者に対し、容易に目的を達成することができる。
【００７５】例３：ラットのＳＣＷ−誘発関節炎のスト
レプトコッカル細胞壁（ＳＣＷ）−誘発活性化に対する
ヒト３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の効果の立証 この実験には、Ｅｓｓｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ａｒｔｈｒ
ｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，２８：１４
０１−１４１１，（１９８５），に記載のモデルを用
い、特に、文献としてここに引用している。このモデル
は簡単に次のようにまとめられる：ストレプトコッカル
細胞壁（ＳＣＷ）を、ルイスラットの足首の関節に関節
内注射をする。対照として塩水を反対側の関節に注射す
る。初期の炎症が静まった２０日後に、ＳＣＷを再び、
今度は静脈内に注射する。このＳＣＷ投与量はそれ自身
で関節炎症を引き起こすには不十分であり、そのため、
塩水注射の足首にはほとんど影響しない。しかしなが
ら、逆に、この投与量は、先にＳＣＷを注射した足首に
ついては炎症と関節破壊を活性化させることができる。
第２回目のＳＣＷ投与に続く炎症の広がりを評価するた
めに、足首関節の寸法を毎日測定する。ストレプトコッ
カル細胞壁−誘発関節炎について、Ｒ．Ｌ．Ｗｉｌｄｅ
ｒは，Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｇｅｎｅｔｉｃ Ｍｅｃ
ｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ Ａｒｔｈｒｉｔｓ９章標題“慢
性関節炎の実験動物モデル”に、“実験的な関節疾患の
臨床的、組織学的また放射線医学的特徴は、成人や子供
のリウマチ関節炎に非常によく似ている”とコメントし
ている。
レプトコッカル細胞壁（ＳＣＷ）−誘発活性化に対する
ヒト３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の効果の立証 この実験には、Ｅｓｓｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ａｒｔｈｒ
ｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，２８：１４
０１−１４１１，（１９８５），に記載のモデルを用
い、特に、文献としてここに引用している。このモデル
は簡単に次のようにまとめられる：ストレプトコッカル
細胞壁（ＳＣＷ）を、ルイスラットの足首の関節に関節
内注射をする。対照として塩水を反対側の関節に注射す
る。初期の炎症が静まった２０日後に、ＳＣＷを再び、
今度は静脈内に注射する。このＳＣＷ投与量はそれ自身
で関節炎症を引き起こすには不十分であり、そのため、
塩水注射の足首にはほとんど影響しない。しかしなが
ら、逆に、この投与量は、先にＳＣＷを注射した足首に
ついては炎症と関節破壊を活性化させることができる。
第２回目のＳＣＷ投与に続く炎症の広がりを評価するた
めに、足首関節の寸法を毎日測定する。ストレプトコッ
カル細胞壁−誘発関節炎について、Ｒ．Ｌ．Ｗｉｌｄｅ
ｒは，Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｇｅｎｅｔｉｃ Ｍｅｃ
ｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ Ａｒｔｈｒｉｔｓ９章標題“慢
性関節炎の実験動物モデル”に、“実験的な関節疾患の
臨床的、組織学的また放射線医学的特徴は、成人や子供
のリウマチ関節炎に非常によく似ている”とコメントし
ている。
【００７６】ＳＣＷ誘発−関節炎の囓歯動物を用いて２
種類の関節炎の治療法を決定した。第１の方法 第１組
の実験において、ＳＣＷ誘発関節炎のモデルを用い、関
節炎のラットに、リン酸緩衝塩水（ＰＢＳ）中のＴＮＦ
阻害剤を１回関節内に投与した。開始０日に各ラットの
左足首にＳＣＷ（１．８μｇラムノース当量）を注射し
て関節炎を誘発させた。右足首には等容量の、発熱物質
を含まない塩水を注射した。足首の寸法を０、１、２、
及び７日目に測定した。１及び２日目の左足首の膨脹
（表１）は、ＳＣＷ誘発関節炎の急性相を反映してい
る。関節内注射に関係した機械的な外傷のため対照とし
て用いた右足首には、有意な膨脹を生じなかった（デー
タは示していない）。
種類の関節炎の治療法を決定した。第１の方法 第１組
の実験において、ＳＣＷ誘発関節炎のモデルを用い、関
節炎のラットに、リン酸緩衝塩水（ＰＢＳ）中のＴＮＦ
阻害剤を１回関節内に投与した。開始０日に各ラットの
左足首にＳＣＷ（１．８μｇラムノース当量）を注射し
て関節炎を誘発させた。右足首には等容量の、発熱物質
を含まない塩水を注射した。足首の寸法を０、１、２、
及び７日目に測定した。１及び２日目の左足首の膨脹
（表１）は、ＳＣＷ誘発関節炎の急性相を反映してい
る。関節内注射に関係した機械的な外傷のため対照とし
て用いた右足首には、有意な膨脹を生じなかった（デー
タは示していない）。
【００７７】関節炎の急性相が静まった後の２１日目
に、ラットを各々９または１０匹ずつの４群に無作為に
分け、麻酔をかけ、以下に述べる計画にしたがって注射
した。Ｃ１０５は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）
の共有結合のための部位を作る目的でアミノ酸置換を行
った３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤である。Ｃ１０５では、３
０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の位置１０５でアスパラギンがシ
ステイン置換した。Ｃ１０５−ＰＥＧ３４００ダンベル
（ｄｂ）分子は、Ｃ１０５の２つの分子が、分子量およ
そ３４００ダルトンの１個のＰＥＧ分子によって架橋し
ている。このダンベル分子とポリエチレングリコール化
法は、１９９１年３月１５日出願のＵ．Ｓ．特許出願連
続番号０７／６６９，８６２（対応国際公報ＷＯ９２／
１６２２１）にさらに十分に説明されており、標題は
“ポリペプチドの部位特異的ＰＥＧ化”である。この出
願は、特に、ここに文献として引用してある。Ｃ１０５
−ＰＥＧ３４００ｄｂの製造方法は、以下の例５に示さ
れている。
に、ラットを各々９または１０匹ずつの４群に無作為に
分け、麻酔をかけ、以下に述べる計画にしたがって注射
した。Ｃ１０５は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）
の共有結合のための部位を作る目的でアミノ酸置換を行
った３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤である。Ｃ１０５では、３
０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の位置１０５でアスパラギンがシ
ステイン置換した。Ｃ１０５−ＰＥＧ３４００ダンベル
（ｄｂ）分子は、Ｃ１０５の２つの分子が、分子量およ
そ３４００ダルトンの１個のＰＥＧ分子によって架橋し
ている。このダンベル分子とポリエチレングリコール化
法は、１９９１年３月１５日出願のＵ．Ｓ．特許出願連
続番号０７／６６９，８６２（対応国際公報ＷＯ９２／
１６２２１）にさらに十分に説明されており、標題は
“ポリペプチドの部位特異的ＰＥＧ化”である。この出
願は、特に、ここに文献として引用してある。Ｃ１０５
−ＰＥＧ３４００ｄｂの製造方法は、以下の例５に示さ
れている。
【００７８】
【００７９】Ｉ群は、Ｃ１０５−処理ＩＶ群のための担
体対照用として用いた。ＩＩ群は、Ｃ１０５−ＰＥＧ３
４００ｄｂ−処理ＩＩＩ群のための担体群として用い
た。関節内注射は、自動ピペッターに取り付けた２５ゲ
ージ針を通して全容量が１０μｌであった。いろいろな
処方の関節内注射の後すぐに、それぞれのラットにＳＣ
Ｗ（１５０μｇラムノース当量）を静脈内に注射して関
節炎を活性化させた。それ以外は何もラットに与えなか
った。足首関節の寸法は、２１、２２、２３、及び２４
日目に測定した。
体対照用として用いた。ＩＩ群は、Ｃ１０５−ＰＥＧ３
４００ｄｂ−処理ＩＩＩ群のための担体群として用い
た。関節内注射は、自動ピペッターに取り付けた２５ゲ
ージ針を通して全容量が１０μｌであった。いろいろな
処方の関節内注射の後すぐに、それぞれのラットにＳＣ
Ｗ（１５０μｇラムノース当量）を静脈内に注射して関
節炎を活性化させた。それ以外は何もラットに与えなか
った。足首関節の寸法は、２１、２２、２３、及び２４
日目に測定した。
【００８０】期待したように、全群のラットの左足首
は、２１日目の（表１と図１３）ＳＣＷの静脈内注射に
反応して膨脹した。しかしながら、その反応は、処理群
の間で著しく異なっていた。対照のＩ及びＩＩ群のラッ
トの関節が、それぞれ、初期の寸法の３０％及び３２％
膨脹したのに対して、Ｃ１０５−ＰＥＧ３４００ｄｂ−
処理のＩＩＩ群の相当する関節の増加はわずか１５％、
Ｃ１０５−処理のＩＶ群では２５％であった。図１４
で、ＳＣＷ−誘発再活性化の後７２時間の間の関節直径
の最大増加が、Ｉ，ＩＩ，ＩＩＩ，及びＩＶ群について
グラフ化されている。Ｃ１０５−ＰＥＧ３４００ｄｂの
１回の関節内注射により、関節炎症の関節の膨脹が、統
計的に有意に減少した。
は、２１日目の（表１と図１３）ＳＣＷの静脈内注射に
反応して膨脹した。しかしながら、その反応は、処理群
の間で著しく異なっていた。対照のＩ及びＩＩ群のラッ
トの関節が、それぞれ、初期の寸法の３０％及び３２％
膨脹したのに対して、Ｃ１０５−ＰＥＧ３４００ｄｂ−
処理のＩＩＩ群の相当する関節の増加はわずか１５％、
Ｃ１０５−処理のＩＶ群では２５％であった。図１４
で、ＳＣＷ−誘発再活性化の後７２時間の間の関節直径
の最大増加が、Ｉ，ＩＩ，ＩＩＩ，及びＩＶ群について
グラフ化されている。Ｃ１０５−ＰＥＧ３４００ｄｂの
１回の関節内注射により、関節炎症の関節の膨脹が、統
計的に有意に減少した。
【００８１】第２の方法 第２組の実験では、関節炎の
同じＳＣＷモデルを用い、関節炎のラットに、リン酸緩
衝塩水（ＰＢＳ）中の３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤を多数回
皮下投与を行った。１日目に、それぞれのラットの左足
首に、ＳＣＷ（１．８μｇラムノース当量）を注射して
関節炎を誘発させ、また、右の足首に等容量の、発熱物
質を含まない塩水を注射した。急性関節炎が静まった後
の２１日目に、ラットを無作為に４群に分けた。関節炎
を活性化させるために、それぞれのラットに対しＳＣＷ
の２回目の投与量（１５０μｇラムノース当量）を、静
脈内に注射した。ＳＣＷの注射後３分以内に、対照群Ｉ
の９匹のラットにＰＢＳを与え、また、各ＩＩ，ＩＩ
Ｉ，及びＩＶ群の５匹のラットに対し、それぞれ、ＰＢ
Ｓ中の３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の１、３、及び９ｍｇ／
ｋｇ体重で処理した。１群に対するＰＢＳの皮下注射ま
たはＩＩ、ＩＩＩ、及びＩＶ群（それぞれ１、３、及び
９ｍｇ／ｋｇ）に対する３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の皮下
注射は、ＳＣＷ投与後２及び６時間目に再び行い、その
後４２時間の間、６時間ごとに繰り返した。足首関節の
直径はＳＣＷの静脈内注射後、０，２４，３９，４８，
６０，及び７２時間目に測定した。
同じＳＣＷモデルを用い、関節炎のラットに、リン酸緩
衝塩水（ＰＢＳ）中の３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤を多数回
皮下投与を行った。１日目に、それぞれのラットの左足
首に、ＳＣＷ（１．８μｇラムノース当量）を注射して
関節炎を誘発させ、また、右の足首に等容量の、発熱物
質を含まない塩水を注射した。急性関節炎が静まった後
の２１日目に、ラットを無作為に４群に分けた。関節炎
を活性化させるために、それぞれのラットに対しＳＣＷ
の２回目の投与量（１５０μｇラムノース当量）を、静
脈内に注射した。ＳＣＷの注射後３分以内に、対照群Ｉ
の９匹のラットにＰＢＳを与え、また、各ＩＩ，ＩＩ
Ｉ，及びＩＶ群の５匹のラットに対し、それぞれ、ＰＢ
Ｓ中の３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の１、３、及び９ｍｇ／
ｋｇ体重で処理した。１群に対するＰＢＳの皮下注射ま
たはＩＩ、ＩＩＩ、及びＩＶ群（それぞれ１、３、及び
９ｍｇ／ｋｇ）に対する３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の皮下
注射は、ＳＣＷ投与後２及び６時間目に再び行い、その
後４２時間の間、６時間ごとに繰り返した。足首関節の
直径はＳＣＷの静脈内注射後、０，２４，３９，４８，
６０，及び７２時間目に測定した。
【００８２】図１５と表２は、４種の実験群で、ＳＣＷ
で誘発した関節炎の活性化後７２時間の間の関節の直径
の最大変化を示す。期待したように、塩水処理群の足首
はＳＣＷの静脈内注射に反応して膨脹した。しかしなが
ら、ＩＩ，ＩＩＩ，ＩＶ群の最大膨脹は、それぞれ、５
８％，８５％，及び７５％減少した。表２は、対数変換
した平均のｔ−検定法を用い、図１５のデータの統計的
解析の結果を示している。
で誘発した関節炎の活性化後７２時間の間の関節の直径
の最大変化を示す。期待したように、塩水処理群の足首
はＳＣＷの静脈内注射に反応して膨脹した。しかしなが
ら、ＩＩ，ＩＩＩ，ＩＶ群の最大膨脹は、それぞれ、５
８％，８５％，及び７５％減少した。表２は、対数変換
した平均のｔ−検定法を用い、図１５のデータの統計的
解析の結果を示している。
【００８３】例４：成人呼吸困難症候群（ＡＲＤＳ）の
治療方法として、ラットにおけるエンドトキシン誘発の
急性肺損傷に対するヒト組換え３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤
の効果の立証 本実験は、Ｕｌｉｃｈ，ｅｔ ａｌ．，Ａｍｅｒｉｃａ
ｎ Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ １３
８：１４８５−１４９６，（１９９１），に開示され、
特に、ここに文献により引用するモデルにしたがって、
急性の好中球−媒介の肺損傷を誘発するために、敗血症
刺激エンドトキシンを用いる。このモデルは、簡単に次
のようにまとめられる：麻酔したラットの気管の中央頸
部にエンドトキシンを注射する。６時間の潜伏期間後、
肺の気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）が最終の処置として行わ
れる。全体及び個別の白血球細胞の数をＢＡＬ流体につ
いて計算する。発熱物質を含まない塩水の気管内注射
は、少ない数で、肺胞マクロファージが支配的な（約９
９％）ＢＡＬ流体を生ずる。エンドトキシンの気管内注
射は、ＢＡＬ細胞数の著しい増加をもたらし、また好中
球が支配的になる。肺胞空間への急性好中球の流入は、
６から１２時間がピークで、肺胞空間内に蛋白質含有の
水腫状の流体の蓄積が続いて発生する。ＴＮＦはエンド
トキシン誘発肺胞炎の媒体の１つであると信じられてい
る。ＴＮＦはエンドトキシンによる刺激の後ＢＡＬ流体
中に存在する。肺胞マクロファージは、その合成の源で
あると信じられている。さらに、外因性ＴＮＦの気管内
注射は、エンドトキシンによって生じたものと定性的に
同じような急性肺胞内好中球滲出液を発生させる。
治療方法として、ラットにおけるエンドトキシン誘発の
急性肺損傷に対するヒト組換え３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤
の効果の立証 本実験は、Ｕｌｉｃｈ，ｅｔ ａｌ．，Ａｍｅｒｉｃａ
ｎ Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ １３
８：１４８５−１４９６，（１９９１），に開示され、
特に、ここに文献により引用するモデルにしたがって、
急性の好中球−媒介の肺損傷を誘発するために、敗血症
刺激エンドトキシンを用いる。このモデルは、簡単に次
のようにまとめられる：麻酔したラットの気管の中央頸
部にエンドトキシンを注射する。６時間の潜伏期間後、
肺の気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）が最終の処置として行わ
れる。全体及び個別の白血球細胞の数をＢＡＬ流体につ
いて計算する。発熱物質を含まない塩水の気管内注射
は、少ない数で、肺胞マクロファージが支配的な（約９
９％）ＢＡＬ流体を生ずる。エンドトキシンの気管内注
射は、ＢＡＬ細胞数の著しい増加をもたらし、また好中
球が支配的になる。肺胞空間への急性好中球の流入は、
６から１２時間がピークで、肺胞空間内に蛋白質含有の
水腫状の流体の蓄積が続いて発生する。ＴＮＦはエンド
トキシン誘発肺胞炎の媒体の１つであると信じられてい
る。ＴＮＦはエンドトキシンによる刺激の後ＢＡＬ流体
中に存在する。肺胞マクロファージは、その合成の源で
あると信じられている。さらに、外因性ＴＮＦの気管内
注射は、エンドトキシンによって生じたものと定性的に
同じような急性肺胞内好中球滲出液を発生させる。
【００８４】動物モデルは、ヒトの疾患を正確に模写す
るとは考えられないけれども、特に、ＡＲＤＳの急性か
ら慢性相の移行に、ＡＲＤＳにおける肺の実質損傷の急
性相の間、変質した肺浮腫、白血球症の隔離及び血中酸
素減少に似通うところの多い多くの動物モデルが用いら
れる。Ｊ．Ｆ．Ｍｕｒｒａｙ ｅｔ ａｌ．，Ａｍ．Ｒ
ｅｖ．ｏｆ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｄｉｓｅａｓｅ
ｖｏｌ．１３８，ｐｐ．７２０−７２３（１９９
１）．ＡＲＤＳの急性型は、敗血症、吸引肺炎、または
多重血液輸注のようなある種の確認し得るリスク要因の
存在で発生する。現在の調査では、ＡＲＤＳの病理生理
学における好中球媒介損傷の中心的役割が強調されてい
る（Ｔａｔｅ，Ｒ．Ｍ．Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐ．Ｄｉ
ｓ．１２８：５５２−５５９，（１９８３））。活性化
した好中球により解放された毒性産物が肺胞毛管膜を傷
付けると信じられている。損傷した膜の浸透性は、血清
蛋白質と炎症細胞の肺胞空間内への移動を著しく刺激す
る。敗血症由来のＡＲＤＳの実験的な羊のモデルで、好
中球の放血は、肺損傷の進行を防御した（Ｈｅｆｌｉ
ｎ，Ａ．Ｃ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．６８：１２
５３−１２６０，（１９８１））。
るとは考えられないけれども、特に、ＡＲＤＳの急性か
ら慢性相の移行に、ＡＲＤＳにおける肺の実質損傷の急
性相の間、変質した肺浮腫、白血球症の隔離及び血中酸
素減少に似通うところの多い多くの動物モデルが用いら
れる。Ｊ．Ｆ．Ｍｕｒｒａｙ ｅｔ ａｌ．，Ａｍ．Ｒ
ｅｖ．ｏｆ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｄｉｓｅａｓｅ
ｖｏｌ．１３８，ｐｐ．７２０−７２３（１９９
１）．ＡＲＤＳの急性型は、敗血症、吸引肺炎、または
多重血液輸注のようなある種の確認し得るリスク要因の
存在で発生する。現在の調査では、ＡＲＤＳの病理生理
学における好中球媒介損傷の中心的役割が強調されてい
る（Ｔａｔｅ，Ｒ．Ｍ．Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐ．Ｄｉ
ｓ．１２８：５５２−５５９，（１９８３））。活性化
した好中球により解放された毒性産物が肺胞毛管膜を傷
付けると信じられている。損傷した膜の浸透性は、血清
蛋白質と炎症細胞の肺胞空間内への移動を著しく刺激す
る。敗血症由来のＡＲＤＳの実験的な羊のモデルで、好
中球の放血は、肺損傷の進行を防御した（Ｈｅｆｌｉ
ｎ，Ａ．Ｃ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．６８：１２
５３−１２６０，（１９８１））。
【００８５】ＰＢＳ中の３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の気管
内投与により、ラットの好中球肺胞炎を治療する方法を
実施した。肺損傷は、殺菌した全容量０．５ｍｌのＰＢ
Ｓ中のエンドトキシン（５μｇ／ラット）を２７ゲージ
１／２インチの針を通して、外科的に開いた気管の中央
頸部の気管軟骨の間に投与して引き起こした。ラットの
呼吸の速度や深さを検査しながら、接種物をゆっくり投
与した。６時間後、肺の洗浄をやりやすくするため開腹
術が出来るようにイソフルランで麻酔した。肺の血液含
量を減少するため、尾の大静脈を切断した。洗浄の間、
肺が広がるように横隔膜を開いた。ＢＡＬは、Ｈａｎｋ
の平衡塩溶液４０ｍｌを、中央頸部気管の切開部分に挿
入し固定した血管カテーテルを通して気管支肺胞空間に
注入して行った。炎症性の細胞の流入は、ＢＡＬ流体を
１５００回転１５分間遠心分離することによって得られ
たペレットから取り出された。白血球の全数をコールタ
ーカウンターで数えた。多形核好中球のパーセンテージ
は、染色した細胞のスライド上で手動の鑑別細胞計算で
測定した。
内投与により、ラットの好中球肺胞炎を治療する方法を
実施した。肺損傷は、殺菌した全容量０．５ｍｌのＰＢ
Ｓ中のエンドトキシン（５μｇ／ラット）を２７ゲージ
１／２インチの針を通して、外科的に開いた気管の中央
頸部の気管軟骨の間に投与して引き起こした。ラットの
呼吸の速度や深さを検査しながら、接種物をゆっくり投
与した。６時間後、肺の洗浄をやりやすくするため開腹
術が出来るようにイソフルランで麻酔した。肺の血液含
量を減少するため、尾の大静脈を切断した。洗浄の間、
肺が広がるように横隔膜を開いた。ＢＡＬは、Ｈａｎｋ
の平衡塩溶液４０ｍｌを、中央頸部気管の切開部分に挿
入し固定した血管カテーテルを通して気管支肺胞空間に
注入して行った。炎症性の細胞の流入は、ＢＡＬ流体を
１５００回転１５分間遠心分離することによって得られ
たペレットから取り出された。白血球の全数をコールタ
ーカウンターで数えた。多形核好中球のパーセンテージ
は、染色した細胞のスライド上で手動の鑑別細胞計算で
測定した。
【００８６】気管支肺胞空間への細胞のエンドトキシン
刺激性流入に対する、３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の効果
は、エンドトキシンの気管内点滴注入と同時に３０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤を投与することによって観測した。３０
ＫＤａＴＮＦ阻害剤は、１から１０μｇ／ラットの投与
量の範囲で試験した。１μｇ／ラットの投与量の３０Ｋ
ＤａＴＮＦ阻害剤は肺胞空間への好中球の流入を減少さ
せなかった。しかしながら、２．５μｇから１０μｇ／
ラットの間の量の３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の気管内投与
が、肺胞空間への好中球の流入を最大に減少させた。無
処理のラットにおける好中球の流入に比較して、これら
の３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤処理ラットの細胞流入阻害パ
ーセントは、およそ３５％（図１６）であった。気管支
肺胞空間に存在する好中球の全数は、２．５から１０μ
ｇ／ラットの３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤で処理したラット
では有意に減少した（図１７と表３）。
刺激性流入に対する、３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の効果
は、エンドトキシンの気管内点滴注入と同時に３０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤を投与することによって観測した。３０
ＫＤａＴＮＦ阻害剤は、１から１０μｇ／ラットの投与
量の範囲で試験した。１μｇ／ラットの投与量の３０Ｋ
ＤａＴＮＦ阻害剤は肺胞空間への好中球の流入を減少さ
せなかった。しかしながら、２．５μｇから１０μｇ／
ラットの間の量の３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の気管内投与
が、肺胞空間への好中球の流入を最大に減少させた。無
処理のラットにおける好中球の流入に比較して、これら
の３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤処理ラットの細胞流入阻害パ
ーセントは、およそ３５％（図１６）であった。気管支
肺胞空間に存在する好中球の全数は、２．５から１０μ
ｇ／ラットの３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤で処理したラット
では有意に減少した（図１７と表３）。
【００８７】例５：Ｃ１０５−ＰＥＧ３４００ｄｂ製造 Ｃ１０５−ＰＥＧｄｂ化合物は、３０ＫＤａＴＮＦ阻害
剤Ｃ１０５のムテインを含むシステインとＰＥＧ−ビス
−マレイミドとの反応によって製造した。ＰＥＧ−ビス
−マレイミドを作るために、Ｎｉｌｓｏｎ ａｎｄ Ｍ
ｏｓｂａｃｈ，ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙ
ｍｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１０４，ｐｐ．５６−６９，Ａ
ｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏ
ｒｋ，ＮＹ（１９８４）によって述べられているよう
に、ＰＥＧ−ビス−ジオールからＰＥＧトレシレートを
作った。スルホン化中間体の量は、フッ素の元素分析で
測定した。この中間体を、フタルイミド誘導体に変換し
た後、ヒドラジンヒドラートによりＰＥＧ−ビス−アミ
ン中間体にした。これら２つの反応は、Ｐｉｌｌａｉ，
ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，ｖｏｌ．４５
ｐｐ．５３６４−５３７０（１９８０）により述べら
れている方法で行った。各中間体の量は、窒素の元素分
祈で推定した。さらに、ＰＥＧ−ビス−アミンの量は、
２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン酸との反応で
測定した。ＰＥＧ−ビス−アミン誘導体は、Ｂｕｌｔｅ
ｒ ａｎｄ Ｈａｒｔｌｅｙ，ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ
ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．ＸＸＶ，ｐｐ．
１９１−１９９，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎ
ｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ（１９７２）の方法適用
による無水マレイン酸との反応、及び、Ｗｕｎｓｃｈ，
ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．Ｈｏｐｐｅ−Ｓｅ
ｙｌｅｒ，ｖｏｌ．３６６，ｐｐ．５６−６１（１９８
５）により述べられている方法を用いた中間体の環化に
よって、相当するビス−マレイミド生産物に変換させ
た。
剤Ｃ１０５のムテインを含むシステインとＰＥＧ−ビス
−マレイミドとの反応によって製造した。ＰＥＧ−ビス
−マレイミドを作るために、Ｎｉｌｓｏｎ ａｎｄ Ｍ
ｏｓｂａｃｈ，ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙ
ｍｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１０４，ｐｐ．５６−６９，Ａ
ｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏ
ｒｋ，ＮＹ（１９８４）によって述べられているよう
に、ＰＥＧ−ビス−ジオールからＰＥＧトレシレートを
作った。スルホン化中間体の量は、フッ素の元素分析で
測定した。この中間体を、フタルイミド誘導体に変換し
た後、ヒドラジンヒドラートによりＰＥＧ−ビス−アミ
ン中間体にした。これら２つの反応は、Ｐｉｌｌａｉ，
ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，ｖｏｌ．４５
ｐｐ．５３６４−５３７０（１９８０）により述べら
れている方法で行った。各中間体の量は、窒素の元素分
祈で推定した。さらに、ＰＥＧ−ビス−アミンの量は、
２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン酸との反応で
測定した。ＰＥＧ−ビス−アミン誘導体は、Ｂｕｌｔｅ
ｒ ａｎｄ Ｈａｒｔｌｅｙ，ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ
ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．ＸＸＶ，ｐｐ．
１９１−１９９，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎ
ｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ（１９７２）の方法適用
による無水マレイン酸との反応、及び、Ｗｕｎｓｃｈ，
ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．Ｈｏｐｐｅ−Ｓｅ
ｙｌｅｒ，ｖｏｌ．３６６，ｐｐ．５６−６１（１９８
５）により述べられている方法を用いた中間体の環化に
よって、相当するビス−マレイミド生産物に変換させ
た。
【００８８】ムテインＣ１０５ ３０ＫＤａＴＮＦ阻害
剤は、１９９１年３月１５日出願のＵ．Ｓ．特許出願連
続番号０７／６６９，８６２（対応国際公報ＷＯ９２／
１６２２１）に記載されているとおりに製造した。２−
３ｍｇ／ｍｌのＣ１０５ ３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤を４
倍モル過剰のジチオスライトール（ＤＴＴ）で２時間室
温で処理する。ムテインは、次に、ｐＨ７．０、４℃で
３時間、脱気した５０ｍＭのＨＥＰＥＳに対して透析さ
れる。ダンベル化合物−−ポリエチレングリコール（Ｐ
ＥＧ）架橋ダイマーと考えられる−−を作るために透析
したムテインをＰＥＧ−ビス−マレイミドと反応させ
る。ムテインのＰＥＧ−ビス−マレイミドに対する割合
は、ＰＥＧ化合物の分子量に依存する。約１９００の分
子量をもつＰＥＧ−ビス−マレイミドに対しては、１：
１分子比率を用いたが、一方、３，４００または２０，
０００の分子量をもつＰＥＧ化合物に対しては、ムテイ
ンのＰＥＧ化合物に対する分子比率２：１を用いた。反
応は、室温で３−１２時間保温する。
剤は、１９９１年３月１５日出願のＵ．Ｓ．特許出願連
続番号０７／６６９，８６２（対応国際公報ＷＯ９２／
１６２２１）に記載されているとおりに製造した。２−
３ｍｇ／ｍｌのＣ１０５ ３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤を４
倍モル過剰のジチオスライトール（ＤＴＴ）で２時間室
温で処理する。ムテインは、次に、ｐＨ７．０、４℃で
３時間、脱気した５０ｍＭのＨＥＰＥＳに対して透析さ
れる。ダンベル化合物−−ポリエチレングリコール（Ｐ
ＥＧ）架橋ダイマーと考えられる−−を作るために透析
したムテインをＰＥＧ−ビス−マレイミドと反応させ
る。ムテインのＰＥＧ−ビス−マレイミドに対する割合
は、ＰＥＧ化合物の分子量に依存する。約１９００の分
子量をもつＰＥＧ−ビス−マレイミドに対しては、１：
１分子比率を用いたが、一方、３，４００または２０，
０００の分子量をもつＰＥＧ化合物に対しては、ムテイ
ンのＰＥＧ化合物に対する分子比率２：１を用いた。反
応は、室温で３−１２時間保温する。
【００８９】保温に続き、ＰＥＧ−架橋ダイマーは、２
６０ｍＭ，３１０ｍＭ，及び３５０ｍＭ塩化ナトリウム
段階勾配を用い、５０ｍＭＨｏＡｃ，ｐＨ４．０のモノ
−Ｓ高速液体クロマトグラフィーを用いて、非ＰＥＧ化
ムテインとＰＥＧ−ムテインモノマーから精製した。ダ
ンベル化合物は、３１０ｍＭ塩化ナトリウム段階で溶出
する。残りの非ＰＥＧ化ムテインは、スーパーデックス
７５のクロマトグラフィーによって除かれた。Ｃ１０５
−ＰＥＧ３４００ｄｂは、ＴＮＦ阻害剤が３０ＫＤａＴ
ＮＦ阻害剤のＣ１０５ムテインであり、ＰＥＧ単位が約
３４００ダルトンの分子量を持つダンベル化合物に関係
している。本発明は、好ましい具体例に関連して説明し
たけれども、この分野の専門家であれば本発明の範囲ま
たは思想からはずれることなく、修正や変化を加えるこ
とができることを理解すべきである。したがって、好ま
しい具体例のこれまでの説明は、限定した考え方でとら
えるべきではなく、次のクレーム及びそれらと同価値の
ものによって最もよく定義される。
６０ｍＭ，３１０ｍＭ，及び３５０ｍＭ塩化ナトリウム
段階勾配を用い、５０ｍＭＨｏＡｃ，ｐＨ４．０のモノ
−Ｓ高速液体クロマトグラフィーを用いて、非ＰＥＧ化
ムテインとＰＥＧ−ムテインモノマーから精製した。ダ
ンベル化合物は、３１０ｍＭ塩化ナトリウム段階で溶出
する。残りの非ＰＥＧ化ムテインは、スーパーデックス
７５のクロマトグラフィーによって除かれた。Ｃ１０５
−ＰＥＧ３４００ｄｂは、ＴＮＦ阻害剤が３０ＫＤａＴ
ＮＦ阻害剤のＣ１０５ムテインであり、ＰＥＧ単位が約
３４００ダルトンの分子量を持つダンベル化合物に関係
している。本発明は、好ましい具体例に関連して説明し
たけれども、この分野の専門家であれば本発明の範囲ま
たは思想からはずれることなく、修正や変化を加えるこ
とができることを理解すべきである。したがって、好ま
しい具体例のこれまでの説明は、限定した考え方でとら
えるべきではなく、次のクレーム及びそれらと同価値の
ものによって最もよく定義される。
【００９０】
【表１】
【００９１】
【表２】
【００９２】
【表３】
【図１】図１は、ヒト組換え腫瘍壊死要因アルファ（ｈ
ｒＴＮＦα）の３００μｇ／ｋｇの一定用量を投与した
ヒト組換えインターロイキン−１ベータ（ｈｒＩＬ−１
β）の投与量の函数としての死亡率を描いている。６匹
のマウス群に異なった量のｈｒＩＬ−１βを投与した。
サイトカイン混合物の静脈注射後７２時間目に死亡率を
測定した。測定値は３回の実験の平均値±平均の標準偏
差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。
ｒＴＮＦα）の３００μｇ／ｋｇの一定用量を投与した
ヒト組換えインターロイキン−１ベータ（ｈｒＩＬ−１
β）の投与量の函数としての死亡率を描いている。６匹
のマウス群に異なった量のｈｒＩＬ−１βを投与した。
サイトカイン混合物の静脈注射後７２時間目に死亡率を
測定した。測定値は３回の実験の平均値±平均の標準偏
差（Ｓ．Ｅ．Ｍ．）である。
【図２】図２は、３００μｇ／ｋｇのｈｒＴＮＦαと
２、５００μｇ／ｋｇのｈｒＩＬ−１βを時間ゼロで静
脈に注射で投与した後の時間の函数としての表面温度を
描いている。
２、５００μｇ／ｋｇのｈｒＩＬ−１βを時間ゼロで静
脈に注射で投与した後の時間の函数としての表面温度を
描いている。
【図３】図３は、−・−・−がサイトカイン混合物の静
脈内投与３０分前と３０分後に２回、４０ＫＤａＴＮＦ
阻害剤△５３を腹膜内に注射したマウスを表わし、図２
と同様の時間の函数としての表面温度を描いている。投
与した全４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３は２００ｍｇ／
ｋｇであった。＊は、ＴＮＦ阻害剤処理と無処理のサイ
トカイン注射マウスの片側ｔ−検定（ｐ＜０．０５）に
よる統計的に有意な相違を示している。
脈内投与３０分前と３０分後に２回、４０ＫＤａＴＮＦ
阻害剤△５３を腹膜内に注射したマウスを表わし、図２
と同様の時間の函数としての表面温度を描いている。投
与した全４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３は２００ｍｇ／
ｋｇであった。＊は、ＴＮＦ阻害剤処理と無処理のサイ
トカイン注射マウスの片側ｔ−検定（ｐ＜０．０５）に
よる統計的に有意な相違を示している。
【図４】図４は図３に示した実験を時間の函数としての
死亡率で描かれている。
死亡率で描かれている。
【図５】 与３０分前と、３０分、３時間、６時間、９時間及び１
２時間後に、６回、４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３を腹
膜内に注射したマウスを表わし、図２と同様の時間の函
数としての表面温度を描いている。投与した全４０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤△５３は６００ｍｇ／ｋｇであった。＊
は、ＴＮＦ阻害剤処理とＰＢＳ注射マウスの片側ｔ−検
定（ｐ＜．００１）による統計的に有意な相違を示して
いる。
２時間後に、６回、４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３を腹
膜内に注射したマウスを表わし、図２と同様の時間の函
数としての表面温度を描いている。投与した全４０ＫＤ
ａＴＮＦ阻害剤△５３は６００ｍｇ／ｋｇであった。＊
は、ＴＮＦ阻害剤処理とＰＢＳ注射マウスの片側ｔ−検
定（ｐ＜．００１）による統計的に有意な相違を示して
いる。
【図６】図６は、図５に示した実験について、時間の函
数としての死亡率を描いている。
数としての死亡率を描いている。
【図７】図７は、−・−・−がサイトカイン混合物の静
脈内投与３０分前と、３０分、３時間、６時間、９時
間、１２時間、１５時間、１８時間、２１時間及び２４
時間後に、１０回４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３を腹膜
内に注射したマウスを表わし、図２と同様に時間の函数
としての表面温度を描いている。投与した全４０ＫＤａ
ＴＮＦ阻害剤△５３は１，０００ｍｇ／ｋｇであった。
脈内投与３０分前と、３０分、３時間、６時間、９時
間、１２時間、１５時間、１８時間、２１時間及び２４
時間後に、１０回４０ＫＤａＴＮＦ阻害剤△５３を腹膜
内に注射したマウスを表わし、図２と同様に時間の函数
としての表面温度を描いている。投与した全４０ＫＤａ
ＴＮＦ阻害剤△５３は１，０００ｍｇ／ｋｇであった。
【図８】図８は、図７に示した実験について、時間の函
数としての死亡率を描いている。
数としての死亡率を描いている。
【図９】図９は、図７に示した実験について、時間の函
数としての体重を描いている。
数としての体重を描いている。
【図１０】図１０は、図２と同様に時間の函数としての
表面温度を描いており、ここで：−□−□−がサイトカ
イン混合物（全部で２４０ｍｇ／ｋｇ）の皮下投与３０
分前と、３０分、３時間、６時間、９時間、１２時間後
に、６回、３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤を腹膜内に注射した
マウスを表わし；−△−△−がサイトカイン混合物（全
部で４００ｍｇ／ｋｇ）の皮下投与３０分前と、３０
分、３時間、６時間、９時間、１２時間、１５時間、１
８時間、２１時間及び２４時間後に、１０回３０ＫＤａ
ＴＮＦ阻害剤を腹膜内に注射したマウスを表わし；−○
−○−がサイトカイン混合物（全部で６００ｍｇ／ｋ
ｇ）の皮下投与３０分前と、３０分、３時間、６時間、
９時間、１２時間、１５時間、１８時間、２１時間、２
４時間、２７時間、３０時間、３３時間、３６時間及び
３９時間後に、１５回、３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤を腹膜
内に注射したマウスを表わしている。
表面温度を描いており、ここで：−□−□−がサイトカ
イン混合物（全部で２４０ｍｇ／ｋｇ）の皮下投与３０
分前と、３０分、３時間、６時間、９時間、１２時間後
に、６回、３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤を腹膜内に注射した
マウスを表わし；−△−△−がサイトカイン混合物（全
部で４００ｍｇ／ｋｇ）の皮下投与３０分前と、３０
分、３時間、６時間、９時間、１２時間、１５時間、１
８時間、２１時間及び２４時間後に、１０回３０ＫＤａ
ＴＮＦ阻害剤を腹膜内に注射したマウスを表わし；−○
−○−がサイトカイン混合物（全部で６００ｍｇ／ｋ
ｇ）の皮下投与３０分前と、３０分、３時間、６時間、
９時間、１２時間、１５時間、１８時間、２１時間、２
４時間、２７時間、３０時間、３３時間、３６時間及び
３９時間後に、１５回、３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤を腹膜
内に注射したマウスを表わしている。
【図１１】図１１は、図１０に示した実験について、時
間の函数としての死亡率を描いている。
間の函数としての死亡率を描いている。
【図１２】図１２は、図１０に示す実験について、時間
の函数としての体重を描いている。
の函数としての体重を描いている。
【図１３】図１３は、以下にのべる例３の方法１に従
い、２１日目のストレプトコッカル細胞壁（ＳＣＷ）に
よる活性化後の関節の直径の増加を時間の函数として示
している。
い、２１日目のストレプトコッカル細胞壁（ＳＣＷ）に
よる活性化後の関節の直径の増加を時間の函数として示
している。
【図１４】図１４は、図１３に示した実験におけるＳＣ
Ｗによる活性化後７２時間間隔における関節の直径の最
大変化を示している。＊は、片側ｔ検定、ｔ＝４．３
６，ｐ＜０．００１により、ＰＥＧ３４００対照群と比
較した統計的に有意な相違を示している。
Ｗによる活性化後７２時間間隔における関節の直径の最
大変化を示している。＊は、片側ｔ検定、ｔ＝４．３
６，ｐ＜０．００１により、ＰＥＧ３４００対照群と比
較した統計的に有意な相違を示している。
【図１５】図１５は、以下の例３方法２に従い、ＳＣＷ
による活性化後７２時間間隔における関節の直径の最大
変化を示している。
による活性化後７２時間間隔における関節の直径の最大
変化を示している。
【図１６】図１６は、以下の例に述べるように、３０Ｋ
ＤａＴＮＦ阻害剤で処理したラットの気管支肺胞空間へ
の、エンドトキシンに刺激された好中球の流入の阻害百
分率を描いている。
ＤａＴＮＦ阻害剤で処理したラットの気管支肺胞空間へ
の、エンドトキシンに刺激された好中球の流入の阻害百
分率を描いている。
【図１７】図１７は、図１６に示す実験において、エン
ドトキシンの攻撃に応答して肺胞空間に移動する好中球
の数に対する、３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の５投与量の気
管内点滴注入の効果を描いている。＊は、片側ｔ検定、
ｐ＜０．０１による評価で、無処理の対照ラットとの統
計的に有意な相違を示している。
ドトキシンの攻撃に応答して肺胞空間に移動する好中球
の数に対する、３０ＫＤａＴＮＦ阻害剤の５投与量の気
管内点滴注入の効果を描いている。＊は、片側ｔ検定、
ｐ＜０．０１による評価で、無処理の対照ラットとの統
計的に有意な相違を示している。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ｃ０７Ｋ 14/525 Ｃ１２Ｐ 21/02 ＺＮＡＬ Ｃ１２Ｐ 21/02 ＺＮＡ Ａ６１Ｋ 37/02 (72)発明者 トンプソン，ロバート，シー. アメリカ合衆国80303 コロラド州ボウ ルダー，レハイ ストリート 1820 (72)発明者 ラッセル，デボラ アメリカ合衆国80303 コロラド州ボウ ルダー，アーマー ドライブ 3825 (72)発明者 コウノ，タダヒコ アメリカ合衆国80027 コロラド州ルイ スビル，ヘイス シーティー． 1557 (56)参考文献 特開 平２−200（ＪＰ，Ａ) 欧州特許出願公開393438（ＥＰ，Ａ ２) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) A61K 38/00 - 38/58 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (15)
- 【請求項１】 腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）媒介疾患の治療
または予防用薬剤学的組成物であって、治療有効量の組
換ＴＮＦ阻害剤を含み、該組換ＴＮＦ阻害剤が、以下の
アミノ酸配列を有する３０ｋＤａ阻害剤であって、３０
ｋＤａ阻害剤の１０５番目のアミノ酸残基に非自然発生
システイン残基を含む３０ｋＤａ阻害剤である組成物。 【化１】 - 【請求項２】 該疾患が成人呼吸困難症候群である、請
求項１記載の組成物。 - 【請求項３】 該疾患が関節炎である、請求項１記載の
組成物。 - 【請求項４】 該疾患が敗血症ショックである、請求項
１記載の組成物。 - 【請求項５】 成人呼吸困難症候群疾患の治療または予
防用薬剤学的組成物であって、該組成物が治療有効量の
組換ＴＮＦ阻害剤を含み、該組換ＴＮＦ阻害剤が、以下
のアミノ酸配列を有する３０ｋＤａ阻害剤： 【化２】 、ＴＮＦ阻害活性を有する、該阻害剤のフラグメントま
たはムテインであり、かつ、該組換ＴＮＦ阻害剤が１０
５番目のアミノ酸残基に非自然発生システイン残基を含
む組成物。 - 【請求項６】 関節炎疾患の治療または予防用薬剤学的
組成物であって、該組成物が治療有効量の組換ＴＮＦ阻
害剤を含み、該組換ＴＮＦ阻害剤が、以下のアミノ酸配
列を有する３０ｋＤａ阻害剤： 【化３】 、ＴＮＦ阻害活性を有する、該阻害剤のフラグメントま
たはムテインであり、かつ、該組換ＴＮＦ阻害剤が１０
５番目のアミノ酸残基に非自然発生システイン残基を含
む組成物。 - 【請求項７】 敗血症ショック疾患の治療または予防用
薬剤学的組成物であって、該組成物が治療有効量の組換
ＴＮＦ阻害剤を含み、該組換ＴＮＦ阻害剤が、以下のア
ミノ酸配列を有する３０ｋＤａ阻害剤： 【化４】 、ＴＮＦ阻害活性を有する、該阻害剤のフラグメントま
たはムテインであり、かつ、該組換ＴＮＦ阻害剤が１０
５番目のアミノ酸残基に非自然発生システイン残基を含
む組成物。 - 【請求項８】 該組換ＴＮＦ阻害剤が、Ｃ１０５−ＰＥ
Ｇ３４００ｄｂである、請求項１〜４のいずれか一項に
記載の組成物。 - 【請求項９】 該組換ＴＮＦ阻害剤が、Ｎ−末端におい
てメチオニン残基を有する、請求項５〜８のいずれか一
項に記載の組成物。 - 【請求項１０】 該組換ＴＮＦ阻害剤が、実質的に純粋
である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。 - 【請求項１１】 該組換ＴＮＦ阻害剤が、繰り返しポリ
マー成分に結合している、請求項１〜１０のいずれか一
項に記載の組成物。 - 【請求項１２】 該繰り返しポリマー成分が、ポリエチ
レングリコールである、請求項１１記載の組成物。 - 【請求項１３】 さらに生理的適合性の徐放性製剤を含
む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。 - 【請求項１４】 該組換ＴＮＦ阻害剤が、凍結乾燥粉末
である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成
物。 - 【請求項１５】 請求項１４記載の凍結乾燥粉末と生理
的適合性の溶媒とを含む、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）媒介
疾患の治療または予防用の水溶性薬剤学的製剤を製造す
るためのキット。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US64434591A | 1991-01-18 | 1991-01-18 | |
| US644345 | 2006-12-22 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4504597A Division JP2864434B2 (ja) | 1991-01-18 | 1992-01-17 | 腫瘍壊死因子媒介疾患の治療方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11199505A JPH11199505A (ja) | 1999-07-27 |
| JP3210629B2 true JP3210629B2 (ja) | 2001-09-17 |
Family
ID=24584497
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4504597A Expired - Lifetime JP2864434B2 (ja) | 1991-01-18 | 1992-01-17 | 腫瘍壊死因子媒介疾患の治療方法 |
| JP29598898A Expired - Lifetime JP3210629B2 (ja) | 1991-01-18 | 1998-09-10 | 腫瘍壊死因子媒介疾患の治療または予防用薬剤学的組成物 |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4504597A Expired - Lifetime JP2864434B2 (ja) | 1991-01-18 | 1992-01-17 | 腫瘍壊死因子媒介疾患の治療方法 |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0567566B2 (ja) |
| JP (2) | JP2864434B2 (ja) |
| KR (1) | KR100234520B1 (ja) |
| AT (1) | ATE190629T1 (ja) |
| AU (2) | AU1235692A (ja) |
| CA (1) | CA2100329C (ja) |
| DE (1) | DE69230789T3 (ja) |
| DK (1) | DK0567566T4 (ja) |
| ES (1) | ES2145744T5 (ja) |
| GE (1) | GEP20002142B (ja) |
| GR (1) | GR3033327T3 (ja) |
| NO (1) | NO316310B1 (ja) |
| RU (1) | RU2166955C2 (ja) |
| SG (1) | SG63617A1 (ja) |
| WO (1) | WO1992013095A1 (ja) |
Families Citing this family (76)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IL98078A0 (en) * | 1991-05-07 | 1992-06-21 | Yeda Res & Dev | Pharmaceutical compositions comprising an anticytokyne |
| US5512544A (en) * | 1987-09-13 | 1996-04-30 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Pharmaceutical compositions comprising an anticytokine |
| ES2238070T3 (es) | 1989-04-21 | 2005-08-16 | Amgen Inc. | Receptor del tnf, proteina ligante del tnf y adn codante para estos. |
| US6221675B1 (en) | 1989-04-21 | 2001-04-24 | Amgen, Inc. | TNF receptors, TNF binding proteins and DNAs coding for them |
| US7264944B1 (en) | 1989-04-21 | 2007-09-04 | Amgen Inc. | TNF receptors, TNF binding proteins and DNAs coding for them |
| IL95031A (en) | 1989-07-18 | 2007-03-08 | Amgen Inc | A method of producing a recombinant human necrotic factor absorber |
| US6143866A (en) * | 1989-07-18 | 2000-11-07 | Amgen, Inc. | Tumor necrosis factor (TNF) inhibitor and method for obtaining the same |
| DE59010933D1 (de) | 1989-09-12 | 2003-05-08 | Hoffmann La Roche | TFN-bindende Proteine |
| US5698195A (en) * | 1991-03-18 | 1997-12-16 | New York University Medical Center | Methods of treating rheumatoid arthritis using chimeric anti-TNF antibodies |
| US6277969B1 (en) | 1991-03-18 | 2001-08-21 | New York University | Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor |
| US6284471B1 (en) | 1991-03-18 | 2001-09-04 | New York University Medical Center | Anti-TNFa antibodies and assays employing anti-TNFa antibodies |
| US5656272A (en) * | 1991-03-18 | 1997-08-12 | New York University Medical Center | Methods of treating TNF-α-mediated Crohn's disease using chimeric anti-TNF antibodies |
| US7192584B2 (en) | 1991-03-18 | 2007-03-20 | Centocor, Inc. | Methods of treating psoriasis with anti-TNF antibodies |
| DE69230862T2 (de) * | 1991-10-15 | 2000-12-14 | Michael F. Mullarkey | Rezeptoren zur Behandlung von Entzündungen vom verzögerten Typ |
| DK0639079T3 (da) * | 1992-04-30 | 2000-06-13 | Amgen Inc | Fremgangsmåder til behandling af interleukin-1- og tumornekrosefaktor-medierede sygdomme |
| NZ256293A (en) * | 1992-09-15 | 1997-06-24 | Immunex Corp | Method of treating tumour necrosis factor - mediated inflammation by use of tnf antagonist |
| US5457129A (en) * | 1993-05-17 | 1995-10-10 | Research Development Foundation | Inhibition of nitric oxide production by retinoic acid |
| US5446090A (en) * | 1993-11-12 | 1995-08-29 | Shearwater Polymers, Inc. | Isolatable, water soluble, and hydrolytically stable active sulfones of poly(ethylene glycol) and related polymers for modification of surfaces and molecules |
| CA2139385C (en) * | 1994-02-04 | 2001-12-25 | Gottfried Alber | Products containing g-csf and tnf binding protein |
| US5629384A (en) * | 1994-05-17 | 1997-05-13 | Consiglio Nazionale Delle Ricerche | Polymers of N-acryloylmorpholine activated at one end and conjugates with bioactive materials and surfaces |
| US5824784A (en) | 1994-10-12 | 1998-10-20 | Amgen Inc. | N-terminally chemically modified protein compositions and methods |
| US7012060B1 (en) | 1995-07-14 | 2006-03-14 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | TNF receptor and steroid hormone in a combined therapy |
| DE69525181T2 (de) * | 1995-07-14 | 2002-08-14 | Applied Research Systems Ars Holding N.V., Curacao | Tnf-rezeptor und steroidhormon dhea in einer kombinationstherapie |
| TW555765B (en) | 1996-07-09 | 2003-10-01 | Amgen Inc | Low molecular weight soluble tumor necrosis factor type-I and type-II proteins |
| WO1998024477A1 (en) | 1996-12-06 | 1998-06-11 | Amgen Inc. | Combination therapy using an il-1 inhibitor for treating il-1 mediated diseases |
| DK0942740T3 (da) | 1996-12-06 | 2003-12-15 | Amgen Inc | Kombinationsterapi under anvendelse af et TFN-bindende protein til behandling af TFN-medierede sygdomme |
| WO1999023879A1 (en) * | 1997-11-07 | 1999-05-20 | Uab Research Foundation | Method for the augmentation of gene expression |
| EP1123314B1 (en) * | 1998-10-20 | 2004-02-18 | Vlaams Interuniversitair Instituut voor Biotechnologie vzw. | Use of a cytokine-producing lactococcus strain to treat colitis |
| US20040220103A1 (en) | 1999-04-19 | 2004-11-04 | Immunex Corporation | Soluble tumor necrosis factor receptor treatment of medical disorders |
| US6808902B1 (en) | 1999-11-12 | 2004-10-26 | Amgen Inc. | Process for correction of a disulfide misfold in IL-1Ra Fc fusion molecules |
| JP2003525612A (ja) | 2000-03-02 | 2003-09-02 | ゼンコー | ＴＮＦ−α関連障害の処置のための変種ＴＮＦ−αタンパク質の設計および発見 |
| UA81743C2 (uk) | 2000-08-07 | 2008-02-11 | Центокор, Инк. | МОНОКЛОНАЛЬНЕ АНТИТІЛО ЛЮДИНИ, ЩО СПЕЦИФІЧНО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З ФАКТОРОМ НЕКРОЗУ ПУХЛИН АЛЬФА (ФНПα), ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ, ЩО ЙОГО МІСТИТЬ, ТА СПОСІБ ЛІКУВАННЯ РЕВМАТОЇДНОГО АРТРИТУ |
| DK2270052T3 (en) | 2001-06-26 | 2018-07-02 | Amgen Inc | Antibodies to OPGL |
| TWI334439B (en) | 2001-08-01 | 2010-12-11 | Centocor Inc | Anti-tnf antibodies, compositions, methods and uses |
| EA007927B1 (ru) | 2002-04-10 | 2007-02-27 | Апплайд Резеч Системз Арс Холдинг Н. В. | Применение остеопротегерина для лечения и/или профилактики фиброзного заболевания |
| US7585840B2 (en) | 2002-04-10 | 2009-09-08 | Merck Serono S.A. | Use of osteoprotegerin for the treatment and/or prevention of fibrotic disease |
| US9028822B2 (en) | 2002-06-28 | 2015-05-12 | Domantis Limited | Antagonists against TNFR1 and methods of use therefor |
| WO2004032837A2 (en) | 2002-10-08 | 2004-04-22 | Ares Trading S.A. | The use of cytokine able to bind il-18bp and of inhibiting the activity of a second cytokine |
| US7892563B2 (en) | 2003-05-20 | 2011-02-22 | Wyeth Holdings Corporation | Methods for treatment of severe acute respiratory syndrome (SARS) |
| US7482376B2 (en) * | 2003-07-03 | 2009-01-27 | 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. | Conjugated complement cascade inhibitors |
| IL161672A0 (en) | 2004-04-29 | 2004-09-27 | Yeda Res & Dev | Compositions and methods for therapy of chemotherapy-induced neuropathy |
| IL161673A0 (en) | 2004-04-29 | 2004-09-27 | Applied Research Systems | Compositions and methods for therapy of chemotherapy-induced neuropathy |
| CA2603671C (en) | 2005-04-26 | 2012-03-27 | Laboratoires Serono S.A. | Insp163 polypeptides for the treatment or prevention of cancer and arthritis |
| DK2267024T3 (da) | 2005-06-03 | 2012-06-25 | Ares Trading Sa | Fremstilling af rekombinant II-18 bindingsprotein |
| CA2610804C (en) | 2005-06-10 | 2013-11-19 | Ares Trading S.A. | Process for the purification of il-18 binding protein |
| KR20080044836A (ko) | 2005-07-15 | 2008-05-21 | 라보라뚜와르 세로노 에스. 에이. | 자궁내막증 치료용 ｊｎｋ 억제제 |
| BRPI0613042A2 (pt) | 2005-07-15 | 2010-12-14 | Serono Lab | inibidores de jnk para o tratamento de endometriose |
| LT1917276T (lt) | 2005-08-26 | 2018-05-25 | Ares Trading S.A. | Glikozilinto interferono beta gavimo būdas |
| ZA200801923B (en) | 2005-09-01 | 2009-09-30 | Ares Trading Sa | Treatment of optic neuritis |
| CN101300031A (zh) | 2005-10-31 | 2008-11-05 | 雪兰诺实验室有限公司 | 用sdf-1治疗和/或预防神经疾病 |
| US8795668B2 (en) * | 2005-12-23 | 2014-08-05 | The Regents Of The University Of Michigan | Methods for treating pulmonary fibrosis |
| IL173104A0 (en) | 2006-01-12 | 2006-06-11 | Yeda Res & Dev | Siva and ubiquintination |
| MX2008014971A (es) | 2006-05-24 | 2008-12-05 | Serono Lab | Regimen de cladribine para tratar esclerosis multiple. |
| US7767206B2 (en) | 2006-10-02 | 2010-08-03 | Amgen Inc. | Neutralizing determinants of IL-17 Receptor A and antibodies that bind thereto |
| US20100063257A1 (en) | 2007-01-26 | 2010-03-11 | Merck Serono Sa | Purification of FC-TACI Fusion Proteins Using the Oilbody Technology |
| JP2011500757A (ja) | 2007-10-22 | 2011-01-06 | メルク セローノ ソシエテ アノニム | Ｆｃ含有タンパク質の精製方法 |
| US8415291B2 (en) | 2008-10-31 | 2013-04-09 | Centocor Ortho Biotech Inc. | Anti-TNF alpha fibronectin type III domain based scaffold compositions, methods and uses |
| WO2010113117A2 (en) | 2009-03-30 | 2010-10-07 | Edimer Biotech S.A. | Preparation of isolated agonist anti-edar monoclonal antibodies |
| TW201117824A (en) | 2009-10-12 | 2011-06-01 | Amgen Inc | Use of IL-17 receptor a antigen binding proteins |
| JP5743234B2 (ja) | 2010-01-15 | 2015-07-01 | キリン−アムジェン・インコーポレーテッド | 抗体製剤及び治療レジメン |
| WO2011145085A2 (en) | 2010-05-21 | 2011-11-24 | Procognia (Israel) Ltd | Novel antibodies and methods of use for the treatment and diagnosis of cancer |
| CN103347520A (zh) | 2010-10-13 | 2013-10-09 | 波士顿大学管理委员会 | 用作癌症化学治疗的晚期sv40因子（lsf）的抑制剂 |
| WO2013016220A1 (en) | 2011-07-22 | 2013-01-31 | Amgen Inc. | Il-17 receptor a is required for il-17c biology |
| EP3461482A1 (en) | 2012-03-16 | 2019-04-03 | Children's Medical Center Corporation | Calcium channel blockers for the treatment of ribosomal disorders and ribosomapathies |
| US9751942B2 (en) | 2012-03-29 | 2017-09-05 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-LAMP5 antibody and utilization thereof |
| UA125204C2 (uk) | 2013-09-05 | 2022-02-02 | Аб2 Біо Са | Застосування il-18-зв'язувального білка (il-18bp) при запальних захворюваннях |
| SG11201607881SA (en) | 2014-03-31 | 2016-10-28 | Kirin Amgen Inc | Methods of treating nail and scalp psoriasis |
| MY194040A (en) | 2015-03-05 | 2022-11-09 | Ab2 Bio Sa | Il-18 binding protein (il-18bp) and antibodies in inflammatory diseases |
| US10465003B2 (en) | 2016-02-05 | 2019-11-05 | Janssen Biotech, Inc. | Anti-TNF antibodies, compositions, methods and use for the treatment or prevention of type 1 diabetes |
| LT3484474T (lt) | 2016-07-13 | 2024-07-25 | The Children's Medical Center Corporation | Fenotiazino junginiai, skirti ribosominių sutrikimų ir ribosomopatijų gydymui |
| MA47362A (fr) | 2017-01-30 | 2019-12-04 | Janssen Biotech Inc | Anticorps anti-tnf, compositions et méthodes pour le traitement du rhumatisme psoriasique actif |
| JP2020506947A (ja) | 2017-02-07 | 2020-03-05 | ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド | 活動性強直性脊椎炎を治療するための抗ｔｎｆ抗体、組成物、及び方法 |
| BR112021023295A2 (pt) | 2019-05-23 | 2022-02-08 | Janssen Biotech Inc | Método de tratamento de doença inflamatória intestinal com uma terapia de combinação de anticorpos para il-23 e tnf-alfa |
| EP4146174A1 (en) | 2020-05-06 | 2023-03-15 | AB2 Bio SA | Il-18 binding protein (il-18bp) in respiratory diseases |
| EP3943097A1 (en) | 2020-07-24 | 2022-01-26 | AB2 Bio SA | Car-t cell therapy |
| WO2023166206A1 (en) | 2022-03-04 | 2023-09-07 | Ab2 Bio Sa | Il-18 binding protein (il-18bp) in the treatment of vexas |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1283046C (en) * | 1986-05-29 | 1991-04-16 | Nandini Katre | Tumor necrosis factor formulation |
| IL83878A (en) * | 1987-09-13 | 1995-07-31 | Yeda Res & Dev | Soluble protein corresponding to tnf inhibitory protein its preparation and pharmaceutical compositions containing it |
| GB8807803D0 (en) * | 1988-03-31 | 1988-05-05 | Glaxo Group Ltd | Biochemical product |
| ES2238070T3 (es) * | 1989-04-21 | 2005-08-16 | Amgen Inc. | Receptor del tnf, proteina ligante del tnf y adn codante para estos. |
| DE3922089A1 (de) * | 1989-05-09 | 1990-12-13 | Basf Ag | Neue proteine und ihre herstellung |
| IL95031A (en) * | 1989-07-18 | 2007-03-08 | Amgen Inc | A method of producing a recombinant human necrotic factor absorber |
| AU1674292A (en) * | 1991-03-15 | 1992-10-21 | Synergen, Inc. | Pegylation of polypeptides |
-
1992
- 1992-01-17 AU AU12356/92A patent/AU1235692A/en not_active Abandoned
- 1992-01-17 DE DE69230789T patent/DE69230789T3/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-17 JP JP4504597A patent/JP2864434B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-17 KR KR1019930702129A patent/KR100234520B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-01-17 RU RU93051522/14A patent/RU2166955C2/ru active
- 1992-01-17 GE GEAP19922664A patent/GEP20002142B/en unknown
- 1992-01-17 DK DK92904429T patent/DK0567566T4/da active
- 1992-01-17 EP EP92904429A patent/EP0567566B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-17 SG SG1996007283A patent/SG63617A1/en unknown
- 1992-01-17 AT AT92904429T patent/ATE190629T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-01-17 CA CA002100329A patent/CA2100329C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-17 WO PCT/US1992/000432 patent/WO1992013095A1/en active IP Right Grant
- 1992-01-17 ES ES92904429T patent/ES2145744T5/es not_active Expired - Lifetime
-
1993
- 1993-07-19 NO NO19932610A patent/NO316310B1/no not_active IP Right Cessation
-
1996
- 1996-02-02 AU AU42288/96A patent/AU702466B2/en not_active Withdrawn - After Issue
-
1998
- 1998-09-10 JP JP29598898A patent/JP3210629B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-04-26 GR GR20000401011T patent/GR3033327T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2145744T3 (es) | 2000-07-16 |
| CA2100329A1 (en) | 1992-07-19 |
| AU702466B2 (en) | 1999-02-25 |
| EP0567566B1 (en) | 2000-03-15 |
| DE69230789T2 (de) | 2000-08-31 |
| AU1235692A (en) | 1992-08-27 |
| KR100234520B1 (ko) | 1999-12-15 |
| EP0567566A4 (en) | 1994-10-05 |
| WO1992013095A1 (en) | 1992-08-06 |
| JPH06506446A (ja) | 1994-07-21 |
| ATE190629T1 (de) | 2000-04-15 |
| JPH11199505A (ja) | 1999-07-27 |
| NO932610L (no) | 1993-09-09 |
| NO932610D0 (no) | 1993-07-19 |
| ES2145744T5 (es) | 2008-02-01 |
| CA2100329C (en) | 2009-09-29 |
| EP0567566A1 (en) | 1993-11-03 |
| SG63617A1 (en) | 1999-03-30 |
| RU2166955C2 (ru) | 2001-05-20 |
| DK0567566T4 (da) | 2007-10-22 |
| DE69230789D1 (de) | 2000-04-20 |
| AU4228896A (en) | 1996-04-18 |
| DE69230789T3 (de) | 2007-10-31 |
| GEP20002142B (en) | 2000-06-25 |
| GR3033327T3 (en) | 2000-09-29 |
| EP0567566B2 (en) | 2007-07-04 |
| DK0567566T3 (da) | 2000-07-31 |
| NO316310B1 (no) | 2004-01-12 |
| JP2864434B2 (ja) | 1999-03-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3210629B2 (ja) | 腫瘍壊死因子媒介疾患の治療または予防用薬剤学的組成物 | |
| EP0639079B1 (en) | Methods for treating interleukin-1 and tumor necrosis factor mediated diseases | |
| KR20150121715A (ko) | Ｃｓｆ１ 치료제 | |
| EP3065765B1 (en) | Use of il-22 dimers in manufacture of medicaments for treating pancreatitis | |
| JP5208135B2 (ja) | 組換え白血球阻害因子とヒルゲンのキメラタンパク質及びその薬物組成物 | |
| JP2000511190A (ja) | 外傷に起因する出血に見舞われたヒトにおけるｂｐｉタンパク質産物の治療用途 | |
| JP2017518269A (ja) | 線維症性疾患の処置のためのＴｒａｉｌレセプターアゴニスト | |
| KR100837898B1 (ko) | 다발성 경화증의 치료에서 사용되는 케모킨 변이체 | |
| KR100442758B1 (ko) | 조직인자응고계억제제함유혈관신생저해제 | |
| JP3030386B2 (ja) | 抗ガン剤 | |
| TW202237634A (zh) | 用於治療ｃｏｖｉｄ－１９之ｄｓｇ２組成物和方法 | |
| KR20230005298A (ko) | 척수성 근위축증의 치료 방법 및 약물 | |
| AU784768B2 (en) | Methods for treating cytokine mediated diseases | |
| CN115944714B (zh) | 能够同时抗白细胞介素1和肿瘤坏死因子炎症的纳米材料及其制备方法与应用 | |
| CN118369351A (zh) | Dsg2组合物和方法 | |
| WO2023196532A1 (en) | Chimeric il-10/carrier constructs for treatment of pouchitis and methods of use | |
| JPWO2005077971A1 (ja) | ヘビ毒由来の血管内皮増殖因子（ｖｅｇｆ）様タンパク質のヘパリン結合部位より設計された新規なヘパリン結合能を有するペプチドとその用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20070713 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080713 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080713 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090713 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090713 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100713 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100713 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110713 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110713 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120713 Year of fee payment: 11 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term | ||
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120713 Year of fee payment: 11 |