NO316310B1 - Anvendelse av en TNF-inhibitor til fremstilling av et medikament - Google Patents
Anvendelse av en TNF-inhibitor til fremstilling av et medikament Download PDFInfo
- Publication number
- NO316310B1 NO316310B1 NO19932610A NO932610A NO316310B1 NO 316310 B1 NO316310 B1 NO 316310B1 NO 19932610 A NO19932610 A NO 19932610A NO 932610 A NO932610 A NO 932610A NO 316310 B1 NO316310 B1 NO 316310B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- tnf
- inhibitor
- tnf inhibitor
- kda
- hours
- Prior art date
Links
- 229940046728 tumor necrosis factor alpha inhibitor Drugs 0.000 title claims abstract description 169
- 239000002451 tumor necrosis factor inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 169
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 41
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 7
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 37
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 33
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 29
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 29
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 17
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 16
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 13
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 13
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims description 9
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 7
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 claims description 5
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010003256 Arthritis gonococcal Diseases 0.000 claims description 2
- 208000033464 Reiter syndrome Diseases 0.000 claims description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 2
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 2
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000025722 ankylosing spondylitis 2 Diseases 0.000 claims 1
- 229920006158 high molecular weight polymer Polymers 0.000 claims 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 claims 1
- 239000002861 polymer material Substances 0.000 claims 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 claims 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 38
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 38
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 abstract description 35
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 abstract description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 121
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 119
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 52
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 52
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 45
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 41
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 41
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 40
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 40
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 36
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 36
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 31
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 30
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 29
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 29
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 28
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 28
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 26
- 108091006086 inhibitor proteins Proteins 0.000 description 21
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 20
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 17
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 16
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 13
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 13
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 13
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 230000002631 hypothermal effect Effects 0.000 description 12
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 11
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 10
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 9
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 9
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 9
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 8
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 8
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 7
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 7
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 7
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 7
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 7
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 6
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 241000894007 species Species 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 5
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 5
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 5
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 5
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 5
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 4
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 4
- 210000000544 articulatio talocruralis Anatomy 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 4
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 230000034994 death Effects 0.000 description 4
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 4
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 4
- 230000003448 neutrophilic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 4
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 4
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000011870 unpaired t-test Methods 0.000 description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 4
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 3
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 3
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 3
- 208000004852 Lung Injury Diseases 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 3
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 3
- 108700012920 TNF Proteins 0.000 description 3
- 206010069363 Traumatic lung injury Diseases 0.000 description 3
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 3
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 3
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 3
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 3
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 3
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 231100000515 lung injury Toxicity 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 208000013223 septicemia Diseases 0.000 description 3
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 3
- 210000002437 synoviocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 3
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010001889 Alveolitis Diseases 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 2
- 206010060902 Diffuse alveolar damage Diseases 0.000 description 2
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 206010024264 Lethargy Diseases 0.000 description 2
- 206010040799 Skin atrophy Diseases 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 210000001132 alveolar macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000002917 arthritic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 2
- 201000001155 extrinsic allergic alveolitis Diseases 0.000 description 2
- 102000057041 human TNF Human genes 0.000 description 2
- 208000022098 hypersensitivity pneumonitis Diseases 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000018276 interleukin-1 production Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 229920003192 poly(bis maleimide) Polymers 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000009163 protein therapy Methods 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 2
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 2
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 2
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 208000008203 tachypnea Diseases 0.000 description 2
- 206010043089 tachypnoea Diseases 0.000 description 2
- 210000004876 tela submucosa Anatomy 0.000 description 2
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 1
- XQUPVDVFXZDTLT-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[[4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]methyl]phenyl]pyrrole-2,5-dione Chemical compound O=C1C=CC(=O)N1C(C=C1)=CC=C1CC1=CC=C(N2C(C=CC2=O)=O)C=C1 XQUPVDVFXZDTLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHJVRSWLHSJWIN-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O NHJVRSWLHSJWIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000013824 Acidemia Diseases 0.000 description 1
- 208000010444 Acidosis Diseases 0.000 description 1
- 208000017612 Acute Hemorrhagic Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 102000011767 Acute-Phase Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010062271 Acute-Phase Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010053555 Arthritis bacterial Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 206010008531 Chills Diseases 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 206010011703 Cyanosis Diseases 0.000 description 1
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 description 1
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000792859 Enema Species 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 206010056328 Hepatic ischaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020843 Hyperthermia Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 208000004575 Infectious Arthritis Diseases 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010023203 Joint destruction Diseases 0.000 description 1
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 1
- 108010013563 Lipoprotein Lipase Proteins 0.000 description 1
- 102100022119 Lipoprotein lipase Human genes 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- 206010033650 Pancreatitis haemorrhagic Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 206010037423 Pulmonary oedema Diseases 0.000 description 1
- 101100046535 Rattus norvegicus Tnf gene Proteins 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 241000219061 Rheum Species 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 description 1
- 208000001871 Tachycardia Diseases 0.000 description 1
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 1
- 238000012084 abdominal surgery Methods 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000026816 acute arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010069351 acute lung injury Diseases 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000011341 adult acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000008382 alveolar damage Effects 0.000 description 1
- 210000002821 alveolar epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000004872 arterial blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008952 bacterial invasion Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000001601 blood-air barrier Anatomy 0.000 description 1
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000004534 cecum Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 1
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 1
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 1
- 208000009190 disseminated intravascular coagulation Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000002497 edematous effect Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 231100000284 endotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002346 endotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007920 enema Substances 0.000 description 1
- 229940079360 enema for constipation Drugs 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 210000000224 granular leucocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 210000003547 hepatic macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036031 hyperthermia Effects 0.000 description 1
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 230000036044 hypoxaemia Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 239000002085 irritant Substances 0.000 description 1
- 231100000021 irritant Toxicity 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 1
- 238000002350 laparotomy Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- 230000023404 leukocyte cell-cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 150000002617 leukotrienes Chemical class 0.000 description 1
- 238000011694 lewis rat Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 231100000516 lung damage Toxicity 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N maleic anhydride Chemical class O=C1OC(=O)C=C1 FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003622 mature neutrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 125000002073 methionyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100001160 nonlethal Toxicity 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 1
- 210000004409 osteocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- XKJCHHZQLQNZHY-UHFFFAOYSA-N phthalimide Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NC(=O)C2=C1 XKJCHHZQLQNZHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 210000003456 pulmonary alveoli Anatomy 0.000 description 1
- 208000005333 pulmonary edema Diseases 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000006215 rectal suppository Substances 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011808 rodent model Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 201000001223 septic arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000009919 sequestration Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 210000001258 synovial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000012385 systemic delivery Methods 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 230000006794 tachycardia Effects 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 239000006216 vaginal suppository Substances 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
- C07K14/7151—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for tumor necrosis factor [TNF], for lymphotoxin [LT]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/16—Central respiratory analeptics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører anvendelse av en tumornekrosefaktor (TNF) inhibitor til fremstilling av et medikament for å behandle eller forebygge et utvalg TNF-medierte sykdommer
Tumornekrosefaktorer (TNF) er en klasse cytokiner produsert av mange celle-typer, inkludert monocyter og makrofager Minst to TNF er tidligere blitt beskrevet, spesielt TNF alfa og TNF beta (lymfotoksin).
Disse kjente TNF har viktige fysiologiske virkninger på et antall forskjellige malsceller som er involvert i betenn-elsesresponsen. Proteinene forårsaker både at fibroblaster og synovialceller utskiller latent kollagenase og prostaglandin E2, og forårsaker at osteocytceller stimulerer ben-resorpsjonen. Disse proteinene øker overflateadhesive egenskaper til endoteliske celler for neutrofiler De forårsaker at endoteliske celler utskiller koagulantaktivitet og reduserer deres evne til å lysere koagler. I tillegg styrer de aktiviteten til adipocyter bort fra lagring av lipidene ved å inhibere ekspresjonen av enzymet lipoprotein lipase
TNF forårsaker at hepatocyter syntetiserer en klasse av proteiner kjent som "akutt fase reaktanter" og de virker på hypothalomus som pyrogener Gjennom disse aktivitetene er det blitt oppdaget at TNF spiller en viktig rolle i en organismes respons overfor forskjellige indikasjoner så som infeksjon og skade Se for eksempel artikkelen til P J Selby et al , Lancet, februar 27, 1988, s 483, H F Starnes, Jr. et al , J Clin Invest , vol. 82, s. 1321 (1988), A Oliff et al. Cell, vol 50 s. 555 (1987), og A Waage et al., Lancet, februar 14, 1987, s 355.
En sykdom antas å være en "TNF formidlet sykdom" dersom den spontane eller eksperimentelle sykdommen er assosiert med forhøyede nivåer av TNF i kroppsvæsker eller i vev ved fokusering på sykdommen eller indikasjon i kroppen. I mange tilfeller er slike TNF medierte sykdommer også kjent for følgende ytterligere to tilstander (1) patologiske funn assosiert med sykdommen kan bli etterlignet eksperimentelt 1 dyr ved administrering av TNF og (2) patologien indusert i eksperimentelle dyremodeller av sykdommen kan bli inhibert eller unngått ved behandling med midler som inhiberer virkningen av TNF I de fleste "TNF medierte sykdommer" blir minst to av de tre betingelsene oppfylt, og i mange "TNF medierte sykdommer" er alle tre betingelsene oppfylt.
En liste med sykdommer som tilfredsstiller disse kriteriene omfatter, men er ikke begrenset til, følgende,
1) respiratonsk distressyndrom i voksne
2 ) lungefibrose
3) artritt
4) inflammatorisk mavesykdom
5) septisk sjokk
Bevis for TNF-medienngen av disse fem sykdommene vil bli presentert Dyremodeller på septisk sjokk, artritt og respiratonsk distress syndrom i voksne er velkjent og blir anvendt heri for å demonstrere evnen som TNF inhibitorer har til å behandle TNF-formidlet sykdom
Respiratonsk distressyndrom (ARDS) i voksne er kjennetegnet ved det hurtige forløpet av dyspnea, tachypnea, cyanosis, alvorlig hypoksemi, redusert lungesamsvar og øket lunge-vaskulær permeabilitet Dødeligheten ved ARDS er mere enn 50%. Risikofaktorer assosiert med utvikling av ARDS omfatter trauma, massiv blostransfusjon, disseminert intravaskulær koagulasjon, oksygentoksisitet, inhalering av toksiner og irriterende midler og systemisk reaksjon overfor sepsis, hemorragic pancreatitis, brannsår og komplikasjoner ved abdominal kirurgi En mengde mediatorer så som prosta-glandiner, leukotriener, komplement og frie oksygenradikaler er blitt implisert i årsaken til syndromet, men forskjellige behandlinger konstruert for å inhibere virkningene til spesifikke mediatorer har ikke forbedret det kliniske forløpet til ARDS Resulatetene fra dyreeksperimenteringen understøtter hypotesen om at TNF er en mediator for ARDS som følger: 1 Infusjon av TNF til rotter etterligner ARDS. Etter infusjon med TNF blir lungesamsvaret redusert, lungevann-mnholdet og cellulariteten blir øket, punkterte blødninger kan stort sett bli synlige og histologiske bevis på neutrofil trombi og diffus alveolar skade er til stede Se E. Ferrari-Baliviera et al , Arch Surg , vol 124, s 1400-1405 (1989), K J Tracey et al , Science, vol. 234, s 470-474 (1986). 2 Forbehandling av rotter med anti-TNF antiserum inhiberer induksjonen av en dyremodell for ARDS ARDS ble indusert ved hepatisk ischemi etterfulgt av reperfusjon av leveren Forhøyede sirkulerende nivåer av TNF etter reper-fusjonen ble antatt å oppstå ut fra den store massen av fikserte hepatiske makrofager Lungekapillær lekkasjer ble redusert i de behandlede rottene sammenlignet med verdiene i rotter som mottok serum uten TNF-blokkerende egenskaper. Se L. M Colletti et al., Transplantation, vol. 49, 2. 268-272
(1990 )
3. I de to kliniske studier ble TNF-konsentrasjoner målt 1 bronkie-lungesekresjoner fra pasienter med ARDS. I den første studien av fem ARDS-pasienter overskred TNF-konsentrasjonene 12,5 ng/ml TNF ble ikke detektert i kontrollprøvene I den andre studien ble betraktelige TNF-nivåer målt i bronchoalveolar utskyllingsvæske fra tre av fire pasienter med ARDS, men var under grensen for detektsjon i kontrollene. Se A B Millar et al , Lancet, vol 2, s 712-714 (1989), D J. Roberts et al , Lancet, vol 2, s 1043-1044 (1989).
Lungefibrose oppstår i løpet av sluttstadiet ved forskjellige lungesykdommer Fibrose er et resultat av veksten av fibroblaster og en økning av kollagen avsetningen innenfor alveolar veggene TNF spiller tydeligvis en hovedrolle ved utvikling av lungefibrose TNF er en vekstfaktor til normale diploide fibroblaster ved picomolare konsentrasjoner. Se B.J. Sugarman rt al., Science, vol 230, s. 943-945 (1985). Resultatene av dyreeksperimentermgen involverer lungeskade indusert av bleomycin, et chemoterapeutisk middel for cancer, som gir bevis for det forslaget. TNF-mediermg av lungefibrose blir understøttet av følgende: 1. Intravenøs infusjon av TNF induserer diffus alveolær skade med nekrose av alveolære epithelial og endothelial celler og markert fortykning av alveolære membraner Subkutan infusjon av TNF til rotter fører til en markert økning av fibroblast prolyferasjon og kollagenavsetnmg. Se K J. Tracey et al., Science vol. 234, s 470-474 (1986); P.F. PIguet et al., Int Arch. Allerg Apol Immunol. , vol. 83, s. 18
(1986) 2. Administrering av kanin anti-TNF antistoff til mus forhindret bleomycm-indusert alveolar skade, vekst av fibroblaster og kollagen avsetning. Se, Pierre F. Piguet et al , J Exp Med , vol 170, s. 655-663 (1989) 3 En vanlig ettersykdom hos pasienter som overlever ARDS er lungefibrose. I løpet av den akutte fasen til ARDS er TNF presentert i betydelige mengder i bronchoalveolar fluidet.
Artritt er en betegnelse anvendt for å beskrive forskjellige indikasjoner som er kjennetegnet ved kronisk betennelse i leddene. Inkludert i definisjonen på betegnelsen artritt er følgende: rheumatoid artritt, osteo artritt, ankyloring spondylitis, lupus erythematosus, gonococcal artritt, Reiters sykdom artritt og urinsyregikt. Bevis er presentert nedenfor for den formidlende rollen til TNF i rheumatoid artritt
Rheumatoid artritt er en kronisk autoimmun sykdom som forårsaker ødeleggelse av artikulær brusk i ledd. Synovial linningen blir kronisk betent og gjennomgår progressiv fibrocytisk vekst. In vitro aktiverer TNF både endotelet og lukocyter for å fremme lekocytadhesjon og stimulerer resorpsjonen og inhiberer syntesen av proteoglycaner i brusket. Se, JR Gamble et al , Proe. Nati. Acad. Sei. USA, vol., 82, s 8667-8673 (1985), J Saklatvala, Nature, vol
322, s 547-552 (1986). Disse in vitro aktivitetene tyder på at TNF kan være en formidler av leddpatologi i rheumatoid artritt. TNF-medieringen av rheumatoid artritt er understøt-tet av følgende.
1. Intra-artikulær injeksjon av TNF inn i leddene til en kanin forårsaker mnflltrermg av lekuocyter i leddene, men ikke noen proteoglycantap fra brusket. Injeksjon av sub-maksimale doser av TNF og interleukm-1 (IL-1) inn i leddet forårsaket en synergistisk akkumulering av neutrofiler Se, B. Henderson et al , Clin Exp. Immunol , vol 75, s. 306-310
(1989). I en annen serie av eksperimenter ved anvendelse av kaniner forårsaket en enkel intra-artikulær injeksjon av TNFa både cellulær innflltrering og tap av proteoglycan i brusk Nivåene av forbindelse P, et inflammatorisk neuropeptid, ble øket i synovial fluidet Se, A S Rubin et al., Arthritis and Rheumatism, vol 33, s. 1023-1028 (1990) 2. Virkningen av TNF-antistoffer på synoviol celle IL-1 produksjonen er blitt bestemt i pasienter med rheumatoid artritt Kulturer av mononukleære celler ekstrahert fra synovium eller synovial væsken til rheumatoid ledd produserer cytokmer i opp til 6 dager uten ytre stimulering I pasienter med rheumatoid artritt ble synovial celle IL-1 produksjonen i kultur betraktelig redusert av anti-TNF antistoff Disse resultatene tyder på at TNF spiller en viktig rolle ved induksjon av IL-1 i rheumatoide ledd. Se, F. M Brennan et al , Lancet vol, 2 (8657), s 244-247 (1989). 3. TNF er til stede i detekterbare nivåer i rheumatoide synovial fluider Se, F S Di Giovme et al., Ann. Rheum Dis., vol. 47, s. 768-776 (1988). Idiopatisk inflammatorisk bowel dlsease (IBD) innbefatter to syndromer ulcerativ kolititt og Chrons sykdom. Chrons sykdom er kjennetegnet ved en granulomatøs inflammatorisk reaksjon som involverer full tykkelse av veggen til terminale tarm eller tynntarm, mens ulcerativ kolititt er en uspesifikk betennelsesrespons begrenset til slimhinnen og subslimhinnen til tarmen Til tross for at det er forskjeller i patologi ved de to syndromene og etiologien til begge forblir utydelig antas det at de to sykdommene representerer variable responser overfor vev eller immunologien til et vanlig etiologisk middel Forskjellige immunologiske forstyrrelser er blitt identifisert i pasienter med IBD. En hypotese går ut på at immunsystemet til pasientene reagerer unormalt eller uhensiktsmessig overfor antigener, så som bakterielle produkter, som alle vanligvis blir utsatt for Syntese av høye nivåer av TNF i tarmen kan bidra til inflammatorisk cellulær mnflltrering i IBD TNF-mediering av IBD er understøttet av følgende 1) I to studier med rotter ble nekrose av mavetarmkanalen indusert ved intravenøs bolusadmlnistrermg av TNF. Virkningene av TNF så ut til å være realtert til dose Doser som overskrider 0,6 mg/kg induserte stor og mikroskopisk nekrose av tynntarmen Tarmen utviser segmental ischemi med regioner med likefrem blødning eller nekrose. Cecum så ut til å være spesielt følsom overfor TNF. Histologiske seksjoner avlkke-nekrotisk tarmkanal viste også inflammatoriske forandringer med invasjoner av subslimhinne og muskularisslimhinnen til polymorfonukleære leukocyter. Epithelet ble denuert i en focal distribusjon i tarmen Se, X M Sun et al , J. Clin. Tracey, et al Science, vol 234, s. 470-474 (1986). 2. I Tracey studien førte infusjon av 4 mg av et nøytral-iserende monoklonalt antistoff fra mus rettet mot humant TNF til rotter 1 time før infusjon av TNF ikke til fullstendig beskyttelse av dyrene fra letale doser av TNF, men forhindret også utvikling av lesjonene som vanligvis blir indusert av
TNF.
3) Isolater fra biopsier fra barn med Chrons sykdom viste forhøyede hyppigheter av TNFoc utskillende celler i alle individer analysert med en flekk ELISA teknikk Isolater fra normale barn viste ikke denne økningen I ulcerativ kolititt hadde fire av åtte barn øket produksjon av TNFa Disse resultatene tyder på at TNFa er en viktig mediator for betennelse i menneskelig tarm. Se, T T. MacDonald, et al. Clim Exp. Immunol., (ENGLAND) vol. 81, s. 301-305 (1990)
Septisk sjokk er en tilstand assosiert med massive bakterielle invasjoner. Det antas at sjokk forårsaket av Gram negative infeksjoner dannes, i det minste delvis, av tilstedeværelsen av bakterielle endotoksiner (lipopolysakkarider) Septisk sjokk er en relativ vanlig årsak til dødelighet i sykehus For tiden er det få behandlingsmulig-heter for pasienter som lider av septisk sjokk og behandlingene som er tilgjengelige er generelt supportive av natur
Septisk sjokk erkarakterisert vedforskjellige symptomer inkludert et fall i gjennomsnittlig arterielt blodtrykk (MAP), en reduksjon i hjerteyteevnen, tachycardia, tachypnea, lacticacidemi og leukopeni Forskjellige cytokiner, inkludert TNF, har vært implikert i formidlingen av septisk sjokk til tross for at den spesifikke etiologien til sykdommen ikke er fullstendig forståelig.
Det er flere bevislinjer som tyder på at TNF kan spille en rolle i formidling av septisk sjokk 1 Administrering av TNF til dyr er blitt vist å indusere en sjokklignende tilstand. Se Everhaerdt et al., Biochem Biophys Res. Commun , vol. 163 s 378 (1989) Det er blitt vist at administrering av lipopolysakkarider til mus etterligner symptomene på septisk sjokk i dyr. Dyrene behandlet på denne måten er blitt vist å ha økte nivåer av sirkulerende TNFa Se Parillo et al., Ann Intern. Med., vol. 9, s 28-31 (1988); og Carswell et al., Proe. NA ti. Acad Sei., USA, vol 72, s 3666-3670 (1975) 2. Administrering av antistoffer mot TNFa er blitt vist å redusere de letale virkningene av høye doser av endotoksln i mus og aper. Se, Tracey et al., Nature, vol. 330, s. 662-664
(1987), Buetler et al , Science, vol. 229, s 869-871 (1985) 3 En ytterligere studie blir utført hvor blodserumet til barn som lider av Gram negativ septicemi ble analyser for TNFa konsentrasjonen Denne studien viste at forhøyede nivåer av TNFa ble funnet i 91% av pasientene som ble undersøkt. I tillegg var serum TNFa serumnivåene betraktelig høyere pasienter som døde enn i de som overlevde. Firardin et al., New England J. of Med , vol. 319, s. 397-400 (1988).
Oppfinnerene antok at forbindelser som interfererer med aktiviteten til TNF kan være effektive forbindelser for behandling av TNF-medierte sykdommer, som definert ovenfor.
Oppfinnerene identifiserte en klasse av forbindelser, referert til som TNF inhibitorer, som forhindret og behandlet TNF-medierte sykdommer I inngitte US-patentsøknad senenr. 555,274 inngitt juli 19, 1990, inkorporert heri som referanse, er en foretrukket klasse av naturlig forekommende protemholdige TNF-inhibitorer og en fremgangsmåte for fremstilling av en vesentlig mengde av den samme med en høy grad av renhet beskrevet. Ovennevnte søknad beskriver spesielt i detalj to undergrupper av TNF-inhibitorer referert til som som 30kDa TNF-inhibitor og 40kDa TNF-inhibitor. I tillegg til full-lengde 40kDa TNF-inhibitorprotelnet er to forkortede, men biologisk aktive former av 40kDa TNF-mhibitor også blitt dannet. Full-lengde 40 kDa TNF-inhibitoren er TNF-inhibitoren som har en molekylvekt på omtrent 40 kDa ifølge SDS-PAGE og som kan bli isolert fra medium kondisjonert med humane U937 celler eller fra menneskelig unn. Full-lengde 40 kDa TNF-inhibitor kan bli glykosylert som det naturlig forekommende proteinet eller ikke glykosylert som proteinet rekombinant uttrykt fra et bakterielt eksperssjonssystem. De forkortede proteinene hvor 51 og 53 karboksyl termini aminosyrer er blitt fjernet fra full-lengde proteinet er referert til som henholdsvis 40kDa TNF-inhibitor A 51 og 40 kDa TNF-inhibitor A 53. 30 kDa TNF-inhibitoren er blitt vist å halnhibisjons-aktivitet overfor TNFa. 40 kDA TNF-inhibitorer, inkludert full-lengde 40 kDa TNF-inhibitor, 40 kDa TNF-mhibitor A 51 og 40 kDa TNF-mhibitor A 53, er blitt vist å ha mhibisjons-aktivitet overfor både TNFa og TNFp.
Inngitte US-patentsøknad serienr. 07/669,862, inngitt mars 15, 1991, inkorporert heri som referanse, beskriver et antall modifiserte TNF-inhibitor arter Mutemer av TNF-inhibitorer blir danner hvor selektert aminosyreresidie(er) blir erstattet med cysteinresidier. Slike muteiner kan deretter bli sete-selektivt omsatt med funksjonaliserte polyetylenglykol (PEG) enheter for å danne TNF inhibitor PEG arter. Spesielt er en 30 kDa TNF-inhibitor mutein referert til som C105 beskrevet hvor asparagin i posisjon 105 til 30 kDa TNF-mhibitoren er erstattet med cystem I en ytterligere utførelsesform kan mutemproteinene bli omsatt med bi-funksjonaliserte PEG enheter for å danne bivalente "dumbbell" arter hvor to TNF-mhibitor muteiner er koblet via en enkelt PEG kjede
Foreliggende oppfinnelse beskriver anvendelse av en terapeu tisk effektiv mengde av en TNF-inhibitor som omfatter en aminosyresekvens valgt fra gruppen bestående av (i) aminosyresekvensen av 30 kDa-inhlbltoren eller et TNF-mhibitonsk fragment derav eller et muteln derav; (II) aminosyresekvensen av 40 kDa-inhibitoren eller et TNF-inhibitonsk fragment eller mutein derav, (III) aminosyresekvensen av 40 kDa-inhlbltorenA53 eller et TNF-inhibitonsk fragment eller mutein derav, og (iv) aminosyresekvensen av 40 kDa-inhlbitorenA51 eller et TNF-inhibitonsk fragment eller mutein derav.
Fremgangsmåter er beskrevet for behandling og forhindring av TNF-medierte sykdommer, spesielt TNF-formidlet septisk sjokk, TNF-formidlet artritt og TNF-formidlet respiratorlsk dlstress syndrom i voksne med terapeutiske effektive mengder av TNF-mhibitorer
Foretrukne TNF-mhibitorer er naturlig forekommende proteiner og forkortede former av naturlig forekommende proteiner. De naturlig forekommende proteinene er foretrukket på grunn av at de har en relativ lav risiko for å danne uønskede bivirkninger 1 pasienter behandlet dermed. Muteiner av protein TNF-inhibitorer hvor bare et lite antall amlnosyre-residier er forskjellige fra den naturlige proteinsekvensen er også foretrukne TNF-inhibitorer.
En foretrukket klasse av TNF-inhibitorer er humane TNF-bindende proteiner Foretrukne TNF-lnhlbltorer ser ut til å være oppløselige fragmenter av TNF-reseptorproteiner. De TNF-lnhibitorene som er foretrukket ved utførelse av foreliggende oppfinnelse blir valgt fra gruppen bestående av 30 kDa TNF-inhibitor, 40 kDa TNF-mhibitor og nevnte 40 kDa TNF-mhibitor blir videre valgt fra gruppen bestående av full-lengde 40 kDa TNF-inhibitor, 40 kDa TNF-inhibitor A 51 og 40 kDa TNF-inhibitor A 53. Også foretrukket er proteiner som er blitt modifisert, for eksempel, ved tilsetning av poly etylenglykol (PEG) eller en hvilken som helst annen gjentatt polymer for å øke deres sirkulerende halveringstid og/eller økelmmunogenisiteten TNF-inhibitorer som virker som reseptor antagonister overfor TNF er også innbefattet innenfor rammen av denne oppfinnelsen.
På grunn av at produksjonen av TNF-inhibitorer kan bli oppnådd ved ekstrahering fra naturlige tilgjengelige kilder, så som ved isolering fra human urin, utgjør en foretrukket fremgangsmåte for TNF-inhibitor produksjon rekombinant DNA-teknologi. Rekombinant DNA-teknologi er delvis foretrukket på grunn av at det er mulig å danne sammenlignbare høye mengder av TNF-inhibtorer med høyere renheter.
Ytterligere foretrukne TNF-mhibitorer innbefatter muteiner av 30 kDa TNF-inhibitoren der hvor selekterte aminosyrer av 30 kDa TNF-inhibitoren er erstattet med cystem. Slike muteiner kan bli anvendt som TNF-inhibitorer, eller så kan de bli omsatt med polyetylenglykol (PEG) for å danne TNF-mhibitor PEG forbindelser, inneholdende en eller to TNF-mhibitorer pr. molekyl. I den mest foretrukne utførelses-formen er TNF-inhibitoren en bivalent art dannet i en reaksjon mellom en mutein 30 kDa TNF-inhibitor og en bifunksjonalisert PEG forløper Det foretrukne muteinet er C105 30 kDa TNF-inhibitoren, hvor residiet C105 til 30 kDa TNF-inhibitoren er erstattet med et cysteinresidie.
Det er å bemerke at begge foregående generelle beskrivelser og følgende detaljerte beskrivelse skal forklare oppfinnelsen .
Kort beskrivelse av tegningene
Fig 1 angir dødelighetsratene som en funksjon av dosen til human rekombinant mterleukin-1 beta (hrIL-lp) administrert med en konstant dose 300 pg/kg human rekombinant tumornekrosefaktor alfa (hrTNFa) Grupper på 6 mus ble dosert med forskjellige mengder hrlL-lp Dødeligheten ble vurdert 72 timer etter den subkutane injeksjonen av cytokinblandingen. De angitte verdiene er gjennomsnittlige ± standardavvik av gjennomsnittet (S.E M. ) for tre eksperimenter.
Fig 2 angir overflatetemperaturen som en funksjon av tiden etter administrering av 300 pg/kg hrTNFa og 2.500 pg/kg hrlL-lp injisert subkutant ved tiden null. Fig. 3 angir overflatetemperaturen som en funksjon av tiden som i figur 2, hvori - o - o - representerer mus gitt to intraperitoneale injeksjoner av 40 kDa TNF inhibitor A 53 30 minutter før og 30 minutter etter den subkutane administreringen av cytokinblandingen Totalt 40 kDa TNF-inhibitor A 53 som ble administrert var 200 mg/kg. " Angir statistiske signifikante forskjeller mellom TNF-inhibitor behandlede og ubehandlede cytokin-injiserte mus vurdert ifølge den uparrede t-testen (p<0,05). Fig. 4 angir dødeligheten som en funksjon av tiden i eksperimentet angitt i fig 3 Fig 5 angir overflatetemperaturen som en funksjon av tiden som i fig 2, hvor - [x] - |T| — representerer mus gitt seks mtraperetoneale injeksjoner 40 kDa TNF-inhibitor A 53 30 minutter før og 30 minutter, 3 timer, 6 timer, 9 timer og 12 timer etter administrering av cytokinblandingen. Totalt 40 kDa TNF-inhibitor A 53 som ble administrert var 600 mg/kg.<*>Angir statistiske signifikante forskjeller mellom TNF-mhibtor som er behandlet og PBS-injiserte mus vurdert ved den uparrede t-testen (p< 001). Fig 5 angir dødeligheten som en funksjon av tiden i eksperimentet angitt i fig. 5. Fig 7 angir overflatetemperaturen som en funksjon av tiden som i fig. 2, hvor - o - o - representerer mus gitt 10 intraperetoneale injeksjoner av 40 kDa TNF-inhibitor A 53 30 minutter før, og 30 minutter, 3 timer, 6 timer, 9 timer, 12 timer, 15 timer, 18 timer og 24 timer etter den subkutane administreringen av cytokinblandingen. Totalt 40 kDa TNF-mhibitor A 53 som ble administrert var 1,000 mg/kg. Fig. 8 angir dødeligheten som en funksjon av tiden til eksperimentet angitt i fig 7 Fig. 9 angit kroppsvektene som en funksjon av tiden i eksperimentet angitt i fig 7. Fig. 10 angir overflatetemperaturen som en funksjon av tiden som beskrevet i fig.2, hvori: - QJ- angir en mus gitt 6 intraperetonale injeksjoner av 30 kDa TNF-mhibtor 30 minutter før og 30 minutter, 3 timer, 6 timer, 9 timer og 12 timer etter den subkutane administreringen av cytokinblandingen (totalt 240 mg/kg); --a-a — representerer mus gitt 10 mtraperetoneale injeksjoner av 30 kDa TNF-inhibitor 30 minutter før og 30 minutter, 3 timer, 6 timer, 9 timer, 12 timer, 15 timer, 18 timer, 21 timer og 24 timer etter den subkutane administreringen av cytokinblandingen (totalt 400 mg/kg); og --o—o-- representerer mus gitt 15 mtraperetoneale injeksjoner av 30 kDa TNF-mhibitor 30 minutter før og 30 minutter, 3 timer, 6 timer, 9 timer, 12 timer, 15 timer, 18 timer, 21 timer, 24 timer, 27 timer, 30 timer, 33 timer, 36 timer og 39 timer etter subkutan administrering av cytokinblandingen (totalt 600 mg/kg) Fig. 11 angir dødeligheten som en funksjon av tiden i eksperimentet angitt i fig 10 Fig. 12 angir kroppsvekten som en funksjon av tiden i eksperimentet angitt i fig 10 Fig. 13 angir økningen i leddiameteren som en funksjon av tiden etter reaktivermg med streptococcal cellevegg (SCW) på dag 21, ifølge fremgangsmåte 1 i eksempel 3 nedenfor Fig. 14 angir maksimal forandring i leddiamteren i løpet av intervallet på 72 timer etter reaktivering med SCW i eksperimentet angitt i fig 13<*>Angir statistiske signifikante forskjeller sammenlignet med PEG 3400 kontrollgruppen ved uparret t-test, t = 4,36, p < 0,001. Fig. 15 angir maksimal forandring i leddiameteren i løpet av 72 timer intervallet etter reaktivering med SCW ifølge fremgangsmåte 2 i eksempel 3 nedenfor. Fig. 16 angir prosentandel inhibisjon av endotoksin-stimulert neutrofil influks inn i bronchoalveolare områder til 30 kDa TNF-inhibtor-behandlede rotter som beskrevet i eksempel 4 nedenfor Fig. 17 angir virkningene av intratracheal inndrypping av 5 doser av 30 kDa TNF-inhibisjon på antallet neutrofiler som migrerer inn i alveolarområdene i respons til en endotoksisk utsettning i eksperimentet angitt i fig. 16. Angir statistiske signifikante forskjeller i forhold til de ubehandlede kontrollrottene vurdert ved den uparrede t-testen, p < 0,01.
Det vil nå bli referert i detalj til de foretrukne ut-førelsesformene ifølge oppfinnelsen som sammen med følgende eksempler forklarer prinsippene ved foreliggende oppfinnelse.
Foreliggende oppfinnelse beskriver anvendelse av en terapeutisk effektiv mengde av en TNF-inhibitor som omfatter en aminosyresekvens valgt fra gruppen bestående av
(i) aminosyresekvensen av 30 kDa-inhibitoren eller et TNF-inhibitonsk fragment derav eller et mutein derav; (li) aminosyresekvensen av 40 kDa-inhibitoren eller et TNF-inhibitonsk fragment eller mutein derav, (ili) aminosyresekvensen av 40 kDa-InhibitorenA53 eller et TNF-inhibitonsk fragment eller mutein derav; og (iv) aminosyresekvensen av 40 kDa-inhibitorenA51 eller et TNF-inhibitonsk fragment eller mutein derav
En sykdom eller medisinsk indikasjon er betraktet å være en TNF-formidlet sykdom dersom den spontane eller eksperimentelle sykdommen er assosiert med forhøyede nivåer av TNF i kroppsvæsker eller i vev ved siden av fokuset til sykdommen eller indikasjonen i kroppen. TNF-medierte sykdommer kan også bli gjenkjent av følgende to tilstander: 1) patologiske funn assosiert med en sykdom kan bli etterlignet eksperimentelt i dyr ved administrering av TNF og 2) patologien indusert i eksperimentelle dyremodeller av sykdommen kan bli inhibert eller opphevet ved behandling med midler som inhiberer virkningen av TNF Mange TNF-medierte sykdommer tilfredsstiller to av disse tre tilstandene og andre vil tilfredsstille alle tre tilstandene. En ikke-eksklusiv liste av TNF-medierte sykdommer innbefatter respitorisk distress-syndrom i voksne, lungefibrose, artritt, inflammatonsk tarmsykdom og septisk sjokk.
Foretrukne TNF-inhibitorer er naturlig forekommende proteiner som virker som TNF-bmdende proteiner De naturlig forekommende proteinene er delvis foretrukket på grunn av at de utviser en sammenlignbar lav risiko for å produsere ufor-utsatte og uønskede fysiologiske bivirkninger 1 pasienter behandlet dermed.
I beskrivelsen er et protein "naturlig-forekommende" dersom det eller et vesentlig ekvivalent protein kan bli funnet å eksistere normalt i friske mennesker. "Naturlig forekommende" proteiner innbefatter spesielt former av proteiner som eksisterer i friske voksne som er delvis forkortede ved karboksylterminusen til slike proteiner, samt uglukosylerte former av proteinene som eksisterer i glykosylerte former i friske mennesker "Naturlig-forekommende" proteiner kan bli oppnådd ved rekomtiinante DNA-metoder samt ved isolering fra celler som ordinært produserer dem. "Naturlig-forekommende" omfatter også proteiner som inneholder en N-termmal methionylgruppe som en konsekvens av ekspresjon i E coli
"Vesentlig ekvivalent" som anvendt i beskrivelsen er definert å bety at de inneholder en meget høy grad av aminosyreresidie homologi {se generelt M Dayhoff, Atlas of Protein Sequence ans Structure, vol 5, s 124 (1972), national Biochemical Research Foundation, Washington, D.C., speciflcally in-corporated herein by reference) samt at de har sammenlignbar biologisk aktivitet.
Blant de foretrukne TNF-Inhibitorene ifølge foreliggende oppfinnelse er proteiner som eksisterer in vivo som bindings-proteiner av TNF som tidligere er blitt beskrevet i en inngitt US-patentsøknad. Denne søknaden er US-patentsøknad serienr 07/555,275 inngitt juli 19, 1990, til Brewer et al., med tittelen "Tumor Necrosis Factor (TNF) Inhibitor and Method for Obtainmg the Same" Denne US-patent søknaden er spesifikt inkorporert hen som referanse.
Det er to bestemte former av foretrukne TNF-mhibitorer og hver av disse er beskrevet i ovennevnte Brewer et al søknad. Den første av disse er 30 kDa TNF-inhibitoren som er blitt identifisert i og isolert fra minst et medium kondisjonert av humane U937 celler og fra human unn 30kDa TNF-inhibitoren er på omtrent 30 kDa ifølge SES-PAGE og blir eluert fra en DEAE CL6B kolonne ved omtrent 80 millimolar NaCl i Tris buffer, pH 7,5. 30kDa TNF-inhibitoren er blitt vist å inhibere aktiviteten til TNFa og har liten virkning på aktiviteten til TNF<p>. Det naturlig forekommende proteinet blir glykosylert. Uglykosylert 30 kDa TNF-inhibitoren utviser også TNF-inhibtorisk aktivitet
Den andre formen av foretrukne TNF-inhibitorer er 40 kDa TNF-mhibitoren som også er blitt identifisert og isolert fra minst et medium kondisjonert med humane U937 celler og human urin. 40 kDa TNF-inhibitoren er omtrent 40 kDa på SDS-PAGE og eluerer fra en DEAE-kolonne bed omtrent 100 millimolar NaCl i Tris buffer, pH 7,5 40 kDa TNF-mhibtoren er blitt vist å inhibere aktiviteten til både TNFa og TNF<p>. 40 kDa TNF-mhibitoren er også et glykoprotein og det uglykosylerte proteinet utviser TNF-inhibitonsk aktivitet
Nuklemsyresekvensene til genene kodende for både 30 kDa TNF-mhibitoren og 40 kDa TNF-inhibitoren og aminosyresekvensene til begge proteinene er gitt i søknaden til Brewer et al. Foreliggende oppfinnelse omfatter uglykosylerte former av TNF-inhibitorene samt visse forkortede former av de naturlig forekommende proteinene som beskrevet nedenfor. I en ytterligere utførelsesform er TNF-inhibitorene modifisert ved kobling av en eller flere polyetylenglykol (PEG) eller andre gjentatte polymeriske deler
Tre former av 40 kDa TNF-inhibitoren er blitt produsert rekombinant ved ekspressjon i E coil. Hver av disse formene, referert til som full-lengde 40 kDa TNF-inhibitor, 40 kDa TNF-inhibitor A 51 og 40 kDa TNF-inhibitor A 53 (sammen med glykosylert full-lengde 40 kDa TNF-inhibitor isolert fra medium kondisjonert med humane U937 celler og human urin, i glykosylerte og uglykosylerte former, som alle kollektivt er referert til heri som 40 kDa YNF-inhibitor (er beskrevet i søknaden til Brewer et al. ) A 51 proteinet er en forkortet versjon av det native proteinet hvor 51 aminosyreresidiene ved karboksylterminusen til det modne proteinet er fjernet.
A 53 proteinet er en forkortet versjon av det modne proteinet hvor 53 aminosyreresidier ved karboksylterminusen til det native proteinet er fjernet Naturlig-forekommende 40 kDa TNF-inhibitor (glykosylert) og uglykosylerte inhibitorer (native, A 51 og A 53) har vesentlig samme TNF-Inhibtoriske aktivtet
Fremgangsmåtene for fremstilling av inhibitorene til Brewer et al er også beskrevet i ovennevnte søknad. En beskrevet fremgangsmåte består av isolering av inhibitorer fra forskjellige kilder, sa som human urin og medium kondisjonert med humane U937 celler. En annen beskrevet fremgangsmåte innbefatter isolering av gener som er ansvarlige for koding av inhibitorene, kloning av genet i egnede vektorer og celletyper, og uttrykking av genet for å produsere inhibitorene Den sistnevnte fremgangsmåten som er eksmpler på rekombinante DNA-metoder generelt, er en foretrukket fremgangsmåte ifølge foreliggende oppfinnelse Rekombinante DNA-metoder er delvis foretrukket på grunn av at de kan oppnå sammenlignbare høyere mengder med høyere renheter
Også innbefattet innenfor rammen av foreliggende oppfinnelse er TNF-mhibitor muteiner og muteiner som er blitt modifisert som beskrevet i US-patentsøknad serienr. 07/669,892 inngitt mars 15, 1991 og inkorporert heri som referanse Et foretrukket mutein er 30 kDa TNF-inhibitoren hvor posisjonen 105 er en cystein. En foretrukket pegylert TNF-inhibtor er en "dumbbell" art hvor to C105 30 kDa TNF-inhibtorer er koblet til en polyetylenglykol (PEG) del. Det er mest foretrukket at PEG-kjeden har en molekylvekt på 20.000. Fremstilling av "dumbbell" forbindelsen er beskrevet i eksempel 5 nedenfor.
Ovennevnte TNF-inhibitorer er fortrinnsvis fremstilt ved ovennvente fremgangsmåte i "vesentlig ren" form. Med "vesentlig ren" menes at inhibitoren, i en umodifisert form, har en sammenlignbar høy spesifikk aktivitet Det er derimot å bemerke at derivater av TNF-inhibtorene kan ha forskjellige spesifikke aktiviteter Det er foretrukket at en terapeutisk sammensetning omfatter minst en av 30 kDa TNF-inhibtoren eller 40 kDa TNF-inhibitoren som bli administrert i en effektiv mengde til pasienter som lider av TNF-medierte sykdommer
Ytterligere TNF-inhibtorer omfatter forbindelser som kan konkurrere med TNF for TNF-reseptorsetene. Slike forbindelser omfatter reseptorantagonister. Andre TNF-inhibitorer omfatter forbindelser og proteiner som blokkerer in vivo syntesen eller den ekstracellulære frigjøringen av TNF. Slike forbindelser omfatter midler som påvirker transkriptsjonen eller translasjonen av TNF-gener eller prosessering av TNF-preproteinene.
På grunn av at det er mulig at den inhibitorlske funksjonen til foretrukne mhibtorer er meddelt av en eller flere diskrete og separerbare deler, blir det også betraktet at fremgangsmåten ifølge oppfinnelse kan bli utført ved administrering av en terapeutisk sammensetning hvor den aktive ingrediensen består av den delen (eller de delene) av en inhibtor som kontrollerer TNF-inhibisjonen.
Den terapeutiske sammensetningen blir fortrinnsvis administrert parenteralt ved injeksjon til tross for at andre effektive admmistreringsformer, så som mtraartikulær injeksjon, inhaleringsinnretninger, oralt aktive formuleringer, transdermallontoforese eller suppositorer, kommer også i betraktning En foretrukket bærer er fysiologisk saltvannsoppløsnmg, men andre farmasøytiske akseptable bærere kan også bli anvendt. I en foretrukket utførelsesform blir det betraktet at bæreren og TNF-inhibitoren utgjør en fysiologisk-kompatibel formulering med sakte frigjøring. Det primære oppløsningsmiddelet i en slik bærer kan enten være vandig eller ikke-vandig av natur I tillegg kan bæreren inneholde andre farmakologisk-akseptable eksipienter for modifisering eller opprettholdelse av pH, osmolaritet, viskositet, klarhet, farve, sterilitet, stabilitet, oppløs-nmgsrate eller lukt til formuleringen. Bæreren kan likeledes inneholde ytterligere farmakologisk-akseptable eksipienter for modifisering eller for opprettholdelse av stabiliteten, oppløsningsraten, frigjøringen eller absorpsjonen av TNF-mhibitoren Slike eksipienter er de forbindelsene som vanligvis blir anvendt for å formulere doseringer for parenteral administrasjon i enten enhetsdose eller fler-dose form
Når den terapeutiske sammensetningen er blitt formulert kan den bli lagret i sterile beholdere som en oppløsning, suspensjon, gel, emulsjon, fast stoff eller bli dehydrert eller lyofilisert pulver. Slike formuleringer kan bli lagret enten i en form som er klar til bruk eller kreve å bli rekonstituert rett før administreringen. Den foretrukne lagringen av slike formuleringer er ved temperaturer som er minst så lave som 4°C og fortrinnsvis ved -70°C. Det er også foretrukket at slike formuleringer inneholdende TNF-inhibitor blir lagret og administrert ved eller nære ved fysiologisk pH. Det er for tiden antatt at administreringen i en formulering ved høy pH (dvs. høyere enn 8) eller ved en lav pH (dvs. mindre enn 5) er uønsket
Administreringsmåten til formuleringene inneholdende TNF-mhibitoren for systemisk levering er fortrinnsvis via subkutan, intramuskulær, intravenøs, mtranasal eller vaginal eller rektal suppositorier. Administreringsmåten til formuleringene inneholdende TNF-inhibitor for lokal levering er fortrinnsvis via intraartikulær, mtratracheal eller instillasjon eller inhalasjoner til den respiratoriske kanalen I tillegg kan det være ønskelig a administrere TNF-mhibitoren til spesifiserte deler av fordøyelseskanalen enten ved oral administrering av TNF-inhibitoren i en hensiktsmessig formulering eller innretning eller via suppositorier eller enema.
I visse utførelsesformer blir administreringen utformet for å danne et forvalgt konsentrasjonsområde av TNF-inhibitoren i pasientens blodstrøm. Det antas at opprettholdelse av sirkulerende konsentrasjoner av TNF-mhibtor på mindre enn 0,01 ng pr ml plasma ikke behøver å være en effektiv sammensetning, mens den forlengede opprettholdelsen av sirkulerende nivåer over 10 >jg pr. ml kan ha uønskede bivirkninger.
Et foretrukket doseringsområde for behandling av TNF-medierte sykdommer og spesielt for behandling av TNF-formidlet septisk sjokk er mellom omtrent 0,1-200 mg pr kg av pasientens kroppsvekt pr. 24 timer administrert i like doser mellom omtrent 4-15 ganger pr 24 timer Det er mere foretrukket at doseringen er mellom omtrent 0,1-100 mg pr kg av pasientens kroppsvekt pr. 24 timer administrert I like doser hver 3. time. Det er mest foretrukket at 1-50 mg pr kg av pasientens kroppsvekt pr. 24 timer blir administrert hver 3 time. Administreringen fortsetter i 12-60 timer. I et mest foretrukket regime vil administreringen fortsette i minst 24 timer. Dosermgsfrekvensen og den optimale dosen vil avhenge av farmakokinetiske parametere til TNF-inhibitoren i formuleringen som blir anvendt.
I en ytterligere foretrukket måte for behandling av TNF-medierte sykdommer og spesielt for behandling av TNF-formidlet septisk sjokk, blir en opprinnelig intravenøs bolus injeksjon av TNF administrert etterfulgt av en kontinuerlig intravenøs infusjon av TNF-inhibitoren helt til sirkulerende TNF nivåer ikke lenger er forhøyede. Serum TNFa-nivåene kan bli bekreftet ved kommersielt tilgjengeligelmmunoanalyse-testkit Initiering av behandlingen for TNF-formidlet septisk sjokk bør bli påbegynt under en hvilken som helst behand-lingsmåte, så fort som mulig etter septisemi eller at sjanse for septisemi blir diagnostisert. For eksempel kan behandlingen bli påbegynt rett etter kirurgi eller en ulykke eller en annen hendelsen som kan innbefatte risiko for å initiere septisk sjokk.
Foretrukne metoder for behandling av TNF medierte sykdommer og spesielt for behandling av TNF-formidlet artritt omfatter: 1) en enkelt intraartikulær injeksjon av TNF-inhibitor gitt periodisk etter behov for å forhindre eller behjelpe oppblussing av artritt og 2) periodiske subkutane injeksjoner av TNF-inhibitor.
Foretrukne behandlingsmetoder for TNF-medierte sykdommer og spesielt for behandling av TNF-formidlet respiratorisk distressyndrom i voksne omfatter: enkelte eller flere intratracheale administreringer av TNF-inhibitor og 2) bolus eller kontinuerlig intravenøs infusjon av TNF-inhibitor.
Det er også betraktet at visse formuleringer inneholdende TNF-inhibitor skal bli administrert oralt. TNF-mhibitoren som blir administrert på denne måten er fortrinnsvis innkapslet. Innkapslet TNF-inhibitor kan bli formulert med eller uten de bærerene som vanligvis blir anvendt i sammen-fatning av faste doseringsformer. Kapslen blir fortrinnsvis konstruert slik at den aktive delen av formuleringen blir frigjort ved det tidspunktet i mavetarmkanalen når den biologiske tilgjengeligheten er maksimal og den pre-sys-temiske degraderinger er minimalisert Ytterligere eksipienter kan bli innbefattet for å lette absorpsjonen av TNF-mhibitoren Fortynningsmidler, smaksstoffer, voks med lavt smeltepunkt, vegetabilske oljer, smøremidler, suspenderings-midler, tablettoppløsende midler og bindemidler kan også bli anvendt.
Uansett administrermgsmåte blir den spesifikke dosen beregnet ifølge den omtrentlige kroppsvekten til pasienten Ytterligere tilpasninger av beregningene nødvendig for å bestemme den hensiktsmessige doseringen for behandlingen omfattende hver av ovennevnte formuleringer blir rutinemessig utført av fagfolk innenfor dette området og hører inn under de rutinemessige oppgavene utført av disse uten unødig eksperimentering, spesielt i lys av informasjon om dosering og analyser som er beskrevet heri Disse doseringene kan bli bekreftet gjennom anvendelse av de etablerte analysene for å bestemme doseringer anvendt sammen med hensiktsmessige dose-responsdata.
Det er å bemerke at TNF-inhibitor formuleringene beskrevet heri kan bli anvendt for veterinære anvendelser samt humane anvendelser og at betegnelsen "pasient" bør bli tolket på en begrensende måte Nar det gjelder veterinær anvendelser bør doseringsområdene være som angitt ovenfor.
Det er å bemerke at anvendelsen av det som blir beskrevet i foreliggende oppfinnelse ovefor et spesifikt problem eller miljø hører inn under evnene til fagfolk innenfor dette området i lys av det som blir beskrevet heri. Eksempler på representiative anvendelser av foreliggende oppfinnelse fremgår av følgende eksempler
Følgende eksempler beskriver anvendelsen ifølge foreliggende oppfinnelse mot en TNF-formidlet sykdom beskrevet heri Forskjellene, om noen, mellom behandling av pasienter som lider av andre TNF-medierte sykdommer fra behandling av pasienter som lider av TNF-formidlet septisk sjokk kan lett og rutinemessig bli identifisert av fagfolk innenfor dette området. Evnen til å lindre virkningene av TNF-formidlet septisk sjokk ved administrering av en TNF-inhibitor som vist i følgende eksempler viser at administrering av en TNF-lnhibitor vil være like effektivt for behandling av alle sykdommer som blir formidlet av TNF, som definert heri.
Eksempel 1 Demonstrering av de beskyttende virkningene av human rekombinant 40 kDa TNF- inhibitorA53 i en munn modell av cvtokm indusert septisk s. lokk
A Protokoll for induksjon av septisk sjokk i mus.
En modifikasjon av en munn modell av septisk sjokk utviklet av Everaerdt, et al. er blitt anvendt i dette eksempelet for a demonstrere den terapeutiske effektiviteten til TNF-inhibitoren overfor septisk sjokk Everaerdt et al Biochem. biophys Res Commun., vol. 163, s. 378 (1989), er spesifikt inkorporert hen som referanse. I denne modellen er den synergistiske virkningen av en kombinasjon av cytokiner, human rekombinant tumornekrosef aktor ot (hrTNFa) og human rekombinant interleukin-lp (hrIL-l<p>) produserer septisk sjokk i mus som erkarakterisert vedomfattende hypotermi og deretter død.
Letalt septisk sjokk ble indusert i C57B1/6 hunnmus, 8-12 uker gamle, med 18-21 g kroppsvekt, ved administrering av hrTNFa og hrIL-lp. Human rekombinant tumornekrosefaktor ble dannet generelt ifølge fremgangsmåten beskrevet i Shirai et al , Nature (1985) vol 313, s. 803-806, spesifikt inkorporert heri som referanse, se gså patentsøknaden til Brewer et al . Human rekombinant interleukin-lp ble dannet generelt ifølge fremgangsmåten beskrevet i Kronheim et al , Biotechnology (1986) vol. 4, s 1078-1082, spesifikt inkorporert heri som referanse Cytokinene ble testet for LPS ifølge fremgangsmåtene beskrevet i United States Pharmocopia XXII, national Formulary WVII, januar 1, 1990, s. 1493-1495. Injeksjoner av cytokiner ble gitt som en enkelt bolus, subkutant, på den dosale overflaten av musen, i volumer på 100 pl 40 kDa TNF-inhibi toren A 53 ble dannet ifølge den rekombinante DNA metoden beskrevet i søknaden til Brewer et al og ble gitt i multiple intraperitoneale doser, i volumer på 300 pl eller mindre pr. injeksjon
Preliminære eksperimenter ble utført for å bestemme forholdet mellom hrIL-lp og hrTNFa nødvendig for å indusere en dødelighet på 100% (figur 1) Dosene blir uttrykt som pg/kg kroppsvekt. Mens hrTNFa doseringen holdes konstant på 300 pg/kg ble økende mengder hrIL-lp tilsatt til injeksjonsbolus. Resultater gitt som pg hrIL-i<p>/kg % dødelighet var som følger 250 0, 500 10, 1500.50, 2000 67, 2500:100 Alle doser som var høyere enn 2500 pg/kg produserte 100% dødelighet. I alle påfølgende eksperimenter ble cytokinene anvendt ved 2500pg/kg hrIL-lp og 300pg/kg hrTNFa, og ble levert som en enkelt subkutan bolus på den dorsale overflaten.
Den kombinerte administreringen av hrTNFa og hrlL-l<g>forårsaket i mus en betydelig hypotermi (figur 2) og deretter død omtrent 18 til 30 timer etter injeksjonen (figur 4). I dette eksempelet ble en reduksjon i kroppstemperaturen anvendt som en målbar indikator for alvorligheten til det induserte sjokket Kroppstemperatur ble vurdert ved anvendelse av en håndholdt First Temp infrarød scanner (Intelligent medical Systems, Carlsbad, CA) Grad av hypotermi ble direkte korrelert med alvorligheten til andre kliniske tegn (dvs skjelving, lethargy, tap av hudens elastisitet, krokrygget holdning). Kroppstemperaturen til dyrene falt fra en normalverdi på 39* C til så mye som 28° C omtrent 15 timer etter injeksjonen
I kontrast til dette forårsaket injeksjoner av en av cytokinene alene ikke en lignende grad av hypotermi (figur 2) og var uten letal virkning. Enkelt bolus subkutane injeksjoner av hrIL-lp ved 2.500 jjg/kg forårsaket et forbigående fall i kroppstemperaturen til 34°C og nådde dette lavpunktet 12 til 16 timer etter injeksjonen. Ingen dødelighet ble observert hrTNFa ved 300ug/kg produserte ikke en målbar virkning på kroppstemperaturen til mus og en dødelighet ble heller ikke observert.
B. Virkninger av 40 kDa TNF-mhibitor A 53 på cytokin indusert sjokk 40 kDa TNF-inhibitoren A 53 ble administrert til mus injisert med cytokinblandingen (hrlL-lp og hrTNFa i mengdene angitt ovenfor) En serie eksperimenter ble utført hvor grupper på 6 mus ble behandlet med inhibi tor<p>rotem (i dette eksperimentet, 40 kDa TNF-mhibitor A 53) for stadig lengre perioder Mengden av mhibitorprotein pr. injeksjon ble holdt konstant, mens det totale antallet injeksjoner ble øket. Den absolutte mengden av mhibitorprotein som ble anvendt i de tre eksperimentene varierte derfor med varigheten av det terapeutiske regimet. Kroppstemperatur og dødelighet ble vurdert for hvert eksperiment.
I det første eksperimentet ble inhibtorprotein injisert intraperetonealt 30 minutter før og 30 minutter etter cytokin bolusen {figur 3) Hver injeksjon inneholdt 100 ug/kg mhibitorprotein i et 300 pl volum i totalt 200 pg/kg. Av cytonkin-sjokkede mus viste de i gruppen som mottok in-hibitorprotemet en betraktelig reduksjon av hypotermi i en
4-6 timers periode etter administrering av cytokinene sammenlignet med den ubehandlede gruppen (figur 3). Forløpet av dødeligheten ble forsinket omtrent 12 timer i den behandlede gruppen (figur 4) I begge gruppene var dødelig-heten derimot 100% 48 timer etter injeksjon.
I det andre eksperimentet ble terapien fortsatt i totalt 12 timer etter injeksjonen (figur 5) Injeksjonstidene relativt til tiden for cytokininjeksjon var -30 minutter, pluss 30 minutter, 3 timer, 6 timer, 9 timer og 12 timer. Dette regimet resulterte i en total dose av mhibitorprotein på 600 pg/kg Etter cytokin injeksjon utviklet den ubehandlede gruppen karaktertrekkene ved hypotermi med et lavpunkt på 26'C etter 15 timer. De første dødsfallene ble oppdaget etter 36 timer (figur 6) Dødeligheten var 100% etter 43 timer I kontrast til dette var gruppen behandlet med mhibitorprotein beskyttet overfor alvorlig hypertermi i omtrent 24 timer etter injeksjon av cytokinblandingen. Kroppstemperaturen nådde et innledende lavpunkt på 35,5<e>C etter 12 timer Ved dette tidspunktet var terapi med mhibitorprotein avsluttet. Kroppstemperaturen økte noe i løpet av de neste 6 timene og falt deretter til 26° C innen 36 timer. Relativt til den ubehandlede gruppen ble forløpet av dødeligheten forsinket i den behandlede gruppen. De første dødsfallene ble observert 24 timer etter injeksjon og nådde 100% innen 44 timer.
Det tredje eksperimentet økte ovennevnte regime fra 12 timer til 24 timer etter cytokin injeksjon (figur 7). De ytter ligere intraperetonale injeksjonene ble administrert 15, 18, 21 og 24 timer etter injeksjon av cytokinblandingen. Den resulterende totale doseringen var 1000 mg/kg. Den ubehandlede gruppen som mottok hrIL-lp og hrTNFa fulgte samme forløpet som i det andre eksperimentet Kroppstemperaturen nådde et lavpunkt på 27°C etter 12 timer. Dødeligheten begynte 18 timer etter injeksjon og var 100% innen 42 timer (figur 8) I kontrast til dette ble gruppen som mottok mhibitorprotein beskyttet overfor alvorlig hypotermi og dødelighet. Den gjennomsnittlige kroppstemperaturen ble redusert til bare 33,5°C innen 10 timer etter cytokin injeksjon og økte deretter til omtrent normalverdier innen 24 timer ved avslutning av inhibitorproteinbehandlmg (figur 7). Innen 42 timer (18 timer etter avslutning av terapi) ble kroppstemperaturen redusert til 34,5°C og forble til en viss grad under det normale helt til 90 timer etter injeksjon av cytokiner. Dødeligheten i denne gruppen var en 1 av 6. Det ene fatale tilfellet kunne forklares Dyret forble derimot unormal i løpet av eksperimentet og dette kan kanskje være forårsaket av feilplassering av den intraperitoneale injeksjonen Kroppsvektene til disse dyrene ble registrert for å vurdere den fullstendige helbredelsen fra det cytokm-mduserte sjokket (figur 9). I gruppen behandlet med mhibitorprotein ble gjennomsnittsvekten redusert til 39% av den opprinnelige vekten innen 62 timer. Innen 200 timer etter cytokin injeksjon hadde den gjennomsnittlige vekten gått tilbake til den til kontrollgruppen injisert med fosfatbuffret saltvann (PBS). Dyrene så ut til å ha normal adferd og var normale når det gjelder ytre utseende Ved forlenging av terapien med mhibtorprotein i 24 timer ble det mulig å reversere den uttalte hypotermien og dødeligheten som var til stede i den cytokinmduserte modellen av septisk sjokk i mus. Varigheten og frekvensen av administrasjonen av inhibitoren vil være kompatibel med den omfattende behandlingen som blir gitt til en pasient med septisk sjokk.
C Kontroller som utviser manglende virkninger av fluidterapi og den ikke-toksiske naturen til inhibitor alene.
I de siste tre eksperimentene beskrevet ovenfor ble in-hibitorprotem (40 kDa TNF-inhibitor A 53) gitt i volumer på 200 til 300 pl pr. injeksjon Det var mulig at fluldvolumet til inhibitorproteinet selv kan påvirke en terapi. For å undersøke den muligheten ble hypotermi og dødeligheten sammenlignet i en gruppe av mus som bare mottok cytokiner og en annen gruppe som mottok cytokiner pluss den intraperetoneale injeksjonen av PBS i volum og frekvenser som er identiske med den inhibltorproteinbehandlede gruppen (figur 5). Ingen signifikante forskjeller i hypotermi eller dødelighet ble observert I påfølgende eksperimenter ble PBS administrert intraperetonalt til ubehandlede cytokin sjokkbehandlede mus
En separat kontroll ble innbefattet for å vurdere virkningene av inhibtorprotein alene. I alle eksperimentene ble en gruppe mus injisert med kun mhibitorprotein i identiske volumer og frekvenser som de som ble gitt til den behandlede, cytokin-sjokkbehandlede gruppen Ingen dødelighet eller endringer av kroppstemperatur ble observert i inhibtorprotein kontrollgruppene (figurene 3, 5, 7)
Eksempel 2 Demonstrasjon av de beskyttende virkningene av human rekombinant 30 kDa TNF- inhibitorer i en munn modell av cytokin indusert septisk s. iokk
A Protokoll for induksjon av munn septisk sjokk
Den samme munn modellen av septisk sjokk beskrevet 1 eksempel 1 ble anvendt for å demonstrere den terapeutiske effektiviteten av 30 kDa TNF-mhibitoren Letalt sjokk ble indusert i C57B1/6 hunnmus, 8-12 uker gamle, med vekt på 18-21 gram ved den kombinerte subkutane administreringen av hrTNFa ved 300 pg/kg og hrIL-ip ved 2.500 pg/kg. Dødeligheten var 100% ved disse dosene. Cytokinene ble levert som en enkel subkutan bolus på baksiden av halsen
I dette eksempelet ble en reduksjon i kroppstemperaturen anvendt som en målbar Indikator for alvorligheten til det induserte sjokket Hypotermigraden korrelerte direkte med alvorligheten til de kliniske tegnene (dvs. skjelving, lethargy, tap av hudelastisiteten, krokrygget holdning) Etter den kombinerte administreringen av hrTNFa og hrIL-lP falt kroppstemperaturen fra en normalverdi på 39°C til 28<*>C innen 15 timer etter injeksjon (figur 2). Temperaturen ble vurdert med en "First Temp infrared hand held scanner"
(Intelligent Medical Systems, carlsbad, CA) I kontrast forårsaket injeksjoner av enten hrTNFa eller hrIL-lp alene ikke en lignende grad av hypotermi og var uten lethale virkninger (figur 2) Den humane rekombinante 30 kDa TNF-mhibitoren anvendt i dette eksperimentet ble dannet ifølge fremgangsmåtene beskrevet i patentsøknaden til Brewer et al.
B Virkninger av 30 kDa TNF-inhibitoren på cytokin indusert septisk sjokk
Inhibitorproteinet (i dette eksempelet 30 kDa TNF-inhibitoren) ble gitt intraperetonealt ved 40 mg/kg pr. injeksjon til en gruppe på 8 mus i perioder på enten 12, 24 eller 39 timer etter den subkutane administreringen av hrTNFa og hrlL-lp. Den første gruppen som inneholdt en mus ble behandlet med inhibtorprotein 30 minutter før og 30 minutter, 3 timer, 6 timer, 9 timer og 12 timer etter injeksjon av cytokinene. Denne musen mottok totalt 240 mg/kg av inhibitorproteinet gitt i 6 injeksjoner I den neste gruppen ble behandlingen utvidet i ytterligere 12 timer i det de ytterligere injeksjonene ble gitt i intervaller på 3 timer. De tre musene i denne gruppen mottok hver i løpet av 24 timers perioden totalt 400 mg/kg inhibtorprotein gitt i 10 injeksjoner. I den neste gruppen ble behandlingen utvidet i ytterligere 15 timer i det de tilsatte injeksjonen på ny ble gitt i intervaller på
3 timer De fire musene i denne gruppen mottok hver i løpet av perioden på 39 timer totalt 600 mg/kg gitt i 15 injeksjoner . Kroppstemperaturen (figur 10) og dødeligheten (figur 11) ble undersøkt i behandlede og ubehandlede mus Gjennomsnitts-temperaturen til de ubehandlede musene falt til 27 "C innen 12 timer og forble ved dette lave nivået helt til musene døde 36 til 42 timer etter administrering av cytokinene. I kontrast til dette ble kroppstemperaturen til musene i alle tre behandlingsgruppene bare moderat redusert og alle musene overlevde det cytokin induserte sjokket I løpet av de første 24 timene etter administrering av cytokinene falt kroppstemperaturen 2 til 4"C innen 12 timer i alle tre gruppene og ble deretter økt til det normale innen 24 timer. Deretter ble temperaturen opprettholdt ved normale nivåer i gruppene som mottok enten 24 timers eller 39 timers inhibitor protein-behandling, mens temperaturen til enkelt mus bare behandlt i 12 timer falt 3<*>C ved 39<*>C og gikk deretter tilbake til en normal verdi 100 timer etter cytokin injeksjon Tiden nødvendig for at kroppsvekten gikk tilbake til verdier for tid 0 ble også anvendt som en indeks på helbredelse etter cytoindusert sjokk (figur 12). Kroppsvektene til mus behandlet med inhibitor protein i enten 24 eller 39 timer falt til 86% av nulltidsverdiene innen 60 timer og gikk deretter tilbake til normale nivåer innen 140 timer Kroppsvekten til den enkelte musen behandlet med inhibitoren i 12 timer nådde et lavpunkt på 81% noe senere, 75 timer, men oppnådde tid nullverdien ved omtrent 140 timer som er det samme punktet som de andre to gruppene 30 kDa TNF-mhibitoren var effektiv når det gjelder å beskytte mus overfor et cytokinindusert letalt septisk sjokksyndrom når terapien ble opprettholdt ved 3 timers intervaller i perioder på enten 12, 24 eller 34 timer etter injeksjon av cytokinblandingen Et lignende terapeutisk regime kan lett bli oppnådd i en pasient med septisk sjokk ved intensiv behandling
Eksempel 3: Demonstrering av virkningene av human rekombinant 30 kDa TNF- inhibitor på Streptococcellevegg ( SCW )- indusert reaktivering av SCW- indusert artritt i rotter
Dette eksperimentet anvender modellen beskrevet i Esser, et al., Arthritis and Rheumatism, 28:1401-1411, (1985), spesifikt inkorporert heri som referanse. Denne modellen kan kort oppsummeres som følger: Streptococcellevegg (SCW) blir injisert intraartikulaert inn i ankelleddet til Lewis rotter Saltvann blir injisert inn i kontralateral leddet for å oppnå en kontroll. Etter en periode på 20 dager hvor den opprinnelige betennelsen dør hen blir SCW på ny administrert og denne gangen ved intravenøs injeksjon. Denne SCW-dosen er utilstrekkelig når det gjelder å forårsake leddbetennelse i seg selv og har derfor liten virkning på den saltvanns-Injiserte ankelen. Denne dosen kan reaktivere betennelse og leddødeleggelser i ankelen på forhånd injisert med SCW. For a vurdere grad av betennelse etter den andre administreringen av SCW blir dimensjonene av ankelleddet målt daglig.
Når det gjelder Streptococcellevegg-mdusert artritt se R L. Wilder i Immunopathogenetic Mechansims of Arthritis, kap. 9 med tittel "Experimental Animal Models of Chronic Arthritis", comments "the clmical, histological and radiological features of the experimental joint disease closely resemble those observed in adult and juvenlle rheumatoid itis".
To fremgangsmåter for behandling av artritt ble utført ved anvendelse av gnagermodellen til SCW-indusert artritt
Fremgangsmåte 1
I et sett av eksperimenter ble rotter med artritt gitt en enkelt intraartikulær administrasjon av TNF-inhibitor I forfatbuffret saltvann (PBS) ved anvendelse av sen SCW- induserte modellen til artritt. Artritt ble indusert ved injeksjon inn i hver rotte pa dag 0 i venstre ankel med SCW (1,8 pg rhamnose ekvivalens). Den høyre ankelen ble injisert med et likt vilum pyrogen-fritt saltvann. Ankeldimensjonene ble målt på dagene 0, 1, 2 og 7. Svelling av venstre ankel på dagene 1 og 2 (tabell 1) reflekterer den akutte fasen til SCW-indusert artritt Den høyre ankelen som virket som en kontroll for den mekaniske traumen assosiert med den intraartikulære injeksjonen gjennomgikk ingen signifikant svelling (data ikke vist).
På dag 21, etter at den akutte fasen til artritt opphørte ble rottene tilfeldig delt mn i fire grupper som hver inneholdt 9 eller 10 rotter og disse ble bedøvt og injisert ifølge protokollen beskrevet nedenfor C105 er et mutein av 30 kDa TNF-inhibitoren hvor en aminosyresubstitusj on ble utført for å oppnå et sete for kovalent kobling av polyetylenglykol (PEG). I C105 er asparagm blitt erstattet med cystein i posisjon 105 til 30 kDa TNF inhibtoren. I C105-PEG 3400 dumbbell (db) molekylet blir to molekyler av C105 kryssbundet med et enkelt PEG molekyl med en omtrentlig molekylvekt på 3.400 dalton Dumbell molekylet og pegy-lenngsprosedyren er fullstendig beskrevet i US-patentsøknad serienr. 07/669,862 inngitt mars 15, 1991 og har tittelen "Site Specific pegylation og Polypeptides". Denne søknaden er spesifikt inkorporert hen som referanse. Prosedyren for å produsere C105-PEG 3400 db er angitt nedenfor i eksempel 5. Gruppe I virket som bærerkontroll for den Cl05-behandlede gruppen IV Gruppe II virket som bærergruppe for C105-PEG 3400 db-behandlet gruppe III. De mtraartikulære injeksjonene ble utført i et totalvolum på 10 pl via en 25 gauge nål koblet til en automatisk pipetterer. Rett etter de mtraartikulære injeksjonene til de forskjellige behandlingene ble hver rotte injisert intravenøst med SCW (150 pg rhamnose ekvivalens) for å reaktivere artritt. Ingen andre behandlinger ble administrert til rottene Diameterene til ankelleddene ble målt på dagene 21, 22, 23 og 24
Som ventet svellet de venstre anklene til rottene i alle gruppene i respons til den intravenøse injeksjonen av SCW på dag 21 (tabell 1 og figur 13). Responsen varierte derimot betraktelig mellom behandlingsgruppene Leddene til rottene i kontrollgruppene I og II svellet med henholdsvis 30% og 32% i forhold til deres opprinnelige dimensjoner mens de tilsvarende leddene i C105-PEG 3400 db-behandlet gruppe III økte med bare 15% og i C105-behandlet grippe IV med 25%. I figur 14 er de maksimale økningene i leddiameter i løpet av 72 timer intervallet etter SCW-mdusert reaktivering grafisk fremstilt for gruppene I, II, III og IV. En enkelt mtraartikulær injeksjon av Z105-PEG 3400 db forårsaket en statistisk signifikant reduskjon 1 svellingen av artrittiske ledd
Fremgangsmåte 2
I et annet sett av eksperimenter ble artrittiske rotter gitt multiple subkutane administreringer av 30 kDa TNF-inhibitor i fosfatbuffret saltvann (PBS) ved anvendelse av samme SCW-modell for artritt. Artritt ble indusert ved injisering i hver rotte på dag 1 i venstre ankel med SCW (1,8 pg rhamnose ekvivalens) og i høyre ankel med et likt volum pyrogen-fritt saltvann
På dag 21 etter at den akutte artritt opphørte ble rottene tilfeldig delt inn i fire grupper. Hver rotte ble injisert intravenøst med en andre dose av SCW (150 pg rhamnose ekvivalens) for å reaktivere artritt. I løpet av 3 minutter etter injeksjon av SCW ble de ni rottene i kontrollgruppe I behandlet med PBS og de fire rottene i hver av gruppene II, III og IV ble behandlet med 1, 3 og 9 mg pr. kroppsvekt av 30 kDa TNF-inhibitor i PBS Subkutane injeksjoner av PBS til gruppe I eller 30 kDa TNF-mhibitor til gruppene II, III og IV (1, 3 og 9 mg/kg) ble gitt på nytt ved 2 og 6 timer etter SCW-administrermgen og ble gjentatt hver 6. time i løpet av den 42 timer lange perioden der etter. Diameterene til ankelleddene ble målt 0, 24, 39, 48, 60 og 72 timer etter den intravenøse injeksjonen av SCW
Figur 15 og tabell 2 viser de maksimale forandringene i leddiameterene i løpet av den 72 timer lange perioden etter SCW-indusert reaktivering av artritt i de fire eksperimentelle gruppene. Som ventet svellet anklene i den salt-vanns-behandlede gruppen I i respons til den intravenøse injeksjonen av SCW Den maksimale svellingen i gruppene II, III og IV ble derimot redusert med 58%, 85% og 75% Tabell 2 viser resultatene av statistisk analyse av data fra figur 15 ved anvendelse av t-testen som hadde gjennomgått en logarith-misk transformasjon
Eksempel 4 Demonstras. i on av virkningene av human rekombinant 30 kDa TNF- inhibitor på akutt lungeskade indusert av endotoksin i rotter som er fremgangsmåte for behandle respiratonsk distress syndrom i voksne f ARDS)
Dette eksperimentet anvender en septisk stimuli, endotoksin, for å indusere akutt, neutrofil-formidlet lungeskade ifølge modellen beskrevet i Ulich et al , American Journal of Pathology 138. 1485-1496, (1991), og som er spesifikt inkorporert hen som referanse. Denne modellen kan kort oppsummeres som følger endotoksin blir injisert intra-trachealt mn I den midtcervicale delen av luftrøret til bedøvde rotter. Etter en latent periode på 6 timer blir bronchoalveolar lavage (BAL) av lungene utført som en terminal prosedyre Totale og differensiale tellinger av hvite blodceller blir utført på BAL-fluidet. Intratracheal injeksjon av pyrogen-fritt saltvann tilveiebringer BAL-fluid med en hovedvekt av alveolare makrofager (omtrent 99%) i små antall Intratracheal injeksjon av endotoksin forårsaker en stor økning i antall BAL-celler og en hovedvekt av neutrofiler Den akutte neutrofile influks inn i alveolar-området topper seg etter 6-12 timer og blir ledsaget av akkumulering av den protem-inneholdende ødematøse væsken inn i alveloar-områdene. TNF antas å være en av mediatorene til endotoksin-mdusert alveolitis TNF er til stede i BAL-fluidet etter stimulering med endotoksin. Alveolarmakrofagen antas å være kilden for syntesen derav. Intratracheal injeksjon av eksogen TNF induserer et akutt intraalveolart neutrofilisk eksudat som er kvalitativt lik det som blir indusert av endotksin
Til tross for at dyremodeller ikke blir betraktet å fullstendig replikere den humane sykdommen, spesielt overgangen fra akutte til kroniske faser av ARDS, blir mange dyremodeller anvendt som approkimerer det endrere pulmonære ødemet, sekvestrenng av leukocyter og hypoksimilløpet av den akutte fasen av lungeparenchymal skade i løpet av ARDS. J.F. Murray et al., Am. Rev of Respiratory Disease vol. 138, s. 720-723 (1991). De akutte formene av ARDS oppstår 1 nærvær av visse identifiserbare risikofaktorer så som sepsis, aspirasjon eller multiple blodtransfusjoner. Gjeldende undersøkelser betoner den sentrale rollen til neutrofil-formidlet skade i patofysiologien til ARDS (Tate, R.M. Am. Rev Resp. Dis 128 552-559, (1983)). Toksiske produkter frigjort av den aktiverte neutrofilen antas å skade den alveolare kapillærmembranen Permeabiliteten til den skadede membranen blir sterkt øket og dette stimulerer bevegelsen av plasmaproteinene og inflammatoriske celler inn i alveolarområdene. I en eksperimentell ovinmodell av ARDS med septisk opprinnelse beskyttet neutrofil tapping overfor utvikling av lungeskade (Heflm, A.C. J. Clin. Invest. 68:1253-1260, {1981)"
En fremgangsmåte for å behandle neutrofilisk alveolitis i rotter ved intratracheal administrering av 30 kDa TNF-mhibitpr i PBS ble utført. Lungeskade ble indusert ved administrering av endotoksin (5 jjg pr. rotte) i et totalvolum på 0,5 ml sterilt PBS gjennom en 27 gauge 1,27 cm nål satt inn mellom trachealrmgene i den kirurgisk eksponerte midtcervicale regionen av luftrøret. Inokulumet ble administrert sakte inn i luftrøret med registrering av raten og dybden av respirasjonen til rotten. 6 timer senere ble rottene bedøvd med isofluran slik at en laparotomi kunne bli utført for å lette utskylling av lungene. Caudal vena cava ble påvirket for å redusere blodtrykket til lungene Diafragma ble åpnet for å muliggjøre at lungene ble utvidet i løpet av utskyllingen. BAL ble utført vedlnjisering av 40 ml Hanks balanserte saltoppløsning inn i bronchoalveolære områder via et angiocath kateteter som ble skutt inn i og festet ved stedet for et midtcervicalt luftrør innsnitt Inflammatorisk cellulær mfluks ble isolert fra pelleten oppnådd ved sentnfugering av BAL-fluidet ved 1500 rpm i 15 minutter Totale antall leukocyter ble opptelt på en Coulter counter Prosentandel polymorfnukleære neutrofller ble bestemt ved å utføre en differensial celletelling manuelt på et objektglass av farvede celler.
Virkningene av 30 kDa TNF-inhibitoren på endotoksin-stimulert mfluks av cellene inn i de bronchoalveolare områdene ble bestemt ved administrering av 30 kDa TNF-inhibitor samtidig med intratracheal instillasjon av endotoksin 30 kDa TNF-lnhibitor ble testet i doser varierende mellom 1 til 10 pg pr. rotte. 30 kDa TNF-inhibitoren i en dose på 1 jjg/rotte reduserte ikke mfluks til neutrofilene inn i alveolarområdene. Den intratracheale administreringen av 30 kDa TNF-mhibitoren i doser på mellom 2,5 jjg til 10 pg pr. rotte forårsaket en maksimal reduksjon i mfluks av neutrofiler inn i alveolarområdene Sammenlignet med den neutrofile mfluksen i ubehandlede rotter var prosentandel mhibisjon av den cellulære influksen i disse 30 kDa TNF-inhibitorbehandlede rottene omtrent 35% (figur 16). Det totale antallet neutrofiler til stede i bronchoalveolarområdene ble betraktelig redusert i rotter behandlet med 2,5 til 10 ug 30 kDa TNF-lnhibitor pr. rotte (figur 17 og tabell 3)
Eksempel 5: Fremstilling av C105- PEG 3400 db
C105-PEG db forbindelsene ble fremstilt ved omsetning av det cysteminneholdende mutemet av 30 kDa TNF-inhibitor C105 med et PEG-bis maleimid. For å fremstille PEG-bis maleimid ble PEG-tresylat fremstilt fra PEG-bis diol som beskrevet av Nilson og Mosbach i Methods in Enzymology, vol. 104, s. 56-69, Academic Press, Inc , New York, NY (1984) Mengden av sulfonat mellomprodukter ble bestemt ved elementanalyse for fluor Dette mellomproduktet ble omdannet til ftalimid-denvatet som deretter ble redusert med hydrazinhydrat til PEG-bis amin mellomproduktet Disse to reaksjonene ble utført ifølge fremgangsmåten beskrevet av Pillai, et al J, Org. Chem., vol 45 s 5364-5370 (1980). Mengden av hvert mellomprodukt ble vurdert ved elementanalyse for nitrogen. I tillegg ble mengden av PEG-bis-amin bestemt ved omsetning med 2,4,6-trinitrobenzensulfonsyre. PEB-bis-amindenvatene ble omdannet til tilsvarende bis-maleimidprodukter ved omsetning med maleinsyreanhydrider via en tilpasning av prosedyren til Butler og Hartley i methods m Enzymology, vol. XXV, s 191-199, Academic Press, Inc., New York, NY (1972), og ved syklisering av mellomproduktet ved anvendelse av fremgangsmåten beskrevet av wunsch, et al., Biol Chem. Hoppe-Seyler, vol 366, s. 56-61 (1985)
Muteinet C105 30 kDa TNF-inhibitoren blir fremstilt som beskrevet i US-patentsøknad senenr 07/669,862 inngitt mars 15, 1991. C105 30 kDa TNF inhibitoren i 2-3 mg/ml blir behandlet med et 4-ganger molart overskudd av dithiothreitol (DTT) i to timer ved romtemperatur. Muteinet blir deretter dialysert mot avgasset 50 mM HEPES pH 7,0 i 3 timer ved 4'C For å danne dumbbell-forbmdelsen som kan bli betraktet som en polyetylenglykol (PEG) linker dimer, blir det dialyserte muteinet omsatt med PEG-bis-malemidartene. Forholdet mellom mutein og PEG-bis-maleimid varierer avhengig av molekylmassen til PEG-forbindelsen For PEG-bis-maleimid med en molekylvekt på omtrent 1900 ble et 1 til 1 molar forhold anvendt, mens for PEG-forbindelsene med en molekylvekt på 3,400 eller 20 000 ble et 2 til 1 molart forhold av mutein til PEG-forbindelse anvendt Reaksjonene blir inkubert i 3-12 timer ved romtemperatur
Etter inkubasjon ble PEG-koblede dimerer renset fra upegylert mutein og PEG-mutem monomerene ved anvendelse av MONO-S FPLC i 50 mM HoAc pH 4,0 ved anvendelse av en 260 mM, 310mM og 350 mM NaCl trinngradient Dumbbellforbindelsene blir eluert ved 310 mM NaCl trinnet Gjenværende upegylert mutein ble fjernet ved kromatografi på superdex 75 C105-PEG 3400 db refererer til en dumbbell forbindelse (en TNF inhibitor PEG-koblet dimer) hvor TNF-mhibitoren er C105-mutemet av 30 kDa TNF-inhibitoren og PEG-enheten har en molekylvekt på omtrent 3400 dalton
Claims (12)
1
Anvendelse av en terapeutisk effektiv mengde av en TNF-inhabitor som omfatter en aminosyresekvens valgt fra gruppen bestående av (i) aminosyresekvensen av 30 kDa-mhibitoren eller et TNF-inhibitonsk fragment derav eller et mutein derav, (11) aminosyresekvensen Ul 40 kDa-inhibitoren eller et TNF-inhibitonsk
fragment eller mutein derav,
(ni) aminosyresekvensen til 40 kDa-inhibitoren A53 eller et TNF-inhibitonsk
fragment eller mutein derav, og (iv) aminosyresekvensen til 40 kDa-inhibitoren A51 eller et TNF-inhibitonsk
fragment eller mutem derav
til fremstilling av et medikament for å behandle eller forebygge, osteoarrntt, ankyloserende spondyhtt, gonokokkartntt, Reiters sykdom artntt og unnsyregikt
2
Anvendelsen ifølge krav 1, hvor nevnte TNF-inhibitor har en ikke-naturlig forekommende cysteinrest
3
Anvendelsen ifølge krav 2, hvor den ikke-naturlige forekommende cysteinresten er i posisjon 105 til 30 kDa-inhibitoren
4
Anvendelsen ifølge ethvert av kravene 1 ti I 3, hvor TNF-inhibitoren er glykosylert eller hvor TNF-inhibitoren ikke er glykosylert
5
Anvendelsen ifølge ethvert av kravene 1 til 3, hvor TNF-inhibitoren har en methionin-rest i den N-terminale enden
6
Anvendelsen ifølge ethvert av kravene 1 til 5, hvor nevnte TNF-inhibitor blir produsert ved rekombinante DNA-metoder
7
Anvendelsen ifølge ethvert av kravene 1 Ul 6, hvor TNF-inhibitoren i det vesentlige er ren
8
Anvendelsen ifølge ethvert av kravene 1 til 7, hvor nevnte polypeptid er koblet hl et repeterende polymerenhet-matenale med høy molekylvekt
9
Anvendelsen ifølge krav 8, hvor det høymolekylærvektpolyrnere materialet er polyetylenglykol
10
Anvendelsen ifølge ethvert av kravene 1 til 9, hvor medikamentet omfatter en farmakologisk kompatibel, sakte fhgivende formulering
11
Anvendelsen ifølge ethvert av kravene 1 til 10, hvor medikamentet tillater intra-artikulær, subkutan, intramuskulær, intravenøs, intranasal, oral eller topisk administrering av TNF-inhibitoren
12
Anvendelsen ifølge ethvert av kravene 1 til 10, hvor medikamentet tillater kontinuerlig infusjon
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US64434591A | 1991-01-18 | 1991-01-18 | |
PCT/US1992/000432 WO1992013095A1 (en) | 1991-01-18 | 1992-01-17 | Methods for treating tumor necrosis factor mediated diseases |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO932610D0 NO932610D0 (no) | 1993-07-19 |
NO932610L NO932610L (no) | 1993-09-09 |
NO316310B1 true NO316310B1 (no) | 2004-01-12 |
Family
ID=24584497
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO19932610A NO316310B1 (no) | 1991-01-18 | 1993-07-19 | Anvendelse av en TNF-inhibitor til fremstilling av et medikament |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0567566B2 (no) |
JP (2) | JP2864434B2 (no) |
KR (1) | KR100234520B1 (no) |
AT (1) | ATE190629T1 (no) |
AU (2) | AU1235692A (no) |
CA (1) | CA2100329C (no) |
DE (1) | DE69230789T3 (no) |
DK (1) | DK0567566T4 (no) |
ES (1) | ES2145744T5 (no) |
GE (1) | GEP20002142B (no) |
GR (1) | GR3033327T3 (no) |
NO (1) | NO316310B1 (no) |
RU (1) | RU2166955C2 (no) |
SG (1) | SG63617A1 (no) |
WO (1) | WO1992013095A1 (no) |
Families Citing this family (76)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IL98078A0 (en) * | 1991-05-07 | 1992-06-21 | Yeda Res & Dev | Pharmaceutical compositions comprising an anticytokyne |
US5512544A (en) * | 1987-09-13 | 1996-04-30 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Pharmaceutical compositions comprising an anticytokine |
ES2238070T3 (es) | 1989-04-21 | 2005-08-16 | Amgen Inc. | Receptor del tnf, proteina ligante del tnf y adn codante para estos. |
US6221675B1 (en) | 1989-04-21 | 2001-04-24 | Amgen, Inc. | TNF receptors, TNF binding proteins and DNAs coding for them |
US7264944B1 (en) | 1989-04-21 | 2007-09-04 | Amgen Inc. | TNF receptors, TNF binding proteins and DNAs coding for them |
IL95031A (en) | 1989-07-18 | 2007-03-08 | Amgen Inc | A method of producing a recombinant human necrotic factor absorber |
US6143866A (en) * | 1989-07-18 | 2000-11-07 | Amgen, Inc. | Tumor necrosis factor (TNF) inhibitor and method for obtaining the same |
DE59010933D1 (de) | 1989-09-12 | 2003-05-08 | Hoffmann La Roche | TFN-bindende Proteine |
US5698195A (en) * | 1991-03-18 | 1997-12-16 | New York University Medical Center | Methods of treating rheumatoid arthritis using chimeric anti-TNF antibodies |
US6277969B1 (en) | 1991-03-18 | 2001-08-21 | New York University | Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor |
US6284471B1 (en) | 1991-03-18 | 2001-09-04 | New York University Medical Center | Anti-TNFa antibodies and assays employing anti-TNFa antibodies |
US5656272A (en) * | 1991-03-18 | 1997-08-12 | New York University Medical Center | Methods of treating TNF-α-mediated Crohn's disease using chimeric anti-TNF antibodies |
US7192584B2 (en) | 1991-03-18 | 2007-03-20 | Centocor, Inc. | Methods of treating psoriasis with anti-TNF antibodies |
DE69230862T2 (de) * | 1991-10-15 | 2000-12-14 | Michael F. Mullarkey | Rezeptoren zur Behandlung von Entzündungen vom verzögerten Typ |
DK0639079T3 (da) * | 1992-04-30 | 2000-06-13 | Amgen Inc | Fremgangsmåder til behandling af interleukin-1- og tumornekrosefaktor-medierede sygdomme |
NZ256293A (en) * | 1992-09-15 | 1997-06-24 | Immunex Corp | Method of treating tumour necrosis factor - mediated inflammation by use of tnf antagonist |
US5457129A (en) * | 1993-05-17 | 1995-10-10 | Research Development Foundation | Inhibition of nitric oxide production by retinoic acid |
US5446090A (en) * | 1993-11-12 | 1995-08-29 | Shearwater Polymers, Inc. | Isolatable, water soluble, and hydrolytically stable active sulfones of poly(ethylene glycol) and related polymers for modification of surfaces and molecules |
CA2139385C (en) * | 1994-02-04 | 2001-12-25 | Gottfried Alber | Products containing g-csf and tnf binding protein |
US5629384A (en) * | 1994-05-17 | 1997-05-13 | Consiglio Nazionale Delle Ricerche | Polymers of N-acryloylmorpholine activated at one end and conjugates with bioactive materials and surfaces |
US5824784A (en) | 1994-10-12 | 1998-10-20 | Amgen Inc. | N-terminally chemically modified protein compositions and methods |
US7012060B1 (en) | 1995-07-14 | 2006-03-14 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | TNF receptor and steroid hormone in a combined therapy |
DE69525181T2 (de) * | 1995-07-14 | 2002-08-14 | Applied Research Systems Ars Holding N.V., Curacao | Tnf-rezeptor und steroidhormon dhea in einer kombinationstherapie |
TW555765B (en) | 1996-07-09 | 2003-10-01 | Amgen Inc | Low molecular weight soluble tumor necrosis factor type-I and type-II proteins |
WO1998024477A1 (en) | 1996-12-06 | 1998-06-11 | Amgen Inc. | Combination therapy using an il-1 inhibitor for treating il-1 mediated diseases |
DK0942740T3 (da) | 1996-12-06 | 2003-12-15 | Amgen Inc | Kombinationsterapi under anvendelse af et TFN-bindende protein til behandling af TFN-medierede sygdomme |
WO1999023879A1 (en) * | 1997-11-07 | 1999-05-20 | Uab Research Foundation | Method for the augmentation of gene expression |
EP1123314B1 (en) * | 1998-10-20 | 2004-02-18 | Vlaams Interuniversitair Instituut voor Biotechnologie vzw. | Use of a cytokine-producing lactococcus strain to treat colitis |
US20040220103A1 (en) | 1999-04-19 | 2004-11-04 | Immunex Corporation | Soluble tumor necrosis factor receptor treatment of medical disorders |
US6808902B1 (en) | 1999-11-12 | 2004-10-26 | Amgen Inc. | Process for correction of a disulfide misfold in IL-1Ra Fc fusion molecules |
JP2003525612A (ja) | 2000-03-02 | 2003-09-02 | ゼンコー | TNF−α関連障害の処置のための変種TNF−αタンパク質の設計および発見 |
UA81743C2 (uk) | 2000-08-07 | 2008-02-11 | Центокор, Инк. | МОНОКЛОНАЛЬНЕ АНТИТІЛО ЛЮДИНИ, ЩО СПЕЦИФІЧНО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З ФАКТОРОМ НЕКРОЗУ ПУХЛИН АЛЬФА (ФНПα), ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ, ЩО ЙОГО МІСТИТЬ, ТА СПОСІБ ЛІКУВАННЯ РЕВМАТОЇДНОГО АРТРИТУ |
DK2270052T3 (en) | 2001-06-26 | 2018-07-02 | Amgen Inc | Antibodies to OPGL |
TWI334439B (en) | 2001-08-01 | 2010-12-11 | Centocor Inc | Anti-tnf antibodies, compositions, methods and uses |
EA007927B1 (ru) | 2002-04-10 | 2007-02-27 | Апплайд Резеч Системз Арс Холдинг Н. В. | Применение остеопротегерина для лечения и/или профилактики фиброзного заболевания |
US7585840B2 (en) | 2002-04-10 | 2009-09-08 | Merck Serono S.A. | Use of osteoprotegerin for the treatment and/or prevention of fibrotic disease |
US9028822B2 (en) | 2002-06-28 | 2015-05-12 | Domantis Limited | Antagonists against TNFR1 and methods of use therefor |
WO2004032837A2 (en) | 2002-10-08 | 2004-04-22 | Ares Trading S.A. | The use of cytokine able to bind il-18bp and of inhibiting the activity of a second cytokine |
US7892563B2 (en) | 2003-05-20 | 2011-02-22 | Wyeth Holdings Corporation | Methods for treatment of severe acute respiratory syndrome (SARS) |
US7482376B2 (en) * | 2003-07-03 | 2009-01-27 | 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. | Conjugated complement cascade inhibitors |
IL161672A0 (en) | 2004-04-29 | 2004-09-27 | Yeda Res & Dev | Compositions and methods for therapy of chemotherapy-induced neuropathy |
IL161673A0 (en) | 2004-04-29 | 2004-09-27 | Applied Research Systems | Compositions and methods for therapy of chemotherapy-induced neuropathy |
CA2603671C (en) | 2005-04-26 | 2012-03-27 | Laboratoires Serono S.A. | Insp163 polypeptides for the treatment or prevention of cancer and arthritis |
DK2267024T3 (da) | 2005-06-03 | 2012-06-25 | Ares Trading Sa | Fremstilling af rekombinant II-18 bindingsprotein |
CA2610804C (en) | 2005-06-10 | 2013-11-19 | Ares Trading S.A. | Process for the purification of il-18 binding protein |
KR20080044836A (ko) | 2005-07-15 | 2008-05-21 | 라보라뚜와르 세로노 에스. 에이. | 자궁내막증 치료용 jnk 억제제 |
BRPI0613042A2 (pt) | 2005-07-15 | 2010-12-14 | Serono Lab | inibidores de jnk para o tratamento de endometriose |
LT1917276T (lt) | 2005-08-26 | 2018-05-25 | Ares Trading S.A. | Glikozilinto interferono beta gavimo būdas |
ZA200801923B (en) | 2005-09-01 | 2009-09-30 | Ares Trading Sa | Treatment of optic neuritis |
CN101300031A (zh) | 2005-10-31 | 2008-11-05 | 雪兰诺实验室有限公司 | 用sdf-1治疗和/或预防神经疾病 |
US8795668B2 (en) * | 2005-12-23 | 2014-08-05 | The Regents Of The University Of Michigan | Methods for treating pulmonary fibrosis |
IL173104A0 (en) | 2006-01-12 | 2006-06-11 | Yeda Res & Dev | Siva and ubiquintination |
MX2008014971A (es) | 2006-05-24 | 2008-12-05 | Serono Lab | Regimen de cladribine para tratar esclerosis multiple. |
US7767206B2 (en) | 2006-10-02 | 2010-08-03 | Amgen Inc. | Neutralizing determinants of IL-17 Receptor A and antibodies that bind thereto |
US20100063257A1 (en) | 2007-01-26 | 2010-03-11 | Merck Serono Sa | Purification of FC-TACI Fusion Proteins Using the Oilbody Technology |
JP2011500757A (ja) | 2007-10-22 | 2011-01-06 | メルク セローノ ソシエテ アノニム | Fc含有タンパク質の精製方法 |
US8415291B2 (en) | 2008-10-31 | 2013-04-09 | Centocor Ortho Biotech Inc. | Anti-TNF alpha fibronectin type III domain based scaffold compositions, methods and uses |
WO2010113117A2 (en) | 2009-03-30 | 2010-10-07 | Edimer Biotech S.A. | Preparation of isolated agonist anti-edar monoclonal antibodies |
TW201117824A (en) | 2009-10-12 | 2011-06-01 | Amgen Inc | Use of IL-17 receptor a antigen binding proteins |
JP5743234B2 (ja) | 2010-01-15 | 2015-07-01 | キリン−アムジェン・インコーポレーテッド | 抗体製剤及び治療レジメン |
WO2011145085A2 (en) | 2010-05-21 | 2011-11-24 | Procognia (Israel) Ltd | Novel antibodies and methods of use for the treatment and diagnosis of cancer |
CN103347520A (zh) | 2010-10-13 | 2013-10-09 | 波士顿大学管理委员会 | 用作癌症化学治疗的晚期sv40因子(lsf)的抑制剂 |
WO2013016220A1 (en) | 2011-07-22 | 2013-01-31 | Amgen Inc. | Il-17 receptor a is required for il-17c biology |
EP3461482A1 (en) | 2012-03-16 | 2019-04-03 | Children's Medical Center Corporation | Calcium channel blockers for the treatment of ribosomal disorders and ribosomapathies |
US9751942B2 (en) | 2012-03-29 | 2017-09-05 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-LAMP5 antibody and utilization thereof |
UA125204C2 (uk) | 2013-09-05 | 2022-02-02 | Аб2 Біо Са | Застосування il-18-зв'язувального білка (il-18bp) при запальних захворюваннях |
SG11201607881SA (en) | 2014-03-31 | 2016-10-28 | Kirin Amgen Inc | Methods of treating nail and scalp psoriasis |
MY194040A (en) | 2015-03-05 | 2022-11-09 | Ab2 Bio Sa | Il-18 binding protein (il-18bp) and antibodies in inflammatory diseases |
US10465003B2 (en) | 2016-02-05 | 2019-11-05 | Janssen Biotech, Inc. | Anti-TNF antibodies, compositions, methods and use for the treatment or prevention of type 1 diabetes |
LT3484474T (lt) | 2016-07-13 | 2024-07-25 | The Children's Medical Center Corporation | Fenotiazino junginiai, skirti ribosominių sutrikimų ir ribosomopatijų gydymui |
MA47362A (fr) | 2017-01-30 | 2019-12-04 | Janssen Biotech Inc | Anticorps anti-tnf, compositions et méthodes pour le traitement du rhumatisme psoriasique actif |
JP2020506947A (ja) | 2017-02-07 | 2020-03-05 | ヤンセン バイオテツク,インコーポレーテツド | 活動性強直性脊椎炎を治療するための抗tnf抗体、組成物、及び方法 |
BR112021023295A2 (pt) | 2019-05-23 | 2022-02-08 | Janssen Biotech Inc | Método de tratamento de doença inflamatória intestinal com uma terapia de combinação de anticorpos para il-23 e tnf-alfa |
EP4146174A1 (en) | 2020-05-06 | 2023-03-15 | AB2 Bio SA | Il-18 binding protein (il-18bp) in respiratory diseases |
EP3943097A1 (en) | 2020-07-24 | 2022-01-26 | AB2 Bio SA | Car-t cell therapy |
WO2023166206A1 (en) | 2022-03-04 | 2023-09-07 | Ab2 Bio Sa | Il-18 binding protein (il-18bp) in the treatment of vexas |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA1283046C (en) * | 1986-05-29 | 1991-04-16 | Nandini Katre | Tumor necrosis factor formulation |
IL83878A (en) * | 1987-09-13 | 1995-07-31 | Yeda Res & Dev | Soluble protein corresponding to tnf inhibitory protein its preparation and pharmaceutical compositions containing it |
GB8807803D0 (en) * | 1988-03-31 | 1988-05-05 | Glaxo Group Ltd | Biochemical product |
ES2238070T3 (es) * | 1989-04-21 | 2005-08-16 | Amgen Inc. | Receptor del tnf, proteina ligante del tnf y adn codante para estos. |
DE3922089A1 (de) * | 1989-05-09 | 1990-12-13 | Basf Ag | Neue proteine und ihre herstellung |
IL95031A (en) * | 1989-07-18 | 2007-03-08 | Amgen Inc | A method of producing a recombinant human necrotic factor absorber |
AU1674292A (en) * | 1991-03-15 | 1992-10-21 | Synergen, Inc. | Pegylation of polypeptides |
-
1992
- 1992-01-17 AU AU12356/92A patent/AU1235692A/en not_active Abandoned
- 1992-01-17 DE DE69230789T patent/DE69230789T3/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-17 JP JP4504597A patent/JP2864434B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-17 KR KR1019930702129A patent/KR100234520B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-01-17 RU RU93051522/14A patent/RU2166955C2/ru active
- 1992-01-17 GE GEAP19922664A patent/GEP20002142B/en unknown
- 1992-01-17 DK DK92904429T patent/DK0567566T4/da active
- 1992-01-17 EP EP92904429A patent/EP0567566B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-17 SG SG1996007283A patent/SG63617A1/en unknown
- 1992-01-17 AT AT92904429T patent/ATE190629T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-01-17 CA CA002100329A patent/CA2100329C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-17 WO PCT/US1992/000432 patent/WO1992013095A1/en active IP Right Grant
- 1992-01-17 ES ES92904429T patent/ES2145744T5/es not_active Expired - Lifetime
-
1993
- 1993-07-19 NO NO19932610A patent/NO316310B1/no not_active IP Right Cessation
-
1996
- 1996-02-02 AU AU42288/96A patent/AU702466B2/en not_active Withdrawn - After Issue
-
1998
- 1998-09-10 JP JP29598898A patent/JP3210629B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-04-26 GR GR20000401011T patent/GR3033327T3/el unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ES2145744T3 (es) | 2000-07-16 |
CA2100329A1 (en) | 1992-07-19 |
AU702466B2 (en) | 1999-02-25 |
EP0567566B1 (en) | 2000-03-15 |
DE69230789T2 (de) | 2000-08-31 |
AU1235692A (en) | 1992-08-27 |
KR100234520B1 (ko) | 1999-12-15 |
EP0567566A4 (en) | 1994-10-05 |
WO1992013095A1 (en) | 1992-08-06 |
JPH06506446A (ja) | 1994-07-21 |
ATE190629T1 (de) | 2000-04-15 |
JPH11199505A (ja) | 1999-07-27 |
NO932610L (no) | 1993-09-09 |
NO932610D0 (no) | 1993-07-19 |
JP3210629B2 (ja) | 2001-09-17 |
ES2145744T5 (es) | 2008-02-01 |
CA2100329C (en) | 2009-09-29 |
EP0567566A1 (en) | 1993-11-03 |
SG63617A1 (en) | 1999-03-30 |
RU2166955C2 (ru) | 2001-05-20 |
DK0567566T4 (da) | 2007-10-22 |
DE69230789D1 (de) | 2000-04-20 |
AU4228896A (en) | 1996-04-18 |
DE69230789T3 (de) | 2007-10-31 |
GEP20002142B (en) | 2000-06-25 |
GR3033327T3 (en) | 2000-09-29 |
EP0567566B2 (en) | 2007-07-04 |
DK0567566T3 (da) | 2000-07-31 |
JP2864434B2 (ja) | 1999-03-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
NO316310B1 (no) | Anvendelse av en TNF-inhibitor til fremstilling av et medikament | |
AU672606B2 (en) | Methods for treating interleukin-1 and tumor necrosis factor mediated diseases | |
KR101510941B1 (ko) | 신규한 펩타이드 및 이의 용도 | |
KR20050004809A (ko) | 말초 맥관 질환 치료 및/또는 예방에 사용되는 il-18저해제 | |
US8916525B2 (en) | TNF-A and TWEAK dual antagonist for the prophylaxis and treatment of autoimmune diseases | |
AU2014346051A1 (en) | Use of IL-22 dimers in manufacture of medicaments for treating pancreatitis | |
MX2007004374A (es) | Proteina quimerica. | |
RU2524630C2 (ru) | Применение apl пептида для лечения воспалительной болезни кишечника и диабета типа 1 | |
JP3030386B2 (ja) | 抗ガン剤 | |
US6255283B1 (en) | Use of proteins extractable from animal organs for the preparation of medicaments for the treatment of pathological conditions characterized by hyperproduction of tumor necrosis factor (TNF) | |
AU784768B2 (en) | Methods for treating cytokine mediated diseases | |
CA3230014A1 (en) | Fusion protein of interleukin-2 and application thereof in ibd | |
Tracey et al. | Studies of cachexia in parasitic infection | |
CN111763244B (zh) | 青环海蛇抗炎活性肽Hydrostatin-SN61及其编码基因和在制药中的应用 | |
JP2006315988A (ja) | ケモカイン産生誘導効果を有する血管新生阻害物質 | |
JP2008094746A (ja) | 炎症性疾患の治療又は予防剤 | |
CN113583098B (zh) | 一种来源于真菌的环状拟肽及其制备方法和应用 | |
US20220241374A1 (en) | Treatment of non-alcoholic steatohepatitis | |
CN108992671A (zh) | 一种药物组合物及其制备治疗肝损伤的药物中的用途 | |
CN117720664A (zh) | 一种人工拟肽二聚体及其制备方法与在制备抗痛风性关节炎药物中的应用 | |
BEUTLER et al. | LYMPHOKINES, VOL. 14 | |
LeRoy et al. | PROTEINASES IN THE FIBROSIS OF SYSTEMIC SCLEROSIS | |
CN109954131A (zh) | 一种肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体拮抗剂作为脓毒血症治疗药物的应用 | |
Bond | The production and characterization of a putative anti-idiotypic antibody to tumor necrosis factor-α |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MK1K | Patent expired |