JP2756907B2 - 酵母エキス組成物及びその製造法並びにそれを含有する飼料 - Google Patents
酵母エキス組成物及びその製造法並びにそれを含有する飼料Info
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Description
の製造法並びにそれを含有する飼料に関し、詳しくは摂
餌促進作用及び免疫増強作用を共に有する酵母エキス組
成物及びその製造法並びにそれを含有する飼料に関する
ものである。
幼若期は一般に免疫機能が充分でなく、そのため消化管
系・呼吸器系の感染症が発生し易い。よって出来るだけ
速く増体させ抵抗力を付けることが必要である。また一
度この様な感染症が発生すると、一般的に魚類、家畜及
び家禽類の飼育は、生産効率向上のため高密度で行われ
ているために蔓延し易く、経済的損失は極めて大きく、
特に水畜産業界に於いては重要な問題点となっている。
現在これ等の感染症の予防・治療には、抗生物質を始め
とした種々の薬剤が使用されている。しかしながらこれ
等薬剤の効果は充分でない上に、新たに薬剤の体内残留
・薬剤耐性菌の出現といった問題が生じ、薬剤の使用は
制限される方向にある。
を有する物質を投与して増体を促し、感染症に掛かり易
い幼若期の期間を短くする方法、免疫増強物質を投与し
て感染症に対する抵抗力を付ける方法などが検討されて
いる。摂餌促進作用を有する物質としては、5’−ヌク
レオチド類、遊離アミノ酸、ペプチド、砂糖等が知られ
ている。これ等を有効成分とする物質を飼料に添加して
嗜好性を改善し摂餌を促進させる方法が知られている
(特開平3−266944)。しかしながら感染症に掛
かり易い幼若期の期間を短縮するには限度があり、これ
だけでは充分満足の行く方法とは言えなかった。
等の細胞壁構成成分であるβ−グルカンやマンナン等が
知られている。キノコ由来の免疫増強物質としては、シ
イタケから熱水抽出されたレンチナンやスエヒロタケが
生産するシゾフィラン等が開発上市されている。また酵
母菌体を用いた免疫増強剤としては、酵母菌体の細胞壁
構成成分であるβ−グルカンを含むザイモザンが知られ
ている。しかしながらこれ等の免疫増強剤は、製造工程
が煩雑で収量も充分でないためにコスト高となり、飼料
添加物として広く利用するには問題があった。また免疫
増強作用と体重増加作用を共に有する物質に就いても知
られているが(特開平2−11519)、飽くまで強制
的に摂取させた時にのみ有効であり、その効果に就いて
も充分満足の行くものではなかった。以上の様な理由
で、摂餌促進作用が有り、且つ免疫増強作用も有する物
質の開発が熱望され続けていた。
解決すべく鋭意研究した結果、温度・pHを特定の範囲
に限定した自己消化を行い、固形分収率を上げ、且つ高
分子RNA及びマンナンを分解させる事なく多量の遊離
アミノ酸含量を増加させた後に、反応液を一定条件で加
熱し菌体内酵素を失活させ、次ぎに細胞壁溶解酵素を作
用させ、更に続けて5’−ヌクレオチドを生成する5’
−ホスホジエステラーゼ及び5’−アデニル酸デアミナ
ーゼを添加すると、摂餌促進作用並びに免疫増強作用が
共に非常に優れた酵母エキス組成物が得られることを発
見し、本発明を完成するに至った。
遊離アミノ酸含量を高めること並びにRNA及びマンナ
ンの分解を抑える点で、また自己消化反応後に加熱工程
を組み入れることは、以後の酸素反応工程に於いて呈味
性5’−ヌクレオチド及びβ−グルカン・マンナンの分
解を抑制する点で極めて重要な因子となるものである。
以下に本発明を更に詳細に説明する。本発明で使用する
酵母は、食用または飼料用のものであれば特に制限は無
く、ビール酵母,パン酵母,アルコール酵母,清酒用酵
母など一般に食品工業で用いられているものを使用する
ことが出来る。
イセス・セレビシェ(IFO 1954,IFO 03
09,IAM 4274)、キャンデイダ・ユーティリ
ス(IFO 0619,ATCC 15239)、トル
ロプシス・ノダエンシス(IFO 1942)、トルロ
プシス・ステラタ(IFO 1953)、ハンセヌラ・
アノマラ(IFO 1150)等が挙げられる。中でも
トルラ酵母はRNA含量が高く、呈味力も強いので好ま
しい。酵母菌体は培養後、洗浄して得られる生菌体を使
用するが、特に亜硫酸パルプ排液で培養した酵母が、安
価な上に活性が高いので本発明の酵母として優れてい
る。
濁させた後、自己消化反応を行う。反応pH及び反応温
度に就いては、高分子RNA及びマンナンの分解を抑え
ると共に遊離アミノ酸生成を高める様な条件が必要であ
り、pH5.5〜8.5、温度45〜65℃の範囲に於
いて目的は達成される。pHに就いてはこの範囲以外に
於いては遊離アミノ酸含量を上げることが困難である。
温度に就いてはこの範囲より下では遊離アミノ酸含量は
高くなる反面、RNA及びマンナンの分解がみられる。
また65℃を超えるとRNA及びマンナンの分解は無く
なるが、遊離アミノ酸含量は極端に低下して了う。遊離
アミノ酸含量が12%未満では著明な摂餌促進効果が認
められない。また40%を超える含量とするには自己消
化時間が極めて長くなり、腐敗等の問題が生じて来る。
よって遊離アミノ酸含量としては12%〜40%が好ま
しい。
程度行わせた後、80〜120℃好ましくは90〜10
0℃で加熱し、菌体内酵素の失活を行う。加熱時間は1
0分程度で充分である。次ぎに細胞壁溶解酵素を0.3
〜3%程度添加して、1〜5時間反応させる。この範囲
の時間内に於いては、先の工程を経て来た酵母は細胞壁
溶解酵素を添加しても、あまり多糖類の低分子化を伴わ
ずに固形分収率を上げることが出来る。これは細胞壁中
のグルカン・マンナンは蛋白質との複合体を形成してい
るが、加熱処理により蛋白質が変性して細胞壁構造が堅
固になり、低分子化が阻害を受けるものと考えられる。
反応時間が短いとβ−グルカン,マンナン含量が1%未
満となり、免疫活性が充分でない上に固形分収率が低下
して了う。これ以上長過ぎるとβ−グルカン,マンナン
含量は25%以上出せるが、必要以上に低分子化して了
い、免疫活性が低下して了う。よってβ−グルカン,マ
ンナン含量は共に1〜25%が好ましい。
ナーゼ,マンナナーゼを含有し、酵母細胞壁を溶解する
に充分な活性を有するものであれば構わないが、例えば
市販の細胞壁溶解酵素としては、YL−5(天野製薬
(株)製),ツニカーゼ(大和化成(株)製,キタラー
ゼ(クミアイ化学(株)製)などが挙げられる。引続き
5’−ホスホジエステラーゼ,5’−アデニル酸デアミ
ナーゼを添加し、5’−ヌクレオチド類を生成させる。
酵素添加量,酵素反応温度,pHは特に限定するもので
はなく、各々の酵素の最適条件下で行えばよい。反応終
了後、反応液は90℃に加熱し酵素を失活させた後、遠
心分離して上澄液を濃縮しエキス分として回収し、スプ
レードライ等の方法により乾燥させる。この様にして得
られた酵母エキスは、5’−イノシン酸・5’−グアニ
ル酸を共に対固形分当り1〜5%、遊離アミノ酸を12
〜40%含有しているため、強い摂餌促進効果を有して
いる。なお且つβ−グルカンを1〜25%、マンナンを
1〜25%含有しているため、優れた免疫増強活性を有
している。また固形分収率も50%以上あるため経済的
にも非常に有利であり、広く飼料添加物として利用出来
る。本発明品の飼料への添加剤は対象とする動物の種
類、週齢により異なってくるが、0.1〜20重量%、
好ましくは0.2〜5%の範囲で添加すれば本発明は達
成できる。
れに限定されるものではない。
5%糖蜜培地を用いて培養し、集菌洗浄後酵母スラリー
(菌体濃度15%)1000mlを調製した。pHを6
に調製した後、55℃にて18時間反応させた。反応
後、90℃、10分間加熱し菌体内酵素を失活させた後
に、細胞壁溶解酵素(商品名:YL−5(天野製薬
(株)製))を1.5g添加し55℃にて3時間反応さ
せた。次ぎに70℃まで加温し、5’−ホスホジエステ
ラーゼ(商品名:ヌクレアーゼ「アマノ」(天野製薬
(株)製))を0.3g添加しpH5に調製後、10時
間反応させた。続いて5’−アデニル酸デアミナーゼ
(商品名:デアミザイム(天野製薬(株)製))を0.
2g添加しpH5に調製後、10時間反応させた。反応
後、常法により処理し122gの酵母エキスを得た。こ
の酵母エキス中の5’−イノシン酸、5’−グアニル
酸、遊離アミノ酸含量を高速液体クロマトグラフを用い
て定量したところ、含量は各々2.5%、2.6%、4
5%であり固形分収率は81.3%であった。またβ−
グルカン及びマンナンの含量を試料を高速液体クロマト
グラフを用いて加水分解前後の差から定量したところ、
含量はそれぞれ9%、8%であった。更にこれ等の分子
量をゲル濾過法で求めたところ、各々6.3万、5.9
万であった。
し、集菌洗浄後、酵母スラリー(菌体濃度15%)10
00mlを調製した。pHを6.5に調製した後、60
℃で18時間自己消化反応を行った。その後95℃、1
0分間加熱し菌体内酵素を失活させた後、細胞壁溶解酵
素(商品名:ツニカーゼ(大和化成(株)製))を1.
8g添加し55℃にて2.5時間反応させた。反応後、
70℃まで加温し核酸分解酵素(商品名:ヌクレアーゼ
「アマノ」(天野製薬(株)製))を180mg添加し
9時間反応させた。その後、45℃まで温度を下げプロ
テアーゼ(商品名:アマノP(天野製薬(株)製))
1.8g、5’−アデニル酸デアミナーゼ(商品名:デ
アミザイム(天野製薬(株)製))200mgを添加し
10時間反応させた。冷却後、常法により処理し105
gの酵母エキスを得た。この酵母エキス中の5’−イノ
シン酸、5’−グアニル酸、遊離アミノ酸含量を高速液
体クロマトグラフを用いて定量したところ、含量は各々
3.6%、3.8%、35%であり固形分収率は70.
0%であった。またβ−グルカン及びマンナンの含量を
高速液体クロマトグラフを用いて定量したところ、含量
はそれぞれ12%、20%であった。更にこれ等の分子
量をゲル濾過法で求めたところ、各々7.2万、5.6
万であった。
ル酵母発底の酵母エキス、並びに哺乳期に摂餌促進剤と
して添加される市販のぶどう果汁の4つのものに於い
て、摂餌促進作用効果を調べた。
を0.2%添加して飼料を調製した。
育ゲージに収容し、対照と各試料が添加された飼料とを
14日間選択法により摂食させ、摂食量を比較した。な
お供試飼料箱は1日交代で置き場を交互に変えた。結果
は表2の通りである。(摂食量比:対照の人工乳の摂食
量を100に換算した値を示す(以下同じ))。
い、各種試料を0.2%添加した飼料を調製した。次ぎ
に母畜から離された1週齢の幼牛を各群6頭宛用い、実
施例1と同様な方法で評価した。結果は表3に示す通り
であった。
各種試料を0.2%添加した飼料を調製した。次ぎに1
週齢の幼雛を各群10羽宛用い、実施例1と同様な方法
で評価した。結果は表4に示す通りであった。
た。
を添加し、37℃にて30分間保温した。次いで、抗体
で感作した羊赤血球を加え、37℃にて60分間保温し
た後、羊赤血球の溶血度を測定することにより、試料よ
って活性化されなかった残存補体量を測定し、試料の補
体第二経路活性化作用を測定した。なお、比較のために
市販のビール酵母発底の酵母エキス、ザイモザン(Sigm
a株式会社製:酵母細胞壁成分の商品名)及び市販免疫
増強剤(エーザイ株式会社製:商品名ノイリッチ50
M)に就いて同時に抗補体活性試験を行った。その結果
を図1に示す。
に各試料を添加し、24時間後の培養上清中のグルコー
ス量を定量し、その消費量からマクロファージに対する
活性化作用を測定した。なお、比較のために市販のビー
ル酵母発底の酵母エキス及び市販免疫増強剤(エーザイ
株式会社製:商品名ノイリッチ50M)に就いても同時
にマクロファージ活性化試験を行った。その結果を図2
に示す。
8〜23g)の尾静脈中に、25倍に希釈したカーボン
粒子(ロットリングインキで代用)を注入し、注入後
1,3及び5分経過した後に、眼底静脈より採取した5
0μlの血液を3mlの0.1%炭酸ナトリウム溶液と
混合し、675nmの吸光度を測定したときのカーボン
粒子の血中消失を指標として食作用係数(K値)を算出
することにより、肝臓と脾臓のマクロファージ機能の測
定を行った。なお、比較のために市販のビール酵母発底
の酵母エキス並びに市販免疫増強剤(エーザイ株式会社
製:商品名ノイリッチ50M)に就いても同時にカーボ
ンクリアランステストを行った。その結果を表5に示
す。
た摂餌促進作用及び免疫増強作用を有する酵母エキスを
効率良く、しかも安価に得ることが出来る。またこのも
のは天然物であるために毒性も全く無く、安心して各種
感染症の発生予防に広く飼料に添加することが出来る。
販免疫増強剤(ノイリッチ50M)に就いての抗補体活
性試験結果を溶血阻止率(%)によって示した図であ
る。
増強剤(ノイリッチ50M),及び未添加の場合とに就
いてマクロファージ活性化試験を行ないグルコース消費
率(%)で示した図である。
Claims (8)
- 【請求項1】 5’−ヌクレオチド類として5’−イノ
シン酸,5’−グアニル酸を対固形分当り各々1〜5
%、遊離アミノ酸を対固形分当り12%〜40%、β−
グルカンを1%〜25%及びマンナンを1%〜25%含
有することを特徴とする摂餌促進作用及び免疫増強作用
を有する酵母エキス組成物。 - 【請求項2】 自己消化を行わせた後に加熱し、菌体内
酵素を総べて失活後、細胞壁溶解酵素を作用させ、更に
続いて5’−ホスホジエステラーゼ、5’−アデニル酸
デアミナーゼを作用させて5’−ヌクレオチドとしての
5’−イノシン酸,5’−グアニル酸含量,遊離アミノ
酸含量,β−グルカン及びマンナン含量をそれぞれ対固
形分当り1〜5%,対固形分当り1〜5%,対固形分当
り12%〜40%,1%〜25%及び1%〜25%に高
めることを特徴とする摂餌促進作用及び免疫増強作用を
有する酵母エキス組成物の製造法。 - 【請求項3】 自己消化条件が温度45〜65℃、pH
5.5〜8.5である請求項2に記載の酵母エキス組成
物の製造法。 - 【請求項4】 加熱時の温度が80〜120℃である請
求項2又は3に記載の酵母エキス組成物の製造法。 - 【請求項5】 酵母がトルラ酵母又はサッカロ酵母であ
る請求項2〜4中の何れか1項に記載の酵母エキス組成
物の製造法。 - 【請求項6】 酵母が亜硫酸パルプ廃液で培養した酵母
である請求項2〜5中の何れか1項に記載の酵母エキス
組成物の製造法。 - 【請求項7】 請求項1に記載の酵母エキス組成物を含
有することを特徴とする飼料。 - 【請求項8】 酵母エキス組成物を0.1〜20重量%
含有する請求項6に記載の飼料。
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CN101744145B (zh) * | 2008-12-19 | 2012-03-21 | 中国科学院海洋研究所 | 一种草鱼或鲤鱼用肉质风味改良剂及其制备方法 |
CN102987169A (zh) * | 2012-12-31 | 2013-03-27 | 南京同凯兆业生物技术有限责任公司 | 一种断奶仔猪核苷酸饲料添加剂 |
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JPH07184595A (ja) | 1995-07-25 |
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