JP2021502951A5 - - Google Patents
Download PDFInfo
- Publication number
- JP2021502951A5 JP2021502951A5 JP2019538254A JP2019538254A JP2021502951A5 JP 2021502951 A5 JP2021502951 A5 JP 2021502951A5 JP 2019538254 A JP2019538254 A JP 2019538254A JP 2019538254 A JP2019538254 A JP 2019538254A JP 2021502951 A5 JP2021502951 A5 JP 2021502951A5
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- vlp
- composition
- pentamer
- delivery system
- drug delivery
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 41
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 22
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 18
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 claims description 18
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 18
- 210000001218 Blood-Brain Barrier Anatomy 0.000 claims description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 7
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 claims description 6
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N Trimethylglycine Chemical group C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 5
- 230000002528 anti-freeze Effects 0.000 claims description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 claims description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 claims description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 claims description 4
- SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-M bromate Chemical compound [O-]Br(=O)=O SXDBWCPKPHAZSM-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L cacl2 Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XKUUMWKWUZRRPD-UHFFFAOYSA-N heptan-2-amine;sulfuric acid Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O.CCCCCC(C)[NH3+].CCCCCC(C)[NH3+] XKUUMWKWUZRRPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000035699 permeability Effects 0.000 claims description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 claims description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 2qpq Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N Cesium Chemical compound [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 2
- 208000009025 Nervous System Disease Diseases 0.000 claims description 2
- 206010029305 Neurological disorder Diseases 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K [O-]P([O-])([O-])=O Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 230000000996 additive Effects 0.000 claims description 2
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 claims description 2
- 230000024126 agglutination involved in conjugation with cellular fusion Effects 0.000 claims description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 2
- 229940027983 antiseptics and disinfectants Quaternary ammonium compounds Drugs 0.000 claims description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229910001901 bromine monoxide radical Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000000684 bromosyl group Chemical group O=Br[*] 0.000 claims description 2
- 229910052792 caesium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000001809 detectable Effects 0.000 claims description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M dihydrogenphosphate Chemical compound OP(O)([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-O dimethylaminium Chemical compound C[NH2+]C ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxyl anion Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 2
- ICIWUVCWSCSTAQ-UHFFFAOYSA-M iodate Chemical compound [O-]I(=O)=O ICIWUVCWSCSTAQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N lithium Chemical group [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-L phosphate Chemical compound OP([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 claims description 2
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 claims description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 2
- 150000003856 quaternary ammonium compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- IGLNJRXAVVLDKE-UHFFFAOYSA-N rubidium Chemical compound [Rb] IGLNJRXAVVLDKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052701 rubidium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 claims description 2
- QEMXHQIAXOOASZ-UHFFFAOYSA-N tetramethylammonium Chemical compound C[N+](C)(C)C QEMXHQIAXOOASZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 claims 6
- 210000000234 Capsid Anatomy 0.000 claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase family Proteins 0.000 description 1
- 238000003670 luciferase enzyme activity assay Methods 0.000 description 1
Description
次の工程において、これらのサンプルを、ルシフェラーゼアッセイにおいて使用した（図９Ｂ）。予測外なことには、そのルシフェラーゼ活性は、硫酸アンモニウムを含む組成物中に貯蔵されたＶＬＰによって強力に増大された。ベタインはまた、凍結防止添加剤なしのサンプルおよび他の試験した凍結防止添加剤と比較した場合に有利であった。従って、凍結防止添加剤、特に硫酸アンモニウムの使用は、ＶＬＰの安定性をかなり増大させ、その装填ＶＬＰの感染性およびカーゴ送達有効性を増大させた。繰り返すと、この効果は、そのＶＬＰが迅速に凍結されたか（黒い棒）またはゆっくりと凍結されたか（白い棒）に関わらず無関係であった。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
Ｊｏｈｎ Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む薬物送達システムを提供するための方法であって、該方法は、以下の工程：
ａ） ＶＰ１タンパク質を含む組成物を提供する工程、
ｂ） 該ａ）の組成物の該ＶＰ１タンパク質を、ＶＬＰへとアセンブルするように該ＶＰ１を誘導する条件に曝す工程、
ｃ） 該ｂ）の組成物の該ＶＬＰを、該ＶＬＰをペンタマーへと脱アセンブルする条件に曝す工程、
ｄ） 該（ｃ）の組成物の該ペンタマーを、ＶＬＰへと再アセンブルするように該ペンタマーを誘導する条件に曝す工程
ｅ） 該ｄ）の組成物の該ＶＬＰを、該ＶＬＰをペンタマーへと脱アセンブルする条件へと曝す工程、
ｆ） 該ｅ）の組成物の該ペンタマーを、カーゴと会合したＶＬＰへとアセンブルするように、該カーゴおよび該ペンタマーを誘導する条件に曝す工程、
を包含する方法。
(項目２)
工程ｄ）の前に、前記ｃ）の組成物の前記ペンタマーは、該ペンタマーの凝集を誘導する条件へと曝される、項目１に記載の方法。
(項目３)
前記凝集は、沈殿剤、好ましくは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルコール、塩またはこれらの組み合わせからなる群より選択される沈殿剤によって、最も好ましくは塩によって誘導される、項目２に記載の方法。
(項目４)
前記塩は、シトレート（Ｃ６Ｈ５Ｏ７ ３−）、ホスフェート（ＰＯ４ ３−）、スルフェート（ＳＯ４ ２−）、リン酸水素（ＨＰＯ４ ２−）、リン酸二水素（Ｈ２ＰＯ４−）、ヨウ素酸（ＩＯ３ −）、ヒドロキシド（ＯＨ−）、フルオリド（Ｆ−）、臭素酸（ＢｒＯ３ −）またはアセテート（ＣＨ３ＣＯＯ−）、四級アンモニウム化合物（ＮＲ４ ＋）であって、Ｒは、アルキル基もしくはアリール基であるもの、好ましくはテトラメチルアンモニウム（（ＣＨ３）４Ｎ＋）またはジメチルアンモニウム（（ＣＨ３）２Ｎ２ ＋）、アンモニウム（ＮＨ４ ＋）、カリウム（Ｋ＋）、セシウム（Ｃｓ＋）、ルビジウム（Ｒｂ＋）またはリチウム（Ｌｉ＋）からなる群より選択される、アニオンおよびカチオンを含み、好ましくはＳＯ４ ２−および／またはＮＨ４ ＋を含む、項目３に記載の方法。
(項目５)
前記塩は、（ＮＨ４）２ＳＯ４、Ｋ２ＳＯ４、Ｎａ２ＳＯ４、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４およびＮａ２ＨＰＯ４からなる群より選択され、好ましくは（ＮＨ４）２ＳＯ４である、項目３または４に記載の方法。
(項目６)
工程ｄ）は、ｄ）の組成物のペンタマーを、該ペンタマーの凝集を誘導する条件から分離することを包含する、項目２〜５のいずれかに記載の方法。
(項目７)
前記分離は、塩および緩衝液、ならびに６〜８．５の、好ましくは６．５〜８．５の、より好ましくは７〜８の、最も好ましくは７．２〜７．５の、特に７．５のｐＨを含む組成物に対する透析によって達成される、項目６に記載の方法。
(項目８)
前記工程ｄ）の組成物は、
ａ）０．３未満、好ましくは０．２未満、好ましくは０．１未満の多分散指数（ＰＤＩ）、より好ましくは０．０１〜０．０９の間の範囲の多分散指数、および／または
ｂ）ＶＬＰのうちの少なくとも７０％が２０ｎｍ〜７０ｎｍの、好ましくは３０ｎｍ〜７０ｎｍの、より好ましくは３５ｎｍ〜６５ｎｍの、より好ましくは４０〜６０ｎｍの平均直径を有する、
によって特徴づけられる、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目９)
約−８０℃〜約４℃の温度において少なくとも１０時間、１５時間、２０時間、好ましくは少なくとも２４時間にわたって、より好ましくは約−８０℃の温度において少なくとも２４時間にわたって、前記工程ｄ）の組成物からのＶＬＰを貯蔵する工程を包含する、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目１０)
貯蔵する工程は、凍結防止添加剤、好ましくはポリオール、糖、無機塩、有機塩、アミノ酸、ポリマー、エクストリモライト、またはこれらの誘導体もしくは組み合わせを含む群から選択される凍結防止添加剤を含む組成物の中で起こる、項目９に記載の方法。
(項目１１)
前記無機塩は、スルフェートアニオンを含み、好ましくは硫酸アンモニウムであり、そして／または前記アミノ酸は、グリシン、グルタミン、プロリン、アラニンであり、そして／または前記アミノ酸誘導体は、ベタインである、項目１０に記載の方法。
(項目１２)
前記工程ｂ）のＶＬＰ、前記工程ｃ）のペンタマーおよび／または前記工程ｄ）のＶＬＰは精製に供される、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目１３)
前記ＶＰ１は、配列番号１に従うアミノ酸配列と、その全長にわたって少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、好ましくは配列番号１のアミノ酸配列を有する、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目１４)
前記ＶＰ１タンパク質のヌクレオチド配列は、配列番号２のヌクレオチド配列と、その全長にわたって少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％同一であり、好ましくは配列番号２のヌクレオチド配列である、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目１５)
以下のパラメーターのうちの１またはこれより多くによって特徴づけられる、Ｊｏｈｎ Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む組成物：
ａ）０．３未満、好ましくは０．２未満、好ましくは０．１未満、より好ましくは０．０１〜０．０９の間の範囲の多分散指数（ＰＤＩ）、
ｂ）ＶＬＰのうちの少なくとも７０％が、２０ｎｍ〜７０ｎｍ、好ましくは３０ｎｍ〜７０ｎｍの、より好ましくは３５ｎｍ〜６５ｎｍの、より好ましくは４０〜６０ｎｍの平均直径を有する、
ｃ）前記組成物内のＶＬＰ含有量が、少なくとも８０％（ｖ／ｖ）。好ましくは少なくとも８５％（ｖ／ｖ）、好ましくは少なくとも９０％（ｖ／ｖ）、好ましくは少なくとも９５％（ｖ／ｖ）。
(項目１６)
前述の項目のいずれかに記載の方法によって得られ得る、薬物送達システム。
(項目１７)
必要性のある被験体における治療および／または診断の方法における使用のための、好ましくは神経学的障害の、特にＣＮＳ疾患の処置のための、項目１６に記載の薬物送達システム。
(項目１８)
項目１の工程ａ）〜ｅ）、および前記ｅ）の組成物の前記ペンタマーをＶＬＰへとアセンブルするように該ペンタマーを誘導する条件に曝すというさらなる工程を包含する方法によって得られ得る、Ｊｏｈｎ Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
(項目１９)
前記ＶＬＰは血液脳関門（ＢＢＢ）を横断する、項目１６もしくは１７に記載の薬物送達システム、または項目１８に記載のＶＬＰ。
(項目２０)
ＶＬＰは、前記薬物送達システムの投与後に、好ましくはｉ．ｖ．投与後に、１０日間以内にＣＮＳにおいて検出可能である、項目１９に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
(項目２１)
前記ＶＬＰは、生理学的に無傷のＢＢＢを横断する、項目１９または２０に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
(項目２２)
前記横断は、前記ＢＢＢの完全性の喪失または透過性の増大を要求しない、項目２０に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
(項目２３)
前記被験体は、彼のＢＢＢの透過性を増大させるか、またはその混乱を誘導するという処置を受けたことがない、項目１７に記載の薬物送達システム。
(項目２４)
塩および緩衝液を含み、そしてｐＨ７．０〜８．０、好ましくは７．５の、Ｊｏｈｎ Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む組成物であって、該組成物は、好ましくは：
ａ）１２０ｍＭ〜１７０ｍＭ ＮａＣｌ、好ましくは１５０ｍＭ ＮａＣｌ、
ｂ）１〜５ｍＭ ＣａＣｌ２、好ましくは２ｍＭ ＣａＣｌ２、および
ｃ）５〜３０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、好ましくは１０〜２５ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、より好ましくは１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、
を含む、組成物。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
Ｊｏｈｎ Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む薬物送達システムを提供するための方法であって、該方法は、以下の工程：
ａ） ＶＰ１タンパク質を含む組成物を提供する工程、
ｂ） 該ａ）の組成物の該ＶＰ１タンパク質を、ＶＬＰへとアセンブルするように該ＶＰ１を誘導する条件に曝す工程、
ｃ） 該ｂ）の組成物の該ＶＬＰを、該ＶＬＰをペンタマーへと脱アセンブルする条件に曝す工程、
ｄ） 該（ｃ）の組成物の該ペンタマーを、ＶＬＰへと再アセンブルするように該ペンタマーを誘導する条件に曝す工程
ｅ） 該ｄ）の組成物の該ＶＬＰを、該ＶＬＰをペンタマーへと脱アセンブルする条件へと曝す工程、
ｆ） 該ｅ）の組成物の該ペンタマーを、カーゴと会合したＶＬＰへとアセンブルするように、該カーゴおよび該ペンタマーを誘導する条件に曝す工程、
を包含する方法。
(項目２)
工程ｄ）の前に、前記ｃ）の組成物の前記ペンタマーは、該ペンタマーの凝集を誘導する条件へと曝される、項目１に記載の方法。
(項目３)
前記凝集は、沈殿剤、好ましくは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルコール、塩またはこれらの組み合わせからなる群より選択される沈殿剤によって、最も好ましくは塩によって誘導される、項目２に記載の方法。
(項目４)
前記塩は、シトレート（Ｃ６Ｈ５Ｏ７ ３−）、ホスフェート（ＰＯ４ ３−）、スルフェート（ＳＯ４ ２−）、リン酸水素（ＨＰＯ４ ２−）、リン酸二水素（Ｈ２ＰＯ４−）、ヨウ素酸（ＩＯ３ −）、ヒドロキシド（ＯＨ−）、フルオリド（Ｆ−）、臭素酸（ＢｒＯ３ −）またはアセテート（ＣＨ３ＣＯＯ−）、四級アンモニウム化合物（ＮＲ４ ＋）であって、Ｒは、アルキル基もしくはアリール基であるもの、好ましくはテトラメチルアンモニウム（（ＣＨ３）４Ｎ＋）またはジメチルアンモニウム（（ＣＨ３）２Ｎ２ ＋）、アンモニウム（ＮＨ４ ＋）、カリウム（Ｋ＋）、セシウム（Ｃｓ＋）、ルビジウム（Ｒｂ＋）またはリチウム（Ｌｉ＋）からなる群より選択される、アニオンおよびカチオンを含み、好ましくはＳＯ４ ２−および／またはＮＨ４ ＋を含む、項目３に記載の方法。
(項目５)
前記塩は、（ＮＨ４）２ＳＯ４、Ｋ２ＳＯ４、Ｎａ２ＳＯ４、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４およびＮａ２ＨＰＯ４からなる群より選択され、好ましくは（ＮＨ４）２ＳＯ４である、項目３または４に記載の方法。
(項目６)
工程ｄ）は、ｄ）の組成物のペンタマーを、該ペンタマーの凝集を誘導する条件から分離することを包含する、項目２〜５のいずれかに記載の方法。
(項目７)
前記分離は、塩および緩衝液、ならびに６〜８．５の、好ましくは６．５〜８．５の、より好ましくは７〜８の、最も好ましくは７．２〜７．５の、特に７．５のｐＨを含む組成物に対する透析によって達成される、項目６に記載の方法。
(項目８)
前記工程ｄ）の組成物は、
ａ）０．３未満、好ましくは０．２未満、好ましくは０．１未満の多分散指数（ＰＤＩ）、より好ましくは０．０１〜０．０９の間の範囲の多分散指数、および／または
ｂ）ＶＬＰのうちの少なくとも７０％が２０ｎｍ〜７０ｎｍの、好ましくは３０ｎｍ〜７０ｎｍの、より好ましくは３５ｎｍ〜６５ｎｍの、より好ましくは４０〜６０ｎｍの平均直径を有する、
によって特徴づけられる、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目９)
約−８０℃〜約４℃の温度において少なくとも１０時間、１５時間、２０時間、好ましくは少なくとも２４時間にわたって、より好ましくは約−８０℃の温度において少なくとも２４時間にわたって、前記工程ｄ）の組成物からのＶＬＰを貯蔵する工程を包含する、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目１０)
貯蔵する工程は、凍結防止添加剤、好ましくはポリオール、糖、無機塩、有機塩、アミノ酸、ポリマー、エクストリモライト、またはこれらの誘導体もしくは組み合わせを含む群から選択される凍結防止添加剤を含む組成物の中で起こる、項目９に記載の方法。
(項目１１)
前記無機塩は、スルフェートアニオンを含み、好ましくは硫酸アンモニウムであり、そして／または前記アミノ酸は、グリシン、グルタミン、プロリン、アラニンであり、そして／または前記アミノ酸誘導体は、ベタインである、項目１０に記載の方法。
(項目１２)
前記工程ｂ）のＶＬＰ、前記工程ｃ）のペンタマーおよび／または前記工程ｄ）のＶＬＰは精製に供される、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目１３)
前記ＶＰ１は、配列番号１に従うアミノ酸配列と、その全長にわたって少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、好ましくは配列番号１のアミノ酸配列を有する、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目１４)
前記ＶＰ１タンパク質のヌクレオチド配列は、配列番号２のヌクレオチド配列と、その全長にわたって少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％同一であり、好ましくは配列番号２のヌクレオチド配列である、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目１５)
以下のパラメーターのうちの１またはこれより多くによって特徴づけられる、Ｊｏｈｎ Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む組成物：
ａ）０．３未満、好ましくは０．２未満、好ましくは０．１未満、より好ましくは０．０１〜０．０９の間の範囲の多分散指数（ＰＤＩ）、
ｂ）ＶＬＰのうちの少なくとも７０％が、２０ｎｍ〜７０ｎｍ、好ましくは３０ｎｍ〜７０ｎｍの、より好ましくは３５ｎｍ〜６５ｎｍの、より好ましくは４０〜６０ｎｍの平均直径を有する、
ｃ）前記組成物内のＶＬＰ含有量が、少なくとも８０％（ｖ／ｖ）。好ましくは少なくとも８５％（ｖ／ｖ）、好ましくは少なくとも９０％（ｖ／ｖ）、好ましくは少なくとも９５％（ｖ／ｖ）。
(項目１６)
前述の項目のいずれかに記載の方法によって得られ得る、薬物送達システム。
(項目１７)
必要性のある被験体における治療および／または診断の方法における使用のための、好ましくは神経学的障害の、特にＣＮＳ疾患の処置のための、項目１６に記載の薬物送達システム。
(項目１８)
項目１の工程ａ）〜ｅ）、および前記ｅ）の組成物の前記ペンタマーをＶＬＰへとアセンブルするように該ペンタマーを誘導する条件に曝すというさらなる工程を包含する方法によって得られ得る、Ｊｏｈｎ Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
(項目１９)
前記ＶＬＰは血液脳関門（ＢＢＢ）を横断する、項目１６もしくは１７に記載の薬物送達システム、または項目１８に記載のＶＬＰ。
(項目２０)
ＶＬＰは、前記薬物送達システムの投与後に、好ましくはｉ．ｖ．投与後に、１０日間以内にＣＮＳにおいて検出可能である、項目１９に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
(項目２１)
前記ＶＬＰは、生理学的に無傷のＢＢＢを横断する、項目１９または２０に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
(項目２２)
前記横断は、前記ＢＢＢの完全性の喪失または透過性の増大を要求しない、項目２０に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
(項目２３)
前記被験体は、彼のＢＢＢの透過性を増大させるか、またはその混乱を誘導するという処置を受けたことがない、項目１７に記載の薬物送達システム。
(項目２４)
塩および緩衝液を含み、そしてｐＨ７．０〜８．０、好ましくは７．５の、Ｊｏｈｎ Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む組成物であって、該組成物は、好ましくは：
ａ）１２０ｍＭ〜１７０ｍＭ ＮａＣｌ、好ましくは１５０ｍＭ ＮａＣｌ、
ｂ）１〜５ｍＭ ＣａＣｌ２、好ましくは２ｍＭ ＣａＣｌ２、および
ｃ）５〜３０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、好ましくは１０〜２５ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、より好ましくは１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、
を含む、組成物。
Claims (24)
- Ｊｏｈｎ Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む薬物送達システムを提供するための方法であって、該方法は、以下の工程：
ａ） ＶＰ１タンパク質を含む組成物を提供する工程、
ｂ） 該ａ）の組成物の該ＶＰ１タンパク質を、ＶＬＰへとアセンブルするように該ＶＰ１を誘導する条件に曝す工程、
ｃ） 該ｂ）の組成物の該ＶＬＰを、該ＶＬＰをペンタマーへと脱アセンブルする条件に曝す工程、
ｄ） 該（ｃ）の組成物の該ペンタマーを、ＶＬＰへと再アセンブルするように該ペンタマーを誘導する条件に曝す工程
ｅ） 該ｄ）の組成物の該ＶＬＰを、該ＶＬＰをペンタマーへと脱アセンブルする条件へと曝す工程、
ｆ） 該ｅ）の組成物の該ペンタマーを、カーゴと会合したＶＬＰへとアセンブルするように、該カーゴおよび該ペンタマーを誘導する条件に曝す工程、
を包含する方法。 - 工程ｄ）の前に、前記ｃ）の組成物の前記ペンタマーは、該ペンタマーの凝集を誘導する条件へと曝される、請求項１に記載の方法。
- 前記凝集は、沈殿剤、好ましくは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルコール、塩またはこれらの組み合わせからなる群より選択される沈殿剤によって、最も好ましくは塩によって誘導される、請求項２に記載の方法。
- 前記塩は、シトレート（Ｃ６Ｈ５Ｏ７ ３−）、ホスフェート（ＰＯ４ ３−）、スルフェート（ＳＯ４ ２−）、リン酸水素（ＨＰＯ４ ２−）、リン酸二水素（Ｈ２ＰＯ４−）、ヨウ素酸（ＩＯ３ −）、ヒドロキシド（ＯＨ−）、フルオリド（Ｆ−）、臭素酸（ＢｒＯ３ −）またはアセテート（ＣＨ３ＣＯＯ−）、四級アンモニウム化合物（ＮＲ４ ＋）であって、Ｒは、アルキル基もしくはアリール基であるもの、好ましくはテトラメチルアンモニウム（（ＣＨ３）４Ｎ＋）またはジメチルアンモニウム（（ＣＨ３）２Ｎ２ ＋）、アンモニウム（ＮＨ４ ＋）、カリウム（Ｋ＋）、セシウム（Ｃｓ＋）、ルビジウム（Ｒｂ＋）またはリチウム（Ｌｉ＋）からなる群より選択される、アニオンおよびカチオンを含み、好ましくはＳＯ４ ２−および／またはＮＨ４ ＋を含む、請求項３に記載の方法。
- 前記塩は、（ＮＨ４）２ＳＯ４、Ｋ２ＳＯ４、Ｎａ２ＳＯ４、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４およびＮａ２ＨＰＯ４からなる群より選択され、好ましくは（ＮＨ４）２ＳＯ４である、請求項３または４に記載の方法。
- 工程ｄ）は、ｄ）の組成物のペンタマーを、該ペンタマーの凝集を誘導する条件から分離することを包含する、請求項２〜５のいずれかに記載の方法。
- 前記分離は、塩および緩衝液、ならびに６〜８．５の、好ましくは６．５〜８．５の、より好ましくは７〜８の、最も好ましくは７．２〜７．５の、特に７．５のｐＨを含む組成物に対する透析によって達成される、請求項６に記載の方法。
- 前記工程ｄ）の組成物は、
ａ）０．３未満、好ましくは０．２未満、好ましくは０．１未満の、動的光散乱法（ＤＬＳ）によって決定された多分散指数（ＰＤＩ）、より好ましくは０．０１〜０．０９の間の範囲の、動的光散乱法（ＤＬＳ）によって決定された多分散指数、および／または
ｂ）ＶＬＰのうちの少なくとも７０％が２０ｎｍ〜７０ｎｍの、好ましくは３０ｎｍ〜７０ｎｍの、より好ましくは３５ｎｍ〜６５ｎｍの、より好ましくは４０〜６０ｎｍの平均直径を有する、
によって特徴づけられる、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。 - 約−８０℃〜約４℃の温度において少なくとも１０時間、１５時間、２０時間、好ましくは少なくとも２４時間にわたって、より好ましくは約−８０℃の温度において少なくとも２４時間にわたって、前記工程ｄ）の組成物からのＶＬＰを貯蔵する工程を包含する、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
- 貯蔵する工程は、凍結防止添加剤、好ましくはポリオール、糖、無機塩、有機塩、アミノ酸、ポリマー、エクストリモライト、またはこれらの誘導体もしくは組み合わせを含む群から選択される凍結防止添加剤を含む組成物の中で起こる、請求項９に記載の方法。
- 前記無機塩は、スルフェートアニオンを含み、好ましくは硫酸アンモニウムであり、そして／または前記アミノ酸は、グリシン、グルタミン、プロリン、アラニンであり、そして／または前記アミノ酸誘導体は、ベタインである、請求項１０に記載の方法。
- 前記工程ｂ）のＶＬＰ、前記工程ｃ）のペンタマーおよび／または前記工程ｄ）のＶＬＰは精製に供される、請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
- 前記ＶＰ１は、配列番号１に従うアミノ酸配列と、その全長にわたって少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、好ましくは配列番号１のアミノ酸配列を有し、ここで、該ＶＰ１はキャプシドへとアセンブルし得る、請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。
- 前記ＶＰ１タンパク質のヌクレオチド配列は、配列番号２のヌクレオチド配列と、その全長にわたって少なくとも９０％同一であり、好ましくは配列番号２のヌクレオチド配列であり、ここで、該ＶＰ１タンパク質はキャプシドへとアセンブルし得る、請求項１〜１３のいずれかに記載の方法。
- 以下のパラメーターのうちの１またはこれより多くによって特徴づけられる、Ｊｏｈｎ Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む組成物であって、請求項１に記載の方法で得られた組成物：
ａ）０．３未満、好ましくは０．２未満、好ましくは０．１未満、より好ましくは０．０１〜０．０９の間の範囲の、動的光散乱法（ＤＬＳ）によって決定された多分散指数（ＰＤＩ）、
ｂ）前記ＶＬＰのうちの少なくとも７０％が、２０ｎｍ〜７０ｎｍ、好ましくは３０ｎｍ〜７０ｎｍの、より好ましくは３５ｎｍ〜６５ｎｍの、より好ましくは４０〜６０ｎｍの平均直径を有する、
ｃ）ＶＬＰ含有量が、少なくとも８０％（ｖ／ｖ）。好ましくは少なくとも８５％（ｖ／ｖ）、好ましくは少なくとも９０％（ｖ／ｖ）、好ましくは少なくとも９５％（ｖ／ｖ）。 - 請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法によって得られた、薬物送達システム。
- 必要性のある被験体における治療および／または診断の方法における使用のための、好ましくは神経学的障害の、特にＣＮＳ疾患の処置のための、請求項１６に記載の薬物送達システム。
- 請求項１の工程ａ）〜ｅ）、および前記ｅ）の組成物の前記ペンタマーをＶＬＰへとアセンブルするように該ペンタマーを誘導する条件に曝すというさらなる工程を包含する方法によって得られた、Ｊｏｈｎ Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
- 前記ＶＬＰは血液脳関門（ＢＢＢ）を横断する、請求項１６もしくは１７に記載の薬物送達システム、または請求項１８に記載のＶＬＰ。
- 前記ＶＬＰは、前記薬物送達システムの投与後に、好ましくはｉ．ｖ．投与後に、１０日間以内にＣＮＳにおいて検出可能である、請求項１９に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
- 前記ＶＬＰは、生理学的に無傷のＢＢＢを横断する、請求項１９または２０に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
- 前記横断は、前記ＢＢＢの完全性の喪失または透過性の増大を要求しない、請求項２０に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
- 前記被験体は、彼のＢＢＢの透過性を増大させるか、またはその混乱を誘導するという処置を受けたことがない、請求項１７に記載の薬物送達システム。
- 塩および緩衝液を含み、そしてｐＨ７．０〜８．０、好ましくは７．５の、請求項１５に記載の組成物であって、該組成物は、好ましくは：
ａ）１２０ｍＭ〜１７０ｍＭ ＮａＣｌ、好ましくは１５０ｍＭ ＮａＣｌ、
ｂ）１〜５ｍＭ ＣａＣｌ２、好ましくは２ｍＭ ＣａＣｌ２、および
ｃ）５〜３０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、好ましくは１０〜２５ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、より好ましくは１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、
を含む、組成物。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/EP2018/085699 WO2020125962A1 (en) | 2018-12-18 | 2018-12-18 | A novel drug delivery system and methods providing thereof |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2021502951A JP2021502951A (ja) | 2021-02-04 |
| JP2021502951A5 true JP2021502951A5 (ja) | 2021-04-30 |
| JP6884432B2 JP6884432B2 (ja) | 2021-06-09 |
Family
ID=65009711
Family Applications (3)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2019538254A Active JP6884432B2 (ja) | 2018-12-18 | 2018-12-18 | 新規薬物送達システムおよびそれを提供する方法 |
| JP2019227342A Pending JP2020105169A (ja) | 2018-12-18 | 2019-12-17 | リソソーム蓄積症の処置のためのｖｌｐ |
| JP2022521659A Pending JP2022551531A (ja) | 2018-12-18 | 2020-10-13 | Ｊｏｈｎ ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルスＶＬＰを提供するための方法 |
Family Applications After (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2019227342A Pending JP2020105169A (ja) | 2018-12-18 | 2019-12-17 | リソソーム蓄積症の処置のためのｖｌｐ |
| JP2022521659A Pending JP2022551531A (ja) | 2018-12-18 | 2020-10-13 | Ｊｏｈｎ ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルスＶＬＰを提供するための方法 |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US11279938B2 (ja) |
| EP (2) | EP3688147B8 (ja) |
| JP (3) | JP6884432B2 (ja) |
| CN (3) | CN111587289B (ja) |
| BR (3) | BR112019014209A2 (ja) |
| CA (3) | CA3049197C (ja) |
| DK (1) | DK3688147T3 (ja) |
| ES (1) | ES2933275T3 (ja) |
| HU (1) | HUE060952T2 (ja) |
| PL (1) | PL3688147T3 (ja) |
| SI (1) | SI3688147T1 (ja) |
| WO (4) | WO2020125962A1 (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA3184307A1 (en) * | 2020-05-22 | 2021-11-25 | Neuway Pharma Gmbh | Vlp for the treatment of leukodystrophies |
| WO2022227287A1 (zh) * | 2021-04-25 | 2022-11-03 | 中南大学 | Dnj及其衍生物在制备预防和/或治疗肺动脉高压药物中的应用 |
| EP4166672A1 (en) | 2021-10-15 | 2023-04-19 | NEUWAY Pharma GmbH | A novel method for purification of protein- or peptide-based capsules |
| WO2024079361A1 (en) | 2022-10-14 | 2024-04-18 | Neuway Pharma Gmbh | A PROTEIN- OR PEPTIDE-BASED CAPSULE (PPC), PREFERABLY A VLP, LOADED WITH A MESSENGER RNA (mRNA) AND A METHOD OF PRODUCTION AND PURIFICATION THEREOF |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19543553B4 (de) | 1995-11-22 | 2009-04-09 | Deutsches Primatenzentrum Gmbh | VP-Antigene des JC-Virus |
| US20050158296A1 (en) | 2002-01-11 | 2005-07-21 | Starr Christopher M. | Use of p97 as an enzyme delivery system for the delivery of therapeutic lysosomal enzymes |
| US7442372B2 (en) | 2003-08-29 | 2008-10-28 | Biomarin Pharmaceutical Inc. | Delivery of therapeutic compounds to the brain and other tissues |
| FR2920158B1 (fr) | 2007-08-24 | 2010-03-12 | Centre Nat Rech Scient | Production de plasmides et expression de proteines recombinantes dans des cellules cultivees sans antibiotiques |
| EP2554664A1 (de) | 2011-08-02 | 2013-02-06 | Life Science Inkubator | Verfahren zur Aufreinigung von Virus-ähnlichen Partikeln (VLP) |
| EP2636746A1 (en) | 2012-03-06 | 2013-09-11 | Life Science Inkubator | A novel drug delivery system based on JCV-VLP |
| BR112016025819B1 (pt) * | 2014-05-14 | 2022-08-16 | Universitat Autònoma De Barcelona | Vetores de vírus adeno-associados para o tratamento de doenças de depósito lisossômico |
-
2018
- 2018-12-18 US US16/476,724 patent/US11279938B2/en active Active
- 2018-12-18 DK DK18830794.6T patent/DK3688147T3/da active
- 2018-12-18 HU HUE18830794A patent/HUE060952T2/hu unknown
- 2018-12-18 WO PCT/EP2018/085699 patent/WO2020125962A1/en unknown
- 2018-12-18 CA CA3049197A patent/CA3049197C/en active Active
- 2018-12-18 SI SI201830824T patent/SI3688147T1/sl unknown
- 2018-12-18 EP EP18830794.6A patent/EP3688147B8/en active Active
- 2018-12-18 CN CN201880006448.0A patent/CN111587289B/zh active Active
- 2018-12-18 JP JP2019538254A patent/JP6884432B2/ja active Active
- 2018-12-18 ES ES18830794T patent/ES2933275T3/es active Active
- 2018-12-18 BR BR112019014209-6A patent/BR112019014209A2/pt unknown
- 2018-12-18 PL PL18830794.6T patent/PL3688147T3/pl unknown
-
2019
- 2019-04-26 WO PCT/EP2019/060814 patent/WO2020126116A1/en active Application Filing
- 2019-10-14 WO PCT/EP2019/077807 patent/WO2020126151A1/en active Application Filing
- 2019-10-14 CA CA3121689A patent/CA3121689A1/en active Pending
- 2019-10-14 BR BR112021010758-4A patent/BR112021010758A2/pt unknown
- 2019-10-14 US US17/311,480 patent/US20230157972A1/en active Pending
- 2019-12-16 CA CA3065548A patent/CA3065548A1/en active Pending
- 2019-12-16 BR BR102019026837-9A patent/BR102019026837A2/pt unknown
- 2019-12-17 CN CN201911300544.9A patent/CN111333702A/zh active Pending
- 2019-12-17 US US16/717,033 patent/US20200224205A1/en not_active Abandoned
- 2019-12-17 JP JP2019227342A patent/JP2020105169A/ja active Pending
-
2020
- 2020-10-13 EP EP20789150.8A patent/EP4045638A1/en active Pending
- 2020-10-13 WO PCT/EP2020/078733 patent/WO2021074123A1/en unknown
- 2020-10-13 JP JP2022521659A patent/JP2022551531A/ja active Pending
- 2020-10-13 CN CN202080081855.5A patent/CN115135757A/zh active Pending
-
2022
- 2022-11-07 US US18/053,198 patent/US20230159938A1/en active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2021502951A5 (ja) | ||
| JP6483299B2 (ja) | ジクアホソル含有点眼液 | |
| DE60020570T2 (de) | Rotavirus impfstoffformulierungen | |
| JP5388842B2 (ja) | インフルエンザワクチン含有凍結乾燥製剤、及びその製造方法 | |
| JP2018503595A5 (ja) | ||
| JPH0348170B2 (ja) | ||
| WO2002011540A1 (en) | Rotavirus vaccine formulations | |
| KR20070085818A (ko) | 안정하고 여과 가능한 외피보유 바이러스 조성물 | |
| UA127829C2 (uk) | Стабільна ліофілізована імуногенна композиція, яка містить живий атенуйований рекомбінантний флавівірус, спосіб і набір для її отримання та застосування | |
| DE69738271T2 (de) | Rotavirus-impfstoff | |
| JP2019533679A5 (ja) | ||
| JP2017525679A5 (ja) | ||
| JP2012149057A (ja) | ジクアホソル含有点眼液およびその製造方法、不溶性析出物発生の抑制方法 | |
| JPS6314729A (ja) | 生ワクチン用改良安定剤、その製造法およびそれを含有するワクチン | |
| JPS6129327B2 (ja) | ||
| JP4558652B2 (ja) | ウイルス生産の改善 | |
| JP2016504025A (ja) | 鉱物塩の製造方法及び鉱物塩生成物 | |
| KR20150116854A (ko) | 바이러스―유사 입자의 방출 방법 | |
| JP2017079791A5 (ja) | ||
| JPWO2021168100A5 (ja) | ||
| AU2008202660B2 (en) | Rotavirus vaccine formulations | |
| AT227879B (de) | Verfahren zur Herstellung eines stabilen Vaccins | |
| RU2020142735A (ru) | Состав слитого белка ctla4-ig | |
| Malakian et al. | Effect of salt on Recombinant Interferon Beta-1b function | |
| DD266503A1 (de) | Verfahren zur stabilisierung von fibrinogen |