JP2017075960A - 凝固制御剤およびそれを含む装置 - Google Patents
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Abstract
Description
Rは、−NR1R2;−NO2;1〜6個の炭素原子を有する置換または非置換の、直鎖または分岐鎖アルキル基;ハロゲン;−CO(O)R1;−CO−NR1R2;−OH;または−OR1からなる群より選択され、
血清サンプル中のフィブリン塊に対するプロタミンの軽減作用
まず硫酸プロタミンを約0.5Mの塩酸に約250mg/mLの濃度で再懸濁した。次にこの溶液を5Nの水酸化ナトリウムで約pH6まで滴定した。持続的なプロタミンの低いpHへの曝露は加水分解を引き起こして活性が失われると考えられているため、この約pH6までの滴定は即座に行われた。また、プロタミン溶液を製造するのにより希薄な塩酸溶液を使用することが可能であることも考えられる。
プロタミンがトロンビンの凝固作用を促進する
約pH6の約20mMのクエン酸塩中のトロンビンおよびプロタミンの溶液を、再溶解された市販の凍結乾燥したヒト血漿と約1:1の比率で混合し、スタゴコンパクト(Stago Compact)凝固解析装置で試験した。得られた凝固時間を、所定のトロンビン濃度におけるトロンビン濃度とプロタミン濃度との関数として測定した。図3のグラフに列挙した濃度は、血漿と混合する前のトロンビン/プロタミン溶液を示す。
トロンビンおよびプロタミンによって促進された安定性の結果
トロンビン(約1250U/mL)、プロタミン(約125mg/mLまたは約62.5mg/mL)、およびシロキサンアルコキシレート界面活性剤の混合物を、約pH6.0で、約20mMのクエン酸塩中で調製した。この混合物約20μLを13×100mmのPETチューブに噴霧した。チューブを強制熱風によって乾燥させ、真空にし、冷蔵庫で保存した。研究の開始時に、チューブの栓をはずし、前もって約50℃および約45%の相対湿度に平衡化した制御環境下のチャンバー中に置いた。様々な時間間隔で、チューブを取り出しスタゴコンパクト凝固解析装置でトロンビン活性について評価した。図4に結果を示す。エラーバーは、5回反復した場合のトロンビン活性に関する95%信頼区間を示す。図4から明らかに、トロンビン活性は、プロタミンを含むほうがプロタミンを含まない場合よりも長期にわたり優れていることが示される。
トロンビンおよびp−アミノベンズアミジンによって促進された安定性の結果
凝固制御剤のp−アミノベンズアミジンを評価して、それが安定性を高めた条件下で噴霧されたトロンビンの安定性を改善するかどうかを決定した。何らかの特定の理論に縛られることは望まないが、p−アミノベンズアミジンは、室温でもトロンビンの自己消化的な分解が急速になり得る極めて高い湿度の条件下でも、噴霧乾燥されたトロンビンを安定化すると考えられる。
Claims (10)
- 血清を回収するための容器であって、第一の端部および第二の端部、ならびに血液を受け入れるためのリザーバー部分を規定する少なくとも1つの内壁を含み、前記リザーバーは、トロンビンおよび少なくとも1種の凝固制御剤、ならびにクロージャーを含む容器であって、
前記凝固制御剤は、0.1マイクロモルより大きい阻害定数を有するトロンビンの弱い競合的阻害剤であり、
前記トロンビンの弱い競合的阻害剤は、式(I)
Rは、−NR1R2;−NO2;1〜6個の炭素原子を有する置換または非置換の、直鎖または分岐鎖アルキル基;ハロゲン;−CO(O)R1;−CO−NR1R2;−OH;または−OR1からなる群より選択され、
R1およびR2は、同一でもよいしまたは異なっていてもよく、水素、置換または非置換の、直鎖または分岐鎖C1〜C10アルキル基、および−(CH2)x−アリールからなる群より選択してもよく、
xは、1から10の範囲の整数である
化合物であることを特徴とする容器。 - 前記凝固制御剤の濃度は、濃縮製剤の約0.5mMから約100mMの範囲であることを特徴とする請求項1に記載の容器。
- 前記凝固制御剤は、p−アミノベンズアミジンであることを特徴とする請求項1に記載の容器。
- 前記凝固制御剤の濃度は、濃縮製剤の約0.5mMから約20mMの範囲であることを特徴とする請求項3に記載の容器。
- 前記回収容器は、水溶性ポリマーおよび糖からなる群より選択される添加剤をさらに含むことを特徴とする請求項1に記載の容器。
- 前記水溶性ポリマーは、ポリビニルピロリドン、多糖、およびポリエチレングリコールからなる群より選択されることを特徴とする請求項5に記載の容器。
- 前記糖は、デキストラン、シクロデキストリン、トレハロース、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびソルビトールからなる群より選択されることを特徴とする請求項5に記載の容器。
- ゲル組成物または機械式の分離要素から成る群から選択される分離要素をさらに含むことを特徴とする請求項1に記載の容器。
- 前記クロージャーは、針で穴が開けられるようになっており、前記容器は、針を介して容器に導入された血液をさらに含むことを特徴とする請求項1に記載の容器。
- 血液を回収する方法であって、トロンビンと、トロンビンを安定化させるためにまたはトロンビンの活性を促進するために十分な濃度の凝固制御剤とを含む容器を用意するステップと、前記容器に血液サンプルを添加するステップとを含む方法であって、
前記凝固制御剤は、0.1マイクロモルより大きい阻害定数を有するトロンビンの弱い競合的阻害剤であり、
前記凝固制御剤は、ベンズアミジンであることを特徴とする方法。
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