JP2013532122A - 修飾ヌクレオシド、その類似体、およびこれらから調製されるオリゴマー化合物 - Google Patents
修飾ヌクレオシド、その類似体、およびこれらから調製されるオリゴマー化合物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2013532122A JP2013532122A JP2013508162A JP2013508162A JP2013532122A JP 2013532122 A JP2013532122 A JP 2013532122A JP 2013508162 A JP2013508162 A JP 2013508162A JP 2013508162 A JP2013508162 A JP 2013508162A JP 2013532122 A JP2013532122 A JP 2013532122A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- substituted
- alkyl
- och
- independently
- alkoxy
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/712—Nucleic acids or oligonucleotides having modified sugars, i.e. other than ribose or 2'-deoxyribose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
- C07H19/067—Pyrimidine radicals with ribosyl as the saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
- C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
- C07H19/167—Purine radicals with ribosyl as the saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
- C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/02—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with ribosyl as saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1135—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against oncogenes or tumor suppressor genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/11—Antisense
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/315—Phosphorothioates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/318—Chemical structure of the backbone where the PO2 is completely replaced, e.g. MMI or formacetal
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/321—2'-O-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/322—2'-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/323—Chemical structure of the sugar modified ring structure
- C12N2310/3231—Chemical structure of the sugar modified ring structure having an additional ring, e.g. LNA, ENA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/345—Spatial arrangement of the modifications having at least two different backbone modifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
- C12N2310/346—Spatial arrangement of the modifications having a combination of backbone and sugar modifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/50—Methods for regulating/modulating their activity
- C12N2320/51—Methods for regulating/modulating their activity modulating the chemical stability, e.g. nuclease-resistance
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Virology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
【選択図】なし
Description
本発明は、NIHの発注した契約#5R44GM076793−03に基づき米国政府の支援でなされたものである。米国政府は本発明の一定の権利を有する。
本発明は、電子フォーマットの配列表と共に出願される。配列表は、2011年4月26日に作成され、サイズが10Kbであり、20110426_CHEM0067WOSEQ.txtと題するファイルとして提供される。配列表の電子フォーマットの情報は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
の疾患の発生に関与する遺伝子発現を選択的に調節する薬物治療のツールとしても、きわめて魅力あるものとなる。
WO92/13869として公開された、国際出願番号:PCT/US92/01020を参照)。
9;公開PCT出願:WO93/25565;WO02/18406;WO05/049582号、米国特許第5,314,893号;第5,607,922号;第6,455,507号を参照。
Nucleic Acids,2001,20(4−7),785−788;Wangら,J.Am.Chem.,2000,122,8595−8602;公開PCT出願WO06/047842;公開PCT出願WO01/049687を参照。これら文献の各々のテキストは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる)。
Med.Chem.,1993,36,2033−2040;Van Aerscholら,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.,1995,34(12),1338−1339;Andersonら,Tetrahedron Letters,1996,37(45),8147−8150;Herdewijnら,Liebigs Ann.,1996,1337−1348;De Bouvereら,Liebigs Ann./Recueil,1997,1453−1461;1513−1520;Hendrixら,Chem.Eur.J.,1997,3(1),110−120;Hendrixら,Chem.Eur.J.,1997,3(9),1513−1520;Hossainら,J.Org.Chem.,1998,63,1574−1582;Allartら,Chem.Eur.J.,1999,5(8),2424−2431;Boudouら,Nucleic Acids Res.,1999,27(6),1450−1456;Kozlovら,J.Am.Chem.Soc.,1999,121,1108−1109;Kozlovら,J.Am.Chem.Soc.,1999,121,2653−2656;Kozlovら,J.Am.Chem.Soc.,1999,121,5856−5859;Pochetら,Nucleosides & Nucleotides,1999,18(4&5),1015−1017;Vastmansら,Collection Symposium Series,1999,2,156−160;Froeyenら,Helvetica Chimica Acta,2000,83,2153−2182;Kozlovら,Chem.Eur.J.,2000,6(1),151−155;Atkinsら,Parmazie,2000,55(8),615−617;Lescrinierら,Chemistry & Biology,2000,7,719−731;Lescrinierら,Helvetica Chimica
Acta,2000,83,1291−1310;Wangら,J.Am.Chem.,2000,122,8595−8602;米国特許出願第2004/0033967号;米国公開特許出願第2008/0038745号;米国公開発行済み特許第7,276,592号を参照)。DNA類似体も論文(Leumann,J.C,Bioorganic & Medicinal Chemistry,2002,10,841−854を参照)で総説がなされ、この論文には(ヘキシトール核酸ファミリーの名称で)テトラヒドロピランヌクレオシド類似体の一般的考察が掲載されている。
おいてHNA核酸とも呼ばれる)はすでに調製され、サイレンシング能力が試験された(2006年5月11日に公開された公開PCT出願WO06/047842を参照)。
Ic
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
M1は、H、OH、またはOR1であり;
M2は、OH、OR1、またはN(R1)(R2)であり;
R1とR2は、それぞれ独立して、C1−C6アルキルまたは置換C1−C6アルキルであり;
rは、0または1であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
M3は、O、S、NR14、C(R15)(R16)、C(R15)(R16)C(R17)(R18)、C(R15)=C(R17)、OC(R15)(R16)、またはOC(R15)(Bx2)であり;
R14は、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
R15、R16、R17、およびR18は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Bx1は、ヘテロ環塩基部分であり;
またはBx2が存在する場合、Bx2はヘテロ環塩基部分であり、Bx1はH、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
J4、J5、J6、およびJ7は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
または、J4はJ5とJ7のいずれか一方と架橋を形成し、ここで当該架橋は、O、S、NR19、C(R20)(R21)、C(R20)=C(R21)、C[=C(R20)(R21)]、C(=O)から選ばれる1〜3個の結合ビラジカル基を含み、J5、J6、J7のうち他の2つは、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
R19、R20、およびR21は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X1]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
X1は、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=X2)J1、OC(=X2)N(J1)(J2)、およびC(=X2)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
X2は、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
Q1とQ2は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、または置換C1−C6アルコキシである。いくつかの実施形態では、Q1とQ2はそれぞれHである。いくつかの実施形態では、Q1とQ2はそれぞれ独立して、Hまたはハロゲンである。いくつかの実施形態では、Q1とQ2のいずれか一方はHであり、Q1とQ2の他方はF、CH3、またはOCH3である。
RaとRcは、それぞれ独立して、保護されたヒドロキシル、保護されたチオール、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、保護されたアミノ、または置換アミノであり;
Rbは、OまたはSである。いくつかの実施形態では、RbはOであり、RaとRcは、それぞれ独立して、OCH3、OCH2CH3、またはOCH(CH3)2である。
CH2、O(CH2)2−OCH3、O(CH2)2−O(CH2)2−N(CH3)2、OCH2C(=O)−N(H)CH3、OCH2C(=O)−N(H)−(CH2)2−N(CH3)2、またはOCH2−N(H)−C(=NH)NH2である。いくつかの実施形態では、Gは、F、OCH3、またはO(CH2)2−OCH3である。いくつかの実施形態では、GはO(CH2)2−OCH3である。
Ie
RbはOであり;
RaとRcは、それぞれ独立して、OCH3、OCH2CH3、またはOCH(CH3)2である。
IIc
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
T2は、式IIcの化合物をオリゴマー化合物と結合するヌクレオシド間連結基であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
M3は、O、S、NR14、C(R15)(R16)、C(R15)(R16)C(R17)(R18)、C(R15)=C(R17)、OC(R15)(R16)、またはOC(R15)(Bx2)であり;
R14は、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
R15、R16、R17、およびR18は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Bx1は、ヘテロ環塩基部分であり;
またはBx2が存在する場合、Bx2はヘテロ環塩基部分であり、Bx1はH、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
J4、J5、J6、およびJ7は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
または、J4はJ5とJ7のいずれか一方と架橋を形成し、ここで当該架橋は、O、S、NR19、C(R20)(R21)、C(R20)=C(R21)、C[=C(R20)(R21)]、C(=O)から選ばれる1〜3個の結合ビラジカル基を含み、J5、J6、J7のうち他の2つは、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6
アルキニルであり;
R19、R20、およびR21は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X1]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
X1は、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=X2)J1、OC(=X2)N(J1)(J2)、およびC(=X2)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
X2は、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、ZはハロゲンおよびN(E2)(E3)以外であり;
上記オリゴマー化合物は8〜40個のモノマーサブユニットを含み、標的核酸の少なくとも一部分とハイブリダイズ可能である。
Q1とQ2は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、または置換C1−C6アルコキシである。いくつかの実施形態では、Q1とQ2はそれぞれHである。いくつかの実施形態では、Q1とQ2はそれぞれ独立して、Hまたはハロゲンである。いくつかの実施形態では、Q1とQ2のいずれか一方はHであり、Q1とQ2の他方はF、CH3、またはOCH3である。
RaとRcは、それぞれ独立して、保護されたヒドロキシル、保護されたチオール、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、保護されたアミノ、または置換アミノであり;
Rbは、OまたはSである。いくつかの実施形態では、RbはOであり、RaとRcは、それぞれ独立して、OCH3、OCH2CH3、またはCH(CH3)2である。
IId
RbはOであり;
RaとRcは、それぞれ独立して、OCH3、OCH2CH3、またはOCH(CH3)2である。
IIe
Bxは、ウラシル、チミン、シトシン、5−メチルシトシン、アデニン、またはグアニンであり;
T2は、式IIeの化合物をオリゴマー化合物と結合するホスホロチオエートヌクレオシド間連結基であり;
Gは、ハロゲン、OCH3、OCF3、OCH2CH3、OCH2CF3、OCH2−CH=CH2、O(CH2)2−OCH3、O(CH2)2−O(CH2)2−N(CH3)2、OCH2C(=O)−N(H)CH3、OCH2C(=O)−N(H)−(CH2)2−N(CH3)2、またはOCH2−N(H)−C(=NH)NH2である。
ド間連結基またはホスホロチオエートヌクレオシド間連結基である。いくつかの実施形態では、各ヌクレオシド間連結基は、ホスホロチオエートヌクレオシド間連結基である。
第1のオリゴマー化合物と第2のオリゴマー化合物を含む二本鎖組成物であって、第1のオリゴマー化合物は第2のオリゴマー化合物に対して相補的であり、第2のオリゴマー化合物は核酸標的に対して相補的であり;
第1のオリゴマー化合物と第2のオリゴマー化合物の少なくとも1つは、本明細書で提供するオリゴマー化合物であり;
この組成物は1つ以上の5’または3’−末端基を任意で含む、二本鎖組成物を提供する。
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
Q1とQ2は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(R3)(R4)であり;
R3とR4は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=X2)J1、OC(=X2)N(J1)(J2)、およびC(=X2)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
X2は、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、ZはハロゲンおよびN(E2)(E3)以外であり;
上記のオリゴマー化合物または二本鎖組成物は、それぞれ、ssRNAiまたはdsRNAi RISCベースの機構を通じて機能し、5’修飾を持たないオリゴマー化合物と比べて、強化された活性を提供する。このような修飾は、オリゴマー化合物の5’末端、または、非フラノシルモノマーを含むオリゴマー化合物の5’相当位に位置することが可能である。上記で示したビニル基のいずれか1つが、非フラノシル環を有するモノマーに結合する例を実施例で説明する。
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
Q1とQ2は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(R3)(R4)であり;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=X2)J1、OC(=X2)N(J1)(J2)、およびC(=X2)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
X2は、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、ZはハロゲンおよびN(E2)(E3)以外であり;
上記のオリゴマー化合物または二本鎖組成物は、それぞれ、ssRNAiまたはdsRNAi RISCベースの機構を通じて機能し、5’修飾を持たないオリゴマー化合物と比べて、強化された活性を提供する。このような修飾は、オリゴマー化合物の5’末端、または、非フラノシルモノマーを含むオリゴマー化合物の5’相当位に位置することが可能である。
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
上記のオリゴマー化合物または二本鎖組成物は、それぞれ、ssRNAiまたはdsRNAi RISCベースの機構を通じて機能し、5’修飾を持たないオリゴマー化合物と比べて、強化された活性を提供する。このような修飾は、オリゴマー化合物の5’末端、または、非フラノシルモノマーを含むオリゴマー化合物の5’相当位に位置することが可能である。
Ic
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
M1は、H、OH、またはOR1であり;
M2は、OH、OR1、またはN(R1)(R2)であり;
R1とR2は、それぞれ独立して、C1−C6アルキルまたは置換C1−C6アルキルであり;
rは、0または1であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
M3は、O、S、NR14、C(R15)(R16)、C(R15)(R16)C(R17)(R18)、C(R15)=C(R17)、OC(R15)(R16)、またはOC(R15)(Bx2)であり;
R14は、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
R15、R16、R17、およびR18は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Bx1とBx2のいずれか一方はヘテロ環塩基部分であり、Bx1とBx2の他方が存
在する場合、当該他方はH、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
J4、J5、J6、およびJ7は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
または、J4はJ5とJ7のいずれか一方と架橋を形成し、ここで当該架橋は、O、S、NR19、C(R20)(R21)、C(R20)=C(R21)、C[=C(R20)(R21)]、C(=O)から選ばれる1〜3個の結合ビラジカル基を含み、J5、J6、J7のうち他の2つは、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
R19、R20、およびR21は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X1]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
X1は、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=X2)J1、OC(=X2)N(J1)(J2)、およびC(=X2)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
X2は、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、ZはハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
I
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
M1は、H、OH、またはOR1であり;
M2は、OH、OR1、またはN(R1)(R2)であり;
R1とR2は、それぞれ独立して、アルキルまたは置換アルキルであり;
rは、0または1であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
Xは、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=L)J1、OC(=L)N(J1)(J2)、およびC(=L)N(J1)(
J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
Lは、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、ZはハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
いくつかの実施形態では、Bxは、ピリミジン、置換ピリミジン、プリン、または置換プリンである。いくつかの実施形態では、Bxは、ウラシル、5−チアゾロ−ウラシル、チミン、シトシン、5−メチルシトシン、5−チアゾロ−シトシン、アデニン、グアニン、または2,6−ジアミノプリンである。
RaとRcは、それぞれ独立して、保護されたヒドロキシル、保護されたチオール、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、保護されたアミノ、または置換アミノであり;
Rbは、OまたはSである。
RaとRcはそれぞれ、保護されたヒドロキシルであり;
Rbは、OまたはSである。
RaとRcは、それぞれ独立して、OCH3、OCH2CH3、またはOCH(CH3)2であり;
RbはOである。
CH3)2]2である。
Hであり、R6とR7の他方はC1−C6アルキルまたは置換C1−C6アルキルである。いくつかの実施形態では、R6とR7のいずれか一方はHであり、R6とR7の他方はCH3である。いくつかの実施形態では、R6とR7はそれぞれ独立して、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシである。
Ia
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
M1は、H、OH、またはOR1であり;
M2は、OH、OR1、またはN(R1)(R2)であり;
R1とR2は、それぞれ独立して、アルキルまたは置換アルキルであり;
rは、0または1であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
Xは、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=L)J1、OC(=L)N(J1)(J2)、およびC(=L)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
Lは、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
Ib
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
M1は、H、OH、またはOR1であり;
M2は、OH、OR1、またはN(R1)(R2)であり;
R1とR2は、それぞれ独立して、アルキルまたは置換アルキルであり;
rは、0または1であり;
Q1とQ2は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、またはN(R3)(R4)であり;
R3とR4は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
Xは、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=L)J1、OC(=L)N(J1)(J2)、およびC(=L)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
Lは、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
Ib
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
M1はO(CH2)2CNであり;
M2はN[(CH(CH3)2]2であり;
rは0であり;
Q1とQ2はそれぞれHであり;
Gは、ハロゲンまたはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
Xは、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=L)J1、OC(=L)N(J1)(J2)、およびC(=L)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
Lは、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
Ib
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
M1はO(CH2)2CNであり;
M2はN[(CH(CH3)2]2であり;
rは0であり;
Q1とQ2はそれぞれHであり;
GはO(CH2)2OCH3であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=L)J1、OC(=L)N(J1)(J2)、およびC(=L)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
Lは、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
IIc
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
T2は、式IIcの化合物をオリゴマー化合物と結合するヌクレオシド間連結基であり;
M1は、H、OH、またはOR1であり;
M2は、OH、OR1、またはN(R1)(R2)であり;
R1とR2は、それぞれ独立して、C1−C6アルキルまたは置換C1−C6アルキルであり;
rは、0または1であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
M3は、O、S、NR14、C(R15)(R16)、C(R15)(R16)C(R17)(R18)、C(R15)=C(R17)、OC(R15)(R16)、またはOC(R15)(Bx2)であり;
R14は、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
R15、R16、R17、およびR18は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Bx1とBx2のいずれか一方はヘテロ環塩基部分であり、Bx1とBx2の他方が存在する場合、当該他方はH、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
J4、J5、J6、およびJ7は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
または、J4はJ5とJ7のいずれか一方と架橋を形成し、ここで当該架橋は、O、S、NR19、C(R20)(R21)、C(R20)=C(R21)、C[=C(R20)(R21)]、C(=O)から選ばれる1〜3個の結合ビラジカル基を含み、J5、J6、J7のうち他の2つは、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
R19、R20、およびR21は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X1]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
X1は、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=X2)J1、OC(=X2)N(J1)(J2)、およびC(=X2)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
X2は、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
II
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
T2は、式IIの化合物をオリゴマー化合物と結合するヌクレオシド間連結基であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、またはN(R3)(R4)であり;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
Xは、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=L)J1、OC(=L)N(J1)(J2)、およびC(=L)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
Lは、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
RaとRcは、それぞれ独立して、保護されたヒドロキシル、保護されたチオール、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、保護されたアミノ、または置換アミノであり;
Rbは、OまたはSである。
RaとRcはそれぞれ、保護されたヒドロキシルであり;
Rbは、OまたはSである。
RaとRcは、それぞれ独立して、OCH3、OCH2CH3、またはOCH(CH3)2であり;
RbはOである。
合物を提供する(式中、Q3はC(R6)(R7)であり、R6とR7のいずれか一方はHであり、R6とR7の他方はCH3である)。いくつかの実施形態では、式IIまたは式IIcを有する化合物を含むオリゴマー化合物を提供する(式中、Q3はC(R6)(R7)であり、R6とR7は、それぞれ独立して、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシである)。
IIa
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
T2は、式IIの化合物をオリゴマー化合物の残基(remainder)と結合するヌクレオシド間連結基であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
Xは、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=L)J1、OC(=L)N(J1)(J2)、およびC(=L)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
Lは、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
IIb
第1のオリゴマー化合物と第2のオリゴマー化合物を含む二本鎖組成物であって、第1のオリゴマー化合物は第2のオリゴマー化合物に対して相補的であり、第2のオリゴマー化合物は核酸標的に対して相補的であり;
第1のオリゴマー化合物および第2のオリゴマー化合物の少なくとも1つは、式II、IIa、IIb、またはIIcを有する5’−末端化合物を含むオリゴマー化合物であり;
この組成物は1つ以上の5’または3’−末端基を任意で含む、二本鎖組成物を提供する。
約8〜約40のモノマーサブユニットを含み、オリゴマー化合物または、二本鎖組成物中の第1のオリゴマー化合物もしくは第2のオリゴマー化合物は、標的RNAに対して相補的である。いくつかの実施形態では、細胞は動物の中にある。いくつかの実施形態では、細胞はヒトの中にある。いくつかの実施形態では、標的RNAは、標的mRNA、プレmRNA、およびマイクロRNAから選ばれる。いくつかの実施形態では、標的RNAはmRNAである。いくつかの実施形態では、標的RNAはヒトmRNAである。いくつかの実施形態では、標的RNAを切断することによりその機能を阻害する。いくつかの実施形態では、上記の方法は、標的RNAのレベルを検出することをさらに含む。
つかの実施形態では、上記少なくとも1つの2’−修飾ヌクレオシドは、2’−Fヌクレオシド、2’−OCH3ヌクレオシド、および2’−O(CH2)2OCH3ヌクレオシドから選ばれる。いくつかの実施形態では、上記少なくとも1つの2’−修飾ヌクレオシドは、2’−Fヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、上記少なくとも1つの2’−修飾ヌクレオシドは、2’−OCH3ヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、上記少なくとも1つの2’−修飾ヌクレオシドは、2’−O(CH2)2OCH3ヌクレオシドである。
第1タイプ領域はそれぞれ独立して1〜20個の連続したヌクレオシドを含み、各第1タイプ領域の各ヌクレオシドは第1タイプ修飾を含む、1〜20個の第1タイプ領域と;
第2タイプ領域はそれぞれ独立して1〜20個の連続したヌクレオシドを含み、各第2タイプ領域の各ヌクレオシドは第2タイプ修飾を含む、0〜20個の第2タイプ領域と;
第3タイプ領域はそれぞれ独立して1〜20個の連続したヌクレオシドを含み、各第3タイプ領域の各ヌクレオシドは第3タイプ修飾を含む、0〜20個の第3タイプ領域と;
を含む。ここで、第1タイプ修飾、第2タイプ修飾、および第3タイプ修飾は、それぞれ独立して、2’−F、2’−OCH3、2’−O(CH2)2OCH3、BNA、F−HNA、2’−H、および2’−OHから選ばれる。ただし、第1タイプ修飾、第2タイプ修飾、および第3タイプ修飾は、互いに異なるものとする。
置する第3タイプ領域を含む。いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物の残基は、オリゴマー化合物の3’端に位置する第3タイプ領域を含む。いくつかの実施形態では、第3タイプ領域は1〜3個の修飾ヌクレオシドを含み、第3タイプ修飾は2’−O(CH2)2OCH3である。いくつかの実施形態では、同第3タイプ領域は2つの修飾ヌクレオシドを含み、第3タイプ修飾は2’−O(CH2)2OCH3である。
ヌクレオシド、(4’−C(CH3)H−O−2’)BNAヌクレオシド、DNAヌクレオシド、RNAヌクレオシド、およびF−HNAヌクレオシドから選ばれる。いくつかの実施形態では、AとBはそれぞれ独立して、2’−Fヌクレオシド、2’−OCH3ヌクレオシド、(4’−CH2−O−2’)BNAヌクレオシド、(4’−(CH2)2−O−2’)BNAヌクレオシド、(4’−C(CH3)H−O−2’)BNAヌクレオシド、およびDNAヌクレオシドから選ばれる。いくつかの実施形態では、AとBのいずれか一方は2’−Fヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、AとBのいずれか一方は2’−OCH3ヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、AとBのいずれか一方は2’−O(CH2)2OCH3ヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、Aは2’−Fヌクレオシドであり、Bは2’−OCH3ヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、Aは2’−OCH3ヌクレオシドであり、Bは2’−Fヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、AとBのいずれか一方は、(4’−CH2−O−2’)BNAヌクレオシド、(4’−(CH2)2−O−2’)BNAヌクレオシド、および(4’−C(CH3)H−O−2’)BNAヌクレオシドから選ばれ、AとBの他方は、DNAヌクレオシドである。
。いくつかの実施形態では、均一に修飾されたヌクレオシド領域は、均一に修飾され連続した4〜20個のヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、均一に修飾されたヌクレオシド領域は、均一に修飾され連続した5〜20個のヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、均一に修飾されたヌクレオシド領域は、均一に修飾され連続した6〜20個のヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、均一に修飾されたヌクレオシド領域は、均一に修飾され連続した5〜15個のヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、均一に修飾されたヌクレオシド領域は、均一に修飾され連続した6〜15個のヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、均一に修飾されたヌクレオシド領域は、均一に修飾され連続した5〜10個のヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、均一に修飾されたヌクレオシド領域は、均一に修飾され連続した6〜10個のヌクレオシドを含む。
いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物の残基は、AABBAA、ABBABB、AABAAB、ABBABAABB、ABABAA、AABABAB、ABABAA、ABBAABBABABAA、BABBAABBABABAA、またはABABBAABBABABAAから選ばれるヌクレオシドモチーフを有する領域を少なくとも1つ含む。ここで、Aは第1タイプのヌクレオシドであり、Bは第2タイプのヌクレオシドである。
Gは、コンジュゲート基、またはオリゴマー化合物をコンジュゲートと結合する連結基であり;
aは0または1であり;
Qa、Qb、およびQcは、それぞれ独立して、ハロゲン、アリル、アミノ、アジド、O−アリル、O−C1−C6アルキル、OCF3,O−(CH2)2−O−CH3、O(CH2)2SCH3、O−(CH2)2−O−N(J5)(J6)、およびO−CH2−C(=O)−N(Ja)(Jb)から選ばれる2’−置換基を有する2’−修飾ヌクレオシドであり(ここで、JaとJbは、それぞれ独立してH、アミノ保護基、または置換もしくは非置換C1−C6アルキルである。ただし、Qa、Qb、Qcは互いに異なり;tは4〜8であり;uは0または1であり;vは1〜3である);
Zは、式II、IIa、IIb、IIc、IId、またはIIeの化合物である。
(a)5’端位置のヌクレオシドは、式II、IIa、IIb、IIc、IId、またはIIeを有し;
(b)5’−端から2番目のヌクレオシドの糖部分は、無修飾2’−OH糖と修飾糖から選ばれ、この修飾糖は、2’−ハロゲン、2’O−アルキル、および2’−O−置換アルキルから選ばれる修飾を含み;
(c)5’−端位置の1番目のヌクレオシド間結合、および3’−端位置の最後の7個
のヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合であり;
(d)少なくとも1つのヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合以外の結合である。
態におけるアンチセンス化合物は、核酸塩基配列を有するマイクロRNA模倣体であり、この核酸塩基配列に含まれる一部分は、マイクロRNAの種領域と少なくとも80%同一であり、かつマイクロRNAと少なくとも60%の全同一性を有する。いくつかの実施形態におけるアンチセンス化合物は、核酸塩基配列を有するマイクロRNA模倣体であり、この核酸塩基配列に含まれる一部分は、マイクロRNAの種領域と少なくとも80%同一であり、かつマイクロRNAと少なくとも65%の全同一性を有する。いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物は、miRBaseで検索されたマイクロRNA配列から選ばれる核酸塩基配列を含む。いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物は、miRBaseで検索されたマイクロRNA配列から選ばれる核酸塩基配列からなる。
化を検出することを含む。いくつかの実施形態では、当該方法は、細胞中のmRNAレベルの減少を検出することを含む。いくつかの実施形態では、当該方法は、標的タンパク質の量の変化を検出することを含む。いくつかの実施形態では、細胞はインビトロに存在する。いくつかの実施形態では、この細胞は動物の中にある。いくつかの実施形態では、この動物は哺乳類である。いくつかの実施形態では、この哺乳類はヒトである。
具体的に定義しない限り、本明細書に記載する分析化学、有機合成化学、医薬品化学、および製薬化学に関連して使用される命名法ならびに手順および手法は、当該技術分野においてよく知られ、一般に使われているものである。化学合成および化学分析には、標準の手法を使用してよい。上記の手法および手順のいくつかは、例えば「Carbohydrate Modifications in Antisense Research」(編集:Sangvi and Cook,American Chemical Society,Washington D.C.,1994)、「Remington’s Pharmaceutical Sciences」(Mack Publishing Co.,Easton,Pa.,18th edition,1990)、「Antisense Drug Technology,Principles,Strategies,and Applications」(編集:Stanley T.Crooke,CRC Press,Boca Raton,Florida)、および「Molecular Cloning,A laboratory Manual」2nd Edition(Sambrookら,Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989)などに記載されている。これらの文献は、目的を問わず参照により本明細書に組み込まれる。本明細書での開示の中で参照しているすべての特許、出願、公開出願、ならびに他の出版物および他のデータは、許可されている場合、参照によりその全体が組み込まれる。
有結合をいう。
である。
向している。
ダイズする能力をいう。いくつかの実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは1つより多い数の標的部位と特異的にハイブリダイズする。
−S(O)2N(Rbb)(Rcc)または−N(Rbb)S-(O)2Rbb)が含まれるが、これらに限定されない。ここで、Raa、Rbb、およびRccは、それぞれ独立して、H、任意に結合した化学官能基、またはさらなる置換基であり、好ましいリストにはH、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、脂肪族基、アルコキシ基、アシル基、アリール基、アラルキル基、ヘテロアリール基、脂環式基、ヘテロ環式基、およびヘテロアリールアルキル基が含まれるが、これらに限定されない。本明細書に記載の化合物内の選択された置換基は、再帰的な程度まで存在する。
脂肪族基、脂環式基、または芳香族基である。例としては、脂肪族カルボニル、芳香族カルボニル、脂肪族スルホニル、芳香族スルフィニル、脂肪族スルフィニル、芳香族ホスフェート、脂肪族ホスフェートなどが挙げられる。本明細書で用いるアシル基は、さらなる置換基を任意で含んでもよい。
上がヘテロ原子を含まない系を含む縮合環系を含むことが意図される。ヘテロアリール基は、一般に、硫黄、窒素、または酸素から選ばれる1つの環原子を含む。ヘテロアリール基の例には、ピリジニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、チオフェニル、フラニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、キノオキサリニルなどが含まれるが、これらに限定されない。ヘテロアリールラジカルは、親分子に直接結合するか、または脂肪族基やヘテロ原子などの結合部分を通じて親分子に結合することができる。本明細書で用いるヘテロアリール基は、さらなる置換基を任意で含んでもよい。
RaとRcは、それぞれ独立して、OH、SH、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、アミノ、または置換アミノであり;
RbはOまたはSである。
ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、または置換C1−C6アルコキシが含まれるが、これらに限定されない。こうした結合リン部分の例には、リン酸、修飾リン酸、チオリン酸、修飾チオリン酸、ホスホネート、修飾ホスホネート、ホスホルアミダート、および修飾ホスホルアミダートが含まれるが、これらに限定されない。
ロベンジル、t−ブチルジメチルシリル、t−ブチルジフェニルシリル、ベンゾイル、メシレート、トシレート、ジメトキシトリチル(DMT)、9−フェニルキサンチン−9−イル(ピキシル)、および9−(p−メトキシフェニル)キサンチン−9−イル(MOX)が含まれるが、これらに限定されない。
を有する化合物を提供する。当該技術分野では、こうした反応性リン基は公知であり、PIIIまたはPV原子価状態のリン原子を含有する。具体的には、ホスホロアミダイト、H−ホスホネート、リン酸トリエステル、およびリン含有キラル補助剤が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、反応性リン基は、ジイソプロピルシアノエトキシホスホロアミダイト(−O*−P[N[(CH(CH3)2]2]O(CH2)2CN)およびH−ホスホネート(−O*−P(=O)(H)OH)から選ばれる。ここで、ここでO*は、モノマーについてのマーカッシュ群から提供される。好ましい合成固相の合成では、ホスホロアミダイト(PIII化学構造)を反応性ホスファイトとして利用する。その後、この中間体のホスファイト化合物は、既知の方法を使用してホスフェートまたはチオフォスフーェト(PV化学構造)へ酸化して、ホスホジエステルまたはホスホロチオエートヌクレオシド間結合を得る。他の反応性ホスフェートおよびホスファイトについては、Report Number 309(Beaucage and Iyer,Tetrahedron,1992,48,2223−2311)に開示されている。
いくつかの実施形態では、式Icを有する化合物を提供する。
Ic
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
M1は、H、OH、またはOR1であり;
M2は、OH、OR1、またはN(R1)(R2)であり;
R1とR2は、それぞれ独立して、C1−C6アルキルまたは置換C1−C6アルキルであり;
rは、0または1であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
M3は、O、S、NR14、C(R15)(R16)、C(R15)(R16)C(R17)(R18)、C(R15)=C(R17)、OC(R15)(R16)、またはO
C(R15)(Bx2)であり;
R14は、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
R15、R16、R17、およびR18は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Bx1とBx2のいずれか一方はヘテロ環塩基部分であり、Bx1とBx2の他方が存在する場合、当該他方はH、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
J4、J5、J6、およびJ7は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
または、J4はJ5とJ7のいずれか一方と架橋を形成し、ここで当該架橋は、O、S、NR19、C(R20)(R21)、C(R20)=C(R21)、C[=C(R20)(R21)]、C(=O)から選ばれる1〜3個の結合ビラジカル基を含み、J5、J6、J7のうち他の2つは、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
R19、R20、およびR21は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X1]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
X1は、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=X2)J1、OC(=X2)N(J1)(J2)、およびC(=X2)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
X2は、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
I
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
M1は、H、OH、またはOR1であり;
M2は、OH、OR1、またはN(R1)(R2)であり;
R1とR2は、それぞれ独立して、アルキルまたは置換アルキルであり;
rは、0または1であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
Xは、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=L)J1、OC(=L)N(J1)(J2)、およびC(=L)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
Lは、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
Ia
式中、
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
M1は、H、OH、またはOR1であり;
M2は、OH、OR1、またはN(R1)(R2)であり;
R1とR2は、それぞれ独立して、アルキルまたは置換アルキルであり;
rは、0または1であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
Xは、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=L)J1、OC(=L)N(J1)(J2)、およびC(=L)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
Lは、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
Ib
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
M1は、H、OH、またはOR1であり;
M2は、OH、OR1、またはN(R1)(R2)であり;
R1とR2は、それぞれ独立して、アルキルまたは置換アルキルであり;
rは、0または1であり;
Q1とQ2は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、またはN(R3)(R4)であり;
R3とR4は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
Xは、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=L)J1、OC(=L)N(J1)(J2)、およびC(=L)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
Lは、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
いくつかの実施形態では、式IIcを有する化合物を含むオリゴマー化合物を提供する。
IIc
式中、
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
T2は、式IIcの化合物をオリゴマー化合物と結合するヌクレオシド間連結基であり;
M1は、H、OH、またはOR1であり;
M2は、OH、OR1、またはN(R1)(R2)であり;
R1とR2は、それぞれ独立して、C1−C6アルキルまたは置換C1−C6アルキルであり;
rは、0または1であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
M3は、O、S、NR14、C(R15)(R16)、C(R15)(R16)C(R17)(R18)、C(R15)=C(R17)、OC(R15)(R16)、またはOC(R15)(Bx2)であり;
R14は、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
R15、R16、R17、およびR18は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Bx1とBx2のいずれか一方はヘテロ環塩基部分であり、Bx1とBx2の他方が存在する場合、当該他方はH、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
J4、J5、J6、およびJ7は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
または、J4はJ5とJ7のいずれか一方と架橋を形成し、ここで当該架橋は、O、S、NR19、C(R20)(R21)、C(R20)=C(R21)、C[=C(R20)(R21)]、C(=O)から選ばれる1〜3個の結合ビラジカル基を含み、J5、J
6、J7のうち他の2つは、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
R19、R20、およびR21は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X1]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
X1は、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=X2)J1、OC(=X2)N(J1)(J2)、およびC(=X2)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
X2は、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
II
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
T2は、式IIの化合物をオリゴマー化合物の残基と結合するヌクレオシド間連結基であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、またはN(R3)(R4)であり;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
Xは、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=L)J1、OC(=L)N(J1)(J2)、およびC(=L)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
Lは、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
IIa
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
T2は、式IIの化合物をオリゴマー化合物の残基と結合するヌクレオシド間連結基であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
、置換C2−C6アルキニル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、またはN(R3)(R4)であり;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
Xは、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=L)J1、OC(=L)N(J1)(J2)、およびC(=L)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
Lは、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。
IIb
本発明のオリゴマー化合物は、糖基が修飾された1つ以上のヌクレオシドを任意で含むことができる。こうした糖修飾ヌクレオシドは、ヌクレアーゼ安定性の増強、結合親和性の上昇、または他の有益な生物学的性質をアンチセンス化合物に付与することができる。いくつかの実施形態では、ヌクレオシドは、化学修飾されたリボフラノース環部分を含む。化学修飾されたリボフラノース環の例には、置換基(5’および/または2’置換基を含む)の付加;2つの環原子の架橋による二環式核酸(BNA)の形成;リボシル環酸素原子のS、N(R)、またはC(R1)(R2)(R=H,C1−C12アルキルまたは保護基)による置き換え;およびこれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。化学修飾糖の例としては、2’−F−5’−メチル置換ヌクレオシド(開示されている他の5’,2’−ビス置換ヌクレオシドについては、2008年8月21日に公開されたPCT国際出願WO2008/101157を参照)、リボシル環酸素原子のSによる置き換え、および2’位におけるさらなる置換(2005年6月16日に公開された米国特許出願US2005/0130923を参照)、あるいはBNAの5’−置換(2007年11月22日に公開されたPCT国際出願WO2007/134181を参照。ここでは、LNAが例えば5’−メチル基や5’−ビニル基で置換される)が含まれる。
.Chem.,1998,63,10035−10039;Srivastavaら,J.Am.Chem.Soc.,129(26)8362−8379(July 4,2007);Elayadiら,Curr.Opinion Invens.Drugs,2001,2,558−561;Braaschら,Chem.Biol.,2001,8,1−7;Orumら,Curr.Opinion Mol.Ther.,2001,3,239−243;米国特許番号:7,053,207,6,268,490,6,770,748,6,794,499,7,034,133,6,525,191,6,670,461,7,399,845;国際出願WO2004/106356,WO1994/14226,WO2005/021570,WO2007/134181;米国公開特許番号US2004/0171570,US2007/0287831,US2008/0039618;米国特許シリアル番号12/129,154,60/989,574,61/026,995,61/026,998,61/056,564,61/086,231,61/097,787/61/099,844;PCT国際出願番号PCT/US2008/064591,PCT/US2008/066154,PCT/US2008/068922も参照のこと。上述の二環式ヌクレオシドの各々は、例えばα−L−リボフラノース、β−D−リボフラノースなどの1つ以上の立体化学的糖配置を有して調製できる(PCT国際出願PCT/DK98/00393(WO99/14226として1999年3月25日に公開)を参照)。
xは、0、1、または2であり;
nは、1、2、3、または4であり;
RaとRbは、それぞれ独立して、H、保護基、ヒドロキシル、C1−C12アルキル、置換C1−C12アルキル、C2−C12アルケニル、置換C2−C12アルケニル、C2−C12アルキニル、置換C2−C12アルキニル、C5−C20アリール、置換C5−C20アリール、ヘテロ環ラジカル、置換ヘテロ環ラジカル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、C5−C7脂環式ラジカル、置換C5−C7脂環式ラジカル、ハロゲン、OJ1、NJ1J2、SJ1、N3、COOJ1、アシル(C(=O)−H)、置換アシル、CN、スルホニル(S(=O)2−J1)、またはスルホキシル(S(=O)−J1)であり;
J1とJ2は、それぞれ独立してH、C1−C12アルキル、置換C1−C12アルキル、C2−C12アルケニル、置換C2−C12アルケニル、C2−C12アルキニル、置換C2−C12アルキニル、C5−C20アリール、置換C5−C20アリール、アシル(C(=O)−H)、置換アシル、ヘテロ環ラジカル、置換ヘテロ環ラジカル、C1−C12アミノアルキル、置換C1−C12アミノアルキル、または保護基である。
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
−Qa−Qb−Qc−は、−CH2−N(Rc)−CH2−、−C(=O)−N(Rc
)−CH2−、−CH2−O−N(Rc)−、−CH2−N(Rc)−O−、または−N(Rc)−O−CH2であり;
Rcは、C1−C12アルキルまたはアミノ保護基であり;
TaとTbは、それぞれ独立して、H、ヒドロキシル保護基、コンジュゲート基、反応性リン基、リン部分、または支持媒体との共有結合である。
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
TaとTbは、それぞれ独立して、H、ヒドロキシル保護基、コンジュゲート基、反応性リン基、リン部分、または支持媒体との共有結合であり;
Zaは、C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C1−C6アルキル、置換C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルキニル、アシル、置換アシル、置換アミド、置換アミド、チオール、または置換チオールである。
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
TaとTbは、それぞれ独立して、H、ヒドロキシル保護基、コンジュゲート基、反応性リン基、リン部分、または支持媒体との共有結合であり;
Zbは、C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C1−C6アルキル、置換C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルキニル、または置換アシル(C(=O)−)である。
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
TaとTbは、それぞれ独立して、H、ヒドロキシル保護基、コンジュゲート基、反応性リン基、リン部分、または支持媒体との共有結合であり;
Rdは、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
qa、qb、qc、およびqdは、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、C1−C6アルコキシル、置換C1−C6アルコキシル、アシル、置換アシル、C1−C6アミノアルキル、または置換C1−C6アミノアルキルである。
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
TaとTbは、それぞれ独立して、H、ヒドロキシル保護基、コンジュゲート基、反応性リン基、リン部分、または支持媒体との共有結合であり;
qa、qb、qe、およびqfは、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、C1−C12アルキル、置換C1−C12アルキル、C2−C12アルケニル、置換C2−C12アルケニル、C2−C12アルキニル、置換C2−C12アルキニル、C1−C12アルコキシ、置換C1−C12アルコキシ、OJj、SJj、SOJj、SO2Jj、NJjJk、N3、CN、C(=O)OJj、C(=O)NJjJk、C(=O)Jj、O−C(=O)NJjJk、N(H)C(=NH)NJjJk、N(H)C(=O)NJjJk、もしくはN(H)C(=S)NJjJkであり;
または、qeとqfは一緒になって=C(qg)(qh)であり;
qgとqhは、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C12アルキル、または置換C1−C12アルキルである。
oshkinら,Tetrahedron,1998,54,3607−3630を参照)。BNAとその調製についても、WO98/39352およびWO99/14226に記述されている。
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
TaとTbは、それぞれ独立して、H、ヒドロキシル保護基、コンジュゲート基、反応性リン基、リン部分、または支持媒体との共有結合であり;
qi、qj、qk、およびqlは、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C12アルキル、置換C1−C12アルキル、C2−C12アルケニル、置換C2−C12アルケニル、C2−C12アルキニル、置換C2−C12アルキニル、C1−C12アルコキシル、置換C1−C12アルコキシル、OJj、SJj、SOJj、SO2Jj、NJjJk、N3、CN、C(=O)OJj、C(=O)NJjJk、C(=O)Jj、O−C(=O)NJjJk、N(H)C(=NH)NJjJk、N(H)C(=O)NJjJk、またはN(H)C(=S)NJjJkであり;
qiとqj、またはqlとqkは、一緒になって=C(qg)(qh)であり、ここでqgとqhは、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C12アルキル、または置換C1−C12アルキルである。
Med.Chem.(2002)10:841−854を参照)、フルオロHNA(F−HNA)と呼ばれるもの、または式VIIを有する化合物が含まれるが、これらに限定されない。
VII
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T3とT4は、それぞれ独立して、テトラヒドロピランヌクレオシド類似体をアンチセンス化合物に結合するヌクレオシド間連結基であるか、または、T3とT4のいずれか一方は、テトラヒドロピランヌクレオシド類似体をアンチセンス化合物に結合するヌクレオシド間連結基であり、T3とT4の他方は、H、ヒドロキシル保護基、結合コンジュゲート基、または5’もしくは3’−末端基であり;
q1、q2、q3、q4、q5、q6、およびq7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
R1とR2のいずれか一方は水素であり、他方は、水素、置換または非置換アルコキシ、NJ1J2、SJ1、N3、OC(=X)J1、OC(=X)NJ1J2、NJ3C(=X)NJ1J2、およびCNから選ばれ、ここでXはOであり、SまたはNJ1、およびJ1、J2、J3の各々は独立して、HまたはC1−C6アルキルである。
2007,48,3621−3623;Nauwelaertsら,J.Am.Chem.Soc.,2007,129(30),9340−9348;Guら,Nucleosides,Nucleotides & Nucleic Acids,2005,24(5−7),993−998;Nauwelaertsら,Nucleic Acids
Research,2005,33(8),2452−2463;Robeynsら,Acta Crystallographica,Section F:Structural Biology and Crystallization Communications,2005,F61(6),585−586;Guら,Tetrahedron,2004,60(9),2111−2123;Guら,Oligonucleotides,2003,13(6),479−489;Wangら,J.Org.Chem.,2003,68,4499−4505;Verbeureら,Nucleic Acids Research,2001,29(24),4941−4947;Wangら,J.Org.Chem.,2001,66,8478−82;Wangら,Nucleosides,Nucleotides & Nucleic Acids,2001,20(4−7),785−788;Wangら,J.Am.Chem.,2000,122,8595−8602;公開PCT出願WO06/047842;公開PCT出願WO01/049687を参照。これら文献の各々のテキストは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる)。いくつかの修飾シクロヘキセニルヌクレオシドは、式VIIIを有する。
VIII
Bxは、ヘテロ環塩基部分であり;
T3とT4は、それぞれ独立して、シクロヘキセニルヌクレオシド類似体をアンチセンス化合物に結合するヌクレオシド間連結基であるか、または、T3とT4のいずれか一方はテトラヒドロピランヌクレオシド類似体をアンチセンス化合物に結合するヌクレオシド間連結基であり、T3とT4の他方は、H、ヒドロキシル保護基、結合コンジュゲート基、または5’もしくは3’−末端基であり;
q1、q2、q3、q4、q5、q6、q7、q8、およびq9は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、または他の糖置換基である。
US2005−0130923を参照)、あるいは二環式核酸の5’−置換(2007年11月22日に公開されたPCT国際出願WO2007/134181を参照。ここでは4’−CH2−O−2’二環式ヌクレオシドが5’位で5’−メチル基または5’−ビニル基でさらに置換される)などがあるが、これらに限定されない。こうした環系に各種の追加の置換を行って、活性を増強することができる。
いくつかの実施形態では、本発明のヌクレオシドは、1つ以上の無修飾核酸塩基を含む。いくつかの実施形態では、本発明のヌクレオシドは、1つ以上の修飾核酸塩基を含む。
,687,808号に開示されている核酸塩基、The Concise Encyclopedia Of Polymer Science And Engineering,Kroschwitz,J.I.,Ed.,John Wiley & Sons,1990,858−859に開示されている核酸塩基、Englischら,Angewandte Chemie,International Edition,1991,30,613に開示されている核酸塩基、およびSanghvi,Y.S.,Chapter 15,Antisense Research and Applications,Crooke,S.T. and Lebleu,B.,Eds.,CRC Press,1993,273−288に開示されている核酸塩基などがある。
いくつかの実施形態では、本発明は、結合ヌクレオシドを含むオリゴマー化合物を提供する。いくつかの実施形態では、任意のヌクレオシド間結合を用いてヌクレオシド同士を結合できる。リン原子の有無によって、主に2つのクラスのヌクレオシド間連結基が定義される。リンを含有する代表的なヌクレオシド間結合には、ホスホジエステル(P=O)、ホスホトリエステル、メチルホスホネート、ホスホルアミデート、ホスホロチオエート(P=S)が含まれるが、これらに限定されない。リンを含有しない代表的なヌクレオシド間連結基には、メチレンメチルイミノ(−CH2−N(CH3)−O−CH2−)、チオジエステル(−O−C(O)−S−)、チオノカルバメート(−O−C(O)(NH)−S−)、シロキサン(−O−Si(H)2−O−)、およびN,N’−ジメチルヒドラジン(−CH2−N(CH3)−N(CH3)−)が含まれるが、これらに限定されない。リンを含有しないヌクレオシド間連結基を有するオリゴヌクレオチドを、オリゴヌクレオシドと呼ぶ場合がある。天然ホスホジエステル結合と比べて、修飾された結合を使用すると、オリゴマー化合物のヌクレアーゼ耐性を変化させる(通常は増加させる)ことができる。いくつかの実施形態では、キラル原子を有するヌクレオシド間結合により、別個のエナンチオマーとしてのラセミ混合物を作製することができる。代表的なキラル結合には
、アルキルホスホネートおよびホスホロチオエートが含まれるが、これらに限定されない。リンを含有するヌクレオシド間結合およびリンを含有しないヌクレオシド間結合の調製方法は、当業者に周知されている。
いくつかの実施形態では、本発明は、さまざまな長さ範囲のオリゴヌクレオチドを含むオリゴマー化合物を提供する。いくつかの実施形態では、本発明は、X個〜Y個の結合ヌクレオシドからなるオリゴマー化合物またはオリゴヌクレオチドを提供する。ここで、Xは、ヌクレオシド数の範囲で最も小さい数字を表し、Yは、ヌクレオシド数の範囲で最も大きな数字を表す。いくつかの実施形態では、XとYは、それぞれ独立して、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、および50から選ばれる。ただしX≦Yである。例えば、いくつかの実施形態では、本発明は、8〜9、8〜10、8〜11、8〜12、8〜13、8〜14、8〜15、8〜16、8〜17、8〜18、8〜19、8〜20、8〜21、8〜22、8〜23、8〜24、8〜25、8〜26、8〜27、8〜28、8〜29、8〜30、9〜10、9〜11、9〜12、9〜13、9〜14、9〜15、9〜16、9〜17、9〜18、9〜19、9〜20、9〜21、9〜22、9〜23、9〜24、9〜25、9〜26、9〜27、9〜28、9〜29、9〜30、10〜11、10〜12、10〜13、10〜14、10〜15、10〜16、10〜17、10〜18、10〜19、10〜20、10〜21、10〜22、10〜23、10〜24、10〜25、10〜26、10〜27、10〜28、10〜29、10〜30、11〜12、11〜13、11〜14、11〜15、11〜16、11〜17、11〜18、11〜19、11〜20、11〜21、11〜22、11〜23、11〜24、11〜25、11〜26、11〜27、11〜28、11〜29、11〜30、12〜13、12〜14、12〜15、12〜16、12〜17、12〜18、12〜19、12〜20、12〜21、12〜22、12〜23、12〜24、12〜25、12〜26、12〜27、12〜28、12〜29、12〜30、13〜14、13〜15、13〜16、13〜17、13〜18、13〜19、13〜20、
13〜21、13〜22、13〜23、13〜24、13〜25、13〜26、13〜27、13〜28、13〜29、13〜30、14〜15、14〜16、14〜17、14〜18、14〜19、14〜20、14〜21、14〜22、14〜23、14〜24、14〜25、14〜26、14〜27、14〜28、14〜29、14〜30、15〜16、15〜17、15〜18、15〜19、15〜20、15〜21、15〜22、15〜23、15〜24、15〜25、15〜26、15〜27、15〜28、15〜29、15〜30、16〜17、16〜18、16〜19、16〜20、16〜21、16〜22、16〜23、16〜24、16〜25、16〜26、16〜27、16〜28、16〜29、16〜30、17〜18、17〜19、17〜20、17〜21、17〜22、17〜23、17〜24、17〜25、17〜26、17〜27、17〜28、17〜29、17〜30、18〜19、18〜20、18〜21、18〜22、18〜23、18〜24、18〜25、18〜26、18〜27、18〜28、18〜29、18〜30、19〜20、19〜21、19〜22、19〜23、19〜24、19〜25、19〜26、19〜29、19〜28、19〜29、19〜30、20〜21、20〜22、20〜23、20〜24、20〜25、20〜26、20〜27、20〜28、20〜29、20〜30、21〜22、21〜23、21〜24、21〜25、21〜26、21〜27、21〜28、21〜29、21〜30、22〜23、22〜24、22〜25、22〜26、22〜27、22〜28、22〜29、22〜30、23〜24、23〜25、23〜26、23〜27、23〜28、23〜29、23〜30、24〜25、24〜26、24〜27、24〜28、24〜29、24〜30、25〜26、25〜27、25〜28、25〜29、25〜30、26〜27、26〜28、26〜29、26〜30、27〜28、27〜29、27〜30、28〜29、28〜30、または29〜30個の結合ヌクレオシドからなるオリゴヌクレオチドを含むオリゴマー化合物を提供する。オリゴマー化合物またはオリゴヌクレオチドのヌクレオシド数が特定の範囲または特定の数に制限されている実施形態の場合でも、そのオリゴマー化合物またはオリゴヌクレオチドに、さらに別の置換基を追加して含めてよい。例えば、8〜30個のヌクレオシドを含むオリゴヌクレオチドの場合、ヌクレオシド31個を有するオリゴヌクレオチドは除外されるが、別段の指示がない限り、このようなオリゴヌクレオチドはさらに、例えば1つ以上のコンジュゲート基、末端基、または他の置換基を含めてよい。いくつかの実施形態では、末端基には末端基ヌクレオシドが含まれるが、これに限定されない。このような実施形態では、末端基ヌクレオシドは、オリゴヌクレオチドの末端ヌクレオシドとは異なる方法で修飾される。これにより、オリゴヌクレオチドのヌクレオシドと末端基ヌクレオシドが区別される。
いくつかの実施形態では、本発明は、特定のヌクレオシドモチーフを有する1つ以上の領域を含むオリゴマー化合物を提供する。いくつかの実施形態では、本発明の修飾オリゴヌクレオチドの5’−末端ヌクレオチドは、式II、IIa、IIb、IIc、IId、またはIIeの化合物を含む。
いくつかの実施形態では、本発明のオリゴマー化合物はギャップマー領域を含む。このような実施形態のいくつかでは、外部領域の各糖基は互いに同一である(本明細書では対称ギャップマーと呼ぶ)。いくつかの実施形態では、5’−外部領域で使われる糖基と、3’−外部領域で使われる糖基は異なる(本明細書では非対称ギャップマーと呼ぶ)。いくつかの実施形態では、外部領域は小さく(各外部領域は独立して1、2、3、4、または約5個のモノマーサブユニットである)、このモノマーサブユニットは天然由来でない糖基を含み、内部領域はβ−D−2’−デオキシリボヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、外部領域はそれぞれ独立して、非天然由来の糖基を有する1〜約5個のモノマーサブユニットを含み、内部領域は、6〜18個の無修飾ヌクレオシドを含む。内部領
域すなわちギャップは、一般にβ−D−2’−デオキシリボヌクレオシドを含むが、天然由来でない糖基を含むことができる。ヘテロ環式塩基およびヌクレオシド間結合は、独立して、ギャップ化オリゴマー化合物の各位置で可変である。このモチーフはさらに、1つ以上の基の使用が含まれていてもよい。1つ以上の基とは、キャッピング基、コンジュゲート基、その他の5’または3’−末端基が含まれるが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態では、本発明のオリゴヌクレオチドは、1つ以上の交互修飾領域を含む。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、1つ以上の交互ヌクレオシド修飾領域を含む。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、1つ以上の交互結合修飾領域を含む。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、1つ以上の交互ヌクレオシドおよび結合修飾領域を含む。
シドモチーフ領域を1つ以上含んでよい。
AABBAA;
ABBABB;
AABAAB;
ABBABAABB;
ABABAA;
AABABAB;
ABABAA;
ABBAABBABABAA;
BABBAABBABABAA;
ABABBAABBABABAA;
ここで、Aは第1タイプのヌクレオシドであり、Bは第2タイプのヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、AとBはそれぞれ、2’−F、2’−OMe、BNA、DNA、およびMOEから選ばれる。
いくつかの実施形態では、本発明のオリゴヌクレオチドは、2−2−3モチーフを有する領域を含む。このような領域は以下のモチーフを含む。
B、C、D、およびEは、Aとは異なる方法で修飾されたヌクレオシドであり、ただしB、C、D、およびEの修飾は互いに同一でも異なっていてもよく;
wとzは0〜15であり;
xとyは1〜15である。
施形態では、第1タイプの各修飾の3’−端にある結合はホスホジエステル結合である。
上記のモチーフおよび修飾のいくつかを組み合わせてよいものと理解される。1つのモチーフに含まれるヌクレオシドの数がごく少数の場合があるので、ある特定のオリゴヌクレオチドが2つ以上のモチーフを含むことがある。いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物に含まれるヌクレオシドモチーフの非限定的な例として、下表に記載するモチーフを含む。下表に示す「なし」という語は、特定の特徴がオリゴヌクレオチドに存在しないことを示す。例えば「5’モチーフ/修飾」列に「なし」とある場合、オリゴヌクレオチドの5’端は、中央モチーフの先頭のヌクレオシドを含むことを表す。
列Aは、20個の結合ヌクレオシドからなるオリゴマー化合物を表す。このオリゴマー化合物は、式II、IIa、IIb、IIc、IId、またはIIeの修飾5’−末端ヌクレオシド;交互ヌクレオシド領域;交互結合領域;それぞれウラシル塩基を含む2つの3’−末端MOEヌクレオシド;および3’−端位置のホスホロチオエート結合6個の領域を含む。
シド(位置1)が式II、IIa、IIb、IIc、IId、またはIIeの化合物であり、位置2のヌクレオシドは2’−修飾を含む。こうした実施形態のいくつかでは、位置2のヌクレオシドの2’−修飾は、ハロゲン、アルキル、および置換アルキルから選ばれる。いくつかの実施形態では、位置2のヌクレオシドの2’−修飾は、2’−Fと2’−アルキルから選ばれる。いくつかの実施形態では、位置2のヌクレオシドの2’−修飾は、2’−Fである。いくつかの実施形態では、位置2のヌクレオシドの2’−置換は、(天然由来RNAのように)無修飾OHである。
いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物は、1つ以上のコンジュゲート基の結合により修飾される。一般に、コンジュゲート基は、結合するオリゴマー化合物の1つ以上の特性を修飾する。特性には薬力学的特性、薬物動態特性、安定性、結合、吸収、細胞分布、細胞の取込み、充填、排除が含まれるが、これらに限定されない。コンジュゲート基は化学技術分野において日常的に使用されており、オリゴマー化合物、オリゴヌクレオチドなどの親化合物に直接結合するか、または任意のコンジュゲート結合部分もしくはコンジュゲート連結基を介して結合する。コンジュゲート基には挿入分子、レポーター分子、ポリアミン、ポリアミド、ポリエチレングリコール、チオエーテル、ポリエーテル、コレステロール、チオコレステロール、コール酸部分、葉酸、脂質、リン脂質、ビオチン、フェナジン、フェナントリジン、アダマンタン、アクリジン、フルオレセイン、ローダミン、クマリン、および色素が含まれるが、これらに限定されない。いくつかのコンジュゲート基は以前に文献に記述されている。例えば、コレステロール部分(Letsingerら,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1989,86,6553−6556)、コール酸(Manoharanら,Bioorg.Med.Chem.Let.,1994,4,1053−1060)、ヘキシル−S−トリチルチオールなどのチオエーテル(Manoharanら,Ann.N.Y.Acad.Sci.,1992,660,306−309;Manoharanら,Bioorg.Med.Chem.Let.,1993,3,2765−2770)、チオコレステロール(Oberhauserら,Nucl.Acids Res.,1992,20,533−538)、ドデカンジオールやウンデシル残基などの脂肪族鎖(Saison−Behmoarasら,EMBO
J.,1991,10,1111−1118;Kabanovら,FEBS Lett.,1990,259,327−330;Svinarchukら,Biochimie,1993,75,49−54)、ジ−ヘキサデシル−rac−グリセリンやトリエチルアンモニウム1,2−ジ−O−ヘキサデシル−rac−グリセロ−3−H−ホスホネートなどのリン脂質(Manoharanら,Tetrahedron Lett.,1995,36,3651−3654;Sheaら,Nucl.Acids Res.,1990,18,3777−3783)、ポリアミンもしくはポリエチレングリコール鎖(Manoharanら,Nucleosides & Nucleotides,1995,
14,969−973)、またはアダマンタン酢酸(Manoharanら,Tetrahedron Lett.,1995,36,3651−3654)、パルミチル部分(Mishraら,Biochim.Biophys.Acta,1995,1264,229−237)、またはオクタデシルアミンもしくはヘキシルアミノ−カルボニル−オキシコレステロール部分(Crookeら,J.Pharmacol.Exp.Ther.,1996,277,923−937)などが記述されている。
らに限定されない。いくつかの実施形態では、二官能性結合部分には、アミノ、ヒドロキシル、カルボン酸、チオール、不飽和基(例えば二重結合や三重結合)などが含まれる。
いくつかの実施形態では、本発明のオリゴマー化合物はアンチセンス化合物である。こうした実施形態では、オリゴマー化合物は、標的核酸に対して相補的である。いくつかの実施形態では、標的核酸はRNAである。いくつかの実施形態では、標的核酸は非コードRNAである。いくつかの実施形態では、標的核酸はタンパク質をコードする。いくつかの実施形態では、標的核酸は、mRNA、プレ−mRNA、マイクロRNA、非コードRNA(低分子非コードRNAを含む)、およびプロモーター指向性RNAから選ばれる。いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物は、1つより多い標的核酸に対して少なくとも部分的に相補的である。例えば、本発明のオリゴマー化合物は、一般に複数の標的と結合するマイクロRNA模倣体となることができる。
がって、RNase Hが活性化する結果、RNA標的が切断されることにより、DNA様のオリゴヌクレオチドが媒介する遺伝子発現阻害の効率が大幅に増強される。
いくつかの実施形態では、本発明のオリゴマー化合物は、一本鎖アンチセンス化合物としての使用に特に適している。いくつかの実施形態では、このようなオリゴマー化合物は一本鎖RNAi化合物である。いくつかの実施形態では、このようなオリゴマー化合物はssRNA化合物またはマイクロRNA模倣体である。本明細書に記述するいくつかの5’−末端ヌクレオシドは、このような一本鎖オリゴマー化合物での使用に適している。いくつかの実施形態では、このような5’−末端ヌクレオシドは5’−亜リン酸部分を安定化する。いくつかの実施形態では、本発明の5’−末端ヌクレオシドは対ヌクレアーゼ耐性を有する。いくつかの実施形態では、本発明のモチーフは、一本鎖アンチセンス化合物での使用に特に適している。
つか課題が存在する。例えば、設計する化合物は化学的に安定であり、ヌクレアーゼ分解に対する耐性を持ち、細胞に進入でき、RISCへの組み込みが可能であり(例えばAgo1またはAgo2と結合可能)、標的核酸とハイブリダイズでき、かつ細胞や動物に対する毒性があってはならない。いくつかの例では、ある特性を改善する修飾またはモチーフは他の特性を悪化させるため、RNAi化合物として使用するには不適切な修飾またはモチーフを有する化合物となっている。例えばいくつかの修飾は、特にオリゴマー化合物の5’−端またはその近くに配置された場合、化合物の安定性やヌクレアーゼ分解耐性を向上できる反面、RISCの構成要素(Ago1、Ago2など)との相互作用をブロックすることにより、RISCへの組み込みを阻害または妨害する可能性がある。このような化合物は、安定性特性は改善できても、RNAiで使用するには不適切となる。したがって、取り組むべき課題は、機能的な一本鎖RNAi化合物を提供するのに少なくとも十分な各パラメータについて、これらのパラメータを満足する修飾、組み合わせ、および修飾の配置を特定することである。いくつかの実施形態では、本発明のオリゴマー化合物は、複数の修飾を組み合わせることにより、一本鎖RNAi化合物としての活性を有する一本鎖RNAi化合物を提供する。
アーゼ)、および二本鎖リボヌクレアーゼが含まれるが、これらに限定されない。例えば、ヌクレアーゼにはRNase H、アルゴノートタンパク質(Ago2など)、およびダイサー(dicer)が含まれるが、これらに限定されない。
クレオシドを含む。いくつかの実施形態では、こうしたオーバーハングは2個のヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、3’−オーバーハング内のヌクレオシドはプリン核酸塩基を含む。いくつかの実施形態では、3’−オーバーハング内のヌクレオシドはアデニン核酸塩基を含む。いくつかの実施形態では、3’−オーバーハング内のヌクレオシドはピリミジンを含む。いくつかの実施形態では、3’−プリンオーバーハングを含むダイサー二重鎖は、3’ピリミジンオーバーハングを含むダイサー二重鎖と比較して、アンチセンス化合物としての活性が高い。いくつかの実施形態では、ダイサー二重鎖のオリゴマー化合物は、1つ以上の3’デオキシヌクレオシドを含む。こうした実施形態のいくつかでは、3’デオキシヌクレオシドはdTヌクレオシドである。
いくつかの実施形態では、本発明のオリゴマー化合物は酵素ダイサーと相互作用する。このような実施形態のいくつかでは、オリゴマー化合物はダイサーと結合し、かつ/またはダイサーに切断される。このような実施形態のいくつかでは、ダイサーと相互作用する結果、最終的にアンチセンス活性が得られる。いくつかの実施形態では、ダイサーはヒトダイサーである。いくつかの実施形態では、ダイサーと相互作用するオリゴマー化合物は二本鎖オリゴマー化合物である。いくつかの実施形態では、ダイサーと相互作用するオリゴマー化合物は一本鎖オリゴマー化合物である。
IId、またはIIeのヌクレオシドを含む。いくつかの実施形態では、ダイサー二重鎖の一方の鎖はアンチセンスオリゴマー化合物であり、他方の鎖は、そのセンス相補体である。
いくつかの実施形態では、本発明のオリゴマー化合物はAgoと相互作用する。いくつかの実施形態では、このようなオリゴマー化合物は、RISC経路の他のメンバー(例:ダイサー)と相互作用することによりRISC経路に最初に進入する。いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物は、Agoと相互作用することにより最初にRISC経路に進入する。いくつかの実施形態では、このような相互作用の結果、最終的にアンチセンス活性が得られる。いくつかの実施形態では、本発明は、Agoとオリゴマー化合物とを接触させることを含む、Agoの活性化方法を提供する。いくつかの実施形態では、Agoは細胞の中にある。このような実施形態のいくつかでは、細胞は動物の中にある。
いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物の一部分はマイクロRNAの核酸塩基配列と100%同一であるが、オリゴマー化合物全体では、マイクロRNAと完全に同一ではない。このような実施形態のいくつかでは、100%同一の部分を有するオリゴマー化合物の長さは、マイクロRNAの長さより大きい。例えば、マイクロRNA模倣体が24個の結合ヌクレオシドからなり、位置1〜23のヌクレオシドが長さ23核酸塩基のマイク
ロRNAの対応位置とそれぞれ同一である場合、23個のヌクレオシド部分はマイクロRNAの核酸塩基配列と100%同一であり、マイクロRNAの核酸塩基配列との全同一性は約96%である。
本明細書で提供するヌクレオシドは、例えば下記の実施例で例示するような適用可能な有機合成手法のいずれかにより調製できる。こうした手法の多くは当該技術分野でよく知られているが、公知となっている手法の多くは以下の文献に詳述されている。Compendium of Organic Synthetic Methods,John Wiley & Sons,New York:Vol.1,Ian T.Harrison and Shuyen Harrison,1971;Vol.2,Ian T.Harrison and Shuyen Harrison,1974;Vol.3,Louis S.Hegedus and Leroy Wade,1977;Vol.4,Leroy G.Wade Jr.,1980;Vol.5,Leroy G.Wade Jr.,1984;およびVol.6,Michael B.Smith;ならびにMarch,J.,Advanced Organic Chemistry,3rd
Edition,John Wiley & Sons,New York,1985;Comprehensive Organic Synthesis.Selectivity,Strategy & Efficiency in Modern Organic Chemistry,in 9 Volumes,Barry M.Trost,Editor−in−Chief,Pergamon Press,New York,1993;Advanced Organic Chemistry,Part B:Reactions and Synthesis,4th Edition;Carey and Sundberg,Kluwer Academic/Plenum Publishers,New York,2001;Advanced Organic
Chemistry,Reactions,Mechanisms,and Structure,2nd Edition,March,McGraw Hill,1977;Greene,T.W.,and Wutz,P.G.M.,Protecting Groups in Organic Synthesis,4th Edition,John Wiley & Sons,New York,1991;およびLarock,R.C.,Comprehensive Organic Transformations,2nd Edition,John Wiley & Sons,New York,1999。
できる。分割に関するさらなる詳細は、Jacquesら,Enantiomers,Racemates,and Resolutions,John Wiley & Sons,1981に記載されている。本明細書に記述する化合物がオレフィン二重結合、他の不飽和、または他の幾何学的非対称の中心を含む場合、かつ別段の指定がない限り、化合物はEおよびZ幾何異性体の両方またはシスおよびトランス異性体を含むことが意図される。同様に、すべての互変異性型を含めることも意図される。本明細書に現れる任意の炭素−炭素二重結合の配置は、便宜上選択されているだけであり、本文でその旨を記載していない限り、特定の配置に限定することは意図されない。
オリゴマー化合物は、液相法ではなく固体支持体法を使用して、日常的に調製されている。固体支持体法を利用するオリゴマー化合物の調製で一般に使用される市販の機器は、アプライドバイオシステムズ(カリフォルニア州フォスターシティ)など数社の販売業者から販売されている。当該技術分野で公知となっている上記合成の他の手段も、追加的または代替的に使用してよい。自動合成手法を含む好適な固相手法については、Oligonucleotides and Analogues,a Practical Approach,F. Eckstein,Ed.,Oxford University
Press,New York,1991に記述されている。
1(2−フルオロフェニル)−4−エトキシピペリジン−4−イル]である。いくつかの実施形態では、上記RNA合成方法の各々を本明細書で使用できる。いくつかの実施形態では、上記のRNA合成方法をハイブリッド方式で、例えば、ある方法からの5’−保護基と別の方法からの2’−O−保護基を一緒に使用して実施することができる。
オリゴマー化合物は、医薬組成物の調製または製剤の目的で、薬剤的に許容される活性または不活性の物質と混合できる。医薬組成物の組成および製剤方法は、投与経路、疾患の程度、投与量など(これらに限定されない)のいくつかの基準によって異なる。
いくつかの実施形態では、本発明は、標的核酸の量または活性を減少させるための化合物と方法を提供する。いくつかの実施形態では、本発明はアンチセンス化合物と方法を提供する。いくつかの実施形態では、本発明は、RNase Hの活性化に基づくアンチセンス化合物と方法を提供する。いくつかの実施形態では、本発明はRNAi化合物と方法を提供する。
を使用することが好ましい。こうした例のいくつかでは、一本鎖か二本鎖かを問わず、無修飾のRNAは好適ではない。一本鎖RNAは比較的不安定であり、二本鎖RNAは容易に細胞に進入できない。従来の課題は、RNAiを通じてRNAのアンチセンス活性に干渉することなく(改良することすらなく)、安定性向上などの所望の特性を提供できる修飾およびモチーフを特定することであった。
本明細書に記載するいくつかの化合物、組成物、および方法は、いくつかの実施形態に従って具体性をもって記述されているが、以下の実施例は、本明細書に記載する化合物を例示するだけの働きをするものであり、当該化合物を限定することは意図していない。本願に列挙する参考文献、GenBank受入番号などの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
300MHzおよび75MHz用Bruker分光計で、1Hおよび13C NMRスペクトルをそれぞれ記録した。
ヌクレオシドホスホルアミダイトの合成
ヌクレオシドホスホルアミダイトの調製は、本明細書で説明する手順、および当該技術分野で説明されている手順、例えば米国特許第6,426,220号および公開PCT WO02/26743号など(これらに限定されない)に従って行う。
オリゴマー化合物の合成
本発明で使用するオリゴマー化合物は、周知の固相合成手法により簡便かつ日常的に調製することができる。こうした合成用の機器は、アプライドバイオシステムズ(カリフォルニア州フォスターシティ)など数社の販売業者から販売されている。当該技術分野で公知となっている上記合成の他の手段も、追加的または代替的に使用してよい。類似の手法を使用して、アルキル誘導体などのオリゴヌクレオチドや、ホスホロチオエート結合を有するオリゴヌクレオチドを調製することがよく知られている。
オリゴヌクレオチドを含むが、これに限定されない)は、ヨウ素による酸化を伴う標準のホスホルアミダイト化学を使用して、自動化DNA合成機(アプライドバイオシステムズ
モデル394)で合成することができる。
オリゴマー化合物の単離および精製
制御多孔質ガラス固体支持体または他の支持媒体からの切断および濃水酸化アンモニウム中での55℃で12〜16時間にわたる脱ブロックの後、3倍量を超えるエタノールで1M NH4OAcから沈殿させることにより、オリゴマー化合物(オリゴヌクレオチドおよびオリゴヌクレオシドが含まれるが、これらに限定されない)を回収する。合成したオリゴマー化合物を、エレクトロスプレー質量分析法(分子量決定)およびキャピラリーゲル電気泳動法により分析する。合成で得られるホスホロチオエート結合およびホスホジエステル結合の相対量は、−16amu生成物(+/−32+/−48)に対する補正分子量の比により求める。いくつかの試験において、Chiangら,J.Biol.Chem.1991,266,18162−18171に記載されているように、HPCLによりオリゴマー化合物が精製されている。HPLCで精製した材料を用いて得られる結果は、HPLCを使用せずに精製した材料を用いて得られる結果と概して同様である。
96−ウェルプレートフォーマットを使用したオリゴマー化合物の合成
オリゴマー化合物(オリゴヌクレオチドを含むが、これに限定されない)は、96−ウェルフォーマットで96配列を同時に会合可能な自動化合成機で固相P(III)ホスホロアミダイト化学により合成することができる。ホスホジエステルヌクレオシド間結合は、水性ヨウ素による酸化により得られる。ホスホロチオエートヌクレオシド間結合は、無水アセトニトリル中で3,H−1,2−ベンゾジチオール−3−オン1,1ジオキシド(ビューケージ(Beaucage)試薬)を用いた硫化により生成される。標準の塩基保護ベータ−シアノエチル−ジイソ−プロピルホスホロアミダイトは、商業販売業者(例えば、PE−アプライドバイオシステムズ、カリフォルニア州フォスターシティ、ファルマシア、ニュージャージー州ピスカタウェイなど)から購入できる。非標準のヌクレオシドは、標準の方法または特許保護された方法により合成して、塩基保護beta−シアノエチルジイソプロピルホスホロアミダイトとして官能性を持たせることができる。
96−ウェルプレートフォーマットを使用したオリゴマー化合物の分析
各ウェル中のオリゴマー化合物の濃度は、試料の希釈およびUV吸収分光法により評価することができる。個々の生成物の全長完全性については、96−ウェルフォーマット(Beckman P/ACE(商標)MDQ)でキャピラリー電気泳動(CE)により評価するか、または、個別に調製した試料に対しては市販のCE装置(例えばBeckman P/ACE(商標)5000、ABI 270)で評価できる。塩基および主鎖の組成は、エレクトロスプレー質量分析を用いたオリゴマー化合物の質量分析により確認する。すべてのアッセイ試験プレートは、単一およびマルチチャネルのロボットピペッターを使用してマスタープレートから希釈する。プレート上のオリゴマー化合物の少なくとも85%が少なくとも85%全長である場合、プレートは許容可能と判断される。
オリゴマー化合物を用いた細胞のインビトロ処置
標的核酸の発現に対するオリゴマー化合物の影響については、その標的核酸が測定可能な量で存在していれば、多様な細胞型のいずれでも試験される。例えば、PCRやノーザンブロット分析を用いて日常的に測定できる。アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション(ATCC、バージニア州マナッサス)より、複数の組織および種に由来する細胞株を入手することができる。
細胞が適切なコンフルエント状態に達したとき、記載されているトランスフェクション法を用いてオリゴマー化合物で処置する。
細胞が65〜75%コンフルエントとなったとき、1つ以上のオリゴマー化合物で細胞を処置する。オリゴマー化合物の所望の濃度および100nMオリゴマー化合物につき2.5または3μg/mLのLIPOFECTIN(商標)濃度が得られるように、オリゴマー化合物をOpti−MEM(商標)−1血清低減培地(インビトロジェンライフテクノロジーズ、カリフォルニア州カールズバッド)中でLIPOFECTIN(商標)(インビトロジェンライフテクノロジーズ、カリフォルニア州カールズバッド)と混合する。このトランスフェクション混合物を室温で約0.5時間インキュベートする。96−ウェルプレートで増殖した細胞では、ウェルを100μLのOPTI−MEMT(商標)−1で1回洗浄してから、130μLのトランスフェクション混合物で処置する。24−ウェルプレートまたは他の標準組織培養プレートにおいて増殖した細胞も、適正量の培地およびオリゴマー化合物を使用して、同様に処置する。細胞を処置して、データを同一2検体または同一3検体で入手する。37℃で約4〜7時間処置した後、トランスフェクション混合物を含む培地を新しい培地と交換する。オリゴマー化合物を用いた処置の16〜24時間後に細胞を回収する。
標的mRNAレベルのリアルタイム定量的PCR分析
標的mRNAレベルの定量は、ABI PRISM(商標)7600、7700、また
は7900配列検出システム(PE−アプライドバイオシステムズ、カリフォルニア州フォスターシティ)を使用し製造業者の説明書に従って、リアルタイム定量PCRにより実施する。このシステムは、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)生成物をリアルタイムかつ高速な処理能力で定量化できる、ゲルを使用しない閉管蛍光検出システムである。PCRが完了した後で増幅産物を定量する標準PCRとは対照的に、リアルタイム定量PCRでは、増幅産物の蓄積が進行するのと同時に定量する。この定量は、順方向、逆方向の両PCRプライマーの間で特異的にアニールして2つの蛍光色素を含有するオリゴヌクレオチドプローブを、PCR反応に含めることによって実現される。レポーター色素(例:PE−アプライドバイオシステムズ(カリフォルニア州フォスターシティ)、オペロンテクノロジーズ(カリフォルニア州アラメダ)、インテグレーテッドDNAテクノロジーズ(アイオワ州コラルビル)から入手されるFAMまたはJOE)をプローブの5’端に付け、クエンチャー色素(例:PE−アプライドバイオシステムズ(カリフォルニア州フォスターシティ)、オペロンテクノロジーズ(カリフォルニア州アラメダ)、またはインテグレーテッドDNAテクノロジーズ(アイオワ州コラルビル)から入手されるTAMRA)をプローブの3’端に付ける。プローブと色素がインタクトであるとき、レポーター色素発光は、3’クエンチャー色素の近接により消光する。増幅中、標的配列に対するプローブのアニーリングにより、Taqポリメラーゼの5’−エキソヌクレアーゼ活性により切断可能な基質が生ずる。PCR増幅サイクルの伸長段階中、Taqポリメラーゼによるプローブの切断により、プローブの残り部分から(したがってクエンチャー部分から)レポーター色素が放出され、配列特異的な蛍光シグナルが発生する。各サイクルに伴って、追加のレポーター色素分子がそれぞれのプローブから切断され、ABI PRISM(商標)配列検出システムに内蔵のレーザー光学装置により定間隔で蛍光強度をモニタリングする。各アッセイにおいて、未処置対照試料からのmRNAの連続希釈液を含有する一連の並行反応物より検量線を作成し、これを使用して、試験試料のアンチセンスオリゴヌクレオチド処置後の阻害パーセントを定量する。
定量的PCR分析に先立って、測定される標的遺伝子に特異的なプライマー−プローブセットについて、GAPDH増幅反応で「多重化」される能力を評価する。多重化の際、標的遺伝子と内部標準遺伝子GAPDHの両方を単一の試料において同時に増幅する。この分析では、未処置細胞より単離するmRNAを連続的に希釈する。GAPDHのみ、標的遺伝子のみ(「単一化」)、または両方(多重化)に特異的なプライマー−プローブセットの存在下で、各希釈液を増幅する。PCR増幅に続き、単一化試料と多重化試料の両方より、GAPDHと標的mRNAシグナルの検量線を希釈度の関数として作成する。多重化試料から生成されるGAPDHおよび標的シグナルの傾きと相関係数の両方が、単一化試料から生成される対応値の10%以内に入る場合、当該標的に特異的なプライマー−プローブセットは多重化可能とみなされる。PCRの他の方法も当該技術分野で公知となっている。
標的発現のオリゴヌクレオチド阻害の分析
当該技術分野で公知となっている様々な方法で、標的発現のアンチセンス調節をアッセイすることができる。例えば標的mRNAレベルは、ノーザンブロット分析、競合的ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)、リアルタイムPCRなどによって定量できる。現時点で望ましい方法は、リアルタイム定量PCRである。全細胞RNAまたはポリ(A)+mRNAに対してRNA分析を実施できる。本開示のRNA分析の1つの方法は、本明細書の他の実施例に記載されている全細胞RNAを使用することである。RNA単離の方法は、当該技術分野でよく知られている。ノーザンブロット分析も、当該技術分野で日常的に行われている。リアルタイム定量(PCR)は、PEアプライドバイオシステムズ(カリフォルニア州フォスターシティ)が市販するABI PRISM(商標)7600、7700、または7900配列検出システムを製造業者の説明書に従って使用することにより、簡便に実施できる。
.ら,Current Protocols in Molecular Biology,Volume 2,pp.10.8.1−10.8.21,John Wiley & Sons,Inc.,1997に記述されている。酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)は当該技術分野における標準の方法であり、例えばAusubel,F.M.ら,Current Protocols in Molecular Biology,Volume 2,pp.11.2.1−11.2.22,John Wiley & Sons,Inc.,1991に記載されている。
表現型アッセイの設計および標的阻害剤の使用のためのインビボ試験
表現型アッセイ
本明細書に開示する方法によって標的阻害剤を同定した後、特定の疾患状態または状況の治療における効力の予測となる測定可能なエンドポイントをそれぞれ有する1つ以上の表現型アッセイにおいて、オリゴマー化合物をさらに調査する。
本明細書に記載するインビボ試験の個々の被検体は、ヒトを含む温血脊椎動物である。
RNAの単離
ポリ(A)+mRNA単離
ポリ(A)+mRNAは、Miuraら(Clin.Chem.,1996,42,1758−1764)に従って単離する。ポリ(A)+mRNAの他の単離方法は、当該技術分野において日常的に使われている。手短に言えば、96−ウェルプレートで増殖させた細胞に対して、細胞から増殖培地を除去し、各ウェルを200μLの冷PBSで洗浄する。各ウェルに60μLの溶解緩衝液(10mMトリス−HCl(pH7.6)、1mM
EDTA、0.5M NaCl、0.5% NP−40、20mMバナジルリボヌクレオシド複合体)を加え、プレートを穏やかに振り混ぜてから、室温で5分間インキュベートする。55μLの溶解液をオリゴd(T)コート化96−ウェルプレート(AGCT社、カリフォルニア州アーヴィン)へ移す。プレートを室温で60分間インキュベートし、200μLの洗浄緩衝液(10mMトリス−HCl pH7.6、1mM EDTA、0.3M NaCl)で3回洗浄する。最終洗浄の後で、プレートをペーパータオルで拭いて余分な洗浄緩衝液を除去してから、5分間風乾する。70℃に予熱した60μLの溶出緩衝液(5mMトリス−HCl pH7.6)を各ウェルに加え、プレートを90℃のホットプレート上で5分間インキュベートしてから、溶出液を新しい96−ウェルプレートに移す。
全RNAの単離は、キアジェン社(カリフォルニア州バレンシア)から購入するRNEASY96(商標)キットおよび緩衝液を使用し、製造業者の推奨手順に従って行う。手短に言えば、96−ウェルプレートで増殖させた細胞に対して、細胞から増殖培地を除去し、各ウェルを200μLの冷PBSで洗浄する。各ウェルに150μLの緩衝液RLTを加えて、プレートを20秒間激しく振り混ぜる。次に、各ウェルに150μLの70%エタノールを加えて、上下3回のピペッティングにより中身を混合する。次に、この試料を、排液回収トレーを備えて真空源が付いたQIAVACTMマニフォールドと接続するRNEASY96(商標)ウェルプレートへ移す。1分間、真空圧をかける。RNEASY96(商標)プレートの各ウェルに500μLの緩衝液RW1を加えて、15分間インキュベートし、再び真空圧を1分間かける。RNEASY96(商標)プレートの各ウェルに追加の500μLの緩衝液RW1を加えて、真空圧を2分間かける。次に、RNEASY96(商標)プレートの各ウェルに1mLの緩衝液RPEを加えて、90秒間真空圧をかける。次に、緩衝液RPEでの洗浄を繰り返して、真空圧をさらに3分間かける。次に、QIAVAC(商標)マニフォールドからプレートを外し、ペーパータオルで拭いて乾燥させる。次に、このプレートを、1.2mL回収管を格納する収集チューブラックを備えたQIAVAC(商標)マニフォールドに再び取り付ける。次に、RNAseの無い140μLの水を各ウェルにピペット注入し、1分間インキュベートしてから真空圧を3分間かけることにより、RNAを溶出させる。
QIAGEN Bio−Robot 9604(キアジェン社、カリフォルニア州バレンシア)を使用すると、このピペッティングと溶出の反復工程を自動化できる。基本的には、培養プレート上で細胞を溶解した後、プレートをロボットデッキへ移し、ここでピペッティング、DNase処置、および溶出の工程を行う。
標的に特異的なプライマーおよびプローブ
公開されている配列情報を使用して、標的配列とハイブリダイズするようにプローブとプライマーを設計することができる。
を設計した。
逆方向プライマー:TGCACATATCATTACACCAGTTCGT(配列番号3)
PCRプローブ:
FAM−TTGCAGCAATTCACTGTAAAGCTGGAAAGG−TAMRA(配列番号4)ここで、FAMは蛍光色素であり、TAMRAはクエンチャー色素である。
標的タンパク質レベルのウェスタンブロット分析
ウェスタンブロット分析(免疫ブロット解析)は標準の方法を使って実施する。オリゴヌクレオチド処置の16〜20時間後に細胞を採取し、PBSで1回洗浄し、レムリ緩衝液(100μl/ウェル)に懸濁させ、5分間煮沸して、16% SDS−PAGEゲルに装填する。ゲルを150Vで1.5時間泳動して、ウェスタンブロッティング用の膜に移す。標的に対する適切な一次抗体を、一次抗体種に対する放射標識または蛍光標識された二次抗体とともに使用する。PHOSPHORIMAGER(商標)(モレキュラーダイナミクス、カリフォルニア州サニーベール)を使用して、バンドを可視化する。
化合物5の調製
化合物9の調製
市販の1,2;5,6−ジ−O−イソプロピリデン−α−D−アロフラノース、化合物6(135g、519.0mmol)、および2−(ブロモメチル)−ナフタレン(126g、570.0mmol)を、三つ口フラスコ(500mL)でDMF(500mL)中に溶解させ、反応液を氷浴で冷却した。水酸化ナトリウム(60%w/w、29g、727.0mmol)を反応液に注意深く(10分ごとに6gずつ)添加し、添加完了後、さらに60分間攪拌を継続した。この時点でTLC分析では、糖は確認されなかった(化合物6)。反応液を注意深く砕氷(約500g)に注ぎ、氷が溶けるまで、得られたスラ
リーを激しく攪拌した。得られた淡白色固体をろ過して回収し、水中に懸濁させた。懸濁液をメカニカルスターラーで30分間激しく撹拌してから、得られた固体をろ過して回収し、ヘキサン中に懸濁させた。懸濁液をメカニカルスターラーで30分間激しく攪拌し、ろ過して固体を回収し、4〜6時間風乾し、さらに、P2O5上で高減圧下にて16時間乾燥して、化合物7(206.0g、99%)を淡白色固体として得た。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.85(m,4H),7.48(m,3H),5.74(s,1H),4.92(d,1H,J=11.7),4.75(d,1H,J=11.6),4.58(m,1H),4.36(m,1H),4.15(m,1H),4.03−3.86(m,3H),1.61(s,3H),1.36(s,9H)
化合物7(200.0g、0.5モル)を、酢酸(2.2L)と水(740mL)の溶液に少量ずつ添加した。反応液を室温で16時間攪拌した後、TLC分析(30%EtOAc/ヘキサン)により化合物7が完全に消費されたことを確認した。次に、反応液を減圧下で濃縮し、大部分の酢酸を除去した。残った溶液を、EtOAc(1L)と水(1L)の攪拌溶液に注入した。次に、固体KOHを上記混合物に加えて、水層を強塩基性(pH>12)にした。次に、有機層を分離し、飽和重炭酸ナトリウム溶液とブラインで洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、ろ過および減圧濃縮して、化合物8を黄色発泡体として得て、これをさらに精製することなく使用した。
NaIO4(107.0g)の水(3L)溶液を、40分かけて化合物8のジオキサン(1.5L)撹拌(メカニカルスターラー)溶液に加えた。60分後、反応混合物をEtOAc(1.5L)に注ぎ、有機層を分離し、水(1L)およびブライン(1L)で洗浄し、次いで乾燥させ(Na2SO4)、濃縮して、黄色油状の化合物9を得て、これをさらに精製することなく使用した。
化合物14の調製
化合物17の調製
米国特許第5,969,116号に公開されている手順に従って、化合物1を調製した。ヌクレオシド化合物1(25g、40.5mmol)のピリジン(100mL)溶液に、塩化ベンゾイル(5.6mL、48.5mmol)を加えた。室温で3時間撹拌した後、さらに塩化ベンゾイル(2.5mL)を反応物に加えた。60分経過後、反応物を水でクエンチし、次いで酢酸エチルと水に分配した。さらに有機層を水とブラインで洗浄し、
乾燥させ(硫酸ナトリウム)、濃縮して、ベンゾイル保護された粗ヌクレオシドを得て、さらに保護することなくこれを使用した。
化合物15(2.0g、4.8mmol)およびトリフルオロ酢酸ピリジニウム(0.92g、4.8mmol)のジメチルスルホキシド(48mL)溶液にジシクロヘキシルカルボジイミド(1.5g、7.2mmol)を加え、反応混合物を室温で6時間撹拌させた。別のフラスコで、テトラエチルメチレンジホスホネート(2.4mL、9.6mmol)のTHF(20mL)溶液に、カリウムtert−ブトキシド(THF 1M溶液の10mL)を加えた。室温で10分間撹拌した後、このフラスコを氷浴で冷却し、カニューレを介してDMSO溶液を加えた。室温で2時間撹拌した後、反応物を酢酸エチルで希釈し、有機層を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ(硫酸ナトリウム)、濃縮した。カラムクロマトグラフィー(シリカゲル、ジクロロメタン中20〜40%のアセトンで溶出)により精製し、ビニルヌクレオシド化合物16(1.25g、47%)を得た。
ビニルヌクレオシド化合物16(110mg、0.2mmol)および7Nアンモニアのメタノール(2mL)溶液を室温で6時間ねかせ、ローターエバポレーター上で溶媒を除去した。クロマトグラフィー(シリカゲル、ジクロロメタン中70〜90%のアセトンで溶出)により残渣を精製し、化合物16a(84mg、95%)を得た。
化合物16a(84mg、0.19mmol)、テトラゾール(12mg、0.15mmol)、およびN−メチルイミダゾール(1滴)のジメチルホルムアミド(1mL)溶液に、(2−シアノエトキシ)−テトライソプロピルホスホロジアミダイト(0.084mL、0.28mmol)を加えた。室温で3時間撹拌した後、反応物を酢酸エチルで希釈し、ブラインで洗浄し(2x)、乾燥させ(硫酸ナトリウム)、濃縮した。カラムクロマトグラフィー(シリカゲル、ジクロロメタン中2〜4%のメタノールで溶出)により精製し、アミダイト化合物17(113mg、90%)を得た。
化合物19および19aの調製
化合物20の調製
化合物24の調製
化合物27の調製
化合物30の調製
化合物32の調製
化合物36、37、および38の調製
化合物42、43、および44の調製
化合物14および47を調製する代替方法
化合物50の調製
化合物62の調製
出発物質である化合物51は市販されているが、Moffattら,J.Org.Chem.,1979,44,1301の手順に従って調製することもできる。
粗化合物(105g、0.293モル)を無水DMF(1L)に溶解した後、イミダゾール(39.9g、0.58モル)を加えた。得られた黄色の液体を、窒素下で撹拌しながら氷浴で0℃まで冷却した。最小量のDMFに溶解したtert−ブチルジメチルシリルクロリド(TBDMSCl、48.5ml、0.322モル)を、40分かけて滴下した。さらに16時間、撹拌を続けながら、氷浴の温度を滴下完了時の0℃から室温にした。この時点で、反応が完了したことをTLC(Rf=0.56、20% EtOAc/ヘキサン)で確認した。次に、MeOH(50mL)を追加して反応物をクエンチした。次に、水(1L)とEtOAc(500mL)を加えて、有機物を飽和NaHCO3(1L)とブライン(1L)で洗浄した後、乾燥させ(Na2SO4)、ろ過し、減圧下で溶媒を除去して、黄色油状の化合物52(139.0g)を得た。
3,133.1,128.3,128.0,127.7,126.6,126.2,126.0,125.7,111.7,105.2,82.6,81.9,79.6,72.6,68.6,64.5,26.7,26.3,25.9,18.3,−5.4 LCMS(方法CN1)、保持時間=1.8分、m/z=497.1(M+Na)、純度>98%
2つの追加漏斗付きの2L丸底フラスコに、塩化オキサリル(12.2mL、145ミリモル)とCH2Cl2(280mL)を加えた。一方の追加漏斗にはDMSO(20.5mL、289ミリモル)のCH2Cl2(30mL)溶液を入れ、他方の漏斗には、CH2Cl2(380mL)に溶解した化合物52(45.75g、96.4ミリモル)を入れた。次に、丸底を窒素下で−78℃まで冷却し、15分かけてDMSO溶液を滴下した。さらに50分間撹拌した後、化合物52の溶液を15分かけて滴下した。さらに30分間撹拌した後、10分かけてEt3N(60mL、434ミリモル)を加え、室温で30分間反応を進行させた。次に、反応物をNH4Cl(飽和、150mL)でクエンチし、有機層を10%クエン酸(1L)、重炭酸ナトリウム(飽和、1L)、およびブライン(1L)で連続的に洗浄した。次に、有機層をNa2SO4上で乾燥させ、濃縮し、シリカゲル(20% EtOAc/ヘキサン)に通してろ過し、粗ケトン(42.4g、93%)を得て、さらなる精製は行わずに、この粗ケトンをそのまま次の工程で使用した。TLC(Rf=0.55、20% EtOAc/ヘキサン)LCMS(方法CN1)、保持時間=2.1分、m/z=473.1(M+H)、495.1(M+Na)、967.3(2M+Na)
LCMS(方法DR1)、m/z=501.1(M+H)、523.2(M+Na)
ほぼ純粋な化合物53(41.3g、82.5ミリモル)とアンバーライト(IR−120H+強酸性イオン交換樹脂、80g)に、1,4−ジオキサン(275mL)とH2
O(230mL)を加えた。これを90℃で36時間加熱してから、熱い状態でセライトに通してろ過し、蒸発乾固させた。次に、得られた粗固体を50℃で12時間、P2O5上で乾燥させた。
上記で得た白色の粗固体をピリジン(290mL)とAc2O(78mL、10当量)で処置した後、滴下してDMAP(120mg)に加えた。室温で16時間反応させた後、溶媒を蒸発させ、トルエン(3x100mL)と共蒸発させた。主生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(25%EtOAc/ヘキサン〜35%EtOAc/ヘキサン)で精製して、化合物54である粗テトラアセテート(31.4g、74%)を白色の発泡体として得た。TLC(Rf=0.27、40% EtOAc/ヘキサン)
LCMS(方法CN1)、保持時間=1.47分、m/z=537.1(M+Na)、純度=99%
ドライアセトニトリル(300mL)中のウラシル(10.2g、90.7mmol)と化合物54(31.1g、60.4ミリモル)の撹拌懸濁液に、N,O−ビス(トリメチルシリル)アセトアミド(BSA、54.7mL、224mmol)を加えた。室温で30分撹拌した後、透明な溶液を認め、反応物を窒素下で0℃まで冷却した。トリメチルシリフルオロメタンスルホネート(trimethylsilyfluoromethanesulfonate)(TMSOTf、21.9mL、121mmol)を加え、反応物を室温で15分間撹拌した後、80℃に予熱した油浴に移した。80℃で4時間撹拌した後、反応物を室温まで冷却し、MeOH(20mL)、EtOAc(250mL)、およびH2O(400mL)を加えた。次に、有機相を飽和NaHCO3、ブラインで連続的に洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、濃縮して、粗トリアセテートを得た。TLC(Rf=0.60、80% EtOAc/ヘキサン)LCMS(方法DRHI)、m/z=567.1(M+H)
LCMS(方法G1)、保持時間=2.09分、m/z=463.1(M+Na)、純度>99%
ドライDMF(180mL)中トリオール化合物55(16.1g、36.5ミリモル)の撹拌混合物にカンファースルホン酸(CSA、850mg)を加え、次いでベンズアルデヒドジメチルアセタール(BDMA、22mL、146ミリモル)を加えた。これを50℃で撹拌し、2時間後にさらにCSA(600mg)とBDMA(6mL)を加えた。その2時間後、反応混合物を室温まで冷まし、EtOAc(300mL)とNaHCO3(飽和)/H2O(500mL、3:2)に分配した。次に、有機層をブラインで2回洗浄し、水層をEtOAcの追加部分で逆抽出した。まとめた有機層をNa2SO4上で乾燥し、蒸発させて、粗ベンジリジンを得た。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(2% MeOH/CH2Cl2〜5% MeOH/CH2Cl2)で精製して、白色固体状のベンジリジン化合物56(18.6g、96%)を得た。最終化合物にいくらかDMFが含まれていることが1H NMRで確認されたが、後続工程の妨げにはならなかった。TLC(Rf=0.45、8% MeOH/CH2Cl2)
つあるが、他のいずれか1つと重なっている。
LCMS(方法G1)、保持時間=3.70分、m/z=529.1(M+Na)、551.1(M+Na)、純度>99%
化合物56(45g、85ミリモル)の95%アセトン(水溶液、350mL)撹拌溶液に、N−メチルモルホリンオキシド(48g、409ミリモル)と2.5% OsO4のイソプロパノール(70g OsO4)溶液を加え、反応物を4日間、室温で撹拌した。その時点で反応物をセライトとシリカゲルに通してろ過し、アセトンで十分溶出させた。得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィー(2.5%〜5%メタノール/DCM)で精製し、ジオール(19.74g)を得て、直後にTHF(175mL)、H2O(175mL)、およびNaIO4(15g、70ミリモル)でこのジオールを処置した。1時間後、水とEtOAcを加えて、有機物を飽和NaHCO3とブラインで洗浄した後、乾燥させ(Na2SO4)、ろ過し、減圧下で溶媒を除去して、粗アルデヒドを得た。その直後に、この化合物を0℃で1時間、4当量のNaBH4のメタノール溶液で処置し、次いで水とEtOAcを加え、有機物を10%クエン酸(水溶液)およびブラインで洗浄し、次いで乾燥させ(Na2SO4)、ろ過して、減圧下で溶媒を除去し、粗アルコールを得た。反応物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、メタノール/DCMで溶出して、化合物57を得た(全収率40%)。1H NMRおよびLCMSは構造と一致した。
化合物57(1,28g、2.4ミリモル)とトリフェニルホスフィン(2.2g、8.4ミリモル)のドライTHF(20mL)溶液を撹拌した0℃の混合物に、DIAD(1.6mL、8.4ミリモル)を滴下した。室温で18時間撹拌した後、水とDCMを加えて、有機物をブラインで洗浄した後、乾燥させ(Na2SO4)、ろ過し、減圧下で溶媒を除去して、粗二環式生成物を得た。この生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(2%メタノール/DCM〜10%メタノール/DCM)で精製して、純粋な化合物58(1.11g、90%)を得た。1H NMRおよびLCMSは構造と一致した。
化合物58(1.1g、2.15ミリモル)をDMFに溶解し、15分間NaH(鉱油中60%、6.4ミリモル)で処置した。この時点でNH4ClとEtOAcを加えて、有機物を水とブラインで洗浄した後、乾燥させ(Na2SO4)、ろ過し、減圧下で溶媒を除去して、粗化合物を得た。この化合物をシリカゲルクロマトグラフィー(3%メタノール/DCM)で精製して、純粋な化合物59(866mg、79%)を得た。1H NMRおよびLCMSは構造と一致した。
0℃のCH3CN(14mL)中の化合物60(388mg、1.04ミリモル)とDMAP(343mg、2.8ミリモル)の撹拌混合物を、フェニルクロロチオホルマート(196μL、1.45ミリモル)に加えた。4時間撹拌した後、反応混合物を蒸発乾固させた。トルエン(13mL)、Bu4SnH(1.65mL、6.24ミリモル)、およびAIBN(15mg)を90℃で4時間加熱した。次に、反応物を蒸発乾固させ、シリカゲルクロマトグラフィー(1.5%〜3%メタノール/DCM)で精製して、化合物61(254mg、68%)を得た。1H NMRおよびLCMSは構造と一致した。
化合物61(230mg、0.64ミリモル)の撹拌混合物を40psiにて、10%Pd/C(20mg)上で10時間水素添加した。反応物をろ過し、蒸発させ、トルエンと共蒸発させた。減圧下で16時間乾燥させた後、ピリジン(3mL)とDMTCl(187mg、0.55ミリモル)を加えた。反応物を室温で4時間撹拌させた後、水とEtOAcを加えて、有機物を飽和NaHCO3およびブラインで洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、ろ過し、減圧下で溶媒を除去した。得られた発泡体をシリカゲルクロマトグラフィー(10%〜40%アセトン/CH2Cl2)で精製して、化合物62(171mg、47%)を得た。1H NMRおよびLCMSは構造と一致した。
化合物65の調製
化合物69の調製
化合物73の調製
化合物77の調製
化合物81の調製
化合物85の調製
化合物89の調製
化合物93の調製
69として2010年8月12日に公開された国際出願番号:PCT/US2010/022759を参照)。
化合物50を調製する代替方法
オリゴマー化合物
式II、IIa、IIb、IIc、IId、またはIIeの少なくとも1つの5’修飾ヌクレオシドを有するオリゴマー化合物の合成手順は、当該記述分野でよく知られており、そのいくつかは本明細書に例示している。こうした公知の合成手順に従い、上記実施例に例示したホスホロアミダイト化合物(実施例13、化合物5;実施例15および25、化合物14;実施例16、化合物17;実施例17、化合物19および19a;実施例19、化合物24;実施例20、化合物27;実施例21、化合物30;実施例22、化合物32;実施例23、化合物36〜38;実施例24、化合物42〜44;実施例25、化合物47;実施例26および35a、化合物50;実施例28、化合物65;実施例29、化合物69;実施例30、化合物73;実施例31、化合物77;実施例32、化合物81;実施例33、化合物85;実施例34、化合物89;実施例35、化合物93)を1つ以上使用して調製する。
本明細書で提供する修飾ヌクレオシドを5’末端に含むオリゴマー化合物を、固相手法を介して調製する一般的方法(505739の調製)
5’−ビニルジメチルホスホネート3’−ホスホルアミダイト溶液を使用した。VIMAD UnyLinker(商標)固相支持体上でオリゴマー化合物を合成した。合成のため、適量の固相支持体をカラムに詰めた。トルエンのジクロロ酢酸溶液(6%)を脱トリチル化試薬として使用した。カップリング工程中、N−メチルイミダゾールまたはCH3CN中の1H−テトラゾール存在下の4,5−ジシアノイミダゾールを活性化剤として使用した。AKTAOligopilot合成機(GEヘルスケアバイオサイエンス)またはABI394合成機(アプライドバイオシステム)上で、以下に規定する手順を使用し、2〜200μmolスケールでオリゴマー化合物の合成を行った。
TEA/CH3CN中の1Mの2−メルカプトエタノールでクエンチした(固体支持体の0.5mL/μモルを使用)。上清をデカントし、固体支持体を追加の2−メルカプトエタノール溶液で洗浄した。45分後、室温で追加の2−メルカプトエタノール溶液を用いた洗浄を繰り返した。上清をデカントし、固体支持体と結合したオリゴマー化合物を1Mの2−メルカプトエタノール中のアンモニア(28〜30wt%)に懸濁し(0.75mL/μの固体支持体を使用)、55℃で2時間加熱し、固体支持体からオリゴマー化合物を切断した。
修飾5’−ヌクレオシドを含むオリゴマー化合物の調製(5’−デオキシ−5’−メチレンジエチルホスホネートおよび5’−デオキシ−5’−ビニルジメチルホスホネート)
C16およびコレステロールとコンジュゲートしたオリゴマー化合物95、96を調製する一般的方法
C16およびコレステロールとコンジュゲートしたオリゴマー化合物の調製
C16 コレステロール
C10
添字R
少なくとも1つのFHNAを含みPTENを標的指向する修飾ssRNA−インビトロ試験
ホジエステルヌクレオシド間結合を表す。5’−端の「Pv」は、5’−(E)−ビニルホスホネート基、(PO(OH)2(CH=CH−)を表す。後ろに添字f、m、e、またはhが付きヌクレオシドは、糖修飾ヌクレオシドである。添字「f」は2’−フルオロ修飾ヌクレオシドを表し、添字「m」は2’−O−メチル修飾ヌクレオシドを表し、添字「e」は2’−O−メトキシエチル(MOE)修飾ヌクレオシドを表す。添字「h」の付いたヌクレオシドはFHNAであり、以下に示す通りである。
添字h(FHNA)
添字k((S)−cEt)
修飾ssRNAの安定性の評価−インビボ試験
ssRNAの安定性を0分、5分、10分、20分、30分、40分、および60分の各時点で評価した。ただし例外として、配列番号25、ISIS番号408877は0分、15分、30分、60分、120分、および240分の各時点で評価し、配列番号25,ISIS番号409044は0時間、0.5時間、1時間、2時間、4時間、8時間、および18時間の各時点で評価した。抽出の前に、最終濃度2.5μMの内部標準(配列番号24、ISIS番号355868、27−mer、2’−O−メトキシエチル−修飾ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド)を各試料に加えた。70μLのNH4OHおよび240μLのフェノール/クロロホルム/イソアミルアルコール(25:24:1)で試料を抽出した。14000rpmで2分間の遠心分離後、上清を除去した。残りの抽出溶媒に500μLの水を加えてボルテックスにかけ、水層を除去し、14000rpmで2分間の遠心分離後に上清と合わせた。
1Mの酢酸トリエチルアンモニウム溶液(500μL)を上清に加えた。9000rpmで20分間の遠心分離後、プレコンディショニングされたBiotage(商標)フェニル固相抽出プレート(SPEプレート)上に混合物の水層をロードした。SPEプレートを水で数回洗浄した。次に、試料をの90% MeOH中の1.5mL 1% TEAで溶出させ、タンパク質沈殿プレート(Phenomenex(商標))に通してろ過した。溶出液を蒸発乾固させて、50%のクエンチング緩衝液(8M尿素、50mM EDTA)と水で200μLに希釈した後で、試料を注入した。
Agilent1100シリーズLC/MSDシステムを質量分光計と直列式に接続した。質量分光計は、エレクトロスプレー陰イオンモードで操作した。ネブライザーの窒素ガスは325psiに設定し、乾燥用の窒素ガスは、12L/分に設定した。乾燥温度は325℃であった。試料(25μL/ウェル)を自動サンプラーより導入し、流速300μL/分、55℃で、XBridge OST C18 2.5μm 2.1mm×50mm HPLCカラムを用いて逆相クロマトグラフィーを行った。イオンペア緩衝液は、A:20%アセトニトリル中5mM酢酸トリブチルアンモニウム(TBAA)と、B:90%アセトニトリル中5nM TBAAからなり、ローディング緩衝液は、25%アセト
ニトリル中25mM TBAAであった。分離は、9分で30%〜70% B、次いで11分で80% Bの勾配で実施した。
PTENを標的指向する修飾ssRNA−反復投与インビボ試験
PTENを標的指向する修飾ssRNAの安定性:反復投与インビボ試験
PTENを標的指向する修飾ssRNA−インビボ用量応答試験
FVIIを標的指向する修飾ssRNA−インビボ用量応答および安定性試験
Claims (58)
- 式Icを有する化合物。
Ic
[式中、
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
M1は、H、OH、またはOR1であり;
M2は、OH、OR1、またはN(R1)(R2)であり;
R1とR2は、それぞれ独立して、C1−C6アルキルまたは置換C1−C6アルキルであり;
rは、0または1であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
M3は、O、S、NR14、C(R15)(R16)、C(R15)(R16)C(R17)(R18)、C(R15)=C(R17)、OC(R15)(R16)、またはOC(R15)(Bx2)であり;
R14は、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
R15、R16、R17、およびR18は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Bx1は、ヘテロ環塩基部分であり;
またはBx2が存在する場合、Bx2はヘテロ環塩基部分であり、Bx1はH、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
J4、J5、J6、およびJ7は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
または、J4はJ5とJ7のいずれか一方と架橋を形成し、ここで該架橋は、O、S、
NR19、C(R20)(R21)、C(R20)=C(R21)、C[=C(R20)(R21)]、C(=O)から選ばれる1〜3個の結合ビラジカル基を含み、J5、J6、J7のうち他の2つは、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
R19、R20、およびR21は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X1]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
X1は、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=X2)J1、OC(=X2)N(J1)(J2)、およびC(=X2)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
X2は、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、Zは、ハロゲンおよびN(E2)(E3)以外である。] - M3はO、CH=CH、OCH2、またはOC(H)(Bx2)である、請求項1に記載の化合物。
- M3はOである、請求項1に記載の化合物。
- J4、J5、J6、およびJ7はそれぞれHである、請求項1〜3のいずれか一項に記載の化合物。
- J4はJ5とJ7のいずれか一方と架橋を形成する、請求項1〜3のいずれか一項に記載の化合物。
- Aは以下の式のいずれか1つを有する、請求項1〜5のいずれか一項に記載の化合物。
Q1とQ2は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、または置換C1−C6アルコキシである。] - Q1とQ2はそれぞれHである、請求項6に記載の化合物。
- Q1とQ2はそれぞれ独立してHまたはハロゲンである、請求項6に記載の化合物。
- Q1とQ2のいずれか一方はHであり、Q1とQ2の他方はF、CH3、またはOCH3である、請求項6に記載の化合物。
- T1は以下の式を有する、請求項1〜9のいずれか一項に記載の化合物。
[式中、
RaとRcは、それぞれ独立して、保護されたヒドロキシル、保護されたチオール、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、保護されたアミノ、または置換アミノであり;
Rbは、OまたはSである。] - RbはOであり、RaとRcは、それぞれ独立してOCH3、OCH2CH3、またはOCH(CH3)2である、請求項10に記載の化合物。
- rは0であり、M1はO(CH2)2CNであり、M2はN[CH(CH3)2]2である、請求項1〜11のいずれか一項に記載の化合物。
- Gはハロゲン、OCH3、OCH2F、OCHF2、OCF3、OCH2CH3、O(CH2)2F、OCH2CHF2、OCH2CF3、OCH2−CH=CH2、O(CH2)2−OCH3、O(CH2)2−SCH3、O(CH2)2−OCF3、O(CH2)3−N(R10)(R11)、O(CH2)2−ON(R10)(R11)、O(CH2)2−O(CH2)2−N(R10)(R11)、OCH2C(=O)−N(R10)(R11)、OCH2C(=O)−N(R12)−(CH2)2−N(R10)(R11)、またはO(CH2)2−N(R12)−C(=NR13)[N(R10)(R11)]であり、ここでR10、R11、R12、およびR13は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルである、請求項1〜12のいずれか一項に記載の化合物。
- Gはハロゲン、OCH3、OCF3、OCH2CH3、OCH2CF3、OCH2−CH=CH2、O(CH2)2−OCH3、O(CH2)2−O(CH2)2−N(CH3)2、OCH2C(=O)−N(H)CH3、OCH2C(=O)−N(H)−(CH2)2−N(CH3)2、またはOCH2−N(H)−C(=NH)NH2である、請求項1〜12のいずれか一項に記載の化合物。
- GはF、OCH3、またはO(CH2)2−OCH3である、請求項1〜12のいずれか一項に記載の化合物。
- GはO(CH2)2−OCH3である、請求項1〜12のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記ヘテロ環塩基部分はピリミジン、置換ピリミジン、プリン、または置換プリンである、請求項1〜16のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記ヘテロ環塩基部分はウラシル、チミン、シトシン、5−メチルシトシン、アデニン
、またはグアニンである、請求項1〜17のいずれか一項に記載の化合物。 - 式Ieを有する、請求項1に記載の化合物。
Ie
[式中、Bxは、ピリミジン、置換ピリミジン、プリン、または置換プリンから選ばれるヘテロ環塩基部分である。] - Aは以下の式を有する、請求項19に記載の化合物。
[式中、Q1とQ2は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、または置換C1−C6アルコキシである。] - Q1とQ2はそれぞれ独立してH、F、CH3、またはOCH3である、請求項20に記載の化合物。
- T1は以下の式を有する、請求項19〜21のいずれか一項に記載の化合物。
[式中、
RbはOであり;
RaとRcは、それぞれ独立して、OCH3、OCH2CH3、またはOCH(CH3)2である。] - 式IIcを有する5’−末端化合物を含むオリゴマー化合物。
IIc
[式中、
T1は、任意に保護されるリン部分であり;
T2は、前記式IIcの化合物を前記オリゴマー化合物と結合するヌクレオシド間連結基であり;
Aは、以下の式のいずれか1つを有し;
Q3は、O、S、N(R5)、またはC(R6)(R7)であり;
R3、R4、R5、R6、およびR7は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、またはC1−C6アルコキシであり;
M3は、O、S、NR14、C(R15)(R16)、C(R15)(R16)C(R17)(R18)、C(R15)=C(R17)、OC(R15)(R16)、またはOC(R15)(Bx2)であり;
R14は、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
R15、R16、R17、およびR18は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Bx1は、ヘテロ環塩基部分であり;
またはBx2が存在する場合、Bx2はヘテロ環塩基部分であり、Bx1はH、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
J4、J5、J6、およびJ7は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、もしくは置換C2−C6アルキニルであり;
または、J4はJ5とJ7のいずれか一方と架橋を形成し、ここで該架橋は、O、S、NR19、C(R20)(R21)、C(R20)=C(R21)、C[=C(R20)(R21)]、C(=O)から選ばれる1〜3個の結合ビラジカル基を含み、J5、J6、J7のうち他の2つは、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
R19、R20、およびR21は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6アルコキシ、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、または置換C2−C6アルキニルであり;
Gは、H、OH、ハロゲン、またはO−[C(R8)(R9)]n−[(C=O)m−X1]j−Zであり;
R8とR9は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
X1は、O、S、またはN(E1)であり;
Zは、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C2−C6アルケニル、置換C2−C6アルケニル、C2−C6アルキニル、置換C2−C6アルキニル、またはN(E2)(E3)であり;
E1、E2、およびE3は、それぞれ独立して、H、C1−C6アルキル、または置換C1−C6アルキルであり;
nは、1〜約6であり;
mは、0または1であり;
jは、0または1であり;
各置換基は、ハロゲン、OJ1、N(J1)(J2)、=NJ1、SJ1、N3、CN、OC(=X2)J1、OC(=X2)N(J1)(J2)、およびC(=X2)N(J1)(J2)からそれぞれ独立して選ばれる1つ以上の任意に保護された置換基を含み;
X2は、O、S、またはNJ3であり;
J1、J2、およびJ3は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルであり;
jが1のとき、ZはハロゲンおよびN(E2)(E3)以外であり;
前記オリゴマー化合物は8〜40個のモノマーサブユニットを含み、標的核酸の少なくとも一部分とハイブリダイズ可能である。] - M3はO、CH=CH、OCH2、またはOC(H)(Bx2)である、請求項23に記載のオリゴマー化合物。
- M3はOである、請求項23に記載のオリゴマー化合物。
- J4、J5、J6、およびJ7はそれぞれHである、請求項23〜25のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
- J4はJ5とJ7のいずれか一方と架橋を形成する、請求項23〜25のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
- Aは以下の式のいずれか1つを有する、請求項23〜27のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
Q1とQ2は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、または置換C1−C6アルコキシである。] - Q1とQ2はそれぞれHである、請求項28に記載のオリゴマー化合物。
- Q1とQ2はそれぞれ独立してHまたはハロゲンである、請求項28に記載のオリゴマー化合物。
- Q1とQ2のいずれか一方はHであり、Q1とQ2の他方はF、CH3、またはOCH3である、請求項28に記載のオリゴマー化合物。
- T1は以下の式を有する、請求項23〜31のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
[式中、
RaとRcは、それぞれ独立して、保護されたヒドロキシル、保護されたチオール、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、置換C1−C6ア
ルコキシ、保護されたアミノ、または置換アミノであり;
Rbは、OまたはSである。] - RbはOであり、RaとRcは、それぞれ独立してOCH3、OCH2CH3、またはOCH(CH3)2である、請求項32に記載のオリゴマー化合物。
- Gはハロゲン、OCH3、OCH2F、OCHF2、OCF3、OCH2CH3、O(CH2)2F、OCH2CHF2、OCH2CF3、OCH2−CH=CH2、O(CH2)2−OCH3、O(CH2)2−SCH3、O(CH2)2−OCF3、O(CH2)3−N(R10)(R11)、O(CH2)2−ON(R10)(R11)、O(CH2)2−O(CH2)2−N(R10)(R11)、OCH2C(=O)−N(R10)(R11)、OCH2C(=O)−N(R12)−(CH2)2−N(R10)(R11)、またはO(CH2)2−N(R12)−C(=NR13)[N(R10)(R11)]であり、ここでR10、R11、R12、およびR13は、それぞれ独立して、HまたはC1−C6アルキルである、請求項23〜33のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
- Gはハロゲン、OCH3、OCF3、OCH2CH3、OCH2CF3、OCH2−CH=CH2、O(CH2)2−OCH3、O(CH2)2−O(CH2)2−N(CH3)2、OCH2C(=O)−N(H)CH3、OCH2C(=O)−N(H)−(CH2)2−N(CH3)2、またはOCH2−N(H)−C(=NH)NH2である、請求項23〜33のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
- GはF、OCH3、またはO(CH2)2−OCH3である、請求項23〜33のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
- GはO(CH2)2−OCH3である、請求項23〜33のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
- 前記ヘテロ環塩基部分はピリミジン、置換ピリミジン、プリン、または置換プリンである、請求項23〜37のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
- 前記ヘテロ環塩基部分はウラシル、チミン、シトシン、5−メチルシトシン、アデニン、またはグアニンである、請求項23〜38のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
- 前記5’−末端化合物は式IIdを有する、請求項23に記載のオリゴマー化合物。
IId
[式中、Bxは、ピリミジン、置換ピリミジン、プリン、または置換プリンから選ばれるヘテロ環塩基部分である。] - Aは以下の式を有する、請求項40に記載のオリゴマー化合物。
[式中、Q1とQ2は、それぞれ独立して、H、ハロゲン、C1−C6アルキル、置換C1−C6アルキル、C1−C6アルコキシ、または置換C1−C6アルコキシである。] - Q1とQ2はそれぞれ独立してH、F、CH3、またはOCH3である、請求項40に記載のオリゴマー化合物。
- T1は以下の式を有する、請求項40〜42のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
[式中、
RbはOであり;
RaとRcは、それぞれ独立して、OCH3、OCH2CH3、またはOCH(CH3)2である。] - 前記5’−末端化合物は式IIeを有する、請求項23に記載のオリゴマー化合物。
IIe
[式中、
Bxは、ウラシル、チミン、シトシン、5−メチルシトシン、アデニン、またはグアニンであり;
T2は、前記式IIeの化合物を前記オリゴマー化合物と結合するホスホロチオエートヌクレオシド間連結基であり;
Gは、ハロゲン、OCH3、OCF3、OCH2CH3、OCH2CF3、OCH2−CH=CH2、O(CH2)2−OCH3、O(CH2)2−O(CH2)2−N(CH3)2、OCH2C(=O)−N(H)CH3、OCH2C(=O)−N(H)−(CH2)2−N(CH3)2、またはOCH2−N(H)−C(=NH)NH2である。] - 各ヌクレオシド間連結基は、独立して、ホスホジエステルヌクレオシド間連結基またはホスホロチオエートヌクレオシド間連結基である、請求項23〜44のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
- 実質的に各々のヌクレオシド間連結基はホスホロチオエートヌクレオシド間連結基である、請求項23〜44のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物。
- 第1のオリゴマー化合物と第2のオリゴマー化合物を含む二本鎖組成物であって、
前記第1のオリゴマー化合物は前記第2のオリゴマー化合物に対して相補的であり、前記第2のオリゴマー化合物は核酸標的に対して相補的であり;
前記第1および第2のオリゴマー化合物の少なくとも1つは、請求項23〜46のいず
れか一項に記載のオリゴマー化合物であり;
前記組成物は1つ以上の5’または3’−末端基を任意で含む、二本鎖組成物。 - 細胞と請求項23〜46のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物または請求項47に記載の二本鎖組成物とを接触させることを含む、遺伝子発現を阻害する方法であって、該オリゴマー化合物は約8〜約40個のモノマーサブユニットを含み、かつ標的RNAに対して相補的である、方法。
- 前記細胞は動物の中にある、請求項48に記載の方法。
- 前記細胞はヒトの中にある、請求項48に記載の方法。
- 前記標的RNAはmRNA、プレ−mRNA、およびマイクロRNAから選ばれる、請求項48に記載の方法。
- 前記標的RNAはmRNAである、請求項48に記載の方法。
- 前記標的RNAはヒトmRNAである、請求項478に記載の方法。
- 前記標的RNAが切断されることによりその機能を阻害する、請求項48に記載の方法。
- 標的RNAのレベルを検出することをさらに含む、請求項48に記載の方法。
- 1つ以上の細胞、または組織と、請求項23〜46のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物または請求項47に記載の二本鎖組成物とを接触させることを含む、遺伝子発現を阻害するインビトロの方法。
- 1つ以上の細胞、組織、または動物と、請求項23〜46のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物または請求項47に記載の二本鎖組成物とを接触させることを含む、遺伝子発現を阻害するインビボの方法において使用するための、請求項23〜46のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物または請求項47に記載の二本鎖組成物。
- 医学療法において使用するための、請求項23〜46のいずれか一項に記載のオリゴマー化合物または請求項47に記載の二本鎖組成物。
Applications Claiming Priority (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US32899010P | 2010-04-28 | 2010-04-28 | |
US61/328,990 | 2010-04-28 | ||
US39310010P | 2010-10-14 | 2010-10-14 | |
US61/393,100 | 2010-10-14 | ||
US40968410P | 2010-11-03 | 2010-11-03 | |
US61/409,684 | 2010-11-03 | ||
PCT/US2011/033968 WO2011139702A2 (en) | 2010-04-28 | 2011-04-26 | Modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016078844A Division JP2016166222A (ja) | 2010-04-28 | 2016-04-11 | 修飾ヌクレオシド、その類似体、およびこれらから調製されるオリゴマー化合物 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013532122A true JP2013532122A (ja) | 2013-08-15 |
JP2013532122A5 JP2013532122A5 (ja) | 2014-06-19 |
JP6005628B2 JP6005628B2 (ja) | 2016-10-12 |
Family
ID=44904335
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013508162A Active JP6005628B2 (ja) | 2010-04-28 | 2011-04-26 | 修飾ヌクレオシド、その類似体、およびこれらから調製されるオリゴマー化合物 |
JP2016078844A Withdrawn JP2016166222A (ja) | 2010-04-28 | 2016-04-11 | 修飾ヌクレオシド、その類似体、およびこれらから調製されるオリゴマー化合物 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016078844A Withdrawn JP2016166222A (ja) | 2010-04-28 | 2016-04-11 | 修飾ヌクレオシド、その類似体、およびこれらから調製されるオリゴマー化合物 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US8993738B2 (ja) |
EP (2) | EP2601204B1 (ja) |
JP (2) | JP6005628B2 (ja) |
KR (1) | KR101869570B1 (ja) |
CN (1) | CN103154014B (ja) |
WO (1) | WO2011139702A2 (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2017525705A (ja) * | 2014-08-20 | 2017-09-07 | アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッドAlnylam Pharmaceuticals, Inc. | 修飾二本鎖rna剤 |
JP2021500862A (ja) * | 2017-10-04 | 2021-01-14 | アビディティー バイオサイエンシーズ,インク. | 核酸ポリペプチド組成物およびその使用 |
Families Citing this family (82)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010048585A2 (en) | 2008-10-24 | 2010-04-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds and methods |
JP5645840B2 (ja) | 2008-12-02 | 2014-12-24 | 株式会社Wave Life Sciences Japan | リン原子修飾核酸の合成方法 |
CN102596204B (zh) | 2009-07-06 | 2016-11-23 | 波涛生命科学有限公司 | 新的核酸前药及其使用方法 |
CN103154014B (zh) * | 2010-04-28 | 2015-03-25 | Isis制药公司 | 修饰核苷、其类似物以及由它们制备的寡聚化合物 |
EP2625186B1 (en) | 2010-04-28 | 2016-07-27 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | 5' modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
EP2620428B1 (en) | 2010-09-24 | 2019-05-22 | Wave Life Sciences Ltd. | Asymmetric auxiliary group |
JP6128529B2 (ja) | 2011-07-19 | 2017-05-17 | ウェイブ ライフ サイエンシズ リミテッドWave Life Sciences Ltd. | 官能化核酸の合成のための方法 |
WO2013022984A1 (en) | 2011-08-11 | 2013-02-14 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Selective antisense compounds and uses thereof |
EP2751270B1 (en) * | 2011-08-29 | 2018-08-22 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomer-conjugate complexes and their use |
WO2013033223A1 (en) * | 2011-08-29 | 2013-03-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compounds useful in conditions related to repeat expansion |
JP6280045B2 (ja) | 2011-12-22 | 2018-02-14 | アイオーニス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッドIonis Pharmaceuticals,Inc. | 肺腺癌内転移関連性転写物1(metastasis−associated−in−lung−adenocarcinoma−transcript−1:malat−1)の発現調節法 |
US20140378533A1 (en) | 2012-02-08 | 2014-12-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of rna by repeat targeting |
WO2013142514A1 (en) | 2012-03-19 | 2013-09-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for modulating alpha-1-antitrypsin expression |
AU2013203395A1 (en) | 2012-03-30 | 2013-10-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating TAU expression for reducing seizure and modifying a neurodegenerative syndrome |
US9518261B2 (en) | 2012-05-22 | 2016-12-13 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of enhancer RNA mediated gene expression |
CA2877905A1 (en) | 2012-06-25 | 2014-01-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of ube3a-ats expression |
AU2013287630B2 (en) | 2012-07-13 | 2017-05-25 | Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. | Chiral nucleic acid adjuvant |
PL2872485T3 (pl) | 2012-07-13 | 2021-05-31 | Wave Life Sciences Ltd. | Asymetryczna grupa pomocnicza |
WO2014012081A2 (en) | 2012-07-13 | 2014-01-16 | Ontorii, Inc. | Chiral control |
US9175291B2 (en) | 2012-10-11 | 2015-11-03 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Modulation of androgen receptor expression |
ES2907254T3 (es) | 2012-10-11 | 2022-04-22 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Un compuesto antisentido modificado para su uso en el tratamiento de la enfermedad de Kennedy |
WO2014059356A2 (en) | 2012-10-12 | 2014-04-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Selective antisense compounds and uses thereof |
KR102190852B1 (ko) | 2013-01-31 | 2020-12-14 | 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 | 변형된 커플링 프로토콜을 이용하는 올리고머 화합물의 제조 방법 |
MX368155B (es) | 2013-02-14 | 2019-09-20 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Modulación de la expresión de apolipoproteína c-iii (apociii) en poblaciones con deficiencia de lipoproteína lipasa (lpld). |
EP2958998B1 (en) * | 2013-02-22 | 2017-12-27 | Sirna Therapeutics, Inc. | Short interfering nucleic acid (sina) molecules containing a 2' internucleoside linkage |
CA2906119A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating tau expression |
JP6387084B2 (ja) | 2013-05-01 | 2018-09-05 | アイオーニス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッドIonis Pharmaceuticals,Inc. | アポリポタンパク質c−iiiの発現を調節するための組成物および方法 |
CA2916252A1 (en) * | 2013-06-21 | 2014-12-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulation of target nucleic acids |
ES2787600T3 (es) | 2013-07-02 | 2020-10-16 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Moduladores del receptor de la hormona del crecimiento |
TW202246503A (zh) | 2013-07-19 | 2022-12-01 | 美商百健Ma公司 | 用於調節τ蛋白表現之組合物 |
US10435430B2 (en) | 2013-07-31 | 2019-10-08 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compounds useful in conditions related to repeat expansion |
HUE045109T2 (hu) | 2013-09-13 | 2019-12-30 | Ionis Pharmaceuticals Inc | A B-komplementfaktor modulátorai |
US20170037409A1 (en) | 2013-12-24 | 2017-02-09 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of angiopoietin-like 3 expression |
WO2015108047A1 (ja) | 2014-01-15 | 2015-07-23 | 株式会社新日本科学 | 免疫誘導活性を有するキラル核酸アジュバンド及び免疫誘導活性剤 |
JPWO2015108048A1 (ja) | 2014-01-15 | 2017-03-23 | 株式会社新日本科学 | 抗腫瘍作用を有するキラル核酸アジュバンド及び抗腫瘍剤 |
EP3095460A4 (en) | 2014-01-15 | 2017-08-23 | Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. | Chiral nucleic acid adjuvant having anti-allergic activity, and anti-allergic agent |
US10160969B2 (en) | 2014-01-16 | 2018-12-25 | Wave Life Sciences Ltd. | Chiral design |
WO2015168172A1 (en) | 2014-04-28 | 2015-11-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Linkage modified oligomeric compounds |
PL3137596T3 (pl) | 2014-05-01 | 2019-11-29 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Kompozycja i sposoby modulowania ekspresji czynnika b dopełniacza |
RU2724527C2 (ru) | 2014-05-01 | 2020-06-23 | Ионис Фармасьютикалз, Инк. | Композиции и способы модулирования экспрессии рецептора гормона роста |
WO2015168589A2 (en) | 2014-05-01 | 2015-11-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating angiopoietin-like 3 expression |
WO2015168661A1 (en) * | 2014-05-01 | 2015-11-05 | Smith Larry J | METHODS AND MODIFICATIONS THAT PRODUCE ssRNAi COMPOUNDS WITH ENHANCED ACTIVITY, POTENCY AND DURATION OF EFFECT |
WO2016077704A1 (en) | 2014-11-14 | 2016-05-19 | The Regents Of The University Of California | Modulation of agpat5 expression |
WO2016086104A1 (en) | 2014-11-25 | 2016-06-02 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of ube3a-ats expression |
ES2848377T3 (es) | 2015-02-26 | 2021-08-09 | Ionis Pharmaceuticals Inc | Moduladores específicos de alelo de RODOPSINA P23H |
PL3277815T3 (pl) | 2015-04-03 | 2022-03-21 | University Of Massachusetts | Związki oligonukleotydowe do leczenia stanu przedrzucawkowego i innych zaburzeń angiogennych |
WO2017079739A1 (en) | 2015-11-06 | 2017-05-11 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | MODULATING APOLIPOPROTEIN (a) EXPRESSION |
US10478503B2 (en) | 2016-01-31 | 2019-11-19 | University Of Massachusetts | Branched oligonucleotides |
KR102426487B1 (ko) | 2016-06-06 | 2022-07-27 | 애로우헤드 파마슈티컬스 인코포레이티드 | 5'-시클로-포스포네이트 변형된 뉴클레오티드 |
WO2018031933A2 (en) | 2016-08-12 | 2018-02-15 | University Of Massachusetts | Conjugated oligonucleotides |
PT3506909T (pt) * | 2016-09-02 | 2022-08-16 | Dicerna Pharmaceuticals Inc | Análogos de 4¿-fosfato e oligonucleótidos compreendendo os mesmos |
JOP20190065A1 (ar) | 2016-09-29 | 2019-03-28 | Ionis Pharmaceuticals Inc | مركبات وطرق لتقليل التعبير عن tau |
KR20190065341A (ko) | 2016-10-06 | 2019-06-11 | 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 | 올리고머 화합물들의 접합 방법 |
JP2019535839A (ja) | 2016-11-29 | 2019-12-12 | ピュアテック ヘルス エルエルシー | 治療剤の送達のためのエクソソーム |
EP4219714A3 (en) * | 2017-04-05 | 2023-08-30 | Silence Therapeutics GmbH | Rna interference mediated inhibition of tmprss6 |
CN110997917B (zh) | 2017-12-01 | 2024-04-09 | 苏州瑞博生物技术股份有限公司 | 一种核酸、含有该核酸的组合物与缀合物及制备方法和用途 |
WO2019105414A1 (zh) | 2017-12-01 | 2019-06-06 | 苏州瑞博生物技术有限公司 | 一种核酸、含有该核酸的组合物与缀合物及制备方法和用途 |
CN110997919B (zh) | 2017-12-01 | 2024-04-02 | 苏州瑞博生物技术股份有限公司 | 双链寡核苷酸、含双链寡核苷酸的组合物与缀合物及制备方法和用途 |
WO2019105435A1 (zh) | 2017-12-01 | 2019-06-06 | 苏州瑞博生物技术有限公司 | 一种核酸、含有该核酸的组合物与缀合物及制备方法和用途 |
CA3087106A1 (en) | 2017-12-29 | 2019-07-04 | Suzhou Ribo Life Science Co., Ltd. | Conjugates and preparation and use thereof |
US20210095283A1 (en) * | 2018-01-04 | 2021-04-01 | Avidity Biosciences, Inc. | Heteroduplex nucleic acid molecules and uses thereof |
CN112105625A (zh) * | 2018-03-07 | 2020-12-18 | 赛诺菲 | 核苷酸前体、核苷酸类似物以及含其的寡聚化合物 |
EP3775207A1 (en) | 2018-04-05 | 2021-02-17 | Silence Therapeutics GmbH | Sirnas with vinylphosphonate at the 5' end of the antisense strand |
KR20210093227A (ko) | 2018-08-10 | 2021-07-27 | 유니버시티 오브 매사추세츠 | Snp를 표적화하는 변형된 올리고뉴클레오티드 |
WO2020038377A1 (zh) | 2018-08-21 | 2020-02-27 | 苏州瑞博生物技术有限公司 | 一种核酸、含有该核酸的药物组合物和缀合物及其用途 |
JP7376952B2 (ja) | 2018-09-30 | 2023-11-09 | スーチョウ リボ ライフ サイエンス カンパニー、リミテッド | siRNA複合体及びその調製方法と使用 |
US11166976B2 (en) | 2018-11-08 | 2021-11-09 | Aligos Therapeutics, Inc. | S-antigen transport inhibiting oligonucleotide polymers and methods |
CN113544271A (zh) | 2019-02-27 | 2021-10-22 | Ionis制药公司 | Malat1表达的调节剂 |
JP2022527105A (ja) | 2019-03-29 | 2022-05-30 | アイオーニス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッド | Ube3a-atsを調節するための化合物及び方法 |
WO2020247782A1 (en) | 2019-06-06 | 2020-12-10 | Avidity Biosciences, Inc. | Nucleic acid-polypeptide compositions and uses thereof |
CN110204583B (zh) * | 2019-07-01 | 2021-03-23 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 修饰核苷、核苷酸和修饰核酸聚合物及其制备方法和应用 |
EP4013767A4 (en) | 2019-08-15 | 2023-10-25 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | COMPOUND-MODIFIED OLIGOMERIC COMPOUNDS AND USES THEREOF |
CN115485384A (zh) | 2020-03-06 | 2022-12-16 | 阿利戈斯治疗公司 | 经修饰的短干扰核酸(siNA)分子和其用途 |
EP4133080A1 (en) | 2020-04-10 | 2023-02-15 | Aligos Therapeutics, Inc. | Short interfering nucleic acid (sina) molecules and uses thereof for coronavirus diseases |
EP4359539A1 (en) | 2021-06-23 | 2024-05-01 | University Of Massachusetts | Optimized anti-flt1 oligonucleotide compounds for treatment of preeclampsia and other angiogenic disorders |
US20230159929A1 (en) | 2021-09-08 | 2023-05-25 | Aligos Therapeutics, Inc. | MODIFIED SHORT INTERFERING NUCLEIC ACID (siNA) MOLECULES AND USES THEREOF |
WO2023039076A1 (en) | 2021-09-08 | 2023-03-16 | Aligos Therapeutics, Inc. | Modified short interfering nucleic acid (sina) molecules and uses thereof |
KR20240055874A (ko) | 2021-09-16 | 2024-04-29 | 어비디티 바이오사이언시스 인크. | 안면견갑상완 근이영양증을 치료하는 조성물 및 방법 |
US20230346819A1 (en) * | 2022-02-22 | 2023-11-02 | Sanegene Bio Usa Inc. | 5'-modified carbocyclic ribonucleotide derivatives and methods of use |
US11879125B2 (en) | 2022-03-16 | 2024-01-23 | Empirico Inc. | GalNAc compositions for improving siRNA bioavailability |
WO2023246935A1 (zh) * | 2022-06-23 | 2023-12-28 | 安沛治疗有限公司 | 包含喹啉修饰的靶特异性核酸分子 |
WO2024062413A1 (en) * | 2022-09-21 | 2024-03-28 | Janssen Biotech, Inc. | Novel stabilized nucleoside phosphates and analogues thereof |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06507883A (ja) * | 1991-02-08 | 1994-09-08 | ギリアド サイエンシズ,インコーポレイテッド | メチレンホスホネートヌクレオシド類似体およびそれから作られるオリゴヌクレオチド類似体 |
JPH06345791A (ja) * | 1993-06-05 | 1994-12-20 | Ciba Geigy Ag | ジヌクレオチド類似体、その中間体及びそれから誘導されるオリゴヌクレオチド |
JPH083185A (ja) * | 1993-03-06 | 1996-01-09 | Ciba Geigy Ag | ジヌクレオチド及びオリゴヌクレオチド類似体 |
US6087490A (en) * | 1996-03-23 | 2000-07-11 | Novartis Ag | Dinucleotide and oligonucleotide analogues |
JP2002516256A (ja) * | 1998-05-26 | 2002-06-04 | アイ・シー・エヌ・フアーマシユーテイカルズ・インコーポレイテツド | 二環式糖成分を有する新規ヌクレオシド |
JP2005524662A (ja) * | 2002-02-28 | 2005-08-18 | ビオタ インコーポレーティッド | ヌクレオシド5’−一リン酸模倣物およびこれらのプロドラッグ |
US20090274686A1 (en) * | 2008-05-02 | 2009-11-05 | Yat Sun Or | Nucleoside phosphonate derivatives |
JP2012506701A (ja) * | 2008-10-24 | 2012-03-22 | アイシス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッド | 5’及び2’ビス置換ヌクレオシド及びそれから製造されるオリゴマー化合物 |
Family Cites Families (224)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2699808A (en) | 1944-10-06 | 1955-01-18 | Mark W Lowe | Apparatus for peeling tomatoes |
US2699508A (en) | 1951-12-21 | 1955-01-11 | Selectronics Inc | Method of mounting and construction of mounting for low frequency piezoelectric crystals |
US3687808A (en) | 1969-08-14 | 1972-08-29 | Univ Leland Stanford Junior | Synthetic polynucleotides |
US4500707A (en) | 1980-02-29 | 1985-02-19 | University Patents, Inc. | Nucleosides useful in the preparation of polynucleotides |
US4458066A (en) | 1980-02-29 | 1984-07-03 | University Patents, Inc. | Process for preparing polynucleotides |
US5132418A (en) | 1980-02-29 | 1992-07-21 | University Patents, Inc. | Process for preparing polynucleotides |
US4469863A (en) | 1980-11-12 | 1984-09-04 | Ts O Paul O P | Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof |
US4973679A (en) | 1981-03-27 | 1990-11-27 | University Patents, Inc. | Process for oligonucleo tide synthesis using phosphormidite intermediates |
US4415732A (en) | 1981-03-27 | 1983-11-15 | University Patents, Inc. | Phosphoramidite compounds and processes |
US4668777A (en) | 1981-03-27 | 1987-05-26 | University Patents, Inc. | Phosphoramidite nucleoside compounds |
US5023243A (en) | 1981-10-23 | 1991-06-11 | Molecular Biosystems, Inc. | Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same |
US4476301A (en) | 1982-04-29 | 1984-10-09 | Centre National De La Recherche Scientifique | Oligonucleotides, a process for preparing the same and their application as mediators of the action of interferon |
JPS5927900A (ja) | 1982-08-09 | 1984-02-14 | Wakunaga Seiyaku Kk | 固定化オリゴヌクレオチド |
FR2540122B1 (fr) | 1983-01-27 | 1985-11-29 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux composes comportant une sequence d'oligonucleotide liee a un agent d'intercalation, leur procede de synthese et leur application |
US4605735A (en) | 1983-02-14 | 1986-08-12 | Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha | Oligonucleotide derivatives |
US4948882A (en) | 1983-02-22 | 1990-08-14 | Syngene, Inc. | Single-stranded labelled oligonucleotides, reactive monomers and methods of synthesis |
US4824941A (en) | 1983-03-10 | 1989-04-25 | Julian Gordon | Specific antibody to the native form of 2'5'-oligonucleotides, the method of preparation and the use as reagents in immunoassays or for binding 2'5'-oligonucleotides in biological systems |
USRE34069E (en) | 1983-08-18 | 1992-09-15 | Biosyntech Gmbh | Process for the preparation of oligonucleotides |
DE3329892A1 (de) | 1983-08-18 | 1985-03-07 | Köster, Hubert, Prof. Dr., 2000 Hamburg | Verfahren zur herstellung von oligonucleotiden |
US4587044A (en) | 1983-09-01 | 1986-05-06 | The Johns Hopkins University | Linkage of proteins to nucleic acids |
US5118802A (en) | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | DNA-reporter conjugates linked via the 2' or 5'-primary amino group of the 5'-terminal nucleoside |
US5118800A (en) | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide |
US5550111A (en) | 1984-07-11 | 1996-08-27 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Dual action 2',5'-oligoadenylate antiviral derivatives and uses thereof |
FR2567892B1 (fr) | 1984-07-19 | 1989-02-17 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons |
US5367066A (en) | 1984-10-16 | 1994-11-22 | Chiron Corporation | Oligonucleotides with selectably cleavable and/or abasic sites |
US5258506A (en) | 1984-10-16 | 1993-11-02 | Chiron Corporation | Photolabile reagents for incorporation into oligonucleotide chains |
US5430136A (en) | 1984-10-16 | 1995-07-04 | Chiron Corporation | Oligonucleotides having selectably cleavable and/or abasic sites |
US4828979A (en) | 1984-11-08 | 1989-05-09 | Life Technologies, Inc. | Nucleotide analogs for nucleic acid labeling and detection |
FR2575751B1 (fr) | 1985-01-08 | 1987-04-03 | Pasteur Institut | Nouveaux nucleosides de derives de l'adenosine, leur preparation et leurs applications biologiques |
US5185444A (en) | 1985-03-15 | 1993-02-09 | Anti-Gene Deveopment Group | Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages |
US5034506A (en) | 1985-03-15 | 1991-07-23 | Anti-Gene Development Group | Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages |
US5235033A (en) | 1985-03-15 | 1993-08-10 | Anti-Gene Development Group | Alpha-morpholino ribonucleoside derivatives and polymers thereof |
US5405938A (en) | 1989-12-20 | 1995-04-11 | Anti-Gene Development Group | Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids |
US5166315A (en) | 1989-12-20 | 1992-11-24 | Anti-Gene Development Group | Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids |
US4762779A (en) | 1985-06-13 | 1988-08-09 | Amgen Inc. | Compositions and methods for functionalizing nucleic acids |
US5317098A (en) | 1986-03-17 | 1994-05-31 | Hiroaki Shizuya | Non-radioisotope tagging of fragments |
JPS638396A (ja) | 1986-06-30 | 1988-01-14 | Wakunaga Pharmaceut Co Ltd | ポリ標識化オリゴヌクレオチド誘導体 |
DE3788914T2 (de) | 1986-09-08 | 1994-08-25 | Ajinomoto Kk | Verbindungen zur Spaltung von RNS an eine spezifische Position, Oligomere, verwendet bei der Herstellung dieser Verbindungen und Ausgangsprodukte für die Synthese dieser Oligomere. |
US5276019A (en) | 1987-03-25 | 1994-01-04 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products |
US5264423A (en) | 1987-03-25 | 1993-11-23 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products |
US4904582A (en) | 1987-06-11 | 1990-02-27 | Synthetic Genetics | Novel amphiphilic nucleic acid conjugates |
CA1340032C (en) | 1987-06-24 | 1998-09-08 | Jim Haralambidis | Lucleoside derivatives |
US5585481A (en) | 1987-09-21 | 1996-12-17 | Gen-Probe Incorporated | Linking reagents for nucleotide probes |
US4924624A (en) | 1987-10-22 | 1990-05-15 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof |
US5188897A (en) | 1987-10-22 | 1993-02-23 | Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education | Encapsulated 2',5'-phosphorothioate oligoadenylates |
US5525465A (en) | 1987-10-28 | 1996-06-11 | Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine | Oligonucleotide-polyamide conjugates and methods of production and applications of the same |
DE3738460A1 (de) | 1987-11-12 | 1989-05-24 | Max Planck Gesellschaft | Modifizierte oligonukleotide |
ATE151467T1 (de) | 1987-11-30 | 1997-04-15 | Univ Iowa Res Found | Durch modifikationen an der 3'-terminalen phosphodiesterbindung stabilisierte dna moleküle, ihre verwendung als nukleinsäuresonden sowie als therapeutische mittel zur hemmung der expression spezifischer zielgene |
US5403711A (en) | 1987-11-30 | 1995-04-04 | University Of Iowa Research Foundation | Nucleic acid hybridization and amplification method for detection of specific sequences in which a complementary labeled nucleic acid probe is cleaved |
US5082830A (en) | 1988-02-26 | 1992-01-21 | Enzo Biochem, Inc. | End labeled nucleotide probe |
JPH03503894A (ja) | 1988-03-25 | 1991-08-29 | ユニバーシィティ オブ バージニア アランミ パテンツ ファウンデイション | オリゴヌクレオチド n‐アルキルホスホラミデート |
US5278302A (en) | 1988-05-26 | 1994-01-11 | University Patents, Inc. | Polynucleotide phosphorodithioates |
US5109124A (en) | 1988-06-01 | 1992-04-28 | Biogen, Inc. | Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine |
US5216141A (en) | 1988-06-06 | 1993-06-01 | Benner Steven A | Oligonucleotide analogs containing sulfur linkages |
US5175273A (en) | 1988-07-01 | 1992-12-29 | Genentech, Inc. | Nucleic acid intercalating agents |
US5262536A (en) | 1988-09-15 | 1993-11-16 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Reagents for the preparation of 5'-tagged oligonucleotides |
US5194599A (en) | 1988-09-23 | 1993-03-16 | Gilead Sciences, Inc. | Hydrogen phosphonodithioate compositions |
US5512439A (en) | 1988-11-21 | 1996-04-30 | Dynal As | Oligonucleotide-linked magnetic particles and uses thereof |
US5599923A (en) | 1989-03-06 | 1997-02-04 | Board Of Regents, University Of Tx | Texaphyrin metal complexes having improved functionalization |
US5457183A (en) | 1989-03-06 | 1995-10-10 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Hydroxylated texaphyrins |
US5391723A (en) | 1989-05-31 | 1995-02-21 | Neorx Corporation | Oligonucleotide conjugates |
US5256775A (en) | 1989-06-05 | 1993-10-26 | Gilead Sciences, Inc. | Exonuclease-resistant oligonucleotides |
US4958013A (en) | 1989-06-06 | 1990-09-18 | Northwestern University | Cholesteryl modified oligonucleotides |
US5451463A (en) | 1989-08-28 | 1995-09-19 | Clontech Laboratories, Inc. | Non-nucleoside 1,3-diol reagents for labeling synthetic oligonucleotides |
US5134066A (en) | 1989-08-29 | 1992-07-28 | Monsanto Company | Improved probes using nucleosides containing 3-dezauracil analogs |
US5254469A (en) | 1989-09-12 | 1993-10-19 | Eastman Kodak Company | Oligonucleotide-enzyme conjugate that can be used as a probe in hybridization assays and polymerase chain reaction procedures |
US5591722A (en) | 1989-09-15 | 1997-01-07 | Southern Research Institute | 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity |
US5721218A (en) | 1989-10-23 | 1998-02-24 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotides with inverted polarity |
US5399676A (en) | 1989-10-23 | 1995-03-21 | Gilead Sciences | Oligonucleotides with inverted polarity |
US5264562A (en) | 1989-10-24 | 1993-11-23 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide analogs with novel linkages |
US5264564A (en) | 1989-10-24 | 1993-11-23 | Gilead Sciences | Oligonucleotide analogs with novel linkages |
EP0942000B1 (en) | 1989-10-24 | 2004-06-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-Modified oligonucleotides |
US5292873A (en) | 1989-11-29 | 1994-03-08 | The Research Foundation Of State University Of New York | Nucleic acids labeled with naphthoquinone probe |
US5177198A (en) | 1989-11-30 | 1993-01-05 | University Of N.C. At Chapel Hill | Process for preparing oligoribonucleoside and oligodeoxyribonucleoside boranophosphates |
US5130302A (en) | 1989-12-20 | 1992-07-14 | Boron Bilogicals, Inc. | Boronated nucleoside, nucleotide and oligonucleotide compounds, compositions and methods for using same |
US5486603A (en) | 1990-01-08 | 1996-01-23 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide having enhanced binding affinity |
US5459255A (en) | 1990-01-11 | 1995-10-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | N-2 substituted purines |
US5681941A (en) | 1990-01-11 | 1997-10-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Substituted purines and oligonucleotide cross-linking |
US5623065A (en) | 1990-08-13 | 1997-04-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Gapped 2' modified oligonucleotides |
US5587470A (en) | 1990-01-11 | 1996-12-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 3-deazapurines |
US5587361A (en) | 1991-10-15 | 1996-12-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US5578718A (en) | 1990-01-11 | 1996-11-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Thiol-derivatized nucleosides |
US5646265A (en) | 1990-01-11 | 1997-07-08 | Isis Pharmceuticals, Inc. | Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites |
US5670633A (en) | 1990-01-11 | 1997-09-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression |
US5220007A (en) | 1990-02-15 | 1993-06-15 | The Worcester Foundation For Experimental Biology | Method of site-specific alteration of RNA and production of encoded polypeptides |
US5149797A (en) | 1990-02-15 | 1992-09-22 | The Worcester Foundation For Experimental Biology | Method of site-specific alteration of rna and production of encoded polypeptides |
US5214136A (en) | 1990-02-20 | 1993-05-25 | Gilead Sciences, Inc. | Anthraquinone-derivatives oligonucleotides |
WO1991013080A1 (en) | 1990-02-20 | 1991-09-05 | Gilead Sciences, Inc. | Pseudonucleosides and pseudonucleotides and their polymers |
US5321131A (en) | 1990-03-08 | 1994-06-14 | Hybridon, Inc. | Site-specific functionalization of oligodeoxynucleotides for non-radioactive labelling |
US5470967A (en) | 1990-04-10 | 1995-11-28 | The Dupont Merck Pharmaceutical Company | Oligonucleotide analogs with sulfamate linkages |
GB9009980D0 (en) | 1990-05-03 | 1990-06-27 | Amersham Int Plc | Phosphoramidite derivatives,their preparation and the use thereof in the incorporation of reporter groups on synthetic oligonucleotides |
EP0745689A3 (en) | 1990-05-11 | 1996-12-11 | Microprobe Corporation | A dipstick for a nucleic acid hybridization assay |
EP0544824B1 (en) | 1990-07-27 | 1997-06-11 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Nuclease resistant, pyrimidine modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression |
US5602240A (en) | 1990-07-27 | 1997-02-11 | Ciba Geigy Ag. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
US5541307A (en) | 1990-07-27 | 1996-07-30 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogs and solid phase synthesis thereof |
US5608046A (en) | 1990-07-27 | 1997-03-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Conjugated 4'-desmethyl nucleoside analog compounds |
US5138045A (en) | 1990-07-27 | 1992-08-11 | Isis Pharmaceuticals | Polyamine conjugated oligonucleotides |
US5623070A (en) | 1990-07-27 | 1997-04-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Heteroatomic oligonucleoside linkages |
US5223618A (en) | 1990-08-13 | 1993-06-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 4'-desmethyl nucleoside analog compounds |
US5618704A (en) | 1990-07-27 | 1997-04-08 | Isis Pharmacueticals, Inc. | Backbone-modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through radical coupling |
US5677437A (en) | 1990-07-27 | 1997-10-14 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Heteroatomic oligonucleoside linkages |
US5386023A (en) | 1990-07-27 | 1995-01-31 | Isis Pharmaceuticals | Backbone modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through reductive coupling |
US5218105A (en) | 1990-07-27 | 1993-06-08 | Isis Pharmaceuticals | Polyamine conjugated oligonucleotides |
US5378825A (en) | 1990-07-27 | 1995-01-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
US5489677A (en) | 1990-07-27 | 1996-02-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms |
US5610289A (en) | 1990-07-27 | 1997-03-11 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogues |
US5688941A (en) | 1990-07-27 | 1997-11-18 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods of making conjugated 4' desmethyl nucleoside analog compounds |
CA2088673A1 (en) | 1990-08-03 | 1992-02-04 | Alexander L. Weis | Compounds and methods for inhibiting gene expression |
US5245022A (en) | 1990-08-03 | 1993-09-14 | Sterling Drug, Inc. | Exonuclease resistant terminally substituted oligonucleotides |
US5177196A (en) | 1990-08-16 | 1993-01-05 | Microprobe Corporation | Oligo (α-arabinofuranosyl nucleotides) and α-arabinofuranosyl precursors thereof |
US5512667A (en) | 1990-08-28 | 1996-04-30 | Reed; Michael W. | Trifunctional intermediates for preparing 3'-tailed oligonucleotides |
US5214134A (en) | 1990-09-12 | 1993-05-25 | Sterling Winthrop Inc. | Process of linking nucleosides with a siloxane bridge |
US5561225A (en) | 1990-09-19 | 1996-10-01 | Southern Research Institute | Polynucleotide analogs containing sulfonate and sulfonamide internucleoside linkages |
AU662298B2 (en) | 1990-09-20 | 1995-08-31 | Gilead Sciences, Inc. | Modified internucleoside linkages |
US5432272A (en) | 1990-10-09 | 1995-07-11 | Benner; Steven A. | Method for incorporating into a DNA or RNA oligonucleotide using nucleotides bearing heterocyclic bases |
EP0556301B1 (en) | 1990-11-08 | 2001-01-10 | Hybridon, Inc. | Incorporation of multiple reporter groups on synthetic oligonucleotides |
US5371241A (en) | 1991-07-19 | 1994-12-06 | Pharmacia P-L Biochemicals Inc. | Fluorescein labelled phosphoramidites |
US5571799A (en) | 1991-08-12 | 1996-11-05 | Basco, Ltd. | (2'-5') oligoadenylate analogues useful as inhibitors of host-v5.-graft response |
DE59208572D1 (de) | 1991-10-17 | 1997-07-10 | Ciba Geigy Ag | Bicyclische Nukleoside, Oligonukleotide, Verfahren zu deren Herstellung und Zwischenprodukte |
US5594121A (en) | 1991-11-07 | 1997-01-14 | Gilead Sciences, Inc. | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified purines |
DE69232816T2 (de) | 1991-11-26 | 2003-06-18 | Isis Pharmaceuticals Inc | Gesteigerte bildung von triple- und doppelhelices aus oligomeren mit modifizierten pyrimidinen |
TW393513B (en) | 1991-11-26 | 2000-06-11 | Isis Pharmaceuticals Inc | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified pyrimidines |
US5484908A (en) | 1991-11-26 | 1996-01-16 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotides containing 5-propynyl pyrimidines |
US5792608A (en) | 1991-12-12 | 1998-08-11 | Gilead Sciences, Inc. | Nuclease stable and binding competent oligomers and methods for their use |
US5359044A (en) | 1991-12-13 | 1994-10-25 | Isis Pharmaceuticals | Cyclobutyl oligonucleotide surrogates |
US5700922A (en) | 1991-12-24 | 1997-12-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | PNA-DNA-PNA chimeric macromolecules |
US5565552A (en) | 1992-01-21 | 1996-10-15 | Pharmacyclics, Inc. | Method of expanded porphyrin-oligonucleotide conjugate synthesis |
US5595726A (en) | 1992-01-21 | 1997-01-21 | Pharmacyclics, Inc. | Chromophore probe for detection of nucleic acid |
FR2687679B1 (fr) | 1992-02-05 | 1994-10-28 | Centre Nat Rech Scient | Oligothionucleotides. |
US5633360A (en) | 1992-04-14 | 1997-05-27 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide analogs capable of passive cell membrane permeation |
US5434257A (en) | 1992-06-01 | 1995-07-18 | Gilead Sciences, Inc. | Binding compentent oligomers containing unsaturated 3',5' and 2',5' linkages |
NL9300058A (nl) | 1992-06-18 | 1994-01-17 | Stichting Rega V Z W | 1,5-anhydrohexitol nucleoside analoga en farmaceutisch gebruik daarvan. |
EP0577558A2 (de) | 1992-07-01 | 1994-01-05 | Ciba-Geigy Ag | Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte |
US5272250A (en) | 1992-07-10 | 1993-12-21 | Spielvogel Bernard F | Boronated phosphoramidate compounds |
US5652355A (en) | 1992-07-23 | 1997-07-29 | Worcester Foundation For Experimental Biology | Hybrid oligonucleotide phosphorothioates |
ATE162198T1 (de) | 1992-07-27 | 1998-01-15 | Hybridon Inc | Oligonukleotid alkylphosphonothiate |
EP0673559A1 (en) | 1992-12-14 | 1995-09-27 | Honeywell Inc. | Motor system with individually controlled redundant windings |
US5574142A (en) | 1992-12-15 | 1996-11-12 | Microprobe Corporation | Peptide linkers for improved oligonucleotide delivery |
US5314893A (en) | 1993-01-25 | 1994-05-24 | Bristol-Myers Squibb Co. | Antiviral tetrahydropyrans |
NZ262254A (en) | 1993-01-25 | 1997-10-24 | Hybridon Inc | Oligonucleotide analogue containing a ribonucleotide alkylphosphon(ate or thioate), gene repression |
US5476925A (en) | 1993-02-01 | 1995-12-19 | Northwestern University | Oligodeoxyribonucleotides including 3'-aminonucleoside-phosphoramidate linkages and terminal 3'-amino groups |
GB9304620D0 (en) | 1993-03-06 | 1993-04-21 | Ciba Geigy Ag | Compounds |
ATE155467T1 (de) | 1993-03-30 | 1997-08-15 | Sanofi Sa | Acyclische nucleosid analoge und sie enthaltende oligonucleotidsequenzen |
WO1994022890A1 (en) | 1993-03-31 | 1994-10-13 | Sterling Winthop Inc. | Novel 5'-substituted nucleosides and oligomers produced therefrom |
AU6412794A (en) | 1993-03-31 | 1994-10-24 | Sterling Winthrop Inc. | Oligonucleotides with amide linkages replacing phosphodiester linkages |
DE59407895D1 (de) | 1993-05-12 | 1999-04-15 | Novartis Ag | Nukleoside und Oligonukleotide mit 2'-Ethergruppen |
US5502177A (en) | 1993-09-17 | 1996-03-26 | Gilead Sciences, Inc. | Pyrimidine derivatives for labeled binding partners |
US5457187A (en) | 1993-12-08 | 1995-10-10 | Board Of Regents University Of Nebraska | Oligonucleotides containing 5-fluorouracil |
ATE196311T1 (de) | 1993-12-09 | 2000-09-15 | Univ Jefferson | Verbindungen und verfahren zur ortsspezifischen mutation in eukaryotischen zellen |
US5446137B1 (en) | 1993-12-09 | 1998-10-06 | Behringwerke Ag | Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides |
US5519134A (en) | 1994-01-11 | 1996-05-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolidine-containing monomers and oligomers |
US5596091A (en) | 1994-03-18 | 1997-01-21 | The Regents Of The University Of California | Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides |
US5627053A (en) | 1994-03-29 | 1997-05-06 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid |
US5625050A (en) | 1994-03-31 | 1997-04-29 | Amgen Inc. | Modified oligonucleotides and intermediates useful in nucleic acid therapeutics |
US5646269A (en) | 1994-04-28 | 1997-07-08 | Gilead Sciences, Inc. | Method for oligonucleotide analog synthesis |
US5525711A (en) | 1994-05-18 | 1996-06-11 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Pteridine nucleotide analogs as fluorescent DNA probes |
US5597696A (en) | 1994-07-18 | 1997-01-28 | Becton Dickinson And Company | Covalent cyanine dye oligonucleotide conjugates |
US5864031A (en) | 1994-07-29 | 1999-01-26 | Amgen Inc. | Process for preparing 5-dithio-modified oligonucleotides |
US5597909A (en) | 1994-08-25 | 1997-01-28 | Chiron Corporation | Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use |
US5580731A (en) | 1994-08-25 | 1996-12-03 | Chiron Corporation | N-4 modified pyrimidine deoxynucleotides and oligonucleotide probes synthesized therewith |
US5681940A (en) | 1994-11-02 | 1997-10-28 | Icn Pharmaceuticals | Sugar modified nucleosides and oligonucleotides |
US5652356A (en) | 1995-08-17 | 1997-07-29 | Hybridon, Inc. | Inverted chimeric and hybrid oligonucleotides |
US5656408A (en) | 1996-04-29 | 1997-08-12 | Xerox Corporation | Coated carrier particles |
WO1998000434A1 (en) | 1996-06-28 | 1998-01-08 | Novartis Ag | Modified oligonucleotides |
AU4815197A (en) | 1996-10-09 | 1998-05-05 | Pharmasset, Ltd. | Tetraphosphonate bicyclic trisanhydrides |
US6770748B2 (en) | 1997-03-07 | 2004-08-03 | Takeshi Imanishi | Bicyclonucleoside and oligonucleotide analogue |
JP3756313B2 (ja) | 1997-03-07 | 2006-03-15 | 武 今西 | 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体 |
CA2293470C (en) | 1997-06-10 | 2008-05-13 | Glaxo Group Limited | Benzimidazole derivatives |
DE04020014T1 (de) | 1997-09-12 | 2006-01-26 | Exiqon A/S | Bi-zyklische - Nukleosid,Nnukleotid und Oligonukleotid-Analoga |
US6794499B2 (en) | 1997-09-12 | 2004-09-21 | Exiqon A/S | Oligonucleotide analogues |
US6043352A (en) | 1998-08-07 | 2000-03-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-O-Dimethylaminoethyloxyethyl-modified oligonucleotides |
EP1152009B2 (en) | 1999-02-12 | 2017-09-06 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Novel nucleosides and oligonucleotide analogues |
US7084125B2 (en) | 1999-03-18 | 2006-08-01 | Exiqon A/S | Xylo-LNA analogues |
NZ514348A (en) | 1999-05-04 | 2004-05-28 | Exiqon As | L-ribo-LNA analogues |
US6525191B1 (en) | 1999-05-11 | 2003-02-25 | Kanda S. Ramasamy | Conformationally constrained L-nucleosides |
JP4151751B2 (ja) | 1999-07-22 | 2008-09-17 | 第一三共株式会社 | 新規ビシクロヌクレオシド類縁体 |
US6147200A (en) | 1999-08-19 | 2000-11-14 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-O-acetamido modified monomers and oligomers |
EP1244667B1 (en) | 1999-12-30 | 2006-04-05 | K.U. Leuven Research & Development | Cyclohexene nucleic acids |
US7053199B2 (en) | 2000-08-29 | 2006-05-30 | Takeshi Imanishi | Nucleoside analogs and oligonucleotide derivatives containing these analogs |
GB2366290A (en) | 2000-08-30 | 2002-03-06 | Leuven K U Res & Dev | Hexitol Nucleosides |
US6426220B1 (en) | 2000-10-30 | 2002-07-30 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of calreticulin expression |
WO2003020739A2 (en) | 2001-09-04 | 2003-03-13 | Exiqon A/S | Novel lna compositions and uses thereof |
US20060074035A1 (en) | 2002-04-17 | 2006-04-06 | Zhi Hong | Dinucleotide inhibitors of de novo RNA polymerases for treatment or prevention of viral infections |
US7569575B2 (en) | 2002-05-08 | 2009-08-04 | Santaris Pharma A/S | Synthesis of locked nucleic acid derivatives |
ES2550609T3 (es) | 2002-07-10 | 2015-11-11 | MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Interferencia de ARN mediante de moléculas de ARN de cadena sencilla |
PT1527176E (pt) | 2002-08-05 | 2007-04-30 | Atugen Ag | Novas formas de muléculas de arn de interferência |
US20040219565A1 (en) | 2002-10-21 | 2004-11-04 | Sakari Kauppinen | Oligonucleotides useful for detecting and analyzing nucleic acids of interest |
AU2003295387A1 (en) | 2002-11-05 | 2004-06-03 | Isis Parmaceuticals, Inc. | Modified oligonucleotides for use in rna interference |
CA2504694C (en) | 2002-11-05 | 2013-10-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation |
CA2463719A1 (en) | 2003-04-05 | 2004-10-05 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Nucleotide analogs with six membered rings |
CN1788024A (zh) | 2003-05-12 | 2006-06-14 | 联合碳化化学及塑料技术公司 | 控制气相聚合反应中聚合物粉末的方法 |
WO2005020885A2 (en) | 2003-05-21 | 2005-03-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for the treatment of severe acute respiratory syndrome (sars) |
WO2004106356A1 (en) | 2003-05-27 | 2004-12-09 | Syddansk Universitet | Functionalized nucleotide derivatives |
JP2005060664A (ja) | 2003-07-31 | 2005-03-10 | Asahi Glass Co Ltd | 含フッ素化合物、含フッ素ポリマーとその製造方法およびそれを含むレジスト組成物 |
WO2005013901A2 (en) | 2003-07-31 | 2005-02-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds and compositions for use in modulation of small non-coding rnas |
JP4731324B2 (ja) | 2003-08-28 | 2011-07-20 | 武 今西 | N−o結合性架橋構造型新規人工核酸 |
NZ546564A (en) | 2003-09-12 | 2010-02-26 | Commw Scient Ind Res Org | Modified gene-silencing nucleic acid molecules and uses thereof |
WO2005027962A1 (en) | 2003-09-18 | 2005-03-31 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 4’-thionucleosides and oligomeric compounds |
US20110070192A1 (en) | 2003-11-14 | 2011-03-24 | Bruno Tse | Method of preparation of novel nucleoside analogs and uses |
WO2006031461A2 (en) | 2004-09-09 | 2006-03-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolidinyl groups for attaching conjugates to oligomeric compounds |
WO2006038865A1 (en) | 2004-10-01 | 2006-04-13 | Betagenon Ab | Nucleotide derivatives for the treatment of type 2 diabetes and other disorders |
WO2006047842A2 (en) | 2004-11-08 | 2006-05-11 | K.U. Leuven Research And Development | Modified nucleosides for rna interference |
WO2007020018A1 (en) | 2005-08-12 | 2007-02-22 | Universite Libre De Bruxelles | Use of purinergic and pyrimidinergic receptor agonists for dendritic cells based immunotherapies |
KR20130042043A (ko) | 2006-01-27 | 2013-04-25 | 아이시스 파마수티컬즈 인코포레이티드 | 6-변형된 바이시클릭 핵산 유사체 |
US8935416B2 (en) | 2006-04-21 | 2015-01-13 | Fortinet, Inc. | Method, apparatus, signals and medium for enforcing compliance with a policy on a client computer |
WO2007134181A2 (en) | 2006-05-11 | 2007-11-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 5'-modified bicyclic nucleic acid analogs |
DK2068886T3 (da) | 2006-10-03 | 2013-11-18 | Tekmira Pharmaceuticals Corp | Lipidholdige præparater |
US20100190837A1 (en) | 2007-02-15 | 2010-07-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 5'-Substituted-2-F' Modified Nucleosides and Oligomeric Compounds Prepared Therefrom |
US8278425B2 (en) | 2007-05-30 | 2012-10-02 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs |
ES2386492T3 (es) | 2007-06-08 | 2012-08-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Análogos de ácidos nucleicos bicíclicos carbocíclicos |
AU2008272918B2 (en) | 2007-07-05 | 2012-09-13 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 6-disubstituted bicyclic nucleic acid analogs |
WO2009023855A2 (en) | 2007-08-15 | 2009-02-19 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Tetrahydropyran nucleic acid analogs |
US8530640B2 (en) | 2008-02-07 | 2013-09-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic cyclohexitol nucleic acid analogs |
US8604192B2 (en) | 2008-09-24 | 2013-12-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Cyclohexenyl nucleic acids analogs |
WO2010048585A2 (en) | 2008-10-24 | 2010-04-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds and methods |
AT507215B1 (de) | 2009-01-14 | 2010-03-15 | Boehler Edelstahl Gmbh & Co Kg | Verschleissbeständiger werkstoff |
WO2010090969A1 (en) | 2009-02-06 | 2010-08-12 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Tetrahydropyran nucleic acid analogs |
US9102938B2 (en) | 2010-04-01 | 2015-08-11 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | 2′ and 5′ modified monomers and oligonucleotides |
EP2625186B1 (en) | 2010-04-28 | 2016-07-27 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | 5' modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
CN103154014B (zh) * | 2010-04-28 | 2015-03-25 | Isis制药公司 | 修饰核苷、其类似物以及由它们制备的寡聚化合物 |
US9311307B2 (en) | 2011-06-03 | 2016-04-12 | Apple Inc. | Context sensitive entry points |
US9400902B2 (en) | 2012-05-22 | 2016-07-26 | Trimble Navigation Limited | Multi-modal entity tracking and display |
US9984408B1 (en) | 2012-05-30 | 2018-05-29 | Amazon Technologies, Inc. | Method, medium, and system for live video cooperative shopping |
US9778708B1 (en) | 2016-07-18 | 2017-10-03 | Lenovo Enterprise Solutions (Singapore) Pte. Ltd. | Dual sided latching retainer for computer modules |
-
2011
- 2011-04-26 CN CN201180021008.0A patent/CN103154014B/zh active Active
- 2011-04-26 US US13/642,827 patent/US8993738B2/en active Active
- 2011-04-26 WO PCT/US2011/033968 patent/WO2011139702A2/en active Application Filing
- 2011-04-26 EP EP11721850.3A patent/EP2601204B1/en active Active
- 2011-04-26 KR KR1020127030987A patent/KR101869570B1/ko active IP Right Grant
- 2011-04-26 JP JP2013508162A patent/JP6005628B2/ja active Active
- 2011-04-26 EP EP16187500.0A patent/EP3173419A1/en not_active Withdrawn
-
2015
- 2015-02-20 US US14/627,960 patent/US9321799B2/en active Active
-
2016
- 2016-03-17 US US15/073,386 patent/US10087210B2/en active Active
- 2016-04-11 JP JP2016078844A patent/JP2016166222A/ja not_active Withdrawn
-
2018
- 2018-08-30 US US16/117,435 patent/US11084844B2/en active Active
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06507883A (ja) * | 1991-02-08 | 1994-09-08 | ギリアド サイエンシズ,インコーポレイテッド | メチレンホスホネートヌクレオシド類似体およびそれから作られるオリゴヌクレオチド類似体 |
JPH083185A (ja) * | 1993-03-06 | 1996-01-09 | Ciba Geigy Ag | ジヌクレオチド及びオリゴヌクレオチド類似体 |
JPH06345791A (ja) * | 1993-06-05 | 1994-12-20 | Ciba Geigy Ag | ジヌクレオチド類似体、その中間体及びそれから誘導されるオリゴヌクレオチド |
US6087490A (en) * | 1996-03-23 | 2000-07-11 | Novartis Ag | Dinucleotide and oligonucleotide analogues |
JP2002516256A (ja) * | 1998-05-26 | 2002-06-04 | アイ・シー・エヌ・フアーマシユーテイカルズ・インコーポレイテツド | 二環式糖成分を有する新規ヌクレオシド |
JP2005524662A (ja) * | 2002-02-28 | 2005-08-18 | ビオタ インコーポレーティッド | ヌクレオシド5’−一リン酸模倣物およびこれらのプロドラッグ |
US20090274686A1 (en) * | 2008-05-02 | 2009-11-05 | Yat Sun Or | Nucleoside phosphonate derivatives |
JP2012506701A (ja) * | 2008-10-24 | 2012-03-22 | アイシス ファーマシューティカルズ, インコーポレーテッド | 5’及び2’ビス置換ヌクレオシド及びそれから製造されるオリゴマー化合物 |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2017525705A (ja) * | 2014-08-20 | 2017-09-07 | アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッドAlnylam Pharmaceuticals, Inc. | 修飾二本鎖rna剤 |
JP7289610B2 (ja) | 2014-08-20 | 2023-06-12 | アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド | 修飾二本鎖rna剤 |
JP7370311B2 (ja) | 2014-08-20 | 2023-10-27 | アルナイラム ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド | 修飾二本鎖rna剤 |
JP2021500862A (ja) * | 2017-10-04 | 2021-01-14 | アビディティー バイオサイエンシーズ,インク. | 核酸ポリペプチド組成物およびその使用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2016166222A (ja) | 2016-09-15 |
US8993738B2 (en) | 2015-03-31 |
EP2601204B1 (en) | 2016-09-07 |
CN103154014A (zh) | 2013-06-12 |
US9321799B2 (en) | 2016-04-26 |
US20150159163A1 (en) | 2015-06-11 |
EP3173419A1 (en) | 2017-05-31 |
US11084844B2 (en) | 2021-08-10 |
US20160186185A1 (en) | 2016-06-30 |
EP2601204A2 (en) | 2013-06-12 |
US20180371005A1 (en) | 2018-12-27 |
US10087210B2 (en) | 2018-10-02 |
CN103154014B (zh) | 2015-03-25 |
JP6005628B2 (ja) | 2016-10-12 |
WO2011139702A2 (en) | 2011-11-10 |
KR20130105294A (ko) | 2013-09-25 |
US20130084576A1 (en) | 2013-04-04 |
WO2011139702A3 (en) | 2013-05-02 |
KR101869570B1 (ko) | 2018-06-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6005628B2 (ja) | 修飾ヌクレオシド、その類似体、およびこれらから調製されるオリゴマー化合物 | |
US11268094B2 (en) | 5′ modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom | |
EP2447274B1 (en) | Oligomeric compounds and methods | |
JP5763539B2 (ja) | 5’及び2’ビス置換ヌクレオシド及びそれから製造されるオリゴマー化合物 | |
US8846637B2 (en) | Substituted 2′-amino and 2′-thio-bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom | |
JP5572090B2 (ja) | テトラヒドロピラン核酸類似体 | |
US9688707B2 (en) | Bicyclic morpholino compounds and oligomeric compounds prepared therefrom | |
US9156873B2 (en) | Modified 5′ diphosphate nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom | |
WO2011085102A1 (en) | Base modified bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom | |
WO2015164693A1 (en) | Oligomeric compounds comprising alpha-beta-constrained nucleic acid | |
WO2012170347A1 (en) | Bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140424 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20140424 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20150216 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20150518 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20150612 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20151211 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160411 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20160421 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20160701 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160711 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20160809 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20160907 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6005628 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |