JP2012213406A - Nogo遺伝子のヌクレオチド配列およびタンパク質配列、ならびにそれに基づく方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 配列番号29の全長にわたって90%より高い同一性を有するアミノ酸配列から成る精製ヒトNogoタンパク質であって、(i)天然では結合している全ての中枢神経系ミエリン物質を含まず、且つ(ii)神経突起成長における抑制効果を有する、前記タンパク質。
【選択図】 図1
Description
本発明はNogo遺伝子、特にそれがコードするタンパク質産物Nogo、ならびにそれらの誘導体および類似体に関する。Nogoタンパク質、誘導体、および抗体の生産も提供する。本発明はさらに、治療用組成物、ならびに診断法および治療法に関する。
高等脊椎動物の中枢神経系(CNS)においては、損傷後の軸索の再生はほとんど起こらず、構造塑性が制限されている。CNSミエリンに関連した成長インヒビターがおそらく重要な役割を果たしていると思われる。このことは、モノクローナル抗体(mAb)のIN-1が強力な神経突起成長抑制性ミエリンタンパク質を中和することによって、成体ラットにおいて脊髄または脳が損傷を受けた後、長期間にわたり軸索の再生を促進し、補償的塑性を高めることから、証明される。
本発明は、Nogo遺伝子(ヒト、ラット、ウシのNogoと、他の種のNogo相同体)のヌクレオチド配列、それがコードするタンパク質のアミノ酸配列、ならびにその誘導体(例えば、断片)および類似体に関する。前記ヌクレオチド配列にハイブリダイズ可能なまたは相補的な核酸も提供する。特定の実施形態において、Nogoタンパク質はラット、ウシまたはヒトのタンパク質である。
本明細書において、遺伝子の名前に下線を施したりイタリック体を使用することはその遺伝子自体を示しており、これに対して、下線やイタリック体を用いていない遺伝子名はそれがコードするタンパク質産物を示している。例えば、イタリック体の「Nogo」はNogo遺伝子をさし、イタリック体でない「Nogo」はNogo遺伝子のタンパク質産物を示す。
(図面の説明については以下を参照)
本発明は、Nogo遺伝子のヌクレオチド配列およびそれらのコードタンパク質のアミノ酸配列に関する。本発明はさらに、Nogoタンパク質の断片、ならびに他の誘導体および類似体に関する。そのような断片または誘導体をコードする核酸もまた、本発明の範囲にある。本発明は、多くの異なる種のNogo遺伝子およびそれらのコードタンパク質を提供する。本発明のNogo遺伝子としては、ヒト、ラットおよびウシのNogoおよび他の種における関連遺伝子(相同体)が含まれる。Spillmanら, 1998, J. Biol. Chem. 273:19283-19293に開示されているウシのサブ配列は、本発明の一部として権利請求されてはいない。特定の実施形態において、Nogo遺伝子およびタンパク質は脊椎動物、より詳細には哺乳動物に由来するものである。本発明の好ましい実施形態では、Nogo遺伝子およびタンパク質はヒト起源のものである。例えば、組換え方法による上記のタンパク質および誘導体の生産が提供される。
本発明は、Nogo遺伝子または核酸のヌクレオチド配列に関する。1つの実施形態において、Nogo核酸は、図1bに示すNogo Aとして同定された図2aのラットcDNA配列(配列番号1)もしくはそのコード領域、または長さが1163アミノ酸のNogoタンパク質をコードするヌクレオチド配列もしくはそれらの機能的断片もしくは誘導体(例えば、図2aに示す配列番号2の配列を有するタンパク質)を含む。
1)BLASTPプログラムは、アミノ酸照会配列をタンパク質配列データベースと比較する。
Nogoタンパク質またはその機能的に活性な類似体もしくは断片もしくは他の誘導体をコードするヌクレオチド配列(図1bおよび2a;第6.2.1節および第6.2.2節を参照)を、好適な発現ベクター、すなわち挿入されたタンパク質コード配列の転写および翻訳のために必要なエレメントを含有するベクター中に挿入することができる。必要な転写および翻訳シグナルも、天然のNogo遺伝子および/またはその隣接領域により供給することもできる。コード配列はまた、結合パートナーとの公知の結合特性を有するよく知られている抗原または生体分子をコードする配列(例えば、mycエピトープタグ、ヒスチジンタグ、T7エピトープタグなど、6.2.6節および図11a-11cを参照)を用いてタグを付けすることができる。次いでこの追加した配列を用い、固相マトリックスに結合しているそれに対応するパートナーと結合基との相互作用を用いてNogoタンパク質、タンパク質断片、または誘導体を精製できる。
ある特定の態様においては、本発明は、抗原決定基を含む(すなわち、抗体により認識されうる)かまたはさもなくば機能的に活性なNogo(好ましくはヒトNogo)およびそのフラグメントおよび誘導体のアミノ酸配列、ならびに以上をコードする核酸配列を提供する。本明細書で使われる「機能的に活性な」Nogo物質は、全長(野生型)NogoAタンパク質に関連する1つ以上の既知の機能活性を呈する物質を意味し、例えば以下の:非許容性の基質特性、後根神経節増殖錐体の崩壊、NIH 3T3伸展阻害、神経突起成長阻害、Nogo基質またはNogo結合パートナーとの結合、抗原性(抗Nogo抗体との結合)、免疫原性など、が挙げられる。
Nogo遺伝子とタンパク質の構造は、当業界で公知の様々な方法により分析することができ、以下の小節でこれらのうちのいくつかの方法を記載する。
Nogo遺伝子に対応するクローン化DNAまたはcDNAは、限定されるものでないが、サザンハイブリダイゼーション(Southern, E.M., 1975, J. Mol. Biol. 98:503-517)、ノーザンハイブリダイゼーション(例えば、Freemanら, 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 80:4094-4098を参照)、制限エンドヌクレアーゼマッピング(Maniatis, T., 1982, Molecular Cloning(分子クローニング), A Laboratory, Cold Spring Harbor, New York)、およびDNA配列分析を含む方法により分析することができる。ポリメラーゼ連鎖反応(PCR;米国特許第4,683,202号、第4,683,195号、および第4,889,818号;Gyllensteinら, 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 85:7652-7656;Ochmanら, 1988, Genetics 120:621-623;Lohら, 1989, Science 243:217-220)とその後のNogo遺伝子特異的プローブによるサザンハイブリダイゼーションにより、様々な細胞型に由来するDNA中のNogo遺伝子の検出が可能になる。PCR以外の増幅の方法は公知であり、同様に使うことができる。ある実施形態においてはサザンハイブリダイゼーションを用いてNogoの遺伝子連鎖を確認することができる。ノーザンハイブリダイゼーション分析を使ってNogo遺伝子の発現を確認することができる。発生または活性の様々な状態にある種々の細胞型をNogo遺伝子の発現に対して試験することができる。サザンおよびノーザンハイブリダイゼーション両方のハイブリダイゼーション条件のストリンジェンシーを操作して、使用する特定のNogoプローブと所望の程度の関連性をもつ核酸の検出を保証することができる。これらの方法の変法および当業界で公知の他の方法を使うことができる。
Nogoタンパク質のアミノ酸配列は、DNA配列の推論により、あるいはまた、例えば自動アミノ酸シーケンサーを用いるタンパク質の直接配列決定により導くことができる。
本発明において、Nogoタンパク質、そのフラグメントまたは他の誘導体、またはその類似体を免疫原として用いて、この免疫原と免疫特異的に結合する抗体を作製することができる。このような抗体は、限定されるものでないが、ポリクローナル、モノクローナル、キメラ、1本鎖、Fabフラグメント、およびFab発現ライブラリーを含む。ラットおよびウシNogoの組換えフラグメントに対する抗体が作製され(第6.1.7節)、これらの抗体はまた他の種のエピトープとも交差反応する。他の実施形態においては、親水性と同定されたNogoタンパク質のフラグメントを抗体作製の免疫原として使う。
本発明はさらにNogoタンパク質ならびにNogoタンパク質の誘導体(限定されるものでないが断片を含む)および類似体に関する。Nogoタンパク質誘導体およびタンパク質類似体をコードする核酸も提供される。ある実施形態においては、Nogoタンパク質は、上記第5.1節に記載のNogo核酸によりコードされる。特定の態様においては、Nogo A、Nogo B、またはNogo Cタンパク質および誘導体、または類似体は動物(例えばマウス、ラット、ブタ、ウシ、イヌ、サル、ヒト、ハエ、またはカエル)に由来し、これらは本発明の範囲内である。
ある特定の実施形態においては、本発明は、Nogoタンパク質の1つ以上のドメインを含むかまたはそれから成るNogo誘導体および類似体、特にNogoフラグメントおよびそのフラグメントの誘導体に関し、限定されるものでないが、保存カルボキシ末端および疎水性ドメインまたはアミノ末端酸性またはポリプロリンリッチドメイン、以上のいずれかの機能的フラグメント(例えば結合した)、または以上のいずれかの組合わせを含む。
Nogoタンパク質、誘導体および類似体の機能的活性は、様々な方法によりアッセイすることができる。以下の節の機能アッセイの記載は限定を意味するものでなく、かつ当業者に周知の他のアッセイを含むことができる。
ある特定の実施形態においては、Nogoタンパク質、誘導体および類似体を、in vitro組織培養を用いて、NIH 3T3伸展阻害またはPC12神経突起成長阻害についてアッセイできる(第6.1.10節)。
ある実施例においては、距離の長い皮質脊髄路(corticospinal tract)(CST)の再生およびその挙動回復に対する動物モデルを使うin vivoの機能アッセイに、Nogoタンパク質、誘導体および類似体のアンタゴニストを使うことができる。
ある実施形態においては、抗Nogo抗体との結合に対して野生型Nogoと結合または競合する能力についてアッセイする場合、当業界で公知の様々なイムノアッセイを使うことができ、限定されるものでないが、ラジオイムノアッセイ、ELISA(酵素結合免疫吸着アッセイ)、「サンドイッチ」イムノアッセイ、免疫放射線測定アッセイ、ゲル拡散沈降反応、免疫拡散アッセイ、in situイムノアッセイ(例えば金コロイド、酵素または放射性同位体標識を用いる)、ウェスタンブロット、沈降反応、凝集アッセイ(例えば、ゲル凝集アッセイ、血球凝集アッセイ)、補体結合アッセイ、免疫蛍光アッセイ、プロテインAアッセイ、および免疫電気泳動アッセイ、その他の技術を使う競合および非競合アッセイシステムを含む。ある実施形態においては、抗体結合を1次抗体の標識を検出することにより検出する。他の実施形態においては、1次抗体を、1次抗体に対する2次抗体または試薬の結合を検出することにより検出する。さらなる実施形態においては2次抗体を標識する。イムノアッセイの結合を検出するための多数の方法が当業界では公知であり、本発明の範囲内にある。
本発明は治療用組成物(本明細書では「治療薬」と呼ばれる)の投与による種々の疾病および疾患の治療または予防を提供する。かかる「治療薬」としては限定されるものではないが、Nogoタンパク質ならびにその類似体および誘導体(断片を含む)(例えば上記のもの);それに対する抗体(例えば上記のもの);Nogoタンパク質をコードする核酸、類似体または誘導体(例えば上記のもの);Nogoアンチセンス核酸、ならびにNogoアゴニストおよびアンタゴニストが挙げられる。調節解除された細胞増殖を伴う疾患、例えばCNS腫瘍はNogo機能を誘導する治療薬の投与によって治療または予防される。神経突起増殖、分化または維持が欠如しているか、または望まれる疾患は、Nogo機能を阻害する治療薬の投与によって治療される。上記は以下のサブセクションで詳細に記載される。
調節解除された細胞増殖を伴う疾病および疾患はNogo機能を誘導する(すなわち高める、または供給する)治療薬の投与によって治療または予防される。かかる治療薬の例としては限定されるものではないが、Nogoタンパク質、機能上活性な、特に神経突起伸長の阻害または細胞増殖の阻害(例えば、in vitroアッセイまたは動物モデルにおいて証明されたもの)に活性のある誘導体または断片、ならびにNogoタンパク質断片をコードする核酸またはその機能上活性な誘導体もしくは断片(例えば、遺伝子治療に用いられる)が挙げられる。Nogoタンパク質、その誘導体または断片は、それと天然では結合している全てのCNSミエリン物質を含まないことが好ましい。使用できるその他の治療薬、例えばNogoアゴニストはin vitroアッセイまたは動物モデルを用いて同定することができ、その例は以下に記載されている。
Nogo機能を促進する治療薬の投与によって治療または予防できる腫瘍性増殖および関連疾患としては、限定されるものではないが、表1に挙げるものがある(かかる疾患に関する総説としては、Fishmanら, 1985, Medicine,第2版, J.B. Lippincott Co., Philadelphiaを参照)。
Nogo活性を誘導する本発明の治療薬はまた、限定されるものではないが表1に挙げられた疾患をはじめとする前癌病変症状を治療するため、および腫瘍形成状態または悪性腫瘍状態への進行を予防するために投与することができる。かかる予防または治療用途は腫瘍または癌へと進行することが知られている、または疑われる症状、特に過形成、変質形成または最も好ましくは異形成からなる非腫瘍性細胞増殖が起こっている症状に適用される(かかる異常増殖症状の総説に関しては、RobbinsおよびAngell, 1976, Bacic Pathology, 第2版, W.B Saunders Co., Philadelphia, 68-79頁を参照)。過形成とは、構造または機能に著しい変化を伴わずに組織または器官における細胞数の増加を伴う制御された細胞増殖の一形態である。変質形成とは、あるタイプの成熟細胞または十分分化した細胞が別のタイプの成熟細胞に置き換わる制御された細胞増殖の一形態である。変質形成とは、上皮または結合組織細胞で起こり得る。不定形の変質形成はいく分無秩序な変質形成上皮を伴う。異形成は癌の徴候である場合が多く、主として上皮に見られ、これは個々の細胞に均一性を欠き、また細胞の構造的配向を欠いた最も無秩序な形態の非腫瘍性細胞増殖である。異形成細胞はしばしば異常に大きく、濃く染まる核を持ち、多型性を示す。異形成は特徴的には慢性刺激または炎症が存在するところで起こる。
本発明のもう1つの実施形態では、Nogo活性を促進する治療薬を用いて過剰増殖性または良性の異形増殖性疾患を治療または予防する。特定の実施形態は肝硬変(瘢痕形成が正常な肝再生プロセスを追い越してしまった状態)の治療または予防、ケロイド(肥厚瘢痕)形成(瘢痕形成プロセスが正常な再生を妨害している皮膚の変質)、乾癬(皮膚の過剰な増殖および適切な細胞の運命の決定の遅延によって特徴づけられる)、良性腫瘍、繊維症症状、および組織肥厚(例えば、前立腺肥大) の治療に向けられる。
特定の実施形態では、Nogoタンパク質またはその機能的誘導体をコードする配列を含んでなる核酸が遺伝子治療によりNogo機能を促進するために投与される。遺伝子治療とは被験体に核酸を投与することによって行われる治療をさす。本発明の本実施形態では、核酸は、それがコードしているNogo機能の促進によって治療作用を媒介するタンパク質を産生する。
神経突起伸長、増殖または再生が望まれる疾病および疾患はNogo機能を阻害する治療薬の投与によって治療される。終局的に神経系の損傷をもたらす疾病、疾患または損傷としては、限定されるものではないが、中枢神経系(CNS)外傷(例えば、脊髄または脳損傷)、亀裂骨折、感染、悪性腫瘍、有毒物質への曝露、栄養欠乏、準腫瘍症候群、および変性神経疾患(限定されるものではないがアルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン舞踏病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症および進行性上核不全麻痺を含む)が挙げられ、Nogo活性を阻害する化合物(例えば、ドミナントネガティブNogo誘導体、Nogoに対する抗体、Nogoをコードするアンチセンス核酸、NogoリボザイムまたはNogoの活性部位と結合する化学群)を投与することにより治療される。
特定の実施形態では、Nogo機能はNogoアンチセンス核酸の使用によって阻害される。本発明はNogoもしくはその一部をコードする遺伝子またはcDNAに対してアンチセンスである少なくとも6個のヌクレオチドの核酸の治療または予防的使用を提供する。本明細書においてNogo「アンチセンス」核酸とは、いくつかの配列相補性によってNogo RNA(好ましくはmRNA)の一部とハイブリダイズし得る核酸をいう。このアンチセンス核酸はNogo mRNAのコード領域および/または非コード領域に相補的であり得る。かかるアンチセンス核酸はNogo機能を阻害する治療薬としての有用性を持ち、上記の疾患の治療または予防に使用できる。
Nogoアンチセンス核酸は少なくとも6個のヌクレオチドからなり、好ましくはオリゴヌクレオチド(6〜約50個のオリゴヌクレオチドの範囲)である。特定の態様では、このオリゴヌクレオチドは少なくとも10個のヌクレオチド、少なくとも15個のヌクレオチド、少なくとも100個のヌクレオチド、または少なくとも200個のヌクレオチドである。これらのオリゴヌクレオチドはDNAであってもRNAであってよく、あるいはキメラ混合物、またはその誘導体もしくは修飾体であってもよく、一本鎖であっても二本鎖であってもよい。このオリゴヌクレオチドは塩基部分、糖部分またはリン酸骨格で修飾されていてもよい。オリゴヌクレオチドとしてはペプチドなどのその他の付属の基、または細胞膜をわたる輸送(例えば、Letsingerら, 1989, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 86:6553-6556; Lemaitreら, 1987, Proc. Natl. Acad. Sci. 84:648-652; 1988年12月15日公開のPCT公開第WO88/09810号参照)、もしくは血液脳関門(例えば、1988年4月25日公開のPCT公開第WO89/10134号参照)をわたる輸送を助ける薬剤、ハイブリダイゼーションによって誘発される切断剤(例えば、Krolら, 1988, BioTechniques 6:958-976参照)、またはインターカレート剤(例えば、Zon, 1988, Pharm. Res. 5:539-549参照)が挙げられる。
Nogoアンチセンス核酸は、Nogoを発現、または好ましくは過剰発現する細胞型の疾患を治療(または予防)するのに使用できる。特定の実施形態において、そのような疾患は細胞増殖性疾患である。特定の実施形態では、一本鎖DNAアンチセンスNogoオリゴヌクレオチドが用いられる。
本発明の治療薬はヒトに用いる前に所望の治療または予防活性に関してin vitroで、次ぎにin vivoで試験するのが好ましい。例えば、特定の治療薬の投与が指示されるかどうかを決めるのに使用できるin vitroアッセイとしては、患者の組織サンプルを培養系で増殖させて治療薬にさらすか、あるいは治療薬を投与し、かかる治療薬の組織サンプルに対する作用を観測するin vitro細胞培養アッセイが挙げられる。例えばNogo機能の阻害剤である治療薬は神経突起の再生または患者における運動制御の機能回復を測定することによってアッセイできる。
本発明は被験者への有効量の本発明の治療薬の投与による治療(および予防)の方法を提供する。好ましい態様では、治療薬が実質的に精製される。被験者は動物、例えばウシ、ブタ、ウマ、ニワトリ、ネコ、イヌ等を含むが、これらに限定されない、動物であることが好ましく、哺乳類であることが好ましく、ヒトであることが最も好ましい。特定の実施形態では、非ヒト哺乳類が被験者である。
Nogoタンパク質、それらの類似体、誘導体、および部分配列、Nogo核酸(およびそれらに相補的な配列)、抗Nogo抗体は診断に用途を有する。このような分子はNogo発現に影響する種々の症状、疾患、および障害を検出し、予知し、診断し、もしくは監視し、又はその治療を監視するためにイムノアッセイなどのアッセイに使用し得る。特に、このようなイムノアッセイは患者に由来するサンプルを免疫特異的結合が生じうるような条件下で抗Nogo抗体と接触させ、該抗体による免疫特異的結合の量を検出又は測定することを含んでなる方法により行なわれる。特定の態様では、組織切片中の、抗体のこのような結合は異常なNogo局在化又はNogoの異常な(例えば、低い、又は不在の)レベルを検出するのに使用し得る。特定の実施形態では、Nogoの抗体はNogoの異常なレベルが症状の指示である場合に、Nogoの存在について患者の組織又は血清サンプル中でアッセイするのに使用し得る。「異常なレベル」、はその障害を有しない生体の一部又は被験者からの類似のサンプル中に、存在するレベル、又は存在するレベルに相当する通常のレベルと比較して増大した、又は減少したレベルを意味する。
Nogo核酸、タンパク質、および誘導体はまたNogo核酸、タンパク質、又は誘導体に特異的に結合する分子を検出するためのスクリーニングアッセイに用途を有し、従ってNogoのアゴニスト又はアンタゴニスト、特に、そうして細胞成長調節に影響する分子としての潜在的な用途を有する。好ましい実施形態では、このようなアッセイは薬物開発のために神経成長促進剤としての潜在的な用途を有する分子についてスクリーニングするために行なわれる。こうして、本発明はNogo核酸、タンパク質、又は誘導体に特異的に結合する分子を検出するためのアッセイを提供する。例えば、Nogo核酸を発現する組換え細胞を使用し、これらのアッセイにおいてNogoタンパク質を組換え産生し、Nogoタンパク質に結合する分子をスクリーニングし得る。分子(例えば、Nogoの推定の結合パートナー)を、結合を誘導する条件下でNogoタンパク質(又はその断片)と接触させ、次にNogoタンパク質に特異的に結合する分子が同定される。同様の方法がNogo誘導体又は核酸に結合する分子をスクリーニングするのに使用し得る。以上を行なうのに使用し得る方法が当業界で一般的に知られている。
本発明はまた、マウス、ハムスター、ヒツジ、ブタ、ウシ、および好ましくは非ヒト哺乳動物のモデルを含むが、これらに限定されない動物モデルを提供する。
本明細書に記載された実施例は、クローン化された遺伝子Nogoが強力な神経細胞増殖インヒビターでありかつまたSchwabらの米国特許第5,684,133号に記載されたモノクローナル抗体により認識されるタンパク質をコードすることを示している。
以下の分節は本発明で用いられる材料および方法について記載する。当業者は、これらの材料および方法がここに特許請求されている本発明をただ例示するのみであって、本発明者らによる改変が想定されることを認識しよう。かかる改変は添付の特許請求の範囲に包含されるものとする。
すべての精製工程は4℃で実施し、得られた画分の抑制性基質活性はNIH 3T3伸展およびPC12神経突起成長アッセイ(6.1.10節)によりルーチンに測定した。ウシ脊髄組織は髄膜を除去することにより注意深く清浄化し、小片に切断した。次にミエリンを抽出バッファー(60 mM CHAPS, 100 mM トリス-HCl, pH 8.0, 10 mM EDTAバッファー, pH 8.0, 2.5 mMヨードアセトアミド, 1 mMフッ化フェニルメチルスルホニル, 0.1 μg/mlアプロチニン,1 μg/mlロイペプチン, 1 μg/mlペプトスタチンA )中に抽出した。
いくつかのゲルの、IN-1中和可能な活性ゲル-溶出物質を還元条件下に10% SDS-ポリアクリルアミドゲル上で再泳動し、そして50% メタノールおよび10% 酢酸中の0.1% (w/v)クーマシーブルー R250で染色した。220 KDaバンドを切り出し、直接にゲル中でエンドプロテイナーゼLys-C 消化(モル比1:50)を行った。サンプルを酸性化して逆相高速液体クロマトグラフィーカラムにかけ、ペプチドを0.04% トリフルオロ酢酸および80%アセトニトリルの直線勾配(0-100%)を用いて分離し、単一のペプチド種を含有する画分を自動エドマン分解にかけた。
6%(w/v) SDS-ポリアクリルアミドゲル(10×24×0.01cm)を用い還元条件下(100 mMジチオトレイトール)に高分解能SDS-PAGEを行った。セミドライトランスファー装置(Bio-Rad, Trans Blot SD)を用い、20 mM トリス塩基, 192 mMグリシン, pH 8.3, 0.037%(w/v)SDS, 20% メタノール中で、Immobilon-P メンブラン(Millipore)への移行を行った。移行時間は0.8 mA/cm2で2時間であった。ブロッキング剤(室温で1時間)はPBS(リン酸緩衝食塩水、pH 7.2, 8g NaCl, 0.2g KH2PO4, 2.8g Na2HPO4 12H2O,および0.2g KClを水1リットル中に溶解)中の3%ゼラチンであり、洗浄溶液は20 mM トリス-HCl, pH 7.5, 150 mM NaCl,および0.4% Tweenを含有した(室温で3×10分間)。(PBS中の1%ゼラチンで希釈するための)第1の抗体に対するインキュベーション時間は通常4℃で一夜であった。西洋ワサビペルオキシダーゼ結合抗マウスIgG 2次抗体(1:2000)は室温で1時間インキュベートした。検出にはECL 化学ルミネセンスシステム(Amersham Pharmacia Biotech) を用いた。
ウシ脊髄から白質を新たに切開し、そしてFastTrackキット(Invitrogen)を用いてポリ(A)+ RNAを抽出した。cDNAライブラリーの構築は製造者の指示に従いUni-ZAPキット(Stratagene)を使用して行なった。ライブラリーの複雑度は全体で4×106 プラーク形成単位より大きく、インサートの平均サイズは約1.8 キロベースであった。
TCIGTIGGYAAIACIGCIGGYAARTC(配列番号47); MSC6:
TCIGTIGGIAGIACIGCIGGYAAYTC(配列番号48); MSC7:
TCIGTIGGYAAIACIGCIGGIAGRTC(配列番号49); MSC8:
TCIGTIGGIAGIACIGCIGGIAGRTC(配列番号50))を設計し、MSC9 (GARATHGCIGAIATHCARGAYGGIGA(配列番号51)をbNI220ペプチド2配列から設計した。オリゴヌクレオチドはMWG Biotech (Munchenstein, Switzerland)により合成し、DIG DNA 3'末端標識キットを用いて標識した。リボプローブはDIG RNA 標識キット(Boehringer Mannheim)を用いて合成した。
CWP1-3, Oli18, Oli3,およびR1-3U21の両鎖をMicrosynth (Balgach, Switzerland) によるPerkin Elmer AB1377システムを用いて配列決定した。DNA 配列はDNASISプログラム(Hitachi)により分析した。データベース検索はBLASTプログラム(NCBI)を用いて実施した。
総RNAおよびポリ(A)+ RNAはRNAgent (Promega) またはFastTrackキット(Invitrogen)をそれぞれ用いて組織から抽出した。RNAは1%ホルムアルデヒドゲル上の電気泳動により分離し、Genescreenメンブランに移した。ブロットを、適切なプラスミドからDIG RNA標識キット(Boehringer Mannheim)を用いて生成させたアンチセンスリボプローブとハイブリダイズさせた。ブロットハイブリダイゼーション、洗浄、およびCDP スター検出条件は製造者により記載されたとおりであった。「共通」のプローブEST111410 (TIGR, ATCC, Rockville, MD, USA)はヌクレオチド2535-4678の間の転写物A 配列を含有し、エキソン1特異的プローブはヌクレオチド65-769の間の転写物A 配列を含有し、そしてエキソン2特異的なプローブはヌクレオチド815-3183の間の転写物A 配列を含有する。
抗血清472 (AS 472)は合成ペプチドP472, SYDSIKLEPENPPPYEEA(ウシ配列、配列番号33)に対してResearch Genetics, Inc. (Huntsville AL, USA)により生成され、このペプチドは配列番号2のラットNogoアミノ酸配列623-640に相当し、ミスマッチ3個が存在する。
SDS-PAGEおよびウエスタンブロッティングは当業者に良く知られた標準的方法を用いて実施した。抗体を以下のように希釈した。すなわち、AS Bruna 1:7,500; AS 472 1:2,000; 抗myc (9E10) 1:5,000 (Invitrogen); 抗BiP 2μg/ml (Stressgen); mAb IN-1ハイブリドーマ上清は未希釈のまま使用した。2次抗体は、HRP結合抗ウサギ(Pierce; 1:20,000); 抗マウスIgM (1:50,000); およびアルカリホスファターゼ結合抗マウス(Milan Analytica AG, La Roche, Switzerland; 1:5,000)であった。
成体ラットの脊髄または小脳を素早く切開し、OTC 化合物中に包埋し、-40 ℃で凍結させた。20個の死後切片を切り出し、40℃でエタノール/酢酸中で固定した。急冷工程を除外する以外はRubinら、1994、J. Neurocytol. 23:209-217 に記載されたようにして免疫染色を行った。あるいは、組織切片をメタノールで固定し(-20 ℃で2分間)、そして免疫染色を上記Rubin らに記載されるようにして実施した。使用した1次抗体(抗体:(希釈度))は、IN-1のハイブリドーマ上清:(未希釈); AS Bruna:(1:5,000);またはアフィニティ精製AS 472: (1:50)であった。
5 μg/ウエル(=1cm2)のq-プールで予め被覆した培養皿にNIH 3T3繊維芽細胞をプレートした。q-プールとはQ セファロースカラム上に分離されたウシ脊髄抽出物のプールされた活性画分である。IN-1は未希釈の培養上清として使用し(1-10μg/ml)、AS Brunaおよび免疫前血清はPBS中1:1000に希釈し、そしてAS 472および免疫前血清はPBS中1:500に希釈した。異なるq-プール調製物における活性変動を補うために、q-プール上にプレートした、阻害された丸細胞の数を100%にノーマライズし、そしてバッファー対照上にプレートしたそれを0%とした(Spillmanら、1998, J. Biol. Chem. 273:19283-93)。
ハンクス平衡塩類溶液(HBSS)中のE16 胚性ニワトリから後根神経節(DRG)を切開し、2部分に分け、10% (FCS)および1%メタノールを含有するF12培地100 μl中のq-プールで予め被覆した皿にプレートした。個々のDRGからの神経突起成長を37℃で24時間インキュベート後に0(成長なし)から4(最大成長)までの尺度で半定量的方法で評価した。
視神経を成体ラットから切り出し、5500グレイを照射し、AS 472または相当する免疫前血清(1:10 希釈)のいずれかを注射した。神経の対は、各神経の一端がシリコングリース/テフロンリングバリアを介して中央チャンバー(ここにはPOラットからの解離した培養一次DRGニューロンが配置してある)中に到達するように3チャンバー培養で培養した。培養2週間後、神経を当分野で知られた標準的技術により固定し、電子顕微鏡(EM)用に包埋し、そしてDRG露出基部から約3.5 mmの距離で超薄切片を取った。切片をZeiss EM 902を用いて再成長中の軸索の存在に関して系統的に分析した。
Nogo Aオープンリーディングフレームを当分野で知られた標準的なクローニング技術を使用してpcDNA3.1mychisベクター(Invitrogen)中にサブクローニングした。生成したプラスミド(Nogo-myc19)は、myc-his タグ(21アミノ酸)に融合したNogo A配列を含有する組換えタンパク質をもたらした。Nogo-myc19 (35mmの皿当たりDNA 2μg)または対照プラスミド(pcDNAmychisLacZ)を、製造者のプロトコルに従いスーパーフェクト(superfect)(Qiagen)を用いてCOS 細胞中にトランスフェクトした。トランスフェクトした細胞をトランスフェクション36〜48時間後に収穫した。抗myc抗体および酵素によるβガラクトシダーゼ発色反応を用いる免疫蛍光染色に基づき、平均トランスフェクション率は約20%であると推定された。トランスフェクトされたCOS 細胞を95% エタノール/5% 酢酸を用いて固定し(4℃、25分間)、PBS/10% FCS中でブロックし、そしてAS Bruna (1:200)またはIN-1 (1:2)と室温でPBS/1% FCS中2時間インキュベートした。細胞をPBSで洗い、蛍光2次抗体(AS Brunaに関してはヤギ抗ウサギFITC、IN-1検出に関してはヤギ抗マウスTRITC, Jackson Immuno Research Lab. Inc., West Grove, PA)と反応させた。
ラット新生児の脳から単離された稀突起神経膠細胞を75cm2ポリリジンフラスコ(Sigma, St.Louis, MO) にプレートし、5% FCSを補添したDMEM中10-12 日間培養した。富化され、混合された集団の稀突起神経膠細胞およびそれらの前駆細胞を軌道シェーカー中210 rpm で1中夜振盪することにより星状細胞単層から放出した。細胞をポリリジン被覆35cm2皿上に1-2 × 106 細胞の密度でプレートした。前駆細胞を化学的に規定された培地(CDM) 中3-4 日間分化せしめた。
P4ラット全脳培養物をvan der Haarら、(1998, J. Neurosci. Res. 51:371-81) に記載されるようにして調製した。in vitroで7日目にそれらを、全ての工程を15℃で実施し、細胞を溶解バッファー(0.05M NaH2PO4 pH 8.0, 0.15 M NaCl, 0.5% CHAPS (Sigma), 2.5 mM ヨードアセトアミド, 1 mMフェニルメチルスルホニルフルオライド, 0.1 μg/mlアプロチニン,1 μg/mlロイペプチン, 1 μg/mlペプスタチンA )1 ml中に溶解させる以外は記載されるように、細胞非透過性EZ-LINK スルホNHS-LC-Biotin (Pierce)を用いてビオチン化した。ビオチン化タンパク質をDynabeads M-280 Streptavidin (Dynal)を用いて免疫沈降し、SDS-PAGEにかけ、そしてニトロセルロースメンブランに転写し、これらをAS472,α-BiPおよびα- β- チューブリンを用いてプローブした。メンブランをRe-Blot Western Blot Recyclingキット(Chemicon)を用いてはがした。
視神経稀突起神経膠細胞をSchwabおよびCaroni (1988, J. Neurosci. 8:2381-2393) に記載されるようにして調製した。2日令培養物をAS 472 (1:200)またはmAb IN-1 (1:3)と、培地中室温(rt)で25分間インキュベートした。培養物を洗浄し、PBS 中の4%パラホルムアルデヒド/5% スクロースを用いて固定し、そして0.1 M マレイン酸/2% ブロッキング剤(Boehringer Mannheim) 中で1時間ブロックした。2次アルカリホスファターゼコンジュゲート抗体(Milan Analytica) を0.1M マレイン酸/1% ブロッキング剤(1時間、rt)中の1:7,500 で使用した。トランスフェクションされたCOS 細胞を95% エタノール/5% 酢酸を用いて固定し(4℃、25分間)、ブロックし、そしてAS Bruna (1:200)またはmAb IN-1と室温で2時間インキュベートした。細胞をヤギ抗ウサギFITC、およびヤギ抗マウスTRITC(Jackson Immuno Research Lab) と反応させた。
視神経の対をSchwabら (1988, J. Neurosci. 8:2381-2393) に記載されるように3室培養系で培養し、AS 472または相当する免疫前血清(1:10)を注射およびそれにさらした。視神経を電子顕微鏡(EM)用に封埋し、DRG 露出断端から約3.5 mmの距離で超薄切片をとった。切片をZeiss EM 902顕微鏡を用い再生中の軸索の存在に関して組織的に分析した。
以下の分節は6.1 節に示される方法分節およびサブ分節から得られた実験結果を開示する。
ラットNI-250のウシ相同体を精製し、bNI220および精製タンパク質のペプチドをプロテアーゼ消化により生成した。複数のジゴキシゲニン標識した縮重オリゴヌクレオチドを6種の異なるbNI220ペプチド配列に従って設計した。これらオリゴヌクレオチドを使用してウシ白質ライブラリーのスクリーニングから幾つかのcDNAクローンを単離した。最長クローンのインサート(CWP1-3,図1a) を用いてラットcDNAライブラリーの後続のスクリーニング用のプローブを合成した。かかるスクリーニングから選択されたクローンを図1aに示す。これらcDNAクローンのDNA 配列分析では、3種の異なる転写物が1つの遺伝子に由来することが示され、この遺伝子をNogoと表示した。異なる転写物は、選択的プロモーターの使用および選択的スプライシングの両方から生成するようである(Nogo A, Nogo Bおよび NogoC,図1b)。図1Aに示されるクローンからDNA 配列を編集して転写物 Aを生成し、そのDNA 配列を図2aに示す。
Nogo Aは7個の有力なN-グリコシル化部位を有するが、しかしながら生化学的証拠ではNogo Aが主要多糖類成分を有しないことが示される。またNogo AはPKCの認識部位を19個およびカゼインキナーゼIIの認識部位を7個有する(図2a)。3種のNogo全ては2種の共通の、それぞれ35および36アミノ酸からなるカルボキシ末端疎水性ドメインを有する。それらドメインの一方または両方は膜貫通性または膜内ドメインとして使用でき、これは内在性膜タンパク質としてのbNI220の特性と一致する。Nogo A(Nogo Bおよび Cも)は何ら公知の細胞接着分子、細胞外マトリックスタンパク質、もしくは他のガイダンス分子のモチーフを含有しない。
Nogoの発現パターンがノーザンブロッティングおよびin situ ハイブリダイゼーションにより検査された。「共通」プローブ(6.1.6 節)が使用された場合、視神経、脊髄および大脳皮質において3種の主要なNogo転写物(表示:A, 4.6kb; B, 2.6kb; そしてC, 1.7kb)が検出された(図4a)。後根神経節では、2種のより大きい方の転写物しか検出されなかった。 2.6kbの主要転写物はPC12細胞中で検出されたが、 4.6kbバンドは長期露出後にしか検出できない(図4a)。座骨神経では、転写物の検出レベルが低く 2.6kbバンドが主要転写物である。脊髄およびPC12細胞ポリ(A) + RNA をエキソン1に特異的なプローブとハイブリダイズさせた場合、4.6kb および 2.6kb転写物しか検出されなかった。後脳および骨格筋ポリ(A) + RNA をエキソン2に特異的なプローブとハイブリダイズさせた場合、後脳に4.6kb 転写物のみが検出された(図4b)。これらの結果は図1Bに示される転写マップを証明している。しかしながらノーザンブロッティング結果はまた、Nogo発現が神経系に限定されないこと(図4c); Nogo転写物が骨格筋(1.7kb)、腎臓(2.6kb および1.7kb)、軟骨(胸骨から、1.7kb)、皮膚(1.7kb)、肺(2.6kb)、および脾臓(2.6kb)でも検出されたことも示している。Nogo C転写物を高レベルで発現する骨格筋を除き、神経系の外のNogo転写物レベルは神経系のそれより低い。従って、4.6kb Nogo A転写物は神経系において特有に転写されると見られる。
半精製されたウシ脊髄NI-220調製物(q-プール)は、NIH 3T3繊維芽細胞の伸展(spreading)と神経突起の成長を妨げることが可能である。Nogo抗血清(AS Bruna(AS 472)またはIN-1のいずれか)の存在下で、q−プール阻害活性が減少した。ここでq−プール阻害活性は、NIH 3T3繊維芽細胞の伸展を示し、また胚性ニワトリ後根神経節(DRG)がq−プールをコートした皿上で神経突起を伸ばす活性をいう(図9)。特異性はP472ペプチドの添加によって示された。このペプチドは、AS 472を誘発させるために使用されたペプチドである(6.1.7節)。P472はうまく、AS 472の阻害作用を阻止したが、一方、対照ペプチドは該阻害に対し全く作用しなかった。
成体CNS組織を介しての新生仔ラットDRG神経突起の再生および成長能を調べた。視神経の対を、成体ラットから切り分けて、DRG神経突起が各神経の一端に近づくように特殊なチャンバー培養システム内で培養した(図10a)。各培養において、2つの神経のうち1つに前免疫ウサギ血清を注入して該血清に露呈し、他方の神経にはAS 472を注入した。AS 472もまた、前記チャンバー内の該神経のまわりに存在させた。NGFの存在中in vitroで2週間後に、電子顕微鏡(EM)観察のために、該培養物を固定し、取りくずし、そして包埋した。EM切片をDRGニューロンと接触する該神経の端から約3.5mm取った。前免疫血清を注入した神経は軸索を全く含まないか、または、わずか数個の軸索を含んでいるにすぎなかった(図10b)。後者は、該神経表面で、基底膜および星状神経膠細胞と結合することが専ら見出された。これに反して、AS 472が注入された視神経の大部分がしばしば、最高数百個の、かなりの数の軸索を含んでいた。ミエリンとの接触を頻繁に認めることができた(図10c,d)。
Nogo Aが、トランスフェクトされたCOS細胞内で、カルボキシ末端のmyc-hisタグ化組換えタンパク質として発現されると、抗myc抗体およびAS Brunaの両方を用いるウエスタンブロッティングにより、組換えNogo Aが変性SDSゲル上で約200kDの見かけ分子量をもつことが示された(図11a)。同じブロット上で、類似の移動度のバンドが、ラット初代培養稀突起神経膠細胞においてAS Brunaによって検出されたが、このことから、組換えNogo Aが稀突起神経膠細胞由来の内因性Nogo Aとほぼ同一の分子量をもつことが示唆された(図1a)。トランスフェクトされたCOS細胞がIN-1およびAS Brunaを用いた免疫蛍光法によって染色されたときには、IN-1およびAS Brunaは同一の、トランスフェクトされた細胞を認識した(図11b,c)。免疫反応性の大部分は、細胞内に局在し、また透過(permeabilization)後にのみアクセス可能であった。
Nogoの一連の欠失変異体を作製して、Nogoの阻害ドメインまたは領域をマッピングした。Nogo遺伝子の欠失構築物は、内部の制限部位、エキソヌクレアーゼIII-ヤエナリ(mung bean)消化、およびポリメラーゼ連鎖反応によって作製された。該変異体の説明は図18とその簡単な説明に与えられている。構築物の大部分は、抗T7モノクローナル抗体を使用する同定のためのN末端T7タグと、固定化Co(II)アフィニティクロマトグラフィーを使用する精製のためのN末端またはC末端ヘキサヒスチジンタグ(「Hisタグ」)とを有している。Nogo欠失変異体(NiG-D1,NiG-D2からNiG-D20と称する)の全てを、NIH 3T3繊維芽細胞の伸展アッセイを用いて試験し、阻害活性を測定した。いくつかの変異体を、PC12神経突起の成長アッセイ、解離されたラットDRG神経突起の成長アッセイ、または網膜神経節線(retinal ganglion stripe)のアッセイで試験した。この結果を下記の表2に示す。
本発明は、ヒトNogoタンパク質およびヒトNogoタンパク質断片(ラットNogo A、Nogo B、およびNogo Cの一部に対するヒト等価物)をコードするヌクレオチド配列を提供する。ヒトNogoアミノ酸配列は図13に示されており、配列番号29として割当てられている。
8.1 神経突起成長インヒビターNogoのクローニング
Nogo Aは、以前に記載のあるラットNI-250が、CNSミエリンの主たる神経突起成長抑制タンパク質であり、IN-1の抗原であることを支持する、多くの特質を有している。分子レベルでは、Nogo Aは、元々はウシの脊髄ミエリンの主たる抑制性成分であるbNI-220の配列決定によって得られた、6つのペプチドを全て含む。発現レベルでは、稀突起神経膠細胞は成体CNSにおいてNogo Aを発現する主たる細胞型であり、視神経におけるNogo発現のタイミングは、神経突起の伸長に対するミエリン抑制活性がIN-1により中和されるという以前の記載と一致する。さらに、ウェスタンブロッティングは活性q-プール画分におけるNogo Aの存在を示し、また様々なCNS領域に由来する白質は、AS BrunaおよびAS 472(Nogo Aに特異的)によって、IN-1を用いた場合と同じパターンで染色された。これらの事実はどちらも、Nogo AがNI-250であるという説明に合致している。
P0由来のラット視神経稀突起神経膠細胞におけるNogoの発現は、先の神経突起成長抑制活性を中和し得るIN-1の発見とよく一致する。興味深いことに、この発現は主要ミエリンタンパク質の発現に先立って起こり、数日のうちにミエリン形成に至る。おそらく軸索のシグナルに応答したNogoの出現は、対応する神経線維路におけるさらなる軸索の成長を妨げることが可能であった(ラット視神経においてE20が軸索数のピーク)。Nogoはまた、二次形成を抑制することによって分化したCNSの全体的構造を安定化することができた。異なるCNS領域の灰白質において、ミエリン含量およびIN-1免疫反応性は、GAP-43のレベルおよび所定領域が有し得る塑性と逆相関している。実際、成体CNSへ適用したIN-1抗体は、脳幹および脊髄において、以前は発生初期のCNSでしか知られていなかった程度まで出芽および塑性を生じさせる。この塑性に対応した大幅な機能的回復は、出芽軸索が機能的に適切な接続を形成することが可能であることを示唆している。
Nogoの配列解析からは、軸索誘導(反発性または誘引性)に関わる細胞表面もしくは基質タンパク質の既知のモチーフは示されなかった。すなわち、免疫グロブリン、フィブロネクチンIII型、またはEGFドメインは同定できなかった。記載のある神経突起成長インヒビターの、セマフォリン、ネトリン、またはエフリンに対する相同性は、いずれも存在しなかった。
Nogo C転写物は、神経系に匹敵するレベルで骨格筋にて発現される。筋肉のNogo Cについて考えられる機能の1つは、運動軸索を拒絶し、それらを運動終板領域に限定することである。また低レベルのNogo発現は他の非神経組織でも検出され得る。ミエリン抽出物およびNI-250による繊維芽細胞および星状膠細胞の伸展に対する抑制が観察されたことから、これらの細胞におけるNogoタンパク質の受容体および応答機構の存在が示される。このことは、細胞運動の接触抑制におけるNogoのあり得る一般的機能を示している。
Claims (31)
- 配列番号29の全長にわたって90%より高い同一性を有するアミノ酸配列から成る精製ヒトNogoタンパク質であって、(i)天然では結合している全ての中枢神経系ミエリン物質を含まず、且つ(ii)神経突起成長における抑制効果を有する、前記タンパク質。
- 配列番号29の全長にわたって97%より高い同一性を有するアミノ酸配列から成る、請求項1に記載のタンパク質。
- 配列番号29の配列を有する、請求項1に記載のタンパク質。
- 配列中の1以上のアミノ酸残基が、サイレントな改変を生じる、機能的同等物として働く類似の極性を持つ他のアミノ酸により保存的に置換されている、配列番号29の配列を有する、請求項1〜3のいずれか1項に記載のタンパク質。
- 配列番号1のヌクレオチド配列から成る第2の核酸にハイブリダイズすることが可能な第1の核酸によりコードされる、請求項1〜4のいずれか1項に記載のタンパク質。
- 非グリコシル化タンパク質である、請求項1〜5のいずれか1項に記載のタンパク質。
- 請求項1〜6のいずれか1項に記載のタンパク質を含む融合タンパク質又はキメラタンパク質。
- 請求項1〜6のいずれか1項に記載のタンパク質をコードする単離された核酸。
- (a)配列番号29のアミノ酸配列から成るポリペプチドをコードするヌクレオチド配列に相補的なヌクレオチド配列から成る第2の核酸とハイブリダイズすることができ、且つ(b)配列番号29のアミノ酸配列から成るタンパク質に対する抗体に結合する天然に存在するタンパク質をコードする、請求項8に記載の核酸。
- 天然に存在するヒトタンパク質をコードする、請求項9に記載の単離された核酸。
- 固有のものでないプロモーターに機能的に連結された、請求項8〜10のいずれか1項に記載の核酸を含むクローニングベクター。
- 発現ベクターである、請求項11に記載のベクター。
- 請求項11又は12に記載のベクターを用いて配列番号1の核酸により形質転換された組換え細胞。
- 原核生物又は真核生物組換え細胞である、請求項13に記載の組換え細胞。
- (a)請求項13又は14に記載の細胞を培養するステップ、及び
(b)請求項1〜7のいずれか1項に記載のタンパク質を回収するステップ
を含む、請求項1〜7のいずれか1項に記載のタンパク質の産生方法。 - 医薬としての使用のための請求項1〜7のいずれか1項に記載のタンパク質。
- 被験体における請求項1〜6のいずれか1項に記載のタンパク質の産生を特異的に阻害するリボザイム又はアンチセンス核酸。
- 医薬としての使用のための請求項17に記載のリボザイム又はアンチセンス核酸。
- 中枢神経系の腫瘍性疾患の治療のための医薬の製造における、請求項1〜7のいずれか1項に記載のタンパク質の使用であって、該タンパク質が被験体での細胞増殖の阻害において活性である、前記使用。
- 腫瘍性疾患が、神経膠腫、神経膠芽腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫、稀突起神経膠腫、髄膜腫、神経芽腫又は網膜芽腫である、請求項19に記載の使用。
- 中枢神経系の損傷を治療するための医薬の製造における、ニューロンの再生若しくは出芽を誘導するための医薬の製造における、又は中枢神経系の可塑性を強化するための医薬の製造における、請求項17に記載のリボザイム又はアンチセンス核酸の使用。
- 被験体がヒトである、請求項19又は21に記載の使用。
- 請求項1〜6のいずれか1項に記載のタンパク質に免疫特異的に結合するモノクローナル抗体。
- 請求項1〜6のいずれか1項に記載のタンパク質に対するポリクローナル抗体の取得方法であって、
(a)免疫原性量の請求項1〜6のいずれか1項に記載のタンパク質を非ヒト動物に投与するステップ、及び
(b)前記非ヒト動物から前記ポリクローナル抗体を回収するステップ
を含む、前記方法。 - 配列番号29に免疫特異的に結合する、請求項24に記載の方法に従い産生されたポリクローナル抗体を含む単離された抗血清サンプル。
- 治療用抗体又は治療用抗血清である、請求項23に記載の抗体又は請求項25に記載の抗血清。
- ヒト抗体、キメラ抗体又は一本鎖抗体である、請求項23又は26に記載の抗体。
- 医薬としての使用のための、請求項23、26若しくは27に記載の抗体又は請求項25に記載の抗血清。
- 中枢神経系の損傷を治療するための医薬の製造における、ニューロンの再生若しくは出芽を誘導するための医薬の製造における、又は被験体での中枢神経系の可塑性を強化するための医薬の製造における、請求項23、26若しくは27に記載の抗体又は請求項25に記載の抗血清の使用。
- 被験体がヒトである、請求項29に記載の使用。
- 請求項1〜6のいずれか1項に記載のタンパク質に対するモノクローナル抗体の取得方法であって、
(a)免疫原性量の請求項1〜6のいずれか1項に記載のタンパク質を非ヒト動物に投与するステップ、
(b)前記非ヒト動物由来の、培養中の継続的な細胞株によりモノクローナル抗体分子を産生させるステップ、及び
(c)前記培養から前記モノクローナル抗体を回収するステップ
を含む、前記方法。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20160076312A (ko) * | 2014-12-22 | 2016-06-30 | 경북대학교 산학협력단 | 근육 분화, 재생, 또는 질환 상태와 관련된 노고-에이의 용도 |
JP2016532496A (ja) * | 2013-08-08 | 2016-10-20 | グローバル・バイオ・セラピューティクス・インコーポレイテッドGlobal Bio Therapeutics,Inc. | 低侵襲処置用インジェクションデバイスおよびその使用 |
Families Citing this family (36)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20020072493A1 (en) * | 1998-05-19 | 2002-06-13 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Activated T cells, nervous system-specific antigens and their uses |
EP1098972B1 (en) * | 1998-07-22 | 2010-09-29 | SmithKline Beecham Limited | Protein similar to neuroendocrine-specific protein, and encoding cdna |
SK287323B6 (sk) | 1998-11-06 | 2010-07-07 | University Of Z�Rich | Nogo proteín, jeho purifikovaný fragment, chimérny proteín a purifikovaná molekula s jeho obsahom, izolovaná nukleová kyselina, vektor s jej obsahom, rekombinantná bunka, spôsob produkcie rekombinantného proteínu a jeho použitie |
WO2000060083A1 (en) * | 1999-04-08 | 2000-10-12 | Chiron Corporation | Novel protein associated with cell stress response |
US7186530B1 (en) | 2000-04-07 | 2007-03-06 | Chiron Corporation | Protein associated with cell stress response |
GEP20063830B (en) * | 2000-01-12 | 2006-05-25 | Univ Yale | Nogo Receptor-Mediated Blockade of Axonal Growth |
US7119165B2 (en) * | 2000-01-12 | 2006-10-10 | Yale University | Nogo receptor-mediated blockade of axonal growth |
US7049395B2 (en) | 2000-05-02 | 2006-05-23 | Yale University | Anti-inflammatory compounds and uses thereof |
JP4465148B2 (ja) * | 2000-10-06 | 2010-05-19 | イェール ユニバーシティー | Nogoレセプターホモログ |
GB0101313D0 (en) * | 2001-01-18 | 2001-02-28 | Glaxo Group Ltd | Assay |
GB0101312D0 (en) | 2001-01-18 | 2001-02-28 | Glaxo Group Ltd | Assay |
TWI323265B (en) | 2002-08-06 | 2010-04-11 | Glaxo Group Ltd | Antibodies |
GB0228832D0 (en) | 2002-12-10 | 2003-01-15 | Novartis Ag | Organic compound |
EP1556409A1 (en) * | 2002-10-31 | 2005-07-27 | Pieris ProteoLab AG | Soluble truncated polypeptides of the nogo-a protein |
ATE479754T1 (de) | 2003-03-19 | 2010-09-15 | Biogen Idec Inc | Nogo rezeptor bindendes protein |
GB0306309D0 (en) | 2003-03-19 | 2003-04-23 | Glaxo Group Ltd | Method of treatment |
PT1711530E (pt) * | 2003-12-22 | 2009-10-22 | Glaxo Group Ltd | Imunoglobulinas neutralizantes de nogo-a para o tratamento de doenças neurológicas |
RS52593B (en) | 2004-06-24 | 2013-04-30 | Biogen Idec Ma Inc. | TREATMENT OF THE CONDITIONS CONCERNING DEMYELINIZATION |
KR100659820B1 (ko) | 2004-11-17 | 2006-12-19 | 삼성에스디아이 주식회사 | 리튬 이온 이차 전지 |
US20090137484A1 (en) * | 2004-12-01 | 2009-05-28 | National University Of Singapore | Neuronal Network-Interacting Peptide |
US7893032B2 (en) | 2005-07-07 | 2011-02-22 | Yale University | NgR variants and compositions thereof for suppressing axonal growth inhibition |
EP2394661A1 (en) | 2005-07-08 | 2011-12-14 | Biogen Idec MA Inc. | Sp35 antibodies and uses thereof |
US20070026463A1 (en) * | 2005-07-28 | 2007-02-01 | Wyeth | Compositions and methods of mutant Nogo-66 domain proteins |
RU2008123384A (ru) | 2005-11-16 | 2009-12-27 | Новартис АГ (CH) | БИОМАРКЕРЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АНТИТЕЛОМ к Nogo-A ПРИ ПОВРЕЖДЕНИЯХ СПИННОГО МОЗГА |
GB0525662D0 (en) | 2005-12-16 | 2006-01-25 | Glaxo Group Ltd | Immunoglobulins |
US20080025959A1 (en) * | 2006-05-24 | 2008-01-31 | Richard Daneman | Permeability of blood-brain barrier |
CN101015683B (zh) * | 2007-01-18 | 2010-07-21 | 复旦大学 | 人rtn4b蛋白在制备创伤愈合药物中的应用 |
NZ584911A (en) * | 2007-11-02 | 2011-08-26 | Novartis Ag | Improved nogo-a binding molecules and pharmaceutical use thereof |
AU2008328370A1 (en) * | 2007-11-22 | 2009-05-28 | Symphogen A/S | A method for characterization of a recombinant polyclonal protein |
CA2997870A1 (en) | 2008-07-09 | 2010-01-14 | Biogen Ma Inc. | Compositions comprising antibodies to lingo or fragments thereof |
CN102439451B (zh) * | 2009-06-02 | 2014-12-03 | 德克萨斯大学系统董事会 | 患神经退行性疾病的对象中抗体所识别的小分子的鉴定 |
WO2012004773A1 (en) | 2010-07-09 | 2012-01-12 | Universite De Geneve | New uses of nogo-a inhibitors and related methods |
RU2478646C1 (ru) * | 2011-11-28 | 2013-04-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт молекулярной биологии им.В.А.Энгельгардта Российской академии наук (ИМБ РАН) | Способ получения высокоаффинных поликлональных антител |
NZ702178A (en) | 2012-05-14 | 2017-01-27 | Biogen Ma Inc | Lingo-2 antagonists for treatment of conditions involving motor neurons |
JP2018504400A (ja) | 2015-01-08 | 2018-02-15 | バイオジェン・エムエイ・インコーポレイテッドBiogen MA Inc. | Lingo‐1拮抗薬及び脱髄障害の治療のための使用 |
US20180015144A1 (en) * | 2015-01-27 | 2018-01-18 | Universitat Zurich | Agonists of the nogo-a s1pr pathway for the treatment of glioblastoma |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH04117298A (ja) * | 1988-11-04 | 1992-04-17 | Erziehungsdirektion Of The Canton Zuerich | 神経突起成長調節因子 |
WO1998006841A2 (en) * | 1996-08-12 | 1998-02-19 | Incyte Pharmaceuticals, Inc. | Two human nsp-like proteins |
WO1998017687A2 (en) * | 1996-10-25 | 1998-04-30 | Genetics Institute, Inc. | Secreted proteins and polynucleotides encoding them |
Family Cites Families (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4196265A (en) * | 1977-06-15 | 1980-04-01 | The Wistar Institute | Method of producing antibodies |
CA1173823A (en) | 1980-08-26 | 1984-09-04 | Leonard M. Hjelmeland | Nondenaturing zwitterionic detergent for membrane biochemistry |
CA1341401C (en) | 1984-03-23 | 2002-11-26 | Adriano Fontana | Immunosuppressant factor derived from human glioblastoma cells |
EP0155433A1 (en) | 1984-03-23 | 1985-09-25 | Adriano Fontana | Immunosuppressant factor |
EP0233838A3 (en) | 1986-02-04 | 1990-01-31 | Incyte Pharmaceuticals, Inc. | Neurite-promoting factor and process for the manufacture thereof |
SG50681A1 (en) | 1988-06-13 | 1998-07-20 | American Biogenetic Sciences | Method for the production of monoclonal antibodies utilizing a germfree animal |
US5250414A (en) | 1988-11-04 | 1993-10-05 | Erziehungsdirektion Of The Canton Zurich | Diagnostic methods using neurite growth regulatory factors |
WO1990005191A1 (en) * | 1988-11-04 | 1990-05-17 | Erziehungsdirektion Of The Canton Zurich | Neurite growth regulatory factors |
AU2152092A (en) * | 1991-06-24 | 1993-01-25 | Erziehungsdirektion Of The Canton Zurich | Neurite growth regulatory factors |
WO1999033979A2 (en) * | 1997-12-30 | 1999-07-08 | Chiron Corporation | Bone marrow secreted proteins and polynucleotides |
US6607879B1 (en) * | 1998-02-09 | 2003-08-19 | Incyte Corporation | Compositions for the detection of blood cell and immunological response gene expression |
US20020072493A1 (en) * | 1998-05-19 | 2002-06-13 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Activated T cells, nervous system-specific antigens and their uses |
EP1098972B1 (en) | 1998-07-22 | 2010-09-29 | SmithKline Beecham Limited | Protein similar to neuroendocrine-specific protein, and encoding cdna |
JP2002537757A (ja) * | 1998-08-24 | 2002-11-12 | アルファジーン・インコーポレイテッド | 分泌タンパク質及びそれらをコードするポリヌクレオチド |
SK287323B6 (sk) | 1998-11-06 | 2010-07-07 | University Of Z�Rich | Nogo proteín, jeho purifikovaný fragment, chimérny proteín a purifikovaná molekula s jeho obsahom, izolovaná nukleová kyselina, vektor s jej obsahom, rekombinantná bunka, spôsob produkcie rekombinantného proteínu a jeho použitie |
EP1147192A1 (en) * | 1999-11-15 | 2001-10-24 | Smithkline Beecham Plc | Human nogo-c polynucleotide and polypeptide and their uses |
US20030134301A1 (en) * | 2001-07-27 | 2003-07-17 | Brooksbank Robert Alan | Identification and use of molecules implicated in pain |
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2005
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-
2008
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2009
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2012
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH04117298A (ja) * | 1988-11-04 | 1992-04-17 | Erziehungsdirektion Of The Canton Zuerich | 神経突起成長調節因子 |
WO1998006841A2 (en) * | 1996-08-12 | 1998-02-19 | Incyte Pharmaceuticals, Inc. | Two human nsp-like proteins |
WO1998017687A2 (en) * | 1996-10-25 | 1998-04-30 | Genetics Institute, Inc. | Secreted proteins and polynucleotides encoding them |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
JPN6009068731; J.Biol.Chem.,Vol.273,No.30(1998.Jul.)p.19283-19293 * |
JPN6009068733; Eur.J.Neurosci.,Vol.9,No.3(1997)p.549-555 * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016532496A (ja) * | 2013-08-08 | 2016-10-20 | グローバル・バイオ・セラピューティクス・インコーポレイテッドGlobal Bio Therapeutics,Inc. | 低侵襲処置用インジェクションデバイスおよびその使用 |
US10245388B2 (en) | 2013-08-08 | 2019-04-02 | Global Bio Therapeutics, Inc. | Injection device for minimally invasive procedures and uses thereof |
KR20160076312A (ko) * | 2014-12-22 | 2016-06-30 | 경북대학교 산학협력단 | 근육 분화, 재생, 또는 질환 상태와 관련된 노고-에이의 용도 |
KR101685109B1 (ko) | 2014-12-22 | 2016-12-09 | 경북대학교 산학협력단 | 근육 분화, 재생, 또는 질환 상태와 관련된 노고-에이의 용도 |
Also Published As
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---|---|---|
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AU769166B2 (en) | Fizz proteins | |
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JP2001522228A (ja) | 活性依存性向神経第▲iii▼因子(adnf▲iii▼) |
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