JP2016528207A - Ｉｌ−４ｒ阻害剤の投与による好酸球性食道炎を治療する方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、好酸球性食道炎を治療し、予防しまたはその重症度を低減させる方法を提供する。本発明の方法は、抗ＩＬ−４Ｒα抗体などのインターロイキン−４受容体（ＩＬ−４Ｒα）阻害剤を含む治療用組成物をそれを必要とする対象に投与することを含む。

Description

本発明は、それを必要とする対象における好酸球性食道を治療または予防するためのインターロイキン−４受容体阻害剤の使用に関する。

好酸球性食道炎（ＥｏＥ）は、食道機能障害および食道の異常な好酸球性炎症によって特徴付けられる新興疾患である。ＥｏＥの典型的な症状としては、生活の損なわれた質につながる可能性がある拒食、嘔吐、胸焼け、嚥下障害および食片圧入が挙げられる。ＥｏＥは、多くの患者において食物アレルギーに関連することが見出されている。また、患者の中には、同時における喘息またはアトピー性皮膚炎またはアレルギー性鼻炎などのアトピー性疾患を有する者もいる。現在、ＥｏＥは、好酸球増多をチェックするために食道の内視鏡検査および食道組織の生検によって診断される。治療オプションは、現在、アレルゲンの撤去、食事の変更およびコルチコステロイドに限定されている。

したがって、好酸球性食道炎を予防または治療し、再発を予防する、有害な副作用がない効果的な治療アプローチに関する要求は、当該技術分野において満たされていない。

本発明の一態様によれば、対象における好酸球性食道炎（ＥｏＥ）の少なくとも１つの症状または兆候を治療、予防、または改善するための方法が提供される。本発明のこの態様による方法は、インターロイキン−４受容体（ＩＬ−４Ｒ）阻害剤を含む治療有効量の医薬組成物をそれを必要とする対象に投与することを含む。特定の実施形態において、それを必要とする対象は、食物アレルゲンまたは非食物アレルゲンに対するアレルギー反応を示す。

本発明の別の態様によれば、対象におけるＥｏＥ関連バイオマーカーのレベルを減少させる方法が提供される。特定の実施形態において、ＥｏＥ関連バイオマーカーは、例えば、循環または食道の好酸球、エオタキシン−３、ペリオスチン、（総およびアレルゲン特異的）血清ＩｇＥ、ＩＬ−１３、ＩＬ−５、血清胸腺および活性化制御ケモカイン（ＴＡＲＣ；ＣＣＬ１７）、胸腺間質性リンホポエチン（ＴＳＬＰ）、血清好酸球カチオン性タンパク質（ＥＣＰ）および好酸球由来神経毒（ＥＤＮ）からなる群から選択される。本方法は、ＩＬ−４Ｒ阻害剤を含む治療有効量の医薬組成物を投与することを含む。

本発明の別の態様によれば、それを必要とする対象において、食道の好酸球浸潤を減少させるための方法が提供される。特定の実施形態において、食道における炎症を減少させる方法が提供される。本方法は、ＩＬ−４Ｒ阻害剤を含む治療有効量の医薬組成物を投与することを含む。特定の実施形態において、食道の好酸球浸潤は、それを必要とする対象の食道における高倍率視野あたり約１５個を超えるまたはそれに等しい好酸球によって表される。特定の実施形態において、好酸球数は、ＩＬ−４Ｒ阻害剤の投与後１０日目までに約５０％減少する。

特定の実施形態において、ＩＬ−４Ｒ阻害剤は、第２の治療薬または治療法と併用して投与される。

特定の実施形態において、それを必要とする対象は、食物アレルギー、アトピー性皮膚炎、喘息、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎および遺伝性結合組織障害からなる群から選択される同時に発生する疾患または障害を有する。

本発明の方法との関連で使用することができる例示的なＩＬ−４Ｒ阻害剤としては、例えば、ＩＬ−４Ｒもしくはそのリガンドの小分子化学阻害剤またはＩＬ−４Ｒもしくはそのリガンド（ＩＬ−４および／もしくはＩＬ−１３）を標的にする生物学的作用物質が挙げられる。特定の実施形態によれば、ＩＬ−４Ｒ阻害剤は、ＩＬ−４Ｒα鎖に結合し、ＩＬ−４、ＩＬ−１３またはＩＬ−４とＩＬ−１３の両方によってシグナル伝達をブロックする抗体または抗原結合タンパク質である。特定の実施形態において、抗ＩＬ−４Ｒ抗体または抗原結合タンパク質は、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）の重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）および配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）の軽鎖ＣＤＲを含む。本発明の方法との関連で使用することができる抗原結合タンパク質のこのようなタイプの１つは、デュピルマブなどの抗ＩＬ−４Ｒα抗体である。

特定の実施形態において、本発明は、ヒトを含む対象における好酸球性食道炎を治療または阻害または予防するための薬剤の製造における、本発明の抗体またはその抗原結合抗体断片の使用を提供する。

本発明の他の実施形態は、次の詳細な説明の検討から明らかになる。

本明細書中の実施例１に記載されるようにして、流体力学的ＤＮＡ送達（ＨＤＤ）法を用いてＩＬ２５ＤＮＡが注入され、その後、アイソタイプ対照、抗ｍＩＬ−４Ｒ ｍＡｂまたはＩＬ−１３Ｒａ２−ｍＦｃで処置されたマウスにおける血清ＩｇＥレベルを示すグラフである。 図２は、本明細書中の実施例１に記載されるようにして、ＨＤＤ法を用いてＩＬ２５ＤＮＡが注入され、その後、アイソタイプ対照、抗ｍＩＬ−４Ｒ ｍＡｂまたはＩＬ−１３Ｒａ２−ｍＦｃで処置されたマウスの食道組織学的スコアを示すグラフである。 図３は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）またはピーナッツアレルゲン抽出物（ＰＡＥ）によって感作され、ＰＢＳまたはＰＡＥが負荷されたマウスの食道組織学的スコア（本明細書の他の箇所に記載されている）を示すグラフである。マウスは、抗ｍＩＬ−４Ｒ ｍＡｂまたはアイソタイプ対照を用いて処置された。 図４は、ＰＢＳまたはピーナッツアレルゲン抽出物（ＰＡＥ）によって感作され、ＰＢＳまたはＰＡＥが負荷されたマウスにおける（Ａ）ピーナッツアレルゲン特異的ＩｇＧ１および（Ｂ）ＩｇＥの血清レベルを示すグラフである。マウスは、抗ｍＩＬ−４Ｒ ｍＡｂまたはアイソタイプ対照を用いて処置された。

本発明について説明する前に、本発明は、記載されている特定の方法および実験条件に限定されるものではなく、これは、このような方法および条件が変化し得ることによることを理解すべきである。また、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるため、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを説明することを目的とし、限定することを意図するものではないことは理解すべきである。

特に定義しない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって、一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書で使用されるとき、列挙された特定の数値に関して使用される場合、用語「約」とは、数値が、列挙された値から１％未満で変化し得ることを意味する。例えば、本明細書で使用するとき、表現「約１００」には、９９および１０１、ならびにその間の全ての値（例えば、９９．１、９９．２、９９．３、９９．４など）が含まれる。

本明細書に記載されている方法および材料に類似したまたは同等の任意の方法および材料が、本発明の実施に使用することができるが、好ましい方法および材料はここに記載されている。本明細書において言及される全ての刊行物は、全体として記載するために参照により本明細書に組み入れられる。

好酸球性食道炎を治療、予防または改善する方法
本発明は、対象における好酸球性食道炎（ＥｏＥ）の少なくとも１つの症状または兆候を治療、予防または改善するための方法を含む。本発明のこの態様による方法は、それを必要とする対象にＩＬ−４Ｒ阻害剤を含む治療有効量の医薬組成物を投与することを含む。本明細書で使用するとき、用語「治療する」、「治療すること」などは、症状を軽減し、一時的もしくは永続的のいずれかで症状の原因を取り除き、または食道における好酸球性炎症の症状の発症を予防もしくは遅らせることを意味する。特定の実施形態において、本発明の方法は、限定されないが、食道の好酸球浸潤、食道壁の肥厚、食道の炎症、食道における気管様のリングまたは突起部の出現、胸痛および腹痛、拒食、嘔吐、嚥下障害ならびに食片圧入を含む、ＥｏＥの少なくとも１つの症状または兆候の治療または改善に有用である。

「好酸球性食道炎」（ＥｏＥ）とは、本明細書で使用するとき、食道内の異常な好酸球性炎症および食道機能不全によって特徴付けられる炎症性疾患を意味する。ＥｏＥの主要な症状としては、限定されないが、胸痛および腹痛、嚥下障害、胸焼け、拒食、嘔吐ならびに食片圧入が含まれる。ＥｏＥの臨床病理学は、食道壁における突起部または気管様リングの存在、および食道粘膜における好酸球浸潤によって特徴付けられる。ＥｏＥは、現在、食道の内視鏡検査、続く、食道粘膜内層の顕微鏡および生化学的分析によって診断される。ＥｏＥは、対象の状態に応じて、アレルギー性または非アレルギー性に分類することができる。本発明は、ＥｏＥのアレルギー性と非アレルギー性形態の両方を治療するための方法を含む。

本明細書で使用するとき、表現「それを必要する対象」とは、好酸球性食道炎の１つまたはそれ以上の症状もしくは兆候を示し、および／または好酸球性食道炎（ＥｏＥ）と診断されたヒトまたは非ヒト哺乳動物を意味する。特定の実施形態において、本発明の方法は、（本明細書の他の箇所に記載される）１つまたはそれ以上のＥｏＥ関連バイオマーカーの上昇レベルを示す患者を治療するために使用することができる。例えば、本発明の方法は、ＩｇＥまたはエオタキシン−３の上昇レベルを有する患者にＩＬ−４Ｒ阻害薬を投与することを含む。また、用語「それを必要とする対象」としては、例えば、治療前に、ＥｏＥの１つまたはそれ以上の兆候、例えば、肥満細胞などの炎症誘発性メディエーターの食道における過剰発現、食道の好酸球浸潤、食道壁の肥厚、嚥下障害、食片圧入、ならびに胸痛と腹痛、および／またはＥｏＥ関連バイオマーカーの上昇レベルを示す（または示した）対象が含まれる。この用語はまた、食道において高倍率視野あたり１５個以上の好酸球の存在を示す対象、および末梢好酸球数の上昇（＞３００細胞／μｌ）または血清ＩｇＥの上昇（＞１５０ｋＵ／Ｌ）を有する対象を含む。

特定の実施形態において、本方法は、胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）を含む慢性食道炎を有する対象において観察される病理学および症状を示す対象を治療するために使用することができる。特定の実施形態において、用語「それを必要とする対象」は、抗ＧＥＲＤ療法に非応答性または耐性である対象を含む。例えば、本方法は、プロトンポンプ阻害剤（ＰＰＩ）に対して耐性である対象を治療するために使用することができる。

本発明の文脈において、「それを必要とする対象」は、ＥｏＥに対してより感受性であるまたはＥｏＥ関連バイオマーカーの上昇レベルを示すことができる集団の一部を含み得る。例えば、「それを必要とする対象」は、アトピー性疾患または障害、例えば、食物アレルギー、アトピー性皮膚炎、喘息、アレルギー性鼻炎およびアレルギー性結膜炎に罹患している対象を含むことができる。特定の実施形態において、用語「それを必要とする対象」は、ＩＬ−４Ｒ阻害剤の投与前または投与時に、アトピー性皮膚炎、喘息、アレルギー性鼻炎およびアレルギー性結膜炎からなる群から選択される疾患もしくは障害を有するまたはそれと診断された対象を含む。特定の実施形態において、用語「それを必要とする対象」は、遺伝性結合組織障害を有する患者を含むことができる。このような対象集団は、例えば、ＩｇＥ、エオタキシン−３、ペリオスチン、ＩＬ−５またはＩＬ−１３などのＥｏＥ関連バイオマーカーの上昇レベルを示すことができる。

特定の実施形態において、「それを必要とする対象」は、アレルゲンに感受性の対象を含む。例えば、「それを必要とする対象」は、以下の特徴のうちの１つを示すことができる対象を含む：（ａ）１つまたはそれ以上のアレルゲンに曝露されたときにアレルギー反応または応答を起こしやすい；（ｂ）以前に１つまたはそれ以上のアレルゲンに対するアレルギー応答または反応を示した；（ｃ）アレルギーの既往歴を有する；および／または（ｄ）アレルギー応答またはアナフィラキシーの徴候または症状を示す。特定の実施形態において、対象は、ＥｏＥに関連したアレルゲンまたは対象をＥｏＥに感受性の状態にしおよび／もしくはＥｏＥを発症しやすくするアレルゲンに対してアレルギーがある。

用語「アレルゲン」には、本明細書で使用するとき、感受性の個体においてアレルギー応答を刺激することができる任意の物質、化学物質、粒子または組成物が含まれる。アレルゲンは、例えば、乳製品（例えば、牛乳）、卵、小麦、大豆、トウモロコシ、ライ麦、魚、甲殻類、ピーナッツおよび木の実などの食品内に含まれるまたは食品に由来することができる。あるいは、アレルゲンは、例えば、ダスト（例えば、イエダニを含む）、花粉、昆虫毒（例えば、ハチ、カリバチ、蚊の毒など）、カビ、動物の鱗屑、ラテックス、医薬、薬物、ブタクサ、草および白樺などの非食品内に含まれるまたは非食品に由来することができる。

特定の実施形態において、用語「それを必要とする対象」は、食物アレルゲンに対してアレルギー反応を示す集団の一部を含む。例えば、「それを必要とする対象」は、限定されないが、乳製品、卵、小麦、大豆、トウモロコシ、ライ麦、魚、甲殻類、ピーナッツ、木の実、牛肉、鶏肉、オート麦、大麦、豚肉、インゲンおよび果物、例えば、リンゴおよびパイナップルを含む食品に含まれるアレルゲンに対するアレルギーを有する対象を含む。

特定の実施形態において、この用語は、ダスト、カビ、昆虫、花粉を含む植物ならびにペット、例えばネコおよびイヌに由来するアレルゲンなどの非食品アレルゲンに対してアレルギー性である対象を含む。非食物アレルギー（環境アレルゲンまたは空気アレルゲンとして知られている）の例には、限定されないが、ハウスダストダニアレルゲン、花粉アレルゲン、動物の鱗屑アレルゲン、昆虫毒、草アレルゲンおよびラテックスが含まれる。

本明細書で使用するとき、語句「アレルギー応答」、「アレルギー反応」、「アレルギー症状」などには、蕁麻疹（ｕｒｔｉｃａｒｉａ）（例えば、蕁麻疹（ｈｉｖｅｓ））、血管性浮腫、鼻炎、喘息、嘔吐、くしゃみ、鼻水、副鼻腔炎症、涙目、喘鳴、気管支痙攣、最大呼気流量（ＰＥＦ）の減少、胃腸障害、フラッシング、腫れた唇、腫れた舌、血圧低下、アナフィラキシーおよび臓器機能障害／臓器不全からなる群から選択される１つまたはそれ以上の兆候または症状が含まれる。また、「アレルギー応答」、「アレルギー反応」、「アレルギー症状」などには、例えば、ＩｇＥ産生の増加、アレルゲン特異的免疫グロブリン産生の増加および／または好酸球増多などの免疫学的応答および反応が含まれる。

いくつかの実施形態において、本方法は、本明細書において、３歳以下の子供におけるＥｏＥを治療するために使用することができる。例えば、本発明の方法は、１カ月未満、２カ月未満、３カ月未満、４カ月未、５カ月未、６カ月未、７カ月未満、８カ月未満、９カ月未満、１０カ月未満、１１カ月未満または１２カ月未満の年齢である乳児を治療するために使用することができる。他の実施形態において、本発明の方法は、３歳超の年齢、４歳超、５歳超、６歳超、７歳超、８歳超、９歳超、１０歳超、１１歳超、１２歳超、１３歳超、１４歳超または１５歳超である子供を治療するために使用することができる。

本発明はまた、好酸球浸潤を減少させるための方法を含む。本発明のこの態様による方法は、例えば、食道粘膜において、好酸球数を減少または取り除くために、ＩＬ−４Ｒ阻害剤を含む医薬組成物の１回またはそれ以上の用量を対象に投与することを含む。

本明細書で使用するとき、「好酸球浸潤」とは、対象の血液、食道、胃、十二指腸および回腸を含む臓器または組織中の好酸球の存在を意味する。本発明の文脈において、用語「好酸球浸潤」とは、限定されないが、食道および胃を含む胃腸管の領域の粘膜内層中の好酸球の存在を意味する。好酸球浸潤は、例えば、ＥｏＥに罹患している対象の食道組織生検において分析される。特定の実施形態によれば、「好酸球浸潤」とは、食道において高倍率視野あたり１５個以上の好酸球の存在を意味する。用語「高倍率視野」とは、組織中の、例えば対象の食道由来の組織中の好酸球を観察するために使用される顕微鏡による４００倍の標準的な総合倍率を意味する。特定の実施形態において、「好酸球の浸潤」には、白血球、例えば、リンパ球、好中球および肥満細胞による組織への浸潤が含まれる。例えば、食道組織への白血球浸潤は、好酸球特異的マーカー（例えば、ＣＤ１１ｃ^{Ｌｏｗ／Ｎｅｇ}、ＳｉｇｌｅｃＦ^＋、Ｆ４／８０^＋、ＥＭＲ１^＋、Ｓｉｇｌｅｃ ８^＋およびＭＢＰ２^＋）、マクロファージ特異的マーカー（例えば、ＣＤ１１ｂ^＋、Ｆ４／８０^＋、ＣＤ１４^＋、ＥＭＲ１^＋およびＣＤ６８^＋）、好中球特異的マーカー（例えば、ＣＤ１１ｂ^＋、Ｌｙ６Ｇ^＋、Ｌｙ６Ｃ^＋、ＣＤ１１ｂ^＋およびＣＤ６６ｂ^＋）ならびにＴ細胞特異的マーカー（例えば、ＣＤ３^＋ＣＤ４^＋ＣＤ８^＋）などの細胞表面マーカーによって検出することができる。

本明細書で使用するとき、食道好酸球の減少とは、ＥｏＥを有し、ＩＬ−４Ｒ阻害剤で治療された対象の食道において測定された好酸球と他の白血球の数が、ＩＬ−４Ｒ阻害剤で治療されていない同一または同様の対象において測定された食道好酸球よりも少なくとも５％、１０％、２０％、５０％、７０％、８０％または９０％低いことを意味する。特定の実施形態において、好酸球浸潤の減少とは、食道粘膜の生検において、高倍率視野あたり１５個未満の好酸球、より好ましくは高倍率視野あたり１０個未満の好酸球、９個未満の好酸球、８個未満の好酸球、７個未満の好酸球、６個未満の好酸球または５個未満の好酸球を検出することを意味する。特定の実施形態において、食道好酸球の減少とは、好酸球が対象の食道粘膜において検出されないことを意味する。

本発明は、好酸球性食道炎を治療し、予防しまたはその重症度を減少させるための方法であって、ＩＬ−Ｒ阻害剤を含む治療有効量の医薬組成物をそれを必要とする対象に投与することを含み、該医薬組成物が、例えば、特定の治療投薬レジメンの一部として、複数回投薬で対象に投与される、前記方法を含む。例えば、治療投薬レジメンは、１日に約１回、２日ごとに１回、３日ごとに１回、４日ごとに１回、５日ごとに１回、６日ごとに１回、１週間に１回、２週間ごとに１回、３週間ごとに１回、４週間ごとに１回、１カ月に１回、２カ月ごとに１回、３カ月ごとに１回、４カ月ごとに１回の頻度またはそれらよりも少ない頻度で対象に医薬組成物の複数の用量を投与することを含むことができる。

本発明の方法は、特定の実施形態によれば、対象に第２の治療薬を併用して、ＩＬ−４Ｒ阻害剤を含む治療有効量の医薬組成物を投与することを含む。第２の治療薬は、例えば、ＩＬ−１β阻害剤、ＩＬ−５阻害剤、ＩＬ−９阻害剤、ＩＬ−１３阻害剤、ＩＬ−１７阻害剤、ＩＬ−２５阻害剤、ＴＮＦα阻害剤、エオタキシン−３阻害剤、ＩｇＥ阻害剤、プロスタグランジンＤ２阻害剤、免疫抑制剤、コルチコステロイド、グルココルチコイド、プロトンポンプ阻害剤、充血除去剤、抗ヒスタミン剤および非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）からなる群から選択される薬剤であってもよい。特定の実施形態において、本発明のＩＬ−４Ｒ阻害剤は、アレルゲン除去および食事管理を含む治療法を併用して投与することができる。本明細書で使用するとき、語句「併用して」とは、ＩＬ−４Ｒ阻害剤を含む医薬組成物が、第２の治療薬の投与と同時に、投与直前にまたは投与直後に対象に投与されることを意味する。特定の実施形態において、第２の治療薬は、ＩＬ−４Ｒ阻害剤との共製剤として投与される。関連する実施形態において、本発明は、バックグラウンド抗アレルギー治療レジメン中である対象にＩＬ−４Ｒ阻害剤を含む治療有効量の医薬組成物を投与することを含む方法を含む。バックグラウンド抗アレルギー治療レジメンは、例えば、ステロイド、抗ヒスタミン剤、充血除去剤、抗ＩｇＥ剤などの投与経路を含んでもよい。ＩＬ−４Ｒ阻害薬は、バックグラウンド抗アレルギー治療レジメンに加えて追加することができる。いくつかの実施形態において、ＩＬ−４Ｒ阻害剤は「バックグラウンドステップダウン」スキームの一部として追加され、バックグラウンドの抗アレルギー療法は、経時的に（例えば、段階的に）対象から徐々に使用中止にされ、一方、ＩＬ−４Ｒ阻害剤は、対象に経時的に一定用量でまたは用量を増加してまたは用量を減少させて投与される。

好酸球性食道炎関連バイオマーカー
本発明はまた、ＥｏＥ関連バイオマーカーの使用、定量化および分析を伴う方法を含む。本明細書で使用するとき、用語「ＥｏＥ関連バイオマーカー」とは、非ＥｏＥ患者に存在するまたは検出できるマーカーのレベルまたは量とは異なる（例えば、より大きいまたはより小さい）レベルまたは量でＥｏＥ患者に存在するまたは検出できる、任意の生物学的応答、細胞型、パラメータ、タンパク質、ポリペプチド、酵素、酵素活性、代謝産物、核酸、炭水化物または他の生体分子を意味する。例示的なＥｏＥ関連バイオマーカーとしては、限定されないが、例えば、食道好酸球、エオタキシン−３（ＣＣＬ２６）、ペリオスチン、（総およびアレルゲン特異的）血清ＩｇＥ、ＩＬ−１３、ＩＬ−５、血清胸腺および活性化制御ケモカイン（ＴＡＲＣ；ＣＣＬ１７）、胸腺間質性リンホポエチン（ＴＳＬＰ）、血清好酸球カチオン性タンパク質（ＥＣＰ）および好酸球由来神経毒（ＥＤＮ）が挙げられる。用語「ＥｏＥ関連バイオマーカー」はまた、ＥｏＥでない対象と比較して、ＥｏＥの対象において差異的に発現される、当該技術分野において公知の遺伝子または遺伝子プローブを含む。例えば、ＥｏＥの対象において有意に上方制御される遺伝子としては、限定されないが、Ｔヘルパー２（Ｔｈ２）関連ケモカイン、例えば、ＣＣＬ８、ＣＣＬ２３およびＣＣＬ２６、ペリオスチン、カドヘリン様２６およびＴＮＦα誘導性タンパク質６（Ｂｌａｎｃｈａｒｄら、２００６年、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１６：５３６〜５４７頁）が挙げられる。あるいは、「ＥｏＥ関連バイオマーカー」はまた、末端分化タンパク質（例えば、フィラグリン）（Ｂｌａｎｃｈａｒｄら、２００６、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１６：５３６〜５４７頁）などのＥｏＥに起因して下方制御される遺伝子を含む。本発明の特定の実施形態は、ＩＬ−４Ｒアンタゴニストの投与により、疾患逆転を監視するためのこれらのバイオマーカーの使用に関する。ＥｏＥ関連バイオマーカーを検出および／または定量するための方法は当技術分野において公知である；このようなＥｏＥ関連バイオマーカーを測定するためのキットは、様々な商業的供給源から入手可能である；および様々な商業的診断研究室は、同様にこのようなバイオマーカーの測定を与えるサービスを提供する。

本発明の特定の態様によれば、ＥｏＥを治療するための方法であって、（ａ）疾患状態を意味する、治療前または治療時の少なくとも１つのＥｏＥ関連バイオマーカーのレベルを示す対象を選択することと；（ｂ）対象に治療有効量のＩＬ−４Ｒアンタゴニストを含む医薬組成物を投与することとを含む前記方法が提供される。本発明のこの態様の特定の実施形態において、対象は、ＩｇＥまたはエオタキシン−３の上昇レベルに基づいて選択される。

本発明の他の態様によれば、対象に治療有効量のＩＬ−４Ｒアンタゴニストを含む医薬組成物を投与することを含む、ＥｏＥを治療するための方法であって、対象への該医薬組成物の投与が、投与前の対象におけるＥｏＥ関連バイオマーカーのレベルと比較して、医薬組成物の投与後の時点で少なくとも１つの該バイオマーカー（例えば、食道好酸球、エオタキシン−３、ＩｇＥなど）の減少をもたらす、前記方法が提供される。

当業者に理解されるように、ＥｏＥ関連バイオマーカーの増加または減少は、（ｉ）ＩＬ−４Ｒアンタゴニストを含む医薬組成物の投与後の所定時間点で対象において測定されるバイオマーカーのレベルと、（ｉｉ）ＩＬ−４Ｒアンタゴニストを含む医薬組成物の投与前の患者において測定される該バイオマーカーのレベル（すなわち、「ベースライン測定」）を比較することによって決定することができる。バイオマーカーが測定される所定の時間点は、例えば、ＩＬ−４Ｒアンタゴニストを含む医薬組成物の投与後約４時間、８時間、１２時間、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１５日、２０日、３５日、４０日、５０日、５５日、６０日、６５日、７０日、７５日、８０日、８５日またはそれ以上であり得る。

本発明の特定の実施形態によれば、対象は、ＩＬ−４Ｒアンタゴニスト（例えば、抗ＩＬ−４Ｒ抗体）を含む医薬組成物の投与後に、ＩｇＥおよび／またはエオタキシン−３の１つまたはそれ以上のレベルの減少を示すことができる。例えば、約７５ｍｇ〜約６００ｍｇの抗ＩＬ−４Ｒ抗体（例えば、デュピルマブ）を含む、第１、第２、第３または第４の用量の医薬組成物の投与後約１日目、４日目、８日目、１５日目、２２日目、２５日目、２９日目、３６日目、４３日目、５０日目、５７日目、６４日目、７１日目または８５日目に、対象は、本発明によれば、ベースラインから約１％、２％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％またはそれを超えるエオタキシン−３の減少を示すことができる（「ベースライン」は、第１の投与直前の対象におけるエオタキシン−３のレベルとして定義される）。同様に、約７５ｍｇ〜約６００ｍｇの抗ＩＬ−４Ｒ抗体（例えば、デュピルマブ）を含む、第１、第２、第３または第４の用量の医薬組成物の投与後約１日目、４日目、８日目、１５日目、２２日目、２５日目、２９日目、３６日目、４３日目、５０日目、５７日目、６４日目、７１日目または８５日目に、対象は、本発明によれば、ベースラインから約１％、２％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％またはそれを超えるＩｇＥの減少を示すことができる（「ベースライン」は、第１の投与直前の対象におけるＩｇＥのレベルとして定義される）。

本発明はまた、対象が、ＩＬ−４Ｒアンタゴニストを含む医薬組成物の投与が有益である適切な対象であるか否かを決定するための方法を含む。例えば、個体が、ＩＬ−４Ｒアンタゴニストを含む医薬組成物を受け入れる前に、疾患状態を表すＥｏＥ関連バイオマーカーのレベルを示す場合、したがって、個体は、本発明の医薬組成物（抗ＩＬ−４Ｒ抗体を含む組成物）の投与が有益である適切な患者として特定される。関連する実施形態において、本発明は、適切な対象を治療するための方法を含み、適切な対象は、例えば、食物アレルギーまたはアトピー性疾患に起因して、ＥｏＥに対してより影響を受けやすい場合がある。例えば、本発明は、食物アレルギー、アトピー性皮膚炎、喘息、アレルギー性鼻炎またはアレルギー性結膜炎を有する対象にＩＬ−４Ｒアンタゴニストを投与することを含む方法を含む。別の例において、本発明は、メンデル遺伝性結合組織障害、例えば、マルファン症候群、ロイス・ディーツ症候群、移動性エーラス・ダンロス症候群（ＥＤＳ）または関節過度可動性症候群（ＪＨＳ）を有する対象にＩＬ−４Ｒアンタゴニストを投与することを含む方法を含む。このような対象集団は、ＥｏＥ関連バイオマーカーのレベルが上昇している可能性がある。

特定の例示的な実施態様によれば、個体が、以下：（ｉ）約３０ｐｇ／ｍｌより大きい、約４０ｐｇ／ｍｌより大きい、約５０ｐｇ／ｍｌより大きい、約１００ｐｇ／ｍｌより大きい、約１５０ｐｇ／ｍｌより大きい、約２００ｐｇ／ｍｌより大きい、約２５０ｐｇ／ｍｌより大きい、約３００ｐｇ／ｍｌより大きい、約３５０ｐｇ／ｍｌより大きい、約４００ｐｇ／ｍｌより大きい、約４５０ｐｇ／ｍｌより大きいもしくは約５００ｐｇ／ｍｌより大きいエオタキシン−３レベル；または（ｉｉ）約１１４ｋＵ／Ｌより大きい、約１５０ｋＵ／Ｌより大きい、約５００ｋＵ／Ｌより大きい、約１０００ｋＵ／Ｌより大きい、約１５００ｋＵ／Ｌより大きい、約２０００ｋＵ／Ｌより大きい、約２５００ｋＵ／Ｌより大きい、約３０００ｋＵ／Ｌより大きい、約３５００ｋＵ／Ｌより大きい、約４０００ｋＵ／Ｌより大きい、約４５００ｋＵ／Ｌもしくは約５０００ｋＵ／Ｌより大きい血清ＩｇＥレベル；または（ｉｉｉ）対象の食道において高倍率視野あたり１５個以上の好酸球、の１つまたはそれ以上を示す場合、個体は抗ＩＬ−４Ｒ療法に対して良好な候補として特定することができる。追加の基準、例えば、ＥｏＥの他の臨床指標（例えば、ＥｏＥを示す食道壁の肥厚および食物アレルギー）は、本明細書の他の箇所に記載される抗ＩＬ−４Ｒ療法に適した候補として個体を特定するために、前述のＥｏＥ関連バイオマーカーのいずれかを併用して使用することができる。

インターロイキン−４受容体阻害剤
本発明の方法は、インターロイキン−４受容体（ＩＬ−４Ｒ）阻害剤を含む治療用組成物をそれを必要とする対象に投与することを含む。本明細書で使用するとき、「ＩＬ−４Ｒ阻害剤」（本明細書では「ＩＬ−４Ｒアンタゴニスト」、「ＩＬ−４Ｒαアンタゴニスト」、「ＩＬ−４Ｒブロッカー」、「ＩＬ−４Ｒαブロッカー」などと称する。）は、ＩＬ−４ＲαもしくはＩＬ−４Ｒリガンドに結合するまたはそれと相互作用し、１型および／もしくは２型のＩＬ−４受容体の正常な生物学的シグナル伝達機能を阻害または減衰させる任意の薬物である。ヒトＩＬ−４Ｒは、配列番号１１のアミノ酸配列を有する。１型のＩＬ−４受容体は、ＩＬ−４Ｒα鎖とγｃ鎖を含む二量体受容体である。２型のＩＬ−４受容体は、ＩＬ−４Ｒα鎖およびＩＬ−１３Ｒα１鎖を含む二量体受容体である。１型のＩＬ−４受容体はＩＬ−４と相互作用し、ＩＬ−４によって刺激され、一方、２型のＩＬ−４受容体はＩＬ−４とＩＬ−１３の両方によって刺激される。したがって、本発明の方法において使用することができるＩＬ−４Ｒ阻害剤は、ＩＬ−４媒介性シグナル伝達、ＩＬ−１３媒介性シグナル伝達またはＩＬ−４とＩＬ−１３媒介性シグナル伝達の両方をブロックすることによって機能することができる。このようにして、本発明のＩＬ−４Ｒ阻害剤は、１型または２型受容体とのＩＬ−４および／ＩＬ−１３の相互作用を妨げることができる。

ＩＬ−４Ｒ阻害剤のカテゴリーの非制限的な例としては、小分子ＩＬ−４Ｒ阻害薬、抗ＩＬ−４Ｒアプタマー、ペプチドベースのＩＬ−４Ｒ阻害剤（例えば、「ペプチボディ」分子）、「受容体ボディ」（例えば、ＩＬ−４Ｒ成分のリガンド結合ドメインを含む遺伝子操作された分子）およびヒトＩＬ−４Ｒαに特異的に結合する抗体または抗体の抗原結合断片が挙げられる。本明細書で使用するとき、ＩＬ−４Ｒ阻害剤はまた、ＩＬ−４および／またはＩＬ−１３に特異的に結合する抗原結合タンパク質を含む。

抗ＩＬ−４Ｒα抗体およびその抗原結合断片
本発明の特定の例示的な実施形態によれば、ＩＬ−４Ｒ阻害剤は、抗ＩＬ−４Ｒα抗体またはその抗原結合断片である。用語「抗体」は、本明細書で使用するとき、ジスルフィド結合によって内部連結された２つの重（Ｈ）鎖と２つの軽（Ｌ）鎖の４つのポリペプチド鎖を含む免疫グロブリン分子、ならびにそのマルチマー（例えば、ＩｇＭ）を含む。典型的な抗体において、各々の重鎖は、重鎖可変領域（本明細書においてＨＣＶＲまたはＶ_Ｈと省略される）および重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、３つのドメインであるＣ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３を含む。各々の軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書においてＬＣＶＲまたはＶ_Ｌと略記される）および軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、１つのドメイン（Ｃ_Ｌ１）を含む。Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌ領域は、さらに、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域にさらに細分することができ、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる、より保存されている領域が散在する。各々のＶ_ＨおよびＶ_Ｌは、以下のＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順でアミノ末端からカルボキシ末端に配置された３つのＣＤＲと４つのＦＲで構成される。本発明の異なる実施形態において、抗ＩＬ−４Ｒ抗体（またはその抗原結合部分）のＦＲは、ヒト生殖細胞系配列と同一であってもよく、または天然もしくは人工的に改変することができる。アミノ酸コンセンサス配列は、２つまたはそれを超えるＣＤＲの比較分析に基づいて定義することができる。

用語「抗体」はまた、本明細書で使用するとき、完全な抗体分子の抗原結合断片を含む。抗体の「抗原結合部分」、抗体の「抗原結合断片」などの用語は、本明細書で使用するとき、抗原と特異的に結合し、複合体を形成する、任意の天然に存在する、酵素的に得られる、合成の、もしくは遺伝子操作されたポリペプチドまたは糖タンパク質を含む。抗体の抗原結合断片は、例えば、タンパク分解または抗体可変ドメインおよび場合により定常ドメインをコードするＤＮＡの操作および発現を伴う組換え遺伝子操作技術などの任意の適した標準技術を用いて完全な抗体分子から誘導することができる。このようなＤＮＡは、公知でありおよびもしくは、例えば、商業的供給源、ＤＮＡライブラリー（例えば、ファージ抗体ライブラリーを含む）から容易に入手可能であり、または合成することができる。ＤＮＡを配列決定し、化学的にまたは分子生物学的技術を用いて操作し、例えば、適切な構成に１もしくはそれ以上の可変領域および／または定常領域を配置することができ、あるいはコドンを導入し、システイン残基を作成し、アミノ酸を改変、付加または削除することができる。

抗原結合断片の非限定的な例としては、（ｉ）Ｆａｂ断片；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）Ｆｄ断片；（ｉｖ）Ｆｖ断片；（ｖ）一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）分子；（ｖｉ）ｄＡｂ断片；および（ｖｉｉ）抗体の超可変領域（例えば、ＣＤＲ３ペプチドなどの単離された相補性決定領域（ＣＤＲ））または制約されたＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４ペプチドを模倣するアミノ酸残基からなる最小認識単位が挙げられる。他の遺伝子操作された分子、例えば、ドメイン特異的抗体、単一ドメイン抗体、ドメイン欠失抗体、キメラ抗体、ＣＤＲ移植抗体、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ミニボディ、ナノボディ（例えば、一価ナノボディ、二価ナノボディなど）、小モジュール免疫医薬（ＳＭＩＰ）およびサメ可変ＩｇＮＡＲドメインは、本明細書で使用される「抗原結合断片」という表現に包含される。

抗体の抗原結合断片は、典型的には、少なくとも１つの可変ドメインを含む。可変ドメインは、任意のサイズまたはアミノ酸組成であることができ、一般には、１つまたはそれ以上のフレームワーク配列に隣接してまたはそれとインフレームである少なくとも１つのＣＤＲを含む。Ｖ_Ｌドメインに関連付けられたＶ_Ｈドメインを有する抗原結合断片において、Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌドメインは、任意の適切な配置で互いに関連して配置することができる。例えば、可変領域は、二量体であってもよく、Ｖ_Ｈ−Ｖ_Ｈ、Ｖ_Ｈ−Ｖ_ＬまたはＶ_Ｌ−Ｖ_Ｌ二量体を含有することができる。あるいは、抗体の抗原結合性断片は、単量体Ｖ_Ｈま
たはＶ_Ｌドメインを含むことができる。

特定の実施形態において、抗体の抗原結合断片は、少なくとも１つの定常ドメインに共有結合された少なくとも１つの可変ドメインを含むことができる。本発明の抗体の抗原結合断片内に見出すことができる可変ドメインおよび定常ドメインの非限定的な例示的構成は、（ｉ）Ｖ_Ｈ−Ｃ_Ｈ１；（ｉｉ）Ｖ_Ｈ−Ｃ_Ｈ２；（ｉｉｉ）Ｖ_Ｈ−Ｃ_Ｈ３；（ｉｖ）Ｖ_Ｈ−Ｃ_Ｈ１−Ｃ_Ｈ２；（ｖ）Ｖ_Ｈ−Ｃ_Ｈ１−Ｃ_Ｈ２−Ｃ_Ｈ３；（ｖｉ）Ｖ_Ｈ−Ｃ_Ｈ２−Ｃ_Ｈ３；（ｖｉｉ）Ｖ_Ｈ−Ｃ_Ｌ；（ｖｉｉｉ）Ｖ_Ｌ−Ｃ_Ｈ１；（ｉｘ）Ｖ_Ｌ−Ｃ_Ｈ２；（ｘ）Ｖ_Ｌ−Ｃ_Ｈ３；（ｘｉ）Ｖ_Ｌ−Ｃ_Ｈ１−Ｃ_Ｈ２；（ｘｉｉ）Ｖ_Ｌ−Ｃ_Ｈ１−Ｃ_Ｈ２−Ｃ_Ｈ３；（ｘｉｉｉ）Ｖ_Ｌ−Ｃ_Ｈ２−Ｃ_Ｈ３；および（ｘｉｖ）Ｖ_Ｌ−Ｃ_Ｌを含む。上記の例示的構成のいずれかを含む可変ドメインおよび定常ドメインのいずれかの構成において、可変ドメインおよび定常ドメインは、互いに直接結合することができ、あるいは完全もしくは部分的なヒンジまたはリンカー領域によって連結することができる。ヒンジ領域は、単一のポリペプチド分子において隣接する可変ドメインおよび／または定常ドメインの間の可撓性または半可撓性連結をもたらす、少なくとも２個（例えば、５、１０、１５、２０、４０、６０個またはそれを超える）のアミノ酸から構成することができる。さらに、本発明の抗体の抗原結合性断片は、互いに非共有結合でおよび／または１つもしくはそれ以上の単量体のＶ_ＨまたはＶ_Ｌドメインと（例えば、ジスルフィド結合（単数もしくは複数）による）非共有結合で、上記で列挙された可変ドメインと定常ドメインの構成のいずれかのホモ二量体またはヘテロ二量体（または他の多量体）を含むことができる。

また、用語「抗体」とは、本明細書で使用するとき、多重特異的（例えば、二重特異性）抗体を含む。多重特異的抗体または抗体の抗原結合断片は、典型的には、少なくとも２つの異なる可変ドメインを含み、各々の可変ドメインは、異なる抗原または同一の抗原上の異なるエピトープに特異的に結合することができる。任意の多重特異的抗体フォーマットは、当該技術分野で利用可能な日常的な技術を用いて、本発明の抗体または抗体の抗原結合断片との関連で使用するために適合させることができる。例えば、本発明は、二重特異的抗体の使用を含む方法を含み、免疫グロブリンの一方のアームは、ＩＬ−４Ｒαまたはその断片に特異的であり、免疫グロブリンの他方のアームは、第２の治療標的に特異的でありまたは治療部分にコンジュゲートされる。本発明との関連で使用することができる例示的な二重特異的フォーマットとしては、限定されないが、例えば、ｓｃＦｖベースまたはダイアボディ二重特異的フォーマット、ＩｇＧ−ｓｃＦｖ融合体、二重可変ドメイン（ＤＶＤ）−Ｉｇ、クアドローマ、ノブ−イントゥ−ホール（ｋｎｏｂ−ｉｎｔｏ−ｈｏｌｅ）、共通の軽鎖（例えば、ノブ−イントゥ−ホールを有する共通の軽鎖など）、ＣｒｏｓｓＭａｂ、ＣｒｏｓｓＦａｂ、（ＳＥＥＤ）ボディ、ロイシンジッパー、デュオボディ、ＩｇＧ１／ＩｇＧ２、二重作用Ｆａｂ（ＤＡＦ）−ＩｇＧおよびＭａｂ^２二重特異的フォーマット（例えば、上記フォーマットの概要について、Ｋｌｅｉｎら、２０１２年、ｍＡｂｓ ４：６、１〜１１頁およびそこに引用されている参考文献を参照されたい。）が挙げられる。二重特異的抗体はまた、ペプチド／核酸コンジュゲーションを用いて構築することができ、例えば、直交化学反応性を有する非天然アミノ酸を用いて、部位特異的抗体−オリゴヌクレオチドコンジュゲートを生じさせ、次に、所定の組成、原子価および形状（ｇｅｏｍｅｔｒｙ）を有する多量体複合体へと自己集合する（例えば、Ｋａｚａｎｅら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．［Ｅｐｕｂ：Ｄｅｃ．４，２０１２年］を参照されたい）。

本発明の方法において使用される抗体はヒト抗体であり得る。用語「ヒト抗体」は、本明細書で使用するとき、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する抗体を含むことが意図される。本発明のヒト抗体は、それにもかかわらず、例えば、ＣＤＲ、特にＣＤＲ３において、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされていないアミノ酸残基（例えば、インビトロにおいてランダムもしくは部位特異的突然変異誘発によってまたはインビボにおいて体細胞変異によって誘導される変に）を含むことができる。しかしながら、用語「ヒト抗体」は、本明細書で使用するとき、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植された抗体を含むことを意図するものではない。

本発明の方法において使用される抗体は、組換えヒト抗体であってもよい。用語「組換えヒト抗体」は、本明細書で使用するとき、組換え手段によって調製され、発現され、作製されまたは単離される全てのヒト抗体、例えば、宿主細胞内にトランスフェクトされる組換え発現ベクターを用いて発現される抗体（以下に詳細に記載されている）、組換え、組み合わせヒト抗体から単離される抗体（以下に詳細に記載されている）、ヒト免疫グロブリン遺伝子を導入した動物（例えば、マウス）から単離される抗体（例えば、Ｔａｙｌｏｒら（１９９２年）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２０：６２８７〜６２９５頁）または他のＤＮＡ配列へのヒト免疫グロブリン遺伝子配列のスプライシングを伴う任意の他の手段によって調製され、発現され、作製されもしくは単離される抗体を含むことが意図される。このような組換えヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する。しかしながら、特定の実施形態において、このような組換えヒト抗体は、インビトロでの突然変異誘発（またはヒトＩｇ配列について遺伝子導入された動物が使用された場合は、インビボでの体細胞突然変異誘発）に供され、したがって、組換え抗体のＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト抗体生殖系列Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌ配列に由来し、それらに関連する一方、インビボでのヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然に存在しない可能性がある配列である。

特定の実施形態によれば、本発明の方法において使用される抗体は、ＩＬ−４Ｒαに特異的に結合する。用語「特異的に結合する」などは、抗体またはその抗原結合断片が生理学的条件下で比較的安定である抗原と複合体を形成することを意味する。抗体が抗原に特異的に結合するかどうかを決定するための方法は当該技術分野において周知であり、例えば、平衡透析、表面プラズモン共鳴などが挙げられる。例えば、ＩＬ−４Ｒαに「特異的に結合する」抗体は、本発明との関連で、表面プラズミン共鳴アッセイにおいて測定した場合、約５００ｎＭ未満、約３００ｎＭ未満、約２００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満、約９０ｎＭ未満、約８０ｎＭ未満、約７０ｎＭ未満、約６０ｎＭ未満、約５０ｎＭ未満、約４０ｎＭ未満、約３０ｎＭ未満、約２０ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、約４ｎＭ未満、約３ｎＭ未満、約２ｎＭ未満、約１ｎＭ未満または約０．５ｎＭ未満のＫ_ＤでＩＬ−４Ｒαまたはその部分に結合する抗体を含む。しかしながら、ヒトＩＬ−４Ｒαに特異的に結合する単離された抗体は、他の（非ヒト）種由来のＩＬ−４Ｒα分子などの他の抗原に対して交差反応性を有することができる。

本発明の特定の例示的な実施形態によれば、ＩＬ−４Ｒ阻害剤は、抗ＩＬ−４Ｒα抗体、または米国特許第７，６０８，６９３号に記載されている、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）および／もしくは抗ＩＬ−４Ｒ抗体のアミノ酸配列のいずれかを含む相補性決定領域（ＣＤＲ）、を含む上記抗体の抗原結合断片である。特定の例示的な実施形態において、本発明の方法との関連で使用することができる抗ＩＬ−４Ｒα抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）の重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）および配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）を含む。特定の実施形態によれば、抗ＩＬ−４Ｒα抗体またはその抗原結合断片は、３つのＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）と３つのＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含み、ＨＣＤＲ１は配列番号３のアミノ酸配列を含み；ＨＣＤＲ２は配列番号４のアミノ酸配列を含み；ＨＣＤＲ３は配列番号５のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ１は配列番号６のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ２は配列番号７のアミノ酸配列を含み；およびＬＣＤＲ３は配列番号８のアミノ酸配列を含む。なお他の実施形態において、抗ＩＬ−４Ｒ抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１を含むＨＣＶＲと配列番号２を含むＬＣＶＲを含む。特定の実施形態において、本発明の方法は、抗ＩＬ−４Ｒ抗体の使用を含み、該抗体は、配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態において、抗ＩＬ−４Ｒ抗体は、配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む例示的な抗体は、デュピルマブとして知られている完全なヒト抗ＩＬ−４Ｒ抗体である。特定の例示的な実施形態によれば、本発明の方法は、デュピルマブまたはその生物学的同等物の使用を含む。用語「生物学的に同等な」とは、本明細書で使用するとき、同様の実験条件下で単回投薬または複数回投薬のいずれかで同じモル用量で投与した場合、吸収の速度および／または程度が、デュピルマブのそれと比較して有意な差を示さない医薬同等物または医薬代替物である抗ＩＬ−４Ｒ抗体もしくはＩＬ−４Ｒ結合タンパク質またはそれらの断片を意味する。本発明との関連で、この用語は、安全性、純度および／または効力においてデュピルマブと比較して臨床的に意味のある差がない、ＩＬ−４Ｒに結合する抗原結合タンパク質を意味する。

特定の具体的な実施形態において、本発明の方法は、配列番号９のＨＣＶＲ配列と配列番号１０のＬＣＶＲ配列を含む抗マウスＩＬ−４Ｒ抗体またはその抗原結合断片の使用を含む。例示的な実施形態において、本発明の方法は、好酸球性食道炎のマウスモデルにおいて、食道の好酸球浸潤の減少における抗マウス抗ＩＬ−４Ｒ抗体（「抗ｍＩＬ−４Ｒα」）の使用を含む。

本発明の方法との関連で使用することができる他の抗ＩＬ−４Ｒα抗体は、例えば、ＡＭＧ３１７と称し、ＡＭＧ３１７として当該技術分野において公知である抗体（Ｃｏｒｒｅｎら、２０１０年、Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．、１８１（８）：７８８〜７９６）または米国特許第７，１８６，８０９号、米国特許第７，６０５，２３７号、米国特許第７，６０８，６９３号または米国特許第８，０９２，８０４号に記載されている抗ＩＬ−４Ｒα抗体のいずれかを含む。

本発明の方法との関連で使用される抗ＩＬ−４Ｒα抗体は、ｐＨ依存的な結合特性を有することができる。例えば、本発明の方法において使用するための抗ＩＬ−４Ｒα抗体は、中性ｐＨと比較して酸性ｐＨにおいて減少したＩＬ−４Ｒαに対する結合を示し得る。あるいは、本発明の抗ＩＬ−４Ｒα抗体は、中性ｐＨと比較して、酸性ｐＨにおいてその抗原に対して増強した結合を示すことができる。表現「酸性ｐＨ」は、約６．２未満のｐＨ値、例えば、約６．０、５．９５、５．９、５．８５、５．８、５．７５、５．７、５．６５、５．６、５．５５、５．５、５．４５、５．４、５．３５、５．３、５．２５、５．２、５．１５、５．１、５．０５、５．０、またはそれ未満を含む。本明細書で使用されるとき、表現「中性ｐＨ」は、約７．０から約７．４のｐＨを意味する。表現「中性ｐＨ」は、約７．０、７．０５、７．１、７．１５、７．２、７．２５、７．３、７．３５および７．４のｐＨ値を含む。

特定の例において、「中性ｐＨと比較して酸性ｐＨにおいて減少したＩＬ−４Ｒαに対する結合」は、中性ｐＨにおいてＩＬ−４Ｒαに結合する抗体結合のＫ_Ｄ値に対する酸性ｐＨにおいてＩＬ−４Ｒαに結合する抗体のＫ_Ｄ値（または逆）によって表される。例えば、抗体またはその抗原結合抗体が約３．０またはそれを超える酸性／中性Ｋ_Ｄ比を示す場合、抗体またはその抗原結合断片は、本発明の目的で、「中性ｐＨと比較して酸性ｐＨにおいて減少したＩＬ−４Ｒαに対する結合」を示すものとしてみなされる場合がある。特定の例示的な実施形態において、本発明の抗体または抗原結合断片に関する酸性／中性Ｋ_Ｄ比は、約３．０、３．５、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０、１０．５、１１．０、１１．５、１２．０、１２．５、１３．０、１３．５、１４．０、１４．５、１５．０、２０．０、２５．０、３０．０、４０．０、５０．０、６０．０、７０．０、１００．０またはそれを超えるものであり得る。

ｐＨ依存的な結合特性を有する抗体は、例えば、中性ｐＨと比較して、酸性ｐＨで特定の抗原に対する減少（または増強）した結合について抗体集団をスクリーニングすることによって取得することができる。加えて、アミノ酸レベルでの抗原結合ドメインの修飾は、ｐＨ依存的特性を有する抗体を得ることができる。例えば、抗原結合ドメイン（例えば、ＣＤＲ内）の１つまたはそれ以上のアミノ酸をヒスチジン残基で置換することによって、中性ｐＨと比較して酸性ｐＨで抗原結合が減少した抗体を得ることができる。本明細書で使用されるとき、表現「酸性ｐＨ」とは、６．０またはそれ未満のｐＨを意味する。

医薬組成物
本発明は、対象にＩＬ−４Ｒ阻害剤を投与することを含む方法を含み、ＩＬ−４Ｒ阻害剤は医薬組成物内に含有される。本発明の医薬組成物は、適切な担体、賦形剤、および適切な転写、送達、耐性などを提供する他の薬剤とともに製剤化することができる。多数の適切な製剤は、薬剤師に公知の処方において見出すことができる：Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ。これらの製剤としては、例えば、粉末、ペースト、軟膏、ゼリー、ワックス、油、脂質、ベシクルを含む脂質（カチオン性またはアニオン性）（例えば、ＬＩＰＯＦＥＣＴＩＮ（商標））、ＤＮＡコンジュゲート、無水吸収ペースト、水中油および油中水エマルジョン、エマルジョンカーボワックス（様々な分子量のポリエチレングリコール）、半固体ゲルならびにカーボワックスを含む半固体混合物が挙げられます。また、Ｐｏｗｅｌｌら 「Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｏｆ ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ ｆｏｒ ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ」ＰＤＡ（１９９８年）Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ Ｔｅｃｈｎｏｌ ５２：２３８〜３１１を参照されたい。

様々な送達系が公知であり、本発明の医薬組成物を投与するために使用することができ、例えば、リポソーム、微粒子、マイクロカプセル、変異ウイルスを発現することができる組換え細胞への封入、受容体媒介性エンドサイトーシスが挙げられる（例えば、Ｗｕら、１９８７年、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２：４４２９〜４４３２頁を参照されたい）。投与方法には、限定されないが、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻腔内、硬膜外および経口経路が含まれる。組成物は、任意の便利な経路によって、例えば、点滴またはボーラス注射によって、上皮または粘膜皮膚内壁（例えば、口腔粘膜、直腸および腸粘膜など）を介した吸収によって投与することができ、他の生物学的に活性な薬剤と一緒に投与することができる。

本発明の医薬組成物は、標準的な針およびシリンジで皮下または静脈内に送達することができる。さらに、皮下送達に関して、ペン型送達デバイスは、容易に、本発明の医薬組成物を送達するという用途を有する。このようなペン型送達デバイスは、再利用可能または使い捨てであり得る。再利用可能なペン型送達デバイスは、一般に、医薬組成物を含有する交換可能なカートリッジを利用する。カートリッジ内の医薬組成物の全てが投与され、カートリッジが空になると、空のカートリッジは容易に破棄され、医薬組成物を含む新しいカートリッジと交換することができる。ペン型送達デバイスは、再利用することができる。使い捨てのペン型送達デバイスでは、交換可能なカートリッジはない。むしろ、使い捨てのペン型送達デバイスは、デバイス内のリザーバ内に保持された医薬組成物で予め充填する。リザーバにおいて医薬組成物が空になると、デバイス全体が廃棄される。

特定の状況において、医薬組成物は、制御放出システムで送達することができる。一実施形態において、ポンプを使用することができる。別の実施形態において、ポリマー材料を使用することができる；Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ、ＬａｎｇｅｒおよびＷｉｓｅ（編集）、１９７４年、ＣＲＣ Ｐｒｅｓ．、Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ、Ｆｌｏｒｉｄａを参照されたい。さらに別の実施形態において、放出制御システムは、組成物の標的の近傍に配置することができ、したがって、全身投薬の一部のみを必要とする（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ、１９８４年、ｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ、上述、ｖｏｌ．２、ｐｐ．１１５〜１３８を参照されたい）。他の放出制御システムは、Ｌａｎｇｅｒ、１９９０、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７〜１５３３頁による概説において検討されている。

注射用調製剤は、静脈内、皮下、皮内および筋肉内注射剤、点滴剤などを含むことができる。これらの注射調製剤は、公知の方法によって調製することができる。例えば、注射用調製剤は、例えば、無菌の水性媒体または通常、注射剤に用いられる油性媒体中で上述した抗体またはその塩を溶解し、懸濁しまたは乳化することによって調製することができる。注射用の水性媒体として、例えば、生理食塩水、グルコースおよび他の補助剤を含有する等張液があり、これらは、アルコール（例えば、エタノール）、多価アルコール（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、非イオン性界面活性剤［例えば、ポリソルベート８０、ＨＣＯ−５０（水素化ヒマシ油のポリオキシエチレン（５０モル）付加物）］などの適切な可溶化剤と併用することができる。油性媒体として、例えば、ゴマ油、大豆油などが用いられ、これは、安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどの可溶化剤を併用することができる。このようにして調製された注射剤は、好ましくは、適切なアンプル中に充填される。

有利には、上述の経口または非経口用の医薬組成物は、有効成分の用量を適合するように適した単位用量の投薬形態に調製される。単位用量のこのような投薬形態には、例えば、錠剤、丸剤、カプセル、注射剤（アンプル）、坐剤が含まれる。

本発明との関連で使用することができる抗ＩＬ−４Ｒ抗体を含む例示的な医薬組成物は、例えば、米国特許出願公開第２０１２／００９７５６５号に開示されている。

用量
本発明の方法による、対象に投与されるＩＬ−４Ｒ阻害剤（例えば、抗ＩＬ−４Ｒα抗体）の量は、一般に、治療有効量である。本明細書で使用するとき、語句「治療有効量」とは、以下：（ａ）好酸球性食道炎の症状の重症度または持続時間の減少；（ｂ）食道における好酸球数の減少；（ｃ）アレルギー反応の予防または軽減；および（ｄ）従来のアレルギー療法の使用または必要性の低減（例えば、抗ヒスタミン剤、充血除去剤、経鼻もしくは吸入ステロイド、抗ＩｇＥ治療、エピネフリンなどの使用の低減または排除）、の１つまたはそれ以上をもたらすＩＬ−４Ｒ阻害剤の量を意味する。

抗ＩＬ−４Ｒα抗体の場合において、治療有効量は、抗ＩＬ−４Ｒ抗体の約０．０５ｍｇから約６００ｍｇ、例えば、約０．０５ｍｇ、約０．１ｍｇ、約１．０ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２．０ｍｇ、約１０ｍｇ、約２０ｍｇ、約３０ｍｇ、約４０ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２７０ｍｇ、約２８０ｍｇ、約２９０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３１０ｍｇ、約３２０ｍｇ、約３３０ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３７０ｍｇ、約３８０ｍｇ、約３９０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４１０ｍｇ、約４２０ｍｇ、約４３０ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４７０ｍｇ、約４８０ｍｇ、約４９０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５１０ｍｇ、約５
２０ｍｇ、約５３０ｍｇ、約５４０ｍｇ、約５５０ｍｇ、約５６０ｍｇ、約５７０ｍｇ、約５８０ｍｇ、約５９０ｍｇまたは約６００ｍｇであり得る。特定の実施形態において、３００ｍｇの抗ＩＬ−４Ｒ抗体を投与する。

個々の用量に含有されるＩＬ−４Ｒ阻害剤の量は、患者の体重の１ｋｇあたりの抗体ミリグラム（すなわち、ｍｇ／ｋｇ）を単位として表される。例えば、ＩＬ−４Ｒ阻害剤は、患者の体重の約０．０００１から約１００ｍｇ／ｋｇの用量で患者に投与することができる。

以下の実施例は、本発明の方法および組成物をどのように作製し、使用するかについて完全な開示および記載を当業者に提供するように記載され、発明者らがそれらの発明としてみなす範囲を限定することを意図しない。使用されている数量（例えば、量、温度など）の精度を確実にするために注力がなされたが、いくらかの実験誤差および偏差は考慮されなければならない。特に断らない限り、部は重量部であり、分子量は平均分子量であり、温度は摂氏であり、圧力は大気圧または大気圧付近である。

抗ＩＬ−４Ｒ抗体はＩＬ−２５の流体力学的ＤＮＡ送達（ＨＤＤ）駆動型のマウスモデルにおいて好酸球性食道炎を減少させる
本実施例において、ＩＬ２５流体力学的ＤＮＡ送達（ＨＤＤ）マウスモデルにおける好酸球性食道炎におけるＩＬ−４Ｒα遮断の効果を評価した。このモデルは、誘導されたＩＬ−２５発現がＩＬ−４Ｒα／ＩＬ−１３Ｒヘテロ二量体受容体を介したＩＬ−１３シグナル伝達を引き起こすという観察に基づき、結果として、食道の好酸球浸潤および粘液産生を含む、胃腸管の好酸球増多をもたらす。

０日目に、Ｂａｌｂ／ｃマウスは、各々が２５μｇのＤＮＡ／マウスである、マウスＩＬ２５ ＤＮＡを発現するプラスミド（「ｐＲＧ９７７／ｍＩｌ２５」、ｎ＝１７）または空ベクター（「ｐＲＧ９７７」、ｎ＝４）のいずれかで、流体力学的ＤＮＡ送達（ＨＤＤ）法によって注射された（例えば、Ｌｉｕら、１９９９年、Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ６：１２５８〜１２６６頁を参照されたい）。プラスミドをＰＢＳ中に希釈し、尾静脈に高容量（体重の１０％［ｍｌ］）および高注射速度（注射あたり６から８秒）で注射した。ｐＲＧ９７７／ｍＩｌ２５ ＤＮＡを注射したマウスは、それぞれ１、３、６および９日目に、抗マウスＩＬ−４Ｒ抗体（「抗ｍＩＬ−４Ｒα」）またはアイソタイプ対照またはマウスのＦｃ領域に融合させたＩＬ−１３受容体アルファの融合タンパク質（デコイ受容体として使用される「ＩＬ−１３Ｒａ２−ｍＦｃ」、Ｙａｓｕｎａｇａら、２００３年；Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ２４：２９３〜３０３頁）のいずれかの皮下（ＳＱ）注射により処置された。各々の用量は、５０ｍｇ／ｋｇ体重であった。この実施例において使用される抗ｍＩＬ−４Ｒα抗体は、アミノ酸配列が配列番号９であるＨＣＶＲおよびアミノ酸配列が配列番号１０を含むＬＣＶＲを含む抗体であった。ＩＬ−１３Ｒａ２−ｍＦｃ構築物は、配列番号１２のアミノ酸配列を有した。食道および血液分析のために、マウスを１２日目に安楽死させた。採血し、血清をＥＬＩＳＡによる総ＩｇＥレベルを検出するために使用した。

各々のマウスから採取した食道を固定し、パラフィン包埋し、ヘマトキシリン／エオシンで染色した。切片を病理学について採点し、好酸球浸潤のレベルを以下のように採点した：
スコア０：食道壁の肥厚の変化がなく、白血球の浸潤がない；
スコア１：低から中程度の白血球浸潤が粘膜下層で検出される；
スコア２：中程度から重度の白血球浸潤が粘膜下層にあり、食道壁の肥厚が検出できる；
スコア３：重度の白血球浸潤が食道壁の顕著な肥厚を生じさせる。

各々の食道の近位部分、中間部分および遠位部分は、１つのスコアによって評価され、動物あたりの最終スコアは、これらの３つの値の平均であった。

Ｉｌ２５が注射され、アイソタイプ対照抗体またはＩＬ−１３Ｒａ２−ｍＦｃ融合タンパク質で処置されたマウスは、ＩＬ−１３Ｒａ２−ｍＦＣ処置と比較して、抗ｍＩＬ−４Ｒα ｍＡｂで処置されたマウスにおいて有意に減少させた血清ＩｇＥレベルの増加を示した（図１を参照されたい）。組織学採点結果を図２に示す。抗ｍＩＬ−４Ｒα ｍＡｂとＩＬ−１３Ｒａ２−ｍＦｃの両方は、食道の病理学スコアを約５０％に減少させた（図２を参照されたい）。最初に有意性を計算するためにｔ−検定を用いた；しかしながら、ＡＮＯＶＡ（またはノンパラメトリッククラスカル・ワリス検定）を後の分析のために使用した。

抗ＩＬ−４Ｒ抗体はピーナッツアレルギーのマウスモデルにおいて食道の好酸球浸潤を低減させる
この実施例において、マウスモデルにおいてピーナッツアレルゲン誘導性の好酸球性食道炎におけるＩＬ−４Ｒα遮断の効果を評価した。

Ｂａｌｂ／ｃマウスは、０日および１４日目に１ｍｇのアルミニウム塩（ミョウバン）アジュバント中の２００μｇのピーナッツアレルゲン抽出物（ＰＡＥ）で感作された。３週間後、２１日目に、マウスは、５０μｌのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に溶解させた１００μｇのＰＡＥが鼻腔内に負荷された。負荷を２４日目、２７日目および２１日目に繰り返した。２１日目に開始して、負荷されたマウスの１つのグループは処置せず、２つのグループは、２５ｍｇ／ｋｇ用量の抗ＩＬ−４Ｒ抗体（上記される「抗ｍＩＬ−４Ｒ ｍＡｂ」）またはアイソタイプ対照ＩｇＧ１のいずれかで注射された。処置は、２１日目に開始して、１週間に２回適用された。マウスは、３１日目にＰＥＡでの最終負荷から２４時間後に安楽死され、血液試料および食道を回収した。

食道を緩衝化したホルマリン中で固定し、パラフィン包埋し、組織の切片スライドをＨ＆Ｅで染色した。白血球浸潤と炎症の程度は、以下の採点を用いて盲検法で採点した：０＝食道壁の肥厚の変化がなく、白血球の浸潤がない；１＝低から中程度の白血球浸潤が粘膜下層で検出される；２＝中程度から重度の白血球浸潤が粘膜下層にあり、食道壁の肥厚が検出できる；３＝重度の白血球浸潤が食道壁の顕著な肥厚を生じさせる。食道の長さのそれぞれの２５％が１つのスコア（食道あたり４つのスコア）を受け、平均を計算し、「スコア／マウス」として使用された。

差分細胞数および活性について、食道組織をリベラーゼＤＬ酵素で３０分間、３７℃で消化した（群あたりｎ＝５）。リベラーゼＤＬ消化後、細胞懸濁液を濾過し、細胞を好酸球、Ｔ細胞、好中球およびマクロファージに特異的なマーカーで染色し、フローサイトメトリーによって分析した。リベラーゼＤＬ消化によって食道から単離された細胞の一部を、Ｔ細胞を活性化するために抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８抗体で刺激し、３日間培養した。組織培養上清をＴｈ２サイトカイン（ＩＬ−１３、ＩＬ−１０およびＩＬ−４）レベルについてＥＬＩＳＡによってアッセイした。

ピーナッツアレルゲンによる感作もピーナッツアレルゲンの負荷もされなかったマウスの群についての平均スコアは０であった。感作および負荷されたが、処置されなかったマウスは０．９２５±０．４９７（平均±ＳＤ）のスコアであり、感作および負荷され、さらにアイソタイプ対照または抗ｍＩＬ−４Ｒ ｍＡｂで処置されたマウスはそれぞれ０．９７５±０．６１５および０．７２５±０．６５２のスコアであった。アイソタイプ対照群、抗ｍＩＬ−４Ｒ ｍＡｂ群または未処置群の間の差異は、一方向ＡＮＯＶＡ検定によれば、統計学的に有意ではなかった（図３に示される）。

血液はまた、死後の心臓穿刺によって回収され、血清は、総ＩｇＥレベルとピーナッツ特異的ＩｇＧ１（ＰＡＥ特異的ＩｇＧ１）レベルについてＥＬＩＳＡによって分析された。簡単に述べると、ＰＡＥ特異的ＩｇＧ１検出について、ＰＡＥを被覆したプレートを連続希釈した血清試料とともにインキュベートし、その後、抗マウスＩｇＧ１−ＨＲＰコンジュゲート抗体とともにインキュベートした。ＩｇＧ１血清レベルの相対的レベルを力価単位として表した（ＯＤ４５０はＯＤ４５０≦０．５を達成するのに必要とされる希釈率で掛け算された）。総ＩｇＥレベルの検出について、連続希釈された血清試料は、９６ウェルプレートで抗ＩｇＥ捕捉抗体とともにインキュベートされ、ＩｇＥは、ビオチン化された抗マウスＩｇＥの二次抗体によって検出された。ＨＲＰ標識された精製マウスＩｇＥを標準として使用した。

未感作および未負荷のマウスの血液におけるＰＡＥ特異的なＩｇＧ１および総ＩｇＥレベルは、それぞれ、４３９±１７．２５Ｕおよび６４４±３３７．７ｎｇ／ｍｌであった。追加の処置がないＰＡＥ感作および負荷されたマウスにおいて、ＰＡＥ特異的なＩｇＧ１および総ＩｇＥレベルは、それぞれ、５７８２２±８４５５Ｕおよび２８５７±１１４９ｎｇ／ｍｌに増加した。アイソタイプ対照で処置されたマウスは、６１３０４±１７２９３ＵのＰＡＥ特異的なＩｇＧ１および２５１６±１６１３ｎｇ／ｍｌのＩｇＥを示した。抗ｍＩＬ−４Ｒα ｍＡｂによる処置は、ＩｇＧ１のＰＡＥ特異的なレベルを有意に影響を与えなかったが（４８１２８±２２６９１Ｕ）、アイソタイプ対照処置または未処置のマウスのいずれかと比較して、ＩｇＥの総血清レベルを有意に減少させた（３００±１８７．８ｎｇ／ｍｌ）（図４に示される）。

好酸球性食道炎（ＥｏＥ）を患っている成人患者における皮下投与されたデュピルマブの臨床試験
この研究は、ＥｏＥを患っている成人患者におけるデュピルマブの有効性、安全性、忍容および免疫原性を調査するために、３２週間の二重盲検、無作為化、プラセボ対照とした試験である。デュピルマブは、配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖；配列番号１／２を含むＨＣＶＲ／ＬＣＶＲアミノ酸配列対；および配列番号３〜８を含む重鎖と軽鎖ＣＤＲ配列を含む完全ヒト抗ＩＬ−４Ｒ抗体である。

研究治療は、安全性フォローアップの１６週間とともに、最大１２週間投与される。インフォームドコンセントを与えた後、１日目のベースライン来院の４週間以内に行われたスクリーニング来院時に適格を評価する。シュトラウマン嚥下障害測定法（ＳＤＩ）（０−９）症状日記データ（１週間の想起期間）とＥｏＥ活動係数（ＥｏＥＡＩ）症状日記データ（１週間の想起期間）をスクリーニング来院中と研究期間中の毎週回収した（Ｓｔｒａｕｍａｎｎら、２０１０年、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １３９：１５２６〜１５３７頁）。成人ＥｏＥクオリティオブライフアンケートは、スクリーニング来院時と治療来院の終了時に回収される。適格基準を満たす患者は、１日目のベースライン評価を受ける。患者は１：１の比率で無作為化され、１２週間の二重盲検段階で週１回、皮下デュピルマブ３００ｍｇまたはプラセボを受ける。

近位レベルと遠位レベルの両方で食道の組織学的生検標本か１５ｅｏｓ／ｈｐｆ以上の証明されたピーク細胞密度によって確認されるＥｏＥの診断の病歴、嚥下障害の少なくとも２回の発症の病歴、および付随するアレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎もしくは食物アレルギーの証明された病歴または随伴；あるいは末梢好酸球数の増加（≧３００細胞／μＬ）または血清ＩｇＥの上昇（≧１５０ｋＵ／Ｌ）を有する１８〜５０差異の患者を研究に含める。

治験薬治療は、１日目に６００ｍｇの負荷用量のデュピルマブ、続く、週１回の３００ｍｇ用量；または１日目に２倍用量のプラセボ、続く、週１回のプラセボ用量を含む。

患者は、１日目に２回の注射（負荷用量を含む）、続く、週１回の注射を受ける。１２週間の二重盲検治療期の終了時に、患者はさらに１６週間追跡される。研究集団は、経口的な（ｓｗａｌｌｏｗｅｄ）局所コルチコステロイドの使用に対する以前の応答によって層別化される。不適切な応答は、少なくとも２カ月の局所療法後に、組織好酸球を標準化できず、症状を解消できないものと定義される。食道生検は、スクリーニング時および１２週目で行われる。１２週間前に研究を中止した患者は、彼らの早期終了来院時に行われる手段がある。ＥｏＥ内視鏡基準スコアに基づく炎症の測定および食道機能のリモデリングは、手段の一部として含まれる。

全ての患者は、研究治療を継続しながら、必要に応じて併用薬（禁止薬物療法を除く）を受ける。必要に応じて、レスキュー薬（例えば、全身および局所コルチコステロイドなど）または緊急な食道拡張が研究患者に与えられる。レスキュー療法を受けている患者は、研究治療を中止される。安全な実験室および臨床効果の測定は特定の来院で行われる。治療後の追跡来院は１６、２０、２４および２８週で行われる。ＤＮＡおよびＲＮＡ分析用の試料は、オプションのゲノミクスサブ研究に登録した患者から回収される。食道生検ＲＮＡのトランスクリプトーム配列決定またはマイクロアレイ分析が行われる。

研究の第一の目的は、活動性疾患を有する成人患者においてＥｏＥを制御するために、プラセボと比較して、デュピルマブの繰り返しの週１回の皮下投薬（１２週間の治療）の潜在的有効性を評価することである。第二の目的は、（ａ）活性なＥｏＥを患っている成人患者におけるデュピルマブの繰り返しの皮下投薬の安全性、忍容性および免疫原性を評価すること；（ｂ）食道生検におけるピーク好酸球数（ｅｏｓ／ｈｐｆ）におけるデュピルマブの効果を評価こと；（ｃ）成人ＥｏＥ患者におけるデュピルマブの薬物動態を評価すること；（ｄ）開発中の臨床評価項目の登録評価項目スキーマを評価し、最適化すること；および（ｅ）組織学および循環マーカー（ＴＡＲＣおよびエオタキシン−３）を含むバイオマーカーを用いて、デュピルマブの薬力学的効果を評価することである。

患者は、（ａ）ベースラインから１２週までの結果を報告した好酸球性食道炎活性係数（ＥｏＥＡＩ）患者におけるパーセント変化；（ｂ）ベースラインから１２週までのＳＤＩスコアの変化；および（ｃ）ベースラインから１２週までの血清ＴＡＲＣと血漿エオタキシン−３の低減について監視される。監視される他の評価項目としては、食道過形成、炎症、炎症性遺伝子サインおよびリモデリング（組織学）の減少、ならびに高倍率視野（４００倍）あたりの食道粘膜の好酸球数の減少が含まれる。

本発明は、本明細書に記載されている特定の実施形態によって範囲が限定されるものではない。実際に、本明細書に記載されている変更に加えて、本発明の様々な変更は、前述の説明および添付の図面から当業者に明らかになる。このような変更は、添付の特許請求の範囲内に含まれることが意図される。

Claims (36)

1. インターロイキン−４受容体（ＩＬ−４Ｒ）阻害剤を含む治療有効量の医薬組成物をそれを必要とする対象に投与することを含む、好酸球性食道炎（ＥｏＥ）の少なくとも１つの症状または兆候を治療、予防または改善する方法。
2. ＥｏＥの症状または兆候が、食道の好酸球浸潤、食道壁の肥厚、拒食、嘔吐、腹痛、胸焼け、吐き戻し、嚥下障害および食片圧入からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
3. 対象が、乳製品、卵、小麦、大豆、トウモロコシ、魚、甲殻類、ピーナッツ、木の実、牛肉、鶏肉、オート麦、大麦、豚肉、インゲン、リンゴおよびパイナップルからなる群から選択される食品に含有される食物アレルゲンに対してアレルギー反応を示す、請求項１または２に記載の方法。
4. 対象が、ダスト、花粉、カビ、植物、ネコ、イヌまたは昆虫の１つに由来する非食物アレルゲンに対してアレルギー反応を示す、請求項１または２に記載の方法。
5. ＩＬ−４Ｒ阻害剤の投与が、対象におけるＥｏＥ関連バイオマーカーレベルの減少をもたらす、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
6. ＥｏＥ関連バイオマーカーが、食道好酸球、エオタキシン−３、ペリオスチン、（総およびアレルゲン特異的）血清ＩｇＥ、ＩＬ−１３、ＩＬ−５、血清胸腺および活性化制御ケモカイン（ＴＡＲＣ）、胸腺間質性リンホポエチン（ＴＳＬＰ）、血清好酸球カチオン性タンパク質（ＥＣＰ）および好酸球由来神経毒（ＥＤＮ）からなる群から選択される、請求項５に記載の方法。
7. 好酸球性食道炎（ＥｏＥ）の少なくとも１つの症状または兆候を治療、予防または改善するための方法であって、
   対象をＥｏＥに罹りやすい状態にするアレルゲンに対するアレルギー反応を有する対象を選択することと
   インターロイキン−４受容体（ＩＬ−４Ｒ）阻害剤を含む治療有効量の医薬組成物をそれを必要とする対象に投与することと
   を含む前記方法。
8. アレルゲンが、乳製品、卵、小麦、大豆、トウモロコシ、魚、甲殻類、ピーナッツ、木の実、牛肉、鶏肉、オート麦、大麦、豚肉、インゲン、リンゴおよびパイナップルからなる群から選択される食品に含有される食物アレルゲンである、請求項７に記載の方法。
9. アレルゲンが、ダスト、花粉、カビ、植物、ネコ、イヌまたは昆虫の１つに由来する非食物アレルゲンである、請求項７に記載の方法。
10. ＥｏＥの症状または兆候が、食道の好酸球浸潤、食道壁の肥厚、拒食、嘔吐、腹痛、胸焼け、吐き戻し、嚥下障害および食片圧入からなる群から選択される、請求項７〜９のいずれか１項に記載の方法。
11. ＩＬ−４Ｒ阻害剤の投与が、対象におけるＥｏＥ関連バイオマーカーレベルの減少をもたらす、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の方法。
12. ＥｏＥ関連バイオマーカーが、食道好酸球、エオタキシン−３、ＩｇＥ、ＴＡＲＣ、ペリオスチン、ＩＬ−５、ＩＬ−１３、胸腺間質性リンホポエチン（ＴＳＬＰ）および好酸球由来神経毒（ＥＤＮ）からなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。
13. 好酸球性食道炎（ＥｏＥ）の少なくとも１つの症状または兆候を治療、予防または改善する方法であって、
    対象が、食道好酸球、エオタキシン−３、ペリオスチン、（総およびアレルゲン特異的）血清ＩｇＥ、ＩＬ−１３、ＩＬ−５、ＴＡＲＣ、ＴＳＬＰ、血清ＥＣＰおよびＥＤＮからなる群から選択されるバイオマーカーの上昇したレベルを有する、好酸球性食道炎（ＥｏＥ）の少なくとも１つの症状または兆候を示す対象を選択することと、
    インターロイキン−４受容体（ＩＬ−４Ｒ）阻害剤を含む治療有効量の医薬組成物をそれを必要とする対象に投与することと
    を含む前記方法。
14. 対象が、治療前または治療時（「ベースライン」）に食道において高倍率視野（ｈｐｆ）あたり１５個以上の好酸球を示すことを基準にして選択される、請求項１３に記載の方法。
15. 対象が、ＩＬ−４Ｒ阻害剤の投与後１０日目にベースラインからｈｐｆあたりの好酸球数の少なくとも５０％の減少を示す、請求項１４に記載の方法。
16. 対象が、治療前または治療の開始時（「ベースライン」）に約５０ｐｇ／ｍＬより大きいエオタキシン−３レベルを示すことを基準にして選択される、請求項１３に記載の方法。
17. 対象が、投与後１０日目にベースラインからエオタキシン−３レベルにおいて少なくとも５０％の減少を示す、請求項１６に記載の方法。
18. 対象が、乳製品、卵、小麦、大豆、トウモロコシ、魚、甲殻類、ピーナッツ、木の実、牛肉、鶏肉、オート麦、大麦、豚肉、インゲン、リンゴおよびパイナップルからなる群から選択される食品に含有される食物アレルゲンに対してアレルギー反応を示す、請求項１３〜１７のいずれか１項に記載の方法。
19. 対象が、ダスト、花粉、カビ、植物、ネコ、イヌまたは昆虫からなる群から選択される供給源由来の非食物アレルゲンに対してアレルギー反応を示す、請求項１３〜１７のいずれか１項に記載の方法。
20. 兆候が、食道の好酸球浸潤、食道壁の肥厚、拒食、嘔吐、腹痛、胸焼け、吐き戻し、嚥下障害および食片圧入からなる群から選択される、請求項１３〜１９のいずれか１項に記載の方法。
21. インターロイキン−４受容体（ＩＬ−４Ｒ）阻害剤を含む治療有効量の医薬組成物をそれを必要する対象に投与することを含む、好酸球性食道炎（ＥｏＥ）関連バイオマーカーのレベルを減少させる方法。
22. ＥｏＥ関連バイオマーカーが、食道好酸球数、エオタキシン−３、ＴＡＲＣ、ペリオスチン、ＩｇＥ、ＩＬ−５、ＩＬ−１３、胸腺間質性リンホポエチン（ＴＳＬＰ）および好酸球由来神経毒（ＥＤＮ）からなる群から選択される、請求項２１に記載の方法。
23. 対象が、治療前または治療の開始時（「ベースライン」）に食道において高倍率視野（ｈｐｆ）あたり１５個以上の好酸球を示す、請求項２２に記載の方法。
24. 食道における好酸球数が、ＩＬ−４Ｒ阻害剤の投与後１０日目までにベースラインから少なくとも５０％減少する、請求項２３に記載の方法。
25. 対象が、乳製品、卵、小麦、大豆、トウモロコシ、魚、甲殻類、ピーナッツ、木の実、牛肉、鶏肉、オート麦、大麦、豚肉、インゲン、リンゴおよびパイナップルからなる群から選択される食品に含有される食物アレルゲンに対してアレルギー反応を示す、請求項２１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
26. 対象が、ダスト、花粉、カビ、植物、ネコ、イヌまたは昆虫の１つから選択される供給源由来の非食物アレルゲンに対してアレルギー反応を示す、請求項２１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
27. 対象が、好酸球性食道炎（ＥｏＥ）を有する、請求項２１〜２６のいずれか１項に記載の方法。
28. 対象が、ＩＬ−４Ｒ阻害剤の投与前または投与時に、アトピー性皮膚炎、喘息、アレルギー性鼻炎およびアレルギー性結膜炎からなる群から選択される疾患もしくは障害を有するまたはそれと診断される、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の方法。
29. ＩＬ−４Ｒ阻害剤が第２の治療薬または第２の治療法を併用して投与され、第２の治療薬または第２の治療法が、ＩＬ−１β阻害剤、ＩＬ−５阻害剤、ＩＬ−９阻害剤、ＩＬ−１３阻害剤、ＩＬ−１７阻害剤、ＩＬ−２５阻害剤、ＴＮＦα阻害剤、エオタキシン−３阻害剤、ＩｇＥ阻害剤、プロスタグランジンＤ２阻害剤、免疫抑制剤、コルチコステロイド、グルココルチコイド、プロトンポンプ阻害剤、ＮＳＡＩＤ、アレルゲン除去および食事管理からなる群から選択される、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の方法。
30. ＩＬ−４Ｒ阻害剤が、ＩＬ−４Ｒαに結合し、ＩＬ−４および／またはＩＬ−１３の、１型もしくは２型ＩＬ−４Ｒ受容体との相互作用を阻害する抗体またはその抗原結合断片である、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の方法。
31. 抗体またはその抗原結合断片が、ＩＬ−４およびＩＬ−１３の、１型と２型ＩＬ−４受容体の両方との相互作用を阻害する、請求項３０に記載の方法。
32. 抗体およびその抗原結合断片が、配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）の重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）および配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）を含む、請求項３１に記載の方法。
33. 抗体およびその抗原結合断片が、３つのＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２およびＨＣＤＲ３）および３つのＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２およびＬＣＤＲ３）を含み、ＨＣＤＲ１は配列番号３のアミノ酸配列を含み；ＨＣＤＲ２は配列番号４のアミノ酸配列を含み；ＨＣＤＲ３は配列番号５のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ１は配列番号６のアミノ酸配列を含み；ＬＣＤＲ２は配列番号７のアミノ酸配列を含み；およびＬＣＤＲ３は配列番号８のアミノ酸配列を含む、請求項３２に記載の方法。
34. ＨＣＶＲが配列番号１のアミノ酸配列を含み、およびＬＣＶＲが配列番号２のアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の方法。
35. 抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号１４のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む、請求項３０または３１に記載の方法。
36. ＩＬ−４Ｒ阻害剤がデュピルマブまたはその生物学的同等物である、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の方法。

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