JP2007528229A - 臍帯血から分離された多能性幹細胞及びこれを含有する虚血性壊死疾患治療用細胞治療剤 - Google Patents
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Abstract
本発明に係る多能性幹細胞は、成体幹細胞であるにも拘わらず、骨形成細胞または神経細胞または内皮細胞に分化できることから、大腿部の動脈循環の渋滞が抹消循環障害を引き起こし、その結果、微細血管系の組織を崩壊させて虚血性壊死を招く疾病だけではなく、脳梗塞、心筋梗塞、股關節の虚血壊死及び糖尿の後遺症に起因する四肢末端の壊死など虚血性疾病の治療にも有効に利用可能である。
Description
(Yamamoto,K.et al.,Arterio.Thromb.Vasc.Biol.,24:192,2004)などがある。
臍帯血は、臨床試験倫理委員会のガイドライン(Institutional Review Board(IRB) guidelines)に基づき、ソウル大学病院と三星第一病院における満期(full−term)産と早期産(preterm)の新生児において集めた。
前記実施例1において得られた臍帯血由来の多能性幹細胞培養液を1mLの骨形成誘導培地[0.1μmol/L dexamethasone(Sigma,USA),0.05mmol/L ascorbic acid−2−phosphate(Sigma,USA) and 10mmol/L beta−glycophosphate(Sigma),5〜20%のヒト血清またはプラズマ]に希釈して細胞数を数えた後、フラスコに入れ培養(5%のC02、37℃で、培地は3〜4日おきに1回ずつ入れ替え)を行うことにより、多能性幹細胞の骨形成細胞への分化を誘導した。培養し始めてから14日目にフォンコッサ(Von−Kossa)染色法を用いて臍帯血由来の多能性幹細胞が骨形成細胞に分化されたことを確認した(図2参照)。
前記実施例1において得られた臍帯血由来の多能性幹細胞培養液を1mLの神経形成誘導培地[5〜20%のヒト血清またはプラズマに10ng/mL basic fibroblast growth(Roche,Switzerland),10ng/mL human epidermal growth factor(Roche, Switzerland) 10ng/mL human neural growth factor(Invitrogen,USA)を添加]に希釈して細胞数を数えた後、フラスコに入れ、5%のC02、37℃で培養を行うことにより、多能性幹細胞から神経細胞への分化を誘導した。培養し始めてから14日目、神経系ニューロンの特異抗原であるNSE(ニューロン特異的エノラーゼ:neuron−specific enolase)と神経系星状細胞の特異抗原であるGFAP(グリア細胞繊維性酸性タンパク質:glial fibrillary acidic protein)に対して陽性反応を示すことを確認した。これは臍帯血由来の多能性幹細胞が神経細胞に分化されたことを示唆している(図3参照)。
前記実施例1において得られた臍帯血由来の多能性幹細胞の免疫学的な特性を把握するために、細胞表面抗原の発現を調べた。すなわち、前記実施例1において培養した細胞2×106〜107個を用意してPBS溶液で洗浄し、各抗原に該当する抗体と室温で反応させた。抗原の発現の有無は、フローサイトメーター(flow cytometer)を用いて確認した。また、PAS(periodic acid Stain)染色をした。
(1)実験動物の準備
BALB/cANCrjBgi−nu種6週齢のマウス20匹を(株)オリエントから購入して1週間純化した後、18匹を選別して下記実験例に用いた。選別した細胞は、温度32±3℃、相対湿度60±10%、換気回数10〜12回/時間、照明時間12時間、照度250〜200lux下で、HEPAフィルター付きMI rackで高圧蒸気滅菌された実験動物用固形飼料((株)ピュリナ)と高圧蒸気滅菌された飲用水を自由に摂取させながら飼育した。純化期間及び実験期間中にポリカーボネートMIケージ(polycarbonate MI cage,26×42×18cm,ミョンジン機械製)で飼育ボックス当たり7匹を飼育した。
上記の如く虚血性壊死を誘導したマウスに本発明の臍帯血由来の多能性幹細胞を投与した後、30日間実験動物の大腿部を観察した。症状が現われた日と切断が見られた日を区分して記録し、試験開始前と終了時点で試験動物の体重を測定し、試験終了後に剖検を行った。試験中に測定された試験動物の体重などに関する資料の統計学的分析のために一元配置分散分析(one way ANOVA)を行い群間の有意性を検定した。この際、有意性が認められた場合、ダネットのt検定(Dunnett’s t−test)を行い、対照群と試験群間の統計学的有意性を検定した(p<0.05)。
血管造影法とは、X線を用いた血管検査であって、造影剤(ヨウ素−131)をマウスの心臓の血管の中に注入し、血管をX線で撮影することを可能にする。この調べによりX線の相で血管の異常の有無を判断し、病名や病巣の位置、病気の進行程度を確認することができる。
剖検時に心臓からの採血を行い各群のすべての個体から筋肉の血液を取り除いた。4%のリン酸パラホルムアルデヒド(paraformaldehyde phosphate)溶液に1.5%のスクロース(sucrose)溶液を混ぜた固定液を用いて各個体の左側大腿部と右側大腿部の筋肉組職を固定した。30%スクロースリン酸(sucrose phosphate)溶液に固定された大腿部筋肉組職が沈降するまで4℃で放置した後、各組職をパラフィンで包埋し、ミクロトーム(microtome)を用いて厚さ5μmの切片に薄切した。それから、プレハイブリダイゼーション(prehybridization)溶液(50%のホルムアミド、4×SSC、50mMのDDT、4×Denhardt’s溶液、’×TED、100μg/mL denatured salmon sperm DNA,250μg/mL yeast RAN)を加えて42℃で1時間反応させた。ここにDIG標識DNA(100ng/mL)を加え、プレハイブリダイゼーション溶液を24時間反応させてDIG標識ヒト特異DNAプローブをmRNAに結合させた。大腿部組職を2×SSC溶液、1×SSC溶液、0.5×SSC溶液によりそれぞれ10分間2回ずつ洗浄した後、スライドグラス(slide glass)に固定させた後、室温で2時間乾燥させた。
Claims (8)
- 臍帯血由来の血液を5〜20%のヒト血清またはプラズマを含有する培地において培養することにより得られる、下記の特性を有する成体幹細胞:
(a)CD24,CD29,CD31,CD33,CD45及びCD49Bに対してすべて陽性の免疫学的な反応を示し、CD34,CD51/61,CD62L,CD62P,CD73,CD90,CD133及びCD135に対して陰性の免疫学的な反応を示し;
(b)プラスチックに付着して成長し、丸形状(round−shape)または紡錘状(spindle−shape)の形態学的な特性を示し;及び
(c)中胚葉、内胚葉及び外胚葉由来の細胞への分化能を有する。 - SH−2及び/またはSH−3に対して陽性の免疫学的な反応をさらに示す請求項1に記載の成体幹細胞。
- CD44,CD105及びCD117に対して陽性または陰性の免疫学的な反応を示す請求項1に記載の成体幹細胞。
- 前記中胚葉由来の細胞は、骨形成細胞、神経細胞または内皮細胞(endothelial cells)である請求項1に記載の成体幹細胞。
- 臍帯血由来の血液を5〜20%のヒト血清またはプラズマを含有する培地において培養し、そして成体幹細胞を回収する工程を含む、下記の特性を有する成体幹細胞の製造方法:
(a)CD24,CD29,CD31,CD33,CD45及びCD49Bに対してすべて陽性の免疫学的な反応を示し、CD34,CD51/61,CD62L,CD62P,CD73,CD90,CD133及びCD135に対して陰性の免疫学的な反応を示し;
(b)プラスチックに付着して成長し、丸形状(round−shape)または紡錘状(spindle−shape)の形態学的な特性を示し;及び
(c)中胚葉、内胚葉及び外胚葉由来の細胞への分化能を有する。 - 前記ヒト血清またはプラズマは自家(autologous)または他家(allologous)である請求項5に記載の方法。
- 請求項1〜4のいずれか一項に記載の成体幹細胞を有効成分として含有する閉塞性動脈または静脈疾患による虚血性壊死疾患又は心血管疾患用細胞治療剤。
- 前記虚血性壊死疾患は心筋梗塞、脳梗塞、股關節の虚血壊死、バージャー病及び糖尿病性合併症による四肢壞疽病からなる群から選択される閉塞性動脈疾患による虚血性壊死疾患又は心血管疾患用細胞治療剤。
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Families Citing this family (7)
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---|---|---|---|---|
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KR100697326B1 (ko) | 2005-12-02 | 2007-03-20 | 재단법인서울대학교산학협력재단 | Oct4 발현능을 가지는 제대혈 유래 다분화능 성체줄기세포 및 그의 제조방법 |
WO2010027195A2 (ko) * | 2008-09-05 | 2010-03-11 | Lee Sung Min | 녹용유래세포 및 이의 배양방법 |
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---|---|---|---|---|
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WO2003070922A1 (en) * | 2002-02-19 | 2003-08-28 | Medipost Co., Ltd. | Isolation and culture-expansion methods of mesenchymal stem/progenitor cells from umbilical cord blood, and differentiation method of umbilical cord blood-derived mesenchymal stem/progenitor cells into various mesenchymal tissues |
US20040203142A1 (en) * | 2003-04-14 | 2004-10-14 | Reliance Life Sciences Pvt. Ltd. | Growth of neural precursor cells using umbilical cord blood serum and a process for the preparation thereof for therapeutic purposes |
DE10330216A1 (de) * | 2003-07-03 | 2005-01-20 | Jensen, Arne Wilhelm Oluf, Prof. Dr. | Verwendung von Stammzellen aus Nabelschnurblut zur Verhinderung von Hirnschäden infolge Sauerstoffmangel und zur Neuroprotektion |
KR100560340B1 (ko) * | 2003-11-11 | 2006-03-14 | 한훈 | 제대혈로부터 중간엽 줄기세포의 분리 및 배양 방법 |
WO2005073366A1 (en) * | 2004-01-30 | 2005-08-11 | Lifecord Inc. | Method for isolating and culturing multipotent progenitor/stem cells from umbilical cord blood and method for inducing differentiation thereof |
KR100697326B1 (ko) * | 2005-12-02 | 2007-03-20 | 재단법인서울대학교산학협력재단 | Oct4 발현능을 가지는 제대혈 유래 다분화능 성체줄기세포 및 그의 제조방법 |
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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JP2018117643A (ja) * | 2010-01-14 | 2018-08-02 | オーガノジェネシス・インコーポレイテッドOrganogenesis Inc. | 生物工学によって作られた組織コンストラクトならびにそれを生成および使用するための方法 |
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